JP2006504626A - Morpholine derivatives and intermediates thereof - Google Patents

Abstract

本発明は、
式(I):
【化１】

の化合物（3-([([(2S)-4-(3,4-ジクロロベンジル)モルホリン-2-イル]メチルアミノ)カルボニル]-アミノメチル)-N-エチルベンズアミド）、およびその塩および溶媒和化合物、それらの調製法、それら化合物を含む医薬組成物および治療におけるそれらの使用に関する。The present invention
Formula (I):
[Chemical 1]

(3-([([((2S) -4- (3,4-dichlorobenzyl) morpholin-2-yl] methylamino) carbonyl] -aminomethyl) -N-ethylbenzamide), and salts and solvents thereof The present invention relates to sum compounds, their preparation, pharmaceutical compositions containing these compounds and their use in therapy.

Description

本発明は新規化合物、それを製造する方法、それを含有する医薬組成物、および治療におけるそれの使用に関する。   The present invention relates to novel compounds, methods of making them, pharmaceutical compositions containing them, and their use in therapy.

炎症は、組織傷害または微生物侵害に対する一次応答であり、内皮への白血球接着、血管外遊出および組織内活性化を特徴とする。白血球活性化は、毒性酸素種（スーパーオキシドアニオンなど）の産生、および顆粒産物（ペルオキシダーゼおよびプロテアーゼなど）の放出を生じ得る。循環中の白血球には、好中球、好酸球、好塩基球、単球およびリンパ球が含まれる。様々な炎症の形態は、様々な浸潤する白血球のタイプと関わりがあり、特定のプロファイルは組織内の接着分子、サイトカインおよび走化因子発現のプロファイルにより調節される。   Inflammation is the primary response to tissue injury or microbial infestation and is characterized by leukocyte adhesion to the endothelium, extravasation and intra-organizational activation. Leukocyte activation can result in the production of toxic oxygen species (such as superoxide anions) and the release of granule products (such as peroxidases and proteases). Circulating white blood cells include neutrophils, eosinophils, basophils, monocytes and lymphocytes. Different forms of inflammation are associated with different types of infiltrating leukocytes, and specific profiles are regulated by profiles of adhesion molecules, cytokines and chemotactic factors in the tissue.

白血球の一次機能は、宿主を細菌および寄生虫などの侵入生物から守ることにある。組織が一旦傷害を受けるかまたは感染すると、循環系から患部組織への白血球の局所補充を引き起こす一連の事象が起こる。白血球補充は、外来または死滅細胞の規則的な破壊および食作用が行われ、次いで組織が修復されかつ炎症性浸潤物が吸収されるように制御される。しかし、慢性炎症状態においては、補充が不適切であることも多く、吸収が適切に制御されず、その結果、炎症反応は組織の破壊をもたらす。   The primary function of leukocytes is to protect the host from invading organisms such as bacteria and parasites. Once the tissue is injured or infected, a series of events occur that cause local recruitment of leukocytes from the circulatory system to the affected tissue. Leukocyte recruitment is controlled such that regular destruction and phagocytosis of foreign or dead cells occurs, and then the tissue is repaired and inflammatory infiltrates are absorbed. However, in chronic inflammatory conditions, supplementation is often inadequate and absorption is not properly controlled, so that the inflammatory response results in tissue destruction.

喘息の特徴である気管支の炎症は細胞介在免疫の特殊な形態を表し、T-ヘルパー2（Th2）リンパ球によって放出されるIL-4およびIL-5などのサイトカイン産物が、顆粒球、特に好酸球および、程度は低いが、好塩基球の蓄積と活性化の準備を整えるという証拠が増えている。好酸球は、細胞傷害性の塩基性タンパク質、前炎症メディエータおよび酸素ラジカルの放出を介して、粘膜障害をもたらしかつ気管支過敏性の原因となる機構を開始させる。従って、Th2細胞および好酸球の補充と活性化をブロックすることは、喘息において抗炎症性を有すると思われる。さらに、好酸球は、鼻炎、湿疹、過敏性腸症候群および寄生虫感染などの他の疾患型に関わることが指摘されている。   Bronchial inflammation, characteristic of asthma, represents a special form of cell-mediated immunity, and cytokine products such as IL-4 and IL-5 released by T-helper 2 (Th2) lymphocytes are particularly preferred for granulocytes. There is increasing evidence that eosinophils and, to a lesser extent, are ready for basophil accumulation and activation. Eosinophils initiate a mechanism that causes mucosal damage and causes bronchial hypersensitivity through the release of cytotoxic basic proteins, pro-inflammatory mediators and oxygen radicals. Therefore, blocking recruitment and activation of Th2 cells and eosinophils appears to be anti-inflammatory in asthma. In addition, eosinophils have been implicated in other disease types such as rhinitis, eczema, irritable bowel syndrome and parasitic infections.

ケモカインは、白血球の流通および補充に関わる小タンパク質の大きなファミリーである（総説として、例えば、Luster, New Eng. J. Med., 338, 436-445 (1998)を参照）。ケモカインは広範囲の様々な細胞により放出され、好酸球、好塩基球、好中球、マクロファージ、TおよびBリンパ球を始めとする様々な細胞型を誘引しかつ活性化する作用を果たす。ケモカインには２つの大きなファミリー、CXC-(α)およびCC-(β)ケモカインがあり、ケモカインタンパク質のアミノ末端に近い２つの保存されたシステイン残基の間隔により分類される。ケモカインは、Gタンパク質共役型7回膜貫通ドメインタンパク質のファミリーに属する特定の細胞表面レセプターと結合する（総説は、例えばLuster, 1998を参照)。ケモカインレセプターが活性化すると、他の応答のなかでも、細胞内カルシウムの増加、細胞形状の変化、細胞接着分子発現の増加、脱顆粒、および細胞遊走（走化性）の促進が起こる。   Chemokines are a large family of small proteins involved in the distribution and recruitment of leukocytes (for review see, for example, Luster, New Eng. J. Med., 338, 436-445 (1998)). Chemokines are released by a wide variety of cells and act to attract and activate various cell types including eosinophils, basophils, neutrophils, macrophages, T and B lymphocytes. There are two large families of chemokines, CXC- (α) and CC- (β) chemokines, sorted by the spacing of two conserved cysteine residues close to the amino terminus of the chemokine protein. Chemokines bind to specific cell surface receptors belonging to the family of G protein-coupled seven transmembrane domain proteins (for a review, see for example Luster, 1998). Activation of chemokine receptors results in increased intracellular calcium, changes in cell shape, increased expression of cell adhesion molecules, degranulation, and promotion of cell migration (chemotaxis), among other responses.

現在、複数のCCケモカインレセプターが同定されていて、本発明にとって特に重要なものは、好酸球に、およびまた好塩基球、肥満細胞およびTh2細胞において主に発現されるCC-ケモカインレセプター-3（CCR-3）である。RANTES、MCP-3およびMCP-4などのCCR-3に作用するケモカインは、好酸球を補充しかつ活性化することが公知である。特に重要なのは、CCR-3と特異的に結合するエオタキシンおよびエオタキシン-2である。CCR-3ケモカインの局在と機能は、これらが喘息などのアレルギー疾患の発症に中心的な役割を果たすことを示す。このようにCCR-3は、炎症性アレルギー応答に関わる主な細胞型の全てに特異的に発現する。CCR-3に作用するケモカインは炎症性刺激に応答して産生し、そしてこれら細胞型を炎症部位に補充し、かつそれらを活性化する作用を果たす（例えば、Griffiths ら, J. Exp. Med., 179, 881-887 (1994)、Lloyd ら, J. Exp. Med., 191, 265-273 (2000)）。さらに、抗CCR-3モノクローナル抗体は、完全に好酸球とのエオタキシン相互作用を阻害する（Heath, H. ら, J. Clin. Invest. 99 (2), 178-184 (1997)）一方で、CCR-3特異的ケモカインであるエオタキシンに対する抗体は、喘息の動物モデルにおける気管支過敏性および肺好酸球増加症の両方を軽減させる（Gonzaloら, J. Exp. Med., 188, 157-167 (1998)）。このように、多方面の証拠は、CCR-3レセプターのアンタゴニストがある範囲の炎症性症状の治療にほぼ間違いなく利用し得ることを示す。   Currently, multiple CC chemokine receptors have been identified and of particular importance to the present invention are CC-chemokine receptors-3 that are predominantly expressed in eosinophils and also in basophils, mast cells and Th2 cells. (CCR-3). Chemokines that act on CCR-3, such as RANTES, MCP-3 and MCP-4 are known to recruit and activate eosinophils. Of particular interest are eotaxin and eotaxin-2, which specifically bind to CCR-3. The localization and function of CCR-3 chemokines indicate that they play a central role in the development of allergic diseases such as asthma. Thus, CCR-3 is specifically expressed on all major cell types involved in inflammatory allergic responses. Chemokines that act on CCR-3 are produced in response to inflammatory stimuli and serve to recruit and activate these cell types at sites of inflammation (see, eg, Griffiths et al., J. Exp. Med. , 179, 881-887 (1994), Lloyd et al., J. Exp. Med., 191, 265-273 (2000)). Furthermore, anti-CCR-3 monoclonal antibodies completely inhibit eotaxin interaction with eosinophils (Heath, H. et al., J. Clin. Invest. 99 (2), 178-184 (1997)) , Antibodies against eotaxin, a CCR-3 specific chemokine, reduce both bronchial hypersensitivity and pulmonary eosinophilia in animal models of asthma (Gonzalo et al., J. Exp. Med., 188, 157-167 (1998)). Thus, multilateral evidence indicates that CCR-3 receptor antagonists can almost certainly be used to treat a range of inflammatory conditions.

炎症性傷害における中心的役割に加えて、ケモカインおよびそのレセプターはまた感染性疾患においてもある役割を果たす。哺乳類動物サイトメガロウイルス、ヘルペスウイルスおよびポックスウイルスは、ケモカインレセプター同族体を発現し、これらはRANTESおよびMCP-3レセプターなどのヒトCCケモカインにより活性化され得る（総説は、WellsおよびSchwartz, Curr. Opin. Biotech., 8, 741-748, 1997を参照）。さらに、CXCR-4、CCR-5およびCCR-3のなどのヒトケモカインレセプターは、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）などの微生物による哺乳類動物細胞の感染に対する補助レセプターとして作用し得る。従って、CCR-3アンタゴニストを始めとするケモカインレセプターアンタゴニストは、HIVによるCCR-3発現細胞の感染をブロックする上でまたはサイトメガロウイルスなどのウイルスによる免疫細胞応答の操作を防止する上で有用である。   In addition to a central role in inflammatory injury, chemokines and their receptors also play a role in infectious diseases. Mammalian cytomegaloviruses, herpesviruses and poxviruses express chemokine receptor homologs, which can be activated by human CC chemokines such as RANTES and MCP-3 receptors (reviewed by Wells and Schwartz, Curr. Opin Biotech., 8, 741-748, 1997). In addition, human chemokine receptors such as CXCR-4, CCR-5 and CCR-3 can act as co-receptors for infection of mammalian cells by microorganisms such as human immunodeficiency virus (HIV). Thus, chemokine receptor antagonists, including CCR-3 antagonists, are useful in blocking infection of CCR-3 expressing cells by HIV or preventing manipulation of immune cell responses by viruses such as cytomegalovirus. .

