JP2007010428A

JP2007010428A - Cell potential measuring container

Info

Publication number: JP2007010428A
Application number: JP2005190210A
Authority: JP
Inventors: Eiji Watabe; 英二渡部; Masaya Nakatani; 将也中谷; Akira Higuchi; 朗樋口
Original assignee: Matsushita Electric Industrial Co Ltd
Current assignee: Panasonic Holdings Corp
Priority date: 2005-06-29
Filing date: 2005-06-29
Publication date: 2007-01-18
Anticipated expiration: 2025-06-29
Also published as: JP4834335B2

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a cell potential measuring container capable of being simplified in its structure, even when the number of cells of the measuring target is increased. <P>SOLUTION: In the cell potential measuring container, having a first solution reservoir parts 14, second solution reservoir parts 15, a partition substrate 18, a first electrode 27a, a second electrode 27b, a first measuring terminal 13a and a second measuring terminal 13b and constituted so that the first and second solution reservoir parts 14 and 15 are partitioned by the partition substrate 18, through-holes 19 are provided to the partition substrate 18; the through-holes 19 open toward each, with one end directed toward the first solution reservoir parts 14, and the other end, toward the second solution reservoir parts 15; cells can be held to the opening part of one end of each through-hole 19; the first electrode 27a is arranged so as to come into contact with a first solution and the second electrode 27b is arranged so as to become contactable with a second solution; and a second solution flow channels 20 are further formed and the second solution reservoir parts 15 are arranged on the second solution flow channels. <P>COPYRIGHT: (C)2007,JPO&INPIT

Description

本発明は、細胞電位測定用容器に関する。 The present invention relates to a cell potential measurement container.

電気生理学の初期のころから、ガラス電極を細胞に刺入して細胞の膜電位を測定することが行われ、細胞膜におけるイオンチャネルの存在が予見されていた。そして、細胞膜電位の測定は、パッチクランプ法の開発により、大きく進展した。パッチクランプ法は、１９７６年にＮｅｈｅｒおよびＳａｋｍａｎｎによって開発され（非特許文献１）、これにより、実際にイオンチャンネルの存在を証明するという画期的成果を生み出した。さらに、１９８１年に、Ｈａｍｉｌｌ等によってホールセルクランプ（ｗｈｏｌｅ−ｃｅｌｌ−ｃｌａｍｐ）法が開発され、これにより細胞膜表面全体に存在するイオンチャネルの全電流の測定が可能となった。ホールセルパッチクランプ法は、医薬品開発において重要であるため、これを高速で実施可能にするための技術が開発されている。例えば、高速処理スクリーニングのために、平板デバイスに複数の貫通孔を設け、ここに接着した細胞の連続層を含み、電極で電位依存性のイオンチャネル活性を測定する技術がある（特許文献１）。しかし、複数の細胞を基板上に保持し、各細胞は隣接する細胞と堅く結合しなければならず、電気的なシール状態を実現することは、技術的に難しい。この問題を解決するために、電位差を利用した電気泳導によって測定対象となる細胞のポジショニングと電気的シールを密にする技術がある（特許文献２）。この他に、基板の上に複数のウェルを形成し、前記ウェルの底に細胞を保持するための窪みを形成し、前記窪みと吸引手段とが貫通孔で連結されている細胞外電位測定用デバイスがある（特許文献３）。この細胞外電位測定用デバイスにおいて、さらに細胞保持を確実にするために、ウェルの底部に、第１の開口、第２の開口および空洞部を形成し、前記第１の開口で測定対象の細胞が保持され、前記第１の開口と前記第２の開口とが前記空洞部を介して連結し、前記第１の開口の径が前記空洞部の径より小さく、前記第２の開口部の径よりも大きく、かつ測定対象の細胞の径より小さくするという技術がある（特許文献４）。また、細胞外電位測定用デバイスにおいて、細胞の電気的シールを密にするために、基板の一面側にダイアフラムを設け、このダイアフラムを構成するいずれかの面に少なくとも一つ以上の曲面からなる窪みを設け、この窪みの最深部より上部に貫通孔を設け、この貫通孔の前記窪みと反対側の開口部に検出電極を設けることにより、前記貫通孔内の培養液のイオン濃度を効率よく測定する技術がある（特許文献５）。同様に、細胞外電位測定用デバイスにおいて、細胞の電気的シールを密にするために、基板の一面側にダイアフラムを設け、このダイアフラムのいずれかの面に第一の窪みを設け、この第一の窪に貫通孔を設け、この貫通孔の前記第一の窪みと反対側の開口部に第二の窪みを設け、この第二の窪みの一部に検出電極を設けることにより、前記貫通孔内の培養液のイオン濃度を効率よく測定する技術がある（特許文献６）。 From the early days of electrophysiology, glass electrodes were inserted into cells and the membrane potential of the cells was measured, and the presence of ion channels in the cell membrane was foreseen. The measurement of cell membrane potential has greatly progressed with the development of the patch clamp method. The patch clamp method was developed by Neher and Sakmann in 1976 (Non-Patent Document 1), which produced an epoch-making result of actually demonstrating the existence of ion channels. Furthermore, in 1981, a whole-cell-clamp method was developed by Hamilton et al., Which enabled measurement of the total current of ion channels existing on the entire cell membrane surface. Since the whole cell patch clamp method is important in drug development, a technique for enabling it to be implemented at high speed has been developed. For example, for high-speed processing screening, there is a technique in which a plate device is provided with a plurality of through holes, includes a continuous layer of cells adhered thereto, and measures potential-dependent ion channel activity with electrodes (Patent Document 1). . However, a plurality of cells are held on the substrate, and each cell must be tightly coupled with an adjacent cell, and it is technically difficult to realize an electrical seal state. In order to solve this problem, there is a technique for densely positioning a cell to be measured and electrical sealing by electrostimulation using a potential difference (Patent Document 2). In addition, a plurality of wells are formed on the substrate, a recess for holding cells is formed at the bottom of the well, and the recess and the suction means are connected by a through hole. There is a device (Patent Document 3). In this extracellular potential measurement device, in order to further secure cell retention, a first opening, a second opening, and a cavity are formed at the bottom of the well, and a cell to be measured is formed at the first opening. The first opening and the second opening are connected via the cavity, and the diameter of the first opening is smaller than the diameter of the cavity, and the diameter of the second opening There is a technique of making it larger than the diameter of the cell to be measured (Patent Document 4). In addition, in the device for measuring extracellular potential, a diaphragm is provided on one surface side of the substrate in order to make the electrical seal of the cell dense, and at least one curved surface is formed on any surface constituting the diaphragm. By providing a through hole above the deepest part of the recess and providing a detection electrode at the opening on the opposite side of the through hole, the ion concentration of the culture medium in the through hole is efficiently measured. There is a technique (Patent Document 5). Similarly, in an extracellular potential measurement device, a diaphragm is provided on one side of the substrate, and a first depression is provided on either side of the diaphragm, in order to make an electrical seal of cells dense. By providing a through hole in the recess, providing a second recess in the opening opposite to the first recess of the through hole, and providing a detection electrode in a part of the second recess, the through hole There is a technique for efficiently measuring the ion concentration of the culture medium (Patent Document 6).

これらの技術によれば、複数の細胞の細胞膜電位を測定することができ、かつ電気的シールも密にすることができるため、高精度での測定が可能になる。しかしながら、測定対象の細胞数を増加させると、測定装置の構造が複雑になるという問題があった。
特表２００２−５１８６７８号公報特許第３４８６１７１号公報ＷＯ０２／０５５６５３Ａ１特開２００４−１２２１５号公報特開２００４−２７１３３０号公報特開２００４−２７１３３１号公報ＮｅｈｅｒＥ＆ＳａｋｍａｎｎＢ（１９７６）Ｓｉｎｇｌｅｃｈａｎｎｅｌｃｕｒｒｅｎｔｓｒｅｃｏｒｄｅｄｆｒｏｍｍｅｍｂｒａｎｅｏｆｄｅｎｅｒｖａｔｅｄｆｒｏｇｍｕｓｃｌｅｆｉｂｅｒｓ．Ｎａｔｕｒｅ２６０：７９９−８０２ＨａｍｉｌｌＯＰ，ＭａｒｔｙＡ，ＮｅｈｅｒＥ，ＳａｋｍａｎｎＢ＆ＳｉｇｗｏｒｔｈＦＪ（１９８１）Ｉｍｐｒｏｖｅｄｐａｔｃｈ−ｃｌａｍｐｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｆｏｒｈｉｇｈ−ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｃｕｒｒｅｎｔｒｅｃｏｒｄｉｎｇｆｒｏｍｃｅｌｌｓａｎｄｃｅｌｌ−ｆｒｅｅｍｅｍｂｒａｎｅｐａｔｃｈｅｓ．ＰｆｌuｇｅｒｓＡｒｃｈ３９１：８５ − １００． According to these techniques, the cell membrane potential of a plurality of cells can be measured, and the electrical seal can be made dense, so that measurement with high accuracy is possible. However, when the number of cells to be measured is increased, there is a problem that the structure of the measuring device becomes complicated.
JP 2002-518678 Gazette Japanese Patent No. 3486171 WO02 / 055653A1 JP 2004-12215 A JP 2004-271330 A JP 2004-271331 A Neher E & Sakmann B (1976) Single channel currents recorded from membrane of degenerated fragile fibers. Nature 260: 799-802 Haml OP, Marty A, Neher E, Sakmann B & Sigworth FJ (1981) Improved patch-clamp techniques for high-reduction current recoding. Pflugers Arch 391: 85-100.

そこで、本発明は、測定対象の細胞数が増えた場合であっても、構造が複雑にならない細胞電位測定用容器の提供を目的とする。 Therefore, an object of the present invention is to provide a cell potential measurement container that does not have a complicated structure even when the number of cells to be measured increases.

