JP2005508846A - Use of N-phenyl-2-pyrimidinamine derivatives for mast cell diseases such as allergic diseases - Google Patents

Abstract

アレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎、薬物アレルギーまたは食物アレルギー、血管浮腫、じんま疹、乳幼児突然死症候群、気管支肺アスペルギルス症、多発性硬化症、または肥満細胞症を処置する医薬組成物の製造における、式Ｉ
【化１】

（式中、記号および置換基は本明細書に示されたものと同じ意味を有する）
の、Ｎ−フェニル−２−ピリミジン−アミン誘導体の遊離形態または医薬上許容される塩形態での使用。In the manufacture of a pharmaceutical composition for treating allergic rhinitis, allergic dermatitis, drug or food allergy, angioedema, urticaria, sudden infant death syndrome, bronchopulmonary aspergillosis, multiple sclerosis, or mastocytosis , Formula I
[Chemical 1]

(Wherein the symbols and substituents have the same meaning as indicated herein)
Of N-phenyl-2-pyrimidin-amine derivatives in free or pharmaceutically acceptable salt form.

Description

発明の詳細な説明Detailed Description of the Invention

本発明は、アレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎、薬物アレルギーまたは食物アレルギー、血管浮腫、じんま疹、乳幼児突然死症候群、気管支肺アスペルギルス症、多発性硬化症または肥満細胞症を処置する医薬組成物の製造における、記号および置換基が下記に示される意味を有する式ＩのＮ−フェニル−２−ピリミジン−アミン誘導体の遊離形態または医薬上許容される塩形態での新規な使用、ならびに治療上有効量の式Ｉの化合物を上記疾病の１つを患う温血動物に投与する、温血動物、好ましくはヒトの処置方法に関する。   The present invention relates to a pharmaceutical composition for treating allergic rhinitis, allergic dermatitis, drug allergy or food allergy, angioedema, hives, sudden infant death syndrome, bronchopulmonary aspergillosis, multiple sclerosis or mastocytosis Novel use of N-phenyl-2-pyrimidin-amine derivatives of formula I in the form of free radicals or pharmaceutically acceptable salts, as well as therapeutically effective, in the preparation of It relates to a method for treating warm-blooded animals, preferably humans, wherein an amount of a compound of formula I is administered to a warm-blooded animal suffering from one of the above diseases.

本発明は、アレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎、薬物アレルギーまたは食物アレルギー、血管浮腫、じんま疹、乳幼児突然死症候群、気管支肺アスペルギルス症、肥満細胞症または多発性硬化症を処置する薬剤の製造のための、式Ｉ

［式中、
Ｒ_１は４−ピラジニル；１−メチル−１Ｈ−ピロリル；アミノ−もしくはアミノ−低級アルキル置換フェニル(ここで、各場合においてアミノ基は遊離型であるか、アルキル化またはアシル化されている)；５員環炭素原子において結合している１Ｈ−インドリルもしくは１Ｈ−イミダゾリル；または環炭素原子において結合し、かつ、窒素原子において酸素で置換されていてもされていなくてもよい非置換もしくは低級アルキル置換ピリジルであり；
Ｒ_２およびＲ_３は各々他とは独立に水素または低級アルキルであり；
Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８基のうち１つまたは２つは各々ニトロ、フルオロ置換低級アルコキシまたは式ＩＩ
−Ｎ(Ｒ_９)−Ｃ(＝Ｘ)−(Ｙ)_ｎ−Ｒ_１０ (ＩＩ)
｛式中、
Ｒ_９は水素または低級アルキルであり、
Ｘはオキソ、チオ、イミノ、Ｎ−低級アルキル−イミノ、ヒドロキシイミノまたはＯ−低級アルキル−ヒドロキシイミノであり、
Ｙは酸素またはＮＨ基であり、
ｎは０または１であり、
Ｒ_１０は少なくとも５個の炭素原子を有する脂肪族基、または芳香族、芳香−脂肪族、シクロ脂肪族、シクロ脂肪−脂肪族、複素環式もしくは複素環式脂肪族基である}
の基であり、かつ、
残りのＲ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８基は各々他とは独立に水素；非置換、または遊離もしくはアルキル化アミノ、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニルまたはモルホリニルにより置換されている低級アルキル；あるいは低級アルカノイル；トリフルオロメチル；遊離、エーテル化もしくはエステル化ヒドロキシ；遊離、アルキル化もしくはアシル化アミノ、または遊離もしくはエステル化カルボキシである］
のＮ−フェニル−２−ピリミジン−アミン誘導体、または少なくとも１つの塩形成基を有するかかる化合物の塩の使用に関する。 The present invention relates to the manufacture of a medicament for treating allergic rhinitis, allergic dermatitis, drug allergy or food allergy, angioedema, hives, sudden infant death syndrome, bronchopulmonary aspergillosis, mastocytosis or multiple sclerosis For the formula I

[Where:
R ₁ is 4-pyrazinyl; 1-methyl-1H-pyrrolyl; amino- or amino-lower alkyl-substituted phenyl, where in each case the amino group is free, alkylated or acylated; 1H-indolyl or 1H-imidazolyl attached at a 5-membered ring carbon atom; or unsubstituted or lower alkyl substituted attached at the ring carbon atom and optionally or not substituted with oxygen at the nitrogen atom Pyridyl;
R ₂ and R ₃ are each independently hydrogen or lower alkyl;
One or two of the R ₄ , R ₅ , R ₆ , R ₇ and R ₈ groups are each nitro, fluoro-substituted lower alkoxy or Formula II
_{-N (R 9) -C (=} X) - (Y) n -R 10 (II)
{Where,
R ₉ is hydrogen or lower alkyl,
X is oxo, thio, imino, N-lower alkyl-imino, hydroxyimino or O-lower alkyl-hydroxyimino;
Y is oxygen or an NH group;
n is 0 or 1;
R ₁₀ is an aliphatic group having at least 5 carbon atoms, or an aromatic, aromatic-aliphatic, cycloaliphatic, cycloaliphatic-aliphatic, heterocyclic or heterocyclic aliphatic group}
And the basis of
The remaining R ₄ , R ₅ , R ₆ , R ₇ and R ₈ groups are each independently hydrogen; lower alkyl, unsubstituted or substituted by free or alkylated amino, piperazinyl, piperidinyl, pyrrolidinyl or morpholinyl Or lower alkanoyl; trifluoromethyl; free, etherified or esterified hydroxy; free, alkylated or acylated amino, or free or esterified carboxy]
Of N-phenyl-2-pyrimidin-amine derivatives, or salts of such compounds having at least one salt-forming group.

１−メチル−１Ｈ−ピロリルは好ましくは１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イルまたは１−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イルである。   1-methyl-1H-pyrrolyl is preferably 1-methyl-1H-pyrrol-2-yl or 1-methyl-1H-pyrrol-3-yl.

アミノ−またはアミノ−低級アルキル−置換フェニルＲ_１(なおここで、各場合においてアミノ基は遊離型であるか、アルキル化またはアシル化されている)はいずれかの所望の位置(オルト、メタ、パラ)で置換されたフェニルであり、アルキル化アミノ基は好ましくはモノ−またはジ−低級アルキルアミノ、例えばジメチルアミノであり、アミノ−低級アルキルの低級アルキル部分は好ましくは直鎖Ｃ_１−Ｃ_３アルキル、例えば特にメチルまたはエチルである。 The amino- or amino-lower alkyl-substituted phenyl R ₁ (wherein the amino group is free, alkylated or acylated in each case) is in any desired position (ortho, meta, Para) substituted phenyl, the alkylated amino group is preferably mono- or di-lower alkylamino, such as dimethylamino, and the lower alkyl portion of the amino-lower alkyl is preferably linear C ₁ -C ₃ Alkyl, for example in particular methyl or ethyl.

５員環炭素原子において結合している１Ｈ−インドリルは１Ｈ−インドール−２−イルまたは１Ｈ−インドール−３−イルである。   The 1H-indolyl bonded at a 5-membered ring carbon atom is 1H-indol-2-yl or 1H-indol-3-yl.

環炭素原子において結合している非置換または低級アルキル置換ピリジルは低級アルキル置換された、または好ましくは置換されていない２−、４−または好ましくは３−ピリジル、例えば３−ピリジル、２−メチル−３−ピリジルまたは４−メチル−３−ピリジルである。窒素原子において酸素で置換されているピリジルはピリジンＮ−オキシド、すなわちＮ−オキシド−ピリジル由来の基である。   An unsubstituted or lower alkyl substituted pyridyl attached at a ring carbon atom is a lower alkyl substituted or preferably unsubstituted 2-, 4- or preferably 3-pyridyl, such as 3-pyridyl, 2-methyl- 3-pyridyl or 4-methyl-3-pyridyl. Pyridyl substituted with oxygen at the nitrogen atom is a pyridine N-oxide, ie a group derived from N-oxide-pyridyl.

フルオロ置換低級アルコキシは少なくとも１つ、好ましくは数個のフルオロ置換基、特にトリフルオロメトキシまたは１,１,２,２−テトラフルオロ−エトキシを有する低級アルコキシである。   A fluoro-substituted lower alkoxy is a lower alkoxy having at least one, preferably several fluoro substituents, in particular trifluoromethoxy or 1,1,2,2-tetrafluoro-ethoxy.

Ｘがオキソ、チオ、イミノ、Ｎ−低級アルキル−イミノ、ヒドロキシイミノまたはＯ−低級アルキル−ヒドロキシイミノであるとき、Ｃ＝Ｘ基は上記の順序でそれぞれＣ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝Ｎ−Ｈ、Ｃ＝Ｎ−低級アルキル、Ｃ＝Ｎ−ＯＨまたはＣ＝Ｎ−Ｏ−低級アルキルである。Ｘは好ましくはオキソである。   When X is oxo, thio, imino, N-lower alkyl-imino, hydroxyimino, or O-lower alkyl-hydroxyimino, the C═X groups are C═O, C═S, C═N, respectively, in the above order. -H, C = N-lower alkyl, C = N-OH or C = N-O-lower alkyl. X is preferably oxo.

ｎは好ましくは０であり、すなわちＹ基は存在しない。   n is preferably 0, ie no Y group is present.

存在する場合、Ｙは好ましくはＮＨ基である。   When present, Y is preferably an NH group.

本明細書の範囲内で「低級」とは、７個まで(７個を含む)、好ましくは４個まで(４個を含む)炭素原子を有する基を表す。   Within the scope of this specification, “lower” represents a group having up to 7 (including 7), preferably up to 4 (including 4) carbon atoms.

低級アルキルＲ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_９は好ましくはメチルまたはエチルである。 Lower alkyl R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₉ are preferably methyl or ethyl.

少なくとも５個の炭素原子を有する脂肪族基Ｒ_１０は好ましくは２２以下の炭素原子、一般に１０以下の炭素原子を有し、このような置換または好ましくは非置換脂肪族炭化水素基、いわゆるＣ_５−Ｃ_７アルキル、例えばｎ−ペンチルなど、このような置換または好ましくは非置換アルキニル、アルケニルまたは好ましくはアルキル基である。芳香族基Ｒ_１０は２０個までの炭素原子を有し、置換されていなくとも置換されていてもよく(例えば各場合において置換されていなくとも、またはナフチル、特に２−ナフチルなど、または好ましくはフェニルで置換されていてもよい)、これらの置換基は好ましくはシアノ、非置換またはヒドロキシ−、アミノ−もしくは４−メチル−ピペラジニル−置換低級アルキル、特にメチル；トリフルオロメチル；遊離、エーテル化もしくはエステル化ヒドロキシ；遊離、アルキル化もしくはアシル化アミノ；および遊離もしくはエステル化カルボキシから選択される。芳香−脂肪族基Ｒ_１０では、芳香族部分は上記定義の通りであり、脂肪族部分は好ましくは低級アルキル、特に置換されていないか、または好ましくは例えばベンジル置換されているＣ_１−Ｃ_２アルキルである。 The aliphatic group R ₁₀ having at least 5 carbon atoms preferably has no more than 22 carbon atoms, generally no more than 10 carbon atoms, such substituted or preferably unsubstituted aliphatic hydrocarbon groups, so-called C _5. -C ₇ alkyl, for example n- pentyl, etc., such substituted or preferably unsubstituted alkynyl, alkenyl or preferably alkyl radical. The aromatic group R ₁₀ has up to 20 carbon atoms and may be unsubstituted or substituted (eg in each case unsubstituted or naphthyl, especially 2-naphthyl, etc., or preferably Optionally substituted with phenyl), these substituents are preferably cyano, unsubstituted or hydroxy-, amino- or 4-methyl-piperazinyl-substituted lower alkyl, in particular methyl; trifluoromethyl; free, etherified or Esterified hydroxy; selected from free, alkylated or acylated amino; and free or esterified carboxy. In the aromatic-aliphatic radical R ₁₀ , the aromatic moiety is as defined above, and the aliphatic moiety is preferably lower alkyl, especially unsubstituted or preferably, for example, benzyl substituted C ₁ -C ₂ Alkyl.