国際特許出願公開番号WO 01/24786（Shionogi & Co. Ltd.）は、糖尿病を治療するための特定のアリールおよびヘテロアリール誘導体を開示している。WO 00/69830（Torrey Pines Institute for Molecular Studies）は、特定のジアザ環式化合物およびそれを含有するライブラリーを生物学的スクリーニング用に開示している。WO 00/18767（Neurogen Corporation）は、特定のピペラジン誘導体をドーパミンD4レセプターアンタゴニストとして開示している。米国特許第6,031,097号およびWO 99/21848（Neurogen Corporation）は特定のアミノイソキノリン誘導体をドーパミンレセプターリガンドとして開示している。WO 99/06384（Recordati Industria Chimica）は下部尿路の神経筋機能不全の治療用に有用なピペラジン誘導体を開示している。WO 98/56771（Schering Aktiengesellschaft）は特定のピペラジン誘導体を抗炎症剤として開示している。WO 97/47601（Yoshitomi Pharmaceutical Industries Ltd.）は特定の縮合ヘテロ環式化合物をドーパミンD-レセプター遮断薬として開示している。WO 96/39386（Schering Corporation）は特定のピペリジン誘導体をニューロキニンアンタゴニストとして開示している。WO 96/02534（Byk Gulden Lomberg Chemische Fabrik GmbH）はヘリコバクター細菌を抑制するために有用な特定のピペラジンチオピリジンを開示している。WO 95/32196（Merck Sharp & Dohme Limited）は特定のピペラジン、ピペリジン、およびテトラヒドロピリジン誘導体を5-HT1D-αアンタゴニストとして開示している。米国特許第5,389,635号（E.I. Du Pont de Nemours and Company）は特定の置換イミダゾールをアンギオテンシン-IIアンタゴニストとして開示している。欧州特許出願公開番号0 306 440（Schering Aktiengesellschaft）は特定のイミダゾール誘導体を心血管薬として開示している。   International Patent Application Publication No. WO 01/24786 (Shionogi & Co. Ltd.) discloses certain aryl and heteroaryl derivatives for treating diabetes. WO 00/69830 (Torrey Pines Institute for Molecular Studies) discloses specific diazacyclic compounds and libraries containing them for biological screening. WO 00/18767 (Neurogen Corporation) discloses certain piperazine derivatives as dopamine D4 receptor antagonists. US Pat. No. 6,031,097 and WO 99/21848 (Neurogen Corporation) disclose certain aminoisoquinoline derivatives as dopamine receptor ligands. WO 99/06384 (Recordati Industria Chimica) discloses piperazine derivatives useful for the treatment of neuromuscular dysfunction in the lower urinary tract. WO 98/56771 (Schering Aktiengesellschaft) discloses certain piperazine derivatives as anti-inflammatory agents. WO 97/47601 (Yoshitomi Pharmaceutical Industries Ltd.) discloses certain fused heterocyclic compounds as dopamine D-receptor blockers. WO 96/39386 (Schering Corporation) discloses certain piperidine derivatives as neurokinin antagonists. WO 96/02534 (Byk Gulden Lomberg Chemische Fabrik GmbH) discloses certain piperazine thiopyridines useful for controlling Helicobacter bacteria. WO 95/32196 (Merck Sharp & Dohme Limited) discloses certain piperazine, piperidine, and tetrahydropyridine derivatives as 5-HT1D-α antagonists. US Pat. No. 5,389,635 (E.I. Du Pont de Nemours and Company) discloses certain substituted imidazoles as angiotensin-II antagonists. European Patent Application Publication No. 0 306 440 (Schering Aktiengesellschaft) discloses certain imidazole derivatives as cardiovascular drugs.

この度、本発明者らはCCR-3アンタゴニストである新規のグループの化合物を見出した。この化合物は好酸球の遊走／走化性を遮断し、その結果、抗炎症特性を有する。従って、この化合物は、特に好酸球、好塩基球肥満細胞およびTh2-細胞型が関与する疾患、限定されるものでないが、気管支喘息、アレルギー性鼻炎およびアトピー性皮膚炎を始めとするアレルギー性疾患においてこのような細胞が誘発する組織障害から、これらの細胞を特に保護する治療効果を有する可能性がある。   Now we have discovered a new group of compounds that are CCR-3 antagonists. This compound blocks the migration / chemotaxis of eosinophils and consequently has anti-inflammatory properties. Therefore, this compound has allergenic properties including but not limited to diseases involving eosinophils, basophil mast cells and Th2-cell types, including but not limited to bronchial asthma, allergic rhinitis and atopic dermatitis. It may have therapeutic effects that specifically protect these cells from tissue damage induced by such cells in disease.

従って、本発明の一態様により式(I)の化合物およびその塩および溶媒和化合物が提供される。

Accordingly, one aspect of the present invention provides compounds of formula (I) and salts and solvates thereof.

式(I)は、3-([([(2S)-4-(3、4-ジクロロベンジル)モルホリン-2-イル]メチルアミノ)カルボニル]-アミノメチル)-N-エチルベンズアミドである。   Formula (I) is 3-([([((2S) -4- (3,4-dichlorobenzyl) morpholin-2-yl] methylamino) carbonyl] -aminomethyl) -N-ethylbenzamide.

式(I)の化合物の適切な塩には、生理学的に許容される塩および生理学的に許容されないが式(I)の化合物およびその生理学的に許容される塩を調製するのに有用であり得る塩が含まれる。適宜、酸付加塩は無機酸または有機酸から誘導することができ、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、1-ヒドロキシ-2-ナフトエ酸塩、パモ酸塩、メタンスルホン酸塩、ギ酸塩またはトリフルオロ酢酸塩が挙げられる。   Suitable salts of the compound of formula (I) are useful for preparing physiologically acceptable salts and physiologically unacceptable compounds of the formula (I) and physiologically acceptable salts thereof. The resulting salt is included. Where appropriate, acid addition salts can be derived from inorganic or organic acids, such as hydrochloride, hydrobromide, sulfate, phosphate, acetate, benzoate, citrate, succinate, Examples include lactate, tartrate, fumarate, maleate, 1-hydroxy-2-naphthoate, pamoate, methanesulfonate, formate or trifluoroacetate.

溶媒和化合物の例は水和物を含む。   Examples of solvates include hydrates.

式(I)の化合物、その塩および溶媒和化合物は、本発明のさらなる態様を構成する、下記の方法論により調製することができる。   The compounds of formula (I), their salts and solvates can be prepared by the following methodology, which constitutes a further aspect of the invention.

本発明に準拠した式(I)の化合物の調製法は、式(II)の化合物またはその塩をエチルアミンとカップリングさせることを含む。

The process for preparing a compound of formula (I) according to the invention comprises coupling a compound of formula (II) or a salt thereof with ethylamine.

その後、適宜、以下の1以上の工程を実施し得る:
(i)いずれかの保護基の除去、
(ii)形成した化合物の適切な塩または溶媒和化合物の調製。 Thereafter, as appropriate, one or more of the following steps may be performed:
(i) removal of any protecting groups,
(ii) Preparation of the appropriate salt or solvate of the formed compound.

式(II)の化合物のカップリングは、あらゆる適切な溶媒、例えば、極性有機溶媒、例えば、テトラヒドロフランとN,N-ジメチルホルムアミドの混合物等中で、適切な脱水剤、例えば、カルボジイミド剤等、例えば、1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミドハイドロクロライドの存在下、かつ適宜、適切な活性化剤、例えば、活性化ヒドロキシ化合物、例えば、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール等の存在下で、かつ適宜、塩基、例えば3級アミン等、例えばN,N-ジイソプロピルエチルアミンの存在下で、所望の生成物を適切な割合で形成するあらゆる温度での従来のカップリング条件下、適切な反応時間、例えば12-24時間かけて行う。   The coupling of the compound of formula (II) may be carried out in any suitable solvent, for example a polar organic solvent, such as a mixture of tetrahydrofuran and N, N-dimethylformamide, etc., with a suitable dehydrating agent, such as a carbodiimide agent, for example, , 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride, and optionally in the presence of a suitable activator, such as an activated hydroxy compound, such as 1-hydroxybenzotriazole, And optionally, an appropriate reaction time under conventional coupling conditions at any temperature in the presence of a base such as a tertiary amine, such as N, N-diisopropylethylamine, to form the desired product in the proper proportions, For example, it takes 12-24 hours.

適切な反応温度には、18℃〜25℃の範囲が含まれる。   Suitable reaction temperatures include the range of 18 ° C to 25 ° C.

反応生成物は、従来の方法を用いて単離精製する。   The reaction product is isolated and purified using conventional methods.

式(II)の化合物は、式(III)の化合物を加水分解することにより調製することができる。

The compound of formula (II) can be prepared by hydrolyzing the compound of formula (III).

加水分解は、適切な溶媒、例えば、アルコール水溶液、例えば、水とメタノールの混合物中、適切な触媒、例えば塩基水溶液、例えば水酸化ナトリウム水溶液の存在下、適切な温度、例えば18℃〜25℃の範囲の温度で、適切な時間、例えば12-24時間かけて行う。   The hydrolysis is carried out at a suitable temperature, e.g. 18C-25C in the presence of a suitable catalyst, e.g. aqueous base, e.g. aqueous sodium hydroxide, in a suitable solvent, e.g. aqueous alcohol, e.g. water and methanol mixture. Performed at a temperature in the range for an appropriate period of time, eg 12-24 hours

式(III)の化合物は、式(IV)の化合物を式(V)の化合物と反応させることにより調製することができる。

A compound of formula (III) can be prepared by reacting a compound of formula (IV) with a compound of formula (V).

式(IV)の化合物と式(V)の化合物の反応は、適切な溶媒、例えば極性有機溶媒、例えばN,N-ジメチルホルムアミドおよび適切な塩基、例えば3級アミン、例えばN,N-ジイソプロピルエチルアミン、適切な温度、例えば18℃〜25℃の範囲にある温度で、適切な時間、例えば60-100時間かけて行う。   The reaction of the compound of formula (IV) with the compound of formula (V) is carried out by using a suitable solvent, such as a polar organic solvent, such as N, N-dimethylformamide, and a suitable base, such as a tertiary amine, such as N, N-diisopropylethylamine. At a suitable temperature, for example in the range of 18 ° C. to 25 ° C., for a suitable time, for example 60-100 hours.

式(IV)の化合物は、4-ニトロフェニルクロロホルメートと反応させることにより式(VI)の化合物から調製することができる。

Compounds of formula (IV) can be prepared from compounds of formula (VI) by reacting with 4-nitrophenyl chloroformate.

式(VI)の化合物と4-ニトロフェニルクロロホルメートの反応は、適切な溶媒、例えば不活性有機溶媒例えばジクロロメタン中、適切な塩基、例えば3級アミン、例えばトリエチルアミンの存在下、適切な温度、例えば-5℃〜+5℃の範囲にある温度で、適切な時間、例えば3-5時間かけて行う。   The reaction of the compound of formula (VI) with 4-nitrophenyl chloroformate is carried out in a suitable solvent such as an inert organic solvent such as dichloromethane in the presence of a suitable base such as a tertiary amine such as triethylamine, For example, it is performed at a temperature in the range of −5 ° C. to + 5 ° C. for an appropriate time, for example, 3-5 hours.

