JP2006298841A - Liposome-containing x-ray contrast medium - Google Patents

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an X-ray contrast medium containing a liposome which efficiently includes a nonionic-type iodine-based compound and having high safety. <P>SOLUTION: This X-ray contrast medium contains the liposome which contains one or more kinds of physiologically acceptable preparation auxiliary agents, wherein the liposome is prepared by mixing a lipid membrane component which contains a phospholipid and a lipid having a polyethylene glycol (PEG) group with supercritical carbon dioxide under a condition of 40-65°C and 10-30 MPa and does not substantially contain an organic solvent and the lipid membrane component has a mole ratio of the phospholipid (not containing the lipid having the PEG group) to the lipid having the PEG group of not less than 1000/1 to less than 100/5. <P>COPYRIGHT: (C)2007,JPO&INPIT

Description

本発明は、リポソーム含有Ｘ線造影剤に関し、詳しくは肝臓のＸ線画像診断用造影剤に使用すると造影コントラストを鮮明にすることが可能なリポソーム含有Ｘ線造影剤に関する。   The present invention relates to a liposome-containing X-ray contrast agent, and more particularly to a liposome-containing X-ray contrast agent that can make contrast contrast clear when used for a contrast agent for X-ray imaging of a liver.

Ｘ線による検査・診断は、画像診断の中核をなす技術の一つである。臓器などの軟組織のＸ線検査では、骨、歯などのいわゆる硬組織とは異なり、Ｘ線吸収の差が小さいことから高いコントラスト像を得ることは困難である。このため、造影剤を使用してコントラストの高い画像を得ることが一般に行なわれている。   X-ray inspection / diagnosis is one of the core technologies of image diagnosis. In X-ray examination of soft tissues such as organs, unlike so-called hard tissues such as bones and teeth, it is difficult to obtain a high contrast image because the difference in X-ray absorption is small. For this reason, it is a common practice to obtain a high-contrast image using a contrast agent.

現在実用化されているＸ線造影剤の大部分は、トリヨウドフェニル基を含み水溶性化された化合物を造影物質とするものである。目標とする組織もしくは疾患部位に選択的に造影剤を集積し、病変箇所の周囲またはその他の部位と明瞭なコントラストで区別できるＸ線造影剤が望まれている。   Most of the X-ray contrast agents currently in practical use use a compound containing a triiodophenyl group and water-solubilized as a contrast substance. There is a demand for an X-ray contrast medium that selectively accumulates a contrast medium in a target tissue or diseased site and can be distinguished from the surrounding of the lesion site or other sites with a clear contrast.

その解決には、造影剤を微粒子状にするとともにその血中半減期を改善することにより標的組織へ選択的に送達する方法が有効である。そこで、生体膜類似の脂質から構成され、低い抗原性であるリポソームに造影物質を内包させたリポソーム含有製剤を造影剤として使用することが試みられている。   In order to solve the problem, a method of selectively delivering the contrast agent to the target tissue by making the contrast agent fine particles and improving the half-life in blood is effective. Therefore, an attempt has been made to use a liposome-containing preparation composed of a lipid similar to a biological membrane and encapsulating a contrast substance in a low antigenic liposome as a contrast agent.

特に、脂質成分は肝臓に貯まりやすいため、脂質を主成分とするリポソーム含有製剤を使用すれば、リポソームは肝臓に取り込まれる可能性が高くなる。肝臓に存在するKupffer細胞の食作用により、該細胞部位に造影物質を集積することができる。肝臓癌の撮像に
おいては、その癌組織は正常組織に比べてKupffer細胞が少ないために、リポソームの取
込み量が少なく、集積する造影物質の量も少ないので、病変箇所の周囲部位と明瞭なコントラストで区別することが可能となる。このように肝臓造影用のＸ線造影剤として、リポソーム含有製剤への期待は高い。 In particular, since lipid components are easily stored in the liver, the use of a liposome-containing preparation containing lipid as a main component increases the possibility of liposome being taken into the liver. By the phagocytosis of Kupffer cells present in the liver, the contrast material can be accumulated in the cell site. In liver cancer imaging, the number of Kupffer cells in the cancer tissue is smaller than that in normal tissue, so the amount of liposomes taken up and the amount of contrast material that accumulates are small. It becomes possible to distinguish. Thus, as an X-ray contrast agent for liver contrast, there is a high expectation for a liposome-containing preparation.

リポソームを含むX線造影剤として、例えば国際公開ＷＯ88/09165、同ＷＯ89/00988、
同ＷＯ90/07491、特開平07-316079号公報などに提案されている。
しかしながら、従来より提案された方法では、素材としての安全性が高く、生体内で適度な分解性を有するリポソームを用いるにもかかわらず、製造過程においてリポソーム膜を構成するリン脂質の溶剤として、有機溶媒、特にクロロホルム、ジクロロメタンといったクロル系溶剤を使用する（例えば、特許文献１参照）。このため、残存する溶剤の毒性があるという理由で実用化に至っていないのが現状である（特許文献２）。 As an X-ray contrast medium containing liposomes, for example, International Publication WO88 / 09165, WO89 / 00988,
This is proposed in WO90 / 07491 and JP-A-07-316079.
However, in the conventionally proposed method, although the safety as a raw material is high and a liposome having an appropriate degradability in vivo is used, an organic solvent is used as a phospholipid solvent constituting the liposome membrane in the production process. A solvent, particularly a chloro solvent such as chloroform or dichloromethane is used (for example, see Patent Document 1). For this reason, the present situation is that it has not been put into practical use because of the toxicity of the remaining solvent (Patent Document 2).

また、特開2003-119120号公報（特許文献３）では、薬効成分を内包したリポソームを
、超臨界二酸化炭素を用いて製造する方法が開示されている。しかしながら、この方法では、エタノール等の助溶剤の使用が望まれることが示唆されており、助溶剤を使用せずに内包率の高いリポソームを作製することは困難であった。また、得られたリポソームも、安定性が低く、内包物が時間経過とともに外部へ漏出することもあるなど問題点が多い。 Japanese Patent Laid-Open No. 2003-119120 (Patent Document 3) discloses a method for producing a liposome encapsulating a medicinal component using supercritical carbon dioxide. However, in this method, it has been suggested that use of a cosolvent such as ethanol is desired, and it has been difficult to produce liposomes having a high encapsulation rate without using a cosolvent. In addition, the obtained liposomes have many problems such as low stability and inclusions may leak out over time.

したがって、造影能に優れた造影物質を効率よくリポソームに内包できるとともに、安定にそれを保持し、しかも特定の臓器志向性を有する製剤組成の改良について、特別の要求が存在する。
特許2619037号公報 特開平7-316079号公報 特開2003-119120号公報 Therefore, there is a special demand for improving a pharmaceutical composition that can efficiently encapsulate a contrast material excellent in contrast ability in a liposome, stably hold it, and has a specific organ orientation.
Japanese Patent No. 2619037 Japanese Patent Laid-Open No. 7-316079 Japanese Patent Laid-Open No. 2003-119120

そこで、本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討した結果、リポソームを構成する脂質膜成分の組成が、臓器志向性の要めであり、ポリエチレングリコール基を有する脂質の量を特定の範囲とすることで、リポソームが捕獲・分解されにくくなるとともに、とりわけ肝臓に到達しやすくなり、しかも、薬剤の粘度自体も低くすることができることを見出した。本発明は、有機溶媒を使用せずに作製されたリポソーム内に安定に造影物質が内包され、しかも特定の臓器、特に肝臓への志向性を有するＸ線造影剤を提供する。   Therefore, as a result of intensive studies to solve the above problems, the present inventors have determined that the composition of the lipid membrane component constituting the liposome is essential for organ orientation, and the amount of lipid having a polyethylene glycol group is within a specific range. As a result, it has been found that the liposomes are less likely to be captured and decomposed, more easily reach the liver, and the viscosity of the drug itself can be lowered. The present invention provides an X-ray contrast medium in which a contrast medium is stably encapsulated in liposomes prepared without using an organic solvent, and has an orientation toward a specific organ, particularly the liver.

