JP2006232752A - Cholesterol and neutral fat absorption inhibitor and food containing the same - Google Patents

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a novel cholesterol and neutral fat absorption inhibitor derived from a natural substance which has a high effect of inhibiting the absorption of cholesterol and neutral fat and a food containing the same. <P>SOLUTION: The cholesterol and neutral fat absorption inhibitor comprises a resin of Sangre de Grado/Drago or its methanol extract. The food which inhibits the absorption of cholesterol and neutral fat contains a resin of Sangre de Grado/Drago or its methanol extract. <P>COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

本発明は、コレステロール及び中性脂肪吸収抑制剤及びこれを含む食品に関する。   The present invention relates to cholesterol and neutral fat absorption inhibitors and foods containing the same.

コレステロール及び中性脂肪の過剰な蓄積は、様々な生活習慣病を引き起こすことが知られている。このような生活習慣病としては、高脂血症が挙げられるが、これは動脈硬化、ひいては虚血性心疾患などを発症させる危険因子となり得る。
血液中のコレステロール濃度及び中性脂肪濃度を低下させる組成物として、キトサン、低分子アルギン酸ナトリウム、サイリウム種皮由来植物繊維、ミズナラ及びコナラ樹木種実粉末（特許文献１参照）、タマリンドの種皮（特許文献２参照）などいくつかの素材が知られているが、より効果の高い素材が求められている。 Excessive accumulation of cholesterol and neutral fat is known to cause various lifestyle diseases. Examples of such lifestyle-related diseases include hyperlipidemia, which can be a risk factor for developing arteriosclerosis and eventually ischemic heart disease.
Examples of compositions that lower cholesterol and triglyceride concentrations in blood include chitosan, low-molecular sodium alginate, psyllium seed coat-derived plant fibers, Mizunara and Quercus tree seed seed powder (see Patent Document 1), tamarind seed coat (Patent Document 2) Some materials are known, but more effective materials are required.

サングレ・デ・グラード（現地名Ｓａｎｇｒｅ ｄｅ Ｇｒａｄｏ／Ｄｒａｇｏ、学名Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉ）は、トウダイグサ（Euphorbiaceae）科、クロトン（Croton）属に属する高さが２０mほどにもなるペルー、エクアドル、コロンビア等の比較的標高が高いアッパーアマゾンに自生する植物であって、その樹皮や樹液がアマゾン熱帯雨林において伝統的に生薬として利用されてきた。
サングレ・デ・グラードの樹皮や樹液等は、抗酸化作用、抗炎症作用、止血作用、抗ウィルス作用、抗菌作用、抗下痢作用などの効能を有することが報告されている（例えば、非特許文献１、非特許文献２参照）。しかし、サングレ・デ・グラードにコレステロール及び中性脂肪の吸収抑制効果があることは全く知られていなかった。 Sangre de Grado (local name: Sangre de Grado / Drago, scientific name: Croton lechleri) It is a plant that grows naturally in the upper Amazon at a high altitude, and its bark and sap have traditionally been used as herbal medicines in the Amazon rainforest.
It has been reported that the bark and sap of Sangre de Grado have anti-oxidant, anti-inflammatory, hemostatic, antiviral, antibacterial, and antidiarrheal effects (eg, non-patent literature) 1, refer to Non-Patent Document 2). However, it has not been known at all that Sangre de Grado has an effect of suppressing absorption of cholesterol and neutral fat.

特開平１１−２９９４５１号公報JP-A-11-299451 特開平９−２９１０３９号公報JP-A-9-291039 Ｐｅｒｄｕｅ ＧＰ，ｅｔ ａｌ．Ｓｏｕｔｈ Ａｍｅｒｉｃａｎ ｐｌａｎｔｓ II：ｔａｓｐｉｎｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ，１９７９ Ｊａｎ．Perdue GP, et al. South American plants II: taspine isolation and anti-inflammability activity. J Pharm Sci, 1979 Jan. Ｃｈｅｎ ＺＰ，ｅｔ ａｌ．Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｕｒ，ａｎｔｉ−ｂａｃｔｅｒｉａｌ，ａｎｄ ｗｏｕｎｄ−ｈｅａｌｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｄｒａｇｏｎ’ｓ ｂｌｏｏｄ・Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄ，１９９４ Ｄｅｓ．Chen ZP, et al. Studies on the anti-tumour, anti-bacterial, and wound-healing properties of dragon's blood, Plant Med, 1994 Des.

