JP2006307126A - 多孔質表面を有する磁性粒子およびその製造方法、ならびに生化学用担体 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 本発明の多孔質表面を有する磁性粒子は、コア(A)と、多孔質のシェル(B)とを含み、前記コア(A)および前記シェル(B)の少なくとも一方が磁性体微粒子を含む。
【選択図】 図1
Description
コア(A)と、多孔質のシェル(B)とを含み、
前記コア(A)および前記シェル(B)の少なくとも一方が磁性体微粒子(M)を含む。
コア(A)をポリマー部(P)で被覆する工程と、
前記ポリマー部に対して溶解性を有する有機溶剤(S)に該ポリマー部(P)を接触させることにより、多孔質のシェル(B)を形成する工程と、
を含み、
前記コア(A)および前記シェル(B)の少なくとも一方が磁性体微粒子(M)を含む。
コア(A)の表面に、磁性体微粒子(M)からなる磁性体層を形成する工程と、
前記磁性体層をポリマー部(P)で被覆する工程と、
前記ポリマー部(P)に対して溶解性を有する有機溶剤(S)に該ポリマー部(P)を接触させることにより、前記磁性体微粒子(M)を含む多孔質のシェル(B)を形成する工程と、を含む。
本発明の多孔質表面を有する磁性粒子(以下、単に「磁性粒子」ともいう)は主に、コア(A)と、多孔質のシェル(B)からなる。このコア・シェル構造は、磁性粒子をエポキシ樹脂などで包埋した後、ミクロトームで切片を切り出し、透過型電子顕微鏡で観察することにより確認できる。また、磁性粒子が多孔質表面であることは、金またはカーボンを蒸着した磁性粒子を走査型電子顕微鏡で観察することで確認できる。
ケース(i)は、シェル(B)が磁性体微粒子(M)を含み、コア(A)が磁性体微粒子(M)を実質的に含まない場合である。
1.1.1.磁性体微粒子(M)を実質的に含まないコア(A)
コア(A)が磁性体微粒子(M)を実質的に含まない場合、コア(A)は、有機物質および無機物質のいずれも使用可能であるが、好ましくは有機物質である。この場合、有機物質の代表例としては、例えばポリマーを挙げることができる。かかるポリマーとしては、特に、ビニル系ポリマーが好ましく、その製造に使用するビニル系モノマーとしては、スチレン、α−メチルスチレン、ハロゲン化スチレン、ジビニルベンゼンなどの芳香族ビニル単量体、酢酸ビニル、プロピオン酸ビニルなどのビニルエステル類、アクリロニトリルなどの不飽和ニトリル、メチルアクリレート、エチルアクリレート、エチルメタクリレート、ブチルアクリレート、ブチルメタクリレート、2−エチルヘキシルアクリレート、2−エチルヘキシルメタクリレート、ラウリルアクリレート、ラウリルメタクリレート、エチレングリコールジアクリレート、エチレングリコールジメタクリレート、シクロヘキシルアクリレート、シクロヘキシルメタクリレートなどのエチレン性不飽和カルボン酸アルキルエステル、エチレングリコールジアクリレート、エチレングリコールジメタクリレート、トリメチロールプロパントリアクリレート、トリメチロールプロパントリメタクリレートなどの多官能性(メタ)アクリレート、グリシジルアクリレート、グリシジルメタクリレート、2−ヒドロキシエチルアクリレート、2−ヒドロキシエチルメタクリレートなどの官能基を有する(メタ)アクリレートなどを例示することができる。このビニル系ポリマーは単独重合体であっても、あるいは上記ビニル系モノマーから選ばれた2種以上のモノマーからなる共重合体であってもよい。また、上記ビニル系モノマーとブタジエン、イソプレンなどの共役ジオレフィン、アクリル酸、メタクリル酸、アクリルアミド、メタクリルアミド、N−メチロールアクリルアミド、N−メチロールメタクリルアミド、ジアリルフタレート、アリルアクリレート、アリルメタクリレートなどの共重合可能なモノマーとの共重合体も使用することができる。
