JP2005523263A

JP2005523263A - Use of PDE5 inhibitors in the treatment of scarring and fibrosis

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Publication number: JP2005523263A
Application number: JP2003563565A
Authority: JP
Inventors: バット，リチャード・フィリップ; フィリップス，スティーヴン・チャールズ
Original assignee: ファイザー・インク
Priority date: 2002-01-31
Filing date: 2003-01-21
Publication date: 2005-08-04
Also published as: TW200302105A; GB0202254D0; CA2474852A1; BR0307410A; EP1469857A1; MXPA04007430A; WO2003063875A1

Abstract

本発明は、組織における瘢痕化又は繊維症の治療又は予防のための選択的サイクリックグアノシン３’，５’−モノホスフェートタイプ５（ｃＧＭＰＰＤＥ５）阻害剤（以後、ＰＤＥ５阻害剤）の使用に関する。ＰＤＥ５阻害剤には、特に、化合物シルデナフィルが含まれる。The present invention relates to the use of selective cyclic guanosine 3 ', 5'-monophosphate type 5 (cGMP PDE5) inhibitors (hereinafter PDE5 inhibitors) for the treatment or prevention of scarring or fibrosis in tissues. PDE5 inhibitors include in particular the compound sildenafil.

Description

本発明は、瘢痕化及び／又は繊維症を減少又は防止するためのサイクリックグアノシン３’，５’−モノホスフェートタイプ５ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤（以下、ＰＤＥ５阻害剤）の使用に関する。ＰＤＥ５阻害剤には、特に、化合物シルデナフィルが含まれる。 The present invention relates to the use of cyclic guanosine 3 ', 5'-monophosphate type 5 cGMP PDE5 inhibitor (hereinafter PDE5 inhibitor) for reducing or preventing scarring and / or fibrosis. PDE5 inhibitors include in particular the compound sildenafil.

本発明によると、瘢痕化及び／又は繊維症に関連する疾患の例には：肺繊維症；アテローム性動脈硬化症；心血管疾患；感染、外傷、外科処置若しくは熱傷の後の皮膚及び角膜瘢痕化及び／又は繊維症；強皮症及び他の結合組織障害；心臓の繊維症；慢性閉塞性肺疾患；筋繊維症；腎繊維症；慢性皮膚潰瘍及び脂質皮膚硬化症（lipdermatosclerosis）；（あらゆる原因による）肺繊維症；外科処置後及び特発性（idiophatic）の癒着；皮膚の炎症性状態（苔癬状態及びそれに関連する状態も含まれる）；老化及び全ての老化関連変性障害（皮膚の老化も含まれる）；あらゆる病因（ウイルス性及び非ウイルス性肝炎が含まれる）による肝繊維症；肝硬変；慢性膵炎；慢性甲状腺炎；（あらゆる原因による）石灰沈着症；その病原が結合マトリックスの沈着／リモデリングに関連する状態（ガンも含まれる）が、（必ずしもこれらに限定されないが）含まれる。 According to the present invention, examples of diseases associated with scarring and / or fibrosis include: pulmonary fibrosis; atherosclerosis; cardiovascular disease; skin and corneal scars after infection, trauma, surgery or burns Scleroderma and / or fibrosis; scleroderma and other connective tissue disorders; cardiac fibrosis; chronic obstructive pulmonary disease; muscle fibrosis; renal fibrosis; chronic skin ulcer and lipdermatosclerosis; Caused by pulmonary fibrosis; post-surgical and idiophatic adhesions; inflammatory conditions of the skin (including lichen conditions and related conditions); aging and all aging-related degenerative disorders (skin aging) Liver fibrosis of any etiology (including viral and non-viral hepatitis); cirrhosis; chronic pancreatitis; chronic thyroiditis; calcification (by any cause); Conditions associated with wearing / remodeling (cancer include) it is included (but are not necessarily limited to).

本発明は、このような疾患状態の治療における一定の化合物の使用に関する。 The present invention relates to the use of certain compounds in the treatment of such disease states.

開発途上国と先進国のいずれにおいても、瘢痕化及び／繊維症に関連する何らかの疾患の発生は資源の深刻な浪費である。これら疾患の結果を処理することを試みる国内的及び国際的公衆衛生プログラムの両方のための費用は相当なものである。従って、瘢痕化及び／又は繊維症に関連した疾患の作用を治療又は減少させるための手段を提供することが望ましい。 In both developing and developed countries, the occurrence of any disease associated with scarring and / or fibrosis is a serious waste of resources. The costs for both national and international public health programs that attempt to treat the outcome of these diseases are substantial. Accordingly, it would be desirable to provide a means for treating or reducing the effects of diseases associated with scarring and / or fibrosis.

アテローム性動脈硬化症のような瘢痕化及び／又は繊維症に関連した一定の疾患の進行は、平滑筋細胞（ＳＭＣ）の蓄積／増殖に関与し得る。平滑筋細胞は、本質的に大部分膠原性である細胞外マトリックス微小分子を合成する。血栓症から心筋梗塞（ＭＩ）へのアテローム性動脈硬化症の進行は組織傷害につながる可能性があり、それは、瘢痕組織ターンオーバーと繊維組織形成のいずれをも引き起こし得る。組織傷害後の正常な創傷修復過程は繊維芽細胞の増殖を生じるが、繊維芽細胞の筋繊維芽細胞への分化が、組織繊維症の発達における初期の事象を特徴付け得る。筋繊維芽細胞が梗塞部位に長期に渡り存在すると、細胞外マトリックスタンパク質とプロテアーゼの不均衡も生じやすく、それは肥厚性瘢痕及び創傷形成を悪化し得る。 Certain disease progressions associated with scarring and / or fibrosis such as atherosclerosis may be involved in smooth muscle cell (SMC) accumulation / proliferation. Smooth muscle cells synthesize extracellular matrix micromolecules that are essentially collagenous. The progression of atherosclerosis from thrombosis to myocardial infarction (MI) can lead to tissue injury, which can cause both scar tissue turnover and fibrous tissue formation. Although normal wound repair processes after tissue injury result in fibroblast proliferation, differentiation of fibroblasts into myofibroblasts can characterize an early event in the development of tissue fibrosis. When myofibroblasts are present at the site of infarction for a long time, an imbalance between extracellular matrix proteins and proteases can also occur, which can exacerbate hypertrophic scarring and wound formation.

瘢痕化及び／又は繊維症に関連した疾患を治療するための、それら疾患状態を治療できるか又は少なくとも改善できる化合物を提供することが望ましいであろう。
ＥＰＯ９３００６９は、瘢痕化を減少させるための組成物を開示している。これら組成物のうち、ホスホジエステラーゼ阻害剤も、創傷の瘢痕化を減少するといわれている。しかしながら、その文献中に記載されたホスホジエステラーゼ阻害剤は、広範囲の阻害剤であり、ＰＤＥ５に特異的でない。従って、当該特許の阻害剤は、本発明の化合物と同じ治療効果を有さない点で不利であり得る。 It would be desirable to provide compounds that can treat or at least ameliorate those disease states for treating diseases associated with scarring and / or fibrosis.
EPO930069 discloses a composition for reducing scarring. Of these compositions, phosphodiesterase inhibitors are also said to reduce wound scarring. However, the phosphodiesterase inhibitors described in that document are a wide range of inhibitors and are not specific for PDE5. Accordingly, the inhibitors of the patent may be disadvantageous in that they do not have the same therapeutic effect as the compounds of the present invention.

Redondo et al (British Journal of Pharmacology 1998, 124, 1455-1462) は、成人心臓繊維芽細胞によるコラーゲン合成に対する、心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）とサイクリックＧＭＰホスホジエステラーゼ阻害の効果についての検討を記載している。ナトリウム利尿ペプチドレセプターの２つの主要なサブクラスが特定されており、これらのうちＮＰＲ−Ｃタイプが最も支配的で、心臓繊維芽細胞におけるナトリウム利尿ペプチドレセプターの集団の７０％を占める。その著者は、ＰＤＥ阻害剤であるザプリナスト（Zaprinast）が、それだけでは心臓繊維芽細胞増殖の制御において効果を有さないことを見出した。同様に、ＡＮＰもそれだけでは心臓繊維芽細胞増殖を制御しなかった。しかしながら、ＡＮＰとザプリナストの組合せは、限定された濃度範囲にわたりチミジン取り込み反応の濃度依存的阻害を引き起こし、その著者は、これをＤＮＡ合成の間接的アッセイとして用いた。それら結果は、Ｃ−ＡＮＦ４−３２（ＮＰＲ−Ｃ特異的類似体）とザプリナストの組合せでは再現することができなかった。実はどこか他の文献ではザプリナストが非特異的ＰＤＥ阻害剤として作用すると記録されている（例えば、McMahon et al (doc 18) と Kukoretz et al (doc 3) を参照のこと）のに、その著者はザプリナストが特異的ＰＤＥ５阻害剤であると記載していることにより、この検討に更なる疑いが投げかけられる。それは、ＰＤＥ５よりも、ＰＤＥ６に対して５倍強力であることも知られている。 Redondo et al (British Journal of Pharmacology 1998, 124 , 1455-1462) describes the effects of atrial natriuretic peptide (ANP) and cyclic GMP phosphodiesterase inhibition on collagen synthesis by adult cardiac fibroblasts. ing. Two major subclasses of natriuretic peptide receptors have been identified, of which the NPR-C type is the most dominant and accounts for 70% of the natriuretic peptide receptor population in cardiac fibroblasts. The author found that the PDE inhibitor Zaprinast alone has no effect in controlling cardiac fibroblast proliferation. Similarly, ANP alone did not control cardiac fibroblast proliferation. However, the combination of ANP and zaprinast caused a concentration-dependent inhibition of the thymidine incorporation reaction over a limited concentration range, which the author used as an indirect assay for DNA synthesis. These results could not be reproduced with the combination of C-ANF4-32 (NPR-C specific analog) and zaprinast. In fact, some other document has documented that zaprinast acts as a non-specific PDE inhibitor (see, eg, McMahon et al (doc 18) and Kukoretz et al (doc 3)). Argues that this is further questioned by the fact that Zaprinast is described as a specific PDE5 inhibitor. It is also known to be 5 times more powerful against PDE6 than PDE5.

