JP2006519585A - Hivワクチン - Google Patents
Hivワクチン Download PDFInfo
- Publication number
- JP2006519585A JP2006519585A JP2004549145A JP2004549145A JP2006519585A JP 2006519585 A JP2006519585 A JP 2006519585A JP 2004549145 A JP2004549145 A JP 2004549145A JP 2004549145 A JP2004549145 A JP 2004549145A JP 2006519585 A JP2006519585 A JP 2006519585A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- codon
- polynucleotide
- nef
- optimized
- hiv
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 229940033330 HIV vaccine Drugs 0.000 title description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 113
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims abstract description 90
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract description 90
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims abstract description 90
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 67
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 64
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims abstract description 37
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims abstract description 32
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 claims abstract 5
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims description 98
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 89
- 101710149951 Protein Tat Proteins 0.000 claims description 72
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 54
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 54
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims description 50
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 31
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 26
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 26
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 26
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 26
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 25
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 25
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 claims description 23
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 22
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 21
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 19
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 19
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 19
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims description 14
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 13
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 claims description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 9
- 241000701024 Human betaherpesvirus 5 Species 0.000 claims description 7
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims description 7
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 claims description 3
- 101150102264 IE gene Proteins 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 claims description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 abstract description 12
- 238000011238 DNA vaccination Methods 0.000 abstract description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 61
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 60
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 49
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 43
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 29
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 28
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 22
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 20
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 20
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 17
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 15
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 14
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 13
- 102100034349 Integrase Human genes 0.000 description 12
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 12
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 12
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 11
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 11
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 11
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 11
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 11
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 10
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 10
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 10
- 229960002751 imiquimod Drugs 0.000 description 10
- DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N imiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C3N(CC(C)C)C=NC3=C(N)N=C21 DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 10
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 description 9
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 description 9
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 9
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 9
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 9
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 9
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 9
- HQBUPOAKJGJGCD-UHFFFAOYSA-N 3h-imidazo[4,5-c]quinolin-4-amine Chemical group NC1=NC2=CC=CC=C2C2=C1N=CN2 HQBUPOAKJGJGCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 8
- 241000894007 species Species 0.000 description 8
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 8
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 7
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 7
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 7
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 7
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 7
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 6
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 108010061833 Integrases Proteins 0.000 description 6
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 6
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 6
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 5
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 5
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 5
