JP2006321932A - Carrier polymer particle and its production method - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、有機ポリマー粒子の表面が糖類で被覆されている担体ポリマー粒子およびその製造方法に関する。 The present invention relates to carrier polymer particles in which the surface of organic polymer particles is coated with a saccharide and a method for producing the same.
近年、創薬などの分野で、分子間相互作用を利用して、ある特定の分子に特異的な相互作用を有する分子を探索する試みが盛んに行われている。具体的には、相互作用を有する片方の分子を担体に固定し、特異的相互作用を利用してもう片方の分子(ターゲット分子)を捕捉、精製することが広く行われている。 In recent years, in the field of drug discovery and the like, attempts have been actively made to search for a molecule having an interaction specific to a specific molecule by utilizing an intermolecular interaction. Specifically, it is widely performed that one molecule having an interaction is immobilized on a carrier, and the other molecule (target molecule) is captured and purified using a specific interaction.
例えば、アフィニティー樹脂を用いた免疫抑制剤ＦＫ５０６の細胞内結合タンパク質ＦＫＢＰ１２の発見（非特許文献１）などが知られている。このようなアフィニティー樹脂としては、アガロースなどの多孔質ゲルが一般的に用いられている。しかしながら、多孔質ゲルを用いる場合、ターゲット分子以外の分子がアフィニティー樹脂に吸着する、いわゆる、非特異吸着と呼ばれる現象が生じ、ターゲット分子の分離、精製が困難であるという問題が生じる。 For example, the discovery of the intracellular binding protein FKBP12 of the immunosuppressant FK506 using an affinity resin (Non-patent Document 1) is known. As such an affinity resin, a porous gel such as agarose is generally used. However, when a porous gel is used, a phenomenon called so-called non-specific adsorption occurs in which molecules other than the target molecule are adsorbed to the affinity resin, resulting in a problem that it is difficult to separate and purify the target molecule.
かかる非特異吸着の解決策として、表面がグリシジルメタクリレートで覆われたスチレン−グリシジルメタクリレート重合体にスペーサを介して生理活性物質を結合したミクロスフィア（特許文献―１，２）、粒子表面に親水性のスペーサを導入した粒子（特許文献―３，４）などが提案されている。しかしながら、これらはいずれも非特異吸着の低減効果が充分ではなく、さらに非特異吸着の少ない担体用粒子が求められている。 As a solution for such non-specific adsorption, microspheres with a bioactive substance bound to a styrene-glycidyl methacrylate polymer whose surface is covered with glycidyl methacrylate via a spacer (Patent Documents 1 and 2), hydrophilic on the particle surface (See Patent Documents 3 and 4) in which a spacer is introduced. However, none of these is sufficiently effective in reducing non-specific adsorption, and there is a need for carrier particles with less non-specific adsorption.
一方、化学結合法で感作させる生理活性物質担体ポリマー粒子として、主にカルボキシル基変性ポリスチレン粒子が広く使用されている。しかしながら、このポリスチレン系の粒子は一般に、試験検体中に存在する目的としない他の生理活性物質等の吸着（非特異吸着）が大きく、これにより感作粒子の性能が阻害されるため、粒子を使用する上での大きな障害になっている。これに対して、粒子表面に目的の生理活性物質を感作させた後、残りの粒子表面をウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）等の害の少ないタンパクを先に吸着させるブロッキングの手法が用いられているが、非特異吸着を充分に防止することは困難である。また、ポリスチレン粒子にスチレンスルホン酸塩もしくは一般式（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎまたは（ＣＨ２ＣＨＣＨ３Ｏ）ｍで表されるポリアルキレンオキシド側鎖を有するアクリルエステルを共重合させたり、あるいは粒子の乳化重合後にアルカリ性水溶液中で加熱処理して粒子に結合した過硫酸塩系開始剤の断片を加水分解させたりすることにより、生理活性物質担体粒子としての性能を向上させることが知られているが、非特異吸着を充分に防止するには至っていない。
本発明の目的は、タンパク質などの生理活性物質の非特異吸着が極めて少ない担体ポリマー粒子およびその製造方法を提供することである。 An object of the present invention is to provide carrier polymer particles with very little non-specific adsorption of physiologically active substances such as proteins, and a method for producing the same.
本発明の担体ポリマー粒子は、
粒径が０．１〜１５μｍの有機ポリマー粒子と、
前記有機ポリマー粒子の表面を被覆する糖類と、
を含み、
前記有機ポリマー粒子および前記糖類が化学結合している。
The carrier polymer particles of the present invention are
Organic polymer particles having a particle size of 0.1 to 15 μm;
Sugars that coat the surface of the organic polymer particles;
Including
The organic polymer particles and the saccharide are chemically bonded.
ここで、上記本発明の担体ポリマー粒子において、前記糖類が多糖類であることができる。 Here, in the carrier polymer particles of the present invention, the saccharide may be a polysaccharide.
ここで、上記本発明の担体ポリマー粒子において、前記糖類はカルボキシメチル化されていることができる。 Here, in the carrier polymer particle of the present invention, the saccharide may be carboxymethylated.
ここで、上記本発明の担体ポリマー粒子において、前記化学結合は、アミド結合およびエステル結合の少なくとも一方を含む結合基によることができる。 Here, in the carrier polymer particle of the present invention, the chemical bond can be based on a linking group including at least one of an amide bond and an ester bond.
本発明の担体ポリマー粒子の製造方法は、
粒径が０．１〜１５μｍの有機ポリマー粒子および前記糖類を化学結合させることにより、前記有機ポリマー粒子の表面を前記糖類で被覆する工程を含む。
The method for producing carrier polymer particles of the present invention comprises:
A step of covering the surface of the organic polymer particles with the saccharide by chemically bonding the organic polymer particles having a particle size of 0.1 to 15 μm and the saccharide.
ここで、上記本発明の担体ポリマー粒子の製造方法において、前記化学結合させる際、前記有機ポリマー粒子は、第１の官能基を有し、前記糖類は、第２の官能基を有し、前記第１の官能基と前記第２の官能基とを反応させることにより、前記有機ポリマー粒子と前記糖類とを結合させることができる。 Here, in the method for producing carrier polymer particles of the present invention, when the chemical bonding is performed, the organic polymer particles have a first functional group, and the saccharide has a second functional group, By reacting the first functional group and the second functional group, the organic polymer particles and the saccharide can be bonded.
ここで、上記本発明の担体ポリマー粒子の製造方法において、前記第１の官能基は、カルボキシル基、エポキシ基、アミノ基、およびトシル基から選ばれる少なくとも１種以上の官能基であることができる。 Here, in the method for producing carrier polymer particles of the present invention, the first functional group may be at least one functional group selected from a carboxyl group, an epoxy group, an amino group, and a tosyl group. .
本発明の担体ポリマー粒子によれば、粒径が０．１〜１５μｍの有機ポリマー粒子と、前記有機ポリマー粒子の表面を被覆する糖類と、を含み、前記有機ポリマー粒子および前記糖類が化学結合していることにより、非特異吸着が少ないという特徴を有する。これにより、目的とする分子の分離および精製を容易に行なうことができる。 According to the carrier polymer particle of the present invention, the organic polymer particle having a particle size of 0.1 to 15 μm and a saccharide that covers the surface of the organic polymer particle are chemically bonded to each other. Therefore, it has the characteristic that there is little nonspecific adsorption | suction. Thereby, the target molecule can be easily separated and purified.
以下、本発明の担体ポリマー粒子およびその製造方法について、詳細に説明する。 Hereinafter, the carrier polymer particles of the present invention and the production method thereof will be described in detail.
１．担体ポリマー粒子
本発明の担体ポリマー粒子は、粒径が０．１〜１５μｍの有機ポリマー粒子と、有機ポリマー粒子の表面を被覆する糖類と、を含む。また、本発明の担体ポリマー粒子においては、有機ポリマー粒子および糖類が化学結合している。限定されないが、化学結合は、アミド結合およびエステル結合の少なくとも一方を含む結合基によるものが好ましい。
1. Carrier Polymer Particles The carrier polymer particles of the present invention include organic polymer particles having a particle size of 0.1 to 15 μm and saccharides that coat the surface of the organic polymer particles. In the carrier polymer particles of the present invention, organic polymer particles and saccharide are chemically bonded. Although not limited, it is preferable that the chemical bond is a bond group including at least one of an amide bond and an ester bond.
本発明の担体ポリマー粒子はそのままで使用することも可能であるが、化合物との反応を効率的に行なうために、分散媒に分散させた分散液として使用することも可能である。かかる分散媒としては、水、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、イソブチルアルコール、ｓｅｃ-ブチルアルコール、ｔ−ブチルアルコールなどのアルコール類、エチレングリコール、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノプロピルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテルアセテート、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジエチルエーテルなどのエチレングリコール誘導体、プロピレングリコール、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノプロピルエーテル、プロピレングリコールモノブチルエーテル、プロピレングリコールモノメチルエーテルアセテートなどのプロピレングリコール誘導体、アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、メチルアミルケトン、ジイソブチルケトン、シクロヘキサノンなどのケトン類、酢酸エチル、酢酸ブチル、酢酸イソブチル、乳酸エチル、γ―ブチルラクトンなどのエステル類、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドンなどのアミド類、ジメチルスルホキシド、トルエン、キシレンなどの芳香族炭化水素などが挙げられる。 The carrier polymer particle of the present invention can be used as it is, but can also be used as a dispersion liquid dispersed in a dispersion medium in order to efficiently react with the compound. Examples of the dispersion medium include water, methanol, ethanol, propanol, isopropyl alcohol, n-butyl alcohol, isobutyl alcohol, sec-butyl alcohol, t-butyl alcohol, and other alcohols, ethylene glycol, ethylene glycol monomethyl ether, ethylene glycol mono Ethylene glycol derivatives such as ethyl ether, ethylene glycol monopropyl ether, ethylene glycol monobutyl ether, ethylene glycol monoethyl ether acetate, diethylene glycol monomethyl ether, diethylene glycol monoethyl ether, diethylene glycol dimethyl ether, diethylene glycol diethyl ether, propylene glycol, propylene glycol monomethyl ether, Propylene glycol derivatives such as propylene glycol monoethyl ether, propylene glycol monopropyl ether, propylene glycol monobutyl ether, propylene glycol monomethyl ether acetate, ketones such as acetone, methyl ethyl ketone, methyl isobutyl ketone, methyl amyl ketone, diisobutyl ketone and cyclohexanone, acetic acid Esters such as ethyl, butyl acetate, isobutyl acetate, ethyl lactate, γ-butyl lactone, amides such as N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide, N-methylpyrrolidone, dimethyl sulfoxide, toluene, xylene, etc. And aromatic hydrocarbons.
