JP2007507226A - ラクトパミンの液状製剤 - Google Patents

Abstract

可溶性の安定な液状製剤、調製方法、及びラクトパミン或いはその生理的に許容し得る塩、液状の非イオン性共溶媒、及び水から成る上記可溶性の安定な液状製剤の使用方法が記述される。

Description

ラクトパミンはブタの飼料成分の一つであって、栄養素に指令して生産効率を向上して屠殺体の脂肪の少ない赤身の増大を増進する。ラクトパミンはアメリカ合衆国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって認可されてブタ及びウシにおける使用のために登録されている。有効性の検討は、ラクトパミンが、米国及び世界中の他の国々におけるブタならびにウシで実施された試験を通じて、屠殺体の脂肪の少ない赤身を増加し、体重増加率を増大して、飼料有効率を向上するのに有効であることを証明している。これらのデータは、ラクトパミンを与えた動物からの豚肉及び牛肉がヒトの消費に対して安全であることを確立していて、ＦＤＡはすべてのデータを徹底的に精査してラクトパミンがＦＤＡの厳格なヒトの食品の安全基準を満たしていることを確認した後、上記生成物を認可した。現在、ラクトパミンは米国及び他の数カ国において使用が認可されている。ラクトパミンは、価値の高い赤身の豚肉及び牛肉の生産を向上し、同時に、生産される豚肉及び牛肉の各キログラムの環境への影響を低減するための豚肉ならびに牛肉業界によって容認された手段となりつつある。

ラクトパミンは、以下の式Ｉの構造を有する化合物１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（１−メチル−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロピルアミノ）エタノールに対する米国で採用された名称である。

それは二個の不斉炭素原子を有する。Ｒ，Ｒ異性体が最も活性であるが他の異性体もまた活性である。個別の異性体の単離が可能ではあるが、個別の異性体は必要ではなく、好ましくは、当化合物は異性体の混合物として用いられる。ラクトパミンの種々の生理的に許容できる塩も可能であり、塩酸塩が好ましい。ラクトパミンは選択的なβ１アドレナリン作動性受容体の作用薬である。

米国特許第４，６９０，９５１号は、ラクトパミン、ラクトパミンの種々の製剤形態、ラクトパミンの使用、及びラクトパミンの製造方法を開示している。

市販の本製剤は、粉砕したトウモロコシの穂先１ポンド当りラクトパミン塩酸塩９ｇ（２０ｇ／ｋｇ）を含む固体の乾燥された予混合物（タイプＡ薬物添加品）である。上記乾燥予混合物は次いで消費者によって適当な固体の飼料成分中に十分に混入されて１トン当たり９−１８ｇ量のラクトパミン塩酸塩を得る。

ウシに対して最近認可されたように、ウシに対する市販の製剤もまた、固体の乾燥予混合物であって粉砕されたトウモロコシの穂先１ポンド当りラクトパミン塩酸塩４５．４ｇを含む。この乾燥予混合物は消費者によって適当な固体の飼料成分中に十分に混入されてウシに投与するために１トン当たりラクトパミン塩酸塩を８．２から２４．６ｇ提供することも可能である。また、上記固体の乾燥予混合物を液状のタイプＢ飼料中に混合して、１ポンド当り０．８２から１．１５ｇの、或いは重量で０．１８から０．２５％のラクトパミン塩酸塩を含む液状のタイプＢ薬物添加飼料を提供する説明書も含まれている。液状のタイプＢ飼料のｐＨは４．５から７．５の間に維持することが必要である。日毎の再攪拌、ならびに使用直前の再攪拌が必要である。

ラクトパミン及びその塩酸塩は、水における溶解度が限られていて重量で約３−４％である。酸又は塩基或いは適当は緩衝液でｐＨを調節してもラクトパミンの溶解度をそれ程には増大しない。上述のように、固体予混合物は価値の高い赤身の豚肉の生産を向上するためのブタ産業界により容認された手段となりつつあるが、ラクトパミン塩酸塩を投与する可能性のある潜在的な方法を拡張するために溶液タイプの製剤に対する相当な要望が残存している。例えば、病気の家畜は常には固体の乾燥飼料を食べるように仕向けることはできない。

ラクトパミン塩酸塩の溶解度増進は一定のアルコールやグリコール溶媒中で得ることができる。しかしながら、この３−４％以上の溶解度の増進は、安定性の問題を犠牲にして達成されるものである。上述のように、ラクトパミンはその分子に結合した３個の水酸基を有する。同分子は２価のエタン-1,2-ジイル部分に結合した水酸基において反応性である。ラクトパミンをアルコール、グリコール又は他の極性溶媒に溶解する場合、同分子はそのエタン-1,2-ジイル水酸基において溶媒の水酸基と反応して共役結合した反応生成物を形成する。このような反応生成物の形成と存在は、このような反応生成物の安全性及び毒物学的性質を含む薬理学的特性が解明されていないので極めて望ましくない。さらに、このような反応生成物は、本申請書に引用して組み込まれている米国食品医薬品局の、同局家畜薬物センターの新家畜薬物中の夾雑物ならびに新家畜医薬品生成物中の夾雑物の指針第９２及び９３号の下の必要事項の一つ以上に抵触する恐れがある。

ラクトパミン塩酸塩の非極性溶媒における溶解性への検討によって、有用なタイプＡ液状製剤を創製するためには溶解性が不十分であることが証明された。驚くべきことに、一定の共溶媒を用いて、液状製剤に適切なラクトパミン塩酸塩の溶解性及び許容し得る安定性を提供できることが見出されている。