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 5
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 108700004028 nef Genes Proteins 0.000 description 5
- 101150023385 nef gene Proteins 0.000 description 5
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 5
- 230000023603 positive regulation of transcription initiation, DNA-dependent Effects 0.000 description 5
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 5
- 108700004027 tat Genes Proteins 0.000 description 5
- 101150098170 tat gene Proteins 0.000 description 5
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 4
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 4
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 4
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 4
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 4
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 4
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 4
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 4
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- -1 imiquimod [S-26308 Chemical class 0.000 description 4
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 4
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 4
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 4
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 4
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 4
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 4
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 3
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 3
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 3
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 3
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 3
- 102100038132 Endogenous retrovirus group K member 6 Pro protein Human genes 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 101710203526 Integrase Proteins 0.000 description 3
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 3
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 3
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 3
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 3
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 230000034303 cell budding Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 108700004026 gag Genes Proteins 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 3
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 3
- 229940065638 intron a Drugs 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 230000007498 myristoylation Effects 0.000 description 3
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 3
- 108700004029 pol Genes Proteins 0.000 description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 3
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- BXNMTOQRYBFHNZ-UHFFFAOYSA-N resiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C(N(C(COCC)=N3)CC(C)(C)O)C3=C(N)N=C21 BXNMTOQRYBFHNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 2
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 2
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 2
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 2
- 108010072220 Cyclophilin A Proteins 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 101710177291 Gag polyprotein Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 2
- 108010048209 Human Immunodeficiency Virus Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 2
- 108010064171 Lysosome-Associated Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000014944 Lysosome-Associated Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 101710151805 Mitochondrial intermediate peptidase 1 Proteins 0.000 description 2
- 102100034539 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase A Human genes 0.000 description 2
- 101710192141 Protein Nef Proteins 0.000 description 2
- 101710149136 Protein Vpr Proteins 0.000 description 2
- 108010019653 Pwo polymerase Proteins 0.000 description 2
- 101150057615 Syn gene Proteins 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229920006355 Tefzel Polymers 0.000 description 2
- 102000008233 Toll-Like Receptor 4 Human genes 0.000 description 2
- 108010060804 Toll-Like Receptor 4 Proteins 0.000 description 2
- 101800001690 Transmembrane protein gp41 Proteins 0.000 description 2
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 2
- 101150003160 X gene Proteins 0.000 description 2
- LTOCXIVQWDANEX-UXCYUTBZSA-M [Br-].CCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCCN)OCCCCCCCC\C=C/CCCC.CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)CC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C Chemical compound [Br-].CCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCCN)OCCCCCCCC\C=C/CCCC.CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)CC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C LTOCXIVQWDANEX-UXCYUTBZSA-M 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- QHSJIZLJUFMIFP-UHFFFAOYSA-N ethene;1,1,2,2-tetrafluoroethene Chemical compound C=C.FC(F)=C(F)F QHSJIZLJUFMIFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 101150098622 gag gene Proteins 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 2
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 2
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 101150088264 pol gene Proteins 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical group 0.000 description 2
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N spermidine Chemical compound NCCCCNCCCN ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N (2R)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2R,3S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-amino-1-hydroxyethylidene)amino]-3-carboxy-1-hydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1,5-dihydroxy-5-iminopentylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]hexanoic acid Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=N[C@@H](CS)C(=N[C@@H](C)C(=N[C@@H](CO)C(=NCC(=N[C@@H](CCC(=N)O)C(=NC(CS)C(=N[C@H]([C@H](C)O)C(=N[C@H](CS)C(=N[C@H](CO)C(=NCC(=N[C@H](CS)C(=NCC(=N[C@H](CCCCN)C(=O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)N=C([C@H](CS)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](C)N=C(CN=C([C@H](CO)N=C([C@H](CS)N=C(CN=C(C(CS)N=C(C(CC(=O)O)N=C(CN)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N 0.000 description 1