本発明の担体ポリマー粒子の粒径は、好ましくは０．１〜１７μｍであり、より好ましくは１〜１０μｍである。ここで、粒径が０．１μｍ未満の場合、遠心分離などを用いた分離に長時間を要し、水などの洗浄溶媒と粒子との分離が不十分になるため、目的外の分子（例えば、タンパク質などの生理活性物質）の除去が不十分になり、充分な精製ができない場合がある。一方、粒径が１７μｍを超えると、表面積が小さくなり、ターゲットとするタンパク質などの生理活性物質の捕捉量が少ない場合がある。 The particle size of the carrier polymer particles of the present invention is preferably 0.1 to 17 μm, more preferably 1 to 10 μm. Here, when the particle size is less than 0.1 μm, it takes a long time for separation using centrifugation or the like, and the separation between the washing solvent such as water and the particles becomes insufficient. Removal of physiologically active substances such as proteins) may be insufficient and sufficient purification may not be possible. On the other hand, when the particle size exceeds 17 μm, the surface area becomes small, and the amount of captured physiologically active substance such as a target protein may be small.
次に、本発明の担体ポリマー粒子の構成要素について詳細に説明する。 Next, components of the carrier polymer particles of the present invention will be described in detail.
１．１．有機ポリマー粒子
本発明で使用する有機ポリマー粒子の平均粒子径は好ましくは０．１〜１５μｍ、さらに好ましくは０．３〜１０μｍ、もっとも好ましくは１〜１０μｍである。また、本発明で使用する有機ポリマー粒子の変動係数は、通常３０％以下、好ましくは２０％以下、より好ましくは１０％以下である。
1.1. Organic Polymer Particles The average particle diameter of the organic polymer particles used in the present invention is preferably 0.1 to 15 μm, more preferably 0.3 to 10 μm, and most preferably 1 to 10 μm. The coefficient of variation of the organic polymer particles used in the present invention is usually 30% or less, preferably 20% or less, more preferably 10% or less.
本発明において、有機ポリマー粒子は、本発明の担体ポリマー粒子のベース粒子として使用することができる。有機ポリマー粒子は、化学結合によって結合された糖類で表面を被覆することが容易であるため、ベース粒子として適している。また、有機ポリマー粒子として、磁性体含有有機ポリマー粒子を用いることができる。 In the present invention, the organic polymer particles can be used as base particles of the carrier polymer particles of the present invention. Organic polymer particles are suitable as base particles because the surface can be easily coated with saccharides bonded by chemical bonds. Further, as the organic polymer particles, magnetic substance-containing organic polymer particles can be used.
上述したように、本発明の担体ポリマー粒子を溶媒に分散させる場合、分散媒に有機ポリマー粒子が溶解したり、あるいは溶媒によって有機ポリマー粒子が膨潤したりすると、タンパク質などの生理活性物質の非特異吸着が増加する。このため、有機ポリマー粒子は、分散媒に溶解しないことが望ましい。ここで、分散媒としては、例えば、水系媒体を用いることができる。ここで、水系媒体とは、水、または水と水に溶解する溶剤（例えば、アルコール類、アルキレングリコール誘導体など）との混合物をいう。 As described above, when the carrier polymer particles of the present invention are dispersed in a solvent, if the organic polymer particles are dissolved in the dispersion medium or the organic polymer particles are swollen by the solvent, the non-specificity of physiologically active substances such as proteins Adsorption increases. For this reason, it is desirable that the organic polymer particles are not dissolved in the dispersion medium. Here, as the dispersion medium, for example, an aqueous medium can be used. Here, the aqueous medium refers to water or a mixture of water and a solvent that dissolves in water (for example, alcohols, alkylene glycol derivatives, etc.).
有機ポリマー粒子を構成するポリマーとしては、特に、ビニル系ポリマーが好ましい。ビニル系ポリマーを構成するビニル系モノマーとしては、スチレン、α−メチルスチレン、ハロゲン化スチレン、ジビニルベンゼンなどの芳香族ビニル単量体、酢酸ビニル、プロピオン酸ビニルなどのビニルエステル類、アクリロニトリルなどの不飽和ニトリル、メチルアクリレート、エチルアクリレート、エチルメタクリレート、ブチルアクリレート、ブチルメタクリレート、２−エチルヘキシルアクリレート、２−エチルヘキシルメタクリレート、ラウリルアクリレート、ラウリルメタクリレート、シクロヘキシルアクリレート、シクロヘキシルメタクリレートなどのエチレン性不飽和カルボン酸アルキルエステル、エチレングリコールジアクリレート、エチレングリコールジメタクリレート、トリメチロールプロパントリアクリレート、トリメチロールプロパントリメタクリレートなどの多官能性（メタ）アクリレート、グリシジルアクリレート、グリシジルメタクリレート、２−ヒドロキシエチルアクリレート、２−ヒドロキシエチルメタクリレートなどの官能基を有する（メタ）アクリレートなどを例示することができる。このビニル系ポリマーは単独重合体であっても、あるいは上記ビニル系モノマーから選ばれた２種以上のモノマーからなる共重合体であってもよい。また、上記ビニル系モノマーとブタジエン、イソプレンなどの共役ジオレフィン、アクリル酸、メタクリル酸、イタコン酸、アクリルアミド、メタクリルアミド、Ｎ−メチロールアクリルアミド、Ｎ−メチロールメタクリルアミド、ジアリルフタレート、アリルアクリレート、アリルメタクリレートなどの共重合可能なモノマーとの共重合体も使用することができる。 As the polymer constituting the organic polymer particles, a vinyl polymer is particularly preferable. Examples of vinyl monomers constituting the vinyl polymer include aromatic vinyl monomers such as styrene, α-methylstyrene, halogenated styrene, and divinylbenzene, vinyl esters such as vinyl acetate and vinyl propionate, and non-acrylic monomers such as acrylonitrile. Ethylenically unsaturated carboxylic acid alkyl esters such as saturated nitrile, methyl acrylate, ethyl acrylate, ethyl methacrylate, butyl acrylate, butyl methacrylate, 2-ethylhexyl acrylate, 2-ethylhexyl methacrylate, lauryl acrylate, lauryl methacrylate, cyclohexyl acrylate, cyclohexyl methacrylate, Ethylene glycol diacrylate, ethylene glycol dimethacrylate, trimethylolpropane triacrylate Polyfunctional (meth) acrylates such as trimethylolpropane trimethacrylate, glycidyl acrylate, glycidyl methacrylate, 2-hydroxyethyl acrylate and 2-(meth) acrylate having a functional group such as hydroxyethyl methacrylate can be exemplified. This vinyl polymer may be a homopolymer or a copolymer composed of two or more monomers selected from the vinyl monomers. In addition, the above vinyl monomers and conjugated diolefins such as butadiene and isoprene, acrylic acid, methacrylic acid, itaconic acid, acrylamide, methacrylamide, N-methylolacrylamide, N-methylolmethacrylamide, diallyl phthalate, allyl acrylate, allyl methacrylate, etc. Copolymers with other copolymerizable monomers can also be used.
磁性体含有有機ポリマー粒子は、磁石で集めることが可能な公知の粒子状物質であり、磁性体微粒子を含有する。本発明において使用される有機ポリマー粒子が磁性体含有有機ポリマー粒子である場合、本発明の担体ポリマー粒子は、例えば後述する用途に使用可能な磁性粒子として使用することができる。 The magnetic substance-containing organic polymer particles are known particulate substances that can be collected with a magnet, and contain magnetic fine particles. When the organic polymer particles used in the present invention are magnetic substance-containing organic polymer particles, the carrier polymer particles of the present invention can be used, for example, as magnetic particles that can be used for the uses described below.
磁性体含有有機ポリマー粒子の粒径が０．１μｍ未満であると、磁力による分離精製に長時間を要することがあり、１０μｍを超えると表面積が小さくなり、ターゲットとするタンパク質などの生理活性物質の捕捉量が少ない場合がある。 When the particle size of the magnetic substance-containing organic polymer particles is less than 0.1 μm, it may take a long time for separation and purification by magnetic force. When the particle size exceeds 10 μm, the surface area becomes small, and the physiologically active substance such as a target protein has There may be a small amount of capture.