前記目的を達成するために、本発明の細胞電位測定用容器は、
第１溶液溜め部、第２溶液溜め部、仕切り基板、第１電極および第２電極とを備える複数の測定単位と、第１測定用端子および第２測定用端子とを有する細胞電位測定容器であって、
各前記測定単位において、前記第１溶液溜め部と前記第２溶液溜め部とは前記仕切り基板により仕切られ、前記仕切り基板には、貫通孔が設けられ、前記貫通孔の一端は前記第１溶液溜め部に向かって開口し、前記貫通孔の他端は、前記第２溶液溜め部に向かって開口し、前記貫通孔の前記一端の開口部は細胞を保持可能であり、前記第１電極は、第１溶液に接触可能なように配置され、前記第２電極は第２溶液と接触可能なように配置され、
前記細胞電位測定容器において、前記第１電極は、前記両測定用端子のいずれか一方と電気的に接続され、前記第２電極は前記両測定用端子の残りの一方と電気的に接続され、
前記細胞電位測定容器は、さらに第２溶液用流路を有し、前記第２溶液用流路の上に、複数の前記測定単位が配置され、前記第２溶液用流路と前記第２溶液溜め部とが連通し、前記第２溶液用流路の一端開口部は前記第２溶液の導入口であり、前記第２溶液用流路の他端開口部は前記第２溶液の排出口である細胞電位測定用容器である。 In order to achieve the above object, the cell potential measurement container of the present invention comprises:
A cell potential measuring container having a plurality of measurement units each including a first solution reservoir, a second solution reservoir, a partition substrate, a first electrode, and a second electrode, and a first measurement terminal and a second measurement terminal. There,
In each measurement unit, the first solution reservoir and the second solution reservoir are partitioned by the partition substrate, the partition substrate is provided with a through hole, and one end of the through hole is the first solution. Opening toward the reservoir, the other end of the through-hole opens toward the second solution reservoir, the opening at the one end of the through-hole can hold cells, and the first electrode is The second electrode is disposed so as to be in contact with the second solution, and the second electrode is disposed so as to be in contact with the second solution.
In the cell potential measurement container, the first electrode is electrically connected to one of the two measurement terminals, and the second electrode is electrically connected to the remaining one of the two measurement terminals,
The cell potential measurement container further includes a second solution channel, and a plurality of the measurement units are arranged on the second solution channel, and the second solution channel and the second solution are arranged. The reservoir is communicated with, the one end opening of the second solution channel is an introduction port for the second solution, and the other end opening of the second solution channel is the discharge port for the second solution. A container for measuring cell potential.

このように、本発明の細胞電位測定用容器では、前記第２溶液用流路の上に複数の前記測定単位が配置されており、このため、測定対象の細胞数が増えた場合であっても容器の構造が複雑になることがない。また、本発明の細胞電位測定用容器では、前記第２溶液用流路を有するため、前記測定単位毎に第２溶液を供給することに代えて、複数の前記測定単位に対し一度で第２溶液を供給することが可能である。したがって、本発明の細胞電位測定用容器は、例えば、医薬品候補化合物等の高速スクリーニングに適している。 As described above, in the cell potential measurement container of the present invention, the plurality of measurement units are arranged on the second solution channel, and therefore, the number of cells to be measured is increased. However, the container structure is not complicated. In addition, since the cell potential measurement container of the present invention has the second solution flow path, the second solution is supplied to the plurality of measurement units at a time instead of supplying the second solution for each measurement unit. It is possible to supply a solution. Therefore, the cell potential measurement container of the present invention is suitable for high-speed screening of drug candidate compounds and the like, for example.

本発明の細胞電位測定用容器において、測定の対象となるのは、細胞膜を境界とする細胞内外の電位である。前記細胞電位は、例えば、受容体の活性化、細胞内信号伝達系の作用によって、細胞膜内に存在するイオンチャンネルを通して、例えば、Ｎａ^＋、Ｋ^＋、Ｃａ^２＋、Ｃｌ⁻などのイオンが細胞内外を移動することに伴って値が変化する信号である。また、本発明の細胞電位測定用容器において、測定対象となる細胞電位は、電圧および電流の少なくとも一方である。すなわち、本発明の細胞電位測定用容器では、例えば、電流を固定して電圧を測定してもよいし、電圧を固定して電流を測定してもよい。前述のように、細胞電位の変化は、イオンの移動の変化により生じるものであり、電流変化を測定しても、電圧変化を測定しても、前記イオンの移動の変化を測定することに変わりはない。 In the cell potential measurement container of the present invention, the measurement target is the potential inside and outside the cell with the cell membrane as a boundary. The cell potential is, for example, that ions such as Na ⁺ , K ⁺ , Ca ²⁺ , and Cl ⁻ are introduced inside and outside the cell through ion channels existing in the cell membrane by the activation of the receptor and the action of an intracellular signal transmission system. Is a signal whose value changes as it moves. In the cell potential measurement container of the present invention, the cell potential to be measured is at least one of voltage and current. That is, in the cell potential measurement container of the present invention, for example, the voltage may be measured with a fixed current, or the current may be measured with a fixed voltage. As described above, a change in cell potential is caused by a change in ion movement, and instead of measuring a current change or a voltage change, the change in the ion movement is measured. There is no.

本発明の細胞電位測定用容器において、前記第２溶液用流路の前記第２溶液溜め部に対応する位置に、前記第２溶液を前記第２溶液溜め部に向かって流すための流方向制御手段が配置されていることが好ましい。前記流方向制御手段としては、特に制限されないが、前記第２溶液用流路内部に形成された突起部であることが好ましい。 In the cell potential measurement container of the present invention, flow direction control for flowing the second solution toward the second solution reservoir at a position corresponding to the second solution reservoir in the second solution channel. Preferably means are arranged. The flow direction control means is not particularly limited, but is preferably a protrusion formed inside the second solution flow path.

本発明の細胞電位測定用容器において、前記第２溶液用流路を複数有し、複数の各前記第２溶液用流路に複数の前記測定単位が形成されていることが好ましい。前記測定単位が複数で多ければ、測定対象の細胞数を増加することが可能であり、医薬品候補化合物質等のさらなる高速スクリーニングが可能となるからである。 In the cell potential measurement container of the present invention, it is preferable that a plurality of the second solution channels are provided, and a plurality of the measurement units are formed in each of the plurality of second solution channels. This is because if there are a plurality of measurement units, the number of cells to be measured can be increased, and further high-speed screening of drug candidate compound quality and the like becomes possible.

本発明の細胞電位測定用容器において、複数の前記測定単位における各前記第１電極および各前記第２電極のいずれか一方が、前記第１測定用端子および前記第２測定用端子の一方と、共通配線構造で接続していることが好ましい。このように、共通配線構造を採用すれば、配線構造を簡略化することが可能である。 In the cell potential measurement container of the present invention, any one of the first electrode and the second electrode in the plurality of measurement units is one of the first measurement terminal and the second measurement terminal, It is preferable to connect with a common wiring structure. Thus, if a common wiring structure is adopted, the wiring structure can be simplified.

本発明の細胞電位測定用容器において、前記第１溶液溜め部の下に、前記第２溶液溜め部が配置されているという構成が好ましい。 In the cell potential measurement container of the present invention, a configuration in which the second solution reservoir is disposed below the first solution reservoir is preferable.

本発明の細胞電位測定用容器において、前記第１電極が、前記仕切り基板の第１溶液溜め部側表面に配置され、前記第２電極が、前記仕切り基板の第２溶液溜め部側表面に配置されているという構成が好ましい。 In the cell potential measurement container of the present invention, the first electrode is disposed on the first solution reservoir side surface of the partition substrate, and the second electrode is disposed on the second solution reservoir side surface of the partition substrate. The structure of being made is preferable.

本発明の細胞電位測定用容器において、前記仕切り基板に、複数の前記貫通孔が設けられていることが好ましい。 In the cell potential measurement container of the present invention, it is preferable that the partition substrate is provided with a plurality of the through holes.

本発明の細胞電位測定用容器において、さらにノイズを低減できるという理由から、電気信号増幅装置および電力供給用端子を有することが好ましい。前記電力供給用端子は、前記電気信号増幅装置と電気的に接続されている。前記電気信号増幅装置は、前記第１電極と前記第１測定用端子との接続の途中に配置してもよいし、前記第２電極と前記第２測定用端子との接続の途中に配置してもよい。前述のように、本発明の細胞電位測定用容器において、細胞の電圧信号を測定してもよいし、電流信号を測定してもよい。細胞の電圧変化を測定する場合は、前記電気信号増幅装置として電圧信号増幅装置を用い、前記第１測定用端子および前記第２測定用端子を用いて、前記電圧変化を測定し、細胞の電流変化を測定する場合は、前記電気信号増幅装置として電流信号増幅装置を用い、前記第１測定用端子および前記第２測定用端子を用いて、前記電流変化を測定すればよい。 The cell potential measurement container of the present invention preferably has an electric signal amplifying device and a power supply terminal because noise can be further reduced. The power supply terminal is electrically connected to the electric signal amplifier. The electrical signal amplifying device may be disposed in the middle of the connection between the first electrode and the first measurement terminal, or may be disposed in the middle of the connection between the second electrode and the second measurement terminal. May be. As described above, in the cell potential measurement container of the present invention, a cell voltage signal or a current signal may be measured. When measuring a voltage change of a cell, a voltage signal amplifying device is used as the electric signal amplifying device, the voltage change is measured using the first measuring terminal and the second measuring terminal, and the cell current is measured. When measuring a change, a current signal amplifying device may be used as the electrical signal amplifying device, and the current change may be measured using the first measuring terminal and the second measuring terminal.

本発明の細胞電位測定用容器において、前記電気信号増幅装置を有する場合、スイッチング装置によって、前記電気信号増幅装置に接続する複数の前記測定単位の切り替えを行ってもよい。この場合の容器の構成は、例えば、下記の２つがある。 In the cell potential measurement container of the present invention, when the electric signal amplifying device is provided, a plurality of the measurement units connected to the electric signal amplifying device may be switched by a switching device. In this case, the container has, for example, the following two configurations.