- LEBVLXFERQHONN-UHFFFAOYSA-N 1-butyl-N-(2,6-dimethylphenyl)piperidine-2-carboxamide Chemical compound CCCCN1CCCCC1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C LEBVLXFERQHONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RHKWIGHJGOEUSM-UHFFFAOYSA-N 3h-imidazo[4,5-h]quinoline Chemical class C1=CN=C2C(N=CN3)=C3C=CC2=C1 RHKWIGHJGOEUSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XEDONBRPTABQFB-UHFFFAOYSA-N 4-[(2-formyl-3-hydroxyphenoxy)methyl]benzoic acid Chemical compound C1=CC(C(=O)O)=CC=C1COC1=CC=CC(O)=C1C=O XEDONBRPTABQFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 101150061183 AOX1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 241000710929 Alphavirus Species 0.000 description 1
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 241000272478 Aquila Species 0.000 description 1
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000006734 Beta-Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010087504 Beta-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 102100037853 C-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710149863 C-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100032367 C-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100031658 C-X-C chemokine receptor type 5 Human genes 0.000 description 1
- 101710082516 C-X-C chemokine receptor type 5 Proteins 0.000 description 1
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 1
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 1
- 101100505076 Caenorhabditis elegans gly-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000178270 Canarypox virus Species 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 1
- 108010055166 Chemokine CCL5 Proteins 0.000 description 1
- 108010035563 Chloramphenicol O-acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 241000759568 Corixa Species 0.000 description 1
- 229920000832 Cutin Polymers 0.000 description 1
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N Digitonin Natural products CC1CCC2(OC1)OC3C(O)C4C5CCC6CC(OC7OC(CO)C(OC8OC(CO)C(O)C(OC9OCC(O)C(O)C9OC%10OC(CO)C(O)C(OC%11OC(CO)C(O)C(O)C%11O)C%10O)C8O)C(O)C7O)C(O)CC6(C)C5CCC4(C)C3C2C QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101150029662 E1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 101710170658 Endogenous retrovirus group K member 10 Gag polyprotein Proteins 0.000 description 1
- 101710186314 Endogenous retrovirus group K member 21 Gag polyprotein Proteins 0.000 description 1
- 101710162093 Endogenous retrovirus group K member 24 Gag polyprotein Proteins 0.000 description 1
- 101710094596 Endogenous retrovirus group K member 8 Gag polyprotein Proteins 0.000 description 1
- 101710177443 Endogenous retrovirus group K member 9 Gag polyprotein Proteins 0.000 description 1
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 101710204610 Envelope glycoprotein gp160 Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108060003393 Granulin Proteins 0.000 description 1
- 241001316290 Gypsophila Species 0.000 description 1
- 108010039334 HIV Envelope Protein gp120 Proteins 0.000 description 1
- 102000006481 HIV Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010083930 HIV Receptors Proteins 0.000 description 1
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 1
- 101000746373 Homo sapiens Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 1
- 101000740205 Homo sapiens Sal-like protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 1
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- 241000598436 Human T-cell lymphotropic virus Species 0.000 description 1
- 101900065606 Human cytomegalovirus Immediate early protein IE1 Proteins 0.000 description 1
- 102100034347 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 102000012330 Integrases Human genes 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 1
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 102000003810 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 1
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 102000004125 Interleukin-1alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010082786 Interleukin-1alpha Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 101710128836 Large T antigen Proteins 0.000 description 1
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 1
- 239000012097 Lipofectamine 2000 Substances 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102000003792 Metallothionein Human genes 0.000 description 1
- 108090000157 Metallothionein Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 101710145242 Minor capsid protein P3-RTD Proteins 0.000 description 1
- 108010086093 Mung Bean Nuclease Proteins 0.000 description 1
- MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N Muraminsaeure Natural products OC(=O)C(C)OC1C(N)C(O)OC(CO)C1O MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000713102 Mus musculus C-C motif chemokine 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010021466 Mutant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008300 Mutant Proteins Human genes 0.000 description 1
- 244000270834 Myristica fragrans Species 0.000 description 1
- 235000009421 Myristica fragrans Nutrition 0.000 description 1
- 108091061960 Naked DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100035069 Neuronal vesicle trafficking-associated protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710085178 Neuronal vesicle trafficking-associated protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 108700001237 Nucleic Acid-Based Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 108090001074 Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010013639 Peptidoglycan Proteins 0.000 description 1
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 1
- 108020005091 Replication Origin Proteins 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 241000714474 Rous sarcoma virus Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 102100037204 Sal-like protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 101710137302 Surface antigen S Proteins 0.000 description 1