磁性体含有有機ポリマー粒子の内部組成は均質であってもよいが、上記の好ましい粒径範囲にある均質な磁性体粒子は、常磁性である物質が多く、磁力による分離精製を繰り返すと媒質への再分散が困難になる場合がある。このため、磁性体含有有機ポリマー粒子は、残留磁化の少ない磁性体微粒子を含む、不均質な内部組成を有することがより好ましい。このような不均質な内部組成を有する磁性体含有有機ポリマー粒子の内部構造としては、磁性体微粒子をポリマーなどの非磁性体の連続相中に分散した構造、磁性体微粒子の２次凝集体をコアとしてポリマーなどの非磁性体をシェルとする構造、ポリマーなどの非磁性体（非磁性核粒子）をコアとして磁性体微粒子の２次凝集体をシェルとする構造などが挙げられる。ここで、磁性体含有有機ポリマー粒子に含まれるポリマーとしては、例えば、有機ポリマー粒子を構成するものとして列記された上記ポリマーであってもよい。ポリマーなどの非磁性体（非磁性核粒子）をコアとして磁性体微粒子の２次凝集体をシェルとする内部構造の場合、最外層にさらにポリマー層を形成することが好ましい。最外層のポリマーとしては、例えば、ベース粒子に使用する有機ポリマー粒子を構成するものとして列記された上記ポリマーであってもよい。 The internal composition of the magnetic material-containing organic polymer particles may be homogeneous, but the homogeneous magnetic particles in the above preferred particle size range are mostly paramagnetic substances, and when separated and purified by magnetic force are repeated, the medium becomes a medium. May be difficult to re-distribute. For this reason, it is more preferable that the magnetic substance-containing organic polymer particles have a heterogeneous internal composition including magnetic fine particles having a small residual magnetization. The internal structure of the magnetic material-containing organic polymer particles having such an inhomogeneous internal composition includes a structure in which magnetic fine particles are dispersed in a continuous phase of a non-magnetic material such as a polymer, or a secondary aggregate of magnetic fine particles. Examples include a structure in which a non-magnetic material such as a polymer is used as a core as a core, and a structure in which a non-magnetic material such as a polymer (non-magnetic core particle) is used as a core and a secondary aggregate of magnetic fine particles is used as a shell. Here, the polymer contained in the magnetic substance-containing organic polymer particles may be, for example, the polymers listed as constituting the organic polymer particles. In the case of an internal structure in which a non-magnetic substance (non-magnetic core particle) such as a polymer is used as a core and a secondary aggregate of magnetic fine particles is used as a shell, it is preferable to further form a polymer layer in the outermost layer. As the polymer of the outermost layer, for example, the above-mentioned polymers listed as constituting organic polymer particles used for the base particles may be used.
本発明において、有機ポリマー粒子は、例えば、乳化重合、ソープフリー重合、懸濁重合などの定法を用いて製造が可能である。また、有機ポリマー粒子が磁性体含有有機ポリマー粒子の場合、例えば、非磁性核粒子と磁性体微粒子とを混合し、非磁性核粒子の表面に磁性体微粒子を物理的に吸着させることにより製造が可能である。なお、本発明において、「物理的吸着」とは、化学反応を伴わない吸着を意味する。「物理的吸着」の原理としては、例えば、疎水／疎水吸着、溶融結合または吸着、融着結合または吸着、水素結合、ファンデルワールス結合などが挙げられる。 In the present invention, the organic polymer particles can be produced using a conventional method such as emulsion polymerization, soap-free polymerization or suspension polymerization. Further, when the organic polymer particle is a magnetic substance-containing organic polymer particle, for example, it can be produced by mixing nonmagnetic core particles and magnetic fine particles and physically adsorbing the magnetic fine particles on the surface of the nonmagnetic core particles. Is possible. In the present invention, “physical adsorption” means adsorption without chemical reaction. The principle of “physical adsorption” includes, for example, hydrophobic / hydrophobic adsorption, melt bonding or adsorption, fusion bonding or adsorption, hydrogen bonding, van der Waals bonding, and the like.
より具体的には、有機ポリマー粒子は、例えば、上記ビニル系モノマーの懸濁重合、あるいはポリマーバルクの粉砕によって得ることができる。例えば、有機ポリマー粒子は、特公昭５７−２４３６９号公報記載のシード粒子を用いる二段膨潤重合法、ジャーナル・オブ・ポリマーサイエンス・ポリマーレター・エディション，９３７頁，第２１巻，１９６３年（J. Polym. Sc i., Polymer Letter Ed. ２１，９３７（１９６３））記載の重合方法、特開昭６１−２１５６０２号公報、特開昭６１−２１５６０３号公報、および特開昭６１−２１５６０４号公報記載の方法によって作製することができる。 More specifically, the organic polymer particles can be obtained, for example, by suspension polymerization of the vinyl monomer or pulverization of a polymer bulk. For example, the organic polymer particles may be obtained by the two-stage swelling polymerization method using seed particles described in Japanese Patent Publication No. 57-24369, Journal of Polymer Science Polymer Letter Edition, page 937, Vol. 21, 1963 (J. Polym. Sci., Polymer Letter Ed. 21, 937 (1963)), described in JP-A Nos. 61-215602, 61-215603, and 61-215604. It can produce by this method.
また、磁性体含有有機ポリマー粒子は、上述したように、疎水／疎水吸着を利用する方法によって作製することができる。例えば、非磁性核粒子の表面および磁性体微粒子の表面が疎水性のものあるいは疎水化処理されたものを選択し、これらの非磁性核粒子および磁性体微粒子をドライブレンドするか、あるいは、非磁性核粒子および磁性体微粒子の双方を侵すことなく良分散性の溶剤（例えばトルエン、ヘキサン）中で充分分散させた後、混合条件下で溶剤を揮発させる方法が挙げられる。 Further, as described above, the magnetic substance-containing organic polymer particles can be produced by a method utilizing hydrophobic / hydrophobic adsorption. For example, the surface of the nonmagnetic core particles and the surface of the magnetic fine particles are selected to be hydrophobic or hydrophobized, and these nonmagnetic core particles and magnetic fine particles are dry blended, or nonmagnetic There is a method in which the solvent is volatilized under mixing conditions after sufficiently dispersing in a well-dispersible solvent (for example, toluene, hexane) without attacking both the core particles and the magnetic fine particles.
あるいは、磁性体含有有機ポリマー粒子を、物理的に強い力を外部から加えることにより、非磁性核粒子および磁性体微粒子の複合化を実現させる方法により作製することもできる。物理的に強い力を負荷する方法としては、例えば、乳鉢、自動乳鉢、ボールミル、ブレード加圧式粉体圧縮法、メカノフュージョン法のようなメカノケミカル効果を利用するもの、あるいはジェットミル、ハイブリダイザーなど高速気流中衝撃法を利用するものが挙げられる。効率よくかつ強固に複合化を実施するには、物理的吸着力が強いことが望ましい。その方法としては、攪拌翼付き容器中で攪拌翼の周速度が好ましくは１５ｍ／秒以上、より好ましくは３０ｍ／秒以上、さらに好ましくは４０〜１５０ｍ／秒で実施することが挙げられる。撹拌翼の周速度が１５ｍ／秒より低いと、非磁性核粒子の表面に磁性体微粒子を吸着させるのに十分なエネルギーを得ることができないことがある。なお、撹拌翼の周速度の上限については、特に制限はないが、使用する装置、エネルギー効率などの点から自ずと決定される。 Alternatively, the magnetic substance-containing organic polymer particles can be produced by a method of realizing a composite of nonmagnetic core particles and magnetic substance fine particles by applying a physically strong force from the outside. Examples of methods for applying a physically strong force include mortars, automatic mortars, ball mills, blade pressurizing powder compression methods, those using mechanochemical effects such as mechanofusion methods, jet mills, hybridizers, etc. The thing using the impact method in a high-speed air current is mentioned. It is desirable that the physical adsorption force is strong in order to efficiently and firmly perform the composite. As the method, it is mentioned that the peripheral speed of the stirring blade is preferably 15 m / second or more, more preferably 30 m / second or more, and further preferably 40 to 150 m / second in a vessel with a stirring blade. When the peripheral speed of the stirring blade is lower than 15 m / sec, it may not be possible to obtain sufficient energy for adsorbing the magnetic fine particles on the surface of the nonmagnetic core particles. In addition, although there is no restriction | limiting in particular about the upper limit of the circumferential speed of a stirring blade, It determines automatically from points, such as an apparatus to be used and energy efficiency.
１．２．糖類
本発明の担体ポリマー粒子に用いられる糖類としては、例えば、フルクトース，アラビノース，キシロース，リボース，デオキシリボースなどのフラノース類、グルコ−ス，マンノース，ガラクトースなどのピラノース類、セプタノース類などの単糖類、トレハロース，ラクトース，コージオース，ニゲロース，マルトース，イソマルトース，ソホロース，ラミナリオース，セロビオース，ゲンチビオースなどの二糖類、デンプン，アミロース，アミロペクチン，デキストリン，グリコーゲン，シクロデキストリン，セルロース，アガロース，アルギン酸，イヌリン，グルコマンナン，キチン，キトサン，ヒアルロン酸などの多糖類を挙げることができる。有機ポリマー粒子と糖類とを化学結合させて、有機ポリマー粒子の表面を覆うためには、被覆効率の点で高分子量の多糖類が好ましい。なお、糖類は、例えばカルボキシメチルセルロースやカルボキシメチルデキストランのように、上述した糖類の分子内の官能基（例えば、水酸基、アミノ基、カルボキシル基など）の少なくとも一部が変換されたものであってもよく、その変換は必要に応じて多段階施されたものであってもよい。より好ましくは、糖類として、例えばカルボキシメチルセルロースやカルボキシメチルデキストランのように、カルボキシメチル化されているものを用いる。
1.2. Saccharides used as the carrier polymer particles of the present invention include, for example, furanoses such as fructose, arabinose, xylose, ribose and deoxyribose, pyranoses such as glucose, mannose and galactose, and monosaccharides such as septanoses, Disaccharides such as trehalose, lactose, cordose, nigerose, maltose, isomaltose, sophorose, laminarios, cellobiose, gentibiose, starch, amylose, amylopectin, dextrin, glycogen, cyclodextrin, cellulose, agarose, alginic acid, inulin, glucomannan, chitin , Polysaccharides such as chitosan and hyaluronic acid. In order to cover the surface of the organic polymer particles by chemically bonding the organic polymer particles and the saccharide, a high molecular weight polysaccharide is preferable in terms of coating efficiency. Note that the saccharide may be one in which at least a part of functional groups (for example, a hydroxyl group, an amino group, a carboxyl group, etc.) in the saccharide molecule described above is converted, such as carboxymethyl cellulose and carboxymethyl dextran. The conversion may be performed in multiple stages as required. More preferably, saccharides that are carboxymethylated, such as carboxymethylcellulose and carboxymethyldextran, are used as saccharides.
２．担体用ポリマー粒子の製造方法
本発明の担体ポリマー粒子の製造方法は、粒径が０．１〜１５μｍの有機ポリマー粒子および前記糖類を化学結合させることにより、前記有機ポリマー粒子の表面を糖で被覆する工程を含む。
2. Method for Producing Polymer Particles for Carrier The method for producing carrier polymer particles according to the present invention is to coat the surface of the organic polymer particles with sugar by chemically bonding the organic polymer particles having a particle size of 0.1 to 15 μm and the sugar. The process of carrying out.