本発明者らは、以下の本発明を完成するに至った。
[1]脂質膜内外の水相に、造影物質として水溶性の非イオン型ヨウド系化合物、ならびに
１種類以上の生理的に許容される製剤助剤を含有するリポソームを含み、
該リポソームが、リン脂質およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質を含む脂質膜成分と、超臨界二酸化炭素を、40〜65℃、10〜30MPaの条件下に混合すること
により作製され、かつ実質的に有機溶剤を含まないものであり、
脂質膜成分のリン脂質（ポリエチレングリコール基を有する脂質を含まず）/ポリエチ
レングリコール基を有する脂質のモル比が1000/1以上100/5未満であるＸ線造影剤。
[2]ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質中のオキシエチレン単位が50〜5000の範囲にある。
[3]製剤のｐＨが6.5〜8.5であり、37℃における粘度が20 mPa・s以下である。
[4]該ヨウド系化合物をヨウド原子として100〜350mgＩ/mL造影剤、全脂質を20〜100mg/mL造影剤の濃度で含む。
[5]前記ヨウド系化合物の70〜95質量％が、リポソームに内包されていない形態にあり、
リポソームを懸濁する水性媒体中に存在する。
[6]前記ヨウド系化合物のうち、リポソームに内包された部分の前記脂質の量に対する重
量比が、3〜8（g/g）である。
[7]前記ヨウド系化合物が、イオメプロール、イオパミドール、イオヘキソール、イオプ
ロミド、イオキシラン、イオタスル、イオトロランまたはイオジキサノールである。
[8]ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質が存在する条件下で、
リン脂質を含む脂質膜形成成分と、ヨウド系化合物および製剤助剤を含む溶液もしくは懸濁液と、超臨界状態二酸化炭素とを、
前記のポリエチレングリコール基を有する脂質とリン脂質との量比が、リン脂質（ポリエチレングリコール基を有するリン脂質）/ポリエチレングリコール基を有する脂質のモ
ル比で、1000/1以上100/5未満の範囲となるように、
40〜65℃、10〜30MPaの条件下に混合したのち、
二酸化炭素を排出して、それらのヨウド系化合物および製剤助剤を内部に含有するリポソームを作製するＸ線造影剤の製造方法。 The inventors of the present invention have completed the following present invention.
[1] A liposome containing a water-soluble nonionic iodine-based compound as a contrast medium and one or more physiologically acceptable formulation aids in the aqueous phase inside and outside the lipid membrane,
The liposome is prepared by mixing a lipid membrane component containing a phospholipid and a lipid having a polyethylene glycol (PEG) group and supercritical carbon dioxide under conditions of 40 to 65 ° C. and 10 to 30 MPa, and substantially It does not contain any organic solvent,
An X-ray contrast agent having a molar ratio of a lipid membrane component phospholipid (not including a lipid having a polyethylene glycol group) / a lipid having a polyethylene glycol group of 1000/1 or more and less than 100/5.
[2] The oxyethylene unit in the lipid having a polyethylene glycol (PEG) group is in the range of 50 to 5000.
[3] The formulation has a pH of 6.5 to 8.5 and a viscosity at 37 ° C. of 20 mPa · s or less.
[4] Containing the iodine compound as an iodine atom at a concentration of 100 to 350 mg I / mL contrast agent and total lipid at a concentration of 20 to 100 mg / mL contrast agent.
[5] 70 to 95% by mass of the iodine compound is in a form not encapsulated in liposomes,
Present in an aqueous medium in which the liposomes are suspended.
[6] The weight ratio of the portion of the iodine compound encapsulated in the liposome to the amount of the lipid is 3 to 8 (g / g).
[7] The iodo compound is iomeprol, iopamidol, iohexol, iopromide, ioxirane, iotasulfur, iotrolane or iodixanol.
[8] Under conditions where a lipid having a polyethylene glycol (PEG) group is present,
A lipid film-forming component containing a phospholipid, a solution or suspension containing an iodine-based compound and a formulation aid, and supercritical carbon dioxide,
The molar ratio of the lipid having a polyethylene glycol group and the phospholipid is a molar ratio of phospholipid (phospholipid having a polyethylene glycol group) / lipid having a polyethylene glycol group in a range of 1000/1 or more and less than 100/5. So that
After mixing under conditions of 40 to 65 ° C and 10 to 30 MPa,
A method for producing an X-ray contrast medium, which discharges carbon dioxide and produces liposomes containing the iodine compound and formulation aid therein.

本発明のＸ線造影剤では、リポソームを構成するリン脂質（ＰＥＧ-リン脂質を含まず
）/ポリエチレングリコール基を有する脂質のモル比が、1000/1以上100/5未満という極めて限定的な範囲にあるので、リポソームは多く肝臓に到達しやすくなり、しかもそれまでに捕獲・分解されにくい。さらに、肝臓に送達されたリポソームは、肝臓に存在するKupffer細胞の食作用により取り込まれる可能性が高くなり、その細胞部位に造影物質を集積
することができる。このため、肝臓癌の撮像においては、病変箇所の周囲部位と明瞭なコントラストで区別することが可能となる。また造影剤の粘度も増加しない。 In the X-ray contrast medium of the present invention, the molar ratio of phospholipid (not including PEG-phospholipid) / lipid having a polyethylene glycol group constituting the liposome is a very limited range of 1000/1 or more and less than 100/5. Therefore, many liposomes can easily reach the liver, and are difficult to capture and decompose by then. Furthermore, the liposome delivered to the liver is more likely to be taken up by phagocytosis of Kupffer cells present in the liver, and a contrast substance can be accumulated at the cell site. For this reason, in imaging of liver cancer, it is possible to distinguish from the surrounding region of the lesion site with clear contrast. Also, the viscosity of the contrast agent does not increase.

本発明のＸ線造影剤は、脂質膜内外の水相に、造影物質として水溶性の非イオン型ヨウド系化合物、ならびに１種類以上の生理的に許容される製剤助剤を含有するリポソームを含み、
該リポソームが、リン脂質およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質を含む脂質膜成分と、超臨界二酸化炭素とを、40〜65℃、10〜30MPaの条件下に混合するこ
とにより作製され、かつ実質的に有機溶剤を含まないものであり、
脂質膜成分のリン脂質（ポリエチレングリコール基を有する脂質を含まず）/ポリエチ
レングリコール基を有する脂質のモル比が1000/1以上100/5未満である。 The X-ray contrast medium of the present invention contains liposomes containing a water-soluble nonionic iodine-based compound as a contrast medium and at least one physiologically acceptable formulation aid in the aqueous phase inside and outside the lipid membrane. ,
The liposome is prepared by mixing a lipid membrane component containing a phospholipid and a lipid having a polyethylene glycol (PEG) group and supercritical carbon dioxide under conditions of 40 to 65 ° C. and 10 to 30 MPa, and Is substantially free of organic solvents,
The molar ratio of the lipid membrane component phospholipid (not including a lipid having a polyethylene glycol group) / a lipid having a polyethylene glycol group is 1000/1 or more and less than 100/5.

本明細書において、「リポソーム」は、通常、脂質膜、すなわち脂質二重膜から形成されている構造物である。また本明細書では、リポソーム膜を「脂質膜」と言及することもある。リポソーム内に「内包」されるとは、リポソーム内に封入されてそのリン脂質膜と会合しているか、またはリン脂質膜内部に閉じ込められている水相（内部水相）中に存在している状態の両方を含むものとする。「実質的に」とは、造影剤における残存有機溶媒の濃度の上限値が10μg/Ｌであることを意味する。
造影物質
本発明の造影剤に使用される造影物質は、水溶性の非イオン型ヨウド系化合物である。 In the present specification, a “liposome” is usually a structure formed from a lipid membrane, that is, a lipid bilayer membrane. In the present specification, the liposome membrane may also be referred to as “lipid membrane”. “Encapsulated” in a liposome means that it is encapsulated in the liposome and associated with the phospholipid membrane, or is present in an aqueous phase (internal aqueous phase) confined inside the phospholipid membrane. Includes both states. “Substantially” means that the upper limit of the concentration of the residual organic solvent in the contrast agent is 10 μg / L.
Contrast Material The contrast material used in the contrast agent of the present invention is a water-soluble nonionic iodine-based compound.

水溶性の非イオン型ヨウド系化合物として、ヨウ化フェニルが挙げられ、例えば2,4,6
−トリヨウドフェニル基を少なくとも1個有する非イオン型ヨウド系化合物が好適である
。 Examples of water-soluble nonionic iodine compounds include phenyl iodide, such as 2,4,6.
-Nonionic iodo compounds having at least one triiodophenyl group are preferred.

本発明のＸ線造影剤の造影物質として、特に好ましいヨウド系化合物は、イオメプロール、イオパミドール、イオヘキソール、イオペントール、イオプロミド、イオキシラン、イオシミド、イオベンゾール、イオトロラン、イオジキサノール、イオデシモル、イオタスル、メトリザミド、1，3−ビス−（Ｎ−3，5−ビス−（2，3−ジヒドロキシプロピルアミノカルボニル）−2，4，6−トリヨードフェニル）−Ｎ−ヒドロキシアセチル−アミノ
）−プロパンなどが挙げられる。これらの化合物は単独で用いてもよく、あるいは２種以上を組み合わせて用いてもよい。またその例示に限定されるものではない。前記ヨウド系化合物のうち、特にイオメプロール、イオパミドール、イオヘキソール、イオプロミド、イオキシラン、イオタスル、イオトロランまたはイオジキサノールが好ましい。
薬剤助剤
製剤助剤として、少なくとも水溶性アミン系緩衝剤、ＥＤＴＡNa₂−Ca（エデト酸カル
シウム２ナトリウム）、無機塩、浸透圧調節剤および保存剤などが挙げられる。
リポソーム
本発明で使用されるリポソームは、リン脂質およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質を含む脂質膜成分と、超臨界二酸化炭素を、40〜65℃、10〜30MPaの条件
下に混合することにより作製され、かつ実質的に有機溶剤を含まないものである。
（脂質膜成分）
脂質膜成分としては、リン脂質およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質を含む。さらに脂質膜成分として、糖脂質、ステロール類、カチオン性脂質などが含まれていてもよい。 Particularly preferred iodo compounds as the contrast material of the X-ray contrast agent of the present invention are iomeprol, iopamidol, iohexol, iopentol, iopromide, ioxirane, iocimid, iobenzol, iotrolan, iodixanol, iodesimol, iotasulfur, metrisamide, 1,3- And bis- (N-3,5-bis- (2,3-dihydroxypropylaminocarbonyl) -2,4,6-triiodophenyl) -N-hydroxyacetyl-amino) -propane. These compounds may be used alone or in combination of two or more. Moreover, it is not limited to the illustration. Among the iodo compounds, iomeprol, iopamidol, iohexol, iopromide, ioxirane, iotasulfur, iotrolane or iodixanol is particularly preferable.
Examples of the pharmaceutical auxiliary preparation auxiliary include at least a water-soluble amine buffer, EDTANa ₂ -Ca (calcium disodium edetate), an inorganic salt, an osmotic pressure regulator and a preservative.
Liposomes The liposome used in the present invention is a mixture of a lipid membrane component containing a phospholipid and a lipid having a polyethylene glycol (PEG) group and supercritical carbon dioxide under conditions of 40 to 65 ° C. and 10 to 30 MPa. And is substantially free of organic solvent.
(Lipid membrane component)
Lipid membrane components include phospholipids and lipids having polyethylene glycol (PEG) groups. Furthermore, glycolipids, sterols, cationic lipids and the like may be included as lipid membrane components.

