JP2004536794A - マイクロ遠心機を用いる血液成分の分離方法及びその使用法 - Google Patents
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Abstract
遠心処理により体液又は組織から所定の細胞成分を分離するための方法及び装置を提供する。より具体的に言えば、本発明は、幹細胞、軟層、骨髄細胞、赤血球、白血球、血小板、血清、蛍光標識細胞及び磁気標識細胞などの、１種類又は複数種類の成分を、全血、骨髄、軟層、脂肪細胞、筋細胞及び神経細胞から、遠心機を回転させながら、遠心処理により分離及び単離する方法を提供する。
Description
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体を、比重の異なる成分毎に遠心分離するための新規な方法、装置及び器具に関し、特に、さまざまな治療で使用する血液成分の分離などに有用な血液分離装置を提供するものである。
【背景技術】
【０００２】
遠心分離法は、溶液内の懸濁粒子が、それぞれの密度に基づいて遠心機ロータ内を特定の径方向の位置に移動するため、遠心機を適切な時間の間、適切な角速度で回転させることにより、その粒子を分離することができるという原理に基づく。遠心液体処理システムは、広範囲な様々な分野で応用されている。例えば、遠心分離法は、血液をその一部の成分、すなわち赤血球、血小板、白血球及び血漿に分離するための血液分離技術において広く用いられている。
【０００３】
血漿と呼ばれる血液の液体部分は、白血球、赤血球及び血漿が混濁されているタンパク質及び塩分を含む溶液である。９０パーセントが水分である血漿は、血液全体容積の約５５％を占めており、アルブミン（主なタンパク質成分）、フィブリノゲン（血液凝固の中心的役割を果たす）、グロブリン（抗体を含む）及び他の凝固性タンパク質を含んでいる。血漿は、十分な血圧の維持及び容量の提供から血液凝固及び免疫に必須であるタンパク質の供給まで、さまざまな機能を付与する。血液の液体部分を血液中に懸濁されている細胞から分離することにより、この血漿を得ることができる。
【０００４】
赤血球は、おそらく全血の中でも最もよく知られた成分である。赤血球には、血液を赤色としている間に全身に酸素を運搬する鉄含有複合タンパク質、即ちヘモグロビンが含まれている。赤血球の血液容積百分率は、「ヘマトクリット値」と呼ばれる。
【０００５】
白血球は、細菌、カビ及びウィルスなどの異物による侵入から身体を保護する役割を果たしている。身体を保護する白血球にはいくつかの種類があり、その例として、侵入してきた細菌やウィルスを包囲及び破壊して身体の感染を防止する顆粒球及び大食球、並びに免疫防御を補助するリンパ球が挙げられる。
【０００６】
血小板は、血管の内層に付着して凝固プロセスを補助する、血液の最も小さな細胞成分である。血小板は、外傷による大量失血と、普通の日常的な活動の中で起こり得る血管からの血液の漏出の双方の防止に役立つため、生命維持に不可欠な成分である。
【０００７】
全血を収集し、適した抗凝固剤を添加してその凝固を防止しておけば、その全血を成分部分に遠心分離することができる。遠心分離を施すと、最も重量のある赤血球が、回転容器の最も外側に押し寄せられ、最も密度の低い血漿が回転容器の中央部分に溜まる。血漿と赤血球とを分離するのが、軟層（ｂｕｆｆｙ ｃｏａｔ ｌａｙｅｒ）と呼ばれる白色又は灰色の薄い層である。この軟層は、白血球及び血小板からなり、血液全体容積の約１パーセントを占めている。
【０００８】
上述した血液成分を分離すると、これらを広範囲の診断及び治療方法に使用することができる。例えば、赤血球は、腎不全、悪性腫瘍又は胃腸の出血などの疾患による慢性貧血を患う患者、並びに外傷や手術により急激に失血している患者に日常的に輸注される。血漿成分は通常、寒冷沈降反応により、凍結され、次いで徐々に解凍されて、第ＶＩＩＩ因子、フィブリノゲン、フォン・ウィルブランド因子及び第ＸＩＩＩ因子などの特定の凝固因子を多量に含む、寒冷沈降処理された抗血友病因子が作製される。寒冷沈降処理処理されたＡＨＦは、血友病やフォン・ウィルブランド病を患う個人の出血防止及び出血制御に用いられる。軟層に見られる血小板及び白血球を用いて、それぞれ血小板機能が異常（血小板減少症）である患者や、抗生剤による治療に反応のない患者を治療することができる。
【０００９】
これまでに、全血の収集とその後の全血からの治療用成分の分離を容易にするさまざまな技術及び機器が開発されてきた。血液処理システムとも呼ばれる遠心分離システムは一般に、不連続流装置と連続流装置の２種類に分類される。
【００１０】
不連続流システムでは、ドナー又は患者からの全血が、導管を通過してロータ又はボール内に流入し、そこで成分分離が行われる。このシステムでは、比較的大容量（通常２００ｍｌ以上）のボール型ロータを用いており、所望成分のいずれを採取するにも、その前にこのロータを血液で充填しておかなければならない。ボールが満杯になったところで、新鮮血液の吸引を停止し、その全血を遠心法により成分毎に分離する。不要な成分は、連続的にではなく一定分量に分けて断続的に同じ導管を介して同じドナー又は患者に戻される。不要成分がすべて戻されると、再度、全血がドナー又は患者から吸引され、第２のサイクルが始まる。この処理が、所望成分の必要量が収集されるまで続けられる。
【００１１】
不連続流システムには、ロータの直径が比較的小さいという利点があるが、体外容量（すなわち、処理の間のいずれかの時にドナー外にある血液量）が多いという欠点もある。このため、ロータの充填に必要な血液量を吸引できない体格及び体重の人々には、この不連続流システムは使用しにくく、又は使用できない。不連続流装置は、血小板及び／又は血漿の収集、並びに赤血球の濃縮及び洗浄に使用されるものである。それらは、予め凍結しておいた赤血球を元に戻し、手術時に失われた赤血球を回収するために用いられる。しかし、このシステムで使用されるボールは剛性でその容量が固定されているため、回収された血液量がボールを赤血球で充填するのに不充分な場合には特に、最終生成物のヘマトクリット値を制御することが難しい。
【００１２】
不連続流装置システムの１例が、ＭｃＭａｎｎｉｓらによる米国特許第５，３１６，５４０号に開示されている。このシステムは、液状媒体の成分を分離するための容積可変式遠心分離機であり、可撓性膜により上方チャンバと下方チャンバとに分けられた遠心機と、その上方チャンバ内に配設された可撓性処理容器バッグとを含む。ＭｃＭａｎｎｉｓらによるシステムは、加圧液を下方チャンバ内に注入して膜を上昇させることにより上方チャンバの容積を変化させて、遠心分離機から所望成分を絞り出すものである。このＭｃＭａｎｎｉｓらによるシステムはかなりのスペースを必要とする上、軟らかいホットケーキ形状のロータはその取扱いが難しい。また、このＭｃＭａｎｎｉｓらによるシステムは、流体媒体の処理バッグへの流入と取出しとを同時に行うことができず、処理バッグから流状媒体を吸引によって引き出すこともできない。
【００１３】
連続流システムの場合も、ドナー又は患者からの全血が導管を通過して回転ロータ内に流入し、そこで成分分離が行われる。対象成分が収集され、不要成分は、全血を採りながら連続的に、第２の導管を介してドナーに戻される。血液を採る速度と戻す速度とが実質的に同じであるため、体外容積、すなわち処理の間のいずれかの時にドナー外にある血液量は比較的少ない。このシステムは通常、直径が比較的大きなベルト型ロータを用いるが、処理容量が比較的小さい（通常１００ｍｌ以下）。連続流システムには、ドナー又は患者外に保持しなければならない血液量を比較的少なくすることができるという利点があるが、ロータの直径が大きいため、システム全体が大きくなるという欠点もある。さらに、このシステムはその設置及び使用法が複雑である。この装置はほとんどが血小板の収集に使用される。
【００１４】
連続流システムは、互いに流体連通している回転自在な部分と固定部分とからなる。したがって、連続流システムは、ロータリーシール又はＪループかのどちらかを使用する。これまでに、遠心機用ロータリーシールのさまざまな種類が開発されてきた。有効であることが証明されている遠心機用ロータリーシールの例は、Ｌａｔｈａｍに発行された米国特許第３，４０９，２０３号及び同第３，５６５，３３０号に記載されている。これらの特許では、移動式剛性部材と接触して動的シールを形成している固定式剛性低摩擦部材と、その動的シールの表面間に弾性固定シールと適度な閉鎖力とを提供する弾性部材とからなるロータリーシールが開示されている。
【００１５】
血液を処理する遠心機での使用に適した別のロータリーシールは、Ｊｏｎｅｓらに発行された米国特許第３，８０１，１４２号に記載されている。このロータリーシールでは、非浸食性材料による対面式環状流体密シール面を有する１対のシール構成要素が設けられている。この構成要素は、回転自在であると同時に、このシール構成要素への流体接続の１つを形成している一定長さの弾性管による軸方向圧搾により流体密関係に維持される。
【００１６】
ロータリーシールを介して固定管部材に連結された回転自在な使い捨て式環状分離チャンバを組入れる、関連タイプのシステムは、米国特許第４，３８７，８４８号、同第４，０９４，４６１号、同第４，００７，８７１号及び同第４，０１０，８９４号に開示されている。
【００１７】
上述した連続流システムの１つの欠点は、回転式シール又は連結構成要素を遠心機ロータが支持するシステム部分と固定されたシステム部分との間に使用していることである。こうした回転式シールの性能は概して満足のいくものであるが、製造コストがかかるため、流動システム全体のコストが不必要に高くなる。また、こうした回転式シールにより、余計な成分がシステム内に入るため、それが不良なものであれば、処理中の血液を汚染する危険性がある。
【００１８】
回転式シールの課題を克服するようにこれまで考案された流動システムの１つは、回転式運搬台を用いて、そこに単一筐体を回転自在に取り付けるものである。固定地点からその筐体に延びている供給ケーブルにより、筐体は遊星運動ができるようになっているため、ケーブルが捻れることはない。無菌処理における所望結果の取得を促進し、単一シールシステム内における不連続流システムの欠点を回避するため、一群の二重部材型遠心機を用いて、細胞分離を実行することができる。この型の遠心機の１例が、Ａｄａｍｓに付与された米国特許第ＲＥ２９，７３８号「移動する末端部材と固定末端部材との間にエネルギ通信を設けるための装置（Ａｐｐａｒａｔｕｓ ｆｏｒ Ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ Ｅｎｅｒｇｙ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ Ｂｅｔｗｅｅｎ ａ Ｍｏｖｉｎｇ ａｎｄ ａ Ｓｔａｔｉｏｎａｒｙ Ｔｅｒｍｉｎａｌ）」に開示されている。今では周知であるように、この二重部材遠心機の特徴により、献血ユニットなどの流体を含む容器を回転させ、回転式シールを用いずに、血漿などの分離した流体成分を遠心機から固定容器内に引抜くことができる。こうした容器システムはＪループを用いており、これを閉じた無菌移送セットとして形成することができる。
【００１９】
Ａｄａｍｓ特許では、回転自在な外側部材と、回転自在な内側部材とを有する遠心機が開示されている。この内側部材は、外側部材内に位置付けられ、外側部材に回転自在に支持されている。外側部材は、「１オメガ」と普通呼ばれる一定の回転速度で回転し、内側筐体は、その外側筐体の２倍の回転速度、すなわち「２オメガ」で回転する。したがって、２つの部材間には１オメガの回転速度差がある。以下、本明細書では「二重部材型遠心機」をＡｄａｍｓ型遠心機と呼ぶ。
【００２０】
Ａｄａｍｓ特許の二重部材型遠心機は、上述したように、回転する流体容器と移動しない成分収集容器との間にシールが不要であるという点で特に有利である。Ａｄａｍｓ特許のシステムにより、遠心機の２つの部材を回転させつつ、ドナーからの全血を遠心機内に注入できる単一密閉無菌システム内で、血液を成分毎に分離する１つの方法が得られる。
【００２１】
Ａｄａｍｓ特許の装置とは別の方法が、Ｌｏｌａｃｈｉに付与された米国特許第４，０５６，２２４号「液体遠心処理装置用流動システム（Ｆｌｏｗ Ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ ｌｉｑｕｉｄ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ａｐｐａｒａｔｕｓ）」に例示されている。Ｌｏｌａｃｈｉ特許のシステムは、Ａｄａｍｓ型の二重部材型遠心機を含むものである。Ｌｏｌａｃｈｉ式遠心機の外側部材は、ベルト及びシャフトで回転自在な内側筐体に連結されている単一電気モータにより回転させられる。
【００２２】
Ｂｒｏｗｎに付与された米国特許第４，１０８，３５３号「対向位置にある回転支持手段を有する遠心機装置（Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ Ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｗｉｔｈ Ｏｐｐｏｓｉｔｅｌｙ Ｐｏｓｉｔｉｏｎｅｄ Ｒｏｔａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｏｒｔ Ｍｅａｎｓ）」には、２つの別個の電気モータを含むＡｄａｍｓ型の遠心機構造が開示されている。一方の電気モータは、ベルトで外側部材に連結されて、その外側部材を所望の公称回転速度で回転させ、第２のモータは、回転する外側部材内に支持されており、内側部材を外側部材の速度より速い２倍の速度で回転させるものである。
【００２３】
Ｂｒｏｗｎらに付与された米国特許第４，１０９，８５５号「遠心処理装置用駆動システム（Ｄｒｉｖｅ Ｓｙｓｔｅｍ Ｆｏｒ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ａｐｐａｒａｔｕｓ）」には、別の駆動システムが開示されている。Ｂｒｏｗｎらによる特許のシステムは、外側部材を選択速度で回転させるように外側部材に固定された外側シャフトを有する。その外側シャフトと共軸で設けられた内側シャフトは、内側部材に連結されている。内側シャフトが、内側部材を外側部材の２倍の回転速度で回転させる。これと同様のシステムが、Ｂｒｏｗｎに付与された米国特許第４，１０９，８５４号「囲い込み部材を備えた遠心装置（Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ Ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｗｉｔｈ Ｏｕｔｅｒ Ｅｎｃｌｏｓｕｒｅ）」に開示されている。
【００２４】
上記文献に記載されている連続流システムは、携帯を目的としない大型で高価なユニットであり、標準の複数容器型血液収集セットより大幅に価格が高い。したがって、小型で容易に使用でき、従来技術による連続流システムの欠点のない、血液及び他の生体流体を処理する遠心システムが必要である。
【００２５】
成分分離すべき全血は通常、可撓性プラスチックドナーバッグ内に収集され、遠心処理によりバッチ処理を通じて成分毎に分離される。この分離は、冷却された大型遠心機内で血液バッグを約１０分間回転させて行われる。すると、主要な血液成分、すなわち赤血球、血小板、白血球及び血漿が、沈殿し、別個の層を形成して主要バッグに装着された複数の付随バッグ内に手動抽出器により連続的に圧出される。
【００２６】
さらに最近では、この操作を容易にするために、自動化された抽出器が導入されている。しかし、処理全体はなお手間がかかり、血液成分の品質を保証するために特定時間枠内に分離作業を行う必要がある。特に、大半の献血がバッチ処理機能を備えていないばらばらの場所で行われることを考えると、これではロジスティクスが複雑になってしまう。
【００２７】
この方法は、１９７０年代に血液収集用の使い捨てプラスチックバッグが広く使用され出してから行われているものであり、その後大幅に改良されていない。全献血に血漿交換技術を適用しようという試みも行われてきた。この技術は、献血を行いつつ１種類又は複数種類の血液成分をオンラインで吸引及び抽出し、残りの成分をドナーに返還するものである。しかし、この血漿交換システムは複雑で費用がかかることから、日常的な全血収集としての輸血センターにおける使用は不可能である。
【００２８】
携帯型使い捨て式遠心装置について、これまでにさまざまな提案がなされてきた。こうした装置は通常、折り畳み可能なバッグを具備しており、その例としてＬａｔｈａｍ，Ｊｒ．に付与された米国特許第３，７３７，０９６号又は同第４，３０３，１９３号が挙げられ、剛性で壁部を設けたボールを具備する例としては、Ｆｅｌｌらに付与された米国特許第４，８８９，５２４号が挙げられる。こうした装置の場合はすべて最小固定保持容量が定められており、通常約２５０ｍｌの最小容量を処理しなければ、いずれの成分も回収できない。
【００２９】
ＭｃＭａｎｎｉｓらに付与された米国特許第５，３１６，５４０号には、処理チャンバが、生体流体で充填するように変形可能となっているか、又は駆動ユニットの一部を形成している膜により空にすることのできる可撓性処理バッグである処理装置が開示されている。このバッグは、バッグへの流体の導入及び除去用入口／出口管を１本しか具備してないため、連続したオンライン処理には使用できない。また、この処理バッグには容量が６５０ｍｌであるという欠点があるため、ＭｃＭａｎｎｉｓらによる装置を血液処理装置として使用することは難しい。
【００３０】
上述したように、遠心機はしばしば、さまざまな治療方法での使用を目的に、血液を各成分に分離するために用いられる。こうした用途の１つが、生体接着剤の調製である。フィブリン糊とも呼ばれる生体接着剤は、血液凝固最終段階の生物学的プロセスを再現しようとする比較的新しい技術である。これまでの臨床報告書から、心血管、胸部、移植、頭部及び頸部、口腔、胃腸、整形外科、神経外科及び形成外科などのさまざまな外科手術分野にフィブリン糊が使用されていることがわかっている。手術時、フィブリン糊を構成する２種類の主成分、フィブリノゲン及びトロンビンを混合して、凝塊を形成させる。この凝塊は、適用後数十秒のうちに凝固させる必要のある組織、骨又は神経に接着して、およそ１０日後、フィブリン溶解現象により身体内に徐々に再吸収されていく。フィブリン糊の重要な特徴は、（１）特に、縫合手段を行えない領域、又は縫合が極めて危険な領域における血管吻合術にて、止血ができること、（２）縫合のみでは制御できない、針穴や動脈破断部分からの出血を制御できること、及び（３）ヘパリン化された患者又は凝血障害を患う患者を止血できることである。Ｂｏｒｓｔ，Ｈ．Ｇ．、ｅｔ ａｌ．、ＪＴｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．、８４：５４８−５５３（１９８２）；Ｗａｌｔｅｒｂｕｓｃｈ，Ｇ．Ｊ ｅｔ ａｌ．、Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ、３０：２３４−２３ ５（１９８２）；ａｎｄ Ｗｏｌｎｅｒ，Ｆ．Ｊ．ｅｔ ａｌ．、Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．、３０：２３６−２３７ １９８２）を参照されたい。
【００３１】
欧州では医師らによりフィブリン糊が有効かつ成功裏に使用されているにもかかわらず、米国ではフィブリン糊もその基本成分であるフィブリノゲン及びトロンビンもあまり使用されていない。その大きな理由は、ウィルス感染、特に、ＨＢＶ及びＨＣＶなどの（非Ａ非Ｂ型肝炎ウィルスとしても周知である）肝炎ウィルスの感染の危険性があるとして１９７８年に米国食品医薬品局が、ドナーから市販用に調製されたフィブリノゲン濃縮物に対する禁止令を出したことである。さらに、フィブリノゲン調製時に、ＡＩＤＳに関連するＨＩＶ、サイトメガロウィルス、並びにエプスタインバーウィルスや単純性疱疹ウィルスなどのほかの脂質包囲ウィルスがより最近になっても出現していることから、近い将来に局の方針が変更される見通しはない。同様の理由から、現在、ヒトからのトロンビンについて、米国ではヒトへの使用が認可されていない。米国でヒトへの使用を許可されているウシからのトロンビンは、ＨＩＶ及び肝炎に対する重大な危険性がないと見なされたウシから得られるものであるが、このウシが海綿状脳症や脳炎などの他の病原体を保有している可能性はある。
【００３２】
フィブリン糊の調製を目的に、これまでさまざまな方法が開発されてきた。Ｒｏｓｅらに付与された米国特許第４，６２７，８７９号には、（ａ）梅毒、肝炎又は後天性免疫不全症候群など１種類又は複数種類の血液感染病についてスクリーン検査を行ったヒトや、雌ウシ、ヒツジ、ブタなどの他の動物などの単一ドナーから新鮮な血漿を得て、これを約８０℃にて少なくとも約６時間、好ましくは少なくとも約１２時間凍結するステップと、（ｂ）上澄みとフィブリノゲン及びＸＩＩＩ因子を含む寒冷沈降懸濁物とを形成するように、例えば約０℃と室温との間の温度に、凍結した血漿の温度を上昇させるステップと、（ｃ）その寒冷沈降懸濁物を回収するステップとを含む、フィブリン糊の調製においてプリカーサとして有用な、フィブリノゲン及びＸＩＩＩ因子を含む寒冷沈降懸濁物を調製する方法が開示されている。こうして得た寒冷沈降懸濁物の規定量と、ヒト、ウシ、ヒツジ又はブタのトロンビンなどのトロンビンを十分な量で含有する組成物とをその部位に適用して、懸濁物内のフィブリノゲンをフィブリン糊に変換してゲルとして固体化させることにより、フィブリン糊を調製する。
【００３３】
フィブリン糊を調製する第２の技術は、Ｍａｒｘに付与された米国特許第５，６０７，６９４号にＭａｒｘにより開示されている。この技術では、本質的に、上述した寒冷沈降物をフィブリノゲン成分供給源として用いてから、トロンビンとリポソームとを添加する。Ｂｅｒｒｕｙｅｒ，Ｍ．らによる「Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ ｂｙ ｂｏｖｉｎｅ ｔｈｒｏｍｂｉｎ ｕｓｅｄ ｗｉｔｈ ｆｉｂｒｉｎ ｇｌｕｅ ｄｕｒｉｎｇ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ」、（Ｊ．Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ、１０５（５）：８９２−８９７（１９９２））にて説明されている第３の方法は、ウシのトロンビンを、フィブリノゲン、フィブロネクチン、ＸＩＩＩ因子及びプラスミノゲンなどのヒトの凝固剤タンパク質だけでなく、ウシのアプロチニン及び塩化カルシウムとも混合することにより調製されるフィブリン糊を開示している。
【００３４】
Ｒｏｓｅら及びＭａｒｘによる上記特許及びＢｅｒｒｕｙｅｒによる技術文献にはそれぞれ、フィブリン接着剤を調製する方法が開示されているが、そのいずれにも、ウシのトロンビンを活性化剤として使用することに関連する欠点がある。ウシのトロンビンを含むフィブリン糊を使用したために発生した重大かつ生命を脅かす結果として、ウシのトロンビンを局所的に受けた患者が出血性体質になったという報告がある。この合併症は、比較的不純なウシのトロンビン調製物内におけるウシのＶ因子に対して患者が抗体をつくると起こるものである。この抗体がヒトのＶ因子と交差反応してＶ因子欠損症を起こし、ひどい場合には出血や死をもたらすことになる。Ｒａｐａｐｏｒｔ，Ｓ．Ｉ．ｅｔ ａｌ．、Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．、９７：８４−９１（１９９２）；Ｂｅｒｒｕｙｅｒ，Ｍ．、ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．、１０５：８９２−８９７（１９９３）；Ｚｅｈｎｄｅｒ，Ｊ．、ｅｔ ａｌ．、Ｂｌｏｏｄ、７６（１０）：２０１１−２０１６（１９９０）；Ｍｕｎｔｅａｎ，Ｗ．、ｅｔ ａｌ．、Ａｃｔａ Ｐａｅｄｉａｔｒ．、８３：８４−７（１９９４）；Ｃｈｒｉｓｔｉｎｅ，Ｒ．Ｊ．、ｅｔ ａｌ．、Ｓｕｒｇｅｒｙ、１２７：７０８−７１０（１９９７）を参照されたい。
【００３５】
Ｍａｒｘ及びＲｏｓｅらにより開示された方法に関連する別の欠点は、寒冷沈降物の調製に長い時間とかなりの費用がかかるということである。また、いかなるウィルスの汚染もないように常に細心の注意を払わなくてはならない。
【００３６】
上記に開示した方法に関連する別の欠点は、ヒトのトロンビンは、活性化剤として見なすことができても、臨床上の使用には利用できないため、患者がヒトのトロンビンに対して抗原反応を起こさないという証明ができないということである。類推により、組換型ヒトＶＩＩＩ因子が血友病者で抗原反応を起こすことがわかっている。Ｂｉａｓｉ，Ｒ．ｄｅ．、Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ａｎｄ Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ、７１（５）：５４４−５４７（１９９４）を参照されたい。したがって、ヒトの組換え型トロンビンの効果についてさらに臨床研究を行うまで、ヒトの組換え型トロンビンを用いればウシのトロンビンに関連して起こる抗原問題を回避できると簡単に想定することはできない。トロンビンに関する第２の問題は、これが自触反応性である、すなわち、自滅しがちであるため、取扱い及び長時間の保管が難しいということである。
【００３７】
最後に、上述したように、フィブリン糊は主にフィブリノゲン及びトロンビンから構成されているため、適量の血小板に欠けている。血小板は成長因子と治癒因子とを含んでおり、これらは血小板濃縮物内により多く含まれると考えられる。また、凝固プロセスは、血小板により促進される。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００３８】
したがって、小型で使用しやすく、従来技術による連続流体システムの欠点を持たない、血液及び他の生体流体を処理するための遠心システムがなお必要である。また、疾病感染の危険性がなく、生理学的副作用を起こす危険性もない、血小板ゲル組成物の調製に便利で実際的な方法も必要である。
【００３９】
血液収集時に、全血に含まれる、密度及びサイズの異なる複数種類の成分を、単純かつ低コストな使い捨てユニットを用いて自動的に分離するシステムも広く必要である。
【００４０】
また、回転連結構成要素を用いずに、複数の細胞バッチを同時に効率よく処理する細胞遠心処理システムが必要である。
【００４１】
さらに、フィブリン凝塊形成速度を高めて止血を促進する血小板濃縮物も必要である。
【００４２】
好ましくは、この装置を本質的に自己充足型とする。好ましくは、この方法の実施に必要な設備の価格を比較的低く抑え、この血液接触セットを、全血の分離が終了するたびに廃棄できるものとする。
【課題を解決するための手段】
【００４３】
以上に鑑み、本発明は、流体媒体内に懸濁又は溶解している成分を遠心法により分離するための方法及び装置を提供するものである。さらに具体的に言えば、本発明は、遠心法により、遠心機を回転させながら、抗凝固剤入り全血から血小板を多く含む血漿、白血球、貧血小板血漿、幹細胞などの１種類又は複数種類の全血成分を単離させることで、これらの成分を分離及び単離する方法を提供する。
【００４４】
本発明はさらに、単離した血液成分を治療に用いる方法を提供する。
【００４５】
本発明はさらに、遠心処理時に、特定の血液成分を引抜くと同時に供給源容器から全血を追加することのできる遠心機バッグを具備する全血成分分離装置を提供する。
【００４６】
本発明はさらに、遠心機による全血成分分離時に、全血を保持するための使い捨て可能な１回使用型遠心機バッグであって、必要な場所で使用されるタイプの携帯型遠心機で使用できるようにされたバッグを提供する。
【００４７】
本発明はさらに、使い捨て式遠心機バッグの容量より多い血液の一部から採取できる所定血液分画量を最大にする使い捨て遠心機バッグを具備した携帯型遠心機を提供する。
【００４８】
以上のみならず、本発明による他の目的を実現するために、本明細書内で具体化し広義に説明するように、本発明の一の実施形態は、ａ）１本又は複数本のチューブと、ｂ）可撓性である上方及び下方シートとを含む、軸を中心に回転するようにされた可撓性使い捨て式遠心機バッグとを含む。各シートは、ドーナッツ形状であり、中央コアを画定する内周部と外周部とを有しており、上方シート及び下方シートが重ね合わされ、完全に互いにその外周部でシールされており、チューブが、上方シートと下方シートとの間に挟持されて中央コアから外周部に向けて延伸しているため、上方及び下方シートがその内周部にてシールされると、チューブが上方シートと下方シートとの間でその内周部にてシールされて、遠心機バッグの内側環境及び外側環境と流体連通した状態となる。１本又は複数本のチューブは、遠心機バッグのチューブと同じ数である１本又は複数本の内腔を設けた供給ケーブルに流体接続されている。
【００４９】
本発明のもう１つの実施形態は、軸を中心に回転するようにされた剛性成形容器を含む。この容器は、頂端部が閉じ、底端部が開いた、軸方向コアを有する剛性環状本体を含む。この剛性成形容器はさらに、遠心処理を施す流体媒体を収容及び保持するための内側収集チャンバを含む。このチャンバは、外周部及び内周部を有し、その断面領域は、多少偏心された「８の字」状となっている。この剛性成形容器はさらに、コアから径方向に延伸し、チャンバの外周部近傍の地点と流体連通している第１のチャネルと、コアから径方向に延伸し、８の字状チャンバの狭窄部分又は「首」付近領域と流体連通している第２のチャネルとを含む。したがって、第１及び第２のチャネルにより、内側収集チャネルの内側環境と外側環境とが流体連通している。この第１及び第２のチャネルは、引入れ腔及び引出し腔を有する二腔管に流体接続されている。
【００５０】
本発明のさらに別の実施形態は、流体媒体に含まれている成分を分離するための装置及び方法である。具体的に言えば、本発明は、全血を多血小板血漿及び貧血小板血漿などの分画に分離できるように、遠心法の原理を用いる。本発明の一態様において、この成分分離は、回転自在な遠心機モータを使用することにより行われる。このモータは、中央柱状部を有する基部と、中央コアを有し、遠心機モータ内に配置可能でモータと共に回転可能な使い捨て式遠心機バッグとを含むものである。遠心処理時に全血を保持する、この使い捨て式遠心機バッグはさらに、全血を遠心機バッグに導入するための導入チューブと、所望の血液分画を遠心機バッグから取り出すための排出チューブとを含む。この導入及び排出チューブは、二腔管と流体連通している。遠心機バッグは、***する柱状部をバッグ中央コア内に挿入してカバーで固定することにより、遠心機ロータ内に着脱自在に固定される。遠心機が回転している間、全血の成分は、それぞれの密度に基づいて遠心機バッグ内の径方向かつ水平方向に位置するため、流体媒体成分は、密度の異なる他の成分から分離されることになる。
【００５１】
本発明は、全血が所望程度に分離されたら、遠心機が回転し続けている間に、遠心機バッグから排出チューブを介して１つ又は複数領域内の所望分画を特異的に取り出すことにより、所望分画をオンラインで取り出せるようにする方法を提供するものである。所望成分の採取と同時に、又はこの後に、導入チューブを介して血液の一部を遠心機バッグに追加することができる。一の実施形態において、遠心機バッグは、可撓性かつ透明で略平坦なドーナッツ状のバッグである。別の実施形態における遠心機バッグは、遠心処理時に流体媒体を収容及び保持するための内側チャンバを有する剛性で透明な容器である。このチャンバの断面は、多少偏心した８の字形状である。
【００５２】
本発明のもう１つの態様は、導入チューブ及び排出チューブを有する使い捨て式遠心機バッグを含む。この排出チューブは、屈曲部品に流体接続されている。
【００５３】
本発明の別の態様は、遠心機バッグを保持するための遠心機ロータを含む。このロータは、溝を設けて***している第１の中央柱状部を含む基部と、溝を設けて***している第２の中央柱状部を含むカバーとを含む。遠心機バッグは、その内側環境及び外側環境と流体連通している導入チューブ及び排出チューブを含む可撓性のドーナッツ状バッグであり、これらのチューブは、基部及びカバーに設けられた柱状部溝内に位置して、遠心機バッグを基部及びカバーに対する固定位置に保持している。これにより、バッグが、基部及びカバーとは別に回転してしまうことはなく、基部及びカバーと同時に同じ回転速度にて回転するようになる。
【００５４】
本発明の別の態様は、遠心機バッグを保持するための遠心機ロータを含む。このロータは、遠心機バッグを間に固定するための基部とカバーとを含む。この遠心機カバーはさらに、チューブの遠位端を操作者に見えやすくするため、カバー又は基部の中央から間隔をおいて位置する１つ又は複数の同心状表示円を含む。
【００５５】
流体媒体（例えば全血）の成分を分離する本発明の別の態様は、複雑形状の内側チャンバを含む遠心機ロータを用いる。このチャンバは、遠心処理時に流体媒体を保持するための可撓性でドーナッツ状の遠心機バッグを支持するものである。この遠心機ロータは、下方チャンバを有する基部と、上方チャンバを有するカバーとで画定されている。カバーを基部上に重ねると、上方及び下方チャンバが、ロータの環状内側チャンバを画定する。内側ロータチャンバの断面は、流体媒体（例えば、抗凝固剤入り全血）の遠心処理により得られる所望成分（例えば、多血小板血漿）の収集量を最大限にするように特に設計された、多少偏心した８の字形状である。この遠心機バッグは、実質的に可撓性である材料から形成されているため、遠心処理時のそのプロファイルを決定する少なくとも１つが、バッグ内に含まれる流体媒体量となっている。この遠心機バッグの最大容量が充填されると、ロータチャンバの内側形状と同じとなる。
【００５６】
本発明のもう１つの態様は、流体媒体の所望成分をオンライン採取する方法を含む。本発明の一の実施形態では、遠心機と、遠心機内に配置可能であり、分離時に流体媒体を入れるための使い捨て式遠心機バッグとを用いる。このバッグはさらに、少なくとも１本の導入チューブと少なくとも１本の排出チューブとを含む。遠心機は、基部部分と、カバーと、外側リムとを有する遠心機ロータを含む。基部部分とカバーとが、遠心機ロータの内側を画定しており、これは上方チャンバと下方チャンバとに分けられている。使い捨て式遠心機バッグを、下方チャンバ内にて水平に配置でき、カバーにより遠心機基部に適切に固定することができる。遠心機バッグは、二腔管により供給源（例えば、抗凝固剤入り自家由来全血を含む容器）及び収集容器（例えば、引き続き処理される、多血小板血漿や他の成分用容器）と流体接続されている。二腔管は、遠心機バッグの導入チューブに流体接続された引入れ腔と、遠心機バッグの排出チューブに流体接続された引出し腔とを含む。この遠心機バッグは、遠心機の回転軸に対して実質的に環状である。遠心機バッグが遠心機ロータ内に配置され、これと同時に回転できるように適切に固定されると、遠心機が回転している間に、流体媒体が引入れ腔から遠心機バッグに供給される。バッグ内の成分は、それぞれの密度に基づいて、径方向位置及び水平方向位置に移動する。所望程度の分離が行われたら、遠心機を回転させながら、所望分画を遠心機バッグから引出し腔を介して取り出すことができる。採取すべき分画の位置は、外周部近傍に位置する成分を導入チューブから引抜くことにより、又は、液状媒体の一部をバッグ内に追加することにより、必要に応じて、排出チューブ領域内でシフトさせることができる。この方法の一の実施形態において、バッグは、可撓性かつ透明なドーナッツ状バッグである。この方法の別の実施形態によるバッグは剛性で透明なバッグであり、断面が偏心８の字形状である内側チャンバを含んでいる。
【００５７】
本発明はさらに、自動化することのできる液体遠心処理システムを提供する。
【００５８】
本発明はさらに、内側リード駆動機構を有して小型サイズを実現できる遠心機を提供する。
【００５９】
本発明はさらに、あらゆる医療用にトロンビンを生成及び単離できる方法及び装置を提供する。
【００６０】
本発明はさらに、完全に自家由来である血小板ゲルを調製する方法を提供する。
【００６１】
本発明はさらに、ウシのトロンビン及びヒトの組換え型トロンビンを使用することに伴う危険性を回避した自家由来血小板ゲルを提供する。
【００６２】
本発明はさらに、あらゆる用途向けの自家由来血小板ゲルを提供する。
【００６３】
本発明はさらに、医療用途で使用される細胞成分を提供する。
【００６４】
本発明によるさらなる新規特徴及び利点のいくつかを、以下の説明及び実施例に記載する。当業者であれば、以下の説明により他の特徴及び利点も明らかになるであろう。また、本発明を実施することにより、他の特徴及び利点を発見できるであろう。
【００６５】
本明細書に組入れられており、本明細書の一部を構成している添付図面は、本発明の好適実施形態を例示しており、以下の記載と合わせて、本発明の原理を説明する役割を果たすものである。
【００６６】
（発明の詳細な説明）
本発明による遠心処理システム１０は、図１に最もよく図示されている。このシステムは、固定基部１２と、所定軸Ａを中心に回転するように該固定基部１２に回転自在に取り付けられた遠心機２０と、連続流用に設計された使い捨てバッグ（図示せず）を収容するためのロータ２０２とを有する。図示するように、遠心処理システム１０は、主要テーブルプレート又は固定基部１２と、側壁１３と、透明若しくは不透明のプラスチック、又は他の適した材料で形成された着脱式蓋１５とを含む防護用囲い込み部１１を具備しており、これにより、処理システム１０の構成要素を構造的に支持し、可動部品を包囲して安全性を確保し、遠心処理システム１０を携帯できるものとしている。遠心処理システム１０はさらに、蓋１５の開口部（図示せず）上に取り付けられたクランプ２２を具備する。クランプ２２は、供給ケーブル２２８内を移動する流体の流れを妨げることなく、軸Ａ又は軸Ａ付近に固定されている。側部取付けモータ２４も設けられており、これは、システムが動作している間、ドライブシャフトアセンブリ２８（図２参照）及びそれと相互連結されて駆動されるロータアセンブリ２００を、供給ケーブル２２８の結合を制御するために選択された速度比、例えば２：１（すなわち、ドライブシャフトアセンブリ２８が１回転する毎にロータアセンブリ２００が２回転する）で同じ回転方向に回転させるように、駆動ベルト２６により遠心機２０に接続されている。
本発明はさらに、図６０で最もよくわかるように、さまざまな治療方法のために、特定の血液成分を回収して処理するためのディスペンサー装置９０２に関する。その具体的成分の例として、自家由来トロンビン及び自家由来血小板ゲルを生成するために使用可能な多血小板血漿、貧血小板血漿及び白血球が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００６７】
次に図２を参照すると、連続流遠心処理システム１０は、ロータ２０２を着脱式又は非着脱式に装着する遠心機２０を含む。遠心機２０とそれに自能されている中間シャフトギアアセンブリ１０８（ギア１１０、１１０’、１３１及び７４を含む）の設計が、本発明の重要な構成要素である。これにより、遠心処理システム１０全体を小型化し、ドライブシャフトアセンブリ２８とロータアセンブリ２００とを所望の速度比で回転させることができる。
【００６８】
図２で最もよくわかるように、遠心機２０の組立てはまず、下方ベアリングアセンブリ６６を下方ケースシェル３２内に挿入して、下方ケースアセンブリ３０を形成することから始める。次に、ケーブルガイド１０２並びにギア１１０及び１１０’を、以下で詳細に説明するように下方ケースアセンブリ３０内に配設して、ギア１１０及び１１０’を下方ベアリングアセンブリ６６に可動状態で係合させる。次に、上方ベアリングアセンブリ１３０を頂部ケースシェル１２６内に挿入してベアリングアセンブリ１２４を形成し、これを下方ケースアセンブリ３０に嵌合させる。これにより、ギア１１０及び１１０’は、上方ベアリングアセンブリ１３０とも可動状態で係合し、留め具２９により所定位置に保持される。下方ベアリングアセンブリ６６は固定基部又は主要テーブルプレート１２にネジ１４により軸支されており、その結果遠心機２０は、（図１に図示したように）主要テーブルプレート１２に垂直な軸Ａを中心に回転することができる。
【００６９】
次に図３〜図５を参照すると、下方ケースアセンブリ３０は、必ずしもそうでなくともよいが、金属材料から機械加工又は成形されているものが好ましく、下方ケースシェル３２と、タイミングベルトリング４６と、タイミングベルトフランジ５０と、ベアリング６２（例えば、ボールベアリングなど）とを備えている。下方ケースシェル３２は、細長い主要本体４０を具備しており、当該主要本体４０は、タイミングベルトリング４６及びタイミングベルトフランジ５０を収容するために、直径を小さくした首部分３６を、当該主要本体４０の一端から延出させている。直径の大きな主要本体４０の終端は、首部分３６至り、それによってタイミングベルトリング４６用のベアリング面４２を有する外側肩部３８が形成されている。図５で最もよくわかるように、タイミングベルトリング４６及びタイミングベルトフランジ５０の内径は、首部３６の外径よりわずかに大きくなっており、これにより、双方を首部３６に嵌合できるようになっている。肩部３８はさらに、それぞれタイミングベルトリング４６及びタイミングベルトフランジ５０の穴ガイド４８及び５２と整合する、内向するネジ穴４４を少なくとも１つ、好ましくは４つを備えている（図５に図示）。これにより、組み立てられた際、ネジ５４は穴ガイド５２及び４８に収容され、ネジ穴４４内に螺装されて、タイミングベルトリング４６及びタイミングベルトフランジ５０を首部分３６に固定することができる。下方ケースシェル３２はまた、その内部を貫通する軸方向若しくはスリーブ穴５６と、外側肩部３８とほぼ同じ水平面に位置する内側肩部５８及び上方面６０とを有する。ベアリング６２（図４に図示）は、スリーブ穴５６内にそれと同軸状にプレス嵌めされて、上方面６０と同一平面上に配置される。内側肩部５８はまた、図６〜図８に示す下方ベアリングアセンブリ６６の上方面６８上に当接する下方荷重面６４を有する。
【００７０】
下方ベアリングアセンブリ６６は、下方ギア挿入部７０と、ボールベアリング８４と、ギア７４と、バネピン７６及び７６’とを含む。以下で明かなように、ギア７４は、中間シャフトギアアセンブリ１０８のギア１１０、１１０’などのように嵌合又は接触するギアに入力回転速度を伝達するために、適した設計のものとし、接触するギアと組み合わされた際に所望のギア列又は速度比が得られるようにサイズ及び歯数を選択すればよい。例えば、ギア７４を、直線状又は螺旋状の傘歯車、はすば歯車、ウォーム歯車、ハイポイド歯車などとして、適した材料で形成することができる。一の好適な実施形態において、ギア７４は、遠心処理システム１０の操作速度における歯動作を滑らかにするために、螺旋状歯車とする。下方ギア挿入部７０の上方面６８は、軸方向に配設されたスリーブ７２を含んでおり、これがギア７４を収容及び保持する。ギア７４は、少なくとも１つ、好ましくは２つのバネピン７６及び７６’によりスリーブ７２内に保持させることが好ましい。このバネピンは、下方ギア挿入部７０内を水平方向にスリーブ７２内に延出するバネピン穴７３及び７３’内に配設される。このため、ピン受け部７７及び７７’を有するギア７４がスリーブ７２内に挿入されると、バネピン７６及び７６’が、対応する受け部７７及び７７’に侵入して、ギア７４を所定位置に固定することになる。無論、他の組立技術を用いて、ギア７４を下方ギアアセンブリ６６内に配設及び保持することもでき、こうした技術も本開示内容の範囲内と見なされる。例えば、ギア７４を、プレス嵌め又は摩擦嵌合など、これに限定しないいくつかの他の方法でスリーブ７２内に保持することができる。又は別法として、ギア７４及び下方ギア挿入部７０を単一部材から成形してもよい。
【００７１】
下方ギア挿入部７０の基部７８の直径は、やや裾広がりな構造により、下方ギア挿入部７０の上方本体８０よりわずかに大きい。このやや裾広がりな構造により、肩部８２が形成されており、ここにボールベアリング８４が当接する。組み立てられると、下方ベアリングアセンブリ６６は、下方ケースシェル３２の首部３６内に延伸するスリーブ穴５６内に収容される。そこで、ボールベアリング８４上方で下方ベアリングアセンブリ６６の外径とスリーブ穴５６の内径との違いにより発生する環状スペース内に、保持リング８６を挿入する。第２の保持リング８７（図２に図示）も、ボールベアリング８４上方で下方ベアリングアセンブリ６６の外径とスリーブ穴５６の内径との違いにより発生する環状スペース内に挿入して、下方ギア挿入部７０を下方ケースシェル３２内で固定する。これにより、ボールベアリング６２及び８４がそれぞれ保持リング８６及び８７で固定されるため、下方ケースシェル３２は、下方ベアリングアセンブリ６６を中心に回転自在に軸支されるが、長手方向及び横断方向移動に対しては固定される。したがって、組立て時、ネジ１４を基部７８内のネジ穴７９に固定することにより、下方ベアリングアセンブリ６６を固定基部１２に取り付けることができる。駆動ベルト２６が係合されると、下方ケースシェル３２は、固定されている下方ベアリングアセンブリ６６の周りを自由に回転することができる。
【００７２】
次に図５を参照すると、下方ケースシェル３２が備える首部分３６とは反対側の端部から延出しているのが、複数の突起又は指部８８、９０、９２及び９４である。突起８８と９０との間、及び突起９２と９４との間にそれぞれあるのが、チューブガイド１０２（図９）を収容するための凹部スロット９６及び９８である。チューブガイド１０２の機能については以下で詳細に説明するが、簡単に言えば、遠心機バッグ２２６に接続された供給ケーブル２２８を、中間シャフトギアアセンブリ１０８を通過させてから遠心機２０外部へ案内するものである。
【００７３】
突起９０と９２との間、及び突起８８と９４との間にそれぞれ位置するのが、中間シャフトギアアセンブリ１０８のギア１１０及び１１０’（図２）を収容するための凹部スロット１０４及び１０６である。ギア１１０及び１１０’を好ましくは、ギア７４と嵌合接触し、遠心機２０内におけるギア列比全体を所望通りにするように構成する。これに関しては、ギア１１０及び１１０’を、螺旋状歯車設計など、ギア７４と同様の形態（例えば、サイズ、歯数など）となるように選択することが好ましい。図２及び図１４に図示したように、中間シャフトギアアセンブリ１０８は、ギア７４及び１３１と係合する１対のギア１１０及び１１０’を備える。この機械技術における当業者であればギア及びギア組合せ構造は周知であるが、本明細書にも簡単にその内容を開示する。
【００７４】
図１０は、ギア１１０の組立てを示す分解図であり、図１１は、図１０に示したギア１１０を組み立てた状態を示す斜視図である。ギア１１０’も同様に構成されている。ギア１１１がまず、キーストック１１４及び外側保持リング１１６により、中間ギアシャフト１１２上に固締される。次に、ボールベアリング１１８が、平坦なワッシャ１２０及び押さえネジ１２２により、中間ギアシャフト１１２に装着される。下方ケースシェル３２の凹部スロット１０４及び１０６が、ボールベアリング１１８及び１１８’（図示せず）を収容する。別の実施形態では、ボールベアリング１１８をブシュ（図示せず）にしてもよい。組み立てると、ギア１１０及び１１０’が下方ギア７４と接触して（図２及び図１４参照）、固定ギア７４からギア１１０及び１１０’へと力を伝達して、ギア１１０及び１１０’を所定速度で回転させることにより、駆動されたロータアセンブリ２００に所望する出力回転速度を得るための接触面が形成される。ロータアセンブリ２００は、ドライブシャフトアセンブリ２８により駆動される。ドライブシャフトアセンブリ２８は、駆動モータ２４により入力回転速度で回転するものであり、一の好適な実施形態において、ロータアセンブリ２００を、ギア１１０及び１１０’を用いて、その入力回転速度の２倍の出力回転速度で回転させるように構成されている（すなわち、入力回転速度に対する出力回転速度の割合が２：１である）。この比率は、例示した実施形態では、下方ケースシェル３２を駆動モータ２４で回転させながら、ドライブシャフトアセンブリ２８内に位置するギア１１０及び１１０’を固締して、遠心機の中心軸Ａを中心に回転させることにより実現される。ギア１１０及び１１０’はまた、静止ギア７４と接触することにより、遠心機中心軸Ａを横切るそれぞれの回転軸を中心に回転させられる。このとき、図示したように、ギア１１０及び１１０’の回転軸は一致している。ギア１１０及び１１０’は、下方ケースシェル３２と共に、回転軸を中心に回転することにより、ロータアセンブリ２００の入力回転速度に対する出力回転速度を所望通り２：１にすることができる。
【００７５】
これについて、ギア１１０及び１１０’及びチューブガイド１０２は、頂部ベアリングアセンブリ１２４を下方ケースアセンブリ３０に装着することにより、所定位置に固締される。頂部ベアリングアセンブリ１２４（図１２に図示したように）は、頂部ケースシェル１２６と、ボールベアリング１２８と、上方ベアリング１３０とを含む。頂部ケースシェル１２６は、図１２及び図１３で最もよくわかるように、上方面１３２と、下方リップ１３４と、その中を通る中央又は軸方向穴１３６とを含む。上方面１３２は軸方向穴１３６からわずかに突出しているため、下方面１４０を有する肩部１３８が形成されている（図１３に図示）。下方リップ１３４は、下方ケースシェル３２の上方リップ１００（図５に図示）を反対向きにしたものである。
【００７６】
上方ベアリングアセンブリ１３０（図１２）は、上方面１３３と下方面１３５とを含み、上方面１３３は、ロータ２０２を収容する手段を有している。下方面１３５には、下方面１３５に垂直に径方向外向きに突出し、下方面と同軸状に配置された柱状部１３７が設けられている。上方ベアリングアセンブリ１３０はさらに、軸方向に位置する穴１３９を含む。この穴は、柱状部１３７及び上方面１３３を横断しており、上方ギア挿入部１３１を収容するものである。上方ギア挿入部１３１も軸方向穴１４２を備えているため、柱状部１３７内に同軸状で配置されると、軸方向穴１３９及び１４２により、供給ケーブル２２８を頂部ケースシェル１２６の上方ベアリングアセンブリ１３０からケーブルガイド１０２へと通すことができるようになる（図１４に図示）。下方ベアリングアセンブリ６６について上述したように、上方ギア挿入部１３１を、中間シャフトギアアセンブリ１０８のギア１１０、１１０’などの嵌合又は接触するギアから入力回転速度を伝達される適した設計であれば、接触するギアと組み合わされた時点で所望のギア列又は速度比が得られるように選択したサイズ及び歯数を備えつつ、どのように設計してもよい。例えば、ギア挿入部１３１を、直線状又は螺旋状の傘歯車、はすば歯車、ウォーム歯車、ハイポイド歯車などとして形成することができる。一の好適な実施形態において、ギア１３１を、遠心処理システム１０の操作速度における歯動作を滑らかにするように、螺旋状歯車とする。ギア挿入部１３１を好ましくは、少なくとも１つ、好ましくは２つのバネピン（図示せず）により柱状部１３７内に保持する。しかし、他の組立技術を用いて、ギア挿入部１３１を柱状部１３７内に配設及び保持することもでき、こうした技術も本開示内容の範囲内と見なされる。例えば、ギア挿入部１３１を、プレス嵌め又は摩擦嵌合など、これに限定しないいくつかの他の方法で柱状部１３７内に保持することができる。又は別法として、ギア挿入部１３１及び上方ベアリングアセンブリを単一部材から成形してもよい。
【００７７】
上方ベアリングアセンブリ１３０を、頂部ケースシェル１２６の軸方向穴１３６内に挿入して、下方面１３５を頂部ケースシェル１２６の上方面１３２と同じ高さに配置する。続いて、ボールベアリング１２８を、柱状部１３７の外径と頂部ケースシェル１２６の内側側壁１４１との間に形成される環状スペース内に挿入して、上方ベアリングアセンブリ１３０を所定位置に固定する。
【００７８】
ここで図１３を参照すると、下方リップ１３４は、下方ケースシェル３２から延出した突起８８、９０、９２及び９４と嵌合する構造となっている。具体的に言えば、下方リップ１３４の外径が、下方ケースシェル３２が含む主要本体４０の上方端部の外径と一致しており、凹部１４４及び１４８が、突起８８及び９２をそれぞれ収容及び保持し、凹部１４６及び１５０が突起９４及び８８をそれぞれ収容及び保持する。各凹部及び各突起に穴が設けられているため、組み立てられた時点で、留め具１５２（図１２に図示）をその穴に挿入して、頂部ベアリングアセンブリ１２４を下方ケースアセンブリ３０に固定することができる。
【００７９】
凹部１４４と１４６との間、及び凹部１４８と１５０との間に位置しているのがそれぞれ、中間ギアアセンブリ１０８のギア１１０及び１１０’を収容するための凹部スロット１０４’及び１０６’である（図２及び図１４）。ギア１１０及び１１０’を好ましくは、ギア挿入部１３１と嵌合接触し、遠心機２０内におけるギア列比全体を所望通りにするように構成する。これについて、ギア１１０及び１１０’を好ましくは、螺旋状歯車設計など、ギア１３１と同様の形状（例えば、サイズ、歯数など）となるように選択する。さらに、凹部１４４と１５０との間、及び凹部１４６と１４８との間に凹部スロット９６’及び９８’がそれぞれ設けられている。ギア１１０及び１１０’を図１４に図示したように組み立てると、下方ケースシェル３２及び頂部ケースシェル１２６それぞれからの凹部スロット９６及び９６’がポート１５４を形成し、凹部スロット９８及び９８’がポート１５６を形成するため、供給ケーブル２２８をポート１５４又は１５６を用いて遠心機２０から出すことができる。上述した方法は、本発明による遠心処理システム１０を組み立てる１つの方法である。しかし、当業者であれば、下方ケースシェル３０及び上方ベアリングアセンブリをさまざまな方法で接合して、４つのギアを互いに適切に整合させられることがわかるであろう。
【００８０】