Duncan et al (The FASEB Journal) は正常ラット腎臓の in vitro 検討を開示しており、その中で、結合組織成長因子（connective tissue growth factor）が腫瘍細胞増殖因子ベータ（ＴＧＦ−β）誘発繊維芽細胞コラーゲン合成を媒介すること、及び、ＣＴＧＦ合成又は作用の in vivo 遮断が、コラーゲン合成及び繊維芽細胞蓄積の両方を阻害することによってＴＧＦ−β誘発肉芽組織形成を減少させることが見出された。ｃＡＭＰもＣＴＧＦそれ自体により誘発されるコラーゲン合成を阻害したが、ｃＧＭＰは効果を有さないと報告された。この論文は、ＰＤＥ５はコラーゲン産生を阻害するという Redondo らによる仮説と矛盾する。従って、瘢痕化におけるｃＧＭＰの役割は、従来技術からは不明である。 Duncan et al (The FASEB Journal) discloses an in vitro study of normal rat kidney in which connective tissue growth factor is a tumor cell growth factor beta (TGF-β) -induced fibroblast. It has been found that mediating cellular collagen synthesis and in vivo blockade of CTGF synthesis or action reduces TGF-β-induced granulation tissue formation by inhibiting both collagen synthesis and fibroblast accumulation. . Although cAMP also inhibited collagen synthesis induced by CTGF itself, cGMP was reported to have no effect. This paper contradicts the hypothesis by Redondo et al. That PDE5 inhibits collagen production. Therefore, the role of cGMP in scarring is unknown from the prior art.

組織ホメオスタシスの破壊に続く創傷治癒の過程は、協調的に結び付く重複した段階のカスケードに関与し、このカスケードには：炎症、肉芽組織形成、細胞外マトリックス沈着及び集合、及びターメーション (termation) が含まれる。ペプチド因子が、その過程に種々の方式で関与し、血小板機能、白血球走化性、サイトカイン合成及び血管形成を制御し、並びに、繊維芽細胞表現形の進行をもたらし、究極的に未熟な瘢痕組織の形成を引き起こす。それらペプチド因子は、これら過程を、繊維芽細胞の増殖する能力、及び定量的及び定性的にそれらの細胞外マトリックス成分産生プロファイルを変化させる能力を調節することにより制御する。創傷治癒カスケードの開始に関与することが知られている主な調節性因子の１つはＴＧＦ−βである。 The process of wound healing following the destruction of tissue homeostasis involves a cascade of overlapping steps that are coordinated, including: inflammation, granulation tissue formation, extracellular matrix deposition and assembly, and termination. included. Peptide factors are involved in the process in various ways, controlling platelet function, leukocyte chemotaxis, cytokine synthesis and angiogenesis, and leading to the progression of fibroblast phenotype, ultimately immature scar tissue Cause the formation of. These peptide factors control these processes by regulating the ability of fibroblasts to proliferate and alter their extracellular matrix component production profile quantitatively and qualitatively. One of the main regulatory factors known to be involved in the initiation of the wound healing cascade is TGF-β.

その文献には、酸化窒素が創傷治癒の速度を改善するといういくつかの示唆がある。ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤が酸化窒素由来ｃＧＭＰの細胞内濃度を増加させ、それによって酸化窒素の効果を促進するということも知られている。これは、男性***不全症の治療におけるシルデナフィルの効力の原因である。
Redondo et al, British Journal of Pharmacology 1998,124, 1455-1462 ＥＰＯ９３００６９ The literature has several suggestions that nitric oxide improves the rate of wound healing. It is also known that cGMP PDE5 inhibitors increase the intracellular concentration of nitric oxide-derived cGMP, thereby promoting the effects of nitric oxide. This is responsible for the efficacy of sildenafil in the treatment of male erectile dysfunction.
Redondo et al, British Journal of Pharmacology 1998,124, 1455-1462 EPO930069

理論に拘束されることを望まないが、抗瘢痕化効果は創傷治癒サイクルの適切な段階における特異的ＰＤＥ５阻害に関連すると考えられる。これは、ＮＯ媒介平滑筋弛緩のような適切なシグナルと共に生じ得る。他の因子も関与し得る。 Without wishing to be bound by theory, it is believed that the anti-scarring effect is related to specific PDE5 inhibition at the appropriate stage of the wound healing cycle. This can occur with appropriate signals such as NO-mediated smooth muscle relaxation. Other factors may also be involved.

驚くべきことに、かくして我々は、治癒している創傷にＰＤＥ５阻害剤を投与することが瘢痕組織形成の発生の減少をもたらし得ることを見出した。
我々は、心臓組織の繊維症の in vivo 観測から、正常な心臓組織と比較して過剰にタンパク質ＰＤＥ５が発現していることを見出した。筋繊維芽細胞として知られる繊維芽細胞の亜集団においてＰＤＥ５が存在していることも確認した。従って、これら細胞における増大したＰＤＥ５発現は、組織繊維症をもたらす病理に関与し得る。全ての組織における繊維症をもたらすメカニズムは類似していると考えられており、従って、肝臓、腎臓、肺、脊髄、及び皮膚における繊維症の発生も同様に進行する。本発明によると、これら全ての（及び多くの他の）組織タイプの繊維状態はＰＤＥ５阻害により軽減されることができ、このようにして、有意な治療的恩恵をもたらし得る。 Surprisingly, we have thus found that administering a PDE5 inhibitor to a healing wound can result in a reduction in the occurrence of scar tissue formation.
We found from the in vivo observation of fibrosis of heart tissue that protein PDE5 is excessively expressed compared to normal heart tissue. We also confirmed the presence of PDE5 in a subpopulation of fibroblasts known as myofibroblasts. Thus, increased PDE5 expression in these cells may be involved in the pathology leading to tissue fibrosis. The mechanisms leading to fibrosis in all tissues are considered similar, and thus the occurrence of fibrosis in the liver, kidney, lung, spinal cord, and skin proceeds as well. According to the present invention, the fiber status of all these (and many other) tissue types can be alleviated by PDE5 inhibition and thus can provide significant therapeutic benefits.

（ザプリナストの検討においてRedondoらによって例示されているような）非選択的ＰＤＥ阻害や、ペントキシフィリン（弱く非選択的なＰＤＥ阻害剤）を用いたデータは、これら薬剤が抗繊維症剤として振舞い得ることを示唆したが、先行技術においては、瘢痕化を予防又は減少させるための治療が選択的ＰＤＥ５阻害を基礎とし得ることは認識されていない。実際、先行技術においては瘢痕形成におけるｃＧＭＰの役割（そして従ってＰＤＥ５の役割）に関して意見の争いがあるようである。 Non-selective PDE inhibition (as exemplified by Redondo et al. In the study of Zaprinast) and data using pentoxifylline (a weak non-selective PDE inhibitor) indicate that these drugs behave as antifibrotic agents. Although suggested, it is not recognized in the prior art that treatments to prevent or reduce scarring may be based on selective PDE5 inhibition. Indeed, there appears to be a dispute in the prior art regarding the role of cGMP (and thus the role of PDE5) in scar formation.

本発明の第一の側面によると、患者を有効な量のｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤又はその医薬組成物で処置することを含む、患者において瘢痕化を減少させるため及び／又は繊維症を治療するための方法が提供される。 According to a first aspect of the present invention for reducing scarring and / or treating fibrosis in a patient comprising treating the patient with an effective amount of a cGMP PDE5 inhibitor or pharmaceutical composition thereof. A method is provided.

本発明の第二の側面によると、瘢痕化を減少させるため及び／又は繊維症を治療するための医薬を製造するためのｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤の使用が提供される。
本発明の第三の側面によると、組織における瘢痕化を減少させるため及び／又は繊維症を治療するためのｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤の使用が提供される。 According to a second aspect of the present invention there is provided the use of a cGMP PDE5 inhibitor for the manufacture of a medicament for reducing scarring and / or treating fibrosis.
According to a third aspect of the present invention there is provided the use of a cGMP PDE5 inhibitor for reducing scarring in tissue and / or for treating fibrosis.

本発明の第四の側面によると、ＰＤＥ５阻害剤を含む医薬組成物、瘢痕化を減少させるため及び／又は繊維症を治療するためのその組成物の使用に関する指示書、及び容器を含む医薬パックが提供される。 According to a fourth aspect of the invention, a pharmaceutical composition comprising a PDE5 inhibitor, instructions for using the composition to reduce scarring and / or to treat fibrosis, and a pharmaceutical pack comprising a container Is provided.

上記側面の各々の態様において、本発明により治療され得る瘢痕化及び／又は繊維症に関連した疾患には：肺繊維症；アテローム性動脈硬化症；心血管疾患；感染、外傷、外科処置若しくは熱傷の後の皮膚及び角膜瘢痕化及び／又は繊維症；強皮症及び他の結合組織障害；心臓の繊維症；慢性閉塞性肺疾患；筋繊維症；腎繊維症；慢性皮膚潰瘍及び脂質皮膚硬化症；（あらゆる原因による）肺繊維症；外科処置後及び特発性の癒着；皮膚の炎症性状態（苔癬状態及びそれに関連する状態も含まれる）；老化及び全ての老化関連変性障害（皮膚の老化も含まれる）；あらゆる病因（ウイルス性及び非ウイルス性肝炎が含まれる）による肝繊維症；肝硬変；慢性膵炎；慢性甲状腺炎；（あらゆる原因による）石灰沈着症；その病原が結合マトリックスの沈着／リモデリングに関連する状態（ガンも含まれる）が含まれる。 In each embodiment of the above aspect, the scarring and / or fibrosis related diseases that can be treated according to the present invention include: pulmonary fibrosis; atherosclerosis; cardiovascular disease; infection, trauma, surgery or burns Skin and corneal scarring and / or fibrosis after; scleroderma and other connective tissue disorders; cardiac fibrosis; chronic obstructive pulmonary disease; myofibrosis; renal fibrosis; chronic skin ulcer and lipid sclerosis Pulmonary fibrosis (due to any cause); post-surgical and idiopathic adhesions; inflammatory conditions of the skin (including lichen conditions and related conditions); aging and all aging-related degenerative disorders (skin (Including aging); liver fibrosis of any etiology (including viral and non-viral hepatitis); cirrhosis; chronic pancreatitis; chronic thyroiditis; (caused by any cause) calcification; Scan condition associated with the deposition / remodeling of (cancer is also included) is included.

ｃＧＭＰＰＤＥ５イソ酵素に選択的に作用することにより組織における瘢痕化の発生を改善又は予防する治療薬剤は、現在は商業的に入手可能でない。
本発明の文脈において、ＰＤＥ５阻害剤とは、ｃＧＭＰＰＤＥ５イソ酵素の強力で選択的な阻害剤である、あらゆる化合物のことをいう。 Therapeutic agents that ameliorate or prevent the occurrence of scarring in tissues by selectively acting on the cGMP PDE5 isoenzyme are not currently commercially available.
In the context of the present invention, a PDE5 inhibitor refers to any compound that is a potent and selective inhibitor of cGMP PDE5 isoenzyme.

本発明の目的のためには、ＰＤＥ５阻害剤は、少なくとも２５倍、そして好ましくは少なくとも３０倍のＰＤＥ５阻害に有利な選択性を示すことが必要である。
本発明による薬学的組合せ剤の使用に適するＰＤＥ５阻害剤は、以下に詳述されるｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤である。本発明における使用のために特に好ましいものは、強力で選択的なｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤である。 For the purposes of the present invention, a PDE5 inhibitor needs to exhibit a selectivity that is advantageous for PDE5 inhibition of at least 25-fold, and preferably at least 30-fold.
Suitable PDE5 inhibitors for use in the pharmaceutical combination according to the invention are cGMP PDE5 inhibitors detailed below. Particularly preferred for use in the present invention are potent and selective cGMP PDE5 inhibitors.