本発明が解決しようとする課題は、コレステロール及び中性脂肪の吸収を抑制する効果が高く、新規な天然物由来のコレステロール及び中性脂肪吸収抑制剤及びこれを含む食品を提供することにある。   The problem to be solved by the present invention is to provide a novel natural product-derived cholesterol and neutral fat absorption inhibitor and a food containing the same, which are highly effective in suppressing absorption of cholesterol and neutral fat.

本発明者は、様々な薬効で知られているサングレ・デ・グラードの樹脂に、コレステロール及び中性脂肪の吸収を抑制する作用があることを発見した。
即ち、本発明のコレステロール及び中性脂肪吸収抑制剤は、サングレ・デ・グラードの樹脂を有効成分とする。更に詳しくは、本発明のコレステロール及び中性脂肪吸収抑制剤は、サングレ・デ・グラードの樹脂のメタノール抽出物を有効成分とする。また、本発明の食品は、サングレ・デ・グラードの樹脂又はそのメタノール抽出物を含有する。
サングレ・デ・グラードの樹液には、プロアンソシアニジン、フェノール類、ジテルペン、フィトステロール、タスピン、リグナン・ジメチルセルロシン等の様々な植物化学成分が含有されているが、サングレ・デ・グラードの樹液が固化してなる樹脂の中で、如何なる成分がコレステロール及び中性脂肪吸収抑制剤として作用しているのかは明らかでない。 The inventor of the present invention has found that a resin of Sangre de Grado, which is known for various medicinal effects, has an action of suppressing absorption of cholesterol and neutral fat.
That is, the cholesterol and neutral fat absorption inhibitor of the present invention comprises a Sangre de Grado resin as an active ingredient. More specifically, the cholesterol and neutral fat absorption inhibitor of the present invention comprises a methanol extract of a Sangre de Grado resin as an active ingredient. Moreover, the foodstuff of this invention contains the resin of Sangre de Grado or its methanol extract.
The sap of Sangre de Grado contains various phytochemical components such as proanthocyanidins, phenols, diterpenes, phytosterols, taspine, lignan dimethylcellulose, etc. It is not clear what components act as cholesterol and neutral fat absorption inhibitors in the solidified resin.

本発明によれば、従来から伝統薬として知られていたサングレ・デ・グラードを利用して、コレステロール及び中性脂肪の吸収を抑制することができる。   According to the present invention, absorption of cholesterol and neutral fat can be suppressed by using Sangre de Grado, which has been known as a traditional medicine.

本発明のコレステロール及び中性脂肪吸収抑制剤は、サングレ・デ・グラードの樹液を固化してなる樹脂を有効成分とする。
サングレ・デ・グラードとは、現地名Ｓａｎｇｒｅ ｄｅ Ｇｒａｄｏ／Ｄｒａｇｏ、学名Ｃｒｏｔｏｎ ｌｅｃｈｌｅｒｉをさし、トウダイグサ（Euphorbiaceae）科、クロトン（Croton）属に属する。
サングレ・デ・グラードの樹脂は、樹木の表面に傷を付け、この傷跡から滲出する樹液を固化したもので、従来より公知のものであり、既に商品として販売されている。
本発明に係るサングレ・デ・グラードの樹脂のメタノール抽出物とは、上記公知の樹脂をメタノールで抽出して得られた化合物である。メタノール抽出は一般的な方法で行う。例えば、樹脂を粉末状に粉砕した粉末樹脂にメタノールを加え、室温〜７０℃程度で数時間から数日放置し、その抽出液に濾過、遠心分離等の操作を加え、濃縮する。 The cholesterol and neutral fat absorption inhibitor of the present invention contains, as an active ingredient, a resin obtained by solidifying a sap of Sangre de Grado.
Sangre de Grado refers to the local name Sangre de Grado / Drago and the scientific name Croton lechleri, belonging to the Euphorbiaceae family and the genus Croton.
The Sangre de Grado resin is obtained by scratching the surface of a tree and solidifying the sap that exudes from the scar, and has been conventionally known and has already been sold as a product.
The methanol extract of the Sangre de Grado resin according to the present invention is a compound obtained by extracting the above known resin with methanol. Methanol extraction is performed by a general method. For example, methanol is added to a powder resin obtained by pulverizing a resin into a powder form, and the mixture is allowed to stand at room temperature to about 70 ° C. for several hours to several days. The extract is subjected to operations such as filtration and centrifugation, and concentrated.