まず、第１の構成は、本発明の細胞電位測定用容器において、さらに、スイッチング装置およびスイッチング信号入力用端子を有し、前記スイッチング装置と前記スイッチング信号入力用端子とが電気的に接続され、複数の前記測定単位、一つの前記第１測定用端子、一つの前記第２測定用端子、一つの前記電気信号増幅装置および一つの前記スイッチング装置から一つの測定グループが構成され、前記測定グループにおいて、複数の前記第２電極は、一つの前記第２測定用端子と共通配線構造で接続され、複数の前記第１電極のいずれかは、一つの前記電気信号増幅装置および一つの前記スイッチング装置を介して一つの前記第１測定用端子に電気的に接続され、前記スイッチング装置により、複数の前記第１電極の中から、前記電気信号増幅装置および前記第１測定用端子と電気的に接続される一つの前記第１電極が選択されるという構成である。 First, in the cell potential measurement container of the present invention, the first configuration further includes a switching device and a switching signal input terminal, and the switching device and the switching signal input terminal are electrically connected, A plurality of the measurement units, one first measurement terminal, one second measurement terminal, one electric signal amplifier, and one switching device constitute one measurement group. In the measurement group, The plurality of second electrodes are connected to one second measurement terminal through a common wiring structure, and any one of the plurality of first electrodes includes one electric signal amplifying device and one switching device. Electrically connected to one of the first measurement terminals via the switching device and the electrical signal from among the plurality of first electrodes. It is a configuration that one of the first electrode is wide device and connected to the first measurement terminal and electrically are selected.

また、第２の構成は、本発明の細胞電位測定用容器において、さらに、スイッチング装置およびスイッチング信号入力用端子を有し、前記スイッチング装置と前記スイッチング信号入力用端子とが電気的に接続され、複数の前記測定単位、一つの前記第１測定用端子、一つの前記第２測定用端子、一つの前記電気信号増幅装置および一つの前記スイッチング装置から一つの測定グループが構成され、前記測定グループにおいて、複数の前記第１電極は、一つの前記第２測定用端子と共通配線構造で接続され、複数の前記第２電極のいずれかは、一つの前記電気信号増幅装置および一つの前記スイッチング装置を介して一つの前記第１測定用端子に電気的に接続され、前記スイッチング装置により、複数の前記第２電極の中から、前記電気信号増幅装置および前記第１測定用端子と電気的に接続される一つの前記第２電極が選択されるという構成である。 The second configuration further includes a switching device and a switching signal input terminal in the cell potential measurement container of the present invention, and the switching device and the switching signal input terminal are electrically connected, A plurality of the measurement units, one first measurement terminal, one second measurement terminal, one electric signal amplifier, and one switching device constitute one measurement group. In the measurement group, The plurality of first electrodes are connected to one second measurement terminal through a common wiring structure, and any one of the plurality of second electrodes includes one electric signal amplifying device and one switching device. Electrically connected to one of the first measurement terminals via the switching device and the electrical signal from among the plurality of second electrodes. It is a configuration that one of the second electrode which is wide device and connected to the first measurement terminal and electrically are selected.

このように、前記スイッチング装置を用いれば、前記電気信号増幅装置の数を減らすことができ、これによって、前記測定単位が増加した場合であっても、本発明の細胞電位測定用容器の構造を単純化することが可能となる。前記スイッチング装置を有する場合、前記測定グループは、単数であってもよいし、複数であってもよい。 As described above, when the switching device is used, the number of the electric signal amplifying devices can be reduced, and thus the structure of the cell potential measuring container of the present invention can be achieved even when the measurement unit is increased. It becomes possible to simplify. When the switching device is included, the measurement group may be singular or plural.

本発明の細胞電位測定用容器は、その形態は特に制限されない。例えば、本発明の細胞電位測定用容器は、容器本体プレート、樹脂部、仕切り基板、第１電極、第２電極、第１配線、第２配線、第１測定用端子、第２測定用端子を有し、前記容器本体プレートの表面に孔が形成され、前記孔を覆う状態で前記仕切り基板が前記容器本体プレート表面に配置され、前記仕切り基板には貫通孔が形成され、この貫通孔を囲む状態で前記容器本体プレート表面に前記樹脂部が配置され、前記樹脂部で囲まれた空間が第１溶液を溜めるための第１溶液溜め部であり、前記孔内部が第２溶液を溜めるための第２溶液溜め部であり、前記貫通孔の一端が前記第１溶液溜め部に向かって開口し、前記貫通孔の他端が前記第２溶液溜め部に向かって開口し、前記貫通孔の前記一端開口部が細胞を保持可能であり、前記仕切り基板の表面に前記第１電極が前記第１溶液に接触可能なように配置され、前記仕切り基板の裏面に前記第２電極が前記第２溶液と接触可能なように配置され、前記第１溶液溜め部、前記第２溶液溜め部、前記仕切り基板、前記第１電極および前記第２電極から測定単位が構成され、前記容器本体プレート内部に第２溶液用流路が形成され、前記第２溶液用流路と、前記第２溶液溜め部を形成する前記孔とが、連通しており、前記第２溶液用流路の一端は前記容器本体プレート表面で開口し、前記開口が前記樹脂部の貫通孔と連通して前記貫通孔の開口部が前記第２溶液導入口となっており、前記第２溶液用流路の他端は前記容器本体プレート表面で開口し、前記開口が前記樹脂部の貫通孔と連通して前記貫通孔の開口部が第２溶液排出口となっており、前記第２溶液用流路毎に複数の前記測定単位が形成され、前記第１配線、前記第２配線、前記第１測定用端子、前記第２測定用端子が前記容器本体プレート表面に配置され、前記第２電極は、前記第２配線により第２測定用端子と電気的に接続され、前記第１電極は、前記第１配線により、前記第１測定用端子に電気的に接続されているという形態であってもよい。 The form of the cell potential measurement container of the present invention is not particularly limited. For example, the cell potential measurement container of the present invention includes a container body plate, a resin part, a partition substrate, a first electrode, a second electrode, a first wiring, a second wiring, a first measurement terminal, and a second measurement terminal. A hole is formed on the surface of the container body plate, the partition substrate is disposed on the surface of the container body plate in a state of covering the hole, and a through hole is formed in the partition substrate, and surrounds the through hole In the state, the resin part is arranged on the surface of the container body plate, a space surrounded by the resin part is a first solution reservoir part for storing the first solution, and the inside of the hole for storing the second solution A second solution reservoir, wherein one end of the through hole opens toward the first solution reservoir, the other end of the through hole opens toward the second solution reservoir, One end opening can hold the cell and the partition The first electrode is disposed on the surface of the plate so as to be in contact with the first solution, and the second electrode is disposed on the back surface of the partition substrate so as to be in contact with the second solution. A measurement unit is constituted by the reservoir, the second solution reservoir, the partition substrate, the first electrode, and the second electrode, and a second solution channel is formed inside the container body plate, and the second solution And the hole for forming the second solution reservoir is in communication, one end of the second solution channel is opened on the surface of the container body plate, and the opening is formed on the resin portion. The opening of the through hole communicates with the through hole and serves as the second solution introduction port. The other end of the second solution flow path opens on the surface of the container body plate, and the opening is the resin portion. And the opening of the through hole serves as a second solution discharge port. A plurality of the measurement units are formed for each of the second solution flow paths, and the first wiring, the second wiring, the first measurement terminal, and the second measurement terminal are on the surface of the container body plate. The second electrode is electrically connected to the second measurement terminal by the second wiring, and the first electrode is electrically connected to the first measurement terminal by the first wiring. It may be in the form of being done.

前記形態の本発明の細胞電位測定用容器において、複数の前記測定単位毎に前記樹脂部が形成されているという構成であってもよい。この他に、前記形態の本発明の細胞電位測定用容器において、前記樹脂部が、複数の孔が形成された樹脂プレートであり、複数の前記測定単位における前記孔が、複数の前記測定単位の前記第１溶液溜め部を形成するように前記樹脂プレートが前記容器本体プレート表面に配置されているという構成であってもよい。 The cell potential measuring container of the present invention having the above-described form may be configured such that the resin portion is formed for each of a plurality of the measurement units. In addition, in the cell potential measurement container of the present invention of the above-described form, the resin portion is a resin plate in which a plurality of holes are formed, and the holes in the plurality of measurement units are a plurality of the measurement units. The structure that the said resin plate is arrange | positioned at the said container main body plate surface so that the said 1st solution reservoir part may be formed may be sufficient.

前記形態の本発明の細胞電位測定用容器において、前記第１測定用端子および前記第２測定用端子が、前記容器本体プレートの端部表面に配置されているという構成であってもよい。 In the cell potential measurement container of the present invention having the above-described form, the first measurement terminal and the second measurement terminal may be arranged on the end surface of the container body plate.

前記形態の本発明の細胞電位測定用容器において、前記第２溶液用流路の前記第２溶液溜め部に対応する位置に、前記第２溶液を前記第２溶液溜め部に向かって流すための流方向制御手段が配置されていることが好ましい。前記流方向制御手段は、特に制限されないが、前記第２溶液用流路内部に形成された突起部であることが好ましい。また、前記第２溶液用流路を複数有し、複数の各前記第２溶液用流路の上に複数の前記測定単位が形成されていることが好ましい。 In the cell potential measurement container of the present invention of the above-described form, for flowing the second solution toward the second solution reservoir in a position corresponding to the second solution reservoir of the second solution channel. A flow direction control means is preferably arranged. The flow direction control means is not particularly limited, but is preferably a protrusion formed inside the second solution channel. In addition, it is preferable that a plurality of the second solution channels are provided, and a plurality of the measurement units are formed on each of the plurality of second solution channels.

前記形態の本発明の細胞電位測定用容器において、前記第１配線は、前記容器本体プレート表面上に形成された配線パターンと、導電ワイヤとから構成され、前記配線パターンと前記第１電極とが前記導電ワイヤにより電気的に接続されていることが好ましい。また、前記形態の本発明の細胞電位測定用容器において、第２配線は、前記容器本体プレート表面上に形成された配線パターンであり、前記配線パターンの端部の上に、前記仕切り基板の裏面の第２電極が配置されているという構成が好ましい。 In the cell potential measurement container of the present invention according to the above aspect, the first wiring is composed of a wiring pattern formed on the surface of the container body plate and a conductive wire, and the wiring pattern and the first electrode are It is preferable to be electrically connected by the conductive wire. Further, in the cell potential measurement container of the present invention of the above aspect, the second wiring is a wiring pattern formed on the surface of the container body plate, and on the end of the wiring pattern, the back surface of the partition substrate The second electrode is preferably arranged.