本発明による使用に適するｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤には、以下のものが含まれる：
ＥＰ−Ａ−０４６３７５６中に開示されているピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン類；ＥＰ−Ａ−０５２６００４中に開示されているピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン類；公開された国際特許出願ＷＯ９３／０６１０４中に開示されているピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン類；公開された国際特許出願ＷＯ９３／０７１４９中に開示されている異性体であるピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン類；公開された国際特許出願ＷＯ９３／１２０９５中に開示されているキナゾリン−４−オン類；公開された国際特許出願ＷＯ９４／０５６６１中に開示されているピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン類；公開された国際特許出願ＷＯ９４／００４５３中に開示されているプリン−６−オン類；公開された国際特許出願ＷＯ９８／４９１６６中に開示されているピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン類；公開された国際特許出願ＷＯ９９／５４３３３中に開示されているピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン類；ＥＰ−Ａ−０９９５７５１中に開示されているピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン類；公開された国際特許出願ＷＯ００／２４７４５中に開示されているピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン類；ＥＰ−Ａ−０９９５７５０中に開示されているピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン類；公開された国際出願ＷＯ９５／１９９７８中に開示されている化合物；公開された国際出願ＷＯ９９／２４４３３中に開示されている化合物；及び公開された国際出願ＷＯ９３／０７１２４中に開示されている化合物、
公開された国際出願ＷＯ０１／２７１１２中に開示されているピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン類；公開された国際出願ＷＯ０１／２７１１３中に開示されているピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン類；ＥＰ−Ａ−１０９２７１８中に開示されている化合物、及びＥＰ−Ａ−１０９２７１９中に開示されている化合物。 Suitable cGMP PDE5 inhibitors for use according to the present invention include:
Pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-ones disclosed in EP-A-0463756; pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-ones disclosed in EP-A-0526004 Pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-ones disclosed in published international patent application WO 93/06104; isomers disclosed in published international patent application WO 93/07149 Certain pyrazolo [3,4-d] pyrimidin-4-ones; quinazolin-4-ones disclosed in published international patent application WO 93/12095; disclosed in published international patent application WO 94/05661 Pyrido [3,2-d] pyrimidin-4-ones; purin-6-ones disclosed in published international patent application WO 94/00453 Pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-ones disclosed in published international patent application WO 98/49166; pyrazolo [4,3 disclosed in published international patent application WO 99/54333 -D] pyrimidin-7-ones; pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-4-ones disclosed in EP-A-0995751; disclosed in published international patent application WO 00/24745. Pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-ones; pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-4-ones disclosed in EP-A-099750; published international application WO 95/19978 Compounds disclosed in; compounds disclosed in published international application WO 99/24433; and published international application WO 93/07124. Compounds disclosed in,
Pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-ones disclosed in published international application WO01 / 27112; pyrazolo [4,3-d disclosed in published international application WO01 / 27113 Pyrimidin-7-ones; compounds disclosed in EP-A-1092718 and compounds disclosed in EP-A-1092719.

本発明による使用のための好ましいタイプＶホスホジエステラーゼ阻害剤には、以下のものが含まれる：
１−［［３−（６，７−ジヒドロ−１−メチル−７−オキソ−３−プロピル−１Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−５−イル）−４−エトキシフェニル］スルホニル］−４−メチルピペラジンとしても知られる５−［２−エトキシ−５−（４−メチル−１−ピペラジニルスルホニル）フェニル］−１−メチル−３−ｎ−プロピル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（シルデナフィル）（ＥＰ−Ａ−０４６３７５６を参照のこと）；
５−（２−エトキシ−５−モルホリノアセチルフェニル）−１−メチル−３−ｎ−プロピル−１,６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＥＰ−Ａ−０５２６００４を参照のこと）；
３−エチル−５−［５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）−２−ｎ−プロポキシフェニル］−２−（ピリジン−２−イル）メチル−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ９８／４９１６６を参照のこと）；
３−エチル−５−［５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）−２−（２−メトキシエトキシ）ピリジン−３−イル］−２−（ピリジン−２−イル）メチル−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ９９／５４３３３を参照のこと）；
３−エチル−５−{５−［４−エチルピペラジン−１−イルスホニル］−２−（［（１Ｒ）−２−メトキシ−１−メチルエチル］オキシ）ピリジン−３−イル}−２−メチル−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オンとしても知られる（＋）−３−エチル−５−［５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）−２−（２−メトキシ−１（Ｒ）−メチルエトキシ）ピリジン−３−イル］−２−メチル−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ９９／５４３３３を参照のこと）；
１−｛６−エトキシ−５−［３−エチル−６，７−ジヒドロ−２−（２−メトキシエチル）−７−オキソ−２Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−５−イル］−３−ピリジルスルホニル｝−４−エチルピペラジンとしても知られる、５−［２−エトキシ−５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）ピリジン−３−イル］−３−エチル−２−［２−メトキシエチル］−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ０１／２７１１３、実施例８を参照のこと）；
５−［２−イソブトキシ−５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）ピリジン−３−イル］−３−エチル−２−（１−メチルピペリジン−４−イル）−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４,３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ０１／２７１１３、実施例１５を参照のこと）；
５−［２−エトキシ−５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）ピリジン−３−イル］−３−エチル−２−フェニル−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ０１／２７１１３、実施例６６を参照のこと）；
５−（５−アセチル−２−プロポキシ−３−ピリジニル）−３−エチル−２−（１−イソプロピル−３−アゼチジニル）−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ０１／２７１１２、実施例１２４を参照のこと）；
５−（５−アセチル−２−ブトキシ−３−ピリジニル）−３−エチル−２−（１−エチル−３−アゼチニル）−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（ＷＯ０１／２７１１２、実施例１３２を参照のこと）；
（６Ｒ，１２ａＲ）−２，３，６，７，１２，１２ａ−ヘキサヒドロ−２−メチル−６−（３，４−メチレンジオキシフェニル）−ピラジノ［２’，１’：６，１］ピリド［３，４−ｂ］インドール−１，４−ジオン（ＩＣ−３５１）、即ち、公開された国際出願ＷＯ９５／１９９７８の実施例７８及び９５の化合物、並びに実施例１、３、７、及び８の化合物；
１−［［３−（３，４−ジヒドロ−５−メチル−４−オキソ−７−プロピルイミダゾ［５，１−ｆ］−ａｓ−トリアジン−２−イル）−４−エトキシフェニル］スルホニル］−４−エチルピペラジンとしても知られる、２−［２−エトキシ−５−（４−エチル−ピペラジン−１−イル−１−スルホニル）フェニル］−５−メチル−７−プロピル−３Ｈ−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−オン（ヴァルデナフィル）、即ち、公開された国際出願ＷＯ９９／２４４３３の実施例２０、１９、３３７及び３３６の化合物；
公開された国際出願ＷＯ９３／０７１２４（エーザイ）の実施例１１の化合物；及び、
Rotella D P, J. Med. Chem., 2000, 43, 1257 からの化合物３及び１４。 Preferred type V phosphodiesterase inhibitors for use according to the present invention include:
1-[[3- (6,7-Dihydro-1-methyl-7-oxo-3-propyl-1H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-5-yl) -4-ethoxyphenyl] sulfonyl]- 5- [2-Ethoxy-5- (4-methyl-1-piperazinylsulfonyl) phenyl] -1-methyl-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H—also known as 4-methylpiperazine Pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-one (sildenafil) (see EP-A-0463756);
5- (2-Ethoxy-5-morpholinoacetylphenyl) -1-methyl-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-one (EP-A- 052604));
3-ethyl-5- [5- (4-ethylpiperazin-1-ylsulfonyl) -2-n-propoxyphenyl] -2- (pyridin-2-yl) methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo [ 4,3-d] pyrimidin-7-one (see WO 98/49166);
3-ethyl-5- [5- (4-ethylpiperazin-1-ylsulfonyl) -2- (2-methoxyethoxy) pyridin-3-yl] -2- (pyridin-2-yl) methyl-2,6 -Dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-one (see WO 99/54333);
3-ethyl-5- {5- [4-ethylpiperazin-1-ylsulfonyl] -2-([(1R) -2-methoxy-1-methylethyl] oxy) pyridin-3-yl} -2-methyl- (+)-3-ethyl-5- [5- (4-ethylpiperazin-1-ylsulfonyl)-, also known as 2,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-one 2- (2-Methoxy-1 (R) -methylethoxy) pyridin-3-yl] -2-methyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-one (WO99 / 54333);
1- {6-Ethoxy-5- [3-ethyl-6,7-dihydro-2- (2-methoxyethyl) -7-oxo-2H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-5-yl]- 5- [2-Ethoxy-5- (4-ethylpiperazin-1-ylsulfonyl) pyridin-3-yl] -3-ethyl-2- [2 also known as 3-pyridylsulfonyl} -4-ethylpiperazine -Methoxyethyl] -2,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-one (see WO 01/27113, Example 8);
5- [2-Isobutoxy-5- (4-ethylpiperazin-1-ylsulfonyl) pyridin-3-yl] -3-ethyl-2- (1-methylpiperidin-4-yl) -2,6-dihydro- 7H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-one (see WO 01/27113, Example 15);
5- [2-Ethoxy-5- (4-ethylpiperazin-1-ylsulfonyl) pyridin-3-yl] -3-ethyl-2-phenyl-2,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d ] Pyrimidin-7-one (see WO 01/27113, Example 66);
5- (5-acetyl-2-propoxy-3-pyridinyl) -3-ethyl-2- (1-isopropyl-3-azetidinyl) -2,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidine- 7-one (see WO01 / 27112, Example 124);
5- (5-acetyl-2-butoxy-3-pyridinyl) -3-ethyl-2- (1-ethyl-3-azetinyl) -2,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidine- 7-one (see WO01 / 27112, Example 132);
(6R, 12aR) -2,3,6,7,12,12a-Hexahydro-2-methyl-6- (3,4-methylenedioxyphenyl) -pyrazino [2 ′, 1 ′: 6,1] pyrido [3,4-b] indole-1,4-dione (IC-351), ie the compounds of Examples 78 and 95 of published international application WO 95/19978, and Examples 1, 3, 7, and 8 A compound of
1-[[3- (3,4-Dihydro-5-methyl-4-oxo-7-propylimidazo [5,1-f] -as-triazin-2-yl) -4-ethoxyphenyl] sulfonyl]- 2- [2-Ethoxy-5- (4-ethyl-piperazin-1-yl-1-sulfonyl) phenyl] -5-methyl-7-propyl-3H-imidazo [5, also known as 4-ethylpiperazine 1-f] [1,2,4] triazin-4-one (valdenafil), ie, the compounds of Examples 20, 19, 337 and 336 of published international application WO 99/24433;
The compound of Example 11 of published international application WO 93/07124 (Eisai); and
Compounds 3 and 14 from Rotella DP, J. Med. Chem., 2000, 43, 1257.