上記のように、遠心処理システム１０は、遠心機２０を出入する流体給送ライン、ケーブルなどを締付ける又は捻ることなく、血液及び他の流体を効率よく分離するのに有用な小型携帯装置となる。ギア７４、ギア１１０及び１１０’、及び上方ベアリング１３０のギア挿入部１３１を少なくとも一部含む自己充足型内側ギア列を用いれば、遠心処理システム１０をさらに小型化することができる。上方ベアリング１３０のギア挿入部１３１を好ましくは、ギア１１０及び１１０’の回転速度を、結果的にギア７４から及び上方ベアリング１３０のギア挿入部１３１へと伝達するギア１１０及び１１０’との接触面（１つ又は複数）を設けるように選択する。一の好適な実施形態において、上方ベアリング１３０のギア挿入部１３１は、ロータアセンブリ２００を回転させるように上方ベアリング１３０内で堅く取り付けられ、螺旋状ギア７４と同様に設計された、すなわち、歯のねじれ量、円ピッチ、螺旋角などが同じ又は同様の螺旋状歯車である。操作時、下方ケースシェル３２が遠心機軸Ａを中心に、０ｒｐｍ〜５０００ｒｐｍの間で選択された回転速度などの入力回転速度で回転している間、ギア７４は静止状態を保つ。ギア１１０、１１０’は、シェル３２と共に、静止状態のギア７４に接触することにより、どちらも遠心機軸Ａを中心に回転する。螺旋状歯車１１０及び１１０’が上方ベアリング１３０のギア挿入部１３１に接触すると、ギア挿入部１３１及びこれに接続されている上方ベアリング１３０が、入力回転速度とは異なる、つまりそれより速い出力回転速度で回転する。
【００８１】
本発明を実施するにあたり、いくつかのギア比又はトレイン比（すなわち、入力回転速度／出力回転速度）を使用できるが、本発明の一の実施形態は、１：２のギア列比を用いる。この場合、ギア７４、ギア１１０、１１０’、及び上方ベアリング１３０のギア１３１の組合せ及び構成を、このギア列比を実現できるように選択する。特に、ギア１１０、１１０’は、ギア列比の実現に確実に作用するため、一の実施形態において、同様に設計された４つのギアを使用することができる。このことから、入力回転速度から出力回転速度へと速度を速めつつ、製造コストを低く抑えることができる。同様に、機械技術における当業者であればわかるように、数、サイズ及び構成が異なってもこの比（また他の選択比）を実現できるギアの数多くの組合せを用いて本発明を実施することができ、こうした組合せも、本開示内容の一部と考えられる。例えば、２つのギア１１０、１１０’は、伝動力を分配し、動作している遠心機内のバランスをとるものとして中間シャフトギアアセンブリ１０８内に図示されているが、これより多い（又は少ない）ギアを用いて、ギア７４の回転を上方ベアリング１３０のギアに伝達してもよい。また、内側ギアの数、サイズ及び構成を、図１〜図１４に図示した例とは異なるものにできるように、ギア７４、ギア１１０、１１０’、及びギア挿入部１３１の形成に用いる材料も、当技術分野で周知の適したギア材料であればいずれを用いてもよい。
【００８２】
例示した遠心処理システム１０の、有利なことに小型化を貢献するもう１つの特徴は、側部取付け駆動モータ２４である。図１及び図２に図示したように、駆動モータ２４は、囲い込み部１１の固定基部１２上で遠心機２０に隣接して取り付けられる。駆動モータ２４を、遠心処理システム１０の遠心機２０の回転速度を所望通りにするために有用な、標準電気モータなどのいくつかのモータから選択することができる。駆動モータ２４を手動操作型にしても、一の好適な実施形態のように、遠心処理システム１０のコントローラにより自動操作可能なモータコントローラを設けて駆動モータ２４の操作を行ってもよい（これについては、本発明による自動化された実施形態を参照しながら以下で詳述する）。図１に図示したように、駆動ベルト２６を用いて、ドライブシャフトアセンブリ２８（及び、それに伴い、ロータアセンブリ２００）を回転させることができる。この実施形態において、駆動ベルト２６に好ましくは、ドライブシャフトアセンブリ２８が含む下方ケースアセンブリ３０部分のタイミングベルトリング４６の外側歯と嵌合するように選択した内側歯を設ける（駆動ベルトを使用する場合には、歯は不要）。ただし、本発明は、駆動ベルト２６を使用することに限定されるものではなく、駆動ベルトの代わりに駆動チェーン、モータ２４により駆動される外側ギア、及び他の適した駆動機構のいずれをも使用することができる。駆動モータ２４は、特定回転速度で操作されると、ドライブシャフトアセンブリ２８をそれとほぼ同じ回転速度で回転させる（すなわち、入力回転速度）。単一速度駆動モータ２４を用いることも、別の実施形態において、複数及び／又は可変速度モータ２４を備えて、入力回転速度に、所望の出力回転速度（すなわち、遠心機バッグ２２６を含むロータアセンブリ２００の回転速度）が得られるように操作者又はコントローラにより選択可能な一定範囲を設けることもできる。
【００８３】
本発明は概して、遠心法の原理を用いて、流体媒体から所定の分画（１種類又は複数種類）を分離するための装置及び方法を含む。本発明の原理を複数の用途に用いることができるが、本発明の一の実施形態は、抗凝固剤入り全血から所定の分画（１種類又は複数種類）（例えば、多血小板血漿又は貧血小板血漿）を単離することを含む。例えば、多血小板血漿を、血小板濃縮物又はゲルの調製に用いることができる。さらに具体的に言えば、手術前又は手術時に患者から採った血液を用いて、手術時に、多血小板血漿から自家由来血小板ゲルを調製することができる。
【００８４】
遠心機２０について、上記に説明し、本発明の小型携帯型態様を実証してきた。本発明の装置を完成させるため、ボール又はロータ２０２とも呼ばれる流体収集装置を、図１及び図２に図示したように、上方ベアリングアセンブリ１３０の上方面１３３に取り付ける。ロータ２０２を上方ベアリングアセンブリ１３０に永久装着することが好ましいが、着脱式に取り付けてもよい。ロータ２０２は、下方環状溝２１２を設けたロータ基部２０４（図１５に図示）と、上方環状溝２１４を設けたロータカバー２０６とを含む。図１７及び図１８に図示したように、ロータ２０２の環状内側チャンバ２１６は、この下方環状溝２１２及び上方環状溝２１４により画定されている。下方環状溝２１２は、遠心処理する流体媒体を含有するための遠心機バッグ２２６を収容する部分である。この遠心機バッグ２２６を、好ましくは、これに限定するわけではないが、好ましくは二腔構造型である供給ケーブル２２８を介して、容器３９８及び４００にそれぞれ供給用及び収容用に接続する。技法によっては、複数の出口又は入口ポートが必要となる場合もあり得るため、本発明の供給ケーブル２２８に複数の内腔を具備することができる。好適実施形態による供給ケーブル２２８は、引入れ腔２３０と引出し腔２３２とを含んでいるため、遠心機ロータ２０２が回転している間に、流体媒体を遠心機バッグ２２６に供給する、かつ遠心機バッグ２２６から取り出すことができる。
【００８５】
遠心機ロータ２０２の一の実施形態を、図１５〜図１８により具体的に例示する。図１５は、ロータ基部２０４の斜視図であり、図１６はロータカバー２０６の斜視図である。図１７は、図１の線分１７を通る断面から見たロータ２０２の側面断面図であり、図１８は、図１の線分１８を通る断面から見たロータ２０２の側面断面図である。図１５に図示したように、ロータ基部２０４は、***した環状リム２０８と、基部２０４内で軸方向に位置して***している柱状部２１８とを含む。***した柱状部２１８にはさらに、その直径を横切って延伸する溝２２２が形成されている。この***した環状リム２０８と***した柱状部２１８とにより、環状溝２１２が画定されている。リム２０８の高さは、柱状部２１８の高さと同じである。図１６に示したロータカバー２０６は、***した環状リム２１０と、ロータカバー２０６内で軸方向に位置し、***した柱状部２２０とを含む。***した柱状部２２０にはさらに、その直径を横切って延伸する溝２２４が形成されている。このリム２１０と柱状部２２０とにより、環状溝２１４が画定されている。リム２１０の高さは、柱状部２２０の高さと同じである。
【００８６】
一般に、使用時に遠心機ロータ２０２が組み立てられると、中央コア２４２を有するドーナッツ形状の遠心機バッグ２２６（図１９及び図２０）などの可撓性遠心機バッグがロータ基部２０４内に配置されて、中央の柱状部２１８が、遠心機バッグ２２６のコア２４２内に延在し、遠心機バッグ２２６は環状溝２１２内に配置される。ロータカバー２０６は、図１７及び図１８に図示したように、溝２２２と溝２２４とが整合するように、ロータ基部２０４上に重ねられる。ロータカバー２０６がロータ基部２０４に適したネジ、留め具など（図示せず）により固定されると、リム２０８及び２１０が互いに密着して、環状溝２１２と環状溝２１４とによりロータ内側チャンバ２１６が画定される。一の実施形態において、柱状部２１８及び２２０を互いに密着させる。別法として、遠心機バッグ２２６の内周部２４０を柱状部２１８と２２０との間に固定して、柱状部２１８及び２２０が互いに全く物理的に接触しないようにすることもできる。
【００８７】
遠心機の一の実施形態に関する上述を念頭におきながら、遠心処理システム１０に用いる遠心機の別の好適実施形態について、以下に説明する。図１９〜図２２を参照すると、遠心機６４０の一の好適な実施形態が例示されている。この遠心機６４０は、所望の入力駆動比に対する出力駆動比（上述したように、例えば２：１）を得るように、内側ギアアセンブリではなく、特有の配置方法による内側プーリシステムを使用している。遠心機６４０は、側部取付けモータ２４（図１に図示）を用い、駆動ベルト２６を介して、遠心機の回転部分の回転速度を所望通りにしている。
【００８８】
まず図１９を参照すると、遠心機６４０は、遠心機６４０の操作時に遠心機バッグを収容及び支持するための凹部面６４８を設けたロータ基部６４４（又は頂部プレート）を含む。ロータ基部６４４は、留め具により、下方ケースシェル６６０の別個の回転自在部分（すなわち、図２０及び図２１を参照しながら説明する頂部プーリ６９８）に堅く取り付けられている。ロータ基部６４４の中央には、ケーブルポート６５６が設けられており、これを、ロータ基部６４４の凹部面６４８上に位置する遠心機バッグと流体接続されるはずの遠心機チューブ又は供給ケーブル用通路としている。遠心機６４０の操作時には、供給ケーブル及び可動部分（例えば駆動ベルト及びプーリ）に対する接触及び締付けを最小限に抑えて制御することが重要である。このため、下方ケースシェル６６０は、供給ケーブルを遠心機６４０内に侵入させられるように側部ケーブルポート６６２を含み、その位置を、重要なことに、アイドラプーリ６６６と６６８との間にして、挿入されたあらゆるチューブ又はケーブルと遠心機６４０の可動駆動構成要素との間に間隔を設けている。
【００８９】
ピン６６４でプーリ６６６、６６８を物理的に支持できるように、アイドラシャフト又はピン６６４を下方ケースシェル６６０内に取り付けて支持する。アイドラプーリ６６６、６６８は、遠心機６４０操作時にピン６６４の中心軸を中心に自由に回転できるように、軸受けによりピン６６４上に取り付けられる。アイドラプーリ６６６、６６８は、以下で図２０及び図２１を参照しながら詳述するように、駆動ベルト２６から下方ケースシェル６６０に提供又は付与された駆動力又は原動力をロータ基部６４４に移すことができるように、また、内側駆動ベルト６７０を遠心機６４０内に物理的に支持するように、具備されている。駆動ベルト２６は、側部取付けモータ２４（図１に図示）により駆動され、下方ケースシェル６６０に接触して、下方ケースシェル６６０を、その中心軸を中心に回転させる。その下方ケースシェル６６０は、駆動ベルト２６が側部取付けモータ２６により駆動されると基部６７４上で自由に回転できるように、基部６７４上に取り付けられている。基部６７４は、実質的に堅く、また、下方ケースシェル６６０と共に回転しないように、固定基部１２（図１に図示）に取り付けられている。
【００９０】
次に図２０〜図２２を参照すると、２：１などの所望の入力比に対する出力比を得るために内側プーリアセンブリを用いることについて、よりわかりやすくするために部分切取図として、遠心機６４０が図示されている。図示のように、基部６７４は、ゴム、プラスチックなどの振動吸収材料で製造された振動絶縁台６７６を含む。基部６７４はこの振動絶縁台６７４を介して比較的堅く固定基部１２（図１）に取り付けられている。側部取付けモータ２４（図１）から延びた駆動ベルト２６が、下方ケースシェル６６０に堅く取り付けられている駆動プーリ６８０に接触する（摩擦により、又は上述したように歯などを用いて）。駆動ベルト２６がモータ２４に駆動されると、下方ケースシェル６６０が駆動プーリ６８０を介してその中心軸（遠心機６４０の中心軸に相当する）を中心に回転する。この下方ケースシェル６６０の回転速度を、入力回転速度として考えることができる。
【００９１】
ロータ基部６４４にて入力回転速度より速い所望の速度を得るため、下方ケースシェル６６０を、遠心機の中心軸を中心に自由に回転できるように、基部６７４と嵌合するベアリング６９０により基部に取り付ける。ベアリング６９０は、底部プーリ６９２と基部６７４との間で所定位置に保持されており、底部プーリ６９２は、下方ケースシェル６６０が回転しても静止状態を保つように、基部６７４に堅く（ボルトなどにより）取り付けられている。例示したベアリング６９０は、下方ケースシェル６６０を基部６７４上で回転させられるようにツーピース式ベアリングである。下方ケースシェル６６０内には、底部プーリ６９２の外面に接触するように、内側駆動ベルト６７０が挿入されている。ベルト６７０を好ましくは、、摩擦力でベルト６７０を固定底部プーリ６９２の周囲に回転させられるように、底部プーリ６９２としっかり嵌合する適度な緊張を持たせて設置する。標準ゴムベルト又は歯付きベルトを用いると、この摩擦嵌合を強化することができる（無論、チェーンなどの他の駆動装置をベルト６７０の代わりに用いてもよい）。
【００９２】
内側駆動ベルト６７０は、一時的に遠心機６４０の外部を通過して、アイドラプーリ６６６及び６６８の外面と接触する。アイドラプーリ６６６及び６６８は、ベルト６７０に別の運動を付与することはないが、ピン６６４上で自由に回転するものであり、下方ケースシェル６６０による遠心機中心軸を中心とする回転を、同じ軸を中心に回転する別のプーリ（すなわち、頂部プーリ６９８）に伝えられるように具備されている。そこで、アイドラプーリ６６６及び６６８は、ベルト６７０を縛り付けることなく捻り、下方ケースアセンブリ６６０の上方部分内に給送して戻すことを補助する非剛性（又は回転自在な）支持部を提供するものである（図２０及び図２１で明らかなように）。内側駆動ベルト６７０は、下方ケースアセンブリ６６０内に給送されると、頂部プーリ６９８の外面に接触する。
【００９３】
遠心機６４０の操作時、内側駆動ベルト６７０の動作により、頂部プーリ６９８は遠心機中心軸を中心に回転する。アイドラプーリ６６６及び６６８は、遠心機６４０内におけるプーリ６９２及び６９８に対するその位置及び方向から、ロータ基部６４４を下方ケースシェル６６０と同じ方向に回転させる。重要なことに、頂部プーリ６９８が、頂部プーリ６９８の内面に摩擦接触するように下方ケースシェル６６０の中心シャフト６８６に取り付けられたベアリング６９４（ベアリング６９０に類似のツーピース式ベアリングであれば好ましいが、他のベアリング構造も利用可能である）を介して下方ケースシェル６６０に取り付けられているため、頂部プーリ６９８は、遠心機中心軸を中心に入力回転速度の２倍の速度で回転する。内側駆動ベルト６７０が底部プーリ６９２を中心に回転し、アイドラプーリ６６６、６６８が、駆動ベルト２６により遠心機中心軸を中心に回転するため、頂部プーリ６９８は、下方ケースシェル６６０と同じ方向に、ただし２倍の速度で、遠心機中心軸を中心に回転する。
【００９４】
言い換えれば、駆動ベルト２６及び内側駆動ベルト６７０の駆動力が、遠心機６４０の構成要素により組み合わされて、出力回転速度を形成しているのである。上述したように、さまざまな出力と入力の駆動比が可能であるが、２：１の比率が一般に好適であり、遠心機６４０を好ましくは、頂部プーリ６９８の第２のより速い回転速度が下方ケースシェル６６０の速度の実質的に２倍となるように構成する。内側駆動ベルト６７０を、同じ軸を中心に回転する２つのプーリと組み合わせて用い、回転する筐体内にてプーリを構造的に支持することにより、大幅に小型化され、２：１の駆動比で効率よく、比較的低い騒音レベルにて（これは、数多くの医療現場で望ましいことである）動作する遠心機が得られる。
【００９５】
ロータ基部６４４を頂部プーリ６９８に留め具６５２により堅く装着することにより、頂部プーリ６９８で２：１の駆動比が得られると、これがロータ基部６４４に伝達される。ロータ基部６４４の凹部面６４８上に配置された遠心機バッグは、上述したように締付けをうまく制御している下方ケースシェル６６０内に給送された供給ケーブル２２８の２倍の速度で回転する。ベアリング６９４（ワンピース又はツーピース以上）が、下方ケースシェル６６０の中心シャフト６８６全体を取り囲んでいる。遠心機６４０からロータ基部６４４（これは、図１に図示したように、操作時、ロータ頂部又はカバーにより閉じられる）まで延びる供給コード２２８用の通路を確保するため、ロータ基部６４４にはケーブルポート６５６が設けられており、中央シャフト６８６は、中央ケーブルガイドを形成するように中空に形成されている。これにより、供給ケーブル２２８を、遠心機中央軸に基本的に平行に遠心機バッグ（図示せず）まで給送することができる。下方ケースシェル６６０は、遠心機６４０に入る最初の入口とするために側部ケーブルポート６６２を含み、また、ケーブル２２８を下方ケースシェル６６０から中央シャフト６８６の中空部分まで案内するために側部ケーブルガイド（又はトンネル）６８４を含んでいる。側部ポート６６２及び側部ケーブルガイド６８４を、２つのアイドラプーリ６６６と６６８との間の実質的に中心に配設することにより、ケーブル２２８を内側駆動ベルト６７０から離して配置して、締付けや磨耗が発生する危険性を最小限に抑えている。
【００９６】
図１９〜図２２に例示した遠心機６４０は、底部プーリ６９２にも頂部プーリ６９８にもツーピース式ベアリングを用いており、供給ケーブル２２８用の通路を確保するために、中央「目くら」通路（側部ケーブルガイド６８４、中央シャフト６８６の中空部分及びケーブルポート６５６、６６２を介する）が遠心機６４０内に設けられている。この「目くら」通路は、有効であるが、比較的堅いケーブル２２８がこの通路内に給送又は押入れられるため、実際には締付けの問題を含む可能性がある。この問題に対処するため、別の遠心機実施形態７００を提供し、図２３及び図２４に例示する。この実施形態では、遠心機７００の上方部分において、アイドラプーリ６６６と６６８との間にガイドスロットが設けられており、これにより、ケーブル２２８を挿入している操作者の視界を遮る構成要素がない状態で、供給ケーブル２２８を頂部から遠心機７００内に給送できるようになっている。
【００９７】
ガイドスロットを設けられるようにするため、遠心機６４０内の連続状上方ベアリング６９４を、ケーブル２２８の外径より少なくともわずかに大きい１つの空隙又は分離部を有するベアリング部材に置換える。このケーブル入口空隙を設けるためにいくつかのベアリング部材を使用することができ、この部材も本開示内容の範囲である。図示のように、遠心機７００は、ロータ基部７０２を含む。この基部は、出力速度（例えば、入力速度の２倍）にてこのプーリと回転し、遠心機バッグを凹状面７１６上に収容及び支持するように、頂部プーリ６９８（図示せず）に留め具７０４により堅く固定されている。ロータ基部７０２はまた、バッグの中心及びケーブル２２８を遠心機７００の中心に位置合わせするのに有用なケーブルポート７１８を具備している。
【００９８】
ケーブル２２８を遠心機７００内に挿入できる状態にするため、ロータ基部７０２はさらに、ケーブルガイドスロット７１２を含む。このスロットは、図示のように、下方ケースシェル７２０の側部ケーブルガイド７２４に向けて遠心機７００内に下向きにケーブル２２８を挿入できるようにする、ロータ基部７０２に設けられた溝又は開口部である。下方ケースシェル７２０はまた、側部ケーブルガイド７２４の頂部までくり抜かれたケーブルガイドスロット７２２を含む。この場合も、ガイドスロット７１２及び７２４のどちらも、遠心機内にてアイドラプーリ６６６と６６８との間に配置することにより、挿入されるケーブル２２８が、頂部プーリ又は下方ケースシェル７２０を基本的に１８０度包囲している内側駆動ベルト６７０と接触して締付けられることがないようにしている。
【００９９】
図２３に示すように、ベアリング部材７０６は互いに間隔をおいて配置されており、好ましくは、こうした間隔又は空隙の少なくとも１つを、下方ケースシェル７２０の中央シャフトまでケーブル２２８を通過させられるほどの大きさとする。図示のように、ベアリング部材７０６として４つのカムフォロワが用いられているが、４つ以外の数の部材を用いてもよい。このカムフォロワ７０６は、頂部プーリを回転させるように頂部プーリに接続されており、同時に、下方ケースシェル７２０と共に回転できるように下方ケースシェル７２０の中央シャフトに接続されている。カムフォロワ７０６は、下方ケースシェル７２０内に形成されたベアリング溝７１０内に配置されている。ケーブル２２８用に障害のない通路を確保するため、ケーブルガイドスロット７１２及び７２２が、アイドラプーリ６６６、６６８に隣合う２つのカムフォロワ７０６の間に位置付けられている。好ましくは、ケーブルガイドスロット７１２及び７２２を、アイドラプーリ６６６と６６８との実質的に中央に配置する。ガイドスロット７１２、７２２はこれらのカムフォロワ７０６の間に配置されて、ケーブル２２８を内側駆動ベルト６７０と頂部プーリ６９８との間の接触面とは反対側の遠心機７００上に配設する（図２０〜図２２）。このように、分かれたベアリング部材７０６を１対のケーブルガイドスロット７１２、７２２と組み合わせて用いることにより、操作者は、駆動システムの内部を通さずとも、容易に供給ケーブル２２８を取り付けることができ、締付けや他の挿入時の問題を最小限に抑えることができる。
【０１００】
Ａ．可撓性使い捨て式遠心機バッグ
使い捨て式可撓性遠心機バッグ２２６の一の実施形態を、さらに具体的に図２５及び図２６に例示する。このバッグは、２段階が連続して一体となった自己平衡使い捨て設計によるものである。この使い捨て式遠心機バッグ２２６は、実質的に平坦で、外周２３８と内周２４０を有する環状体又はドーナッツ状であり、実質的に可撓性である材料で形成された、径方向に延伸する上方及び下方シート２３４、２３６を含む。上方及び下方シート２３４、２３６は互いに重ね合わされて、その外周２３８にて、熱溶接、高周波溶接又は、２つの表面を接着する他の同様の方法により、完全にシールされている。内周２４０が、バッグ２２６のコア２４２を画定している。本発明の一の実施形態において、遠心機バッグ２２６はさらに、上方シート２３４と下方シート２３６との間に挟持され、内周２４０により画定されたコア２４２の中央から外周２３８に向けて延伸する導入チューブ２４８と、上方シート２３４と下方シート２３６との間に挟持され、コア２４２の中央から外周２３８に向けて延伸する排出チューブ２５０とを含む。上方及び下方シート２３４、２３６がその内周２４０にて互いにシールされると、このシールにより、導入及び排出チューブ２４８、２５０はその間でシールされる。導入及び排出チューブ２４８、２５０はそれぞれ、遠心機バッグ２２６の内側及び遠心機バッグ２２６の外部環境と流体連通している。排出チューブ２５０の長さは、導入チューブ２４８の長さより短い。
【０１０１】
本発明の一の実施形態において、図３１に図示したように、排出チューブ２５０は直線状のチューブである。別法として、排出チューブ２５０に、その遠位端と流体接続した屈曲部品２５２を具備させる（図２５及び図２６）。屈曲部品２５２の構造として幾通りも可能であるが、好ましくは、図２７、図２８、図２９及び図３０にそれぞれ例示したように、「Ｔ字型」、「湾曲したＴ字型」、「Ｊ字型」又は「Ｌ字型」の形状とする。別法として、排出チューブ２５０及び屈曲部品２５２を、２つの接続したピースではなく、連続した成形ユニットとしてもよい。好ましくは、屈曲部品２５２を、図２７及び図２８にそれぞれ例示したように、「Ｔ字型」又は「湾曲したＴ字型」にする。屈曲部品２５２を「Ｔ字型」又は「湾曲したＴ字型」設計にすれば、以下で詳細に説明するように、屈曲部品２５２の上方や下方に位置する分画からではなく、屈曲部品２５２の側部から所望の血液成分（分画）を取り出すことができる。
【０１０２】
上述したように、遠心機バッグ２２６を遠心機ロータ２０２の環状溝２１２内に配置する際、導入及び排出チューブ２４８、２５０を溝２２２内に設置しておくことが重要である。また、ロータカバー２０６を遠心機基部２０４上に載せて、着脱自在に固定する際、導入及び排出チューブ２４８、２５０を溝２２４内にも設置しておくことが重要である。導入及び排出チューブ２４８、２５０を溝２２２及び２２４内に設置することにより、遠心機ロータ２０２をロータ基部２０４とロータカバー２０６との間の固定位置に確実に保持して、遠心機バッグ２２６及び遠心機ローラ２０２を一緒に回転させることができる。つまり、遠心機バッグ２２６が固定位置にあれば、遠心機バッグ２２６が遠心処理時にこれだけで独立して回転してしまうことはない。
【０１０３】
導入及び排出チューブ２４８、２５０は、その近位端で供給ケーブル２２８と流体接続されており、この具体的実施形態における供給ケーブルは、遠心処理時に、遠心機バッグ２２６に成分を導入することと遠心機バッグ２２６から成分を取り出すこととができるように、遠心機バッグ２２６を供給源及び収容容器３９８、４００それぞれに接続する二腔構造である（図１７参照）。二腔管２２８は、遠心機バッグ２２６の導入チューブ２４８を供給源容器３９８に接続する引入れ腔２３０と、遠心機バッグ２２６の排出チューブ２５０を収容容器４００に接続する引出し腔２３２とを含む。一の実施形態において、導入及び排出チューブ２４８、２５０は、その近位端において、引入れ及び引出し腔２３０及び２３２内に挿入できるようにされている。別法として、図２６に図示したように、接続手段２５４を導入及び排出チューブ２４８、２５０の近位端内に挿入して、これらのチューブを引入れ及び引出し腔２３０、２３２に接続する。
【０１０４】
操作時、供給ケーブル２２８の一方の端部をロータアセンブリ２００に固定して、ロータアセンブリ２００が回転している間、ロータ２０２軸とケーブルガイド１０２を介して方向付けられている供給ケーブル２２８とに対して同じ回転を付与するドライブシャフトアセンブリ２８を同軸で半分の速度にて回転させて、それ自体が捻れないようにしなければならない。すなわち、ロータアセンブリ２００が３６０°の第１の回転を終了し、ドライブシャフトアセンブリ２８が同じ方向における１８０°の半回転を終了したとすると、供給ケーブル２２８はその軸を中心として１方向に１８０°捻れることになる。さらに、ロータアセンブリ２００が３６０°同じ方向に回転し、ドライブシャフトアセンブリ２８が同じ方向にさらに１８０°回転すれば、供給ケーブル２２８は反対方向に１８０°捻れられて、供給ケーブル２２８はその元の捻れていない状態に戻ることになる。したがって、供給ケーブル２２８は、本発明による遠心処理システム１０の操作時に、連続的に撓んだり折れ曲がったりしても、完全に回転する、又はこれ自体の軸を中心に捻れることは決してない。
【０１０５】
図３５に図示する、本発明による使い捨て式遠心機バッグの別の実施形態は、２本又はそれ以上の導入チューブ及び／又は２本又はそれ以上の排出チューブを含み、これらのチューブは、複数の内腔管に流体接続されている。
【０１０６】
使い捨て式可遠心機バッグ２２６は、透明で、実質的に可撓性である材料で形成されており、その例として、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン、エチレン酢酸ビニル及びこれらの組合せ、又は他の可撓性材料が挙げられるが、これらに限定するものではない。遠心機バッグ２２６が可撓性であるため、中に含有される流体量が少なくとも１つの要因となって、図２５及び図２６に示すこの可撓性遠心機バッグのプロファイルが決定される。遠心機バッグ２２６のプロファイルはまた、以下で詳細に説明するように、遠心機ロータの内部構造によっても画定される。遠心機ロータの内部構造に基づいて遠心機バッグ２２６のプロファイルを左右できることを少なくとも１つの理由として、以下で詳細に説明するように、遠心処理時に遠心機バッグ２２６内に含有できる流体媒体量を最大限にすることができる。
【０１０７】
遠心処理する流体又は媒体を、供給源容器３００内に入れることができる。例えば、本発明による遠心機２０を使用して自家由来血小板ゲルを調製する場合、手術時又はその前に、流体（すなわち全血）を患者から抗凝固剤の入った供給源容器３９８内に採ることができる。遠心機バッグ２２６を遠心機ロータ２０２内に設置し、その回転を開始した後、抗凝固剤を入れた全血を引入れ腔２３０から導入チューブ２４８を通して遠心機バッグ２２６に導入する。上述したように、遠心機バッグ２２６を遠心機基部２０４の溝２２２、２２４内に固定することにより、遠心機バッグ２２６をこれらの間の固定位置に保持して、遠心機ロータ２０２と別に移動できないようになっているため、遠心機バッグ２２６及びロータアセンブリ２００を同じ回転速度で同時に回転させることができる。遠心機ロータ２０２が回転すると、図３２に図示したように、抗凝固剤入り全血の中で密度のより高い成分が遠心機バッグ２２６の外周２３８に近い位置に方向付けられて移動し、密度のより低い成分が内側領域に近い位置に残る。さらに具体的に言えば、図３２に図示したように、分離すべき流体媒体が全血である場合、その全血が、遠心機バッグ２２６内において、赤血球分画（２５６）、白血球分画（２５８）、多血小板血漿分画（２６０）及び貧血小板血漿分画（２６２）に分離される。当業者には明らかであるように、全血分画、赤血球及び血漿はそれぞれ異なる色を帯びているため、これらの分画が分離されれば、操作者は容易に区別することができる。遠心処理時の適当な時間に、吸引や他の抽出手段を引出し腔２３２から遠心機バッグ２２６内部に適用して、遠心機バッグ２２６から所望の分画を取り出すことができる。別の実施形態において、遠心機カバー２０６に、同心指標ラインを設けて、操作者にＲＢＣと血漿との境界面に対する排出チューブ２５０の位置を見易くしてもよい。速度と時間によって、ＲＢＣと血漿との境界面に対するＷＢＣ及び血小板の位置は変化する可能性がある。例えば、ｒｐｍが低いままであれば（およそ１，０００〜１，７００、好ましくは、１，５００）、血漿及び血小板がＲＢＣ層から分離され、ｒｐｍを高速にすると（１，４００〜１，７００）、血小板が、血漿から分離してＲＢＣに対する血漿の境界面の位置にさらに濃縮されて集合する。さらに速度を速めれば、ＷＢＣはＲＢＣパック内のより深いところに位置する。
【０１０８】
再度、屈曲部品２５２について説明すると、一の実施形態における屈曲部品は、排出チューブ２５０の遠位端に流体接続されている。屈曲部品２５２は、「Ｔ」形状（図２７）として図３２に図示されているが、これは例示のみを目的としたものである。したがって、図３２に図示したように、屈曲部品２５２を、図２５〜図３１に図示した例など、いくつか他の形状にすることができることを理解されたい。屈曲部品２５２をこのように設計することにより、確実に、汚染される危険性がより少ない状態で、隣合う分画２５８部分から所望成分（例えば、多血小板血漿分画２６０）を採ることができる。このため、一の実施形態において、所望の分画が屈曲部品２５２の位置と重なった時点で、その分画を抜出す。別法として、遠心機バッグ２２６から所定分画を取り除きたい場合には、まず導入チューブ２４８を用いて赤血球分画２５６を抜出してから、その所定分画を屈曲部品２５２及び排出チューブ２５０を通じて引抜き、引出し腔２３２から収容容器４００内に方向付けることができる。
【０１０９】
続けて図３２を参照する。流体媒体の分離が遠心法により開始されると、特定密度又は特定範囲の密度の成分を含む、実質的に環状である領域が形成され始める。便宜上、全血の分離について説明し、図３２に図示したように、所与密度又は密度範囲の特定型成分をそれぞれ含む４つの領域を例として挙げる。また、各領域を横切って所与密度が分布して、領域が鮮明に画定されない場合もあることを理解されたい。したがって、実際にはこれらの領域がより広くなり（例えば、径方向にさらに広がる）、一定範囲の密度の成分を包含する場合もある。
【０１１０】
図３２の例では、第１の領域２５６は４領域の中で最も外側にあり、赤血球を含むものである。第２の領域２５８は、赤血球よりも密度の低い白血球を含み、第３の領域２６０は、多血小板血漿分画を含み、最も内側の領域２６２は、最も密度の低い、貧血小板血漿分画を含んでいる。一の実施形態において、領域２６０に含まれる多血小板血漿分画を採取すると望ましい場合がある。多血小板血漿分画を遠心機バッグ２２６から取り出すため、遠心機バッグ２２６の引出し腔２３２を通じて真空又は吸引を施して、所望する領域部分２６０を取り出す。屈曲部品２５２領域内にある分画２６０部分は、屈曲部品２５２を通じて抜き取られ、その分画に適した収集容器４００（図１７）の１つの中に収集される。
【０１１１】
さらに具体的に言えば、図３３〜図３９は、動的処理である、全血成分を分離するための本発明による１つの方法を例示している。図３３は、遠心機バッグ２２６の一部を示しており、全血の一部を遠心機バッグ２２６内に注入し、およそ６０秒〜１０分間にわたり、０〜５，０００ｒｐｍの回転速度で遠心処理をした後の、全血成分が分離された状態を例示している。当業者であれば、回転速度が速いほど、より短時間で血液が分離されることがわかるであろう。
【０１１２】
図３３は、分離された４つの全血分画を示しており、密度の高い分画ほど外周２３８近くに位置し、密度の低い分画ほど内周２４０近くに位置している。ヘマトクリット値（すなわち、百分率で表される、血液体積に対する赤血球体積の比）は、およそ２９％〜６８％の間で個人差があることは周知であるが、以下で詳細に説明するように、こうしたばらつきは、遠心機バッグ２２６の新規設計により容易に調整することができるものであり、所望する分画の単離に何ら影響も与えることはない。便宜上、最初に注入された抗凝固剤入り全血の一部を遠心処理すると、図３３に示したプロファイルが得られると予想される。一の実施形態では、多血小板血漿分画２６０を採取したい場合、バッチ分離処理又は連続分離処理を、以下に説明するように行うことにより、これを実現することができる。
【０１１３】
多血小板血漿分画２６０を採取するための、本発明によるバッチ分離処理の一の実施形態において、遠心機バッグ２２６は、図３２に図示したように設計されており、全血の一部を遠心処理すると多血小板血漿分画２６０が通常位置する領域内に、屈曲部品２５２がほぼ配設されている。この位置推定は、ロータカバー２０６の上方面に、同心指標ライン２０５、２０７及び２０９（図示せず）を置くと、同心ライン２０５、２０７及び２０９がそれぞれ、領域２６０、２５８及び２５６の縁部にほぼ相当するため、簡単に行うことができる。別法として、ライン２０５、２０７及び２０９と類似の同心ラインを、遠心機バッグ２２６の表面上に直接印刷してもよい。
【０１１４】
遠心機バッグ２２６内の血液を遠心処理した後、遠心機ロータ２０２を回転させながら、多血小板血漿分画２６０の大部分を、屈曲部品２５２を介して遠心機バッグ２２６から抜き取る。抜き取ることにより多血小板血漿分画２６０の容積が減るため、図３４に図示したように、最も内側の分画２６２が遠心力により自然と外周２３８に向けて移動する。図３４に図示したように、貧血小板血漿分画２６２が屈曲部品２５２に接近し、かつ貧血小板血漿分画２６２が大量に屈曲部品２５２により抜き取られる前の時点で、多血小板血漿分画２６０の抜取りを終了する。この時点は、以下に詳細に記載するように、操作者がその容積を目で見るか、センサを用いるかのいずれかで決定することができる。所望した多血小板血漿分画２６０を抜き取ったら、引入れ腔２３０を全血供給源容器３９８から外し、処分容器に接続する。接続後、遠心機バッグ２２６内に残留している流体を導入チューブ２４８から吸出して処分容器に入れる。次に、引入れ腔を全血供給源容器に再接続して、所望分画の必要量を単離するまで、上述したバッチ処理を必要な回数だけ繰返す。
【０１１５】
別法として、上述した処理を連続処理として行うこともできる。こうすると、全血供給源容器３９８から引入れ腔２３０を外すステップを省略することができる。連続処理による全血の分離を、図３９〜図３９に図示した使い捨て式可遠心機バッグ２２６’を用いて行うことができる。このバッグは、１本の導入チューブ２４８と３本の排出チューブ２４５、２４７及び２５０を含み、これらのチューブは、４つの内腔を含む供給ケーブルに接続されている。さらに具体的に言えば、全血の連続処理に用いる使い捨て式遠心機バッグは、引入れ腔により全血供給源容器に接続された導入チューブ２４８と、多血小板血漿を収容する容器に接続されている第１の引出し腔に接続された第１の排出チューブ２５０と、赤血球収容容器か廃棄物容器かのどちらかに通じる第２の引出し腔に接続された第２の排出チューブ２４５と、貧血小板血漿を収容する容器に通じる第３の引出し腔に接続された第３の排出チューブ２４７とを含む。この連続分離処理では、図３３及び図３４を参照しながら上述したように多血小板血漿又は他の細胞成分部分を抜き取った後、遠心機バッグに、全血の追加量（一部）を入れることができるようになっている。したがって、図３５に図示したように、遠心処理を継続しながら、遠心機バッグ２２６’が満杯になるまで全血の一部を第１の導入チューブ２４８を介して再度注入する。血液を追加したことから、遠心機バッグ２２６’内の血液分画のプロファイルは、大体、図３５に図示したようになる。図３５からわかるように、血液を追加すると、血液分画の位置が移動して、多血小板血漿分画２６０が屈曲部品２５２の領域内に戻り、貧血小板血漿分画２６２が内周２４０方向に戻って、屈曲部品２５２入口から遠ざかる。そこで、追加された多血小板血漿２６０を、図３５に図示したように、排出チューブ２５０を介して遠心機バッグ２２６’から取り出すことができる。
【０１１６】
上述したように、追加された多血小板血漿分画２６０を取り出すと、図３６に図示したように、貧血小板血漿分画２６２が外周２３８に近い位置へと移動して、屈曲部品２５２入口に近づく。この時点で再度、多血小板血漿の取出しは一次的に終了する。
【０１１７】
上述したように全血の一部を遠心機バッグ２２６’に追加注入し、多血小板血漿を（多血小板血漿分画２６０の位置を屈曲部品２５２の位置に対して移動させて）取り出すことを、複数回繰返すことができる。しかし、全血を注入し続けながら多血小板血漿分画のみを取り出していけば、遠心機バッグ２２６’内に残る血液分画２５６、２５８及び２６０量（及びこれに伴う幅）が必然的に次第に増加してしまう。具体的に言えば、赤血球分画２５６の量及びその幅が、他の分画を内周２４０方向に押し込んでしまうほどに増大する（図３７）。図３７に図示するように、赤血球量が遠心機バッグ２２６’内で増加したことにより、他の分画が内周２４０方向に移動し、所望している多血小板血漿分画２６２ではなく白血球分画２６０が、屈曲部品２５２の入口付近にくる。
【０１１８】
有利なことに、遠心機バッグ２２６’の新規設計は、図３７に示した状況になった場合にこうした分画を所望位置に戻す手段を提供するものである。すなわち、第２の排出チューブ２４５が、遠心機バッグ２２６’への全血導入用の引入れ腔として機能すると同時に、外周２３８付近に位置する分画を抜き取る機能も果たすのである。これを実現させるためにすることの１つは、第２の引出し腔を赤血球収容容器か吸引手段を有する（例えば、シリンジ、ポンプなど）廃棄物容器かのいずれかに装着することである。図３８に図示したように、第２の排出チューブ２４５の遠位端を外周２３８付近に配置し、これを操作して、赤血球分画２５６の大部分を抜き取ることができる。これにより、残りの分画２５８、２６０及び２６２の位置が移動する。赤血球分画２５６の抜取りを操作者が目でモニタしても、センサなどの他の手段でモニタしてもよい。別法として、貧血小板血漿分画２６２を、第３の引出し腔を介して貧血小板血漿収容容器に接続された第３の排出チューブ２４７で抜き取って、他の分画の位置を移動させてもよい。
【０１１９】
図３７は、赤血球分画２５６の一部を抜き取った後、遠心機バッグ２２６’に再度、遠心のための全血の追加分を収容する容積ができたことを示している。全血の一部を導入チューブ２４８から図３７の遠心機バッグ２２６’内に追加注入して遠心処理を行うと、図３９に例示したプロファイルとなる。上述したステップを必要に応じて繰返して、多血小板血漿の所望量を採取する。上述したステップはすべて、遠心機ロータ２０２が回転している間に行われる。
【０１２０】
上述した連続分離方法を、全血注入ステップと多血小板血漿を採取するステップとを連続して行うものとして例示した。別法による実施形態では、この注入ステップと採取ステップとを実質的に同時に行う。すなわち、全血の一部がバッグに追加されるのと同時に、多血小板血漿分画を抜出すことができる。この別法による実施形態では、全血の一部の注入とほぼ同時に全血成分を直ちに分離できる速度で遠心機ロータを回転させなければならない。
【０１２１】
上述したように、上記ステップはすべて、操作者の視覚によりその量で、又はセンサによりモニタできるものである。これらのステップを視覚でモニタする場合、遠心機カバー２０６にさらに、操作者が領域２６０、２５８及び２５６の位置を領域２５２に対して見やすいように、カバー２０６の中央から領域２６０、２５８及び２５６の外側縁部とほぼ同じ距離だけ間隔を置くことのできる、１つ又は複数の同心指標円２０５、２０７、２０９を含めることができる（図１７及び図１８）。
【０１２２】
図３３から図３９は、遠心機バッグ２２６及び２２６’をこのように設計することにより、所望の血液分画を、汚染リスクを伴わずに、連続的に採取できるように、また、１０〜２００ｃｃ用量の使い捨て式遠心機バッグ２２６及び２２６’を含む小型携帯遠心機装置を用いて大量の血液（１０〜５リットル）をオンラインで連続的に採取できるように、さまざまな血液分画の通常の位置を移動させる方法に対する一の実施形態を例示している。
【０１２３】
例えば、導入チューブ２４８及び排出チューブ２５０を備えるように遠心機バッグ２２６を設計すれば、これは、所望成分又は分画は排出チューブ２５０のみを介して遠心機バッグ２２６から抜出され、全血の一部の追加や他の成分（例えば、赤血球分画２５６）の取出しは、二重機能式導入チューブ２４８を介してのみ行われるということである。この場合、採取された分画（例えば、多血小板血漿分画２６０）が、それまでは他の流体媒体（例えば、全血や赤血球）に接触していた導入チューブ２４８から抜出されることは決してない。したがって、このような遠心機バッグ２２６の設計により、流体媒体を容器に導入することと採取された分画をその容器から抜出すこととの両方を行う１本のチューブしか具備しなかった従来の遠心機容器にはない、重要な利点が得られる。
【０１２４】
さらに、このように特有に設計されていることから、遠心機バッグ２２６及び２２６’を、遠心処理すべき全血の組成とは無関係に使用することができる。例えば、上述したように、ヘマトクリット値（すなわち、百分率で表される、血液体積に対する赤血球体積の比）には個人間で差があるため、図３２に例示したプロファイルも個人によって異なるものとなる。すなわち、赤血球分画２５６の幅が広くなる場合も狭くなる場合もあるが、いずれにしても、多血小板血漿分画２６０の位置は屈曲部品２５２から遠ざかることになる。しかし、図３３及び図３４を具体的に参照しながら上述したように、遠心機バッグ２２６及び２２６’の設計により、所望分画の位置を屈曲部品２５２領域内まで移動させることができる。例えば、遠心機バッグ２２６を用いて、赤血球分画を導入チューブ２４８から抜き取る、又は全血の一部を導入チューブ２４８から追加することにより、このような移動を実現することができる。
【０１２５】
図４０に、使い捨て式可撓性遠心機バッグ２７０の別の実施形態を例示する。使い捨て式遠心機バッグ２７０は、外周２７１及び内周２７２をそれぞれ有する、実質的に平坦な桿状体、又はドーナッツ形状であり、実質的に可撓性である材料で形成されて径方向に延伸している上方シート２７３及び下方シート２７４を含む。上方及び下方シート２７３、２７４は互いに重ね合わされて、その外周２７１にて、高周波溶接、熱溶接、又は、２つの表面を接着する他の同様の方法により、完全にシールされている。内周２７２が、遠心機バッグ２７０のコア２７５を画定している。本発明の一の実施形態において、遠心機バッグ２７０はさらに、上方シート２７３と下方シート２７４との間に挟持され、コア２７５の中央から外周２７１に向けて延伸する導入チューブ２７６と、上方シート２７３と下方シート２７４との間に挟持され、コア２７５の直径を横切って延伸し、第１及び第２の遠位端２８０、２８１を有する排出チューブ２７８とを含む。上方及び下方シート２７３、２７４がその内周２７２にて互いにシールされると、このシールにより、導入及び排出チューブ２７６、２７８はその間でシールされる。導入及び排出チューブ２７６、２７８はそれぞれ、遠心機バッグ２７０の内側及び遠心機バッグ２７０の外部環境と流体連通している。導入及び排出チューブ２７６、２７８は、この具体的実施形態では二腔管である供給ケーブル２２８（図示せず）に流体接続されている。導入チューブ２７６はその近位端にて、好ましくはＬ字状コネクタ（図示せず）を介して、供給ケーブル２２８に流体接続されており、排出チューブ２７８は、その中央にてＴ字状コネクタ（図示せず）を介して供給ケーブル２２８に流体接続されている。
【０１２６】
使い捨て式可遠心機バッグ２７０は、透明で、実質的に可撓性である材料で形成されており、その例として、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン、エチレン酢酸ビニル及びこれらの組合せ、又は他の可撓性材料が挙げられるが、これらに限定するものではない。
【０１２７】
遠心機バッグ２７０の上方及び下方シート２７３、２７４は、外周と内周との間の２点でさらにシールされている。すなわち、遠心機バッグ２７０はさらに、外周２７１と内周２７２との間に位置し、第１の凹形くぼみ又はウェル２８３を凹状側部に有する第１のＣ字状シール２８２と、外周２７１と内周２７２との間に位置し、第２の凹形くぼみ又はウェル２８５を凹状側部に有する第２のＣ字状シール２８４とをさらに含む。第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４は、２表面をシールするための、当技術分野で周知の方法により、上方及び下方シート２７３、２７４の一部を互いにシールすることで形成されている。その方法例として、高周波溶接や熱溶接が挙げられるが、これらに限定するものではない。第１のＣ字状シール２８２の端部２８８及び２８９は内側コア２７５に向けて内側に湾曲しており、同様に、第２のＣ字状シール２８４の端部２９０及び２９１は内側コア２７５に向けて内側に湾曲している。第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４の凹状側部が互いに向き合って配置されているため、第１及び第２のくぼみ２８３、２８５が互いに直径方向に対向するようになっている。つまり、図４０のように遠心機バッグ２７０を上から見ると、第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４は互いに鏡像関係となっている。第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４が共に、外周２７１と第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４との間に外側チャンバ２９２を画定している。この外側チャンバ２９２は、環状体であり、第１の処理室として機能するものである。第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４はさらに、第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４と内周２７２との間に内側チャンバ２９３を画定している。この内側チャンバ２９３は、環状体であり、第２の処理室として機能するものである。第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４は、その端部２８８及び２９０が直接対向して互いの間に空間を設けていることにより、そこに第１のチャネル２８６を画定するように位置しており、またその端部２８９及び２９１が直接対向して互いの間に空間を設けていることにより、そこに第２のチャネル２８７を画定するように位置している。このとき、第１及び第２のチャネル２８６、２８７は直径方向に対向して、第１の処理室２９２と第２の処理室２９３との間を流体連通させている。導入チューブ２７６は、チャネル２８６かチャネル２８７かのどちらかの中に延在し、排出チューブ２７８の第１及び第２の遠位端２８０、２８１はそれぞれ、第１及び及び第２のくぼみ２８３、２８５内に延在する。
【０１２８】
遠心機バッグ２７０は、ロータ基部２０４とロータ２０２のロータカバー２０６との間に上述したように着脱自在に固定される。これにより、遠心機ロータ２０２が回転している間も、ロータ基部２０４及びロータカバー２０６に対して固定位置に保持される。当業者には明らかであるように、遠心機バッグ２７０を設計する場合、これを収容するためには、ロータ基部２０４（図１５）及びロータカバー２０６（図１６）には別の実施形態が必要である。したがって、ロータ基部２０４の別の実施形態は、***した柱状部２１８を含む。この柱状部は、互いに直交しながら、***した基部柱状部２１８の直径方向に延伸する第１及び第２の溝を含む。これにより、ロータ２０２が組み立てられると、遠心機バッグ２７０の導入チューブ２７６及び排出チューブ２７８が、***した柱状部２１８の第１及び第２の溝内にそれぞれ収まる。同様に、ロータカバー２０６の別の実施形態は、***した柱状部２２０を含む。この柱状部は、互いに直交しながら、***した基部柱状部２２０の直径方向に延伸する第１及び第２の溝を含む。これにより、ロータ２０２が組み立てられると、導入チューブ２７６及び排出チューブ２７８が、***した柱状部２２０の第１及び第２の溝内にもそれぞれ収まるようになる。
【０１２９】
上述したように、導入チューブ２７６及び排出チューブ２７８は供給ケーブル２２８と流体接続されている。この具体的実施形態における供給ケーブル２２８は、遠心機２０が回転している間、遠心処理すべき流体をバッグ２７０内に導入し、分離された１種類又は複数種類の成分を遠心機バッグ２７０から取り出すために、遠心機バッグ２７０を供給源及び収集容器３９８、４００それぞれに接続する二腔管である。二腔管２２８は、導入チューブ２７６を供給源容器３９８に接続する引入れ腔２３０と、排出チューブ２７８を収集容器４００に接続する引出し腔２３２とを含む。
【０１３０】
遠心機バッグ２７０を用いて遠心処理する流体又は媒体を、供給源容器３９８内に入れることができる。例えば、本発明の遠心機２０を用いて自家由来血小板ゲルを調製する場合、手術時又は手術前に、流体（すなわち、全血）を患者から、抗凝固剤を入れた供給源容器３９８内に採ることができる。遠心機バッグ２７０を遠心機ロータ２０２内に配設し、その回転を開始してから、抗凝固剤入り全血を、引入れ腔２３０を介して導入チューブ２７６から遠心機バッグ２７０に導入する。
【０１３１】
さまざまな流体媒体内に溶解又は懸濁している１種類又は複数種類の成分を分離及び単離するために、遠心機バッグ２７０を用いることができる。その例として、生体流体から細胞成分を分離することが挙げられ、例えば、全血から血小板を取り出して濃縮するのに、遠心機バッグ２７０が有用である。しかし、これに限定するものではない。したがって、以下に、遠心機バッグ２７０を用いて全血から血小板を分離することについて説明するが、これは例示のみを目的としており、バッグ２７０の使用を何ら限定するものではない。遠心機バッグ２７０内に含まれる全血などの流体媒体の分離を、２段階分離処理と考えることができる。全血から血小板を分離するのが第１の段階であり、この段階では、赤血球から血小板懸濁液を分離する必要がある。血小板懸濁液は通常、血小板を多く含む血漿であり、通常、多血小板血漿（ＰＲＰ）と呼ばれる。しかし、本明細書でいう用語「血小板懸濁液」は、専門的な意味におけるＰＲＰのみならず、全血内に含まれる血小板の割合よりも多い割合で血小板が濃縮されて含まれている懸濁物すべてを含むものであり、これに、血小板以外に他の血液成分を含む懸濁液も含められる。分離の第２の段階には、血小板懸濁液から血小板を分離して、血小板濃縮物を生成することが含まれる。本明細書でいう用語「血小板濃縮物」は、「血小板懸濁液」が、血小板懸濁液の流体容積を減らす次の分離ステップを施されて得られる一定容量の血小板を含むものである。血小板濃縮物は、白血球と赤血球が欠乏した濃縮物とすることができる。
【０１３２】
図４１を参照すると、遠心機バッグ２７０を用いる全血分離処理の第１の段階は、遠心機２０を回転させながら、全血の一部を導入チューブ２７６から遠心機バッグ２７０内に導入することで開始されている。全血の一部は、遠心機バッグ２７０の外側チャンバ２９２に入ると、遠心力の影響を受け、全血内成分のそれぞれの密度に基づき、さまざまな分画として外側チャンバ２９２内で径方向に急速に分離する。その例として、赤血球を含んで遠心機バッグ２７０の外周２７１に沿って集まる最も外側の分画と、血小板懸濁液を含む最も内側の分画とが挙げられる。全血の第１部分に対して遠心処理を施した後に得られる血小板懸濁液を、図４１にリング２９４として表す。第１の処理室２９２内に全血を続けて注入すると、赤血球量が増加するため、リング２９５で示すように、血小板懸濁液が内側に押し込まれる。全血の注入が追加されることで、リング２９６及び２９７で表すように、血小板懸濁液は内側に押し込まれ続け、ついには、第１の処理室２９２は赤血球で実質的に満杯になり（その他は血漿）、血小板懸濁液はチャネル２８６及び２８７から第２の処理室２９３内に押入れられる。上述したように、Ｃ字型シール２８２、２８４の端部２８８、２８９及び２９０、２９１はそれぞれ、内側に屈曲しているため、血小板懸濁液をチャネル２８６、２８７から送り込み、チャネル２８６、２８７を通過する赤血球量を最小限に抑えやすくなっている。赤血球がチャネル２８６、２８７の入口に近づいた箇所については、以下に詳細に記載するように、目で、又はセンサによりモニタすることができる。赤血球が入口に接近した時点で、全血の注入を停止し、２段階式分離処理の第２の段階を開始する。