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 1
- 108010001244 Tli polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 1
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 1
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 101710086987 X protein Proteins 0.000 description 1
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 description 1
- 238000002679 ablation Methods 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229960003150 bupivacaine Drugs 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 101150055766 cat gene Proteins 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 108091092356 cellular DNA Proteins 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007891 compressed tablet Substances 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N digitonin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)C[C@@H](O)[C@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO7)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@@H](CO)O5)O)C[C@@H]4CC[C@H]3[C@@H]2[C@@H]1O)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@@H](C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N 0.000 description 1
- UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N digitonine Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CC(O)C(OC5C(C(O)C(OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)CO7)O)C(O)C(CO)O6)OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)C(CO)O7)O)C(O)C(CO)O6)O)C(CO)O5)O)CC4CCC3C2C2O)C)C2OC11CCC(C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940011399 escin Drugs 0.000 description 1
- 229930186222 escin Natural products 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 108700014844 flt3 ligand Proteins 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000008076 immune mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000008975 immunomodulatory function Effects 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 230000000266 injurious effect Effects 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 235000005772 leucine Nutrition 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical class [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000012067 mathematical method Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000003595 mist Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 239000007932 molded tablet Substances 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 1
- 230000012223 nuclear import Effects 0.000 description 1
- 230000025308 nuclear transport Effects 0.000 description 1
- 229940023146 nucleic acid vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 229950010550 resiquimod Drugs 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940063673 spermidine Drugs 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940021747 therapeutic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229940100611 topical cream Drugs 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229950009795 tucaresol Drugs 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 230000029302 virus maturation Effects 0.000 description 1
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16111—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV env
- C12N2740/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16211—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV gagpol
- C12N2740/16222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16311—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV regulatory proteins
- C12N2740/16322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
本発明は核酸構築物、かかる構築物を含むベクター、該ベクターおよび構築物を調製する方法ならびに予防または治療、特に治療用ワクチンにおけるその使用に関する。本発明はさらに、該構築物およびベクターを含む宿主細胞および該構築物によりコード化されるポリペプチドならびにポリペプチドそれ自体に関する。本発明はさらに構築物およびベクターを含む医薬処方ならびに医学における該構築物およびベクターの使用に関する。本発明は特に、HIV感染症の予防および治療において、さらに詳細には粒子性送達により投与された場合に有用なDNAワクチンに関する。
HIV−1は世界の主要な健康上の問題の1つと見なされる後天性免疫不全症候群(エイズ)の主な原因である。世界中でワクチンを作り出すための大規模な研究が行われてきたが、このような努力はこれまでのところ成功していなかった。
gp120−RT−Nef−Gag
RT−Nef−Gag−gp120
において突然変異を有する(Virology 235:48−64、1997)。
1.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル
2.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−trNef
3.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−trNef−mTat
4.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−Nef−mTat
5.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24Gag−trNef
6.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24Gag−trNef−mTat
7.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−Nef−mTat
8.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−mNef−mTat
9.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−L1Nef−mTat
10.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−L2Nef−mTat
11.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−LLNef−mTat
12.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−mLLNef−mTat
13.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−mL1Nef−mTat
14.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−mL2Nef−mTat
15.最適化されたgp120コドン−trNef
16.最適化されたgp120コドン−trNef−mTat
17.最適化されたgp120コドン−Nef−mTat
18.最適化されたNef−mTat−gp120コドン
19.最適化されたtrNef−mTat−gp120コドン
20.最適化されたgp120コドン−p17/24Gag−trNef
21.最適化されたgp120コドン−p17/24Gag−trNef−mTat
L1 Nef=NefにおけるL174A突然変異
L2Nef=NefにおけるL175A突然変異
LLNef=NefにおけるL174AおよびL175A突然変異
TrNef=末端アミノ酸1−65をコード化するヌクレオチドが欠損したNef
mRT=生物学的活性(W229K)を除去するために突然変異した逆転写酵素。RTは最適化されたコドンである。
Gag=最適化されたGagコドン
ヒト(高度に発現された)遺伝子のコドン使用 1/24/91(human_high.cod)
アミノ酸 コドン 数 /1000 フラクション
Gly GGG 905.00 18.76 0.24
Gly GGA 525.00 10.88 0.14
Gly GGT 441.00 9.14 0.12
Gly GGC 1867.00 38.70 0.50
Glu GAG 2420.00 50.16 0.75
Glu GAA 792.00 16.42 0.25
Asp GAT 592.00 12.27 0.25
Asp GAC 1821.00 37.75 0.75
Val GTG 1866.00 38.68 0.64
Val GTA 134.00 2.78 0.05
Val GTT 198.00 4.10 0.07
Val GTC 728.00 15.09 0.25
Ala GCG 652.00 13.51 0.17
Ala GCA 488.00 10.12 0.13
Ala GCT 654.00 13.56 0.17
Ala GCC 2057.00 42.64 0.53
Arg AGG 512.00 10.61 0.18
Arg AGA 298.00 6.18 0.10
Ser AGT 354.00 7.34 0.10
Ser AGC 1171.00 24.27 0.34
Lys AAG 2117.00 43.88 0.82
Lys AAA 471.00 9.76 0.18
Asn AAT 314.00 6.51 0.22
Asn AAC 1120.00 23.22 0.78