好ましい中性リン脂質として、大豆、卵黄などから得られるレシチン、リゾレシチンおよび／またはこれらの水素添加物、水酸化物の誘導体を挙げることができる。
その他のリン脂質として、卵黄、大豆またはその他の動植物に由来するか、または半合成のホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルエタノールアミン、スフィンゴミエリン、合成
により得られるホスファチジン酸、ジパルミトイルホスファチジルコリン（DPPC）、ジステアロイルホスファチジルコリン（DSPC）、ジミリストリルホスファチジルコリン（DMPC）、ジオレイルホスファチジルコリン（DOPC）、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（DPPG）、ジステアロイルホスファチジルセリン（DSPS）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（DSPＧ）、ジパルミトイルホスファチジルイノシトール（DPPI）、
ジステアロイルホスファチジルイノシトール（DSPI）、ジパルミトイルホスファチジン酸（DPPA）、ジステアロイルホスファチジン酸（DSPA）などを挙げることができる。 Preferred neutral phospholipids include lecithin, lysolecithin and / or hydrogenated products and hydroxide derivatives obtained from soybeans, egg yolks and the like.
Other phospholipids may be derived from egg yolk, soybeans or other animals or plants, or semi-synthetic phosphatidylcholine, phosphatidylserine, phosphatidylinositol, phosphatidylglycerol, phosphatidylethanolamine, sphingomyelin, synthetically obtained phosphatidic acid, dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC), distearoylphosphatidylcholine (DSPC), dimyristolphosphatidylcholine (DMPC), dioleylphosphatidylcholine (DOPC), dipalmitoylphosphatidylglycerol (DPPG), distearoylphosphatidylserine (DSPS), distearoylphosphatidylglycerol (DSPG), Dipalmitoylphosphatidylinositol (DPPI),
Examples include distearoyl phosphatidylinositol (DSPI), dipalmitoyl phosphatidic acid (DPPA), and distearoyl phosphatidic acid (DSPA).

リン脂質類には、転移温度を有するリン脂質が少なくとも含まれていることが望ましい。リン脂質の「（相）転移温度」とは、リン脂質がとり得るゲルと液晶との両状態間の相転移を生じる温度である。その測定は、示差走査熱量計（ＤＳＣ）を使用する示差熱分析による。相転移点を有するリン脂質として、ジミリストイルホスファチジルコリン（転移温度、以下同じ、23〜24℃）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（41.0〜41.5℃）、水素添加大豆レシチン（53℃）、水素添加大豆ホスファチジルコリン（54℃）、ジステアロイルホスファチジルコリン（54.1〜58.0℃）などが例示される。   The phospholipids preferably contain at least a phospholipid having a transition temperature. The “(phase) transition temperature” of a phospholipid is a temperature that causes a phase transition between both the gel and liquid crystal states that the phospholipid can take. The measurement is by differential thermal analysis using a differential scanning calorimeter (DSC). As phospholipids having a phase transition point, dimyristoyl phosphatidylcholine (transition temperature, the same below, 23-24 ° C), dipalmitoylphosphatidylcholine (41.0-41.5 ° C), hydrogenated soybean lecithin (53 ° C), hydrogenated soybean phosphatidylcholine (54 ° C), distearoylphosphatidylcholine (54.1-58.0 ° C) and the like.

ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質としては、例えばＰＥＧ−リン脂質またはPEG-コレステロールが好適である。これらのオキシエチレン単位が50〜5000、好ましくは100〜4000の範囲にあることが望ましい。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基の
長さと導入する割合を適宜変えることにより、その臓器志向性機能を調節することができる。このような範囲にあれば、後述するように、得られる造影剤の粘度が高くなることはない。本発明では、相対的にオキシエチレン単位が長いものが望ましい。 As the lipid having a polyethylene glycol (PEG) group, for example, PEG-phospholipid or PEG-cholesterol is suitable. It is desirable that these oxyethylene units are in the range of 50 to 5000, preferably 100 to 4000. By appropriately changing the length of the polyethylene glycol (PEG) group and the ratio of introduction, the organ-oriented function can be adjusted. If it is in such a range, the viscosity of the obtained contrast agent will not become high so that it may mention later. In the present invention, those having relatively long oxyethylene units are desirable.

ポリエチレングリコール基を有する脂質は、リポソーム膜の構成成分であるのみならず、リポソームを調製する際の溶解助剤として機能する。すなわち、溶解助剤として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質を用いると、脂質膜成分を、薬剤水溶液、および超臨界二酸化炭素と混合する際に、必ずしもエタノールなどの有機溶媒を使用する必要がない。   The lipid having a polyethylene glycol group is not only a component of the liposome membrane but also functions as a solubilizing agent when preparing the liposome. That is, when a lipid having a polyethylene glycol (PEG) group is used as a solubilizing agent, it is necessary to use an organic solvent such as ethanol when the lipid membrane component is mixed with the aqueous drug solution and supercritical carbon dioxide. Absent.

本発明のように脂質膜成分として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質、好ましくはＰＥＧ-リン脂質を含んでいると、ＰＥＧ鎖がリポソーム膜表面に導入され
、PEG化されたリポソームほど免疫系から認識されにくくなる（「ステルス化」された状
態である）効果が期待できる。逆に、肝臓造影用にはステルス化は好ましくない。 When a lipid having a polyethylene glycol (PEG) group, preferably PEG-phospholipid, is contained as a lipid membrane component as in the present invention, a PEG chain is introduced on the surface of the liposome membrane, and the PEGylated liposome is the immune system. Can be expected to have an effect of becoming difficult to be recognized (in a “stealth” state). Conversely, stealth is not preferred for liver imaging.

脂質膜成分のリン脂質（ポリエチレングリコール基を有する脂質を含まず）/ポリエチ
レングリコール基を有する脂質のモル比が1000/1以上100/5未満、好ましくは1000/1.5〜100/4.5の範囲にあることが望ましい。特に肝臓造影用には、モル比を小さくする。 The molar ratio of the lipid membrane component phospholipid (excluding lipids having polyethylene glycol groups) / polyethylene glycol group-containing lipids is 1000/1 or more and less than 100/5, preferably in the range of 1000 / 1.5 to 100 / 4.5 It is desirable. Especially for liver imaging, the molar ratio is reduced.

このような限定されたモル比でPEG鎖が導入されていれば、脂質量が多くても製剤の粘
度を低くくすることができる。したがって、注射もしくは注入投与の操作が容易となり、しかも、脂質量が相対的に多いため、肝臓に到達する可能性が高くなる。さらに、ＰＥＧ鎖による水和作用の寄与もあるため、リポソームの血中滞留性および経時安定性を向上させることも可能となる。 If PEG chains are introduced at such a limited molar ratio, the viscosity of the preparation can be lowered even if the amount of lipid is large. Therefore, the operation of injection or infusion administration is facilitated, and since the amount of lipid is relatively large, the possibility of reaching the liver is increased. Furthermore, since there is also a hydration effect due to the PEG chain, it becomes possible to improve the retention in the blood and stability over time of the liposome.

このような、ＰＥＧ-リン脂質の量による生成リポソームの構造の違いについては、図
１のすモデル図のように考えられる。図１中、(1)のモデルは、前記モル比が本発明の範
囲（1000/1以上100/5未満）にあるもの、(2)のモデルは、前記モル比が（100/5より多く100/7.5）程度で、ＰＥＧ-リン脂質の量が本発明より多いもの（つまりＰＥＧ鎖が多いも
の）、(3)のモデルは、前記モル比が100/7.5以上で、ＰＥＧ-リン脂質の量がさらに多い
ものである。 Such a difference in the structure of the produced liposome depending on the amount of PEG-phospholipid is considered as shown in the model diagram of FIG. In FIG. 1, the model (1) has the molar ratio within the range of the present invention (1000/1 or more and less than 100/5), and the model (2) has the molar ratio (more than 100/5). 100 / 7.5), and the amount of PEG-phospholipid is larger than that of the present invention (that is, the amount of PEG chain is larger), and the model of (3) has a molar ratio of 100 / 7.5 or more and PEG-phospholipid The amount is even greater.

図１(1)のモデル図のように、リポソームを構成するリン脂質（ＰＥＧ-リン脂質を含まず）/ポリエチレングリコール基を有する脂質のモル比が本発明の範囲内にあるものは、
リポソーム表面のＰＥＧ鎖が少ないので、ＰＥＧ鎖はリポソーム表面に寝ているものと考えられる。このような構造でも、他のリポソームのPEG鎖との相互作用が低く、溶媒中に
良好に分散していると考えられる。 As shown in the model diagram of FIG. 1 (1), the molar ratio of phospholipid (not including PEG-phospholipid) / lipid having a polyethylene glycol group constituting the liposome is within the scope of the present invention.
Since there are few PEG chains on the liposome surface, it is considered that the PEG chain lies on the liposome surface. Even with such a structure, the interaction with the PEG chain of other liposomes is low, and it is considered that they are well dispersed in the solvent.