【０１３３】
分離処理の第２の段階では、チャネル２８６、２８７から第２の処理室２９３内に押し込まれた血小板懸濁液が、遠心力の影響を受けて、第２の処理室２９３内にて径方向に最も長い距離を、すなわち凹状ウェル２８３、２８５に向けて流動する。こうして、このウェル内に、血小板懸濁液内で密度の高い成分である血小板が収集され始める。集まった血小板を凹状ウェル２８３、２８５から排出チューブ２７８を介して引抜くことができる。したがって、全血から血小板懸濁液を分離する上記２段階処理において、第１及び第２のＣ字状シール２８２、２８４は、全血から血小板を分離及び収集できるように、赤血球と血小板との間の物理的バリヤとして機能し、第１及び第２の凹状ウェル２８３、２８５は、分離処理の第２の段階で血小板懸濁液から分離された血小板を入れるリザーバの役割を果たしている。
【０１３４】
ウェル２８３、２８５から血小板を引抜いた後、引入れ腔２３０を全血供給源容器から外し、引入れ腔２３０に吸引力を印可して遠心機バッグ２７０内に残留している成分を導入チューブ２７６から吸引し、廃棄物容器に方向付ける。その後、引入れ腔２３０を全血供給源容器にまた接続して、上述したバッチ処理を、所望の血小板量が採取されるまで、必要に応じて繰返す。
【０１３５】
内側Ｃ字状シールを有する使い捨て式可撓性遠心機バッグの別の実施形態が、遠心機バッグ３２０として図４２に例示されている。この使い捨て式遠心機バッグ３２０は、実質的に平坦で、外周３２２及び内周３２４を有する桿状体又はドーナッツ形状であり、実質的に可撓性である材料で形成された、径方向に延伸する上方及び下方シート３２３、３２５を含む。上方及び下方シート３２３、３２５は互いに重ね合わされて、その外周３２２にて、熱溶接、高周波溶接又は、２つの表面を接着する他の同様の方法により、完全にシールされている。内周３２４が、バッグ３２０のコア３２７を画定している。
【０１３６】
遠心機バッグ３２０の上方及び下方シート３２３、３２５はさらに、その外周と内周との間を２つの部分でシールされている。すなわち、遠心機バッグ３２０はさらに、外周３２２と内周３２４との間に位置する第１のＣ字状シール３２６と、外周３２２と内周３２４との間に位置する第２のＣ字状シール３２８とを含む。第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８は、互いに対向する凹状側部を有しているため、図３６のように遠心機バッグ３２０を上から見ると、互いに鏡像関係となっている。第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８がともに、第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８と外周３２２との間に外側室３４８を画定している。この外側室３４８は、環状体である。第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８はさらに、第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８と内周３２４との間に内側室３５０を画定している。この内側室３５０は、ドーナッツ形状である。第１のＣ字状シール３２６の端部３３０及び３３２は、内側コア３２７に向けてわずかに内側に湾曲しており、同様に、第２のＣ字状シール３２８の端部３３４及び３３６も、内側コア３２７に向けてわずかに内側に湾曲している。第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８は、その端部３３０と３３４とが、直接対向して互いの間に空間を設けていることにより、そこに第１のチャネル３３５を画定するように、また、その端部３３２と３３６とが、直接対向して互いの間に空間を設けていることにより、そこに第２のチャネル３３７を画定するように位置しており、このとき、第１及び第２のチャネル３３５及び３３７は直径方向に対向して、外側室と内側室との間を流体連通させている。
【０１３７】
遠心機バッグ３２０はさらに、流体を外側室３４８内に導入するため、下方シート３２５内に位置する入口ポート３４０を含んでいる。入口ポート３４０をチャネル３３５から９０度の位置に設けることが好ましいが、９０度を前後する角度で設けることも可能である。遠心機バッグ３２０はさらに、流体を遠心機バッグ３２０から引抜くため、下方シート３２５内でチャネル３３５及び３３７内に配設された出口ポート３４４、３４６を含んでいる。
【０１３８】
一の好適な実施形態において、遠心機バッグ３２０は、上方シート３２３又は下方シート３２５の外面に固定され、コア３２７の中央から外周３２２に向けて径方向に延伸する導入チューブ３３８を含む。導入チューブ３３８の遠位端は入口ポート３４０に流体接続されている。入口ポート３４０は、導入チューブ３３８を遠心機バッグ３２０の外側チャンバ３４８と流体接続するものである。導入チューブ３３８の近位端は、好ましくはＬ字状コネクタ（図示せず）により、供給ケーブル２２８に流体接続されている。また、一の好適な実施形態において、遠心機バッグ３２０は、上方シート３２３又は下方シート３２５の外面に固定され、コア３２７の直径を横切って延伸する排出チューブ３４２を含む。排出チューブ３４２の一方の端部は、第１の出口ポート３４４に流体接続されており、もう一方の端部は、第２の出口ポート３４６に流体接続されている。排出チューブは、その中央にて、Ｔ字状コネクタ（図示せず）により、供給ケーブル２２８に流体接続されている。
【０１３９】
本発明の別の一の実施形態において、遠心機バッグ３２０は、上方シート３２３と下方シート３２５との間に挟持され、コア３２７の中央から外周３２２に向けて延伸し、その遠位端が入口ポート３４０に流体連結された導入チューブ３３８と、上方シート３２３と下方シート３２５との間に挟持され、コア３２７の直径を横切って延伸し、一方の端部が出口ポート３４４と流体接続され、もう一方の端部が出口ポート３４６に流体接続された排出チューブ３４２とを含む。上方シート３２３と下方シート３２５が内周３２４で互いにシールされると、そのシールにより、導入チューブ及び排出チューブ３３８、３４２はシート間でシールされる。導入チューブ及び排出チューブ３３８、３４２は、この具体的実施形態では二腔管である供給ケーブル２２８（図示せず）に流体接続されている。
【０１４０】
遠心機バッグ３２０は、遠心機ロータ２０２が回転している間、遠心機バッグ３２０がロータ基部２０４及びロータカバー２０６に対して固定位置に保持されるように、ロータ基部２０４とロータ２０２のロータカバー２０６との間に上述したように着脱自在に固定される。当業者には明らかであるように、遠心機バッグ２７０を参照しながら上述したように、遠心機バッグ３７０の設計の場合、これを収容するためには、ロータ基部２０４（図１５）及びロータカバー２０６（図１６）には別の実施形態が必要である。
【０１４１】
さまざまな流体媒体内に溶解又は懸濁している１種類又は複数種類の成分を分離及び単離するために、遠心機バッグ３７０を用いることができる。その例として、生体流体から細胞成分を分離することが挙げられ、例えば、全血から血小板を取り出して濃縮するのに、遠心機バッグ３７０が有用である。しかし、これに限定するものではない。したがって、以下に、遠心機バッグ３２０を用いて全血から血小板を分離することについて説明するが、これは例示のみを目的としており、バッグ３２０の使用を何ら限定するものではない。遠心機バッグ３２０内に含まれる全血などの流体媒体の分離を、１段階分離処理と考えることができる。図３６を参照すると、全血の遠心処理は、遠心機２０を回転させながら、導入チューブ３３８を介して入口ポート３４０から全血の一部を遠心機バッグ３２０内に導入することから開始されている。導入チューブ３３８は、供給ケーブル２２８の引入れ腔２３０を介して、抗凝固剤を入れた全血供給源に流体接続されている。全血の一部が遠心機バッグ３２０の外側チャネル３４８内に入ると、全血内成分のそれぞれの密度に基づき、さまざまな分画として外側チャンバ３４８内で径方向に急速に分離する。その例として、赤血球を含んで遠心機バッグ３２０の外周３２２に沿って集まる、最も外側の分画と、血小板及び血漿を含む、それより内側の分画とが挙げられる。全血を続けて注入すると、赤血球量が増加するため、血小板を含む分画が内側に押し込まれる。全血の注入が追加されることで、血小板を含む分画は内側に押し込まれ続け、ついには、チャンバ３４８は赤血球で実質的に満杯になり（その他は血漿）、血小板を含む分画はチャネル３３５、３３７及び出口ポート３４４、３４６付近に押入れられる。上述したように、Ｃ字状シール３２６、３２８の端部はわずかに内側に湾曲しているため、血小板含有分画をチャネル３３５、３３７に送り込み、チャネル３３５、３３７を通過する赤血球量を最小限に抑えやすくなっている。赤血球がチャネル３３５、３３７の入口に近づいた箇所については、以下に詳細に記載するように、目で、又はセンサによりモニタすることができる。血小板含有分画が出口ポート３４４、３４６に接近した時点で、全血の注入を停止し、吸引力又は他の引抜き手段を排出チューブ３４２に適用して、血小板含有分画を出口ポート３４４、３４６を介して引抜く。
【０１４２】
多血小板血漿の大部分を引抜いたら、引入れ腔２３０を全血供給源容器から外し、廃棄物容器に接続する。接続後、遠心機バッグ３２０内に残留している成分を、吸引力を導入チューブ２７６に印可することにより入口ポート３４を通じて吸引し、廃棄物容器へ方向付ける。その後、引入れ腔２３０を全血供給源容器に再接続して、所望量の血小板が採取できるまで、必要に応じて上述した処理を繰返す。
【０１４３】
Ｂ．剛性遠心機容器
以上からわかるように、採取するために分離される分画の表面積を最大限にできれば、分離した成分内に不純物が入り込む危険性を高めることなく（例えば、隣接する成分で、密度のより低い成分が、採取すべき分画領域内に移動し始める可能性がある）、また、遠心機のサイズを不当に拡大することなく収集される分画量を最大限にできるため、表面積を最大限にすることが望ましい可能性がある。
【０１４４】
採取できる所望成分（例えば、多血小板血漿、白血球又は貧血小板血漿）の量を最大限にするため、図４５〜図５２に図示した、流体媒体（例えば、全血）内の成分を分離するための本発明の遠心機容器に対する一の実施形態は、所望分画の表面積（すなわち幅）が水平方向に最大になるように、固定された遠心機容器又は遠心機バッグ内において所望成分（例えば、多血小板血漿）を一定領域に配設されるように設計されている。そこで、本発明のもう１つの実施形態は、図４５に図示する遠心機容器５００を含む。図４５は、剛性容器５００の側部断面図であり、この容器は、頂部端部６１０にて閉じられ、底部端部６２０にて開いている軸方向コア６００を有する剛性環状本体５１０を含む。この容器５００はさらに、遠心処理すべき流体媒体を収容及び保持し、外周５８５及び内周５９０を有する内部収集チャンバ５８０を含む。チャンバ５８０の側部断面プロファイルは、図４６に図示したように、概して、偏心された「８の字」又は「ダンベル」形状である。本明細書でいう「８の字」又は「ダンベル」形状とは、Ａ部分の高さがＣ部分の高さとほぼ同じであり、Ａ部分及びＣ部分の高さが、Ｂ部分の高さより高いことを意味する。さらに、本明細書でいう「偏心」とは、図４５及び図４６に図示したように、Ｂ部分の中心から外周５８５までの幅Ｗ１が、Ｂ部分の中心から内周５９０までの幅Ｗ２より狭いことを意味している。
【０１４５】
剛性容器５００はさらに、コア６００から外周５８５付近まで径方向に延伸し、その遠位端でチャネル５８０の外側領域と流体接続されている導入チャネル５５０と、コア６００からチャンバ５８０の中央により近い地点（すなわち、８の字断面の狭い部分又は「首」）まで径方向に延伸し、その遠位端でチャンバ５８０と流体接続されている排出チャネル５５４とを含む。図４５では、導入及び排出チャネル５５０、５５４をチャンバ５８０の頂部端部と流体接続されたものとして図示しているが、本発明は、これらのチャネル５５０、５５４ともがチャンバ５８０の底部端部と流体連通している実施形態、又はチャネル５５０がチャネル５８０の頂部端部と流体連通し、チャネル５５４がチャンバ５８０の底部端部と流体連通している、又はこの反対構造の実施形態も含むものである。導入及び排出チャネル５５０、５５４は、引入れ腔２３０及び引出し腔２３２を有する二腔管２２８と流体接続されている。剛性容器５００は、適したネジ、留め具など（図示せず）で上方ベアリングアセンブリ１３０の上面１３３に着脱自在に固定されている。引入れ腔２３０を流体媒体供給源に接続することができ、引出し腔２３２を、チャンバ５８０から所望分画を引抜くための吸引手段に接続することができる。
【０１４６】
チャンバ５８０の構造は、抗凝固剤を入れた全血を遠心処理することにより多血小板血漿を最大限収集できるように特に設計されたものである。具体的に言えば、チャンバ５８０は、上から見ると多血小板血漿分画の幅が広く、側部から見るとその深さが浅くなるように構成されているため、より多くの多血小板血漿を引抜くことができる。この特有の構造は、図４４と図４７とを比較するとよくわかる。図４４は、図４３に図示した剛性遠心機容器５００の側部プロファイルを図示しており、ほぼ楕円で、遠心処理により４種類の分画に分離された全血を含むものである。図４４の幅Ｗ３は、採取すべき多血小板血漿分画の水平方向における相対幅を示しており、Ｄ１は、多血小板血漿分画の相対深さを示している。図４７は、本発明による剛性遠心機容器５８０の側部プロファイルを図示しており、上述したように偏心８の字型であり、遠心処理により４種類の分画に分離された全血を含むものである。図４７の幅Ｗ４は、採取すべき多血小板血漿分画２６０の水平方向における相対幅を示しており、Ｄ２は、多血小板血漿分画２６０の相対深さを示している。幅Ｗ４は、図４４の幅Ｗ３より当然広い。これらの図から、図４４に図示した楕円容器から多血小板血漿分画２６０を引抜くと、貧血小板血漿分画２６２が排出チューブ５５４方向に比較的速く移動することが容易にわかる。これに対して、図４７に図示したダンベル状プロファイルのチャンバ５８０では幅Ｗ４が大幅に広くなって、平均深さＤ２が浅くなっているため、貧血小板血漿分画２６２が排出チューブ５５４に到達する前に、多血小板血漿分画２６０の大部分を図４４の場合よりずっと厳密に引抜くことができる。
【０１４７】
多血小板血漿を収集する実施形態では、チャネル５８０を以下のように設計することができる。チャンバ５８０の構造、すなわち、図４６に図示する相対的高さＡ、Ｂ及びＣを、全血を遠心処理して得られる多血小板血漿分画２６０の通常位置に基づいて決定する。例えば、図４５に例示した剛性遠心機容器５００には、３０ｍｌ容量で、回転軸から縁部６３０までで測定される半径がおよそ６５ｍｍであるチャンバ５８０を具備し、同じ回転軸から約３５〜約６０ｍｍの径方向位置でこのチャンバ５８０内に多血小板血漿を収集する。図４６に例示したように、チャンバ５８０が含むこの領域の水平方向における表面積「Ｂ」が約４ｍｍ２になるように、チャンバ５８０の高さを約１０ｍｍとしている。チャンバ５８０をこのように特有な構造にしているため、図４７に例示したように、剛性遠心機容器５００のサイズ全体を不当に拡大せずに、多血小板血漿分画２６０の表面積を最大にできることがわかる。当業者であれば、遠心処理する流体媒体及び収集する細胞分画に応じて、さまざまな形状の設計を使用できることがわかるであろう。剛性容器５００を用いて全血から血小板を採取する処理を、バッグ２２６用に記載した方法と同様に行うことができる。
【０１４８】
剛性遠心機容器５００を、通常の殺菌条件に耐えられる数多くの剛性かつ透明な材料から製造することができる。その例として、アクリル樹脂、ポリカーボネート又は透明な熱プラスチックが挙げられるが、これらに限定するものではない。剛性容器５００を、使い捨てするのに比較的安価な、コストパーフォーマンスのよい材料で製造することが好ましい。
【０１４９】
本発明による剛性容器５００だけでなく、遠心機バッグ２２６、２２６’、２７０及び３２０を用いて、さまざまな流体媒体内に溶解又は懸濁する１種類又は複数種類の成分を分離又は単離することができる。その例として、生体流体から細胞成分を分離することが挙げられ、全血から血小板を取り出して濃縮するのに、上述したように、本明細書に記載する遠心機バッグ及び容器が有用である。しかし、これに限定するものではない。
【０１５０】
別の実施形態において、本発明は、体液及び組織から他の細胞成分を単離するための方法を提供するものである。その例として、１）全血から幹細胞、赤血球、白血球、血小板及び血清、２）骨髄から幹細胞、赤血球、白血球、血小板及び血清、３）全血から軟層、４）骨髄から軟層、５）軟層から幹細胞、６）脂肪組織、筋細胞及び神経細胞から幹細胞を挙げられるが、これらに限定するものではない。この方法は、本発明による剛性容器５００だけでなく、遠心機バッグ２２６、２２６’、２７０及び３２０を含めて、本明細書に記載する遠心機バッグ、ロータ及び遠心機システムのいずれかを用いることができる。
【０１５１】
一の実施形態において、本発明は、全血成分又は幹細胞などのそのサブコンポーネントに対する変速式遠心処理に基づく細胞差異により幹細胞を単離する方法を提供する。本明細書でいう「幹細胞」には、造血、間葉、上皮幹細胞、筋芽細胞、骨芽細を含められるが、これらに限定するものではない。
【０１５２】
別の実施形態において、本発明は、血小板、赤血球及び成長因子から軟層を分離する方法を提供する。この方法は、本明細書に記載した遠心機バッグ、ロータ、遠心機システムのすべてを使用することができるものであり、この方法では、軟層を分離した後、Ｍｅｄｔｒｏｎｉｃ，Ｉｎｃ．により出願された係属中の特許出願に記載されている手段を介して、血小板を活性化することができる。この特許出願内容全体を参照として具体的に本明細書内に引用したものとする。白血球は、ベクター／遺伝子の組合せでトランスフェクトされる。一の実施形態において、以下の実施例では、Ｍｅｄｔｒｏｎｉｃ，Ｉｎｃ．により出願された係属中の米国特許出願に開示されているように、細胞はＬＭＰ−１アデノウイルスを用いてトランスフェクトされる。この特許出願内容全体を参照として具体的に本明細書内に引用したものとする。白血球をトランスフェクトする方法の例として、機械的混合、エレクトロポレーションなどが挙げられる。トランスフェクトされた軟層は、血小板ゲルと組み合わされると、半固体の「組織プラグ」を形成する。組織プラグ形成の目的は、宿主又は組織増殖用半ビボ生物反応装置内における自家由来組織の再編、「組織プラグ」からのタンパク質の分泌、又はこれら２つの組合せである。
【０１５３】
別の実施形態において、本発明は、蛍光又は磁気タグで標識された細胞を分離するための方法を提供する。この方法は、本明細書に記載した遠心機バッグ、ロータ、遠心機システムのすべてを使用することができるものである。
【０１５４】
別の実施形態において、本発明は、骨髄細胞採取方法を提供する。この方法において、骨髄細胞は、無菌移植を目的に、遠心機バッグ、又は本発明の容器から直接抜出される。
【０１５５】
上述したように、単離された軟層細胞、及び／又は、本発明の方法により単離された赤血球、白血球、血小板及び血清を複数種類の治療法に用いることができる。その例として、細胞治療及び遺伝子治療が挙げられるが、これらに限定するものではない。
【０１５６】
体液及び組織から細胞成分を単離するために本発明による方法を用いると、以下の利点が得られる。
１．軟層細胞単離の簡易化
２．さまざまな細胞成分を単離するためのより安定した方法の提供
３．処理時における人為エラー発生率の低下
４．緊急治療室内に複数設備を集結させる必要性の削減
５．ＬＭＰ−１アデノウイルスを用いた細胞トランスフェクトに対する標準感染多重度（ＭＯＩ）の提供
６．ＬＭＰ−１効力の安定性の改良
７．ＬＭＰ−１に対する自家由来生物学的キャリヤの提供
【０１５７】
Ｃ．複雑な内部幾何形状を有する遠心機ロータ
可撓性遠心機バッグ２２６を支持するための、本発明による遠心機ロータの別の実施形態が、図４８〜図５２に例示されている。概して、また図４８及び図４９を参照すると、遠心機ロータ７５５は、下方チャネル７８０を有するロータ基部７６０（図４８、図５０及び図５２）と、上方チャネル７８２を有するロータカバー７７０（図４９及び図５１）とにより画定されている。ロータ７５５の環状内側チャンバ７８４（図４８）は、その下方及び上方チャネル７８０、７８２により画定されており、以下で説明するように、抗凝固剤入り全血を遠心処理することにより収集される多血小板血漿量を最大限にするように特に設計され、偏心された略８の字の断面形状となっている。
【０１５８】
図５１及び図５２に例示したように、ロータ基部７６０は、***した環状リム７７５と、ロータ基部７６０の内側にて軸方向に配置されて***している柱状部７８６とを含む。***した柱状部７８６はさらに、その直径方向に延伸する溝７９０（図５２）を有する。リム７７５の高さは、柱状部７８６の高さと同じになっている。図５１に図示したように、ロータカバー７７０は、***した環状リム７７７と、カバー７７０の内側にて軸方向に配置されて***している柱状部７８８とを含む。***した柱状部７８８はさらに、その直径方向に延伸している溝７９２（図５２）を有する。リム７７７の高さは、柱状部７８８の高さと同じになっている。ロータ基部７６０及びロータカバー７７０を、好ましくは、剛性で透明な材料を使用して製造する。その種類は何種類でもよい。材料の例として、アクリル樹脂、ポリカーボネート、又は透明な熱プラスチックが挙げられるが、これらに限定するものではない。
【０１５９】
使用時に遠心機ロータ７５５を組み立てる際、中央コア２４２を有し、可撓性でドーナッツ形状の遠心機バッグ２２６をロータ基部７６０内に配置する。このとき、中央の柱状部７８６を遠心機バッグ２２６のコア内に延在させ、バッグ２２６の導入及び排出チューブ２４８、２５０が溝７９０内に収まるようにすることが好ましいが、必ずしもそうでなくともよい。ロータカバー７７０は、溝７９０と７９２とが位置合わせされて導入及び排出チューブ２４８、２５０を溝７９２内に収められるように、ロータ基部７６０上に重ねられる。一の実施形態において、カバー７７０を基部７６０に上述したように固定すると（例えば、ネジ、クランプなどで）、リム７７５と７７７とが互いに密着し、柱状部７８６と７８８とが、好ましくは、互いに密着して、チャンバ７８４（図４８）が形成される。別法として、カバー７７０を基部７６０に上述したように固定すると、バッグ２２６の内周が、柱状部７８６と７８８とを互いに物理的に接触させないように、柱状部７８６と７８８との間に固定される。
【０１６０】
略平坦な可撓性遠心機バッグ２２６を、流体媒体（例えば、全血）を流入する前にチャンバ７８４内に設置すると、バッグはチャンバ７８４内全体には広がらないが、遠心機ロータ７５５が回転するにつれて、径方向に延伸する平坦な形状となる。しかし、導入チューブ２４８から、バッグ２２６が実質的に完全に満杯になるように十分な量の流体媒体（例えば、全血）が可撓性バッグ２２６内に導入されると、充填された遠心機バッグ２２６は、チャンバ７８４の形状に追従して、偏心された８の字断面形状となることを理解されたい。
【０１６１】
チャンバ７８４の偏心８の字形状は、剛性バッグ５００の形状とほぼ同じである。同じ理由から、チャンバ７８４の形状（及び充填されたバッグ２２６の形状）も偏心８の字形状となり、多血小板血漿分画の幅は、断面を楕円形とする充填バッグ（例えば、図４６及び図４７参照）の幅に対して大幅に増加する。
【０１６２】
上述したように、いくつかの方法を用いて、遠心機バッグからの所望分画（例えば、多血小板血漿。ただし、これに限定するものではない）の採取を判断することができる。例えば、多血小板血漿（色の薄い分画）を含む同心円とその外側で赤血球を含む赤い同心円とを目で観察して、多血小板血漿分画が分離されたことを確認することができる。この場合、この分画（１種類又は複数種類）が分離されたら、多血小板血漿を屈曲部品１６０を用いて遠心機バッグ２２６から引抜き、適したコレクタへと多血小板血漿を方向付けることができる。
【０１６３】
別法として、以下に詳細に説明するように、センサを組入れて、多血小板血漿分画の存在を検出してもよい。
【０１６４】
上述から、本発明による遠心処理システム１０と遠心機ロータ及びバッグとに、本発明の各態様による患者の全血からの多血小板血漿、白血球、貧血小板血漿又は赤血球の採取に適した複数の特徴があることがわかる。例えば、上述したように、ヘマトクリット値（すなわち、百分率で表される、血液体積に対する赤血球体積の比）には個人間で差がある。したがって、具体的サンプル内に含まれる赤血球量に応じて、遠心処理を行った後に遠心機バッグ内にてさまざまな血液成分が分布する厳密な径方向位置も異なる。本発明による遠心機バッグは、全血を遠心機バッグ内に導入するだけでなく、赤血球分画の一部又は全部を必要に応じて引抜いて、採取すべき分画位置を排出チューブ領域内へと移動させることのできる導入チューブを設けることにより、この問題を克服したものである。この特徴は、遠心機バッグ２２６、２７０、３２０及び５００に具備されている。ヘマトクリット値が一定ではないことによる問題を克服する、本発明による遠心機バッグのもう１つの実施態様が、複数本の排出チューブを有する遠心機バッグ２２６’である。
【０１６５】
さらに、本発明による遠心処理システム１０では、遠心機が回転している間に、処理を中断することなく、材料を周囲環境に長時間暴露することなく、流体供給源（例えば、手術前又は手術時に患者から採った抗凝固剤入り全血）と収集容器（すなわち、血小板ゲルの調製用容器）とに接続された二腔管などを介して材料を提供及び取り出すことができるため、このシステム１０は事実上、処理全体にわたって所望程度の無菌状態を維持できる可能性を高めた閉塞システムとなっている。
【０１６６】
さらに、分離された分画を移動させ、採取された分画の表面積を最大にするという上述の特徴と合わせて、遠心処理システム１０が携帯サイズであることにより、これより大きい従来の遠心機に比較して、自家由来血小板ゲルの処理性能が高くなっている。
【０１６７】
遠心処理システム１０がオンライン採取性能を備えているため、流体媒体の導入と分離された分画の取出しとを上述したように調節することにより、多血小板血漿、白血球、赤血球及び貧血小板血漿を連続的かつ動的に分離及び収集することができる。また、本発明による可撓性及び剛性遠心機バッグ及びその中身の方向（例えば、概して径方向に延伸する）は、さまざまな成分を分離して採取するまでの変換過程においても、大幅に変更されることはない。また、流体媒体の追加やそのさまざまな分画の取出し時に遠心処理システム１０を減速又は停止させる必要がないため、本発明による遠心機バッグの中身を攪拌する必要も低減又は回避される。
【０１６８】
さらに、本発明による可撓性及び剛性遠心機バッグの通常の配向（例えば、実質的に水平）は、遠心処理時における遠心機バッグの配向と同様に、所望する全血分画の取出し時にも同じままに維持されるため、遠心処理により得られた分離状態を維持することが一層容易となる。したがって、得られた分離状態に悪影響を及ぼすほどに分画を乱してしまう危険が少なくなる。
【０１６９】
以上、本発明を全血成分の分離について説明してきたが、本明細に記載する方法及び装置を他の流体媒体の成分分離にも使用できることを理解されたい。その例として、密度勾配媒体を含む全血、すでに画定された４種類の全血成分の細胞成分又はサブセットが挙げられるが、これらに限定するものではない。
【０１７０】
上述したように、血液の分離及び材料の取扱いを手動で制御することもできるが、本発明の別の実施形態では、分離及び材料取扱い処理の少なくとも一部が自動化されている。図５３を参照すると、自動処理システム８００が例示されている。この処理は概して、血液の導入ステップ、所望成分の分離ステップ、及び分離された成分の取出しステップを自動制御するように構成されている。遠心処理システム８００に関する以下の説明は、血液サンプル内の血小板を分離する例であるが、このシステムにより、血液や他の流体から他の成分又は分画を分離するのに有用な特徴も得られる。こうした他の使用法も本開示内容の範囲内である。同様に、遠心処理システム８００における使用例として説明する具体的な成分は例示のみを目的としており、本発明を何ら制限するものではない。同時に、医療装置分野の当業者であれば、別の装置も明白であろう。
【０１７１】
図５３に図示した実施形態では、遠心処理システム８００は、注入ポンプ８１０に流体ライン８０４で接続された血液供給源８０２を含む。流体ライン８０４には、電磁弁又は一方向逆止め弁などの弁８０６が具備されて、注入ポンプ８１０の操作時に血液供給源８０２との間の流動を制御できるようになっている。注入ポンプ８１０は、流体ライン８１８を介して血液供給源８０２から遠心機８２０まで血液を注入するように操作可能となっている。血液供給源８０２内の血液のすべて又は選択部分が遠心機８２０の血液リザーバ８２４内に注入されると、注入ポンプ８１０のスイッチは切られて、血液供給源８０２が弁８０６で隔離された状態となる。遠心処理システム８００の操作中（例えば、分離された成分の取出し時、又は取出し後）、追加血液を供給するために、注入ポンプ８１０を再度動作させることができる。
【０１７２】
遠心機２０に好ましくは、導入された血液を収集するように、ロータ内２０２内に、バッグ２２６、２２６’、２７０又は３２０などの可撓性遠心機バッグを具備する。別法として、ロータ２０２を、偏心８の字状チャンバを有する剛性容器として、上述したように血液を直接収集することもできる。したがって、以下に説明する実施形態は、バッグ２２６を有する遠心機を例示したものであるが、本明細書内に開示した別の遠心機バッグも同様に使用可能であることを理解されたい。上述した遠心機２０は、内側中間シャフトギアアセンブリ１０８を有する。このアセンブリ１０８により、ロータアセンブリ２００、特にロータ２０２を、ロータ２０２内に含有されているさまざまな構成要素や血液成分を分離させる遠心力の発生に適した回転速度で回転させる原動力が得られる。駆動アセンブリ８２２に、遠心機２０の内側駆動構成要素に接続されたドライブシャフトを具備する電気モータなど、原動力の発生に有用ないくつかの装置を含めることができる。一の好適な実施形態において、この駆動アセンブリ８２２は、遠心機２０の外側部分に装着されたベルト、具体的に言えばタイミングベルトリング４４を駆動する電気モータを含む。成分を適切に分離するため、その回転速度は通常、約０ＲＰＭ〜５０００ＲＰＭであり、本発明の一の実施形態における回転速度は、約０ＲＰＭ〜５０００ＲＰＭに維持される。
【０１７３】
上記に詳細に説明したように、成分はその具体的な密度に応じて、ロータ２０２の中心軸Ａから距離の異なる径方向位置又はベルトを構成する。例えば、重い赤血球は通常、外側領域に分離され、それより軽い血小板はロータ２０２の中心軸に近いほうの領域内に分離される。こうした成分領域それぞれの間には、流体密度が高いほうから低いほうへと測定可能に変化する界面があるため（すなわち、外側領域から内側領域へと密度を測定した場合）、遠心処理システム１０のいくつかの実施形態では、この密度界面を用いて、成分領域の位置を特定する（これについては、以下で詳細を説明する）。一の好適な実施形態において、駆動アセンブリ８２２は、遠心処理システム１０の動作中、成分の分離状態を保つために、遠心機２０を回転させ続ける。
【０１７４】
ロータ２０２内で血液が分離されたら、汲出しポンプ８３０が、選択成分を引出し腔８２８を介してロータ２０２から汲み出すように操作される。上述したように、使い捨て式血液遠心機バッグ２２６の特徴として、ロータ２０２内に支持される遠心機バッグを好ましくは、多血小板血漿領域内にある血小板など、分離された血液成分を、引出し腔２３２を遠心機バッグ２２６の中心軸から径方向の一定距離に配設することにより選択的に取り出すことができるように構成する。好ましくは、引出し腔の径方向長さ又は径方向位置を、分離された所望成分の径方向長さ、又は分離される成分の予想位置と一致するように選択する。こうすることにより、汲出しポンプ８３０のみが（又は、実質的にこのポンプのみが）、その径方向距離にある具体的な成分（例えば、容器４００内の血小板）を取り出すことになる。遠心機バッグ２２６から具体的成分のすべて又は所望量が取り出されたら、汲出しポンプ８３０の動作は停止するため、新たな分離処理を開始させることができる。別法として、一の好適な実施形態において、汲出しポンプ８３０の動作停止後、又は汲出しポンプ８３０の動作中に注入ポンプ８１０を再度動作させて、追加血液を遠心機バッグ２２６内に注入する。
【０１７５】
出口ポートを径方向距離又は位置に固定する時点で懸念されることは、各血液サンプルに異なる成分がさまざまなレベル又は量で含まれている可能性があることである。このため、遠心機バッグ２２６内における具体的成分の径方向距離や位置又は成分領域は、血液サンプル毎に少なくともわずかに変化する。さらに、成分レベルがさまざまであることから、成分領域の広さも変化するため、他の成分を混合することなく遠心機バッグ２２６から汲出しポンプ８３０で汲み出すことのできる量も、血液サンプル毎に異なる。また、汲出しポンプ８３０で血液を取り出した後又は取り出している間に血液が追加される分離システム１０の実施形態では、成分領域の位置も変化する。
【０１７６】
分離される具体的成分の位置が変化することに対処するため、遠心処理システム１０を好ましくは、分離された成分の位置を調節して、分離された成分の径方向位置を出口ポートの径方向位置と実質的に位置合わせするように構成する。例えば、遠心処理システム１０を用いて、血液サンプルから血小板を収集することができる。この例では、遠心処理システム１０に好ましくは、隔離弁８１６（例えば、電磁弁又は一方向逆止め弁）を具備した流体ライン８１４を介して注入ポンプ８１０に接続された赤血球コレクタ８１２を含める。別法として、ポンプや注入器を弁として作用させてもよい。注入ポンプ８１０は、流体を遠心機８２０との間の２方向で流体ライン８１８を介して選択的に注入するように構成されている。したがって、注入ポンプ８１０を可逆方向式蠕動ポンプ又は他の２方向式ポンプにしてもよい。同様に、２本の流体ライン８０４及び８１４を概略的に図示しているが、本発明を実施するために、注入及び排出ラインとして単一流体ラインを用いてもよい。
【０１７７】
遠心機バッグ２２６から流体を取り出すために注入ポンプ８１０を動作させることは、分離された所望成分の径方向位置を遠心機バッグ２２６の排出チューブ２５０及び導入チューブ２４８と位置合わせするのに有用である。血小板又は多血小板血漿を内腔２３２及び２３０にそれぞれ接続された排出チューブ２５０及び導入チューブ２４８と位置合わせした場合、導入チューブ２４８を排出チューブ２５０より長い径方向距離に配置することが好ましい。注入ポンプ８１０により引入れ腔２３０に吸引力が印可されると、赤血球が遠心機バッグ２２６から赤血球コレクタ８１２内に汲み出される。赤血球が取り出されると、分離された血小板（すなわち所望の成分領域）が、遠心機バッグ２２６内にて径方向外側の新しい位置に移動する。分離された血小板又は血小板領域の中央軸からの径方向距離が伸びて、遠心機バッグ２２６が含む排出チューブ２５０の径方向距離又は位置と一致するまで、注入ポンプ８１０が動作する。所望成分領域と排出チューブ２５０とが実質的に位置合わせされたら、汲出しポンプ８３０を動作させて、位置合わせされた成分領域内に含まれる成分のすべて又は選択量を取り出す。
【０１７８】
本発明に自動化構造を具備するため、遠心処理システム１０に、注入ポンプ８１０、遠心機２０、駆動アセンブリ８２２及び汲出しポンプ８３０の操作をモニタ及び制御するためのコントローラ８５０を含める。自動操作を効率よくモニタ及び制御するために、遠心処理システム１０内に数多くの制御装置を用いることができる。一の実施形態において、コントローラ８５０は、デジタル信号プロセッサ、メモリ、入力及びフィードバック信号の受信及び制御信号の送信用入出力（Ｉ／Ｏ）インターフェースを含む中央処理ユニット（ＣＰＵ）を備えたコンピュータと、入力信号を処理して制御信号を出力するためのソフトウェア又はプログラミングアプリケーション（信号調節器及び／又は増幅器の有無にかかわらず）とを含む。コントローラ８５０は、信号ライン８６０、８６２、８６４、８６６及び８６８により遠心処理システム１０の装置に通信可能に連係されている。これらのラインには、信号調整装置や、コントローラ８５０と遠心処理システム１０の構成要素との間を適切に交信させられる他の装置を含めることができる。
【０１７９】
血液供給源容器８０２に血液が供給されて、操作者がスタートボタンを押すと、コントローラ８５０が信号ライン８６４を介してモータコントローラを含むことのできる駆動アセンブリ８２２に制御信号を伝送する。これにより、遠心機２０が回転し始めて、遠心機バッグ２２６内の血液成分が、径方向位置の領域（例えば、多血小板血漿領域）内に分離される。遠心機の回転開始後、又は駆動アセンブリ８２２の動作と同時に、コントローラ８５０は制御信号を信号ライン８６０から注入ポンプ８１０に出力して、血液供給源容器８０２から遠心機２０の遠心機バッグ２２６への血液注入を開始させる。遠心処理システム８００の実施形態によっては、駆動アセンブリ８２２は、複数種類の速度で、又は一定範囲外の速度で動作可能である。さらに、単一速度によるドライブシャフトを用いた場合でも、遠心機２０の回転速度は変化する可能性がある。この問題に対処するため、遠心処理システム１０に、速度検出器８５８を含めることができる。この検出器は、遠心機バッグ２２６の動作を少なくとも定期的に検出し、フィードバック信号を信号ライン８６６からコントローラ８５０に伝送するものである。コントローラ８５０は、その信号を受信すると、遠心機２０の回転速度を算出し、適用可能であれば、制御信号を駆動アセンブリ８２２に送信して、その動作速度を加速又は減速することで、遠心機バッグ２２６の回転速度を所望通りにする。
【０１８０】
遠心機バッグ２２６内に成分分離が終了した時点を決定するために、遠心機２０及び駆動アセンブリ８２２構造の差異を考慮して所望レベルの成分分離を行うための最短回転時間を決定できるように、遠心処理システム８００を基準化することができる。この実施形態では、コントローラ８５０に、好ましくは、駆動アセンブリ８２２により遠心機２０が回転した時間を測定するように動作する（コントローラ８５０から駆動アセンブリ８２２への制御信号伝送時から測定を開始するなどにより）タイマー機構８５６を含める。測定された回転時間が、具体的な遠心機２０及び駆動アセンブリ８２２に対して基準化された回転時間と一致していれば、タイミング機構８５６はコントローラ８５０に、遠心機バッグ２２６内の分離が終了したことを通知する。この時点で、コントローラ８５０は、制御信号を信号ライン８６０から注入ポンプ８１０へと伝送して、その動作を停止させ、汲出しポンプ８３０にも信号ライン８６８から制御信号を伝送して、遠心機バッグ２２６の内腔２３２の出口ポートに隣接する成分領域に分離された成分を流体ライン８２８から汲み出す動作を開始させる。コントローラ８５０が回転時間を利用する別の実施形態では、コントローラ８５０が速度検出器８５８からの速度フィードバック信号を用いることにより、所望レベルの成分分離を行うように、必要に応じて回転時間を調節する。例えば、遠心処理システム１０を、いくつかの回転速度に対して基準化して、コントローラ８５０が算出された回転速度を元に探索できるように、回転速度に対応する最短回転時間を参照用テーブルに格納することができる。細胞成分の位置及び／又は濃縮を最適化するために、手動により、又は自動的に回転速度を変えることができる。
【０１８１】
分離操作時に、成分分離領域の位置は変化していくため、遠心処理システム８００の一の好適な実施形態は、遠心機バッグ内の成分分離をモニタし、ライン８６２でコントローラ８５０までフィードバック信号を伝送するためのセンサアセンブリ８４０を含む。当技術分野における当業者であればわかるように、流体サンプル、特に血液サンプル内における特定成分の有無を検出するためのセンサ装置は数多く存在している。こうした装置の多くは、赤外線、レーザ又は白熱光などの放射エネルギの供給源と、それと互換性があり、電気信号を出力することにより受信エネルギに反応する放射エネルギ感応式検出器とを含む。簡単に言えば、放射エネルギビームを通過させる材料の密度にばらつきがあることから、検出される信号が測定可能な状態でさまざまに異なっているため、こうした放射エネルギ装置が有用となる。本発明によれば、センサアセンブリ８４０に、周知の型の放射エネルギ供給源、検出器装置、及び血液などの流体に含まれる構成要素の測定に有用な他のセンサ装置のいずれをも含めることができる。
【０１８２】
センサアセンブリ８４０の供給源及び検出器を、好ましくは、遠心処理システム８００内に配置して、遠心機バッグ２２６をモニタし、遠心機バッグ２２６の出口ポートの径方向位置と一致する径方向位置にある具体的な血液成分の存在を識別できるようにする。一の実施形態において、この供給源からの放射線ビームは、出口ポートの径方向位置と少なくとも一部が重なる径方向位置を含んで遠心機バッグ２２６内に設けられた「窓」内を通過する。遠心処理システム８００の操作時、センサアセンブリ８４０の検出器から出力されるフィードバック信号により、コントローラ８５０は、密度界面が窓内に入った時点を確認することができる。これは、いくつかの理由から実現可能となっている。導入チューブ２４８を介して遠心機バッグ２２６から流体を取り出すために赤血球が注入ポンプ８１０の動作により取り出されると、バッグ２２６内の成分位置が移動する。また、密度のより高い成分が遠心機バッグ２２６に追加されると、特定の血液成分が径方向内側に押し込まれるため、密度変化が起こる可能性がある。全血の遠心処理では、これは、注入ポンプ８１０の動作により血液が追加されて、赤血球が血小板領域より径方向外側の領域に集合すると起こる。
【０１８３】
密度界面のさまざまな移動を考慮して、放射線供給源の窓を、別法として、遠心機バッグ２２６の排出チューブ２５０の位置から径方向内側に配設してもよい。窓を排出チューブ２５０から内側に配置することにより、汲出しポンプ８３０が、モニタした領域の特定成分をほぼすべて除去した時点、及び／又は注入ポンプ８１０が一定量のより密度の高い成分を取り出して、モニタした領域を径方向外側に移動させた時点をコントローラ８５０が認識できる。すると、コントローラ８５０は、排出チューブ２５０に入る不要成分（密度のより低い成分）の量を最小限に抑えるように、制御信号を送信して汲出しポンプ８３０又は注入ポンプ８１０（適切な一方）のスイッチを切るように機能することができる。別法として、センサアセンブリ８４０に２つの放射線供給源及び検出器を具備して、センサアセンブリ８４０の第２の窓を、排出チューブ２５０から径方向外側の一定距離に配置することができる。２つの感知窓を設けることにより、センサアセンブリ８４０は、（赤血球が追加された場合など）排出チューブ２５０に向けて径方向内側に移動する密度界面に関するコントローラ８５０情報を提供するように動作することができる。これに応答して、コントローラ８５０は、注入ポンプ８１０に対する制御信号を生成して、赤血球などの密度のより高い成分を遠心機バッグ２２６から汲み出させるように機能する。２つの感知窓により、コントローラ８５０は外向きの密度界面の移動も検出することができるため、コントローラ８５０は汲出しポンプ８３０を閉じる（及び／又は注入ポンプ８１０の吸引処理を停止させる）かつ／又は注入ポンプ８１０を始動して血液を追加させることができる。
【０１８４】
遠心処理システム８００の操作をさらに明確にするため、図５４に、コントローラ８５０が生成する制御信号とセンサアセンブリ８４０からのフィードバック信号の受信とのタイミング及び関係が例示されている。この実施形態において、センサアセンブリ８４０の放射線検出器は、遠心機バッグ２２６の排出チューブ（汲出しポンプ８３０への入口）に隣接されて、排出チューブ２５０を流動する流体の密度変化を感知できるようになっている。図示のように、遠心処理システム８００の操作は時間ｔ０で開始される。この時点で、注入ポンプ８１０、汲出しポンプ８３０及び遠心機駆動アセンブリ８２２はすべて、スイッチが切られているか、動作していない状態である。時間ｔ１になると、コントローラ８５０が、操作者の入力に応答して、又は血液供給源８０２が適切に充填されたことを感知して動作を開始し（センサは図示せず）、遠心機バッグ２２６を回転させるように遠心機駆動アセンブリ８２２の動作を開始させるための制御信号をライン８６４に出力する。実施形態によっては、ライン８６４を通過する制御信号に、駆動アセンブリ８２２の操作速度を初期設定する回転速度情報が含まれる。これと同時に、又は選択した遅延時間にて、流体ライン８１８により遠心機バッグ２２６まで流体を注入するように構成された注入ポンプ８１０を動作させるように、コントローラ８５０はライン８６０に制御信号を出力する。センサアセンブリ８４０は、ライン８６２により初期密度フィードバック信号をコントローラ８５０に提供する。コントローラ８５０はこの信号を処理して、排出チューブに隣接する初期又は分離前密度を決定することができる。別法として、コントローラ８５０を、遠心機バッグ２２６内に汲み出す成分を各領域に分離できるように設定された遅延時間（上述したように、基準化された最短回転時間など）の経過後（タイマー機構８５６の測定による）、センサアセンブリ８４０からのフィードバック信号を要求する構成にしてもよい。
【０１８５】
時間ｔ２にて、コントローラ８５０は、密度のより高い血小板を含む領域などの所望密度を有する領域を、センサアセンブリ８４０の検出器に隣接（すなわち、排出チューブに隣接）させるように機能する。この位置合わせを行うため、コントローラ８５０は、制御信号をライン８６０から注入ポンプ８１０に送信して、流体の遠心機バッグ２２６への注入を停止させ、弁８０６を閉じて弁８１６を開くことで注入方向を反対向きにし、特定の所望成分より密度の高い成分の遠心機バッグ２２６からコレクタ８１２への汲出しを開始させる。例えば、遠心処理システム１０が、血小板又は多血小板血漿を分離及び収集するように動作している場合、時間ｔ２にて、注入ポンプ８１０は、導入チューブ２４８にて吸引力を遠心機バッグ２２６に印可することで、赤血球分画を汲み出すように動作する。このように密度のより高い成分が注入ポンプ８１０で取り出されてしまうため、時間ｔ３では、排出チューブ２５０に隣接する流体の密度が変化し始め、コントローラ８５０に送信されるセンサフィードバック信号の大きさが変化する。センサフィードバック信号の大きさは、時間ｔ４にて、コントローラ８５０がフィードバック信号を処理して、隣接している流体の密度が所望範囲内であると決定するまで（使用されている特定センサ及び収集される材料に応じて、より強く、又はより弱く）変化する。この移行を、密度の異なる２領域間の界面が、センサアセンブリ８４０の検出器位置を通過する時点で検出できると考えることも可能である。
【０１８６】
時間ｔ４にて、分離された所望成分の領域が排出チューブ２５０と位置合わせされると、コントローラ８５０は制御信号をライン８６０に送信して、注入ポンプ８１０の動作を停止させる。時間ｔ４にて、又はその後のいずれかの時点で、コントローラ８５０は制御信号をライン８６８に出力して、汲出しポンプ８３０を動作させ、遠心機バッグ２２６の排出チューブ２５０に吸引力を印可して、遠心機バッグ２２６から、多血小板血漿分画などの所望成分を取り出す。時間ｔ５にて、貧血小板血漿がセンサアセンブリ８４０のサンプリングウィンドウに入ってきた場合など、排出チューブ２５０付近の流体密度が変化し始めるのにつれて、センサフィードバック信号の大きさが再び変化し始める。時間ｔ６では、排出チューブ２５０に隣接する、及びサンプリングウィンドウ内にある流体の密度が所望密度範囲外となる（例えば、流体が含む血小板又は他の所望流体成分の百分率が所定より低い）。これに応答して、コントローラ８５０が制御信号をライン８６８に送信して、汲出しポンプ８３０の動作を停止させる。無論、時間ｔ６前のいずれの時点でも、制御信号を汲出しポンプ８３０に送信するようにコントローラ８５０を動作させることができる。その例として、時間ｔ５の後で、隣接する流体の密度が変化し始めたが時間ｔ６にはまだ達していない時点、又は取り出した量に基づいた時点が挙げられる。時間ｔ６後になればいつでも、コントローラ８５０を動作させて、遠心機駆動アセンブリ８２２の動作を停止させてもよい。さらに、上述したように、時間ｔ６経過後、注入ポンプ８１０で血液などの流体を追加するように動作させながら、分離処理システム８００の動作を繰返すことができる。別法として、注入ポンプ８１０及び汲出しポンプ８３０を同時に動作させて、時間ｔ４の後、新たに収集された成分量に対応する量の血液を追加して、時間ｔ４における界面検出と時間ｔ６における密度範囲超過検出との間の時間を延長してもよい。
【０１８７】
自動処理システム８００に関する上述において、センサアセンブリ８４０の概略を図５３に示したが、放射エネルギ供給源及び検出器の位置は、遠心機バッグ２２６内における血液成分の分離状態を正確に測定するのに有用であれば、処理システム８００内のいずれでもよいことに留意されたい。例えば、この供給源及び検出器を、遠心機バッグ２２６の隣接する遠心機２０内に配設することができるが、この実施形態の場合、供給源及びセンサへの適切な信号及び電力ライン接続の供給と、遠心機及びセンサアセンブリ８４０の一部の回転とについて問題が起こる可能性がある。したがって、処理システム８００の一の好適な実施形態は、血液リザーバ内に含まれる流体の密度を効率よく決定しつつ、供給源及び検出器を含むセンサアセンブリ８４０を外部に配置して、遠心機２０の構造を簡易化するものである。
【０１８８】
図５５は、遠心処理システム８００の外部センサ式実施形態の関連構成要素を示す略側面図である。一般に、遠心機２０は、ロータ延出部分８８０と、駆動アセンブリ８２２に接続された駆動部分８８１（接続部は図示せず）とを含む。遠心機２０もロータ延出部分８８０も、遠心機２０の中心軸又は回転軸Ｃを中心に回転する。遠心機２０の内側伝動構造について以下で詳述するように、ロータ延出部分８８０まで延びる流体注入及び排出ラインのねじれを制御するため、駆動部分８８１は、リザーバ延出部分８８０に対して２：１の比率（又は他の適した比率）で回転する。遠心機２０の内側伝動構造により、遠心機２０は、分離時に赤血球などの密度の高い成分が密集しすぎて、遠心機から汲み出す又は取り出すことがさらに難しい固体高密度材料となってしまう危険性を抑えつつ、密度の異なる成分を分離させる回転速度を有効に得ることができる。
【０１８９】
図５５を再度参照すると、ロータ延出部分８８０は、遠心機２０の上方端部に位置して、遠心機バッグ２２６又は他の入れ物を具備している。好ましくは、ロータ延出部分８８０を、プラスチックなどの透明又は一部透明な材料で製造して、流体密度を感知できるようにする。その種類は何種類でもよい。ロータ延出部分８８０は、中心軸Ｃから径方向外側に測定して、遠心機２０の外側縁部から一定距離ｄだけ延出している。距離ｄを好ましくは、収集すべき多血小板血漿分画などの所望成分を、やはり遠心機２０から外側に延出している遠心機バッグ２２６内の１地点において１領域内に容易に分離できるように選択する。これに関して、ロータ延出部分８８０も、遠心機バッグ２２６がロータ延出部分８８０内にてその外周付近の地点まで延伸するように構成されている。ロータ延出部分８８０を延出させる距離ｄを好ましくは、位置合わせ処理（上述）を可能にし、密度のより高い成分を取り出すように注入ポンプ８１０を動作させる必要性を制御するように選択する。一の実施形態において、通常の血液サンプルを分離する場合、血小板を多く含む領域の中央が、遠心機２０の周縁部から距離ｄのほぼ半分にくるように距離ｄを選択する。
【０１９０】
図５５に図示したように、センサアセンブリ８４０全体が、遠心機２０の外部に配置されている。センサアセンブリ８４０は、ロータ延出部分８８０及びその中に具備されている遠心機バッグ２２６内を通過する放射エネルギビーム８８４の放出源８８２を含む。上述したように、この場合も、放射エネルギ源８８２を、流体密度センサに有用なものであれば、ほぼすべてのエネルギ源（例えば、白熱光、ストロボ、赤外光、レーザなど）を使用することができ、使用する検出器やエネルギの具体的種類は、エネルギ源８８２の外部位置ほどに重要ではない。センサアセンブリ８４０はさらに、遠心機バッグ２２６を通過した後に衝突してくるビーム８８８を受信又は感知する検出器８８６を含む。検出器８８６として、エネルギ源８８２と互換性があり、感知したエネルギビーム８８８に応答してフィードバック信号を送信するものを選択する。この検出器８８６（コントローラ８５０及びその処理性能と組み合わせて）は、エネルギ源８８２と検出器８８６との間の遠心機バッグ２２６内に含まれる流体の密度検出に有用である。特に、センサアセンブリ８４０は、流体密度の変化及び密度の異なる流体間の界面の認識に有用である。その例として、分離された赤血球含有領域と多血小板血漿分画領域との間の界面や、多血小板血漿領域と貧血小板血漿領域との間の界面が挙げられる。
【０１９１】