シクロ脂肪族基Ｒ_１０は特に３０個まで、さらに特には２０個まで、最も特には１０個までの炭素原子を有し、単環式または多環式であり、かつ、置換されているか、または好ましくは置換されておらず、例えばこのようなシクロアルキル基、特に５または６員シクロアルキル基、好ましくはシクロヘキシルである。シクロ脂肪−脂肪族基Ｒ_１０では、シクロ脂肪族部分は上記定義の通りであり、脂肪族部分は好ましくは低級アルキル、特に置換されている、または好ましくは置換されていないＣ_１−Ｃ_２アルキルである。複素環式基Ｒ_１０は特に２０個までの炭素原子を含み、好ましくは５または６員と、好ましくは窒素、酸素および硫黄から選択される１〜３個のヘテロ原子とを有する、飽和または不飽和単環式基、特に例えばチエニル、または２−、３−もしくは４−ピリジル、あるいは例えば１個または２個のベンゼン基が上記単環式基と環形成(縮合)した二環または三環式基である。複素環式−脂肪族基Ｒ_１０では、複素環部分は上記定義の通りであり、脂肪族基は好ましくは低級アルキル、特に置換されている、または好ましくは置換されていないＣ_１−Ｃ_２アルキルである。 The cycloaliphatic radical R ₁₀ has in particular up to 30, more particularly up to 20, most particularly up to 10 carbon atoms, is monocyclic or polycyclic and is substituted, or Preferably it is not substituted, for example such a cycloalkyl group, in particular a 5 or 6 membered cycloalkyl group, preferably cyclohexyl. Cycloaliphatic - With aliphatic radical R _10, cycloaliphatic moiety is as defined above, C ₁ -C ₂ alkyl aliphatic moiety preferably lower alkyl, or preferably, in particular case unsubstituted It is. Heterocyclic group R ₁₀ may particularly comprise up to 20 carbon atoms, preferably a 5 or 6-membered, preferably a 1 to 3 heteroatoms selected from nitrogen, oxygen and sulfur, saturated or unsaturated Saturated monocyclic groups, in particular bicyclic or tricyclic, such as for example thienyl, or 2-, 3- or 4-pyridyl, or for example one or two benzene groups ring-forming (fused) with the monocyclic group It is a group. Heterocyclic - With aliphatic radical R _10, heterocyclic moiety is as defined above, C ₁ -C ₂ alkyl aliphatic group is preferably lower alkyl, or preferably, in particular case unsubstituted It is.

エーテル化ヒドロキシは好ましくは低級アルコキシである。エステル化ヒドロキシは好ましくは低級アルカン酸などの有機カルボン酸、またはハロゲン化水素酸などの無機酸によりエステル化されたヒドロキシ、例えば低級アルカノイルオキシまたは特にヨウ素、臭素または特にフッ素もしくは塩素などのハロゲンである。   Etherified hydroxy is preferably lower alkoxy. The esterified hydroxy is preferably an organic carboxylic acid such as a lower alkanoic acid, or a hydroxy esterified with an inorganic acid such as a hydrohalic acid, such as lower alkanoyloxy or in particular iodine, bromine or in particular a halogen such as fluorine or chlorine. .

アルキル化アミノは例えば、メチルアミノなどの低級アルキルアミノ、またはジメチルアミノなどのジ−低級アルキル−アミノである。アシル化アミノは例えば、低級アルカノイルアミノまたはベンゾイルアミノである。   Alkylated amino is, for example, lower alkylamino such as methylamino or di-lower alkyl-amino such as dimethylamino. Acylated amino is, for example, lower alkanoylamino or benzoylamino.

エステル化カルボキシは例えば、メトキシカルボニルなどの低級アルコキシカルボニルである。   Esterified carboxy is, for example, lower alkoxycarbonyl such as methoxycarbonyl.

置換フェニル基はフッ素など５個までの置換基を有してもよいが、特に比較的大きな置換基の場合は一般に１〜３個のみの置換基で置換される。特に挙げられる置換フェニルの例としては、４−クロロ−フェニル、ペンタフルオロ−フェニル、２−カルボキシ−フェニル、２−メトキシ−フェニル、４−フルオロ−フェニル、４−シアノ−フェニルおよび４−メチル−フェニルがある。   A substituted phenyl group may have up to 5 substituents, such as fluorine, but is generally substituted with only 1 to 3 substituents, especially in the case of relatively large substituents. Examples of substituted phenyl specifically mentioned include 4-chloro-phenyl, pentafluoro-phenyl, 2-carboxy-phenyl, 2-methoxy-phenyl, 4-fluoro-phenyl, 4-cyano-phenyl and 4-methyl-phenyl. There is.

式Ｉの化合物における塩形成基は塩基性または酸性の特性を有する基または原子団である。少なくとも１つの塩基性基または少なくとも１つの塩基性原子団、例えば遊離アミノ基、ピラジニル基またはピリジル基を有する化合物は例えば塩酸、硫酸もしくはリン酸などの無機酸と、あるいは有機カルボン酸またはスルホン酸、例えば脂肪族モノもしくはジカルボン酸(トリフルオロ酢酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、ヒドロキシマレイン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸またはシュウ酸など)；またはアルギニンもしくはリジンなどのアミノ酸；安息香酸、２−フェノキシ−安息香酸、２−アセトキシ−安息香酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸などの芳香族カルボン酸；マンデル酸または桂皮酸などの芳香−脂肪族カルボン酸；ニコチン酸またはイソニコチン酸などのヘテロ芳香族カルボン酸；メタン−、エタン−または２−ヒドロキシエタンスルホン酸などの芳香族スルホン酸；あるいはベンゼン−、p−トルエン−またはナフタレン−２−スルホン酸などの脂肪族スルホン酸との酸付加塩が形成できる。数個の塩基性基が存在する場合には一酸付加塩または多酸付加塩が形成し得る。   The salt-forming group in the compound of formula I is a group or atomic group having basic or acidic properties. Compounds having at least one basic group or at least one basic atomic group, such as a free amino group, a pyrazinyl group or a pyridyl group, for example with an inorganic acid such as hydrochloric acid, sulfuric acid or phosphoric acid, or an organic carboxylic acid or sulfonic acid, Eg aliphatic mono- or dicarboxylic acids (such as trifluoroacetic acid, acetic acid, propionic acid, glycolic acid, succinic acid, maleic acid, fumaric acid, hydroxymaleic acid, malic acid, tartaric acid, citric acid or oxalic acid); or arginine or lysine Amino acids such as benzoic acid, 2-phenoxy-benzoic acid, 2-acetoxy-benzoic acid, salicylic acid, 4-aminosalicylic acid and the like; aromatic-aliphatic carboxylic acids such as mandelic acid and cinnamic acid; nicotinic acid Or heteroaromatic acids such as isonicotinic acid Formation of acid addition salts with boronic acids; aromatic sulfonic acids such as methane-, ethane- or 2-hydroxyethanesulfonic acid; or aliphatic sulfonic acids such as benzene-, p-toluene- or naphthalene-2-sulfonic acid it can. Monoacid addition salts or polyacid addition salts can form when several basic groups are present.

Ｒ_１０基に酸性基、例えば遊離のカルボン酸基を含む式Ｉの化合物はアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウムもしくはカルシウム塩、あるいはアンモニア、または第三級モノアミン、例えばトリエチルアミンもしくはトリ−(２−ヒドロキシエチル)−アミンなどの好適な有機アミン、または複素環塩基、例えばＮ−エチル−ピペリジンもしくはＮ,Ｎ'−ジメチル−ピペラジンとのアンモニウム塩といった金属またはアンモニウム塩を形成し得る。 Compounds of the formula I which contain an acidic group in the R ₁₀ group, for example a free carboxylic acid group, are alkali metal salts or alkaline earth metal salts, such as sodium, potassium, magnesium or calcium salts, or ammonia, or tertiary monoamines, For example, a suitable organic amine such as triethylamine or tri- (2-hydroxyethyl) -amine, or a metal or ammonium salt such as an ammonium salt with a heterocyclic base such as N-ethyl-piperidine or N, N′-dimethyl-piperazine. Can be formed.

酸性および塩基性の両基を有する式Ｉの化合物は内部塩を形成することができる。   Compounds of formula I having both acidic and basic groups can form internal salts.

単離または精製目的、ならびに中間体としてさらに用いられる化合物の場合には、医薬上許容されるものではない塩を使用することもできる。しかしながら治療目的では医薬上許容される無毒の塩のみを用いるため、これらの塩が好ましい。   For isolation or purification purposes, as well as compounds that are further used as intermediates, salts that are not pharmaceutically acceptable may also be used. However, since only pharmaceutically acceptable non-toxic salts are used for therapeutic purposes, these salts are preferred.

式Ｉの化合物は温血動物、好ましくはヒトの処置または処置用薬剤の製造に使用できる。   The compounds of formula I can be used for the treatment of warm-blooded animals, preferably humans or for the manufacture of medicaments for treatment.

本明細書において「アレルギー性鼻炎」とは、鼻粘膜のアレルギー反応を意味する。このようなアレルギー反応は例えば周年(例えば春季結膜炎)、あるいは季節的に(例えば花粉症性)起こる。   As used herein, “allergic rhinitis” means an allergic reaction of the nasal mucosa. Such allergic reactions occur, for example, for an anniversary (eg, spring conjunctivitis) or seasonally (eg, hay fever).

本明細書において「アレルギー性皮膚炎」とは、特にアトピー性皮膚炎、アレルギー性接触性皮膚炎および湿疹状皮膚炎を意味するが、例えば脂漏性皮膚炎、扁平苔癬、じんま疹およびざ瘡(acne)も含まれる。本明細書で定義されるアトピー性皮膚炎は、皮膚の痒み閾値が低い遺伝的傾向を持つ者に見られる慢性炎症性皮膚疾患である。主として、ひどい痒みが特徴で掻きむしったりこすったりしてしまい、それが次々に局部的湿疹病巣を作る。本明細書で定義されるアレルギー性接触性皮膚炎は、過去にそれに曝された結果としてのアレルゲンに対して後天的過敏性を有する人の皮膚に炎症反応を起こす種々の物質に対するアレルギー感作による皮膚炎の一形態である。   As used herein, “allergic dermatitis” means in particular atopic dermatitis, allergic contact dermatitis and eczema-like dermatitis, such as seborrheic dermatitis, lichen planus, hives and Acne is also included. Atopic dermatitis, as defined herein, is a chronic inflammatory skin disease found in individuals with a genetic tendency that has a low skin itch threshold. It is mainly characterized by severe itching and is scratched or rubbed, which in turn creates local eczema lesions. Allergic contact dermatitis as defined herein is due to allergic sensitization to various substances that cause an inflammatory reaction in the skin of a person with acquired hypersensitivity to allergens as a result of exposure to it in the past. A form of dermatitis.

本明細書において「薬物アレルギーまたは食物アレルギー」とは、薬物または例えばイチゴ、牛乳または卵などの摂取抗原によって起こるアレルギー反応に関するものである。   As used herein, “drug allergy or food allergy” relates to an allergic reaction caused by a drug or an ingested antigen such as strawberry, milk or egg.

本明細書において「気管支肺アスペルギルス症」とは、肺のアスペルギルス感染に関するものである。   As used herein, “bronchopulmonary aspergillosis” refers to pulmonary aspergillosis infection.

本明細書において「肥満細胞症」とは、全身性肥満細胞症、例えば肥満細胞腫、特にイヌ肥満細胞腫瘍に関するものである。   As used herein, “mastocytosis” relates to systemic mastocytosis, such as mastocytoma, particularly canine mast cell tumor.

式Ｉの化合物は下記で「本発明の化合物」と総称される。   The compounds of formula I are generically referred to below as “compounds of the invention”.

肥満細胞は本明細書に記載のアレルギー性疾患において主要エフェクター細胞として重要な役割を果たす。抗原特異的ＩｇＥによって媒介される肥満細胞の脱顆粒は次に化学メディエーターと複数のサイトカインの放出、そしてロイコトリエン合成をもたらす。また、肥満細胞は多発性硬化症の病因にも関与する。   Mast cells play an important role as major effector cells in the allergic diseases described herein. Mast cell degranulation mediated by antigen-specific IgE then leads to the release of chemical mediators and multiple cytokines, and leukotriene synthesis. Mast cells are also involved in the pathogenesis of multiple sclerosis.

肥満細胞腫瘍はヒトおよび動物の双方で発生する。イヌでは肥満細胞腫瘍は肥満細胞腫と呼ばれ、この疾病は多く、イヌの腫瘍の７〜２１％を占める。通常一時的で無痛性のヒト肥満細胞症と、挙動が予測できず、多くの場合進行性、転移性であるイヌ肥満細胞腫とは区別しなければならない。例えば、孤立性のヒト脂肪細胞腫は実質的に転移することはないが、これに対し、Hottendorf & Nielsen (１９６９)が９３８匹のイヌの腫瘍の４６の公表報告を再検証した後に見積もったところ、イヌ肥満細胞腫の５０％は悪性として挙動する。   Mast cell tumors occur in both humans and animals. In dogs, mast cell tumors are called mastocytomas, and this disease is common and accounts for 7-21% of dog tumors. A distinction must be made between human mastocytosis, which is usually transient and indolent, and canine mastocytoma, whose behavior is unpredictable and often progressive and metastatic. For example, isolated human adipoma does not metastasize substantially, whereas Hottendorf & Nielsen (1969) estimated after reviewing 46 published reports of 938 canine tumors. , 50% of canine mastocytomas behave as malignant.