前記形態の本発明の細胞電位測定用容器において、前記樹脂部により、前記第１配線および第２配線の一部若しくは全部が封止されていることが好ましく、前記導電ワイヤを有する場合は、少なくとも前記導電ワイヤが前記樹脂部で封止されていることが好ましい。また、前記形態の本発明の細胞電位測定用容器において、前記樹脂部により、前記仕切り基板の縁部が覆われているという構成が好ましい。 In the cell potential measurement container of the present invention of the above-described form, it is preferable that a part or all of the first wiring and the second wiring are sealed by the resin portion. It is preferable that the conductive wire is sealed with the resin portion. Further, in the cell potential measurement container of the present invention of the above form, a configuration in which an edge portion of the partition substrate is covered with the resin portion is preferable.

つぎに、本発明の実施例ついて説明する。ただし、本発明は、下記の実施例により制限されない。 Next, examples of the present invention will be described. However, the present invention is not limited by the following examples.

図１、図２、図３および図４に、本発明の細胞電位測定用容器の一実施例を示す。図１は、細胞電位測定用容器の斜視図であり、図２は、その平面図であり、図３は、図１のＡ−Ａ方向に見た断面図であり、図４は、図３の断面図の部分拡大断面図であり、これらの図において、同一部分には同一符号を付している。 FIG. 1, FIG. 2, FIG. 3 and FIG. 4 show an embodiment of the cell potential measuring container of the present invention. 1 is a perspective view of a cell potential measuring container, FIG. 2 is a plan view thereof, FIG. 3 is a cross-sectional view taken along the line AA of FIG. 1, and FIG. FIG. 2 is a partially enlarged cross-sectional view of these cross-sectional views. In these drawings, the same portions are denoted by the same reference numerals.

図示のように、本実施例の細胞電位測定用容器では、ボトムプレート１１ｂの上にトッププレート１１ａが配置されて容器本体プレート１１が構成されており、容器本体プレート１１の上に樹脂部１２が配置されている。容器本体プレート１１の形状は、長方形板状であり、樹脂部１２の形状は、容器本体プレート１１よりも長さが短い長方形板状であり、容器本体プレート１１の長手方向の両端部表面は露出している。容器本体プレート１１内部において、その長手方向に沿って延びる第２溶液用流路２０が４本形成され、各第２溶液用流路２０の上に、これと連通する孔が４個形成され、孔内部が第２溶液溜め部１５であり、これらの孔を覆う状態で、孔毎に、仕切り基板１８が容器本体プレート１１表面に配置されている。第２溶液用流路２０の第２溶液溜め部１５に対応する個所には、それぞれ三角状の突起部２２が設けられている。樹脂部１２には、各第２溶液溜め部１５に対応する位置と第２溶液用流路２０の両端に対応する位置に、孔が形成され、第２溶液溜め部１５に対応する孔の内部が第１溶液溜め部１４であり、第２溶液用流路２０の両端に対応する孔の内部が第２溶液導入口２１ａと第２溶液排出口２１ｂである。仕切り基板１８には、複数の貫通孔１９が形成されている。図４の断面図に示すように、仕切り基板１８の第１溶液溜め部１４側の表面には、第１溶液と接触可能な状態で第１電極２７ａが配置されており、仕切り基板１８の第２溶液溜め部１５側の表面（仕切り基板１８の裏面）には、第２溶液と接触可能な状態で第２電極２７ｂが配置されている。そして、第１溶液溜め部１４、第２溶液溜め部１５、仕切り基板１８、第１電極２７ａおよび第２電極２７ｂから、一つの測定単位が構成されている。本実施例の細胞電位測定用容器において、測定単位は、容器本体プレート１１の長手方向にそって４個直列しており、この列は、容器本体プレート１１の幅方向に沿って４本並列している。容器本体プレート１１の表面には、第１配線パターン２８ａおよび第２配線パターン２８ｂが形成されている。第１配線パターン２８ａは、その端部で導電ワイヤ２９の一端と接続し、導電ワイヤ２９の他端は第１電極２７ａと接続している。本実施例の細胞電位測定用容器において、第１配線パターン２８ａと導電ワイヤ２９とにより第１配線が構成されている。また、本実施例の細胞電位測定用容器において、第２配線パターン２８ｂが、第２配線であり、第２配線パターン２８ｂの上に第２電極２７ｂが位置して両者が電気的に接合されている。なお、第１配線パターン２８ａ、導電ワイヤ２９および第２配線パターン２８ｂは、樹脂部１２によって封止されている。本実施例の細胞電位測定用容器において、容器本体プレート１１の一方の端部（図１〜図３において上側若しくは右側）の表面には、４個の第２測定用端子１３ｂ（ＣＯＭ１，ＣＯＭ２，ＣＯＭ３，ＣＯＭ４）が配置され、容器本体プレート１１の他方の端部（図１〜図３において下側若しくは左側）の表面には、４個の第１測定用端子１３ａ（Ａ１,Ａ２，Ａ３，Ａ４）、３個のスイッチング信号入力用端子２６（Ｃ１，Ｃ２，Ｃ３）、一組の電力供給用端子２５（＋、−、ＧＮＤ）が配置されている。また、容器本体プレート１１の他方の端部表面において、前記の４種類の端子（１３ａ，２６，２５）と樹脂部１２との間に、４個の電気信号増幅装置１６（アンプ）および４個のスイッチング装置１７（マルチプレクサ）が配置されている。なお、２３は、電気信号増幅装置１６若しくはスイッチング装置１７を構成する抵抗器である。電気信号増幅装置１６、スイッチング装置１７および抵抗器２３は、封止樹脂２４によって封止されている。本実施例の細胞電位測定用容器において、直列状に配置された４個の測定単位と、一つの電気信号増幅装置１６と、一つのスイッチング装置１７と、一つの第１測定用端子１３ａと、一つの第２測定用端子１３ｂとで、一つの測定グループが構成されており、本実施例の細胞電位測定用容器は、全部で４個の測定グループを備える。なお、電気信号増幅装置１６は、細胞の電圧信号を測定する場合では、電圧信号増幅装置であり、細胞の電流信号を測定する場合では、電流信号増幅装置である。 As shown in the figure, in the cell potential measurement container of this example, a top plate 11a is disposed on a bottom plate 11b to form a container body plate 11, and a resin portion 12 is disposed on the container body plate 11. Has been placed. The shape of the container main body plate 11 is a rectangular plate shape, the shape of the resin portion 12 is a rectangular plate shape shorter than the container main body plate 11, and the surfaces of both end portions in the longitudinal direction of the container main body plate 11 are exposed. is doing. In the container body plate 11, four second solution channels 20 extending along the longitudinal direction are formed, and four holes communicating with the second solution channels 20 are formed on each second solution channel 20, The inside of the hole is the second solution reservoir 15, and the partition substrate 18 is disposed on the surface of the container body plate 11 for each hole in a state of covering these holes. Triangular protrusions 22 are provided at locations corresponding to the second solution reservoir 15 of the second solution flow path 20. A hole is formed in the resin portion 12 at a position corresponding to each second solution reservoir 15 and a position corresponding to both ends of the second solution flow path 20, and the inside of the hole corresponding to the second solution reservoir 15 Is the first solution reservoir 14, and the insides of the holes corresponding to both ends of the second solution channel 20 are the second solution introduction port 21a and the second solution discharge port 21b. A plurality of through holes 19 are formed in the partition substrate 18. As shown in the cross-sectional view of FIG. 4, the first electrode 27 a is disposed on the surface of the partition substrate 18 on the first solution reservoir 14 side so as to be in contact with the first solution. The second electrode 27b is disposed on the surface of the two-solution reservoir 15 side (the back surface of the partition substrate 18) so as to be in contact with the second solution. The first solution reservoir 14, the second solution reservoir 15, the partition substrate 18, the first electrode 27a, and the second electrode 27b constitute one measurement unit. In the cell potential measurement container of this embodiment, four measurement units are arranged in series along the longitudinal direction of the container main body plate 11, and four columns are arranged in parallel along the width direction of the container main body plate 11. ing. A first wiring pattern 28 a and a second wiring pattern 28 b are formed on the surface of the container body plate 11. The first wiring pattern 28a is connected to one end of the conductive wire 29 at its end, and the other end of the conductive wire 29 is connected to the first electrode 27a. In the cell potential measurement container according to the present embodiment, the first wiring is constituted by the first wiring pattern 28 a and the conductive wire 29. In the cell potential measurement container of the present embodiment, the second wiring pattern 28b is the second wiring, and the second electrode 27b is positioned on the second wiring pattern 28b so that the two are electrically joined. Yes. The first wiring pattern 28a, the conductive wire 29, and the second wiring pattern 28b are sealed with the resin portion 12. In the cell potential measurement container of the present embodiment, four second measurement terminals 13b (COM1, COM2, COM2) are provided on the surface of one end of the container body plate 11 (upper side or right side in FIGS. 1 to 3). COM3 and COM4) are arranged, and four first measurement terminals 13a (A1, A2, A3, A3, A3, A3, A3, A3, A3) are disposed on the surface of the other end (lower or left side in FIGS. A4) Three switching signal input terminals 26 (C1, C2, C3) and a set of power supply terminals 25 (+,-, GND) are arranged. Further, on the surface of the other end of the container body plate 11, there are four electric signal amplifying devices 16 (amplifiers) and four between the four types of terminals (13 a, 26, 25) and the resin portion 12. Switching device 17 (multiplexer) is arranged. Reference numeral 23 denotes a resistor constituting the electric signal amplifying device 16 or the switching device 17. The electric signal amplifier 16, the switching device 17, and the resistor 23 are sealed with a sealing resin 24. In the cell potential measurement container of the present embodiment, four measurement units arranged in series, one electric signal amplifying device 16, one switching device 17, and one first measurement terminal 13a, One second measurement terminal 13b constitutes one measurement group, and the cell potential measurement container of this embodiment includes a total of four measurement groups. The electric signal amplifying device 16 is a voltage signal amplifying device when measuring a cell voltage signal, and is a current signal amplifying device when measuring a cell current signal.