エネルギ源及び検出器の組合せによっては、１つのサンプリングポイントではなく、サンプリングウィンドウが設けられる（ただし、本発明の一部では、１つの径方向長さにより画定される窓と同様に１つのサンプリングポイントが有用）。サンプリングウィンドウは、中心軸ｃから外径までの長さＯＵＴと、内径ＩＮまでの長さとにより画定される。上記からわかるように、多くのエネルギ源及び検出器構造において、サンプリングウィンドウのサイズは１地点とあまり変わらないほどに小さく、その断面形状は無論、さまざまに変更可能である（例えば、円形、四角形、矩形など）。上述したように、エネルギ源８８２及び検出器８８６により形成されるサンプリングウィンドウが、分離処理時に形成され、血小板などの特定密度成分を含む領域の径方向位置の少なくとも一部上に重なるように、センサアセンブリ８４０をリザーバ延出部分８８０及び遠心機２２６に対して配設することが好ましい。この位置を、数多くの血液（又は他の流体）サンプルが完全に分離され、特定領域の径方向距離が測定される、遠心機２０の基準化処理を通じて決定された基準化位置にしてもよい。サンプリングウィンドウが、選択した分離領域の予想位置と重なるようにエネルギ源８８２及び検出器８８６をロータ延出部分８８０に対して配設した状態で、決定又は基準化された位置を、センサアセンブリ８４０に対する初期固定位置として用いることができる。無論、サンプルに含まれる内容物にはさまざまな成分が含まれる可能性があり、それにより、この初期位置合わせが不正確になり、遠心処理システム８００を操作しても領域の不整合や移行が起こり得る。したがって、センサアセンブリ８４０で形成したサンプリングウィンドウの初期位置決めのために、好ましくは、上述した位置合わせ処理を用いる。
【０１９２】
別の一の実施形態において、センサアセンブリ８４０は分離システム８００内の固定位置に配置されておらず、分離操作時にこれを位置決めすることができる。例えば、センサアセンブリ８４０を、その距離ＩＮ及びＯＵＴを変えるために、遠心機２０に向けて径方向内側及び外側に摺動させられる基部上に取り付けることができる。この摺動動作は、使い捨てバッグを装着する、又は取り出すなど、遠心機バッグ２２６に手が届くという面で有用である。操作時、新しいバッグを遠心機バッグ２２６内に挿入するまで、センサアセンブリ８４０をまず遠心機２０から外側に押出しておく。次に、センサアセンブリ８４０を基準化された位置まで内側に摺動（又は内側に移動）させる。別法として、この遠心処理システム８００を一定時間の間だけ動作させ、分離作業の一部又は全部を完了させてから（時間、又は単純に視覚による観察に基づいて）、遠心処理システム８００の操作者が、サンプリングウィンドウを分離された成分の所望領域（例えば多血小板血漿領域）に位置合わせしながら目を近づけられる位置まで、センサアセンブリ８４０を内側に摺動させる。こうした位置合わせの有効性は、遠心機バッグ２２６内に流体密度を検出しようとセンサアセンブリ８４０を操作して、コントローラ８５０により算出された密度（また他の情報）が出力又は表示されれば、すぐにわかる。この別の実施形態により、固定位置センサアセンブリ８４０の利点と、所望のサンプル窓と分離領域との位置合わせを簡単にできる、又は少なくとも近づけることのできる利点とを備えつつ、管理の容易な遠心処理システム８００が得られる。
【０１９３】
状況によって、ロータ延出部分８８０を設けない、又は、血液リザーバや遠心機バッグ２２６内の分離をモニタするのに延出部分が重要な役割を果たさないように、ロータ延出部分８８０及びセンサアセンブリ８４０を変更することが望ましい場合がある。図５６及び図５７に例示したのは、外部センサアセンブリ８４０（外部放射線供給源及び検出器など）の利点を提供する、２つの別の実施形態である。こうした実施形態を見れば、当業者には、上述した外部センサの使用法について数多くの他の例が明らかであり、それらも本発明の範囲内と考えられる。
【０１９４】
図５６を参照すると、ロータ２０２は、延出部分を設けず（ただし、ある程度の延出部分を設けることは可能）、遠心機バッグ２２６を備えている。この場合も、ロータ２０２及び遠心機バッグ２２６を、遠心機バッグ２２６に含まれる流体サンプルの密度又は他の特性における変化を検出できるように放射線を通過させることのできるプラスチックや他の材料で製造することが好ましい。センサアセンブリ８４０の実施形態では、放射線供給源８８２及び検出器８８６はロータ２０２の対向側部に配置されておらず、反射体８８５（鏡など）が、遠心機の駆動部分８８１内に配設されて、放射線供給源８８２からの放射線ビームを受信し、それを延出部分８８０及び遠心機バッグ２２６を通過させるように方向付けられている。検出器８８６は、センサアセンブリ８４０内にて遠心機２０に対して、遠心機バッグ２２６の流体サンプル内を通過して偏向又は反射されたビーム８８８を受信するように位置決めされる。この配置により、遠心機バッグ２２６内のサンプリングウィンドウを、分離後に収集すべき分画の予想位置と位置合わせできるように選択することができる。一の好適な実施形態において、サンプリングウィンドウは、血液リザーバ又は遠心機バッグ２２６の排出チューブ位置の少なくとも一部と重なっている。
【０１９５】
一の実施形態において、駆動部分は、透明ではない材料で製造されており、放射線供給源８８４から反射体８８５までのビーム８８４用通路が設けられている。一の好適な実施形態における通路は、ビーム８８４が進行を妨げられずに通過できる通路又はトンネルを形成している、駆動部分８８１の側部に設けられたポート１５４又は１５６（図１４）などの開口又は穴である。無論、この開口を、駆動部分８８１の内部を保護するカバーを提供しつつビームを反射体８８５まで通過させられる透明材料による通路にしてもよい。反射体８８５の下流にも通路を設けて、ビーム８８４を、劣化させることなく、又は最小限の劣化程度で、駆動部分８８１内部に通過させてもよい。この場合も、この通路を、駆動部分から部分２０２までの開口又はトンネル、又は透明材料で形成された通路にすることができる。このトンネル通路式実施形態におけるビーム８８４は、駆動部分８８１が１回転すると１度駆動部分８８１に入射するため、許容範囲のサンプリング率となる。別法として、ビーム８８４透過の場合と同様のサンプリング率を得られるように、駆動部分８８１の中心軸を中心に周方向に延伸する反射体８８５を容易に設けることもできる。無論、放射線供給源８８２及び検出器８８６の位置を反対にし、反射体８８５及びビーム８８４の透過角度を図示のものとは変えて、本発明を実施してもよい。
【０１９６】
外部センサアセンブリ８４０に対する別の実施形態を図５７に提供する。この実施形態では、放射線供給源８８２は放射線検出器としても機能するため、別個の検出器を設ける必要がない。このようにさらに小型となった外部センサ構造では、ビーム８８４は、放射線供給源及び検出器８８２から、駆動部分８８１内又はこの中の通路を通過して回転駆動部分８８１まで透過される。反射体８８５がこのビーム８８４をロータ２０２及び遠心機バッグ２２６に向けて反射するため、密度変化をモニタできるサンプリングウィンドウが遠心機バッグ２２６内に形成される。流体サンプルを含む遠心機バッグ２２６内を通過したビーム８８８は、第２の反射体８８７に衝突する。この反射体８８７は、ビーム８８８を同じ又は実質的に同じ通路から遠心機バッグ２２６内へと反射して、再度反射体８８５に衝突させるように、ロータ２０２内に配設されている。反射体８８５がビーム８８８を駆動部分８８１から放射線供給源及び検出器８８２に戻るように方向付けると、放射線供給源及び検出器８８２は、衝突してきたビーム８８８に応答して、次の処理に向けたフィードバック信号をコントローラ８５０に送信する。
【０１９７】
一の実施形態において、ビーム８８４は、駆動部分８８１が１回転する毎に１度、駆動部分８８１に入射する。上記に詳細に説明したように、部分８８０を好ましくは、駆動部分８８１が１回転する毎に２回転させ、第２の反射体８８７を、駆動部分８８１の１回おきの回転時のみにビーム８８８を受信するように位置合わせする。別法として、１対の反射体８８７をロータ２０２内に配置して、駆動部分８８１が１回転する毎に１回ずつビーム８８８を受信して遠心機バッグ２２６内を通過するように反射させることができる。さらに別の実施形態において、反射体８８５及び第２の反射体８８７を遠心機２０の中心軸を中心に一部又は全部に延長して（駆動部分８８１に対応開口及び／又は透明通路を設けた状態で）、サンプリング率をさらに高くすることも可能である。
【０１９８】
本発明の重要な特徴によれば、図５８に例示したように、自動処理システム９００の別の実施形態では、温度制御が得られる。処理システム９００内に提供する温度制御をさまざまな形態とすることができ、その例として、血液供給源８０２から注入される流体サンプルの温度調節、分離処理を可能とするための、遠心機バッグ２２６に含まれる流体温度のモニタ及び調節、及び処理システム９００に含まれる温度反応成分に対する操作温度の調節が挙げられる。こうした成分には、赤血球、白血球、血漿、多血小板血漿、及び他の薬剤、タンパク質又は化合物と混合したこれら成分のいずれかが挙げられるが、これらに限定するものではない。本発明の一の好適な実施形態において、汲出しポンプ８３０により遠心機バッグ２２６から取り出された成分を所望温度範囲まで加熱する温度制御システムが処理システム９００に具備される。例えば、自己由来血小板ゲルの形成に処理システム９００を用いる場合、ディスペンサアセンブリ９０２が処理システム９００内に具備される。これは、遠心機２０から抜出された多血小板血漿を収集及び処理するチャンバや注射器を含むものである。ゲル形成処理の一部として、そのゲルを使用する（例えば、患者に送出する）前に、採取した多血小板血漿内の血小板を活性化させることが通常望ましい。所定の活性化温度範囲までディスペンサアセンブリ内の血小板温度を上昇させ、上昇させた後もそれを維持できるという点で、この温度制御システムは有用である。ゲル形成処理の一の実施形態において、この活性化温度範囲は２５℃〜５０℃であり、好ましくは、３７℃〜４０℃であるが、所望する活性化レベル及び処理システム９００で処理又は形成している具体的生成物に応じて、これ以外の温度範囲で本発明を実施することも容易である。
【０１９９】
図５８を参照すると、処理システム９００の温度制御システムは、フィードバック信号ライン９０６でコントローラ８５０と通信可能に連結された温度コントローラ９０４を含む。コントローラ８５０を用いて、まず操作温度範囲（例えば、活性化温度範囲）を設定し、その設定値をフィードバック信号ライン９０６から温度コントローラ９０４に伝達することができる。別法として、温度コントローラ９０４に入出力（Ｉ／Ｏ）装置を含めて、操作者からの温度制御範囲を受信できるようにする、又は、こうした温度範囲を、処理システム９００の初期製造及び組立ての一部として予備設定しておくことも可能である。温度コントローラ９０４に電子制御回路を含めて、温度及び加熱構成要素などに対する線形、比例又は他の制御をできるようにしてもよい。一の好適な実施形態において、温度コントローラ９０４は、感知した温度を算出するためのマイクロプロセッサと、温度及び制御アリゴリズム及びプログラムを格納するためのメモリと、温度センサからフィードバック信号を受信し、さまざまな温度制御装置（例えば、抵抗熱構成要素、ファンロータ、及び、加熱冷却技術における当業者に周知の他の装置）に制御信号を送信するためのＩ／Ｏ部分とを含む。
【０２００】
図示のように、ディスペンサアセンブリ９０２の温度を感知し、その対応温度フィードバック信号（感知された温度変化に比例する電気信号など）を信号ライン９１０から温度コントローラ９０４に提供するために、１つ又は複数の温度感知構成要素を含む温度センサ９０８が設けられている。この温度センサ９０８は、温度を感知し、それに応じて、温度コントローラ９０４に有用なフィードバック信号を出力できるものであれば、サーミスタや熱電対など、いずれの温度感知装置でもよい。一の好適な実施形態において、この温度センサ９０８を、すでに分離されている活性化すべき生成物を含む注射器や他のチャンバに熱を伝達する状態で、又はその熱を感知する状態で接触しているディスペンサアセンブリ９０２内に配設する。こうすることにより、温度コントローラ９０４は、ディスペンサアセンブリ９０２内の関連チャンバの温度が、所望の活性化温度範囲内にあるかどうかをより正確にモニタすることができる。
【０２０１】
ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバを一定温度範囲内に維持するために、ヒータ構成要素９１３が温度制御システム内に具備されており、温度センサ９０８から受信した信号に基づいて電力供給源を操作するなど、温度コントローラ９０４で選択的に操作できるようになっている。ヒータ構成要素９１３には、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバなどの対象を加熱するのに有用な装置であれば、いずれをも含めることができる。その例として、チャンバと熱交換できる状態で接触しているチューブを備えた流体熱交換器が挙げられる。一の好適な例として、コイル、プレートなどを含む電気抵抗型ヒータがヒータ構成要素９１３の一部として用いられるが、これに限定するものではない。この実施形態において、好ましくは、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバの挿入及び取出しを可能な状態にしつつ、加熱構成要素９１３の抵抗部分をそのチャンバの外側部分形状に追従した形として形成して、有効な熱伝達を行えるようにすることが好ましい。分離システム９００の操作時、温度コントローラ９０４は、操作温度範囲を受信し、温度センサ９０８から温度フィードバック信号を受信及び処理し、これに対応して、加熱構成要素９１３を選択的に動作させて、まず、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバの温度を操作温度範囲内の温度まで上昇させ、次に、感知される温度を操作範囲内に維持させるように構成されている。
【０２０２】
例えば、ゲルを活性化する、又は他の細胞成分及びその反応物をそれ自体に又は薬剤を用いて操作するための所望操作温度範囲を、前後の許容度を含めた設定温度（また所望の活性化温度）として提供することができる。この例における温度コントローラ９０４は、加熱構成要素９１３を動作させて、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバ温度を設定温度より高く、許容度上限の温度以下の温度まで上昇させることができる。許容度上限温度に到達すると、温度コントローラ９０４により加熱構成要素９１３は停止させられる可能性がある。温度センサ９０８が感知した温度が設定温度を下回りつつも許容度下限温度を上回っていれば、温度コントローラ９０４は加熱構成要素９１３を動作させて、感知される温度を、設定温度より高く、許容度上限の温度以下の温度まで再度上昇させる。こうすることで、温度コントローラ９０４は、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバ温度を所望活性化温度範囲（無論、この範囲を、ほぼ１つの設定温度と同じほどに狭い範囲にしてもよい）内に効率よく維持する。一の実施形態において、温度コントローラを、比例・積分・微分（ＰＩＤ）温度コントローラにする、又は比例・積分・微分（ＰＩＤ）温度コントローラとして動作させて、加熱構成要素９１３が生成する温度内におけるピーク及び突然の変化を少なくして、温度制御を改良する。さらに、温度コントローラ９０４に、感知された温度が設定操作範囲内になった時点を表示するように目に見える表示器（ＬＥＤなど）を含める、かつ／又は、感知された温度が設定操作範囲外になった時点を知らせる音声警報を含めることができる。
【０２０３】
別の実施形態において、加熱構成要素９０３は、処理システム９００の操作全体を通じて動作可能で停止しないように、２つ以上の設定値で動作するように構成されている。例えば、加熱構成要素９１３に、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバを操作範囲の下限温度（例えば、許容できる活性化温度範囲）に維持するように設計された下方設定値と、チャンバを設定操作温度範囲でそれより高い温度まで加熱するように設定された上方設定値とを設ける。別の実施形態では、加熱構成要素９１３を、ディスペンサアセンブリ９０２内で分離された液体の活性化又は他の処理を改良するため、選択可能な速度（例えば、時間単位あたりの温度変化）で加熱するように構成する。この構成により、加熱構成要素９１３による加熱速度を制御できる温度コントローラ９０４が得られる。
【０２０４】
上述したように、本発明は、組み合わせられると、使用スペースの限られた病院や同様の環境内における現場での使用に特に適合された小型分離システムを提供できる特徴を備えている。図５９は、温度制御システムを具備しつつ、プロファイル又は設置面積が小型化された、図５８に示す遠心処理システム９００の一の好適な構造を例示したものである。囲い込み部９１６が、温度制御システムの一部として具備されて、温度制御システムの構成要素を構造的に支持及び保護している。囲い込み部９１６は、プラスチックなど、数多くの構造材料から製造することができるものであり、ディスペンサアセンブリ９０２が含むチャンバ及び他の構成要素の挿入及び取出しができるように構成されたヒータ筐体９１８を支持している。このヒータ筐体９１８は壁部を有しており、この壁部内に、制御ライン９１４により温度コントローラ９０４に接続された加熱構成要素９１３（図５９では図示せず）が入れられている。温度センサ９０８（図５９では図示せず）も、ヒータ筐体９１８内に配置されており、図５８を参照しながら説明したように、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバに対して、システム９００の操作時にチャンバ及びその中の流体の温度を感知できるように位置決めされている。温度フィードバック信号は、温度センサ９０８によりライン９１０から温度コントローラ９０４に送信される。コントローラ９０４はこれに対応して、ヒータ筐体９１８内の温度を選択操作範囲内に維持するように加熱構成要素９１３を選択的に動作させる。
【０２０５】
分離システム９００に、コントローラ８５０などの温度感知構成要素が含まれているため、温度制御システムを、好ましくは、囲い込み部９１６内の温度をモニタ及び制御するように構成する。図示のように、囲い込み部９１６内の周囲温度を感知し、フィードバック信号をライン９２２から温度コントローラ９０４に送信するために温度センサ９２０が含まれる。空気を囲い込み部９１６内に入れ（ＡＩＮ）、加熱した空気を排出して、囲い込み部９１６内の温度を許容範囲内の周囲温度に維持するように、ルーバなどの空気口９３０が囲い込み部９１６に設けられている。冷却空気を循環させるため、ファン９３４も設けられている。これにより、空気を囲い込み部９１６内に引入れ（ＡＩＮ）、より温度の高い空気を囲い込み部９１６から放出させる（ＡＯＵＴ）。ファン９３４は、温度コントローラ９０４によりライン９３８を通じて送信される制御信号を介して選択的に動作可能となっている。ファン９３４のサイズや定格は、本発明の実施形態により変更可能であり、好ましくは、囲い込み部９１６の容積、囲い込み部９１６内に配置される構成要素（例えば、成分分離システム９００により生成される熱量）、囲い込み部９１６に所望する周囲温度、及び他の冷却設計要因に基づいて選択する。
【０２０６】
本発明の別の実施形態において、図６０に図示するように、引出し腔２３２を介して単離及び収集された細胞分画を操作するためのディスペンサ９０２が得られる。一般に、本発明は、血小板ゲル９７０用の血液成分すべてが、その血小板ゲル９７０を適用するはずの患者から採取されたものである自家由来血小板ゲル９７０組成物を形成するための、手動又は自動操作による２段階方法を可能とするディスペンサ９０２に関する。
【０２０７】
以下に詳述する、自家由来血小板ゲル９７０組成物を調製するための本発明による方法を、図６１〜図６３の工程系統図に図示する。上述したように、本発明の方法は、患者の全血３９４を、クエン酸ナトリウム（クエン酸塩）やヘパリンなどの抗凝固剤の入った供給源容器３９８内に収集する抗凝固剤入り全血３９６を形成することから開始される。好ましくは、全血３９４を収集して、３．８％のクエン酸ナトリウム溶液（以下「クエン酸収集媒体」とする）と、具体的に言えばクエン酸収集媒体に対する血液の割合を９：１にして混合する。クエン酸ナトリウムの３．８％溶液を、１００ｍｌの水にクエン酸ナトリウム３．８ｇを添加して調製する。３．８％クエン酸収集媒体は血液の収集及び保存に頻繁に使用されるものであるため、当業者であれば、全血に対するクエン酸ナトリウムの比率を最終濃度として約１０．９〜１２．９％ｍＭｏｌの範囲にできることがわかるであろう。
【０２０８】
上記に詳しく説明し、図６１に図示したようにまず、患者から予め採っておいた一定量の抗凝固剤入り全血３９６を遠心処理することにより、多血小板血漿２６０及び／又は貧血小板血漿２６２を形成する。まず遠心機バッグ２２６から多血小板血漿２６０を抜き、収集チャンバ４００内に入れる。収集チャンバ４００を好ましくは、注射器とするが、収集した分画を活性化しない容器であればいずれでもよい。多血小板血漿２６０を汲出しポンプ８３０（図５３）を介して収集チャンバ４００内に注入する、又は所望分画を直接ディスペンサ９０２内に引抜くことができる。
【０２０９】
経路９５１により図６２に図示した好適実施形態では、遠心機バッグ２２６内の多血小板血漿２６０を２つに分けて、容器９５２及び９６０内に保存する。第１の部分は多血小板血漿２６０全量のおよそ１／４〜１／２であり、トロンビンの調製に第１段階で使用され、第２の部分は、第２段階の容器９６０内で使用される。多血小板血漿２６０又は別法として貧血小板血漿２６２（図６１に図示）を採取した後、迅速に、すなわち３分未満で、トロンビンを得てから血小板ゲル組成物を生成する好適方法が、図６２及び図６３で図示した経路９５１又は９８１で線図としてそれぞれ示されており、これらについて以下に詳述する。しかし、これより長い凝固時間、すなわち２〜８分が望ましい場合には、本発明による血小板ゲル組成物を得る方法を経路９７１及び９８７に沿って進行させることができる。これについても、図６３に線図としてそれぞれ示されており、これらについても以下に詳述する。
【０２１０】
好適実施形態（図６２）による第１段階は、凝固形成処理を戻すことから開始される。抗凝固剤の効果を逆行させることのできる薬剤（回復剤）（ｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎ ａｇｅｎｔ）を、容器９５２内に保存されている多血小板血漿２６０の第１の部分内に添加する。好ましくは、この回復剤を容器９５２自体とする、又は、多血小板血漿２６０を導入する前に回復剤を容器９５２内に含有させておくことができる。しかし、回復剤を後から導入することも可能でる。さらに、接触活性化剤を、ガラス綿９５３又はシリカ、アルミニウム、珪藻土、カオリンなどの材料にする、又は、プラスチック、シリコン処理したガラスなどの濡らすことのできない表面にすることが好ましいが、これらに限定するものではない。カオリンなどの化学的活性化剤を用いて、凝固時間を短縮することもできるが、後にその活性化剤を除去する必要が生じる。好適実施形態では、プラスチック製注射器が所望分画の収集に用いる好適容器である。本発明による目下好適な実施形態では、抗凝固剤の逆行は、塩化カルシウムを用いて行われる。しかし、グルコン酸カルシウムや炭酸カルシウムなど、クエン酸添加血液の凝固活動回復において塩化カルシウムと機能的に同等であると周知又はわかっている物質であれば、本発明の実施にいずれを用いてもよい。したがって、塩化カルシウムが本発明で使用するための目下好適なカルシウム塩であるが、塩化カルシウムと同様に機能するカルシウム塩であれば、いずれを本発明に使用してもよい。同様に、数多くの血液凝固反応は目下共同因子としてカルシウムイオンを必要とすると考えられているが、こうした凝固反応を可能にする上でカルシウムと同等の機能を果たすことで周知である、又はこれからそれが発見される物質であれば、いずれを、独自に又はカルシウムとの組合せで本発明の実施に用いてもよい。使用した抗凝固剤がヘパリンであった場合、ヘパリン又は他の適した抗凝固剤逆行化合物を用いて、その抗凝固剤効果を逆行させることができる。抗凝固剤の逆行に用いる回復剤の濃度は、多血小板血漿２６０内に使用された抗凝固剤の濃度及びキレート剤及び凝固反応の化学量論などに応じて異なるが、凝固形成の実現に十分な濃度でなければならない。
【０２１１】
図６２に図示したように多血小板血漿２６０を回復させると、自然に凝塊９５４が形成される。得られた凝塊９５４を、接触活性化剤としてだけでなくフィルタとしても作用したガラス綿９５３を介して押出すことにより粉砕させ、トロンビン９５５を圧出させる。別法として、又はこれに加えて、大きなミクロン孔径のフィルタ９５８を設けて、含まれている凝固デブリ及びすべての活性化剤や固体を除去できるようにする。フィルタ９５８を、容器９５２の出口９５６に配置する。好適実施形態において、トロンビン９５５を、容器９６０に入れられた多血小板血漿（ＰＲＰ）２６０の第２の部分と混合して、３分以内に臨床で使用できる十分な量で、本発明による血小板ゲル組成物９７０を形成する。
【０２１２】
上述の処理に他の添加剤を追加して、内的酵素触媒反応又は外的酵素触媒反応によりトロンビンの濃度を高めてもよい。
【０２１３】
上記に詳しく説明したように、塩化カルシウムを添加して、クエン酸添加血漿の凝固カスケード機能を回復させ、ガラス綿などの活性化剤に暴露することにより、自家由来トロンビンを生成させることができる。しかし、プロトロンビンの変換が不完全であり、フィブリン及び抗トロンビンＩＩＩによりトロンビンが不活性化されることから、この方法で得られる自家由来トロンビン量は少ない。イソプシンアミノカプロン酸などの調製剤を血漿に添加することで、トロンビンの中和量を削減して、取得量を増加させることができる。しかし、血液凝固促進性材料を提供すると、必要な凝固要因が集合してプロトロンビン変換率を最大限にするため、トロンビンの取得量を最大限にすることができる。活性化された血小板膜は、刺激表面となり、血小板脱顆粒の間、追加因子Ｖを分泌することにより必要な因子Ｖ活動を高める。外生リポタンパク質及び／又は血液凝固促進性材料を血漿環境に添加することにより、内因系及び外因系凝固カスケードを活性化させてトロンビン生成量を最大限にすることもできる。プロトロンビンをトロンビンに変換する前にアンチトロンビンＩＩＩ及びフィブリノゲンの双方を遮断又は除去するようにＰＲＰ及び／又はＰＰＰを予備処理しておいても、自家由来トロンビン生成量をさらに増幅させることができる。こうした改質は、適した吸着剤、抗体又は付着試薬の使用により得られる。
【０２１４】
別の実施形態において、トロンビン９５０を第２段階の貧血小板血漿２６２と混合して、３分未満で本発明による自家由来血小板ゲル組成物９７２を形成する。
【０２１５】
図６２にて経路９７１として示した、本発明による第３の実施形態は、ガラスなどの濡らすことのできる表面を有する容器内に抗凝固剤入り全血３９６から得たオリジナル量の多血小板血漿（ＰＲＰ）２６０を収集することを考慮している。次に、多血小板血漿２６０にカルシウムを再添加して、血小板ゲル組成物９７４を形成する。所望の血小板ゲル組成物９７４の形成には、好適実施形態で上述したように３分未満ではなくおよそ２〜８分が必要である。
【０２１６】
図６３にて経路９８１として線図で示した、本発明による第４の実施形態は、多血小板血漿２６０ではなく貧血小板血漿２６２を、好適実施形態で上述したように２つに分ける。第１段階で使用する第１の部分は、オリジナル量のおよそ１／４〜１／２であり、濡らすことのできる表面を備えた容器９５２内に保存されている。これに、回復剤、好ましくは塩化カルシウムを貧血小板血漿２６２に直接添加する。回復した貧血小板血漿２６２の表面活性は、容器の表面及び／又はガラス綿９５３又は他の表面や化学的活性化剤により起こるものであり、こうして凝塊９６２が形成される。得られた凝塊９６２が上述したように粉砕されて、トロンビン９５５が収集される。このトロンビン９５５が、第２段階の多血小板血漿２６０と混合されると、血小板ゲルシーラント組成物９７３が形成される。
【０２１７】
第５の実施形態において、トロンビン９５５が第２段階の貧血小板血漿２６２と混合されると、３分未満で血小板ゲル組成物９７５が形成される。
【０２１８】
第６の実施形態は、図６３の経路９８７にしたがって進行する。オリジナル量の貧血小板血漿２６２が、ガラスなど、濡れることのできる表面を有する容器内に収集される。次に、貧血小板血漿２６２は再石灰質化されて、血小板ゲル組成物を形成する。
【０２１９】
本発明による血小板ゲル組成物の引張強さを、カルシウムイオンの添加により強化することができる。これにより、より強力な生体接着剤組成物が望ましい場合、上述し、図６２の経路９５１及び９８１にそれぞれ開示した方法を用いて、より多くのカルシウムイオンを、血清を多血小板血漿２６０又は貧血小板血漿２６２に導入するのと同時に添加することができる。別法として、血小板ゲル組成物の調製方法として図６２及び図６３に示す経路９７１及び９８７をそれぞれ採る場合、カルシウムイオンを多血小板血漿２６０又は貧血小板血漿２６２に直接導入することができる。これにより、血小板ゲル組成物９７４及び９７６がそれぞれ形成される。
【０２２０】
以下に詳述するように、本発明による血小板ゲル組成物の形成に必要となる時間は、添加する血清の量によって異なる。多血小板血漿又は貧血小板血漿に対する血清の割合を１：４、１：２及び３：４とすると、それぞれ９０秒、５５秒及び３０秒で血小板ゲル組成物が形成される。また、トロンビンが自己触媒型であることから、血清をこの調製の５時間以内、好ましくは２時間以内、理想的には直ちに使用することが重要である。別法として、血清を無期限に冷蔵又は冷凍することができる。
【０２２１】
適量の多血小板血漿又は貧血小板血漿を傷に適用することにより、本発明による血小板ゲル組成物を手術による傷のシールに用いることができる。また、本発明による血小板ゲル組成物が、これを受取るはずの患者から得た血液成分から単独に調製されたものであるため、血液により媒介された新たな疾病が患者に移入する可能性はゼロである。本発明による方法を、形成された血小板ゲル組成物が、止血剤としてのみではなく、傷を治癒する補助薬として、及び、他の生物活動を伴う薬品及びタンパク質を送出する基質としても機能するようにさらに変更することができる。例えば、フィブリン糊が、整形外科や主な骨折の修復における骨の再構築に有用な骨分画を結合する強力な親和力を備えていることが周知である。したがって、本発明による血小板ゲル組成物の自家由来性に沿って、患者からの自己移植骨をひく、又は粉などとして製造して、本発明による方法の第２段階で得られた多血小板血漿に混合することができる。得られるはずのゲルを凝固させたい箇所に適用できる程度に十分な量で、自家由来トロンビンをこの多血小板血漿と骨分画との組み合わせ内に混合する。使用可能な他の材料の例として、ゼラチンコラーゲン、化学的崩解性ポリマー、ヒルアロン酸、炭水化物及びデンプンが挙げられるが、これらに限定するものではない。
【０２２２】
さらに別の実施形態において、本発明は、本発明による方法で調製された血小板ゲルの美容外科における使用方法を提供する。
【０２２３】
さらに別の実施形態において、本発明は、本発明による方法で調製された血小板ゲルのコーティングステントにおける使用方法を提供する。
【０２２４】
本発明による所望の血小板ゲル組成物を、他の生物活動を伴う薬品及びタンパク質のディスペンサー装置としてさらに機能させる場合、本発明の方法を以下のように変更することができる。第１段階で得られたトロンビンを第２段階の多血小板血漿に添加する前に、他の生物活動を伴う多種多様な薬品及びタンパク質を第２段階の多血小板血漿に添加することができる。血清の添加前に多血小板血漿に添加できる薬剤の例として、リドカインなどの鎮痛化合物、殺菌性及び静菌性化合物を含む抗菌性化合物、抗生剤（例えば、アドリアマイシン、エリスロマイシン、ゲンタマイシン、ペニシリン、トブラマイシン）、抗真菌性化合物、抗炎剤、抗寄生虫化合物、抗ウィルス化合物、パクリタキセル酵素などの制癌化合物、酵素阻害剤、糖蛋白、成長因子（例えば、リンフォカイン、サイトカイン）、ホルモン、ステロイド、糖質コルチコイド、免疫調節薬、免疫グロブリン、鉱物、神経弛緩薬、タンパク質、ペプチド、リポタンパク質、殺腫瘍性化合物、殺腫瘍性化合物、トキシン及びビタミン類（例えば、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＤ又はこれらの派生物）が挙げられるが、これらに限定するものではない。また、上記の一部又は全部の被選択分画、部分、派生物又は類似物も使用可能であると考えられる。
【０２２５】
血液の凝固及び凝固関連活動の測定及び決定を目的として、いくつかの異なる医療装置及び試験方法がある。こうした装置及び方法を用いて、活性化剤、すなわち、本発明による血小板ゲル組成物の形成に必要なトロンビン、カルシウム及び血漿の最適な製剤化を決定しやすくすることができる。血液の凝塊及び凝固状態の評価について、他より成功した技術の例は、Ｃｏｏｐｅｒ他に付与された米国特許第４，５９９，２１９号、Ｊａｃｋｓｏｎ他に付与された同第４，７５２，４４９号及び、Ｓｍｉｔｈに付与された同第５，１７４，９６１号に例示されているプランジャ技術である。これらの特許はすべて、本発明の譲受人に譲渡されており、これら特許内容全体を参照として本明細書内に引用したものとする。
【０２２６】
凝固及び凝固関連活動の測定及び検出を目的としてプランジャ技法を採り入れた自動装置は一般に、プランジャセンサカートリッジ（１つ又は複数）と、そのカートリッジを挿入するマイクロプロセッサ制御装置とを含んでいる。この装置は、カートリッジ及び血液サンプルが中に配置されると動作して、凝固関連事象を誘導及び検出する。カートリッジには、複数の試験セルが具備されており、各セルは、チューブ状部材で画定されており、ここにプランジャアセンブリを配置し、分析試験が実施される上方反応チャンバと、試薬（１種類又は複数種類）を含む試薬チャンバとが設けられている。活性化凝固時間（ＡＣＴ）試験を目的に、例えば、試薬に、血液の凝固を活性化させるために活性化試薬を含める。プラグ部材が試薬チャンバの底部をシールしている。試験が開始されると、試薬チャンバの内容物が反応チャンバ内に押出されて、通常はヒトの血液又はその成分である流体サンプルと混合される。装置の一部であるアクチュエータが、プランジャアセンブリを上昇及び下降させて、反応チャンバ内の流体プール内を往復運動させる。プランジャアセンブリは重力により下降し、反応チャンバ内の流体が有する粘度などの性質により抵抗を受ける。サンプルの性質が、凝固関連活動の開始や発生により所定通りに変化すると、プランジャアセンブリの下降速度も変化する。下降速度が十分に変化すると、装置により凝固関連活動が検出され、表示される。
【０２２７】
上述した方法を用いて、多血小板血漿又は貧血小板血漿から得た血清と試薬チャンバ内のＣａＣ１２をカートリッジに組み合わせた。多血小板血漿（ＰＲＰ）又は貧血小板血漿（ＰＰＰ）をカートリッジの反応チャンバ内に分散させ、自動処理により、凝固時間試験を行った。図６４に結果を示した第１の実験では、血清量、血清の派生元である血漿のタイプ、及び血清を混合した血漿のタイプを試験して、最短凝固時間を決定した。調査した多血小板血漿又は貧血小板血漿に対する血清の割合は、１：４、１：２及び３：４とした。図６６及び図６７に結果を示す第２のセットの実験では、血清の生成から０分、３０分、６０分遅れて血清を添加することにより、本発明の血小板ゲル形成にかかる実際のゲル化時間をカートリッジ内の凝固時間と比較した。図６８及び図６９に結果を示した、第２のセットの実験では、カルシウム添加による、カートリッジ内における実際のゲル化時間と凝固時間との関係への影響を調べた。図６５に結果を示した最後のセットの実験では、カルシウム添加による凝固時間への影響を調べた。
【０２２８】
ドナーによって凝固時間はさまざまであるが、各ドナーに対する凝固時間を比較したところ、血漿に対する血清の割合とカルシウム濃度とが著しい効果を持つことがわかった。どのドナーに対しても、最短凝固時間は３：４の割合の場合であり、その凝固時間は、１：４の割合の場合より４７％短かった。３：４の割合における凝固時間と１：２の割合における凝固時間との差は統計学としては重要ではないが、いずれのドナーに対しても３：４の割合を用いた場合の凝固時間が一貫して最も短かった。この結果から、多血小板血漿に対する血清の割合を高めると、凝固時間を短縮できることがわかる。同様に、凝固時間は、カルシウム添加量により大きく影響を受け、カルシウムを添加しない場合の凝固時間が最も短くなった。したがって、その血清含有レベルが、クエン酸塩を添加した多血小板血漿の再石灰質化に十分であったことがわかる。この拡大実験の予備結果から、カートリッジ内に実験凝固時間が実際のゲル化時間と相関関係にあることがわかる。
【０２２９】
次に、本発明をさらに、以下の非制限的実施例により例示する。すべての科学的及び技術的用語は、当業者であれば明白な意味にて使用されている。以下に記載する具体的実施例は、本発明による生体接着剤組成物を臨床現場で調製することのできる方法を例示するものであり、本発明の分野や範囲を何ら制限するものではない。この方法を、本発明の範囲であるが具体的に開示されていない組成物の生成用に変更することが可能である。また、当業者であれば、同じ組成物を生成するために本発明の方法をさまざまに変更できることも明らかであろう。
【０２３０】
本明細書に記載している実施例は、本発明を実施するさまざまな態様を例示しているにすぎず、本発明を何ら制限するものではない。
【実施例１】
【０２３１】
ＬＭＰ−１アデノウイルスによる軟層のトランスフェクト
本発明の方法により単離された軟層を、遺伝的形質転換に用いることができる。例えば、全血のサンプルを本発明の遠心機装置を用いて分離して、軟層を単離した。単離された細胞を洗浄してその数を数えてから、Ｍｅｄｔｒｏｎｉｃ，Ｉｎｃ．を出願人とする係属中の米国特許出願に開示されているＬＭＰ−１アデノウイルスでトランスフェクトした。この特許内容全体を参照として本明細書内に引用したものとする。この実験の結果を表１に示す。この実験では、手術日が２０００年１１月２８日、死亡日が２００１年１月２日であった。
【０２３２】
【表１】
【０２３３】
一の実施形態において、ＬＭＰ−１をトランスフェクトした細胞を骨粗鬆症治療に用いた。一の実施形態において、トランスフェクトされた細胞は、生体内にて「組み立てられる」ゲル状キャリヤとして送出される。例えば、トランスフェクト細胞を本発明の方法により調製された血小板ゲルとして送出することができ、ＬＭＰ−１アデノウイルスを担持しているゲルは、椎体などの骨粗鬆症を発症している骨内に直接注入される。すると、ＬＭＰ−１遺伝子が発現して、新たな骨の生成量が増加し、骨塩密度が高まる。別法として、トランスフェクト細胞を、これに限定するものではないが、長骨の骨折及び頭蓋／口腔顎顔面処置などを含む他の骨治療のいずれにも使用することができる。
【実施例２】
【０２３４】
多血小板血漿及び血清を用いた生体接着剤組成物の調製
多血小板血漿の６ｃｃを収容チャンバ９６１内に抜き取り、多血小板血漿（ＰＲＰ）又は貧血小板血漿（ＰＰＰ）のいずれか３ｃｃを、１０％塩化カルシウム０．３３ｃｃ及びガラス綿を含む収容チャンバ９５７内に入れる。収容チャンバ９５７の内容物は、２〜８分で凝固する。この凝固物を任意のフィルタ９５８を通過させ、そこから生成された血清を、収容チャンバ９６１内の多血小板血漿と一緒に混合又は噴霧することにより、多血小板血漿に添加する。多血小板血漿と血清とは、およそ３分でゲル化する。
【０２３５】
このゲルを注射器型装置９０２で上述したように適用することは、多くの用途であまり好ましいものではない。したがって、別の実施形態において、非活動状態の血液成分及びトロンビンを、混合及び／又は所望形状の型内に注入することができる。この型は、これに限定するものではないがプラスチックなどの濡らすことのできる表面を有する材料で形成することができる。特に、本発明の血小板ゲルを用いて、これらに限定されるものではないが、抜歯であいた歯茎の穴及び／又はけがや手術処置によりできた組織内及び骨内の穴などの腔を一時的に充填することができる。本発明は、腔内に挿入する前に血小板を有用な形状に予め賦形又は成形しておけば、具体的な使用法に血小板ゲルを導入する、より簡単な方法となるものである。抜歯の場合、血小板ゲルを、基本的円錐形状を得るように賦形することができる。ロッドに限らず、矩形などの他の形状も本発明の範囲内である。ゲル形成後に活性化処理を施すことにより、ゲルの固体程度を増減して展性を持たせることができる。
【０２３６】
上述は、本発明の原理を例示したものと解釈すべきである。また、当業者であれば、さまざまな修正及び変更を本明細書に容易に加えることができるため、上述した細かい構造及び処理は本発明を何らこれらに限定するものではない。したがって、適切な修正及びその等価物はすべて、請求の範囲に規定される本発明の範囲内と見なすことができる。
【０２３７】
上述は、本発明の原理を例示したものと解釈すべきである。本明細書内及び請求の範囲内で用いる用語「含む」は、記載されている１つ又は複数の特徴、整数、成分又はステップを含むことを条件としつつ、１つ又は複数の他の特徴、整数、成分、ステップ、又はこれらのグループの存在や追加を除外するものではない。また、当業者であれば、数多くの修正及び変更を本明細書に容易に加えることができるため、上述した細かい構造及び処理は本発明を何らこれらに限定するものではない。したがって、適切な修正及びその等価物はすべて、請求の範囲に規定される本発明の範囲内と見なすことができる。
【図面の簡単な説明】
【０２３８】
【図１】本発明の連続流遠心処理システムの一の実施形態を示す斜視図であり、遠心機と、本発明の保護筐体又は囲い込み部内に配設された側部取付けモータとを例示している。
【図２】図１の遠心処理システムの遠心機及び側部取付けモータを示す分解側面図であり、遠心機の各構成要素を例示している。
【図３】図２のドライブシャフトアセンブリの下方ケースアセンブリを示す部分斜視図である。
【図４】図３の下方ケースアセンブリを示す分解側面図である。
【図５】図３の下方ケースアセンブリに含まれる構成要素を示す分解斜視図である。
【図６】図３の下方ケースアセンブリ内に配設される下方ベアリングアセンブリを示す平面図である。
【図７】図６の下方ベアリングアセンブリを示す斜視図である。
【図８】図６及び図７の下方ベアリングアセンブリを示す分解側面図である。
【図９】図２の遠心機に含まれるチューブ収容ガイドを示す斜視図である。
【図１０】図２の中間シャフトギアアセンブリのギアを示す分解斜視図である。
【図１１】図１０のギアを組み立てた状態を示す斜視図である。
【図１２】図２の遠心機に含まれる頂部ベアリングアセンブリを示す分解斜視図である。
【図１３】図２の頂部ベアリングアセンブリの頂部ケースシェルを示す斜視図である。
【図１４】図１に示した本発明の遠心機を示す斜視図であり、図１の線分１４−１４に沿って４分の１部分を切取った状態である。
【図１５】遠心機ロータ基部の一の実施形態を示す斜視図である。
【図１６】遠心機ロータカバーの一の実施形態を示す斜視図である。
【図１７】図１４の線分１７に沿って切取った、使い捨て式遠心機バッグを支持するための本発明によるロータの一の実施形態を示す側部断面図であり、二腔管がバッグに接続された状態である。
【図１８】図１の線分１８に沿って切取った、使い捨て式遠心機バッグを支持するための本発明によるロータの一の実施形態を示す側部断面図であり、基部及びカバーの溝付き柱状部を示している。
【図１９】側部取付けモータ（外側駆動ベルトのみを図示）により駆動される遠心機の別の実施形態を例示する、図１と同様の拡大斜視図である。
【図２０】所望の駆動比率を実現するために用いられる内側プーリ駆動システム及び遠心機バッグを収容するようになされたロータ基部を例示する、図１９の遠心機を示す切取側面図である。
【図２１】頂部プーリと取り付けられた内側駆動ベルトに対する両方のアイドラプーリの位置とをよりわかりやすく例示するためにロータ基部を取り除いた、図２０と同様の切取側面図である。
【図２２】内側プーリ駆動システムをさらに例示し、遠心機チューブ（又は供給ケーブル）の経路を図示した、図２０の遠心機を示す断面図である。
【図２３】図１９の遠心機と同様であるが、遠心機チューブ（又は供給ケーブル）を位置決めするために遠心機の一部を切断して設けなければならないガイドシャフトを具備できるようにする内側の別個ベアリング部材（４つのカムフォロワとして図示）を含む、さらに別の遠心機を示す平面図である。
【図２４】図２３の遠心機実施形態を例示する、図１９と同様の斜視図であり、ガイドスロットをさらに例示し、遠心機を外部駆動ベルトで駆動できることを示している。
【図２５】本発明の可撓性使い捨て式遠心機バッグを示す平面図である。
【図２６】本発明の可撓性使い捨て式遠心機バッグを示す斜視図である。
【図２７】本発明の「Ｔ」形状屈曲部品を例示する図である。
【図２８】本発明の「湾曲したＴ」形状屈曲部品を例示する図である。
【図２９】本発明の「Ｌ」形状屈曲部品を例示する図である。
【図３０】本発明の「Ｊ」形状屈曲部品を例示する図である。
【図３１】本発明の導入及び／又は排出チューブを例示する図である。
【図３２】全血を遠心処理した後の本発明による使い捨て式遠心機バッグを示す平面図であり、分離された血液成分を示している。
【図３３】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３４】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３５】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３６】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３７】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３８】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３９】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図４０】内側チャンバ及び外側チャンバを有する本発明による使い捨て式遠心機バッグの別の実施形態を示す平面図である。
【図４１】図３４に示した使い捨て式遠心機バッグを示す平面図であり、赤血球層を外周部から内周部に向けて移動させることを例示している。
【図４２】出口ポート及び入口ポートと流体連通している内側チャンバ及び外側チャンバを有する、本発明による使い捨て式遠心機バッグの別の実施形態を示す底面図である。
【図４３】本発明の剛性使い捨て式遠心機バッグを示す側部断面図である。
【図４４】図４３に図示した、断面形状を楕円形とする遠心機バッグ内に含有されている、分離された血液成分を示す概略図である。
【図４５】本発明による剛性使い捨て式遠心機バッグを示す側部断面図である。
【図４６】図４５に示した８の字形状の表面領域及びさまざまな寸法を示す概略図である。
【図４７】断面形状を８の字とする遠心機バッグ内に含有されている、分離後の血液成分を示す概略図である。
【図４８】図４９のロータカバーと図５０のロータ基部とを含む、本発明により組み立てられた遠心機ロータの別の実施形態を示す側部断面図である。
【図４９】本発明によるロータカバーの別の実施形態を示す側部断面図である。
【図５０】本発明によるロータ基部の別の実施形態を示す側部断面図である。
【図５１】図５０のロータ基部を示す斜視図である。
【図５２】図４９のロータカバーを示す斜視図である。
【図５３】本発明による遠心処理システムの構成要素を例示するブロック図である。
【図５４】図５３の自動化遠心処理システムの一の実施形態を操作している間の制御信号伝送及びフィードバック信号受信のタイミング及び関係を例示するグラフである。
【図５５】図５３に例示した自動化遠心処理システムの別の実施形態を示す側面図であり、遠心機が、外部に位置するセンサアセンブリを使用できるように、リザーバを遠心機の外径を超えて延出させたロータを有することを示している。
【図５６】ロータを延出させていない、本発明による遠心処理システムが含む外部センサアセンブリのさらに別の実施形態を示す側面図であり、遠心機内に反射体を配設していることを例示している。
【図５７】本発明による遠心処理システムが含む外部センサアセンブリのさらに別の実施形態を示す側面図であり、単一放射エネルギ供給源及び検出器装置を例示している。
【図５８】図４７の実施形態と同様の自動化遠心処理システムを示すブロック図であり、分離及び処理された生成物の温度を制御するための温度制御システムを形成する構成要素を含めて示している。
【図５９】図５８の温度制御システムに含まれる構成要素を示す斜視図である。
【図６０】本発明のディスペンサを示す概略断面図である。
【図６１】本発明による血小板ゲルの調製に用いるための、多血小板血漿と貧血小板血漿とを分離する方法を表す工程系統図である。
【図６２】出発材料として多血小板血漿を用いた場合の、本発明による血小板ゲルの調製に用いる方法の最終部分を表す工程系統図である。
【図６３】出発材料として貧血小板血漿を用いた場合の、本発明による血小板ゲルの調製に用いる方法の最終部分を表す工程系統図である。
【図６４】血清と血漿との割合が凝固時間に及ぼす影響を表すグラフである。
【図６５】カルシウムの添加が多血小板血漿及び貧血小板血漿の凝固時間に及ぼす影響を表すグラフである。
【図６６】ドナーから得た血液を用いた、凝固時間と実際のゲル化時間との関係を表すグラフである。
【図６７】ドナーから得た血液を用いた、凝固時間と実際のゲル時間との関係を表すグラフである。
【図６８】カルシウムの添加が、ドナーから得た血液を用いた凝固時間及び実際のゲル化時間に及ぼす影響を表すグラフである。
【図６９】カルシウムの添加が、ドナーから得た血液を用いた凝固時間及び実際のゲル化時間に及ぼす影響を表すグラフである。
【０００１】
本発明は、液体を、比重の異なる成分毎に遠心分離するための新規な方法、装置及び器具に関し、特に、さまざまな治療で使用する血液成分の分離などに有用な血液分離装置を提供するものである。
【背景技術】
【０００２】
遠心分離法は、溶液内の懸濁粒子が、それぞれの密度に基づいて遠心機ロータ内を特定の径方向の位置に移動するため、遠心機を適切な時間の間、適切な角速度で回転させることにより、その粒子を分離することができるという原理に基づく。遠心液体処理システムは、広範囲な様々な分野で応用されている。例えば、遠心分離法は、血液をその一部の成分、すなわち赤血球、血小板、白血球及び血漿に分離するための血液分離技術において広く用いられている。
【０００３】
血漿と呼ばれる血液の液体部分は、白血球、赤血球及び血漿が混濁されているタンパク質及び塩分を含む溶液である。９０パーセントが水分である血漿は、血液全体容積の約５５％を占めており、アルブミン（主なタンパク質成分）、フィブリノゲン（血液凝固の中心的役割を果たす）、グロブリン（抗体を含む）及び他の凝固性タンパク質を含んでいる。血漿は、十分な血圧の維持及び容量の提供から血液凝固及び免疫に必須であるタンパク質の供給まで、さまざまな機能を付与する。血液の液体部分を血液中に懸濁されている細胞から分離することにより、この血漿を得ることができる。
【０００４】
赤血球は、おそらく全血の中でも最もよく知られた成分である。赤血球には、血液を赤色としている間に全身に酸素を運搬する鉄含有複合タンパク質、即ちヘモグロビンが含まれている。赤血球の血液容積百分率は、「ヘマトクリット値」と呼ばれる。
【０００５】
白血球は、細菌、カビ及びウィルスなどの異物による侵入から身体を保護する役割を果たしている。身体を保護する白血球にはいくつかの種類があり、その例として、侵入してきた細菌やウィルスを包囲及び破壊して身体の感染を防止する顆粒球及び大食球、並びに免疫防御を補助するリンパ球が挙げられる。
【０００６】
血小板は、血管の内層に付着して凝固プロセスを補助する、血液の最も小さな細胞成分である。血小板は、外傷による大量失血と、普通の日常的な活動の中で起こり得る血管からの血液の漏出の双方の防止に役立つため、生命維持に不可欠な成分である。
【０００７】
全血を収集し、適した抗凝固剤を添加してその凝固を防止しておけば、その全血を成分部分に遠心分離することができる。遠心分離を施すと、最も重量のある赤血球が、回転容器の最も外側に押し寄せられ、最も密度の低い血漿が回転容器の中央部分に溜まる。血漿と赤血球とを分離するのが、軟層（ｂｕｆｆｙ ｃｏａｔ ｌａｙｅｒ）と呼ばれる白色又は灰色の薄い層である。この軟層は、白血球及び血小板からなり、血液全体容積の約１パーセントを占めている。
【０００８】
上述した血液成分を分離すると、これらを広範囲の診断及び治療方法に使用することができる。例えば、赤血球は、腎不全、悪性腫瘍又は胃腸の出血などの疾患による慢性貧血を患う患者、並びに外傷や手術により急激に失血している患者に日常的に輸注される。血漿成分は通常、寒冷沈降反応により、凍結され、次いで徐々に解凍されて、第ＶＩＩＩ因子、フィブリノゲン、フォン・ウィルブランド因子及び第ＸＩＩＩ因子などの特定の凝固因子を多量に含む、寒冷沈降処理された抗血友病因子が作製される。寒冷沈降処理処理されたＡＨＦは、血友病やフォン・ウィルブランド病を患う個人の出血防止及び出血制御に用いられる。軟層に見られる血小板及び白血球を用いて、それぞれ血小板機能が異常（血小板減少症）である患者や、抗生剤による治療に反応のない患者を治療することができる。
【０００９】
