JP2007008894A - Caspase-3 inhibitor - Google Patents

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a low-molecular-weight inhibitor to inhibit caspase-3 activity, more specifically, to provide a new low-molecular-weight inhibitor free from a peptide skeleton recognized to have high utility as a medicine. <P>SOLUTION: The caspase-3 inhibitor contains a compound having a specific pharmacophore or its salt. The invention further provides an apoptosis inhibitor based on the caspase-3 inhibiting activity. <P>COPYRIGHT: (C)2007,JPO&INPIT

Description

本発明は、新規なカスパーゼ−３活性阻害剤に関する。さらに詳細には、本発明はカスパーゼ−３活性を阻害するアポトーシス抑制剤に関する。   The present invention relates to a novel caspase-3 activity inhibitor. More specifically, the present invention relates to an apoptosis inhibitor that inhibits caspase-3 activity.

アポトーシスは遺伝子に制御された細胞死の一様式であり、アポトーシスに特徴的な細胞の形態学的変化やＤＮＡのヌクレオソーム単位での断片化により特徴づけられている。アポトーシスのシグナル伝達経路には多くの分子が関与しているが、その中でもカスパーゼ（Ｃａｓｐａｓｅ）はその実行因子として中心的な役割を担っている。現在、１４種類のカスパーゼが同定されており、主にアポトーシスではカスパーゼ−２、−３、−６、−７、−８、−９が、そして炎症反応ではカスパーゼ−１、−４、−５が関与することが示されている。アポトーシスに関与するカスパーゼはさらに、イニシエータータイプ（カスパーゼ−２、−８、−９）とエフェクタータイプ（カスパーゼ−３、−６、−７）に分類される。カスパーゼは通常、不活性な前駆体として存在し、特定のＡｓｐ残基部位でプロセッシングを受けることにより、３つのパートに分かれ、分子量約２０ｋＤ及び約１０ｋＤの断片（ｐ２０、ｐ１０）を２つずつ含む四量体の活性型となる。アポトーシスの刺激に応じてイニシエータータイプのカスパーゼが最初に活性化して、プロテアーゼ活性を発揮できるようになり、これがエフェクタータイプのカスパーゼをプロセッシングして活性化させ、細胞内の構成成分を切断する（カスパーゼカスケード）。これまでに６０以上のカスパーゼの基質タンパク質が同定されている。
アポトーシスにおけるカスパーゼカスケードの破綻は、アルツハイマー病、パーキンソン病、癌などの疾患の発症に深く関与していることが明らかとなっている。特に、カスパーゼ−３は、アポトーシスの実行時に中心的な役割を果たすエフェクタータイプのカスパーゼであるため、その特異的阻害剤は、カスパーゼ−３の生理的役割だけではなく、疾患との関連性を解明する上での重要なツールとなる。さらに、カスパーゼ阻害剤は、ＡＬＳ、敗血症、脳虚血の治療に有効であることも示されている（非特許文献１〜３）。
カスパーゼ阻害剤の有効性が報告されるに伴い、ペプチド性阻害剤から低分子阻害剤への変換設計（ペプチドミメティクス）、及びＨＴＳ（Ｈｉｇｈ ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ）を用いた低分子阻害剤の探索が活発に行われるに到っている。ペプチドミメティクスのベース配列としてカスパーゼ−３阻害剤であるＡｃ−ＤＥＶＤ−ＣＨＯなどが利用され、これまでに、多くのペプチドミメティクスが報告されている（非特許文献４〜６）。そこでの課題は、医薬品としての物性に乏しい負電荷をもつカルボン酸、及びペプチド骨格をいかにＤｒｕｇ−ｌｉｋｅな骨格へと変換設計していくかである。しかしながら、細胞／動物レベルにおいて効果を示したペプチド性阻害剤はいくつか報告されているが、低分子阻害剤の成功事例はほとんどないのが現状である。
Ｌｉ，Ｍ．ら， Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ ｃａｓｐａｓｅ−１ ａｎｄ ｃａｓｐａｓｅ−３ ｉｎ ａｎ ＡＬＳ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ． （２０００） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８８， ｐ．３３５−３３９ Ｈｏｔｃｈｋｉｓｓ，Ｒ．Ｓ．ら， Ｃａｓｐａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｉｍｐｒｏｖｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ｓｅｐｓｉｓ： ａ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ． （２０００） Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ． １， ｐ．４９６−５０１ Ｃｈｅｎｇ，Ｙ．ら， Ｃａｓｐａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ａｆｆｏｒｄｓ ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｄｅｌａｙｅｄ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｎｅｏｎａｔａｌ ｈｙｐｏｘｉｃ−ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｂｒａｉｎ ｉｎｊｕｒｙ． （１９９８） Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ． １０１， ｐ．１９９２−１９９９ Ｈａｎ，Ｙ．ら， Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｎｏｖｅｌ ａｓｐａｒｔｙｌ ｋｅｔｏｎｅ ｄｉｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｓ ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃａｓｐａｓｅ−３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ． （２００４） Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ．， １４， ｐ．８０５−８０８ Ｂｅｃｋｅｒ，Ｊ．Ｗ．ら， Ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｔｈｅ ｐｅｐｔｉｄｙｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｃａｓｐａｓｅ−３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ： ａ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ． （２００４） Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ． ４７， ｐ．２４６６−２４７４ Ｍｉｃａｌｅ，Ｎ．ら， Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ａ Ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ Ｃａｓｐａｓｅ−３． Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ． （２００４） ４７， ｐ．６４５５−６４５８ Apoptosis is a mode of gene-controlled cell death and is characterized by cell morphological changes characteristic of apoptosis and DNA fragmentation at the nucleosome unit. Many molecules are involved in the signal transduction pathway of apoptosis. Among them, caspase plays a central role as an execution factor. Currently, 14 types of caspases have been identified, mainly caspase-2, -3, -6, -7, -8, -9 in apoptosis and caspase-1, -4, -5 in inflammatory response. Has been shown to be involved. Caspases involved in apoptosis are further classified into initiator types (caspase-2, -8, -9) and effector types (caspase-3, -6, -7). Caspases usually exist as inactive precursors and are processed in specific Asp residue sites to divide into three parts and contain two fragments (p20, p10) with molecular weights of about 20 kD and about 10 kD. It becomes the active form of the tetramer. In response to the stimulation of apoptosis, the initiator-type caspase is activated first and becomes able to exert protease activity, which processes and activates the effector-type caspase and cleaves intracellular components (caspase) cascade). To date, more than 60 caspase substrate proteins have been identified.
It has been clarified that the caspase cascade breakdown in apoptosis is deeply involved in the onset of diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, and cancer. In particular, since caspase-3 is an effector-type caspase that plays a central role in the execution of apoptosis, its specific inhibitor elucidates not only the physiological role of caspase-3 but also its relevance to diseases. It becomes an important tool in doing. Furthermore, caspase inhibitors have also been shown to be effective in the treatment of ALS, sepsis, and cerebral ischemia (Non-Patent Documents 1 to 3).
As the effectiveness of caspase inhibitors is reported, the design of conversion from peptide inhibitors to small molecule inhibitors (peptide mimetics) and the search for small molecule inhibitors using HTS (High throughput screening) are active. Has been done. Ac-DEVD-CHO, which is a caspase-3 inhibitor, is used as a base sequence for peptide mimetics, and many peptide mimetics have been reported so far (Non-patent Documents 4 to 6). The problem is how to design a carboxylic acid having a negative charge with poor physical properties as a pharmaceutical and a peptide skeleton into a drug-like skeleton. However, several peptidic inhibitors that have been effective at the cell / animal level have been reported, but there are few successful examples of small molecule inhibitors.
Li, M.M. Et al., Functional role of caspase-1 and caspase-3 in an ALS transgenic mouse model. (2000) Science 288, p. 335-339 Hotchkiss, R.A. S. Et al., Caspase Inhibitors improve survival in sepsis: a critical role of the lymphocyte. (2000) Nat. Immunol. 1, p. 496-501 Cheng, Y. et al. Et al., Caspase Inhibitor Affords Neuroprotection with Delayed Administration in a Rat Model of Neohypoxic-Issic Brain Injury. (1998) J. MoI. Clin. Invest. 101, p. 1992-1999 Han, Y .; Et al., Discovery of novel aspartyl ketone dipeptides as potent and selective caspase-3 inhibitors. (2004) Bioorg Med Chem Lett. , 14, p. 805-808 Becker, J. et al. W. Et al., Reducing the peptidyl features of case-3 inhibitors: a structural analysis. (2004) J Med Chem. 47, p. 2466-2474 Michael, N.M. Et al., Design and Synthesis of a Potent and Selective Peptidomimetic Inhibitor of Case-3. J Med Chem. (2004) 47, p. 6455-6458

従って、本発明の課題は、カスパーゼ−３活性を阻害する低分子阻害剤、さらに詳細には、医薬品として有用性が高いと認識されている、ペプチド骨格を持たない新規低分子阻害剤を提供することである。   Accordingly, an object of the present invention is to provide a low molecular weight inhibitor that inhibits caspase-3 activity, and more specifically, a novel low molecular weight inhibitor that does not have a peptide skeleton and is recognized as having high utility as a pharmaceutical product. That is.