樹脂を粉末状にすると、メタノールとの接触面積が増大し抽出を効率的に行うことができるが、粉末状の樹脂でなくても良い。また、樹脂から有効成分を溶出させる溶媒は、メタノールに限定されるものではなく、エタノール、アセトン、酢酸エチル、ヘキサン等の類似した他の有機溶媒等を用いることもできる。
さらに、水抽出、熱水抽出、酸性下での抽出、アルカリ性下での抽出で得られたサングレ・デ・グラードの樹脂の抽出物でも、同様の作用を発揮し得るものである。
また、浸漬する時間は、樹脂の大きさ、抽出雰囲気の温度によって異なるが、粉末状の樹脂であれば、通常の室温下では一昼夜の浸漬で十分である。 If the resin is powdered, the contact area with methanol increases and extraction can be performed efficiently, but the resin may not be powdered. The solvent for eluting the active ingredient from the resin is not limited to methanol, and other similar organic solvents such as ethanol, acetone, ethyl acetate, hexane and the like can also be used.
Furthermore, the same action can also be achieved with an extract of a Sangre de Grado resin obtained by water extraction, hot water extraction, acid extraction, or alkali extraction.
Further, the immersion time varies depending on the size of the resin and the temperature of the extraction atmosphere, but in the case of a powdered resin, it is sufficient to immerse all day and night at normal room temperature.

サングレ・デ・グラードの樹脂及びそのメタノール抽出物は、常法に従って従来公知の医薬用無毒性担体と組み合わせることにより、種々の剤形に製剤化できる。
経口投与剤としては、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、ソフトカプセル剤等の固形剤や、溶液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤や、凍結乾燥製剤が挙げられる。非経口投与剤としては、注射剤のほか、座薬、噴霧剤、経皮吸収剤が挙げられる。これらの製剤は、製剤上の常套手段により調製することができる。 The Sangre de Grado resin and its methanol extract can be formulated into various dosage forms by combining with a conventionally known non-toxic pharmaceutical carrier according to a conventional method.
Examples of the orally administered agent include solid agents such as tablets, granules, powders, capsules and soft capsules, solutions such as solutions, suspensions and emulsions, and freeze-dried preparations. Examples of parenteral administration include injections, suppositories, sprays, and transdermal absorption agents. These preparations can be prepared by conventional means on preparations.

医薬用無毒性担体としては、グルコース、乳糖、蔗糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、コレステロール酸グリセリド、ポリエチレングリコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタンコレステロール酸エステル、アミノ酸、アルブミン、水、生理食塩水等が挙げられる。また、必要に応じて、安定化剤、滑剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤等の慣用の添加剤を適宜添加することができる。
サングレ・デ・グラード樹脂の投与量は、被投与者の年齢、体重、症状、疾患の程度、投与スケジュール、製剤形態等により適宜選択・決定されるが、一日当たり、０．０１〜１０ｇ／ｋｇ体重程度とされ、一日数回に分けて投与しても良い。 Non-toxic pharmaceutical carriers include glucose, lactose, sucrose, starch, mannitol, dextrin, cholesterol glyceride, polyethylene glycol, hydroxyethyl starch, ethylene glycol, polyoxyethylene sorbitan cholesterol ester, amino acids, albumin, water, physiological saline Water etc. are mentioned. If necessary, conventional additives such as stabilizers, lubricants, wetting agents, emulsifiers, binders and the like can be appropriately added.
The dose of the Sangre de Grado resin is appropriately selected and determined according to the age, body weight, symptom, degree of disease, administration schedule, formulation form, etc. of the recipient, but is 0.01 to 10 g / kg per day. It may be about the body weight, and may be divided into several times a day.