従って、本発明の一つの目的は、ラクトパミン或いはその生理的に許容し得る塩の溶解及び安定化の向上を提供することにある。本発明のさらなる目的は一定の共溶媒と会合しているラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩から成る安定な液体溶液及び製剤を提供することにある。本発明のさらなる目的は安定化された液状製剤の調製方法を提供することにある。

他の目的、特徴及び有利な点は当事者には以下の記述及び特許請求項から明らかになるであろう。

本発明は、重量比で５から３０％のラクトパミン又はその生理的に許容され得る塩、ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた重量比で２０から９０％の液状の非イオン性共溶媒、および重量比で５から７５％の水を含む、可溶化され安定化された液状の製剤に関する。

本発明はまた、最初に各成分を混合し１００℃以下に加熱することによる、溶液化され安定化された液状製剤の製造方法に関する。そして該液状製剤は、重量比で５から３０％のラクトパミン又はその生理的に許容され得る塩、ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた重量比で２０から９０％の液状の非イオン性共溶媒、および重量比で５から７５％の水を含む。

本発明はまた、重量比で５から３０％のラクトパミン又はその生理的に許容され得る塩、ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた重量比で２０から９０％の液状の非イオン性共溶媒、および重量比で５から７５％の水を含む可溶化され安定化された液状の製剤を用いて、反芻動物、ブタ若しくは七面鳥の体重増加を増大させ、飼料の利用効率を向上させ、赤身を増加させ、脂質生合成を減少させ、脂質分解を増大させ、筋肉タンパク質の合成を増大させ、筋肉タンパク質の分解を減少させ、または反芻動物、ブタ若しくは七面鳥の屠殺体の品質を向上させるために反芻動物、ブタ若しくは七面鳥に本発明の溶液化され安定化された液状製剤の有効量を経口投与する工程を含む方法に関する。

本発明は、ラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩を、水、およびポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた液状の非イオン性共溶媒と混合し調製することで、予想外に安定化され可溶化された水溶液が得られるところに存在する。ラクトパミンが極性溶媒に溶解された場合の上記水溶液の低溶解性、不安定性、又はその両者を考えると、水と上述の液体非イオン性共溶媒とが組み合わされた場合にラクトパミン或いはその生理的に許容し得る塩の安定化され可溶化された水溶液が提供されることは驚くべきことである。

本発明は、ラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩を重量比で５から３０％、好ましくは１０から２０％、より好ましくは１０から１５％；ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた液状の非イオン性共溶媒を重量比で２０から９０％、好ましくは３０から８０％、より好ましくは４０から５５％；および水を重量比で５から７５％、好ましくは１０から６０％、より好ましくは３５から５０％含む安定化され可溶化された液状製剤に関する。本発明の好ましい可溶化され安定化された液状製剤は、１０から２０％のラクトパミン又はその生理的に許容できる塩と、３０から８０％の上記共溶媒、及び１０から６０％の水である。本発明のより好ましい可溶化され安定化された液状製剤は、１０から１５％のラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩と、４０から５５％の上記共溶媒及び３５から５０％の水である。上記ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステルの中で、ポリエトキシル化された２０ソルビタンモノラウレート或いはモノオレエートが好ましい。上記ポリエトキシル化された植物油の中で、ポリエトキシル化されたひまし油が好ましく、ポリエトキシル化された３５ひまし油が最も好ましい。

本発明のさらなる目的は、ラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩を、水及びポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた液状の非イオン性共溶媒と混合し、その混合物を１００℃以下、好ましくは６０℃以下に加熱して、重量比で５から３０％のラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩、ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた重量比で２０から９０％の液状の非イオン性共溶媒、および重量比で５から７５％の水を含む可溶化され安定化された製剤を提供することにある。

本発明のさらなる目的は、体重増加を増進させ、飼料の利用効率を向上させ、脂肪の少ない赤身を増加させ、脂質生合成を減少させ、脂質分解を増進させ、筋肉タンパク質の生合成を増加させ、筋肉タンパク質の分解を減少させるために、または反芻動物、ブタ若しくは七面鳥の動物屠殺体の品質向上のために（脂肪組織の少ないこと、赤身の向上、下ごしらえ率の増大及び主要な赤身大肉片収量の増大等を含むがこれらに限定されるものではない）、重量比で５から３０％のラクトパミン又はその生理的に許容できる塩、重量比で２０から９０％のポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた液状の非イオン性共溶媒、および重量比で５から７５％の水を含む可溶化され安定化された液状製剤の有効量を反芻動物、ブタ若しくは七面鳥に経口投与する工程を含む、可溶化され安定化された液状製剤の使用方法を提供することにある。
本申請書に使用されている「関連物質」は、本発明の製剤中の、或いは本発明の製剤がタイプＡの薬物添加品、タイプＢ又はタイプＣの薬物添加飼料の調製に使用された場合に、ラクトパミンと共溶媒、希釈剤、賦形剤又は栄養成分間の反応生成物、分解産物、又はその両者を意味する。「関連物質」はまた、ラクトパミン合成からの何らかの残存出発原料又は中間体及び２個のラクトパミン分子上の反応性水酸基間の反応によって提供される二量体も包含する。

本申請書で使用されている「安定化された」という術語は、これに限定されるものではないが２５℃で少なくとも３ヶ月、好ましくは６ヶ月、より好ましくは１２ヶ月、最も好ましくは２４ヶ月間評価する貯蔵の間の化学的安定性を意味し、ここで、１）何らかの新しい個別の関連物質は、本申請書に定義されているように、ラクトパミン又はその生理的に許容できる塩と液状の非イオン性共溶媒の水性結合物中のラクトパミン濃度の重量比で０．２％を超過せず、２）個別の関連物質はいずれも、本申請書に定義されているように、ラクトパミン又はその生理的に許容できる塩と液状の非イオン性共溶媒の水性結合物中のラクトパミン濃度の重量比で１．５％を超過せず、また、３）提供される可能性のある関連物質の全量は、本申請書に定義されているように、ラクトパミン又はその生理的に許容できる塩と液状の非イオン性共溶媒の水性結合物中のラクトパミン濃度の重量比で４％を超過しない。