容器本体プレート１１（トッププレート１１ａ，ボトムプレート１１ｂ）の形成材料は、特に制限されず、例えば、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、シクロオレフィンポリマー（ＣＯＰ），シクロオレフィンコポリマー（ＣＯＣ）等の有機系樹脂材料に加え、ガラス、石英、セラミック等の無機系材料が使用可能である。また、容器本体プレート１１の大きさは、特に制限されないが、その形状が長方形板状の場合、例えば、縦８４〜８６ｍｍ×横１２７〜１２９ｍｍ×厚み１〜５ｍｍである。また、トッププレート１１ａの厚みは、例えば、０．５〜４．５ｍｍであり、ボトムプレート１１ｂの厚みは、例えば、５〜４．５ｍｍである。容器本体プレート１１の第２溶液溜め部１５および第２溶液用流路２０は、トッププレート１１ａの所定の位置に溝および孔を形成し、トッププレート１１ａと、ボトムプレート１１ｂを張り合わせることで形成できる。トッププレート１１ａおよびボトムプレート１１ｂの貼り合わせは、例えば、接着剤を使用することができ、接着剤としては、例えば、エポキシ系接着剤、アクリル系接着剤、シリコン系接着剤など通常のものが使用できるが、使用中に溶液内へ溶け出し細胞の活性に影響を与えることのないよう配慮が必要である。プレート貼り合わせの別の方法として、トッププレート１１ａおよびボトムプレート１１ｂが熱可塑型樹脂（例えばポリスチレン）である場合、接着剤を使わずに接着面をレーザや超音波などの手段により溶融させて接合する溶着法によって強固に接合することが可能である。 The material for forming the container body plate 11 (top plate 11a, bottom plate 11b) is not particularly limited. For example, polystyrene (PS), polycarbonate (PC), polyethylene terephthalate (PET), cycloolefin polymer (COP), cycloolefin In addition to organic resin materials such as copolymers (COC), inorganic materials such as glass, quartz, and ceramics can be used. In addition, the size of the container body plate 11 is not particularly limited, but when the shape is a rectangular plate shape, for example, the length is 84 to 86 mm × width 127 to 129 mm × thickness 1 to 5 mm. Moreover, the thickness of the top plate 11a is 0.5-4.5 mm, for example, and the thickness of the bottom plate 11b is 5-4.5 mm, for example. The second solution reservoir 15 and the second solution flow path 20 of the container body plate 11 are formed by forming grooves and holes at predetermined positions of the top plate 11a and bonding the top plate 11a and the bottom plate 11b together. it can. For bonding the top plate 11a and the bottom plate 11b, for example, an adhesive can be used. As the adhesive, for example, an epoxy adhesive, an acrylic adhesive, a silicon adhesive, or the like is used. However, care must be taken not to dissolve into the solution during use and affect the activity of the cells. As another method of laminating the plates, when the top plate 11a and the bottom plate 11b are made of a thermoplastic resin (for example, polystyrene), the bonding surfaces are melted and bonded by means of laser or ultrasonic waves without using an adhesive. It is possible to join firmly by the welding method to do.

樹脂部１２の形成材料は、特に制限されず、トッププレート、ボトムプレートと同様に例えば、ＰＳ、ＰＣ，ＰＥＴ、ＣＯＰ，ＣＯＣ等が使用できる。また、樹脂部１２の大きさは、特に制限されないが、その形状が長方形板状の場合、例えば、縦７０〜８６ｍｍ×横１１０〜１２９ｍｍ×厚み３〜１０ｍｍである。第１溶液溜め部１４は、樹脂部の所定位置に孔を設けることで形成できる。樹脂部１２は、例えば、トランスファーモールド等の樹脂形成工法により形成できる。 The material for forming the resin portion 12 is not particularly limited, and for example, PS, PC, PET, COP, COC and the like can be used in the same manner as the top plate and the bottom plate. In addition, the size of the resin portion 12 is not particularly limited, but when the shape is a rectangular plate shape, for example, the length is 70 to 86 mm × width 110 to 129 mm × thickness 3 to 10 mm. The first solution reservoir 14 can be formed by providing a hole at a predetermined position of the resin portion. The resin portion 12 can be formed by a resin forming method such as transfer molding.

本実施例の細胞電位測定用容器において、測定単位は１６個であるが、本発明は、これに限定されず、例えば、２４〜数百個、好ましくは規格化されているマイクロタイタープレートのウエルの数と同じ数の、２４個、９６個、３８４個等にしてもよい。また、第１溶液としては、例えば、ＮａＣｌを主成分とする生理的塩類溶液で、一般には細胞外液と呼ばれるものを使用するが、測定対象の細胞種によって種種の変更が加えられる。第２溶液としては、例えば、ＫＣｌを主成分とする生理的塩類溶液で、一般には細胞内液と呼ばれ、細胞外液同様に細胞種によって様々な変更が加えられる。また、第２溶液は、細胞膜に孔を形成する物質を含んでいることが好ましく、このような物質としては、例えば、ナイスタチンが使用できる。 In the cell potential measurement container of this example, the number of measurement units is 16, but the present invention is not limited to this. For example, wells of 24 to several hundred, preferably standardized microtiter plates are used. The number may be 24, 96, 384, or the like. In addition, as the first solution, for example, a physiological salt solution containing NaCl as a main component and generally called an extracellular solution is used. However, the type of the first solution is changed depending on the cell type to be measured. The second solution is, for example, a physiological salt solution containing KCl as a main component, and is generally called an intracellular solution, and various changes are added depending on the cell type as in the extracellular solution. Moreover, it is preferable that the 2nd solution contains the substance which forms a pore in a cell membrane, For example, nystatin can be used as such a substance.

本実施例の細胞電位測定用容器の仕切り基板１８の一例を、図５の斜視図に示す。同図において、図１〜図４と同一部分には同一符号を付している。図示のように、仕切り基板１８は、正方形板状であり、その表面の中心部には、４個×４個の状態で正方形状に整列した１６個の貫通孔１９が形成されている。そして、貫通孔１９を取り囲む状態で、仕切り基板１８表面に第１電極２７ａが形成され、同様に、仕切り基板１８裏面に第２電極２７ｂが形成されている。貫通孔１９の第１溶液溜め部１４側の端部開口部は、図４および図６（Ａ）の断面図に示すように、略半球状であってもよい。このような形状であれば、図６（Ａ）に示すように、細胞３９を、しっかりと保持でき、電気的シール状態を密にすることができる。図６において、図１〜図５と同一部分には、同一符号を付している。なお、貫通孔１９の形状は、特に制限されず、例えば、図６（Ｂ）に示すように、貫通孔１９は、軸方向に沿って内径が一定であってもよいし、図６（Ｃ）に示すように、貫通孔１９の第１溶液溜め部１４側の開口部周辺を盛り上げた形状にしてもよい。 An example of the partition substrate 18 of the cell potential measurement container of the present embodiment is shown in the perspective view of FIG. In the figure, the same parts as those in FIGS. As shown in the figure, the partition substrate 18 has a square plate shape, and 16 through holes 19 arranged in a square shape in a state of 4 × 4 are formed at the center of the surface. And the 1st electrode 27a is formed in the partition board | substrate 18 surface in the state surrounding the through-hole 19, and the 2nd electrode 27b is similarly formed in the partition board | substrate 18 back surface. The end opening on the first solution reservoir 14 side of the through hole 19 may be substantially hemispherical as shown in the cross-sectional views of FIGS. 4 and 6A. If it is such a shape, as shown to FIG. 6 (A), the cell 39 can be hold | maintained firmly and an electrical seal state can be made dense. 6, the same parts as those in FIGS. 1 to 5 are denoted by the same reference numerals. The shape of the through hole 19 is not particularly limited. For example, as shown in FIG. 6B, the through hole 19 may have a constant inner diameter along the axial direction. As shown in FIG. 5, the periphery of the opening on the first solution reservoir 14 side of the through hole 19 may be raised.

仕切り基板１８の形成材料は、特に制限されず、例えば、シリコン、石英、ガラスなどの無機系材料に加え、ＰＣ，ＰＥＴ，ポリイミド（ＰＩ），ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）などの有機系樹脂材料も使用できる。仕切り基板１８の大きさは、特に制限されないが、その形状が正方形板状の場合、例えば、縦０．３〜３．０ｍｍ×横０．３〜３．０ｍｍ×厚み０．００１〜１．０ｍｍである。貫通孔１９の数は、前述の１６個に制限されず、例えば、１〜１００個、好ましくは２〜５０個、より好ましくは３〜１０個である。貫通孔の内径は、測定対象の細胞の最大直径よりも小さければ、特に制限されず、例えば、０．５〜１０μｍである。 The material for forming the partition substrate 18 is not particularly limited. For example, in addition to inorganic materials such as silicon, quartz, and glass, organic resin materials such as PC, PET, polyimide (PI), and polydimethylsiloxane (PDMS) are also included. Can be used. The size of the partition substrate 18 is not particularly limited, but when the shape is a square plate, for example, 0.3 to 3.0 mm in length, 0.3 to 3.0 mm in width, and 0.001 to 1.0 mm in thickness. It is. The number of the through holes 19 is not limited to the above-mentioned 16 pieces, and is, for example, 1 to 100 pieces, preferably 2 to 50 pieces, and more preferably 3 to 10 pieces. The inner diameter of the through hole is not particularly limited as long as it is smaller than the maximum diameter of the cell to be measured, and is, for example, 0.5 to 10 μm.

第１電極および第２電極の形成材料は、特に制限されず、例えば、銀−塩化銀、金、白金である。第１電極および第２電極の厚みは、例えば、０．１〜１００μｍである。第１電極および第２電極は、前述の材料を用いて、例えば、蒸着、スパッタリング等の通常の薄膜形成手段に加えて、印刷、メッキなどの電極形成手段により形成できる。 The formation material in particular of a 1st electrode and a 2nd electrode is not restrict | limited, For example, they are silver-silver chloride, gold | metal | money, and platinum. The thickness of the first electrode and the second electrode is, for example, 0.1 to 100 μm. The first electrode and the second electrode can be formed using the above-described materials by, for example, electrode forming means such as printing and plating in addition to normal thin film forming means such as vapor deposition and sputtering.