これまでに、全血の収集とその後の全血からの治療用成分の分離を容易にするさまざまな技術及び機器が開発されてきた。血液処理システムとも呼ばれる遠心分離システムは一般に、不連続流装置と連続流装置の２種類に分類される。
【００１０】
不連続流システムでは、ドナー又は患者からの全血が、導管を通過してロータ又はボール内に流入し、そこで成分分離が行われる。このシステムでは、比較的大容量（通常２００ｍｌ以上）のボール型ロータを用いており、所望成分のいずれを採取するにも、その前にこのロータを血液で充填しておかなければならない。ボールが満杯になったところで、新鮮血液の吸引を停止し、その全血を遠心法により成分毎に分離する。不要な成分は、連続的にではなく一定分量に分けて断続的に同じ導管を介して同じドナー又は患者に戻される。不要成分がすべて戻されると、再度、全血がドナー又は患者から吸引され、第２のサイクルが始まる。この処理が、所望成分の必要量が収集されるまで続けられる。
【００１１】
不連続流システムには、ロータの直径が比較的小さいという利点があるが、体外容量（すなわち、処理の間のいずれかの時にドナー外にある血液量）が多いという欠点もある。このため、ロータの充填に必要な血液量を吸引できない体格及び体重の人々には、この不連続流システムは使用しにくく、又は使用できない。不連続流装置は、血小板及び／又は血漿の収集、並びに赤血球の濃縮及び洗浄に使用されるものである。それらは、予め凍結しておいた赤血球を元に戻し、手術時に失われた赤血球を回収するために用いられる。しかし、このシステムで使用されるボールは剛性でその容量が固定されているため、回収された血液量がボールを赤血球で充填するのに不充分な場合には特に、最終生成物のヘマトクリット値を制御することが難しい。
【００１２】
不連続流装置システムの１例が、ＭｃＭａｎｎｉｓらによる米国特許第５，３１６，５４０号に開示されている。このシステムは、液状媒体の成分を分離するための容積可変式遠心分離機であり、可撓性膜により上方チャンバと下方チャンバとに分けられた遠心機と、その上方チャンバ内に配設された可撓性処理容器バッグとを含む。ＭｃＭａｎｎｉｓらによるシステムは、加圧液を下方チャンバ内に注入して膜を上昇させることにより上方チャンバの容積を変化させて、遠心分離機から所望成分を絞り出すものである。このＭｃＭａｎｎｉｓらによるシステムはかなりのスペースを必要とする上、軟らかいホットケーキ形状のロータはその取扱いが難しい。また、このＭｃＭａｎｎｉｓらによるシステムは、流体媒体の処理バッグへの流入と取出しとを同時に行うことができず、処理バッグから流状媒体を吸引によって引き出すこともできない。
【００１３】
連続流システムの場合も、ドナー又は患者からの全血が導管を通過して回転ロータ内に流入し、そこで成分分離が行われる。対象成分が収集され、不要成分は、全血を採りながら連続的に、第２の導管を介してドナーに戻される。血液を採る速度と戻す速度とが実質的に同じであるため、体外容積、すなわち処理の間のいずれかの時にドナー外にある血液量は比較的少ない。このシステムは通常、直径が比較的大きなベルト型ロータを用いるが、処理容量が比較的小さい（通常１００ｍｌ以下）。連続流システムには、ドナー又は患者外に保持しなければならない血液量を比較的少なくすることができるという利点があるが、ロータの直径が大きいため、システム全体が大きくなるという欠点もある。さらに、このシステムはその設置及び使用法が複雑である。この装置はほとんどが血小板の収集に使用される。
【００１４】
連続流システムは、互いに流体連通している回転自在な部分と固定部分とからなる。したがって、連続流システムは、ロータリーシール又はＪループかのどちらかを使用する。これまでに、遠心機用ロータリーシールのさまざまな種類が開発されてきた。有効であることが証明されている遠心機用ロータリーシールの例は、Ｌａｔｈａｍに発行された米国特許第３，４０９，２０３号及び同第３，５６５，３３０号に記載されている。これらの特許では、移動式剛性部材と接触して動的シールを形成している固定式剛性低摩擦部材と、その動的シールの表面間に弾性固定シールと適度な閉鎖力とを提供する弾性部材とからなるロータリーシールが開示されている。
【００１５】
血液を処理する遠心機での使用に適した別のロータリーシールは、Ｊｏｎｅｓらに発行された米国特許第３，８０１，１４２号に記載されている。このロータリーシールでは、非浸食性材料による対面式環状流体密シール面を有する１対のシール構成要素が設けられている。この構成要素は、回転自在であると同時に、このシール構成要素への流体接続の１つを形成している一定長さの弾性管による軸方向圧搾により流体密関係に維持される。
【００１６】
ロータリーシールを介して固定管部材に連結された回転自在な使い捨て式環状分離チャンバを組入れる、関連タイプのシステムは、米国特許第４，３８７，８４８号、同第４，０９４，４６１号、同第４，００７，８７１号及び同第４，０１０，８９４号に開示されている。
【００１７】
上述した連続流システムの１つの欠点は、回転式シール又は連結構成要素を遠心機ロータが支持するシステム部分と固定されたシステム部分との間に使用していることである。こうした回転式シールの性能は概して満足のいくものであるが、製造コストがかかるため、流動システム全体のコストが不必要に高くなる。また、こうした回転式シールにより、余計な成分がシステム内に入るため、それが不良なものであれば、処理中の血液を汚染する危険性がある。
【００１８】
回転式シールの課題を克服するようにこれまで考案された流動システムの１つは、回転式運搬台を用いて、そこに単一筐体を回転自在に取り付けるものである。固定地点からその筐体に延びている供給ケーブルにより、筐体は遊星運動ができるようになっているため、ケーブルが捻れることはない。無菌処理における所望結果の取得を促進し、単一シールシステム内における不連続流システムの欠点を回避するため、一群の二重部材型遠心機を用いて、細胞分離を実行することができる。この型の遠心機の１例が、Ａｄａｍｓに付与された米国特許第ＲＥ２９，７３８号「移動する末端部材と固定末端部材との間にエネルギ通信を設けるための装置（Ａｐｐａｒａｔｕｓ ｆｏｒ Ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ Ｅｎｅｒｇｙ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ Ｂｅｔｗｅｅｎ ａ Ｍｏｖｉｎｇ ａｎｄ ａ Ｓｔａｔｉｏｎａｒｙ Ｔｅｒｍｉｎａｌ）」に開示されている。今では周知であるように、この二重部材遠心機の特徴により、献血ユニットなどの流体を含む容器を回転させ、回転式シールを用いずに、血漿などの分離した流体成分を遠心機から固定容器内に引抜くことができる。こうした容器システムはＪループを用いており、これを閉じた無菌移送セットとして形成することができる。
【００１９】
Ａｄａｍｓ特許では、回転自在な外側部材と、回転自在な内側部材とを有する遠心機が開示されている。この内側部材は、外側部材内に位置付けられ、外側部材に回転自在に支持されている。外側部材は、「１オメガ」と普通呼ばれる一定の回転速度で回転し、内側筐体は、その外側筐体の２倍の回転速度、すなわち「２オメガ」で回転する。したがって、２つの部材間には１オメガの回転速度差がある。以下、本明細書では「二重部材型遠心機」をＡｄａｍｓ型遠心機と呼ぶ。
【００２０】
Ａｄａｍｓ特許の二重部材型遠心機は、上述したように、回転する流体容器と移動しない成分収集容器との間にシールが不要であるという点で特に有利である。Ａｄａｍｓ特許のシステムにより、遠心機の２つの部材を回転させつつ、ドナーからの全血を遠心機内に注入できる単一密閉無菌システム内で、血液を成分毎に分離する１つの方法が得られる。
【００２１】
Ａｄａｍｓ特許の装置とは別の方法が、Ｌｏｌａｃｈｉに付与された米国特許第４，０５６，２２４号「液体遠心処理装置用流動システム（Ｆｌｏｗ Ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ ｌｉｑｕｉｄ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ａｐｐａｒａｔｕｓ）」に例示されている。Ｌｏｌａｃｈｉ特許のシステムは、Ａｄａｍｓ型の二重部材型遠心機を含むものである。Ｌｏｌａｃｈｉ式遠心機の外側部材は、ベルト及びシャフトで回転自在な内側筐体に連結されている単一電気モータにより回転させられる。
【００２２】
Ｂｒｏｗｎに付与された米国特許第４，１０８，３５３号「対向位置にある回転支持手段を有する遠心機装置（Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ Ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｗｉｔｈ Ｏｐｐｏｓｉｔｅｌｙ Ｐｏｓｉｔｉｏｎｅｄ Ｒｏｔａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｏｒｔ Ｍｅａｎｓ）」には、２つの別個の電気モータを含むＡｄａｍｓ型の遠心機構造が開示されている。一方の電気モータは、ベルトで外側部材に連結されて、その外側部材を所望の公称回転速度で回転させ、第２のモータは、回転する外側部材内に支持されており、内側部材を外側部材の速度より速い２倍の速度で回転させるものである。
【００２３】
Ｂｒｏｗｎらに付与された米国特許第４，１０９，８５５号「遠心処理装置用駆動システム（Ｄｒｉｖｅ Ｓｙｓｔｅｍ Ｆｏｒ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ａｐｐａｒａｔｕｓ）」には、別の駆動システムが開示されている。Ｂｒｏｗｎらによる特許のシステムは、外側部材を選択速度で回転させるように外側部材に固定された外側シャフトを有する。その外側シャフトと共軸で設けられた内側シャフトは、内側部材に連結されている。内側シャフトが、内側部材を外側部材の２倍の回転速度で回転させる。これと同様のシステムが、Ｂｒｏｗｎに付与された米国特許第４，１０９，８５４号「囲い込み部材を備えた遠心装置（Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ Ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｗｉｔｈ Ｏｕｔｅｒ Ｅｎｃｌｏｓｕｒｅ）」に開示されている。
【００２４】
上記文献に記載されている連続流システムは、携帯を目的としない大型で高価なユニットであり、標準の複数容器型血液収集セットより大幅に価格が高い。したがって、小型で容易に使用でき、従来技術による連続流システムの欠点のない、血液及び他の生体流体を処理する遠心システムが必要である。
【００２５】
成分分離すべき全血は通常、可撓性プラスチックドナーバッグ内に収集され、遠心処理によりバッチ処理を通じて成分毎に分離される。この分離は、冷却された大型遠心機内で血液バッグを約１０分間回転させて行われる。すると、主要な血液成分、すなわち赤血球、血小板、白血球及び血漿が、沈殿し、別個の層を形成して主要バッグに装着された複数の付随バッグ内に手動抽出器により連続的に圧出される。
【００２６】
さらに最近では、この操作を容易にするために、自動化された抽出器が導入されている。しかし、処理全体はなお手間がかかり、血液成分の品質を保証するために特定時間枠内に分離作業を行う必要がある。特に、大半の献血がバッチ処理機能を備えていないばらばらの場所で行われることを考えると、これではロジスティクスが複雑になってしまう。
【００２７】
この方法は、１９７０年代に血液収集用の使い捨てプラスチックバッグが広く使用され出してから行われているものであり、その後大幅に改良されていない。全献血に血漿交換技術を適用しようという試みも行われてきた。この技術は、献血を行いつつ１種類又は複数種類の血液成分をオンラインで吸引及び抽出し、残りの成分をドナーに返還するものである。しかし、この血漿交換システムは複雑で費用がかかることから、日常的な全血収集としての輸血センターにおける使用は不可能である。
【００２８】
携帯型使い捨て式遠心装置について、これまでにさまざまな提案がなされてきた。こうした装置は通常、折り畳み可能なバッグを具備しており、その例としてＬａｔｈａｍ，Ｊｒ．に付与された米国特許第３，７３７，０９６号又は同第４，３０３，１９３号が挙げられ、剛性で壁部を設けたボールを具備する例としては、Ｆｅｌｌらに付与された米国特許第４，８８９，５２４号が挙げられる。こうした装置の場合はすべて最小固定保持容量が定められており、通常約２５０ｍｌの最小容量を処理しなければ、いずれの成分も回収できない。
【００２９】
ＭｃＭａｎｎｉｓらに付与された米国特許第５，３１６，５４０号には、処理チャンバが、生体流体で充填するように変形可能となっているか、又は駆動ユニットの一部を形成している膜により空にすることのできる可撓性処理バッグである処理装置が開示されている。このバッグは、バッグへの流体の導入及び除去用入口／出口管を１本しか具備してないため、連続したオンライン処理には使用できない。また、この処理バッグには容量が６５０ｍｌであるという欠点があるため、ＭｃＭａｎｎｉｓらによる装置を血液処理装置として使用することは難しい。
【００３０】
上述したように、遠心機はしばしば、さまざまな治療方法での使用を目的に、血液を各成分に分離するために用いられる。こうした用途の１つが、生体接着剤の調製である。フィブリン糊とも呼ばれる生体接着剤は、血液凝固最終段階の生物学的プロセスを再現しようとする比較的新しい技術である。これまでの臨床報告書から、心血管、胸部、移植、頭部及び頸部、口腔、胃腸、整形外科、神経外科及び形成外科などのさまざまな外科手術分野にフィブリン糊が使用されていることがわかっている。手術時、フィブリン糊を構成する２種類の主成分、フィブリノゲン及びトロンビンを混合して、凝塊を形成させる。この凝塊は、適用後数十秒のうちに凝固させる必要のある組織、骨又は神経に接着して、およそ１０日後、フィブリン溶解現象により身体内に徐々に再吸収されていく。フィブリン糊の重要な特徴は、（１）特に、縫合手段を行えない領域、又は縫合が極めて危険な領域における血管吻合術にて、止血ができること、（２）縫合のみでは制御できない、針穴や動脈破断部分からの出血を制御できること、及び（３）ヘパリン化された患者又は凝血障害を患う患者を止血できることである。Ｂｏｒｓｔ，Ｈ．Ｇ．、ｅｔ ａｌ．、ＪＴｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．、８４：５４８−５５３（１９８２）；Ｗａｌｔｅｒｂｕｓｃｈ，Ｇ．Ｊ ｅｔ ａｌ．、Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ、３０：２３４−２３ ５（１９８２）；ａｎｄ Ｗｏｌｎｅｒ，Ｆ．Ｊ．ｅｔ ａｌ．、Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．、３０：２３６−２３７ １９８２）を参照されたい。
【００３１】
欧州では医師らによりフィブリン糊が有効かつ成功裏に使用されているにもかかわらず、米国ではフィブリン糊もその基本成分であるフィブリノゲン及びトロンビンもあまり使用されていない。その大きな理由は、ウィルス感染、特に、ＨＢＶ及びＨＣＶなどの（非Ａ非Ｂ型肝炎ウィルスとしても周知である）肝炎ウィルスの感染の危険性があるとして１９７８年に米国食品医薬品局が、ドナーから市販用に調製されたフィブリノゲン濃縮物に対する禁止令を出したことである。さらに、フィブリノゲン調製時に、ＡＩＤＳに関連するＨＩＶ、サイトメガロウィルス、並びにエプスタインバーウィルスや単純性疱疹ウィルスなどのほかの脂質包囲ウィルスがより最近になっても出現していることから、近い将来に局の方針が変更される見通しはない。同様の理由から、現在、ヒトからのトロンビンについて、米国ではヒトへの使用が認可されていない。米国でヒトへの使用を許可されているウシからのトロンビンは、ＨＩＶ及び肝炎に対する重大な危険性がないと見なされたウシから得られるものであるが、このウシが海綿状脳症や脳炎などの他の病原体を保有している可能性はある。
【００３２】
フィブリン糊の調製を目的に、これまでさまざまな方法が開発されてきた。Ｒｏｓｅらに付与された米国特許第４，６２７，８７９号には、（ａ）梅毒、肝炎又は後天性免疫不全症候群など１種類又は複数種類の血液感染病についてスクリーン検査を行ったヒトや、雌ウシ、ヒツジ、ブタなどの他の動物などの単一ドナーから新鮮な血漿を得て、これを約８０℃にて少なくとも約６時間、好ましくは少なくとも約１２時間凍結するステップと、（ｂ）上澄みとフィブリノゲン及びＸＩＩＩ因子を含む寒冷沈降懸濁物とを形成するように、例えば約０℃と室温との間の温度に、凍結した血漿の温度を上昇させるステップと、（ｃ）その寒冷沈降懸濁物を回収するステップとを含む、フィブリン糊の調製においてプリカーサとして有用な、フィブリノゲン及びＸＩＩＩ因子を含む寒冷沈降懸濁物を調製する方法が開示されている。こうして得た寒冷沈降懸濁物の規定量と、ヒト、ウシ、ヒツジ又はブタのトロンビンなどのトロンビンを十分な量で含有する組成物とをその部位に適用して、懸濁物内のフィブリノゲンをフィブリン糊に変換してゲルとして固体化させることにより、フィブリン糊を調製する。
【００３３】
フィブリン糊を調製する第２の技術は、Ｍａｒｘに付与された米国特許第５，６０７，６９４号にＭａｒｘにより開示されている。この技術では、本質的に、上述した寒冷沈降物をフィブリノゲン成分供給源として用いてから、トロンビンとリポソームとを添加する。Ｂｅｒｒｕｙｅｒ，Ｍ．らによる「Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ ｂｙ ｂｏｖｉｎｅ ｔｈｒｏｍｂｉｎ ｕｓｅｄ ｗｉｔｈ ｆｉｂｒｉｎ ｇｌｕｅ ｄｕｒｉｎｇ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ」、（Ｊ．Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ、１０５（５）：８９２−８９７（１９９２））にて説明されている第３の方法は、ウシのトロンビンを、フィブリノゲン、フィブロネクチン、ＸＩＩＩ因子及びプラスミノゲンなどのヒトの凝固剤タンパク質だけでなく、ウシのアプロチニン及び塩化カルシウムとも混合することにより調製されるフィブリン糊を開示している。
【００３４】
Ｒｏｓｅら及びＭａｒｘによる上記特許及びＢｅｒｒｕｙｅｒによる技術文献にはそれぞれ、フィブリン接着剤を調製する方法が開示されているが、そのいずれにも、ウシのトロンビンを活性化剤として使用することに関連する欠点がある。ウシのトロンビンを含むフィブリン糊を使用したために発生した重大かつ生命を脅かす結果として、ウシのトロンビンを局所的に受けた患者が出血性体質になったという報告がある。この合併症は、比較的不純なウシのトロンビン調製物内におけるウシのＶ因子に対して患者が抗体をつくると起こるものである。この抗体がヒトのＶ因子と交差反応してＶ因子欠損症を起こし、ひどい場合には出血や死をもたらすことになる。Ｒａｐａｐｏｒｔ，Ｓ．Ｉ．ｅｔ ａｌ．、Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．、９７：８４−９１（１９９２）；Ｂｅｒｒｕｙｅｒ，Ｍ．、ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｔｈｏｒａｃ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｓｕｒｇ．、１０５：８９２−８９７（１９９３）；Ｚｅｈｎｄｅｒ，Ｊ．、ｅｔ ａｌ．、Ｂｌｏｏｄ、７６（１０）：２０１１−２０１６（１９９０）；Ｍｕｎｔｅａｎ，Ｗ．、ｅｔ ａｌ．、Ａｃｔａ Ｐａｅｄｉａｔｒ．、８３：８４−７（１９９４）；Ｃｈｒｉｓｔｉｎｅ，Ｒ．Ｊ．、ｅｔ ａｌ．、Ｓｕｒｇｅｒｙ、１２７：７０８−７１０（１９９７）を参照されたい。
【００３５】
Ｍａｒｘ及びＲｏｓｅらにより開示された方法に関連する別の欠点は、寒冷沈降物の調製に長い時間とかなりの費用がかかるということである。また、いかなるウィルスの汚染もないように常に細心の注意を払わなくてはならない。
【００３６】
上記に開示した方法に関連する別の欠点は、ヒトのトロンビンは、活性化剤として見なすことができても、臨床上の使用には利用できないため、患者がヒトのトロンビンに対して抗原反応を起こさないという証明ができないということである。類推により、組換型ヒトＶＩＩＩ因子が血友病者で抗原反応を起こすことがわかっている。Ｂｉａｓｉ，Ｒ．ｄｅ．、Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ａｎｄ Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ、７１（５）：５４４−５４７（１９９４）を参照されたい。したがって、ヒトの組換え型トロンビンの効果についてさらに臨床研究を行うまで、ヒトの組換え型トロンビンを用いればウシのトロンビンに関連して起こる抗原問題を回避できると簡単に想定することはできない。トロンビンに関する第２の問題は、これが自触反応性である、すなわち、自滅しがちであるため、取扱い及び長時間の保管が難しいということである。
【００３７】
最後に、上述したように、フィブリン糊は主にフィブリノゲン及びトロンビンから構成されているため、適量の血小板に欠けている。血小板は成長因子と治癒因子とを含んでおり、これらは血小板濃縮物内により多く含まれると考えられる。また、凝固プロセスは、血小板により促進される。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００３８】
したがって、小型で使用しやすく、従来技術による連続流体システムの欠点を持たない、血液及び他の生体流体を処理するための遠心システムがなお必要である。また、疾病感染の危険性がなく、生理学的副作用を起こす危険性もない、血小板ゲル組成物の調製に便利で実際的な方法も必要である。
【００３９】
血液収集時に、全血に含まれる、密度及びサイズの異なる複数種類の成分を、単純かつ低コストな使い捨てユニットを用いて自動的に分離するシステムも広く必要である。
【００４０】
また、回転連結構成要素を用いずに、複数の細胞バッチを同時に効率よく処理する細胞遠心処理システムが必要である。
【００４１】
さらに、フィブリン凝塊形成速度を高めて止血を促進する血小板濃縮物も必要である。
【００４２】
好ましくは、この装置を本質的に自己充足型とする。好ましくは、この方法の実施に必要な設備の価格を比較的低く抑え、この血液接触セットを、全血の分離が終了するたびに廃棄できるものとする。
【課題を解決するための手段】
【００４３】
以上に鑑み、本発明は、流体媒体内に懸濁又は溶解している成分を遠心法により分離するための方法及び装置を提供するものである。さらに具体的に言えば、本発明は、遠心法により、遠心機を回転させながら、抗凝固剤入り全血から血小板を多く含む血漿、白血球、貧血小板血漿、幹細胞などの１種類又は複数種類の全血成分を単離させることで、これらの成分を分離及び単離する方法を提供する。
【００４４】
本発明はさらに、単離した血液成分を治療に用いる方法を提供する。
【００４５】
本発明はさらに、遠心処理時に、特定の血液成分を引抜くと同時に供給源容器から全血を追加することのできる遠心機バッグを具備する全血成分分離装置を提供する。
【００４６】
本発明はさらに、遠心機による全血成分分離時に、全血を保持するための使い捨て可能な１回使用型遠心機バッグであって、必要な場所で使用されるタイプの携帯型遠心機で使用できるようにされたバッグを提供する。
【００４７】
本発明はさらに、使い捨て式遠心機バッグの容量より多い血液の一部から採取できる所定血液分画量を最大にする使い捨て遠心機バッグを具備した携帯型遠心機を提供する。
【００４８】
以上のみならず、本発明による他の目的を実現するために、本明細書内で具体化し広義に説明するように、本発明の一の実施形態は、ａ）１本又は複数本のチューブと、ｂ）可撓性である上方及び下方シートとを含む、軸を中心に回転するようにされた可撓性使い捨て式遠心機バッグとを含む。各シートは、ドーナッツ形状であり、中央コアを画定する内周部と外周部とを有しており、上方シート及び下方シートが重ね合わされ、完全に互いにその外周部でシールされており、チューブが、上方シートと下方シートとの間に挟持されて中央コアから外周部に向けて延伸しているため、上方及び下方シートがその内周部にてシールされると、チューブが上方シートと下方シートとの間でその内周部にてシールされて、遠心機バッグの内側環境及び外側環境と流体連通した状態となる。１本又は複数本のチューブは、遠心機バッグのチューブと同じ数である１本又は複数本の内腔を設けた供給ケーブルに流体接続されている。
【００４９】
本発明のもう１つの実施形態は、軸を中心に回転するようにされた剛性成形容器を含む。この容器は、頂端部が閉じ、底端部が開いた、軸方向コアを有する剛性環状本体を含む。この剛性成形容器はさらに、遠心処理を施す流体媒体を収容及び保持するための内側収集チャンバを含む。このチャンバは、外周部及び内周部を有し、その断面領域は、多少偏心された「８の字」状となっている。この剛性成形容器はさらに、コアから径方向に延伸し、チャンバの外周部近傍の地点と流体連通している第１のチャネルと、コアから径方向に延伸し、８の字状チャンバの狭窄部分又は「首」付近領域と流体連通している第２のチャネルとを含む。したがって、第１及び第２のチャネルにより、内側収集チャネルの内側環境と外側環境とが流体連通している。この第１及び第２のチャネルは、引入れ腔及び引出し腔を有する二腔管に流体接続されている。
【００５０】
本発明のさらに別の実施形態は、流体媒体に含まれている成分を分離するための装置及び方法である。具体的に言えば、本発明は、全血を多血小板血漿及び貧血小板血漿などの分画に分離できるように、遠心法の原理を用いる。本発明の一態様において、この成分分離は、回転自在な遠心機モータを使用することにより行われる。このモータは、中央柱状部を有する基部と、中央コアを有し、遠心機モータ内に配置可能でモータと共に回転可能な使い捨て式遠心機バッグとを含むものである。遠心処理時に全血を保持する、この使い捨て式遠心機バッグはさらに、全血を遠心機バッグに導入するための導入チューブと、所望の血液分画を遠心機バッグから取り出すための排出チューブとを含む。この導入及び排出チューブは、二腔管と流体連通している。遠心機バッグは、***する柱状部をバッグ中央コア内に挿入してカバーで固定することにより、遠心機ロータ内に着脱自在に固定される。遠心機が回転している間、全血の成分は、それぞれの密度に基づいて遠心機バッグ内の径方向かつ水平方向に位置するため、流体媒体成分は、密度の異なる他の成分から分離されることになる。
【００５１】
本発明は、全血が所望程度に分離されたら、遠心機が回転し続けている間に、遠心機バッグから排出チューブを介して１つ又は複数領域内の所望分画を特異的に取り出すことにより、所望分画をオンラインで取り出せるようにする方法を提供するものである。所望成分の採取と同時に、又はこの後に、導入チューブを介して血液の一部を遠心機バッグに追加することができる。一の実施形態において、遠心機バッグは、可撓性かつ透明で略平坦なドーナッツ状のバッグである。別の実施形態における遠心機バッグは、遠心処理時に流体媒体を収容及び保持するための内側チャンバを有する剛性で透明な容器である。このチャンバの断面は、多少偏心した８の字形状である。
【００５２】
本発明のもう１つの態様は、導入チューブ及び排出チューブを有する使い捨て式遠心機バッグを含む。この排出チューブは、屈曲部品に流体接続されている。
【００５３】
本発明の別の態様は、遠心機バッグを保持するための遠心機ロータを含む。このロータは、溝を設けて***している第１の中央柱状部を含む基部と、溝を設けて***している第２の中央柱状部を含むカバーとを含む。遠心機バッグは、その内側環境及び外側環境と流体連通している導入チューブ及び排出チューブを含む可撓性のドーナッツ状バッグであり、これらのチューブは、基部及びカバーに設けられた柱状部溝内に位置して、遠心機バッグを基部及びカバーに対する固定位置に保持している。これにより、バッグが、基部及びカバーとは別に回転してしまうことはなく、基部及びカバーと同時に同じ回転速度にて回転するようになる。
【００５４】
本発明の別の態様は、遠心機バッグを保持するための遠心機ロータを含む。このロータは、遠心機バッグを間に固定するための基部とカバーとを含む。この遠心機カバーはさらに、チューブの遠位端を操作者に見えやすくするため、カバー又は基部の中央から間隔をおいて位置する１つ又は複数の同心状表示円を含む。
【００５５】
流体媒体（例えば全血）の成分を分離する本発明の別の態様は、複雑形状の内側チャンバを含む遠心機ロータを用いる。このチャンバは、遠心処理時に流体媒体を保持するための可撓性でドーナッツ状の遠心機バッグを支持するものである。この遠心機ロータは、下方チャンバを有する基部と、上方チャンバを有するカバーとで画定されている。カバーを基部上に重ねると、上方及び下方チャンバが、ロータの環状内側チャンバを画定する。内側ロータチャンバの断面は、流体媒体（例えば、抗凝固剤入り全血）の遠心処理により得られる所望成分（例えば、多血小板血漿）の収集量を最大限にするように特に設計された、多少偏心した８の字形状である。この遠心機バッグは、実質的に可撓性である材料から形成されているため、遠心処理時のそのプロファイルを決定する少なくとも１つが、バッグ内に含まれる流体媒体量となっている。この遠心機バッグの最大容量が充填されると、ロータチャンバの内側形状と同じとなる。
【００５６】
本発明のもう１つの態様は、流体媒体の所望成分をオンライン採取する方法を含む。本発明の一の実施形態では、遠心機と、遠心機内に配置可能であり、分離時に流体媒体を入れるための使い捨て式遠心機バッグとを用いる。このバッグはさらに、少なくとも１本の導入チューブと少なくとも１本の排出チューブとを含む。遠心機は、基部部分と、カバーと、外側リムとを有する遠心機ロータを含む。基部部分とカバーとが、遠心機ロータの内側を画定しており、これは上方チャンバと下方チャンバとに分けられている。使い捨て式遠心機バッグを、下方チャンバ内にて水平に配置でき、カバーにより遠心機基部に適切に固定することができる。遠心機バッグは、二腔管により供給源（例えば、抗凝固剤入り自家由来全血を含む容器）及び収集容器（例えば、引き続き処理される、多血小板血漿や他の成分用容器）と流体接続されている。二腔管は、遠心機バッグの導入チューブに流体接続された引入れ腔と、遠心機バッグの排出チューブに流体接続された引出し腔とを含む。この遠心機バッグは、遠心機の回転軸に対して実質的に環状である。遠心機バッグが遠心機ロータ内に配置され、これと同時に回転できるように適切に固定されると、遠心機が回転している間に、流体媒体が引入れ腔から遠心機バッグに供給される。バッグ内の成分は、それぞれの密度に基づいて、径方向位置及び水平方向位置に移動する。所望程度の分離が行われたら、遠心機を回転させながら、所望分画を遠心機バッグから引出し腔を介して取り出すことができる。採取すべき分画の位置は、外周部近傍に位置する成分を導入チューブから引抜くことにより、又は、液状媒体の一部をバッグ内に追加することにより、必要に応じて、排出チューブ領域内でシフトさせることができる。この方法の一の実施形態において、バッグは、可撓性かつ透明なドーナッツ状バッグである。この方法の別の実施形態によるバッグは剛性で透明なバッグであり、断面が偏心８の字形状である内側チャンバを含んでいる。
【００５７】
本発明はさらに、自動化することのできる液体遠心処理システムを提供する。
【００５８】
本発明はさらに、内側リード駆動機構を有して小型サイズを実現できる遠心機を提供する。
【００５９】
本発明はさらに、あらゆる医療用にトロンビンを生成及び単離できる方法及び装置を提供する。
【００６０】
本発明はさらに、完全に自家由来である血小板ゲルを調製する方法を提供する。
【００６１】
本発明はさらに、ウシのトロンビン及びヒトの組換え型トロンビンを使用することに伴う危険性を回避した自家由来血小板ゲルを提供する。
【００６２】
本発明はさらに、あらゆる用途向けの自家由来血小板ゲルを提供する。
【００６３】
本発明はさらに、医療用途で使用される細胞成分を提供する。
【００６４】
本発明によるさらなる新規特徴及び利点のいくつかを、以下の説明及び実施例に記載する。当業者であれば、以下の説明により他の特徴及び利点も明らかになるであろう。また、本発明を実施することにより、他の特徴及び利点を発見できるであろう。
【００６５】
本明細書に組入れられており、本明細書の一部を構成している添付図面は、本発明の好適実施形態を例示しており、以下の記載と合わせて、本発明の原理を説明する役割を果たすものである。
【００６６】
（発明の詳細な説明）
本発明による遠心処理システム１０は、図１に最もよく図示されている。このシステムは、固定基部１２と、所定軸Ａを中心に回転するように該固定基部１２に回転自在に取り付けられた遠心機２０と、連続流用に設計された使い捨てバッグ（図示せず）を収容するためのロータ２０２とを有する。図示するように、遠心処理システム１０は、主要テーブルプレート又は固定基部１２と、側壁１３と、透明若しくは不透明のプラスチック、又は他の適した材料で形成された着脱式蓋１５とを含む防護用囲い込み部１１を具備しており、これにより、処理システム１０の構成要素を構造的に支持し、可動部品を包囲して安全性を確保し、遠心処理システム１０を携帯できるものとしている。遠心処理システム１０はさらに、蓋１５の開口部（図示せず）上に取り付けられたクランプ２２を具備する。クランプ２２は、供給ケーブル２２８内を移動する流体の流れを妨げることなく、軸Ａ又は軸Ａ付近に固定されている。側部取付けモータ２４も設けられており、これは、システムが動作している間、ドライブシャフトアセンブリ２８（図２参照）及びそれと相互連結されて駆動されるロータアセンブリ２００を、供給ケーブル２２８の結合を制御するために選択された速度比、例えば２：１（すなわち、ドライブシャフトアセンブリ２８が１回転する毎にロータアセンブリ２００が２回転する）で同じ回転方向に回転させるように、駆動ベルト２６により遠心機２０に接続されている。
本発明はさらに、図６０で最もよくわかるように、さまざまな治療方法のために、特定の血液成分を回収して処理するためのディスペンサー装置９０２に関する。その具体的成分の例として、自家由来トロンビン及び自家由来血小板ゲルを生成するために使用可能な多血小板血漿、貧血小板血漿及び白血球が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００６７】
次に図２を参照すると、連続流遠心処理システム１０は、ロータ２０２を着脱式又は非着脱式に装着する遠心機２０を含む。遠心機２０とそれに自能されている中間シャフトギアアセンブリ１０８（ギア１１０、１１０’、１３１及び７４を含む）の設計が、本発明の重要な構成要素である。これにより、遠心処理システム１０全体を小型化し、ドライブシャフトアセンブリ２８とロータアセンブリ２００とを所望の速度比で回転させることができる。
【００６８】
図２で最もよくわかるように、遠心機２０の組立てはまず、下方ベアリングアセンブリ６６を下方ケースシェル３２内に挿入して、下方ケースアセンブリ３０を形成することから始める。次に、ケーブルガイド１０２並びにギア１１０及び１１０’を、以下で詳細に説明するように下方ケースアセンブリ３０内に配設して、ギア１１０及び１１０’を下方ベアリングアセンブリ６６に可動状態で係合させる。次に、上方ベアリングアセンブリ１３０を頂部ケースシェル１２６内に挿入してベアリングアセンブリ１２４を形成し、これを下方ケースアセンブリ３０に嵌合させる。これにより、ギア１１０及び１１０’は、上方ベアリングアセンブリ１３０とも可動状態で係合し、留め具２９により所定位置に保持される。下方ベアリングアセンブリ６６は固定基部又は主要テーブルプレート１２にネジ１４により軸支されており、その結果遠心機２０は、（図１に図示したように）主要テーブルプレート１２に垂直な軸Ａを中心に回転することができる。
【００６９】
次に図３〜図５を参照すると、下方ケースアセンブリ３０は、必ずしもそうでなくともよいが、金属材料から機械加工又は成形されているものが好ましく、下方ケースシェル３２と、タイミングベルトリング４６と、タイミングベルトフランジ５０と、ベアリング６２（例えば、ボールベアリングなど）とを備えている。下方ケースシェル３２は、細長い主要本体４０を具備しており、当該主要本体４０は、タイミングベルトリング４６及びタイミングベルトフランジ５０を収容するために、直径を小さくした首部分３６を、当該主要本体４０の一端から延出させている。直径の大きな主要本体４０の終端は、首部分３６至り、それによってタイミングベルトリング４６用のベアリング面４２を有する外側肩部３８が形成されている。図５で最もよくわかるように、タイミングベルトリング４６及びタイミングベルトフランジ５０の内径は、首部３６の外径よりわずかに大きくなっており、これにより、双方を首部３６に嵌合できるようになっている。肩部３８はさらに、それぞれタイミングベルトリング４６及びタイミングベルトフランジ５０の穴ガイド４８及び５２と整合する、内向するネジ穴４４を少なくとも１つ、好ましくは４つを備えている（図５に図示）。これにより、組み立てられた際、ネジ５４は穴ガイド５２及び４８に収容され、ネジ穴４４内に螺装されて、タイミングベルトリング４６及びタイミングベルトフランジ５０を首部分３６に固定することができる。下方ケースシェル３２はまた、その内部を貫通する軸方向若しくはスリーブ穴５６と、外側肩部３８とほぼ同じ水平面に位置する内側肩部５８及び上方面６０とを有する。ベアリング６２（図４に図示）は、スリーブ穴５６内にそれと同軸状にプレス嵌めされて、上方面６０と同一平面上に配置される。内側肩部５８はまた、図６〜図８に示す下方ベアリングアセンブリ６６の上方面６８上に当接する下方荷重面６４を有する。
【００７０】
下方ベアリングアセンブリ６６は、下方ギア挿入部７０と、ボールベアリング８４と、ギア７４と、バネピン７６及び７６’とを含む。以下で明かなように、ギア７４は、中間シャフトギアアセンブリ１０８のギア１１０、１１０’などのように嵌合又は接触するギアに入力回転速度を伝達するために、適した設計のものとし、接触するギアと組み合わされた際に所望のギア列又は速度比が得られるようにサイズ及び歯数を選択すればよい。例えば、ギア７４を、直線状又は螺旋状の傘歯車、はすば歯車、ウォーム歯車、ハイポイド歯車などとして、適した材料で形成することができる。一の好適な実施形態において、ギア７４は、遠心処理システム１０の操作速度における歯動作を滑らかにするために、螺旋状歯車とする。下方ギア挿入部７０の上方面６８は、軸方向に配設されたスリーブ７２を含んでおり、これがギア７４を収容及び保持する。ギア７４は、少なくとも１つ、好ましくは２つのバネピン７６及び７６’によりスリーブ７２内に保持させることが好ましい。このバネピンは、下方ギア挿入部７０内を水平方向にスリーブ７２内に延出するバネピン穴７３及び７３’内に配設される。このため、ピン受け部７７及び７７’を有するギア７４がスリーブ７２内に挿入されると、バネピン７６及び７６’が、対応する受け部７７及び７７’に侵入して、ギア７４を所定位置に固定することになる。無論、他の組立技術を用いて、ギア７４を下方ギアアセンブリ６６内に配設及び保持することもでき、こうした技術も本開示内容の範囲内と見なされる。例えば、ギア７４を、プレス嵌め又は摩擦嵌合など、これに限定しないいくつかの他の方法でスリーブ７２内に保持することができる。又は別法として、ギア７４及び下方ギア挿入部７０を単一部材から成形してもよい。
【００７１】
下方ギア挿入部７０の基部７８の直径は、やや裾広がりな構造により、下方ギア挿入部７０の上方本体８０よりわずかに大きい。このやや裾広がりな構造により、肩部８２が形成されており、ここにボールベアリング８４が当接する。組み立てられると、下方ベアリングアセンブリ６６は、下方ケースシェル３２の首部３６内に延伸するスリーブ穴５６内に収容される。そこで、ボールベアリング８４上方で下方ベアリングアセンブリ６６の外径とスリーブ穴５６の内径との違いにより発生する環状スペース内に、保持リング８６を挿入する。第２の保持リング８７（図２に図示）も、ボールベアリング８４上方で下方ベアリングアセンブリ６６の外径とスリーブ穴５６の内径との違いにより発生する環状スペース内に挿入して、下方ギア挿入部７０を下方ケースシェル３２内で固定する。これにより、ボールベアリング６２及び８４がそれぞれ保持リング８６及び８７で固定されるため、下方ケースシェル３２は、下方ベアリングアセンブリ６６を中心に回転自在に軸支されるが、長手方向及び横断方向移動に対しては固定される。したがって、組立て時、ネジ１４を基部７８内のネジ穴７９に固定することにより、下方ベアリングアセンブリ６６を固定基部１２に取り付けることができる。駆動ベルト２６が係合されると、下方ケースシェル３２は、固定されている下方ベアリングアセンブリ６６の周りを自由に回転することができる。
【００７２】
次に図５を参照すると、下方ケースシェル３２が備える首部分３６とは反対側の端部から延出しているのが、複数の突起又は指部８８、９０、９２及び９４である。突起８８と９０との間、及び突起９２と９４との間にそれぞれあるのが、チューブガイド１０２（図９）を収容するための凹部スロット９６及び９８である。チューブガイド１０２の機能については以下で詳細に説明するが、簡単に言えば、遠心機バッグ２２６に接続された供給ケーブル２２８を、中間シャフトギアアセンブリ１０８を通過させてから遠心機２０外部へ案内するものである。
【００７３】
突起９０と９２との間、及び突起８８と９４との間にそれぞれ位置するのが、中間シャフトギアアセンブリ１０８のギア１１０及び１１０’（図２）を収容するための凹部スロット１０４及び１０６である。ギア１１０及び１１０’を好ましくは、ギア７４と嵌合接触し、遠心機２０内におけるギア列比全体を所望通りにするように構成する。これに関しては、ギア１１０及び１１０’を、螺旋状歯車設計など、ギア７４と同様の形態（例えば、サイズ、歯数など）となるように選択することが好ましい。図２及び図１４に図示したように、中間シャフトギアアセンブリ１０８は、ギア７４及び１３１と係合する１対のギア１１０及び１１０’を備える。この機械技術における当業者であればギア及びギア組合せ構造は周知であるが、本明細書にも簡単にその内容を開示する。
【００７４】
図１０は、ギア１１０の組立てを示す分解図であり、図１１は、図１０に示したギア１１０を組み立てた状態を示す斜視図である。ギア１１０’も同様に構成されている。ギア１１１がまず、キーストック１１４及び外側保持リング１１６により、中間ギアシャフト１１２上に固締される。次に、ボールベアリング１１８が、平坦なワッシャ１２０及び押さえネジ１２２により、中間ギアシャフト１１２に装着される。下方ケースシェル３２の凹部スロット１０４及び１０６が、ボールベアリング１１８及び１１８’（図示せず）を収容する。別の実施形態では、ボールベアリング１１８をブシュ（図示せず）にしてもよい。組み立てると、ギア１１０及び１１０’が下方ギア７４と接触して（図２及び図１４参照）、固定ギア７４からギア１１０及び１１０’へと力を伝達して、ギア１１０及び１１０’を所定速度で回転させることにより、駆動されたロータアセンブリ２００に所望する出力回転速度を得るための接触面が形成される。ロータアセンブリ２００は、ドライブシャフトアセンブリ２８により駆動される。ドライブシャフトアセンブリ２８は、駆動モータ２４により入力回転速度で回転するものであり、一の好適な実施形態において、ロータアセンブリ２００を、ギア１１０及び１１０’を用いて、その入力回転速度の２倍の出力回転速度で回転させるように構成されている（すなわち、入力回転速度に対する出力回転速度の割合が２：１である）。この比率は、例示した実施形態では、下方ケースシェル３２を駆動モータ２４で回転させながら、ドライブシャフトアセンブリ２８内に位置するギア１１０及び１１０’を固締して、遠心機の中心軸Ａを中心に回転させることにより実現される。ギア１１０及び１１０’はまた、静止ギア７４と接触することにより、遠心機中心軸Ａを横切るそれぞれの回転軸を中心に回転させられる。このとき、図示したように、ギア１１０及び１１０’の回転軸は一致している。ギア１１０及び１１０’は、下方ケースシェル３２と共に、回転軸を中心に回転することにより、ロータアセンブリ２００の入力回転速度に対する出力回転速度を所望通り２：１にすることができる。
【００７５】
これについて、ギア１１０及び１１０’及びチューブガイド１０２は、頂部ベアリングアセンブリ１２４を下方ケースアセンブリ３０に装着することにより、所定位置に固締される。頂部ベアリングアセンブリ１２４（図１２に図示したように）は、頂部ケースシェル１２６と、ボールベアリング１２８と、上方ベアリング１３０とを含む。頂部ケースシェル１２６は、図１２及び図１３で最もよくわかるように、上方面１３２と、下方リップ１３４と、その中を通る中央又は軸方向穴１３６とを含む。上方面１３２は軸方向穴１３６からわずかに突出しているため、下方面１４０を有する肩部１３８が形成されている（図１３に図示）。下方リップ１３４は、下方ケースシェル３２の上方リップ１００（図５に図示）を反対向きにしたものである。
【００７６】
上方ベアリングアセンブリ１３０（図１２）は、上方面１３３と下方面１３５とを含み、上方面１３３は、ロータ２０２を収容する手段を有している。下方面１３５には、下方面１３５に垂直に径方向外向きに突出し、下方面と同軸状に配置された柱状部１３７が設けられている。上方ベアリングアセンブリ１３０はさらに、軸方向に位置する穴１３９を含む。この穴は、柱状部１３７及び上方面１３３を横断しており、上方ギア挿入部１３１を収容するものである。上方ギア挿入部１３１も軸方向穴１４２を備えているため、柱状部１３７内に同軸状で配置されると、軸方向穴１３９及び１４２により、供給ケーブル２２８を頂部ケースシェル１２６の上方ベアリングアセンブリ１３０からケーブルガイド１０２へと通すことができるようになる（図１４に図示）。下方ベアリングアセンブリ６６について上述したように、上方ギア挿入部１３１を、中間シャフトギアアセンブリ１０８のギア１１０、１１０’などの嵌合又は接触するギアから入力回転速度を伝達される適した設計であれば、接触するギアと組み合わされた時点で所望のギア列又は速度比が得られるように選択したサイズ及び歯数を備えつつ、どのように設計してもよい。例えば、ギア挿入部１３１を、直線状又は螺旋状の傘歯車、はすば歯車、ウォーム歯車、ハイポイド歯車などとして形成することができる。一の好適な実施形態において、ギア１３１を、遠心処理システム１０の操作速度における歯動作を滑らかにするように、螺旋状歯車とする。ギア挿入部１３１を好ましくは、少なくとも１つ、好ましくは２つのバネピン（図示せず）により柱状部１３７内に保持する。しかし、他の組立技術を用いて、ギア挿入部１３１を柱状部１３７内に配設及び保持することもでき、こうした技術も本開示内容の範囲内と見なされる。例えば、ギア挿入部１３１を、プレス嵌め又は摩擦嵌合など、これに限定しないいくつかの他の方法で柱状部１３７内に保持することができる。又は別法として、ギア挿入部１３１及び上方ベアリングアセンブリを単一部材から成形してもよい。
【００７７】
上方ベアリングアセンブリ１３０を、頂部ケースシェル１２６の軸方向穴１３６内に挿入して、下方面１３５を頂部ケースシェル１２６の上方面１３２と同じ高さに配置する。続いて、ボールベアリング１２８を、柱状部１３７の外径と頂部ケースシェル１２６の内側側壁１４１との間に形成される環状スペース内に挿入して、上方ベアリングアセンブリ１３０を所定位置に固定する。
【００７８】
ここで図１３を参照すると、下方リップ１３４は、下方ケースシェル３２から延出した突起８８、９０、９２及び９４と嵌合する構造となっている。具体的に言えば、下方リップ１３４の外径が、下方ケースシェル３２が含む主要本体４０の上方端部の外径と一致しており、凹部１４４及び１４８が、突起８８及び９２をそれぞれ収容及び保持し、凹部１４６及び１５０が突起９４及び８８をそれぞれ収容及び保持する。各凹部及び各突起に穴が設けられているため、組み立てられた時点で、留め具１５２（図１２に図示）をその穴に挿入して、頂部ベアリングアセンブリ１２４を下方ケースアセンブリ３０に固定することができる。
【００７９】
凹部１４４と１４６との間、及び凹部１４８と１５０との間に位置しているのがそれぞれ、中間ギアアセンブリ１０８のギア１１０及び１１０’を収容するための凹部スロット１０４’及び１０６’である（図２及び図１４）。ギア１１０及び１１０’を好ましくは、ギア挿入部１３１と嵌合接触し、遠心機２０内におけるギア列比全体を所望通りにするように構成する。これについて、ギア１１０及び１１０’を好ましくは、螺旋状歯車設計など、ギア１３１と同様の形状（例えば、サイズ、歯数など）となるように選択する。さらに、凹部１４４と１５０との間、及び凹部１４６と１４８との間に凹部スロット９６’及び９８’がそれぞれ設けられている。ギア１１０及び１１０’を図１４に図示したように組み立てると、下方ケースシェル３２及び頂部ケースシェル１２６それぞれからの凹部スロット９６及び９６’がポート１５４を形成し、凹部スロット９８及び９８’がポート１５６を形成するため、供給ケーブル２２８をポート１５４又は１５６を用いて遠心機２０から出すことができる。上述した方法は、本発明による遠心処理システム１０を組み立てる１つの方法である。しかし、当業者であれば、下方ケースシェル３０及び上方ベアリングアセンブリをさまざまな方法で接合して、４つのギアを互いに適切に整合させられることがわかるであろう。
【００８０】
上記のように、遠心処理システム１０は、遠心機２０を出入する流体給送ライン、ケーブルなどを締付ける又は捻ることなく、血液及び他の流体を効率よく分離するのに有用な小型携帯装置となる。ギア７４、ギア１１０及び１１０’、及び上方ベアリング１３０のギア挿入部１３１を少なくとも一部含む自己充足型内側ギア列を用いれば、遠心処理システム１０をさらに小型化することができる。上方ベアリング１３０のギア挿入部１３１を好ましくは、ギア１１０及び１１０’の回転速度を、結果的にギア７４から及び上方ベアリング１３０のギア挿入部１３１へと伝達するギア１１０及び１１０’との接触面（１つ又は複数）を設けるように選択する。一の好適な実施形態において、上方ベアリング１３０のギア挿入部１３１は、ロータアセンブリ２００を回転させるように上方ベアリング１３０内で堅く取り付けられ、螺旋状ギア７４と同様に設計された、すなわち、歯のねじれ量、円ピッチ、螺旋角などが同じ又は同様の螺旋状歯車である。操作時、下方ケースシェル３２が遠心機軸Ａを中心に、０ｒｐｍ〜５０００ｒｐｍの間で選択された回転速度などの入力回転速度で回転している間、ギア７４は静止状態を保つ。ギア１１０、１１０’は、シェル３２と共に、静止状態のギア７４に接触することにより、どちらも遠心機軸Ａを中心に回転する。螺旋状歯車１１０及び１１０’が上方ベアリング１３０のギア挿入部１３１に接触すると、ギア挿入部１３１及びこれに接続されている上方ベアリング１３０が、入力回転速度とは異なる、つまりそれより速い出力回転速度で回転する。
【００８１】
本発明を実施するにあたり、いくつかのギア比又はトレイン比（すなわち、入力回転速度／出力回転速度）を使用できるが、本発明の一の実施形態は、１：２のギア列比を用いる。この場合、ギア７４、ギア１１０、１１０’、及び上方ベアリング１３０のギア１３１の組合せ及び構成を、このギア列比を実現できるように選択する。特に、ギア１１０、１１０’は、ギア列比の実現に確実に作用するため、一の実施形態において、同様に設計された４つのギアを使用することができる。このことから、入力回転速度から出力回転速度へと速度を速めつつ、製造コストを低く抑えることができる。同様に、機械技術における当業者であればわかるように、数、サイズ及び構成が異なってもこの比（また他の選択比）を実現できるギアの数多くの組合せを用いて本発明を実施することができ、こうした組合せも、本開示内容の一部と考えられる。例えば、２つのギア１１０、１１０’は、伝動力を分配し、動作している遠心機内のバランスをとるものとして中間シャフトギアアセンブリ１０８内に図示されているが、これより多い（又は少ない）ギアを用いて、ギア７４の回転を上方ベアリング１３０のギアに伝達してもよい。また、内側ギアの数、サイズ及び構成を、図１〜図１４に図示した例とは異なるものにできるように、ギア７４、ギア１１０、１１０’、及びギア挿入部１３１の形成に用いる材料も、当技術分野で周知の適したギア材料であればいずれを用いてもよい。
【００８２】
例示した遠心処理システム１０の、有利なことに小型化を貢献するもう１つの特徴は、側部取付け駆動モータ２４である。図１及び図２に図示したように、駆動モータ２４は、囲い込み部１１の固定基部１２上で遠心機２０に隣接して取り付けられる。駆動モータ２４を、遠心処理システム１０の遠心機２０の回転速度を所望通りにするために有用な、標準電気モータなどのいくつかのモータから選択することができる。駆動モータ２４を手動操作型にしても、一の好適な実施形態のように、遠心処理システム１０のコントローラにより自動操作可能なモータコントローラを設けて駆動モータ２４の操作を行ってもよい（これについては、本発明による自動化された実施形態を参照しながら以下で詳述する）。図１に図示したように、駆動ベルト２６を用いて、ドライブシャフトアセンブリ２８（及び、それに伴い、ロータアセンブリ２００）を回転させることができる。この実施形態において、駆動ベルト２６に好ましくは、ドライブシャフトアセンブリ２８が含む下方ケースアセンブリ３０部分のタイミングベルトリング４６の外側歯と嵌合するように選択した内側歯を設ける（駆動ベルトを使用する場合には、歯は不要）。ただし、本発明は、駆動ベルト２６を使用することに限定されるものではなく、駆動ベルトの代わりに駆動チェーン、モータ２４により駆動される外側ギア、及び他の適した駆動機構のいずれをも使用することができる。駆動モータ２４は、特定回転速度で操作されると、ドライブシャフトアセンブリ２８をそれとほぼ同じ回転速度で回転させる（すなわち、入力回転速度）。単一速度駆動モータ２４を用いることも、別の実施形態において、複数及び／又は可変速度モータ２４を備えて、入力回転速度に、所望の出力回転速度（すなわち、遠心機バッグ２２６を含むロータアセンブリ２００の回転速度）が得られるように操作者又はコントローラにより選択可能な一定範囲を設けることもできる。