本発明における有用な液状の非イオン性共溶媒であるポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油は数平均で４から４０個の、好ましくは１５から２５個の、より好ましくは１８から２２個のポリエトキシル化個所を有する。ポリエトキシル化された植物油の例にはポリエトキシル化されたひまし油が含まれる。
本発明の可溶化され安定化された液状製剤は、本申請書に引用して組み込まれている米国成分法２１条５５８項に定義されているようにタイプＡ薬物添加品と呼ばれる液状の濃縮製剤の調製を含み或いは調製に使用される可能性がある。当事者には知られているように、タイプＡ薬物添加品は他のタイプＡ薬物添加品或いはタイプＢ又はタイプＣ薬物添加飼料の調製に使用されてもよく、タイプＢ及びタイプＣの両者は、本申請書に引用して組み込まれている米国成分法２１条５５８項に定義されている通りである。タイプＡ薬物添加品中では、活性薬剤（複数）は直接投与に適切であるよりも高濃度であり、上記直接投与量にまで希釈する必要がある。同様に、タイプＢ薬物添加飼料は他のタイプＢ薬物添加飼料或いはタイプＣ薬物添加飼料の調製に使用されることがある。タイプＢ薬物添加飼料はタイプＡ薬物添加品或いは別のタイプＢ薬物添加飼料を希釈することによって調製される。タイプＣ薬物添加飼料はさらに混合又は希釈する必要がなく直接投与に適している。

ラクトパミンは本質的に塩基性であるので、いくらでも多数の無機酸及び有機酸と容易に付加塩を形成する。これらの塩類は本発明の製剤、方法及び工程に採用することが出来、しばしば遊離の塩基よりも好まれて、より便宜に製剤化される。酸付加塩の形成に通常使用される酸類は、塩酸、硫酸、リン酸、過塩素酸等の無機酸及び酢酸、クエン酸、コハク酸、パラトルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、乳酸等の有機酸を含有する。本法に採用されるべき好ましい塩類には、塩酸塩及び臭化水素酸塩が含まれ、塩酸塩が最も好ましい。

生長を促進し、体重増加を増大し、飼料利用効率を向上し、赤身を増大し、脂質生合成を減少し、脂質分解を増大し、筋肉タンパク質生合成を増大し、筋肉タンパク質分解を減少する方法、或いは動物の屠殺体の品質の向上（脂肪組織の減少、赤身の向上、仕上がり部分率の増大、主要な赤身の肉切り身の生産量増大を含むがこれらに限定されるものではない）は、上述の定義のように、可溶化され安定化された液状製剤を、栄養的に適切な飼料を与えられている反芻動物、ブタ若しくは七面鳥に経口投与することによって実施される。本法は一般にヒトの食肉消費用に飼育される反芻動物、ウシ又は七面鳥に、例えば、飼育者／仕上げ肥育者のブタ、七面鳥、ウシ等に対して実施される。好ましい実施形態において、本法はブタまたは七面鳥に本発明に記載のラクトパミン製剤を投与することによって実施される。もう一つの好ましい実施形態はウシ、ヒツジ及びヤギに、特にウシのような反芻動物において実施される。

本発明の方法は可溶化され安定化された液状のラクトパミン製剤の有効量を動物に経口投与することによって実施されることが好ましい。動物に投与されるべき量とは、成長の促進、脂身の少ない赤身の向上、体重増加の増大、飼料利用効率の向上、赤身の増大、脂質生合成の減少、脂質分解の増大、筋肉タンパク質生合成の増加、筋タンパク質分解の減少、または動物の屠殺体の質の向上（脂肪組織の減少、赤身の向上、仕上がり部分比率の増大及び主要な赤身大肉片の収量の増大を含むがこれらに限定されるものではない）に効果的な量のことである。効果的な投与量は処理される特定の動物種次第で幾分変動するが、一般的に１日当りの飼料全摂取量の約１から約２００ｐｐｍである。好ましい実施形態は１日当りの全飼料の約２から約１００ｐｐｍ、より好ましくは１日当りの全飼料の約３から約５０ｐｐｍを用いる。反芻動物に投与されるべき活性成分の典型的な量は１日当りの飼料の全摂取量の約２から約４０ｐｐｍであり、好ましくは１日当りの飼料の全摂取量の約３から約３０ｐｐｍである。ブタに投与すべき活性成分の典型的な量は１日当りの飼料の全摂取量の約２から４０ｐｐｍであり、好ましくは１日当りの飼料の全摂取量の約３から約３０ｐｐｍである。七面鳥に投与すべき活性成分の典型的な量は１日当りの飼料の全摂取量の約２から約４０ｐｐｍであり、好ましくは１日当りの飼料の全摂取量の約３から３０ｐｐｍである。

本申請書に記載の製剤は、平均の１日当りの体重増加の促進及び動物における飼料効率の向上に効果的である一方で、また、生成される食肉の質に目に見える向上をもたらす。例えば、ラクトパミンを含有する製剤は、脂肪組織から遊離の脂肪酸を動員して、動物が体重を増加する際に脂肪の沈着を抑制するように思われる。脂肪の低下は、本発明に従って処理されている動物がより使用可能な赤身の肉の形で体重を増加し、そのようにして役に立たない部分を減らしてこのように処理された動物の価値を向上するので有益である。