サングレ・デ・グラードは、食経験もあることから安全性が高いと考えられ、本発明のコレステロール及び中性脂肪吸収抑制剤を食品として摂取することもできる。
本発明のサングレ・デ・グラード樹脂に適当な助剤を添加し、慣用の手段を用いて食用に適した形態、例えば粒状、顆粒状、ペースト状に形成し機能性食品として、これを直接供するか、ハム、ソーセージ、かまぼこ、ちくわ、パン、バター、乳製品、菓子、水、酒類、清涼飲料水等の種々の飲食物に添加し飲食品として、これを直接供することもできる。
サングレ・デ・グラードの樹脂を含む食品の摂取量は、摂取者の年齢、体重、症状、疾患の程度、食品の形態等により適宜選択・決定されるが、サングレ・デ・グラード抽出物の摂取量が、一日当たり０．０１〜１０ｇ／ｋｇ体重程度になるようにする。 Sangre de Grado is considered to be highly safe because it has dietary experience, and the cholesterol and neutral fat absorption inhibitor of the present invention can also be taken as food.
Appropriate auxiliaries are added to the Sangre de Grado resin of the present invention, and it is directly used as a functional food that is formed into an edible form, for example, granular, granular or pasty, using conventional means. It can also be directly served as a food or drink by adding it to various foods such as ham, sausage, kamaboko, chikuwa, bread, butter, dairy products, confectionery, water, alcoholic beverages, and soft drinks.
The intake of food containing Sangre de Grado resin is appropriately selected and determined according to the age, weight, symptoms, disease severity, form of food, etc. of the intake. The amount is about 0.01 to 10 g / kg body weight per day.

（試験１）
サングレ・デ・グラードの樹脂のコレステロール吸収抑制作用を調べるために、次のような試験を行った。
９週齢、雌のｄｄｙマウスを、コントロール群（ｎ＝８）とサングレ・デ・グラード投与群（ｎ＝８）とに分け、両群の尾採血を行った。
コントロール群には、水０．５ｍｌ、コレステロール１４６ｍｇ／ｋｇ体重、コール酸ナトリウム３６ｍｇ／ｋｇ体重、及び、オリーブ油０．５ｍｌの混合物を同時に経口投与した。
サングレ・デ・グラード投与群には、サングレ・デ・グラード樹脂粉末水溶液（１０００ｍｇ／ｋｇ）０．５ｍｌ、コレステロール１４６ｍｇ／ｋｇ体重、コール酸ナトリウム３６ｍｇ／ｋｇ体重、及び、オリーブ油０．５ｍｌの混合物を同時に経口投与した。
投与後３時間経過してから、再び両群の尾採血を行った。尾採血によって得られた血液を遠心分離した後、血漿部を２μｌずつ取り出して、コレステロールテストワコーＥを用いて血中コレステロール濃度を測定した。
試験１の結果を表１に示す。 (Test 1)
In order to investigate the cholesterol absorption inhibitory effect of the resin of Sangre de Grado, the following test was conducted.
Nine-week-old female ddy mice were divided into a control group (n = 8) and a Sangre de Grado administration group (n = 8), and tail blood collection was performed in both groups.
In the control group, a mixture of 0.5 ml of water, 146 mg / kg body weight of cholesterol, 36 mg / kg body weight of sodium cholate and 0.5 ml of olive oil was orally administered simultaneously.
In the Sangre de Grado administration group, a mixture of an aqueous solution of Sangre de Grado resin powder (1000 mg / kg) 0.5 ml, cholesterol 146 mg / kg body weight, sodium cholate 36 mg / kg body weight, and olive oil 0.5 ml Orally administered at the same time.
After 3 hours from the administration, blood was collected from both groups again. After centrifuging blood obtained by tail blood collection, 2 μl of each plasma part was taken out and the blood cholesterol concentration was measured using Cholesterol Test Wako E.
The results of Test 1 are shown in Table 1.