本発明に関連して有用な更に他のタイプのｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤には以下のものが含まれる：４−ブロモ−５−（ピリジルメチルアミノ）−６−［３−（４−クロロフェニル）プロポキシ］−３（２Ｈ）ピリダジノン；１−［４−［（１，３−ベンゾジオキソール−５−イルメチル）アミノ］−６−クロロ−２−キナゾリニル］−４−ピペリジンカルボン酸・モノナトリウム塩；（＋）−シス−５，６ａ，７，９，９，９ａ−ヘキサヒドロ−２−［４−（トリフルオロメチル）フェニルメチル−５−メチル−シクロペンタ−４，５］イミダゾ［２，１−ｂ］プリン−４（３Ｈ）オン；フラズロシリン；シス−２−へキシル−５−メチル−３，４，５，６ａ，７，８，９，９ａ−オクタヒドロシクロペンタ［４，５］−イミダゾ［２，１−ｂ］プリン−４−オン；３−アセチル−１−（２−クロロベンジル）−２−プロピルインドール−６−カルボキシレート；３−アセチル−１−（２−クロロベンジル）−２−プロピルインドール−６−カルボキシレート；４−ブロモ−５−（３−ピリジルメチルアミノ）−６−（３−（４−クロロフェニル）プロポキシ）−３−（２Ｈ）ピリダジノン；１−メチル−５（５−モルホリノアセチル−２−ｎ−プロポキシフェニル）−３−ｎ−プロピル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン；１−［４−［（１，３−ベンゾジオキソール−５−イルメチル）アミノ］−６−クロロ−２−キナゾリニル］−４−ピペリジンカルボン酸・モノナトリウム塩；Pharmaprojects No. 4516（グラクソ・ウェルカム）；Pharmaprojects No. 5051（バイエル）；Pharmaprojects No. 5064（協和発酵；ＷＯ９６／２６９４０参照のこと）；Pharmaprojects No. 5069（シェーリング・プラウ）；ＧＦ−１９６９６０（グラクソ・ウェルカム）；Ｅ−８０１０及びＥ−４０１０（エーザイ）；Ｂａｙ−３８−３０４５及び３８−９４５６（バイエル）、及びＳｃｈ−５１８６６。 Still other types of cGMP PDE5 inhibitors useful in connection with the present invention include: 4-bromo-5- (pyridylmethylamino) -6- [3- (4-chlorophenyl) propoxy] -3 (2H) pyridazinone; 1- [4-[(1,3-benzodioxol-5-ylmethyl) amino] -6-chloro-2-quinazolinyl] -4-piperidinecarboxylic acid monosodium salt; +)-Cis-5,6a, 7,9,9,9a-hexahydro-2- [4- (trifluoromethyl) phenylmethyl-5-methyl-cyclopenta-4,5] imidazo [2,1-b] Purine-4 (3H) one; furazolocillin; cis-2-hexyl-5-methyl-3,4,5,6a, 7,8,9,9a-octahydrocyclopenta [4,5] -imidazo [2 , 1- ] Purin-4-one; 3-acetyl-1- (2-chlorobenzyl) -2-propylindole-6-carboxylate; 3-acetyl-1- (2-chlorobenzyl) -2-propylindole-6- Carboxylate; 4-bromo-5- (3-pyridylmethylamino) -6- (3- (4-chlorophenyl) propoxy) -3- (2H) pyridazinone; 1-methyl-5 (5-morpholinoacetyl-2- n-propoxyphenyl) -3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-one; 1- [4-[(1,3-benzodioxole- 5-ylmethyl) amino] -6-chloro-2-quinazolinyl] -4-piperidinecarboxylic acid monosodium salt; Pharmaprojects No. 4516 (Glaxo Wellcome); Pharmaprojects N o. 5051 (Bayer); Pharmaprojects No. 5064 (Kyowa Hakko; see WO 96/26940); Pharmaprojects No. 5069 (Schering Plow); GF-196960 (Glaxo Welcome); E-8010 and E-4010 ( Eisai); Bay-38-3045 and 38-9456 (Bayer), and Sch-51866.

疑いを回避するため記載するが、引用され具体的に上記された公開特許明細書中に詳細に記載された上記のＰＤＥ５阻害性化合物は本開示の一部を具体的に形成し、本出願の発明の主題の一部を表す。 Although described for the avoidance of doubt, the above-mentioned PDE5 inhibitory compounds cited and specifically described in the above-mentioned published patent specifications specifically form part of this disclosure and are incorporated herein by reference. Represents part of the subject matter of the invention.

いずれの特定のｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤の適切性も、文献の方法を用いてその効力と選択性を評価した後に、標準的薬学プラクティスに従ってその毒性、吸収、代謝、薬物動力学等を評価することによって容易に決定され得る。 The suitability of any particular cGMP PDE5 inhibitor can be determined by assessing its toxicity, absorption, metabolism, pharmacokinetics, etc. according to standard pharmaceutical practice after assessing its potency and selectivity using literature methods. It can be easily determined.

好ましくは、ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、ＰＤＥ５に対する１００ｎＭ未満、より好ましくは５０ｎＭ未満、更により好ましくは１０ｎＭ未満のＩＣ５０値を有する。
ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤についてのＩＣ５０値は、確立された文献の方法論を用いて、例えば、ＥＰ０４６３７５６−Ｂ１及びＥＰ０５２６００４−Ａ１に記載された様に測定され得る。 Preferably, the cGMP PDE5 inhibitor has an IC50 value for PDE5 of less than 100 nM, more preferably less than 50 nM, even more preferably less than 10 nM.
IC50 values for cGMP PDE5 inhibitors can be measured using established literature methodologies, for example, as described in EP0463756-B1 and EP0526004-A1.

好ましくは、本発明において用いられるｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、ＰＤＥ５酵素について選択的である。好ましくは、それらは、ＰＤＥ３よりも選択的であり、より好ましくは、ＰＤＥ３及びＰＤＥ４よりも選択的である。好ましくは、本発明のｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、ＰＤＥ３よりも、より好ましくはＰＤＥ３及びＰＤＥ４よりもＰＤＥ５に対して、２５より大きい、より好ましくは３０より大きい、そして更により好ましくは１００より大きい選択性比を有する。最も良好な阻害剤は、ＰＤＥ３よりも、より好ましくはＰＤＥ３及びＰＤＥ４よりもＰＤＥ５に対して、好ましくは３００倍よりも大きい選択性を示す。 Preferably, the cGMP PDE5 inhibitor used in the present invention is selective for the PDE5 enzyme. Preferably they are selective over PDE3, more preferably selective over PDE3 and PDE4. Preferably, the cGMP PDE5 inhibitor of the present invention has a selectivity over PDE3, more preferably over PDE3 and PDE5 over PDE3, more preferably over 30 and even more preferably over 100. Have a ratio. The best inhibitors show a selectivity, preferably greater than 300 times over PDE3 over PDE3, more preferably over PDE3 and PDE4.

選択性比は、当業者により容易に測定され得る。ＰＤＥ３及びＰＤＥ４酵素についてのＩＣ５０値は、確立された文献の方法論を用いて測定され得る。S A Ballard et al., Journal of Urology, 1998, vol. 159, p. 2164-2171 を参照のこと。 The selectivity ratio can be easily measured by one skilled in the art. IC50 values for PDE3 and PDE4 enzymes can be measured using established literature methodologies. See S A Ballard et al., Journal of Urology, 1998, vol. 159, p. 2164-2171.

治療として有効となるために、本発明の化合物は、好ましくは、経口で生物学的に利用可能なものである。経口生物学的利用能とは、経口投与された薬物が体循環に到達する割合のことをいう。薬物の経口生物学的利用能を決定する因子は、溶解性、膜透過性及び代謝安定性である。典型的には、先ず in vitro 手法により、次いで in vivo 手法によるスクリーニングカスケードが用いられて、経口生物学的利用能が決定される。 In order to be effective as a treatment, the compounds of the present invention are preferably those that are orally bioavailable. Oral bioavailability refers to the rate at which an orally administered drug reaches the systemic circulation. Factors that determine the oral bioavailability of a drug are solubility, membrane permeability and metabolic stability. Typically, an oral bioavailability is determined using a screening cascade, first by in vitro techniques and then by in vivo techniques.

溶解性、即ち、胃腸管（ＧＩＴ）の水性内容物による薬物の可溶化は、ＧＩＴを擬似するのに適切なｐＨで行われる in vitro 溶解度実験によって予測されうる。好ましくは、本発明の化合物は、５０ｍｃｇ／ｍＬの最小溶解度を有する。溶解度は、Adv. Drug Deliv. Rev. 23, 3-25, 1997 中に記載されているような、当該技術分野において公知の標準的手順によって測定されうる。 Solubility, ie, solubilization of the drug by the aqueous contents of the gastrointestinal tract (GIT), can be predicted by in vitro solubility experiments performed at an appropriate pH to mimic GIT. Preferably, the compounds of the present invention have a minimum solubility of 50 mcg / mL. Solubility can be measured by standard procedures known in the art, as described in Adv. Drug Deliv. Rev. 23, 3-25, 1997.

膜透過性とは、ＧＩＴの細胞を通る化合物の通過性のことをいう。親油性は、これを予測するのに鍵となる特性であり、有機溶媒と緩衝液を用いる in vitro ＬｏｇＤ_７．４測定によって規定される。好ましくは、本発明の化合物は、−２〜＋４、より好ましくは、−１〜＋２のＬｏｇＤ_７．４を有する。ＬｏｇＤは、J. Pharm. Pharmacol. 1990, 42:144 中に記載されているような、当該技術分野において公知の標準的手順によって測定されうる。 Membrane permeability refers to the permeability of a compound through GIT cells. Lipophilicity is a key property to predict this and is defined by in vitro LogD _7.4 measurements using organic solvents and buffers. Preferably, the compounds of the invention have a LogD _7.4 of -2 to +4, more preferably -1 to +2. LogD can be measured by standard procedures known in the art, as described in J. Pharm. Pharmacol. 1990, 42: 144.

ｃａｃｏ−２のような細胞単層アッセイは、ｐ−グリコプロテインのような外向きフラックストランスポーターの存在下における好ましい膜透過性の予測を実質的に与える。いわゆるｃａｃｏ−２フラックスである。好ましくは、本発明の化合物は、２×１０^−６ｃｍｓ^−１、より好ましくは、５×１０^−６ｃｍｓ^−１より大きいｃａｃｏ−２フラックスを有する。ｃａｃｏフラックス値は、J Pharm. Sci, 1990, 79, 595-600 中に記載されているような、当該技術分野において公知の標準的手順によって測定され得る。 Cell monolayer assays such as caco-2 substantially provide a predictive membrane permeation in the presence of an outward flux transporter such as p-glycoprotein. This is so-called caco-2 flux. Preferably, the compounds of the invention have a caco-2 flux greater than 2 × 10 ⁻⁶ cms ⁻¹ , more preferably greater than 5 × 10 ⁻⁶ cms ⁻¹ . Caco flux values can be measured by standard procedures known in the art, as described in J Pharm. Sci, 1990, 79, 595-600.