ペット集団における癌は突発性疾患である。自分の動物のライフクォリティーを高めたいと願うペットの飼い主は、国中の個人紹介の動物病院や獣医学教育研究病院で腫瘍学の専門獣医の専門的介護・処置を探し求める場合が多い。癌罹患動物の治療法はヒトと同様であり、外科術、化学療法、放射線療法および生物学的療法が挙げられる。米国には４千２百万匹のイヌ、そしておよそ２千万匹のネコがいると推計されている。ざっと見積もった癌罹患率から、年間イヌでほぼ４百万匹、ネコでも同数が新たに癌と診断されている。   Cancer in the pet population is an idiopathic disease. Pet owners who wish to increase their animal's life quality often seek professional care and treatment by oncology veterinarians at individual referral animal hospitals and veterinary education research hospitals across the country. The treatment of cancer-affected animals is similar to humans and includes surgery, chemotherapy, radiation therapy and biological therapy. It is estimated that there are 42 million dogs and about 20 million cats in the United States. Based on a rough estimate of cancer incidence, approximately 4 million dogs annually and the same number in cats are newly diagnosed with cancer.

イヌの皮膚肥満細胞腫瘍は一般的な問題となっている。ほとんどの肥満細胞腫瘍は良性であって簡単な切除で治癒するが、再発または離れた部位に転移した場合の治療の選択肢は限られている。再発病巣の処置の選択肢としては外部からの光線照射療法が挙げられる。遠位転移または散在疾患では、化学療法プロトコールを含むロムスチン(登録商標)およびビンブラスチンの使用がいくつかの効果を示している。肥満細胞腫瘍の転移部位としては皮膚、局所リンパ節、脾臓、肝臓および骨髄が挙げられる。   Canine cutaneous mast cell tumors are a common problem. Most mast cell tumors are benign and can be cured with simple excision, but treatment options are limited when they recur or metastasize to distant sites. Treatment options for recurrent lesions include external phototherapy. For distal metastases or sporadic disease, the use of Lomustine® and vinblastine, including chemotherapy protocols, has shown some effect. Mast cell tumor metastasis sites include skin, regional lymph nodes, spleen, liver and bone marrow.

いくつかの肥満細胞株でＫＩＴの構成的活性化をもたらすいくつかの突然変異が検出されたという知見により、肥満細胞の病因におけるＫＩＴレセプターの関与が示唆されている。例えば、ホスホトランスフェラーゼドメインのＡｓｐ８１６からＶａｌへの置換とレセプターの自己活性化を引き起こすヒトｃ−ＫＩＴの点突然変異が長期ヒト肥満細胞白血病株(ＨＭＣ−１)および２種の齧歯類肥満細胞株の対応するコドンで見られる。さらに、この活性化突然変異はヒト肥満細胞腫のいくつかの例でｉｎ ｓｉｔｕにて確認されている。他の２つの活性化突然変異、すなわちヒトＨＭＣ−１肥満細胞株におけるＶａｌ５６０Ｇｌｙ置換およびＦＭＡ３と呼ばれる齧歯類肥満細胞株における７つのアミノ酸欠失(Ｔｈｒ５７３−Ｈｉｓ５７９)はＫＩＴの細胞内膜近傍領域に見出されている。   The finding that several mutations leading to constitutive activation of KIT have been detected in several mast cell lines suggests the involvement of the KIT receptor in the pathogenesis of mast cells. For example, the Asc816 to Val substitution of the phosphotransferase domain and the point mutation of human c-KIT that causes receptor self-activation is a long-term human mast cell leukemia line (HMC-1) and two rodent mast cell lines Found in the corresponding codons. Furthermore, this activating mutation has been confirmed in situ in several examples of human mastocytoma. Two other activating mutations, a Val560Gly substitution in the human HMC-1 mast cell line and a seven amino acid deletion (Thr573-His579) in the rodent mast cell line called FMA3, are located in the region near the inner membrane of KIT. Has been found.

本発明の化合物または各場合におけるその医薬上許容される塩が本明細書に記載される疾病の少なくとも１つの効果的な予防、または好ましくは処置をもたらすことは、確立された試験モデルおよび特に本明細書に記載の試験モデルにより示すことができる。当業者ならば、以上および以下に示される治療適応および有益な効果を証明する適切な試験モデルを十分選択することができる。その薬理活性は例えば基本的に以下に記載されるような臨床研究または試験法で証明できる。
パートＡ It is well established that the compounds of the present invention, or pharmaceutically acceptable salts thereof in each case, provide effective prevention, or preferably treatment of the diseases described herein, in particular in established test models. It can be shown by the test model described in the specification. Those skilled in the art are well able to select appropriate test models that demonstrate the therapeutic indications and beneficial effects shown above and below. Its pharmacological activity can be demonstrated, for example, by clinical studies or test methods as basically described below.
Part A

本実施例はKinoshita T, Sawai N, et alのBlood 1999, 94, 496-508に記載の培養系を用いてＣＤ３４^＋臍帯血細胞から確立した培養ヒト肥満細胞増殖のＳＣＦ依存的発達に対する本発明の化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏ作用を証明するものである。フローサイトメトリー分析によれば単離細胞の９０％を超えるものがＣＤ３４陽性であった。 This example demonstrates the present invention for SCF-dependent development of cultured human mast cell proliferation established from CD34 ⁺ umbilical cord blood cells using the culture system described in Kinoshita T, Sawai N, et al. Blood 1999, 94, 496-508. This proves the in vitro action of the compound. According to flow cytometry analysis, more than 90% of the isolated cells were CD34 positive.

試薬および抗体
本発明の化合物を１０^−２Ｍの濃度でＰＢＳに溶解し、−８０℃で保存する。全てｔｒａｎｓのレチノイン酸(Sigma)を１０^−２Ｍの濃度でエタノールに溶解し、遮光バイアルにて−８０℃で保存する。トリプターゼの精製ｍＡｂ(ＭＡＢ１２２２)はChemicon International Inc., CAより購入できる。フローサイトメトリー分析用として、ＣＤ３４(８Ｇ１２, ＦＩＴＣ)およびＣＤ１１ｂ(Ｌｅｕ１５, ＰＥ)のｍＡｂはBecton Dickinson Immunocytometry Systems (Mountain View, CA)から購入し、ＣＤ４１のｍＡｂ(ＳＺ２２, ＦＩＴＣ)はImmunotech S.A. (Marseilles, France)から購入する。グリコホリンＡのｍＡｂ(ＧＰＡ, ＪＣ１５９, ＦＩＴＣ)はDako(Glostrup, Denmark)から入手できる。ウエスタンブロッティングおよび免疫沈降用として、ｃ−ｋｉｔ(ＮＵ−ｃ−ｋｉｔ)およびホスホチロシン(４Ｇ１０)のｍＡｂはそれぞれNichireiおよびUpstate Biotechnology, Inc (Lake Placid, NY)から購入できる。 Reagents and antibodies Compounds of the invention are dissolved in PBS at a concentration of 10 ⁻² M and stored at −80 ° C. All trans retinoic acid (Sigma) is dissolved in ethanol at a concentration of 10 ⁻² M and stored at −80 ° C. in a light-tight vial. Tryptase purified mAb (MAB1222) can be purchased from Chemicon International Inc., CA. For flow cytometry analysis, CD34 (8G12, FITC) and CD11b (Leu15, PE) mAbs were purchased from Becton Dickinson Immunocytometry Systems (Mountain View, CA) and CD41 mAb (SZ22, FITC) was purchased from Immunotech SA (Marseilles , France). Glycophorin A mAb (GPA, JC159, FITC) is available from Dako (Glostrup, Denmark). For Western blotting and immunoprecipitation, c-kit (NU-c-kit) and phosphotyrosine (4G10) mAbs can be purchased from Nichirei and Upstate Biotechnology, Inc (Lake Placid, NY), respectively.

懸濁培養
２４ウェル培養プレート(#3047；Becton Dickinson)にて血清涸渇液体培養を行う。２万個のＣＤ３４^＋細胞を、１％ＢＳＡ、３００μｇ／ｍＬ完全鉄飽和ヒトトランスフェリン(純度およそ９８％, Sigma)、１６μｇ／ｍＬダイズレシチン(Sigma)、９.６μｇ／ｍＬコレステロール(Nakalai Chemicals Ltd., Japan)および２０ｎｇ／ｍＬのＳＣＦ、１０ｎｇ／ｍＬのＧＭ−ＣＳＦ、２Ｕ／ｍＬのＥＰＯ、１０ｎｇ／ｍＬのＴＰＯ、種々の濃度の本発明の化合物の単独または組合せを添加した２ｍＬのα−培地を含む各ウェルで培養する。ＳＣＦに依存する肥満細胞の発達に対する本発明の化合物の作用を調べるため、ＣＤ３４^＋臍帯血細胞由来のＳＣＦ２０ｎｇ／ｍｌで増殖させた１０週目の培養細胞を標的細胞として用いる。５〜１０×１０^４の１０週目の培養細胞を、種々の濃度の本発明の化合物を含む、または含まないＳＣＦ２０ｎｇ／ｍＬを含む２４ウェル培養プレートで２週間インキュベートする。これらのプレートを３７℃、５％ ＣＯ_２、５％ Ｏ_２および９０％ Ｎ_２の混合物でフラッシした加湿雰囲気下でインキュベートする。４週目まで培養を継続する場合は培地の半分を２週間ごとに因子を含む新鮮培地に交換する。生細胞数を血球算定器を用い、トリパンブルー排除によって求める。 Suspension culture Serum-depleted liquid culture is performed in 24-well culture plates (# 3047; Becton Dickinson). Twenty thousand CD34 ⁺ cells were treated with 1% BSA, 300 μg / mL complete iron saturated human transferrin (purity approximately 98%, Sigma), 16 μg / mL soy lecithin (Sigma), 9.6 μg / mL cholesterol (Nakalai Chemicals Ltd. ), 20 ng / mL SCF, 10 ng / mL GM-CSF, 2 U / mL EPO, 10 ng / mL TPO, 2 mL α-medium supplemented with various concentrations of the compounds of the present invention alone or in combination. Incubate in each well containing In order to examine the effect of the compounds of the present invention on the development of mast cells depending on SCF, 10-week cultured cells grown at 20 ng / ml of SCF derived from CD34 ⁺ cord blood cells are used as target cells. Five to 10 × 10 ⁴ week 10 cultured cells are incubated for 2 weeks in 24-well culture plates containing 20 ng / mL SCF with or without various concentrations of the compounds of the invention. The plates _{37 ℃, 5% CO 2,} 5% O 2 and incubated in a humidified atmosphere flushed with a mixture of 90% _{N 2.} If the culture is continued until the fourth week, half of the medium is replaced with a fresh medium containing factors every two weeks. Viable cell count is determined by trypan blue exclusion using a hemocytometer.

クローン細胞培養物
肥満細胞コロニーアッセイは３５ｍＭ Ｌｕｘ懸濁培養ディッシュ(#171099; Nunc, IL)で行う。培養物は１０ｎｇ／ｍＬのＳＣＦ、α−培地、０.９％メチルセルロース(Shinetsu Chemical, Japan)、１％ ＢＳＡ、３００μｇ／ｍＬの完全鉄飽和ヒトトランスフェリン、１６μｇ／ｍＬのダイズレシチン、９.６μｇ／ｍＬのコレステロールおよび１０^−６Ｍの本発明の化合物を含む、または含まない１００ｎｇ／ｍＬのＳＣＦで増殖させた１０週目の培養細胞(４,０００細胞/ｍＬ)からなる。ディッシュを３７℃、５％ ＣＯ_２、５％ Ｏ_２および９０％ Ｎ_２の混合物でフラッシした加湿雰囲気下でインキュベートする。４週間後、３０個以上の細胞からなる塊を肥満細胞コロニーとして数え、１０〜２９細胞からなるものを肥満細胞クラスターとして数える。３０個の個々のコロニーおよびクラスターを採取し、アルカリ性ホスファターゼ抗アルカリホスファターゼ(ＡＰＡＡＰ)法を用いて抗トリプターゼｍＡｂまたはマウスＩｇＧ１で染色する。ほぼ全ての構成細胞がトリプターゼ陽性である。 Clonal cell cultures The mast cell colony assay is performed in 35 mM Lux suspension culture dishes (# 171099; Nunc, IL). The culture was 10 ng / mL SCF, α-medium, 0.9% methylcellulose (Shinetsu Chemical, Japan), 1% BSA, 300 μg / mL fully iron saturated human transferrin, 16 μg / mL soy lecithin, 9.6 μg / mL. mL consisting of cholesterol and ^{10 -6} M of containing the compound of the invention or 10 weeks of culture the cells were grown in 100 ng / mL of SCF free, (4,000 cells / mL). The dishes are incubated in a humidified atmosphere flushed with a mixture of 37 ° C., 5% CO ₂ , 5% O ₂ and 90% N ₂ . After 4 weeks, a mass composed of 30 or more cells is counted as a mast cell colony, and a mass composed of 10-29 cells is counted as a mast cell cluster. Thirty individual colonies and clusters are picked and stained with anti-tryptase mAb or mouse IgG1 using the alkaline phosphatase anti-alkaline phosphatase (APAAP) method. Almost all constituent cells are tryptase positive.

