JP2004506648A

JP2004506648A - Non-covalent inhibitors of urokinase and angiogenesis

Info

Publication number: JP2004506648A
Application number: JP2002519486A
Authority: JP
Inventors: レヴィー，　オディル　エスザー; マディソン，　エドウィン　エル．; センプレ，　ジョセフ　エドワード; タミズ，　アミール　ピー．; ウェインハウス，　マイケル　アイ．
Original assignee: コーバス　インターナショナル，　インコーポレイテッド
Priority date: 2000-08-11
Filing date: 2001-08-10
Publication date: 2004-03-04
Also published as: WO2002014349A3; NZ518195A; AU785260B2; AU2006235835B2; CA2387002A1; AU2006235835A1; WO2002014349A2; AU8334701A; NZ538572A; NZ547626A; IL149042A0

Abstract

ウロキナーゼの非共有結合性インヒビターとしての活性を有し、そして血管形成の減少または阻害における活性を有する新規の化合物が提供される。これらの化合物は、Ｐ１にアミジノまたはグアニジノ部分を有する基あるいはその誘導体を有する。これらの化合物は、インビトロで、プラスミノーゲンアクチベータレベルをモニタリングするために有用であり、そしてインビボで、ウロキナーゼの阻害または減少した活性によって回復される状態の処置ために、ならびに血管形成が病理学的状態に関連する病理学的状態を処置するために有用である。Novel compounds are provided that have activity as non-covalent inhibitors of urokinase and have activity in reducing or inhibiting angiogenesis. These compounds have a group having an amidino or guanidino moiety at P1 or a derivative thereof. These compounds are useful for monitoring plasminogen activator levels in vitro, and for treating conditions that are restored by inhibition or reduced activity of urokinase in vivo, as well as pathological changes in angiogenesis. Useful for treating a pathological condition associated with the condition.

Description

【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、米国出願番号０９／６３７，４８３（２０００年８月１１日出願）の一部継続である、米国特許出願番号０９／７３３，６４５（２０００年１２月７日出願）の一部継続である（これらの開示は、本明細書中で参考として援用される）。
【０００２】
（発明の分野）
ウロキナーゼは、腫瘍細胞の転移、新生血管形成、および他の活性に関与する酵素である。本発明の１つの目的は、ウロキナーゼの活性を阻害しそれによってその有害な効果を弱めるために使用され得るウロキナーゼインヒビターとして活性である新規の化合物を提供することである。本発明の別の目的は、血管形成、特に病理学的状態に関連する血管形成を阻害する新規の化合物を提供することである。
【０００３】
（発明の背景および導入）
尿型プラスミノーゲン活性化因子（ｕＰＡ；ウロキナーゼ）は、トリプシン／キモトリプシンファミリー内のセリンプロテアーゼである。その病理学的状態において、以下の３つの形態のｕＰＡが見られる：一本鎖プロｕＰＡ、二本鎖ｕＰＡ、および低分子量ｕＰＡ（Ｎ末端ドメインを欠く）。酵素原、プロｕＰＡは、Ｋ１５８−Ｉ１５９でペプチド結合を切断することによって、ｕ−ＰＡへ変換される。得られた二本鎖ｕＰＡは、ジスルフィド結合によって連結されており、約５０ｋＤのＭ_ｒ、およびＣ末端セリンプロテイナーゼドメインを有する。
【０００４】
ｕＰＡの活性は、そのレセプター、ｕＰＡＲへの結合の際、細胞表面に集中される。ｕＰＡＲは、一本鎖グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）−固定化膜レセプターである。ｕＰＡＲのＮ末端９２アミノ酸は、ｕＰＡおよびプロｕＰＡへの結合において主要な役割を果たす。ｕＰＡについてのレセプターは、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、単球、および好中球、ならびに血管内皮細胞、線維芽細胞、平滑筋細胞、ケラチノサイト、胎盤栄養膜、肝細胞、および広範な種々の腫瘍細胞上に配置されている。
【０００５】
ｕＰＡへのプロｕＰＡの変換（これは、主に、細胞表面上のｕＰＡＲで生じる）後、ｕＰＡは、プロスミノーゲンをプラスミンへ活性化する。活性化は、ヒトプラスミノーゲンについては残基ＰＧＲ−ＶＶでの、またはウシプラスミノーゲンについては残基ＳＧＲ−ＩＶでの切断の際に生じる。プラスミノーゲンはまた、細胞表面上に存在するので、この活性化カスケードは、原形質膜上においてｕ−ＰＡおよびプラスミンの活性を集中させる。プラスミンは、さらなるｕＰＡおよび他の酵素の活性、フィブリンの消化、および細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の成分の消化を含む多くの役割を有する。腫瘍を取り囲むＥＣＭの消化により、転移細胞に対する物理的バリアとしてのＥＣＭを除去し、転移細胞は、次いで、自由に、原発性腫瘍を離れて第２部位へ侵入する。癌転移におけるｕＰＡ／ｕＰＡＲ系の役割の総説は、「Ｔｈｅ　Ｕｒｏｋｉｎａｓｅ−ｔｙｐｅ　Ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ　Ａｃｔｉｖａｔｏｒ　Ｓｙｓｔｅｍ　ｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ：Ａ　Ｒｅｖｉｅｗ」、Ａｎｄｒｅａｓｅｎら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃ．７２：１−２２（１９９７）において提供される。
【０００６】
高レベルのｕＰＡと高速度の転移との間の相互関係および劣る予後が、特定の腫瘍、特に乳癌において記載される［Ｑｕａｘら、Ｊ．Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ．１１５：１９１−１９９（１９９１）；Ｄｕｆｆｙら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．５０：６８２７−６８２９（１９９０）］。例えば、以下の腫瘍は、高レベルのｕＰＡおよび／またはｕＰＡ活性ならびに高速度の転移を示した：肺［Ｏｋａら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．５１：３５２２−３５２５（１９９１）］、膀胱［Ｈａｓｕｉら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　５０：８７１−８７３（１９９２）］、胃［Ｎｅｋａｒｄａら、Ｌａｎｃｅｔ　３４３：１１７（１９９４）］、子宮癌［Ｋｏｂａｙａｓｈｉら、Ｃａｎｃｅｒ．Ｒｅｓ．５４：６５３９−６５４８（１９９４）］、卵巣［Ｋｕｈｎら、Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．５５：４０１−４０９（１９９４）］、腎臓［Ｈｏｆｍａｎら、Ｃａｎｃｅｒ　７８：４８７−４９２（１９９６）］、脳［Ｂｉｎｄａｈｌら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏ−Ｏｎｃｏｌ．２２：１０１−１１０（１９９４）］、および軟組織肉腫［Ｃｈｏｏｎｇら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ（Ｐｒｅｄ．Ｏｎｃｏｌ．）６９：２６８−２７２（１９９６）］。ｕＰＡの過剰産生は、インビボでの前立腺癌細胞によって増加された骨格転移（ｓｋｅｌｅｔａｌ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ）を生じると報告されている［Ａｃｈｂａｒｏｕら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．５４：２３７２−２３７７（１９９４）］。
【０００７】
ｕＰＡ活性の阻害または低下、あるいはｕＰＡとそのレセプター（ｕＰＡＲ）との相互作用の破壊／阻害は、細胞外マトリックスの維持に対する正の効果、および転移に対する阻害効果を有することを示した［ＯｓｓｏｗｓｋｉおよびＲｅｉｃｈ、Ｃｅｌｌ　３５：６１１−６１９（１９８３）；Ｏｓｓｏｗｓｋｉ、Ｃｅｌｌ　５２：３２１−３２８（１９８８）；Ｏｓｓｏｗｓｋｉ、Ｊ．Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ．１０７：２４３７−２４４５（１９８８）；Ｗｉｌｈｅｌｍら、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ　１３：２９６−３０２（１９９５）；Ａｃｈｂａｒｏｕら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．５４：２３７２−２３７７（１９９４）；Ｃｒｏｗｌｅｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ　９０：５０２１−５０２５（１９９３）；Ｋｏｏｋら、ＥＭＢＯ　Ｊ．１３：３９８３−３９９１（１９９４）］。このような実験的研究の結果は、ｕＰＡ−触媒プラスミノーゲン活性が、腫瘍進行、局所腫瘍侵襲および／または遠隔転移形成の律速であること示唆する。［Ａｎｄｒｅａｓｅｎら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃ．７２：１−２２（１９９７）］。
【０００８】
細胞移動および侵入に対するｕＰＡ系の効果は、細胞外マトリックスのプラスミン媒介分解の光分解効果、ならびに細胞外マトリックスの成分とのｕＰＡレセプターのより多くの直接的相互作用の両方に起因すると考えられる。細胞外マトリックスの分解は、転移細胞がこのマトリックスへ侵入することを可能にし、一方、ｕＰＡレセプターとこのマトリックス自体との間の相互作用は、その移動において、細胞を補助する。細胞表面上のまたは転移細胞のリーディングエッジ（ｌｅａｄｉｎｇ　ｅｄｇｅ）上のｕＰＡ／プラスミン系の局在化は、転移においてｕＰＡの推定される役割に一致する［Ｐｌｅｓｎｅｒら、Ｓｔｅｍ　Ｃｅｌｌｓ　１５：３９８−４０８（１９９７）］。
【０００９】
ビトロネクチン（細胞外マトリックスの成分）とのｕＰＡの相互作用は、細胞接着を媒介し、そしてｕＰＡＲがｕＰＡによって結合される場合、増強され得る。細胞表面接着分子（インテグリン）はまた、この接着機能に関与するようである（特に、β−１およびβ−２インテグリン）［Ｐａｙｓａｎｔら、Ｂｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．１００：４５−５１（１９９８）；Ｓｉｍｏｎら、Ｂｌｏｏｄ　８８：３１８５−３１９４（１９９６）］。ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８インテグリンは、ｕＰＡ−ｕＰＡＲ複合体と会合し得、これらのレセプターを有する細胞（例えば、好中球、白血球）の接着を促進し得る。
【００１０】
ｕＰＡ／ｕＰＡＲ系はまた、新しい脈管構造の確立、すなわち新生血管形成に関与する。
【００１１】
新しい脈管構造の確立は、一次および転移性腫瘍増殖を持続するために必要とされる。病理学的な新生血管形成はまた、網膜疾患、ルベオーシス虹彩炎、増殖性硝子体網膜症炎症性疾患、糖尿病網膜症、慢性ブドウ膜炎、フックス虹彩異色性虹彩毛様体炎、血管新生緑内障、角膜または眼の神経の新生血管形成、脈管疾患、翼状片、緑内障手術ブレブ不全（ｇｌａｕｃｏｍａ　ｓｕｒｇｅｒｙ　ｂｌｅｂ　ｆａｉｌｕｒｅ）、角質増殖症、ケロイドおよびポリープ形成（ＥＰ　４５１，１３０を参照のこと）の特徴である。所望でない脈管形成はまた、以下の状態において生じ得、または以下の活性の結果であり得る：黄斑分解、未熟児網膜症、角膜移植拒絶、水晶体後線維増殖症、流行性角結膜炎、ビタミンＡ欠乏症、コンタクトレンズオバーウエア（ｏｖｅｒ　ｗｅａｒ）、萎縮性角結膜炎、上輪部角膜炎、翼状乾性角結膜炎、シェーグレン病（ｓｏｇｒｅｎｓ　ｄｉｓｅａｓｅ）、しゅさ性挫瘡、フリクテン症（ｐｈｙｌｅｃｔｅｎｕｌｏｓｉｓ）、梅毒、らい病以外のＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ感染、脂質変性、化学的熱傷、細菌性または真菌性潰瘍、単純疱疹または帯状疱疹感染、原生動物感染、カポージ肉腫、モーレン潰瘍、テリエン辺縁変性、辺縁角質溶解、外傷、慢性関節リウマチ、全身性狼瘡、多発性動脈炎、ヴェーゲナーサルコイドーシス、スキーン腺炎、スティーヴンズ−ジョンソン疾患、放射状角膜切開、鎌状赤血球貧血、サルコイド、弾性線維性仮性黄色腫、パジェット病、静脈または動脈閉塞、頚動脈閉塞性疾患、慢性ブドウ膜炎、慢性絨毛組織炎、ライム病、イールズ病、ベチェット病（Ｂｅｃｈｅｔｓ　ｄｉｓｅａｓｅ）、近視、視神経乳頭の先天的な構造上の欠損（ｏｐｔｉｃ　ｐｉｔ）、シュタルガルト病、扁平部炎、慢性網膜剥離、過粘稠度症候群、トキソプラスマ症、レーザー後合併症（ｌａｓｅｒ　ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ）、線維性筋性組織の異常増殖、血管腫、オースラー−ウェーバ−ランデュ、固形腫瘍、血液媒介腫瘍（ｂｌｏｏｄ　ｂｏｒｎｅ　ｔｕｍｏｒ）、ＡＩＤＳ、眼血管新生疾患（ｏｃｕｌａｒ　ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒ　ｄｉｓｅａｓｅ）、変形性関節症、慢性炎症、クローン病、潰瘍性大腸炎、横紋筋肉腫の腫瘍、網膜芽の腫瘍、ユーイング肉腫の腫瘍、神経芽腫の腫瘍、骨肉腫の腫瘍、白血病、乾癬、アテローム性動脈硬化症、類天疱瘡［米国特許第５，７１２，２９１号に記載される］。
【００１２】
ｕＰＡ／ｕＰＡＲ結合のアンタゴニスト（ＩｇＧのＦｃへ融合されたｕＰＡのＥＧＦ様ドメイン）は、ネズミＢ１６黒色腫の新生血管形成および増殖を阻害すると述べられた［Ｍｉｎら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．５６：２４２８−２４３３（１９９６）］。乳癌における微細血管密度、血管侵入およびｕＰＡレベル間に述べられる相互関係は、この知見と一貫している［Ｈｉｌｄｅｎｂｒａｎｄら、Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　７２：８１８−８２３（１９９５）］。公知のｕＰＡインヒビターアミロリドはまた、種々の新生血管形成病理を阻害すると述べられた［Ｇｌａｓｅｒら、欧州特許第４５１，１３０；Ａｖｅｒｙら、Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｏｍｏｌ．１０８：１４７４−１４７６（１９９０）］。
【００１３】
ｕＰＡの２つの主な生理学的インヒビター、ＰＡＩ−１およびＰＡＩ−２が存在し、これらは、プロテイナーゼインヒビターのセルピンファミリーのメンバーである。セルピンのそれらの同族プロテアーゼへの結合は、各タンパク質のアミノ酸間の多数の相互作用を含み、セパリン反応性ループ（ＰＡＩ−１についてＳｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｍｅｔ−Ａｌａ（配列番号１）、ＰＡＩ−２についてＴｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ（配列番号２））中のものを含む。外因性ＰＡＩ−２の実験動物への導入が、肺転移の割合を阻害すると報告された［ＥｖａｎｓおよびＬｉｎ、Ａｍｅｒ．Ｓｕｒｇ．６１：６９２−６９７（１９９５）；Ｍｕｅｌｌｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ　９２：２０５−２０９（１９９５）］。ＰＡＩ−１が転移を阻害する能力は、まだ一貫して示されていない。ＰＡＩ−１についての遺伝子、およびその組換え発現のための手段が、Ｌｏｓｋｕｔｏｆｆらの米国特許第４，９５２，５１２号において開示される。組換えおよび天然ヒトＰＡＩ−２が、Ｓｔｅｐｈｅｎｓらの米国特許第５，４２２，０９０号において開示される。
【００１４】
最も広範に研究されるｕＰＡインヒビターは、インヒビターの４−置換ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボキサミジンのクラス内であり得、Ｂ４２８（４−ヨード−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボキサミジン）およびＢ６２３は、そのメンバーである［Ｔｏｗｌｅら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．５３：２５５３−２５５９（１９９３）；Ｂｒｉｄｇｅｓら、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１：４０３−４１０（１９９３）；Ｂｒｉｄｇｅｓら、米国特許第５，３４０，８３３号］。腫瘍細胞を播種した実験ラットにおけるＢ４２８の注入は、ｕＰＡＲ遺伝子発現を阻害し、一次腫瘍容積を減少させ、そして転移を減少させると述べられた［Ｘｉｎｇら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．５７：３５８５−３５９３（１９９７）］。腫瘍を有するマウスのＢ４２８またはＢ６２３での毎日の腹腔内処置は、筋肉および脂肪への転移を遮断するが、腫瘍誘発血管形成を阻害しないか、または突発性肺転移の割合を軽減しないと述べられた。実際、Ｂ６２３は、肺転移の形成を増強した（Ａｌｏｎｓｏら、Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．Ｔｒｅａｔ．４０：２０９−２２３（１９９６））。同系モデルのラット前立腺癌においてのＢ２４８の注入はまた、一次腫瘍容積および腫瘍重量の減少、および転移の減少を導いた［Ｒａｂｂａｎｉら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　６３：８４０−８４５（１９９５）］。
【００１５】
ｕＰＡの他の公知のインヒビターには、ｐ−アミノベンズアミジン（これは、ｕＰＡの競合的インヒビターである）およびアミロリドが挙げられる。両方の化合物が、実験動物の腫瘍の大きさを減少することが示された［Ｊａｎｋａｎら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．５７：５５９−５６３（１９９７）；Ｂｉｌｌｓｔｒｏｍら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　６１：５４２−５４７（１９９５）］。最近、エピガロ−カテキン−３没食子酸塩（ＥＧＣＧ）（緑茶に見出されるポリフェノール）は、ｕＰＡに結合してその活性を阻害すると報告された［Ｊａｎｋｕｎら、Ｎａｔｕｒｅ　３８７：５６１（１９９７）］。これらの研究者たちは、ＥＧＣＧは、アミロリドよりも弱いｕＰＡのインヒビターであると結論づけたが、ＥＧＣＧは、アミロリドよりもずっと多い用量で、毒性効果なしに消費され得ると示唆した。ｕＰＡの競合的インヒビター、α−Ｎ−ベンジルスルホニル−ｐ−アミノフェニルアラニンが、Ｐｙｅらによって米国特許第４，１６５，２５８号において開示される。
【００１６】
ｕＰＡ／ｕＰＡＲ系を阻害するための他のアプローチには、ｕＰＡのｕＰＡＲ−結合ドメインおよびＰＡＩ−２からなる二官能性ハイブリッド分子の開発が挙げられ、これは、インビトロでｕＰＡを阻害しｕＰＡＲに結合すると言われる［Ｂａｌｌａｎｃｅら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２０７：１７７−１８３（１９９２）］。ｕＰＡＲのアンタゴニストがまた、研究されており［ＤｏｙｌｅおよびＲｏｓｅｎｂｅｒｇ、米国特許第５，６５６，７２６号；Ｍｉｎら、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ．５６：２４２８−２４３３（１９９６）］、ｕＰＡに対して相補的なアンチセンスオリゴヌクレオチドも同様に研究された［Ｗｉｌｈｅｌｍら、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｍｅｔａｓｔ．１３：２９６−３０２（１９９５）；ＩｎｖｅｒｓｅｎおよびＳｃｈｏｌａｒ、米国特許第５，５５２，３９０号］。ｕＰＡＲに対して指向され、そしてＵＰＡＲへのｕＰＡの結合を阻害すると言われる抗体が、Ｄａｎｏらによって米国特許第５，５１９，１２０号において開示される。ウロキナーゼを阻害するといわれる低分子には、種々の他のセリンプロテアーゼと共に、Ａｂｅらによって米国特許第５，５０８，３８５号および米国特許第５，１５３，１７６号において開示されるもの、ならびにＴａｋａｎｏらによってＪ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔ．２７１：１０２７−１０３３（１９９４）において開示されるものが挙げられる。
【００１７】
ｕＰＡＲへのｕ−ＰＡの結合を直接的に阻害する化合物が、開発された（Ｃｒｏｗｌｅｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ　９０：５０２１−５０２５（１９９３）；Ｇｏｏｄｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ　９１：７１２９−７１３３（１９９４）；Ｋｏｂａｙａｓｈｉら、Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　６７：５３７−５４４（１９９３）、およびＩｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　５７：７２７−７３３（１９９４）、およびＪ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：８３６１−８３６６（１９９５）；Ｌｕら、ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔ．３５６：５６−５９（１９９４）およびＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔ．３８０：２１−２４（１９９６））。
【００１８】
さらに、プロ肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、細胞移動刺激タンパク質は、ｕＰＡの基質である［Ｎａｌｄｉｎｉｅら、ＥＭＢＯ　Ｊ．１１：４８２５−４８３３（１９９２）］。６６ｋＤａ細胞外マトリックスタンパク質およびフィブロネクチンのｕＰＡによる直接的切断がまた報告され、これは、細胞移動の促進におけるｕＰＡについてのより直接的な役割を示唆する［Ｑｕｉｇｌｅｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８４：２７７６−２７８０（１９８７）］。従って、ｕＰＡの阻害は、同様に、これらの活性に影響を与え得る。
【００１９】
（発明の要旨）
本発明は、新規なペプチド性（ｐｅｐｉｔｉｄｉｃ）非共有結合ウロキナーゼインヒビターに関する。この化合物は、Ｐ１にアルギニン模倣物を有する。これらの化合物は、ウロキナーゼの強力なインヒビターとしての活性を有し、それによって、その有害なこう化を減少することにおいて有用である。本発明の化合物は、血管形成の阻害において活性であり、特に、病理学的プロセスに関連する血管形成の阻害において活性である。
【００２０】
従って、１つの局面において、本発明は、以下の式（Ｉ）の化合物およびその薬学的受容可能な塩に関する：
【００２１】
【化１１】