一般に液状のタイプＡの薬物添加品は液状の或いは乾燥した栄養補助食品又は最終飼料に混合することができる。濃縮液状のタイプＡの薬物添加品或いは液状のタイプＢの薬物添加飼料は、混合機内の点播棒（ｄｒｉｂｂｌｅ ｂａｒｓ）を通して、混合の間に飼料に散布して、又はミクロ成分機によって乾燥飼料に適用してもよい。本申請書の可溶化され安定化された液状の濃縮物は、液状の飼料補助食品に混合されてもよく、或いは乾燥飼料上に噴霧されてもよく、又は米国特許第４，７３３，９７１号のような液状製剤に便宜を図るように設計された通常の微量成分装置によって配分されてもよいと考えられる。
タイプＢの薬物添加飼料は液状又は乾燥状であってもよく、タイプＡ薬物添加品とタイプＣ薬物添加飼料との間の中間にあって、動物に直接給餌される完全飼料である。タイプＢ製剤は相当量の栄養素を含み、ビタミン及び或いは無機質、及び或いは他の栄養素成分を上記製剤の重量で２５％以上の量で含有する。タイプＢ薬物添加飼料中のカテゴリーＩの薬理学的活性薬物の量は、最終飼料又はタイプＣ薬物添加飼料における１日あたりの最大使用レベルの２００倍を超えることはできない。カテゴリーＩはそれらの活性薬物、例えばラクトパミンに対する米国連邦法規によって使用されている名称であって、それらが認可されている各動物種における最低使用レベルにおいては投与中止の期間は求められてはいない。

タイプＢ薬物添加飼料の組成は生理的に許容し得る希釈液からタンパク質、ビタミン、無機質、アミノ酸、或いは他の栄養成分を提供するために設計された通常の濃縮液まで変動する。タイプＢ薬物添加飼料は薬物と適当な希釈剤との単純な混合物であってもよく、その場合、主な関心事は均質性、輸送の間の分離及び化学的安定性である。

液状の飼料補助食品（ＬＦＳ）はタイプＢ品目であり、米国におけるウシの栄養を補助するますます重要な手段となってきている。一定の地域において、家畜飼育場のウシの５０％以上がＬＦＳを与えられている。その結果、ＬＦＳは、もしその薬物が物理的ならびに化学的にＬＦＳ中で安定ならば、ウシに薬物を送達する便利な方法になってきている。ＬＦＳの組成はその土地で利用し得る副産物及び他の成分の相対的経費次第で大幅に変動する。その結果、栄養物の含有量、比重、溶解された固形物の含量、ｐＨ、粘度及びチキソトロピー（搖変）性に大きな差異が存在する。

二つの基本的タイプのＬＦＳ、通常の液状製剤及びチキソトロピー（搖変）性製剤が牧畜業界の市場で販売されている。チキソトロピー（搖変）性製剤は揺り動かした際には全く液状になっているが、動揺を止めた後、数分から１時間内に粘調になるか又は柔らかいゲルを形成する。薬物を含むＬＳＦは、たとえ薬物がそのバッチ全体を通じて位置的（物理的に）安定であって貯蔵期間中に底部に沈殿したり表面に浮遊したりはしないことが証明されていても、使用直前に一般に攪拌される。もし薬物がＬＦＳの連続相に可溶であるならば、同薬物は位置的に安定であると予想されるが、通常はなお使用直前に攪拌することが勧められる。

懸濁液については、薬物粒子の直径が小さいほど、また、製剤が粘調であるほど、薬物沈殿速度は遅い。キタンサンガム、一定の炭水化物、ペクチン、及び他の粘性樹立剤を使用して通常のＬＦＳ製剤の粘度を増大してその製品の予想貯蔵期間中には薬物沈殿が著明でないようにしてもよい。アタパルガイトクレーのような薬物を使用してポンプで汲み上げ或いは分断される場合には良好な流動性を有するが、攪拌されていない場合に、さもなければ沈殿する無機物、薬物及び他の固体物質を懸濁状態に維持するための十分な粘性を有するチキソトロピー（搖変）性製剤を製造することができる。

本発明のタイプＡ、タイプＢ及びタイプＣ薬物添加品ならびに飼料はそれぞれ、本発明の液状製剤からの当分野で認められている通常の混合機及び微量成分装置系、関連製造装置ならびに技法を用いて調製される。混合機は双軸攪拌へら混合機を含め水平混合機のように多くのサイズ、形状、設計及び構成で市販されている。米国特許第４，７３３，９７１号のような微量成分装置系もまた市販されている。

手動及び自動の両方法を用いて動物の飲料水に薬物を添加する。飲料水に薬物を添加する手動の方法は、動物一匹用の水樋に単一用量の薬物を入れることから多数の動物に対して水を提供するために設計された主タンクに薬物を入れることに至るまで変動する。典型的には飲料水に薬物を添加する容器上の使用説明書は、全内容物を特定量の水に溶解或いは希釈することを表示している。

飲料水に薬物添加をするために設計された生成物は一般に手動で或いはドサトロン（登録商標）のようなプロポーショナーと呼ばれる装置を用いて最終の飲料水でさらに希釈される貯蔵液を調製するための使用説明書が含まれている。プロポーショナーは正確な量の貯蔵液を小室に汲み入れる装置であって、そこで貯蔵液は流出口から動物の水のみ場に通過する前に水流と混和される。その容量測定設計の故に、注入器或いはプロポーショナー装置は、水圧及び水流とは無関係に濃縮液と水流の一定比を維持する。大抵のプロポーショナーは薬物濃縮液の水に対する比率が、使用すべき薬物及び最終飲料水中の所望の薬物濃度次第で変動し得るように設計されている。例えば、薬物の貯蔵溶液の水に対する比率は１：１０から１：５００まで変動し得る。