Met ATG 1077.00 22.32 1.00
Ile ATA 88.00 1.82 0.05
Ile ATT 315.00 6.53 0.18
Ile ATC 1369.00 28.38 0.77
Thr ACG 405.00 8.40 0.15
Thr ACA 373.00 7.73 0.14
Thr ACT 358.00 7.42 0.14
Thr ACC 1502.00 31.13 0.57
Trp TGG 652.00 13.51 1.00
End TGA 109.00 2.26 0.55
Cys TGT 325.00 6.74 0.32
Cys TGC 706.00 14.63 0.68
End TAG 42.00 0.87 0.21
End TAA 46.00 0.95 0.23
Tyr TAT 360.00 7.46 0.26
Tyr TAC 1042.00 21.60 0.74
Leu TTG 313.00 6.49 0.06
Leu TTA 76.00 1.58 0.02
Phe TTT 336.00 6.96 0.20
Phe TTC 1377.00 28.54 0.80
Ser TCG 325.00 6.74 0.09
Ser TCA 165.00 3.42 0.05
Ser TCT 450.00 9.33 0.13
Ser TCC 958.00 19.86 0.28
Arg CGG 611.00 12.67 0.21
Arg CGA 183.00 3.79 0.06
Arg CGT 210.00 4.35 0.07
Arg CGC 1086.00 22.51 0.37
Gln CAG 2020.00 41.87 0.88
Gln CAA 283.00 5.87 0.12
His CAT 234.00 4.85 0.21
His CAC 870.00 18.03 0.79
Leu CTG 2884.00 59.78 0.58
Leu CTA 166.00 3.44 0.03
Leu CTT 238.00 4.93 0.05
Leu CTC 1276.00 26.45 0.26
Pro CCG 482.00 9.99 0.17
Pro CCA 456.00 9.45 0.16
Pro CCT 568.00 11.77 0.19
Pro CCC 1410.00 29.23 0.48
いる使用のための優先の主要なブーストのフォーマットが本発明によれば選択される:
タンパク質プライム/生ベクターブースト
生ベクタープライム/タンパク質ブースト
タンパク質プライム/DNAプラスミドブースト
DNAプラスミドプライム/タンパク質ブースト
生ベクタープライム/DNAプラスミドブースト
DNAプラスミドプライム/生ベクターブースト
1. 1 gp120含有プラスミドの構築
以下の実施例において記載されている組み換えgp120糖タンパク質は、HIV−1単離株W61Dのgp120エンベロープタンパク質の合成形態である。
遺伝子配列はHIV−1単離株W61Dからのgp120配列に基づくものであった。これは、0.297のコドン使用係数を有する。最適化はSynGene2dを用いて行われ、その結果、0.749のCUCが得られた(Ertl、PF.、Thomsen、LL.核酸ワクチンの構築における技術的問題(Technical issues in construction of nucleic acid vaccines.)(2003)Methods31(3);199−206)。SynGeneは使用の相対頻度に基づくコドン最適化のための数学的方法を使用する。簡単に言うと、コドンは、より頻度の高いコドンがより広い範囲を有するように、その頻度に従って割り当てられた値の範囲であり、頻度の昇順に並べられる。値の範囲は、>=0.000、>=0.0??、>=0.???などとして表される。0から0.99999の間に乱数が生じる。次いでコドンを選択するためにこれを使用し、これは乱数がその中に収まるような範囲を割り当てられたコドンであろう。希少コドンを排除するために、0.1−1.09999の範囲に収まるように、値0.1を乱数に加える。
Nef/Tat(pNTmおよびptrNTm)
Nef/Tat融合タンパク質の遺伝子がプラスミドpRIT15244(図3)において供給された。プラスミドpRIT15244はHisテイルが欠失している以外は以下に記載するpRIT14913と同じである。
Bru/Lai単離株からのNef遺伝子(Cell 40:9−17、1985)はコンセンサスNefに最も密接に関連するものに含まれるので、これを構築物に関して選択した。
nef遺伝子はプライマー01および02でpcDNA3/NefプラスミドからPCRにより増幅された。
プライマー01:5’ATCGTCCATG.GGT.GGC.AAG.TGG.T3[配列番号1]
SpeI
プライマー02:5’CGGCTACTAGTGCAGTTCTTGAA3[配列番号2 ]された
pRIT14913を構築するために、プライマー03および04でpCMVLys41/KGEプラスミドからPCRによりtat突然変異遺伝子を増幅した。
プライマー03:5’ATCGTACTAGT.GAG.CCA.GTA.GAT.3[配列番号3]
SpeI
プライマー04:5’CGGCTACTAGTTTCCTTCGGGCCT3’[配列番号4]
得られたPCRフラグメントおよびプラスミドpRIT14597(Nef−Hisタンパク質を発現する)はどちらもSpeI制限酵素によって消化され、アガロースゲル上で精製され、結紮されて、組み込みプラスミドpRIT14913を形成した。
gp120:コドン最適化gp120は前記のようにして提供された。
Nef/Tat融合タンパク質の遺伝子は前記のプラスミドpRIT15244において提供された。このプラスミドにおけるTatはトランス活性化機能を不活化する3つの突然変異を含有する。融合物は、N−末端切断により排除される、免疫調節機能を有する完全長Nef(CollinsおよびBoltimore(1999))を含有する。従って、構築物は完全長Nef/突然変異体Tat(pNTm)および切形Nef/突然変異体Tat(ptrNTm)(Nefの最初の65アミノ酸が除去されている)の両方について生成した。これらの配列を、次のプライマーを使用してpRIT15244からPCR増幅した:
5’Nef GAATTCGCGGCCGCCATGGGTGGCAAGTGGTCAAAAAG
5’trNef GAATTCGCGGCCGCCATGGTGGGTTTTCCAGTCACACC
3’Tat GAATTCGGATCCTTATTCCTTCGGGCCTGTCGGG[配列番号:5,6,7]
NotI−BamHIフラグメントとして遺伝子をベクターp7313−ie中にクローンし、配列化した。PNTmおよびptrNTmおよびNef/Tatおよび切断Nef/Tat配列を図4および5に示す。
Nef/TatおよびtrNef/Tat発現カセットをClaI−XmnI制限フラグメントとして切除し、コドン最適化gp120(pgp120c)を含有するベクターのClaIおよび平滑化されたSse8387I部位中に結紮して、両タンパク質の発現のための単一のプラスミド(それぞれpRIX1およびpRIX2)を得た。
pUC19のEam1105I−Pst1フラグメントを含有するベータ−ラクタマーゼ遺伝子(Amersham Pharmacia Biotech UK Ltd.、Amersham Place、Little Chalfont、Bucks、HP7 9NAから入手可能)を、カナマイシン耐性遺伝子を含有するpUC4KのEcoRIフラグメント(Amersham−Pharmacia)と置換し、続いてT4DNAポリメラーゼを用いて両フラグメントを平滑末端にすることにより、プラスミドを構築した。ヒトサイトメガロウイルスIE1プロモーター/エンハンサー、イントロンAは、Harriet Robinson博士(マサチューセッツ大学)から入手し、XhoI−Sal1フラグメントとしてpUC19のSal1部位中に挿入されたプラスミドJW4303から誘導され、ウシ成長ホルモンポリアデニル化シグナルを組み入れている。プロモーターからの5’SalI−BanIフラグメントの欠失により、ベクターにおいて用いられる最小プロモーターが生じた(WO00/23592−Powderject Vaccines Inc.)。HBV表面抗原3’UTRは、ベクターpAM6においてB型肝炎ウイルス、血清型adwから誘導された(Moriartyら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA、78、2606−10、1981)。pAM6(pBR322ベースのベクター)はAmerican Type Culture Collection(カタログ番号ATCC 45020)から入手した。3’UTRを、BamHI部位を除去するために挿入のために平滑末端化した1.4kb BamHIフラグメントとしてポリアデニル化シグナルに対して5’に挿入した。一連の工程(Bgl II、クレノウポリメラーゼ処理、BstX Iでの消化、Nco Iでの消化、オーバーハングを除去するためのマング・ビーンヌクレアーゼでの処理、およびBstX Iでのさらなる消化を含む)において、X遺伝子プロモーターとbGHpAシグナル間の5コドンよりも大きなオープンフィーディングフレームをすべて除去するためにHBV S遺伝子の3’未翻訳領域およびbGHpAシグナルの間の領域に修飾を施した。この結果、Xタンパク質の翻訳可能な部分(9アミノ酸)をコード化する配列およびX遺伝子開始コドンが欠失した。ウシ成長ホルモンポリアデニル化シグナルを、ウサギベータグロブリンポリアデニル化シグナルと置換した。S抗原の5’非コーディングおよびコーディング配列を切除し、オリゴヌクレオチドリンカーと置換すると、図示するような複数のクローニング部位が提供され、プラスミドp7313−PLが産生された。
Hind−−−NotI―― EcoRV− −NdeI− −BamHI
AGCTTGCGGCCGCTAGCGATATCGGTACCATATGTCGACGGATCC ・・・
... ACGCCGGCGATCGCTATAGCCATGGTCTACAGCTGCCTAGGCCGG
−NheI− −KpnI− −SalI− ΔNotI
[配列番号:8]
AspI− −MunI− NaeI− NdeI−− BglII−
GTACCGGTCAATTGGCGCCGGCGCGCCATATGACGTCAGATCTG−−−−
GCCAGTTAACCGCGGCCGCGCGGTATACTGCAGTCTAGACAGCT
AgeI− −NarI―― AatII− SalI
[配列番号9]
プロモーターおよびポリアデニル化シグナル間のHBV 3’UTR配列を、プライマー:
センス:CCATGGATCCGATCTTTTTCCCTCTGCC[配列番号10]
アンチセンス:GTTAGGGTGAAAAGCTTCCGAGTGAGAGACAC[配列番号11]
を用いてポリアデニル化シグナルのPCR増幅により除去した。
結果として得られる生成物を、BamHIおよびXmnIで切断し、ポリアデニル化シグナルおよび3’UTRの両方を含有する対応するフラグメントを置換するために使用した。
プライマー:
センス:GCTAGCCTGCAGGCTGACCGCCCAACGAC[配列番号12]
アンチセンス:GTTCTCCATCGCGGCCGCACTCTTGGCACGGGG[配列番号13]
を用いたCMVプロモーター/エンハンサーのPCR増幅により、イントロンA配列をプラスミドから除去した。
結果として得られる生成物をSse8387IおよびNotIで切断し、親ベクターのSse8387IおよびNotI部位中に挿入した。
gp120構築物を修飾して、タンパク質の分泌を減少させた。
分泌シグナルがないgp120(dsgp120、pRix12 図2および6参照)
次のプライマーを使用してgp120遺伝子をpgp120cからPCR増幅した:
5’120ds:5’GAATTCGCGGCCGCCATGGCCGAGCAGCTGTGGGTCACC[配列番号14]
L01:5’GAATTCGGATCCTCATCTCTGCACGACGCGGCGCTTGGCCCGGGTGGGGGCCACG[配列番号:15]
PWO DNAポリメラーゼ(Roche)およびサイクル:
95℃(30秒)95℃(30秒)50℃(30秒)72℃(90秒)72℃(120秒)4℃(保持) \____ 20回繰り返し____/
を使用してフラグメントを増幅した。
生成物をNotIおよびBamHIで切断し、p7317中にクローンして、pRix12を得た(図6)。
293T細胞において、分泌シグナルが欠失したベクターpRIX12は、良好な量の分泌されない60kDaの非グリコシル化タンパク質を形成する。
ベクター構築:
pg120およびNer/Tat(m)またはtrNef/Tat(m)orfsをステッチするPCRにより、gp120Nef/Tat(m)構築物を得た。
5’および3’Gp120、5’および3’Nef/Tat(m)および5’trNef/TatをpRix1から増幅した。3’trNef/Tat(m)をpNTmから増幅した。次のプライマーを使用した:
3’120:(アンチセンス):GCCAAGCGCCGCGTCGTGCAGAGA[配列番号16]
5’120/NT:
GCCAAGCGCCGCGTCGTGCAGAGAATGGGTGGCAAGTGGTCAAAAAGT[配列番号17]
3’NT(アンチセンス):GGGGAGCCGACAGGCCCGAAGGAA[配列番号18]
5’NT/120:
GGGGAGCCGACAGGCCCGAAGGAAATGAAGGTCAAGGAGACCAGAAAG[配列番号19]
5’120/trN:
GCCAAGCGCCGCGTCGTGCAGAGAATGGTGGGTTTTCCAGTCAC[配列番号20]
5’trNef:
GAATTCGCGGCCGCCATGGTGGGTTTTCCAGTCACACC [配列番号21]
L01:
GAATTCGGATCCTCATCTCTGCACGACGCGGCGCTTGGCCCGGGTGGGGGCCACG[配列番号:22]
L02:
ACCACCTTGTACTTGTACAGCTCGCTCCGCCAGTTATCCCTCATGTCGCCGCCGCCGGGC[配列番号23]
95℃(60秒)95℃(30秒)55℃(30秒)72℃(120秒)72℃(120秒)4℃(保持) \____ 20回繰り返し____/
を使用して増幅した。
プライマーL1を3’gp120の3’プライマーとして使用した。しかしながら、Nef/TatまたはtrNef/Tをgp120の5’末端とステッチする場合にこのプライマーを使用すると問題があったので、プライマーL2を代わりに使用した。
図33および34(概略図)に示すようにベクターを構築した。
pRix6(2315bp)およびpRix11(2123bp)からのAccI−BamHIフラグメントを同様に切断されたRix12(ds gp120c)中に移すことにより、ds gp120c NefTatmおよびds gp120c trNefTatを含有するpRix28および29が生成した。
Tatがないgp120c Nefのグリコシル化および非グリコシル化融合ベクターを生成するために、NotI−KpnIフラグメントをpRix11(1580bp)またはpRix29(1496bp)から同様に切断されたpRix15、Tat/trNefを含有するベクター中に移した。
TatおよびtrNefの遺伝子は次のプライマーを使用してpNTmからPCR増幅された:
5’Tat:5’GAATTCGCGGCCGCCATGGAGCCAGTAGATCCTAGAC[配列番号24]
3’Tat:’TTCCTTCGGGCCTGTCGGC[配列番号25]
5’trTN:GCCGACAGGCCCGAAGGAAATGGTGGGTTTTCCAGTCACAC[配列番号26]
3’Nef:GAATTCGGATCCTTAGCAGTTCTTGAAGTACTCCGG[配列番号27]
個々の遺伝子をゲル精製し、次いでエンドプライマーを使用してTmtrNを得るためにPCRステッチした。融合物を次いでNotIおよびBamHIで消化し、p7313−ie中にクローンした。
p17/24を含有する融合物を生成するために、プライマーU1および3’120を用いてpgp120cからgp120をPCR増幅し、プライマー5’120Gおよび3’Nefを使用してp73i−GN2からp17/24−Nefを増幅し、U1および3’Nefを使用して両者をPCRステッチした。p73I−GN2はHXB2(GenBankエントリーK03455)に基づくp17/p24の合成コドン最適化配列を含有し、SynGeneを使用して設計され、前記のコドン最適化gp120について記載したように重複オリゴヌクレオチドから組み立てられ、プラスミドpHXBΔPr(B.Maschera、E FurfineおよびE.D.Blair 195 J.Virol 69 5431−5436)からPCRにより得たHXB2 Nefと融合させた。このプラスミドにおけるHXB2 nef遺伝子は早期終止コドンを含有するので、2つの重複するPCRを使用してコドン(TGA[stop]からTGG[Trp])を修復した。修復されたコドンの位置は配列において下線を施した。p17/p24/Nef遺伝子をプラスミドp7313ieのNotIおよびBamHI部位中に挿入した。コーディング配列およびマップを図10位示す。*はp24/trNef接合点を表わす。
U1:
GAATTCGCGGCCGCAATGAAGGTCAAGGAGACCAGAAAGAACTACCAGCATCTGTG[配列番号28]
3’120:TCTCTGCACGACGCGGCGCTTGGC[配列番号29]
5’120G:
GCCAAGCGCCGCGTCGTGGAGAGAATGGGTGCCCGAGCTTCGGTAC[配列番号30]
3’Nef:GAATTCGGATCCTTAGCAGTTCTTGAAGTACTCCGG[配列番号31]
初期サイクル:
94℃(30秒)20x[94℃(30秒)50℃(30秒)68℃(180秒)]68℃(120秒)4℃(0秒)
pfxポリメラーゼと1×エンハンサーを使用。
ステッチ:
94℃(30秒)20x[94℃(30秒)50℃(30秒)72℃(180秒)]72℃(120秒)4℃(0秒)
標準条件においてVentポリメラーゼ+2mM MgCl2を使用。
配列化すると、構築物はシグナルペプチドにおいて誤差を有することが見いだされ、これはgp120の後部からNefの前部までを含有する2560bp BstEII−KpnIフラグメントをpRix30中に移すことにより修正された。
Nefの後部からNefの前部までを含有する2560bpのBstEII−KpnIフラグメントをpRix31、pRix11およびpRix29に移して、それぞれベクターpRix33(図11)、34および35(図12)を形成した。
pRix39(最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−Nef−Tat−図13)およびpRix40−47(構築物pRix40−47は非グリコシル化gp120、gag−p17/24、Nefおよび、ミリスチル化部位において突然変異および/またはNefのジロイシンモチーフを有するTat(m)融合物を含有する)
プライマー:
5’120G:GCCAAGCGCCGCGTCGTGGAGAGAATGGGTGCCCGAGCTTCGGTAC[配列番号32]
および
p24AS:CAACACTCTGGCTTTGTGTCC[配列番号33]
を用いて、gag p17/24を含有するフラグメントをベクターpRix35からPCR増幅した。
5’p24−N:GGACACAAAGCCAGAGTGTTGATGGGCAAGTGGTCAAAAAGTAG[配列番号34]
および
3’Nef:GAATTCGGATCCTTAGCAGTTCTTGAAGTACTCCGG[配列番号35]
を使用して、完全長NefをpNTmからPCR増幅した。
5’p24−Ndm:
GGACACAAAGCCAGAGTGTTGATGGGCAAGTGGTCAAAAAGTAG[配列番号36]
G H K A R V L| M G K W S K S
と置換する以外は同様にしてpRix40(図14)を構築した。
Nef(L174L175)におけるジロイシンモチーフに対する突然変異をPCR により行った:
突然変異を挿入するために、5’NefプライマーおよびasNefLLを使用して、LLモチーフに対するNef5’の部分をPCR増幅した。
5’Nef GAATTCGCGGCCGCCATGGGTGGCAAGTGGTCAAAAAG[配列番号37]
asNefLL(アンチセンス)
GCCAATAAAGGAGAGAACACCAGC[配列番号38]
A N K G E N T S
L174、L175または174および175の両方に対する突然変異は、順プライマー
sNefL1 (L174A)
GCCAATAAAGGAGAGAACACCAGCGCCTTACACCCTGTGAGCCTGCATG
A N K G E N T S| A L H P V S L H
[配列番号39]
sNefL2 (L175A)
GCCAATAAAGGAGAGAACACCAGCTTGGCACACCCTGTGAGCCTGCATG
A N K G E N T S| L a H P V S L H
[配列番号40]
SnefLL(LL174/5AA)
GCCAATAAAGGAGAGAACACCAGCGCCGCACACCCTGTGAGCCTGCATG
A N K G E N T S| A A H P V S L H
[配列番号41]
および3’NTプライマー:
3’NT(アンチセンス):GGGGAGCCGACAGGCCCGAAGGAA [配列番号42]
を使用して、Nefの3’部分を増幅するために生じた。5’および3’産物のそれぞれを、5’Nefおよび3’NTプライマーを使用してPCRステッチした。これらをKpnIおよびSpeIで切断し、同様に切断されたpRix39中に挿入して、pRix41(L174A)、pRix42(L175A)およびpRix43(LL174/175A)がミリストイル化部位突然変異の不在下で生じるか、あるいはpRix40中に挿入されて、ミリストイル化突然変異を有するpRix44(mLL174/175AA)pRix46(mL174A)およびpRix47(mL175A)が生じた。
シグナル配列がないgp120フラグメントを、プライマー:
5’ds120:GAATTCGCGGCCGCCATGGCCGAGCAGCTGTGGGTCACC[配列番号43]
3’120:(アンチセンス):GCCAAGCGCCGCGTCGTGCAGAGA [配列番号44]
を使用してpgp120cからPCR増幅した。
RTの5’末端(最適化され、W229K不活化突然変異を含むコドン)を、3’120とホモローガスな配列を挿入するために5’プライマー、およびRT内のプライマーを用いて、pt−rng(図32−WO03/025003を参照)からPCR増幅した。
120RTf:GCCAAGCGCCGCGTCGTGCAGAGAATGGGCCCCATCAGTCCCATC[配列番号45]
RT3SR1:CGTCACGATGTTCACCTCCAGGCC[配列番号46]
エンドプライマーを用いて2つの生成物をPCRステッチし、NotIおよびNheIで切断した。フラグメントをゲル精製し、pT−rngからNotI−NheIフラグメントを置換するために使用した。
GagMunf
GTGGCCCGAGAGCTGCATCCG [配列番号47]
GAG120R(アンチセンス:)
Gag −−−−−−−−−−−−−−−−−− ds120
GGACACAAAGCCAGAGTGTTGATGGCCGAGCAGCTGTGGGTCACCGTC
[配列番号48]
生成物をMunIおよびBstEIIで切断し、MunI−BstEII切断pRix54からの7113bpフラグメント中に挿入した。
pRix48および49(図30および31)
プラスミドpRix48および49は、グリコシル化gp120を含む以外はpRix39および41と等しい。pRix48およびpRix49を生成するために、pRix39およびpRix41のNotI−SalIフラグメントをpRix32からの等価なフラグメントと置換した。
発現データを図33および35に示す。
Andre S.Seed B.Eberle J.Schraut W.Bultmann A.Haas J.(1998)最適化されたコドン使用を有する合成gp120配列を用いたDNAワクチン接種により惹起される増大した免疫反応(Increased immune response elicited by DNA vaccination with a synthetic gp120 sequence with optimized codon usage.)Journal of Virology.72(2):1497−503.
Vinner L.Nielsen HV.Bryder K.Corbet S.Nielsen C.Fomsgaard A.(1999)哺乳動物コドンを使用したRev−非依存性合成HIV−1gp160エンベロープ遺伝子での遺伝子銃DNAワクチン接種(Gene gun DNA vaccination with Rev−independent synthetic HIV−1 gp160 envelope gene using mammalian codons.)Vaccine.17(17):2166−75
Collins KL.Baltimore D.(1999)細胞免疫反応のHIVの回避(HIV’s evasion of the cellular immune response.)Immunological Reviews.168:65−74.
Accell遺伝子導入装置のカートリッジの調製は既に記載されたとおりであった(Eisenbraunら、DNA and Cell Biology、1993 第12巻 No.9 791−797ページ;Pertnerら)。簡単に言うと、プラスミドDNAを2μm金粒子(DeGussa Corp.,South Plainfield,N.J.、USA)上にコートし、Tefzel管中にロードし、これをカートリッジとしての働きをするように次いで1.27cmの長さに切断し、使用するまで4℃で乾燥保存した。典型的なワクチン接種において、各カートリッジは0.5mgの合計0.5μgのDNA/カートリッジでコートされた金を含有していた。
プロトコル:PMIDに関して、実施例5および6に記載するような標準法を使用するために免疫化(DNA)カートリッジを調製した。約0.5μgのDNA/カートリッジをもたらすDNAローディング速度2を使用し、各免疫化は2回の注射からなっていた。Balb/cマウスにDNAの一次免疫を行った(PMIDを使用)。マウスに28日後DNAで追加抗原投与を行った(PMIDを使用)。マウスを7日後に処分し、血清および脾臓を集めた。脾臓細胞を抽出することにより、脾臓細胞を収穫し、赤血球を溶解させた。脾臓細胞を洗浄し、計数した。特殊ELIspotプレート(インターフェロン−ガンマ捕捉抗体でコートされ、ブロックされたもの)を使用した。脾臓細胞をこれらのプレートに移し、gp120ペプチド、RTペプチドまたはGagペプチドの存在下、37℃/5%CO2で一夜インキュベートした。脾臓細胞を溶解させ、存在するインターフェロン−ガンマ分泌細胞の数を示すために標準的手順を用いてプレートを展開させた。特定の抗体を検出するためのELISA分析により血清を分析した。結果を図36〜38に示す。
意外にも、構築物を発現するdsgp120(分泌シグナルが欠失したgp120)で免疫化された細胞性免疫反応は、gp120構築物で免疫化されたマウスの約2倍であった(図36および37参照)。これは、インビトロトランスフェクション研究において、degp120の発現は関連する細胞の大部分は残存していたが、gp120は排出されたという観察と一致した。