代謝安定性は、吸収過程の間にＧＩＴ又は肝臓が化合物を代謝する能力、つまり初回通過効果を取り扱うものである。ミクロソーム、肝細胞等のようなアッセイ系は、代謝傾向を予測させる。好ましくは、実施例の化合物は、そのアッセイ系において０．５未満の肝抽出率と釣り合う代謝安定性を示す。アッセイ系の例及びデータ操作の例が、Curr. Opin. Drug Disc. Devel., 201, 4, 36-44, Drug Met. Disp., 2000, 28, 1518-1523 中に記載されている。 Metabolic stability deals with the ability of the GIT or liver to metabolize compounds during the absorption process, ie the first pass effect. Assay systems such as microsomes, hepatocytes and the like predict metabolic trends. Preferably, the example compounds exhibit metabolic stability commensurate with a liver extraction rate of less than 0.5 in the assay system. Examples of assay systems and examples of data manipulation are described in Curr. Opin. Drug Disc. Devel., 201, 4, 36-44, Drug Met. Disp., 2000, 28, 1518-1523.

上記過程の相互作用性の故に、ある薬剤がヒトにおいて経口で生物学的に利用可能であろうという更なる裏付けは、動物における in vivo 実験によって得られうる。絶対的生物学的利用能は、これら化合物を経口ルートによって別々に又は混合物で投与することによるこれら検討において測定される。絶対的測定（吸収されたものの％）のために、静脈ルートも用いられる。動物における経口生物学的利用能の評価の例は、Drug Met. Disp., 2001, 29, 82-87; J. Med Chem, 1997, 40, 827-879；Drug Met. Disp., 1999, 27, 221-226 中に見出され得る。 Because of the interactivity of the above process, further support that certain drugs will be orally bioavailable in humans can be obtained by in vivo experiments in animals. Absolute bioavailability is measured in these studies by administering these compounds separately by oral route or in a mixture. The venous route is also used for absolute measurements (% of absorbed). Examples of assessment of oral bioavailability in animals are Drug Met. Disp., 2001, 29, 82-87; J. Med Chem, 1997, 40, 827-879; Drug Met. Disp., 1999, 27 , 221-226.

好ましくは、ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤はシルデナフィルである。
ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は単独で投与することもできるが、ヒト治療においては、一般に、意図される投与経路や標準的薬学プラクティスに関して適切に選択された薬学的賦形剤、希釈剤又は担体との混合物で投与される。 Preferably, the cGMP PDE5 inhibitor is sildenafil.
Although cGMP PDE5 inhibitors can be administered alone, in human therapy, generally a mixture with a pharmaceutical excipient, diluent or carrier appropriately selected for the intended route of administration and standard pharmaceutical practice Is administered.

例えば、ＰＤＥ５阻害剤は、即時、遅延、修飾、又は制御放出の用途のための錠剤、カプセル剤、オビュール剤 (ovules)、エリキシル剤、溶液剤、又は懸濁液剤の形態で、経口、バッカル又は舌下で投与されてもよく、それらには、着香料又は着色剤が含有されてもよい。 For example, PDE5 inhibitors can be used in the form of tablets, capsules, ovules, elixirs, solutions or suspensions for immediate, delayed, modified or controlled release applications, oral, buccal or They may be administered sublingually and may contain flavoring or coloring agents.

そのような錠剤には、微結晶性セルロース、ラクト−ス、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸一水素カルシウム及びグリシンのような賦形剤、デンプン（好ましくはトウモロコシ、バレイショ、又はタピオカデンプン）、スターチグリコール酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム及び一定の複合シリケートのような崩壊剤、及び、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ショ糖、ゼラチン、及びアラビアガムのような顆粒結合剤が含有されてもよい。更に、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ベヘン酸グリセリル及びタルクのような滑沢剤が包含されてもよい。 Such tablets include excipients such as microcrystalline cellulose, lactose, sodium citrate, calcium carbonate, calcium monohydrogen phosphate and glycine, starch (preferably corn, potato, or tapioca starch), Contains disintegrants such as sodium starch glycolate, croscarmellose sodium and certain complex silicates, and granule binders such as polyvinylpyrrolidone, hydroxypropylmethylcellulose, hydroxypropylcellulose, sucrose, gelatin, and gum arabic May be. In addition, lubricants such as magnesium stearate, stearic acid, glyceryl behenate and talc may be included.

類似のタイプの固体組成物が、ゼラチンカプセルの充填剤としても使用され得る。これに関する好ましい賦形剤には、ラクトース、デンプン、セルロース、乳糖又は高分子量ポリエチレングリコール類が含まれる。水性懸濁液剤及び／又はエリキシル剤のためには、本発明のｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、種々の甘味料又は着香料、着色剤又は染料；乳化剤及び／又は懸濁剤；及び、水、エタノール、プロピレングリコール及びグリセリンのような希釈剤；及びその組み合わせと混合されてもよい。 Similar types of solid compositions can also be used as fillers for gelatin capsules. Preferred excipients in this regard include lactose, starch, cellulose, lactose or high molecular weight polyethylene glycols. For aqueous suspensions and / or elixirs, the cGMP PDE5 inhibitors of the present invention include various sweeteners or flavors, colorants or dyes; emulsifiers and / or suspending agents; and water, ethanol, Diluents such as propylene glycol and glycerin; and combinations thereof may be mixed.

ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、非経口で、例えば、静脈内、動脈内、腹腔内、筋肉内若しくは皮下で投与されても、注入手法によって投与されてもよい。そのような非経口投与のためには、それらは滅菌水溶液の形態で最も良好に使用され、それには、他の物質、例えば、その溶液を血液と等張にするのに十分な塩又はグルコースが含有されてもよい。その水溶液は、必要であれば、適切に（好ましくは３〜９のｐＨに）緩衝化されるべきである。滅菌条件下での適する非経口製剤の調製は、当業者にとって周知の標準的薬学的手法によって容易に達成される。 The cGMP PDE5 inhibitor may be administered parenterally, for example, intravenously, intraarterially, intraperitoneally, intramuscularly or subcutaneously, or by infusion techniques. For such parenteral administration, they are best used in the form of a sterile aqueous solution, which contains other substances, for example, enough salts or glucose to make the solution isotonic with blood. It may be contained. The aqueous solution should be buffered appropriately (preferably to a pH of 3-9) if necessary. Preparation of suitable parenteral formulations under sterile conditions is readily accomplished by standard pharmaceutical techniques well known to those skilled in the art.

本明細書における次の投与量レベル及び他の投与量レベルは、約６５〜７０ｋｇの体重を有する平均的なヒト対象のためのものである。当業者は、子供や老人のようにその体重がこの範囲外になる対象について、必要とされる投与量レベルを容易に決定できるであろう。 The following dosage levels and other dosage levels herein are for an average human subject having a body weight of about 65-70 kg. One of ordinary skill in the art will be able to readily determine the required dosage level for subjects whose weight falls outside this range, such as children and the elderly.

そのような製剤中のｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤の投与量はその効力に依存するが、１日３回までの投与について１〜５００ｍｇの範囲内であると予測され得る。ヒト患者への経口及び非経口投与のためには、ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤の１日あたりの投与量レベルは、通常５〜５００ｍｇ（単回又は分割投与で）である。シルデナフィルの場合、好ましい投与量は、１日１回、２回又は３回（好ましくは１回）で投与されうる１０〜１００ｍｇ（例えば、１０、２５、５０及び１００ｍｇ）の範囲内である。しかしながら、正確な投与量は処方する医師によって決定されるものであり、そして患者の年齢及び体重、及び症状の重さに依存する。 The dosage of cGMP PDE5 inhibitor in such formulations depends on its potency, but can be expected to be in the range of 1-500 mg for up to 3 doses per day. For oral and parenteral administration to human patients, the daily dosage level of cGMP PDE5 inhibitor is usually 5 to 500 mg (in single or divided doses). In the case of sildenafil, the preferred dosage is in the range of 10-100 mg (eg, 10, 25, 50 and 100 mg) which can be administered once, twice or three times (preferably once) per day. However, the exact dosage will be determined by the prescribing physician and will depend on the age and weight of the patient and the severity of the symptoms.

従って、例えば、ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤の錠剤又はカプセル剤は、一度に１錠若しくは又は２錠以上で適宜投与するために、５ｍｇ〜２５０ｍｇ（例えば、１０〜１００ｍｇ）の活性化合物を含有しうる。医師は、いずれにしても、どの個々の患者に対しても最も適する実際の投与量を決定することになり、それは、特定の患者の年齢、体重及び反応によって変動する。上記投与量は、平均的ケースの例示である。もちろん、より高い投与量又はより低い投与量の範囲が相応である個別の例もありえ、そのようなものは本発明の範囲内である。 Thus, for example, a tablet or capsule of a cGMP PDE5 inhibitor may contain 5 mg to 250 mg (eg, 10 to 100 mg) of active compound for appropriate administration in one or more tablets at a time. The physician will, in any event, determine the actual dosage that is most appropriate for any individual patient, which will vary with the age, weight and response of the particular patient. The above dosage is an illustration of an average case. There can, of course, be individual instances where higher or lower dosage ranges are merited, and such are within the scope of this invention.

ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、鼻腔内に投与されても吸入によって投与されてもよく、そして、適する噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン；トリクロロフルオロメタン；ジクロロテトラフルオロエタン；１，１，１，２−テトラフルオロエタン又は１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパンのようなハイドロフルオロアルカン；二酸化炭素又は他の適するガスを使用して、加圧容器、ポンプ、スプレー、又はネブライザーから与えられるドライパウダー吸入体又はエアロゾルスプレーの形態で都合よく送り込まれる。加圧エアロゾルの場合、投与量単位は、計量された量を送り込むためのバルブを提供することによって決定されうる。加圧容器、ポンプ、スプレー又はネブライザーには、例えばエタノールと噴射剤の混合物を溶媒として使用するｃＧＭＰＰＤＥ阻害剤の溶液剤又は懸濁液剤が含有されてもよく、それには、更に滑沢剤、例えばソルビタントリオレートが含有されてもよい。吸入器又は注入器中で使用するためのカプセル及びカートリッジ（例えばゼラチンから作られる）は、ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤と、ラクトース又はデンプンのような適する粉末ベースとのパウダーミックスを含有するように製剤され得る。 cGMP PDE5 inhibitors may be administered intranasally or by inhalation and are suitable propellants such as dichlorodifluoromethane; trichlorofluoromethane; dichlorotetrafluoroethane; 1,1,1,2- Hydrofluoroalkanes such as tetrafluoroethane or 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropane; pressurized containers, pumps, sprays, or nebulizers using carbon dioxide or other suitable gas Conveniently delivered in the form of a dry powder inhaler or aerosol spray given by In the case of a pressurized aerosol, the dosage unit may be determined by providing a valve to deliver a metered amount. The pressurized container, pump, spray or nebulizer may contain a solution or suspension of a cGMP PDE inhibitor that uses, for example, a mixture of ethanol and propellant as a solvent, including a lubricant, For example, sorbitan trioleate may be contained. Capsules and cartridges (eg made from gelatin) for use in an inhaler or infuser can be formulated to contain a powder mix of a cGMP PDE5 inhibitor and a suitable powder base such as lactose or starch. .