【００８３】
本発明は概して、遠心法の原理を用いて、流体媒体から所定の分画（１種類又は複数種類）を分離するための装置及び方法を含む。本発明の原理を複数の用途に用いることができるが、本発明の一の実施形態は、抗凝固剤入り全血から所定の分画（１種類又は複数種類）（例えば、多血小板血漿又は貧血小板血漿）を単離することを含む。例えば、多血小板血漿を、血小板濃縮物又はゲルの調製に用いることができる。さらに具体的に言えば、手術前又は手術時に患者から採った血液を用いて、手術時に、多血小板血漿から自家由来血小板ゲルを調製することができる。
【００８４】
遠心機２０について、上記に説明し、本発明の小型携帯型態様を実証してきた。本発明の装置を完成させるため、ボール又はロータ２０２とも呼ばれる流体収集装置を、図１及び図２に図示したように、上方ベアリングアセンブリ１３０の上方面１３３に取り付ける。ロータ２０２を上方ベアリングアセンブリ１３０に永久装着することが好ましいが、着脱式に取り付けてもよい。ロータ２０２は、下方環状溝２１２を設けたロータ基部２０４（図１５に図示）と、上方環状溝２１４を設けたロータカバー２０６とを含む。図１７及び図１８に図示したように、ロータ２０２の環状内側チャンバ２１６は、この下方環状溝２１２及び上方環状溝２１４により画定されている。下方環状溝２１２は、遠心処理する流体媒体を含有するための遠心機バッグ２２６を収容する部分である。この遠心機バッグ２２６を、好ましくは、これに限定するわけではないが、好ましくは二腔構造型である供給ケーブル２２８を介して、容器３９８及び４００にそれぞれ供給用及び収容用に接続する。技法によっては、複数の出口又は入口ポートが必要となる場合もあり得るため、本発明の供給ケーブル２２８に複数の内腔を具備することができる。好適実施形態による供給ケーブル２２８は、引入れ腔２３０と引出し腔２３２とを含んでいるため、遠心機ロータ２０２が回転している間に、流体媒体を遠心機バッグ２２６に供給する、かつ遠心機バッグ２２６から取り出すことができる。
【００８５】
遠心機ロータ２０２の一の実施形態を、図１５〜図１８により具体的に例示する。図１５は、ロータ基部２０４の斜視図であり、図１６はロータカバー２０６の斜視図である。図１７は、図１の線分１７を通る断面から見たロータ２０２の側面断面図であり、図１８は、図１の線分１８を通る断面から見たロータ２０２の側面断面図である。図１５に図示したように、ロータ基部２０４は、***した環状リム２０８と、基部２０４内で軸方向に位置して***している柱状部２１８とを含む。***した柱状部２１８にはさらに、その直径を横切って延伸する溝２２２が形成されている。この***した環状リム２０８と***した柱状部２１８とにより、環状溝２１２が画定されている。リム２０８の高さは、柱状部２１８の高さと同じである。図１６に示したロータカバー２０６は、***した環状リム２１０と、ロータカバー２０６内で軸方向に位置し、***した柱状部２２０とを含む。***した柱状部２２０にはさらに、その直径を横切って延伸する溝２２４が形成されている。このリム２１０と柱状部２２０とにより、環状溝２１４が画定されている。リム２１０の高さは、柱状部２２０の高さと同じである。
【００８６】
一般に、使用時に遠心機ロータ２０２が組み立てられると、中央コア２４２を有するドーナッツ形状の遠心機バッグ２２６（図１９及び図２０）などの可撓性遠心機バッグがロータ基部２０４内に配置されて、中央の柱状部２１８が、遠心機バッグ２２６のコア２４２内に延在し、遠心機バッグ２２６は環状溝２１２内に配置される。ロータカバー２０６は、図１７及び図１８に図示したように、溝２２２と溝２２４とが整合するように、ロータ基部２０４上に重ねられる。ロータカバー２０６がロータ基部２０４に適したネジ、留め具など（図示せず）により固定されると、リム２０８及び２１０が互いに密着して、環状溝２１２と環状溝２１４とによりロータ内側チャンバ２１６が画定される。一の実施形態において、柱状部２１８及び２２０を互いに密着させる。別法として、遠心機バッグ２２６の内周部２４０を柱状部２１８と２２０との間に固定して、柱状部２１８及び２２０が互いに全く物理的に接触しないようにすることもできる。
【００８７】
遠心機の一の実施形態に関する上述を念頭におきながら、遠心処理システム１０に用いる遠心機の別の好適実施形態について、以下に説明する。図１９〜図２２を参照すると、遠心機６４０の一の好適な実施形態が例示されている。この遠心機６４０は、所望の入力駆動比に対する出力駆動比（上述したように、例えば２：１）を得るように、内側ギアアセンブリではなく、特有の配置方法による内側プーリシステムを使用している。遠心機６４０は、側部取付けモータ２４（図１に図示）を用い、駆動ベルト２６を介して、遠心機の回転部分の回転速度を所望通りにしている。
【００８８】
まず図１９を参照すると、遠心機６４０は、遠心機６４０の操作時に遠心機バッグを収容及び支持するための凹部面６４８を設けたロータ基部６４４（又は頂部プレート）を含む。ロータ基部６４４は、留め具により、下方ケースシェル６６０の別個の回転自在部分（すなわち、図２０及び図２１を参照しながら説明する頂部プーリ６９８）に堅く取り付けられている。ロータ基部６４４の中央には、ケーブルポート６５６が設けられており、これを、ロータ基部６４４の凹部面６４８上に位置する遠心機バッグと流体接続されるはずの遠心機チューブ又は供給ケーブル用通路としている。遠心機６４０の操作時には、供給ケーブル及び可動部分（例えば駆動ベルト及びプーリ）に対する接触及び締付けを最小限に抑えて制御することが重要である。このため、下方ケースシェル６６０は、供給ケーブルを遠心機６４０内に侵入させられるように側部ケーブルポート６６２を含み、その位置を、重要なことに、アイドラプーリ６６６と６６８との間にして、挿入されたあらゆるチューブ又はケーブルと遠心機６４０の可動駆動構成要素との間に間隔を設けている。
【００８９】
ピン６６４でプーリ６６６、６６８を物理的に支持できるように、アイドラシャフト又はピン６６４を下方ケースシェル６６０内に取り付けて支持する。アイドラプーリ６６６、６６８は、遠心機６４０操作時にピン６６４の中心軸を中心に自由に回転できるように、軸受けによりピン６６４上に取り付けられる。アイドラプーリ６６６、６６８は、以下で図２０及び図２１を参照しながら詳述するように、駆動ベルト２６から下方ケースシェル６６０に提供又は付与された駆動力又は原動力をロータ基部６４４に移すことができるように、また、内側駆動ベルト６７０を遠心機６４０内に物理的に支持するように、具備されている。駆動ベルト２６は、側部取付けモータ２４（図１に図示）により駆動され、下方ケースシェル６６０に接触して、下方ケースシェル６６０を、その中心軸を中心に回転させる。その下方ケースシェル６６０は、駆動ベルト２６が側部取付けモータ２６により駆動されると基部６７４上で自由に回転できるように、基部６７４上に取り付けられている。基部６７４は、実質的に堅く、また、下方ケースシェル６６０と共に回転しないように、固定基部１２（図１に図示）に取り付けられている。
【００９０】
次に図２０〜図２２を参照すると、２：１などの所望の入力比に対する出力比を得るために内側プーリアセンブリを用いることについて、よりわかりやすくするために部分切取図として、遠心機６４０が図示されている。図示のように、基部６７４は、ゴム、プラスチックなどの振動吸収材料で製造された振動絶縁台６７６を含む。基部６７４はこの振動絶縁台６７４を介して比較的堅く固定基部１２（図１）に取り付けられている。側部取付けモータ２４（図１）から延びた駆動ベルト２６が、下方ケースシェル６６０に堅く取り付けられている駆動プーリ６８０に接触する（摩擦により、又は上述したように歯などを用いて）。駆動ベルト２６がモータ２４に駆動されると、下方ケースシェル６６０が駆動プーリ６８０を介してその中心軸（遠心機６４０の中心軸に相当する）を中心に回転する。この下方ケースシェル６６０の回転速度を、入力回転速度として考えることができる。
【００９１】
ロータ基部６４４にて入力回転速度より速い所望の速度を得るため、下方ケースシェル６６０を、遠心機の中心軸を中心に自由に回転できるように、基部６７４と嵌合するベアリング６９０により基部に取り付ける。ベアリング６９０は、底部プーリ６９２と基部６７４との間で所定位置に保持されており、底部プーリ６９２は、下方ケースシェル６６０が回転しても静止状態を保つように、基部６７４に堅く（ボルトなどにより）取り付けられている。例示したベアリング６９０は、下方ケースシェル６６０を基部６７４上で回転させられるようにツーピース式ベアリングである。下方ケースシェル６６０内には、底部プーリ６９２の外面に接触するように、内側駆動ベルト６７０が挿入されている。ベルト６７０を好ましくは、、摩擦力でベルト６７０を固定底部プーリ６９２の周囲に回転させられるように、底部プーリ６９２としっかり嵌合する適度な緊張を持たせて設置する。標準ゴムベルト又は歯付きベルトを用いると、この摩擦嵌合を強化することができる（無論、チェーンなどの他の駆動装置をベルト６７０の代わりに用いてもよい）。
【００９２】
内側駆動ベルト６７０は、一時的に遠心機６４０の外部を通過して、アイドラプーリ６６６及び６６８の外面と接触する。アイドラプーリ６６６及び６６８は、ベルト６７０に別の運動を付与することはないが、ピン６６４上で自由に回転するものであり、下方ケースシェル６６０による遠心機中心軸を中心とする回転を、同じ軸を中心に回転する別のプーリ（すなわち、頂部プーリ６９８）に伝えられるように具備されている。そこで、アイドラプーリ６６６及び６６８は、ベルト６７０を縛り付けることなく捻り、下方ケースアセンブリ６６０の上方部分内に給送して戻すことを補助する非剛性（又は回転自在な）支持部を提供するものである（図２０及び図２１で明らかなように）。内側駆動ベルト６７０は、下方ケースアセンブリ６６０内に給送されると、頂部プーリ６９８の外面に接触する。
【００９３】
遠心機６４０の操作時、内側駆動ベルト６７０の動作により、頂部プーリ６９８は遠心機中心軸を中心に回転する。アイドラプーリ６６６及び６６８は、遠心機６４０内におけるプーリ６９２及び６９８に対するその位置及び方向から、ロータ基部６４４を下方ケースシェル６６０と同じ方向に回転させる。重要なことに、頂部プーリ６９８が、頂部プーリ６９８の内面に摩擦接触するように下方ケースシェル６６０の中心シャフト６８６に取り付けられたベアリング６９４（ベアリング６９０に類似のツーピース式ベアリングであれば好ましいが、他のベアリング構造も利用可能である）を介して下方ケースシェル６６０に取り付けられているため、頂部プーリ６９８は、遠心機中心軸を中心に入力回転速度の２倍の速度で回転する。内側駆動ベルト６７０が底部プーリ６９２を中心に回転し、アイドラプーリ６６６、６６８が、駆動ベルト２６により遠心機中心軸を中心に回転するため、頂部プーリ６９８は、下方ケースシェル６６０と同じ方向に、ただし２倍の速度で、遠心機中心軸を中心に回転する。
【００９４】
言い換えれば、駆動ベルト２６及び内側駆動ベルト６７０の駆動力が、遠心機６４０の構成要素により組み合わされて、出力回転速度を形成しているのである。上述したように、さまざまな出力と入力の駆動比が可能であるが、２：１の比率が一般に好適であり、遠心機６４０を好ましくは、頂部プーリ６９８の第２のより速い回転速度が下方ケースシェル６６０の速度の実質的に２倍となるように構成する。内側駆動ベルト６７０を、同じ軸を中心に回転する２つのプーリと組み合わせて用い、回転する筐体内にてプーリを構造的に支持することにより、大幅に小型化され、２：１の駆動比で効率よく、比較的低い騒音レベルにて（これは、数多くの医療現場で望ましいことである）動作する遠心機が得られる。
【００９５】
ロータ基部６４４を頂部プーリ６９８に留め具６５２により堅く装着することにより、頂部プーリ６９８で２：１の駆動比が得られると、これがロータ基部６４４に伝達される。ロータ基部６４４の凹部面６４８上に配置された遠心機バッグは、上述したように締付けをうまく制御している下方ケースシェル６６０内に給送された供給ケーブル２２８の２倍の速度で回転する。ベアリング６９４（ワンピース又はツーピース以上）が、下方ケースシェル６６０の中心シャフト６８６全体を取り囲んでいる。遠心機６４０からロータ基部６４４（これは、図１に図示したように、操作時、ロータ頂部又はカバーにより閉じられる）まで延びる供給コード２２８用の通路を確保するため、ロータ基部６４４にはケーブルポート６５６が設けられており、中央シャフト６８６は、中央ケーブルガイドを形成するように中空に形成されている。これにより、供給ケーブル２２８を、遠心機中央軸に基本的に平行に遠心機バッグ（図示せず）まで給送することができる。下方ケースシェル６６０は、遠心機６４０に入る最初の入口とするために側部ケーブルポート６６２を含み、また、ケーブル２２８を下方ケースシェル６６０から中央シャフト６８６の中空部分まで案内するために側部ケーブルガイド（又はトンネル）６８４を含んでいる。側部ポート６６２及び側部ケーブルガイド６８４を、２つのアイドラプーリ６６６と６６８との間の実質的に中心に配設することにより、ケーブル２２８を内側駆動ベルト６７０から離して配置して、締付けや磨耗が発生する危険性を最小限に抑えている。
【００９６】
図１９〜図２２に例示した遠心機６４０は、底部プーリ６９２にも頂部プーリ６９８にもツーピース式ベアリングを用いており、供給ケーブル２２８用の通路を確保するために、中央「目くら」通路（側部ケーブルガイド６８４、中央シャフト６８６の中空部分及びケーブルポート６５６、６６２を介する）が遠心機６４０内に設けられている。この「目くら」通路は、有効であるが、比較的堅いケーブル２２８がこの通路内に給送又は押入れられるため、実際には締付けの問題を含む可能性がある。この問題に対処するため、別の遠心機実施形態７００を提供し、図２３及び図２４に例示する。この実施形態では、遠心機７００の上方部分において、アイドラプーリ６６６と６６８との間にガイドスロットが設けられており、これにより、ケーブル２２８を挿入している操作者の視界を遮る構成要素がない状態で、供給ケーブル２２８を頂部から遠心機７００内に給送できるようになっている。
【００９７】
ガイドスロットを設けられるようにするため、遠心機６４０内の連続状上方ベアリング６９４を、ケーブル２２８の外径より少なくともわずかに大きい１つの空隙又は分離部を有するベアリング部材に置換える。このケーブル入口空隙を設けるためにいくつかのベアリング部材を使用することができ、この部材も本開示内容の範囲である。図示のように、遠心機７００は、ロータ基部７０２を含む。この基部は、出力速度（例えば、入力速度の２倍）にてこのプーリと回転し、遠心機バッグを凹状面７１６上に収容及び支持するように、頂部プーリ６９８（図示せず）に留め具７０４により堅く固定されている。ロータ基部７０２はまた、バッグの中心及びケーブル２２８を遠心機７００の中心に位置合わせするのに有用なケーブルポート７１８を具備している。
【００９８】
ケーブル２２８を遠心機７００内に挿入できる状態にするため、ロータ基部７０２はさらに、ケーブルガイドスロット７１２を含む。このスロットは、図示のように、下方ケースシェル７２０の側部ケーブルガイド７２４に向けて遠心機７００内に下向きにケーブル２２８を挿入できるようにする、ロータ基部７０２に設けられた溝又は開口部である。下方ケースシェル７２０はまた、側部ケーブルガイド７２４の頂部までくり抜かれたケーブルガイドスロット７２２を含む。この場合も、ガイドスロット７１２及び７２４のどちらも、遠心機内にてアイドラプーリ６６６と６６８との間に配置することにより、挿入されるケーブル２２８が、頂部プーリ又は下方ケースシェル７２０を基本的に１８０度包囲している内側駆動ベルト６７０と接触して締付けられることがないようにしている。
【００９９】
図２３に示すように、ベアリング部材７０６は互いに間隔をおいて配置されており、好ましくは、こうした間隔又は空隙の少なくとも１つを、下方ケースシェル７２０の中央シャフトまでケーブル２２８を通過させられるほどの大きさとする。図示のように、ベアリング部材７０６として４つのカムフォロワが用いられているが、４つ以外の数の部材を用いてもよい。このカムフォロワ７０６は、頂部プーリを回転させるように頂部プーリに接続されており、同時に、下方ケースシェル７２０と共に回転できるように下方ケースシェル７２０の中央シャフトに接続されている。カムフォロワ７０６は、下方ケースシェル７２０内に形成されたベアリング溝７１０内に配置されている。ケーブル２２８用に障害のない通路を確保するため、ケーブルガイドスロット７１２及び７２２が、アイドラプーリ６６６、６６８に隣合う２つのカムフォロワ７０６の間に位置付けられている。好ましくは、ケーブルガイドスロット７１２及び７２２を、アイドラプーリ６６６と６６８との実質的に中央に配置する。ガイドスロット７１２、７２２はこれらのカムフォロワ７０６の間に配置されて、ケーブル２２８を内側駆動ベルト６７０と頂部プーリ６９８との間の接触面とは反対側の遠心機７００上に配設する（図２０〜図２２）。このように、分かれたベアリング部材７０６を１対のケーブルガイドスロット７１２、７２２と組み合わせて用いることにより、操作者は、駆動システムの内部を通さずとも、容易に供給ケーブル２２８を取り付けることができ、締付けや他の挿入時の問題を最小限に抑えることができる。
【０１００】
Ａ．可撓性使い捨て式遠心機バッグ
使い捨て式可撓性遠心機バッグ２２６の一の実施形態を、さらに具体的に図２５及び図２６に例示する。このバッグは、２段階が連続して一体となった自己平衡使い捨て設計によるものである。この使い捨て式遠心機バッグ２２６は、実質的に平坦で、外周２３８と内周２４０を有する環状体又はドーナッツ状であり、実質的に可撓性である材料で形成された、径方向に延伸する上方及び下方シート２３４、２３６を含む。上方及び下方シート２３４、２３６は互いに重ね合わされて、その外周２３８にて、熱溶接、高周波溶接又は、２つの表面を接着する他の同様の方法により、完全にシールされている。内周２４０が、バッグ２２６のコア２４２を画定している。本発明の一の実施形態において、遠心機バッグ２２６はさらに、上方シート２３４と下方シート２３６との間に挟持され、内周２４０により画定されたコア２４２の中央から外周２３８に向けて延伸する導入チューブ２４８と、上方シート２３４と下方シート２３６との間に挟持され、コア２４２の中央から外周２３８に向けて延伸する排出チューブ２５０とを含む。上方及び下方シート２３４、２３６がその内周２４０にて互いにシールされると、このシールにより、導入及び排出チューブ２４８、２５０はその間でシールされる。導入及び排出チューブ２４８、２５０はそれぞれ、遠心機バッグ２２６の内側及び遠心機バッグ２２６の外部環境と流体連通している。排出チューブ２５０の長さは、導入チューブ２４８の長さより短い。
【０１０１】
本発明の一の実施形態において、図３１に図示したように、排出チューブ２５０は直線状のチューブである。別法として、排出チューブ２５０に、その遠位端と流体接続した屈曲部品２５２を具備させる（図２５及び図２６）。屈曲部品２５２の構造として幾通りも可能であるが、好ましくは、図２７、図２８、図２９及び図３０にそれぞれ例示したように、「Ｔ字型」、「湾曲したＴ字型」、「Ｊ字型」又は「Ｌ字型」の形状とする。別法として、排出チューブ２５０及び屈曲部品２５２を、２つの接続したピースではなく、連続した成形ユニットとしてもよい。好ましくは、屈曲部品２５２を、図２７及び図２８にそれぞれ例示したように、「Ｔ字型」又は「湾曲したＴ字型」にする。屈曲部品２５２を「Ｔ字型」又は「湾曲したＴ字型」設計にすれば、以下で詳細に説明するように、屈曲部品２５２の上方や下方に位置する分画からではなく、屈曲部品２５２の側部から所望の血液成分（分画）を取り出すことができる。
【０１０２】
上述したように、遠心機バッグ２２６を遠心機ロータ２０２の環状溝２１２内に配置する際、導入及び排出チューブ２４８、２５０を溝２２２内に設置しておくことが重要である。また、ロータカバー２０６を遠心機基部２０４上に載せて、着脱自在に固定する際、導入及び排出チューブ２４８、２５０を溝２２４内にも設置しておくことが重要である。導入及び排出チューブ２４８、２５０を溝２２２及び２２４内に設置することにより、遠心機ロータ２０２をロータ基部２０４とロータカバー２０６との間の固定位置に確実に保持して、遠心機バッグ２２６及び遠心機ローラ２０２を一緒に回転させることができる。つまり、遠心機バッグ２２６が固定位置にあれば、遠心機バッグ２２６が遠心処理時にこれだけで独立して回転してしまうことはない。
【０１０３】
導入及び排出チューブ２４８、２５０は、その近位端で供給ケーブル２２８と流体接続されており、この具体的実施形態における供給ケーブルは、遠心処理時に、遠心機バッグ２２６に成分を導入することと遠心機バッグ２２６から成分を取り出すこととができるように、遠心機バッグ２２６を供給源及び収容容器３９８、４００それぞれに接続する二腔構造である（図１７参照）。二腔管２２８は、遠心機バッグ２２６の導入チューブ２４８を供給源容器３９８に接続する引入れ腔２３０と、遠心機バッグ２２６の排出チューブ２５０を収容容器４００に接続する引出し腔２３２とを含む。一の実施形態において、導入及び排出チューブ２４８、２５０は、その近位端において、引入れ及び引出し腔２３０及び２３２内に挿入できるようにされている。別法として、図２６に図示したように、接続手段２５４を導入及び排出チューブ２４８、２５０の近位端内に挿入して、これらのチューブを引入れ及び引出し腔２３０、２３２に接続する。
【０１０４】
操作時、供給ケーブル２２８の一方の端部をロータアセンブリ２００に固定して、ロータアセンブリ２００が回転している間、ロータ２０２軸とケーブルガイド１０２を介して方向付けられている供給ケーブル２２８とに対して同じ回転を付与するドライブシャフトアセンブリ２８を同軸で半分の速度にて回転させて、それ自体が捻れないようにしなければならない。すなわち、ロータアセンブリ２００が３６０°の第１の回転を終了し、ドライブシャフトアセンブリ２８が同じ方向における１８０°の半回転を終了したとすると、供給ケーブル２２８はその軸を中心として１方向に１８０°捻れることになる。さらに、ロータアセンブリ２００が３６０°同じ方向に回転し、ドライブシャフトアセンブリ２８が同じ方向にさらに１８０°回転すれば、供給ケーブル２２８は反対方向に１８０°捻れられて、供給ケーブル２２８はその元の捻れていない状態に戻ることになる。したがって、供給ケーブル２２８は、本発明による遠心処理システム１０の操作時に、連続的に撓んだり折れ曲がったりしても、完全に回転する、又はこれ自体の軸を中心に捻れることは決してない。
【０１０５】
図３５に図示する、本発明による使い捨て式遠心機バッグの別の実施形態は、２本又はそれ以上の導入チューブ及び／又は２本又はそれ以上の排出チューブを含み、これらのチューブは、複数の内腔管に流体接続されている。
【０１０６】
使い捨て式可遠心機バッグ２２６は、透明で、実質的に可撓性である材料で形成されており、その例として、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン、エチレン酢酸ビニル及びこれらの組合せ、又は他の可撓性材料が挙げられるが、これらに限定するものではない。遠心機バッグ２２６が可撓性であるため、中に含有される流体量が少なくとも１つの要因となって、図２５及び図２６に示すこの可撓性遠心機バッグのプロファイルが決定される。遠心機バッグ２２６のプロファイルはまた、以下で詳細に説明するように、遠心機ロータの内部構造によっても画定される。遠心機ロータの内部構造に基づいて遠心機バッグ２２６のプロファイルを左右できることを少なくとも１つの理由として、以下で詳細に説明するように、遠心処理時に遠心機バッグ２２６内に含有できる流体媒体量を最大限にすることができる。
【０１０７】
遠心処理する流体又は媒体を、供給源容器３００内に入れることができる。例えば、本発明による遠心機２０を使用して自家由来血小板ゲルを調製する場合、手術時又はその前に、流体（すなわち全血）を患者から抗凝固剤の入った供給源容器３９８内に採ることができる。遠心機バッグ２２６を遠心機ロータ２０２内に設置し、その回転を開始した後、抗凝固剤を入れた全血を引入れ腔２３０から導入チューブ２４８を通して遠心機バッグ２２６に導入する。上述したように、遠心機バッグ２２６を遠心機基部２０４の溝２２２、２２４内に固定することにより、遠心機バッグ２２６をこれらの間の固定位置に保持して、遠心機ロータ２０２と別に移動できないようになっているため、遠心機バッグ２２６及びロータアセンブリ２００を同じ回転速度で同時に回転させることができる。遠心機ロータ２０２が回転すると、図３２に図示したように、抗凝固剤入り全血の中で密度のより高い成分が遠心機バッグ２２６の外周２３８に近い位置に方向付けられて移動し、密度のより低い成分が内側領域に近い位置に残る。さらに具体的に言えば、図３２に図示したように、分離すべき流体媒体が全血である場合、その全血が、遠心機バッグ２２６内において、赤血球分画（２５６）、白血球分画（２５８）、多血小板血漿分画（２６０）及び貧血小板血漿分画（２６２）に分離される。当業者には明らかであるように、全血分画、赤血球及び血漿はそれぞれ異なる色を帯びているため、これらの分画が分離されれば、操作者は容易に区別することができる。遠心処理時の適当な時間に、吸引や他の抽出手段を引出し腔２３２から遠心機バッグ２２６内部に適用して、遠心機バッグ２２６から所望の分画を取り出すことができる。別の実施形態において、遠心機カバー２０６に、同心指標ラインを設けて、操作者にＲＢＣと血漿との境界面に対する排出チューブ２５０の位置を見易くしてもよい。速度と時間によって、ＲＢＣと血漿との境界面に対するＷＢＣ及び血小板の位置は変化する可能性がある。例えば、ｒｐｍが低いままであれば（およそ１，０００〜１，７００、好ましくは、１，５００）、血漿及び血小板がＲＢＣ層から分離され、ｒｐｍを高速にすると（１，４００〜１，７００）、血小板が、血漿から分離してＲＢＣに対する血漿の境界面の位置にさらに濃縮されて集合する。さらに速度を速めれば、ＷＢＣはＲＢＣパック内のより深いところに位置する。
【０１０８】
再度、屈曲部品２５２について説明すると、一の実施形態における屈曲部品は、排出チューブ２５０の遠位端に流体接続されている。屈曲部品２５２は、「Ｔ」形状（図２７）として図３２に図示されているが、これは例示のみを目的としたものである。したがって、図３２に図示したように、屈曲部品２５２を、図２５〜図３１に図示した例など、いくつか他の形状にすることができることを理解されたい。屈曲部品２５２をこのように設計することにより、確実に、汚染される危険性がより少ない状態で、隣合う分画２５８部分から所望成分（例えば、多血小板血漿分画２６０）を採ることができる。このため、一の実施形態において、所望の分画が屈曲部品２５２の位置と重なった時点で、その分画を抜出す。別法として、遠心機バッグ２２６から所定分画を取り除きたい場合には、まず導入チューブ２４８を用いて赤血球分画２５６を抜出してから、その所定分画を屈曲部品２５２及び排出チューブ２５０を通じて引抜き、引出し腔２３２から収容容器４００内に方向付けることができる。
【０１０９】
続けて図３２を参照する。流体媒体の分離が遠心法により開始されると、特定密度又は特定範囲の密度の成分を含む、実質的に環状である領域が形成され始める。便宜上、全血の分離について説明し、図３２に図示したように、所与密度又は密度範囲の特定型成分をそれぞれ含む４つの領域を例として挙げる。また、各領域を横切って所与密度が分布して、領域が鮮明に画定されない場合もあることを理解されたい。したがって、実際にはこれらの領域がより広くなり（例えば、径方向にさらに広がる）、一定範囲の密度の成分を包含する場合もある。
【０１１０】
図３２の例では、第１の領域２５６は４領域の中で最も外側にあり、赤血球を含むものである。第２の領域２５８は、赤血球よりも密度の低い白血球を含み、第３の領域２６０は、多血小板血漿分画を含み、最も内側の領域２６２は、最も密度の低い、貧血小板血漿分画を含んでいる。一の実施形態において、領域２６０に含まれる多血小板血漿分画を採取すると望ましい場合がある。多血小板血漿分画を遠心機バッグ２２６から取り出すため、遠心機バッグ２２６の引出し腔２３２を通じて真空又は吸引を施して、所望する領域部分２６０を取り出す。屈曲部品２５２領域内にある分画２６０部分は、屈曲部品２５２を通じて抜き取られ、その分画に適した収集容器４００（図１７）の１つの中に収集される。
【０１１１】
さらに具体的に言えば、図３３〜図３９は、動的処理である、全血成分を分離するための本発明による１つの方法を例示している。図３３は、遠心機バッグ２２６の一部を示しており、全血の一部を遠心機バッグ２２６内に注入し、およそ６０秒〜１０分間にわたり、０〜５，０００ｒｐｍの回転速度で遠心処理をした後の、全血成分が分離された状態を例示している。当業者であれば、回転速度が速いほど、より短時間で血液が分離されることがわかるであろう。
【０１１２】
図３３は、分離された４つの全血分画を示しており、密度の高い分画ほど外周２３８近くに位置し、密度の低い分画ほど内周２４０近くに位置している。ヘマトクリット値（すなわち、百分率で表される、血液体積に対する赤血球体積の比）は、およそ２９％〜６８％の間で個人差があることは周知であるが、以下で詳細に説明するように、こうしたばらつきは、遠心機バッグ２２６の新規設計により容易に調整することができるものであり、所望する分画の単離に何ら影響も与えることはない。便宜上、最初に注入された抗凝固剤入り全血の一部を遠心処理すると、図３３に示したプロファイルが得られると予想される。一の実施形態では、多血小板血漿分画２６０を採取したい場合、バッチ分離処理又は連続分離処理を、以下に説明するように行うことにより、これを実現することができる。
【０１１３】
多血小板血漿分画２６０を採取するための、本発明によるバッチ分離処理の一の実施形態において、遠心機バッグ２２６は、図３２に図示したように設計されており、全血の一部を遠心処理すると多血小板血漿分画２６０が通常位置する領域内に、屈曲部品２５２がほぼ配設されている。この位置推定は、ロータカバー２０６の上方面に、同心指標ライン２０５、２０７及び２０９（図示せず）を置くと、同心ライン２０５、２０７及び２０９がそれぞれ、領域２６０、２５８及び２５６の縁部にほぼ相当するため、簡単に行うことができる。別法として、ライン２０５、２０７及び２０９と類似の同心ラインを、遠心機バッグ２２６の表面上に直接印刷してもよい。
【０１１４】
遠心機バッグ２２６内の血液を遠心処理した後、遠心機ロータ２０２を回転させながら、多血小板血漿分画２６０の大部分を、屈曲部品２５２を介して遠心機バッグ２２６から抜き取る。抜き取ることにより多血小板血漿分画２６０の容積が減るため、図３４に図示したように、最も内側の分画２６２が遠心力により自然と外周２３８に向けて移動する。図３４に図示したように、貧血小板血漿分画２６２が屈曲部品２５２に接近し、かつ貧血小板血漿分画２６２が大量に屈曲部品２５２により抜き取られる前の時点で、多血小板血漿分画２６０の抜取りを終了する。この時点は、以下に詳細に記載するように、操作者がその容積を目で見るか、センサを用いるかのいずれかで決定することができる。所望した多血小板血漿分画２６０を抜き取ったら、引入れ腔２３０を全血供給源容器３９８から外し、処分容器に接続する。接続後、遠心機バッグ２２６内に残留している流体を導入チューブ２４８から吸出して処分容器に入れる。次に、引入れ腔を全血供給源容器に再接続して、所望分画の必要量を単離するまで、上述したバッチ処理を必要な回数だけ繰返す。
【０１１５】
別法として、上述した処理を連続処理として行うこともできる。こうすると、全血供給源容器３９８から引入れ腔２３０を外すステップを省略することができる。連続処理による全血の分離を、図３９〜図３９に図示した使い捨て式可遠心機バッグ２２６’を用いて行うことができる。このバッグは、１本の導入チューブ２４８と３本の排出チューブ２４５、２４７及び２５０を含み、これらのチューブは、４つの内腔を含む供給ケーブルに接続されている。さらに具体的に言えば、全血の連続処理に用いる使い捨て式遠心機バッグは、引入れ腔により全血供給源容器に接続された導入チューブ２４８と、多血小板血漿を収容する容器に接続されている第１の引出し腔に接続された第１の排出チューブ２５０と、赤血球収容容器か廃棄物容器かのどちらかに通じる第２の引出し腔に接続された第２の排出チューブ２４５と、貧血小板血漿を収容する容器に通じる第３の引出し腔に接続された第３の排出チューブ２４７とを含む。この連続分離処理では、図３３及び図３４を参照しながら上述したように多血小板血漿又は他の細胞成分部分を抜き取った後、遠心機バッグに、全血の追加量（一部）を入れることができるようになっている。したがって、図３５に図示したように、遠心処理を継続しながら、遠心機バッグ２２６’が満杯になるまで全血の一部を第１の導入チューブ２４８を介して再度注入する。血液を追加したことから、遠心機バッグ２２６’内の血液分画のプロファイルは、大体、図３５に図示したようになる。図３５からわかるように、血液を追加すると、血液分画の位置が移動して、多血小板血漿分画２６０が屈曲部品２５２の領域内に戻り、貧血小板血漿分画２６２が内周２４０方向に戻って、屈曲部品２５２入口から遠ざかる。そこで、追加された多血小板血漿２６０を、図３５に図示したように、排出チューブ２５０を介して遠心機バッグ２２６’から取り出すことができる。
【０１１６】
上述したように、追加された多血小板血漿分画２６０を取り出すと、図３６に図示したように、貧血小板血漿分画２６２が外周２３８に近い位置へと移動して、屈曲部品２５２入口に近づく。この時点で再度、多血小板血漿の取出しは一次的に終了する。
【０１１７】
上述したように全血の一部を遠心機バッグ２２６’に追加注入し、多血小板血漿を（多血小板血漿分画２６０の位置を屈曲部品２５２の位置に対して移動させて）取り出すことを、複数回繰返すことができる。しかし、全血を注入し続けながら多血小板血漿分画のみを取り出していけば、遠心機バッグ２２６’内に残る血液分画２５６、２５８及び２６０量（及びこれに伴う幅）が必然的に次第に増加してしまう。具体的に言えば、赤血球分画２５６の量及びその幅が、他の分画を内周２４０方向に押し込んでしまうほどに増大する（図３７）。図３７に図示するように、赤血球量が遠心機バッグ２２６’内で増加したことにより、他の分画が内周２４０方向に移動し、所望している多血小板血漿分画２６２ではなく白血球分画２６０が、屈曲部品２５２の入口付近にくる。
【０１１８】
有利なことに、遠心機バッグ２２６’の新規設計は、図３７に示した状況になった場合にこうした分画を所望位置に戻す手段を提供するものである。すなわち、第２の排出チューブ２４５が、遠心機バッグ２２６’への全血導入用の引入れ腔として機能すると同時に、外周２３８付近に位置する分画を抜き取る機能も果たすのである。これを実現させるためにすることの１つは、第２の引出し腔を赤血球収容容器か吸引手段を有する（例えば、シリンジ、ポンプなど）廃棄物容器かのいずれかに装着することである。図３８に図示したように、第２の排出チューブ２４５の遠位端を外周２３８付近に配置し、これを操作して、赤血球分画２５６の大部分を抜き取ることができる。これにより、残りの分画２５８、２６０及び２６２の位置が移動する。赤血球分画２５６の抜取りを操作者が目でモニタしても、センサなどの他の手段でモニタしてもよい。別法として、貧血小板血漿分画２６２を、第３の引出し腔を介して貧血小板血漿収容容器に接続された第３の排出チューブ２４７で抜き取って、他の分画の位置を移動させてもよい。
【０１１９】
図３７は、赤血球分画２５６の一部を抜き取った後、遠心機バッグ２２６’に再度、遠心のための全血の追加分を収容する容積ができたことを示している。全血の一部を導入チューブ２４８から図３７の遠心機バッグ２２６’内に追加注入して遠心処理を行うと、図３９に例示したプロファイルとなる。上述したステップを必要に応じて繰返して、多血小板血漿の所望量を採取する。上述したステップはすべて、遠心機ロータ２０２が回転している間に行われる。
【０１２０】
上述した連続分離方法を、全血注入ステップと多血小板血漿を採取するステップとを連続して行うものとして例示した。別法による実施形態では、この注入ステップと採取ステップとを実質的に同時に行う。すなわち、全血の一部がバッグに追加されるのと同時に、多血小板血漿分画を抜出すことができる。この別法による実施形態では、全血の一部の注入とほぼ同時に全血成分を直ちに分離できる速度で遠心機ロータを回転させなければならない。
【０１２１】
上述したように、上記ステップはすべて、操作者の視覚によりその量で、又はセンサによりモニタできるものである。これらのステップを視覚でモニタする場合、遠心機カバー２０６にさらに、操作者が領域２６０、２５８及び２５６の位置を領域２５２に対して見やすいように、カバー２０６の中央から領域２６０、２５８及び２５６の外側縁部とほぼ同じ距離だけ間隔を置くことのできる、１つ又は複数の同心指標円２０５、２０７、２０９を含めることができる（図１７及び図１８）。
【０１２２】
図３３から図３９は、遠心機バッグ２２６及び２２６’をこのように設計することにより、所望の血液分画を、汚染リスクを伴わずに、連続的に採取できるように、また、１０〜２００ｃｃ用量の使い捨て式遠心機バッグ２２６及び２２６’を含む小型携帯遠心機装置を用いて大量の血液（１０〜５リットル）をオンラインで連続的に採取できるように、さまざまな血液分画の通常の位置を移動させる方法に対する一の実施形態を例示している。
【０１２３】
例えば、導入チューブ２４８及び排出チューブ２５０を備えるように遠心機バッグ２２６を設計すれば、これは、所望成分又は分画は排出チューブ２５０のみを介して遠心機バッグ２２６から抜出され、全血の一部の追加や他の成分（例えば、赤血球分画２５６）の取出しは、二重機能式導入チューブ２４８を介してのみ行われるということである。この場合、採取された分画（例えば、多血小板血漿分画２６０）が、それまでは他の流体媒体（例えば、全血や赤血球）に接触していた導入チューブ２４８から抜出されることは決してない。したがって、このような遠心機バッグ２２６の設計により、流体媒体を容器に導入することと採取された分画をその容器から抜出すこととの両方を行う１本のチューブしか具備しなかった従来の遠心機容器にはない、重要な利点が得られる。
【０１２４】
さらに、このように特有に設計されていることから、遠心機バッグ２２６及び２２６’を、遠心処理すべき全血の組成とは無関係に使用することができる。例えば、上述したように、ヘマトクリット値（すなわち、百分率で表される、血液体積に対する赤血球体積の比）には個人間で差があるため、図３２に例示したプロファイルも個人によって異なるものとなる。すなわち、赤血球分画２５６の幅が広くなる場合も狭くなる場合もあるが、いずれにしても、多血小板血漿分画２６０の位置は屈曲部品２５２から遠ざかることになる。しかし、図３３及び図３４を具体的に参照しながら上述したように、遠心機バッグ２２６及び２２６’の設計により、所望分画の位置を屈曲部品２５２領域内まで移動させることができる。例えば、遠心機バッグ２２６を用いて、赤血球分画を導入チューブ２４８から抜き取る、又は全血の一部を導入チューブ２４８から追加することにより、このような移動を実現することができる。
【０１２５】
図４０に、使い捨て式可撓性遠心機バッグ２７０の別の実施形態を例示する。使い捨て式遠心機バッグ２７０は、外周２７１及び内周２７２をそれぞれ有する、実質的に平坦な桿状体、又はドーナッツ形状であり、実質的に可撓性である材料で形成されて径方向に延伸している上方シート２７３及び下方シート２７４を含む。上方及び下方シート２７３、２７４は互いに重ね合わされて、その外周２７１にて、高周波溶接、熱溶接、又は、２つの表面を接着する他の同様の方法により、完全にシールされている。内周２７２が、遠心機バッグ２７０のコア２７５を画定している。本発明の一の実施形態において、遠心機バッグ２７０はさらに、上方シート２７３と下方シート２７４との間に挟持され、コア２７５の中央から外周２７１に向けて延伸する導入チューブ２７６と、上方シート２７３と下方シート２７４との間に挟持され、コア２７５の直径を横切って延伸し、第１及び第２の遠位端２８０、２８１を有する排出チューブ２７８とを含む。上方及び下方シート２７３、２７４がその内周２７２にて互いにシールされると、このシールにより、導入及び排出チューブ２７６、２７８はその間でシールされる。導入及び排出チューブ２７６、２７８はそれぞれ、遠心機バッグ２７０の内側及び遠心機バッグ２７０の外部環境と流体連通している。導入及び排出チューブ２７６、２７８は、この具体的実施形態では二腔管である供給ケーブル２２８（図示せず）に流体接続されている。導入チューブ２７６はその近位端にて、好ましくはＬ字状コネクタ（図示せず）を介して、供給ケーブル２２８に流体接続されており、排出チューブ２７８は、その中央にてＴ字状コネクタ（図示せず）を介して供給ケーブル２２８に流体接続されている。
【０１２６】
使い捨て式可遠心機バッグ２７０は、透明で、実質的に可撓性である材料で形成されており、その例として、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン、エチレン酢酸ビニル及びこれらの組合せ、又は他の可撓性材料が挙げられるが、これらに限定するものではない。
【０１２７】
遠心機バッグ２７０の上方及び下方シート２７３、２７４は、外周と内周との間の２点でさらにシールされている。すなわち、遠心機バッグ２７０はさらに、外周２７１と内周２７２との間に位置し、第１の凹形くぼみ又はウェル２８３を凹状側部に有する第１のＣ字状シール２８２と、外周２７１と内周２７２との間に位置し、第２の凹形くぼみ又はウェル２８５を凹状側部に有する第２のＣ字状シール２８４とをさらに含む。第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４は、２表面をシールするための、当技術分野で周知の方法により、上方及び下方シート２７３、２７４の一部を互いにシールすることで形成されている。その方法例として、高周波溶接や熱溶接が挙げられるが、これらに限定するものではない。第１のＣ字状シール２８２の端部２８８及び２８９は内側コア２７５に向けて内側に湾曲しており、同様に、第２のＣ字状シール２８４の端部２９０及び２９１は内側コア２７５に向けて内側に湾曲している。第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４の凹状側部が互いに向き合って配置されているため、第１及び第２のくぼみ２８３、２８５が互いに直径方向に対向するようになっている。つまり、図４０のように遠心機バッグ２７０を上から見ると、第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４は互いに鏡像関係となっている。第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４が共に、外周２７１と第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４との間に外側チャンバ２９２を画定している。この外側チャンバ２９２は、環状体であり、第１の処理室として機能するものである。第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４はさらに、第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４と内周２７２との間に内側チャンバ２９３を画定している。この内側チャンバ２９３は、環状体であり、第２の処理室として機能するものである。第１及び第２のＣ字状シール２８２及び２８４は、その端部２８８及び２９０が直接対向して互いの間に空間を設けていることにより、そこに第１のチャネル２８６を画定するように位置しており、またその端部２８９及び２９１が直接対向して互いの間に空間を設けていることにより、そこに第２のチャネル２８７を画定するように位置している。このとき、第１及び第２のチャネル２８６、２８７は直径方向に対向して、第１の処理室２９２と第２の処理室２９３との間を流体連通させている。導入チューブ２７６は、チャネル２８６かチャネル２８７かのどちらかの中に延在し、排出チューブ２７８の第１及び第２の遠位端２８０、２８１はそれぞれ、第１及び及び第２のくぼみ２８３、２８５内に延在する。
【０１２８】
遠心機バッグ２７０は、ロータ基部２０４とロータ２０２のロータカバー２０６との間に上述したように着脱自在に固定される。これにより、遠心機ロータ２０２が回転している間も、ロータ基部２０４及びロータカバー２０６に対して固定位置に保持される。当業者には明らかであるように、遠心機バッグ２７０を設計する場合、これを収容するためには、ロータ基部２０４（図１５）及びロータカバー２０６（図１６）には別の実施形態が必要である。したがって、ロータ基部２０４の別の実施形態は、***した柱状部２１８を含む。この柱状部は、互いに直交しながら、***した基部柱状部２１８の直径方向に延伸する第１及び第２の溝を含む。これにより、ロータ２０２が組み立てられると、遠心機バッグ２７０の導入チューブ２７６及び排出チューブ２７８が、***した柱状部２１８の第１及び第２の溝内にそれぞれ収まる。同様に、ロータカバー２０６の別の実施形態は、***した柱状部２２０を含む。この柱状部は、互いに直交しながら、***した基部柱状部２２０の直径方向に延伸する第１及び第２の溝を含む。これにより、ロータ２０２が組み立てられると、導入チューブ２７６及び排出チューブ２７８が、***した柱状部２２０の第１及び第２の溝内にもそれぞれ収まるようになる。
【０１２９】
上述したように、導入チューブ２７６及び排出チューブ２７８は供給ケーブル２２８と流体接続されている。この具体的実施形態における供給ケーブル２２８は、遠心機２０が回転している間、遠心処理すべき流体をバッグ２７０内に導入し、分離された１種類又は複数種類の成分を遠心機バッグ２７０から取り出すために、遠心機バッグ２７０を供給源及び収集容器３９８、４００それぞれに接続する二腔管である。二腔管２２８は、導入チューブ２７６を供給源容器３９８に接続する引入れ腔２３０と、排出チューブ２７８を収集容器４００に接続する引出し腔２３２とを含む。
【０１３０】
遠心機バッグ２７０を用いて遠心処理する流体又は媒体を、供給源容器３９８内に入れることができる。例えば、本発明の遠心機２０を用いて自家由来血小板ゲルを調製する場合、手術時又は手術前に、流体（すなわち、全血）を患者から、抗凝固剤を入れた供給源容器３９８内に採ることができる。遠心機バッグ２７０を遠心機ロータ２０２内に配設し、その回転を開始してから、抗凝固剤入り全血を、引入れ腔２３０を介して導入チューブ２７６から遠心機バッグ２７０に導入する。
【０１３１】
さまざまな流体媒体内に溶解又は懸濁している１種類又は複数種類の成分を分離及び単離するために、遠心機バッグ２７０を用いることができる。その例として、生体流体から細胞成分を分離することが挙げられ、例えば、全血から血小板を取り出して濃縮するのに、遠心機バッグ２７０が有用である。しかし、これに限定するものではない。したがって、以下に、遠心機バッグ２７０を用いて全血から血小板を分離することについて説明するが、これは例示のみを目的としており、バッグ２７０の使用を何ら限定するものではない。遠心機バッグ２７０内に含まれる全血などの流体媒体の分離を、２段階分離処理と考えることができる。全血から血小板を分離するのが第１の段階であり、この段階では、赤血球から血小板懸濁液を分離する必要がある。血小板懸濁液は通常、血小板を多く含む血漿であり、通常、多血小板血漿（ＰＲＰ）と呼ばれる。しかし、本明細書でいう用語「血小板懸濁液」は、専門的な意味におけるＰＲＰのみならず、全血内に含まれる血小板の割合よりも多い割合で血小板が濃縮されて含まれている懸濁物すべてを含むものであり、これに、血小板以外に他の血液成分を含む懸濁液も含められる。分離の第２の段階には、血小板懸濁液から血小板を分離して、血小板濃縮物を生成することが含まれる。本明細書でいう用語「血小板濃縮物」は、「血小板懸濁液」が、血小板懸濁液の流体容積を減らす次の分離ステップを施されて得られる一定容量の血小板を含むものである。血小板濃縮物は、白血球と赤血球が欠乏した濃縮物とすることができる。
【０１３２】
図４１を参照すると、遠心機バッグ２７０を用いる全血分離処理の第１の段階は、遠心機２０を回転させながら、全血の一部を導入チューブ２７６から遠心機バッグ２７０内に導入することで開始されている。全血の一部は、遠心機バッグ２７０の外側チャンバ２９２に入ると、遠心力の影響を受け、全血内成分のそれぞれの密度に基づき、さまざまな分画として外側チャンバ２９２内で径方向に急速に分離する。その例として、赤血球を含んで遠心機バッグ２７０の外周２７１に沿って集まる最も外側の分画と、血小板懸濁液を含む最も内側の分画とが挙げられる。全血の第１部分に対して遠心処理を施した後に得られる血小板懸濁液を、図４１にリング２９４として表す。第１の処理室２９２内に全血を続けて注入すると、赤血球量が増加するため、リング２９５で示すように、血小板懸濁液が内側に押し込まれる。全血の注入が追加されることで、リング２９６及び２９７で表すように、血小板懸濁液は内側に押し込まれ続け、ついには、第１の処理室２９２は赤血球で実質的に満杯になり（その他は血漿）、血小板懸濁液はチャネル２８６及び２８７から第２の処理室２９３内に押入れられる。上述したように、Ｃ字型シール２８２、２８４の端部２８８、２８９及び２９０、２９１はそれぞれ、内側に屈曲しているため、血小板懸濁液をチャネル２８６、２８７から送り込み、チャネル２８６、２８７を通過する赤血球量を最小限に抑えやすくなっている。赤血球がチャネル２８６、２８７の入口に近づいた箇所については、以下に詳細に記載するように、目で、又はセンサによりモニタすることができる。赤血球が入口に接近した時点で、全血の注入を停止し、２段階式分離処理の第２の段階を開始する。
【０１３３】
分離処理の第２の段階では、チャネル２８６、２８７から第２の処理室２９３内に押し込まれた血小板懸濁液が、遠心力の影響を受けて、第２の処理室２９３内にて径方向に最も長い距離を、すなわち凹状ウェル２８３、２８５に向けて流動する。こうして、このウェル内に、血小板懸濁液内で密度の高い成分である血小板が収集され始める。集まった血小板を凹状ウェル２８３、２８５から排出チューブ２７８を介して引抜くことができる。したがって、全血から血小板懸濁液を分離する上記２段階処理において、第１及び第２のＣ字状シール２８２、２８４は、全血から血小板を分離及び収集できるように、赤血球と血小板との間の物理的バリヤとして機能し、第１及び第２の凹状ウェル２８３、２８５は、分離処理の第２の段階で血小板懸濁液から分離された血小板を入れるリザーバの役割を果たしている。
【０１３４】
ウェル２８３、２８５から血小板を引抜いた後、引入れ腔２３０を全血供給源容器から外し、引入れ腔２３０に吸引力を印可して遠心機バッグ２７０内に残留している成分を導入チューブ２７６から吸引し、廃棄物容器に方向付ける。その後、引入れ腔２３０を全血供給源容器にまた接続して、上述したバッチ処理を、所望の血小板量が採取されるまで、必要に応じて繰返す。
【０１３５】
内側Ｃ字状シールを有する使い捨て式可撓性遠心機バッグの別の実施形態が、遠心機バッグ３２０として図４２に例示されている。この使い捨て式遠心機バッグ３２０は、実質的に平坦で、外周３２２及び内周３２４を有する桿状体又はドーナッツ形状であり、実質的に可撓性である材料で形成された、径方向に延伸する上方及び下方シート３２３、３２５を含む。上方及び下方シート３２３、３２５は互いに重ね合わされて、その外周３２２にて、熱溶接、高周波溶接又は、２つの表面を接着する他の同様の方法により、完全にシールされている。内周３２４が、バッグ３２０のコア３２７を画定している。
【０１３６】
遠心機バッグ３２０の上方及び下方シート３２３、３２５はさらに、その外周と内周との間を２つの部分でシールされている。すなわち、遠心機バッグ３２０はさらに、外周３２２と内周３２４との間に位置する第１のＣ字状シール３２６と、外周３２２と内周３２４との間に位置する第２のＣ字状シール３２８とを含む。第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８は、互いに対向する凹状側部を有しているため、図３６のように遠心機バッグ３２０を上から見ると、互いに鏡像関係となっている。第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８がともに、第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８と外周３２２との間に外側室３４８を画定している。この外側室３４８は、環状体である。第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８はさらに、第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８と内周３２４との間に内側室３５０を画定している。この内側室３５０は、ドーナッツ形状である。第１のＣ字状シール３２６の端部３３０及び３３２は、内側コア３２７に向けてわずかに内側に湾曲しており、同様に、第２のＣ字状シール３２８の端部３３４及び３３６も、内側コア３２７に向けてわずかに内側に湾曲している。第１及び第２のＣ字状シール３２６、３２８は、その端部３３０と３３４とが、直接対向して互いの間に空間を設けていることにより、そこに第１のチャネル３３５を画定するように、また、その端部３３２と３３６とが、直接対向して互いの間に空間を設けていることにより、そこに第２のチャネル３３７を画定するように位置しており、このとき、第１及び第２のチャネル３３５及び３３７は直径方向に対向して、外側室と内側室との間を流体連通させている。