Claims (34)
- ヘテロローガスなプロモーターに操作可能に結合した、HIV非構造またはカプシドタンパク質またはフラグメントあるいはその免疫原性誘導体をコード化する少なくとも1つの配列に融合した、HIVエンベロープタンパク質またはフラグメントあるいはその免疫原性誘導体をコード化する配列を含むポリヌクレオチド。
- HIVエンベロープタンパク質がgp120またはフラグメントあるいはその免疫原性誘導体である請求項1記載のポリヌクレオチド。
- 少なくとも1つの非構造またはカプシドタンパク質またはフラグメントあるいはその免疫原性誘導体がNef、Gag、RTまたはTatの1つまたはそれ以上から選択される請求項1または請求項2記載のポリヌクレオチド。
- gp120コード化配列が、gp120、RT、GagおよびNef−含有融合タンパク質をコード化する、HIV RTまたはフラグメントあるいはその免疫原性誘導体をコード化する配列およびHIV Gagまたはフラグメントあるいはその免疫原性誘導体をコード化する配列およびHIV Nefまたはフラグメントまたは免疫原性誘導体をコード化する配列と結合している請求項3記載のポリヌクレオチド。
- 融合が、gp120−RT−Nef−GagおよびRT−Nef−Gag−gp120から選択される請求項4記載のポリヌクレオチド。
- gp120コード化配列が、gp120およびNef−含有融合タンパク質をコード化するために、HIV Nefをコード化する配列またはその免疫原性誘導体と結合している請求項3記載のポリヌクレオチド。
- gp120配列がさらに、gp120、TatおよびNef−含有融合タンパク質をコード化するために、HIV Tatまたはフラグメントあるいはその免疫原性誘導体をコード化する配列と結合している請求項6記載のポリヌクレオチド。
- gp120−Nef−Tat融合をコード化する請求項7記載のポリヌクレオチド。
- さらに、gp120−Gag−Nef−Tat融合物をコード化するためにHIV Gagまたはフラグメントあるいはその免疫原性誘導体をコード化する配列を含む請求項7記載のポリヌクレオチド。
- Gagがp17および/または24を含む請求項3、4、5または9のいずれか1つに記載のポリヌクレオチド。
- HIVエンベロープ分子が哺乳動物標的細胞において発現される場合に実質的にグリコシル化されていない請求項1〜10のいずれか1つに記載のポリヌクレオチド。
- HIVエンベロープ分子が機能的分泌シグナルに欠けている請求項11記載のポリヌクレオチド。
- gp120、Nef、Gag、RTまたはTatをコード化する1つまたはそれ以上の配列が、高度に発現されたヒト遺伝子におけるコドン用途に類似するように最適化されたコドンである請求項1〜12のいずれか1つに記載のポリヌクレオチド。
- 次の群から選択されるポリヌクレオチド配列:
1.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−trNef
2.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−trNef−mTat
3.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−Nef−mTat
4.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24Gag−trNef
7.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24Gag−trNef−mTat
8.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−Nef−mTat
9.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−mNef−mTat
10.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−L1Nef−mTat
11.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−L2Nef−mTat
12.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24Gag−LLNef−mTat
13.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−mLLNef−mTat
14.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−mL1Nef−mTat
15.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−p17/24gag−mL2Nef−mTat
16.最適化されたgp120コドン−trNef
17.最適化されたgp120コドン−trNef−mTat
18.最適化されたgp120コドン−Nef−mTat
19.最適化されたNef−mTat−gp120コドン
20.最適化されたtrNef−mTat−gp120コドン
21.最適化されたgp120コドン−p17/24Gag−trNef
22.最適化されたgp120コドン−p17/24Gag−trNef−mTat
23.最適化されたgp120コドン、マイナス分泌シグナル−mRT−trNef−p17/24Gag
24.最適化されたmRT−trNef−p17/24Gag−gp120コドン、マイナス分泌シグナル(RTおよびGagは最適化されたコドンである)。 - プロモーターがHCMV IE遺伝子からのプロモーターである請求項1〜14のいずれか1つに記載のポリヌクレオチド。
- プロモーターとコーディングポリヌクレオチド間の5’未翻訳領域がエクソン1を含む請求項15記載のポリヌクレオチド。
- 請求項1〜16のいずれか1つに記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
- 二本鎖DNAプラスミドである請求項17記載のベクター。
- 複製能欠損アデノウイルスベクターである請求項17記載のベクター。
- Pan9、5、6または7から誘導される請求項19記載のベクター。
- HIVエンベロープタンパク質またはフラグメントあるいはその免疫原性誘導体および非構造またはカプシドタンパク質から選択される少なくとも1つの追加のHIVタンパク質またはフラグメントまたは免疫原性誘導体を含む融合タンパク質。
- 融合物がgp120−RT−Nef−GagおよびRT−Nef−Gag−gp120から選択される請求項21記載の融合タンパク質
- 請求項1〜20のいずれか1つに記載のポリヌクレオチドまたはベクターによりコード化されるポリペプチド。
- 請求項1〜16のいずれか1つに記載のヌクレオチド配列、請求項17〜20のいずれか1つに記載のベクター、請求項21または22記載の融合タンパク質または請求項23記載のポリペプチド、および医薬上許容される賦形剤、希釈剤、担体またはアジュバントを含む医薬組成物。
- 担体が金ビーズなどの複数の粒子である請求項24記載の医薬組成物。
- プライムブーストフォーマットにおいて送達される請求項24または25記載の医薬組成物。
- 請求項24〜26のいずれか1つに記載の医薬組成物を含む皮内送達装置。
- 安全で有効な量の請求項24〜26のいずれか1つに記載の医薬組成物を投与することを含む病気にかかっているかまたはかかりやすい患者を治療する方法。
- 医学において用いられる請求項1〜23のいずれか1つに記載のポリヌクレオチドまたはベクターまたは融合タンパク質またはポリペプチド。
- 疾患の治療用医薬の製造における請求項1〜23のいずれか1つに記載のポリヌクレオチドまたはベクターまたは融合タンパク質またはポリペプチドの使用。
- HIVエンベロープタンパク質またはフラグメントあるいは免疫原性誘導体をコード化するヌクレオチド配列、好ましくは非グリコシル化gp120配列、およびHIV非構造またはカプシドタンパク質またはフラグメントあるいは免疫原性誘導体をコード化する配列をヘテロローガスなプロモーター配列と結合させることを含む、請求項1〜16のいずれか1つに記載のポリヌクレオチドの産生法。
- 少なくとも2つのさらなるHIV抗原との融合物においてHIV Tat分子またはフラグメントあるいは免疫原性誘導体をコード化するポリヌクレオチド。
- 2つのさらなるHIV抗原がgp120およびNefおよび任意のGagおよび/またはRT、またはフラグメントあるいはその免疫原性誘導体を含む請求項32記載のポリヌクレオチド。
- 請求項32または33記載のポリヌクレオチドによりコード化されるTat含有融合物。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB0225786.3A GB0225786D0 (en) | 2002-11-05 | 2002-11-05 | Vaccine |
PCT/EP2003/012429 WO2004041851A2 (en) | 2002-11-05 | 2003-11-03 | Vaccine |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2006519585A true JP2006519585A (ja) | 2006-08-31 |
Family
ID=9947245
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2004549145A Pending JP2006519585A (ja) | 2002-11-05 | 2003-11-03 | Hivワクチン |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20060142221A1 (ja) |
EP (1) | EP1558635B1 (ja) |
JP (1) | JP2006519585A (ja) |
AR (1) | AR041765A1 (ja) |
AU (1) | AU2003285320A1 (ja) |
CA (1) | CA2505208A1 (ja) |
DE (1) | DE60328408D1 (ja) |
ES (1) | ES2328685T3 (ja) |
GB (1) | GB0225786D0 (ja) |
TW (1) | TW200502245A (ja) |
WO (1) | WO2004041851A2 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006520185A (ja) * | 2002-11-05 | 2006-09-07 | グラクソ グループ リミテッド | Hivワクチン |
JP2010168288A (ja) * | 2009-01-20 | 2010-08-05 | Yokohama City Univ | 最適化した抗原遺伝子の使用によるウイルスワクチンの免疫原性の増強 |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8206950B2 (en) | 2003-06-09 | 2012-06-26 | Animal Technology Institute Taiwan | Fusion antigen used as vaccine and method of making them |
GB0405480D0 (en) * | 2004-03-11 | 2004-04-21 | Istituto Superiore Di Sanito | Novel tat complexes,and vaccines comprising them |
GB0417494D0 (en) * | 2004-08-05 | 2004-09-08 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
CN103088060A (zh) * | 2005-05-12 | 2013-05-08 | 葛兰素集团有限公司 | 疫苗组合物 |
GB0526210D0 (en) * | 2005-12-22 | 2006-02-01 | Oxford Biomedica Ltd | Vectors |
US20070243587A1 (en) * | 2006-04-14 | 2007-10-18 | Healthbanks Biotech Co., Ltd. | Using a reverse genetic engineering platform to produce protein vaccines and protein vaccine of avian influenza virus |
GB0815872D0 (en) * | 2008-09-01 | 2008-10-08 | Pasteur Institut | Novel method and compositions |
EP2405945A4 (en) * | 2009-03-13 | 2012-09-12 | Lentigen Corp | NON-INTEGRAL RETROVIRAL VECTOR VACCINES |
US9358281B2 (en) * | 2009-10-09 | 2016-06-07 | New York University | Methods, agents and peptides for inducing an innate immune response in HIV vaccination |
WO2011139385A2 (en) * | 2010-05-07 | 2011-11-10 | Duke University | Genetic signatures in hiv-1 subtype c envelope glycoproteins |