図１(2)のように、ＰＥＧ鎖が多くなれば、ＰＥＧ鎖はリポソーム表面から、多くが伸
長して立った状態で存在し、一部屈曲していると考えられ、さらにＰＥＧ鎖が増えると、図１(3)のようにＰＥＧ鎖間での反発が強くなり、ＰＥＧ鎖が直立した状態で存在してい
ると考えられる。このような構造になると、長鎖のPEG鎖が溶媒分子との摩擦、リポソー
ム同士の相互作用、鎖同士の絡み合いなどが生じて製剤の粘度を増大させるものと考えられる。 As shown in Fig. 1 (2), if the number of PEG chains increases, it is considered that the PEG chains are present in a state where many extend from the liposome surface and are partially bent, and the number of PEG chains further increases. As shown in FIG. 1 (3), the repulsion between the PEG chains becomes strong, and the PEG chains are considered to exist in an upright state. In such a structure, it is considered that the long PEG chain causes friction with solvent molecules, interaction between liposomes, entanglement between chains, and the like, thereby increasing the viscosity of the preparation.

上記脂質膜成分には、さらに、カチオン性脂質、糖脂質などを含んでいてもよい。
カチオン性脂質は、１、２−ジオレオイルオキシ−３−（トリメチルアンモニウム）プロパン（DOTAP）、Ｎ、Ｎ−ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン（DOGS）、ジメチ
ルジオクタデシルアンモニウムブロミド（DDAB）、Ｎ−［１−（２、３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ、Ｎ、Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド（DOTMA）、２、３−ジ
オレイルオキシ−Ｎ−［２（スペルミン−カルボキサミド）エチル］−Ｎ、Ｎ−ジメチル−１−プロパンアミニウムトリフルオロアセテート（DOSPA）およびＮ−［１−（２、３
−ジミリスチルオキシ）プロピル］−Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アンモニウムブロミド（DMRIE）、ホスファチジン酸とアミノアルコールとのエステル、
例えばジパルミトイルホスファチジン酸（DPPA）もしくはジステアロイルホスファチジン酸（DSPA）とヒドロキシエチレンジアミンとのエステルなどが挙げられる。 The lipid membrane component may further contain a cationic lipid, a glycolipid, and the like.
Cationic lipids are 1,2-dioleoyloxy-3- (trimethylammonium) propane (DOTAP), N, N-dioctadecylamidoglycylspermine (DOGS), dimethyldioctadecylammonium bromide (DDAB), N- [1- (2,3-dioleyloxy) propyl] -N, N, N-trimethylammonium chloride (DOTMA), 2,3-dioleyloxy-N- [2 (spermine-carboxamido) ethyl] -N, N-dimethyl-1-propanaminium trifluoroacetate (DOSPA) and N- [1- (2,3
-Dimyristyloxy) propyl] -N, N-dimethyl-N- (2-hydroxyethyl) ammonium bromide (DMRIE), ester of phosphatidic acid and amino alcohol,
Examples include esters of dipalmitoyl phosphatidic acid (DPPA) or distearoyl phosphatidic acid (DSPA) with hydroxyethylenediamine.

これらのカチオン性脂質は全脂質量に対し0.1〜5質量％、好ましくは全脂質量に対し0.3〜3質量％、より好ましくは全脂質量に対し0.5〜2質量％の割合で含有するように添加すればよい。なお、全脂質とは、PEG基を有する脂質を含む。   These cationic lipids are contained in an amount of 0.1 to 5% by mass with respect to the total lipid amount, preferably 0.3 to 3% by mass with respect to the total lipid amount, and more preferably 0.5 to 2% by mass with respect to the total lipid amount. What is necessary is just to add. The total lipid includes a lipid having a PEG group.

糖脂質としては、ジガラクトシルジグリセリド、ガラクトシルジグリセリド硫酸エステルなどのグリセロ脂質、ガラクトシルセラミド、ガラクトシルセラミド硫酸エステル、ラクトシルセラミド、ガングリオシドG7、ガングリオシドG6、ガングリオシドG4などのスフィンゴ糖脂質などを挙げることができる。   Examples of glycolipids include glycerolipids such as digalactosyl diglyceride and galactosyl diglyceride sulfate, and sphingoglycolipids such as galactosylceramide, galactosylceramide sulfate, lactosylceramide, ganglioside G7, ganglioside G6, and ganglioside G4.

脂質膜成分として、上記脂質の他に、脂質膜安定化剤として作用するステロール類を含む。ステロール類としては、例えばコレステロール、ジヒドロコレステロール、コレステロールエステル、フィトステロール、シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール、コレスタノール、またはラノステロールなどが挙げられる。また１−Ｏ−ステロールグルコシド，１−Ｏ−ステロールマルトシドまたは１−Ｏ−ステロールガラクトシドといったステロール誘導体もリポソームの安定化に効果がある（特開平5-245357号公報参照）。これらの中で、特にコレステロールが好ましい。   As a lipid membrane component, in addition to the above lipids, sterols that act as lipid membrane stabilizers are included. Examples of the sterols include cholesterol, dihydrocholesterol, cholesterol ester, phytosterol, sitosterol, stigmasterol, campesterol, cholestanol, and lanosterol. In addition, sterol derivatives such as 1-O-sterol glucoside, 1-O-sterol maltoside or 1-O-sterol galactoside are also effective in stabilizing liposomes (see JP-A-5-245357). Among these, cholesterol is particularly preferable.

リポソーム膜中のコレステロールは、ポリアルキレンオキシド導入用のアンカーにもなり得る。特開平09−3093号公報には、ポリオキシアルキレン鎖の先端に、種々の機能性物質を共有結合により固定化することができ、リポソーム形成用の成分として利用することができる新規なコレステロール誘導体が開示されている。   Cholesterol in the liposome membrane can also serve as an anchor for introducing polyalkylene oxide. Japanese Patent Application Laid-Open No. 09-3093 discloses a novel cholesterol derivative that can immobilize various functional substances at the end of a polyoxyalkylene chain by covalent bonds and can be used as a component for liposome formation. It is disclosed.

ステロール類の使用量として、リン脂質（ＰＥＧ-リン脂質を含まず）/ステロール類のモル比が100/60〜100/90、好ましくは100/70〜100/85である。モル比が100/60未満である
と混合脂質の分散性を向上させるステロール類による安定化が充分に発揮されない。 The amount of sterols used is such that the molar ratio of phospholipid (without PEG-phospholipid) / sterols is 100/60 to 100/90, preferably 100/70 to 100/85. When the molar ratio is less than 100/60, stabilization by sterols that improve the dispersibility of the mixed lipid is not sufficiently exhibited.

本発明では、上記以外にリポソーム膜構成成分として、負荷電物質であるジセチルホスフェートといったリン酸ジアルキルエステルなど、正電荷を与える化合物であるステアリルアミンといった脂肪族アミンなどを含んでいてもよい。   In the present invention, in addition to the above, as a liposome membrane component, an aliphatic amine such as stearylamine, which is a compound that imparts a positive charge, such as a dialkyl phosphate such as dicetyl phosphate, which is a negatively charged substance, may be included.

また、公知の各種ポリアルキレンオキシド基、−（ＡＯ）_n−Ｙ（ＡＯは炭素数２〜４
のオキシアルキレン基を表し、ｎはオキシアルキレン基の平均付加モル数である。また、Ｙは、水素原子、アルキル基または機能性官能基を表す。）をリポソーム膜表面に導入してもよい。 In addition, various known polyalkylene oxide groups, — (AO) _n —Y (AO has 2 to 4 carbon atoms)
Wherein n is the average number of moles added of the oxyalkylene group. Y represents a hydrogen atom, an alkyl group or a functional functional group. ) May be introduced to the surface of the liposome membrane.

炭素数２〜４のオキシアルキレン基（ＡＯで表される）として、例えばオキシエチレン基、オキシプロピレン基、オキシトリメチレン基、オキシテトラメチレン基、オキシ−１−エチルエチレン基、オキシ−１，２−ジメチルエチレン基などが挙げられる。これらのオキシアルキレン基は、エチレンオキシド、プロピレンオキシド、オキセタン、１−ブテンオキシド、２−ブテンオキシド、テトラヒドロフランなどのアルキレンオキシド等が挙げられる。   Examples of the oxyalkylene group having 2 to 4 carbon atoms (represented by AO) include oxyethylene group, oxypropylene group, oxytrimethylene group, oxytetramethylene group, oxy-1-ethylethylene group, oxy-1,2 -A dimethylethylene group etc. are mentioned. Examples of these oxyalkylene groups include alkylene oxides such as ethylene oxide, propylene oxide, oxetane, 1-butene oxide, 2-butene oxide, and tetrahydrofuran.

ｎは50〜5000、好ましくは100〜4000の正の整数である。
ｎが50以上の場合、オキシアルキレン基の種類は、同一のものでも異なるものでもよい。後者の場合、ランダム状に付加していても、ブロック状に付加していてもよい。 n is a positive integer of 50 to 5000, preferably 100 to 4000.
When n is 50 or more, the types of oxyalkylene groups may be the same or different. In the latter case, it may be added in a random manner or a block shape.