ここで、
（ａ）Ｘは、−Ｓ（Ｏ）_２−、−Ｎ（Ｒ’）−Ｓ（Ｏ）_２−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｐ−（Ｏ）（Ｒ’）−、および直接結合からなるから選択され、ここで、Ｒ’は、独立して、水素、１〜約４炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、または約７〜約１６炭素原子のアラルキルであり、ただし、Ｘが−Ｐ（Ｏ）（Ｒ’）−の場合、Ｒ’は、水素ではない；
（ｂ）Ｒ_１は、以下からなる群から選択される：
（１）非置換、あるいはＹ_１およびＹ_２からなる群から選択される１つまたは２つの置換基で置換された、１〜約１２炭素原子のアルキル、
（２）約３〜約８炭素原子のシクロアルキルで置換された１〜約３炭素原子のアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、またはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換される、アルキル、
（３）３〜約１５炭素原子のシクロアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、シクロアルキル、
（４）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、４〜約１０環原子のヘテロシクロアルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここでｉは、０、１または２であり、このヘテロシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロアルキル、
（５）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する４〜約１０環原子のヘテロシクロであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここで、ｉは０、１、または２であり、このヘテロシクロは
【００２２】
【化１２】

を含み、ここで、この
【００２３】
【化１３】

は、３〜６個の環炭素原子を有する５〜７員のヘテロ環であり、ここで、Ｖは、−ＣＨ_２−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）_２−または−Ｓ−であり、このヘテロシクロは、非置換であるか、あるいはこの環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロ、
（６）非置換または約３〜約８炭素原子のシクロアルキルで置換された、２〜約６炭素原子のアルケニルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、またはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アルケニル、
（７）約６〜約１４炭素原子のアリールであって、このアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アリール、
（８）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、約５〜約１４環原子のヘテロアリールであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアリール、
（９）約７〜約１５炭素原子のアラルキルであって、このアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そしてこのアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルキル、
（１０）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、このヘテロアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そしてこのヘテロアラルキルは、この環上で非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルキル、
（１１）約８〜約１６炭素原子のアラルケニルであって、このアラルケニルは、非置換であるか、あるいはこのアリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルケニル、
（１２）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約１４環原子のヘテロアラルケニルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアラルケニルは、非置換であるか、あるいはこの環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルケニル、
【００２４】
【化１４】

（１７）約９〜約１５炭素原子の縮合炭素環式アルキル、
（１８）１〜約１２炭素原子のジフルオロメチルまたは過フルオロアルキル、
（１９）約６〜約１４炭素原子の過フルオロアリール、
（２０）約７〜約１５炭素原子の過フルオロアラルキル、および
（２１）Ｘが直接結合の場合、水素；
ここで、各Ｙ_１、Ｙ_２、およびＹ_３は、独立して選択され、そして以下
（ｉ）ハロゲン、シアノ、ニトロ、テトラゾリル、グアニジノ、アミジノ、メチルグアニジノ、−ＣＦ_３、−ＣＦ_２ＣＦ_３、−ＣＨ（ＣＦ_３）_２、−Ｃ（ＯＨ）（ＣＦ_３）_２、−ＯＣＦ_３、−ＯＣＦ_２Ｈ、−ＯＣＦ_２ＣＦ_３、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨＺ_１、−ＯＣ（Ｏ）ＮＺ_１Ｚ_２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｚ_１、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＺ_１、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＺ_１Ｚ_２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＺ_１、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＺ_１、−Ｃ（Ｏ）ＮＺ_１Ｚ_２、−Ｐ（Ｏ）_３Ｈ_２、−Ｐ（Ｏ）_３（Ｚ_１）_２、−Ｓ（Ｏ）_３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）_ｍＺ_１、−Ｚ_１、−ＯＺ_１、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨＺ_１、−ＮＺ_１Ｚ_２、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ_２、−Ｃ（＝ＮＯＨ）ＮＨ_２、−Ｎ−モルホリノ、および−Ｓ（Ｏ）_ｍ（ＣＦ_２）_ｑＣＦ_３からなる群から選択され、ここで、ｍは０、１または２であり、ｑは０〜５の整数であり、そしてＺ_１およびＺ_２は、独立して、１〜約１２炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、約５〜約１４環原子のヘテロアリール、約７〜約１５炭素原子のアラルキル、および約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルからなる群から選択される、あるいは
（ｉｉ）Ｙ_１およびＹ_２は、一緒に−Ｏ［Ｃ（Ｚ_３）（Ｚ_４）］_ｒＯ−または−Ｏ［Ｃ（Ｚ_３）（Ｚ_４）］_ｒ＋１−となるように選択され、ここで、ｒは、１〜４の整数であり、そしてＺ_３およびＺ_４は、独立して、水素、１〜約１２炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、約５〜約１４環原子のヘテロアリール、約７〜約１５炭素原子のアラルキル、および約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルからなる群から選択される；
（ｃ）Ｒ_２は、−ＣＨ_３、−Ｃ_２Ｈ_５、−（ＣＨ_２）_２ＯＨ、−（ＣＨ_２）_２ＯＡ_１、−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＨ、−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＡ_１、および−ＣＨ_２ＮＨ−Ｘ’−Ｒ_６からなる群から選択され、ここで、Ａ_１は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ_６、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_６または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ_５Ｒ_６であり；Ｘ’は、−Ｓ（Ｏ）_２−、−Ｓ（Ｏ）_２−Ｎ（Ｒ”）−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ”）−、および直接結合からなる群から選択され、ここで、Ｒ”は、水素、１〜約４炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、または約７〜約１６炭素原子のアラルキルであり、ただし、Ｘ’が−Ｐ（Ｏ）（Ｒ”）−の場合、Ｒ”は水素ではなく；Ｒ_５は、以下からなる群から選択される：
（１）非置換、あるいはＹ_１およびＹ_２からなる群から選択される１〜２個の置換基で置換された、１〜約４炭素原子のアルキル、
（２）３〜約６炭素原子のシクロアルキルで置換された１〜約３炭素原子のアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換または三置換される、アルキル、
（３）３〜約６炭素原子のシクロアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、シクロアルキル、
（４）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、４〜約６環原子のヘテロシクロアルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここでｉは、０、１または２であり、このヘテロシクロアルキルは、非置換であるか、またはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロアルキル、
（５）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する４〜約６環原子のヘテロシクロであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここで、ｉは０、１、または２であり、このヘテロシクロは
【００２５】
【化１５】