ケース(i)の場合、多孔質のシェル(B)は磁性体微粒子(M)を含む。
ケース(ii)は、コア(A)が磁性体微粒子(M)を含み、シェル(B)が磁性体微粒子(M)を実質的に含まない場合である。この場合、コア(A)は、非磁性核粒子(A1)と、非磁性核粒子(A1)の表面上に配置された磁性体微粒子(M)とを含むことができる。また、コア(A)は、非磁性核粒子(A1)および磁性体微粒子(M)を被覆するコート層(A2)をさらに含むことができる。
1.2.1.磁性体微粒子(M)を含むコア(A)
磁性体微粒子(M)を含むコア(A)の平均粒子径は、好ましくは0.1〜10μm、さらに好ましくは0.2〜7μm、もっとも好ましくは0.5〜5.0μmである。ここで、平均粒子径が0.1μm未満であると、磁力による分離精製に長時間を要することがあり、一方、10μmを超えると生化学物質結合量が少ない場合がある。
ケース(iii)は、コア(A)およびシェル(B)がいずれも磁性体微粒子(M)を含む場合である。コア(A)およびシェル(B)がいずれも磁性体微粒子(M)を含む磁性粒子は、例えば、ケース(i)で用いるシェル(B)と、ケース(ii)で用いるコア(A)とを用いることにより製造することができる。
本発明の磁性粒子の製造方法は、コア(A)をポリマー部(P)で被覆する工程と、ポリマー部(P)に対して溶解性を有する有機溶剤(S)にポリマー部(P)を接触させることにより、多孔質のシェル(B)を形成する工程と、を含む。ここで、コア(A)およびシェル(B)の少なくとも一方が磁性体微粒子(M)を含む。
ここで、磁性体微粒子(M)を実質的に含まないコア(A)の表面に、磁性体微粒子(M)からなる磁性体層を形成させる方法、ならびにポリマー部(P)を前記磁性体層の表面および内部に形成する方法としては、例えば、特許第1804757号、特開2004−205481号公報などに開示されている方法が好適である。
有機溶剤(S)は、ポリマー部(P)に対して溶解性を有するものであることが好ましい。また、ポリマー部(P)に対する溶解性に応じて、有機溶剤(S)を選択することにより、シェル(B)の多孔質の度合いを調整することができる。例えば、有機溶剤(S)のポリマー部(P)に対する溶解性が大きいほど、より多孔質のシェル(B)を形成することができる。
本発明の磁性粒子は、生化学分野、塗料、紙、電子写真、化粧品、医薬品、農薬、食品、触媒など広い分野で利用できる。
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらによって制限されるものではない。
本実施例および比較例において、得られた磁性粒子の評価は以下の方法によって測定された。また、粒子の粒子径は、特に説明がない限り以下の方法により測定された。
本実施例においては、生化学物質結合量として、ビオチン類結合量の評価を行なった。
{(結合前の蛍光標識化ビオチンの量(pmol))−(未反応蛍光標識化ビオチンの量(pmol))}/(磁性粒子の質量(mg)) ・・・・・(1)
本実施例に用いたビオチン類結合用粒子は、カルボキシル基を表面に有する磁性粒子を、縮合剤である1−エチル−3−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩と反応させ、活性化してからストレプトアビジンをさらに投入して、ストレプトアビジンを該磁性粒子に化学結合させることにより作製された。
直径1μm以上の粒子については、レーザ回折式粒度分布測定装置((株)島津製作所製)SALD−200Vにより、直径1μm未満の粒子についてはレーザ散乱回折法粒度分布測定装置LS 13 320((株)ベックマン・コールター)により粒子径を測定した。
4.2.1.多孔質表面を有する磁性粒子の作製