エアロゾル又はドライパウダー製剤は、好ましくは、各々の計量された投与量若しくは“一吹きの量”が、患者へ送り込むための１〜５０ｍｇのｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤を含有するようにしつらえられる。エアロゾルでの一日投与の全量は１〜５０ｍｇの範囲内であり、その日全体を通じて１回で投与されても、より普通には分割で投与されてもよい。 Aerosol or dry powder formulations are preferably tailored so that each metered dose or “puff” contains 1-50 mg of cGMP PDE5 inhibitor for delivery to the patient. The total daily dose with an aerosol is in the range of 1-50 mg and may be administered once throughout the day or more usually in divided doses.

また、ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、坐剤又はペッサリーの形態で投与されても良い。
ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、ゲル剤、ヒドロゲル剤、ローション剤、溶液剤、クリーム剤、軟膏剤又はダスティングパウダー剤の形態で局所に適用されてもよい。ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、例えば、スキンパッチを使用することによって、皮膚に又は経皮的に投与されてもよい。 The cGMP PDE5 inhibitor may also be administered in the form of a suppository or pessary.
The cGMP PDE5 inhibitor may be applied topically in the form of a gel, hydrogel, lotion, solution, cream, ointment or dusting powder. The cGMP PDE5 inhibitor may be administered to the skin or transdermally, for example, by using a skin patch.

皮膚への局所適用のために、ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、例えば、１以上の鉱油、流動ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックス及び水を有する混合物中に懸濁又は溶解された当該阻害剤を含有する適する軟膏剤として製剤されてもよい。また、それらは、例えば、１以上の鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリエチレングリコール、流動パラフィン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール及び水の混合物中に懸濁又は溶解された適するローション剤又はクリーム剤として製剤されてもよい。 For topical application to the skin, the cGMP PDE5 inhibitor is suspended in a mixture having, for example, one or more mineral oils, liquid petrolatum, white petrolatum, propylene glycol, polyoxyethylene polyoxypropylene compound, emulsifying wax and water. Or it may be formulated as a suitable ointment containing the dissolved inhibitor. They are also suspended, for example, in a mixture of one or more mineral oils, sorbitan monostearate, polyethylene glycol, liquid paraffin, polysorbate 60, cetyl ester wax, cetearyl alcohol, 2-octyldodecanol, benzyl alcohol and water. Alternatively, it may be formulated as a suitable dissolved lotion or cream.

ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、シクロデキストリンと組み合わせて使用されてもよい。シクロデキストリン類は、薬物分子と包摂複合体又は非包摂複合体を形成することが知られている。薬物−シクロデキストリン複合体の形成は、薬物分子の溶解性、溶解速度、生物学的利用能及び／又は安定性特性を修飾し得る。薬物−シクロデキストリン複合体は、一般に殆どの投与形態及び投与ルートに有用である。薬物との直接的複合体形成の別のやり方として、シクロデキストリンが、補助的添加剤、例えば、担体、希釈剤又は可溶化剤として使用されてもよい。α−、β−、及びγ−シクロデキストリンが最も普通に使用され、適する例は、ＷＯ−Ａ−９１／１１１７２、ＷＯ−Ａ−９４／０２５１８及びＷＯ−Ａ−９８／５５１４８中に記載されている。 cGMP PDE5 inhibitors may be used in combination with cyclodextrins. Cyclodextrins are known to form inclusion or non-inclusion complexes with drug molecules. Formation of the drug-cyclodextrin complex may modify the solubility, dissolution rate, bioavailability and / or stability properties of the drug molecule. Drug-cyclodextrin complexes are generally useful for most dosage forms and administration routes. As another way of direct complexation with the drug, cyclodextrins may be used as auxiliary additives such as carriers, diluents or solubilizers. α-, β-, and γ-cyclodextrins are most commonly used and suitable examples are described in WO-A-91 / 11172, WO-A-94 / 02518 and WO-A-98 / 55148. Yes.

一般に、ヒトにおいては、ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤の経口投与は好ましいルートであり、最も便利である。受容者が嚥下障害又は経口投与後薬物吸収の障害を患う状況の下では、本薬剤は、非経口、舌下又はバッカルで投与されてもよい。 In general, oral administration of cGMP PDE5 inhibitors is the preferred route and is most convenient in humans. Under circumstances where the recipient suffers from dysphagia or impaired drug absorption after oral administration, the drug may be administered parenterally, sublingually or in buccal.

本発明のｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤は、１以上の次のものと組み合わせて投与されてもよい：
i）α−アドレノセプター、α−レセプター又はα−ブロッカーとしても知られるα−アドレナリン作動性レセプターアンタゴニスト化合物。本発明における使用のために適する化合物には、次のものが含まれる：１９９８年６月１４日に公開され、そのα−アドレナリン作動性レセプターに関する開示が参照により本明細書に組み込まれるＰＣＴ出願ＷＯ９９／３０６９７に記載されており、選択的α_１−アドレノセプター又はα_２−アドレノセプター及び非選択的アドレノセプターを包含する、α−アドレナリン作動性レセプター（適するα_１−アドレノセプターには、フェントラミン、フェントラミンメシレート、トラゾドン、アルフゾシン、インドラミン、ナフトピジル、タムスロシン、ダピプラゾール (dapiprazole)、フェノキシベンザミン、イダゾキサン (idazoxan)、エファラキサン(efaraxan)、ヨヒンビン、ラウオルフィア・アルカロイド、Ｒｅｃｏｒｄａｔｉ１５／２７３９、ＳＮＡＰ１０６９、ＳＮＡＰ５０８９、ＲＳ１７０５３、ＳＬ８９．０５９１、ドキサゾシン、テラゾシン、アバノキル (abanoquil)及びプラゾシンが含まれる）；米国６，０３７，３４６［２０００年３月１４日］からのα_２−ブロッカー、ジベナミン、トラゾリン、トリマゾシン (trimazosin) 及びジベナミン；その各々が参照により本明細書に取り込まれる米国特許４，１８８，３９０号、４，０２６，８９４号、３，５１１，８３６号、４，３１５，００７号、３，５２７，７６１号、３，９９７，６６６号、２，５０３，０５９号、４，７０３，０６３号、３，３８１，００９号、４，２５２，７２１号及び２，５９９，０００号に記載されたα−アドレナリン作動性レセプター；α_２−アドレノセプターには、場合によりピルキサミン (pirxamine) のような強心剤（cariotonic）の存在下での、クロニジン、パパベリン、パパベリン塩酸塩が含まれる；
ii）ＮＯ供与体（ＮＯアゴニスト）化合物。本発明における使用のための適するＮＯ供与体化合物には、モノ−、ジ−若しくはトリ−ニトレートのような有機ニトレート類若しくは有機硝酸エステル類が含まれ、それらには、三硝酸グリセリン（ニトログリセリンとしても知られている）、イソソルビド・５−モノニトレート、イソソルビド・ジニトレート、ペンタエリトリトール・テトラニトレート、四硝酸エリトリチル、ニトロプルシドナトリウム（ＳＮＰ）、３−モルホリノシドノニミン (3-morpholinosydnonimine)モルシドミン、Ｓ−ニトロソ−Ｎ−アセチルペニシラミン（ＳＮＡＰ）、Ｓ−ニトロソ−Ｎ−グルタチオン（ＳＮＯ−ＧＬＵ）、Ｎ−ヒドロキシ−Ｌ−アルギニン、硝酸アミル、リンシドミン (linsidomine)、リンシドミンクロロハイドレート、（ＳＩＮ−１）、Ｓ−ニトロソ−Ｎ−システイン、ジアゼニウムジオレート類 (diazenium diolates)、（ＮＯＮＯエート）、１，５−ペンタンジニトレート、Ｌ−アルギネン（L-arginene）、薬用ニンジン、タイソウ、モルシドミン、Ｒｅ−２０４７、公開されたＰＣＴ出願ＷＯ００１２０７５中に記載されたＮＭＩ−６７８−１１及びＮＭＩ−９３７のようなニトロシル化モキシシリート誘導体が含まれる；
iii）血管拡張薬剤。本発明における使用のための適する血管拡張薬剤には、ニモデピン (nimodepine)、ピナシジル、シクランデレート、イソクスプリン、クロロプルマジン、ハロペリドール、Ｒｅｃ１５／２７３９、トラゾドン、ペントキシフィリンが含まれる；
iv）トロンボキサンＡ２アゴニスト；
v）Ｌ−アルギニンのようなＮＯ−合成酵素の基質；
vi）アムロジピンのようなカルシウムチャンネル遮断薬；
vii）ステロイド性又は非ステロイド性抗炎症薬剤；
viii）マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）阻害剤、特にＭＭＰ−３、ＭＭＰ−１２及びＭＭＰ−１３阻害剤；
ix）ウロキナーゼタイププラスミノーゲンアクチベーター（ｕＰＡ）阻害剤；
x）ＰＣＰ阻害剤；及び
xi）ＰＤＥ４阻害剤。 The cGMP PDE5 inhibitors of the present invention may be administered in combination with one or more of the following:
i) α-adrenergic receptor antagonist compounds, also known as α-adrenoceptors, α-receptors or α-blockers. Compounds suitable for use in the present invention include: PCT application WO99 published on June 14, 1998, the disclosure of which is incorporated herein by reference for its α-adrenergic receptor. Α-adrenergic receptors (including suitable α ₁ -adrenoceptors, including selective α ₁ -adrenoceptors or α ₂ -adrenoceptors and non-selective adrenoceptors described in US Pat. , Phentolamine, phentolamine mesylate, trazodone, alfuzosin, indolamine, naphthopidyl, tamsulosin, dapiprazole, phenoxybenzamine, idazoxan, efaraxan, yohimbine, laurophia alkaloid, Recordati 15/27 NAP1069, SNAP5089, RS17053, SL89.0591, doxazosin, terazosin, include Abanokiru (abanoquil) and prazosin); US 6,037,346 from the [March 14, 2000] α ₂ - blocker, dibenamine, tolazoline, Trimazosin and dibenamine; U.S. Pat. Nos. 4,188,390, 4,026,894, 3,511,836, 4,315,007, 3, each of which is incorporated herein by reference. 527,761, 3,997,666, 2,503,059, 4,703,063, 3,381,009, 4,252,721 and 2,599,000 α-adrenergic receptors; α ₂ -adrenoceptors may optionally include pirxamine (pir clonidine, papaverine, papaverine hydrochloride in the presence of cariotonic such as xamine);
ii) NO donor (NO agonist) compounds. Suitable NO donor compounds for use in the present invention include organic nitrates or organic nitrates such as mono-, di- or tri-nitrates, which include glyceryl trinitrate (as nitroglycerin). Isosorbide 5-mononitrate, isosorbide dinitrate, pentaerythritol tetranitrate, erythrityl tetranitrate, sodium nitroprusside (SNP), 3-morpholinosydnonimine molsidomine, S-nitroso -N-acetylpenicillamine (SNAP), S-nitroso-N-glutathione (SNO-GLU), N-hydroxy-L-arginine, amyl nitrate, linsidomine, linsidomine chlorohydrate, (SIN-1) , S-nitroso- N-cysteine, diazenium diolates, (NONOate), 1,5-pentane dinitrate, L-arginene, medicinal carrots, taisu, molsidomine, Re-2047, published Nitrosylated moxycilitate derivatives such as NMI-678-11 and NMI-937 described in PCT application WO0012075;
iii) Vasodilator drugs. Suitable vasodilators for use in the present invention include nimodepine, pinacidil, cyclandelate, isoxsuprine, chloropurmazine, haloperidol, Rec 15/2739, trazodone, pentoxifylline;
iv) a thromboxane A2 agonist;
v) a substrate for a NO-synthesizing enzyme such as L-arginine;
vi) calcium channel blockers such as amlodipine;
vii) steroidal or non-steroidal anti-inflammatory drugs;
viii) matrix metalloprotease (MMP) inhibitors, in particular MMP-3, MMP-12 and MMP-13 inhibitors;
ix) urokinase type plasminogen activator (uPA) inhibitors;
x) a PCP inhibitor; and
xi) PDE4 inhibitor.