本発明者らは上記課題に鑑み、鋭意検討を重ねた結果、カスパーゼ−３の特定の３つの結合ポケット（図１〜３、Ｓ_１〜Ｓ_３）との結合領域を有する化合物がカスパーゼ−３活性を有意に阻害し、さらにはアポトーシスを阻害することを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明の要旨は以下のとおりである。なお、本明細書中のファーマコフォアの定義においては原子間距離を実線で示している。 As a result of intensive studies in view of the above problems, the present inventors have found that a compound having a binding region with specific three binding pockets (FIGS. 1 to 3, S _{1 to} S ₃ ) of caspase-3 is caspase-3. The present inventors have found that the activity is significantly inhibited and further apoptosis is inhibited, and the present invention has been completed. That is, the gist of the present invention is as follows. In the definition of the pharmacophore in this specification, the interatomic distance is indicated by a solid line.

〔１〕 以下のファーマコフォア [1] The following pharmacophore

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
のいずれかを有する化合物又はその塩を含む、カスパーゼ−３活性阻害剤。
〔２〕 以下の式（Ｉ）又は（ＩＩ） [Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
A caspase-3 activity inhibitor comprising a compound having any of the above or a salt thereof.
[2] The following formula (I) or (II)

〔式中、Ｌは単結合、置換されていてもよいメチレン、−Ｏ−、−Ｎ＝Ｎ−又は−ＮＨ−であり、Ｒ_１１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_１２は水素又は水酸基であり、Ｒ_１３は水素又はメチルであり、Ｒ_１４は置換されていてもよいＣ_１−６アルキル、置換されていてもよいアリール又は置換されていてもよい複素環基であり、Ｒ_１５は水素又は水酸基であり、Ｒ_１６及びＲ_１７のいずれか一方が水素又はスルホニルであり、他方が−Ｌ−Ｒ_１４（Ｌ及びＲ_１４は上記定義と同じ）で示される〕
で示される化合物又はその塩を含む、カスパーゼ−３活性阻害剤。
〔３〕 Ｒ_１４が置換されていてもよいＣ_１−６アルキル、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいナフチル、置換されていてもよいピロリル、置換されていてもよいイミダゾリル、置換されていてもよいインドリル又は置換されていてもよいチアゾリルである、上記〔２〕に記載のカスパーゼ−３活性阻害剤。
〔４〕 アポトーシス阻害剤である、上記〔１〕〜〔３〕のいずれかに記載のカスパーゼ−３活性阻害剤。
〔５〕 以下の式（ＩＩＩ） [Wherein L is a single bond, optionally substituted methylene, -O-, -N = N- or -NH-, R ₁₁ is carboxy or sulfonyl, and R ₁₂ is hydrogen or hydroxyl group. , R ₁₃ is hydrogen or methyl, R ₁₄ is an optionally substituted C _1-6 alkyl, an optionally substituted aryl or an optionally substituted heterocyclic group, and R ₁₅ is hydrogen or It is a hydroxyl group, and any one of R ₁₆ and R ₁₇ is hydrogen or sulfonyl, and the other is represented by -LR ₁₄ (L and R ₁₄ are as defined above)]
Or a caspase-3 activity inhibitor comprising the compound represented by the formula:
[3] C _1-6 alkyl _optionally substituted with R ₁₄ , optionally substituted phenyl, optionally substituted naphthyl, optionally substituted pyrrolyl, optionally substituted imidazolyl, The caspase-3 activity inhibitor according to the above [2], which is indolyl which may be substituted or thiazolyl which may be substituted.
[4] The caspase-3 activity inhibitor according to any one of [1] to [3], which is an apoptosis inhibitor.
[5] The following formula (III)

〔式中、Ｌは単結合又は−Ｏ−であり、Ｒ_２１は置換されていてもよいナフチル又は置換されていてもよい含窒素複素環基である〕
で示される化合物又はその塩。
〔６〕 Ｒ_２１が置換されていてもよいナフチル、置換されていてもよいピロリル、置換されていてもよいイミダゾリル又は置換されていてもよいインドリルである、上記〔５〕に記載の化合物又はその塩。
〔７〕 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア（以下、ファーマコフォア１ともいう） [Wherein, L is a single bond or —O—, and R ₂₁ is an optionally substituted naphthyl or an optionally substituted nitrogen-containing heterocyclic group]
Or a salt thereof.
[6] The compound according to [5] above, wherein R ₂₁ is an optionally substituted naphthyl, an optionally substituted pyrrolyl, an optionally substituted imidazolyl, or an optionally substituted indolyl. salt.
[7] examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore (hereinafter also referred to as pharmacophore 1):

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と
を含む、カスパーゼ−３活性阻害活性を有する化合物をスクリーニングする方法。
〔８〕 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア（以下、ファーマコフォア２ともいう） [Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
And screening for a compound having caspase-3 activity inhibitory activity.
[8] examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore (hereinafter also referred to as pharmacophore 2):

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と
を含む、カスパーゼ−３活性阻害活性を有する化合物をスクリーニングする方法。
〔９〕 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア（以下、ファーマコフォア３ともいう） [Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
And screening for a compound having caspase-3 activity inhibitory activity.
[9] examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore (hereinafter also referred to as pharmacophore 3):

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と
を含む、カスパーゼ−３活性阻害活性を有する化合物をスクリーニングする方法。
〔１０〕 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア [Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
And screening for a compound having caspase-3 activity inhibitory activity.
[10] examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore:

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と、
合致した化合物のカスパーゼ−３活性阻害活性を調べる工程と
を含む、アポトーシス阻害効果を有する化合物をスクリーニングする方法。
〔１１〕 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア [Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
The process of checking whether or not
And a step of examining the caspase-3 activity inhibitory activity of the matched compound.
[11] examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore:

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と、
合致した化合物のカスパーゼ−３活性阻害活性を調べる工程と
を含む、アポトーシス阻害効果を有する化合物をスクリーニングする方法。
〔１２〕 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア [Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
The process of checking whether or not
And a step of examining the caspase-3 activity inhibitory activity of the matched compound.
[12] examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore:

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と、
合致した化合物のカスパーゼ−３活性阻害活性を調べる工程と
を含む、アポトーシス阻害効果を有する化合物をスクリーニングする方法。 [Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
The process of checking whether or not
And a step of examining the caspase-3 activity inhibitory activity of the matched compound.

カスパーゼ−３活性を阻害する本発明の低分子阻害剤は、医薬品として有用性が高いと認識されているペプチド骨格を持たないものであるので、アポトーシスの抑制が所望される疾患に対する医薬として有用でありうる。   Since the small molecule inhibitor of the present invention that inhibits caspase-3 activity does not have a peptide skeleton recognized as highly useful as a pharmaceutical, it is useful as a pharmaceutical for a disease for which suppression of apoptosis is desired. It is possible.

Ｒ_２におけるＣ_１−６アルキルとは、炭素数１〜６の直鎖又は分枝のアルキルを意味し、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ｔｅｒｔ−ヘキシルなどが挙げられる。 C _1-6 alkyl in R ₂ means straight or branched alkyl having 1 to 6 carbon atoms, such as methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, Examples include pentyl, isopentyl, neopentyl, tert-pentyl, hexyl, isohexyl, tert-hexyl and the like.