を含み、ここで、この
【００２６】
【化１６】

は、３〜６個の環炭素原子を有する５〜７員のヘテロ環であり、ここで、Ｖは、−ＣＨ_２−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）_２−または−Ｓ−であり、このヘテロシクロは、非置換であるか、あるいこの環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロ、
（６）非置換または約３〜約６炭素原子のシクロアルキルで置換された、２〜約６炭素原子のアルケニルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、またはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アルケニル、
（７）フェニルであって、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、フェニル、
（８）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、約５〜約６環原子のヘテロアリールであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアリール、
（９）フェニルで置換された１〜約４炭素原子のアルキルであって、このフェニルは、非置換であるか、あるいはこのフェニル環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アルキル、
（１０）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約６環原子のヘテロアラルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そしてこのヘテロアラルキルは、この環上で非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルキル、
（１１）約８〜約１２炭素原子のアラルケニルであって、このアラルケニルは、非置換であるか、あるいはこのアリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルケニル、
（１２）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約６環原子のヘテロアラルケニルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアラルケニルは、非置換であるか、あるいはこの環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルケニル、ならびに
（１３）水素；そして
Ｒ_６は、以下からなる群から選択される：
（１）非置換、あるいはＹ_１およびＹ_２からなる群から選択される１〜２個の置換基で置換された、１〜約１２炭素原子のアルキル、
（２）３〜約８炭素原子のシクロアルキルで置換された１〜約３炭素原子のアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換または三置換される、アルキル、
（３）３〜約１５炭素原子のシクロアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、シクロアルキル、
（４）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、４〜約１０環原子のヘテロシクロアルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここでｉは、０、１または２であり、このヘテロシクロアルキルは、非置換であるか、またはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロアルキル、
（５）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する４〜約１０環原子のヘテロシクロであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここで、ｉは０、１、または２であり、このヘテロシクロは
【００２７】
【化１７】

を含み、ここで、この
【００２８】
【化１８】

は、３〜６個の環炭素原子を有する５〜７員のヘテロ環であり、ここで、Ｖは、−ＣＨ_２−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）_２−または−Ｓ−であり、このヘテロシクロは、非置換であるか、あるいこの環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロ、
（６）約６〜約１４炭素原子のアリールであって、このアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アリール、
（７）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、約５〜約１４環原子のヘテロアリールであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアリール、
（８）約７〜約１５炭素原子のアラルキルであって、このアラルキルは、非置換であるか、またはこのアルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そしてこのアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルキル、
（９）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そしてこのヘテロアラルキルは、この環上で非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルキル、ならびに
（１０）水素、ただし、Ａ_１が−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ_６である場合、Ｒ_６は水素ではない；
（ｄ）Ｒ_３は、Ｈまたはメチルから選択されるか、あるいはＲ_３ならびにＲ_４ａおよびＲ_４ｂは、一緒に（ｆ）に記載されるように選択される；
（ｅ）（ｉ）Ｒ_４ａは、Ｓの立体配置であり、そしてＨ、−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＣＮ、１〜約３炭素原子の低級アルキル、−ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ_２ＣＨ＝ＣＨ_２および−ＣＨ＝ＣＨ_２からなる群から選択され、そしてＲ_４ｂは、水素である；
（ｉｉ）Ｒ_４ａおよびＲ_４ｂは、独立して、１〜３炭素原子の低級アルキルである；
（ｉｉｉ）Ｒ_４ａおよびＲ_４ｂは、一緒に選択され、そして−（ＣＨ_２）_ｋ−であり、ここで、ｋは５または６であり、スピロシクロアルキルを提供する；または
（ｉｖ）Ｒ_３、ならびにＲ_４ａおよびＲ_４ｂは、（ｆ）に記載されるように一緒に選択される；
（ｆ）あるいは、Ｒ_３およびＲ_４ａは、Ｓの立体配置になるように一緒に選択されて、プロリル、ピペコリル、アゼチジン−２−カルボニル、４−ヒドロキシプロリル、３−ヒドロキシプロリル、４−アミノプロリル、４−（−ＣＨ_２ＮＨ_２）−プロリル、３，４−メタノプロリル、および３，４−デヒドロプロリルからなる群から選択される基をＰ２に提供し、そしてＲ_４ｂは水素である；
（ｇ）Ｒ_７は、水素または１〜約４炭素原子のアルキルである；ならびに
（ｈ）Ｅは、Ｑ−Ｔである、
ここで、（ｉ）Ｑは、−Ｃ（Ｒ_１３Ｒ_１４）_ｔ−、Ｒ_８およびＲ_９で置換されたフェニル、Ｒ_８またはＲ_８およびＲ_９で置換された、１〜２個のヘテロ原子を有する５員または６員の複素環式環、ならびにＲ_８およびＲ_９で置換された、１〜２個のヘテロ原子を有する９員または１０員の複素環式環からなる群から選択され、ここで、このヘテロ原子は、窒素および硫黄から選択される；ならびに
（ｉｉ）Ｔは、−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１、および−ＮＨＲ_１５からなる群から選択される；
ここで、Ｒ_８およびＲ_９は、独立して、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、１〜約４炭素原子のアルキル、１〜約４炭素原子のアルコキシで置換された１〜約４炭素原子のアルキル、１〜約６炭素原子のアルコキシ、およびトリフルオロメチルからなる群から選択され；Ｒ_１０およびＲ_１１は、独立して、水素、ヒドロキシ、１〜約３炭素原子のアルコキシ、３〜約１６炭素原子のトリヒドロカルビルシリル、１〜約３炭素原子のアルキル、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_１２であり、ただし、Ｒ_１０およびＲ_１１は、両方ともヒドロキシまたは両方ともアルコキシではない；Ｒ_１２は、水素、１〜約６炭素原子のアルキル、１〜約６炭素原子のアルコキシ、または（ＣＦ_２）_ｊＣＦ_３であり、ここで、ｊは０、１、２または３である；Ｒ_１３およびＲ_１４の各々は、独立して、水素および１〜約３炭素原子の低級アルキルからなる群から選択される；Ｒ_１５は、水素、１〜約６炭素原子のアルキル、および−（ＣＦ_２）_ｈＣＦ_３からなる群から選択され、ここで、ｈは、０、１、２または３であり、そしてｔは、０〜６の整数である。
【００２９】
本発明の化合物は、以下の式Ｉａに見られるように、Ｐ_１、Ｐ_２、Ｐ_３およびＰ_４と名付けられる部分に分割され得る：
【００３０】
【化１９】

ここで、Ｘ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_７およびＥは、式（Ｉ）に関して定義される通りである。従って、式（Ｉ）の化合物のＰ_１またはＰ１と呼ばれる部分は、以下の部分である：
【００３１】
【化２０】

式（Ｉ）の化合物のＰ_２またはＰ２と呼ばれる部分は、以下の部分である：
【００３２】
【化２１】

式（Ｉ）の化合物のＰ_３またはＰ３と呼ばれる部分は、以下の部分である：
【００３３】
【化２２】

他の因子のうちでも、本発明は、本発明者らの発明の新規化合物が、ウロキナーゼのインヒビターとして活性であるという、本発明者らの発見に基づく。本発明の化合物は、新脈管形成の阻害において、活性を示す。
【００３４】
別の局面において、本発明は、治療有効量の本発明の化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物に関する。
【００３５】
なお別の局面において、本発明は、本発明の化合物および薬学的組成物を、ウロキナーゼの阻害のために使用する方法に関する。
【００３６】
（定義）
本発明によれば、そして本明細書中において使用される場合に、以下の用語は、他に明白に示されない限り、以下の意味を有するよう定義される。
【００３７】
用語「アルケニル」とは、少なくとも１つの二重結合を有する不飽和脂肪族基をいう。
【００３８】
用語「アルキル」とは、直鎖、分枝鎖および環状（多環式を含む）の基を含む飽和脂肪族基をいう。
【００３９】
用語「アルコキシ」および「アルコキシル」とは、式Ｒ−Ｏ−を有する基をいい、ここで、Ｒは、アルキル基である。
【００４０】
用語「アルコキシカルボニル」とは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲをいい、ここで、Ｒは、アルキルである。
【００４１】
用語「アラルケニル」とは、アリール基で置換されたアルケニル基をいう。好ましくは、このアルケニル基は、２〜約６個の炭素原子を有する。
【００４２】
用語「アラルキル」とは、アリール基で置換されたアルキル基をいう。適切なアラルキル基としては、ベンジル、フェネチルなどが挙げられ、これらの全ては、必要に応じて置換され得る。好ましくは、このアルキル基は、１〜約６個の炭素原子を有する。
【００４３】
用語「アリール」とは、共役π電子系を有する少なくとも１つの環を有する、芳香族基をいい、そして炭素環式アリール、複素環式アリールおよびビアリール基が挙げられ、これらの全ては、必要に応じて置換され得る。
【００４４】
用語「アリールオキシ」とは、式Ｒ−Ｏ−を有する基をいい、ここで、Ｒはアリール基である。
【００４５】
用語「アラルコキシ」とは、式Ｒ−Ｏ−を有する基をいい、ここで、Ｒはアラルキル基である。
【００４６】
用語「アミノ酸」とは、構造においてＤとＬとの立体異性体の形態が可能である場合には、これらのＤおよびＬの立体異性体の、天然と非天然との両方のアミノ酸、ならびにそれらのアナログをいう。天然アミノ酸としては、アラニン（Ａｌａ）、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、システイン（Ｃｙｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リジン（Ｌｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）およびバリン（Ｖａｌ）が挙げられる。非天然アミノ酸としては、以下が挙げられるが、それらに限定されない：アゼチジンカルボン酸、２−アミノアジピン酸、３−アミノアジピン酸、β−アラニン、アミノプロピオン酸、２−アミノ酪酸、４−アミノ酪酸、６−アミノカプロン酸、２−アミノヘプタン酸、２−アミノイソ酪酸、３−アミノイソ酪酸、２−アミノピメリン酸、２，４　ジアミノイソ酪酸、デモシン（ｄｅｍｏｓｉｎｅ）、２，２’−ジアミノピメリン酸、２，３−ジアミノプロピオン酸、Ｎ−エチルグリシン、Ｎ−エチルアスパラギン、ヒドロキシリジン、アロヒドロキシリジン、３−ヒドロキシプロリン、４−ヒドロキシプロリン、イソデスモシン（ｉｓｏｄｅｓｍｏｓｉｎｅ）、アロイソロイシン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ−メチルイソロイシン、Ｎ−メチルバリン、ノルバリン、ノルロイシン、オルニチンおよびピペコリン酸。アミノ酸アナログとしては、可逆的かまたは非可逆的に化学的にブロックされたか、あるいはＮ末端アミノ基または側鎖基が改変された、天然および非天然のアミノ酸が挙げられ、これらは例えば、メチオニンスルホキシド、メチオニンスルホン、Ｓ−（カルボキシメチル）−システイン、Ｓ−（カルボキシメチル）−システインスルホキシドおよびＳ−（カルボキシメチル）−システインスルホンである。
【００４７】
用語「アミノ酸アナログ」とは、Ｃ末端カルボキシ基、Ｎ末端アミノ基または側鎖官能基のいずれかが別の官能基に化学的に改変された、アミノ酸をいう。例えば、アスパラギン酸−（β−メチルエステル）は、アスパラギン酸のアミノ酸アナログであり；Ｎ−エチルグリシンは、グリシンのアミノ酸アナログであり；またはアラニンカルボキサミドは、アラニンのアミノ酸アナログである。
【００４８】
用語「アミノ酸残基」とは、以下の構造を有する基をいう：（１）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ−ＮＨ−であって、ここで、Ｒは、代表的に−ＣＨ（Ｒ’）−であり、ここで、Ｒ’は、Ｈまたは炭素含有置換基である；または（２）
【００４９】
【化２３】