【０１３７】
遠心機バッグ３２０はさらに、流体を外側室３４８内に導入するため、下方シート３２５内に位置する入口ポート３４０を含んでいる。入口ポート３４０をチャネル３３５から９０度の位置に設けることが好ましいが、９０度を前後する角度で設けることも可能である。遠心機バッグ３２０はさらに、流体を遠心機バッグ３２０から引抜くため、下方シート３２５内でチャネル３３５及び３３７内に配設された出口ポート３４４、３４６を含んでいる。
【０１３８】
一の好適な実施形態において、遠心機バッグ３２０は、上方シート３２３又は下方シート３２５の外面に固定され、コア３２７の中央から外周３２２に向けて径方向に延伸する導入チューブ３３８を含む。導入チューブ３３８の遠位端は入口ポート３４０に流体接続されている。入口ポート３４０は、導入チューブ３３８を遠心機バッグ３２０の外側チャンバ３４８と流体接続するものである。導入チューブ３３８の近位端は、好ましくはＬ字状コネクタ（図示せず）により、供給ケーブル２２８に流体接続されている。また、一の好適な実施形態において、遠心機バッグ３２０は、上方シート３２３又は下方シート３２５の外面に固定され、コア３２７の直径を横切って延伸する排出チューブ３４２を含む。排出チューブ３４２の一方の端部は、第１の出口ポート３４４に流体接続されており、もう一方の端部は、第２の出口ポート３４６に流体接続されている。排出チューブは、その中央にて、Ｔ字状コネクタ（図示せず）により、供給ケーブル２２８に流体接続されている。
【０１３９】
本発明の別の一の実施形態において、遠心機バッグ３２０は、上方シート３２３と下方シート３２５との間に挟持され、コア３２７の中央から外周３２２に向けて延伸し、その遠位端が入口ポート３４０に流体連結された導入チューブ３３８と、上方シート３２３と下方シート３２５との間に挟持され、コア３２７の直径を横切って延伸し、一方の端部が出口ポート３４４と流体接続され、もう一方の端部が出口ポート３４６に流体接続された排出チューブ３４２とを含む。上方シート３２３と下方シート３２５が内周３２４で互いにシールされると、そのシールにより、導入チューブ及び排出チューブ３３８、３４２はシート間でシールされる。導入チューブ及び排出チューブ３３８、３４２は、この具体的実施形態では二腔管である供給ケーブル２２８（図示せず）に流体接続されている。
【０１４０】
遠心機バッグ３２０は、遠心機ロータ２０２が回転している間、遠心機バッグ３２０がロータ基部２０４及びロータカバー２０６に対して固定位置に保持されるように、ロータ基部２０４とロータ２０２のロータカバー２０６との間に上述したように着脱自在に固定される。当業者には明らかであるように、遠心機バッグ２７０を参照しながら上述したように、遠心機バッグ３７０の設計の場合、これを収容するためには、ロータ基部２０４（図１５）及びロータカバー２０６（図１６）には別の実施形態が必要である。
【０１４１】
さまざまな流体媒体内に溶解又は懸濁している１種類又は複数種類の成分を分離及び単離するために、遠心機バッグ３７０を用いることができる。その例として、生体流体から細胞成分を分離することが挙げられ、例えば、全血から血小板を取り出して濃縮するのに、遠心機バッグ３７０が有用である。しかし、これに限定するものではない。したがって、以下に、遠心機バッグ３２０を用いて全血から血小板を分離することについて説明するが、これは例示のみを目的としており、バッグ３２０の使用を何ら限定するものではない。遠心機バッグ３２０内に含まれる全血などの流体媒体の分離を、１段階分離処理と考えることができる。図３６を参照すると、全血の遠心処理は、遠心機２０を回転させながら、導入チューブ３３８を介して入口ポート３４０から全血の一部を遠心機バッグ３２０内に導入することから開始されている。導入チューブ３３８は、供給ケーブル２２８の引入れ腔２３０を介して、抗凝固剤を入れた全血供給源に流体接続されている。全血の一部が遠心機バッグ３２０の外側チャネル３４８内に入ると、全血内成分のそれぞれの密度に基づき、さまざまな分画として外側チャンバ３４８内で径方向に急速に分離する。その例として、赤血球を含んで遠心機バッグ３２０の外周３２２に沿って集まる、最も外側の分画と、血小板及び血漿を含む、それより内側の分画とが挙げられる。全血を続けて注入すると、赤血球量が増加するため、血小板を含む分画が内側に押し込まれる。全血の注入が追加されることで、血小板を含む分画は内側に押し込まれ続け、ついには、チャンバ３４８は赤血球で実質的に満杯になり（その他は血漿）、血小板を含む分画はチャネル３３５、３３７及び出口ポート３４４、３４６付近に押入れられる。上述したように、Ｃ字状シール３２６、３２８の端部はわずかに内側に湾曲しているため、血小板含有分画をチャネル３３５、３３７に送り込み、チャネル３３５、３３７を通過する赤血球量を最小限に抑えやすくなっている。赤血球がチャネル３３５、３３７の入口に近づいた箇所については、以下に詳細に記載するように、目で、又はセンサによりモニタすることができる。血小板含有分画が出口ポート３４４、３４６に接近した時点で、全血の注入を停止し、吸引力又は他の引抜き手段を排出チューブ３４２に適用して、血小板含有分画を出口ポート３４４、３４６を介して引抜く。
【０１４２】
多血小板血漿の大部分を引抜いたら、引入れ腔２３０を全血供給源容器から外し、廃棄物容器に接続する。接続後、遠心機バッグ３２０内に残留している成分を、吸引力を導入チューブ２７６に印可することにより入口ポート３４を通じて吸引し、廃棄物容器へ方向付ける。その後、引入れ腔２３０を全血供給源容器に再接続して、所望量の血小板が採取できるまで、必要に応じて上述した処理を繰返す。
【０１４３】
Ｂ．剛性遠心機容器
以上からわかるように、採取するために分離される分画の表面積を最大限にできれば、分離した成分内に不純物が入り込む危険性を高めることなく（例えば、隣接する成分で、密度のより低い成分が、採取すべき分画領域内に移動し始める可能性がある）、また、遠心機のサイズを不当に拡大することなく収集される分画量を最大限にできるため、表面積を最大限にすることが望ましい可能性がある。
【０１４４】
採取できる所望成分（例えば、多血小板血漿、白血球又は貧血小板血漿）の量を最大限にするため、図４５〜図５２に図示した、流体媒体（例えば、全血）内の成分を分離するための本発明の遠心機容器に対する一の実施形態は、所望分画の表面積（すなわち幅）が水平方向に最大になるように、固定された遠心機容器又は遠心機バッグ内において所望成分（例えば、多血小板血漿）を一定領域に配設されるように設計されている。そこで、本発明のもう１つの実施形態は、図４５に図示する遠心機容器５００を含む。図４５は、剛性容器５００の側部断面図であり、この容器は、頂部端部６１０にて閉じられ、底部端部６２０にて開いている軸方向コア６００を有する剛性環状本体５１０を含む。この容器５００はさらに、遠心処理すべき流体媒体を収容及び保持し、外周５８５及び内周５９０を有する内部収集チャンバ５８０を含む。チャンバ５８０の側部断面プロファイルは、図４６に図示したように、概して、偏心された「８の字」又は「ダンベル」形状である。本明細書でいう「８の字」又は「ダンベル」形状とは、Ａ部分の高さがＣ部分の高さとほぼ同じであり、Ａ部分及びＣ部分の高さが、Ｂ部分の高さより高いことを意味する。さらに、本明細書でいう「偏心」とは、図４５及び図４６に図示したように、Ｂ部分の中心から外周５８５までの幅Ｗ１が、Ｂ部分の中心から内周５９０までの幅Ｗ２より狭いことを意味している。
【０１４５】
剛性容器５００はさらに、コア６００から外周５８５付近まで径方向に延伸し、その遠位端でチャネル５８０の外側領域と流体接続されている導入チャネル５５０と、コア６００からチャンバ５８０の中央により近い地点（すなわち、８の字断面の狭い部分又は「首」）まで径方向に延伸し、その遠位端でチャンバ５８０と流体接続されている排出チャネル５５４とを含む。図４５では、導入及び排出チャネル５５０、５５４をチャンバ５８０の頂部端部と流体接続されたものとして図示しているが、本発明は、これらのチャネル５５０、５５４ともがチャンバ５８０の底部端部と流体連通している実施形態、又はチャネル５５０がチャネル５８０の頂部端部と流体連通し、チャネル５５４がチャンバ５８０の底部端部と流体連通している、又はこの反対構造の実施形態も含むものである。導入及び排出チャネル５５０、５５４は、引入れ腔２３０及び引出し腔２３２を有する二腔管２２８と流体接続されている。剛性容器５００は、適したネジ、留め具など（図示せず）で上方ベアリングアセンブリ１３０の上面１３３に着脱自在に固定されている。引入れ腔２３０を流体媒体供給源に接続することができ、引出し腔２３２を、チャンバ５８０から所望分画を引抜くための吸引手段に接続することができる。
【０１４６】
チャンバ５８０の構造は、抗凝固剤を入れた全血を遠心処理することにより多血小板血漿を最大限収集できるように特に設計されたものである。具体的に言えば、チャンバ５８０は、上から見ると多血小板血漿分画の幅が広く、側部から見るとその深さが浅くなるように構成されているため、より多くの多血小板血漿を引抜くことができる。この特有の構造は、図４４と図４７とを比較するとよくわかる。図４４は、図４３に図示した剛性遠心機容器５００の側部プロファイルを図示しており、ほぼ楕円で、遠心処理により４種類の分画に分離された全血を含むものである。図４４の幅Ｗ３は、採取すべき多血小板血漿分画の水平方向における相対幅を示しており、Ｄ１は、多血小板血漿分画の相対深さを示している。図４７は、本発明による剛性遠心機容器５８０の側部プロファイルを図示しており、上述したように偏心８の字型であり、遠心処理により４種類の分画に分離された全血を含むものである。図４７の幅Ｗ４は、採取すべき多血小板血漿分画２６０の水平方向における相対幅を示しており、Ｄ２は、多血小板血漿分画２６０の相対深さを示している。幅Ｗ４は、図４４の幅Ｗ３より当然広い。これらの図から、図４４に図示した楕円容器から多血小板血漿分画２６０を引抜くと、貧血小板血漿分画２６２が排出チューブ５５４方向に比較的速く移動することが容易にわかる。これに対して、図４７に図示したダンベル状プロファイルのチャンバ５８０では幅Ｗ４が大幅に広くなって、平均深さＤ２が浅くなっているため、貧血小板血漿分画２６２が排出チューブ５５４に到達する前に、多血小板血漿分画２６０の大部分を図４４の場合よりずっと厳密に引抜くことができる。
【０１４７】
多血小板血漿を収集する実施形態では、チャネル５８０を以下のように設計することができる。チャンバ５８０の構造、すなわち、図４６に図示する相対的高さＡ、Ｂ及びＣを、全血を遠心処理して得られる多血小板血漿分画２６０の通常位置に基づいて決定する。例えば、図４５に例示した剛性遠心機容器５００には、３０ｍｌ容量で、回転軸から縁部６３０までで測定される半径がおよそ６５ｍｍであるチャンバ５８０を具備し、同じ回転軸から約３５〜約６０ｍｍの径方向位置でこのチャンバ５８０内に多血小板血漿を収集する。図４６に例示したように、チャンバ５８０が含むこの領域の水平方向における表面積「Ｂ」が約４ｍｍ２になるように、チャンバ５８０の高さを約１０ｍｍとしている。チャンバ５８０をこのように特有な構造にしているため、図４７に例示したように、剛性遠心機容器５００のサイズ全体を不当に拡大せずに、多血小板血漿分画２６０の表面積を最大にできることがわかる。当業者であれば、遠心処理する流体媒体及び収集する細胞分画に応じて、さまざまな形状の設計を使用できることがわかるであろう。剛性容器５００を用いて全血から血小板を採取する処理を、バッグ２２６用に記載した方法と同様に行うことができる。
【０１４８】
剛性遠心機容器５００を、通常の殺菌条件に耐えられる数多くの剛性かつ透明な材料から製造することができる。その例として、アクリル樹脂、ポリカーボネート又は透明な熱プラスチックが挙げられるが、これらに限定するものではない。剛性容器５００を、使い捨てするのに比較的安価な、コストパーフォーマンスのよい材料で製造することが好ましい。
【０１４９】
本発明による剛性容器５００だけでなく、遠心機バッグ２２６、２２６’、２７０及び３２０を用いて、さまざまな流体媒体内に溶解又は懸濁する１種類又は複数種類の成分を分離又は単離することができる。その例として、生体流体から細胞成分を分離することが挙げられ、全血から血小板を取り出して濃縮するのに、上述したように、本明細書に記載する遠心機バッグ及び容器が有用である。しかし、これに限定するものではない。
【０１５０】
別の実施形態において、本発明は、体液及び組織から他の細胞成分を単離するための方法を提供するものである。その例として、１）全血から幹細胞、赤血球、白血球、血小板及び血清、２）骨髄から幹細胞、赤血球、白血球、血小板及び血清、３）全血から軟層、４）骨髄から軟層、５）軟層から幹細胞、６）脂肪組織、筋細胞及び神経細胞から幹細胞を挙げられるが、これらに限定するものではない。この方法は、本発明による剛性容器５００だけでなく、遠心機バッグ２２６、２２６’、２７０及び３２０を含めて、本明細書に記載する遠心機バッグ、ロータ及び遠心機システムのいずれかを用いることができる。
【０１５１】
一の実施形態において、本発明は、全血成分又は幹細胞などのそのサブコンポーネントに対する変速式遠心処理に基づく細胞差異により幹細胞を単離する方法を提供する。本明細書でいう「幹細胞」には、造血、間葉、上皮幹細胞、筋芽細胞、骨芽細を含められるが、これらに限定するものではない。
【０１５２】
別の実施形態において、本発明は、血小板、赤血球及び成長因子から軟層を分離する方法を提供する。この方法は、本明細書に記載した遠心機バッグ、ロータ、遠心機システムのすべてを使用することができるものであり、この方法では、軟層を分離した後、Ｍｅｄｔｒｏｎｉｃ，Ｉｎｃ．により出願された係属中の特許出願に記載されている手段を介して、血小板を活性化することができる。この特許出願内容全体を参照として具体的に本明細書内に引用したものとする。白血球は、ベクター／遺伝子の組合せでトランスフェクトされる。一の実施形態において、以下の実施例では、Ｍｅｄｔｒｏｎｉｃ，Ｉｎｃ．により出願された係属中の米国特許出願に開示されているように、細胞はＬＭＰ−１アデノウイルスを用いてトランスフェクトされる。この特許出願内容全体を参照として具体的に本明細書内に引用したものとする。白血球をトランスフェクトする方法の例として、機械的混合、エレクトロポレーションなどが挙げられる。トランスフェクトされた軟層は、血小板ゲルと組み合わされると、半固体の「組織プラグ」を形成する。組織プラグ形成の目的は、宿主又は組織増殖用半ビボ生物反応装置内における自家由来組織の再編、「組織プラグ」からのタンパク質の分泌、又はこれら２つの組合せである。
【０１５３】
別の実施形態において、本発明は、蛍光又は磁気タグで標識された細胞を分離するための方法を提供する。この方法は、本明細書に記載した遠心機バッグ、ロータ、遠心機システムのすべてを使用することができるものである。
【０１５４】
別の実施形態において、本発明は、骨髄細胞採取方法を提供する。この方法において、骨髄細胞は、無菌移植を目的に、遠心機バッグ、又は本発明の容器から直接抜出される。
【０１５５】
上述したように、単離された軟層細胞、及び／又は、本発明の方法により単離された赤血球、白血球、血小板及び血清を複数種類の治療法に用いることができる。その例として、細胞治療及び遺伝子治療が挙げられるが、これらに限定するものではない。
【０１５６】
体液及び組織から細胞成分を単離するために本発明による方法を用いると、以下の利点が得られる。
１．軟層細胞単離の簡易化
２．さまざまな細胞成分を単離するためのより安定した方法の提供
３．処理時における人為エラー発生率の低下
４．緊急治療室内に複数設備を集結させる必要性の削減
５．ＬＭＰ−１アデノウイルスを用いた細胞トランスフェクトに対する標準感染多重度（ＭＯＩ）の提供
６．ＬＭＰ−１効力の安定性の改良
７．ＬＭＰ−１に対する自家由来生物学的キャリヤの提供
【０１５７】
Ｃ．複雑な内部幾何形状を有する遠心機ロータ
可撓性遠心機バッグ２２６を支持するための、本発明による遠心機ロータの別の実施形態が、図４８〜図５２に例示されている。概して、また図４８及び図４９を参照すると、遠心機ロータ７５５は、下方チャネル７８０を有するロータ基部７６０（図４８、図５０及び図５２）と、上方チャネル７８２を有するロータカバー７７０（図４９及び図５１）とにより画定されている。ロータ７５５の環状内側チャンバ７８４（図４８）は、その下方及び上方チャネル７８０、７８２により画定されており、以下で説明するように、抗凝固剤入り全血を遠心処理することにより収集される多血小板血漿量を最大限にするように特に設計され、偏心された略８の字の断面形状となっている。
【０１５８】
図５１及び図５２に例示したように、ロータ基部７６０は、***した環状リム７７５と、ロータ基部７６０の内側にて軸方向に配置されて***している柱状部７８６とを含む。***した柱状部７８６はさらに、その直径方向に延伸する溝７９０（図５２）を有する。リム７７５の高さは、柱状部７８６の高さと同じになっている。図５１に図示したように、ロータカバー７７０は、***した環状リム７７７と、カバー７７０の内側にて軸方向に配置されて***している柱状部７８８とを含む。***した柱状部７８８はさらに、その直径方向に延伸している溝７９２（図５２）を有する。リム７７７の高さは、柱状部７８８の高さと同じになっている。ロータ基部７６０及びロータカバー７７０を、好ましくは、剛性で透明な材料を使用して製造する。その種類は何種類でもよい。材料の例として、アクリル樹脂、ポリカーボネート、又は透明な熱プラスチックが挙げられるが、これらに限定するものではない。
【０１５９】
使用時に遠心機ロータ７５５を組み立てる際、中央コア２４２を有し、可撓性でドーナッツ形状の遠心機バッグ２２６をロータ基部７６０内に配置する。このとき、中央の柱状部７８６を遠心機バッグ２２６のコア内に延在させ、バッグ２２６の導入及び排出チューブ２４８、２５０が溝７９０内に収まるようにすることが好ましいが、必ずしもそうでなくともよい。ロータカバー７７０は、溝７９０と７９２とが位置合わせされて導入及び排出チューブ２４８、２５０を溝７９２内に収められるように、ロータ基部７６０上に重ねられる。一の実施形態において、カバー７７０を基部７６０に上述したように固定すると（例えば、ネジ、クランプなどで）、リム７７５と７７７とが互いに密着し、柱状部７８６と７８８とが、好ましくは、互いに密着して、チャンバ７８４（図４８）が形成される。別法として、カバー７７０を基部７６０に上述したように固定すると、バッグ２２６の内周が、柱状部７８６と７８８とを互いに物理的に接触させないように、柱状部７８６と７８８との間に固定される。
【０１６０】
略平坦な可撓性遠心機バッグ２２６を、流体媒体（例えば、全血）を流入する前にチャンバ７８４内に設置すると、バッグはチャンバ７８４内全体には広がらないが、遠心機ロータ７５５が回転するにつれて、径方向に延伸する平坦な形状となる。しかし、導入チューブ２４８から、バッグ２２６が実質的に完全に満杯になるように十分な量の流体媒体（例えば、全血）が可撓性バッグ２２６内に導入されると、充填された遠心機バッグ２２６は、チャンバ７８４の形状に追従して、偏心された８の字断面形状となることを理解されたい。
【０１６１】
チャンバ７８４の偏心８の字形状は、剛性バッグ５００の形状とほぼ同じである。同じ理由から、チャンバ７８４の形状（及び充填されたバッグ２２６の形状）も偏心８の字形状となり、多血小板血漿分画の幅は、断面を楕円形とする充填バッグ（例えば、図４６及び図４７参照）の幅に対して大幅に増加する。
【０１６２】
上述したように、いくつかの方法を用いて、遠心機バッグからの所望分画（例えば、多血小板血漿。ただし、これに限定するものではない）の採取を判断することができる。例えば、多血小板血漿（色の薄い分画）を含む同心円とその外側で赤血球を含む赤い同心円とを目で観察して、多血小板血漿分画が分離されたことを確認することができる。この場合、この分画（１種類又は複数種類）が分離されたら、多血小板血漿を屈曲部品１６０を用いて遠心機バッグ２２６から引抜き、適したコレクタへと多血小板血漿を方向付けることができる。
【０１６３】
別法として、以下に詳細に説明するように、センサを組入れて、多血小板血漿分画の存在を検出してもよい。
【０１６４】
上述から、本発明による遠心処理システム１０と遠心機ロータ及びバッグとに、本発明の各態様による患者の全血からの多血小板血漿、白血球、貧血小板血漿又は赤血球の採取に適した複数の特徴があることがわかる。例えば、上述したように、ヘマトクリット値（すなわち、百分率で表される、血液体積に対する赤血球体積の比）には個人間で差がある。したがって、具体的サンプル内に含まれる赤血球量に応じて、遠心処理を行った後に遠心機バッグ内にてさまざまな血液成分が分布する厳密な径方向位置も異なる。本発明による遠心機バッグは、全血を遠心機バッグ内に導入するだけでなく、赤血球分画の一部又は全部を必要に応じて引抜いて、採取すべき分画位置を排出チューブ領域内へと移動させることのできる導入チューブを設けることにより、この問題を克服したものである。この特徴は、遠心機バッグ２２６、２７０、３２０及び５００に具備されている。ヘマトクリット値が一定ではないことによる問題を克服する、本発明による遠心機バッグのもう１つの実施態様が、複数本の排出チューブを有する遠心機バッグ２２６’である。
【０１６５】
さらに、本発明による遠心処理システム１０では、遠心機が回転している間に、処理を中断することなく、材料を周囲環境に長時間暴露することなく、流体供給源（例えば、手術前又は手術時に患者から採った抗凝固剤入り全血）と収集容器（すなわち、血小板ゲルの調製用容器）とに接続された二腔管などを介して材料を提供及び取り出すことができるため、このシステム１０は事実上、処理全体にわたって所望程度の無菌状態を維持できる可能性を高めた閉塞システムとなっている。
【０１６６】
さらに、分離された分画を移動させ、採取された分画の表面積を最大にするという上述の特徴と合わせて、遠心処理システム１０が携帯サイズであることにより、これより大きい従来の遠心機に比較して、自家由来血小板ゲルの処理性能が高くなっている。
【０１６７】
遠心処理システム１０がオンライン採取性能を備えているため、流体媒体の導入と分離された分画の取出しとを上述したように調節することにより、多血小板血漿、白血球、赤血球及び貧血小板血漿を連続的かつ動的に分離及び収集することができる。また、本発明による可撓性及び剛性遠心機バッグ及びその中身の方向（例えば、概して径方向に延伸する）は、さまざまな成分を分離して採取するまでの変換過程においても、大幅に変更されることはない。また、流体媒体の追加やそのさまざまな分画の取出し時に遠心処理システム１０を減速又は停止させる必要がないため、本発明による遠心機バッグの中身を攪拌する必要も低減又は回避される。
【０１６８】
さらに、本発明による可撓性及び剛性遠心機バッグの通常の配向（例えば、実質的に水平）は、遠心処理時における遠心機バッグの配向と同様に、所望する全血分画の取出し時にも同じままに維持されるため、遠心処理により得られた分離状態を維持することが一層容易となる。したがって、得られた分離状態に悪影響を及ぼすほどに分画を乱してしまう危険が少なくなる。
【０１６９】
以上、本発明を全血成分の分離について説明してきたが、本明細に記載する方法及び装置を他の流体媒体の成分分離にも使用できることを理解されたい。その例として、密度勾配媒体を含む全血、すでに画定された４種類の全血成分の細胞成分又はサブセットが挙げられるが、これらに限定するものではない。
【０１７０】
上述したように、血液の分離及び材料の取扱いを手動で制御することもできるが、本発明の別の実施形態では、分離及び材料取扱い処理の少なくとも一部が自動化されている。図５３を参照すると、自動処理システム８００が例示されている。この処理は概して、血液の導入ステップ、所望成分の分離ステップ、及び分離された成分の取出しステップを自動制御するように構成されている。遠心処理システム８００に関する以下の説明は、血液サンプル内の血小板を分離する例であるが、このシステムにより、血液や他の流体から他の成分又は分画を分離するのに有用な特徴も得られる。こうした他の使用法も本開示内容の範囲内である。同様に、遠心処理システム８００における使用例として説明する具体的な成分は例示のみを目的としており、本発明を何ら制限するものではない。同時に、医療装置分野の当業者であれば、別の装置も明白であろう。
【０１７１】
図５３に図示した実施形態では、遠心処理システム８００は、注入ポンプ８１０に流体ライン８０４で接続された血液供給源８０２を含む。流体ライン８０４には、電磁弁又は一方向逆止め弁などの弁８０６が具備されて、注入ポンプ８１０の操作時に血液供給源８０２との間の流動を制御できるようになっている。注入ポンプ８１０は、流体ライン８１８を介して血液供給源８０２から遠心機８２０まで血液を注入するように操作可能となっている。血液供給源８０２内の血液のすべて又は選択部分が遠心機８２０の血液リザーバ８２４内に注入されると、注入ポンプ８１０のスイッチは切られて、血液供給源８０２が弁８０６で隔離された状態となる。遠心処理システム８００の操作中（例えば、分離された成分の取出し時、又は取出し後）、追加血液を供給するために、注入ポンプ８１０を再度動作させることができる。
【０１７２】
遠心機２０に好ましくは、導入された血液を収集するように、ロータ内２０２内に、バッグ２２６、２２６’、２７０又は３２０などの可撓性遠心機バッグを具備する。別法として、ロータ２０２を、偏心８の字状チャンバを有する剛性容器として、上述したように血液を直接収集することもできる。したがって、以下に説明する実施形態は、バッグ２２６を有する遠心機を例示したものであるが、本明細書内に開示した別の遠心機バッグも同様に使用可能であることを理解されたい。上述した遠心機２０は、内側中間シャフトギアアセンブリ１０８を有する。このアセンブリ１０８により、ロータアセンブリ２００、特にロータ２０２を、ロータ２０２内に含有されているさまざまな構成要素や血液成分を分離させる遠心力の発生に適した回転速度で回転させる原動力が得られる。駆動アセンブリ８２２に、遠心機２０の内側駆動構成要素に接続されたドライブシャフトを具備する電気モータなど、原動力の発生に有用ないくつかの装置を含めることができる。一の好適な実施形態において、この駆動アセンブリ８２２は、遠心機２０の外側部分に装着されたベルト、具体的に言えばタイミングベルトリング４４を駆動する電気モータを含む。成分を適切に分離するため、その回転速度は通常、約０ＲＰＭ〜５０００ＲＰＭであり、本発明の一の実施形態における回転速度は、約０ＲＰＭ〜５０００ＲＰＭに維持される。
【０１７３】
上記に詳細に説明したように、成分はその具体的な密度に応じて、ロータ２０２の中心軸Ａから距離の異なる径方向位置又はベルトを構成する。例えば、重い赤血球は通常、外側領域に分離され、それより軽い血小板はロータ２０２の中心軸に近いほうの領域内に分離される。こうした成分領域それぞれの間には、流体密度が高いほうから低いほうへと測定可能に変化する界面があるため（すなわち、外側領域から内側領域へと密度を測定した場合）、遠心処理システム１０のいくつかの実施形態では、この密度界面を用いて、成分領域の位置を特定する（これについては、以下で詳細を説明する）。一の好適な実施形態において、駆動アセンブリ８２２は、遠心処理システム１０の動作中、成分の分離状態を保つために、遠心機２０を回転させ続ける。
【０１７４】
ロータ２０２内で血液が分離されたら、汲出しポンプ８３０が、選択成分を引出し腔８２８を介してロータ２０２から汲み出すように操作される。上述したように、使い捨て式血液遠心機バッグ２２６の特徴として、ロータ２０２内に支持される遠心機バッグを好ましくは、多血小板血漿領域内にある血小板など、分離された血液成分を、引出し腔２３２を遠心機バッグ２２６の中心軸から径方向の一定距離に配設することにより選択的に取り出すことができるように構成する。好ましくは、引出し腔の径方向長さ又は径方向位置を、分離された所望成分の径方向長さ、又は分離される成分の予想位置と一致するように選択する。こうすることにより、汲出しポンプ８３０のみが（又は、実質的にこのポンプのみが）、その径方向距離にある具体的な成分（例えば、容器４００内の血小板）を取り出すことになる。遠心機バッグ２２６から具体的成分のすべて又は所望量が取り出されたら、汲出しポンプ８３０の動作は停止するため、新たな分離処理を開始させることができる。別法として、一の好適な実施形態において、汲出しポンプ８３０の動作停止後、又は汲出しポンプ８３０の動作中に注入ポンプ８１０を再度動作させて、追加血液を遠心機バッグ２２６内に注入する。
【０１７５】
出口ポートを径方向距離又は位置に固定する時点で懸念されることは、各血液サンプルに異なる成分がさまざまなレベル又は量で含まれている可能性があることである。このため、遠心機バッグ２２６内における具体的成分の径方向距離や位置又は成分領域は、血液サンプル毎に少なくともわずかに変化する。さらに、成分レベルがさまざまであることから、成分領域の広さも変化するため、他の成分を混合することなく遠心機バッグ２２６から汲出しポンプ８３０で汲み出すことのできる量も、血液サンプル毎に異なる。また、汲出しポンプ８３０で血液を取り出した後又は取り出している間に血液が追加される分離システム１０の実施形態では、成分領域の位置も変化する。
【０１７６】
分離される具体的成分の位置が変化することに対処するため、遠心処理システム１０を好ましくは、分離された成分の位置を調節して、分離された成分の径方向位置を出口ポートの径方向位置と実質的に位置合わせするように構成する。例えば、遠心処理システム１０を用いて、血液サンプルから血小板を収集することができる。この例では、遠心処理システム１０に好ましくは、隔離弁８１６（例えば、電磁弁又は一方向逆止め弁）を具備した流体ライン８１４を介して注入ポンプ８１０に接続された赤血球コレクタ８１２を含める。別法として、ポンプや注入器を弁として作用させてもよい。注入ポンプ８１０は、流体を遠心機８２０との間の２方向で流体ライン８１８を介して選択的に注入するように構成されている。したがって、注入ポンプ８１０を可逆方向式蠕動ポンプ又は他の２方向式ポンプにしてもよい。同様に、２本の流体ライン８０４及び８１４を概略的に図示しているが、本発明を実施するために、注入及び排出ラインとして単一流体ラインを用いてもよい。
【０１７７】
遠心機バッグ２２６から流体を取り出すために注入ポンプ８１０を動作させることは、分離された所望成分の径方向位置を遠心機バッグ２２６の排出チューブ２５０及び導入チューブ２４８と位置合わせするのに有用である。血小板又は多血小板血漿を内腔２３２及び２３０にそれぞれ接続された排出チューブ２５０及び導入チューブ２４８と位置合わせした場合、導入チューブ２４８を排出チューブ２５０より長い径方向距離に配置することが好ましい。注入ポンプ８１０により引入れ腔２３０に吸引力が印可されると、赤血球が遠心機バッグ２２６から赤血球コレクタ８１２内に汲み出される。赤血球が取り出されると、分離された血小板（すなわち所望の成分領域）が、遠心機バッグ２２６内にて径方向外側の新しい位置に移動する。分離された血小板又は血小板領域の中央軸からの径方向距離が伸びて、遠心機バッグ２２６が含む排出チューブ２５０の径方向距離又は位置と一致するまで、注入ポンプ８１０が動作する。所望成分領域と排出チューブ２５０とが実質的に位置合わせされたら、汲出しポンプ８３０を動作させて、位置合わせされた成分領域内に含まれる成分のすべて又は選択量を取り出す。
【０１７８】
本発明に自動化構造を具備するため、遠心処理システム１０に、注入ポンプ８１０、遠心機２０、駆動アセンブリ８２２及び汲出しポンプ８３０の操作をモニタ及び制御するためのコントローラ８５０を含める。自動操作を効率よくモニタ及び制御するために、遠心処理システム１０内に数多くの制御装置を用いることができる。一の実施形態において、コントローラ８５０は、デジタル信号プロセッサ、メモリ、入力及びフィードバック信号の受信及び制御信号の送信用入出力（Ｉ／Ｏ）インターフェースを含む中央処理ユニット（ＣＰＵ）を備えたコンピュータと、入力信号を処理して制御信号を出力するためのソフトウェア又はプログラミングアプリケーション（信号調節器及び／又は増幅器の有無にかかわらず）とを含む。コントローラ８５０は、信号ライン８６０、８６２、８６４、８６６及び８６８により遠心処理システム１０の装置に通信可能に連係されている。これらのラインには、信号調整装置や、コントローラ８５０と遠心処理システム１０の構成要素との間を適切に交信させられる他の装置を含めることができる。
【０１７９】
血液供給源容器８０２に血液が供給されて、操作者がスタートボタンを押すと、コントローラ８５０が信号ライン８６４を介してモータコントローラを含むことのできる駆動アセンブリ８２２に制御信号を伝送する。これにより、遠心機２０が回転し始めて、遠心機バッグ２２６内の血液成分が、径方向位置の領域（例えば、多血小板血漿領域）内に分離される。遠心機の回転開始後、又は駆動アセンブリ８２２の動作と同時に、コントローラ８５０は制御信号を信号ライン８６０から注入ポンプ８１０に出力して、血液供給源容器８０２から遠心機２０の遠心機バッグ２２６への血液注入を開始させる。遠心処理システム８００の実施形態によっては、駆動アセンブリ８２２は、複数種類の速度で、又は一定範囲外の速度で動作可能である。さらに、単一速度によるドライブシャフトを用いた場合でも、遠心機２０の回転速度は変化する可能性がある。この問題に対処するため、遠心処理システム１０に、速度検出器８５８を含めることができる。この検出器は、遠心機バッグ２２６の動作を少なくとも定期的に検出し、フィードバック信号を信号ライン８６６からコントローラ８５０に伝送するものである。コントローラ８５０は、その信号を受信すると、遠心機２０の回転速度を算出し、適用可能であれば、制御信号を駆動アセンブリ８２２に送信して、その動作速度を加速又は減速することで、遠心機バッグ２２６の回転速度を所望通りにする。
【０１８０】
遠心機バッグ２２６内に成分分離が終了した時点を決定するために、遠心機２０及び駆動アセンブリ８２２構造の差異を考慮して所望レベルの成分分離を行うための最短回転時間を決定できるように、遠心処理システム８００を基準化することができる。この実施形態では、コントローラ８５０に、好ましくは、駆動アセンブリ８２２により遠心機２０が回転した時間を測定するように動作する（コントローラ８５０から駆動アセンブリ８２２への制御信号伝送時から測定を開始するなどにより）タイマー機構８５６を含める。測定された回転時間が、具体的な遠心機２０及び駆動アセンブリ８２２に対して基準化された回転時間と一致していれば、タイミング機構８５６はコントローラ８５０に、遠心機バッグ２２６内の分離が終了したことを通知する。この時点で、コントローラ８５０は、制御信号を信号ライン８６０から注入ポンプ８１０へと伝送して、その動作を停止させ、汲出しポンプ８３０にも信号ライン８６８から制御信号を伝送して、遠心機バッグ２２６の内腔２３２の出口ポートに隣接する成分領域に分離された成分を流体ライン８２８から汲み出す動作を開始させる。コントローラ８５０が回転時間を利用する別の実施形態では、コントローラ８５０が速度検出器８５８からの速度フィードバック信号を用いることにより、所望レベルの成分分離を行うように、必要に応じて回転時間を調節する。例えば、遠心処理システム１０を、いくつかの回転速度に対して基準化して、コントローラ８５０が算出された回転速度を元に探索できるように、回転速度に対応する最短回転時間を参照用テーブルに格納することができる。細胞成分の位置及び／又は濃縮を最適化するために、手動により、又は自動的に回転速度を変えることができる。
【０１８１】
分離操作時に、成分分離領域の位置は変化していくため、遠心処理システム８００の一の好適な実施形態は、遠心機バッグ内の成分分離をモニタし、ライン８６２でコントローラ８５０までフィードバック信号を伝送するためのセンサアセンブリ８４０を含む。当技術分野における当業者であればわかるように、流体サンプル、特に血液サンプル内における特定成分の有無を検出するためのセンサ装置は数多く存在している。こうした装置の多くは、赤外線、レーザ又は白熱光などの放射エネルギの供給源と、それと互換性があり、電気信号を出力することにより受信エネルギに反応する放射エネルギ感応式検出器とを含む。簡単に言えば、放射エネルギビームを通過させる材料の密度にばらつきがあることから、検出される信号が測定可能な状態でさまざまに異なっているため、こうした放射エネルギ装置が有用となる。本発明によれば、センサアセンブリ８４０に、周知の型の放射エネルギ供給源、検出器装置、及び血液などの流体に含まれる構成要素の測定に有用な他のセンサ装置のいずれをも含めることができる。
【０１８２】
センサアセンブリ８４０の供給源及び検出器を、好ましくは、遠心処理システム８００内に配置して、遠心機バッグ２２６をモニタし、遠心機バッグ２２６の出口ポートの径方向位置と一致する径方向位置にある具体的な血液成分の存在を識別できるようにする。一の実施形態において、この供給源からの放射線ビームは、出口ポートの径方向位置と少なくとも一部が重なる径方向位置を含んで遠心機バッグ２２６内に設けられた「窓」内を通過する。遠心処理システム８００の操作時、センサアセンブリ８４０の検出器から出力されるフィードバック信号により、コントローラ８５０は、密度界面が窓内に入った時点を確認することができる。これは、いくつかの理由から実現可能となっている。導入チューブ２４８を介して遠心機バッグ２２６から流体を取り出すために赤血球が注入ポンプ８１０の動作により取り出されると、バッグ２２６内の成分位置が移動する。また、密度のより高い成分が遠心機バッグ２２６に追加されると、特定の血液成分が径方向内側に押し込まれるため、密度変化が起こる可能性がある。全血の遠心処理では、これは、注入ポンプ８１０の動作により血液が追加されて、赤血球が血小板領域より径方向外側の領域に集合すると起こる。
【０１８３】
密度界面のさまざまな移動を考慮して、放射線供給源の窓を、別法として、遠心機バッグ２２６の排出チューブ２５０の位置から径方向内側に配設してもよい。窓を排出チューブ２５０から内側に配置することにより、汲出しポンプ８３０が、モニタした領域の特定成分をほぼすべて除去した時点、及び／又は注入ポンプ８１０が一定量のより密度の高い成分を取り出して、モニタした領域を径方向外側に移動させた時点をコントローラ８５０が認識できる。すると、コントローラ８５０は、排出チューブ２５０に入る不要成分（密度のより低い成分）の量を最小限に抑えるように、制御信号を送信して汲出しポンプ８３０又は注入ポンプ８１０（適切な一方）のスイッチを切るように機能することができる。別法として、センサアセンブリ８４０に２つの放射線供給源及び検出器を具備して、センサアセンブリ８４０の第２の窓を、排出チューブ２５０から径方向外側の一定距離に配置することができる。２つの感知窓を設けることにより、センサアセンブリ８４０は、（赤血球が追加された場合など）排出チューブ２５０に向けて径方向内側に移動する密度界面に関するコントローラ８５０情報を提供するように動作することができる。これに応答して、コントローラ８５０は、注入ポンプ８１０に対する制御信号を生成して、赤血球などの密度のより高い成分を遠心機バッグ２２６から汲み出させるように機能する。２つの感知窓により、コントローラ８５０は外向きの密度界面の移動も検出することができるため、コントローラ８５０は汲出しポンプ８３０を閉じる（及び／又は注入ポンプ８１０の吸引処理を停止させる）かつ／又は注入ポンプ８１０を始動して血液を追加させることができる。
【０１８４】
遠心処理システム８００の操作をさらに明確にするため、図５４に、コントローラ８５０が生成する制御信号とセンサアセンブリ８４０からのフィードバック信号の受信とのタイミング及び関係が例示されている。この実施形態において、センサアセンブリ８４０の放射線検出器は、遠心機バッグ２２６の排出チューブ（汲出しポンプ８３０への入口）に隣接されて、排出チューブ２５０を流動する流体の密度変化を感知できるようになっている。図示のように、遠心処理システム８００の操作は時間ｔ０で開始される。この時点で、注入ポンプ８１０、汲出しポンプ８３０及び遠心機駆動アセンブリ８２２はすべて、スイッチが切られているか、動作していない状態である。時間ｔ１になると、コントローラ８５０が、操作者の入力に応答して、又は血液供給源８０２が適切に充填されたことを感知して動作を開始し（センサは図示せず）、遠心機バッグ２２６を回転させるように遠心機駆動アセンブリ８２２の動作を開始させるための制御信号をライン８６４に出力する。実施形態によっては、ライン８６４を通過する制御信号に、駆動アセンブリ８２２の操作速度を初期設定する回転速度情報が含まれる。これと同時に、又は選択した遅延時間にて、流体ライン８１８により遠心機バッグ２２６まで流体を注入するように構成された注入ポンプ８１０を動作させるように、コントローラ８５０はライン８６０に制御信号を出力する。センサアセンブリ８４０は、ライン８６２により初期密度フィードバック信号をコントローラ８５０に提供する。コントローラ８５０はこの信号を処理して、排出チューブに隣接する初期又は分離前密度を決定することができる。別法として、コントローラ８５０を、遠心機バッグ２２６内に汲み出す成分を各領域に分離できるように設定された遅延時間（上述したように、基準化された最短回転時間など）の経過後（タイマー機構８５６の測定による）、センサアセンブリ８４０からのフィードバック信号を要求する構成にしてもよい。
【０１８５】
時間ｔ２にて、コントローラ８５０は、密度のより高い血小板を含む領域などの所望密度を有する領域を、センサアセンブリ８４０の検出器に隣接（すなわち、排出チューブに隣接）させるように機能する。この位置合わせを行うため、コントローラ８５０は、制御信号をライン８６０から注入ポンプ８１０に送信して、流体の遠心機バッグ２２６への注入を停止させ、弁８０６を閉じて弁８１６を開くことで注入方向を反対向きにし、特定の所望成分より密度の高い成分の遠心機バッグ２２６からコレクタ８１２への汲出しを開始させる。例えば、遠心処理システム１０が、血小板又は多血小板血漿を分離及び収集するように動作している場合、時間ｔ２にて、注入ポンプ８１０は、導入チューブ２４８にて吸引力を遠心機バッグ２２６に印可することで、赤血球分画を汲み出すように動作する。このように密度のより高い成分が注入ポンプ８１０で取り出されてしまうため、時間ｔ３では、排出チューブ２５０に隣接する流体の密度が変化し始め、コントローラ８５０に送信されるセンサフィードバック信号の大きさが変化する。センサフィードバック信号の大きさは、時間ｔ４にて、コントローラ８５０がフィードバック信号を処理して、隣接している流体の密度が所望範囲内であると決定するまで（使用されている特定センサ及び収集される材料に応じて、より強く、又はより弱く）変化する。この移行を、密度の異なる２領域間の界面が、センサアセンブリ８４０の検出器位置を通過する時点で検出できると考えることも可能である。
【０１８６】
時間ｔ４にて、分離された所望成分の領域が排出チューブ２５０と位置合わせされると、コントローラ８５０は制御信号をライン８６０に送信して、注入ポンプ８１０の動作を停止させる。時間ｔ４にて、又はその後のいずれかの時点で、コントローラ８５０は制御信号をライン８６８に出力して、汲出しポンプ８３０を動作させ、遠心機バッグ２２６の排出チューブ２５０に吸引力を印可して、遠心機バッグ２２６から、多血小板血漿分画などの所望成分を取り出す。時間ｔ５にて、貧血小板血漿がセンサアセンブリ８４０のサンプリングウィンドウに入ってきた場合など、排出チューブ２５０付近の流体密度が変化し始めるのにつれて、センサフィードバック信号の大きさが再び変化し始める。時間ｔ６では、排出チューブ２５０に隣接する、及びサンプリングウィンドウ内にある流体の密度が所望密度範囲外となる（例えば、流体が含む血小板又は他の所望流体成分の百分率が所定より低い）。これに応答して、コントローラ８５０が制御信号をライン８６８に送信して、汲出しポンプ８３０の動作を停止させる。無論、時間ｔ６前のいずれの時点でも、制御信号を汲出しポンプ８３０に送信するようにコントローラ８５０を動作させることができる。その例として、時間ｔ５の後で、隣接する流体の密度が変化し始めたが時間ｔ６にはまだ達していない時点、又は取り出した量に基づいた時点が挙げられる。時間ｔ６後になればいつでも、コントローラ８５０を動作させて、遠心機駆動アセンブリ８２２の動作を停止させてもよい。さらに、上述したように、時間ｔ６経過後、注入ポンプ８１０で血液などの流体を追加するように動作させながら、分離処理システム８００の動作を繰返すことができる。別法として、注入ポンプ８１０及び汲出しポンプ８３０を同時に動作させて、時間ｔ４の後、新たに収集された成分量に対応する量の血液を追加して、時間ｔ４における界面検出と時間ｔ６における密度範囲超過検出との間の時間を延長してもよい。
【０１８７】
自動処理システム８００に関する上述において、センサアセンブリ８４０の概略を図５３に示したが、放射エネルギ供給源及び検出器の位置は、遠心機バッグ２２６内における血液成分の分離状態を正確に測定するのに有用であれば、処理システム８００内のいずれでもよいことに留意されたい。例えば、この供給源及び検出器を、遠心機バッグ２２６の隣接する遠心機２０内に配設することができるが、この実施形態の場合、供給源及びセンサへの適切な信号及び電力ライン接続の供給と、遠心機及びセンサアセンブリ８４０の一部の回転とについて問題が起こる可能性がある。したがって、処理システム８００の一の好適な実施形態は、血液リザーバ内に含まれる流体の密度を効率よく決定しつつ、供給源及び検出器を含むセンサアセンブリ８４０を外部に配置して、遠心機２０の構造を簡易化するものである。
【０１８８】
図５５は、遠心処理システム８００の外部センサ式実施形態の関連構成要素を示す略側面図である。一般に、遠心機２０は、ロータ延出部分８８０と、駆動アセンブリ８２２に接続された駆動部分８８１（接続部は図示せず）とを含む。遠心機２０もロータ延出部分８８０も、遠心機２０の中心軸又は回転軸Ｃを中心に回転する。遠心機２０の内側伝動構造について以下で詳述するように、ロータ延出部分８８０まで延びる流体注入及び排出ラインのねじれを制御するため、駆動部分８８１は、リザーバ延出部分８８０に対して２：１の比率（又は他の適した比率）で回転する。遠心機２０の内側伝動構造により、遠心機２０は、分離時に赤血球などの密度の高い成分が密集しすぎて、遠心機から汲み出す又は取り出すことがさらに難しい固体高密度材料となってしまう危険性を抑えつつ、密度の異なる成分を分離させる回転速度を有効に得ることができる。
【０１８９】
図５５を再度参照すると、ロータ延出部分８８０は、遠心機２０の上方端部に位置して、遠心機バッグ２２６又は他の入れ物を具備している。好ましくは、ロータ延出部分８８０を、プラスチックなどの透明又は一部透明な材料で製造して、流体密度を感知できるようにする。その種類は何種類でもよい。ロータ延出部分８８０は、中心軸Ｃから径方向外側に測定して、遠心機２０の外側縁部から一定距離ｄだけ延出している。距離ｄを好ましくは、収集すべき多血小板血漿分画などの所望成分を、やはり遠心機２０から外側に延出している遠心機バッグ２２６内の１地点において１領域内に容易に分離できるように選択する。これに関して、ロータ延出部分８８０も、遠心機バッグ２２６がロータ延出部分８８０内にてその外周付近の地点まで延伸するように構成されている。ロータ延出部分８８０を延出させる距離ｄを好ましくは、位置合わせ処理（上述）を可能にし、密度のより高い成分を取り出すように注入ポンプ８１０を動作させる必要性を制御するように選択する。一の実施形態において、通常の血液サンプルを分離する場合、血小板を多く含む領域の中央が、遠心機２０の周縁部から距離ｄのほぼ半分にくるように距離ｄを選択する。
【０１９０】
図５５に図示したように、センサアセンブリ８４０全体が、遠心機２０の外部に配置されている。センサアセンブリ８４０は、ロータ延出部分８８０及びその中に具備されている遠心機バッグ２２６内を通過する放射エネルギビーム８８４の放出源８８２を含む。上述したように、この場合も、放射エネルギ源８８２を、流体密度センサに有用なものであれば、ほぼすべてのエネルギ源（例えば、白熱光、ストロボ、赤外光、レーザなど）を使用することができ、使用する検出器やエネルギの具体的種類は、エネルギ源８８２の外部位置ほどに重要ではない。センサアセンブリ８４０はさらに、遠心機バッグ２２６を通過した後に衝突してくるビーム８８８を受信又は感知する検出器８８６を含む。検出器８８６として、エネルギ源８８２と互換性があり、感知したエネルギビーム８８８に応答してフィードバック信号を送信するものを選択する。この検出器８８６（コントローラ８５０及びその処理性能と組み合わせて）は、エネルギ源８８２と検出器８８６との間の遠心機バッグ２２６内に含まれる流体の密度検出に有用である。特に、センサアセンブリ８４０は、流体密度の変化及び密度の異なる流体間の界面の認識に有用である。その例として、分離された赤血球含有領域と多血小板血漿分画領域との間の界面や、多血小板血漿領域と貧血小板血漿領域との間の界面が挙げられる。
【０１９１】
エネルギ源及び検出器の組合せによっては、１つのサンプリングポイントではなく、サンプリングウィンドウが設けられる（ただし、本発明の一部では、１つの径方向長さにより画定される窓と同様に１つのサンプリングポイントが有用）。サンプリングウィンドウは、中心軸ｃから外径までの長さＯＵＴと、内径ＩＮまでの長さとにより画定される。上記からわかるように、多くのエネルギ源及び検出器構造において、サンプリングウィンドウのサイズは１地点とあまり変わらないほどに小さく、その断面形状は無論、さまざまに変更可能である（例えば、円形、四角形、矩形など）。上述したように、エネルギ源８８２及び検出器８８６により形成されるサンプリングウィンドウが、分離処理時に形成され、血小板などの特定密度成分を含む領域の径方向位置の少なくとも一部上に重なるように、センサアセンブリ８４０をリザーバ延出部分８８０及び遠心機２２６に対して配設することが好ましい。この位置を、数多くの血液（又は他の流体）サンプルが完全に分離され、特定領域の径方向距離が測定される、遠心機２０の基準化処理を通じて決定された基準化位置にしてもよい。サンプリングウィンドウが、選択した分離領域の予想位置と重なるようにエネルギ源８８２及び検出器８８６をロータ延出部分８８０に対して配設した状態で、決定又は基準化された位置を、センサアセンブリ８４０に対する初期固定位置として用いることができる。無論、サンプルに含まれる内容物にはさまざまな成分が含まれる可能性があり、それにより、この初期位置合わせが不正確になり、遠心処理システム８００を操作しても領域の不整合や移行が起こり得る。したがって、センサアセンブリ８４０で形成したサンプリングウィンドウの初期位置決めのために、好ましくは、上述した位置合わせ処理を用いる。
【０１９２】
別の一の実施形態において、センサアセンブリ８４０は分離システム８００内の固定位置に配置されておらず、分離操作時にこれを位置決めすることができる。例えば、センサアセンブリ８４０を、その距離ＩＮ及びＯＵＴを変えるために、遠心機２０に向けて径方向内側及び外側に摺動させられる基部上に取り付けることができる。この摺動動作は、使い捨てバッグを装着する、又は取り出すなど、遠心機バッグ２２６に手が届くという面で有用である。操作時、新しいバッグを遠心機バッグ２２６内に挿入するまで、センサアセンブリ８４０をまず遠心機２０から外側に押出しておく。次に、センサアセンブリ８４０を基準化された位置まで内側に摺動（又は内側に移動）させる。別法として、この遠心処理システム８００を一定時間の間だけ動作させ、分離作業の一部又は全部を完了させてから（時間、又は単純に視覚による観察に基づいて）、遠心処理システム８００の操作者が、サンプリングウィンドウを分離された成分の所望領域（例えば多血小板血漿領域）に位置合わせしながら目を近づけられる位置まで、センサアセンブリ８４０を内側に摺動させる。こうした位置合わせの有効性は、遠心機バッグ２２６内に流体密度を検出しようとセンサアセンブリ８４０を操作して、コントローラ８５０により算出された密度（また他の情報）が出力又は表示されれば、すぐにわかる。この別の実施形態により、固定位置センサアセンブリ８４０の利点と、所望のサンプル窓と分離領域との位置合わせを簡単にできる、又は少なくとも近づけることのできる利点とを備えつつ、管理の容易な遠心処理システム８００が得られる。
【０１９３】
状況によって、ロータ延出部分８８０を設けない、又は、血液リザーバや遠心機バッグ２２６内の分離をモニタするのに延出部分が重要な役割を果たさないように、ロータ延出部分８８０及びセンサアセンブリ８４０を変更することが望ましい場合がある。図５６及び図５７に例示したのは、外部センサアセンブリ８４０（外部放射線供給源及び検出器など）の利点を提供する、２つの別の実施形態である。こうした実施形態を見れば、当業者には、上述した外部センサの使用法について数多くの他の例が明らかであり、それらも本発明の範囲内と考えられる。
【０１９４】
図５６を参照すると、ロータ２０２は、延出部分を設けず（ただし、ある程度の延出部分を設けることは可能）、遠心機バッグ２２６を備えている。この場合も、ロータ２０２及び遠心機バッグ２２６を、遠心機バッグ２２６に含まれる流体サンプルの密度又は他の特性における変化を検出できるように放射線を通過させることのできるプラスチックや他の材料で製造することが好ましい。センサアセンブリ８４０の実施形態では、放射線供給源８８２及び検出器８８６はロータ２０２の対向側部に配置されておらず、反射体８８５（鏡など）が、遠心機の駆動部分８８１内に配設されて、放射線供給源８８２からの放射線ビームを受信し、それを延出部分８８０及び遠心機バッグ２２６を通過させるように方向付けられている。検出器８８６は、センサアセンブリ８４０内にて遠心機２０に対して、遠心機バッグ２２６の流体サンプル内を通過して偏向又は反射されたビーム８８８を受信するように位置決めされる。この配置により、遠心機バッグ２２６内のサンプリングウィンドウを、分離後に収集すべき分画の予想位置と位置合わせできるように選択することができる。一の好適な実施形態において、サンプリングウィンドウは、血液リザーバ又は遠心機バッグ２２６の排出チューブ位置の少なくとも一部と重なっている。