Ｒ_１４における置換されていてもよいＣ_１−６アルキルのＣ_１−６アルキルとは、Ｒ_２について記載したＣ_１−６アルキルと同じであるが、メチルが好ましい。
Ｒ_１４における置換されていてもよいアリールのアリールとは、単環式又は縮合二環式の芳香族基を意味し、例えば、フェニル、ナフチルなどが挙げられる。
Ｒ_１４における置換されていてもよい複素環基の複素環基とは、窒素原子及びイオウ原子からなる群から選ばれる少なくとも１つの原子を環構成原子に含む単環式若しくは縮合二環式の脂肪族環基又は芳香族環基を意味し、例えば、ピロリル、イミダゾリル、インドリル、チアゾリル、２，３−ジヒドロピロリルなどが挙げられる。 The _{C 1-6} alkyl _{C 1-6} alkyl optionally substituted in R _14, is the same as the _{C 1-6} alkyl described for _{R 2,} methyl is preferable.
The aryl of the aryl which may be substituted in R ₁₄ means a monocyclic or condensed bicyclic aromatic group, and examples thereof include phenyl and naphthyl.
The heterocyclic group of the optionally substituted heterocyclic group for R ₁₄ is a monocyclic or condensed bicyclic fatty acid containing at least one atom selected from the group consisting of a nitrogen atom and a sulfur atom as a ring constituent atom. An aromatic ring group or an aromatic ring group is meant, and examples thereof include pyrrolyl, imidazolyl, indolyl, thiazolyl, and 2,3-dihydropyrrolyl.

Ｒ_２１における置換されていてもよい含窒素複素環基の含窒素複素環基とは、少なくとも１つの窒素原子を環構成原子に含む単環式又は縮合二環式の複素環基を意味し、例えば、ピロリル、イミダゾリル、インドリル、２，３−ジヒドロピロリルなどが挙げられる。 The nitrogen-containing heterocyclic group of the optionally substituted nitrogen-containing heterocyclic group in R ₂₁ means a monocyclic or condensed bicyclic heterocyclic group containing at least one nitrogen atom as a ring constituent atom, For example, pyrrolyl, imidazolyl, indolyl, 2,3-dihydropyrrolyl and the like can be mentioned.

Ｌにおける置換されていてもよいメチレンの置換基としては、例えば、３−カルボキシ−５−メチル−４−オキソ−シクロヘキサ−２，５−ジエン−１−イリデン、３−カルボキシ−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イリデンなどが挙げられる。
本明細書における置換されていてもよいＣ_１−６アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよい複素環基、置換されていてもよい含窒素複素環基、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいナフチル、置換されていてもよいピロリル、置換されていてもよいイミダゾリル、置換されていてもよいインドリル、及び、置換されていてもよいチアゾリルが有していてもよい置換基としては、例えば、Ｃ_１−６アルキル−オキシカルボニル、フェニル、オキソ、２−（４−ブロモ−フェニル）フラン−５−イルメチリデン、２−オキソ−クロメン−３−イル、塩素、スルホニル、ニトロ、ピリジン−２−イル−アミノスルホニル、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル（置換基としては、カルバモイル、カルボキシなどが挙げられる）、水酸基、カルボキシなどが挙げられる。ここでの置換基としてのＣ_１−６アルキルとしては、Ｒ_２について記載したＣ_１−６アルキルと同じものが挙げられるが、メチル及びエチルが好ましい。 Examples of the optionally substituted methylene substituent in L include 3-carboxy-5-methyl-4-oxo-cyclohexa-2,5-dien-1-ylidene, 3-carboxy-4-oxo-1 , 4-dihydro-naphthalene-1-ylidene and the like.
In the present specification, C _1-6 alkyl which may be substituted, aryl which may be substituted, heterocyclic group which may be substituted, nitrogen-containing heterocyclic group which may be substituted, substituted May have phenyl, optionally substituted naphthyl, optionally substituted pyrrolyl, optionally substituted imidazolyl, optionally substituted indolyl, and optionally substituted thiazolyl. Suitable substituents include, for example, C _1-6 alkyl-oxycarbonyl, phenyl, oxo, 2- (4-bromo-phenyl) furan-5-ylmethylidene, 2-oxo-chromen-3-yl, chlorine, sulfonyl , nitro, pyridin-2-yl - aminosulfonyl, as optionally substituted C _1-6 alkyl (substituents are carbamoyl, carbo Shi and the like), a hydroxyl group, such as carboxyl and the like. The C _1-6 alkyl as a substituent herein, but include the same as the C _1-6 alkyl described for R _2, methyl and ethyl are preferred.

Ｒ_２における置換されていてもよいＣ_１−６アルキルとしては、エトキシカルボニルメチルが好ましい。
Ｒ_１４としては、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいナフチル、置換されていてもよいピロリル、置換されていてもよいイミダゾリル、置換されていてもよいインドリル、及び、置換されていてもよいチアゾリルが好ましく、エトキシカルボニルメチル、フェニル、２，６−ジクロロ−３−スルホニル−フェニル、４−ニトロ−フェニル、４−（ピリジン−２−イル−アミノスルホニル）−フェニル、３−カルボキシ−４−ヒドロキシ−ナフチル、３−［２−（４−ブロモ−フェニル）フラン−５−イルメチリデン］−２−オキソ−５−フェニル−２，３−ジヒドロ−ピロリル、４−（２−オキソ−クロメン−３−イル）−チアゾール−２−イル、１−カルバモイルメチル−４−メチル−イミダゾール−２−イル、１−カルボキシメチル−３−メチル−ピロール−５−イル、１−カルバモイルエチル−４−メチル−イミダゾール−２−イル、１−カルボキシエチル−３−メチル−ピロール−５−イル、５−カルバモイルエチル−２−メチル−１Ｈ−インドール−７−イル、及び、５−カルボキシエチル−２−メチル−１Ｈ−インドール−７−イルが特に好ましい。
Ｒ_２１における置換されていてもよいナフチルとしては、３−カルボキシ−４−ヒドロキシ−ナフチルが好ましい。
Ｒ_２１における置換されていてもよい含窒素複素環基としては、置換されていてもよいナフチル、置換されていてもよいピロリル、置換されていてもよいイミダゾリル、及び、置換されていてもよいインドリルが好ましく、１−カルバモイルメチル−４−メチル−イミダゾール−２−イル、１−カルボキシメチル−３−メチル−ピロール−５−イル、１−カルバモイルエチル−４−メチル−イミダゾール−２−イル、１−カルボキシエチル−３−メチル−ピロール−５−イル、５−カルバモイルエチル−２−メチル−１Ｈ−インドール−７−イル、及び、５−カルボキシエチル−２−メチル−１Ｈ−インドール−７−イルが好ましい。 The optionally substituted C _1-6 alkyl for R ₂ is preferably ethoxycarbonylmethyl.
As R ₁₄ , C _1-6 alkyl which may be substituted, phenyl which may be substituted, naphthyl which may be substituted, pyrrolyl which may be substituted, imidazolyl which may be substituted, substituted Indolyl which may be substituted and thiazolyl which may be substituted are preferred, and ethoxycarbonylmethyl, phenyl, 2,6-dichloro-3-sulfonyl-phenyl, 4-nitro-phenyl, 4- (pyridine-2- Yl-aminosulfonyl) -phenyl, 3-carboxy-4-hydroxy-naphthyl, 3- [2- (4-bromo-phenyl) furan-5-ylmethylidene] -2-oxo-5-phenyl-2,3-dihydro -Pyrrolyl, 4- (2-oxo-chromen-3-yl) -thiazol-2-yl, 1-carbamoylmethyl-4 Methyl-imidazol-2-yl, 1-carboxymethyl-3-methyl-pyrrol-5-yl, 1-carbamoylethyl-4-methyl-imidazol-2-yl, 1-carboxyethyl-3-methyl-pyrrole-5 Particularly preferred are -yl, 5-carbamoylethyl-2-methyl-1H-indol-7-yl and 5-carboxyethyl-2-methyl-1H-indol-7-yl.
As the optionally substituted naphthyl in R ₂₁ , 3-carboxy-4-hydroxy-naphthyl is preferable.
Examples of the optionally substituted nitrogen-containing heterocyclic group for R ₂₁ include naphthyl which may be substituted, pyrrolyl which may be substituted, imidazolyl which may be substituted, and indolyl which may be substituted. 1-carbamoylmethyl-4-methyl-imidazol-2-yl, 1-carboxymethyl-3-methyl-pyrrol-5-yl, 1-carbamoylethyl-4-methyl-imidazol-2-yl, 1- Carboxyethyl-3-methyl-pyrrol-5-yl, 5-carbamoylethyl-2-methyl-1H-indol-7-yl and 5-carboxyethyl-2-methyl-1H-indol-7-yl are preferred. .

式（Ｉ）及び（ＩＩ）のいずれかで示される化合物はいかなる方法によって得られるものであってもよく、適宜慣用の合成法を組み合わせて合成してもよいし、市販のものであってもよい。   The compound represented by any one of formulas (I) and (II) may be obtained by any method, may be synthesized by appropriately combining conventional synthesis methods, or may be a commercially available product. Good.