であって、ここで、ｐは１、２または３であり、それぞれアゼチジンカルボン酸残基、プロリン残基またはピペコリン酸残基を表す。
【００５０】
「ビアリール」とは、本明細書中に定義されるような炭素環式アリールまたは複素環式アリールで、フェニル環の結合点に対してオルト、メタまたはパラで置換されたフェニルをいう。
【００５１】
「ブライン」とは、塩化ナトリウムの飽和水溶液をいう。
【００５２】
「炭素環式アリール」とは、芳香族環の環原子が炭素原子である芳香族基をいう。炭素環式アリール基としては、単環式炭素環式アリール基およびナフチル基が挙げられ、これらの全ては、必要に応じて置換され得る。適切な炭素環式アリール基としては、フェニルおよびナフチルが挙げられる。適切な置換炭素環式アリール基としては、１または２個の置換基で置換されたインデンおよびフェニルが挙げられる。この置換基は、有利には、低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、ハロゲン、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、ニトロ、およびシアノなどである。置換（された）ナフチルとは、本明細書中上記で式（Ｉ）に関して定義されるようなＹ_１、Ｙ_２および／またはＹ_３によって置換される、ナフチル、より好ましくは、１−ナフチルまたは２−ナフチルをいう。
【００５３】
「シクロアルケニル」とは、環状アルケニル基をいう。適切なシクロアルケニル基としては、例えば、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが挙げられる。
【００５４】
「シクロアルキル」とは、少なくとも１つの環を有する環状アルキル基をいい、そして縮環環状アルキル基を含む多環式基が挙げられる。適切なシクロアルキル基としては、例えば、シクロヘキシル、シクロプロピル、シクロペンチル、およびシクロヘプチルが挙げられる。
【００５５】
「シクロヘキシルメチル」とは、ＣＨ_２に結合したシクロヘキシル基をいう。
【００５６】
「縮合炭素環式」とは、芳香族環と非芳香族環との両方を有する多環式縮合炭素環式環をいう。適切な縮合炭素環式環としては、フルオレニル、テトラリンなどが挙げられる。
【００５７】
「縮合炭素環式アルキル」とは、縮合した炭素環式環部分（好ましくは、芳香族環と非芳香族環との両方を含む、多環式縮合炭素環式環）で置換されたアルキル基をいう。適切な縮合炭素環式アルキル基としては、フルオレニルメチルなどが挙げられる。
【００５８】
用語「ハロゲン」とは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素をいう。
【００５９】
「ヘテロアラルケニル」とは、ヘテロアリールで置換されたアルケニル基をいい、そして「Ｈａｎｄｂｏｏｋ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｃｓ」、第４９版、１９６８，Ｒ．Ｃ．Ｗｅａｓｔ編；Ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｕｂｂｅｒ　Ｃｏ．，Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ，ＯＨに記載される複素環式系が挙げられる。特に、Ｓｅｃｔｉｏｎ　Ｃ，Ｒｕｌｅｓ　ｆｏｒ　Ｎａｍｉｎｇ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｂ．Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ　Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ　Ｓｙｓｔｅｍｓを参照のこと。好ましくは、このアルケニル基は、２〜約６個の炭素原子を有する。
【００６０】
「ヘテロアラルキル」とは、ピコリルのようなヘテロアリールで置換されたアルキル基をいい、そして「Ｈａｎｄｂｏｏｋ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｃｓ」第４９版、１９６８，Ｒ．Ｃ．Ｗｅａｓｔ編；Ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｕｂｂｅｒ　Ｃｏ．，Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ，ＯＨに記載される複素環式系が挙げられる。特に、Ｓｅｃｔｉｏｎ　Ｃ，Ｒｕｌｅｓ　ｆｏｒ　Ｎａｍｉｎｇ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｂ．Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ　Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ　Ｓｙｓｔｅｍｓを参照のこと。好ましくは、このアルキル基は、１〜約６個の炭素原子を有する。
【００６１】
「ヘテロアリール」とは、１〜１４の炭素原子を有し、そして環原子の残りがヘテロ原子である、芳香族基をいい、そして「Ｈａｎｄｂｏｏｋ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｃｓ」，第４９版、１９６８，Ｒ．Ｃ．Ｗｅａｓｔ編；Ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｕｂｂｅｒ　Ｃｏ．，Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ，ＯＨに記載される複素環式系が挙げられる。特に、Ｓｅｃｔｉｏｎ　Ｃ，Ｒｕｌｅｓ　ｆｏｒ　Ｎａｍｉｎｇ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｂ．Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ　Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ　Ｓｙｓｔｅｍｓを参照のこと。適切なヘテロ原子としては、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉが挙げられ、ここで、ｉは、０、１または２であり、そして適切な複素環式アリールとしては、フラニル、チエニル、ピリジル、ピロリル、ピリミジル、ピラジニル、イミダゾリルなどが挙げられる。
【００６２】
「ヘテロシクロ」とは、炭素、窒素、酸素および／または硫黄原子からなる還元された複素環式環系をいい、そして「Ｈａｎｄｂｏｏｋ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｃｓ」、第４９版，１９６８，Ｒ．Ｃ．Ｗｅａｓｔ編；Ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｕｂｂｅｒ　Ｃｏ．，Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ，ＯＨに記載される複素環式系が挙げられる。特に、Ｓｅｃｔｉｏｎ　Ｃ，Ｒｕｌｅｓ　ｆｏｒ　Ｎａｍｉｎｇ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｂ．Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ　Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ　Ｓｙｓｔｅｍｓを参照のこと。
【００６３】
「ヘテロシクロアルキル」とは、ヘテロシクロ基で置換されたアルキル基をいい、そして「Ｈａｎｄｂｏｏｋ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｃｓ」、第４９版、１９６８，Ｒ．Ｃ．Ｗｅａｓｔ編；Ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｕｂｂｅｒ　Ｃｏ．，Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ，ＯＨ．に記載される複素環式系が挙げられる。特に、Ｓｅｃｔｉｏｎ　Ｃ．Ｒｕｌｅｓ　ｆｏｒ　Ｎａｍｉｎｇ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｂ．Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ　Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ　Ｓｙｓｔｅｍｓを参照のこと。好ましくは、このアルキル基は、約１〜約６の炭素原子を有する。
【００６４】
本明細書中において有機ラジカルまたは有機基に関して言及される用語「低級」とは、１以上５以下の炭素原子、好ましくは４以下の炭素原子、そして有利には１個または２個の炭素原子を有するような、ラジカルまたは基を定義する。このようなラジカルまたは基は、直鎖であっても分枝鎖であってもよい。
【００６５】
「過フルオロアルキル」とは、全ての水素がフッ素で置換された、アルキル基をいう。
【００６６】
「過フルオロアリール」とは、全ての水素がフッ素で置換された、アリール基をいう。
【００６７】
「過フルオロアリールアルキル」とは、アリール部分の全ての水素がフッ素で置換された、アラルキル基をいう。
【００６８】
「薬学的に受容可能な塩」としては、本発明の化合物と、有機酸または無機酸との組み合わせから誘導される、本発明の化合物の塩が挙げられる。実際には、塩形態の使用は、塩基形態の使用と同じである。本発明の化合物は、遊離塩基と塩形態との両方において有用であり、両方の形態が、本発明の範囲内であると考えられる。
【００６９】
「ＡｃＮ」、「ＣＨ_３ＣＮ」または「ＭｅＣＮ」とは、アセトニトリルをいう。
【００７０】
「ＡＩＢＮ」とは、２，２’−アゾビスイソブチロニトリルをいう。
【００７１】
「Ｂｎ」とは、ベンジルをいう。
【００７２】
「Ｂｏｃ」とは、ｔ−ブトキシカルボニルをいう。
【００７３】
「Ｂｏｃ_２Ｏ」とは、Ｂｏｃ無水物（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルカーボネート）をいう。
【００７４】
「ＢＯＣ−ＯＮ」とは、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシアミノ）−２−フェニルアセトニトリルをいう。
【００７５】
「ＢｚｌＳＯ_２」とは、ベンジルスルホニルをいう。
【００７６】
「Ｃｂｚ」または「ＣＢｚ」とは、ベンジルオキシカルボニルをいう。
【００７７】
「ＣＮＮＨ_２」または「Ｈ_２ＮＣＮ」とは、シアナミドをいう。
【００７８】
「ＣｓＣＯ_３」とは、炭酸セシウムをいう。
【００７９】
「ＤＣＡ」とは、ジクロロ酢酸をいう。
【００８０】
「ＤＣＣ」とは、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドをいう。
【００８１】
「ＤＣＭ」または「ＣＨ_２Ｃｌ_２」とは、ジクロロメタンをいう。
【００８２】
「ＤＩＥＡ」とは、ジイソプロピルエチルアミンをいう。
【００８３】
「ＤＭＦ」とは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドをいう。
【００８４】
「ＤＭＳＯ」とは、ジメチルスルホキシドをいう。
【００８５】
「ＤＭＡＰ」とは、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンをいう。
【００８６】
「ＥＤＣ」とは、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノ−プロピル）カルボジイミド塩酸塩をいう。
【００８７】
「Ｅｔ_３Ｎ」または「ＴＥＡ」とは、トリエチルアミンをいう。
【００８８】
「ＥｔＯＡｃ」とは、酢酸エチルをいう。
【００８９】
「ＥｔＯＨ」とは、エタノールをいう。
【００９０】
「ＨＡＴＵ」とは、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートをいう。
【００９１】
「ＨＢＴＵ」は、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートを意味する。
【００９２】
「ＨＣｌ」は、塩酸を意味する。
【００９３】
「ＨＯＡｃ」は、酢酸を意味する。
【００９４】
「ＨＯＡｔまたはＨＯＡＴ」は、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾールを意味する。
【００９５】
「ＨＯＢｔ」は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物を意味する。
【００９６】
「ｉ−ＢｕＯＣＯＣｌ」は、イソブチルクロロホルメートを意味する。
【００９７】
「ＨＰＬＣ」は、高速液体クロマトグラフィーを意味する。
【００９８】
「ＬｉＡｌＨ_４」は、水素化リチウムアルミニウムを意味する。
【００９９】
「ＬｉＡｌＨ_２（ＯＥｔ）_２」は、リチウムアルミニウムヒドリドジエトキシドを意味する。
【０１００】
「Ｍｅ」は、メチルを意味する。
【０１０１】
「ＭｅＯＨ」は、メタノールを意味する。
【０１０２】
「ＮＭＭ」は、Ｎ−メチルモルホリンを意味する。
【０１０３】
「ＮＢＳ」は、Ｎ−ブロモスクシンイミドを意味する。
【０１０４】
「ＰｈＢ（ＯＨ）_２」は、フェニルボロン酸を意味する。
【０１０５】
「Ｐｈ_３Ｐ」または「ＰＰｈ_３」は、トリフェニルホスフィンを意味する。
【０１０６】
「ＰｙＢＯＰ」は、ベンゾトリアゾール−イル（ｌｙ）−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートを意味する。
【０１０７】
「ＲＰ−ＨＰＬＣ」は、逆相高速液体クロマトグラフィーを意味する。
【０１０８】
「ＴＦＡ」は、トリフルオロ酢酸を意味する。
【０１０９】
「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを意味する。
【０１１０】
「ＴＬＣ」は、薄層クロマトグラフィーを意味する。
【０１１１】
（発明の詳細な説明）
以下の化合物およびその薬学的に受容可能な塩：
【０１１２】
【化２４】

ここで、
（ａ）Ｘは、−Ｓ（Ｏ）_２−、−Ｎ（Ｒ’）−Ｓ（Ｏ）_２−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｐ−（Ｏ）（Ｒ’）−、および直接結合からなるから選択され、ここで、Ｒ’は、独立して、水素、１〜約４炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、または約７〜約１６炭素原子のアラルキルであり、ただし、Ｘが−Ｐ（Ｏ）（Ｒ’）−の場合、Ｒ’は、水素ではない；
（ｂ）Ｒ_１は、以下からなる群から選択される：
（１）非置換、あるいはＹ_１およびＹ_２からなる群から選択される１つまたは２つの置換基で置換された、１〜約１２炭素原子のアルキル、
（２）約３〜約８炭素原子のシクロアルキルで置換された１〜約３炭素原子のアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、またはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換される、アルキル、
（３）３〜約１５炭素原子のシクロアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、シクロアルキル、
（４）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、４〜約１０環原子のヘテロシクロアルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここでｉは、０、１または２であり、このヘテロシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロアルキル、
（５）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する４〜約１０環原子のヘテロシクロであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここで、ｉは０、１、または２であり、このヘテロシクロは
【０１１３】
【化２５】

を含み、ここで、この
【０１１４】
【化２６】

は、３〜６個の環炭素原子を有する５〜７員のヘテロ環であり、ここで、Ｖは、−ＣＨ_２−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）_２−または−Ｓ−であり、このヘテロシクロは、非置換であるか、あるいはこの環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロ、
（６）非置換または約３〜約８炭素原子のシクロアルキルで置換された、２〜約６炭素原子のアルケニルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、またはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アルケニル、
（７）約６〜約１４炭素原子のアリールであって、このアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アリール、
（８）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、約５〜約１４環原子のヘテロアリールであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアリール、
（９）約７〜約１５炭素原子のアラルキルであって、このアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そしてこのアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルキル、
（１０）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、このヘテロアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そしてこのヘテロアラルキルは、この環上で非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルキル、
（１１）約８〜約１６炭素原子のアラルケニルであって、このアラルケニルは、非置換であるか、あるいはこのアリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルケニル、
（１２）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約１４環原子のヘテロアラルケニルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアラルケニルは、非置換であるか、あるいはこの環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルケニル、
【０１１５】
【化２７】