表１において、数値は平均値±標準誤差（ｍｇ／ｄｌ）であり、カッコ内はサングレ・デ・グラード投与群のコントロール群に対する有意差を示す。
表１の結果から、サングレ・デ・グラードの樹脂に、コレステロール吸収抑制効果のあることがわかった。 In Table 1, a numerical value is an average value +/- standard error (mg / dl), and a parenthesis shows a significant difference with respect to the control group of the Sangre de Grade administration group.
From the results of Table 1, it was found that the Sangre de Grado resin has an effect of suppressing cholesterol absorption.

（製法）
サングレ・デ・グラードの樹脂を乾燥して粉砕した粉末８ｇを１５０ｍｌのメタノールに浸漬し、一昼夜抽出した後、ろ過し、ろ液を乾固して、サングレ・デ・グラードの樹脂のメタノール抽出物６．４ｇを得た。 (Manufacturing method)
8 g of powder dried and pulverized from Sangre de Grado resin is immersed in 150 ml of methanol, extracted all day and night, then filtered, and the filtrate is dried to dryness. Methanol extract of Sangre de Grado resin 6.4 g was obtained.

（試験２）
サングレ・デ・グラードの樹脂のメタノール抽出物によるコレステロール吸収抑制作用を調べるために、以下のような実験を行った。
８週齢、雌のｄｄｙマウスを、コントロール群（ｎ＝８）とサングレ・デ・グラード投与群（ｎ＝８）とに分け、両群の尾採血を行った。
コントロール群には、水０．５ｍｌ、コレステロール１４６ｍｇ／ｋｇ体重、コール酸ナトリウム３６ｍｇ／ｋｇ体重、及び、オリーブ油０．５ｍｌの混合物を同時に経口投与した。
サングレ・デ・グラード投与群には、上記製法で得たサングレ・デ・グラードのメタノール抽出物水溶液（３００ｍｌ／ｋｇ）０．５ｍｌ、コレステロール１４６ｍｇ／ｋｇ体重、コール酸ナトリウム３６ｍｇ／ｋｇ体重、及び、オリーブ油０．５ｍｌの混合物を同時に経口投与した。
投与後、２時間、４時間、６時間及び８時間経過後にそれぞれ両群の尾採血を行った。 尾採血によって得られた血液を遠心分離した後、血漿部を２μｌ取り出し、コレステロールテストワコーＥを用いて血中コレステロール濃度の経時変化を測定した。
試験２の結果を表２に示す。 (Test 2)
In order to investigate the cholesterol absorption inhibitory effect of the methanol extract of the resin of Sangre de Grado, the following experiment was conducted.
Eight-week-old female ddy mice were divided into a control group (n = 8) and a Sangre de Grado administration group (n = 8), and tail blood collection was performed in both groups.
In the control group, a mixture of 0.5 ml of water, 146 mg / kg body weight of cholesterol, 36 mg / kg body weight of sodium cholate and 0.5 ml of olive oil was orally administered simultaneously.
In the Sangre de Grado administration group, 0.5 ml of an aqueous solution of methanol extract of Sangre de Grado obtained by the above production method (300 ml / kg), 146 mg / kg body weight of cholesterol, 36 mg / kg body weight of sodium cholate, and A mixture of 0.5 ml of olive oil was orally administered simultaneously.
Tail blood collection was performed in both groups after 2 hours, 4 hours, 6 hours and 8 hours after administration. After centrifuging the blood obtained by tail blood collection, 2 μl of the plasma part was taken out, and the change over time in blood cholesterol concentration was measured using Cholesterol Test Wako E.
The results of Test 2 are shown in Table 2.