式（ＩＩＩ）で示される化合物のうちＲ_２１が置換されていてもよい含窒素複素環基であって、該含窒素複素環基が単環式の化合物は、例えば、後述の製造例１に記載の合成スキームによって合成することができる。 Among the compounds represented by the formula (III), R ₂₁ may be a nitrogen-containing heterocyclic group which may be substituted, and the nitrogen-containing heterocyclic group is a monocyclic compound. It can be synthesized by the described synthesis scheme.

式（ＩＩＩ）で示される化合物のうちＲ_２１が置換されていてもよい含窒素複素環基であって、該含窒素複素環基が縮合二環式の化合物は、例えば、後述の製造例５に記載の合成スキームによって合成することができる。 Among the compounds represented by the formula (III), R ₂₁ may be a substituted nitrogen-containing heterocyclic group, and the nitrogen-containing heterocyclic group is a condensed bicyclic compound. It can be synthesized by the synthesis scheme described in 1.

式（ＩＩＩ）で示される化合物のうちＲ_２１が置換されていてもよいナフチルは、例えば、後述の製造例７に記載の合成スキームによって合成することができる。 Of the compounds represented by the formula (III), naphthyl in which R ₂₁ may be substituted can be synthesized by, for example, a synthesis scheme described in Production Example 7 described later.

ファーマコフォア１〜３及び式（Ｉ）〜（ＩＩＩ）のいずれかで示される化合物は塩を形成することもでき、これもまた本発明に包含される。当該塩は生物学的に許容される通常無毒の塩であり、無機塩基との塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩）、有機塩基との塩（例えば、トリエチルアミン塩、ジイソプロピルエチルアミン塩、ピリジン塩、ピコリン塩、エタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ’，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩等の有機アミン塩）、無機酸付加塩（例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩等）、有機カルボン酸もしくはスルホン酸付加塩（例えば、ギ酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩等）、塩基性あるいは酸性アミノ酸（例えば、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸等）との塩等の、塩基との塩又は酸付加塩が例示される。加えて、それらの溶媒和化合物（例えば、包接化合物（例えば水和物等））もまた、本発明に包含される。   The compounds represented by any of pharmacophores 1 to 3 and formulas (I) to (III) can form a salt, which is also included in the present invention. The salt is a biologically acceptable normally non-toxic salt, such as a salt with an inorganic base (for example, alkali metal salts such as sodium salt and potassium salt, alkaline earth metal salts such as calcium salt and magnesium salt, ammonium salt) Salt), salts with organic bases (for example, triethylamine salt, diisopropylethylamine salt, pyridine salt, picoline salt, ethanolamine salt, triethanolamine salt, dicyclohexylamine salt, N ′, N′-dibenzylethylenediamine salt, etc.) Amine salts), inorganic acid addition salts (eg, hydrochloride, hydrobromide, sulfate, phosphate, etc.), organic carboxylic acid or sulfonic acid addition salts (eg, formate, acetate, trifluoroacetate) , Maleate, tartrate, fumarate, methanesulfonate, benzenesulfonate, toluenesulfonate, etc.) Basic or acidic amino acid (e.g., arginine, aspartic acid, glutamic acid, etc.), such as salts with, salts or acid addition salts with bases are exemplified. In addition, those solvates (eg, inclusion compounds (eg, hydrates)) are also encompassed by the present invention.

本発明のスクリーニング方法は例えば以下のようにして行うことができる。
ファーマコフォア定義
ファーマコフォア１〜３のいずれかを満たす化合物を選択し、慣用のドッキングプログラムを用いてカスパーゼ−３の立体構造と該化合物の結合スコアを計算し、結合スコアの良好な化合物のカスパーゼ−３活性阻害活性をｉｎ ｖｉｔｒｏで評価する。ここで用いられるドッキングプログラムは、特に限定されず、当分野で一般的に利用可能なソフトウェアを用いればよく、そのようなソフトウェアとしては、例えば、ＤＯＣＫ、ＡＵＴＯＤＯＣＫなどが挙げられるが、定義したファーマコフォアを満たす化合物をカスパーゼ−３上のそれに重ね合わせた複合体モデルを作成し、その後、ＡＭＢＥＲ力場（Ｗ．Ｄ．Ｃｏｒｎｅｌｌら， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．， １１７， ５１７９−５１９７ （１９９５））を用いて構造最適化を行い、得られるエネルギーを結合親和性スコアとして計算するプログラムが好ましい。ｉｎ ｖｉｔｒｏの評価としては、例えば、酵素反応生成物の蛍光分光分析などが挙げられる。
このようにして、カスパーゼ−３活性阻害活性を有する化合物をスクリーニングすることができる。 The screening method of the present invention can be performed, for example, as follows.
Definition of pharmacophore A compound satisfying any one of pharmacophores 1 to 3 is selected, and the three-dimensional structure of caspase-3 and the binding score of the compound are calculated using a conventional docking program. The caspase-3 activity inhibitory activity is evaluated in vitro. The docking program used here is not particularly limited, and software generally available in this field may be used. Examples of such software include DOCK and AUTODOCK. A complex model was created by superimposing a compound that satisfies the fore on it on caspase-3, and then the AMBER force field (WD Cornell et al., J. Am. Chem. Soc., 117, 5179-5197 (1995). A program that performs structure optimization using)) and calculates the resulting energy as a binding affinity score is preferred. Examples of in vitro evaluation include fluorescence spectroscopic analysis of enzyme reaction products.
Thus, a compound having caspase-3 activity inhibitory activity can be screened.

本発明におけるカスパーゼ−３活性阻害活性とは、例えば、酵素反応生成物の蛍光分光分析などのカスパーゼ−３活性を評価可能な方法を用いて評価した場合に、コントロールに比べて有意にカスパーゼ−３活性を阻害する活性を意味し、１００μＭでの％阻害が２５％以上であるのが好ましく、５０％以上であるのがさらに好ましい。   The caspase-3 activity inhibitory activity in the present invention is significantly higher than that of the control when evaluated using a method capable of evaluating caspase-3 activity such as fluorescence spectroscopic analysis of enzyme reaction products. It means an activity that inhibits the activity, and the% inhibition at 100 μM is preferably 25% or more, more preferably 50% or more.

また、本発明におけるアポトーシス阻害効果とは、例えば、ＤＮＡラダーなどのアポトーシスによる細胞死を評価可能な方法を用いて評価した場合に、コントロールに比べて有意にアポトーシスを阻害する効果を意味し、そのIＣ５０が１００μＭ以下であるのが好ましく、５０μＭ以下であるのがさらに好ましい。   In addition, the apoptosis inhibitory effect in the present invention means, for example, an effect of significantly inhibiting apoptosis compared to control when evaluated using a method capable of evaluating cell death due to apoptosis such as a DNA ladder, The IC50 is preferably 100 μM or less, and more preferably 50 μM or less.

本発明の阻害剤を医薬として使用する場合、ファーマコフォア１〜３及び式（Ｉ）〜（ＩＩＩ）のいずれかで示される化合物並びにその塩（以下、これらを総称して本発明の化合物ともいう）の少なくとも１種を、医薬上許容される担体（例えば、賦形剤、希釈剤等）などの必要な成分と適宜混合し、液状製剤、粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、注射剤、エアロゾル剤等の慣用の任意の剤形に製剤化して、経口的又は非経口的に投与することができる。   When the inhibitor of the present invention is used as a medicine, the pharmacophores 1 to 3 and the compounds represented by any one of formulas (I) to (III) and salts thereof (hereinafter collectively referred to as the compounds of the present invention). At least one kind of a pharmaceutically acceptable carrier (for example, excipients, diluents, etc.) and the like, and appropriately mixed with liquid preparations, powders, granules, tablets, capsules, syrups, It can be formulated into any conventional dosage form such as injections, aerosols and administered orally or parenterally.