本発明において、有機ポリマー粒子と糖類とを化学結合させるための手法としては特に制限がなく、公知の化学反応を用いることができる。 In the present invention, the technique for chemically bonding organic polymer particles and saccharides is not particularly limited, and a known chemical reaction can be used.
図１は、本発明の担体ポリマー粒子の製造方法の一態様を模式的に示す図である。図２は、本発明の担体ポリマー粒子の一態様を模式的に示す図であり、図１に示される工程により作製された本発明のポリマー粒子１０を示している。
FIG. 1 is a diagram schematically showing one embodiment of a method for producing carrier polymer particles of the present invention. FIG. 2 is a view schematically showing one embodiment of the carrier polymer particle of the present invention, and shows the
例えば、図１に示されるように、本発明の担体ポリマー粒子を作製する際に使用する有機ポリマー粒子１１は、その表面に複数の官能基（第１の官能基）１３を有していてもよい。ここで第１の官能基１３とは、有機ポリマー粒子１１の粒子形状形成時に導入された官能基でもよいし、あるいはその官能基を粒子形状形成後に変換することによって得られた官能基でもよい。その際、官能基の変換は必要に応じて複数回行なってもよい。限定されないが、例えば有機ポリマー粒子１１の粒子形状を形成した際に導入された官能基がエポキシ基である場合、そのエポキシ基に大過剰のアンモニアあるいは適当なジアミン化合物を作用させて生じるアミノ基を第１の官能基とすることができるし、また例えば、有機ポリマー粒子１１の粒子形状を形成した際に導入された官能基が水酸基である場合、その水酸基をトシル基に変換した後、そのトシル基に大過剰の適当なジアミン化合物を作用させて生じるアミノ基を第１の官能基１３とすることができる。例えば、後述する実施例１〜５でそれぞれ得られる有機ポリマー粒子Ａｍ−１〜５においては、第１の官能基１３がアミノ基であることができる。
For example, as shown in FIG. 1, the
また、本発明の担体ポリマー粒子を作製する際に使用する糖類１２は、その１分子中に複数個の官能基（第２の官能基）１４を有していてもよく、その官能基は糖類の官能基が変換されたものであってもよい。
Moreover, the
第１の官能基１３および／または第２の官能基１４として使用可能な官能基としては、例えば、カルボキシル基、水酸基、エポキシ基、アミノ基、メルカプト基、ビニル基、アリル基、アクリル基、メタクリル基、トシル基、アジド基などが挙げられる。この場合、第１の官能基１３および第２の官能基１４は互いに対して反応性を有する。限定されないが、例えば、第１の官能基１３がエポキシ基である場合、第２の官能基１４はアミノ基であることができるし、また例えば、第１の官能基１３がアミノ基である場合、第２の官能基１４はカルボキシル基であることができる。
Examples of the functional group that can be used as the first
図１において、第１の官能基１３と第２の官能基１４とが反応することにより、有機ポリマー粒子１１と糖類１２とが化学的に結合することができる（図２参照）。これにより、本発明の担体ポリマー粒子１０を得ることができる。
In FIG. 1, the first
本発明の担体ポリマー粒子は、上述した工程によって作製された後、必要に応じて、ｐＨ調整を行ない、次いで、透析・限外ろ過・遠心分離等の精製処理によって表面を洗浄してから、担体粒子として使用できる。 After the carrier polymer particles of the present invention are produced by the above-mentioned steps, the pH is adjusted as necessary, and then the surface is washed by a purification treatment such as dialysis, ultrafiltration, centrifugation, etc. Can be used as particles.
３．用途
本発明の担体ポリマー粒子は、創薬分野での化合物担体用粒子および診断薬用の化学結合担体用粒子として利用できる。
3. Use The carrier polymer particles of the present invention can be used as particles for compound carriers in the field of drug discovery and particles for chemical binding carriers for diagnostic agents.
より詳しくは、本発明の担体ポリマー粒子を用いて、解析対象の化学物質（被解析化学物質）を化学結合で固定化し、タンパク物質等との分子間相互作用を用いて当該相互作用を解析および／または測定することによって、被解析化学物質と特異的な相互作用を有するタンパク物質などを選別し、精製することが可能である。 More specifically, using the carrier polymer particles of the present invention, the chemical substance to be analyzed (analyzed chemical substance) is immobilized by chemical bonding, and the interaction is analyzed using molecular interactions with protein substances and the like. By measuring, it is possible to select and purify a protein substance having a specific interaction with the chemical substance to be analyzed.
また、本発明の担体ポリマー粒子は、抗体・抗原・酵素・ホルモン等のタンパク質、ＤＮＡ・ＲＮＡ等の核酸物質、あるいは生理活性糖鎖化合物（以下、これらを「生理活性物質」という）を粒子表面に化学結合法で感作させる生理活性物質担体ポリマー粒子として利用できる。 In addition, the carrier polymer particles of the present invention can be prepared by using proteins such as antibodies, antigens, enzymes and hormones, nucleic acid substances such as DNA and RNA, or physiologically active sugar chain compounds (hereinafter referred to as “physiologically active substances”) on the particle surface. It can be used as bioactive substance carrier polymer particles to be sensitized by a chemical bonding method.
なお、本発明の担体ポリマー粒子の用途は、上述した創薬分野での化合物担体用粒子および診断薬用の化学結合担体用粒子に限定されるわけではなく、例えば、生化学分野、塗料、紙、電子写真、化粧品、医薬品、農薬、食品、触媒など広い分野で利用できる。 The use of the carrier polymer particles of the present invention is not limited to the above-described compound carrier particles in the drug discovery field and chemical bond carrier particles for diagnostic agents. For example, biochemical fields, paints, paper, It can be used in a wide range of fields such as electrophotography, cosmetics, pharmaceuticals, agricultural chemicals, foods, and catalysts.
４．実施例
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらによって制限されるものではない。なお、本実施例において、「％」および「部」は重量基準である。
4). Examples Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples, but the present invention is not limited thereto. In this example, “%” and “parts” are based on weight.
４．１．評価方法
４．１．１．非特異吸着性の評価１（タンパク吸着）
４．１．１Ａ．前洗浄工程
実施例または比較例で得られた担体ポリマー粒子の濃度が１ｗｔ％になるように純水に希釈分散し、分散液を調製した。次に、この分散液５００μｌをエッペンドルフチューブに取り、遠心分離機（ＭＸ−１５０，トミー精機（株）製）にて遠心分離し（回転数１５,０００ｒｐｍ、１５℃、１０分間）、上澄みを除去した。次いで、沈降物を含むチューブにＰＢＳ（−）緩衝液５００μｌを注ぎ、タッチミキサーで振動を与えて前記粒子を分散させた。
4.1. Evaluation method 4.1.1. Nonspecific adsorption evaluation 1 (protein adsorption)
4.1.1 A. Pre-cleaning step A dispersion was prepared by diluting and dispersing in pure water so that the concentration of the carrier polymer particles obtained in the examples or comparative examples was 1 wt%. Next, 500 μl of this dispersion is placed in an Eppendorf tube and centrifuged with a centrifuge (MX-150, manufactured by Tommy Seiki Co., Ltd.) (rotation speed 15,000 rpm, 15 ° C., 10 minutes), and the supernatant is removed. did. Next, 500 μl of PBS (−) buffer was poured into the tube containing the sediment, and the particles were dispersed by applying vibration with a touch mixer.
４．１．１Ｂ．蛋白吸着反応工程
引き続きこのチューブに、１ｗｔ％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）のＰＢＳ（−）溶液５００μｌを注ぎ、さらにタッチミキサーで振動を与えて前記粒子を分散させた後、常温にて２時間回転倒混和させた。
4.1.1B. Protein adsorption reaction step Subsequently, 500 μl of 1 wt% BSA (bovine serum albumin) PBS (−) solution (500 μl) was poured into this tube, and the particles were dispersed by applying vibration with a touch mixer, and then rotated at room temperature for 2 hours. Mixed.
４．１．１Ｃ．洗浄工程
引き続きこのチューブを遠心分離した後、上澄みを除去し、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ１ｍｌを注いでタッチミキサーで振動を与えて前記粒子を分散させた。同様の処理をさらに２回繰り返した後、内容物を別の未使用のエッペンドルフチューブに移し、遠心分離を行なった後、上澄みを除去した。
4.1.1 C. Washing Step Subsequently, the tube was centrifuged, the supernatant was removed, 1 ml of 10 mM HEPES was poured, and the particles were dispersed by applying vibration with a touch mixer. After the same treatment was repeated twice more, the contents were transferred to another unused Eppendorf tube, centrifuged, and the supernatant was removed.
４．１．１Ｄ．剥離工程
引き続きこのチューブに０．５％ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム）水溶液５０μｌを注いでタッチミキサーでごく軽く振動を与えて前記粒子を分散させた。１０分間放置した後、遠心分離を行ない、上澄みの２０μｌを採取した。
4.1.1 D. Peeling Step Subsequently, 50 μl of 0.5% SDS (sodium dodecyl sulfate) aqueous solution was poured into this tube, and the particles were dispersed by applying very light vibration with a touch mixer. After standing for 10 minutes, centrifugation was performed and 20 μl of the supernatant was collected.
４．１．１Ｅ．サンプリング工程
バイオラッド社製プレミックスサンプルバッファー中での濃度が２ｗｔ％になるように２−メルカプトエタノールを溶解させ（以下、これを「サンプルバッファー」とする）、このうち２０μｌをエッペンドルフチューブに採取した。これに上記剥離工程で採取した上澄み２０μｌを混ぜ、チューブヒーターにて１００℃で５分間加熱した。
4.1.1 E. Sampling step 2-Mercaptoethanol was dissolved so that the concentration in the premix sample buffer manufactured by BioRad was 2 wt% (hereinafter referred to as “sample buffer”), and 20 μl of this was collected in an Eppendorf tube. . This was mixed with 20 μl of the supernatant collected in the above peeling step and heated with a tube heater at 100 ° C. for 5 minutes.