ポリオキシアルキレン基としてはエチレンオキシド基が単独で付加したもの、またはポリエチレンオキシドとポリプロピレンオキシドとのブロック共重合物が好ましい。
Ｙは、水素原子、アルキル基または機能性官能基である。アルキル基として、炭素数１〜５の、分岐していてもよい脂肪族炭化水素基が挙げられる。上記の機能性官能基は、ポリアルキレンオキシド鎖の先端に糖、糖タンパク質、抗体、レクチン、細胞接着因子といった「機能性物質」を付するためのもので、例えばアミノ基、オキシカルボニルイミダゾール基、Ｎ-ヒドロキシコハク酸イミド基といった反応性に富む官能基が挙げられる。先
端に「機能性物質」を結合しているポリアルキレンオキシド鎖が固定化されたリポソームは、ポリアルキレンオキシド鎖導入の効果に加えて、ポリアルキレンオキシド鎖に妨げられることなく「機能性物質」の機能、例えば「認識素子」として特定臓器指向性、癌組織指向性などの作用が充分に発揮される。
（リポソームの調製）
リポソームは、圧力容器内で、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質が存在する条件下で、
前記したリン脂質を含む脂質膜形成成分と、ヨウド系化合物および製剤助剤を含む溶液もしくは懸濁液（薬剤溶液）と、超臨界状態二酸化炭素とを、40〜65℃、10〜30MPaの条
件下に混合したのち、二酸化炭素を排出することで調製される。これにより、ヨウド系化合物および製剤助剤を内部に含有するリポソーム分散液が調製される。 As the polyoxyalkylene group, an ethylene oxide group added alone or a block copolymer of polyethylene oxide and polypropylene oxide is preferable.
Y is a hydrogen atom, an alkyl group or a functional functional group. Examples of the alkyl group include an aliphatic hydrocarbon group having 1 to 5 carbon atoms which may be branched. The above functional functional group is for attaching a “functional substance” such as sugar, glycoprotein, antibody, lectin, and cell adhesion factor to the end of the polyalkylene oxide chain. For example, an amino group, an oxycarbonylimidazole group, A reactive functional group such as an N-hydroxysuccinimide group may be mentioned. In addition to the effect of introducing a polyalkylene oxide chain, a liposome having a polyalkylene oxide chain immobilized with a “functional substance” at the tip is not disturbed by the polyalkylene oxide chain. Functions such as specific organ directivity and cancer tissue directivity are sufficiently exerted as a “recognition element”.
(Preparation of liposome)
Liposomes are in a pressure vessel under conditions in which lipids with polyethylene glycol (PEG) groups are present,
A solution or suspension (drug solution) containing the above-described phospholipid-containing lipid film-forming component, an iodine-based compound and a formulation aid, and supercritical carbon dioxide at 40 to 65 ° C. and 10 to 30 MPa. Prepared by discharging carbon dioxide after mixing below. Thereby, the liposome dispersion liquid which contains an iodine type compound and a formulation adjuvant inside is prepared.

本発明による製造方法は、有機溶媒を使用せずに、超臨界二酸化炭素もしくは亜臨界二酸化炭素を用いて上記リポソームを作製する。二酸化炭素は、臨界温度が31.1℃、臨界圧力が7.38MPaと比較的扱いやすく、不活性なガスゆえ残存しても人体に無害であり、高純
度流体が安価で容易に入手できる。本発明の製造方法で使用する超臨界状態（亜臨界状態を含む）の二酸化炭素の温度は、通常40〜65℃、好ましくは45〜65℃の範囲にあることが好ましい。この温度範囲にあると、リン脂質が規則的に配列したリポソーム膜を形成できる。また、圧力は、温度に応じて適宜選択されるが、10〜30MPa、好ましくは15〜30MPaの範囲である。 In the production method according to the present invention, the liposome is produced using supercritical carbon dioxide or subcritical carbon dioxide without using an organic solvent. Carbon dioxide is relatively easy to handle with a critical temperature of 31.1 ° C. and a critical pressure of 7.38 MPa. It is harmless to the human body even if it remains because it is an inert gas, and a high-purity fluid can be easily obtained at low cost. The temperature of carbon dioxide in the supercritical state (including subcritical state) used in the production method of the present invention is usually 40 to 65 ° C, preferably 45 to 65 ° C. In this temperature range, a liposome membrane in which phospholipids are regularly arranged can be formed. Moreover, although a pressure is suitably selected according to temperature, it is the range of 10-30 MPa, Preferably it is 15-30 MPa.

臨界状態もしくは亜臨界状態の二酸化炭素としては、超臨界二酸化炭素流体を使用してもよく、また、液体二酸化炭素を充填したのち、特定条件に加圧・加熱して、超臨界状態にしてもよい。本発明では、取り扱いのしやすさなどの点で液体二酸化炭素を使用することが望ましい。   As the carbon dioxide in the critical state or subcritical state, a supercritical carbon dioxide fluid may be used, and after filling with liquid carbon dioxide, pressurizing and heating to a specific condition to make the supercritical state. Good. In the present invention, it is desirable to use liquid carbon dioxide in terms of ease of handling.

ヨウド系化合物および製剤助剤を含む溶液もしくは懸濁液の濃度は特に制限されず、撮像の目的、部位、造影物質の性質、患者の症状意図する製剤の投与経路、薬剤の溶解度などに応じて調節することができる。溶媒としては水性媒体が使用され、水性媒体には、蒸留水、局方注射用水、純水などの水のほか、生理食塩水、各種緩衝液、塩類などを含む水溶液などが用いられる。   The concentration of the solution or suspension containing the iodo compound and the formulation aid is not particularly limited, and depends on the purpose of imaging, the site, the nature of the contrast material, the intended administration route of the formulation intended for the patient, the solubility of the drug, etc. Can be adjusted. As the solvent, an aqueous medium is used. As the aqueous medium, water such as distilled water, pharmacopoeia water, and pure water, and aqueous solutions containing physiological saline, various buffers, salts, and the like are used.

各成分の混合順序としては特に制限されるものではないが、たとえば、圧力容器内で、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質を含む脂質膜成分と超臨界二酸化炭素と混合したのち、得られた懸濁液に、薬剤溶液を混合してもよく、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質を含む脂質膜成分と、薬剤溶液とを混合したのち、得られた懸濁液に液化二酸化炭素を供給し、前記温度で、加圧して液化二酸化素を超臨界状態二酸化炭素としてもよい。   The mixing order of each component is not particularly limited. For example, it was obtained after mixing a lipid membrane component containing a lipid having a polyethylene glycol (PEG) group and supercritical carbon dioxide in a pressure vessel. The drug solution may be mixed with the suspension, and after mixing the lipid membrane component containing a lipid having a polyethylene glycol (PEG) group and the drug solution, liquefied carbon dioxide is supplied to the obtained suspension. Then, pressurization may be performed at the above temperature to convert the liquefied dioxide into supercritical carbon dioxide.

混合する超臨界二酸化炭素と脂質膜成分との重量比は、二酸化炭素１質量部に対して0.01〜0.3質量部、好ましくは0.03〜0.1質量部の範囲にあることが望ましい。この範囲にあると、脂質膜成分と超臨界二酸化炭素とを混合しやすく、また均質なリポソームを調製することができる。   The weight ratio of the supercritical carbon dioxide to be mixed and the lipid membrane component is 0.01 to 0.3 parts by mass, preferably 0.03 to 0.1 parts by mass with respect to 1 part by mass of carbon dioxide. Within this range, the lipid membrane component and supercritical carbon dioxide can be easily mixed, and homogeneous liposomes can be prepared.

前記量比で混合すると、脂質膜成分、超臨界二酸化炭素、薬剤溶液を均一に混合することができる。
本発明では、ヨウド系化合物をヨウド原子として100〜350mgＩ/mL造影剤、好ましくは150〜300mgI/mLの濃度で、全脂質を20〜100mg/mL、好ましくは20〜80 mg／mL造影剤、より好ましくは30〜65mg／mL造影剤の濃度で含むように各成分を混合することが望ましい。 When mixed in the above quantitative ratio, the lipid membrane component, supercritical carbon dioxide, and drug solution can be mixed uniformly.
In the present invention, an iodine compound is used as an iodine atom, and the contrast agent is 100 to 350 mg I / mL, preferably 150 to 300 mg I / mL, and the total lipid is 20 to 100 mg / mL, preferably 20 to 80 mg / mL, More preferably, it is desirable to mix each component so as to contain at a concentration of 30 to 65 mg / mL contrast agent.

攪拌・混合手段は、リポソーム膜構成成分を均一に分散・混合できれば特に制限されるものではないが、公知の攪拌・混合装置を特に制限無く採用することが可能であり、たとえばマグネチックスターラーに、ホモジナイザー、ホモミキサー、ウルトラミキサーなどが例示される。なお、混合し難い場合は、強攪拌装置を用いてもよい。   The stirring / mixing means is not particularly limited as long as the liposome membrane constituents can be uniformly dispersed / mixed, but a known stirring / mixing device can be used without any particular limitation. For example, in a magnetic stirrer, Examples thereof include a homogenizer, a homomixer, and an ultramixer. If it is difficult to mix, a strong stirring device may be used.

最終的に塊状の脂質の集合物が存在しないように充分に撹拌しながら、混合すると、超臨界二酸化炭素が水溶性薬剤中に乳化分散して、二酸化炭素／水相エマルション（ＣＯ₂/Ｗエマルション）を形成する。 When mixed with sufficient stirring so that there is no aggregate of aggregated lipids in the end, supercritical carbon dioxide is emulsified and dispersed in the water-soluble drug, and a carbon dioxide / water phase emulsion (CO ₂ / W emulsion) ).