医薬上許容される担体としては、例えば、ショ糖、デンプン、マンニット、ソルビット、乳糖、グルコース、セルロース、タルク、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の賦形剤、セルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリプロピルピロリドン、ゼラチン、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、ショ糖、デンプン等の結合剤、デンプン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、ナトリウム−グリコール−スターチ、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、クエン酸カルシウム等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、エアロジル、タルク、ラウリル硫酸ナトリウム等の滑剤、クエン酸、メントール、グリシルリジン・アンモニウム塩、グリシン、オレンジ粉等の芳香剤、安息香酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、メチルパラバン、プロピルパラベン等の保存剤、クエン酸、クエン酸ナトリウム、酢酸等の安定剤、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸アルミニウム等の懸濁剤、界面活性剤等の分散剤、水、生理食塩水、オレンジジュース等の希釈剤、カカオ脂、ポリエチレングリコール、白灯油等のベースワックスなどが挙げられるが、それらに限定されるものではない。   Examples of the pharmaceutically acceptable carrier include excipients such as sucrose, starch, mannitol, sorbit, lactose, glucose, cellulose, talc, calcium phosphate, calcium carbonate, cellulose, methylcellulose, hydroxypropylcellulose, polypropylpyrrolidone , Gelatin, gum arabic, polyethylene glycol, sucrose, starch and other binders, starch, carboxymethylcellulose, hydroxypropyl starch, sodium-glycol starch, sodium bicarbonate, calcium phosphate, calcium citrate and other disintegrants, magnesium stearate , Aerosil, Talc, Lubricant such as sodium lauryl sulfate, Citric acid, Menthol, Glycyllysine / Ammonium salt, Glycine, Orange powder, Fragrance, Nato benzoate Preservatives such as sodium, sodium bisulfite, methylparaban, propylparaben, stabilizers such as citric acid, sodium citrate, acetic acid, suspension agents such as methylcellulose, polyvinylpyrrolidone, aluminum stearate, dispersants such as surfactants, Examples include, but are not limited to, water, physiological saline, diluents such as orange juice, base waxes such as cacao butter, polyethylene glycol, and white kerosene.

本発明の阻害剤を医薬として用いる場合、好ましい剤形は、経口又は注射製剤である。好適な経口製剤は、水、生理食塩水、オレンジジュースのような希釈液に有効量の本発明の化合物を溶解させた液剤、有効量の該化合物を固体や顆粒として含んでいるカプセル剤、サシェ剤又は錠剤、適当な分散媒中に有効量の該化合物を懸濁させた懸濁液剤、有効量の該化合物を溶解させた溶液を適当な分散媒中に分散させ乳化させた乳剤等である。好適な注射製剤としては、水性および非水性の等張な無菌の注射液剤があり、これには抗酸化剤、緩衝液、制菌剤、等張化剤等が含まれていてもよい。また、水性および非水性の無菌の懸濁液剤が挙げられ、これには懸濁剤、可溶化剤、肥厚剤、安定化剤、防腐剤等が含まれていてもよい。本発明の製剤は、アンプルやバイアルのように単位投与量あるいは複数回投与量ずつ容器に封入することができる。また、本発明の化合物および医薬上許容される担体を凍結乾燥（フリーズドライ）し、使用直前に適当な無菌のビヒクルに溶解又は懸濁すればよい状態で保存することもできる。   When the inhibitor of the present invention is used as a medicine, preferred dosage forms are oral or injectable preparations. Suitable oral preparations include a solution in which an effective amount of the compound of the present invention is dissolved in a diluent such as water, physiological saline or orange juice, a capsule or sachet containing the effective amount of the compound as a solid or granule. Agents, tablets, suspensions in which an effective amount of the compound is suspended in an appropriate dispersion medium, emulsions in which an effective amount of the compound is dissolved and dispersed in an appropriate dispersion medium, etc. . Suitable injectable preparations include aqueous and non-aqueous isotonic sterile injection solutions, which may contain antioxidants, buffers, antibacterial agents, isotonic agents and the like. Aqueous and non-aqueous sterile suspensions can also be mentioned, which may contain suspending agents, solubilizers, thickeners, stabilizers, preservatives and the like. The preparation of the present invention can be enclosed in a container in unit doses or multiple doses like ampoules and vials. In addition, the compound of the present invention and a pharmaceutically acceptable carrier can be freeze-dried (freeze-dried) and stored in a state that may be dissolved or suspended in a suitable sterile vehicle immediately before use.

本発明の薬剤の投与量は、有効成分である本発明の化合物の有効量、該化合物の細胞毒性、病気の進行度、投与対象の薬物受容性、体重、年齢等によって異なるが、通常、成人１日あたり３０μｇ〜３０ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは３００μｇ〜３ｍｇ／ｋｇ体重であり、この量を１回又は数回に分けて投与することができる。   The dose of the drug of the present invention varies depending on the effective amount of the compound of the present invention, which is an active ingredient, the cytotoxicity of the compound, the degree of disease progression, the drug acceptability of the administration subject, body weight, age, etc. It is 30 μg to 30 mg / kg body weight, preferably 300 μg to 3 mg / kg body weight per day, and this amount can be administered once or divided into several times.

以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、これらは単なる例示であって、本発明の範囲を何ら限定するものではない。   The present invention will be described in more detail with reference to the following examples, but these are merely examples and do not limit the scope of the present invention.

カスパーゼ−３活性阻害活性を有する化合物の同定
Ｃａｓｐａｓｅ−３特異的阻害ペプチドであるＡｃ−ＤＮＬＤ−ＣＨＯのＬＤの結合様式を基に図１に示すファーマコフォア１を構築した。
予め構築しておいた化合物ライブラリよりファーマコフォア１を有する化合物を選択した。選択した化合物をドッキングプログラム（ファーマコフォア１を満たす化合物をカスパーゼ−３上のそれに重ね合わせた複合体モデルを作成し、その後、ＡＭＢＥＲ力場（Ｗ． Ｄ． Ｃｏｒｎｅｌｌら， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．， １１７， ５１７９−５１９７ （１９９５））を用いて構造最適化を行い、得られるエネルギーを結合親和性スコアとして計算するプログラム）を用いてスクリーニングした。スクリーニングした化合物をｉｎ ｖｉｔｒｏで評価し、後述の実施例１の化合物を同定した。このｉｎ ｖｉｔｒｏ評価の結果を基に、さらに図２に示すファーマコフォア２を構築した。 Identification of Compound Having Caspase-3 Activity Inhibitory Activity The pharmacophore 1 shown in FIG. 1 was constructed based on the LD binding mode of Ac-DNLD-CHO, which is a caspase-3 specific inhibitory peptide.
A compound having pharmacophore 1 was selected from a compound library constructed in advance. The selected compound is docked with a compound model (a compound satisfying pharmacophore 1 is superimposed on caspase-3, and then the AMBER force field (WD Cornell et al., J. Am. Chem. Soc., 117, 5179-5197 (1995)) and screened using a program that calculates the resulting energy as a binding affinity score. The screened compound was evaluated in vitro, and the compound of Example 1 described later was identified. Based on the result of this in vitro evaluation, a pharmacophore 2 shown in FIG. 2 was further constructed.

化合物ライブラリよりファーマコフォア２を有する化合物を選択した。選択した化合物をドッキングプログラム（ファーマコフォア２を満たす化合物をカスパーゼ−３上のそれに重ね合わせた複合体モデルを作成し、その後、ＡＭＢＥＲ力場（Ｗ． Ｄ． Ｃｏｒｎｅｌｌら， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．， １１７， ５１７９−５１９７ （１９９５））を用いて、構造最適化を行い、得られるエネルギーを結合親和性スコアとして計算するプログラム）を用いてスクリーニングした。スクリーニングした化合物をｉｎ ｖｉｔｒｏで評価し、後述の実施例２〜８の化合物を同定した。このｉｎ ｖｉｔｒｏ評価の結果を基に、カスパーゼ−３特異的阻害を規定するＤＮＬＤ（配列表配列番号１）中のＮ（Ｓ３ポケットに結合する）結合配置（Ｙｏｓｈｉｍｏｒｉ Ａ．， Ｔａｋａｓａｗａ Ｒ．， Ｔａｎｕｍａ Ｓ．， Ａ ｎｏｖｅｌ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｃａｓｐａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｂｙ ｔｈｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｐｏｓｉｔｉｏｎａｌ ｆｉｔｎｅｓｓ ｓｃｏｒｅ． ＢＭＣ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． （２００４） ４， ７．）を考慮して、新規化合物を設計し、図３に示すファーマコフォア３を構築した。   A compound having pharmacophore 2 was selected from the compound library. The selected compound is docked with a compound model (a compound satisfying pharmacophore 2 is superimposed on it on caspase-3, and then AMBER force field (WD Cornell et al., J. Am. Chem. Soc., 117, 5179-5197 (1995)), the structure was optimized, and the obtained energy was calculated as a binding affinity score. The screened compounds were evaluated in vitro, and the compounds of Examples 2 to 8 described later were identified. Based on the results of this in vitro evaluation, N (binding to S3 pocket) binding arrangement (Yoshimori A., Takasawa R., Tanuma S) in DNLD (SEQ ID NO: 1) that regulates caspase-3 specific inhibition , A novel method for evaluation and screening of caspase inhibitory peptides by the amino acid positive position score, ph. 3 was built.