細胞化学的染色と免疫学的染色
サイトスピンＩＩを用いて培養細胞をスライドグラス上に広げる。ペルオキシダーゼ(ＰＯＸ)との細胞化学的反応は従来の方法によって行う。トリプターゼに対するｍＡｂとの反応は、F. Ma, K. Koike, et alがBr. J. Haematol. 1998, 100, 427-35で記載したように、ＡＰＡＡＰ法(Dako APAAP Kit System, Dako Corp., CA)を用いて検出する。 Cytochemical staining and immunological staining Spread the cultured cells on a glass slide using Cytospin II. The cytochemical reaction with peroxidase (POX) is performed by conventional methods. The reaction with mAb against tryptase was carried out by the APAAP method (Dako APAAP Kit System, Dako Corp., as described by F. Ma, K. Koike, et al. In Br. J. Haematol. 1998, 100, 427-35. Detect using CA).

免疫沈降およびウェスタンブロッティング
免疫沈降およびウェスタンブロッティングはT. Kamijo, K. Koike, et al.がLeuk. Res. 1997, 21, 1097-106で記載したようにして行う。 Immunoprecipitation and Western blotting Immunoprecipitation and Western blotting are performed as described by T. Kamijo, K. Koike, et al. In Leuk. Res. 1997, 21, 1097-106.

フローサイトメトリー分析
培養細胞の表面マーカーの分析のため、１〜２×１０^５細胞をプラスチック管に採取し、Kinoshita T, Sawai N, et alがBlood 1999, 94, 496-508で記載したように、適宜希釈したＦＩＴＣ−またはＰＥ−ｍＡｂとともにインキュベートする。細胞を２回洗浄した後、表面マーカーをＦＡＣＳｃａｎフローサイトメーターで分析する。生細胞を前方光散乱特性および側方散乱特性のゲートで制御する。陽性細胞の割合をＦＩＴＣ−またはＰＥコンジュゲートマウスイソ型適合Ｉｇで染色した細胞と比較することにより求める。 Flow cytometric analysis For the analysis of surface markers of cultured cells, 1-2 x 10 ⁵ cells were collected in plastic tubes and as described by Kinoshita T, Sawai N, et al in Blood 1999, 94, 496-508. Incubate with appropriately diluted FITC- or PE-mAb. After washing the cells twice, the surface markers are analyzed on a FACScan flow cytometer. Live cells are controlled by forward and side scatter gates. The percentage of positive cells is determined by comparing to cells stained with FITC- or PE-conjugated mouse isotype matched Ig.

細胞アポトーシスの検出
細胞アポトーシスの分析は、N. Sawai, K. Koike, et alがStem Cells. 1999, 17, 45-53に記載した手順に従いヨウ化プロピジウム(PI, Sigma)を用いるフローサイトメトリー分析によって行う。アポトーシス、壊死を受けている細胞またはすでに死んでいる細胞を少なくするためには、パーコール密度勾配遠心分離を利用できる。１０週目の培養細胞をα−培地中２７％パーコール(Sigma)およびＰＢＳ中５４％パーコールの上に重層する。遠心分離後、２種の異なる濃度のパーコール溶液の境界から細胞を回収し、ＰＢＳで洗浄し、室温で４０分間、１ｍＬのＯｒｔｈｏ ＰｅｒｍｅａＦｉｘ(商標)で処理した。次に細胞をＤＮアーゼフリーＲＮアーゼ(Sigma)とともに３７℃にて１５分間インキュベートし、ＰＩで１５分間染色する。２×１０^４細胞のＤＮＡ含量をフローサイトメーターでモニタリングする。ＳＣＦ、またはＳＣＦおよび本発明の化合物に曝した１０週目の培養細胞(２×１０^６)を１００μＬの低張溶解バッファー[１０ｍＭトリス(ｐＨ７.５)、１０ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ８.０、０.５％トリトンＸ−１００]中、氷上で１０分間溶解する。１４,０００ｇで１０分間遠心分離した後、上清を新しい試験管に移し、０.２ｍｇ／ｍＬ ＲＮアーゼＡ(Sigma)および０.２ｍｇ／ｍＬプロテイナーゼＫ(Sigma)で処理する。ＤＮＡを−２０℃にて一晩、１２０μＬイソプロパノールおよび２０μＬ ５Ｍ ＮａＣｌで沈降させる。１４,０００ｇで遠心分離した後、ペレットを乾燥させ、２０μＬトリス−ＥＤＴＡに溶解した後、２％アガロースにてゲル電気泳動によりサンプルを分析し、臭化エチジウム染色する。 Cell Apoptosis Detection Cell apoptosis was analyzed by flow cytometric analysis using propidium iodide (PI, Sigma) according to the procedure described by N. Sawai, K. Koike, et al. In Stem Cells. 1999, 17, 45-53. Do by. Percoll density gradient centrifugation can be used to reduce cells undergoing apoptosis, necrosis, or cells that are already dead. Cultured cells at 10 weeks are layered on 27% percoll (Sigma) in α-medium and 54% percoll in PBS. After centrifugation, cells were collected from the boundary between two different concentrations of Percoll solution, washed with PBS, and treated with 1 mL Ortho PermeFix ™ for 40 minutes at room temperature. Cells are then incubated with DNase-free RNase (Sigma) for 15 minutes at 37 ° C. and stained with PI for 15 minutes. Monitor the DNA content of 2 × 10 ⁴ cells with a flow cytometer. Ten weeks of cultured cells (2 × 10 ⁶ ) exposed to SCF, or SCF and a compound of the present invention, 100 μL of hypotonic lysis buffer [10 mM Tris (pH 7.5), 10 mM EDTA, pH 8.0, 0.5 % Triton X-100] for 10 minutes on ice. After centrifugation at 14,000 g for 10 minutes, the supernatant is transferred to a new tube and treated with 0.2 mg / mL RNase A (Sigma) and 0.2 mg / mL proteinase K (Sigma). The DNA is precipitated with 120 μL isopropanol and 20 μL 5M NaCl overnight at −20 ° C. After centrifugation at 14,000 g, the pellet is dried and dissolved in 20 μL Tris-EDTA, then the sample is analyzed by gel electrophoresis with 2% agarose and stained with ethidium bromide.

ヒスタミン、トリプターゼおよびサイトカインレベルのアッセイ
培養細胞の０.５％ Ｎｏｎｉｄｅｔ Ｐ−４０処理により得られた細胞溶解物中および上清中のヒスタミン濃度を、Kinoshita T, Sawai N, et alがBlood １９９９, ９４, ４９６−５０８で記載したようにヒスタミンラジオイムノアッセイ(RIA)キット(Immunotech)によって測定する。 Assay for Histamine, Tryptase and Cytokine Levels The histamine concentration in cell lysates and supernatants obtained from 0.5% Nonidet P-40 treatment of cultured cells was determined by Kinoshita T, Sawai N, et al, Blood 1999, 94. , 494-508, by the histamine radioimmunoassay (RIA) kit (Immunotech).

統計分析
実験は全て３回行わなければならない。２つの独立した群の間の差の有意性を判定するには片側ｔ検定が使用でき、あるいはデータが正規分布しない場合には、Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ−Ｕ検定が使用できる。 Statistical analysis All experiments must be performed in triplicate. A one-sided t-test can be used to determine the significance of differences between two independent groups, or the Mann-Whitney-U test can be used if the data are not normally distributed.

Ｎ−{５−[４−(４−メチル−ピペラジノ−メチル)−ベンゾイルアミド]−２−メチル−フェニル}−４−(３−ピリジル)−２−ピリミジン−アミン一メシル酸(ＳＴＩ５７１Ｂ)に関して得られる結果
１０^−６Ｍ以上のＳＴＩ５７１ＢをＳＣＦとともに培養物に添加すると次世代はほぼ完全に阻害される。
ＳＣＦ＋ＳＴＩ５７１Ｂでは、２日目では生細胞数は変化せず、その後経時的に減少する。１４日目、細胞総数は無視できるレベルに達する。１０週目の培養肥満細胞で得られた結果に一致して、１０^−６ＭのＳＴＩ５７１ＢはＳＣＦの刺激下でのＣＤ３４^＋細胞による細胞産生を著しく抑制する。さらに、ＳＴＩ５７１ＢはＳＣＦの刺激下で増殖させた培養肥満細胞のプログラムされた細胞死を誘導する。二倍体に満たない核のパーセンテージは培養期間とともに増加する。この知見はゲル電気泳動にてＳＣＦ＋ＳＴＩ５７１Ｂに曝された細胞におけるＤＮＡラダーによって確認することができる。ＳＴＩ５７１Ｂは肥満細胞の発達初期ならびに後期出現肥満細胞の増殖においてその阻害作用を発揮する。 Obtained for N- {5- [4- (4-methyl-piperazino-methyl) -benzoylamido] -2-methyl-phenyl} -4- (3-pyridyl) -2-pyrimidin-amine monomesylic acid (STI571B) Results When the STI571B of 10 ⁻⁶ M or more is added to the culture together with SCF, the next generation is almost completely inhibited.
In SCF + STI571B, the number of viable cells does not change on the second day and then decreases with time. On day 14, the total number of cells reaches a negligible level. Consistent with the results obtained with 10-week cultured mast cells, 10 ⁻⁶ M STI571B significantly suppresses cell production by CD34 ⁺ cells under SCF stimulation. Furthermore, STI571B induces programmed cell death of cultured mast cells grown under SCF stimulation. The percentage of nuclei that are less than diploid increases with the culture period. This finding can be confirmed by DNA ladder in cells exposed to SCF + STI571B by gel electrophoresis. STI571B exerts its inhibitory effect on the growth of mast cells in early and late stages of mast cell development.

得られた結果は本発明の化合物、例えばＳＴＩ５７１Ｂ によるＳＣＦ依存性のヒト肥満細胞増殖の阻害を証明するものである。よって、本発明の化合物が本明細書に記載の疾病の処置に使用できることが示される。
パートＢ： 肥満細胞症 The results obtained demonstrate the inhibition of SCF-dependent human mast cell proliferation by compounds of the invention, such as STI571B. Thus, it is shown that the compounds of the invention can be used for the treatment of the diseases described herein.
Part B: Mastocytosis

方法
試薬：これらの実験に用いる塩Ｉは、Novartis Pharma; Basel, Switzerlandからのものである。各実験の前に、リン酸緩衝生理食塩水(PBS; Gibco-BRL)１ｍｌに化合物を溶解することで阻害剤の新鮮な１０ｍＭ母液を作製した。 Methods Reagents: Salt I used in these experiments is from Novartis Pharma; Basel, Switzerland. Prior to each experiment, a fresh 10 mM mother liquor of the inhibitor was made by dissolving the compound in 1 ml of phosphate buffered saline (PBS; Gibco-BRL).

抗体：ポリクローナルウサギ抗ＫＩＴ抗体(c-kit Ab-1)は１：５００の希釈率で用いた(c-kit Ab-1; Oncogene, Cambridge, MA)。抗ホスホチロシン抗体(PY20)は１：１０００の希釈率で用いた(PY20 Transduction Laboratories；Lexington, KY)。ペルオキシダーゼ結合ヤギ抗マウス抗体は１：５０００の希釈率で用い、ヤギ抗ウサギ抗体は１：１０,０００の希釈率で用いた(Pierce; Rockford, IL)。 Antibody: Polyclonal rabbit anti-KIT antibody (c-kit Ab-1) was used at a dilution of 1: 500 (c-kit Ab-1; Oncogene, Cambridge, MA). Anti-phosphotyrosine antibody (PY20) was used at a dilution of 1: 1000 (PY20 Transduction Laboratories; Lexington, KY). Peroxidase-conjugated goat anti-mouse antibody was used at a dilution of 1: 5000, and goat anti-rabbit antibody was used at a dilution of 1: 10,000 (Pierce; Rockford, IL).