次に、系内を減圧して二酸化炭素を排出する。その結果、脂質単膜から2分子膜へ転換
して、ヨウド系化合物および製剤助剤を内包するリポソームが分散している水性分散液が生成する。本発明の製造方法によれば、主として2〜10枚程度、好ましくは数枚膜からな
るリポソームが得られる。 Next, the system is depressurized to discharge carbon dioxide. As a result, the lipid monolayer is converted into a bilayer, and an aqueous dispersion is produced in which liposomes encapsulating the iodo compound and formulation aid are dispersed. According to the production method of the present invention, liposomes composed mainly of about 2 to 10, preferably several membranes are obtained.

得られたリポソームの水性分散液を、該リポソーム膜を構成する脂質成分のリン脂質の転移温度〜該転移温度+10℃で、0.1〜3時間、好ましくは10〜60分間、インキュベートし
てもよい。さらにリポソーム分散液を必要に応じて0.1〜1μmの孔径を有する濾過膜で、50〜90℃の温度条件下、および0.01〜0.8MPaの圧力下に、濾過してもよい。濾過すること
によって、リポソームの粒径が均一になるとともに、内包率を高めることができる。濾過手段としては、特に制限さるものではなく、公知の加圧濾過方法で行うことが可能であり、好適には、ポリカーボネート、セルロース系のフィルターを装着した押出し濾過装置が
望ましい。
Ｘ線造影剤
本発明のＸ線造影剤は、上記造影物質および製剤助剤とを、前記製法でリポソームの内外に含む。このようなリポソーム内外におけるヨウド系化合物の濃度は、その造影物質の性質、意図する製剤の投与経路および臨床上の指標といった諸要因に基づき任意に設定することができる。 The obtained aqueous dispersion of liposomes may be incubated at the transition temperature of the phospholipid of the lipid component constituting the liposome membrane to the transition temperature + 10 ° C. for 0.1 to 3 hours, preferably 10 to 60 minutes. . Furthermore, the liposome dispersion liquid may be filtered with a filtration membrane having a pore size of 0.1 to 1 μm as necessary under a temperature condition of 50 to 90 ° C. and a pressure of 0.01 to 0.8 MPa. By filtering, the particle size of the liposome becomes uniform and the encapsulation rate can be increased. The filtering means is not particularly limited, and can be performed by a known pressure filtration method. Preferably, an extrusion filtration apparatus equipped with a polycarbonate or cellulose filter is desirable.
X-Ray Contrast Agent The X-ray contrast agent of the present invention contains the above-mentioned contrast material and formulation aid inside and outside the liposome by the above-described method. The concentration of the iodine-based compound inside and outside the liposome can be arbitrarily set based on various factors such as the nature of the contrast medium, the intended route of administration of the preparation, and clinical indicators.

ヨウド系化合物を効率的に内包化し、ヨウド系化合物を担持するリポソームの経時的不安定化を充分に防止するためには、リポソーム内に封入されたヨウド系化合物の量は、Ｘ線造影剤における全ヨウド系化合物の5〜35質量％、好ましくは5〜30質量％、より好ましくは5〜25質量％であることが望ましい。Ｘ線造影剤において、リポソーム内に封入され
たヨウド系化合物の割合が、全体の5〜30質量％（好ましくは5〜25質量％）であれば、残り70〜95質量％（好ましくは75〜95質量％）が存在するリポソーム外の水性分散液へ流出する量については実質的に無視できる。 In order to efficiently encapsulate the iodine-based compound and sufficiently prevent the instability of the liposome carrying the iodine-based compound over time, the amount of the iodine-based compound encapsulated in the liposome is 5 to 35% by mass of the total iodine compound, preferably 5 to 30% by mass, and more preferably 5 to 25% by mass. In the X-ray contrast medium, if the ratio of the iodine compound encapsulated in the liposome is 5 to 30% by mass (preferably 5 to 25% by mass), the remaining 70 to 95% by mass (preferably 75 to The amount that flows out to the aqueous dispersion outside the liposome in which 95% by mass) is present is virtually negligible.

本発明のＸ線造影剤において、含有されるリポソームの粒径とその分布はターゲットの種類、送達部位に応じて適宜選択される。
前記リポソームの平均粒径が、通常、0.05μｍ〜1.0μｍ、より好ましくは0.05〜0.85
μm 、特に好ましくは0.1〜0.5μmに揃えることが望ましい。このような平均粒径にあれ
ば、リポソームをターゲットへ効率的に送達できる。また粒径を0.2μm以上に大きくすると、Kupffer細胞の食作用により肝臓に取り込まれる可能性が高くなり、その細胞部位に
造影物質を集積することができる。これにより肝臓癌の撮像においては、その癌組織には正常組織に比べてKupffer細胞が少ないために、造影剤リポソームの取込み量が、相対的
に少なくなり造影のコントラストが鮮明となる。 In the X-ray contrast medium of the present invention, the particle size and distribution of the contained liposomes are appropriately selected according to the type of target and the delivery site.
The average particle size of the liposome is usually 0.05 μm to 1.0 μm, more preferably 0.05 to 0.85.
It is desirable that the thickness is μm, particularly preferably 0.1 to 0.5 μm. With such an average particle size, liposomes can be efficiently delivered to the target. Further, when the particle size is increased to 0.2 μm or more, there is a high possibility that the Kupffer cells will be taken up by the liver due to phagocytosis, and the contrast material can be accumulated at the cell site. Thereby, in imaging of liver cancer, since the cancer tissue has fewer Kupffer cells than the normal tissue, the amount of contrast agent liposome taken up is relatively small, and the contrast of the contrast becomes clear.

なお、粒径（粒子径）はリポソームを含む分散液を凍結し、その後破砕した界面をカーボン蒸着し、このカーボンを電子顕微鏡で観察すること（凍結破砕ＴＥＭ法）により測定することができる。ここで「平均粒径」とは、観察された造影剤粒子の一定の個数、例えば20個の径の単純平均を指している。これは粒径分布で最も出現頻度の高い粒径を言う「中心粒径」と、通常一致するか、または概ね近似している。   The particle size (particle size) can be measured by freezing the dispersion containing liposomes, then depositing carbon on the crushed interface, and observing the carbon with an electron microscope (freeze crushing TEM method). Here, the “average particle diameter” refers to a simple average of a certain number of observed contrast agent particles, for example, 20 diameters. This usually coincides with or is approximately similar to the “center particle size”, which refers to the particle size having the highest frequency in the particle size distribution.

リポソーム内への薬物の封入量として、リポソーム内に封入された水溶液中に、全薬物（非イオン型ヨウド系化合物および製剤助剤を含む）がリポソーム膜脂質に対して、1〜8、好ましくは3〜8、より好ましくは5〜8の重量比（g/g）で含有されていることが望まし
い。 The amount of drug encapsulated in the liposome is 1 to 8, preferably all of the drug (including nonionic iodine compound and formulation aid) in the aqueous solution encapsulated in the liposome, relative to the liposome membrane lipid. It is desirable that it is contained in a weight ratio (g / g) of 3 to 8, more preferably 5 to 8.

Ｘ線造影剤は、ヨウド含有量として、通常、想定される10〜300mLの製剤溶液の投与量
では、40〜450mgI／mLであり、好ましくは70〜400mgI／mL、リポソーム内への造影物質を内包する効率の観点からは 100〜350mgI／mL、特に好ましくは、150〜300mgI／mLの範囲
である。また、前記脂質膜内外の水相に、製剤助剤がそれぞれ実質的に同一の濃度で含有されることが好ましい。 The X-ray contrast agent is usually 40 to 450 mgI / mL, preferably 70 to 400 mgI / mL, with a contrast medium in the liposome, as the iodine content, usually at a dose of 10 to 300 mL of the formulation solution. From the viewpoint of efficiency of encapsulation, it is in the range of 100 to 350 mgI / mL, particularly preferably 150 to 300 mgI / mL. Moreover, it is preferable that formulation aids are contained in substantially the same concentration in the aqueous phase inside and outside the lipid membrane.

本発明のＸ線造影剤における全脂質濃度は、20〜100 mg／mL造影剤、好ましくは20〜80
mg／mL造影剤、より好ましくは30〜65mg／mL造影剤の濃度で含むことを特徴としている
。この場合の「全脂質」とは、リポソームを構成するリン脂質、ステロール、グリコールといったすべての種類の脂質類を含める意味である。リポソームの膜脂質の重量が多くなると製剤の粘度が大きくなる。 The total lipid concentration in the X-ray contrast medium of the present invention is 20-100 mg / mL contrast medium, preferably 20-80.
It is characterized in that it is contained at a concentration of mg / mL contrast agent, more preferably 30 to 65 mg / mL contrast agent. The “total lipid” in this case is meant to include all types of lipids such as phospholipid, sterol and glycol constituting the liposome. As the membrane lipid weight of the liposome increases, the viscosity of the preparation increases.

本発明では、前記したように、リポソームを構成する脂質膜成分のリン脂質（ポリエチレングリコール基を有する脂質を含まず）/ポリエチレングリコール基を有する脂質のモ
ル比が1000/1以上100/5未満の範囲にあるので、粘度が低くくすることができる。 In the present invention, as described above, the molar ratio of the phospholipid (not including a lipid having a polyethylene glycol group) of the lipid membrane component constituting the liposome / the lipid having a polyethylene glycol group is 1000/1 or more and less than 100/5. Since it exists in a range, a viscosity can be made low.