着色剤を溶液濃縮物に使用してもよい。製剤に着色剤を含む二つの理由は最終の飲料水に薬剤が添加されていることを確認するためと生成物を特異的に同定するためとである。
米国特許第５，３３５，６２５号のような舐めタンクが非タンパク質窒素、ビタミン、無機質及び他の栄養素ならびに薬物を牧場牛及び乳牛に送達するために利用されている。舐めタンクに使用されるべき製剤については、構成成分はすべてある温度範囲にわたって溶解したままでなければならず、もしその製剤がチキソトロピー（搖変）性であるならば、その成分は舐めタンク内にある間に沈殿又は分離してはならない。舐めタンク用製剤の典型的な成分には、トウモロコシ浸液、廃糖蜜、濃縮乳漿、濃縮廃糖蜜溶質、ビール濃縮溶質、濃縮蒸留酒溶質、尿素、塩、リン酸、硫酸、分散性ビタミン及び可溶性無機物が含まれる。

本発明はさらに可溶性で安定な濃縮液状の飼料、液状のビタミン濃縮物及びラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩、ポリヒドロキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル或いはポリヒドロキシル化された植物油から選ばれた液状の非イオン性共溶媒又はその両者、及び本発明の可溶化され安定化された液状製剤を液状飼料、水溶性液状濃縮物、乾燥された水溶性担体、又は飲料水と混合して実質的に均等で化学的に安定な組成物を提供するための飲料水組成物を調製する方法に関する。

本発明はさらにラクトパミン或いはその生理的に許容し得る塩、ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油から選ばれた液状の非イオン性共溶媒或いはその両者、及び水を、動物に投与される可能性のある乾燥固体飼料又は乾燥動物飼料で希釈される可能性のある乾燥動物飼料と混合してラクトパミン或いはその生理的に許容し得る塩の完全な飼料組成物を提供することから成る乾燥固形飼料の調製法を考慮する。

＜実施例１（比較例）＞
重量比で２５％を超えるラクトパミンの溶解性が達成される製剤の１例は１００％のポリエチレングリコール（ＰＧ）を用いる担体系或いはＰＧを含む水性の担体系である。担体系が５０％のＰＧ及び５０％の水である製剤は少なくとも１０％のラクトパミンを２５℃で溶解する能力がある。ＰＧはラクトパミンの優れた溶媒であり、連邦規定５８２．１６６６の２１条に記載の「一般的に安全と認められている」（ＧＲＡＳ）。加えて、水性のＰＧ製剤の粘度は一般に許容範囲内にあって容易に動物飼料に適用される。製剤中のＰＧに対する水の比率次第で、上記溶液はアメリカの家畜生産地帯に共通して見出される気候においては凍結しない。このように、ＰＧは家畜に投与するためのラクトパミンの可溶化に対する溶媒又は担体の優れた選択である。しかしながら、ラクトパミンのプロピレングリコール溶液を正常室温（〜２５℃）で貯蔵する間に新しい関連物質が徐々に形成される。ＰＧはラクトパミン（構造式Ｉの化合物）の種々の異性体のエタン−1,2−ジイル水酸基と反応して構造式ＩＩの共役結合した関連物質を形成する。下記の反応は正常の貯蔵条件下では可逆的ではない。

このようにＰＧは高濃度（４％から２５％以上）のラクトパミン溶液を調製するための優れた溶媒ならびに担体系であるにも拘わらず、ＰＧは反応生成物関連物質の不可逆的形成の故に液状のラクトパミン製剤における溶媒としては受け入れられない。

＜実施例２（比較例）＞
高濃度（２０％以上）のラクトパミンを含む溶液製剤はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）２００、ＰＥＧ３００、又はその両者を含む担体系において達成することができる。これらＰＥＧ類の毒素学的性質、粘度及び口当たりのよい特性によって、これらのＰＥＧ類は液状の家畜用製剤に使用するための許容し得る溶媒及び担体系となっている。しかしながら、実施例１に記載のように、ＰＥＧ分子構造上の水酸基はラクトパミンの種々の異性体のエタン−1,2−ジイル水酸基と反応して共役結合した関連物質を形成する。この反応は正常の貯蔵条件下では可逆的ではない。このように、ＰＥＧ類が４％から２０％以上のラクトパミンを含む液状製剤の調製に優れた溶媒及び担体系であるにも拘わらず、これらＰＥＧ類は液状のラクトパミン製剤における溶媒としては受け入れることができない。

＜実施例３（比較例）＞
実施例３はラクトパミンに対して可能性のある溶媒又は共溶媒として検討された種々の化学的分類からの溶剤のリストを構成するものである。下記のリスト内の溶剤のすべてが家畜飼料における使用に適しているわけではないが、１）ラクトパミンの１０％溶液の達成には溶媒力不十分、２）結果的にラクトパミンの許容し得ない分解を引き起こして関連物質を生じる、或いは３）結果的に、許容できない反応生成物関連物質の形成に至る、の一つ以上を証明する液剤の例として役に立つ。

溶解度の決定は１ドラムの小瓶（バイアル）中で行われる。ラクトパミン塩酸塩を液剤を含むバイアルに加えて液剤に対して最終重量比１０％のラクトパミン塩酸塩となるようにする。この溶液をボーテックスミキサー上で２分から６分間激しく混合する。この混合期間後、ラクトパミンが溶剤に溶解しているか不溶解物質（不透明な溶液又は明確な２相）がバイアル中に残存しているかどうかを目視で判断する。もし溶解度が１０％以下であるならば、液剤を追加してラクトパミン塩酸塩を５−８％の範囲に希釈する。混合操作を反復してラクトパミンが液剤に可溶であるか、或いはより低濃度で不溶のままであるかどうかを判定する。必要ならば、加熱して（室温から６０℃まで）溶解化を助ける。加熱試料を室温にまで冷却して沈殿或いは不透明度を目視観察して溶解度を判定する。