細胞株：ＢＲおよびＣ２イヌ肥満細胞腫細胞株はDr. George Caughey (University of California at San Francisco, San Francisco, CA)から入手した。両細胞株は２％ ウシ胎児血清、１ｍＭ Ｌ−グルタミン、１２.５ｍＭ ＨＥＰＥＳ (ｐＨ７.５)、０.２５ｍｇ／ｍｌヒスチジン、１％ペニシリン−ストレプトマイシンおよび１％フンギゾンを添加したＤＭＥＭ中で維持した。このＢＲおよびＣ２細胞はイヌ肥満細胞腫瘍由来のものであり、免疫欠陥マウスで初期継代した後、長期培養して独自に確立されたものである(DeVinney R et al., Am J Respir Cell Mol Biol 1990; 3(5): 413-420; Lazarus SC et al., Am J Physiol 1986; 251(6 Pt 1): C935-C944)。ＢＲ細胞株は点突然変異(Ｔ１７５２Ｃ)を有し、その結果、５７５番のアミノ酸(膜近傍ドメイン)でロイシンからプロリンに置換されている。Ｃ２細胞株はＫＩＴ膜近傍領域の内部タンデム重複(ＩＴＤ)を有する。このＩＴＤが翻訳されるとエクソン１１の３'末端でアミノ酸残基の再重複が起こる(London CA et al., Exp Hematol 1999; 27(4): 689-697; Ma Yet al., J Invest Dermatol 1999; 112(2): 165-170)。 Cell lines: BR and C2 canine mastocytoma cell lines were obtained from Dr. George Caughey (University of California at San Francisco, San Francisco, Calif.). Both cell lines were maintained in DMEM supplemented with 2% fetal bovine serum, 1 mM L-glutamine, 12.5 mM HEPES (pH 7.5), 0.25 mg / ml histidine, 1% penicillin-streptomycin and 1% fungizone. These BR and C2 cells are derived from canine mast cell tumors and were originally established by long-term culture after initial passage in immune-deficient mice (DeVinney R et al., Am J Respir Cell Mol. Biol 1990; 3 (5): 413-420; Lazarus SC et al., Am J Physiol 1986; 251 (6 Pt 1): C935-C944). The BR cell line has a point mutation (T1752C), which results in a substitution of leucine to proline at amino acid 575 (near membrane domain). The C2 cell line has an internal tandem duplication (ITD) in the region near the KIT membrane. When this ITD is translated, re-duplication of amino acid residues occurs at the 3 ′ end of exon 11 (London CA et al., Exp Hematol 1999; 27 (4): 689-697; Ma Yet al., J Invest Dermatol 1999; 112 (2): 165-170).

増殖アッセイ：９６ウェルプレートに通常培地および種々の濃度の塩Ｉ中、４０,０００細胞/ウェルの濃度で細胞を加えた。４８〜７２時間目にＸＴＴに基づくアッセイ(Roche Molecular Biochemicals; Indianapolis, IN)を用いて増殖を測定した(Heinrich MC et al., Blood 2000; 96(3): 925-932)。 Proliferation assay: Cells were added to 96-well plates at a concentration of 40,000 cells / well in normal medium and various concentrations of salt I. Proliferation was measured at 48-72 hours using an XTT-based assay (Roche Molecular Biochemicals; Indianapolis, IN) (Heinrich MC et al., Blood 2000; 96 (3): 925-932).

タンパク質溶解物：ＢＲおよびＣ２細胞をＰＢＳで２回洗浄した後、３７℃で約１８時間Ｏｐｔｉｍｅｍ(Gibco-BRL)中で休止させた。次に細胞を種々の濃度の塩Ｉの存在下で９０分間インキュベートした。このインキュベーション後、細胞をペレット化し、１００〜２５０μlのタンパク質溶解バッファー(５０ｍＭトリス、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１％ ＮＰ−４０、０.２５％デオキシコレート、さらに阻害剤アプロチニン、ロイペプチン、ペプスタチン、ＰＭＳＦ、およびオルトバナジン酸ナトリウム[Sigma]を添加)を用いて溶解した。ウエスタン免疫ブロット解析はこれまでに記載されている通り行った(Hoatlin MEet al., Blood 1998; 91(4): 1418-1425; Heinrich MC et al., Blood 2000; 96(3): 925-932)。 Protein lysate: BR and C2 cells were washed twice with PBS and then rested in Optimem (Gibco-BRL) at 37 ° C. for about 18 hours. The cells were then incubated for 90 minutes in the presence of various concentrations of salt I. After this incubation, the cells are pelleted and 100-250 μl protein lysis buffer (50 mM Tris, 150 mM NaCl, 1% NP-40, 0.25% deoxycholate, plus the inhibitors aprotinin, leupeptin, pepstatin, PMSF, and orthovanadine. Dissolved with sodium acid [Sigma]). Western immunoblot analysis was performed as previously described (Hoatlin ME et al., Blood 1998; 91 (4): 1418-1425; Heinrich MC et al., Blood 2000; 96 (3): 925-932 ).

化合物Ｉはイヌ肥満細胞腫瘍に関連する構成的活性化ＫＩＴキナーゼを阻害する
化合物Ｉが変異型イヌＫＩＴのキナーゼ活性を阻害する効力を調べるため、発明者らは２種の異なる構成的活性化ＫＩＴイソ型を発現する２種の細胞株(ＢＲおよびＣ２)を用いた。これらの細胞株におけるＫＩＴ突然変異はいずれも膜近傍ドメインに位置し、ヒト胃腸間質腫瘍(ＧＩＳＴ)で見られる突然変異と同種である(Lux ML et al., Am J Pathol 2000; 156(3): 791-795; Rubin BP et al., Cancer Res 2001; 61(22): 8118-8121)。ＢＲまたはＣ２細胞から調製した溶解液を抗Ｐ−Ｔｙｒ抗体でプロービングし、ＫＩＴレセプターの活性化を自己リン酸化を測定することで評価した。これまでに報告されているように、ＳＬＦの不在下でこれらの細胞におけるＫＩＴ自己リン酸化が見られた(Ma Yet al., J Invest Dermatol 1999; 112(2): 165-170; Ma Yet al., Journal of Investigative Dermatology 2000; 114(2): 392-394)。化合物ＩによるＫＩＴ自己リン酸化の阻害は１０および１.０μＭ量を用いた場合に見られる完全阻害に依存的であった。０.１μＭ量を用いた場合でほぼ完全な阻害が見られた。０.００１〜０.０１μＭ量の化合物Ｉを用いた場合にはｃ−ｋｉｔのリン酸化は限られたものであった。このように化合物Ｉはこれらの細胞における変異型ｃ−ｋｉｔレセプターの自己リン酸化を阻害するだけでなく、野生型ｃ−ｋｉｔレセプターの阻害剤というよりこの変異型レセプターのより強力な阻害剤である(ＩＣ_５０ １００〜２００ｎＭ)(Heinrich MC et al., Blood 2000; 96(3): 925-932)。化合物ＩがＫＩＴタンパク質発現を調節したかどうかを判定するため、膜をはがして抗ｃ−ｋｉｔ抗体で再びプロービングした。化合物Ｉで処理した細胞でのｃ−ｋｉｔタンパク質の発現に変化はなかった。従って、化合物ＩはＫＩＴタンパク質の発現をダウンレギュレートすることではなくＫＩＴキナーゼ活性を阻害することにより変異型イヌＫＩＴポリペプチドの自己リン酸化を低下させる。 Compound I Inhibits Constitutively Activated KIT Kinase Associated with Canine Mast Cell Tumors To examine the efficacy of Compound I in inhibiting the kinase activity of mutant canine KIT, we have two different constitutively activated KITs. Two cell lines (BR and C2) expressing isoforms were used. All of the KIT mutations in these cell lines are located in the near-membrane domain and are homologous to the mutations found in human gastrointestinal stromal tumors (GIST) (Lux ML et al., Am J Pathol 2000; 156 (3 ): 791-795; Rubin BP et al., Cancer Res 2001; 61 (22): 8118-8121). Lysates prepared from BR or C2 cells were probed with anti-P-Tyr antibody and KIT receptor activation was assessed by measuring autophosphorylation. As previously reported, KIT autophosphorylation was observed in these cells in the absence of SLF (Ma Yet al., J Invest Dermatol 1999; 112 (2): 165-170; Ma Yet al ., Journal of Investigative Dermatology 2000; 114 (2): 392-394). Inhibition of KIT autophosphorylation by Compound I was dependent on the complete inhibition seen with 10 and 1.0 μM doses. Almost complete inhibition was seen when the 0.1 μM amount was used. When 0.001 to 0.01 μM of Compound I was used, phosphorylation of c-kit was limited. Thus, Compound I not only inhibits autophosphorylation of the mutant c-kit receptor in these cells, but is a more potent inhibitor of this mutant receptor than an inhibitor of the wild type c-kit receptor. (IC ₅₀ 100-200 nM) (Heinrich MC et al., Blood 2000; 96 (3): 925-932). To determine if Compound I modulated KIT protein expression, the membrane was peeled and reprobed with anti-c-kit antibody. There was no change in the expression of c-kit protein in cells treated with Compound I. Thus, Compound I decreases autophosphorylation of mutant canine KIT polypeptides by inhibiting KIT kinase activity rather than down-regulating KIT protein expression.

化合物Ｉはイヌ肥満細胞腫瘍細胞株の増殖を阻害する
変異型ｃ−ｋｉｔレセプターのキナーゼ活性を阻害する生物作用を調べるため、発明者らはＢＲまたはＣ２細胞を種々の濃度の化合物Ｉの存在下で４８〜７２時間培養した。阻害剤濃度０.１〜１０μＭで増殖は、培地のみで処理した細胞に比べ９０〜９５％低下した。化合物Ｉ ０.００１〜０.０１μＭ量では部分的な増殖阻害が見られた。０.０１〜１０μＭ量の阻害剤で見られた増殖低下は統計学的に有意であった(ｐ＜０.００１)。従って、化合物Ｉはレセプターの自己リン酸化の阻害に関して見られたものと同様の用量応答範囲でＢＲおよびＣ２細胞の増殖を阻害する。阻害剤で処理した細胞の形態観察を行ったところアポトーシスと一致する変化が明らかになった(データは示されていない)。
表１：ＢＲ細胞

Compound I Inhibits the Growth of Canine Mast Cell Tumor Cell Lines In order to investigate the biological effects of inhibiting the kinase activity of mutant c-kit receptors, we investigated BR or C2 cells in the presence of various concentrations of Compound I. For 48 to 72 hours. Growth at an inhibitor concentration of 0.1-10 μM was reduced by 90-95% compared to cells treated with medium alone. Partial growth inhibition was seen with Compound I 0.001 to 0.01 μM. The growth reduction seen with 0.01-10 μM amounts of inhibitor was statistically significant (p <0.001). Thus, Compound I inhibits BR and C2 cell proliferation in a dose response range similar to that seen for inhibition of receptor autophosphorylation. Observation of the morphology of cells treated with inhibitors revealed changes consistent with apoptosis (data not shown).
Table 1: BR cells

表２：Ｃ２細胞

Table 2: C2 cells

表１および２：ＢＲまたはＣ２細胞を４０,０００細胞/ウェルの濃度で９６ウェルプレートにプレーティングし、通常の増殖培地および種々の濃度の化合物Ｉ中で培養した。７２時間後、ＸＴＴに基づくアッセイ系を用いて細胞増殖を測定した。各化合物Ｉ濃度につき３回アッセイした。結果は最大増殖(細胞単独で化合物１を含まない)のパーセンテージ±１標準偏差として表した。６回の独立した実験のうちの１回で得られた典型的な結果を示す。
ペット用およびヒト用組成物 Tables 1 and 2: BR or C2 cells were plated in 96 well plates at a concentration of 40,000 cells / well and cultured in normal growth medium and various concentrations of Compound I. After 72 hours, cell proliferation was measured using an XTT based assay system. Three assays were performed for each Compound I concentration. Results were expressed as percentage of maximal proliferation (cells alone without Compound 1) ± 1 standard deviation. Shown is a typical result obtained in one of six independent experiments.
Pet and human compositions

４−[(４−メチル−１−ピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−[４−メチル−３−[[４−(３−ピリジニル)−２−ピリミジニル]アミノ]フェニル]ベンズアミドメタンスルホネートβ結晶型を含むカプセル
化合物Ｉ(遊離塩基)１０ｍｇ相当の１１.９５mgの標題化合物(塩Ｉ)を有効物質として含有するカプセルを以下の組成で調製する。
組成：

カプセルはこれらの成分を混合し、その混合物をゼラチン硬カプセル、サイズ１に充填することで作製した。 4-[(4-Methyl-1-piperazin-1-ylmethyl) -N- [4-methyl-3-[[4- (3-pyridinyl) -2-pyrimidinyl] amino] phenyl] benzamide methanesulfonate β crystal form A capsule containing 11.95 mg of the title compound (salt I) corresponding to 10 mg of compound I (free base) as an active substance is prepared with the following composition.
composition:

Capsules were made by mixing these ingredients and filling the mixture into hard gelatin capsules, size 1.

４−[(４−メチル−１−ピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−[４−メチル−３−[[４−(３−ピリジニル)−２−ピリミジニル]アミノ]フェニル]ベンズアミドメタンスルホネートβ結晶型を含むカプセル
１０.０ｍｇの標題化合物(塩Ｉ)を有効物質として含有するカプセルを以下の組成で調製する。
組成：

カプセルはこれらの成分を混合し、その混合物をゼラチン硬カプセル、サイズ１に充填することで作製した。 4-[(4-Methyl-1-piperazin-1-ylmethyl) -N- [4-methyl-3-[[4- (3-pyridinyl) -2-pyrimidinyl] amino] phenyl] benzamide methanesulfonate β crystal form A capsule containing 10.0 mg of the title compound (salt I) as an active substance is prepared with the following composition.
composition:

Capsules were made by mixing these ingredients and filling the mixture into hard gelatin capsules, size 1.