本発明のＰＤＥ５阻害剤と組み合わせて創傷治療のために用いるための特に好ましい薬剤には：ＷＯ０１／４７９０１、ＧＢ０１０８０９７．７、ＰＣＴ／ＩＢ０１／０２３６０及びＧＢ０１０８１０２．５のもののようなＰＣＰ阻害剤が含まれる。 Particularly preferred agents for use for wound treatment in combination with the PDE5 inhibitors of the present invention include: PCP inhibitors such as those of WO01 / 47901, GB0108097.7, PCT / IB01 / 02360 and GB0108102.5. .

好ましくは、ＭＭＰ阻害剤は、ＷＯ９９／３５１２４、ＥＰ９３１７８８、ＷＯ９９／２９６６７又はＷＯ００／７４６８１中に具体的又は一般的に開示されているもののようなＭＭＰ−３及び／又はＭＭＰ−１３阻害剤である。特に好ましいＭＭＰ阻害剤は、ＷＯ９９／３５１２４、ＥＰ９３１７８８、ＷＯ９９／２９６６７及びＷＯ００／７４６８１の実施例のものである。 Preferably, the MMP inhibitor is an MMP-3 and / or MMP-13 inhibitor, such as those specifically or generally disclosed in WO99 / 35124, EP931788, WO99 / 29667 or WO00 / 74681. Particularly preferred MMP inhibitors are those of the examples of WO99 / 35124, EP931788, WO99 / 29667 and WO00 / 74681.

好ましくは、ｕＰＡ阻害剤は、ＷＯ９９／２０６０８、ＥＰ１０４４９６７又はＷＯ００／０５２１４中に具体的又は一般的に開示されたものから選択される。特に好ましいｕＰＡ阻害剤は、ＷＯ９９／２０６０８、ＥＰ１０４４９６７及びＷＯ００／０５２１４の実施例のものである。 Preferably, the uPA inhibitor is selected from those specifically or generally disclosed in WO99 / 20608, EP1044967 or WO00 / 05214. Particularly preferred uPA inhibitors are those of the examples of WO99 / 20608, EP1044967 and WO00 / 05214.

本明細書における治療についての全ての言及には、治癒的、緩和的及び予防的治療が含まれることが理解される。 It is understood that all references to treatment herein include curative, palliative and prophylactic treatment.

Fawcett et al(Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2000; 97: 3702-3707) の方法に従って、ヒトＰＤＥ５Ａ１のアミノ酸残基１〜１２に対応するＬＩＰ−１［ＭＥＲＡＧＰＳＦＧＱＱＲ］ペプチドに対して、抗ヒトポリクローナル抗血清がウサギ中で生成され、アフィニティー精製された。ＬＩＰ−１はＰＤＥ５Ａ１に特有である。 According to the method of Fawcett et al (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2000; 97: 3702-3707), LIP-1 [MERAGPSFGQQR] peptide corresponding to amino acid residues 1 to 12 of human PDE5A1 is Human polyclonal antiserum was produced in rabbits and affinity purified. LIP-1 is unique to PDE5A1.

ホルマリン固定パラフィン埋め込み組織の４μｍ切片が切断され、ＡＰＥＳ（３−アミノプロピルトリエトキシシラン）でコートされたスライド上に取り上げられ、そして６０℃で１時間乾燥された。切片からロウが除かれ、水で戻され、その後にタンパク質分解抗原回復を、０．１％塩化カルシウム［ｐＨ７−６］中の０．１％トリプシン液中で、３７℃、８分間行った。少し水で洗浄した後、内因性ペルオキシダーゼ活性が、９ｍｌＨ_２Ｏ_２が蒸留水で１００ｍｌにされた溶液中で１０分間インキュベートすることによって遮断された。切片は水道水中で洗浄され、次いでＰＢＳに移された。過剰の緩衝液がスライドから除かれて、試験切片が、ＰＢＳ中で１：６００に希釈されたＬＩＰ−１抗体中で、１時間、室温でインキュベートされた。ネガティブコントロールは、一次抗体を省略することにより含められた。用いられたポジティブコントロール組織は、ヒト海綿体であった。免疫検出は、ＤＡＫＯＲａｂｂｉｔＥｎｖｉｓｉｏｎ（商標）システムを用いて、基質色素体（赤／褐色染色）としての３−アミノ−９−エチルカルバゾール（３−ＡＥＣ）と共に行われた。 A 4 μm section of formalin-fixed paraffin-embedded tissue was cut, picked up on a slide coated with APES (3-aminopropyltriethoxysilane) and dried at 60 ° C. for 1 hour. Waxes were removed from the sections and reconstituted with water, after which proteolytic antigen retrieval was performed in 0.1% trypsin solution in 0.1% calcium chloride [pH 7-6] at 37 ° C. for 8 minutes. After washing with a little water, endogenous peroxidase activity was blocked by incubating for 10 minutes in a solution of 9 ml H ₂ O ₂ made up to 100 ml with distilled water. Sections were washed in tap water and then transferred to PBS. Excess buffer was removed from the slide and the test sections were incubated for 1 hour at room temperature in LIP-1 antibody diluted 1: 600 in PBS. A negative control was included by omitting the primary antibody. The positive control tissue used was human corpus cavernosum. Immunodetection was performed with 3-amino-9-ethylcarbazole (3-AEC) as a substrate plastid (red / brown stain) using a DAKO Rabbit Envision ™ system.

図１は、反応性であるが炎症を起こしていない皮膚の、皮膚創傷の端における切片を示す。細静脈の中膜における平滑筋細胞の陽性染色及び陰性繊維芽細胞は、治癒している創傷におけるＰＤＥ５の発現を示す。過形成であるが損なわれていない扁平上皮１は陰性である。下にある真皮は、小さな又は大きな細静脈２を有する成熟した瘢痕組織を含有する。細静脈の中膜内の平滑筋細胞の陽性の濃い染色に注目されたい（本来の倍率は×１０）。 FIG. 1 shows a section at the edge of a skin wound of reactive but non-inflamed skin. Positive staining and negative fibroblasts of smooth muscle cells in the venule media indicate the expression of PDE5 in healing wounds. Squamous epithelium 1 that is hyperplastic but not impaired is negative. The underlying dermis contains mature scar tissue with small or large venules 2. Note the positive dark staining of smooth muscle cells in the media of the venule (original magnification is x10).

図２は、第１４日の治癒している潰瘍（左）と無傷の上皮（右）の間の境界から採取されたパラフィン切片である。細静脈の中膜内の平滑筋細胞（右）と、潰瘍の基部内の紡錘細胞（筋繊維芽細胞、左）の陽性染色も、やはり、ＰＤＥ５の発現を示す。過形成であるが損なわれていない扁平上皮（右）と壊死炎症性滲出物３は陰性である。細静脈４の中膜内の平滑筋細胞と、潰瘍５の基部内の紡錘細胞の陽性の濃い染色に注目されたい（本来の倍率は×２０）。 FIG. 2 is a paraffin section taken from the boundary between the healing ulcer on day 14 (left) and the intact epithelium (right). Positive staining of smooth muscle cells in the media of the venule (right) and spindle cells in the base of the ulcer (myofibroblast, left) also shows PDE5 expression. Squamous epithelium (right) that is hyperplastic but not impaired and necrotic inflammatory exudate 3 are negative. Note the positive dark staining of smooth muscle cells in the media of the venule 4 and spindle cells in the base of the ulcer 5 (original magnification is x20).

図３は、治癒した潰瘍基部から採取されたパラフィン切片であり、そこでは、若い瘢痕組織の束が正常な皮膚構造にとって代わっている。紡錘細胞（筋繊維芽細胞）の内のいくつか（８）と、いくつかの血管構造の陽性染色も、やはり、ＰＤＥ５の発現を示す（本来の倍率は×２０）。 FIG. 3 is a paraffin section taken from a healed ulcer base where a bundle of young scar tissue replaces normal skin structure. Some of the spindle cells (myofibroblasts) (8) and positive staining of some vascular structures also show PDE5 expression (original magnification is x20).

図４は、図３の皮膚のパラフィン切片をより高倍率で見たものである。その切片は治癒した潰瘍基部から採取され、そこでは、若い瘢痕組織の束が正常な皮膚構造にとって代わっている。ＰＤＥ５の発現が、紡錘細胞（筋繊維芽細胞）のいくつか（９）と、薄い中膜を有する微細血管のいくつか（１０）の陽性染色により示される（本来の倍率は×４０）。 FIG. 4 is a higher magnification view of the paraffin section of the skin of FIG. The section is taken from the healing ulcer base, where a bundle of young scar tissue replaces the normal skin structure. The expression of PDE5 is shown by positive staining of some of the spindle cells (myofibroblasts) (9) and some of the microvessels with thin media (10) (original magnification is x40).