ファーマコフォア３をもとに以下の製造例１〜７の化合物をモデリングした。製造例１〜７の化合物は以下の合成スキームに従って作製できる。   Based on the pharmacophore 3, the following compounds of Production Examples 1 to 7 were modeled. The compounds of Production Examples 1 to 7 can be produced according to the following synthesis scheme.

製造例１
工程１
１，４−ジヒドロキシナフタレンの水酸基の一方を慣用の手法を用いてＰ^１（ベンジル基、ｔ−ブチル基などのフェノール性水酸基の保護基）で保護し、１の化合物を得る。 Production Example 1
Process 1
One of the hydroxyl groups of 1,4-dihydroxynaphthalene is protected with P ¹ (a protecting group for a phenolic hydroxyl group such as a benzyl group or a t-butyl group) using a conventional method to obtain 1 compound.

工程２
２−クロロオキサゾール−４−カルボン酸エチルエステルと工程１で得られる１の化合物とから、Ａ．Ａｆｚａｌｉら，Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１３，３３５（１９８３）の記載に準じ、２の化合物を得る。 Process 2
From 2-chlorooxazole-4-carboxylic acid ethyl ester and 1 compound obtained in step 1, A.I. Afzali et al., Synth. Commun. , 13, 335 (1983), 2 compounds are obtained.

工程３
２の化合物から、Ｊ．Ｗ．Ｃｏｒｎｆｏｒｔｈら，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９４７，９６の記載に準じ、３の化合物を得る。 Process 3
From the compound of 2. W. Cornforth et al. Chem. Soc. , 1947, 96, to obtain 3 compounds.

（式中、Ｐ^２はベンジル基、ｔ−ブチルジフェニルシリル基などの一級水酸基の保護基である） (In the formula, P ² is a primary hydroxyl-protecting group such as benzyl group and t-butyldiphenylsilyl group)

工程４
３の化合物から、Ｇ．Ａ．Ｏｌａｈら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４４，１２４７（１９７９）及びＲ．Ｆ．Ｎｙｓｔｒｏｍら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，６９，２５４８（１９４７）の記載に準じ、４の化合物を得る。 Process 4
From the compound of 3. A. Olah et al. Org. Chem. 44, 1247 (1979) and R.A. F. Nystrom et al. Am. Chem. Soc. , 69, 2548 (1947), 4 compounds are obtained.

工程５
４の化合物から、Ｄ．Ｈ．Ｒ．Ｂａｒｔｏｎら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４７，８９６９（１９９１）の記載に準じ、５の化合物を得る。 Process 5
From the compound of 4. H. R. According to the description of Barton et al., Tetrahedron, 47, 8969 (1991), 5 compounds are obtained.

工程６
５の化合物のＰ^１を慣用の手法を用いて脱保護し、６の化合物を得る。 Step 6
P ¹ of compound 5 is deprotected using conventional techniques to give compound 6

工程７
６の化合物から、Ｋｏｌｂｅ反応（Ａ．Ｓ．Ｌｉｎｄｓｅｙら，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，５７，５８３（１９５７））及びＯ．Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕら，Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ，Ｓｏｃ．Ｊｐｎ．，４０，２３８０（１９６７）の記載に準じ、７の化合物を得る。 Step 7
6 from the Kolbe reaction (AS Lindsey et al., Chem. Rev., 57, 583 (1957)) and O.L. Mitsunobu et al., Bull. Chem, Soc. Jpn. , 40, 2380 (1967), 7 is obtained.

工程８
７の化合物のＰ^２を慣用の手法を用いて脱保護し、８の化合物を得る。 Process 8
The P ² deprotection using conventional methods 7 of compound to give compound 8.

工程９
８の化合物から、Ｅ．Ｊ．Ｃｏｒｅｙら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，１９７９，３９９及びＲ．Ａｐｐｅｌら，Ｂｅｒ．，１１６，２０３７（１９８３）の記載に準じ、９の化合物を得る。 Step 9
From the compound of E.I. J. et al. Corey et al., Tetrahedron Lett. 1979, 399 and R.A. Appel et al., Ber. , 116, 2037 (1983), 9 compounds are obtained.

工程１０
９の化合物から、Ｇ．Ａ．Ｏｌａｈら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４４，１２４７（１９７９）の記載に準じ、製造例１の化合物を得る。 Step 10
From the compounds of 9 A. Olah et al. Org. Chem. , 44, 1247 (1979), the compound of Production Example 1 is obtained.

製造例２〜４
以下の表１に示す製造例２〜４の化合物は、製造例１に準じ、合成することができる。 Production Examples 2 to 4
The compounds of Production Examples 2 to 4 shown in Table 1 below can be synthesized according to Production Example 1.

製造例５
工程１
４−（３−ヒドロキシプロピル）ベンゼン−１，２−ジオールの一級水酸基を慣用の手法を用いてＰ^１（ベンジル基、ｔ−ブチルジフェニルシリル基などの一級水酸基の保護基）で保護し、１の化合物を得る。 Production Example 5
Process 1
The primary hydroxyl group of 4- (3-hydroxypropyl) benzene-1,2-diol is protected with P ¹ (primary hydroxyl group protecting group such as benzyl group, t-butyldiphenylsilyl group) using a conventional method. To obtain a compound of

工程２
１の化合物から、Ｗ．Ｈ．Ｈａｒｔｕｎｇら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，６３，５０７（１９４１）の記載に準じ、２の化合物を得る。 Process 2
From one compound; H. Hartung et al., J. MoI. Am. Chem. Soc. , 63, 507 (1941), 2 compounds are obtained.

工程３
２の化合物のアミノ基を慣用の手法を用いてＰ^２（ｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基などのアミノ基の保護基）で保護し、３の化合物を得る。 Process 3
The amino group of compound 2 is protected with P ² (amino-protecting group such as t-butoxycarbonyl group, benzyloxycarbonyl group) using a conventional method to obtain compound 3.

工程４
３の化合物から、Ｔ．Ｃｈｏｓｈｉ，ＹＡＫＵＧＡＫＵ ＺＡＳＳＨＩ，１２１（７），４８７（２００１）の記載に準じ、４の化合物を得る。 Process 4
From the compounds of 3 According to the description of Choshi, YAKUGAKU ZASSHI, 121 (7), 487 (2001), 4 compounds are obtained.

工程５
１，４−ジヒドロキシナフタレンの水酸基の一方を慣用の手法を用いてＰ^３（ベンジル基、ｔ−ブチル基などのフェノール性水酸基の保護基）で保護し、５の化合物を得る。 Process 5
One of the hydroxyl groups of 1,4-dihydroxynaphthalene is protected with P ³ (a protecting group for a phenolic hydroxyl group such as a benzyl group or a t-butyl group) using a conventional method to obtain compound 5.

工程６
５の化合物から、Ｔ．Ｃｈｏｓｈｉ，ＹＡＫＵＧＡＫＵ ＺＡＳＳＨＩ，１２１（７），４８７（２００１）の記載に準じ、６の化合物を得る。 Step 6
From the compound of 5 According to the description of Choshi, YAKUGAKU ZASSHI, 121 (7), 487 (2001), 6 compounds are obtained.

工程７
工程４で得られる４の化合物と工程６で得られる６の化合物とから、Ｊ．Ｙａｍａｓｈｉｔａら，Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ．，４０７（１９８６）の記載に準じ、７の化合物を得る。 Step 7
From 4 compounds obtained in Step 4 and 6 compounds obtained in Step 6, Yamashita et al., Chem Lett. , 407 (1986), 7 compounds are obtained.

工程８
７の化合物のＰ^３を慣用の手法を用いて脱保護し、８の化合物を得る。 Process 8
The P ³ of 7 compounds were deprotected using conventional methods to give compound 8.

工程９
８の化合物から、Ｋｏｌｂｅ反応（Ａ．Ｓ．Ｌｉｎｄｓｅｙら，Ｃｈｅｍ． Ｒｅｖ．，５７，５８３（１９５７））を用いて、９の化合物を得る。 Step 9
The compound of 8 is obtained from the compound of 8 using the Kolbe reaction (AS Lindsey et al., Chem. Rev., 57, 583 (1957)).

工程１０
９の化合物から、Ｐ．Ｇ．Ｇａｓｓｍａｎら，Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．，ＶＩ，６０１（１９８８）の記載に準じ、１０の化合物を得る。 Step 10
From the compounds of 9 G. Gassman et al., Org. Synth. , VI, 601 (1988), 10 compounds are obtained.