たとえば、製剤のｐＨが6.5〜8.5であり、37℃における粘度が、20 mPa・ｓ以下、好ましくは18 ｍＰa・ｓ以下、より好ましくは15 mPa・ｓ以下である。
またＸ線造影剤の浸透圧モル濃度は、典型的には250〜500 mosmol/L、好ましくは290〜350 mosmol/Lである。投与する造影剤の浸透圧モル濃度が高いと、心臓・循環系の負担が大きい。血液と等張の溶液または懸濁液を得るには、等張液を提供する濃度で、造影剤を媒質中に溶解もしくは懸濁させる。例えば造影物質の溶解性が低いために造影物質だけでは等張液を提供できない場合、等張の溶液もしくは懸濁液が形成されるように他の非毒性の水溶性物質、例えば塩化ナトリウムのごとき塩類、マンニトール、グルコース、ショ糖、ソルビトールなどの糖類を媒質中に添加してもよい。 For example, the pH of the preparation is 6.5 to 8.5, and the viscosity at 37 ° C. is 20 mPa · s or less, preferably 18 mPa · s or less, more preferably 15 mPa · s or less.
The osmolarity of the X-ray contrast agent is typically 250 to 500 mosmol / L, preferably 290 to 350 mosmol / L. When the osmolarity of the contrast medium to be administered is high, the burden on the heart and circulatory system is large. To obtain a solution or suspension that is isotonic with blood, the contrast agent is dissolved or suspended in the medium at a concentration that provides the isotonic solution. For example, if the contrast material alone is not able to provide an isotonic solution due to the low solubility of the contrast material, other non-toxic water-soluble materials such as sodium chloride will form an isotonic solution or suspension. Sugars such as salts, mannitol, glucose, sucrose, and sorbitol may be added to the medium.

上記溶液もしくは懸濁液の好ましいｐＨ範囲は、室温で6.5〜8.5、さらに好ましくは6.8〜7.8である。造影物質が多ヒドロキシル基を有する水溶性ヨウド系化合物である場合、好ましい緩衝液は、米国特許第4278654号に記載されているような負の温度係数を有する
緩衝液である。アミン系緩衝液はこのような要求を満たす性質を有しており、特に好ましくはトリス（TRIS）である。このタイプの緩衝液は、オートクレーブ温度で低いｐＨを有し、このことがオートクレーブ中のＸ線造影剤の安定性を増し、他方、室温では生理的に許容されるｐＨに戻る。したがって、注射用無菌造影剤を製造するために、リポソーム調製物をオートクレーブ滅菌できることは極めて便利であり、貯蔵安定性なども確保できる。しかしオートクレーブ滅菌を適用できないリポソームには、濾過滅菌を行うのがよい。 The pH range of the solution or suspension is preferably 6.5 to 8.5, more preferably 6.8 to 7.8 at room temperature. When the contrast material is a water-soluble iodo compound having multiple hydroxyl groups, a preferred buffer is a buffer having a negative temperature coefficient as described in US Pat. No. 4,278,654. The amine-based buffer has a property that satisfies such a requirement, and tris (TRIS) is particularly preferable. This type of buffer has a low pH at the autoclave temperature, which increases the stability of the X-ray contrast agent in the autoclave, while returning to a physiologically acceptable pH at room temperature. Therefore, in order to produce a sterile contrast medium for injection, it is extremely convenient that the liposome preparation can be sterilized by autoclave, and storage stability and the like can be ensured. However, filtration sterilization should be performed on liposomes to which autoclave sterilization cannot be applied.

本発明のＸ線造影剤は、全身投与または局所投与いずれにも使用される。好ましくは注射剤または点滴注入剤として全身的に静注投与される。直接投与ができない部位へ局所的に投与する場合は、例えばカテーテルまたは他の適当な薬物送達システムなどを用いて、当業界で公知の技術により投与を行うことができる。   The X-ray contrast medium of the present invention is used for either systemic administration or local administration. Preferably, it is intravenously administered systemically as an injection or infusion. For local administration to sites where direct administration is not possible, administration can be accomplished by techniques known in the art using, for example, a catheter or other suitable drug delivery system.

以下、本発明を具体な例を示してさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定的に解釈されるものではない。
本実施例では、PEG-リン脂質として、以下の構造のものを使用した。 Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to specific examples, but the present invention should not be construed as being limited to these examples.
In this example, PEG-phospholipid having the following structure was used.

（Rは、末端がメトキシ基であるポリエチレングリコール基を表し、それぞれPEG鎖の分子量が2000、5000、10000のものを実施例で使用した）
なお、実施例および比較例で調製した造影剤の粘度は以下の方法で評価した。
＜粘度の評価＞
得られた試料に対して、限外濾過により内包されていない薬剤部分を除き、内包率が３０%になるように調製した。調製した試料を、粘度計（英弘精機社製 レオストレスRS1）を用いて、３７℃の条件で測定した。
[実施例１]
ジパルミトイルホスファチジルコリン（DPPC）368.4mgと、コレステロール147.4mg、PE
G-リン脂質（PEG鎖の分子量5000）58.0mgの混合物をステンレス製の特製オートクレーブ
に仕込み、次いで液体二酸化炭素13gを加え、50℃・12MPaの超臨界状態とした。ついで容器内を撹拌しながら、さらに造影剤溶液（日局イオパミドール溶液：ヨウド濃度240mgI/mL）10mLを定量ポンプで連続的に注入した。注入終了後、系内を減圧して二酸化炭素を排
出し、造影剤溶液を含有するリポソームの分散液を得た。得られた分散液を80℃まで加熱し、アドバンテック社製のポリカーボネートフィルター、0.8μmおよび0.4μmの孔径で、加圧濾過して、造影剤溶液を含有するリポソーム分散液を得た。 (R represents a polyethylene glycol group having a methoxy group at the end, and PEG chains having molecular weights of 2000, 5000, and 10000 were used in the examples)
In addition, the viscosity of the contrast agent prepared by the Example and the comparative example was evaluated with the following method.
<Evaluation of viscosity>
The obtained sample was prepared so as to have an encapsulation rate of 30% except for a drug part not encapsulated by ultrafiltration. The prepared sample was measured under the condition of 37 ° C. using a viscometer (Leo Stress RS1 manufactured by Eiko Seiki Co., Ltd.).
[Example 1]
Dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC) 368.4mg, cholesterol 147.4mg, PE
A mixture of 58.0 mg of G-phospholipid (molecular weight of PEG chain 5000) was charged into a special stainless steel autoclave, and then 13 g of liquid carbon dioxide was added to obtain a supercritical state at 50 ° C. and 12 MPa. Next, while the inside of the container was stirred, 10 mL of a contrast medium solution (JP iopamidol solution: iodine concentration 240 mgI / mL) was continuously injected with a metering pump. After completion of the injection, the system was depressurized to discharge carbon dioxide, and a liposome dispersion containing a contrast agent solution was obtained. The obtained dispersion was heated to 80 ° C. and subjected to pressure filtration with a polycarbonate filter manufactured by Advantech, with pore sizes of 0.8 μm and 0.4 μm to obtain a liposome dispersion containing a contrast agent solution.

得られたリポソーム含有造影剤中の薬剤水溶液の内包率および粘度を評価した。内包率はヨウド定量法で求めた。
その結果を表１および表２に示す。
[実施例２]
ジパルミトイルホスファチジルコリン（DPPC）368.4mgと、コレステロール147.4mg、ＰＥＧ−リン脂質（PEG鎖の分子量10000）75.6mgの混合物を、ステンレス製の特製オートクレーブに仕込み、次いで液体二酸化炭素13gを加え、50℃・12MPaの超臨界状態とした。ついで容器内を撹拌しながら、さらに造影剤溶液（日局イオパミドール溶液：ヨウド濃度240mgI/mL）10mLを定量ポンプで連続的に注入した。注入終了後、系内を減圧して二酸化炭
素を排出し、造影剤溶液を含有するリポソームの分散液を得た。得られた分散液を80℃まで加熱し、アドバンテック社製のポリカーボネートフィルター、0.8μmおよび0.4μmの孔径で、加圧濾過して、造影剤溶液を含有するリポソーム分散液を得た。 The encapsulation rate and viscosity of the aqueous drug solution in the liposome-containing contrast agent obtained were evaluated. The encapsulation rate was determined by the iodine quantitative method.
The results are shown in Tables 1 and 2.
[Example 2]
A mixture of 368.4 mg of dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC), 147.4 mg of cholesterol, and 75.6 mg of PEG-phospholipid (molecular weight of PEG chain 10000) is charged into a special stainless steel autoclave, and then 13 g of liquid carbon dioxide is added. A supercritical state of 12 MPa was assumed. Next, while the inside of the container was stirred, 10 mL of a contrast medium solution (JP iopamidol solution: iodine concentration 240 mgI / mL) was continuously injected with a metering pump. After completion of the injection, the system was depressurized to discharge carbon dioxide, and a liposome dispersion containing a contrast agent solution was obtained. The obtained dispersion was heated to 80 ° C. and subjected to pressure filtration with a polycarbonate filter manufactured by Advantech, with pore sizes of 0.8 μm and 0.4 μm to obtain a liposome dispersion containing a contrast agent solution.