WO2012009709A1 (en) * | 2010-07-16 | 2012-01-19 | Sudhir Paul | Hiv cd4 binding site based covalent immunogen compositions |
WO2015123592A2 (en) | 2014-02-13 | 2015-08-20 | Synthetic Genomics, Inc. | Recombinant rna particles and methods of use |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1995032000A1 (en) * | 1994-05-20 | 1995-11-30 | Microgenesys, Inc. | Hiv polyprotein immunogens |
WO2001054719A2 (en) * | 2000-01-31 | 2001-08-02 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Vaccine for the prophylactic or therapeutic immunization against hiv |
WO2002087614A2 (en) * | 2001-04-27 | 2002-11-07 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Multivalent vaccine comprising an hiv antigen and an hsv antigen and/or an hpv antigen |
JP2006520185A (ja) * | 2002-11-05 | 2006-09-07 | グラクソ グループ リミテッド | Hivワクチン |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR0172970B1 (ko) * | 1992-06-17 | 1999-02-01 | 김영길 | Aids백신에 유용한 키메릭 단백 및 그의 제조방법 |
WO1998041536A1 (en) * | 1997-03-14 | 1998-09-24 | President And Fellows Of Harvard College | Glycosylation deficient siv and hiv envelope glycoproteins |
AU1023401A (en) * | 1999-10-12 | 2001-04-23 | Institut Pasteur | Design of a polyepitopic construct for the induction of hla-a2.1 restricted hiv 1 specific ctl responses using hhd mice |
GB0027088D0 (en) * | 2000-11-06 | 2000-12-20 | Glaxo Group Ltd | DNA expression vectors |
EP1311686A2 (en) * | 2000-08-14 | 2003-05-21 | THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by THE SECRETARY, DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES | Modifications of hiv env, gag, and pol enhance immunogenicity for genetic immunization |
CU23235A1 (es) * | 2001-02-28 | 2007-09-26 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | POXVIRUS RECOMBINANTES PARA PROTEINAS QUIMéRICAS DEL VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA Y SU APLICACION EN LA TERAPéUTICA Y LA PREVENCION DEL SIDA |
-
2002
- 2002-11-05 GB GBGB0225786.3A patent/GB0225786D0/en not_active Ceased
-
2003
- 2003-11-03 TW TW092130658A patent/TW200502245A/zh unknown
- 2003-11-03 AU AU2003285320A patent/AU2003285320A1/en not_active Abandoned
- 2003-11-03 DE DE60328408T patent/DE60328408D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2003-11-03 JP JP2004549145A patent/JP2006519585A/ja active Pending
- 2003-11-03 WO PCT/EP2003/012429 patent/WO2004041851A2/en active Application Filing
- 2003-11-03 CA CA002505208A patent/CA2505208A1/en not_active Abandoned
- 2003-11-03 US US10/533,841 patent/US20060142221A1/en not_active Abandoned
- 2003-11-03 ES ES03778306T patent/ES2328685T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-11-03 EP EP03778306A patent/EP1558635B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-11-04 AR ARP030104034A patent/AR041765A1/es unknown
-
2007
- 2007-04-12 US US11/734,464 patent/US20070248679A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1995032000A1 (en) * | 1994-05-20 | 1995-11-30 | Microgenesys, Inc. | Hiv polyprotein immunogens |
WO2001054719A2 (en) * | 2000-01-31 | 2001-08-02 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Vaccine for the prophylactic or therapeutic immunization against hiv |
WO2002087614A2 (en) * | 2001-04-27 | 2002-11-07 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Multivalent vaccine comprising an hiv antigen and an hsv antigen and/or an hpv antigen |
JP2006520185A (ja) * | 2002-11-05 | 2006-09-07 | グラクソ グループ リミテッド | Hivワクチン |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006520185A (ja) * | 2002-11-05 | 2006-09-07 | グラクソ グループ リミテッド | Hivワクチン |
JP2010168288A (ja) * | 2009-01-20 | 2010-08-05 | Yokohama City Univ | 最適化した抗原遺伝子の使用によるウイルスワクチンの免疫原性の増強 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
GB0225786D0 (en) | 2002-12-11 |
AR041765A1 (es) | 2005-05-26 |
US20060142221A1 (en) | 2006-06-29 |
AU2003285320A8 (en) | 2004-06-07 |
US20070248679A1 (en) | 2007-10-25 |
WO2004041851A2 (en) | 2004-05-21 |
ES2328685T3 (es) | 2009-11-17 |
EP1558635B1 (en) | 2009-07-15 |
CA2505208A1 (en) | 2004-05-21 |
TW200502245A (en) | 2005-01-16 |
DE60328408D1 (de) | 2009-08-27 |
WO2004041851A3 (en) | 2005-03-17 |
AU2003285320A1 (en) | 2004-06-07 |
EP1558635A2 (en) | 2005-08-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20070248679A1 (en) | Vaccine | |
JP4601956B2 (ja) | Hiv−gagのコドン最適化dnaワクチン | |
CA2184345C (en) | Coordinate in vivo gene expression | |
JP4580410B2 (ja) | 改善された免疫応答を誘導し得る発現ベクターおよびこのベクターの使用方法 | |
AU2002362368A1 (en) | HIV-gag codon-optimised DNA vaccines | |
US7655235B2 (en) | Vaccine | |
CA2258568A1 (en) | Vaccines comprising synthetic genes | |
JP2010187681A (ja) | HIVに対する免疫のためのgp120と、Nef及び/又はTatを含むワクチン | |
JP2004537303A (ja) | 抗原性b型hivポリペプチドおよび/または抗原性c型hivポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、それらのポリペプチドおよびそれらの使用 | |
KR20030047667A (ko) | SIVmac239의 면역원성 플라스미드 및 이들을 함유한AIDS DNA 백신 | |
RU2312896C2 (ru) | Последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая белок gag вич-1, способ получения указанной последовательности, вектор, содержащий ее, белок, кодируемый ею, фармацевтическая композиция и их применение для профилактики и/или лечения вич-инфекции и спида | |
KR101067231B1 (ko) | Hiv-gag 코돈-최적화된 dna 백신 | |
ES2364466T3 (es) | Vacunas de adn optimizadas por codón rt-nef-gaf para vih. | |
CN101255434A (zh) | 疫苗 | |
WO2003048366A1 (en) | Sivmac239 immunogenic plasmids and aids dna vaccine containing the same | |
EP1729801A2 (en) | Mutant viral nucleic acids and vaccine containing same |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060927 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20091104 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100204 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100212 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100304 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100311 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100405 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100412 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100506 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20100615 |