工程１１
１０の化合物の一級水酸基を慣用の手法を用いてＰ^４（ベンジル基、ｔ−ブチルジフェニルシリル基などの一級水酸基の保護基）で保護し、１１の化合物を得る。 Step 11
The primary hydroxyl group of 10 compounds is protected with P ⁴ (protecting group of primary hydroxyl group such as benzyl group, t-butyldiphenylsilyl group) by a conventional method to obtain 11 compounds.

工程１２
１１の化合物のＰ^１を慣用の手法を用いて脱保護し、１２の化合物を得る。 Step 12
The P ¹ of the compound of 11 was deprotected using conventional methods to obtain the compound of 12.

工程１３
１２の化合物から、Ｅ．Ｊ．Ｃｏｒｅｙら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，１９７９，３９９及びＲ．Ａｐｐｅｌら，Ｂｅｒ．，１１６，２０３７（１９８３）の記載に準じ、１３の化合物を得る。 Step 13
From 12 compounds, E.I. J. et al. Corey et al., Tetrahedron Lett. 1979, 399 and R.A. Appel et al., Ber. , 116, 2037 (1983), 13 compounds are obtained.

工程１４
１３の化合物のＰ^４を慣用の手法を用いて脱保護し、１４の化合物を得る。 Step 14
13 P ⁴ of the compounds of deprotected using conventional techniques to obtain the compound of 14.

工程１５
１４の化合物から、Ｅ．Ｊ．Ｃｏｒｅｙら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，１９７９，３９９の記載に準じ、製造例５の化合物を得る。 Step 15
14 compounds from E.I. J. et al. Corey et al., Tetrahedron Lett. , 1979, 399, the compound of Production Example 5 is obtained.

製造例６Production Example 6

製造例６の化合物は、製造例５に記載の方法に準じ、合成することができる。   The compound of Production Example 6 can be synthesized according to the method described in Production Example 5.

製造例７
工程１
１，１’−ビナフタレン−４，４’−ジオールとナトリウムを反応させ、１の化合物を得る。 Production Example 7
Process 1
1,1′-Binaphthalene-4,4′-diol is reacted with sodium to give 1 compound.

工程２
１の化合物から、Ｋｏｌｂｅ反応（Ａ．Ｓ．Ｌｉｎｄｓｅｙら，Ｃｈｅｍ． Ｒｅｖ．，５７，５８３（１９５７））を用いて、製造例７の化合物を得る。 Process 2
The compound of Production Example 7 is obtained from the compound of 1 using the Kolbe reaction (AS Lindsey et al., Chem. Rev., 57, 583 (1957)).

同定化合物の活性の測定
同定化合物のカスパーゼ−３活性阻害活性及びアポトーシス阻害効果を以下に記載の手順により測定した。測定に使用した化合物は、実施例１の化合物はＳｉｇｍａ社（Ｏ１６２５）、実施例２の化合物はＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ Ｒａｒｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（Ｓ９８４５６６）、実施例３の化合物はＴｉｍＴｅｃ社（ＳＴ９０４３０７）、実施例４の化合物はＳｐｅｃｓ社（ＡＧ−６９０／３７０９９１３３）、実施例５の化合物はＡｓｉｎｅｘ社（ＢＡＳ０４８８０６４６）、実施例６の化合物はＳｉｇｍａ社（Ｃ１０１８）、実施例７の化合物はＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ Ｒａｒｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（Ｒ３２０８９７）、実施例８の化合物はＳｉｇｍａ社（Ｓ０８８３）より購入した。 Measurement of activity of identified compound The caspase-3 activity inhibitory activity and the apoptosis inhibitory effect of the identified compound were measured by the procedures described below. The compounds used in the measurement were Sigma (O1625) for the compound of Example 1, Sigma Aldrich Rare Chemical (S984565) for the compound of Example 2, and TimTech (ST904307) for Example 3 and the compound of Example 4. The compound is Specs (AG-690 / 37099133), the compound of Example 5 is Asinex (BAS04880646), the compound of Example 6 is Sigma (C1018), the compound of Example 7 is Sigma Aldrich Rare Chemical (R320897) The compound of Example 8 was purchased from Sigma (S0883).

カスパーゼ−３活性阻害活性の測定
カスパーゼ−３の活性は、基質として、製品コード３１７１−ｖの基質を株式会社ペプチド研究所から購入し、これを用いて測定した。１ ｕｎｉｔの活性型リコンビナントカスパーゼ−３（ＣＡＬＢＩＯＣＨＥＭ社から購入）を、９６ウェルアッセイプレート（ＣＯＲＮＩＮＧ）において、撹拌しながら３７℃３０分、緩衝液（１００ｍＭ ＮａＣｌ、５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１０ｍＭ ＤＴＴ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１０％グリセロール、０．１％ＣＨＡＰＳ、ｐＨ７．４）中、試験化合物とともにインキュベートした。次いで、２００μＭ基質を各ウェルに添加し、９６ウェルプレートリーダーＷａｌｌａｃｅ １４２０ ＡＲＶＯｓｘ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を用いて、６０分間１分間隔にて３９０ｎｍの波長で励起し、４６０ｎｍの蛍光波長を測定し、各試験化合物の１００μＭでの％阻害（実施例２の化合物についてはＩＣ５０も）を以下のように算出した。
％阻害：
化合物を入れた状態の蛍光強度を化合物なしの状態の蛍光強度で割って１００をかける。この値は％活性を示すので、１００から％活性を引くことにより％阻害とした。
％阻害＝１００−｛（化合物（＋）の蛍光強度／化合物（−）の蛍光強度）×１００｝
ＩＣ５０：
各濃度における％阻害を算出し、Ｘ軸を化合物濃度の対数、Ｙ軸に％阻害をとったグラフを作成し、５０％阻害に対応する濃度をＩＣ５０とした。
結果を表２−１及び２−２に示す。 Measurement of Caspase-3 Activity Inhibitory Activity The activity of caspase-3 was measured using a product code 3171-v substrate purchased from Peptide Institute, Inc. as a substrate. 1 unit of active recombinant caspase-3 (purchased from CALBIOCHEM) was mixed in a 96-well assay plate (CORNING) at 37 ° C. for 30 minutes with a buffer solution (100 mM NaCl, 50 mM HEPES, 10 mM DTT, 1 mM EDTA, 10 % Glycerol, 0.1% CHAPS, pH 7.4) with test compounds. Next, 200 μM substrate was added to each well, and excited using a 96-well plate reader Wallace 1420 ARVOsx (Perkin Elmer) at a wavelength of 390 nm at 1 minute intervals for 60 minutes, and a fluorescence wavelength of 460 nm was measured. The% inhibition of the compound at 100 μM (also IC50 for the compound of Example 2) was calculated as follows.
% Inhibition:
Divide the fluorescence intensity with the compound in by the fluorescence intensity without the compound and multiply by 100. Since this value indicates% activity, subtraction of% activity from 100 gave% inhibition.
% Inhibition = 100 − {(fluorescence intensity of compound (+) / fluorescence intensity of compound (−)) × 100}
IC50:
The% inhibition at each concentration was calculated, a graph was prepared with the logarithm of the compound concentration on the X axis and the% inhibition on the Y axis, and the concentration corresponding to 50% inhibition was taken as IC50.
The results are shown in Tables 2-1 and 2-2.

アポトーシス阻害効果の測定
Ｊｕｒｋａｔ細胞（１．０×１０^６ ｃｅｌｌｓ／ｍＬ）２ｍＬを６ウェルプレートに播種し、各濃度の試験化合物を加え、１時間、プレインキュベートした。その後、Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ ２μＭ、６時間の処理によりアポトーシスを誘導した。
処理の終わった細胞を回収し、２４μＬのＬｙｓｉｓ Ｂｕｆｆｅｒを加え、攪拌し、２０ｍｇ／ｍＬ ＰｒｏＫを５μＬ加えて５０℃で３時間インキュベートした。その後、さらに１０ｍｇ／ｍＬ ＲＮａｓｅＡを５μＬ加えて３７℃で１．５時間インキュベートした。このサンプルを２０μＬ取って１．８％ アガロースゲル電気泳動によりＤＮＡの断片化を検出した。
最後にゲルをＥｔＢｒ染色した後、ＵＶ照射下で写真撮影し、その写真をデンシトメトリーにかけ、定量化することにより、アポトーシス阻害効果を評価した。結果を図４に示す。
（参考文献：改訂 アポトーシス実験プロトコール 基礎編、田沼靖一監修、秀潤社 ７９頁） Measurement of Apoptosis Inhibitory Effect 2 mL of Jurkat cells (1.0 × 10 ⁶ cells / mL) were seeded in a 6-well plate, each concentration of test compound was added, and preincubated for 1 hour. Thereafter, apoptosis was induced by treatment with Camptothecin 2 μM for 6 hours.
The treated cells were collected, 24 μL of Lysis Buffer was added, stirred, 5 μL of 20 mg / mL ProK was added and incubated at 50 ° C. for 3 hours. Thereafter, 5 μL of 10 mg / mL RNase A was further added and incubated at 37 ° C. for 1.5 hours. 20 μL of this sample was taken and DNA fragmentation was detected by 1.8% agarose gel electrophoresis.
Finally, the gel was stained with EtBr and then photographed under UV irradiation. The photograph was subjected to densitometry and quantified to evaluate the apoptosis inhibitory effect. The results are shown in FIG.
(Reference: Revised Protocol for Apoptosis Experiments, edited by Junichi Tanuma, Shujunsha, p. 79)

これらの結果から、本発明の化合物は、優れたカスパーゼ−３活性阻害活性及びアポトーシス阻害効果を有することがわかる。   From these results, it can be seen that the compound of the present invention has excellent caspase-3 activity inhibitory activity and apoptosis inhibitory effect.