本実施例の細胞電位測定用容器において、第１電極および第２電極と第１配線および第２配線との接続の一例について、図７の部分断面斜視図および図９の斜視図を用いて説明する。図７および図９において、図１〜図６と同一部分には同一符号を付している。図示のように、本実施例の細胞電位測定用容器では、容器本体プレート１１の表面に、第１配線パターン２８ａおよび第２配線パターン２８ｂが形成されている。図７および図９において、一つの測定グループ毎に、第１配線パターン２８ａが４本形成され、それぞれの端部が、導電ワイヤ２９の一端と接続し、導電ワイヤ２９の他端は、第１電極２７ａと接続しており、第１配線パターン２８ａおよび導電ワイヤ２９で第１配線が構成され、第１配線は、スイッチング装置（図示せず）を介して、一つの第１測定用端子（図示せず）と接続している。一方、図示のように、第２配線パターン２８ｂは、一つの直線状配線パターンから４本の枝配線パターンが分岐しており、各枝配線パターンの端部が、ボンディングパッドに形成されているという構成であり、前記ボンディングパッドの上に第２電極（図示せず）が配置されて両者が接続されている。第２配線パターンが第２配線であり、第２配線は、共通配線構造をとって、第２測定用端子と接続している。つぎに、図７および図９に示す配線パターンと異なる配線パターンを図１０の部分断面図斜視図に示す。図示のように、第１配線パターン２８ａは、容器本体プレート１１の長手方向に沿って延びる直線状配線パターンと、直線状配線パターンから分岐した４個の端部から構成されている。そして、第１配線パターン２８ａの４個の前記端部は、導電ワイヤ２９の一端と接続し、導電ワイヤ２９の他端は、各第１電極２７ａと接続しており、第１配線パターン２８ａと導電ワイヤ２９とで本発明の第１配線が構成されている。この配線構造では、第１電極２７ａと接続する第１配線は、共通配線構造をとって、第２測定用端子と接続している。一方、前記第２配線パターン２８ｂは、ボンディングパッドと、前記ボンディングパッドから容器本体プレート１１の長手方向に沿って延びる直線状配線パターンとから構成されている。この配線構造において、第２配線パターン２８ｂが、本発明の第２配線であり、図示していないが第２配線と接続する第２電極２７ｂは、スイッチング装置によって切り替え可能となっており、スイッチング装置を介して、第１測定用端子と接続している。 In the cell potential measurement container of the present embodiment, an example of connection between the first electrode and the second electrode and the first wiring and the second wiring will be described with reference to a partial sectional perspective view of FIG. 7 and a perspective view of FIG. To do. 7 and 9, the same parts as those in FIGS. 1 to 6 are denoted by the same reference numerals. As shown in the drawing, in the cell potential measurement container of this example, a first wiring pattern 28 a and a second wiring pattern 28 b are formed on the surface of the container body plate 11. 7 and 9, four first wiring patterns 28a are formed for each measurement group, and each end portion is connected to one end of the conductive wire 29, and the other end of the conductive wire 29 is the first wiring pattern. The first wiring pattern 28a and the conductive wire 29 are connected to the electrode 27a, and the first wiring is constituted by a first measuring terminal (not shown) via a switching device (not shown). (Not shown). On the other hand, as shown in the figure, the second wiring pattern 28b has four branch wiring patterns branched from one linear wiring pattern, and the end of each branch wiring pattern is formed on the bonding pad. The second electrode (not shown) is disposed on the bonding pad and connected to each other. The second wiring pattern is the second wiring, and the second wiring has a common wiring structure and is connected to the second measurement terminal. Next, a wiring pattern different from the wiring patterns shown in FIGS. 7 and 9 is shown in the partial sectional view perspective view of FIG. As shown in the figure, the first wiring pattern 28 a is composed of a linear wiring pattern extending along the longitudinal direction of the container body plate 11 and four ends branched from the linear wiring pattern. The four end portions of the first wiring pattern 28a are connected to one end of the conductive wire 29, and the other end of the conductive wire 29 is connected to each first electrode 27a. The first wire of the present invention is constituted by the conductive wire 29. In this wiring structure, the first wiring connected to the first electrode 27a has a common wiring structure and is connected to the second measurement terminal. On the other hand, the second wiring pattern 28 b includes a bonding pad and a linear wiring pattern extending from the bonding pad along the longitudinal direction of the container body plate 11. In this wiring structure, the second wiring pattern 28b is the second wiring of the present invention, and although not shown, the second electrode 27b connected to the second wiring can be switched by the switching device. And is connected to the first measurement terminal.

第１配線パターンおよび第２配線パターンの形成材料は、特に制限されず、例えば、プリント回路基板の配線で用いられる銅もしくは銅合金などが使用できる。第１配線パターンおよび第２配線パターンは、前述の材料を用いて、プリント回路基板における公知の配線形成法である、フォトリソグラフィーや印刷などの方法により形成できる。導電ワイヤの形成材料には、例えば、金やアルミ系の金属が使用できる。導電ワイヤは、例えば、半導体パッケージの組立で使用されるワイヤボンディングにより第１配線パターン２８ａの端部と第１電極２７ａに接合される。なお、第１配線パターン２８ａの端部の表面ならびに第１電極２７ａの表面のワイヤが接合される表面には、例えば、ワイヤとの接合性をよくするためのめっき層（図示省略）が形成されている。 The formation material in particular of a 1st wiring pattern and a 2nd wiring pattern is not restrict | limited, For example, copper or copper alloy etc. which are used by the wiring of a printed circuit board can be used. The first wiring pattern and the second wiring pattern can be formed by a method such as photolithography or printing, which is a known wiring forming method for a printed circuit board, using the above-described materials. As the conductive wire forming material, for example, gold or aluminum-based metal can be used. The conductive wire is bonded to the end portion of the first wiring pattern 28a and the first electrode 27a, for example, by wire bonding used in the assembly of the semiconductor package. For example, a plating layer (not shown) is formed on the surface of the end portion of the first wiring pattern 28a and the surface of the first electrode 27a where the wire is bonded to improve the bonding property with the wire. ing.

本実施例の細胞電位測定用容器における配線構成の一例を、図８の回路図に示す。図８において、図１〜図７と同一部分には同一符号を付している。図示のように、本実施例の細胞電位測定用容器では、第２溶液用流路毎に、４個の測定単位３０で一つの測定グループを形成している。そして、一つの測定グループ毎に、一つの第１測定用端子１３ａ、一つの第２測定用端子１３ｂ、一つの電気信号増幅装置１６および一つのスイッチング装置１７が配置されている。各測定グループにおいて、４個の測定単位３０における４個の第１電極２７ａは、一つのスイッチング装置１７を介して一つの電気信号増幅装置１６に接続され、電気信号増幅装置１６は一つの第１測定用端子１３ａ（Ａ１，Ａ２，Ａ３若しくはＡ４）に接続している。また、４個の測定単位における４個の第２電極２７ｂは、共通配線構造により一つの第２測定用端子１３ｂ（ＣＯＭ１，ＣＯＭ２，ＣＯＭ３若しくはＣＯＭ４）に接続している。各測定グループにおけるスイッチング装置１７は、３個のスイッチング信号入力用端子２６（Ｃ１，Ｃ２およびＣ３）と接続され、スイッチング信号入力用端子２６から入力される信号により、測定対象となるいずれかの測定単位３０が選択され、選択された測定単位３０の第１電極２７ａと第１測定用端子１３ａとを接続する。 An example of the wiring configuration in the cell potential measurement container of this example is shown in the circuit diagram of FIG. In FIG. 8, the same parts as those in FIGS. As shown in the figure, in the cell potential measurement container of this example, one measurement group is formed by four measurement units 30 for each second solution channel. For each measurement group, one first measurement terminal 13a, one second measurement terminal 13b, one electric signal amplifying device 16 and one switching device 17 are arranged. In each measurement group, the four first electrodes 27a in the four measurement units 30 are connected to one electric signal amplifying device 16 through one switching device 17, and the electric signal amplifying device 16 is one first signal. It is connected to the measurement terminal 13a (A1, A2, A3 or A4). The four second electrodes 27b in the four measurement units are connected to one second measurement terminal 13b (COM1, COM2, COM3, or COM4) by a common wiring structure. The switching device 17 in each measurement group is connected to three switching signal input terminals 26 (C1, C2, and C3), and any measurement to be measured is performed by a signal input from the switching signal input terminal 26. The unit 30 is selected, and the first electrode 27a of the selected measurement unit 30 is connected to the first measurement terminal 13a.

つぎに、本実施例の細胞電位測定用容器と共に用いる細胞電位測定装置の一例を説明する。図１１の機能ブロック図に、細胞電位測定装置の構成の一例を示す。図示のように、細胞電位測定装置は、測定装置本体３１と、表示部３７と、操作・入力部３８とから構成される。測定装置本体３１は、電気信号測定部３２、電力供給部３３、スイッチング信号出力部３４、記録処理部３５および記憶部３６を有する。電気信号測定部３２は、第１測定用端子（Ａ１，Ａ１，Ａ３およびＡ４）および第２測定用端子（ＣＯＭ１，ＣＯＭ２，ＣＯＭ３およびＣＯＭ４）と接続可能であり、かつ、両測定用端子から入力された信号（電圧若しくは電流）を所定のサンプリング周期でデジタル変換して記録処理部３５に送信する。電力供給部３３は、電力供給用端子（＋、−、ＧＮＤ）と接続可能であり、電気信号増幅装置１６に電力を供給する。スイッチング信号出力部３４は、スイッチング信号入力用端子２６（Ｃ１，Ｃ２およびＣ３）と接続可能であり、スイッチング装置１７に信号を送信して測定対象となるいずれかの前記測定単位を選択する。また、スイッチング信号出力部３４は、選択した測定単位を特定可能な情報を記録処理部３５へ出力する。記録処理部３５は、スイッチング信号出力部３４から送られた情報、すなわち測定単位を特定する情報と電気信号測定部３２から送られてくるデジタル変換された信号とを関連付けして記憶部３６に記憶する。スイッチング信号の入力等の操作は、操作・入力部３８または予め設定した切り替えパターンで自動的に行われる。操作・入力部は、例えば、キーボードやマウス等の通常の操作・入力装置が使用される。また、測定結果は、記憶部３６に記憶される他、表示部３７において表示される。表示部３７は、例えば、通常用いられるディスプレィが使用される。 Next, an example of a cell potential measuring device used with the cell potential measuring container of the present embodiment will be described. An example of the configuration of the cell potential measuring device is shown in the functional block diagram of FIG. As shown in the figure, the cell potential measuring device includes a measuring device main body 31, a display unit 37, and an operation / input unit 38. The measurement apparatus main body 31 includes an electrical signal measurement unit 32, a power supply unit 33, a switching signal output unit 34, a recording processing unit 35, and a storage unit 36. The electrical signal measurement unit 32 can be connected to the first measurement terminals (A1, A1, A3, and A4) and the second measurement terminals (COM1, COM2, COM3, and COM4), and is input from both measurement terminals. The converted signal (voltage or current) is digitally converted at a predetermined sampling period and transmitted to the recording processing unit 35. The power supply unit 33 can be connected to power supply terminals (+, −, GND), and supplies power to the electric signal amplifying device 16. The switching signal output unit 34 can be connected to the switching signal input terminal 26 (C1, C2, and C3), and transmits a signal to the switching device 17 to select one of the measurement units to be measured. In addition, the switching signal output unit 34 outputs information that can specify the selected measurement unit to the recording processing unit 35. The recording processing unit 35 associates the information sent from the switching signal output unit 34, that is, the information specifying the measurement unit with the digitally converted signal sent from the electrical signal measuring unit 32 and stores it in the storage unit 36. To do. Operations such as switching signal input are automatically performed by the operation / input unit 38 or a preset switching pattern. For the operation / input unit, for example, a normal operation / input device such as a keyboard or a mouse is used. The measurement result is displayed on the display unit 37 in addition to being stored in the storage unit 36. For the display unit 37, for example, a display that is normally used is used.