下記のTable１とTable２は試験された溶媒中のラクトパミン塩酸塩の溶解度、安定性或いは両者の結果を要約したものである。Table１にはラクトパミン塩酸塩は可溶であるが安定性が容認できない溶媒が要約されている。Table２はラクトパミン塩酸塩の溶解が不十分な溶媒を要約している。溶解度は多くの「水酸基を持たない」溶媒及び油においては低い。

プルロニック（ポリプロピレングリコール鎖（Ａ）トポリエチレングリコール鎖（Ｂ）を疎水基，親水基とするＢ−Ａ−Ｂ形ブロック共重合体の総称）Ｌ−６１試料を、３０℃及び４０℃における３ヶ月時点で始まり２４ヶ月時点で終わる検査において新関連物質について評価を行った。これらの条件下において、新関連物質は２４ヶ月時点において０．２％以上であった。２４ヵ月において９種の新関連物質が検出された。問題の二つの新関連物質は２番及び８番（日付順の保持順序）であった。これらは関連物質（２）と関連物質（８）と呼ばれる。関連物質（２）は１２ヶ月を通じて０．０９％以下であったが、１８ヶ月と２４ヶ月でそれぞれ０．１３％と０．２２％に増大した。関連物質（８）は４０℃において０．５ヶ月時点で０．１１％であった。残余の時点については３０℃において、関連物質（８）は３ヶ月で０．１４％、６ヶ月で０．２４％、９ヶ月で０．３％、１２ヶ月で０．５％、１８ヶ月で０．６％、及び２４ヶ月で０．４１％であった。５℃において冷却貯蔵すると２４ヵ月継続の安定性検査の間に関連物質（２）と関連物質（８）の形成は大いに抑制された。

＜実施例４＞
Table３は実施例３に記載された工程の下においてラクトパミンが可溶で且つ安定である溶媒を纏めたものである。

＜実施例５＞
ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステルのような界面活性剤がある種の化合物の溶解性を増大する可能性のあることが当事者には知られている。しかしながら、ポリオキシエチレン２０ソルビタンモノラウレート（ＰＳＬ）を含む水性媒体系に溶解されたラクトパミン塩酸塩の溶液製剤の長期間の安定性は予想外の発見であった。ポリオキシエチレン２０ソルビタンモノラウレートは一般に食品に使用され、ＧＲＡＳ（一般的に安全と認められているもの）であり、ソルビトールのラウリン酸エステルであって、その無水物はソルビトール及びソルビトール無水物の各１モルに対して凡そ２０モルのエチレンオキシドと共重合する。その結果生じるエステルは多くの水酸基部分を含み、これら水酸基は上記実施例１と２と同じ様式でラクトパミンのエタン-1,2-ジイルヒドロキシ基と反応するものと予想される。しかしながら、驚くべきことに、ＰＳＬの水酸基部分は２５℃における２４ヵ月までと４０℃における１２ヶ月までの貯蔵の間にラクトパミンと反応して新関連物質を形成しない（＜０．２％）。ＰＳＬの水に対する比率を重量比で９０：１０から１０：９０まで変更して種々の濃度のラクトパミン溶液を調製した。最も好ましい比率は重量比５０：５０であって１０％以上のラクトパミンの溶解度と動物飼料への適用を容易にする粘度を提供する結果となる。４０％以上のＰＳＬの比率は特により低温、例えば５℃においてラクトパミンの１０％溶解度を達成するために必要である。

ＰＳＬとラクトパミン塩酸塩を含む製剤は、５０．４４ｇのラクトパミンの水性懸濁液（２１．５％のラクトパミン塩酸塩）、４８．８０ｇのＰＳＬ及び９．２５ｇの水を加えることによって製造される。ラクトパミンの懸濁液をビーカーに量って入れＰＳＬと水を加える。攪拌下に十分な熱（≦６０℃）を加えてラクトパミンを速やかに溶解させる。その結果得られる製剤は５℃と２５℃においては少なくとも２４ヶ月間、又４０℃においては少なくとも１２ヶ月間安定である。

重量で１０％のラクトパミンとＰＳＬ：水を４０：６０及び５０：５０の重量比で含む製剤を新関連物質について３０℃でｐＨ ４．０、５．０、６．０及び７．０における０時点と２４ヶ月間貯蔵後に得られるクロマトグラムを比較することによって評価した。ｐＨは２Ｎの水酸化ナトリウムを用いて調節した。相対保持時間は４−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−ブタン−２−オンを指標として用いて計算した。この化合物はラクトパミン合成の出発原料であり、一般的にはラクトパミンの水性懸濁液（合成からの）中の最大の個別の関連物質であって容易にクロマトグラムで同定される。

ｐＨ４．０において、０時点における全関連物質及び最大の個別の関連物質はそれぞれ１．２２及び０．４１％であって、４−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−ブタン−２−オンは最大の個別の関連物質であった。この増加は主としてラクトパミン二量体の０時点における０．０６％から２４ヶ月時点における０．８９％への増大によって押し上げられた。この二量体は２４ヶ月における最大の個別の関連物質であった。０時点において容易には検出できない二つの関連物質は２４ヶ月時点では検出可能であった。第一の関連物質ピークの相対保持時間（ピーク相対保持時間）（ｒｒｔ＝０．６９）は０．０８％と定量され第二の関連物質（ｒｒｔ＝０．７６）は０．０２％以下と定量された。