ファーマコフォア１を示す図である。図中、Ｓ_１〜Ｓ_３は、カスパーゼ−３との結合領域、Ｄは水素結合ドナー、Ｈｙは疎水領域を示し、Ｒ_１〜Ｒ_３は本明細書に定義したとおりである。1 is a diagram showing a pharmacophore 1. FIG. In the figure, S _{1 to} S ₃ are binding regions with caspase-3, D is a hydrogen bond donor, Hy is a hydrophobic region, and R _{1 to} R ₃ are as defined in this specification. ファーマコフォア２を示す図である。図中、Ｓ_１〜Ｓ_３は、カスパーゼ−３との結合領域、Ｄは水素結合ドナー、Ｈｙは疎水領域を示し、Ｒ_１〜Ｒ_３は本明細書に定義したとおりである。It is a figure which shows the pharmacophore 2. FIG. In the figure, S _{1 to} S ₃ are binding regions with caspase-3, D is a hydrogen bond donor, Hy is a hydrophobic region, and R _{1 to} R ₃ are as defined in this specification. ファーマコフォア３を示す図である。図中、Ｓ_１〜Ｓ_３は、カスパーゼ−３との結合領域、Ａは水素結合アクセプター、Ｄは水素結合ドナー、Ｈｙは疎水領域を示し、Ｒ_１〜Ｒ_３は本明細書に定義したとおりである。It is a figure which shows the pharmacophore 3. FIG. In the figure, S _{1 to} S ₃ are binding regions with caspase-3, A is a hydrogen bond acceptor, D is a hydrogen bond donor, Hy is a hydrophobic region, and R _{1 to} R ₃ are as defined in the present specification. It is. 実施例２の化合物のアポトーシス阻害効果に関する実験結果を示すグラフである。4 is a graph showing experimental results regarding the apoptosis-inhibiting effect of the compound of Example 2.

配列番号１：カスパーゼ−３特異的阻害を規定する配列である。   SEQ ID NO: 1 is a sequence that defines caspase-3 specific inhibition.

Claims (12)

以下のファーマコフォア

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
のいずれかを有する化合物又はその塩を含む、カスパーゼ−３活性阻害剤。 The following pharmacophores

[Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
A caspase-3 activity inhibitor comprising a compound having any of the above or a salt thereof. 以下の式（Ｉ）又は（ＩＩ）

〔式中、Ｌは単結合、置換されていてもよいメチレン、−Ｏ−、−Ｎ＝Ｎ−又は−ＮＨ−であり、Ｒ_１１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_１２は水素又は水酸基であり、Ｒ_１３は水素又はメチルであり、Ｒ_１４は置換されていてもよいＣ_１−６アルキル、置換されていてもよいアリール又は置換されていてもよい複素環基であり、Ｒ_１５は水素又は水酸基であり、Ｒ_１６及びＲ_１７のいずれか一方が水素又はスルホニルであり、他方が−Ｌ−Ｒ_１４（Ｌ及びＲ_１４は上記定義と同じ）で示される〕
で示される化合物又はその塩を含む、カスパーゼ−３活性阻害剤。 The following formula (I) or (II)

[Wherein L is a single bond, optionally substituted methylene, -O-, -N = N- or -NH-, R ₁₁ is carboxy or sulfonyl, and R ₁₂ is hydrogen or hydroxyl group. , R ₁₃ is hydrogen or methyl, R ₁₄ is an optionally substituted C _1-6 alkyl, an optionally substituted aryl or an optionally substituted heterocyclic group, and R ₁₅ is hydrogen or It is a hydroxyl group, and any one of R ₁₆ and R ₁₇ is hydrogen or sulfonyl, and the other is represented by -LR ₁₄ (L and R ₁₄ are as defined above)]
Or a caspase-3 activity inhibitor comprising the compound represented by the formula: Ｒ_１４が置換されていてもよいＣ_１−６アルキル、置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいナフチル、置換されていてもよいピロリル、置換されていてもよいイミダゾリル、置換されていてもよいインドリル又は置換されていてもよいチアゾリルである、請求項２に記載のカスパーゼ−３活性阻害剤。 R ₁₄ may be substituted C _1-6 alkyl, optionally substituted phenyl, optionally substituted naphthyl, optionally substituted pyrrolyl, optionally substituted imidazolyl, substituted The caspase-3 activity inhibitor according to claim 2, which is indolyl which may be substituted or thiazolyl which may be substituted. アポトーシス阻害剤である、請求項１〜３のいずれか１項に記載のカスパーゼ−３活性阻害剤。   The caspase-3 activity inhibitor according to any one of claims 1 to 3, which is an apoptosis inhibitor. 以下の式（ＩＩＩ）

〔式中、Ｌは単結合又は−Ｏ−であり、Ｒ_２１は置換されていてもよいナフチル又は置換されていてもよい含窒素複素環基である〕
で示される化合物又はその塩。 The following formula (III)

[Wherein, L is a single bond or —O—, and R ₂₁ is an optionally substituted naphthyl or an optionally substituted nitrogen-containing heterocyclic group]
Or a salt thereof. Ｒ_２１が置換されていてもよいナフチル、置換されていてもよいピロリル、置換されていてもよいイミダゾリル又は置換されていてもよいインドリルである、請求項５に記載の化合物又はその塩。 The compound or a salt thereof according to claim 5, wherein R ₂₁ is an optionally substituted naphthyl, an optionally substituted pyrrolyl, an optionally substituted imidazolyl, or an optionally substituted indolyl. 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と
を含む、カスパーゼ−３活性阻害活性を有する化合物をスクリーニングする方法。 Examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore:

[Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
And screening for a compound having caspase-3 activity inhibitory activity. 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と
を含む、カスパーゼ−３活性阻害活性を有する化合物をスクリーニングする方法。 Examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore:

[Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
And screening for a compound having caspase-3 activity inhibitory activity. 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と
を含む、カスパーゼ−３活性阻害活性を有する化合物をスクリーニングする方法。 Examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore:

[Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
And screening for a compound having caspase-3 activity inhibitory activity. 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と、
合致した化合物のカスパーゼ−３活性阻害活性を調べる工程と
を含む、アポトーシス阻害効果を有する化合物をスクリーニングする方法。 Examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore:

[Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
The process of checking whether or not
And a step of examining the caspase-3 activity inhibitory activity of the matched compound. 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と、
合致した化合物のカスパーゼ−３活性阻害活性を調べる工程と
を含む、アポトーシス阻害効果を有する化合物をスクリーニングする方法。 Examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore:

[Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
The process of checking whether or not
And a step of examining the caspase-3 activity inhibitory activity of the matched compound. 被験化合物のファーマコフォアを調べる工程と、
該ファーマコフォアが以下のファーマコフォア

〔式中、Ｒ_１はカルボキシ又はスルホニルであり、Ｒ_２はＣ_１−６アルキルであり、Ｒ_３はカルボニル、スルホニル、アミノ、カルボキシ又はニトロである〕
に合致するかどうかを調べる工程と、
合致した化合物のカスパーゼ−３活性阻害活性を調べる工程と
を含む、アポトーシス阻害効果を有する化合物をスクリーニングする方法。 Examining the pharmacophore of the test compound;
The pharmacophore is the following pharmacophore:

[Wherein R ₁ is carboxy or sulfonyl, R ₂ is C _1-6 alkyl, and R ₃ is carbonyl, sulfonyl, amino, carboxy or nitro]
The process of checking whether or not
And a step of examining the caspase-3 activity inhibitory activity of the matched compound.

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