式(VI)の化合物は、反応(a)、反応(b)、または反応(c)により調製することができる。   The compound of formula (VI) can be prepared by reaction (a), reaction (b), or reaction (c).

反応(a):式(IX)の化合物と式(X)の化合物の反応Reaction (a): Reaction of a compound of formula (IX) with a compound of formula (X)

式中、Aは、保護アミノ基、好ましくはフタルイミドであり、次いでアミノ基を脱保護して、式(VIR)の化合物を得る。

Where A is a protected amino group, preferably phthalimide, and then the amino group is deprotected to give a compound of formula (VIR).

次いで式(VIR)の化合物の得られた両エナンチオマーの分割を行う。 The resulting enantiomers of the compound of formula (VIR) are then resolved.

または、
反応(b):上記に定義された式(IX)の化合物と式(XA)の化合物の反応

Or
Reaction (b): Reaction of a compound of formula (IX) and a compound of formula (XA) as defined above

式中、Aは、式(X)に対して上記に定義されたものであり、次いでアミノ基の脱保護により、式(VI)の化合物を得る。 In which A is as defined above for formula (X) and then deprotection of the amino group gives the compound of formula (VI).

反応(c):式(VII)の化合物の加水分解Reaction (c): Hydrolysis of the compound of formula (VII)

次いで式(VIR)の化合物の得られた両エナンチオマーの分割を行う。 The resulting enantiomers of the compound of formula (VIR) are then resolved.

反応(a)と(b)の両反応の場合、式(IX)の化合物と式(X)もしくは(XA)の化合物の反応における中間体ジオール(VIBR)と(VIB)の環化は、一般に、以下のMitsunobu条件下で行われる。   In both reactions (a) and (b), the cyclization of intermediate diols (VIBR) and (VIB) in the reaction of a compound of formula (IX) with a compound of formula (X) or (XA) is generally Performed under the following Mitsunobu conditions.

一般に、式(IX)の化合物および式(X)もしくは式(XA)の化合物の混合物を適切な溶媒、例えばテトラヒドロフランに溶解し、好ましくは20-24時間、適切な温度、好ましくは溶媒の還流温度で、不活性雰囲気下、好ましくは窒素雰囲気下で攪拌する。その後、さらに溶媒を加え、混合物を好ましくは0-5℃まで冷却する。適切なホスフィン、適切なトリフェニルホスフィンを加え、混合物を固体が全て溶解するまで攪拌する。その後、適切なアゾ化合物、適切なジイソプロピルアゾジカルボキシレートを、好ましくは、10-15分かけて添加するが、温度は7℃未満に保持する。混合物を一定時間、好ましくは2-3時間静置し、その後、好ましくは、20-25℃まで温める。さらに一定時間、好ましくは4-6時間静置した後、さらにホスフィンおよびアゾ化合物を加える。さらに一定時間、好ましくは20-24時間静置した後、ほぼ乾燥するまで反応混合物を濃縮する。適切なアルコール、好ましくはプロパン-2-オールを加え、濃縮工程を繰り返す。即ち、その後、当該アルコール添加および濃縮工程を繰り返す。その後、さらにアルコールを添加し、混合物を、好ましくは65-75℃の温度にまで加熱する。適切な時間、好ましくは20-45分後、得られたスラリーを、好ましくは、20-25℃まで冷却し、その後、好ましくは1.5-3時間静置し、その後、生成物を濾別する。濾過固形物をさらにアルコールで洗浄し、その後真空下、35-45℃で乾燥して、式(VIR)または式(VI)の化合物の保護型をそれぞれ得た。   In general, a mixture of a compound of formula (IX) and a compound of formula (X) or formula (XA) is dissolved in a suitable solvent, such as tetrahydrofuran, preferably for 20-24 hours at a suitable temperature, preferably the reflux temperature of the solvent. And stirring under an inert atmosphere, preferably under a nitrogen atmosphere. Thereafter, further solvent is added and the mixture is preferably cooled to 0-5 ° C. Appropriate phosphine, appropriate triphenylphosphine is added and the mixture is stirred until all solids are dissolved. Thereafter, the appropriate azo compound, the appropriate diisopropyl azodicarboxylate, is preferably added over 10-15 minutes, but the temperature is kept below 7 ° C. The mixture is allowed to stand for a period of time, preferably 2-3 hours, after which it is preferably warmed to 20-25 ° C. Further, after standing for a certain time, preferably 4-6 hours, phosphine and an azo compound are further added. Further, after standing for a certain time, preferably 20-24 hours, the reaction mixture is concentrated until almost dry. Add a suitable alcohol, preferably propan-2-ol, and repeat the concentration step. That is, thereafter, the alcohol addition and concentration steps are repeated. Thereafter, more alcohol is added and the mixture is heated to a temperature of preferably 65-75 ° C. After a suitable time, preferably 20-45 minutes, the resulting slurry is preferably cooled to 20-25 ° C. and then preferably allowed to stand for 1.5-3 hours, after which the product is filtered off. The filtered solid was further washed with alcohol and then dried under vacuum at 35-45 ° C. to give protected forms of compounds of formula (VIR) or formula (VI), respectively.

生成物から保護基を除去するのは、一般に、以下のように行う。適切な極性溶媒、好ましくは水中の式(VIR)または式(VI)の化合物の保護型のスラリーを、高温、好ましくは70-75℃まで加熱し、その後、濃無機酸、好ましくは濃硫酸を滴下処理する。混合物をその後、高温、好ましくは溶媒還流温度で、適切な時間、好ましくは20-24時間で加熱し、その後、反応混合物を20-25℃まで冷却し、その後、適切な無極性溶媒、好ましくはジクロロメタンで処理する。その後、塩基、好ましくは0.880のアンモニア溶液を、20-25℃の温度を保持しながら滴下する。その後、さらに無極性溶媒を加え、その後、水相を分離し、さらに無極性溶媒で抽出する。合わせた有機相を水で洗浄し、その後、乾燥するまで濃縮する。残渣を再溶解し、無極性溶媒を蒸発させて式(VIR)または式(VI)の化合物を得る。   Removal of the protecting group from the product is generally performed as follows. A protected slurry of a compound of formula (VIR) or formula (VI) in a suitable polar solvent, preferably water, is heated to an elevated temperature, preferably 70-75 ° C., after which concentrated inorganic acid, preferably concentrated sulfuric acid is added. Drip treatment. The mixture is then heated at an elevated temperature, preferably at the solvent reflux temperature, for a suitable time, preferably 20-24 hours, after which the reaction mixture is cooled to 20-25 ° C. and then a suitable non-polar solvent, preferably Treat with dichloromethane. Thereafter, a base, preferably 0.880 ammonia solution, is added dropwise while maintaining a temperature of 20-25 ° C. Thereafter, a nonpolar solvent is further added, and then the aqueous phase is separated and further extracted with a nonpolar solvent. The combined organic phases are washed with water and then concentrated to dryness. The residue is redissolved and the nonpolar solvent is evaporated to give the compound of formula (VIR) or formula (VI).

また、上記の式(VIR)または式(VI)の化合物の保護型の調製法は2段階で行うこともでき、この場合、式(VIBR)または式(VIB)の中間体化合物をそれぞれ単離する。

In addition, the preparation of the protected form of the compound of formula (VIR) or formula (VI) above can also be carried out in two steps, in which case the intermediate compound of formula (VIBR) or formula (VIB) is isolated, respectively To do.

式中、Aは式(X)および(XA)に対して上記に定義されたものである。 In which A is as defined above for formulas (X) and (XA).

一般に、式(IX)の化合物および式(X)もしくは式(XA)の化合物の混合物を、適切な溶媒、例えばテトラヒドロフランに溶解し、好ましくは20-24時間、適切な温度、好ましくは溶媒の還流温度、不活性雰囲気下、好ましくは窒素雰囲気下で攪拌する。さらに式(IX)の化合物を加え、混合物を適切な温度、好ましくは溶媒の還流温度で、不活性雰囲気下、好ましくは窒素雰囲気下で、適切な時間、好ましくは3-6時間加熱する。その後、反応混合物を好ましくは20-25℃まで冷却し、化合物を適切な助溶媒、好ましくはジイソプロピルエーテルを加えることにより沈殿させる。式(VIBR)または式(VIB)の化合物をそれぞれ濾別し、さらに助溶媒で洗浄し、真空下で乾燥させる。   In general, a mixture of a compound of formula (IX) and a compound of formula (X) or formula (XA) is dissolved in a suitable solvent, such as tetrahydrofuran, preferably for 20-24 hours at a suitable temperature, preferably reflux of the solvent. Stir at temperature and under an inert atmosphere, preferably under a nitrogen atmosphere. Further a compound of formula (IX) is added and the mixture is heated at a suitable temperature, preferably at the reflux temperature of the solvent, under an inert atmosphere, preferably under a nitrogen atmosphere, for a suitable time, preferably 3-6 hours. The reaction mixture is then preferably cooled to 20-25 ° C. and the compound is precipitated by adding a suitable cosolvent, preferably diisopropyl ether. The compound of formula (VIBR) or formula (VIB) is filtered off, washed with a cosolvent and dried under vacuum.

その後、式(VIR)または式(VI)の化合物の保護型を、上記の式(IX)と式(X)もしくは(XA)の化合物との反応条件と類似の条件下(しかし、ホスフィンおよびアゾ化合物の添加前の還流時間は省略する)で、式(VIBR)または式(VIB)の化合物から調製することができる。   Thereafter, the protected form of the compound of formula (VIR) or formula (VI) is reacted under conditions similar to the reaction conditions of the above formula (IX) with the compound of formula (X) or (XA) (but phosphine and azo The reflux time before the addition of the compound is omitted) and can be prepared from compounds of formula (VIBR) or formula (VIB).

一般に反応(c)は、適切な溶媒、例えばメタノールと水の混合物に溶解した式(VII)の化合物の溶液を攪拌し、適切な塩基、例えば炭酸カリウムを添加することにより行われる。混合物を適切な温度、例えば20-25℃の範囲の温度で、適切な時間、例えば16-20時間で攪拌し、次いで有機溶媒の除去を真空下で行う。その後、水を加え、混合物を適切な有機溶媒、例えば酢酸エチルで抽出する。合わせた有機相を水および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、その後、適切な乾燥剤、例えば硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒を真空下で蒸発させる。その後、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製する。   In general, reaction (c) is carried out by stirring a solution of a compound of formula (VII) dissolved in a suitable solvent, for example a mixture of methanol and water, and adding a suitable base, for example potassium carbonate. The mixture is stirred at a suitable temperature, for example in the range of 20-25 ° C., for a suitable time, for example 16-20 hours, and then the removal of the organic solvent is carried out under vacuum. Water is then added and the mixture is extracted with a suitable organic solvent, for example ethyl acetate. The combined organic phases are washed with water and saturated aqueous sodium chloride solution, then dried with a suitable desiccant such as sodium sulfate, filtered and the solvent is evaporated under vacuum. The crude product is then purified by flash chromatography.