特開平7−238105号公報記載の重合方法を参考に、スチレン/ジビニルベンゼン=95/5共重合体粒子(平均粒子径1.5μm)を作製し、重合後遠心分離により粒子のみ取り出したものをさらに水洗し、乾燥、粉砕した。これをコア粒子(A−1)とする(コアの作製)。
次に、固形分濃度1%の磁性粒子の水分散体1mLに1−エチル−3−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩(同仁化学社製)5mgを溶解した0.1mM HCl溶液0.1mLを添加し、室温で2時間回転攪拌し、さらに、ストレプトアビジン(シグマ社製)1mgを溶解した0.1mM HCl溶液0.1mLを添加し、室温で8時間回転攪拌することより、粒子の表面にストレプトアビジンを固定化させたビオチン結合用粒子を調製した。次いで、このビオチン結合用粒子を含む分散液を磁気分離処理した後、固形物(ビオチン結合用粒子)に、0.1%牛血清アルブミンを含むリン酸塩緩衝液(PBS,0.1%BSA/PBS,pH=7.2)を添加して磁気分離処理する操作を3回繰り返すことにより、未反応のストレプトアビジンを除去した。そして、ビオチン結合用粒子を、その固形分濃度が1%となるように、0.1%牛血清アルブミンを含むリン酸塩緩衝液(PBS,0.1%BSA/PBS,pH=7.2)に分散させることにより、固形分濃度1%のビオチン結合用粒子の分散液を調製し、ビオチン類結合量を評価した。結果を表1に示す。また、実施例1のビオチン類結合用粒子の平均数粒子径は2.3μmであった。
実施例1において、ポリマー部を有機溶剤(アセトン)に接触させる前の磁性粒子(比較例1の磁性粒子)を得た。比較例1の磁性粒子をSEM観察したところ、表面が多孔質でないことが確認された。また、比較例1の磁性粒子について、実施例1と同様にビオチン類結合量を評価した。結果を表1に示す。
Claims (9)
- コア(A)と、多孔質のシェル(B)とを含み、
前記コア(A)および前記シェル(B)の少なくとも一方が磁性体微粒子(M)を含む、多孔質表面を有する磁性粒子。 - 請求項1において、
前記シェル(B)は前記磁性体微粒子(M)を含み、
前記コア(A)は前記磁性体微粒子(M)を実質的に含まない、多孔質表面を有する磁性粒子。 - 請求項2において、
前記シェル(B)は、前記磁性体微粒子(M)およびポリマー部(P)からなる、多孔質表面を有する磁性粒子。 - 請求項1において、
前記コア(A)は前記磁性体微粒子(M)を含み、
前記シェル(B)は前記磁性体微粒子(M)を実質的に含まない、多孔質表面を有する磁性粒子。 - 請求項4において、
前記コア(A)は、
非磁性核粒子(A1)と、
前記非磁性核粒子(A1)の表面上に配置された磁性体微粒子(M)と、
を含む、多孔質表面を有する磁性粒子。 - 請求項5において、
前記コア(A)は、前記非磁性核粒子(A1)および前記磁性体微粒子(M)を被覆するコート層(A2)をさらに含む、多孔質表面を有する磁性粒子。 - 請求項1ないし6のいずれかに記載の磁性粒子を用いた、生化学用担体。
- コア(A)をポリマー部(P)で被覆する工程と、
前記ポリマー部(P)に対して溶解性を有する有機溶剤(S)に該ポリマー部(P)を接触させることにより、多孔質のシェル(B)を形成する工程と、
を含み、
前記コア(A)および前記シェル(B)の少なくとも一方が磁性体微粒子(M)を含む、多孔質表面を有する磁性粒子の製造方法。 - コア(A)の表面に、磁性体微粒子(M)からなる磁性体層を形成する工程と、
前記磁性体層をポリマー部(P)で被覆する工程と、
前記ポリマー部(P)に対して溶解性を有する有機溶剤(S)に該ポリマー部(P)を接触させることにより、前記磁性体微粒子(M)を含む多孔質のシェル(B)を形成する工程と、
を含む、多孔質表面を有する磁性粒子の製造方法。
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