（１７）約９〜約１５炭素原子の縮合炭素環式アルキル、
（１８）１〜約１２炭素原子のジフルオロメチルまたは過フルオロアルキル、
（１９）約６〜約１４炭素原子の過フルオロアリール、
（２０）約７〜約１５炭素原子の過フルオロアラルキル、および
（２１）Ｘが直接結合の場合、水素；
ここで、各Ｙ_１、Ｙ_２、およびＹ_３は、独立して選択され、そして以下
（ｉ）ハロゲン、シアノ、ニトロ、テトラゾリル、グアニジノ、アミジノ、メチルグアニジノ、−ＣＦ_３、−ＣＦ_２ＣＦ_３、−ＣＨ（ＣＦ_３）_２、−Ｃ（ＯＨ）（ＣＦ_３）_２、−ＯＣＦ_３、−ＯＣＦ_２Ｈ、−ＯＣＦ_２ＣＦ_３、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨＺ_１、−ＯＣ（Ｏ）ＮＺ_１Ｚ_２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｚ_１、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＺ_１、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＺ_１Ｚ_２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＺ_１、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＺ_１、−Ｃ（Ｏ）ＮＺ_１Ｚ_２、−Ｐ（Ｏ）_３Ｈ_２、−Ｐ（Ｏ）_３（Ｚ_１）_２、−Ｓ（Ｏ）_３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）_ｍＺ_１、−Ｚ_１、−ＯＺ_１、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨＺ_１、−ＮＺ_１Ｚ_２、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ_２、−Ｎ−モルホリノ、および−Ｓ（Ｏ）_ｍ（ＣＦ_２）_ｑＣＦ_３からなる群から選択され、ここで、ｍは０、１または２であり、ｑは０〜５の整数であり、そしてＺ_１およびＺ_２は、独立して、１〜約１２炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、約５〜約１４環原子のヘテロアリール、約７〜約１５炭素原子のアラルキル、および約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルからなる群から選択される、あるいは
（ｉｉ）Ｙ_１およびＹ_２は、一緒に−Ｏ［Ｃ（Ｚ_３）（Ｚ_４）］_ｒＯ−または−Ｏ［Ｃ（Ｚ_３）（Ｚ_４）］_ｒ＋１−となるように選択され、ここで、ｒは、１〜４の整数であり、そしてＺ_３およびＺ_４は、独立して、水素、１〜約１２炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、約５〜約１４環原子のヘテロアリール、約７〜約１５炭素原子のアラルキル、および約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルからなる群から選択される；
（ｃ）Ｒ_２は、−ＣＨ_３、−Ｃ_２Ｈ_５、−（ＣＨ_２）_２ＯＨ、−（ＣＨ_２）_２ＯＡ_１、−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＨ、−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＡ_１、および−ＣＨ_２ＮＨ−Ｘ’−Ｒ_６からなる群から選択され、ここで、Ａ_１は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ_６、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_６または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ_５Ｒ_６であり；Ｘ’は、−Ｓ（Ｏ）_２−、−Ｓ（Ｏ）_２−Ｎ（Ｒ”）−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ”）−、および直接結合からなる群から選択され、ここで、Ｒ”は、水素、１〜約４炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、または約７〜約１６炭素原子のアラルキルであり、ただし、Ｘ’が−Ｐ（Ｏ）（Ｒ”）−の場合、Ｒ”は水素ではなく；Ｒ_５は、以下からなる群から選択される：
（１）非置換、あるいはＹ_１およびＹ_２からなる群から選択される１〜２個の置換基で置換された、１〜約４炭素原子のアルキル、
（２）３〜約６炭素原子のシクロアルキルで置換された１〜約３炭素原子のアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換または三置換される、アルキル、
（３）３〜約６炭素原子のシクロアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、シクロアルキル、
（４）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、４〜約６環原子のヘテロシクロアルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここでｉは、０、１または２であり、このヘテロシクロアルキルは、非置換であるか、またはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロアルキル、
（５）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する４〜約６環原子のヘテロシクロであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここで、ｉは０、１、または２であり、このヘテロシクロは
【０１１６】
【化２８】

を含み、ここで、この
【０１１７】
【化２９】

は、３〜６個の環炭素原子を有する５〜７員のヘテロ環であり、ここで、Ｖは、−ＣＨ_２−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）_２−または−Ｓ−であり、このヘテロシクロは、非置換であるか、あるいこの環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロ、
（６）非置換または約３〜約６炭素原子のシクロアルキルで置換された、２〜約６炭素原子のアルケニルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、またはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アルケニル、
（７）フェニルであって、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、フェニル、
（８）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、約５〜約６環原子のヘテロアリールであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアリール、
（９）フェニルで置換された１〜約４炭素原子のアルキルであって、このフェニルは、非置換であるか、あるいはこのフェニル環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アルキル、
（１０）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約６環原子のヘテロアラルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そしてこのヘテロアラルキルは、この環上で非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルキル、
（１１）約８〜約１２炭素原子のアラルケニルであって、このアラルケニルは、非置換であるか、あるいはこのアリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルケニル、
（１２）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約６環原子のヘテロアラルケニルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアラルケニルは、非置換であるか、あるいはこの環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルケニル、ならびに
（１３）水素；そして
Ｒ_６は、以下からなる群から選択される：
（１）非置換、あるいはＹ_１およびＹ_２からなる群から選択される１〜２個の置換基で置換された、１〜約１２炭素原子のアルキル、
（２）３〜約８炭素原子のシクロアルキルで置換された１〜約３炭素原子のアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換または三置換される、アルキル、
（３）３〜約１５炭素原子のシクロアルキルであって、このシクロアルキルは、非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、シクロアルキル、
（４）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、４〜約１０環原子のヘテロシクロアルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここでｉは、０、１または２であり、このヘテロシクロアルキルは、非置換であるか、またはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロアルキル、
（５）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する４〜約１０環原子のヘテロシクロであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここで、ｉは０、１、または２であり、このヘテロシクロは
【０１１８】
【化３０】

を含み、ここで、この
【０１１９】
【化３１】

は、３〜６個の環炭素原子を有する５〜７員のヘテロ環であり、ここで、Ｖは、−ＣＨ_２−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）_２−または−Ｓ−であり、このヘテロシクロは、非置換であるか、あるいこの環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロ、
（６）約６〜約１４炭素原子のアリールであって、このアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アリール、
（７）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、約５〜約１４環原子のヘテロアリールであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアリール、
（８）約７〜約１５炭素原子のアラルキルであって、このアラルキルは、非置換であるか、またはこのアルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そしてこのアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルキル、
（９）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルであって、ここで、このヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そしてこのヘテロアラルキルは、非置換であるか、あるいはこのアルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そしてこのヘテロアラルキルは、この環上で非置換であるか、あるいはこの環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルキル、ならびに
（１０）水素、ただし、Ａ_１が−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ_６である場合、Ｒ_６は水素ではない；
（ｄ）Ｒ_３は、Ｈまたはメチルから選択されるか、あるいはＲ_３ならびにＲ_４ａおよびＲ_４ｂは、一緒に（ｆ）に記載されるように選択される；
（ｅ）（ｉ）Ｒ_４ａは、Ｓの立体配置であり、そしてＨ、−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＣＮ、１〜約３炭素原子の低級アルキル、−ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ_２ＣＨ＝ＣＨ_２および−ＣＨ＝ＣＨ_２からなる群から選択され、そしてＲ_４ｂは、水素である；
（ｉｉ）Ｒ_４ａおよびＲ_４ｂは、独立して、１〜３炭素原子の低級アルキルである；
（ｉｉｉ）Ｒ_４ａおよびＲ_４ｂは、一緒に選択され、そして−（ＣＨ_２）_ｋ−であり、ここで、ｋは５または６であり、スピロシクロアルキルを提供する；または
（ｉｖ）Ｒ_３、ならびにＲ_４ａおよびＲ_４ｂは、（ｆ）に記載されるように一緒に選択される；
（ｆ）あるいは、Ｒ_３およびＲ_４ａは、Ｓの立体配置になるように一緒に選択されて、プロリル、ピペコリル、アゼチジン−２−カルボニル、４−ヒドロキシプロリル、３−ヒドロキシプロリル、４−アミノプロリル、４−（−ＣＨ_２ＮＨ_２）−プロリル、３，４−メタノプロリル、および３，４−デヒドロプロリルからなる群から選択される基をＰ２に提供し、そしてＲ_４ｂは水素である；
（ｇ）Ｒ_７は、水素または１〜約４炭素原子のアルキルである；ならびに
（ｈ）Ｅは、Ｑ−Ｔである、
ここで、（ｉ）Ｑは、−Ｃ（Ｒ_１３Ｒ_１４）_ｔ−、Ｒ_８およびＲ_９で置換されたフェニル、Ｒ_８またはＲ_８およびＲ_９で置換された、１〜２個のヘテロ原子を有する５員または６員の複素環式環、ならびにＲ_８およびＲ_９で置換された、１〜２個のヘテロ原子を有する９員または１０員の複素環式環からなる群から選択され、ここで、このヘテロ原子は、窒素および硫黄から選択される；ならびに
（ｉｉ）Ｔは、−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１、および−ＮＨＲ_１５からなる群から選択される；
ここで、Ｒ_８およびＲ_９は、独立して、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、１〜約４炭素原子のアルキル、１〜約４炭素原子のアルコキシで置換された１〜約４炭素原子のアルキル、１〜約６炭素原子のアルコキシ、およびトリフルオロメチルからなる群から選択され；Ｒ_１０およびＲ_１１は、独立して、水素、ヒドロキシ、１〜約３炭素原子のアルコキシ、３〜約１６炭素原子のトリヒドロカルビルシリル、１〜約３炭素原子のアルキル、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_１２であり、ただし、Ｒ_１０およびＲ_１１は、両方ともヒドロキシまたは両方ともアルコキシではない；Ｒ_１２は、水素、１〜約６炭素原子のアルキル、１〜約６炭素原子のアルコキシ、または（ＣＦ_２）_ｊＣＦ_３であり、ここで、ｊは０、１、２または３である；Ｒ_１３およびＲ_１４の各々は、独立して、水素および１〜約３炭素原子の低級アルキルからなる群から選択される；Ｒ_１５は、水素、１〜約６炭素原子のアルキル、および−（ＣＦ_２）_ｈＣＦ_３からなる群から選択され、ここで、ｈは、０、１、２または３であり、そしてｔは、０〜６の整数である。
【０１２０】
本発明の別の局面に従って、好ましい化合物は、Ｅが−Ｃ（Ｒ_１３Ｒ_１４）_ｔ−であり、Ｔが−ＮＨＲ_１５でない条件で、式（Ｉ）の化合物を含む。より好ましい局面に従って、式Ｉの好ましい化合物は、Ｑが、Ｒ_８およびＲ_９で置換されたフェニル、Ｒ_８またはＲ_８およびＲ_９で置換された１〜２個のヘテロ原子を有する５員または６員の複素環式環、ならびに、１〜２個のヘテロ原子を有する９員または１０員の複素環式環からなる群より選択され、ここで、ヘテロ原子が窒素および硫黄からなる群より選択される化合物を含む。より好ましくは、Ｑは、Ｒ_８およびＲ_９で置換されたフェニルである。さらに好ましくは、Ｔは、−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１または−ＮＨＣ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１である。
【０１２１】
本発明の１つの局面に従って、式Ｉの化合物が好ましく、ここで、Ｅは、以下からなる群より選択される：
【０１２２】
【化３２】