ラセミ生成物すなわち式(VIR)の化合物から式(VI)の化合物の分割は、当業者に周知の技術、例えば分取キラル高速液体クロマトグラフィー(キラルHPLC)またはジアステレオマー塩の分別結晶を用いることにより行うことができる。   Resolution of racemic products, ie compounds of formula (VIR), to compounds of formula (VI) uses techniques well known to those skilled in the art, such as preparative chiral high performance liquid chromatography (chiral HPLC) or fractional crystals of diastereomeric salts. Can be done.

式(VII)の化合物は、式(VIII)の化合物を3、4-ジクロロベンジルクロライドと反応させることにより調製できる。

A compound of formula (VII) can be prepared by reacting a compound of formula (VIII) with 3,4-dichlorobenzyl chloride.

式(VIII)の化合物と3,4-ジクロロベンジルクロライドの反応は、一般に、適切な溶媒、例えばN,N-ジメチルホルムアミド中、不活性雰囲気下、例えば窒素雰囲気下、適切な塩基、例えば炭酸カリウム、および適切な活性化剤、例えばヨウ化ナトリウムを加えることにより行われる。その後、混合物を、適切な温度、例えば20-25℃の範囲における温度で、適切な時間、例えば16-20時間攪拌し、その後、揮発成分を真空下で除去する。   The reaction of a compound of formula (VIII) with 3,4-dichlorobenzyl chloride is generally carried out in a suitable solvent, such as N, N-dimethylformamide, under an inert atmosphere, such as a nitrogen atmosphere, and a suitable base, such as potassium carbonate. And an appropriate activator, such as sodium iodide. The mixture is then stirred at a suitable temperature, for example a temperature in the range of 20-25 ° C., for a suitable time, for example 16-20 hours, after which the volatile components are removed under vacuum.

式(VIII)の化合物は、適切な有機溶媒、例えばメタノールに溶解したモルホリン-2-イルメチルアミン溶液を、不活性雰囲気下、例えば窒素雰囲気下で、適切な有機溶媒、例えばエーテルに溶解したエチル-α,α,α-トリフルオロアセテート溶液で処理することにより調製する。その後、混合物を適切な時間、例えば20-40分、適切な温度、例えば20-25℃の範囲における温度で攪拌し、揮発成分を真空下で除去する。その後、残渣を、適切な有機溶媒、例えばメタノールに溶解し、揮発成分を真空下で除去する。   The compound of formula (VIII) is prepared by dissolving a morpholin-2-ylmethylamine solution dissolved in a suitable organic solvent, such as methanol, in an appropriate organic solvent, such as ether, in an inert atmosphere, such as a nitrogen atmosphere. -Prepare by treating with α, α, α-trifluoroacetate solution. The mixture is then stirred for a suitable time, eg 20-40 minutes, at a suitable temperature, eg in the range of 20-25 ° C., and the volatile components are removed under vacuum. The residue is then dissolved in a suitable organic solvent such as methanol and the volatile components are removed under vacuum.

式(V)の化合物は公知であり、従来の方法、例えばEur. J. Med. Chem. (1993)、28(7-8)、625-32に記載の方法により調製できる。エチルアミン、4-ニトロフェニルクロロホルメート、2-[(3、4-ジクロロベンジル)アミノ]エタノール、2-(オキシラン-2-イルメチル)-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン、3,4-ジクロロベンジルクロライド、モルホリン-2-イルメチルアミン、2-[(3,4-ジクロロベンジル)アミノ]エタノールおよびエチル-α,α,α-トリフルオロアセテートは公知で市販の化合物であるかまたは公知の手法、例えばJ. March, Advanced Organic Chemistry, 3rd Edition (1985), Wiley Interscience等の合成技術の標準的な参考書に開示されている手法から類推して調製できる。   Compounds of formula (V) are known and can be prepared by conventional methods such as those described in Eur. J. Med. Chem. (1993), 28 (7-8), 625-32. Ethylamine, 4-nitrophenyl chloroformate, 2-[(3,4-dichlorobenzyl) amino] ethanol, 2- (oxiran-2-ylmethyl) -1H-isoindole-1,3 (2H) -dione, 3 , 4-dichlorobenzyl chloride, morpholin-2-ylmethylamine, 2-[(3,4-dichlorobenzyl) amino] ethanol and ethyl-α, α, α-trifluoroacetate are known and commercially available compounds? Alternatively, it can be prepared by analogy with known methods, for example, methods disclosed in standard reference books of synthesis techniques such as J. March, Advanced Organic Chemistry, 3rd Edition (1985), Wiley Interscience.

式(II)、(III)、(IV)、(VI)、(VII)、(VIBR)および(VIB)の化合物は新規であると考えられる。   Compounds of formula (II), (III), (IV), (VI), (VII), (VIBR) and (VIB) are considered novel.

したがって、式(II)の化合物が提供される。   Accordingly, a compound of formula (II) is provided.

また式(III)の化合物も提供する。   Also provided is a compound of formula (III).

また式(IV)の化合物も提供する。   Also provided is a compound of formula (IV).

また式(VI)の化合物も提供する。   Also provided is a compound of formula (VI).

また式(VII)の化合物も提供する。   Also provided is a compound of formula (VII).

また式(VIBR)の化合物も提供する。   A compound of formula (VIBR) is also provided.

また式(VIB)の化合物も提供する。   Also provided is a compound of formula (VIB).

上記のあらゆる反応において、適切な保護基は、当技術分野において従来用いられているものである。このような保護基の形成および除去の方法は、保護される分子に適切な従来法、例えば、P J Kocienski, Protecting Groups, (1994), Thiemeのような合成技術の標準的な参考書に論述されている方法である。   In any of the above reactions, suitable protecting groups are those conventionally used in the art. Methods for the formation and removal of such protecting groups are discussed in standard references of synthetic techniques such as PJ Kocienski, Protecting Groups, (1994), Thieme, which are appropriate for the molecule being protected. Is the way.

上記のあらゆる反応または方法に対して、加熱と冷却の従来の方法、例えば、電気ホットプレートおよび氷/塩浴をそれぞれ用いることができる。従来の精製法、例えば、結晶化およびカラムクロマトグラフィーを、必要に応じて用いることができる。   For any of the above reactions or methods, conventional methods of heating and cooling, such as an electric hot plate and an ice / salt bath, can be used, respectively. Conventional purification methods such as crystallization and column chromatography can be used as needed.

式(I)の化合物の塩および溶媒和化合物は、式(I)の化合物またはその適切な塩もしくは溶媒和化合物から調製でき、従来の手法により単離することができる。   Salts and solvates of the compounds of formula (I) can be prepared from the compounds of formula (I) or their appropriate salts or solvates and isolated by conventional techniques.

本発明の化合物は、以下のアッセイにしたがって、in vitroの生物学的な活性を試験することができる。   The compounds of the invention can be tested for in vitro biological activity according to the following assay.

(a) CCR-3結合アッセイ
CCR-3競争結合SPA（シンチレーション近接アッセイ）を用いて新規化合物のCCR-3に対するアフィニティを評価した。CCR-3を安定して発現するK562細胞から調製した膜（2.5μg/ウエル）を0.25mg/ウエル麦芽凝集素SPAビーズ（Amersham）と混合し、結合バッファー（HEPES 50mM、CaCl₂ 1mM、MgCl₂ 5mM、0.5％ BSA）中で4℃にて1.5時間インキュベートした。インキュベーションの後、20pMの[¹²⁵I]エオタキシン（Amersham）および濃度を順次高くした化合物（1pM〜30μM）を加え、96ウエルプレート中で22℃にて2時間インキュベートし、次いでMicrobetaプレートカウンター上でカウントした。全アッセイ容積は100μlであった。競合結合データは、データを４つのパラメータのロジスチック式（logistic equation）に適合させることにより分析した。データは、少なくとも２つの実験から得た平均pIC₅₀値（[¹²⁵I]エオタキシン結合を50％だけ阻害する化合物濃度の対数に負号をつけたもの）として表した。 (a) CCR-3 binding assay
CCR-3 competitive binding SPA (scintillation proximity assay) was used to assess the affinity of novel compounds for CCR-3. Membrane (2.5 μg / well) prepared from K562 cells stably expressing CCR-3 was mixed with 0.25 mg / well malt agglutinin SPA beads (Amersham) and binding buffer (HEPES 50 mM, CaCl ₂ 1 mM, MgCl ₂ (5 mM, 0.5% BSA) at 4 ° C. for 1.5 hours. After incubation, add 20 pM [ ¹²⁵ I] eotaxin (Amersham) and increasing concentrations of compound (1 pM-30 μM), incubate for 2 hours at 22 ° C. in a 96 well plate, then count on a Microbeta plate counter did. Total assay volume was 100 μl. Competitive binding data was analyzed by fitting the data to a four parameter logistic equation. Data were expressed as mean pIC ₅₀ values from at least two experiments (log of the concentration of the compound that inhibits [ ¹²⁵ I] eotaxin binding by 50%).

(b) 好酸球走化性アッセイ
化合物の好酸球走化性に対する阻害効果を評価した。好酸球は、ヒト末梢血から標準CD16細胞欠乏により上記のMiltenyi細胞分離カラムおよび磁性Super Macsマグネット（Motegi & Kita, 1998; J.Immunology. 161:4340-6）を用いて精製した。細胞をRPMI 1640/10％ FCS溶液中に再懸濁し、カルセイン-AM（Molecular Probes）を用いて37℃にて30分間インキュベートした。インキュベーションの後、好酸球を400gにて5分間遠心分離し、RPMI/FCS中に2.2x10⁶/mlにて再懸濁した。次いで細胞を、化合物の濃度を高くしながら（1pM〜30μM）存在させて、37℃にて30分間インキュベートした。対照応答として、細胞をRPMI/FCSだけを用いてインキュベートした。アゴニストエオタキシン（EC₈₀濃度）を96ウエル走化性プレート（5μmフィルター：Receptor Technologies）の下方チャンバー(lower chamber)に加えた。好酸球（50μlの2x10⁶/ml細胞）をフィルタープレートのトップチャンバーに加え、37℃にて45分間インキュベートした。走化性フィルターのトップに残留する細胞を取除いて、蛍光プレートリーダー上のプレートを読み取って遊走した好酸球数を数値化した。データを４つのパラメータロジスチック式に適合させ、化合物の好酸球走化性に対する効果について阻害曲線を解析した。機能的pK_i値（fpK_i）は、下記の式：

(b) Eosinophil chemotaxis assay The inhibitory effect of compounds on eosinophil chemotaxis was evaluated. Eosinophils were purified from human peripheral blood by standard CD16 cell depletion using the Miltenyi cell separation column and magnetic Super Macs magnet (Motegi & Kita, 1998; J. Immunology. 161: 4340-6). Cells were resuspended in RPMI 1640/10% FCS solution and incubated with calcein-AM (Molecular Probes) at 37 ° C. for 30 minutes. Following incubation, eosinophils were centrifuged at 400 g for 5 minutes and resuspended in RPMI / FCS at 2.2 × 10 ⁶ / ml. Cells were then incubated for 30 minutes at 37 ° C. in the presence of increasing concentrations of compound (1 pM-30 μM). As a control response, cells were incubated with RPMI / FCS alone. Agonist eotaxin (EC ₈₀ concentration) was added to the lower chamber of a 96-well chemotaxis plate (5 μm filter: Receptor Technologies). Eosinophils (50 μl of 2 × 10 ⁶ / ml cells) were added to the top chamber of the filter plate and incubated at 37 ° C. for 45 minutes. Cells remaining on the top of the chemotaxis filter were removed, and the number of migrated eosinophils was quantified by reading the plate on the fluorescence plate reader. The data was fitted to a four parameter logistic equation and the inhibition curves were analyzed for the effect of the compound on eosinophil chemotaxis. The functional pK _i value (fpK _i ) is:

を用いて求めた（Lazareno & Birdsall, 1995. Br.J.Pharmacol 109: 1110-9）。 (Lazareno & Birdsall, 1995. Br. J. Pharmacol 109: 1110-9).