ｐＨ５．０において、０時点における全関連物質及び最大の個別関連物質はそれぞれ１．２２と０．４１％であり、４−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−ブタン−２−オンが最大の個別の関連物質であった。２４ヶ月において、全関連物質は２．９６％に増大した。この増加は主としてラクトパミン二量体の０時点における０．０１％以下から２４ヶ月時点における１．２８％への増大によって押し上げられた。この二量体は２４ヶ月における最大の個別の関連物質であった。０時点において容易には検出できない二つの関連物質は２４ヶ月時点では検出可能であった。第一の関連物質（ｒｒｔ＝０．４２）は０．０２％以下と定量され第二の関連物質（ｒｒｔ＝０．７６）もまた０．０２％以下と定量された。

ｐＨ６．０において、０時点における全関連物質及び最大の個別関連物質はそれぞれ１．２０と０．４０％であった。化合物４−（ｐ−ヒドオキシフェニル）−ブタン−２−オンが最大の個別の関連物質であった。２４ヶ月において、全関連物質は４．１３％に増大した。この増加は主としてラクトパミン二量体の０時点における０．１０％から２４ヶ月時点における１．８２％への増大によって押し上げられた。同二量体は２４ヶ月時点における最大の個別の関連物質であった。０時点で容易には検出できない五つの関連物質は２４ヶ月時点で検出可能であった。第一の関連物質（ｒｒｔ＝０．６９）は０．１２％と定量され、第二の関連物質（ｒｒｔ＝０．７６）は０．０２％以下と定量され、第三の関連物質（ｒｒｔ＝１．２４）は０．０８％と定量され、第四の関連物質（ｒｒｔ＝１．３４）は０．０１％以下と定量され、最後の関連物質（ｒｒｔ＝１．３５）は０．１８％以下と定量された。

＜実施例６＞
ポリオキシエチレン２０ソルビタンモノオレエート（ＰＳＯ）は一般的に食物に使用され、ＧＲＡＳ（一般的に安全と認められている）ものであり、ソルビトールのオレイン酸エステルであって、その無水物はソルビトール及びソルビトール無水物の各１モル当り凡そ２０モルのエチレンオキシドと共重合する。その結果生じるエステルは上記実施例４におけるＰＳＬと同様に多くの水酸基部分を含有する。しかしながら、上記の実施例５と同様に、ＰＳＯは２５℃における２４ヶ月に及ぶ貯蔵の間にラクトパミンと反応して新関連物質（＜０．２％）を形成はしない。ＰＳＯの水に対する比率を重量比で９０：１０から１０：９０まで変更して種々の濃度のラクトパミン溶液を調製することができる。好ましい比率は重量比で５０：５０であって、結果として１０％以上のラクトパミン塩酸塩の溶解度及び動物飼料への適用を容易にする粘性を提供する。ＰＳＯと水の比率が重量比で５０／５０以下の１０％ラクトパミン製剤は５℃における貯蔵下で析出し、また、重量比で６０／４０（ＰＳＯ／水）を超える比率は高粘性のためにより好ましくはない。

ＰＳＯ及びラクトパミン塩酸塩を含む製剤は６９．７８ｇのラクトパミンの水性懸濁液（２１．５％のラクトパミン）、６７．５ｇのＰＳＯ及び１２．７２ｇの水を加えることによって製造される。適当なビーカーにラクトパミン懸濁液を量って入れてＰＳＯと水を加える。攪拌しながら上記ビーカーに十分な熱（≦６０℃）を加えてラクトパミンの急速な溶解を達成する。その結果得られる製剤は２５℃で少なくとも２４ヶ月間安定である。加えて、５℃で貯蔵される試料は少なくとも１２ヶ月間は溶液のままであって５℃のような低い温度で優れた溶解性を示す。

＜実施例７＞
ポリオキシル３５ひまし油（ＰＣＯ）はエチレンオキシドをひまし油と反応させて得られる非イオン性の溶解剤及び乳化剤である。その主成分はグリセロール−ポリエチレングリコールリシノーリエートであり、少量のポリエチレングリコールリシノーリエート及び対応する遊離のグリコールを伴う。ポリオキシル３５ひまし油は米国薬局方／米国処方集に掲載されている。ＰＣＯ対水の比率を重量比で９０：１０から１０：９０に変更することによって種々の濃度のラクトパミン溶液を調製することができる。最も好ましい比率は重量比で５０：５０であって結果として１０％以上のラクトパミン塩酸塩の溶解度が得られる。この製剤は幾分粘調ではあるが適当なサイズの噴射ノズル又は点播棒（ｄｒｉｂｂｌｅ ｂａｒｓ）及び十分なポンプ圧のような適切な装置によって動物飼料に適用して製剤を採用されている混合機に送達してラクトパミン溶液を飼料に混合することができる。微量成分装置内での水による製剤の希釈は又製剤を動物飼料に適用するための効果的な技法と考えられ、続いてリボン混和機のような適当な混合機内で十分に混合される。重量比でＰＣＯ対水の比率が５０／５０以下の１０％ラクトパミン製剤は５℃の貯蔵下で析出し、又６０／４０（ＰＳＯ／水）を超える比率は高粘度のためにより一層好ましくない。

ＰＣＯとラクトパミン塩酸塩を含む製剤は６９．７８ｇのラクトパミンの水性懸濁液（２１．５％ラクトパミン）と、６７．５ｇのＰＣＯ及び１２．７２ｇの水を加えることによって製造される。上記ラクトパミン懸濁液を適当なビーカーに量り取ってＰＣＯ及び水を加える。攪拌しながら上記ビーカーに十分な熱（≦６０℃）を加えてラクトパミンの迅速な溶解を達成する。その結果得られる製剤は２５℃において少なくとも２４ヶ月間は化学的に安定であって溶液から析出しなかった。５℃で貯蔵された試料は３ヶ月の貯蔵の間は透明のままである。６ヶ月の時点で上記試料中に沈殿が観察された。ＰＣＯ対水の比率が５０：５０の製剤は２５℃において２４ヶ月間は物理的にも化学的にも共に安定である。