【０１２３】
【化３３】

【０１２４】
【化３４】

【０１２５】
【化３５】

好ましいＸ基としては、−Ｓ（Ｏ）_２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、および直接結合が挙げられる。特に好ましいのは、−Ｓ（Ｏ）_２−および−ＯＣ（＝Ｏ）−である。
【０１２６】
好ましいＲ_１基としては、アルキル、特に、イソブチル、２−エチルヘキシル、メチル、ｎ−ブチル、イソプロピル、シクロヘキシルメチルおよびシクロへキシルプロピル；シクロアルキル、特に、（−）メチル、（＋）メチル、およびシクロヘキシル；アリール、特に、ナフチルおよびフェニル；アラルキル、特に、ベンジル、３−フェニルプロピル、および２−フェニルエチル；ならびに、融合された炭素環式アルキル、特に、フルオレニルメチルが挙げられる。特に好ましいＲ_１基としては、フェニル、ベンジル、２−フェニルエチル、イソブチル、ｎ−ブチルおよび３−フェニルプロピルが挙げられる。
【０１２７】
Ｒ_１−Ｘ−の好ましい組み合わせとしては、フェニル−Ｓ（Ｏ）_２−、ベンジル−Ｓ（Ｏ）_２−、２−フェニルエチル−Ｓ（Ｏ）_２−、３−フェニルプロピル−Ｓ（Ｏ）_２−、ｎ−ブチル−Ｓ（Ｏ）_２−、ベンジル−ＯＣ（＝Ｏ）−、およびイソブチル−ＯＣ（＝Ｏ）−を含む。
【０１２８】
好ましいＲ_２基としては、−ＣＨ_３、−Ｃ_２Ｈ_５、−ＣＨ_２ＮＨ−Ｘ’−Ｒ_５および−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＨが挙げられ、ここで、Ｒ_５は、水素、アルキル、特に、メチル、またはアルキルである。α炭素における好ましいキラリティーはＲである。キラルな場合、β炭素における好ましいキラリティーはＲである。好ましいＲ_２基は、ｄ−セリル（−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＨ、ここで、Ｒ_５がＨである）、（Ｒ，Ｒ）ｄ−アロトレニル（−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＨ、ここで、Ｒ_５がメチルである）、ｄ−２−アミノブチリル、Ｎ−β−メチルオキシカルボニル−ｄ−２，３−ジアミノプロピオニル（−ＣＨ_２ＮＨ−Ｘ’−Ｒ_５、ここで、Ｒ_５がＣＨ_３であり、そしてＸ’が（−Ｃ＝Ｏ）Ｏ−である）、Ｎ−β−（２−フェニルエチルカルボニル）−ｄ−２，３−ジアミノプロピニル（−ＣＨ_２ＮＨ−Ｒ_５、ここで、Ｒ_５は２−フェニルエチルであり、そして、Ｘ’は−（Ｃ＝Ｏ）−である）、Ｎ−β−ベンジルオキシカルボニル−ｄ−２，３−ジアミノプロピオニル（−ＣＨ_２ＮＨ−Ｘ’−Ｒ_５、ここで、Ｒ_５がベンジルであり、そしてＸ’が−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−）およびｄ−アラニル（−ＣＨ_２）であるＰ３位置を規定するＲ_２基である。特に好ましいＲ_２基は、Ｐ_３をｄ−セリル（Ｒ_５がＨである）または（Ｒ，Ｒ）ｄ−アロトレニル（Ｒ_５がメチルである）として規定するＲ_２基である。
【０１２９】
代替的な好ましいＲ_２基としては、−（ＣＨ_２）_２ＯＡ_１および−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＡ_１、より好ましくは−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＡ_１が挙げられ；好ましくはＲ_５はＨである。さらに好ましいＲ_２は、Ｐ３がアシルまたはｄ−セリルの炭酸エステルとして規定されるように選択される。Ｒ_２が−（ＣＨ_２）_２ＯＡ_１または−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＡ_１である化合物は、プロドラッグとして作用し得る。
【０１３０】
Ｒ_３およびＲ_４が共に選択されない場合、好ましいＲ_３基は水素である。Ｒ_３およびＲ_４が共に選択されない場合、好ましいＲ_４基は、メチル、ビニル、アリルまたはプロパルギルである。Ｒ_３およびＲ_４が共に選択される場合、プロリル、３−ヒドロキシ−プロリル、４−ヒドロキシプロリル、３，４−デヒドロプロリル、３，４−メタノプロリル、およびアゼチジン−２−カルボニル−が、Ｐ２における基を規定するための好ましい選択である。
【０１３１】
好ましいＲ_７基は水素を含む。
【０１３２】
好ましいＥ基は、ＱがＲ_８およびＲ_９で置換されたフェニル、Ｒ_８およびＲ_９で置換されたピリジル、またはＲ_８で置換されたチエニルであり、そして、Ｔは−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１または−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１であるＥ基を含む。
【０１３３】
好ましいＥ基としては、４−アミジノフェニル、４−グアニジノフェニル、３−アミジノプロピル、および５−（２−アミジノ−チエニル）が挙げられる。特に好ましい、Ｅ基としては、４−アミジノフェニルおよび４−グアニジノフェニルが挙げられる。
【０１３４】
本発明の化合物中で、好ましい化合物としては、化合物のＰ３位置でｄ−セリンまたはｄ−アロトレオニンまたはアシルまたはその炭酸エステルを規定するＲ_２エレメント、そして、Ｐ１で、アミジノフェニル、グアニジノフェニルまたはアミジノチエニル基を規定するＲ_２エレメントを有する化合物を含む。特に好ましいのは、ｉ）Ｒ_３で水素、そしてＲ_４でメチルを有する化合物（Ｐ２はアラニンである）、またはｉｉ）Ｐ２がプロリル、アゼチジン−２−カルボニル、３，４−メタノプロリルまたは３，４−デヒドロプロリルとなるようにＲ_３およびＲ_４が共に選択される化合物のいずれかである。
【０１３５】
本発明の好ましい化合物としては、図１０Ａ〜１０Ｆおよび図１３Ａ〜１３Ｃに示される化合物を含む。特に好ましいのは、図１０Ａ〜図１０Ｆの化合物Ｄ、Ｆ、Ｉ、Ｊ、Ｋ、Ｌ、Ｏ、Ｒ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、ＡＥ、ＡＨ、ＡＪ、ＡＮおよびＡＶならびに図１３Ａ〜１３ＣのＢＧ、ＢＪ、ＢＫおよびＢＱである。
【０１３６】
また特に好ましいのは、以下の式（Ｉ）の化合物である：化合物ＡＸ（Ｘ＝Ｓ（Ｏ）_２、Ｒ_１＝４−クロロベンジル、Ｒ_２＝−ＣＨ_２ＯＨ、Ｒ_３＝Ｈ、Ｒ_４＝ＣＨ_３、Ｒ_７＝ＨおよびＥ＝４−アミジノフェニル）、ＡＹ（Ｘ＝ＳＯ_２、Ｒ_１＝３−クロロベンジル、Ｒ_２＝−ＣＨ_２ＯＨ、Ｒ_３＝Ｈ、Ｒ_４＝ＣＨ_３、Ｒ_７＝ＨおよびＥ＝４−アミジノフェニル）およびＡＺ（Ｘ＝ＳＯ_２、Ｒ_１＝２−フルオロベンジル、Ｒ_２＝−ＣＨ_２ＯＨ、Ｒ_３＝Ｈ、Ｒ_４＝ＣＨ_３、Ｒ_７＝ＨおよびＥ＝４−アミジノフェニル）。
【０１３７】
（２．好ましい化合物の調製）
図１〜５は、本発明の特定の化合物の調製において使用され得る中間体の合成のための合成スキームを示す。
【０１３８】
図１は、本発明の化合物の調製において有用な中間体の合成についての溶液相合成を示す。実施例６０〜６２を参照のこと。また実施例９５〜９７を参照のこと。
【０１３９】
実施例６３〜６６、６７〜７０および７１〜７３は、本発明の特定の化合物の合成において有用な中間体の合成のための溶液相合成を示す。
【０１４０】
図２は、溶液相合成を使用する、本発明の化合物の調製において有用な中間体を調製するための代替的な合成経路を示す。
【０１４１】
図６は、Ｐ３にエステル化されたヒドロキシルを有する本発明の化合物の調製のための反応スキームを示す。
【０１４２】
図７は、Ｐ１に４−グアニジノフェニルを有する本発明の化合物の調製のための反応スキームを示す。
【０１４３】
図８は、Ｐ１に３−グアニジノフェニルを有する本発明の化合物の調製のための反応スキームを示す。
【０１４４】
図９は、Ｐ１に２−グアニジノフェニルを有する本発明の化合物の調製のための反応スキームを示す。
【０１４５】
図１１は、Ｐ１に３−アミジノピリジルを有する本発明の化合物の調製のための反応スキームを示す。
【０１４６】
図１２は、Ｐ１に４−アミジノピリジルを有する本発明の化合物の合成のための反応スキームを示す。
【０１４７】
図１４は、Ｐ１に二環式の複素環式基を有する本発明の化合物の合成のための反応スキームを示す。
【０１４８】
図１５は、Ｐ１にアミノ−イミダゾリル基を有する本発明の化合物の合成のための反応スキームを示す。
【０１４９】
図１６は、Ｐ１に２−クロロ−４−グアニジノフェニル基を有する本発明の化合物のための反応スキームを示す。
【０１５０】
図１７は、Ｐ１にグアニジノ−ピリジル基を有する本発明の化合物の合成のための反応スキームを示す。
【０１５１】
化学的にカップリングする好ましい方法（例えば、アミド結合官能基について）は、当該分野で公知の慣例的なカップリング試薬を使用することによるペプチド結合の形成を含む。例えば、Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ，Ｎ．Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５５−７３頁、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ（１９８８）および本明細書中に引用される参考文献を参照のこと。化学的カップリングは、１工程または２工程の方法のいずれかによる。１工程カップリングでは、２つのカップリングパートナーが直接カップリングされる。１工程カップリングのカップリングパートナーのための好ましいカップリング試薬としては、ＨＯＢｔを有するＤＣＣ、ＨＯＢｔを有するＥＤＣ、ＨＯＡｔ、ＨＢＴＵまたはＴＢＴＵを有するＥＤＣが挙げられる。２工程カップリングにおいて、一方のカップリングパートナーのＣ末端カルボキシル基の活性化エステルまたは無水物は、それが他方のカップリングパートナーにカップリングされる前に形成される。
【０１５２】
水素化感受性置換基を有する特定の化合物の調製について、炭素上のパラジウムを有する水素ガスの使用を避けることが好ましい。水素、シアノ、ニトロ、または−Ｓ−Ｚ_１で置換されたアルケニルまたはアリル部分のような水素化感受性基を含む本発明の化合物を調製する別の好ましい方法は、ホウ素トリス（トリフルオロ酢酸）、Ｂ（ＯＯＣＯＣＦ_３）_３、を使用して、アルギニン基のＮ^ｇ−ニトロを切断することである。この試薬は、０℃で、ジクロロアミンにおけるＢＢｒ_３およびＣＦ_３ＣＯＯＨの反応によって調製される。この試薬はまた、市販されている。一般的に、Ｎ^ｇ−ニトロ化合物は、０℃で、トリフルオロ酢酸中のホウ素トリス（トリフルオロ酢酸）で処理される。例えば、Ｆｉｅｓｅｒ，Ｍ．およびＦｉｅｓｅｒ，Ｌ．Ｆ．，Ｒｅａｇｅｎｔｓ　ｆｏｒ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，４６頁、Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ（１９７４）；Ｐｌｅｓｓ，Ｊ．およびＢａｕｅｒ，Ｗ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．，Ｉｎｔｅｒｎａｔ．編、１２、１４７（１９７３）を参照のこと。
【０１５３】
さらに、選択的なニトロ基切断のための別の好ましい試薬は、三塩化チタンである。この試薬は市販されている。Ｎ^ｇニトロ化合物を、酢酸アンモニウム緩衝液を含む水性メタノール中の三塩化チタンで処置し、引き続き、反応物を空気またはジメチルスルホキシドに曝露した。例えば、Ｆｒｅｉｄｉｎｇｅｒ，Ｒ．Ｍ．，Ｈｉｒｓｃｈｍａｎｎ，Ｒ．およびＶｅｂｅｒ，Ｄ．Ｆ．，Ｊ．ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．４３，４８００（１９７８）を参照のこと。
【０１５４】
図６は、本発明の化合物の合成についての反応スキームを示し、ここで、Ｒ_２は−ＣＨ_２ＯＡ_１であり、そして、Ａ_１は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_６である：
【０１５５】
【化３６】