本発明の化合物を、CCR-3結合および／または好酸球走化性アッセイ（それぞれアッセイ(a)および(b)）で試験した。本発明の化合物をCCR-3結合アッセイで試験すると、9.2のpIC50値を有していた。CCR-3好酸球走化性アッセイで試験した本発明の化合物は、10.0のfpKi値を有していた。   The compounds of the invention were tested in CCR-3 binding and / or eosinophil chemotaxis assays (Assays (a) and (b), respectively). The compounds of the invention were tested in the CCR-3 binding assay and had a pIC50 value of 9.2. The compounds of the present invention tested in the CCR-3 eosinophil chemotaxis assay had a fpKi value of 10.0.

本発明の化合物が潜在的に有効な抗炎症効能を有する病状の例には、気管支炎（例えば慢性気管支炎）、気管支拡張症、喘息（例えばアレルゲンが誘発する喘息性反応）、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、嚢胞性線維症、副鼻腔炎および鼻炎などの気道の疾患が含まれる。   Examples of medical conditions in which the compounds of the present invention have potentially effective anti-inflammatory effects include bronchitis (eg, chronic bronchitis), bronchiectasis, asthma (eg, asthmatic reactions induced by allergens), chronic obstructive lung Includes diseases of the respiratory tract such as disease (COPD), cystic fibrosis, sinusitis and rhinitis.

また、上記病状の例は、炎症性腸疾患（例えば、クローン病または潰瘍性大腸炎）を始めとする腸炎症性疾患などの胃腸管疾患および放射線曝露またはアレルゲン曝露に伴う二次的腸炎症性疾患も含む。   Examples of the above conditions are gastrointestinal diseases such as inflammatory bowel diseases (eg, Crohn's disease or ulcerative colitis) and secondary intestinal inflammatory properties associated with radiation exposure or allergen exposure. Includes diseases.

さらに本発明の化合物を用いて、腎炎；乾癬、湿疹、アレルギー性皮膚炎および過敏性反応などの皮膚病；ならびに炎症性成分を有する中枢神経系の疾患（例えばアルツハイマー病、髄膜炎、多発性硬化症）、HIVおよびAIDS痴呆を治療することができる。   In addition, the compounds of the present invention may be used to treat nephritis; skin diseases such as psoriasis, eczema, allergic dermatitis and hypersensitivity reactions; Sclerosis), HIV and AIDS dementia can be treated.

本発明の化合物はまた鼻ポリープ症、結膜炎またはそう痒症の治療にも利用することもできる。   The compounds of the present invention can also be used to treat nasal polyposis, conjunctivitis or pruritus.

本発明の化合物が潜在的に有効な効能を有する病状のさらなる例には、アテローム性動脈硬化症などの心血管症状、末梢血管疾患、および特発性好酸球増多症候群が含まれる。   Additional examples of medical conditions in which the compounds of the present invention have potentially effective efficacy include cardiovascular conditions such as atherosclerosis, peripheral vascular disease, and idiopathic eosinophilia syndrome.

本発明の化合物は、免疫抑制薬として有用であり、従って移植後の同種移植組織拒絶、慢性関節リウマチおよび糖尿病などの自己免疫疾患の治療に用途がある。   The compounds of the present invention are useful as immunosuppressants and are therefore of use in the treatment of autoimmune diseases such as allograft rejection after transplantation, rheumatoid arthritis and diabetes.

本発明の化合物はまた、転移の抑制に有用でもある。   The compounds of the present invention are also useful for inhibiting metastasis.

特に関心のある疾患には、喘息、COPDならびに季節性および通年性鼻炎に関わる上気道の炎症性疾患が含まれる。   Diseases of particular interest include upper respiratory inflammatory diseases involving asthma, COPD and seasonal and perennial rhinitis.

本明細書にて処置または治療の意味は、確立された症状の治療ならびにその予防を意味するとして当業者は理解するであろう。   The meaning of treatment or therapy herein will be understood by those skilled in the art as meaning treatment of established symptoms as well as prevention thereof.

上記のように、式(I)の化合物は治療剤として有用である。   As mentioned above, the compounds of formula (I) are useful as therapeutic agents.

従って、さらなる本発明の態様として、有効な治療剤として用いる式(I)の化合物またはその生理学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物が提供される。   Accordingly, as a further aspect of the present invention there is provided a compound of formula (I) or a physiologically acceptable salt or solvate thereof for use as an effective therapeutic agent.

それ故にまた、炎症性症状、例えば喘息または鼻炎の治療に用いる式(I)の化合物またはその生理学的に許容される塩または溶媒和化合物も提供される。   There is therefore also provided a compound of formula (I) or a physiologically acceptable salt or solvate thereof for use in the treatment of inflammatory conditions such as asthma or rhinitis.

本発明の他の態様によれば、炎症性症状、例えば喘息または鼻炎の治療用医薬品を製造するための式(I)の化合物またはその生理学的に許容される塩または溶媒和化合物の使用も提供される。   According to another aspect of the present invention, there is also provided the use of a compound of formula (I) or a physiologically acceptable salt or solvate thereof for the manufacture of a medicament for the treatment of inflammatory conditions such as asthma or rhinitis Is done.

さらなるまたは代わりの態様においては、炎症性症状、例えば喘息または鼻炎を患うまたは患い易いヒトまたは動物被験体を治療する方法であって、有効量の式(I)の化合物またはその生理学的に許容される塩または溶媒和化合物を投与することを含む上記方法が提供される。   In a further or alternative embodiment, a method of treating a human or animal subject suffering from or susceptible to inflammatory conditions such as asthma or rhinitis, comprising an effective amount of a compound of formula (I) or a physiologically acceptable salt thereof. A method is provided comprising administering a salt or solvate.

本発明による化合物は、あらゆる好都合な方法で投与するために製剤化することができる。   The compounds according to the invention can be formulated for administration in any convenient way.

従ってさらに、式(I)の化合物、またはその生理学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物を含み、および、１以上の生理学的に許容される希釈剤もしくは担体を含んでもよい医薬組成物が提供される。   Accordingly, there is further provided a pharmaceutical composition comprising a compound of formula (I), or a physiologically acceptable salt or solvate thereof, and may comprise one or more physiologically acceptable diluents or carriers. Is done.

さらに、式(I)の化合物またはその生理学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物に１以上の生理学的に許容される希釈剤もしくは担体を加えて混合することを含む医薬製剤を製造する方法も提供される。   Furthermore, there is also provided a method for producing a pharmaceutical preparation comprising adding and mixing one or more physiologically acceptable diluents or carriers to a compound of formula (I) or a physiologically acceptable salt or solvate thereof. Provided.

本発明による化合物は、例えば経口、吸入、鼻腔内、バッカル、非経口または直腸投与用に、好ましくは経口投与用に製剤化することができる。   The compounds according to the invention can be formulated, for example, for oral, inhalation, intranasal, buccal, parenteral or rectal administration, preferably for oral administration.

経口投与用錠剤およびカプセルは、結合剤、例えばシロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、デンプン漿剤（mucilage of starch）、セルロースもしくはポリビニルピロリドン；フィラー、例えば、ラクトース、微結晶セルロース、糖、トウモロコシ-デンプン、リン酸カルシウムもしくはソルビトール；潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ポリエチレングリコールもしくはシリカ；崩壊剤、例えば、ジャガイモデンプン、クロスカルメロースナトリウムもしくはデンプングリコール酸ナトリウム；または湿潤剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムなどの従来の賦形剤を含有してもよい。錠剤は当技術分野で周知の方法によりコーティングされていてもよい。   Tablets and capsules for oral administration are binders such as syrup, acacia, gelatin, sorbitol, tragacanth, mucilage of starch, cellulose or polyvinylpyrrolidone; fillers such as lactose, microcrystalline cellulose, sugar, corn- Lubricants such as magnesium stearate, stearic acid, talc, polyethylene glycol or silica; disintegrants such as potato starch, croscarmellose sodium or sodium starch glycolate; or wetting agents such as lauryl sulfate It may contain conventional excipients such as sodium. The tablets may be coated by methods well known in the art.

経口液製剤は、例えば、水性または油性懸濁液、溶液、乳濁液、シロップまたはエリキシルの形態であってもよいしまたは使用前に水その他の適切なビヒクルで構成させるために乾燥品として与えられてもよい。かかる液体製剤は、懸濁剤、例えば、ソルビトールシロップ、メチルセルロース、グルコース/糖シロップ、ゼラチン、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルまたは水素化食用脂肪；乳化剤、例えば、レシチン、モノオレイン酸ソルビタンまたはアカシア；非水性ビヒクル（食用油を含み得る）、例えばアーモンド油、分留ココナッツ油、油状エステル、プロピレングリコールまたはエチルアルコール；または保存剤、例えば、p-ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピル、またはソルビン酸などの従来の添加物を含有してもよい。製剤はまた、適切にバッファー塩、香料、着色剤および／または甘味剤（例えば、マンニトール）を含有してもよい。   Oral liquid formulations may be in the form of, for example, aqueous or oily suspensions, solutions, emulsions, syrups or elixirs, or given as a dry product for constitution with water or other suitable vehicle prior to use. May be. Such liquid formulations include suspensions such as sorbitol syrup, methylcellulose, glucose / sugar syrup, gelatin, hydroxymethylcellulose, carboxymethylcellulose, aluminum stearate gel or hydrogenated edible fat; emulsifiers such as lecithin, sorbitan monooleate or Acacia; non-aqueous vehicles (which may include edible oils) such as almond oil, fractionated coconut oil, oily esters, propylene glycol or ethyl alcohol; or preservatives such as methyl or propyl p-hydroxybenzoate, or sorbic acid Conventional additives may be included. The formulation may also suitably contain buffer salts, flavoring agents, coloring agents and / or sweetening agents (eg mannitol).

バッカル投与の場合には、組成物は従来の方法で製剤した錠剤またはトローチ剤の形態をとってもよい。   For buccal administration, the composition may take the form of tablets or lozenges formulated in conventional manner.