４−[(４−メチル−１−ピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−[４−メチル−３−[[４−(３−ピリジニル)−２−ピリミジニル]アミノ]フェニル]ベンズアミドメタンスルホネートβ結晶型を含むカプセル
化合物Ｉ(遊離塩基)１００ｍｇ相当の１１９.５ｍｇの標題化合物(化合物Ｉのメシル酸塩)を有効物質として含有するカプセルを以下の組成で調製する。
組成：

カプセルはこれらの成分を混合し、その混合物をゼラチン硬カプセル、サイズ１に充填することで作製した。 4-[(4-Methyl-1-piperazin-1-ylmethyl) -N- [4-methyl-3-[[4- (3-pyridinyl) -2-pyrimidinyl] amino] phenyl] benzamide methanesulfonate β crystal form A capsule containing 119.5 mg of the title compound (mesylate salt of Compound I) corresponding to 100 mg of Compound I (free base) as an active substance is prepared with the following composition.
composition:

Capsules were made by mixing these ingredients and filling the mixture into hard gelatin capsules, size 1.

測定可能な皮膚の肥満細胞腫瘍を有するペット犬の予測症例の例
被験体は測定可能で組織学的に確認される肥満細胞腫瘍を有するペット犬である。生検が可能で測定可能な病巣を有するものに限る。
適格基準は次の通りである。
・組織学的に確認される測定可能な皮膚肥満細胞腫瘍
・療法前後に２ｍｍキーズパンチで一連の生検が必要な場合
・組織学的等級(II−中間型またはIII−分化不十分)
・一般全身状態０またはI(改変型カルノフスキー−表３)
・インフォームド・オーナー・コンセント Example of a predictive case of a pet dog with a measurable cutaneous mast cell tumor The subject is a pet dog with a measurable and histologically confirmed mast cell tumor. Limited to biopsies that have measurable lesions.
The eligibility criteria are as follows:
・ Measurable cutaneous mast cell tumor confirmed histologically ・ When a series of biopsies are required with 2mm key punch before and after therapy ・ Histological grade (II-intermediate type or III-insufficient differentiation)
General general condition 0 or I (modified Karnovsky-Table 3)
・ Informed owner outlet

(a)排除基準は次の通りである。
・細胞傷害性化学療法を伴う場合
・３０日の試験期間内にプレドニソンおよび非ステロイド系抗炎症薬が始められない場合。プレドニソンおよび非ステロイド系抗炎症薬が３０日を過ぎて投与された場合には継続してもよい。
・血清胆汁酸試験(肝機能)が異常な場合
表３：一般全身状態(改変型カルノフスキー)

(a) Exclusion criteria are as follows.
• With cytotoxic chemotherapy • When prednisone and non-steroidal anti-inflammatory drugs cannot be initiated within the 30 day study period. Prednisone and nonsteroidal anti-inflammatory drugs may be continued if administered over 30 days.
・ When serum bile acid test (liver function) is abnormal Table 3: General systemic condition (modified Karnofsky)

全てのケースの前処理評価には身体検査、完全血球総数、軟膜、血清生化学、検尿、血清胆汁酸(絶食中および食事後)、局部リンパ節サイズの記録、腹部レントゲン写真、および腹部超音波が含まれる。処置計画は２５ｍｇ／ｋｇ ＰＯ ＱＤ×６０日の塩Ｉとする。   Pretreatment assessments in all cases included physical examination, complete blood count, buffy coat, serum biochemistry, urinalysis, serum bile acid (fasting and after meal), local lymph node size recording, abdominal x-ray, and abdominal ultrasound Is included. The treatment plan is 25 mg / kg PO QD × 60 days of salt I.

疾病の進行が見られなければ全てのケースにおいて処置を６０日続ける。部分応答または完全応答が見られる場合、さらに６０日の治療を進めることが考えられる。上手く治療が全うできた場合は反復試験に入るに適格なものとなる。
表４：処置および臨床評価プラン

^１ 第一段階は身体検査、ＣＢＣ、軟膜、血清生化学、肝機能試験(血清胆汁酸)、検尿、腹部レントゲン写真、および腹部超音波からなる。再評価は身体検査および腫瘍荷重の測定のみか、あるいは臨床段階の繰り返しからなり得る。
^２ 腫瘍荷重は０、７、１４、２８日目、以降は１４日毎に測定する。処置応答は測定可能な皮膚病巣およびその他の病巣で段階識別して判定する(ＣＲ、ＰＲ、ＳＤ、ＰＤ−下記に定義)。
^３ 最初の５つの試験開始例からの血漿採取は１回目の塩Ｉ投与後０、０.５、１、２、５、８、１２、１６、２４時間目に行う。
^４ 全てのケースから０日目と２８日目に所定の測定可能な病巣から切開生検を採取する。部分応答(ＰＲ)時および目標とする完全応答(ＣＲ)後にさらなる生検を採取する。 If no disease progression is seen, treatment is continued for 60 days in all cases. If a partial or complete response is seen, it is possible to proceed with an additional 60 days of treatment. A successful treatment will qualify for a repeat study.
Table 4: Treatment and clinical evaluation plans

¹ The first stage consists of physical examination, CBC, buffy coat, serum biochemistry, liver function test (serum bile acid), urinalysis, abdominal radiograph, and abdominal ultrasound. Reassessment can consist only of physical examination and measurement of tumor weight, or it can consist of repeated clinical phases.
² Tumor load is measured on days 0, 7, 14, 28 and every 14 days thereafter. Treatment response is staged and determined by measurable skin lesions and other lesions (CR, PR, SD, PD—defined below).
³ Plasma collection from the first 5 trials is performed at 0, 0.5, 1, 2, 5, 8, 12, 16, 24 hours after the first salt I administration.
^4. Incision biopsies are taken from predetermined measurable lesions on days 0 and 28 from all ⁴ cases. Additional biopsies are taken at partial response (PR) and after targeted complete response (CR).

化合物Ｉの効力は臨床終点を用い、測定可能な皮膚肥満細胞腫瘍で評価する。生物学的終点は皮膚腫瘍から採取した一連の生検および処置経過を通じて利用できる血液サンプルから引き出せる。   Compound I efficacy is assessed in measurable cutaneous mast cell tumors using clinical endpoints. Biological endpoints can be derived from a series of biopsies taken from skin tumors and blood samples available throughout the course of treatment.

臨床終点としては測定可能な腫瘍の応答率、測定可能な腫瘍に対する目標応答、および測定可能な腫瘍の進行時間が挙げられる。全ての副作用を記録する。   Clinical endpoints include measurable tumor response rate, measurable target response to tumor, and measurable tumor progression time. Record all side effects.

下記に定義されるような「目標腫瘍応答」は化合物Ｉでの処置下で見られ、処置計画の効力を示す。   A “target tumor response” as defined below is seen under treatment with Compound I and indicates the efficacy of the treatment regimen.

特に化合物Ｉ処理に対する完全応答および部分応答が見られ得る。また、処置を受けた動物の多くが安定疾病を示し、少数が進行性の疾病を示すことが見られる場合がある。また、非処置動物に比べて少ない処置動物が再発を示すことが見られる場合もある。化合物Ｉでの処置下の動物では進行時間、緩解期間および生存は高まり得る。   In particular, complete and partial responses to Compound I treatment can be seen. It may also be seen that many of the treated animals show stable disease and a few show progressive disease. It may also be seen that fewer treated animals show recurrence compared to untreated animals. Progression time, remission period and survival may be increased in animals treated with Compound I.

「完全応答(ＣＲ)」とは、癌の全臨床証拠および癌関連のいずれの徴候もなくなることと定義される。   “Complete response (CR)” is defined as the elimination of all clinical evidence of cancer and any signs of cancer.

「部分応答(ＰＲ)」とは、いずれの病巣も大きくならず、あるいはいずれの新しい病巣も出現せず、典型的な病巣の測定値の和が５０％以上低下することと定義される。   “Partial response (PR)” is defined as the absence of any lesion or the appearance of any new lesion and a reduction in the sum of typical lesion measurements by 50% or more.

「安定疾病(ＳＤ)」とは、全く応答しないか、あるいは部分応答またはいずれの新しい病巣も出現せず、もしくは臨床徴候の悪化のない進行性疾病に関して定義されたものよりも低い応答と定義される。   “Stable disease (SD)” is defined as a response lower than that defined for progressive disease with no response or no partial response or any new lesions or worsening of clinical signs. The

「進行性疾病(ＰＤ)」とは、いずれかの測定可能な病巣の大きさが少なくとも５０％明らかに増大すること、または新しい病巣が出現することと定義される。   “Progressive disease (PD)” is defined as an apparent increase in the size of any measurable lesion by at least 50%, or the appearance of a new lesion.

「再発(Ｒ)」とは、完全応答を示していたイヌにおける新しい病巣の出現、または古い病巣の再出現として定義され、部分応答のみを示していたイヌでは、再発は最大応答時に得られた測定値と比べて、典型的な病巣の測定値の和が少なくとも５０％増加することと定義される。   “Relapse (R)” is defined as the emergence of new lesions in dogs that showed a complete response, or the reappearance of old lesions, and in dogs that showed only a partial response, recurrence was obtained at the maximum response. The sum of typical lesion measurements is defined as an increase of at least 50% compared to the measurements.

「進行時間(ＴＴＰ)」は本プロトコールの０日目から記録する。ＴＴＰは治療開始(０日目)から再発(Ｒ)までの日数として定義される。   “Progression time (TTP)” is recorded from day 0 of this protocol. TTP is defined as the number of days from the start of treatment (day 0) to recurrence (R).

「緩解期間」とは、目標応答(ＰＲまたはＣＲ)から再発までの日数として定義される。   “Remission period” is defined as the number of days from target response (PR or CR) to recurrence.

「生存」とは、化合物Ｉ処理開始から死に至るまでの日数として定義される。死因を記録するが、これには疾病の進行、毒性その他が含まれる。   “Survival” is defined as the number of days from the start of Compound I treatment to death. Record the cause of death, including disease progression, toxicity, etc.

得られた結果は本発明の化合物、例えばＳＴＩ５７１Ｂによる肥満細胞腫瘍の阻害を示す。   The results obtained show inhibition of mast cell tumors by compounds of the invention, such as STI571B.

Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８基の１つまたは２つが各々ニトロまたは式ＩＩ｛式中、Ｒ_９は水素または低級アルキルであり、Ｘはオキソ、チオ、イミノ、Ｎ−低級アルキル−イミノ、ヒドロキシイミノまたはＯ−低級アルキル−ヒドロキシイミノであり、Ｙは酸素またはＮＨ基であり、ｎは０または１であり、かつ、Ｒ_１０は少なくとも５個の炭素原子を有する脂肪族基、または芳香族、芳香−脂肪族、シクロ脂肪族、シクロ脂肪−脂肪族、複素環式もしくは複素環式脂肪族基である｝の基であり、
残りのＲ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８基が各々他とは独立に水素；非置換、または遊離もしくはアルキル化アミノ、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニルまたはモルホリニルにより置換されている低級アルキル；あるいは低級アルカノイル；トリフルオロメチル；遊離、エーテル化もしくはエステル化ヒドロキシ；遊離、アルキル化もしくはアシル化アミノ、または遊離もしくはエステル化カルボキシであり、
残りの置換基が上記定義の通りである
本発明の化合物が好ましい。 One or two of the R ₄ , R ₅ , R ₆ , R ₇ and R ₈ groups are each nitro or formula II {wherein R ₉ is hydrogen or lower alkyl; X is oxo, thio, imino, N— Lower alkyl-imino, hydroxyimino or O-lower alkyl-hydroxyimino, Y is an oxygen or NH group, n is 0 or 1, and R ₁₀ is an aliphatic having at least 5 carbon atoms A group, or an aromatic, aromatic-aliphatic, cycloaliphatic, cycloaliphatic-aliphatic, heterocyclic or heterocyclic aliphatic group},
Lower alkyl wherein the remaining R ₄ , R ₅ , R ₆ , R ₇ and R ₈ groups are each independently hydrogen; unsubstituted or substituted by free or alkylated amino, piperazinyl, piperidinyl, pyrrolidinyl or morpholinyl Or lower alkanoyl; trifluoromethyl; free, etherified or esterified hydroxy; free, alkylated or acylated amino, or free or esterified carboxy;
Preference is given to compounds of the invention in which the remaining substituents are as defined above.