図５は、図４をより高倍率で見たものであり、図４の治癒した潰瘍基部から採取された切片を示し、そこでは、若い瘢痕組織の束が正常な皮膚構造にとって代わっている。無細胞のコラーゲン中に存在する紡錘細胞（筋繊維芽細胞）のいくつか（１１）に陽性染色が存在する。これら紡錘細胞のいくつかの細胞質における免疫学的局在決定は、斑状の分布を有する。小さい細動脈内の中膜平滑筋細胞（１２）の陽性染色はＰＤＥ５の発現を示す。内張りの内皮細胞（１３）の陰性染色が存在し、これはＰＤＥ５がないことを示している（本来の倍率は×６０）。 FIG. 5 is a higher magnification view of FIG. 4 and shows a section taken from the healed ulcer base of FIG. 4, where a bundle of young scar tissue replaces normal skin structure. There is positive staining in some (11) of spindle cells (myofibroblasts) present in acellular collagen. Immunological localization of some of these spindle cells in the cytoplasm has a patchy distribution. Positive staining of medial smooth muscle cells (12) in small arterioles indicates expression of PDE5. There is negative staining of lining endothelial cells (13), indicating the absence of PDE5 (original magnification is x60).

図６も、図４をより高倍率で見たものであり、比較的若い瘢痕組織の領域における治癒した潰瘍基部からの切片を示す。紡錘細胞（筋繊維芽細胞）のいくつか（１４）と、小さい細動脈内の中膜平滑筋（中央）（１５）の陽性染色も、やはり、ＰＤＥ５を示す。これら紡錘細胞のいくつかにおいては、免疫学的局在決定は斑状の分布を有する（本来の倍率は×６０）。 FIG. 6 also shows a higher magnification of FIG. 4 and shows a section from the healed ulcer base in a region of relatively young scar tissue. Positive staining of some of the spindle cells (myofibroblasts) (14) and medial smooth muscle (middle) (15) in small arterioles also shows PDE5. In some of these spindle cells, immunological localization has a patchy distribution (original magnification is x60).

次の製剤例は例示に過ぎず、本発明の範囲の限定を意図するものではない。活性成分とは、ｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤を意味する。
製剤１：
錠剤が、次の成分を用いて製造される：
クエン酸シルデナフィル（５０ｍｇ）が、セルロース（微結晶性）、二酸化ケイ素、ステアリン酸（ヒュームド）とブレンドされ、その混合物が圧縮されて錠剤が形成される。
製剤２：
点滴製剤は、活性成分（１００ｍｇ）を等張生理食塩水（１００ｍｌ）と混合することにより製造され得る。
製剤３：
局所製剤は、２重量％までの活性成分を、鉱油、流動パラフィン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン化合物、乳化ロウ及び水の１以上との混合物であってよい適する賦形剤と混合することにより製造され得る。 The following formulation examples are illustrative only and are not intended to limit the scope of the present invention. An active ingredient means a cGMP PDE5 inhibitor.
Formulation 1:
Tablets are manufactured using the following ingredients:
Sildenafil citrate (50 mg) is blended with cellulose (microcrystalline), silicon dioxide, stearic acid (fumed) and the mixture is compressed to form tablets.
Formulation 2:
Infusion preparations can be prepared by mixing the active ingredient (100 mg) with isotonic saline (100 ml).
Formulation 3:
Topical formulations may be a mixture of up to 2% by weight of the active ingredient with one or more of mineral oil, liquid paraffin, white petrolatum, propylene glycol, polyoxyethylene polyoxypropylene compound, emulsifying wax and water It can be manufactured by mixing with.

本発明の有用性は、次の図面により示される。
図１は、１０×倍率における皮膚のパラフィン切片の顕微鏡写真である。図２は、２０×倍率における皮膚のパラフィン切片の顕微鏡写真である。図３は、２０×倍率における皮膚のパラフィン切片の顕微鏡写真である。図４は、４０×倍率における皮膚のパラフィン切片の顕微鏡写真である。図５は、６０×倍率における皮膚のパラフィン切片の顕微鏡写真である。図６は、６０×倍率における皮膚のパラフィン切片の顕微鏡写真である。 The utility of the present invention is illustrated by the following figures.
FIG. 1 is a photomicrograph of a paraffin section of skin at 10 × magnification. FIG. 2 is a photomicrograph of a paraffin section of skin at 20 × magnification. FIG. 3 is a photomicrograph of a paraffin section of skin at 20 × magnification. FIG. 4 is a photomicrograph of a paraffin section of skin at 40 × magnification. FIG. 5 is a photomicrograph of a paraffin section of skin at 60 × magnification. FIG. 6 is a photomicrograph of a paraffin section of skin at 60 × magnification.

Claims

患者を有効な量のｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤、又はその医薬組成物で処置することを含む、患者における瘢痕化を減少させるため及び／又は繊維症を治療するための方法。 A method for reducing scarring and / or treating fibrosis in a patient comprising treating the patient with an effective amount of a cGMP PDE5 inhibitor, or a pharmaceutical composition thereof.

瘢痕化及び／又は繊維症に関連した疾患が：
肺繊維症；アテローム性動脈硬化症；心血管疾患；感染、外傷、外科処置若しくは熱傷の後の皮膚及び角膜瘢痕化及び／又は繊維症；強皮症及び他の結合組織障害；心臓の繊維症；慢性閉塞性肺疾患；筋繊維症；腎繊維症；慢性皮膚潰瘍及び脂質皮膚硬化症；（あらゆる原因による）肺繊維症；外科処置後及び特発性（idiophatic）の癒着；皮膚の炎症性状態（苔癬状態及びそれに関連する状態も含まれる）；老化及び全ての老化関連変性障害（皮膚の老化も含まれる）；あらゆる病因（ウイルス性及び非ウイルス性肝炎が含まれる）による肝繊維症；肝硬変；慢性膵炎；慢性甲状腺炎；（あらゆる原因による）石灰沈着症；その病原が結合マトリックスの沈着／リモデリングに関連する状態（ガンも含まれる）
から選択される、請求項１記載の方法。 Diseases associated with scarring and / or fibrosis include:
Pulmonary fibrosis; atherosclerosis; cardiovascular disease; skin and corneal scarring and / or fibrosis after infection, trauma, surgery or burn; scleroderma and other connective tissue disorders; heart fibrosis Chronic obstructive pulmonary disease; muscle fibrosis; renal fibrosis; chronic skin ulcer and lipid sclerosis; pulmonary fibrosis (by any cause); post-surgical and idiophatic adhesions; (Including lichen status and related conditions); aging and all aging-related degenerative disorders (including skin aging); liver fibrosis of any etiology (including viral and non-viral hepatitis); Cirrhosis; chronic pancreatitis; chronic thyroiditis; calcification (by any cause); conditions whose pathogenesis is associated with deposition / remodeling of the binding matrix (including cancer)
The method of claim 1, wherein the method is selected from:

瘢痕化を減少させるため及び／又は繊維症を治療するための医薬の製造のためのｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤の使用。 Use of a cGMP PDE5 inhibitor for the manufacture of a medicament for reducing scarring and / or treating fibrosis.

瘢痕化及び／又は繊維症に関連した疾患が：
肺繊維症；アテローム性動脈硬化症；心血管疾患；感染、外傷、外科処置若しくは熱傷の後の皮膚及び角膜瘢痕化及び／又は繊維症；強皮症及び他の結合組織障害；心臓の繊維症；慢性閉塞性肺疾患；筋繊維症；腎繊維症；慢性皮膚潰瘍及び脂質皮膚硬化症；（あらゆる原因による）肺繊維症；外科処置後及び特発性の癒着；皮膚の炎症性状態（苔癬状態及びそれに関連する状態も含まれる）；老化及び全ての老化関連変性障害（皮膚の老化も含まれる）；あらゆる病因（ウイルス性及び非ウイルス性肝炎が含まれる）による肝繊維症；肝硬変；慢性膵炎；慢性甲状腺炎；（あらゆる原因による）石灰沈着症；その病原が結合マトリックスの沈着／リモデリングに関連する状態（ガンも含まれる）
から選択される、請求項３記載の使用。 Diseases associated with scarring and / or fibrosis include:
Pulmonary fibrosis; atherosclerosis; cardiovascular disease; skin and corneal scarring and / or fibrosis after infection, trauma, surgery or burn; scleroderma and other connective tissue disorders; heart fibrosis Chronic obstructive pulmonary disease; myofibrosis; renal fibrosis; chronic skin ulcers and lipid sclerosis; pulmonary fibrosis (due to any cause); post-surgical and idiopathic adhesions; Aging and all aging-related degenerative disorders (including skin aging); liver fibrosis of any etiology (including viral and non-viral hepatitis); cirrhosis; chronic Pancreatitis; chronic thyroiditis; calcification (by any cause); conditions whose pathogenesis is associated with deposition / remodeling of the binding matrix (including cancer)
4. Use according to claim 3, selected from.

前記阻害剤が経口投与又は局所投与される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法又は使用。 The method or use according to any one of claims 1 to 4, wherein the inhibitor is administered orally or topically.

前記阻害剤が１００ｎＭ未満のＩＣ５０を有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法又は使用。 6. The method or use according to any one of claims 1 to 5, wherein the inhibitor has an IC50 of less than 100 nM.

前記阻害剤が１０００を超える選択性比を有する、請求項６記載の方法又は使用。 7. A method or use according to claim 6 wherein the inhibitor has a selectivity ratio of greater than 1000.

前記阻害剤がシルデナフィルである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法又は使用。 8. The method or use according to any one of claims 1 to 7, wherein the inhibitor is sildenafil.

１日あたりの投与量が５〜５００ｍｇである、請求項８記載の方法又は使用。 The method or use according to claim 8, wherein the daily dose is 5 to 500 mg.

１日あたりの投与量が１０〜１００ｍｇである、請求項９記載の方法又は使用。 The method or use according to claim 9, wherein the daily dose is 10 to 100 mg.

瘢痕化を減少させるため及び／又は繊維症を治療するための医薬を製造するための、ＰＣＰ及び／又はＰＤＥ４阻害剤と組み合わせたｃＧＭＰＰＤＥ５阻害剤の使用。 Use of a cGMP PDE5 inhibitor in combination with a PCP and / or PDE4 inhibitor for the manufacture of a medicament for reducing scarring and / or treating fibrosis.

ＰＤＥ５阻害剤を含む医薬組成物、瘢痕化を減少させるため及び／又は繊維症を治療するための当該組成物の使用に関する指示書、及び容器を含む医薬パック。 A pharmaceutical composition comprising a PDE5 inhibitor, instructions for use of the composition to reduce scarring and / or to treat fibrosis, and a pharmaceutical pack comprising a container.

ＰＤＥ５阻害剤と、ＰＣＰ阻害剤及び／又はＰＤＥ４阻害剤（ｕＰＡ）との組合せ剤。 A combination of a PDE5 inhibitor and a PCP inhibitor and / or a PDE4 inhibitor (uPA).