化合物はまた、例えばココアバターまたは他のグリセリドなどの従来の座薬基剤を含有する座薬として製剤することもできる。   The compounds can also be formulated as suppositories, eg, containing conventional suppository bases such as cocoa butter or other glycerides.

本発明による化合物はまた、ボーラス注射または連続輸液による非経口投与用に製剤してもよく、単位用量形態で、例えばアンプル、バイアル、小容量輸液または予め充填したシリンジとしてまたは多用量容器に保存剤を加えて提供してもよい。組成物は、水性または非水性ビヒクル中の溶液、懸濁液、または乳濁液などの形態をとってもよく、そして抗酸化剤、バッファー、抗微生物剤および／または張性調節剤などの補助剤を含有してもよい。あるいは、有効成分が、使用前に、例えば無菌の、発熱物質を含まない適切なビヒクルで構成させるために粉末形状であってもよい。無菌粉末を無菌状態で個々の無菌容器中に充填することによりまたは無菌溶液を無菌状態でそれぞれの容器中に充填し凍結乾燥することにより、乾燥固体剤形を調製してもよい。   The compounds according to the invention may also be formulated for parenteral administration by bolus injection or continuous infusion, in unit dosage form, eg as ampoules, vials, small volume infusions or pre-filled syringes or in multi-dose containers May also be provided. The composition may take the form of a solution, suspension, or emulsion in an aqueous or non-aqueous vehicle, and supplementary agents such as antioxidants, buffers, antimicrobial agents and / or tonicity modifiers. You may contain. Alternatively, the active ingredient may be in powder form for use in a suitable vehicle, eg, sterile, pyrogen-free, prior to use. Dry solid dosage forms may be prepared by filling sterile powders into individual sterile containers aseptically or by filling sterile containers with sterile solutions into each container and lyophilizing.

本発明による化合物および医薬組成物はまた、他の治療剤、例えば抗ヒスタミン剤、抗コリン作用剤、副腎皮質ステロイドなどの抗炎症剤、例えば、プロピオン酸フルチカゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、フランカルボン酸モメタゾン、トリアムシノロンアセトニドまたはブデソニド；または非ステロイド抗炎症剤（NSAIDs）、例えばクロモグリク酸ナトリウム、ネドクロミルナトリウム、PDE-4インヒビター、ロイコトリエンアンタゴニスト、INOSインヒビター、トリプターゼおよびエラスターゼインヒビター、β-2インテグリンアンタゴニストおよびアデノシン2aアゴニスト；またはサルメテロール、サルブタモール、フォルモテロール、フェノテロールまたはテルブタリンおよびそれらの塩などのβアドレナリン作動剤；または、抗感染性剤、例えば抗菌剤および抗ウイルス剤と一緒に使用してもよい。本発明の化合物を吸入または鼻腔内経路により通常投与される他の治療剤と一緒に投与する場合、得られる医薬組成物を吸入または鼻腔内経路により投与し得ることは理解されるであろう。   The compounds and pharmaceutical compositions according to the invention may also contain other therapeutic agents such as antihistamines, anticholinergics, anti-inflammatory agents such as corticosteroids such as fluticasone propionate, beclomethasone dipropionate, mometasone furoate, triamcinolone Acetonide or budesonide; or nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) such as sodium cromoglycate, nedocromil sodium, PDE-4 inhibitors, leukotriene antagonists, INOS inhibitors, tryptase and elastase inhibitors, β-2 integrin antagonists and adenosine 2a agonists Or beta-adrenergic agents such as salmeterol, salbutamol, formoterol, fenoterol or terbutaline and their salts; or anti-infection Agents may be used, for example, with an antibacterial and antiviral agents. It will be appreciated that when a compound of the present invention is administered in conjunction with other therapeutic agents normally administered by inhalation or intranasal route, the resulting pharmaceutical composition may be administered by inhalation or intranasal route.

本発明の化合物は、例えば0.001〜500mg/kg体重、好ましくは0.01〜500mg/kg体重、さらに好ましくは0.01〜100mg/kg体重の量で、かつ適切な頻度で、例えば毎日1〜4回投与することが好都合となり得る。正確な投与管理は勿論、患者の治療徴候、年齢および症状などの因子、ならびに選ばれる特定の投与経路に依存するであろう。   The compound of the present invention is administered in an amount of, for example, 0.001 to 500 mg / kg body weight, preferably 0.01 to 500 mg / kg body weight, more preferably 0.01 to 100 mg / kg body weight, and at an appropriate frequency, for example, 1 to 4 times daily. Can be convenient. The exact dosage regime will, of course, depend on factors such as the patient's therapeutic signs, age and symptoms, and the particular route of administration chosen.

本明細書および特許請求の範囲の全体にわたって、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、さまざまな語尾変化を含めて用語「含む（comprise）」は、示されたものもしくはステップまたはものもしくはステップのグループを含むことを意味するが、他の任意のものもしくはステップまたはものもしくはステップのグループを除外することを意味しないと理解されるであろう。   Throughout the specification and claims, the term “comprise”, including various ending changes, unless indicated to the contrary in context, is intended to indicate what is shown or steps or what or steps. It will be understood that it is meant to include any group of, but not to exclude any other or step or group of things or steps.

一般的実験の詳細
LC/MSシステム
この系は、3μm ABZ+PLUS（3.3cmx4.6mm内径）カラムを使用し、溶媒Aとして0.1％v/vギ酸+0.077％w/v酢酸アンモニウム水溶液；および溶媒Bとして95:5アセトニトリル：水+0.05％v/vギ酸を用いて、毎分3mlの流速にて溶出した。次の勾配プロトコルを用いた：100％ A、0.7分間；A+B 混合物、3.5分間で勾配プロファイル0-100％のB；100％のBにて1.1分間ホールド；0.2分間で100％のAに戻る。 Details of general experiments
LC / MS system This system uses a 3 μm ABZ + PLUS (3.3 cm x 4.6 mm ID) column, with 0.1% v / v formic acid + 0.077% w / v aqueous ammonium acetate as solvent A; and 95: 5 as solvent B Elution was performed using acetonitrile: water + 0.05% v / v formic acid at a flow rate of 3 ml / min. The following gradient protocol was used: 100% A, 0.7 minutes; A + B mixture, gradient profile 0-100% B in 3.5 minutes; hold 1.1 minutes in 100% B; 100% A in 0.2 minutes Return.

サーモスプレーマススペクトル
サーモスプレーマススペクトルを、HP5989Aエンジンマススペクトロメータ、+veサーモスプレー、熱源温度250℃、プローブ温度120℃(stem)、190℃(tip)、検出マスレンジ100-850a.m.u.にて測定した。流速が0.7ml/分で、65%のメタノールと35%の0.05M酢酸アンモニウム水溶液を含む10μlの溶媒混合物中に化合物を注入した。 The thermospray mass spectrum thermospray mass spectrum, HP5989A Engine Mass spectrometer, + ve thermospray, heat source temperature 250 ° C., the probe temperature 120 ℃ (stem), 190 ℃ (tip), measured by the detection mass range 100-850a.mu did. The compound was injected into 10 μl of solvent mixture containing 65% methanol and 35% 0.05M aqueous ammonium acetate at a flow rate of 0.7 ml / min.

固相抽出(イオン交換)
「SCX」は、Isolute Flash SCX-2スルホン酸固相抽出カートリッジを意味する。 Solid phase extraction (ion exchange)
“SCX” means Isolute Flash SCX-2 sulfonic acid solid phase extraction cartridge.

温度の単位は全て℃である。   All temperature units are in degrees Celsius.

説明
説明1:2,2,2-トリフルオロ-N-(モルホリン-2-イルメチル)アセトアミド
メタノール(70ml)に溶解したモルホリン-2-イルメチルアミン(3.1g)の攪拌溶液に窒素下で、エチル-α，α，α-トリフルオロアセテート(5mlを20mlのエーテルに溶解)のエーテル溶液を加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水およびブラインで洗浄し、乾燥した。混合物を30分、22℃で攪拌し、その後、真空下で揮発分を全て除去した。残渣をメタノール(10ml)に溶解し、再度、揮発分を真空下で除去して、表題化合物を白色のカリカリいう発泡体(crunchy foam)(4.9g)として得た。 Explanation
Description 1: A stirred solution of morpholin-2-ylmethylamine (3.1 g) dissolved in 2,2,2-trifluoro-N- (morpholin-2-ylmethyl) acetamidomethanol (70 ml) under nitrogen, ethyl- An ether solution of α, α, α-trifluoroacetate (5 ml dissolved in 20 ml ether) was added, washed with saturated aqueous sodium bicarbonate, water and brine and dried. The mixture was stirred for 30 minutes at 22 ° C., after which all volatiles were removed under vacuum. The residue was dissolved in methanol (10 ml) and again volatiles were removed in vacuo to give the title compound as a white crunchy foam (4.9 g).

サーモスプレーマススペクトル m/z 213 [MH⁺]。 Thermospray mass spectrum m / z 213 [MH ⁺ ].

説明2:N-[4-(3,4-ジクロロベンジル)モルホリン-2-イル]メチル-2,2,2-トリフルオロアセトアミド
窒素下、N,N-ジメチルホルムアミド(50ml)に溶解した説明1(3.3g)の攪拌溶液に炭酸カリウム(2.46g)およびヨウ化ナトリウム(2.12g)を加えた。N,N-ジメチルホルムアミド(10ml)に溶解した3,4-ジクロロベンジルクロライド溶液(2ml)を混合物に滴下した。混合物を22℃で、18時間攪拌し、その後、真空下で揮発分を除去した。残渣をジクロロメタン(100ml)と飽和炭酸ナトリウム水溶液(50ml)に分配した。その後、有機相を新たな飽和炭酸ナトリウム水溶液(2x50ml)と水(50ml)で洗浄し、その後、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空下で溶媒を蒸発させて黄白色のオイルを得た。シクロヘキサンに溶解した25%の酢酸エチルで溶出する90gのシリカカートリッジを用いたBiotageフラッシュクロマトグラフィーでオイルを精製して、表題化合物を無色のオイル(2.97g)として得た。 Description 2: N- [4- (3,4-dichlorobenzyl) morpholin-2-yl] methyl-2,2,2-trifluoroacetamide dissolved in N, N-dimethylformamide (50 ml) under nitrogen 1 To a stirred solution of (3.3 g) was added potassium carbonate (2.46 g) and sodium iodide (2.12 g). A 3,4-dichlorobenzyl chloride solution (2 ml) dissolved in N, N-dimethylformamide (10 ml) was added dropwise to the mixture. The mixture was stirred at 22 ° C. for 18 hours, after which volatiles were removed under vacuum. The residue was partitioned between dichloromethane (100ml) and saturated aqueous sodium carbonate (50ml). The organic phase was then washed with a new saturated aqueous sodium carbonate solution (2 × 50 ml) and water (50 ml), then dried over magnesium sulfate, filtered and the solvent was evaporated under vacuum to give a pale yellow oil. The oil was purified by Biotage flash chromatography using a 90 g silica cartridge eluting with 25% ethyl acetate dissolved in cyclohexane to give the title compound as a colorless oil (2.97 g).

LC/MS(システム A)保持時間2.63分、マススペクトル m/z 371[MH⁺]。 LC / MS (System A) retention time 2.63 minutes, mass spectrum m / z 371 [MH ⁺ ].