細胞電位測定装置は、細胞電位測定用容器の各端子と接続するための接続用プローブを備えている。次にこのプローブの構造について図１２の斜視図を参照して説明する。図１２において、図１〜１１と同一部分には同一符号を付している。図示のように、細胞電位測定装置は、プローブヘッド本体４０と、第１プローブ保持部４２と、第２プローブ保持部４１とを備える。第１プローブ保持部４２は、第１測定用端子１３ａと接続するためのプローブ４３と、電力供給用端子２５と接続するためのプローブ４５と、スイッチング信号入力用端子２６と接続するためのプローブ４４とを備え、第２プローブ保持部４１は、第２測定用端子と接続するためのプローブ４６を備える。プローブヘッド本体４０は、図示しない昇降機構により昇降動作を行う。従って、測定台４７の上に細胞電位測定用容器を載せた状態で、昇降機構を作動させてプローブヘッド本体４０を上から下降させることにより、各プローブ（４３、４４、４５、４６）を、細胞電位測定用容器の各端子（１３ａ，１３ｂ，２５，２６）に接続する。 The cell potential measuring device includes a connection probe for connecting to each terminal of the cell potential measuring container. Next, the structure of this probe will be described with reference to the perspective view of FIG. In FIG. 12, the same parts as those in FIGS. As shown in the figure, the cell potential measuring apparatus includes a probe head main body 40, a first probe holding part 42, and a second probe holding part 41. The first probe holding unit 42 includes a probe 43 for connecting to the first measurement terminal 13a, a probe 45 for connecting to the power supply terminal 25, and a probe 44 for connecting to the switching signal input terminal 26. The second probe holding part 41 includes a probe 46 for connecting to the second measurement terminal. The probe head main body 40 moves up and down by a lifting mechanism (not shown). Therefore, in a state where the cell potential measurement container is placed on the measurement table 47, the probe head body 40 is lowered from above by operating the elevating mechanism, whereby each probe (43, 44, 45, 46) is It connects with each terminal (13a, 13b, 25, 26) of the container for cell potential measurement.

つぎに、本実施例の細胞電位測定用容器を用いた細胞電位の測定方法の一例について説明する。まず、測定対象の細胞を準備し、これを第１溶液に分散させる。細胞が分散した第１溶液を、第１溶液溜め部１４に注入し、細胞を、貫通孔１９の一端開口部（第１溶液溜め部１４側の開口部）に保持する。この細胞の保持は、細胞を、貫通孔１９、第２溶液溜め部１５、第２溶液用流路２０および第２溶液導入口２１ａ（若しくは第２溶液排出口２１ｂ）を通じて、吸引ポンプ（図示せず）で吸引することにより実施できる。この際、電気的シールが密になるように細胞を保持する。一方、第２溶液導入口２１ａから、第２溶液を第２溶液用流路２０に導入し、さらに第２溶液溜め部１５にも導入する。この時、三角状の突起部２２により、第２溶液は、貫通孔１９に向かって流れる。そして、測定対象の細胞が、貫通孔１９の開口部に保持された状態で、細胞電位を測定する。細胞電位の測定は、別途準備した細胞電位測定装置を本実施例の細胞電位測定用容器に接続して実施する。 Next, an example of a cell potential measurement method using the cell potential measurement container of this example will be described. First, a cell to be measured is prepared and dispersed in the first solution. The first solution in which the cells are dispersed is injected into the first solution reservoir 14, and the cells are held in one end opening of the through hole 19 (the opening on the first solution reservoir 14 side). The cells are held by a suction pump (not shown) through the through-hole 19, the second solution reservoir 15, the second solution channel 20, and the second solution introduction port 21a (or the second solution discharge port 21b). (No.). At this time, the cells are held so that the electrical seal is tight. On the other hand, the second solution is introduced into the second solution channel 20 from the second solution introduction port 21 a and further introduced into the second solution reservoir 15. At this time, the second solution flows toward the through-hole 19 by the triangular protrusion 22. Then, the cell potential is measured in a state where the measurement target cell is held in the opening of the through hole 19. The cell potential is measured by connecting a separately prepared cell potential measuring device to the cell potential measuring container of this example.

以上の手順により、細胞電位の測定準備が完了したら、以下のようにして細胞の電位を測定する。まず、細胞電位測定容器を細胞電位測定装置の測定台４７上に載せ、プローブヘッド本体４０を下降させてプローブ４３，４４，４５，４６を第１測定用端子１３ａ，スイッチング信号入力用端子２６，電力供給用端子２５，第２測定用端子１３ｂにそれぞれ接触させる。これにより、細胞電位測定装置と細胞電位測定容器が回路的に一体となり、電力供給部３３からの電力により電気信号増幅装置１６とスイッチング装置１７が作動可能な状態になる。 When the preparation for measuring the cell potential is completed by the above procedure, the cell potential is measured as follows. First, the cell potential measurement container is placed on the measurement table 47 of the cell potential measurement device, the probe head body 40 is lowered, and the probes 43, 44, 45, 46 are connected to the first measurement terminal 13a, the switching signal input terminal 26, The power supply terminal 25 and the second measurement terminal 13b are brought into contact with each other. Thereby, the cell potential measuring device and the cell potential measuring container are integrated in a circuit, and the electric signal amplifying device 16 and the switching device 17 are operable by the power from the power supply unit 33.

次に、細胞電位測定装置のスイッチング信号出力部３４からスイッチング装置１７にスイッチング信号を送信する。すると、スイッチング装置１７はスイッチング信号によって指示された測定単位を選択してこの測定単位の第１電極２７ａと第１測定用端子とを接続する。そして、選択された測定単位の第１電極および第２電極で検知された電気信号は、電気信号増幅装置により増幅されて測定装置の電気信号測定部３２で計測される。電気信号測定部３２で計測された電気信号は所定のサンプリング周期でデジタル変換され、記録処理部３５を介して記憶部３６に送信されて記録される。このようにして、スイッチング装置により測定対象の測定単位を次々に切り替えて細胞電位を測定する。測定対象の測定単位の切り替えは、キーボード等の操作・入力部３８を通じて手動で行ってもよいし、予め設定した切り替え順序（切り替えパターン）を記憶部３６に記憶させておき、これに基づき、自動的に実施してもよい。 Next, a switching signal is transmitted from the switching signal output unit 34 of the cell potential measuring device to the switching device 17. Then, the switching device 17 selects the measurement unit indicated by the switching signal, and connects the first electrode 27a of the measurement unit and the first measurement terminal. Then, the electrical signal detected by the first electrode and the second electrode of the selected measurement unit is amplified by the electrical signal amplification device and measured by the electrical signal measurement unit 32 of the measurement device. The electrical signal measured by the electrical signal measuring unit 32 is digitally converted at a predetermined sampling period, and transmitted to the storage unit 36 via the recording processing unit 35 and recorded. In this way, the cell potential is measured by switching the measurement units to be measured one after another by the switching device. The measurement unit of the measurement target may be switched manually through the operation / input unit 38 such as a keyboard, or a preset switching order (switching pattern) is stored in the storage unit 36, and based on this, the automatic switching is performed. May also be implemented.

測定装置と本実施例の細胞電位測定用容器との接続方法として、前述の接続用プローブを使用する方法の他に、図１３に示すようにコネクタを使用する方法がある。図１３において、図１〜図１２と同一部分には同一符号を付している。すなわち、本実施例の細胞電位測定用容器において、容器本体プレート１１の一端の表面に、コネクタ端子４９を設け、コネクタ端子４９内に、第１測定用端子、第２測定用端子、電力供給用端子およびスイッチング信号入力用端子を配置する。一方、細胞電位測定装置（図示せず）と、コネクタ端子４８とを配線で接続する。そして、両コネクタ端子４８，４９を接続させることで、細胞電位測定装置と本実施例の細胞電位測定用容器とが接続される。 As a method for connecting the measuring apparatus and the cell potential measuring container of this embodiment, there is a method using a connector as shown in FIG. 13 in addition to the method using the connecting probe described above. In FIG. 13, the same parts as those in FIGS. That is, in the cell potential measurement container of this embodiment, a connector terminal 49 is provided on the surface of one end of the container body plate 11, and the first measurement terminal, the second measurement terminal, and the power supply are provided in the connector terminal 49. Terminals and switching signal input terminals are arranged. On the other hand, a cell potential measuring device (not shown) and the connector terminal 48 are connected by wiring. Then, by connecting both connector terminals 48 and 49, the cell potential measuring device and the cell potential measuring container of this embodiment are connected.

本発明において、自然な状態の細胞の電位を測定する他、化学物質、医薬品候補物質の存在下で細胞の電位を測定してもよく、この他、光、熱、電磁波、圧力、機械的力の存在下で細胞の電位を測定してもよい。 In the present invention, in addition to measuring the cell potential in a natural state, the cell potential may be measured in the presence of a chemical substance or a drug candidate substance. In addition, light, heat, electromagnetic waves, pressure, mechanical force The cell potential may be measured in the presence of.