（試験３）
サングレ・デ・グラードの樹脂のメタノール抽出物による中性脂肪吸収抑制作用を調べるために、以下のような実験を行った。
８週齢、雌のｄｄｙマウスを、コントロール群（ｎ＝８）とサングレ・デ・グラード投与群（ｎ＝８）とに分け、両群の尾採血を行った。
コントロール群には、水０．５ｍｌ、コレステロール１４６ｍｇ／ｋｇ体重、コール酸ナトリウム３６ｍｇ／ｋｇ体重、及び、オリーブ油０．５ｍｌの混合物を同時に経口投与した。
サングレ・デ・グラード投与群には、上記製法で得たサングレ・デ・グラードのメタノール抽出物水溶液（３００ｍｌ／ｋｇ）０．５ｍｌ、コレステロール１４６ｍｇ／ｋｇ体重、コール酸ナトリウム３６ｍｇ／ｋｇ体重、及び、オリーブ油０．５ｍｌの混合物を同時に経口投与した。
投与後、３時間及び６時間経過後にそれぞれ両群の尾採血を行った。尾採血で得られた血液を遠心分離した後、血漿部を２μｌ取り出し、トリグルセライドＥテストワコーを用いて血中中性脂肪濃度の経時変化を測定した。
試験３の結果を表３に示す。 (Test 3)
In order to examine the neutral fat absorption inhibitory effect of the methanol extract of the Sangre de Grado resin, the following experiment was conducted.
Eight-week-old female ddy mice were divided into a control group (n = 8) and a Sangre de Grado administration group (n = 8), and tail blood collection was performed in both groups.
In the control group, a mixture of 0.5 ml of water, 146 mg / kg body weight of cholesterol, 36 mg / kg body weight of sodium cholate and 0.5 ml of olive oil was orally administered simultaneously.
In the Sangre de Grado administration group, 0.5 ml of an aqueous solution of methanol extract of Sangre de Grado obtained by the above production method (300 ml / kg), 146 mg / kg body weight of cholesterol, 36 mg / kg body weight of sodium cholate, and A mixture of 0.5 ml of olive oil was orally administered simultaneously.
After 3 hours and 6 hours from the administration, tail blood collection was performed in both groups. After centrifuging the blood obtained by tail blood collection, 2 μl of the plasma part was taken out and the time course of blood triglyceride concentration was measured using Triglyceride E Test Wako.
The results of Test 3 are shown in Table 3.

表２及び表３において、数値は平均値±標準誤差（ｍｇ／ｄｌ）であり、カッコ内はサングレ・デ・グラード投与群のコントロール群に対する有意差を示す。
表２及び表３から明らかなように、サングレ・デ・グラードの樹脂のメタノール抽出物は、コレステロール及び中性脂肪の吸収を顕著に抑制することができる。
In Tables 2 and 3, the numerical value is an average value ± standard error (mg / dl), and the parentheses indicate a significant difference with respect to the control group of the Sangre de Grade administration group.
As is apparent from Tables 2 and 3, the methanol extract of the Sangre de Grado resin can remarkably suppress the absorption of cholesterol and neutral fat.

Claims (3)

サングレ・デ・グラードの樹脂を有効成分とするコレステロール及び中性脂肪吸収抑制剤。   Cholesterol and neutral fat absorption inhibitor containing Sangre de Grado resin as an active ingredient. 該抽出物がサングレ・デ・グラードの樹脂のメタノール抽出物より成ることを特徴とする請求項１に記載のコレステロール及び中性脂肪吸収抑制剤。   The cholesterol and neutral fat absorption inhibitor according to claim 1, wherein the extract comprises a methanol extract of a resin of Sangre de Grado. 請求項１又は２に記載のコレステロール及び中性脂肪吸収抑制剤を含む食品。
A food comprising the cholesterol according to claim 1 or 2 and a neutral fat absorption inhibitor.