説明3:[4-(3,4-ジクロロベンジル)モルホリン-2-イル]メチルアミン
メタノール(15ml)および水(5ml)に溶解した説明2(2.97g)の攪拌溶液に炭酸カリウム(5.53g)を加えた。混合物を22℃で、18時間攪拌し、その後、メタノールを真空下で除去した。水(25ml)を加え、混合物を酢酸エチル(3x30ml)で抽出した。合わせた有機相を水(5ml)および飽和塩化ナトリウム水溶液(10ml)で洗浄し、その後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒を真空下で蒸発させて、黄白色のオイルを得た。75:8:1のジクロロメタン/エタノール/0.880のアンモニア溶液で溶出する90gシリカカートリッジを用いたBiotageフラッシュクロマトグラフィーでオイルを精製した。必要な画分を合わせ、溶媒を真空下で蒸発させて表題化合物を無色のオイル(1.85g)として得た。 Description 3: Potassium carbonate (5.53 g) in a stirred solution of Description 2 (2.97 g) dissolved in [4- (3,4-dichlorobenzyl) morpholin-2-yl] methylamine methanol (15 ml) and water (5 ml) Was added. The mixture was stirred at 22 ° C. for 18 hours, after which the methanol was removed in vacuo. Water (25ml) was added and the mixture was extracted with ethyl acetate (3x30ml). The combined organic phases were washed with water (5 ml) and saturated aqueous sodium chloride solution (10 ml), then dried over sodium sulfate, filtered and the solvent evaporated in vacuo to give a pale yellow oil. The oil was purified by Biotage flash chromatography using a 90 g silica cartridge eluting with 75: 8: 1 dichloromethane / ethanol / 0.880 ammonia solution. The required fractions were combined and the solvent was evaporated under vacuum to give the title compound as a colorless oil (1.85g).

LC/MS(システム A)保持時間1.77分、マススペクトル m/z 275[MH⁺]。 LC / MS (System A) retention time 1.77 minutes, mass spectrum m / z 275 [MH ⁺ ].

説明4:[4-(3,4-ジクロロベンジル)モルホリン-2-イル]メチルアミン(代替合成)
2-[(3,4-ジクロロベンジル)アミノ]エタノール(Chem Abs No.40172-06-3、0.980g)と2-(オキシラン-2-イルメチル)-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン(1.10g)の混合物を80℃、窒素下で3時間加熱した。得られた固形塊を濃硫酸(1.5ml)で処理し、その後、150℃で、24時間攪拌した。混合物を水(100ml)で処理し、その後、酢酸エチル(2x100ml)で洗浄した。浅黒い水相を5Mの水酸化ナトリウム水溶液を用いて約pH12まで塩基性にし、その後、酢酸エチル(2x100ml)で抽出した。合わせた有機抽出物を水およびブラインで洗浄し、乾燥し(Na₂SO₄)、真空下で濃縮して表題化合物を褐色オイル(1.02g)として得た。 Description 4: [4- (3,4-Dichlorobenzyl) morpholin-2-yl] methylamine (alternative synthesis)
2-[(3,4-Dichlorobenzyl) amino] ethanol (Chem Abs No. 40172-06-3, 0.980 g) and 2- (oxiran-2-ylmethyl) -1H-isoindole-1,3 (2H) A mixture of dione (1.10 g) was heated at 80 ° C. under nitrogen for 3 hours. The resulting solid mass was treated with concentrated sulfuric acid (1.5 ml) and then stirred at 150 ° C. for 24 hours. The mixture was treated with water (100 ml) and then washed with ethyl acetate (2 × 100 ml). The dark aqueous phase was basified to about pH 12 using 5M aqueous sodium hydroxide and then extracted with ethyl acetate (2 × 100 ml). The combined organic extracts were washed with water and brine, dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated in vacuo to give the title compound as a brown oil (1.02 g).

LC-MS(システム A):保持時間1.6分。 LC-MS (System A): Retention time 1.6 minutes.

説明5:1-[(2S)-4-(3,4-ジクロロベンジル)モルホリン-2-イル]メチルアミン
説明3(ラセミ混合物,8g)を分取キラル-HPLCにより単一のエナンチオマーに分割した。2" x22cm Chiralpak AD 20μmカラム、Merck self pack DAC system、95:5:0.1(v/v)のヘプタン:無水エタノール:ジエチルアミン(流速:40分かけて55ml/分、UV検出225nm)にて溶出;サンプルロード調製:20mlの3:2(v/v)無水エタノール:システム溶出液に溶解した400mgのサンプルを用いて分割を行った。 Description 5: 1-[(2S) -4- (3,4-dichlorobenzyl) morpholin-2-yl] methylamine Description 3 (racemic mixture, 8 g) was resolved into a single enantiomer by preparative chiral-HPLC . 2 "x22cm Chiralpak AD 20 μm column, Merck self pack DAC system, elution with 95: 5: 0.1 (v / v) heptane: absolute ethanol: diethylamine (flow rate: 55 ml / min over 40 minutes, UV detection 225 nm); Sample load preparation: 20 ml of 3: 2 (v / v) absolute ethanol: A 400 mg sample dissolved in the system eluate was used for the separation.

以下のように表題化合物(2.49g)を得た:分取HPLC保持時間23.0分。 The title compound (2.49 g) was obtained as follows: Preparative HPLC retention time 23.0 minutes.

説明5(代替手法)
水(8.5ml)中の説明7(1.00g)のスラリーを75℃にまで加熱し、その後、濃硫酸(2.5ml)で滴下処理した。その後、混合物を還流加熱した。23時間後、反応混合物を22℃まで冷却し、その後、ジクロロメタン(6ml)で処理した。その後、0.880のアンモニア溶液(7ml)を冷却しながら滴下した。さらにジクロロメタン(10ml)を加えた。水相を分離し、さらにジクロロメタン(10ml)で抽出した。合わせた有機相を水(5ml)で洗浄し、その後、乾燥するまで濃縮した。残渣をジクロロメタンに再溶解し、溶媒を再蒸発させて生成物をオイル(662mg)として得た。 Explanation 5 (alternative method)
A slurry of Description 7 (1.00 g) in water (8.5 ml) was heated to 75 ° C. and then treated dropwise with concentrated sulfuric acid (2.5 ml). The mixture was then heated to reflux. After 23 hours, the reaction mixture was cooled to 22 ° C. and then treated with dichloromethane (6 ml). Thereafter, 0.880 ammonia solution (7 ml) was added dropwise while cooling. Further dichloromethane (10 ml) was added. The aqueous phase was separated and further extracted with dichloromethane (10 ml). The combined organic phases were washed with water (5 ml) and then concentrated to dryness. The residue was redissolved in dichloromethane and the solvent was re-evaporated to give the product as an oil (662 mg).

説明6:D-酒石酸と1-[(2S)-4-(3,4-ジクロロベンジル)モルホリン-2-イル]メタンアミンの1:1の塩
説明3(0.613g)をメタノール(12.3ml)に溶解した。D-酒石酸(0.335g)を加え、スラリーを50分間、還流加熱した。混合物を0-5℃まで冷却し、沈殿物を濾別して、表題化合物を白色固体(0.4g)として得た。 Description 6: 1: 1 salt of D-tartaric acid and 1-[(2S) -4- (3,4-dichlorobenzyl) morpholin-2-yl] methanamine Description 3 (0.613 g) in methanol (12.3 ml) Dissolved. D-tartaric acid (0.335 g) was added and the slurry was heated to reflux for 50 minutes. The mixture was cooled to 0-5 ° C. and the precipitate was filtered off to give the title compound as a white solid (0.4 g).

ee:76%ee。 ee: 76% ee.

キラル分析 HPLC (Chiralpak AD カラム、4.6x250mm、50:50:0.1のMeOH:EtOH:ブチルアミンで溶出、流速0.5ml/分、220nmでUV検出)、保持時間8.9分。 Chiral analytical HPLC (Chiralpak AD column, 4.6 x 250 mm, elution with 50: 50: 0.1 MeOH: EtOH: butylamine, flow rate 0.5 ml / min, UV detection at 220 nm), retention time 8.9 min.

説明7:2-[4-(3,4-ジクロロ-ベンジル)-モルホリン-2-イルメチル]-イソインドール-1,3-ジオン
テトラヒドロフラン(3.3ml)に溶解した2-[(3,4-ジクロロベンジル)アミノ]エタノール(2.038g)と(S)-2-(オキシラン-2-イルメチル)-1H-イソインドール-1,3(2H)-ジオン(2.032g)の混合物を攪拌し、窒素下、還流加熱した。21.5時間後、さらにテトラヒドロフラン(12.5ml)を添加し、混合物を3℃まで冷却した。トリフェニルホスフィン(2.793g)を加え、固体が全て溶解するまで混合物を攪拌した。その後、温度を7℃未満に保持しながら12分かけてジイソプロピルアゾジカルボキシレート(2.1ml)を加えた。2.25時間後、混合物を22℃まで温めた。5.3時間後、さらにトリフェニルホスフィン(121mg)およびジイソプロピルアゾジカルボキシレート(0.09ml)を加えた。22.5時間後、反応混合物をほとんど乾燥するまで濃縮した。プロパン-2-オール(12ml)を加え、濃縮を繰り返し、これをもう一度繰り返した。さらにプロパン-2-オール(12ml)を加え、混合物を70℃まで加熱した。0.5時間後、スラリーを22℃まで冷却し、その後さらに2時間後、生成物を濾過により集めた。この固体をプロパン-2-オール(2x4ml)で洗浄し、その後、真空下、40℃で乾燥して、生成物(2.622g)を得た。 Description 7: 2 -[(3,4-dichloro) dissolved in 2- [4- (3,4-dichloro-benzyl) -morpholin-2-ylmethyl] -isoindole -1,3-dione tetrahydrofuran (3.3 ml) A mixture of (benzyl) amino] ethanol (2.038 g) and (S) -2- (oxiran-2-ylmethyl) -1H-isoindole-1,3 (2H) -dione (2.032 g) was stirred under nitrogen. Heated to reflux. After 21.5 hours, further tetrahydrofuran (12.5 ml) was added and the mixture was cooled to 3 ° C. Triphenylphosphine (2.793 g) was added and the mixture was stirred until all the solid dissolved. Thereafter, diisopropyl azodicarboxylate (2.1 ml) was added over 12 minutes keeping the temperature below 7 ° C. After 2.25 hours, the mixture was warmed to 22 ° C. After 5.3 hours, more triphenylphosphine (121 mg) and diisopropyl azodicarboxylate (0.09 ml) were added. After 22.5 hours, the reaction mixture was concentrated to near dryness. Propan-2-ol (12 ml) was added, concentration was repeated, and this was repeated once more. Further propan-2-ol (12 ml) was added and the mixture was heated to 70 ° C. After 0.5 hours, the slurry was cooled to 22 ° C., and after another 2 hours, the product was collected by filtration. This solid was washed with propan-2-ol (2 × 4 ml) and then dried at 40 ° C. under vacuum to give the product (2.622 g).