６−１のような中間体（実施例９の化合物）は、ピリジンのような塩基の存在下で、酸性塩化物Ｒ_６ＣＯＣｌと反応する。Ｒ_２が−（ＣＨ_２）_２ＯＡ_１または−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＡ_１であり、Ａ_１が−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_６である化合物は、好ましくはピリジンのような塩基の存在下で、適切な酸性塩化物誘導体（Ｒ_６ＣＯＣｌ）と、６−１に対応する適切な中間体と反応させることによって簡便に調製され得る。
【０１５６】
Ｒ_２が−（ＣＨ_２）_２ＯＡ_１または−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＡであり、Ａ_１が−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ_６である化合物は、Ｒ_２が−（ＣＨ_２）_２ＯＨまたは−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＨである対応する化合物を、適切なクロロホルム誘導体で処理することによって、簡便的に調製され得る。Ｐ_１にアミジノまたはクアニジノ基を有する化合物の調製において、アミジノまたはクアニジノ基を脱保護する前に、炭酸基で、Ｐ３ヒドロキシルをキャップすることが好ましくあり得る。従って、対応する中間体を、クロロホルム誘導体で処理することが好ましい（例えば、実施例８を参照のこと）。次いで、この生成物を水素付加し、そして、必要に応じて加水分解条件下で処理し、生成物を生じた（例えば、実施例１６、２１、２８、３５および４０を参照のこと）。
【０１５７】
（３．好ましい化合物の選択）
本発明の１つの局面に従って、本発明の好ましい化合物は、セリンプロテアーゼ（特に、ウロキナーゼ）の阻害に対するその効力および選択性に関して選択される。このような評価は、実施例Ａに示されるような手順に従ってインビトロで慣用的に実施される。本明細書中に記載され、そして一般的に公知のように、標的セリンプロテアーゼおよびその基質は、そのプロテアーゼとその基質との反応を可能にするアッセイ条件下で合わされる。このアッセイは、試験化合物の非存在下、および漸増する濃度の試験化合物の存在下で実施される。５０％のセリンプロテアーゼ活性が試験化合物によって阻害される試験化合物の濃度は、この化合物に関してＩＣ_５０値（阻害濃度）またはＥＣ_５０（有効濃度）値である。一連の試験化合物内または試験化合物の群において、比較的低いＩＣ_５０値またはＥＣ_５０値を有するこれらの化合物は、比較的高いＩＣ_５０値またはＥＣ_５０値を有するこれらの化合物よりもより強力なセリンプロテアーゼのインヒビターであると考えられる。ＩＣ_５０測定は、しばしば、より簡便なアッセイに使用され、但し、ＥＣ_５０は、しばしば、より複雑なアッセイ（例えば、細胞を用いるアッセイ）に使用される。Ｋ_ｉは、ＩＣ_５０から算出される。
【０１５８】
本発明のこの局面に従う好ましい化合物は、ウロキナーゼ活性の阻害に関してインビトロアッセイで測定される場合、１００ｎＭ以下のＫ_ｉ値を有する。特に好ましい化合物は、３０ｎＭより小さいＫ_ｉ値を有する。
【０１５９】
試験化合物はまた、セリンプロテアーゼに対する選択性に関して評価される。実施例に記載され、一般的に公知であるように、試験化合物は、セリンプロテアーゼまたは他の酵素のパネルに対するその効力に関してアッセイされ、そしてＩＣ_５０値またはＥＣ_５０値が、各アッセイ系において各試験化合物に関して決定される。標的酵素（例えば、ウロキナーゼ）に対して低いＩＣ_５０値またはＥＣ_５０値または対応する低いＫ_ｉ値を示す化合物、および試験パネル内の他の酵素（例えば、組織プラスミノーゲンアクチベーター、トロンビン、第Ｘａ因子）に関して比較的高いＩＣ_５０値またはＥＣ_５０値を示す化合物は、標的酵素に対して選択性であると考えられる。一般的に、化合物は、標的酵素アッセイにおけるそのＩＣ_５０値またはＥＣ_５０値（またはＫ_ｉ値）が、酵素の選択性パネルにおいて測定された次に最も小さいＩＣ_５０値またはＥＣ_５０値よりも、少なくとも１オーダーの大きさで小さい場合、選択的であると考えられる。
【０１６０】
本発明の好ましい化合物は、ウロキナーゼ活性の阻害に関してインビトロアッセイにおいて測定される場合、１００ｎＭ以下のＫ_ｉ値を有する。特に好ましい化合物は、インビトロｔＰＡ阻害アッセイにおいて測定されたＩＣ_５０値よりも、少なくとも１オーダーの大きさで小さい、インビトロウロキナーゼ阻害アッセイにおけるＫ_ｉ値を有する。１００より大きいＩＣ_５０　ｔＰＡアッセイ：Ｋ_ｉウロキナーゼアッセイの選択性の比を有する化合物は、特に好ましい。
【０１６１】
本発明の化合物はまた、インビボにおけるその活性に関して評価される。試験化合物の評価に対して選択されるアッセイの型は、その化合物の使用によって処置または予防される病理学的状態、ならびに試験化合物に関して評価される投与経路に依存する。
【０１６２】
例えば、ウロキナーゼの阻害を介して腫瘍増殖を減少するための本発明の化合物の活性を評価するために、ＰＡＩ−１を評価するためのＪａｎｋｕｎら［Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．５７：５５９−５６３、１９９７］によって記載される手順が、使用され得る。簡単に言うと、高レベルのｕＰＡを発現するＡＴＣＣ細胞株のＤＵ１４５、およびｕＰＡを発現しないＬｎＣａＰが、ＳＣＩＤマウスに注射される。腫瘍が確立された後、マウスは、その化合物のインビトロ特徴から決定された投薬レジメ（ｒｅｇｉｍｅ）に従って、試験化合物が提供される。Ｊａｎｋｕｎらの化合物は、水中で投与された。腫瘍容積測定は、約５週間、１週間に２回とられる。化合物を投与された動物が、適切なコントロール化合物を受けた動物と比較して減少した腫瘍容積を示した場合、その化合物は活性であると考えられる。さらに、ＤＵ１４５細胞　対　ＬｎＣａＰ細胞の注射された動物における化合物の効果の比較は、この化合物の効果が、ウロキナーゼかそうでないものの阻害に起因したか否かを示し得る。
【０１６３】
ｐ−アミノベンザミジン（ウロキナーゼ阻害化合物といわれている化合物）の減少する腫瘍容積に対する効果を評価するために設計される別のインビボ実験モデルは、Ｂｉｌｌｓｔｒｏｍら［Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　６１：５４２−５４７、１９９５］によって記載される。
【０１６４】
転移の発生を減少または転移を阻害するための本発明の化合物の能力を評価するために、Ｋｏｂａｙａｓｈｉら［Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃ．５７：７２７−７３３ｄ、１９９４］によって記載される手順が、使用され得る。簡単にいうと、高い肺コロニー形成能力に関して選択されたマウス異種移植片が、Ｃ５７Ｂ１／６マウスに静脈内注射されるか（実験的な転移）または腹部の壁へ皮下注射される（自発的な転移）。種々の濃度の試験される化合物が、注射の前にＭａｔｒｉｇｅｌ中で腫瘍細胞と混合され得る。試験化合物の毎日の腹腔内注射が、腫瘍接種の後に１〜６日または７〜１３日のいずれかでなされる。動物は、腫瘍接種後、約３〜４週間で殺傷され、肺腫瘍のコロニーが計数される。生じるデータの評価により、試験化合物の効果、最適な投薬および投与経路に関する決定が可能になる。
【０１６５】
減少する腫瘍容積および転移に対する本発明の化合物の活性は、これらのインヒビターを評価するためのＲａｂｂａｎｉら［Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　６３：８４０−８４５、１９９５］によって記載されるモデルにおいて評価され得る。コペンハーゲンラットの脇腹に注射されるｕＰＡを過剰発現するＭａｔ　ＬｙＬｕ腫瘍細胞が存在した。この動物は、種々の用量の試験化合物を３週間まで連続して投与するために浸透圧ミニポンプを用いて移植された。実験動物およびコントロール動物の腫瘍質量および腫瘍容積は、転移増殖と同様に、実験の間に評価された。生じるデータの評価は、試験化合物の効果、最適な投薬、および投与経路に関する決定を可能にした。これらの著者らの数人は、Ｘｉｎｇら［Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．５７：３５８５−３５９３、１９９７］に関連プロトコールを記載する。
【０１６６】
新生血管形成に対する本発明の化合物の阻害活性を評価するために、ウサギの角膜新生血管形成モデルを、使用し得た。Ａｖｅｒｙら［Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．１０８：１４７４−１４７５、１９９０］は、ニュージーランドシロウサギを麻酔すること、次いで中心角膜切開をなすこと、および根治的角膜ポケットを形成することを記載する。遅い放出のプロスタグランジンペレットは、新生血管形成を誘導するためにこのポケットに配置された。試験化合物は、腹腔内で５日間投与され、そして５日目に動物は殺傷された。この試験化合物の効果は、縁（ｌｉｍｂｕｓ）を撮った周期的な写真（これは、新生血管応答の領域、ゆえに縁（ｌｉｍｂａｌ）の新生血管形成を算出するために使用され得る）を検討することによって評価される。適切なコントロールと比較した新生血管形成の減少した領域は、この試験化合物が、新生血管形成を減少または阻害するのに効果的であったことを示す。
【０１６７】
新脈管形成を予防する際の試験化合物の効果を評価するために使用される新脈管形成モデルは、Ｍｉｎら［Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．５６：２４２８−２４３３、１９９６］によって記載される。Ｃ５７ＢＬ６マウスは、試験化合物の有りまたは無しで、ｂＦＧＦ（新脈管形成誘導因子として）を含むＭａｔｒｉｇｅｌ混合物の皮下注射を受ける。５日後、この動物は殺傷され、そして新生血管形成が可視化され得るＭａｔｒｉｇｅｌプラグが、撮影される。Ｍａｔｒｉｇｅｌおよび有効量の試験化合物を受ける実験動物は、コントロール動物またはほとんどもしくは全く有効でない用量の化合物を受ける実験動物よりも、より少ない血管新生を示す。
【０１６８】
試験化合物が原発性腫瘍の広がりを制限するその能力に関して設計されるインビボシステムは、Ｃｒｏｗｌｅｙら［Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．９０：５０２１−５０２５、１９９３］によって記載される。ヌードマウスは、ＣＡＴ（クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ）を発現するために操作された腫瘍細胞（ＰＣ３）を注射される。この細胞は、大量のｕＰＡを分泌し、そして細胞表面上のｕＰＡＲに結合する飽和量のｕＰＡ活性を示す。腫瘍サイズおよび／または転移を減少するその能力に関して試験される化合物が動物に投与され、腫瘍サイズおよび／または転移性増殖の引き続く測定がなされる。さらに、種々の器官において検出されたＣＡＴレベルは、試験化合物が転移を阻害する能力の指標を提供し；コントロール動物に対する処置動物の組織におけるより少ないＣＡＴの検出は、その組織に移動されたＣＡＴ発現細胞がより少ないことを示す。
【０１６９】
腫瘍細胞株Ｆ３ＩＩ（高度に侵襲性といわれる）を用いる試験化合物のウロキナーゼ阻害能力を評価するために設計されるインビボ実験モデルは、Ａｌｏｎｓｏら［Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．Ｔｒｅａｔ．４０：２０９−２２３、１９９６］によって記載される。このグループは、毒性決定、腫瘍増殖、侵襲性、自発的な転移、実験的な肺転移および新脈管形成アッセイに関するインビボ研究を記載する。
【０１７０】
ＣＡＭモデル（鶏胚絨毛尿膜モデル）（１９９８年にＬ．Ｏｓｓｏｗｓｋｉによって最初に記載された［Ｊ．Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ．１０７：２４３７−２４４５、１９８８］）は、試験化合物のウロキナーゼ阻害活性を評価するための別の方法を提供する。このＣＡＭモデルにおいて、絨毛尿膜を通じた腫瘍細胞の侵襲は、触媒的に活性なｕＰＡの存在に依存する。ウロキナーゼ阻害剤の存在下でのＣＡＭと腫瘍細胞との接触は、膜を通した腫瘍細胞の侵襲をほとんどまたは全く引き起こさない。従って、ＣＡＭアッセイは、種々の濃度の試験化合物の存在下および非存在下で、ＣＡＭおよび腫瘍細胞を用いて実施される。腫瘍細胞の侵襲は、化合物のウロキナーゼ阻害活性の指標を提供するような条件下で測定される。ウロキナーゼ阻害活性を有する化合物は、より少ない腫瘍侵襲と相関する。
【０１７１】
このＣＡＭモデルはまた、新脈管形成の標準的なアッセイ（すなわち、新規血管の形成に対する効果）で使用される（Ｂｒｏｏｋｓ，Ｐ．Ｃ．；Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ，Ａ．Ｍ．Ｐ．；およびＣｈｅｒｅｓｈ，Ｄ．Ａ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　１２９：２５７−２６９　（１９９９））。このモデルに従って、新脈管形成誘導因子（例えば、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ））を含むフィルターディスクは、ＣＡＭ上に配置される。ＣＡＭ中へのサイトカインの拡散は、局所的な新脈管形成を誘導し、これは、いくつかの方法、例えば、フィルターディスクのすぐ下のＣＡＭ内の血管分枝点の数を計数することによって測定され得る。サイトカイン誘導新脈管形成を阻害する本発明の化合物の能力は、このモデルを用いて試験され得る。試験化合物は、新脈管形成誘導因子を含むフィルターディスクに添加されても、膜上に直接置かれても、全体的に投与されても、いずれであってもよい。試験化合物の存在および／または非存在における新規血管形成の範囲は、このモデルを用いて比較され得る。試験化合物の存在下におけるより少ない新規血管の形成は、抗新脈管形成活性の指標である。本発明の化合物のの若干数は、ウロキナーゼのインヒビターとして活性であるので、このような化合物に対する抗新脈管形成活性は、ウロキナーゼが新脈管形成において有意な役割を果たすことを示唆し得る。
【０１７２】
（４．薬学的組成物）
別の局面において、本発明は、薬学的に受容可能なキャリア中に治療有効量の本発明の化合物を含む、貯蔵または投与のために調製された薬学的組成物を含む。
【０１７３】
本発明の化合物の治療有効量は、投与経路、処置される哺乳動物の型、および考慮の下にある特定の哺乳動物の物理的特徴に依存する。これらの因子およびこの量を決定するためのその関係は、医療分野の当業者に周知である。この量および投与方法は、最適の効力を達成するためにあつらえられ得るが、体重、食事、併用の投薬および医療分野の当業者が認識する他の因子のような因子に依存する。
【０１７４】
本発明の化合物の治療有効量は、所望の効果および治療指標に依存して広く変動し得る。代表的に、投薬量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重と１００ｍｇ／ｋｇ体重との間であり、好ましくは約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重と１０ｍｇ／ｋｇ体重との間である。
【０１７５】
治療用途のための薬学的に受容可能なキャリアは、薬学分野で周知であり、そして例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃｏ．（Ａ．Ｒ，Ｇｅｎｎａｒｏ編、１９８５）に記載される。例えば、滅菌生理食塩水および生理学的ｐＨにおけるリン酸緩衝化生理食塩水が使用され得る。保存剤、安定剤、色素およびさらに矯味矯臭剤が、この薬学的組成物に提供され得る。例えば、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルが、保存剤として添加され得る。同書、１４４９。さらに、抗酸化剤および懸濁剤が使用され得る。同書。
【０１７６】
本発明の薬学的組成物は、経口投与のための錠剤、カプセルまたはエリキシル；直腸投与のための坐剤；注入投与のための滅菌組成物および懸濁液などとして処方され得そして使用され得る。投与の用量および方法は、最適な効力を達成するために変更され得るが、重量、食事、併用薬物および医療分野の当業者が認識する他の因子のような因子に依存する。
【０１７７】
投与が非経口的である（例えば、毎日の静脈内）場合、注入可能な薬学的組成物が従来の形態（液状溶液または懸濁液のいずれかとして）、注入の前の液体中の溶液または懸濁液に適した固体形態、またはエマルジョンとして調製され得る。適切な賦形剤は、例えば、水、生理食塩水、デキストロース、マンニトール、ラクトース、レシチン、アルブミン、グルタミン酸ナトリウムなどである。さらに、所望される場合、注入可能な薬学的組成物は、少量の非毒性の補助物質（例えば、湿潤剤、ｐＨ緩衝化剤など）を含み得る。所望ならば、吸収増強調製物（例えば、リポソーム）が利用され得る。
【０１７８】
（５．有用性）
ウロキナーゼ阻害活性および／または血管形成（新脈管形成および新生血管形成を含む）を減少または阻害する活性を有する本発明の化合物は、多くの適用のためにインビトロおよびインビボの両方で使用され得、これらのいくつかは、本明細書中以下に記載される。
【０１７９】
本発明の化合物は、ウロキナーゼのインヒビターとして活性あり、そしてウロキナーゼに特異的に結合する。従って、固体／ゲル支持体への連結に適した部位を含むこれらの化合物は、サンプルからウロキナーゼを精製するために、または従来のアフィニティークロマトグラフィー手順を使用してサンプルからウロキナーゼを除去するようにアフィニティークロマトグラフィーのために、インビトロで使用され得る。これらの化合物は、従来の方法を使用して、直接的にまたは適切なリンカー支持体を介してかのいずれかで、アフィニティークロマトグラフィーに付着されるかまたは連結され得る。例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ　ｉｎ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　＆　Ｓｏｎｓ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎら編，１９９７）およびＰｒｏｔｅｉｎ　Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｈｕｍａｎａ　Ｐｒｅｓｓ（Ｓ．Ｄｏｏｎａｎ編，１９６６）およびその中の参考文献を参照のこと。
【０１８０】
ウロキナーゼ阻害活性を有する本発明の化合物は、サンプルにおけるｔＰＡ活性を測定するためのインビトロ活性において有用である。血液サンプル中の総プラスミノゲン活性化活性を測定するアッセイにおいて、ウロキナーゼ阻害活性を有する本発明の化合物は、ｕＰＡに起因するプラスミノゲン活性化の部分を不活性化し（ｋｎｏｃｋ　ｏｕｔ）、このことは、ｔＰＡ活性に起因する総プラスミノゲン活性化およびｕＰＡ活性に起因する総プラスミノゲン活性の部分の算出を可能にする。ｔＰＡ活性をモニターするためのこのようなアッセイの使用は、ｔＰＡを受けている患者におけるより良好な用量制御を可能にする。これらのアッセイはまた、組織サンプル（例えば、生検からの）におけるｕＰＡ活性をモニターするために、またはプラスミノゲンアクチベーター活性の測定が補助となるような任意の臨床状態についてのｕＰＡ／ｔＰＡ活性をモニターするために使用され得る。これらのアッセイはまた、プラスミノゲンアクチベーター活性をモニターするために使用され得、ここで、患者がプラスミノゲンアクチベーター活性を有する非内因性化合物（例えば、ストレプトキナーゼまたはスタフィロキナーゼ）で処置されている。
【０１８１】
本発明の化合物は、ウロキナーゼ活性の減少によって寛解される病的状態の処置のためにインビボで使用される。例えば、これらの化合物は、メタロプロテアーゼの活性化を、滑液におけるｕＰＡ−プラスミンカスケードによって阻害し、従って、関節炎の処置に使用され得る。
【０１８２】
これらの化合物は、転移、新生血管形成および腫瘍ならびに他の新生物における細胞外マトリックスの分解を減少または阻害する際に、有用であると考えられる。これらの化合物は、網膜疾患、網膜症、および他の状態（本明細書中上の本発明の背景および導入に記載されるものを含む）のような病的新生血管形成（ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒａｔｉｏｎ）によって特徴付けられる状態を処置する際に治療剤として有用である。
【０１８３】
ウロキナーゼ阻害活性を有する本発明の化合物についての別の使用は、多量の外因性ウロキナーゼがその他の目的のために（例えば、血栓を溶解させるために）患者に与えられる場合には、解毒薬としてである。
【０１８４】
本発明の化合物は、ウロキナーゼの阻害からのそれらの抗炎症性の効果に起因する炎症によって特徴付けられる状態を処置する際に使用され得、それにより、細胞接着または移動のメディエーターを妨害する。このような抗炎症適用は、発作および器官移植の合併症の処置を含む。
【０１８５】
本発明は、ウロキナーゼの阻害によって減弱される状態を有する疑いのある哺乳動物における状態を予防または処置するための方法を含み、この方法は、治療有効量の本発明の化合物または薬学的組成物を、上記哺乳動物に投与する工程を包含する。
【０１８６】
本発明の化合物または薬学的組成物は、通常哺乳動物において、好ましくはヒトに、インビボで投与される。インビボでこれらを使用する際に、化合物または薬学的組成物は、種々の投与形態を使用して、種々の様式（経口的に、非経口的に、静脈内に、皮下に、筋肉内に、経結腸的に、経直腸的に、経鼻的に、または腹腔内に）で哺乳動物に投与され得る。投与は、好ましくは、経口的であり、例えば、毎日摂取される錠剤、カプセルまたはエリキシルによる。
【０１８７】
本発明の方法の実施において、本発明の化合物また薬学的組成物は、単独でかまたは互いに組合されて、あるいは他の治療剤またはインビボ診断剤と組合されて投与される。
【０１８８】
医療分野の当業者に明らかなように、「治療有効量」の本発明の化合物または薬学的組成物は、年齢、重量および処置される哺乳動物種、使用される特定の化合物、投与の特定の様式および所望の影響ならびに治療指標に依存して変化する。この量を決定することに対するこれらの因子およびそれらの関係は、医療分野において周知であるので、治療的に有効投薬レベル（ｕＰＡ活性を阻害する所望の結果を達成するために必要な量）の決定は、当業者の範囲内である。代表的に、本発明の化合物または薬学的組成物の投与は、より低い投薬レベルで開始され、投薬レベルは、ｕＰＡ活性を阻害する所望の効果が所望の程度に達成されるまで増加され、これは、治療有効量を規定する。本発明の化合物について、単独でまたは薬学的組成物の一部として、このような用量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重と１００ｍｇ／ｋｇ体重との間にあり、好ましくは約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重と１０ｍｇ／ｋｇ体重との間にある。
【０１８９】
理解を補助するために、ここで、本発明は、以下の実施例によってさらに例示される。これらの実施例は、それらが本発明に関連するので、もちろん、本発明を具体的に限定するとして解釈されるべきではなく、そしてここで、既知のまたは後に開発され、当業者の範囲内にある、本発明のこのようなバリエーションは、本明細書中に記載され、上記に特許請求されたような本発明の範囲内にあると考えられる。
【０１９０】
（実施例）
（Ａ．本発明の特定の化合物の合成）
（実施例１）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン（ｔｅｒｔ−ブチルエーテル）−メチルエステル（１）の調製）
【０１９１】
【化３７】