一方、コントロールとして、１ｗｔ％のＢＳＡのＰＢＳ（−）溶液を２％ＳＤＳ溶液で５，０００倍、１０，０００倍、２０，０００倍に希釈したものを２０μｌ取り、サンプルバッファー２０μｌと混ぜ、チューブヒーターにて１００℃で５分間加熱した。これらを参照用希釈ＢＳＡと呼ぶ。 On the other hand, 20 μl of 1 wt% BSA in PBS (−) diluted with 5,000 times, 10,000 times, and 20,000 times with 2% SDS solution was taken and mixed with 20 μl of sample buffer, Heated at 100 ° C. for 5 minutes with a heater. These are referred to as reference dilution BSA.
４．１．１Ｆ．電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）
バイオラッド社製縦型電気泳動システム「ミニプロティアン３」、バイオラッド社製プレキャストポリアクリルアミドゲル「レディーゲルＪ（１５％）」、およびバイオラッド社製プレミックス泳動バッファーを用いて、ゲル１レーンあたり２０μｌをアプライし、電気泳動を行った。染色はバイオラッド社製シルバーステインプラスキットを用いて標準的な手法で行った。染色されたゲルはバイオラッド社製デンシトメーター「ＧＳ−７００」でスキャンして画像化し、解析ソフトウェア「Ｍｕｌｔｉ−Ａｎａｌｙｓｔ」を用いて、ゲルにおけるＢＳＡのバンドの濃度と面積との積を定量した。
4.1.1 F. Electrophoresis (SDS-PAGE)
Per lane of gel using Biorad's vertical electrophoresis system "Miniprotian 3", BioRad's precast polyacrylamide gel "Lady Gel J (15%)", and BioRad's premix electrophoresis buffer 20 μl was applied and electrophoresis was performed. Staining was performed by a standard method using a Bio stain silver stain plus kit. The stained gel was scanned and imaged with a densitometer “GS-700” manufactured by Bio-Rad, and the product of the concentration and area of the BSA band in the gel was quantified using analysis software “Multi-Analyst”. .
参照用希釈ＢＳＡにおいて、ゲル１レーンあたりに流れるＢＳＡの重量が既知であるため、バンド濃度と面積との積から検量線を引き、この検量線に基づいて、前記粒子から剥離したＢＳＡの重量を重量単位で換算した。なお、この重量は、粒子１ｍｇあたりに吸着していたＢＳＡの重量に相当する。 In the dilution BSA for reference, since the weight of BSA flowing per lane of gel is known, a calibration curve is drawn from the product of the band concentration and the area, and based on this calibration curve, the weight of BSA peeled from the particles is calculated. Converted by weight. This weight corresponds to the weight of BSA adsorbed per 1 mg of particles.
４．１．２．粒径
直径１μｍ以上の粒子については、レーザ回折式粒度分布測定装置(（株）島津製作所製)ＳＡＬＤ−２００Ｖにより、直径１μｍ未満の粒子についてはレーザ散乱回折法粒度分布測定装置（型名：ＬＳ １３ ３２０，（株）ベックマン・コールター製）により粒径を測定した。
4.1.2. For particles with a diameter of 1 μm or more, laser diffraction particle size distribution measuring device (manufactured by Shimadzu Corporation) SALD-200V, for particles with a diameter of less than 1 μm, laser scattering diffraction particle size distribution measuring device (model name:
４．１．３．赤外吸収スペクトル
フーリエ変換赤外分光光度計（日本電子株式会社製ＪＩＲ−５５００）を用い、ＫＢｒ法により赤外吸収スペクトルを測定した。
4.1.3. Infrared absorption spectrum The infrared absorption spectrum was measured by KBr method using a Fourier transform infrared spectrophotometer (JIR-5500, manufactured by JEOL Ltd.).
４．２．合成例
４．２．１．合成例１（有機ポリマー粒子Ａ−１の合成）
有機ポリマー粒子Ａ−１は、シード粒子を用いる二段膨潤重合法で作製した。
4.2. Synthesis example 4.2.1. Synthesis Example 1 (Synthesis of organic polymer particle A-1)
The organic polymer particles A-1 were produced by a two-stage swelling polymerization method using seed particles.
シード粒子として、ソープフリー重合で重合した粒子径０．９８μｍのポリスチレン粒子を用い、このポリスチレン粒子を水５００ｇに窒素雰囲気下で分散させて水分散体（固形分量５．０ｇ）を調製し、これに二段膨潤重合法（特公昭５７−２４３６９号公報記載の方法に準拠）でシード粒子に、一段目として有機溶剤（シェルゾールＴＫ０．１ｇ）、二段目としてモノマー（ＭＭＡ（メタクリル酸メチル）７０ｇ、ＴＭＰ（トリメチロールプロパントリメタクリレート）１０ｇ、およびＧＭＡ（グリシジルメタクリレート）２０ｇ）を加えて吸収させた後、ＡＩＢＮ（アゾビスイソブチロニトリル）を２ｇ添加して７５℃で２４時間ゆっくり撹拌した。次に、この反応液を冷却した後、５００メッシュ金網でろ過したところ、９９％が通過し、良好な重合安定性であった。重合収率は９９％であった。得られた有機ポリマー粒子Ａ−１の粒子径は２．７１μｍであり、粒子径の変動係数は２％で、単分散粒子であった。 As the seed particles, polystyrene particles having a particle diameter of 0.98 μm polymerized by soap-free polymerization are used, and the polystyrene particles are dispersed in 500 g of water in a nitrogen atmosphere to prepare an aqueous dispersion (solid content: 5.0 g). In the two-stage swelling polymerization method (according to the method described in Japanese Patent Publication No. 57-24369), the seed particle, the organic solvent (shell sol 0.1 g) as the first stage, the monomer (MMA (methyl methacrylate) as the second stage) 70 g, 10 g of TMP (trimethylolpropane trimethacrylate) and 20 g of GMA (glycidyl methacrylate) were added and absorbed, and then 2 g of AIBN (azobisisobutyronitrile) was added and stirred slowly at 75 ° C. for 24 hours. . Next, the reaction solution was cooled and then filtered through a 500 mesh wire net. As a result, 99% passed and the polymerization stability was good. The polymerization yield was 99%. The obtained organic polymer particle A-1 had a particle size of 2.71 μm, a coefficient of variation of the particle size of 2%, and was a monodisperse particle.
４．２．２．合成例２（有機ポリマー粒子Ａ−２の合成）
モノマーとしてＭＭＡ５０ｇ、ＴＭＰ１０ｇ、およびＧＭＡ４０ｇを使用した以外は、上記合成例１と同様の方法を用いることにより、粒子径が２．６４μｍであり、変動係数が２％の有機ポリマー粒子Ａ−２を得た。
4.2.2. Synthesis Example 2 (Synthesis of organic polymer particle A-2)
By using the same method as in Synthesis Example 1 except that 50 g of MMA, 10 g of TMP, and 40 g of GMA were used as monomers, organic polymer particles A-2 having a particle size of 2.64 μm and a coefficient of variation of 2% were obtained. It was.
４．２．３．合成例３（有機ポリマー粒子Ａ−３の合成）
モノマーとしてＭＭＡ３０ｇ、ＴＭＰ１０ｇ、およびＧＭＡ６０ｇを使用した以外は、上記合成例１と同様の方法を用いることにより、粒子径が２．６１μｍであり、変動係数が２.１％の有機ポリマー粒子Ａ−３を得た。
4.2.3. Synthesis Example 3 (Synthesis of organic polymer particle A-3)
By using the same method as in Synthesis Example 1 except that 30 g of MMA, 10 g of TMP, and 60 g of GMA were used as monomers, organic polymer particles A-3 having a particle size of 2.61 μm and a coefficient of variation of 2.1% were used. Got.
４．２．４．合成例４（有機ポリマー粒子Ａ−４の合成）
シード粒子として粒径２．６μｍのポリスチレン粒子を使用した以外は、上記合成例３と同様の方法を用いることにより、粒子径が７．０５μｍであり、変動係数が２．３％の有機ポリマー粒子Ａ−４を得た。
4.2.4. Synthesis Example 4 (Synthesis of organic polymer particle A-4)
Organic polymer particles having a particle diameter of 7.05 μm and a coefficient of variation of 2.3% were obtained by using the same method as in Synthesis Example 3 except that polystyrene particles having a particle diameter of 2.6 μm were used as seed particles. A-4 was obtained.
４．２．５．合成例５（有機ポリマー粒子Ａ−５の合成）
モノマーとしてＴＭＰ１０ｇおよびＧＭＡ９０ｇを使用した以外は、上記合成例１と同様の方法を用いることにより、粒子径が２．５８μｍであり、変動係数が２．３％の有機ポリマー粒子Ａ−５を得た。
4.2.5. Synthesis Example 5 (Synthesis of organic polymer particle A-5)
By using the same method as in Synthesis Example 1 except that 10 g of TMP and 90 g of GMA were used as monomers, organic polymer particles A-5 having a particle diameter of 2.58 μm and a coefficient of variation of 2.3% were obtained. .
４．２．６．合成例６（糖類ＣＭＣ−１の合成）
日本製紙ケミカル株式会社製カルボキシメチルセルロースナトリウム塩ＡＰＰ−８４（平均分子量１７，０００でグルコース単位１個当たり平均０．７個のカルボキシル基を含有）の水溶液に液のｐＨが２以下になるまで希塩酸を加え、この液を透析した後、凍結乾燥することによりカルボキシメチルセルロースＣＭＣ−１を得た。
4.2.6. Synthesis Example 6 (Synthesis of saccharide CMC-1)
Use dilute hydrochloric acid in an aqueous solution of Nippon Paper Chemicals Co., Ltd. carboxymethylcellulose sodium salt APP-84 (average molecular weight 17,000 and an average of 0.7 carboxyl groups per glucose unit) until the pH of the solution is 2 or less. In addition, this solution was dialyzed and then freeze-dried to obtain carboxymethylcellulose CMC-1.