得られたリポソーム含有造影剤中の薬剤水溶液の内包率および粘度を評価した。その結果を表１に示す。
[実施例３]
水素添加大豆ホスファチジルコリン（HSPC）394.0mgと、コレステロール147.4mg、ＰＥＧ−リン脂質（PEG鎖の分子量5000）58.0mgの混合物を、ステンレス製の特製オートクレ
ーブに仕込み、次いで液体二酸化炭素13gを加え、60℃・12MPaの超臨界状態とした。ついで容器内を撹拌しながら、さらに造影剤溶液（日局イオパミドール溶液：ヨウド濃度300mgI/mL）10mLを定量ポンプで連続的に注入した。注入終了後、系内を減圧して二酸化炭素
を排出し、造影剤溶液を含有するリポソームの分散液を得た。得られた分散液を80℃まで加熱し、アドバンテック社製のポリカーボネートフィルター、0.8μmおよび0.4μmの孔径で、加圧濾過して、造影剤溶液を含有するリポソーム分散液を得た。 The encapsulation rate and viscosity of the aqueous drug solution in the liposome-containing contrast agent obtained were evaluated. The results are shown in Table 1.
[Example 3]
A mixture of 394.0 mg of hydrogenated soybean phosphatidylcholine (HSPC), 147.4 mg of cholesterol, and 58.0 mg of PEG-phospholipid (molecular weight of PEG chain 5000) was charged into a special stainless steel autoclave, and then 13 g of liquid carbon dioxide was added.・ A supercritical state of 12 MPa was adopted. Next, while the inside of the container was stirred, 10 mL of a contrast medium solution (JP iopamidol solution: iodine concentration 300 mgI / mL) was continuously injected with a metering pump. After completion of the injection, the system was depressurized to discharge carbon dioxide, and a liposome dispersion containing a contrast agent solution was obtained. The obtained dispersion was heated to 80 ° C. and subjected to pressure filtration with a polycarbonate filter manufactured by Advantech, with pore sizes of 0.8 μm and 0.4 μm to obtain a liposome dispersion containing a contrast agent solution.

得られたリポソーム含有造影剤中の薬剤水溶液の内包率および粘度を評価した。その結果を表１に示す。
[比較例１]
ジパルミトイルホスファチジルコリン（DPPC）368.4mgと、コレステロール147.4mg、ＰＥＧ−リン脂質（PEG鎖の分子量2000）111.5mgの混合物を、クロロホルムとエタノールと水との混合物（質量比100：20：0.1）10mlにメスフラスコ中で混合した。この混合物を湯浴(50℃)上で加熱し、溶液をロータリーエバポレーターで溶媒を蒸発させた。残液をさらに2時間、真空乾燥して、脂質フィルムを形成させた。ここに、造影剤溶液（日局イオパ
ミドール溶液：ヨウド濃度240mgI/mL）10mLを混合し、この混合物を50℃に加熱しながら
ミキサーで約10分間攪拌した、さらに攪拌することにより造影剤溶液を含有するリポソームの分散液を得た。この混合物を80℃まで加熱し、アドバンテック社製のポリカーボネートフィルター、0.8μmおよび0.4μmの孔径で加圧濾過して、リポソーム含有造影剤を得た。 The encapsulation rate and viscosity of the aqueous drug solution in the liposome-containing contrast agent obtained were evaluated. The results are shown in Table 1.
[Comparative Example 1]
Dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC) 368.4mg, cholesterol 147.4mg, PEG-phospholipid (PEG chain molecular weight 2000) 111.5mg mixture into chloroform, ethanol and water mixture (mass ratio 100: 20: 0.1) 10ml Mix in volumetric flask. The mixture was heated on a hot water bath (50 ° C.) and the solution was evaporated on a rotary evaporator. The remaining liquid was further vacuum-dried for 2 hours to form a lipid film. This was mixed with 10 mL of a contrast medium solution (JP iopamidol solution: iodine concentration 240 mg I / mL), and this mixture was stirred for about 10 minutes with a mixer while being heated to 50 ° C. It was further stirred to contain the contrast medium solution. A liposome dispersion was obtained. This mixture was heated to 80 ° C. and pressure filtered through a polycarbonate filter manufactured by Advantech, with pore sizes of 0.8 μm and 0.4 μm to obtain a liposome-containing contrast agent.

得られたリポソーム含有造影剤中の薬剤水溶液の内包率および粘度を評価した。その結果を表１に示す。   The encapsulation rate and viscosity of the aqueous drug solution in the liposome-containing contrast agent obtained were evaluated. The results are shown in Table 1.

図1はＰＥＧ-リン脂質の量による生成リポソームの表面構造の違い示すモデル図である。FIG. 1 is a model diagram showing the difference in the surface structure of the produced liposome depending on the amount of PEG-phospholipid.

Claims (8)

脂質膜内外の水相に、造影物質として水溶性の非イオン型ヨウド系化合物、ならびに１種類以上の生理的に許容される製剤助剤を含有するリポソームを含み、
該リポソームが、リン脂質およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質を含む脂質膜成分と、超臨界二酸化炭素を、40〜65℃、10〜30MPaの条件下に混合すること
により作製され、かつ実質的に有機溶剤を含まないものであり、
脂質膜成分のリン脂質（ポリエチレングリコール基を有する脂質を含まず）/ポリエチ
レングリコール基を有する脂質のモル比が1000/1以上100/5未満である
ことを特徴とするＸ線造影剤。 In the aqueous phase inside and outside the lipid membrane, comprising a liposome containing a water-soluble nonionic iodine-based compound as a contrast medium and one or more physiologically acceptable formulation aids,
The liposome is prepared by mixing a lipid membrane component containing a phospholipid and a lipid having a polyethylene glycol (PEG) group and supercritical carbon dioxide under conditions of 40 to 65 ° C. and 10 to 30 MPa, and substantially It does not contain any organic solvent,
An X-ray contrast agent, wherein a molar ratio of a lipid membrane component phospholipid (not including a lipid having a polyethylene glycol group) / a lipid having a polyethylene glycol group is 1000/1 or more and less than 100/5. ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質中のオキシエチレン単位が50〜5000の範囲にあることを特徴とする請求項１に記載のＸ線造影剤。   The X-ray contrast medium according to claim 1, wherein the oxyethylene unit in the lipid having a polyethylene glycol (PEG) group is in the range of 50 to 5,000. 製剤のｐＨが6.5〜8.5であり、37℃における粘度が20 mPa・s以下であることを特徴と
する請求項１または２に記載のＸ線造影剤。 The X-ray contrast medium according to claim 1 or 2, wherein the formulation has a pH of 6.5 to 8.5 and a viscosity at 37 ° C of 20 mPa · s or less. 該ヨウド系化合物をヨウド原子として100〜350mgＩ/mL造影剤、全脂質を20〜100mg/mL
造影剤の濃度で含むことを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のＸ線造影剤。 100-350 mg I / mL contrast agent with iodine compound as iodine atom, 20-100 mg / mL total lipid
The X-ray contrast medium according to any one of claims 1 to 3, wherein the X-ray contrast medium is contained at a concentration of the contrast medium. 前記ヨウド系化合物の70〜95質量％が、リポソームに内包されていない形態にあり、リポソームを懸濁する水性媒体中に存在することを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載のＸ線造影剤。   The X-based compound according to any one of claims 1 to 4, wherein 70 to 95% by mass of the iodine compound is in a form not encapsulated in liposomes and is present in an aqueous medium in which the liposomes are suspended. Line contrast agent. 前記ヨウド系化合物のうち、リポソームに内包された部分の前記脂質の量に対する重量比が、3〜8（g/g）であることを特徴とする請求項1〜５のいずれかに記載のＸ線造影剤。   X in any one of Claims 1-5 whose weight ratio with respect to the quantity of the said lipid of the part included in the liposome among the said iodine-type compounds is 3-8 (g / g). Line contrast agent. 前記ヨウド系化合物が、イオメプロール、イオパミドール、イオヘキソール、イオプロミド、イオキシラン、イオタスル、イオトロランまたはイオジキサノールであることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載のＸ線造影剤。   The X-ray contrast agent according to any one of claims 1 to 6, wherein the iodo-based compound is iomeprol, iopamidol, iohexol, iopromide, ioxirane, iotasulfur, iotrolan or iodixanol. ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）基を有する脂質が存在する条件下で、
リン脂質を含む脂質膜形成成分と、ヨウド系化合物および製剤助剤を含む溶液もしくは懸濁液と、超臨界状態二酸化炭素とを、
前記のポリエチレングリコール基を有する脂質とリン脂質との量比が、リン脂質（ポリエチレングリコール基を有するリン脂質）/ポリエチレングリコール基を有する脂質のモ
ル比で、1000/1以上100/5未満の範囲となるように、
40〜65℃、10〜30MPaの条件下に混合したのち、
二酸化炭素を排出して、それらのヨウド系化合物および製剤助剤を内部に含有するリポソームを作製することを特徴とするＸ線造影剤の製造方法。



Under conditions where a lipid having a polyethylene glycol (PEG) group is present,
A lipid film-forming component containing a phospholipid, a solution or suspension containing an iodine-based compound and a formulation aid, and supercritical carbon dioxide,
The molar ratio of the lipid having a polyethylene glycol group and the phospholipid is a molar ratio of phospholipid (phospholipid having a polyethylene glycol group) / lipid having a polyethylene glycol group in a range of 1000/1 or more and less than 100/5. So that
After mixing under conditions of 40 to 65 ° C and 10 to 30 MPa,
A method for producing an X-ray contrast agent, characterized in that carbon dioxide is discharged and liposomes containing these iodine-based compounds and formulation aids are produced.

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