Ｒ_１が、各々炭素原子において結合しているピリジルまたはＮ−オキシド−ピリジルであり、
Ｒ_２およびＲ_３が各々水素であり、
Ｒ_４が水素または低級アルキルであり、
Ｒ_５が水素、低級アルキルまたはトリフルオロメチルであり、
Ｒ_６が水素であり、
Ｒ_７がニトロ、フルオロ−置換低級アルコキシまたは式ＩＩ｛式中、Ｒ_９は水素であり、Ｘはオキソであり、ｎは０であり、かつ、Ｒ_１０は炭素原子において結合しているピリジル、置換されていなくとも、あるいはハロゲン、シアノ、低級アルコキシ、カルボキシ、低級アルキルまたは４−メチル−ピペラジニル−メチルによって置換されていてもよいフェニル、またはＣ_５−Ｃ_７アルキル、チエニル、２−ナフチルまたはシクロヘキシルである｝の基であり、かつ、
Ｒ_８が水素である
本発明の化合物が特に好ましい。 R ₁ is pyridyl or N- oxides bonded in each carbon atom - is pyridyl,
R ₂ and R ₃ are each hydrogen;
R ₄ is hydrogen or lower alkyl,
R ₅ is hydrogen, lower alkyl or trifluoromethyl;
R ₆ is hydrogen;
R ₇ is nitro, fluoro-substituted lower alkoxy or Formula II {wherein R ₉ is hydrogen, X is oxo, n is 0, and R ₁₀ is pyridyl bonded at a carbon atom, need not be substituted, or halogen, cyano, lower alkoxy, carboxy, lower alkyl or 4-methyl - piperazinyl - phenyl optionally substituted by methyl or C ₅ -C ₇ alkyl, thienyl, 2-naphthyl or cyclohexyl Is a group, and
Especially preferred are compounds of the invention wherein R ₈ is hydrogen.

Ｒ_４およびＲ_８基の少なくとも一方が低級アルキルであり、残りの置換基が上記定義の通りである、本発明の化合物が特に好ましい。 Particularly preferred are compounds of the invention in which at least one of the R ₄ and R ₈ groups is lower alkyl and the remaining substituents are as defined above.

Ｒ_１が炭素原子において結合しているピリジルであり、
Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_５、Ｒ_６およびＲ_８基が各々水素であり、
Ｒ_４が低級アルキルであり、
Ｒ_７が式ＩＩ｛式中、Ｒ_９は水素であり、Ｘはオキソであり、ｎは０であり、かつ、Ｒ_１０は４−メチル−ピペラジニル−メチルである｝の基である
本発明の化合物がとりわけ好ましい。 R ₁ is pyridyl bonded at a carbon atom;
The R ₂ , R ₃ , R ₅ , R ₆ and R ₈ groups are each hydrogen;
R ₄ is lower alkyl,
R ₇ is a group of formula II wherein R ₉ is hydrogen, X is oxo, n is 0, and R ₁₀ is 4-methyl-piperazinyl-methyl Compounds are particularly preferred.

ＣＧＰ ５７１４８Ｂ {Ｎ−{５−[４−(４−メチル−ピペラジノ−メチル)−ベンゾイルアミド]−２−メチルフェニル}−４−(３−ピリジル)−２−ピリミジン−アミン一メシル酸塩}である式Ｉの本発明の化合物がとりわけ特に好ましい。   CGP 57148B {N- {5- [4- (4-Methyl-piperazino-methyl) -benzoylamido] -2-methylphenyl} -4- (3-pyridyl) -2-pyrimidine-amine monomesylate} Certain compounds of the invention of formula I are particularly particularly preferred.

本発明の化合物は、その一メシル酸塩の形態で用いるのが極めて好ましい。   The compounds according to the invention are very particularly preferably used in the form of their monomesylates.

本発明のある好ましい実施形態では、処置される疾病はアレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎、薬物アレルギーおよび食物アレルギーから選択される。本発明のもう１つの好ましい実施形態では、処置される疾病は多発性硬化症である。本発明のさらなる実施形態では、処置される疾病は血管浮腫、じんま疹、乳幼児突然死症候群および気管支肺アスペルギルス症から選択される。さらにまた、本発明の化合物は全身性肥満細胞症、特に肥満細胞腫の処置に使用できる。この疾病は特にイヌにおいては拡張性転移を伴う悪性疾患である。よって、本発明の化合物はイヌ肥満細胞腫瘍を処置する薬剤の製造に特に有用である。   In certain preferred embodiments of the invention, the disease to be treated is selected from allergic rhinitis, allergic dermatitis, drug allergy and food allergy. In another preferred embodiment of the invention, the disease to be treated is multiple sclerosis. In a further embodiment of the invention, the disease to be treated is selected from angioedema, urticaria, sudden infant death syndrome and bronchopulmonary aspergillosis. Furthermore, the compounds of the invention can be used for the treatment of systemic mastocytosis, in particular mastocytoma. This disease is a malignant disease with dilated metastases, especially in dogs. Thus, the compounds of the present invention are particularly useful in the manufacture of a medicament for treating canine mast cell tumors.

本発明の化合物は特許出願ＥＰ０５６４４０９Ａ１およびＷＯ９９／０３８５４で特に化合物クレームおよび実施例の最終生成物として包括的かつ詳細に開示されており、主題の最終生成物、医薬製剤およびクレームはこれらの公報の出典明示により本願の一部とする。そこに開示されている対応する立体異性体ならびに対応する多形体、例えば結晶変種も同様に含まれる。   The compounds of the present invention are disclosed comprehensively and in detail in patent applications EP 0564409A1 and WO 99/03854, particularly as final products of compound claims and examples, the subject final products, pharmaceutical formulations and claims being the source of these publications It is expressly made a part of this application. The corresponding stereoisomers disclosed therein as well as the corresponding polymorphs, eg crystal variants, are included as well.

欧州特許ＥＰ０５６４４０９Ａ１では、本発明の化合物は癌、血栓症、乾癬、繊維症、硬皮症およびアテローム性動脈硬化症の治療に有用であるとの記載がある。今般、本発明によれば、本発明の化合物が驚くことにアレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎、薬物アレルギーもしくは食物アレルギー、血管浮腫、じんま疹、乳幼児突然死症候群、気管支肺アスペルギルス症、多発性硬化症、さらには肥満細胞症、特にイヌ肥満細胞腫瘍に有益な作用を持つことが判明した。   European Patent EP 0564409A1 states that the compounds of the present invention are useful for the treatment of cancer, thrombosis, psoriasis, fibrosis, scleroderma and atherosclerosis. Now, according to the present invention, the compound of the present invention is surprisingly allergic rhinitis, allergic dermatitis, drug allergy or food allergy, angioedema, hives, sudden infant death syndrome, bronchopulmonary aspergillosis, multiple It has been found to have a beneficial effect on sclerosis and even mastocytosis, in particular canine mast cell tumors.

本発明の特定の発見によれば、本発明はまたヒトを含む温血動物の処置方法も提供し、本明細書に記載の疾病の１つを患うこのような温血動物、好ましくはヒトまたはイヌ、極めて好ましくはヒトに治療上有効量の本発明の化合物を投与する。   According to certain discoveries of the present invention, the present invention also provides a method of treating warm-blooded animals including humans, such warm-blooded animals suffering from one of the diseases described herein, preferably humans or A dog, very preferably a human, is administered a therapeutically effective amount of a compound of the invention.

本発明はまた、本発明の化合物またはその医薬上許容される塩をイヌ肥満細胞腫瘍を有するイヌ被験体に投与する方法であって、医薬上有効量の本発明の化合物またはその医薬上許容される塩を好ましくは１ヶ月、２ヶ月あるいはまた３ヶ月を超える期間一日一回イヌに投与することを含む方法にも関する。本発明は特に、一日量約２０〜２００ｍｇ、好ましくは８０〜１６０ｍｇ、特に１２５ｍｇの塩Ｉを投与する方法に関する。   The present invention also provides a method of administering a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof to a canine subject having a canine mast cell tumor, comprising a pharmaceutically effective amount of the compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof. And a method comprising administering to the dog once a day, preferably for a period of more than 1 month, 2 months or even 3 months. The invention particularly relates to a method of administering a daily dose of about 20-200 mg, preferably 80-160 mg, in particular 125 mg of salt I.

好ましくは本発明は式Ｉの４−(４−メチルピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−[４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ]フェニル]−ベンズアミドの一メタンスルホン酸塩の一日量をイヌに投与する使用または方法に関し、この一日量は少なくとも０.２μＭの血漿レベルを維持するに十分な一メタンスルホン酸塩量を含む。   Preferably the present invention relates to 4- (4-methylpiperazin-1-ylmethyl) -N- [4-methyl-3- (4-pyridin-3-yl) pyrimidin-2-ylamino] phenyl] -benzamide of the formula I With respect to the use or method of administering a daily dose of monomethanesulfonate to a dog, the daily dose comprises an amount of monomethanesulfonate sufficient to maintain a plasma level of at least 0.2 μM.

本明細書において「処置方法」とはまた特に、本明細書に記載の疾病の予防方法、すなわち本明細書に記載の疾病の発生を予防するために健康な被験体に対する本発明の化合物を含む医薬組成物の予防的投与にも関する。   As used herein, “treatment method” also specifically includes a compound of the invention for a method for preventing a disease described herein, ie, for a healthy subject to prevent the occurrence of the disease described herein. It also relates to the prophylactic administration of the pharmaceutical composition.

本発明はまた、本発明の化合物を含む本明細書に記載の疾病の少なくとも１つの処置のための医薬組成物にも関する。本明細書に記載の疾病の少なくとも１つの処置のための医薬組成物は有効量の本発明の化合物を、局所、腸管、例えば経口もしくは直腸、または非経口投与に適し、無機または有機、固形または液体であり得る医薬上許容される担体とともに含む。経口投与に関しては特に、本発明の化合物を希釈剤および／または滑沢剤、例えば珪酸、タルク、ステアリン酸もしくはその塩、および／またはポリエチレングリコールを含む錠剤またはゼラチンカプセル剤が用いられるが、ローション、ジェルまたはクリームであってもよい。錠剤は結合剤、デンプン、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび／またはポリビニルピロリドン、崩壊剤および／または起沸性混合物、または吸収剤、色素、香味剤および甘味剤を含んでもよい。本発明の化合物はまた、非経口投与組成物の形態または点滴液の形態で用いてもよい。例えば皮膚へ局所投与してもよい。局所投与のさらなる形態としては、例えば春季節結膜炎の処置を目的とした眼への投与がある。これらの医薬組成物は滅菌可能であり、かつ／または賦形剤、例えば保存剤、安定剤、湿潤剤、および／または乳化剤、可溶化剤、浸透圧調節のための塩、および／またはバッファーを含んでもよい。本医薬組成物はそれ自体公知の方法、例えば従来の混合、造粒、糖菓剤調剤、溶解または凍結乾燥法によって調製し、およそ１％〜１００％、特におよそ１％〜およそ２０％の有効成分を含む。   The invention also relates to pharmaceutical compositions for the treatment of at least one of the diseases described herein comprising a compound of the invention. A pharmaceutical composition for the treatment of at least one of the diseases described herein comprises an effective amount of a compound of the invention suitable for topical, intestinal, eg oral or rectal, or parenteral administration, inorganic or organic, solid or With a pharmaceutically acceptable carrier which can be a liquid. For oral administration in particular, tablets or gelatin capsules containing the compounds of the invention as diluents and / or lubricants such as silicic acid, talc, stearic acid or salts thereof, and / or polyethylene glycol are used, but lotions, It may be a gel or cream. Tablets may contain binders, starch, gelatin, methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose and / or polyvinylpyrrolidone, disintegrants and / or effervescent mixtures, or absorbents, dyes, flavoring and sweetening agents. The compounds of the present invention may also be used in the form of parenteral compositions or in the form of infusions. For example, it may be administered locally to the skin. Further forms of topical administration include, for example, administration to the eye for the treatment of spring seasonal conjunctivitis. These pharmaceutical compositions can be sterilized and / or contain excipients such as preservatives, stabilizers, wetting agents, and / or emulsifiers, solubilizers, salts for osmotic pressure adjustment, and / or buffers. May be included. The pharmaceutical composition is prepared in a manner known per se, for example by conventional mixing, granulating, confectionary preparation, dissolving or lyophilizing methods, approximately 1% to 100%, in particular approximately 1% to approximately 20% active ingredient. including.

本発明の化合物は例えばＷＯ９９/０３８５４の実施例４または６に開示されているように製剤化することができる。   The compounds of the invention can be formulated as disclosed, for example, in Example 4 or 6 of WO 99/03854.

用いる本発明の化合物の用量範囲は温血動物の種、体重および齢、投与様式、用いる特定の物質、および処置する疾病をはじめとする当業者に公知の因子によって異なる。本明細書中で特に断りのない限り、本発明の化合物は１日に１〜４回投与するか、あるいはアレルギー反応が見られた際には即投与することが好ましい。また、本発明の化合物、特にＮ−{５−[４−(４−メチル−ピペラジノ−メチル)−ベンゾイルアミド]−２−メチルフェニル}−４−(３−ピリジル)−２−ピリミジン−アミン(ＳＴＩ５７１Ｂ)は温血動物、特にヒトに約１０〜７５０ｍｇ/日、好ましくは３０〜６００ｍｇ/日、より好ましくは３０〜３００ｍｇ/日の範囲の用量で投与するのが好ましい。   The dosage range of the compounds of the invention used will depend on factors known to those skilled in the art including the species of warm-blooded animal, the body weight and age, the mode of administration, the particular substance used, and the disease being treated. Unless otherwise specified in the present specification, the compound of the present invention is preferably administered 1 to 4 times a day or immediately when an allergic reaction is observed. Also, the compounds of the present invention, in particular N- {5- [4- (4-methyl-piperazino-methyl) -benzoylamide] -2-methylphenyl} -4- (3-pyridyl) -2-pyrimidin-amine ( STI571B) is preferably administered to warm-blooded animals, particularly humans, at doses ranging from about 10 to 750 mg / day, preferably 30 to 600 mg / day, more preferably 30 to 300 mg / day.