説明8:4-ニトロフェニル[(2S)-4-(3,4-ジクロロベンジル)モルホリン-2-イル]メチルカルバメート
無水ジクロロメタン(10ml)に溶解した4-ニトロフェニルクロロホルメート(2.92g)溶液に、0℃、窒素下で、無水ジクロロメタン(15ml)に溶解した説明5(4.0g)およびトリエチルアミン(2.07ml)の溶液を10分かけて滴下した。混合物を室温にまで温め、2.5時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、シクロヘキサンに溶解した25-50%酢酸エチルにて溶出するシリカゲルBiotageフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製して表題化合物(3.8g)を得た。 Description 8: 4-nitrophenyl chloroformate (2.92 g) solution in 4-nitrophenyl [(2S) -4- (3,4-dichlorobenzyl) morpholin-2-yl] methylcarbamate anhydrous dichloromethane (10 ml) A solution of Description 5 (4.0 g) and triethylamine (2.07 ml) dissolved in anhydrous dichloromethane (15 ml) at 0 ° C. under nitrogen was added dropwise over 10 minutes. The mixture was warmed to room temperature and stirred for 2.5 hours. The solvent was evaporated and the residue was purified by silica gel Biotage flash chromatography eluting with 25-50% ethyl acetate dissolved in cyclohexane to give the title compound (3.8 g).

LC-MS(システム A)保持時間3.1分。マススペクトル m/z 440[MH⁺]。 LC-MS (System A) retention time 3.1 minutes. Mass spectrum m / z 440 [MH ⁺ ].

説明9:メチル3-([([(2S)-4-(3,4-ジクロロベンジル)モルホリン-2-イル]メチルアミノ)カルボニル]アミノメチル)ベンゾエート
N,N-ジメチルホルムアミド(4ml)に溶解した3-アミノメチル-安息香酸メチルエステル(0.1817g)(Eur.J.Med.Chem.1993、28(7-8)、624-632)の溶液に、攪拌しながら、N,N-ジメチルホルムアミド(4ml)に溶解した説明8(0.4612g)の溶液を加えた。N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.365ml)を加え、混合物を20℃で、4時間攪拌した。さらに67時間静置させた後、混合物をメタノール(約5ml)で希釈し、メタノールで前設定された2x10g SCXイオン交換カートリッジ(IST Isolute Flash SCX-2)にかけた。カートリッジをメタノールおよび10%の0.880のアンモニアメタノール溶液で溶出し、最初のアンモニア画分を合わせ、溶媒を真空下で蒸発させた。200:8:1のジクロロメタン/エタノール/0.880のアンモニア溶液で溶出したシリカゲルBiotage(登録商標)フラッシュクロマトグラフィーにより、表題化合物(0.4237g)を黄白色ゴムとして得た。 Description 9: Methyl 3-([([((2S) -4- (3,4-dichlorobenzyl) morpholin-2-yl] methylamino) carbonyl] aminomethyl) benzoate
To a solution of 3-aminomethyl-benzoic acid methyl ester (0.1817 g) (Eur. J. Med. Chem. 1993, 28 (7-8), 624-632) dissolved in N, N-dimethylformamide (4 ml) While stirring, a solution of Description 8 (0.4612 g) dissolved in N, N-dimethylformamide (4 ml) was added. N, N-Diisopropylethylamine (0.365 ml) was added and the mixture was stirred at 20 ° C. for 4 hours. After standing for another 67 hours, the mixture was diluted with methanol (ca. 5 ml) and applied to a 2 × 10 g SCX ion exchange cartridge (IST Isolute Flash SCX-2) pre-set with methanol. The cartridge was eluted with methanol and 10% 0.880 ammonia methanol solution, the first ammonia fractions were combined and the solvent was evaporated under vacuum. Silica gel Biotage® flash chromatography eluting with 200: 8: 1 dichloromethane / ethanol / 0.880 ammonia solution gave the title compound (0.4237 g) as a pale yellow gum.

LC/MS(システム A):保持時間=2.59分、m/z 466,468[MH⁺]。 LC / MS (System A): retention time = 2.59 minutes, m / z 466,468 [MH ⁺ ].

説明10:3-([([(2S)-4-(3、4-ジクロロベンジル)モルホリン-2-イル]メチルアミノ)カルボニル]アミノメチル)安息香酸
メタノール(10ml)および温めたプロパン-2-オール(7ml)で溶解した説明9(0.3869g)の攪拌溶液に2Mの水酸化ナトリウム水溶液(0.85ml)および水(5ml)を加えた。混合物を20℃で、20時間攪拌し、その後、溶媒を真空下で蒸発させると、白色固体が残存した。固体を水に再溶解し、溶液のpHを2Mの塩酸水溶液を加えることによりおよそ6にまで調整した。メタノールで前設定した2x10g SCXイオン交換カートリッジ(IST Isolute Flash SCX-2)に混合物を適用した。カートリッジをメタノールおよびメタノールに溶解した5%のトリエチルアミンで溶出した。合わせた最初のメタノール画分中に溶出された生成物が得られ、溶媒を真空下で蒸発させて粗生成物を回収した。固体を水に再溶解し、2Mの塩酸水溶液を添加することにより溶液のpHをおよそ1にまで調整した。メタノールで前設定した2x10g SCXイオン交換カートリッジ(IST Isolute Flash SCX-2)に混合物を適用した。カートリッジをメタノールおよびメタノールに溶解した5%トリエチルアミンで溶出した。最初のトリエチルアミン画分を合わせ、溶媒を真空下で蒸発させて、表題化合物(0.186g)を淡黄色オイルとして得た。 Description 10: 3-([([[(2S) -4- (3,4-dichlorobenzyl) morpholin-2-yl] methylamino) carbonyl] aminomethyl) benzoic acid methanol (10 ml) and warmed propane-2- To a stirred solution of Description 9 (0.3869 g) dissolved in oar (7 ml) was added 2M aqueous sodium hydroxide (0.85 ml) and water (5 ml). The mixture was stirred at 20 ° C. for 20 hours, after which the solvent was evaporated under vacuum leaving a white solid. The solid was redissolved in water and the pH of the solution was adjusted to approximately 6 by adding 2M aqueous hydrochloric acid. The mixture was applied to a 2 × 10 g SCX ion exchange cartridge (IST Isolute Flash SCX-2) pre-set with methanol. The cartridge was eluted with methanol and 5% triethylamine dissolved in methanol. The product eluted in the first combined methanol fraction was obtained and the solvent was evaporated under vacuum to recover the crude product. The solid was redissolved in water and the pH of the solution was adjusted to approximately 1 by adding 2M aqueous hydrochloric acid. The mixture was applied to a 2 × 10 g SCX ion exchange cartridge (IST Isolute Flash SCX-2) pre-set with methanol. The cartridge was eluted with methanol and 5% triethylamine dissolved in methanol. The first triethylamine fractions were combined and the solvent was evaporated under vacuum to give the title compound (0.186 g) as a pale yellow oil.

LC/MS(システム A):保持時間=2.45分、m/z 452,454[MH⁺]。 LC / MS (System A): retention time = 2.45 min, m / z 452,454 [MH ⁺ ].

実施例1:3-([([(2S)-4-(3,4-ジクロロベンジル)モルホリン-2-イル]メチルアミノ)カルボニル]-アミノメチル)-N-エチルベンズアミド
N,N-ジメチルホルムアミド(1ml)に溶解した説明10(0.035g)の攪拌溶液に、N,N-ジメチルホルムアミド(1ml)に溶解した1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミドハイドロクロライド(0.0208g)および1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(0.012g)の溶液を20℃で加えた。N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.0196ml)およびテトラヒドロフラン(0.282ml)に溶解した2Mのエチルアミン溶液を加え、混合物を20℃で、18.5時間攪拌した。混合物をメタノール(約2ml)で希釈し、メタノールで前設定した5gのSCXイオン交換カートリッジ(IST Isolute Flash SCX-2)に適用した。カートリッジをメタノールおよび10%の0.880のアンモニアメタノール溶液で溶出した。最初のアンモニア画分を真空下で蒸発させ、さらに100:8:1のジクロロメタン/エタノール/0.880アンモニア溶液で溶出するシリカゲルBiotage(登録商標)フラッシュクロマトグラフィーにて残渣を精製して、表題化合物(0.0107g)を無色のガラス質の物質として得た。 Example 1: 3-([([((2S) -4- (3,4-dichlorobenzyl) morpholin-2-yl] methylamino) carbonyl] -aminomethyl) -N-ethylbenzamide
In a stirred solution of Description 10 (0.035 g) dissolved in N, N-dimethylformamide (1 ml), 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrolyzed in N, N-dimethylformamide (1 ml). A solution of chloride (0.0208 g) and 1-hydroxybenzotriazole (0.012 g) was added at 20 ° C. A 2M ethylamine solution dissolved in N, N-diisopropylethylamine (0.0196 ml) and tetrahydrofuran (0.282 ml) was added and the mixture was stirred at 20 ° C. for 18.5 hours. The mixture was diluted with methanol (ca. 2 ml) and applied to a 5 g SCX ion exchange cartridge (IST Isolute Flash SCX-2) pre-set with methanol. The cartridge was eluted with methanol and 10% 0.880 ammonia methanol solution. The first ammonia fraction was evaporated in vacuo and the residue purified by silica gel Biotage® flash chromatography eluting with 100: 8: 1 dichloromethane / ethanol / 0.880 ammonia solution to give the title compound (0.0107 g) was obtained as a colorless glassy material.

LC/MS(システム A):保持時間=2.35分、m/z 479,481[MH⁺]。 LC / MS (System A): retention time = 2.35 minutes, m / z 479,481 [MH ⁺ ].

Claims (12)

式(I)の化合物、その塩および溶媒和化合物。

Compounds of formula (I), their salts and solvates.

式(II)の化合物またはその塩をエチルアミンとカップリングさせることを含む、式(I)の化合物、その塩または溶媒和化合物の調製法。

A process for preparing a compound of formula (I), a salt or solvate thereof, comprising coupling a compound of formula (II) or a salt thereof with ethylamine.

治療剤として用いる、請求項１に記載の化合物。 The compound according to claim 1, which is used as a therapeutic agent. 請求項１に記載の有効量の化合物を投与することを含む、炎症性症状を患うまたは患い易いヒトまたは動物被験体を治療する方法。 A method of treating a human or animal subject suffering from or susceptible to an inflammatory condition comprising administering an effective amount of the compound of claim 1. 請求項１に記載の化合物および当該化合物用の生理学的に許容される担体を含む医薬組成物。 A pharmaceutical composition comprising the compound of claim 1 and a physiologically acceptable carrier for the compound. 式(II)の化合物。

Compound of formula (II).

式(III)の化合物。

Compound of formula (III).

式(IV)の化合物。

A compound of formula (IV).

式(VI)の化合物。

A compound of formula (VI).

式(VII)の化合物。

A compound of formula (VII).

式(VIBR)の化合物。

[式中、Aは保護アミノ基である] A compound of formula (VIBR).

[Wherein A is a protected amino group] 式(VIB)の化合物。

[式中、Aは保護アミノ基である] A compound of formula (VIB).

[Wherein A is a protected amino group]