４．２．７．合成例７（糖類ＣＭＤ−１の合成）
ファルマシア ＡＢ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＡＢ）社製デキストランＴ５００（平均分子量５００，０００）の１０ｗｔ％水溶液２．５ｇに水酸化ナトリウム０．７２ｇおよびブロモ酢酸１．０４ｇを加え、均一になるまで数分間攪拌した。次に、この溶液を４０℃に６０時間保持した後、氷冷し、次いで、液のｐＨが２以下になるまで希塩酸を加え、この液を透析した後、凍結乾燥することにより、カルボキシメチルデキストランＣＭＤ−１を得た。滴定により、ＣＭＤ−１に含まれるカルボン酸を定量したところ、ＣＭＤ−１は、グルコース単位１個当たり平均０．４個のカルボン酸基を含有していた。
4.2.7. Synthesis Example 7 (Synthesis of sugar CMD-1)
0.72 g of sodium hydroxide and 1.04 g of bromoacetic acid were added to 2.5 g of a 10 wt% aqueous solution of dextran T500 (average molecular weight 500,000) manufactured by Pharmacia AB, and stirred for several minutes until uniform. Next, this solution is kept at 40 ° C. for 60 hours, and then ice-cooled. Then, dilute hydrochloric acid is added until the pH of the solution becomes 2 or less, and the solution is dialyzed and freeze-dried to obtain carboxymethyldextran. CMD-1 was obtained. When carboxylic acid contained in CMD-1 was quantified by titration, CMD-1 contained an average of 0.4 carboxylic acid groups per glucose unit.
４．３．実施例１
有機ポリマー粒子Ａ−１の分散液から遠心分離により単離した重合体粒子をアセトンに分散させ、遠心分離して洗浄する操作を３回繰り返した後、乾燥させた。次に、この粒子０．５０ｇを１００ｍｌフラスコに入れ、エチレンジアミン２５ｇを加えた後、間接超音波を１０分間照射して分散させてから、窒素雰囲気下で５０℃にて６時間加熱攪拌し、その後、遠心分離により前記粒子を単離した。次いで、この粒子をメタノールで２回、水／メタノール混合物（３／１、容積比）で３回洗浄した後、乾燥させることにより、有機ポリマー粒子Ａｍ−１を白色粉末として０．５４ｇ得た。
4.3. Example 1
The operation of dispersing polymer particles isolated from the dispersion of organic polymer particles A-1 by centrifugation in acetone, centrifuging and washing three times was repeated and then dried. Next, 0.50 g of these particles are put into a 100 ml flask, 25 g of ethylenediamine is added, and then dispersed by irradiation with indirect ultrasonic waves for 10 minutes, and then heated and stirred at 50 ° C. for 6 hours in a nitrogen atmosphere. The particles were isolated by centrifugation. Next, the particles were washed twice with methanol and three times with a water / methanol mixture (3/1, volume ratio) and then dried to obtain 0.54 g of organic polymer particles Am-1 as a white powder.
この有機ポリマー粒子Ａｍ−１は、有機ポリマー粒子Ａ−１と比較して重量が増加した。さらに、エチレンジアミン処理前の赤外吸収スペクトル（有機ポリマー粒子Ａ−１の赤外吸収スペクトル）と比較して、この有機ポリマー粒子Ａｍ−１（エチレンジアミン処理後）の赤外吸収スペクトルにおいては、有機ポリマー粒子Ａ−１の赤外吸収スペクトルにおいて９００ｃｍ−１付近に観測されたエポキシ基に由来するピークが消失し、かつ、１級アミンに典型的なピークが３３００ｃｍ−１付近および３５００ｃｍ−１付近に新たに観測された。以上の結果から、有機ポリマー粒子Ａｍ−１は、有機ポリマー粒子Ａ−１にアミノ基が導入されたものであることが確認された。すなわち、有機ポリマー粒子Ａｍ−１では、第１の官能基１３がアミノ基である。
The weight of the organic polymer particle Am-1 was increased as compared with the organic polymer particle A-1. Furthermore, in comparison with the infrared absorption spectrum before the ethylenediamine treatment (infrared absorption spectrum of the organic polymer particle A-1), the organic polymer particle Am-1 (after the ethylenediamine treatment) has an organic polymer in the infrared absorption spectrum. disappeared and a peak derived from an epoxy group was observed at around 900 cm -1 in the infrared absorption spectrum of the particles a-1, and a typical peak new around 3300 cm -1 and around 3500 cm -1 to primary amine Observed. From the above results, it was confirmed that the organic polymer particle Am-1 was obtained by introducing an amino group into the organic polymer particle A-1. That is, in the organic polymer particle Am-1, the first
次に、上記合成例１で得たＣＭＣ−１の３０ｍｇを純水１．２ｇに溶解し、ここに有機ポリマー粒子Ａｍ−１を３０．６ｍｇ加え、間接超音波を３０分間照射して分散させた。次いで、この分散液を氷冷し、塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドの１０ｗｔ％水溶液０．３０ｇを加え、氷冷下で１２時間攪拌した。続いて、遠心分離により粒子を単離し、純水に分散させ遠心分離して洗浄する操作を１０回繰り返した後、乾燥させることにより、３３．６ｍｇの担体ポリマー粒子Ｐ−１を得た。 Next, 30 mg of CMC-1 obtained in Synthesis Example 1 is dissolved in 1.2 g of pure water, 30.6 mg of organic polymer particles Am-1 are added thereto, and indirect ultrasonic waves are irradiated for 30 minutes for dispersion. It was. Next, this dispersion was ice-cooled, 0.30 g of a 10 wt% aqueous solution of 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride was added, and the mixture was stirred for 12 hours under ice-cooling. Subsequently, the operation of isolating the particles by centrifugation, dispersing in pure water, centrifuging and washing them was repeated 10 times, followed by drying to obtain 33.6 mg of carrier polymer particles P-1.
担体ポリマー粒子Ｐ−１の赤外吸収スペクトルにおいては、反応前の有機ポリマー粒子Ａｍ−１に由来するピークに加えて、新たにカルボキシメチルセルロースに由来する３４００ｃｍ−１付近および１６００ｃｍ−１付近のピークなどが観測された。以上の結果から、担体ポリマー粒子Ｐ−１においては、有機ポリマー粒子Ａｍ−１に糖類（カルボキシメチルセルロース）が結合していることが確認された。 In the infrared absorption spectrum of the carrier polymer particles P-1, in addition to a peak derived from the organic polymer particles Am-1 before the reaction, new carboxymethylcellulose etc. peak near 3400 cm -1 and around 1600 cm -1 derived from Was observed. From the above results, it was confirmed that the saccharide (carboxymethylcellulose) was bonded to the organic polymer particle Am-1 in the carrier polymer particle P-1.
担体ポリマー粒子Ｐ−１について、タンパク質の非特異吸着性を上記評価方法にしたがって測定した結果、０．０８ｎｇ／ｍｇと非常に低い値であった。 As a result of measuring the nonspecific adsorption property of the protein according to the above evaluation method for the carrier polymer particle P-1, it was a very low value of 0.08 ng / mg.
４．４．実施例２
有機ポリマー粒子Ａ−２の分散液を用いた以外は、上記実施例１と同様の操作を行なうことにより、０．５７ｇの有機ポリマー粒子Ａｍ−２を得た。次いで、有機ポリマー粒子Ａｍ−２（２９．６ｍｇ）およびＣＭＣ−１（３０ｍｇ）を用いた以外は、上記実施例１と同様の操作を行なうことにより、カルボキシメチルセルロース結合粒子（担体ポリマー粒子）Ｐ−２を３４．０ｍｇ得た。
4.4. Example 2
0.57 g of organic polymer particles Am-2 were obtained by performing the same operation as in Example 1 except that the dispersion of organic polymer particles A-2 was used. Subsequently, carboxymethylcellulose binding particles (carrier polymer particles) P- were obtained by performing the same operation as in Example 1 except that organic polymer particles Am-2 (29.6 mg) and CMC-1 (30 mg) were used. 24.0 mg of 2 was obtained.
担体ポリマー粒子Ｐ−２について、タンパク質の非特異吸着性を上記評価方法にしたがって測定した結果、０．０５ｎｇ／ｍｇと非常に低い値であった。 As a result of measuring the nonspecific adsorption property of the protein according to the above evaluation method for the carrier polymer particle P-2, it was a very low value of 0.05 ng / mg.
４．５．実施例３
有機ポリマー粒子Ａ−３の分散液を用いた以外は、上記実施例１と同様の操作を行なうことにより、０．６１ｇの有機ポリマー粒子Ａｍ−３を得た。次いで、有機ポリマー粒子Ａｍ−３（２９．９ｍｇ）およびＣＭＣ−１（３０ｍｇ）を用いた以外は、上記実施例１と同様の操作を行なうことにより、カルボキシメチルセルロース結合粒子（担体ポリマー粒子）Ｐ−３を３６．２ｍｇ得た。
4.5. Example 3
Except for using the dispersion of organic polymer particles A-3, the same operation as in Example 1 was performed to obtain 0.61 g of organic polymer particles Am-3. Subsequently, the same operation as in Example 1 was performed except that organic polymer particles Am-3 (29.9 mg) and CMC-1 (30 mg) were used, whereby carboxymethylcellulose-bonded particles (carrier polymer particles) P- 36.2 mg of 3 was obtained.
担体ポリマー粒子Ｐ−３について、タンパク質の非特異吸着性を上記評価方法にしたがって測定した結果、０．０２ｎｇ／ｍｇと非常に低い値であった。 As a result of measuring the nonspecific adsorption property of the protein according to the above evaluation method for the carrier polymer particle P-3, it was a very low value of 0.02 ng / mg.