以上のように、本発明の細胞電位測定用容器では、前記第２溶液用流路の上に複数の前記測定単位が配置されており、このため、測定対象の細胞数が増えた場合であっても容器の構造が複雑になることがない。したがって、本発明の細胞電位測定用容器は、細胞電位を測定する全ての分野に有用であり、例えば、細胞電気生理学の研究や医薬品の開発に有効である。 As described above, in the cell potential measurement container of the present invention, the plurality of measurement units are arranged on the second solution flow path, and this is the case when the number of cells to be measured increases. However, the container structure is not complicated. Therefore, the cell potential measurement container of the present invention is useful in all fields for measuring cell potential, and is effective for, for example, cell electrophysiology research and pharmaceutical development.

図１は、本発明の一実施例の細胞電位測定用容器の斜視図である。FIG. 1 is a perspective view of a cell potential measuring container according to one embodiment of the present invention. 図２は、前記実施例の細胞電位測定用容器の平面図である。FIG. 2 is a plan view of the cell potential measuring container according to the embodiment. 図３は、図１のＡ−Ａ方向に見た前記実施例の細胞電位測定用容器の断面図である。FIG. 3 is a cross-sectional view of the cell potential measuring container according to the embodiment as viewed in the AA direction of FIG. 図４は、前記図３の断面図の一部拡大断面図である。4 is a partially enlarged sectional view of the sectional view of FIG. 図５は、前記実施例の細胞電位測定用容器の基板の斜視図である。FIG. 5 is a perspective view of the substrate of the cell potential measuring container according to the embodiment. 図６（Ａ），（Ｂ）および（Ｃ）は、前記実施例の細胞電位測定用容器の前記基板の貫通孔を示す断面図である。6A, 6B and 6C are cross-sectional views showing through-holes in the substrate of the cell potential measuring container of the embodiment. 図７は、前記実施例の細胞電位測定用容器の配線構造を示す一部断面斜視図である。FIG. 7 is a partial cross-sectional perspective view showing the wiring structure of the cell potential measuring container of the embodiment. 図８は、前記実施例の細胞電位測定用容器の配線回路を示す回路図である。FIG. 8 is a circuit diagram showing a wiring circuit of the cell potential measuring container according to the embodiment. 図９は、前記実施例の細胞電位測定用容器の配線構造を示す一部斜視図である。FIG. 9 is a partial perspective view showing a wiring structure of the cell potential measuring container of the embodiment. 図１０は、前記実施例のその他の配線構造を示す一部断面斜視図である。FIG. 10 is a partial cross-sectional perspective view showing another wiring structure of the embodiment. 図１１は、細胞電位測定装置の一例の構成を示す機能ブロック図である。FIG. 11 is a functional block diagram showing a configuration of an example of a cell potential measuring apparatus. 図１２は、前記実施例の細胞電位測定用容器と前記細胞電位測定装置との接続状態の一例を示す斜視図である。FIG. 12 is a perspective view showing an example of a connection state between the cell potential measurement container of the embodiment and the cell potential measurement device. 図１３は、前記実施例の細胞電位測定用容器と前記細胞電位測定装置との接続状態のその他の例を示す斜視図である。FIG. 13 is a perspective view showing another example of the connection state between the cell potential measurement container of the embodiment and the cell potential measurement device.

符号の説明Explanation of symbols

１１容器本体プレート
１１ａトッププレート
１１ｂボトムプレート
１２樹脂部
１３ａ第１測定用端子
１３ｂ第２測定用端子
１４第１溶液溜め部
１５第２溶液溜め部
１６電気信号増幅装置
１７スイッチング装置
１８仕切り基板
１９貫通孔
２０第２溶液用流路
２１ａ第２溶液導入口
２１ｂ第２溶液排出口
２２突起部
２３抵抗器
２４封止樹脂
２５電力供給用端子
２６スイッチング信号入力用端子
２７ａ第１電極
２７ｂ第２電極
２８ａ第１配線パターン
２８ｂ第２配線パターン
２９導電ワイヤ
３０測定単位
３１細胞電位測定装置本体
３２電気信号測定部
３３電力供給部
３４スイッチング信号出力部
３５記録処理部
３６記憶部
３７操作・入力部
３８表示部
３９細胞
４０プローブヘッド本体
４１第２プローブ保持部
４２第１プローブ保持部
４３、４４、４５、４６プローブ
４７測定台
４８，４９コネクタ端子 11 Container body plate 11a Top plate 11b Bottom plate 12 Resin portion 13a First measurement terminal 13b Second measurement terminal 14 First solution reservoir portion 15 Second solution reservoir portion 16 Electric signal amplifying device 17 Switching device 18 Partition substrate 19 Hole 20 Second solution flow path 21a Second solution introduction port 21b Second solution discharge port 22 Protrusion 23 Resistor 24 Sealing resin 25 Power supply terminal 26 Switching signal input terminal 27a First electrode 27b Second electrode 28a 1st wiring pattern 28b 2nd wiring pattern 29 Conductive wire 30 Measurement unit 31 Cell potential measuring device main body 32 Electrical signal measuring unit 33 Power supply unit 34 Switching signal output unit 35 Recording processing unit 36 Storage unit 37 Operation / input unit 38 Display unit 39 Cell 40 Probe head body 41 Second probe holding portion 42 First probe Over Bed holder 43, 44, 45, 46 probe 47 measuring stand 49 connector terminals

Claims

第１溶液溜め部、第２溶液溜め部、仕切り基板、第１電極および第２電極とを備える複数の測定単位と、第１測定用端子および第２測定用端子とを有する細胞電位測定容器であって、
各前記測定単位において、前記第１溶液溜め部と前記第２溶液溜め部とは前記仕切り基板により仕切られ、前記仕切り基板には、貫通孔が設けられ、前記貫通孔の一端は前記第１溶液溜め部に向かって開口し、前記貫通孔の他端は、前記第２溶液溜め部に向かって開口し、前記貫通孔の前記一端の開口部は細胞を保持可能であり、前記第１電極は、第１溶液に接触可能なように配置され、前記第２電極は第２溶液と接触可能なように配置され、
前記細胞電位測定用容器において、前記第１電極は、前記両測定用端子のいずれか一方と電気的に接続され、前記第２電極は前記両測定用端子の残りの一方と電気的に接続され、
前記細胞電位測定容器は、さらに第２溶液用流路を有し、前記第２溶液用流路の上に、複数の前記測定単位が配置され、前記第２溶液用流路と前記第２溶液溜め部とが連通し、前記第２溶液用流路の一端開口部は前記第２溶液の導入口であり、前記第２溶液用流路の他端開口部は前記第２溶液の排出口である細胞電位測定用容器。 A cell potential measuring container having a plurality of measurement units each including a first solution reservoir, a second solution reservoir, a partition substrate, a first electrode, and a second electrode, and a first measurement terminal and a second measurement terminal. There,
In each measurement unit, the first solution reservoir and the second solution reservoir are partitioned by the partition substrate, the partition substrate is provided with a through hole, and one end of the through hole is the first solution. Opening toward the reservoir, the other end of the through-hole opens toward the second solution reservoir, the opening at the one end of the through-hole can hold cells, and the first electrode is The second electrode is disposed so as to be in contact with the second solution, and the second electrode is disposed so as to be in contact with the second solution.
In the cell potential measurement container, the first electrode is electrically connected to one of the two measurement terminals, and the second electrode is electrically connected to the remaining one of the two measurement terminals. ,
The cell potential measuring container further includes a second solution channel, and a plurality of the measurement units are disposed on the second solution channel, and the second solution channel and the second solution are arranged. The reservoir is communicated with, the one end opening of the second solution channel is an introduction port for the second solution, and the other end opening of the second solution channel is the discharge port for the second solution. A container for measuring cell potential.

前記第２溶液用流路の前記第２溶液溜め部に対応する位置に、前記第２溶液を前記第２溶液溜め部に向かって流すための流方向制御手段が配置されている請求項１記載の細胞電位測定用容器。 The flow direction control means for flowing the said 2nd solution toward the said 2nd solution reservoir part is arrange | positioned in the position corresponding to the said 2nd solution reservoir part of the said 2nd solution flow path. A container for measuring cell potential.

前記流方向制御手段が、前記第２溶液用流路内部に形成された突起部である請求項２記載の細胞電位測定用容器。 The cell potential measurement container according to claim 2, wherein the flow direction control means is a protrusion formed inside the second solution flow path.

前記第２溶液用流路を複数有し、複数の各前記第２溶液用流路に複数の前記測定単位が形成されている請求項１から３のいずれか一項に記載の細胞電位測定用容器。 4. The cell potential measurement device according to claim 1, wherein a plurality of the second solution channels are provided, and a plurality of the measurement units are formed in each of the plurality of second solution channels. 5. container.

複数の前記測定単位における各前記第１電極および各前記第２電極のいずれか一方が、前記第１測定用端子および前記第２測定用端子の一方と、共通配線構造で接続している請求項１から４のいずれか一項に記載の細胞電位測定用容器。 The first electrode or the second electrode in each of the plurality of measurement units is connected to one of the first measurement terminal and the second measurement terminal with a common wiring structure. The container for cell potential measurement according to any one of 1 to 4.

前記第１溶液溜め部の下に、前記第２溶液溜め部が配置されている請求項１から５のいずれか一項に記載の細胞電位測定用容器。 The cell potential measurement container according to any one of claims 1 to 5, wherein the second solution reservoir is disposed below the first solution reservoir.

前記第１電極が、前記仕切り基板の第１溶液溜め部側表面に配置され、前記第２電極が、前記仕切り基板の第２溶液溜め部側表面に配置されている請求項１から６のいずれか一項に記載の細胞電位測定用容器。 The said 1st electrode is arrange | positioned at the 1st solution reservoir part side surface of the said partition board | substrate, The said 2nd electrode is arrange | positioned at the 2nd solution reservoir part side surface of the said partition board | substrate. The cell potential measurement container according to claim 1.

前記仕切り基板に、複数の前記貫通孔が設けられている請求項１から７のいずれか一項に記載の細胞電位測定用容器。 The cell potential measurement container according to any one of claims 1 to 7, wherein the partition substrate is provided with a plurality of the through holes.