イヌでは、種、齢、個々の状態、投与様式、および着目する臨床像に応じて、有効量、例えば体重約５ｋｇの温血動物に対して一日量約２０〜２００ｍｇ、好ましくは８０〜１６０ｍｇ、特に１２５ｍｇを投与する。切除不能かつ／または転移性の悪性イヌ肥満細胞腫瘍を有する約５ｋｇの成犬では、一日１２５ｍｇの開始用量が奨励され得る。一日１２５ｍｇの治療に対する応答を評価した後、応答が不十分であったイヌには用量の段階的増加を安全に考えることができ、制限毒性がなく処置からの利益が受けられる限りイヌに処置を施すことができる。用量は少なくとも０.２μＭ、好ましくは少なくとも０.５μＭ、より好ましくは少なくとも１μＭの血漿レベルとなるように力価調整する。約１μＭの血漿レベルを達成および／または維持することが特に好ましい。
In dogs, depending on the species, age, individual condition, mode of administration, and clinical profile of interest, the effective dose, for example, about 20-200 mg daily, preferably 80-160 mg for warm-blooded animals weighing about 5 kg. In particular 125 mg. In about 5 kg adult dogs with unresectable and / or metastatic malignant canine mast cell tumors, a starting dose of 125 mg per day may be encouraged. After assessing response to 125 mg of treatment per day, dogs with poor response can safely be considered a gradual increase in dose and treated to dogs as long as there is no limiting toxicity and benefit from treatment Can be applied. The dose is titrated to a plasma level of at least 0.2 μM, preferably at least 0.5 μM, more preferably at least 1 μM. It is particularly preferred to achieve and / or maintain a plasma level of about 1 μM.

Claims (10)

アレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎、薬物アレルギーまたは食物アレルギー、血管浮腫、じんま疹、乳幼児突然死症候群、気管支肺アスペルギルス症、肥満細胞症または多発性硬化症を処置する薬剤の製造のための、式Ｉ

［式中、
Ｒ_１は４−ピラジニル；１−メチル−１Ｈ−ピロリル；アミノ−もしくはアミノ−低級アルキル置換フェニル(なおここで、各場合においてアミノ基は遊離型であるか、アルキル化またはアシル化されている)；５員環炭素原子において結合している１Ｈ−インドリルもしくは１Ｈ−イミダゾリル；または環炭素原子において結合し、かつ、窒素原子において酸素で置換されていてもされていなくてもよい非置換もしくは低級アルキル−置換ピリジルであり；
Ｒ_２およびＲ_３は各々他とは独立に水素または低級アルキルであり；
Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８基のうち１つまたは２つは各々ニトロ、フルオロ置換低級アルコキシまたは式ＩＩ
−Ｎ(Ｒ_９)−Ｃ(＝Ｘ)−(Ｙ)_ｎ−Ｒ_１０ (ＩＩ)
｛式中、
Ｒ_９は水素または低級アルキルであり、
Ｘはオキソ、チオ、イミノ、Ｎ−低級アルキル−イミノ、ヒドロキシイミノまたはＯ−低級アルキル−ヒドロキシイミノであり、
Ｙは酸素またはＮＨ基であり、
ｎは０または１であり、
Ｒ_１０は少なくとも５個の炭素原子を有する脂肪族基、または芳香族、芳香−脂肪族、シクロ脂肪族、シクロ脂肪−脂肪族、複素環式もしくは複素環式脂肪族基である}
の基であり、かつ、
残りのＲ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８基は各々他とは独立に水素；非置換、または遊離もしくはアルキル化アミノ、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニルまたはモルホリニルにより置換されている低級アルキル；あるいは低級アルカノイル；トリフルオロメチル；遊離、エーテル化もしくはエステル化ヒドロキシ；遊離、アルキル化もしくはアシル化アミノ、または遊離もしくはエステル化カルボキシである］
のＮ−フェニル−２−ピリミジン−アミン誘導体、または少なくとも１つの塩形成基を有するかかる化合物の塩の使用。 For the manufacture of a drug to treat allergic rhinitis, allergic dermatitis, drug allergy or food allergy, angioedema, urticaria, sudden infant death syndrome, bronchopulmonary aspergillosis, mastocytosis or multiple sclerosis, Formula I

[Where:
R ₁ is 4-pyrazinyl; 1-methyl-1H-pyrrolyl; amino- or amino-lower alkyl-substituted phenyl (wherein in each case the amino group is free, alkylated or acylated) 1H-indolyl or 1H-imidazolyl bonded at a 5-membered ring carbon atom; or unsubstituted or lower alkyl bonded at a ring carbon atom and optionally or not substituted with oxygen at the nitrogen atom -Substituted pyridyl;
R ₂ and R ₃ are each independently hydrogen or lower alkyl;
One or two of the R ₄ , R ₅ , R ₆ , R ₇ and R ₈ groups are each nitro, fluoro-substituted lower alkoxy or Formula II
_{-N (R 9) -C (=} X) - (Y) n -R 10 (II)
{Where,
R ₉ is hydrogen or lower alkyl,
X is oxo, thio, imino, N-lower alkyl-imino, hydroxyimino or O-lower alkyl-hydroxyimino;
Y is oxygen or an NH group;
n is 0 or 1;
R ₁₀ is an aliphatic group having at least 5 carbon atoms, or an aromatic, aromatic-aliphatic, cycloaliphatic, cycloaliphatic-aliphatic, heterocyclic or heterocyclic aliphatic group}
And the basis of
The remaining R ₄ , R ₅ , R ₆ , R ₇ and R ₈ groups are each independently hydrogen; lower alkyl, unsubstituted or substituted by free or alkylated amino, piperazinyl, piperidinyl, pyrrolidinyl or morpholinyl Or lower alkanoyl; trifluoromethyl; free, etherified or esterified hydroxy; free, alkylated or acylated amino, or free or esterified carboxy]
Of N-phenyl-2-pyrimidin-amine derivatives, or salts of such compounds having at least one salt-forming group. Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８基のうち１つまたは２つが各々ニトロまたは式ＩＩ
｛式中、
Ｒ_９は水素または低級アルキルであり、
Ｘはオキソ、チオ、イミノ、Ｎ−低級アルキル−イミノ、ヒドロキシイミノまたはＯ−低級アルキル−ヒドロキシイミノであり、
Ｙは酸素またはＮＨ基であり、
ｎは０または１であり、かつ、
Ｒ_１０は少なくとも５個の炭素原子を有する脂肪族基、または芳香族、芳香−脂肪族、シクロ脂肪族、シクロ脂肪−脂肪族、複素環式もしくは複素環式脂肪族基であり、かつ、
残りのＲ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８基は各々他とは独立に水素；非置換、または遊離もしくはアルキル化アミノ、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニルまたはモルホリニルにより置換されている低級アルキル；あるいは低級アルカノイル；トリフルオロメチル；遊離、エーテル化もしくはエステル化ヒドロキシ；遊離、アルキル化もしくはアシル化アミノ、または遊離もしくはエステル化カルボキシであり、
かつ、残りの置換基は請求項１で定義した通りである｝
の基である、請求項１に記載の式Ｉの化合物、または少なくとも１つの塩形成基を有するかかる化合物の医薬上許容される塩の使用。 One or two of the R ₄ , R ₅ , R ₆ , R ₇ and R ₈ groups are each nitro or formula II
{Where,
R ₉ is hydrogen or lower alkyl,
X is oxo, thio, imino, N-lower alkyl-imino, hydroxyimino or O-lower alkyl-hydroxyimino;
Y is oxygen or an NH group;
n is 0 or 1, and
Aliphatic radical R ₁₀ having at least 5 carbon atoms or an aromatic, aromatic - aliphatic, cycloaliphatic, cycloaliphatic - aliphatic, heterocyclic or heterocyclic aliphatic group, and,
The remaining R ₄ , R ₅ , R ₆ , R ₇ and R ₈ groups are each independently hydrogen; lower alkyl, unsubstituted or substituted by free or alkylated amino, piperazinyl, piperidinyl, pyrrolidinyl or morpholinyl Or lower alkanoyl; trifluoromethyl; free, etherified or esterified hydroxy; free, alkylated or acylated amino, or free or esterified carboxy;
And the remaining substituents are as defined in claim 1}
Use of a compound of formula I according to claim 1 or a pharmaceutically acceptable salt of such a compound having at least one salt-forming group. Ｒ_１が炭素原子において結合しているピリジルであり、
Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_５、Ｒ_６およびＲ_８が各々水素であり、
Ｒ_４が低級アルキルであり、
Ｒ_７が式ＩＩ
｛式中、
Ｒ_９は水素であり、
Ｘはオキソであり、
ｎは０であり、かつ、
Ｒ_１０は４−メチル−ピペラジニル−メチルである｝
の基である、請求項１に記載の式Ｉの化合物、またはその医薬上許容される塩の使用。 R ₁ is pyridyl bonded at a carbon atom;
R ₂ , R ₃ , R ₅ , R ₆ and R ₈ are each hydrogen;
R ₄ is lower alkyl,
R ₇ has the formula II
{Where,
R ₉ is hydrogen;
X is oxo,
n is 0, and
R ₁₀ is 4-methyl-piperazinyl-methyl}
Use of a compound of formula I according to claim 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 化合物がＮ−{５−[４−(４−メチル−ピペラジノ−メチル)−ベンゾイルアミド]−２−メチルフェニル}−４−(３−ピリジル)−２−ピリミジン−アミンである請求項１に記載の化合物、またはその医薬上許容される塩の使用。   2. The compound of claim 1, wherein the compound is N- {5- [4- (4-methyl-piperazino-methyl) -benzoylamido] -2-methylphenyl} -4- (3-pyridyl) -2-pyrimidin-amine. Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 化合物がその一メシル酸塩の形態で用いられる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の使用。   Use of a compound of formula I according to any one of claims 1 to 4, wherein the compound is used in its monomesylate form. イヌ肥満細胞腫瘍を処置する薬剤の製造のための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の使用。   Use of a compound of formula I according to any one of claims 1 to 5 for the manufacture of a medicament for treating canine mast cell tumors. アレルギー性鼻炎、アレルギー性皮膚炎、薬物アレルギーまたは食物アレルギー、血管浮腫、じんま疹、乳幼児突然死症候群、気管支肺アスペルギルス症、肥満細胞症または多発性硬化症を有する温血動物の処置方法であって、請求項１〜５のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物(この式Ｉの化合物は医薬上許容される塩の形態で提供してもよい)を、上記疾病の少なくとも１つに対して治療上有効な量で動物に投与することを含む、方法。   Allergic rhinitis, allergic dermatitis, drug allergy or food allergy, angioedema, urticaria, sudden infant death syndrome, bronchopulmonary aspergillosis, mastocytosis or multiple sclerosis A compound of formula I according to any one of claims 1 to 5 (this compound of formula I may be provided in the form of a pharmaceutically acceptable salt) to at least one of the above diseases Administering to an animal in a therapeutically effective amount. イヌ肥満細胞腫瘍を患うイヌを処置する方法であって、かかる処置を必要とするイヌに、イヌ肥満細胞腫瘍に対して有効な量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物を投与することを含む、方法。   6. A method of treating a dog suffering from a canine mast cell tumor, wherein the dog in need of such treatment is in an amount effective against the canine mast cell tumor of formula I according to any one of claims 1-5. Administering a compound of: 一日量２０〜２００ｍｇの４−(４−メチルピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−[４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ]フェニル]−ベンズアミドまたはその医薬上許容される塩を成犬に投与する、請求項８または６に記載の使用または方法。   20-200 mg of 4- (4-methylpiperazin-1-ylmethyl) -N- [4-methyl-3- (4-pyridin-3-yl) pyrimidin-2-ylamino] phenyl] -benzamide or its daily dose The use or method according to claim 8 or 6, wherein a pharmaceutically acceptable salt is administered to an adult dog. 一日量３０〜４００ｍｇの４−(４−メチルピペラジン−１−イルメチル)−Ｎ−[４−メチル−３−(４−ピリジン−３−イル)ピリミジン−２−イルアミノ]フェニル]−ベンズアミドまたはその医薬上許容される塩をヒトに投与する、請求項１または７に記載の使用または方法。

30-400 mg of 4- (4-methylpiperazin-1-ylmethyl) -N- [4-methyl-3- (4-pyridin-3-yl) pyrimidin-2-ylamino] phenyl] -benzamide or its daily dose 8. Use or method according to claim 1 or 7, wherein a pharmaceutically acceptable salt is administered to a human.