４．６．実施例４
上記合成例７で得られたＣＭＤ−１の１５０ｍｇを純水６ｇに溶解し、ここに上記実施例１で得られた有機ポリマー粒子Ａｍ−１を１５０．５ｍｇ加え、間接超音波を３０分間照射して分散させた。次に、この分散液を氷冷し、塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドの５ｗｔ％水溶液１．４０ｇを加え、氷冷下で１２時間攪拌した。次いで、遠心分離により前記粒子を単離し、純水に分散させ遠心分離して洗浄する操作を１０回繰り返した後、乾燥させることにより、１５６．２ｍｇの担体ポリマー粒子Ｐ−４を得た。
4.6. Example 4
150 mg of CMD-1 obtained in Synthesis Example 7 was dissolved in 6 g of pure water, 150.5 mg of organic polymer particles Am-1 obtained in Example 1 were added thereto, and indirect ultrasonic waves were irradiated for 30 minutes. And dispersed. Next, this dispersion was ice-cooled, 1.40 g of a 5 wt% aqueous solution of 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride was added, and the mixture was stirred for 12 hours under ice-cooling. Then, the operation of isolating the particles by centrifugation, dispersing in pure water, centrifuging and washing was repeated 10 times, followed by drying to obtain 156.2 mg of carrier polymer particles P-4.
担体ポリマー粒子Ｐ−４の赤外吸収スペクトルにおいては、反応前の有機ポリマー粒子Ａｍ−１に由来するピークに加えて、新たにカルボキシメチルデキストランに由来する３４００ｃｍ−１付近および１６００ｃｍ−１付近のピークなどが観測された。以上の結果から、担体ポリマー粒子Ｐ−４においては、有機ポリマー粒子Ａｍ−１に糖類（カルボキシメチルデキストラン）が結合していることが確認された。 In the infrared absorption spectrum of the carrier polymer particles P-4, in addition to a peak derived from the organic polymer particles Am-1 before the reaction, newly carboxymethyl around 3400 cm -1 derived from dextran and 1600 cm -1 near the peak of Etc. were observed. From the above results, it was confirmed that in the carrier polymer particle P-4, a saccharide (carboxymethyldextran) was bonded to the organic polymer particle Am-1.
担体ポリマー粒子Ｐ−４について、タンパク質の非特異吸着性を上記評価方法にしたがって測定した結果、０．０７ｎｇ／ｍｇ粒子と非常に低い値であった。 As a result of measuring the nonspecific adsorption property of the protein according to the above evaluation method for the carrier polymer particle P-4, it was a very low value of 0.07 ng / mg particle.
４．７．実施例５
有機ポリマー粒子Ａ−４の分散液を用いた以外は上記実施例１と同様の操作を行なうことにより、０．６２ｇの有機ポリマー粒子Ａｍ−４を得た。この有機ポリマー粒子Ａｍ−４（２９．９ｍｇ）およびＣＭＣ−１（３０ｍｇ）を用いた以外は、実施例１と同様の操作を行なうことにより、カルボキシメチルセルロース結合粒子（担体ポリマー粒子）Ｐ−５を３６．１ｍｇ得た。
4.7. Example 5
Except for using the dispersion liquid of organic polymer particles A-4, the same operation as in Example 1 was performed to obtain 0.62 g of organic polymer particles Am-4. Except for using these organic polymer particles Am-4 (29.9 mg) and CMC-1 (30 mg), the same operation as in Example 1 was carried out, whereby carboxymethylcellulose-bound particles (carrier polymer particles) P-5 were obtained. 36.1 mg was obtained.
担体ポリマー粒子Ｐ−５について、タンパク質の非特異吸着性を上記評価方法にしたがって測定した結果、０．０５ｎｇ／ｍｇ粒子と非常に低い値であった。 As a result of measuring the nonspecific adsorption property of the protein according to the above-described evaluation method for the carrier polymer particle P-5, it was a very low value of 0.05 ng / mg particle.
４．８．実施例６
有機ポリマー粒子Ａ−５の分散液から遠心分離により単離した重合体粒子を、アセトンに分散させ遠心分離して洗浄する操作を３回繰り返した後、乾燥させた。
4.8. Example 6
The operation of dispersing the polymer particles isolated from the dispersion of the organic polymer particles A-5 by centrifugation in acetone, centrifuging them and washing them was repeated three times, and then dried.
次に、この粒子０．５０ｇを１００ｍｌフラスコに入れ、ジメチルスルホキシド４６．５ｇを加え、間接超音波を１０分間照射して分散させてから１０ｗｔ％エチレンジアミン溶液（溶媒：ジメチルスルホキシド）３．５ｇを加えた後、窒素雰囲気下で５０℃にて４時間加熱攪拌し、その後、遠心分離により粒子を単離した。この粒子をメタノールで２回、水／メタノール混合物（３／１、容積比）で３回洗浄した後、乾燥させることにより、０．５５ｇの白色粉末として有機ポリマー粒子Ａｍ−５を得た。 Next, 0.50 g of the particles are placed in a 100 ml flask, 46.5 g of dimethyl sulfoxide is added, and after indirect ultrasonic wave irradiation for 10 minutes to disperse, 3.5 g of 10 wt% ethylenediamine solution (solvent: dimethyl sulfoxide) is added. After that, the mixture was heated and stirred at 50 ° C. for 4 hours under a nitrogen atmosphere, and then the particles were isolated by centrifugation. The particles were washed twice with methanol and three times with a water / methanol mixture (3/1, volume ratio) and then dried to obtain organic polymer particles Am-5 as 0.55 g of white powder.
この有機ポリマー粒子Ａｍ−５は、有機ポリマー粒子Ａ−５と比較して重量が増加した。さらに、エチレンジアミン処理前の赤外吸収スペクトル（有機ポリマー粒子Ａ−５の赤外吸収スペクトル）と比較して、この有機ポリマー粒子Ａｍ−５（エチレンジアミン処理後）の赤外吸収スペクトルにおいては、有機ポリマー粒子Ａ−５の赤外吸収スペクトルにおいて９００ｃｍ−１付近に観測されたエポキシ基に由来するピークの強度が弱まり、かつ、１級アミンに典型的なピークが３３００ｃｍ−１付近に、水酸基に由来するピークが３５００ｃｍ−１付近にそれぞれ新たに観測された。以上の結果から、有機ポリマー粒子Ａｍ−５は、有機ポリマー粒子Ａ−５にアミノ基が導入されて得られたものであることが確認された。また、エチレンジアミン処理前後におけるエポキシ基に由来するピーク強度変化から、有機ポリマー粒子Ａ−５に存在するエポキシ基の反応率は約３０％と推定された。 The organic polymer particle Am-5 increased in weight as compared with the organic polymer particle A-5. Furthermore, in comparison with the infrared absorption spectrum before the ethylenediamine treatment (infrared absorption spectrum of the organic polymer particle A-5), the organic polymer particle Am-5 (after the ethylenediamine treatment) has an organic polymer in the infrared absorption spectrum. In the infrared absorption spectrum of the particle A-5, the intensity of the peak derived from the epoxy group observed in the vicinity of 900 cm −1 is weakened, and the peak typical of the primary amine is derived from the hydroxyl group in the vicinity of 3300 cm −1. A new peak was observed in the vicinity of 3500 cm −1 . From the above results, it was confirmed that the organic polymer particle Am-5 was obtained by introducing an amino group into the organic polymer particle A-5. Moreover, from the peak intensity change derived from the epoxy group before and after the ethylenediamine treatment, the reaction rate of the epoxy group present in the organic polymer particle A-5 was estimated to be about 30%.
次いで、ここで得られた有機ポリマー粒子Ａｍ−５の１００ｍｇを、１ｗｔ％硫酸１５ｇおよびアセトン１．５ｇの混合液に加え、間接超音波を１０分間照射して分散させてから、５０℃で９時間加熱攪拌し、その後、遠心分離により前記粒子を単離した。 Next, 100 mg of the organic polymer particle Am-5 obtained here was added to a mixed solution of 15 g of 1 wt% sulfuric acid and 1.5 g of acetone, and dispersed by irradiation with indirect ultrasonic waves for 10 minutes. The particles were stirred with heating for a period of time and then isolated by centrifugation.
この粒子を水で３回、０．０１規定水酸化ナトリウム水溶液で１回、水で５回洗浄した後、乾燥させることにより、１０２ｍｇの粒子を得た。 The particles were washed three times with water, once with a 0.01 N aqueous sodium hydroxide solution and five times with water, and then dried to obtain 102 mg of particles.
次いで、ここで得られた粒子の赤外吸収スペクトル（硫酸処理後に得られた粒子の赤外吸収スペクトル）においては、反応前の有機ポリマー粒子Ａｍ−５の赤外吸収スペクトルと比較して、硫酸処理前の有機ポリマー粒子Ａｍ−５の赤外吸収スペクトルで９００ｃｍ−１付近に観測されたエポキシ基に由来するピークの強度が消失し、かつ、水酸基に由来する３５００ｃｍ−１付近のピークが強まった。この結果から、有機ポリマー粒子Ａｍ−５中のエポキシ基が加水分解されたことが確認された。 Next, in the infrared absorption spectrum of the particles obtained here (the infrared absorption spectrum of the particles obtained after the sulfuric acid treatment), compared with the infrared absorption spectrum of the organic polymer particle Am-5 before the reaction, sulfuric acid The intensity of the peak derived from the epoxy group observed in the vicinity of 900 cm −1 in the infrared absorption spectrum of the organic polymer particle Am-5 before the treatment disappeared, and the peak near 3500 cm −1 derived from the hydroxyl group was strengthened. . From this result, it was confirmed that the epoxy group in the organic polymer particle Am-5 was hydrolyzed.
次いで、ここで得られた粒子３０．３ｍｇを用いた以外は実施例１と同様の操作を行なうことにより、カルボキシメチルセルロース結合粒子（担体ポリマー粒子）Ｐ−６を３３．１ｍｇ得た。 Subsequently, 33.1 mg of carboxymethylcellulose binding particles (carrier polymer particles) P-6 were obtained by performing the same operation as in Example 1 except that 30.3 mg of the particles obtained here were used.
担体ポリマー粒子Ｐ−６について、タンパク質の非特異吸着性を上記評価方法にしたがって測定した結果、検出限界以下（０．０１ｎｇ／ｍｇ粒子以下）であった。 With respect to the carrier polymer particle P-6, the nonspecific adsorption property of the protein was measured according to the above evaluation method. As a result, it was below the detection limit (0.01 ng / mg particle or less).