ＰＣＯ、ラクトパミン及び水を含む製剤（１０％ラクトパミン及び５０／５０の共溶媒／水）を新関連物質について０時点で得られたクロマトグラムを３０℃において２４ヶ月後に得られたクロマトグラムと比較することによって評価した。０時点における全関連物質及び最も豊富な個別の関連物質はそれぞれ１．２と０．４％であった。最も豊富な個別の関連物質は４−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−ブタン−２−オンであった。２４ヶ月の時点で、全関連物質は２．５％に増加した。最も豊富な個別の関連物質は０．４％の４−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−ブタン−２−オンであった。ラクトパミン二量体は０時点における０．０７％から２４ヶ月の時点における０．６％に増加した。０時点において容易には検出されない四つの関連物質は２４ヶ月の時点では検出された。これらの新関連物質は０．０３から０．１３％の範囲にあって合計すると０．２９％になった。これらのうちの一つは０．１％を超えたが何れも０．２％を超えなかった。

Claims (21)

1. 重量比で５から３０％のラクトパミン又はその生理的に許容され得る塩、ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた重量比で２０から９０％の液状の非イオン性共溶媒、および重量比で５から７５％の水を含む、可溶化され安定化された液状の動物飼料製剤。
2. 請求項１の可溶化され安定化された液状の製剤であって、１０から２０％のラクトパミン又はその生理的に許容され得る塩を含む製剤。
3. 請求項１の可溶化され安定化された液状の製剤であって、１０から１５％のラクトパミン又はその生理的に許容され得る塩を含む製剤。
4. 請求項１、２または３の可溶化され安定化された液状の製剤であって、３０から８０％の液状の非イオン性の共溶媒を含む製剤。
5. 請求項１、２または３の可溶化され安定化された液状の製剤であって、４０から５５％の液状の非イオン性共溶媒を含む製剤。
6. 請求項１、２、３、４または５の可溶化され安定化された液状の製剤であって、１０から６０％の水を含む製剤。
7. 請求項１、２、３、４または５の可溶化され安定化された液状の製剤であって、３５から５０％の水を含む製剤。
8. 請求項１、２、３、４、５、６または７の可溶化され安定化された液状の製剤であって、前記非イオン性共溶媒がポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステルである製剤。
9. 請求項１、２、３、４、５、６または７の可溶化され安定化された液状の製剤であって、前記非イオン性共溶媒がポリエトキシル化された植物油である製剤。
10. 請求項１、２、３、４、５、６、７または９の可溶化され安定化された液状の製剤であって、前記非イオン性共溶媒がポリエトキシル化された３５ひまし油である製剤。
11. 請求項１、２、３、４、５、６、７または８の可溶化され安定化された液状の製剤であって、前記非イオン性共溶媒がポリオキシエチレン２０ソルビタンモノラウレートである製剤。
12. 請求項１、２、３、４、５、６、７または８の可溶化され安定化された液状の製剤であって、前記非イオン性共溶媒がポリオキシエチレン２０ソルビタンモノオレエートである製剤。
13. 請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２の可溶化され安定化された液状の製剤であって、ラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩がラクトパミン塩酸塩である製剤。
14. 請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２または１３の可溶化され安定化された液状の製剤であって、前記液状の非イオン性共溶媒／水が重量比で５０／５０で存在する製剤。
15. 請求項１の可溶化され安定化された液状の製剤であって、重量比で１０から２０％のラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩、ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた重量比で３０から８０％の液状の非イオン性共溶媒、および重量比で１０から６０％の水を含む製剤。
16. 請求項１の可溶化され安定化された液状の製剤であって、重量比で１０から１５％のラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩、ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた重量比で４０から５５％の液状の非イオン性共溶媒、および重量比で３５から５０％の水を含む製剤。
17. 可溶化され安定化された液状の動物飼料製剤の調製方法であって、
    ラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩を、水、およびポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた液状の非イオン性共溶媒と混合し、その混合物を１００℃以下に加熱して、重量比で５から３０％のラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩、ポリエトキシル化されたソルビタン脂肪酸エステル又はポリエトキシル化された植物油の一方又は両方から選ばれた重量比で２０から９０％の液状の非イオン性共溶媒、および重量比で５から７５％の水を含む、可溶化され安定化された製剤を得る工程を含む方法。
18. 反芻動物、ブタ若しくは七面鳥の体重増加を増大させ、飼料の利用効率を向上させ、赤身を増大させ、脂質生合成を減少させ、脂肪分解を増進させ、筋肉タンパク質合成を増大させ、筋肉タンパク質分解を減少させ、または家畜の屠殺体の品質を向上させる方法であって、請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６の可溶化され安定化された液状製剤の有効量を反芻動物、ブタ若しくは七面鳥に経口投与する工程を含む方法。
19. 請求項１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６の何れか一つに記載の可溶化され安定化された液状の動物飼料製剤から調製されたタイプＢ薬物添加飼料であって、ラクトパミン又はその生理的に許容し得る塩が毎日の最大使用レベルの２００倍以下で存在する薬物添加飼料。
20. 請求項１９のタイプＢ薬物添加飼料であって液状の飼料。
21. 請求項１９のタイプＢ薬物添加飼料であって液状の飼料補助物質である飼料。