【０１９５】
一の実施形態において、駆動部分は、透明ではない材料で製造されており、放射線供給源８８４から反射体８８５までのビーム８８４用通路が設けられている。一の好適な実施形態における通路は、ビーム８８４が進行を妨げられずに通過できる通路又はトンネルを形成している、駆動部分８８１の側部に設けられたポート１５４又は１５６（図１４）などの開口又は穴である。無論、この開口を、駆動部分８８１の内部を保護するカバーを提供しつつビームを反射体８８５まで通過させられる透明材料による通路にしてもよい。反射体８８５の下流にも通路を設けて、ビーム８８４を、劣化させることなく、又は最小限の劣化程度で、駆動部分８８１内部に通過させてもよい。この場合も、この通路を、駆動部分から部分２０２までの開口又はトンネル、又は透明材料で形成された通路にすることができる。このトンネル通路式実施形態におけるビーム８８４は、駆動部分８８１が１回転すると１度駆動部分８８１に入射するため、許容範囲のサンプリング率となる。別法として、ビーム８８４透過の場合と同様のサンプリング率を得られるように、駆動部分８８１の中心軸を中心に周方向に延伸する反射体８８５を容易に設けることもできる。無論、放射線供給源８８２及び検出器８８６の位置を反対にし、反射体８８５及びビーム８８４の透過角度を図示のものとは変えて、本発明を実施してもよい。
【０１９６】
外部センサアセンブリ８４０に対する別の実施形態を図５７に提供する。この実施形態では、放射線供給源８８２は放射線検出器としても機能するため、別個の検出器を設ける必要がない。このようにさらに小型となった外部センサ構造では、ビーム８８４は、放射線供給源及び検出器８８２から、駆動部分８８１内又はこの中の通路を通過して回転駆動部分８８１まで透過される。反射体８８５がこのビーム８８４をロータ２０２及び遠心機バッグ２２６に向けて反射するため、密度変化をモニタできるサンプリングウィンドウが遠心機バッグ２２６内に形成される。流体サンプルを含む遠心機バッグ２２６内を通過したビーム８８８は、第２の反射体８８７に衝突する。この反射体８８７は、ビーム８８８を同じ又は実質的に同じ通路から遠心機バッグ２２６内へと反射して、再度反射体８８５に衝突させるように、ロータ２０２内に配設されている。反射体８８５がビーム８８８を駆動部分８８１から放射線供給源及び検出器８８２に戻るように方向付けると、放射線供給源及び検出器８８２は、衝突してきたビーム８８８に応答して、次の処理に向けたフィードバック信号をコントローラ８５０に送信する。
【０１９７】
一の実施形態において、ビーム８８４は、駆動部分８８１が１回転する毎に１度、駆動部分８８１に入射する。上記に詳細に説明したように、部分８８０を好ましくは、駆動部分８８１が１回転する毎に２回転させ、第２の反射体８８７を、駆動部分８８１の１回おきの回転時のみにビーム８８８を受信するように位置合わせする。別法として、１対の反射体８８７をロータ２０２内に配置して、駆動部分８８１が１回転する毎に１回ずつビーム８８８を受信して遠心機バッグ２２６内を通過するように反射させることができる。さらに別の実施形態において、反射体８８５及び第２の反射体８８７を遠心機２０の中心軸を中心に一部又は全部に延長して（駆動部分８８１に対応開口及び／又は透明通路を設けた状態で）、サンプリング率をさらに高くすることも可能である。
【０１９８】
本発明の重要な特徴によれば、図５８に例示したように、自動処理システム９００の別の実施形態では、温度制御が得られる。処理システム９００内に提供する温度制御をさまざまな形態とすることができ、その例として、血液供給源８０２から注入される流体サンプルの温度調節、分離処理を可能とするための、遠心機バッグ２２６に含まれる流体温度のモニタ及び調節、及び処理システム９００に含まれる温度反応成分に対する操作温度の調節が挙げられる。こうした成分には、赤血球、白血球、血漿、多血小板血漿、及び他の薬剤、タンパク質又は化合物と混合したこれら成分のいずれかが挙げられるが、これらに限定するものではない。本発明の一の好適な実施形態において、汲出しポンプ８３０により遠心機バッグ２２６から取り出された成分を所望温度範囲まで加熱する温度制御システムが処理システム９００に具備される。例えば、自己由来血小板ゲルの形成に処理システム９００を用いる場合、ディスペンサアセンブリ９０２が処理システム９００内に具備される。これは、遠心機２０から抜出された多血小板血漿を収集及び処理するチャンバや注射器を含むものである。ゲル形成処理の一部として、そのゲルを使用する（例えば、患者に送出する）前に、採取した多血小板血漿内の血小板を活性化させることが通常望ましい。所定の活性化温度範囲までディスペンサアセンブリ内の血小板温度を上昇させ、上昇させた後もそれを維持できるという点で、この温度制御システムは有用である。ゲル形成処理の一の実施形態において、この活性化温度範囲は２５℃〜５０℃であり、好ましくは、３７℃〜４０℃であるが、所望する活性化レベル及び処理システム９００で処理又は形成している具体的生成物に応じて、これ以外の温度範囲で本発明を実施することも容易である。
【０１９９】
図５８を参照すると、処理システム９００の温度制御システムは、フィードバック信号ライン９０６でコントローラ８５０と通信可能に連結された温度コントローラ９０４を含む。コントローラ８５０を用いて、まず操作温度範囲（例えば、活性化温度範囲）を設定し、その設定値をフィードバック信号ライン９０６から温度コントローラ９０４に伝達することができる。別法として、温度コントローラ９０４に入出力（Ｉ／Ｏ）装置を含めて、操作者からの温度制御範囲を受信できるようにする、又は、こうした温度範囲を、処理システム９００の初期製造及び組立ての一部として予備設定しておくことも可能である。温度コントローラ９０４に電子制御回路を含めて、温度及び加熱構成要素などに対する線形、比例又は他の制御をできるようにしてもよい。一の好適な実施形態において、温度コントローラ９０４は、感知した温度を算出するためのマイクロプロセッサと、温度及び制御アリゴリズム及びプログラムを格納するためのメモリと、温度センサからフィードバック信号を受信し、さまざまな温度制御装置（例えば、抵抗熱構成要素、ファンロータ、及び、加熱冷却技術における当業者に周知の他の装置）に制御信号を送信するためのＩ／Ｏ部分とを含む。
【０２００】
図示のように、ディスペンサアセンブリ９０２の温度を感知し、その対応温度フィードバック信号（感知された温度変化に比例する電気信号など）を信号ライン９１０から温度コントローラ９０４に提供するために、１つ又は複数の温度感知構成要素を含む温度センサ９０８が設けられている。この温度センサ９０８は、温度を感知し、それに応じて、温度コントローラ９０４に有用なフィードバック信号を出力できるものであれば、サーミスタや熱電対など、いずれの温度感知装置でもよい。一の好適な実施形態において、この温度センサ９０８を、すでに分離されている活性化すべき生成物を含む注射器や他のチャンバに熱を伝達する状態で、又はその熱を感知する状態で接触しているディスペンサアセンブリ９０２内に配設する。こうすることにより、温度コントローラ９０４は、ディスペンサアセンブリ９０２内の関連チャンバの温度が、所望の活性化温度範囲内にあるかどうかをより正確にモニタすることができる。
【０２０１】
ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバを一定温度範囲内に維持するために、ヒータ構成要素９１３が温度制御システム内に具備されており、温度センサ９０８から受信した信号に基づいて電力供給源を操作するなど、温度コントローラ９０４で選択的に操作できるようになっている。ヒータ構成要素９１３には、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバなどの対象を加熱するのに有用な装置であれば、いずれをも含めることができる。その例として、チャンバと熱交換できる状態で接触しているチューブを備えた流体熱交換器が挙げられる。一の好適な例として、コイル、プレートなどを含む電気抵抗型ヒータがヒータ構成要素９１３の一部として用いられるが、これに限定するものではない。この実施形態において、好ましくは、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバの挿入及び取出しを可能な状態にしつつ、加熱構成要素９１３の抵抗部分をそのチャンバの外側部分形状に追従した形として形成して、有効な熱伝達を行えるようにすることが好ましい。分離システム９００の操作時、温度コントローラ９０４は、操作温度範囲を受信し、温度センサ９０８から温度フィードバック信号を受信及び処理し、これに対応して、加熱構成要素９１３を選択的に動作させて、まず、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバの温度を操作温度範囲内の温度まで上昇させ、次に、感知される温度を操作範囲内に維持させるように構成されている。
【０２０２】
例えば、ゲルを活性化する、又は他の細胞成分及びその反応物をそれ自体に又は薬剤を用いて操作するための所望操作温度範囲を、前後の許容度を含めた設定温度（また所望の活性化温度）として提供することができる。この例における温度コントローラ９０４は、加熱構成要素９１３を動作させて、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバ温度を設定温度より高く、許容度上限の温度以下の温度まで上昇させることができる。許容度上限温度に到達すると、温度コントローラ９０４により加熱構成要素９１３は停止させられる可能性がある。温度センサ９０８が感知した温度が設定温度を下回りつつも許容度下限温度を上回っていれば、温度コントローラ９０４は加熱構成要素９１３を動作させて、感知される温度を、設定温度より高く、許容度上限の温度以下の温度まで再度上昇させる。こうすることで、温度コントローラ９０４は、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバ温度を所望活性化温度範囲（無論、この範囲を、ほぼ１つの設定温度と同じほどに狭い範囲にしてもよい）内に効率よく維持する。一の実施形態において、温度コントローラを、比例・積分・微分（ＰＩＤ）温度コントローラにする、又は比例・積分・微分（ＰＩＤ）温度コントローラとして動作させて、加熱構成要素９１３が生成する温度内におけるピーク及び突然の変化を少なくして、温度制御を改良する。さらに、温度コントローラ９０４に、感知された温度が設定操作範囲内になった時点を表示するように目に見える表示器（ＬＥＤなど）を含める、かつ／又は、感知された温度が設定操作範囲外になった時点を知らせる音声警報を含めることができる。
【０２０３】
別の実施形態において、加熱構成要素９０３は、処理システム９００の操作全体を通じて動作可能で停止しないように、２つ以上の設定値で動作するように構成されている。例えば、加熱構成要素９１３に、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバを操作範囲の下限温度（例えば、許容できる活性化温度範囲）に維持するように設計された下方設定値と、チャンバを設定操作温度範囲でそれより高い温度まで加熱するように設定された上方設定値とを設ける。別の実施形態では、加熱構成要素９１３を、ディスペンサアセンブリ９０２内で分離された液体の活性化又は他の処理を改良するため、選択可能な速度（例えば、時間単位あたりの温度変化）で加熱するように構成する。この構成により、加熱構成要素９１３による加熱速度を制御できる温度コントローラ９０４が得られる。
【０２０４】
上述したように、本発明は、組み合わせられると、使用スペースの限られた病院や同様の環境内における現場での使用に特に適合された小型分離システムを提供できる特徴を備えている。図５９は、温度制御システムを具備しつつ、プロファイル又は設置面積が小型化された、図５８に示す遠心処理システム９００の一の好適な構造を例示したものである。囲い込み部９１６が、温度制御システムの一部として具備されて、温度制御システムの構成要素を構造的に支持及び保護している。囲い込み部９１６は、プラスチックなど、数多くの構造材料から製造することができるものであり、ディスペンサアセンブリ９０２が含むチャンバ及び他の構成要素の挿入及び取出しができるように構成されたヒータ筐体９１８を支持している。このヒータ筐体９１８は壁部を有しており、この壁部内に、制御ライン９１４により温度コントローラ９０４に接続された加熱構成要素９１３（図５９では図示せず）が入れられている。温度センサ９０８（図５９では図示せず）も、ヒータ筐体９１８内に配置されており、図５８を参照しながら説明したように、ディスペンサアセンブリ９０２のチャンバに対して、システム９００の操作時にチャンバ及びその中の流体の温度を感知できるように位置決めされている。温度フィードバック信号は、温度センサ９０８によりライン９１０から温度コントローラ９０４に送信される。コントローラ９０４はこれに対応して、ヒータ筐体９１８内の温度を選択操作範囲内に維持するように加熱構成要素９１３を選択的に動作させる。
【０２０５】
分離システム９００に、コントローラ８５０などの温度感知構成要素が含まれているため、温度制御システムを、好ましくは、囲い込み部９１６内の温度をモニタ及び制御するように構成する。図示のように、囲い込み部９１６内の周囲温度を感知し、フィードバック信号をライン９２２から温度コントローラ９０４に送信するために温度センサ９２０が含まれる。空気を囲い込み部９１６内に入れ（ＡＩＮ）、加熱した空気を排出して、囲い込み部９１６内の温度を許容範囲内の周囲温度に維持するように、ルーバなどの空気口９３０が囲い込み部９１６に設けられている。冷却空気を循環させるため、ファン９３４も設けられている。これにより、空気を囲い込み部９１６内に引入れ（ＡＩＮ）、より温度の高い空気を囲い込み部９１６から放出させる（ＡＯＵＴ）。ファン９３４は、温度コントローラ９０４によりライン９３８を通じて送信される制御信号を介して選択的に動作可能となっている。ファン９３４のサイズや定格は、本発明の実施形態により変更可能であり、好ましくは、囲い込み部９１６の容積、囲い込み部９１６内に配置される構成要素（例えば、成分分離システム９００により生成される熱量）、囲い込み部９１６に所望する周囲温度、及び他の冷却設計要因に基づいて選択する。
【０２０６】
本発明の別の実施形態において、図６０に図示するように、引出し腔２３２を介して単離及び収集された細胞分画を操作するためのディスペンサ９０２が得られる。一般に、本発明は、血小板ゲル９７０用の血液成分すべてが、その血小板ゲル９７０を適用するはずの患者から採取されたものである自家由来血小板ゲル９７０組成物を形成するための、手動又は自動操作による２段階方法を可能とするディスペンサ９０２に関する。
【０２０７】
以下に詳述する、自家由来血小板ゲル９７０組成物を調製するための本発明による方法を、図６１〜図６３の工程系統図に図示する。上述したように、本発明の方法は、患者の全血３９４を、クエン酸ナトリウム（クエン酸塩）やヘパリンなどの抗凝固剤の入った供給源容器３９８内に収集する抗凝固剤入り全血３９６を形成することから開始される。好ましくは、全血３９４を収集して、３．８％のクエン酸ナトリウム溶液（以下「クエン酸収集媒体」とする）と、具体的に言えばクエン酸収集媒体に対する血液の割合を９：１にして混合する。クエン酸ナトリウムの３．８％溶液を、１００ｍｌの水にクエン酸ナトリウム３．８ｇを添加して調製する。３．８％クエン酸収集媒体は血液の収集及び保存に頻繁に使用されるものであるため、当業者であれば、全血に対するクエン酸ナトリウムの比率を最終濃度として約１０．９〜１２．９％ｍＭｏｌの範囲にできることがわかるであろう。
【０２０８】
上記に詳しく説明し、図６１に図示したようにまず、患者から予め採っておいた一定量の抗凝固剤入り全血３９６を遠心処理することにより、多血小板血漿２６０及び／又は貧血小板血漿２６２を形成する。まず遠心機バッグ２２６から多血小板血漿２６０を抜き、収集チャンバ４００内に入れる。収集チャンバ４００を好ましくは、注射器とするが、収集した分画を活性化しない容器であればいずれでもよい。多血小板血漿２６０を汲出しポンプ８３０（図５３）を介して収集チャンバ４００内に注入する、又は所望分画を直接ディスペンサ９０２内に引抜くことができる。
【０２０９】
経路９５１により図６２に図示した好適実施形態では、遠心機バッグ２２６内の多血小板血漿２６０を２つに分けて、容器９５２及び９６０内に保存する。第１の部分は多血小板血漿２６０全量のおよそ１／４〜１／２であり、トロンビンの調製に第１段階で使用され、第２の部分は、第２段階の容器９６０内で使用される。多血小板血漿２６０又は別法として貧血小板血漿２６２（図６１に図示）を採取した後、迅速に、すなわち３分未満で、トロンビンを得てから血小板ゲル組成物を生成する好適方法が、図６２及び図６３で図示した経路９５１又は９８１で線図としてそれぞれ示されており、これらについて以下に詳述する。しかし、これより長い凝固時間、すなわち２〜８分が望ましい場合には、本発明による血小板ゲル組成物を得る方法を経路９７１及び９８７に沿って進行させることができる。これについても、図６３に線図としてそれぞれ示されており、これらについても以下に詳述する。
【０２１０】
好適実施形態（図６２）による第１段階は、凝固形成処理を戻すことから開始される。抗凝固剤の効果を逆行させることのできる薬剤（回復剤）（ｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎ ａｇｅｎｔ）を、容器９５２内に保存されている多血小板血漿２６０の第１の部分内に添加する。好ましくは、この回復剤を容器９５２自体とする、又は、多血小板血漿２６０を導入する前に回復剤を容器９５２内に含有させておくことができる。しかし、回復剤を後から導入することも可能でる。さらに、接触活性化剤を、ガラス綿９５３又はシリカ、アルミニウム、珪藻土、カオリンなどの材料にする、又は、プラスチック、シリコン処理したガラスなどの濡らすことのできない表面にすることが好ましいが、これらに限定するものではない。カオリンなどの化学的活性化剤を用いて、凝固時間を短縮することもできるが、後にその活性化剤を除去する必要が生じる。好適実施形態では、プラスチック製注射器が所望分画の収集に用いる好適容器である。本発明による目下好適な実施形態では、抗凝固剤の逆行は、塩化カルシウムを用いて行われる。しかし、グルコン酸カルシウムや炭酸カルシウムなど、クエン酸添加血液の凝固活動回復において塩化カルシウムと機能的に同等であると周知又はわかっている物質であれば、本発明の実施にいずれを用いてもよい。したがって、塩化カルシウムが本発明で使用するための目下好適なカルシウム塩であるが、塩化カルシウムと同様に機能するカルシウム塩であれば、いずれを本発明に使用してもよい。同様に、数多くの血液凝固反応は目下共同因子としてカルシウムイオンを必要とすると考えられているが、こうした凝固反応を可能にする上でカルシウムと同等の機能を果たすことで周知である、又はこれからそれが発見される物質であれば、いずれを、独自に又はカルシウムとの組合せで本発明の実施に用いてもよい。使用した抗凝固剤がヘパリンであった場合、ヘパリン又は他の適した抗凝固剤逆行化合物を用いて、その抗凝固剤効果を逆行させることができる。抗凝固剤の逆行に用いる回復剤の濃度は、多血小板血漿２６０内に使用された抗凝固剤の濃度及びキレート剤及び凝固反応の化学量論などに応じて異なるが、凝固形成の実現に十分な濃度でなければならない。
【０２１１】
図６２に図示したように多血小板血漿２６０を回復させると、自然に凝塊９５４が形成される。得られた凝塊９５４を、接触活性化剤としてだけでなくフィルタとしても作用したガラス綿９５３を介して押出すことにより粉砕させ、トロンビン９５５を圧出させる。別法として、又はこれに加えて、大きなミクロン孔径のフィルタ９５８を設けて、含まれている凝固デブリ及びすべての活性化剤や固体を除去できるようにする。フィルタ９５８を、容器９５２の出口９５６に配置する。好適実施形態において、トロンビン９５５を、容器９６０に入れられた多血小板血漿（ＰＲＰ）２６０の第２の部分と混合して、３分以内に臨床で使用できる十分な量で、本発明による血小板ゲル組成物９７０を形成する。
【０２１２】
上述の処理に他の添加剤を追加して、内的酵素触媒反応又は外的酵素触媒反応によりトロンビンの濃度を高めてもよい。
【０２１３】
上記に詳しく説明したように、塩化カルシウムを添加して、クエン酸添加血漿の凝固カスケード機能を回復させ、ガラス綿などの活性化剤に暴露することにより、自家由来トロンビンを生成させることができる。しかし、プロトロンビンの変換が不完全であり、フィブリン及び抗トロンビンＩＩＩによりトロンビンが不活性化されることから、この方法で得られる自家由来トロンビン量は少ない。イソプシンアミノカプロン酸などの調製剤を血漿に添加することで、トロンビンの中和量を削減して、取得量を増加させることができる。しかし、血液凝固促進性材料を提供すると、必要な凝固要因が集合してプロトロンビン変換率を最大限にするため、トロンビンの取得量を最大限にすることができる。活性化された血小板膜は、刺激表面となり、血小板脱顆粒の間、追加因子Ｖを分泌することにより必要な因子Ｖ活動を高める。外生リポタンパク質及び／又は血液凝固促進性材料を血漿環境に添加することにより、内因系及び外因系凝固カスケードを活性化させてトロンビン生成量を最大限にすることもできる。プロトロンビンをトロンビンに変換する前にアンチトロンビンＩＩＩ及びフィブリノゲンの双方を遮断又は除去するようにＰＲＰ及び／又はＰＰＰを予備処理しておいても、自家由来トロンビン生成量をさらに増幅させることができる。こうした改質は、適した吸着剤、抗体又は付着試薬の使用により得られる。
【０２１４】
別の実施形態において、トロンビン９５０を第２段階の貧血小板血漿２６２と混合して、３分未満で本発明による自家由来血小板ゲル組成物９７２を形成する。
【０２１５】
図６２にて経路９７１として示した、本発明による第３の実施形態は、ガラスなどの濡らすことのできる表面を有する容器内に抗凝固剤入り全血３９６から得たオリジナル量の多血小板血漿（ＰＲＰ）２６０を収集することを考慮している。次に、多血小板血漿２６０にカルシウムを再添加して、血小板ゲル組成物９７４を形成する。所望の血小板ゲル組成物９７４の形成には、好適実施形態で上述したように３分未満ではなくおよそ２〜８分が必要である。
【０２１６】
図６３にて経路９８１として線図で示した、本発明による第４の実施形態は、多血小板血漿２６０ではなく貧血小板血漿２６２を、好適実施形態で上述したように２つに分ける。第１段階で使用する第１の部分は、オリジナル量のおよそ１／４〜１／２であり、濡らすことのできる表面を備えた容器９５２内に保存されている。これに、回復剤、好ましくは塩化カルシウムを貧血小板血漿２６２に直接添加する。回復した貧血小板血漿２６２の表面活性は、容器の表面及び／又はガラス綿９５３又は他の表面や化学的活性化剤により起こるものであり、こうして凝塊９６２が形成される。得られた凝塊９６２が上述したように粉砕されて、トロンビン９５５が収集される。このトロンビン９５５が、第２段階の多血小板血漿２６０と混合されると、血小板ゲルシーラント組成物９７３が形成される。
【０２１７】
第５の実施形態において、トロンビン９５５が第２段階の貧血小板血漿２６２と混合されると、３分未満で血小板ゲル組成物９７５が形成される。
【０２１８】
第６の実施形態は、図６３の経路９８７にしたがって進行する。オリジナル量の貧血小板血漿２６２が、ガラスなど、濡れることのできる表面を有する容器内に収集される。次に、貧血小板血漿２６２は再石灰質化されて、血小板ゲル組成物を形成する。
【０２１９】
本発明による血小板ゲル組成物の引張強さを、カルシウムイオンの添加により強化することができる。これにより、より強力な生体接着剤組成物が望ましい場合、上述し、図６２の経路９５１及び９８１にそれぞれ開示した方法を用いて、より多くのカルシウムイオンを、血清を多血小板血漿２６０又は貧血小板血漿２６２に導入するのと同時に添加することができる。別法として、血小板ゲル組成物の調製方法として図６２及び図６３に示す経路９７１及び９８７をそれぞれ採る場合、カルシウムイオンを多血小板血漿２６０又は貧血小板血漿２６２に直接導入することができる。これにより、血小板ゲル組成物９７４及び９７６がそれぞれ形成される。
【０２２０】
以下に詳述するように、本発明による血小板ゲル組成物の形成に必要となる時間は、添加する血清の量によって異なる。多血小板血漿又は貧血小板血漿に対する血清の割合を１：４、１：２及び３：４とすると、それぞれ９０秒、５５秒及び３０秒で血小板ゲル組成物が形成される。また、トロンビンが自己触媒型であることから、血清をこの調製の５時間以内、好ましくは２時間以内、理想的には直ちに使用することが重要である。別法として、血清を無期限に冷蔵又は冷凍することができる。
【０２２１】
適量の多血小板血漿又は貧血小板血漿を傷に適用することにより、本発明による血小板ゲル組成物を手術による傷のシールに用いることができる。また、本発明による血小板ゲル組成物が、これを受取るはずの患者から得た血液成分から単独に調製されたものであるため、血液により媒介された新たな疾病が患者に移入する可能性はゼロである。本発明による方法を、形成された血小板ゲル組成物が、止血剤としてのみではなく、傷を治癒する補助薬として、及び、他の生物活動を伴う薬品及びタンパク質を送出する基質としても機能するようにさらに変更することができる。例えば、フィブリン糊が、整形外科や主な骨折の修復における骨の再構築に有用な骨分画を結合する強力な親和力を備えていることが周知である。したがって、本発明による血小板ゲル組成物の自家由来性に沿って、患者からの自己移植骨をひく、又は粉などとして製造して、本発明による方法の第２段階で得られた多血小板血漿に混合することができる。得られるはずのゲルを凝固させたい箇所に適用できる程度に十分な量で、自家由来トロンビンをこの多血小板血漿と骨分画との組み合わせ内に混合する。使用可能な他の材料の例として、ゼラチンコラーゲン、化学的崩解性ポリマー、ヒルアロン酸、炭水化物及びデンプンが挙げられるが、これらに限定するものではない。
【０２２２】
さらに別の実施形態において、本発明は、本発明による方法で調製された血小板ゲルの美容外科における使用方法を提供する。
【０２２３】
さらに別の実施形態において、本発明は、本発明による方法で調製された血小板ゲルのコーティングステントにおける使用方法を提供する。
【０２２４】
本発明による所望の血小板ゲル組成物を、他の生物活動を伴う薬品及びタンパク質のディスペンサー装置としてさらに機能させる場合、本発明の方法を以下のように変更することができる。第１段階で得られたトロンビンを第２段階の多血小板血漿に添加する前に、他の生物活動を伴う多種多様な薬品及びタンパク質を第２段階の多血小板血漿に添加することができる。血清の添加前に多血小板血漿に添加できる薬剤の例として、リドカインなどの鎮痛化合物、殺菌性及び静菌性化合物を含む抗菌性化合物、抗生剤（例えば、アドリアマイシン、エリスロマイシン、ゲンタマイシン、ペニシリン、トブラマイシン）、抗真菌性化合物、抗炎剤、抗寄生虫化合物、抗ウィルス化合物、パクリタキセル酵素などの制癌化合物、酵素阻害剤、糖蛋白、成長因子（例えば、リンフォカイン、サイトカイン）、ホルモン、ステロイド、糖質コルチコイド、免疫調節薬、免疫グロブリン、鉱物、神経弛緩薬、タンパク質、ペプチド、リポタンパク質、殺腫瘍性化合物、殺腫瘍性化合物、トキシン及びビタミン類（例えば、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＤ又はこれらの派生物）が挙げられるが、これらに限定するものではない。また、上記の一部又は全部の被選択分画、部分、派生物又は類似物も使用可能であると考えられる。
【０２２５】
血液の凝固及び凝固関連活動の測定及び決定を目的として、いくつかの異なる医療装置及び試験方法がある。こうした装置及び方法を用いて、活性化剤、すなわち、本発明による血小板ゲル組成物の形成に必要なトロンビン、カルシウム及び血漿の最適な製剤化を決定しやすくすることができる。血液の凝塊及び凝固状態の評価について、他より成功した技術の例は、Ｃｏｏｐｅｒ他に付与された米国特許第４，５９９，２１９号、Ｊａｃｋｓｏｎ他に付与された同第４，７５２，４４９号及び、Ｓｍｉｔｈに付与された同第５，１７４，９６１号に例示されているプランジャ技術である。これらの特許はすべて、本発明の譲受人に譲渡されており、これら特許内容全体を参照として本明細書内に引用したものとする。
【０２２６】
凝固及び凝固関連活動の測定及び検出を目的としてプランジャ技法を採り入れた自動装置は一般に、プランジャセンサカートリッジ（１つ又は複数）と、そのカートリッジを挿入するマイクロプロセッサ制御装置とを含んでいる。この装置は、カートリッジ及び血液サンプルが中に配置されると動作して、凝固関連事象を誘導及び検出する。カートリッジには、複数の試験セルが具備されており、各セルは、チューブ状部材で画定されており、ここにプランジャアセンブリを配置し、分析試験が実施される上方反応チャンバと、試薬（１種類又は複数種類）を含む試薬チャンバとが設けられている。活性化凝固時間（ＡＣＴ）試験を目的に、例えば、試薬に、血液の凝固を活性化させるために活性化試薬を含める。プラグ部材が試薬チャンバの底部をシールしている。試験が開始されると、試薬チャンバの内容物が反応チャンバ内に押出されて、通常はヒトの血液又はその成分である流体サンプルと混合される。装置の一部であるアクチュエータが、プランジャアセンブリを上昇及び下降させて、反応チャンバ内の流体プール内を往復運動させる。プランジャアセンブリは重力により下降し、反応チャンバ内の流体が有する粘度などの性質により抵抗を受ける。サンプルの性質が、凝固関連活動の開始や発生により所定通りに変化すると、プランジャアセンブリの下降速度も変化する。下降速度が十分に変化すると、装置により凝固関連活動が検出され、表示される。
【０２２７】
上述した方法を用いて、多血小板血漿又は貧血小板血漿から得た血清と試薬チャンバ内のＣａＣ１２をカートリッジに組み合わせた。多血小板血漿（ＰＲＰ）又は貧血小板血漿（ＰＰＰ）をカートリッジの反応チャンバ内に分散させ、自動処理により、凝固時間試験を行った。図６４に結果を示した第１の実験では、血清量、血清の派生元である血漿のタイプ、及び血清を混合した血漿のタイプを試験して、最短凝固時間を決定した。調査した多血小板血漿又は貧血小板血漿に対する血清の割合は、１：４、１：２及び３：４とした。図６６及び図６７に結果を示す第２のセットの実験では、血清の生成から０分、３０分、６０分遅れて血清を添加することにより、本発明の血小板ゲル形成にかかる実際のゲル化時間をカートリッジ内の凝固時間と比較した。図６８及び図６９に結果を示した、第２のセットの実験では、カルシウム添加による、カートリッジ内における実際のゲル化時間と凝固時間との関係への影響を調べた。図６５に結果を示した最後のセットの実験では、カルシウム添加による凝固時間への影響を調べた。
【０２２８】
ドナーによって凝固時間はさまざまであるが、各ドナーに対する凝固時間を比較したところ、血漿に対する血清の割合とカルシウム濃度とが著しい効果を持つことがわかった。どのドナーに対しても、最短凝固時間は３：４の割合の場合であり、その凝固時間は、１：４の割合の場合より４７％短かった。３：４の割合における凝固時間と１：２の割合における凝固時間との差は統計学としては重要ではないが、いずれのドナーに対しても３：４の割合を用いた場合の凝固時間が一貫して最も短かった。この結果から、多血小板血漿に対する血清の割合を高めると、凝固時間を短縮できることがわかる。同様に、凝固時間は、カルシウム添加量により大きく影響を受け、カルシウムを添加しない場合の凝固時間が最も短くなった。したがって、その血清含有レベルが、クエン酸塩を添加した多血小板血漿の再石灰質化に十分であったことがわかる。この拡大実験の予備結果から、カートリッジ内に実験凝固時間が実際のゲル化時間と相関関係にあることがわかる。
【０２２９】
次に、本発明をさらに、以下の非制限的実施例により例示する。すべての科学的及び技術的用語は、当業者であれば明白な意味にて使用されている。以下に記載する具体的実施例は、本発明による生体接着剤組成物を臨床現場で調製することのできる方法を例示するものであり、本発明の分野や範囲を何ら制限するものではない。この方法を、本発明の範囲であるが具体的に開示されていない組成物の生成用に変更することが可能である。また、当業者であれば、同じ組成物を生成するために本発明の方法をさまざまに変更できることも明らかであろう。
【０２３０】
本明細書に記載している実施例は、本発明を実施するさまざまな態様を例示しているにすぎず、本発明を何ら制限するものではない。
【実施例１】
【０２３１】
ＬＭＰ−１アデノウイルスによる軟層のトランスフェクト
本発明の方法により単離された軟層を、遺伝的形質転換に用いることができる。例えば、全血のサンプルを本発明の遠心機装置を用いて分離して、軟層を単離した。単離された細胞を洗浄してその数を数えてから、Ｍｅｄｔｒｏｎｉｃ，Ｉｎｃ．を出願人とする係属中の米国特許出願に開示されているＬＭＰ−１アデノウイルスでトランスフェクトした。この特許内容全体を参照として本明細書内に引用したものとする。この実験の結果を表１に示す。この実験では、手術日が２０００年１１月２８日、死亡日が２００１年１月２日であった。
【０２３２】
【表１】
一の実施形態において、ＬＭＰ−１をトランスフェクトした細胞を骨粗鬆症治療に用いた。一の実施形態において、トランスフェクトされた細胞は、生体内にて「組み立てられる」ゲル状キャリヤとして送出される。例えば、トランスフェクト細胞を本発明の方法により調製された血小板ゲルとして送出することができ、ＬＭＰ−１アデノウイルスを担持しているゲルは、椎体などの骨粗鬆症を発症している骨内に直接注入される。すると、ＬＭＰ−１遺伝子が発現して、新たな骨の生成量が増加し、骨塩密度が高まる。別法として、トランスフェクト細胞を、これに限定するものではないが、長骨の骨折及び頭蓋／口腔顎顔面処置などを含む他の骨治療のいずれにも使用することができる。
【実施例２】
【０２３４】
多血小板血漿及び血清を用いた生体接着剤組成物の調製
多血小板血漿の６ｃｃを収容チャンバ９６１内に抜き取り、多血小板血漿（ＰＲＰ）又は貧血小板血漿（ＰＰＰ）のいずれか３ｃｃを、１０％塩化カルシウム０．３３ｃｃ及びガラス綿を含む収容チャンバ９５７内に入れる。収容チャンバ９５７の内容物は、２〜８分で凝固する。この凝固物を任意のフィルタ９５８を通過させ、そこから生成された血清を、収容チャンバ９６１内の多血小板血漿と一緒に混合又は噴霧することにより、多血小板血漿に添加する。多血小板血漿と血清とは、およそ３分でゲル化する。
【０２３５】
このゲルを注射器型装置９０２で上述したように適用することは、多くの用途であまり好ましいものではない。したがって、別の実施形態において、非活動状態の血液成分及びトロンビンを、混合及び／又は所望形状の型内に注入することができる。この型は、これに限定するものではないがプラスチックなどの濡らすことのできる表面を有する材料で形成することができる。特に、本発明の血小板ゲルを用いて、これらに限定されるものではないが、抜歯であいた歯茎の穴及び／又はけがや手術処置によりできた組織内及び骨内の穴などの腔を一時的に充填することができる。本発明は、腔内に挿入する前に血小板を有用な形状に予め賦形又は成形しておけば、具体的な使用法に血小板ゲルを導入する、より簡単な方法となるものである。抜歯の場合、血小板ゲルを、基本的円錐形状を得るように賦形することができる。ロッドに限らず、矩形などの他の形状も本発明の範囲内である。ゲル形成後に活性化処理を施すことにより、ゲルの固体程度を増減して展性を持たせることができる。
【０２３６】
上述は、本発明の原理を例示したものと解釈すべきである。また、当業者であれば、さまざまな修正及び変更を本明細書に容易に加えることができるため、上述した細かい構造及び処理は本発明を何らこれらに限定するものではない。したがって、適切な修正及びその等価物はすべて、請求の範囲に規定される本発明の範囲内と見なすことができる。
【０２３７】
上述は、本発明の原理を例示したものと解釈すべきである。本明細書内及び請求の範囲内で用いる用語「含む」は、記載されている１つ又は複数の特徴、整数、成分又はステップを含むことを条件としつつ、１つ又は複数の他の特徴、整数、成分、ステップ、又はこれらのグループの存在や追加を除外するものではない。また、当業者であれば、数多くの修正及び変更を本明細書に容易に加えることができるため、上述した細かい構造及び処理は本発明を何らこれらに限定するものではない。したがって、適切な修正及びその等価物はすべて、請求の範囲に規定される本発明の範囲内と見なすことができる。
【図面の簡単な説明】
【０２３８】
【図１】本発明の連続流遠心処理システムの一の実施形態を示す斜視図であり、遠心機と、本発明の保護筐体又は囲い込み部内に配設された側部取付けモータとを例示している。
【図２】図１の遠心処理システムの遠心機及び側部取付けモータを示す分解側面図であり、遠心機の各構成要素を例示している。
【図３】図２のドライブシャフトアセンブリの下方ケースアセンブリを示す部分斜視図である。
【図４】図３の下方ケースアセンブリを示す分解側面図である。
【図５】図３の下方ケースアセンブリに含まれる構成要素を示す分解斜視図である。
【図６】図３の下方ケースアセンブリ内に配設される下方ベアリングアセンブリを示す平面図である。
【図７】図６の下方ベアリングアセンブリを示す斜視図である。
【図８】図６及び図７の下方ベアリングアセンブリを示す分解側面図である。
【図９】図２の遠心機に含まれるチューブ収容ガイドを示す斜視図である。
【図１０】図２の中間シャフトギアアセンブリのギアを示す分解斜視図である。
【図１１】図１０のギアを組み立てた状態を示す斜視図である。
【図１２】図２の遠心機に含まれる頂部ベアリングアセンブリを示す分解斜視図である。
【図１３】図２の頂部ベアリングアセンブリの頂部ケースシェルを示す斜視図である。
【図１４】図１に示した本発明の遠心機を示す斜視図であり、図１の線分１４−１４に沿って４分の１部分を切取った状態である。
【図１５】遠心機ロータ基部の一の実施形態を示す斜視図である。
【図１６】遠心機ロータカバーの一の実施形態を示す斜視図である。
【図１７】図１４の線分１７に沿って切取った、使い捨て式遠心機バッグを支持するための本発明によるロータの一の実施形態を示す側部断面図であり、二腔管がバッグに接続された状態である。
【図１８】図１の線分１８に沿って切取った、使い捨て式遠心機バッグを支持するための本発明によるロータの一の実施形態を示す側部断面図であり、基部及びカバーの溝付き柱状部を示している。
【図１９】側部取付けモータ（外側駆動ベルトのみを図示）により駆動される遠心機の別の実施形態を例示する、図１と同様の拡大斜視図である。
【図２０】所望の駆動比率を実現するために用いられる内側プーリ駆動システム及び遠心機バッグを収容するようになされたロータ基部を例示する、図１９の遠心機を示す切取側面図である。
【図２１】頂部プーリと取り付けられた内側駆動ベルトに対する両方のアイドラプーリの位置とをよりわかりやすく例示するためにロータ基部を取り除いた、図２０と同様の切取側面図である。
【図２２】内側プーリ駆動システムをさらに例示し、遠心機チューブ（又は供給ケーブル）の経路を図示した、図２０の遠心機を示す断面図である。
【図２３】図１９の遠心機と同様であるが、遠心機チューブ（又は供給ケーブル）を位置決めするために遠心機の一部を切断して設けなければならないガイドシャフトを具備できるようにする内側の別個ベアリング部材（４つのカムフォロワとして図示）を含む、さらに別の遠心機を示す平面図である。
【図２４】図２３の遠心機実施形態を例示する、図１９と同様の斜視図であり、ガイドスロットをさらに例示し、遠心機を外部駆動ベルトで駆動できることを示している。
【図２５】本発明の可撓性使い捨て式遠心機バッグを示す平面図である。
【図２６】本発明の可撓性使い捨て式遠心機バッグを示す斜視図である。
【図２７】本発明の「Ｔ」形状屈曲部品を例示する図である。
【図２８】本発明の「湾曲したＴ」形状屈曲部品を例示する図である。
【図２９】本発明の「Ｌ」形状屈曲部品を例示する図である。
【図３０】本発明の「Ｊ」形状屈曲部品を例示する図である。
【図３１】本発明の導入及び／又は排出チューブを例示する図である。
【図３２】全血を遠心処理した後の本発明による使い捨て式遠心機バッグを示す平面図であり、分離された血液成分を示している。
【図３３】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３４】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３５】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３６】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３７】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３８】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図３９】本発明の使い捨て式遠心機バッグを用いて全血成分を分離するための本発明による一方法を示す概略図である。
【図４０】内側チャンバ及び外側チャンバを有する本発明による使い捨て式遠心機バッグの別の実施形態を示す平面図である。
【図４１】図３４に示した使い捨て式遠心機バッグを示す平面図であり、赤血球層を外周部から内周部に向けて移動させることを例示している。
【図４２】出口ポート及び入口ポートと流体連通している内側チャンバ及び外側チャンバを有する、本発明による使い捨て式遠心機バッグの別の実施形態を示す底面図である。
【図４３】本発明の剛性使い捨て式遠心機バッグを示す側部断面図である。
【図４４】図４３に図示した、断面形状を楕円形とする遠心機バッグ内に含有されている、分離された血液成分を示す概略図である。
【図４５】本発明による剛性使い捨て式遠心機バッグを示す側部断面図である。
【図４６】図４５に示した８の字形状の表面領域及びさまざまな寸法を示す概略図である。
【図４７】断面形状を８の字とする遠心機バッグ内に含有されている、分離後の血液成分を示す概略図である。
【図４８】図４９のロータカバーと図５０のロータ基部とを含む、本発明により組み立てられた遠心機ロータの別の実施形態を示す側部断面図である。
【図４９】本発明によるロータカバーの別の実施形態を示す側部断面図である。
【図５０】本発明によるロータ基部の別の実施形態を示す側部断面図である。
【図５１】図５０のロータ基部を示す斜視図である。
【図５２】図４９のロータカバーを示す斜視図である。
【図５３】本発明による遠心処理システムの構成要素を例示するブロック図である。
【図５４】図５３の自動化遠心処理システムの一の実施形態を操作している間の制御信号伝送及びフィードバック信号受信のタイミング及び関係を例示するグラフである。
【図５５】図５３に例示した自動化遠心処理システムの別の実施形態を示す側面図であり、遠心機が、外部に位置するセンサアセンブリを使用できるように、リザーバを遠心機の外径を超えて延出させたロータを有することを示している。
【図５６】ロータを延出させていない、本発明による遠心処理システムが含む外部センサアセンブリのさらに別の実施形態を示す側面図であり、遠心機内に反射体を配設していることを例示している。
【図５７】本発明による遠心処理システムが含む外部センサアセンブリのさらに別の実施形態を示す側面図であり、単一放射エネルギ供給源及び検出器装置を例示している。
【図５８】図４７の実施形態と同様の自動化遠心処理システムを示すブロック図であり、分離及び処理された生成物の温度を制御するための温度制御システムを形成する構成要素を含めて示している。
【図５９】図５８の温度制御システムに含まれる構成要素を示す斜視図である。
【図６０】本発明のディスペンサを示す概略断面図である。
【図６１】本発明による血小板ゲルの調製に用いるための、多血小板血漿と貧血小板血漿とを分離する方法を表す工程系統図である。
【図６２】出発材料として多血小板血漿を用いた場合の、本発明による血小板ゲルの調製に用いる方法の最終部分を表す工程系統図である。
【図６３】出発材料として貧血小板血漿を用いた場合の、本発明による血小板ゲルの調製に用いる方法の最終部分を表す工程系統図である。
【図６４】血清と血漿との割合が凝固時間に及ぼす影響を表すグラフである。
【図６５】カルシウムの添加が多血小板血漿及び貧血小板血漿の凝固時間に及ぼす影響を表すグラフである。
【図６６】ドナーから得た血液を用いた、凝固時間と実際のゲル化時間との関係を表すグラフである。
【図６７】ドナーから得た血液を用いた、凝固時間と実際のゲル時間との関係を表すグラフである。
【図６８】カルシウムの添加が、ドナーから得た血液を用いた凝固時間及び実際のゲル化時間に及ぼす影響を表すグラフである。
【図６９】カルシウムの添加が、ドナーから得た血液を用いた凝固時間及び実際のゲル化時間に及ぼす影響を表すグラフである。
Claims (14)
- 体液又は組織から所定の細胞成分を収集する方法であって、
ａ）少なくとも１本の導入チューブと少なくとも１本の排出チューブを具備する、ドーナッツ形状の可撓性遠心機バッグを準備するステップと、
ｂ）遠心機を準備するステップと、
ｃ）前記可撓性遠心機バッグを前記遠心機内に固定して、前記遠心機中で回転できるようにするステップと、
ｄ）前記遠心機を回転して及び前記遠心機バッグを回転させるステップと、
ｅ）前記体液又は組織の一部を、回転している前記遠心機バッグ内に前記導入チューブを介して供給して、前記体液又は組織を２つ以上の分画として径方向に分離させるステップであって、前記分画の１つが、前記所定の細胞成分を含有し、前記排出チューブの遠位端が、前記所定の細胞成分と流体連通した状態にあるステップと、
ｆ）前記所定細胞の大部分が前記バッグから取り出されるまで、前記所定成分を含有する前記分画を、前記排出チューブを介して回転している前記遠心機バッグから抜き取り、前記排出チューブの前記遠位端付近に不要な分画が検出された時点で、前記所望細胞の抜取りを終了するステップと
を含む方法。 - 前記体液又は組織が、全血、骨髄、軟層、脂肪細胞、筋細胞及び神経細胞からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
- 前記細胞成分が、幹細胞、軟層、骨髄細胞、赤血球、白血球、血小板、血清、蛍光標識細胞、及び磁気標識細胞からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
- 前記細胞成分が骨髄細胞であり、前記細胞が、無菌移植を目的として前記遠心機バッグから患者へと直接抜き取られる、請求項３に記載の方法。
- 体液又は組織から所定の細胞成分を収集する方法であって、
ａ）ｉ）軸方向コアを有する剛性環状本体と、
ｉｉ）外周及び内周を有し、断面を、最も狭い部分が前記内周により近く位置しやや偏心した８の字形状とする、遠心処理時に前記体液又は組織を収容及び保持するための内側収集チャンバと、
ｉｉｉ）前記コアから前記チャンバの外周近傍までの距離を径方向に延伸し、その遠位端を前記チャンバ内部と流体連通する導入チャネルと、
ｉｖ）前記コアから前記チャンバの最も狭い部分にほぼ隣接するまでの距離を径方向に延伸し、前記最も狭い部分にて前記チャンバ内部と流体連通している排出チャネルと
を含む剛性遠心機容器を準備するステップと、
ｂ）遠心機を準備するステップと、
ｃ）前記剛性遠心機容器を前記遠心機に固定するステップと、
ｄ）前記遠心機及び前記遠心機容器を回転させるステップと、
ｅ）前記体液又は組織の一部を、回転している前記遠心機容器内に前記導入チャネルを介して供給して、前記体液又は組織を、少なくとも２つの分画として前記チャンバ内にて径方向に分離させるステップであって、前記分画の１つが、前記所定の細胞成分を含有し、前記排出チャネルの遠位端が前記所定成分と流体連通するように配設されているステップと、
ｆ）前記所定成分を、回転している前記遠心機容器から前記排出チャネルを介して抜き取るステップと
を含む方法。 - 体液又は組織から所定の細胞成分を収集する方法であって、
ａ）導入チューブと少なくとも１本の排出チューブとを具備する可撓性遠心機バッグを準備するステップと、
ｂ）前記可撓性遠心機バッグを間に保持するように、下方環状チャネルを有する環状基部と、上方環状チャネルを有する環状カバーとを含む回転自在なロータを準備するステップと、
ｃ）前記可撓性遠心機バッグを前記基部内に配設するステップと、
ｄ）前記カバーを前記基部上に重ね合わせることにより、内側チャンバを、前記上方チャネルと下方チャネルとでやや偏心した８の字断面形状とし、且つ前記遠心機バッグを、固定しながら前記ロータと回転できる状態にするステップと、
ｅ）前記ロータを回転させるステップと、
ｆ）前記体液又は組織の一部を、回転している前記遠心機バッグ内に前記導入チューブを介して導入して、前記体液又は組織を、それぞれの密度に基づく少なくとも２つの分画として、中心軸から異なる径方向距離に分離させるステップであって、前記分画の１つが前記所定成分を含有し、前記排出チューブの遠位端が前記所定成分と流体連通するように配設されているステップと、
ｇ）前記所定細胞成分の分画を、前記排出チューブを介して取り出すステップと
を含む方法。 - トランスフェクトされた遺伝子を含有し、所定の形状を有する自家由来血小板ゲルを調製する方法であって、
ａ）少なくとも１本の導入チューブと少なくとも１本の排出チューブとを具備する可撓性遠心機バッグを準備するステップと、
ｂ）遠心機を準備するステップと、
ｃ）前記可撓性遠心機バッグを前記遠心機内に固定して、前記可撓性遠心機バッグを前記遠心機と共に回転できるようにするステップと、
ｄ）前記遠心機を回転して、前記遠心機バッグを回転させるステップと、
ｅ）抗凝固剤入り全血の一部を、回転している前記遠心機バッグ内に前記導入チューブを介して供給して、最も外側に位置する第１の赤血球含有分画、白血球及び血小板を含有する中間軟層分画、及び最も内側に位置する貧血小板血漿含有分画として前記全血を径方向に分離させるステップであって、前記排出チューブの遠位端が、前記軟層分画と流体連通した状態にされるステップと、
ｆ）前記軟層分画の大部分が前記バッグから取り出されるまで、前記軟層分画含有分画を、回転している前記遠心機バッグから前記排出チューブを介して抜き取り、前記排出チューブの前記遠位端付近に前記最も内側に位置する分画が検出された時点で、前記軟層分画の抜取りを終了するステップと、
ｇ）単離された前記軟層分画に含まれる前記血小板を活性化させるステップと、
ｈ）ステップｇ）で用いた前記軟層分画内の前記白血球に、ベクター／遺伝子の組合せをトランスフェクションするステップと、
ｉ）所望形状の型内において、前記トランスフェクトされた白血球を含む前記軟層分画に、前記血小板ゲルを適用すべき個人から単離したトロンビン及び非活性の血液成分を組み合わせるステップと、
ｊ）前記自家由来血小板ゲルを形成するために、ステップｉ）による前記組合せを前記型内にて固化させるステップと
を含む方法。 - 前記細胞が、ＬＭＰ−１アデノウイルスを用いてトランスフェクトされる、請求項７に記載の方法。
- ｋ）前記型から前記自家由来血小板ゲルを取り出すステップと、
ｌ）前記自家由来血小板ゲルを患者内の腔に挿入するステップと
をさらに含む、請求項７に記載の方法。 - 前記自家由来血小板ゲルがタンパク質を前記腔内に分泌する、請求項９に記載の方法。
- 前記自家由来血小板ゲルが、前記腔を挿入された組織内における組織の再編を促進できる、請求項９に記載の方法。
- 請求項７に記載の方法により調製された前記自家由来血小板ゲル。
- 所定形状を有し、トランスフェクトされた遺伝子と血液成分とを含む自家由来血小板ゲルであって、前記血小板ゲルを形成する前記血液成分のすべてが、前記血小板ゲルが適用される個人から単離される、自家由来血小板ゲル。
- 体液又は組織から、幹細胞、軟層、骨髄細胞、赤血球、白血球、血小板、血清、蛍光標識細胞及び磁気標識細胞からなる群から選択される所定細胞成分を収集する方法であって、
ａ）少なくとも１本の導入チューブと少なくとも１本の排出チューブを具備する、ドーナッツ形状の可撓性遠心機バッグを準備するステップと、
ｂ）遠心機を準備するステップと、
ｃ）前記可撓性遠心機バッグを前記遠心機内に固定して、前記可撓性遠心機バッグを前記遠心機と共に回転できるようにするステップと、
ｄ）前記遠心機を回転させて、前記遠心機バッグを回転させるステップと、
ｅ）前記体液又は組織の一部を、回転している前記遠心機バッグ内に前記導入チューブを介して供給して、前記体液又は組織を２つ以上の分画として径方向に分離させるステップであって、前記分画の１つが前記所定の細胞成分を含有し、前記排出チューブの遠位端が、前記所定の細胞成分と流体連通した状態にされているステップと、
ｆ）前記所定細胞の大部分が前記バッグから取り出されるまで、前記所定成分を含有する前記分画を、前記排出チューブを介して回転している前記遠心機バッグから抜き取り、前記排出チューブの前記遠位端付近に不要な分画が検出された時点で、前記所望細胞の抜取りを終了するステップと
を含む方法。
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