４．９．実施例７
日本製紙ケミカル株式会社製カルボキシメチルセルロースナトリウム塩ＡＰＰ−８４を水溶液にして透析した後、凍結乾燥することにより精製した。この精製ＡＰＰ−８４（３３ｍｇ）および有機ポリマー粒子Ａｍ−２（２９．８ｍｇ）を用いた以外は、上記実施例１と同様の反応操作を行なった。続いて、遠心分離により粒子を単離し、純水に分散させ遠心分離して洗浄する操作を５回、０．０１規定塩酸に分散させ遠心分離しイオン交換する操作を３回、さらに純水に分散させて遠心分離して洗浄する操作を５回繰り返した後乾燥させることにより、カルボキシメチルセルロース結合粒子（担体ポリマー粒子）Ｐ−７を３３．７ｍｇ得た。
4.9. Example 7
The carboxymethyl cellulose sodium salt APP-84 manufactured by Nippon Paper Chemical Co., Ltd. was dialyzed into an aqueous solution, and then purified by lyophilization. The same reaction operation as in Example 1 was carried out except that this purified APP-84 (33 mg) and organic polymer particles Am-2 (29.8 mg) were used. Subsequently, the operation of isolating particles by centrifugation, dispersing in pure water, centrifuging and washing 5 times, the operation of dispersing in 0.01 N hydrochloric acid, centrifuging and ion exchange 3 times, and further adding pure water The operation of dispersing, centrifuging and washing was repeated 5 times and then dried to obtain 33.7 mg of carboxymethylcellulose-bound particles (carrier polymer particles) P-7.
担体ポリマー粒子Ｐ−７について、タンパク質の非特異吸着性を上記評価方法にしたがって測定した結果、０．０５ｎｇ／ｍｇと非常に低い値であった。 With respect to the carrier polymer particle P-7, the nonspecific adsorption property of the protein was measured according to the above evaluation method. As a result, it was a very low value of 0.05 ng / mg.
４．１０．比較例１
有機ポリマー粒子Ａ−１へのタンパク質の非特異吸着性を上記方法にしたがって測定した結果、１．３ｎｇ／ｍｇと高い値であった。
4.10. Comparative Example 1
As a result of measuring the nonspecific adsorption property of the protein to the organic polymer particles A-1 according to the above method, it was as high as 1.3 ng / mg.
４．１１．比較例２
市販の標準ポリスチレン粒子（ＳＴＡＤＥＸ ＳＣ２００Ｓ、ＪＳＲ株式会社製）を純水で充分洗浄してから、非特異吸着性を上記方法にしたがって測定した結果、２０ｎｇ／ｍｇと極めて高い値であった。
4.11. Comparative Example 2
After commercially washing standard polystyrene particles (STADEX SC200S, manufactured by JSR Corporation) were sufficiently washed with pure water, the nonspecific adsorption property was measured according to the above method. As a result, the value was as extremely high as 20 ng / mg.
４．１２．比較例３
ＣＭＣ−１の代わりに両末端カルボン酸変性ポリエチレングリコール（エチレンオキサイド単位の平均繰返し数１０）を用いた以外は、上記実施例１と同様の操作を行なうことにより、ポリエチレングリコールで表面が被覆された粒子Ｐ−７を得た。Ｐ−７の非特異吸着性を上記方法にしたがって測定した結果、０．３ｎｇ／ｍｇであった。
4.12. Comparative Example 3
The surface was coated with polyethylene glycol by the same operation as in Example 1 except that both ends carboxylic acid-modified polyethylene glycol (average number of ethylene oxide unit repetitions of 10) was used instead of CMC-1. Particles P-7 were obtained. It was 0.3 ng / mg as a result of measuring the nonspecific adsorption property of P-7 according to the said method.
１１，１１０・・・有機ポリマー粒子
１２・・・糖類
１３・・・第１の官能基
１４・・・第２の官能基
DESCRIPTION OF SYMBOLS 11,110 ...
Claims (7)
前記有機ポリマー粒子の表面を被覆する糖類と、
を含み、
前記有機ポリマー粒子および前記糖類が化学結合している、担体ポリマー粒子。 Organic polymer particles having a particle size of 0.1 to 15 μm;
Sugars that coat the surface of the organic polymer particles;
Including
Carrier polymer particles in which the organic polymer particles and the saccharide are chemically bonded.
前記糖類は多糖類である、担体ポリマー粒子。 In claim 1,
Carrier polymer particles, wherein the saccharide is a polysaccharide.
前記糖類はカルボキシメチル化されている、担体ポリマー粒子。 In claim 1 or 2,
Carrier polymer particles wherein the saccharide is carboxymethylated.
前記化学結合は、アミド結合およびエステル結合の少なくとも一方を含む結合基による、担体ポリマー粒子。 In any one of Claims 1 thru | or 3,
The chemical bond is a carrier polymer particle by a linking group containing at least one of an amide bond and an ester bond.
前記化学結合させる際、
前記有機ポリマー粒子は、第１の官能基を有し、
前記糖類は、第２の官能基を有し、
前記第１の官能基と前記第２の官能基とを反応させることにより、前記有機ポリマー粒子と前記糖類とを結合させる、担体ポリマー粒子の製造方法。 In claim 5,
When chemically bonding,
The organic polymer particle has a first functional group,
The saccharide has a second functional group;
A method for producing carrier polymer particles, wherein the organic polymer particles and the saccharide are bonded by reacting the first functional group and the second functional group.
前記第１の官能基は、カルボキシル基、エポキシ基、アミノ基、およびトシル基から選ばれる少なくとも１種以上の官能基である、担体ポリマー粒子の製造方法。 In claim 5 or 6,
The method for producing carrier polymer particles, wherein the first functional group is at least one functional group selected from a carboxyl group, an epoxy group, an amino group, and a tosyl group.
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Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008239874A (en) * | 2007-03-28 | 2008-10-09 | Jsr Corp | Vinyl polymer, blocking agent and method for producing probe-bound particles using the same |
| WO2016104505A1 (en) * | 2014-12-24 | 2016-06-30 | 花王株式会社 | Process for producing pigment-containing modified polymer particles |
| CN113397206A (en) * | 2021-07-09 | 2021-09-17 | 广西中烟工业有限责任公司 | Preparation method of carboxymethylated momordica grosvenori polysaccharide and application of carboxymethylated momordica grosvenori polysaccharide in tobacco humectant |
| WO2022270482A1 (en) * | 2021-06-24 | 2022-12-29 | 国立大学法人茨城大学 | Sugar chain immobilized polymer particles and method for producing same |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01121342A (en) * | 1987-11-06 | 1989-05-15 | Oji Paper Co Ltd | Immobilized lignin composite and use thereof |
| JPH0421637A (en) * | 1990-05-11 | 1992-01-24 | Soken Kagaku Kk | High polymer fine grain whose surface is modified with chitin derivative or chitosan and its production |
| JP2001513203A (en) * | 1997-12-10 | 2001-08-28 | デイド、ベーリング、インコーポレイテッド | Particles with polyaldehyde dextran coating with reduced matrix effect |
| JP2003526786A (en) * | 2000-03-06 | 2003-09-09 | デイド・ベーリング・マルブルク・ゲゼルシヤフト・ミツト・ベシユレンクテル・ハフツング | Carrier coated with polysaccharide, its production and use |
| JP2003277455A (en) * | 2002-03-25 | 2003-10-02 | Jsr Corp | Method for producing polymer particle, polymer particle and carrier for physiologically active substance |
| WO2004040305A1 (en) * | 2002-10-31 | 2004-05-13 | Reverse Proteomics Research Institute Co., Ltd. | Method of immobilizing compound on solid phase support |
| WO2005097844A1 (en) * | 2004-03-31 | 2005-10-20 | Sumitomo Bakelite Co., Ltd. | Polymer particle |
-
2005
- 2005-05-20 JP JP2005147824A patent/JP2006321932A/en active Pending
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01121342A (en) * | 1987-11-06 | 1989-05-15 | Oji Paper Co Ltd | Immobilized lignin composite and use thereof |
| JPH0421637A (en) * | 1990-05-11 | 1992-01-24 | Soken Kagaku Kk | High polymer fine grain whose surface is modified with chitin derivative or chitosan and its production |
| JP2001513203A (en) * | 1997-12-10 | 2001-08-28 | デイド、ベーリング、インコーポレイテッド | Particles with polyaldehyde dextran coating with reduced matrix effect |
| JP2003526786A (en) * | 2000-03-06 | 2003-09-09 | デイド・ベーリング・マルブルク・ゲゼルシヤフト・ミツト・ベシユレンクテル・ハフツング | Carrier coated with polysaccharide, its production and use |
| JP2003277455A (en) * | 2002-03-25 | 2003-10-02 | Jsr Corp | Method for producing polymer particle, polymer particle and carrier for physiologically active substance |
| WO2004040305A1 (en) * | 2002-10-31 | 2004-05-13 | Reverse Proteomics Research Institute Co., Ltd. | Method of immobilizing compound on solid phase support |
| WO2005097844A1 (en) * | 2004-03-31 | 2005-10-20 | Sumitomo Bakelite Co., Ltd. | Polymer particle |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008239874A (en) * | 2007-03-28 | 2008-10-09 | Jsr Corp | Vinyl polymer, blocking agent and method for producing probe-bound particles using the same |
| WO2016104505A1 (en) * | 2014-12-24 | 2016-06-30 | 花王株式会社 | Process for producing pigment-containing modified polymer particles |
| US10421862B2 (en) | 2014-12-24 | 2019-09-24 | Kao Corporation | Process for producing pigment-containing modified polymer particles |
| WO2022270482A1 (en) * | 2021-06-24 | 2022-12-29 | 国立大学法人茨城大学 | Sugar chain immobilized polymer particles and method for producing same |
| CN113397206A (en) * | 2021-07-09 | 2021-09-17 | 广西中烟工业有限责任公司 | Preparation method of carboxymethylated momordica grosvenori polysaccharide and application of carboxymethylated momordica grosvenori polysaccharide in tobacco humectant |
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