ＨＣｌ・Ｈ−ｄＳｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＭｅ（２ｇ、９．４４ｍｍｏｌ）および塩化ｎ−ブチルスルホニル（１．１ｍｌ、８．５０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３８）ｍｌの中の溶液を、室温で１０分間攪拌した。次いで、ジイソプロピルエチルアミン（５．７５ｍｌ、３３．０７ｍｍｏｌ）を添加し、そして濁った黄色溶液を周囲温度で一晩攪拌した。次いで、この反応混合物を、酢酸エチル（２００ｍｌ）で希釈し、そして１Ｎ　ＨＣｌ、次にブラインで洗浄した（各々２０ｍｌ）。無水硫酸ナトリウムでの乾燥の後、溶媒を減圧下で除去した。鱗状の黄色固体（１．５６ｇ、６２％）を、ｔｌｃ（ヘキサン中５％酢酸エチル）によって純粋か否かを判定した。
【０１９２】
（実施例２）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン（ｔｅｒｔ−ブチルエーテル）（２）の調製）
【０１９３】
【化３８】

ジオキサン（３２．９５ｍｌ）中の化合物１（１．４６ｇ、４．９４ｍｍｏｌ）の溶液に、２．０Ｎ　ＬｉＯＨ（５．４４ｍｌ、１０．８７ｍｍｏｌ）を滴下した。濁った黄色の溶液を、周囲温度で一晩攪拌した。出発物質が、ｔｌｃ（５％酢酸エチル／ヘキサン）によって、観察されなくなった場合、過剰のジオキサンを減圧下で除去した。この反応混合物を、水とエタノールの１：１の混合物で希釈し、そして前もって洗浄したＤＯＷＥＸ（５０×８−４００）イオン交換樹脂（３０ｍｌ）に通過させた。この樹脂を、メタノールおよび水で完全にリンスした。合せた濾液を、減圧下で濃縮して、クリーム状の固体として定量的な収率で、１．４４ｇの表題化合物を得た。
【０１９４】
（実施例３）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン（ｔｅｒｔ−ブチルエーテル）−アラニンｔｅｒｔ−ブチルエステル（３）の調製）
【０１９５】
【化３９】

実施例２の化合物（０．５０ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）、アラニンｔｅｒｔ−ブチルエステル塩酸塩（０．６５ｇ、３．５８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．６８ｇ、３．５７ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．２７ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．５６ｍｌ、８．９４ｍｍｏｌ）の溶液を、周囲温度でアセトニトリル（１８ｍｌ）中で攪拌した。１８時間後、溶媒を減圧下で除去して、得られた残渣を酢酸エチル（５０ｍｌ）および１Ｎ　ＨＣｌ（１０ｍｌ）中に再懸濁した。酢酸エチル層を、１Ｎ　ＨＣｌ（１０ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１５ｍｌ）およびブライン（１５ｍｌ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を、減圧下で除去し、そして粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（５０％酢酸エチル／ヘキサンで溶離する）で精製して、４２９ｍｇ（５９％）の生成物を得た。この生成物は、逆層（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分間にわたる５〜９０％水性アセトニトリル中の０．１％トリフルオロ酢酸でｔ_Ｒ＝９分）による単一ピークであった。
【０１９６】
（実施例４）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン−アラニン（４）の調製）
【０１９７】
【化４０】

ジクロロメタン（４．２ｍｌ）中の実施例３の化合物（０．４２ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（４．２ｍｌ）を添加した。この反応混合物を、周囲温度で１時間攪拌した。この反応混合物を、５０ｍｌ　ｎ−ヘプタンで希釈し、そして減圧下で濃縮した。この残渣を、１０ｍｌアセトニトリルおよび５０ｍｌ　ｎ−ヘプタンに再懸濁し、そして減圧下で濃縮して、４１０ｍｇの生成物を得た。
【０１９８】
（実施例５）
（α−アジド−４−シアノトルエン（５）の調製）
【０１９９】
【化４１】

アジ化ナトリウム（Ａｌｄｒｉｃｈ、３．５ｇ、５４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１００ｍｌ）中のα−ブロモトルエンニトリル（Ａｌｄｒｉｃｈ、１０ｇ、５１ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、そして得られた混合物を、周囲温度で５時間撹拌した。次いで、この反応混合物を水（３５０ｍｌ）で希釈し、そしてエーテル（２×１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、そして乾燥した（ＭｇＳＯ_４）。溶媒を除去して、表題化合物を得た（８ｇ、９６％）。^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ　４．４２（ｓ，２Ｈ）、７．４１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．６５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）。
【０２００】
（実施例６）
（４−（アミノメチル）ベンジルにトリル（６）の調製）
【０２０１】
【化４２】

１０％の炭素担持Ｐｄ（Ａｌｄｒｉｃｈ、８００ｍｇ）の触媒を、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）中のα−アジド−４−シアノトルエン（化合物５、８ｇ、５１ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この反応混合物を、Ｐａｒｒ装置で１１時間水素化した（Ｈ_２、４５ｐｓｉ）。触媒を濾過し、そして溶媒を減圧下で除去して、表題化合物を得た（６．３ｇ、９３％）。^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ　３．８５（ｓ，２Ｈ）、７．４５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．１）、７．６０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．７８（ｓ，２Ｈ，ＮＨ_２）。
【０２０２】
（実施例７）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン−アラニン−４−シアノベンジルアミド（７）の調製）
【０２０３】
【化４３】

アセトニトリル（５．１ｍｌ）中の化合物４（１５０ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）、４−（アミノメチル）ベンジルニトリル（化合物６、１７１ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１９５ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）、およびＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（７８ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液を、周囲温度で１０分間撹拌した。次いで、２，４，６−コリジン（０．３４ｍｌ、２．５４ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、そして得られた残渣を酢酸エチル（１００ｍｌ）および０．５Ｍ　ＨＣｌ（１０ｍｌ）に再懸濁した。酢酸エチル層を水で洗浄し、続いて０．５Ｍ　ＨＣｌ（１０ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍｌ）およびブライン（１５ｍｌ）で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧下で除去して、２３７ｍｇの生成物を得た。この生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜７５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）により、９．５分で溶出した。
【０２０４】
（実施例８）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン−アラニン−４−ヒドロキシアミジノベンジルアミド（８）の調製）
【０２０５】
【化４４】

メタノール（１．１４ｍｌ）中の実施例７の生成物（１１７ｍｇ、０．２８５ｍｍｏｌ）の溶液に、ヒドロキシアミンヒドロクロリド（３３．７ｍｇ、０．４８５ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、Ｎ−メチルモルホリン（５３μｌ、０．４８５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を周囲温度で一晩撹拌し、次いで、５０°で６時間撹拌した。この反応混合物を減圧下で濃縮した。粗生成物を、さらに精製することなく次の工程（実施例９）に使用した。この生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜５０％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）により、６．５分で溶出した。
【０２０６】
（実施例９）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン−アラニン−４−アミジノベンジルアミド（９）の調製）
【０２０７】
【化４５】

酢酸（２．８５ｍｌ）および水（０．２８ｍｌ）中の実施例８の生成物（１２６ｍｇ、０．２８５ｍｍｏｌ）に、活性亜鉛粉（１８５ｍｇ）を添加した。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。この亜鉛粉を、ガラス漏斗を使用して濾過し、そして濾液を分取用ＨＰＬＣで精製した。生成物を含む画分は、０．１％　ＴＦＡを含む５〜２０％の水性アセトニトリルで溶出し、そしてプールし、そして凍結乾燥して、３５ｍｇの表題化合物を白色粉末として得た。この生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜５０％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）により、６．０分で溶出した。
【０２０８】
（実施例１０）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン（ｔｅｒｔ−ブチルエーテル）−メチルエステル（１０）の調製）
【０２０９】
【化４６】

アセトニトリル（１９ｍｌ）中のＨＣｌ・Ｈ−ｄＳｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＭｅ（１ｇ、４．７２ｍｍｏｌ）およびフェネチルスルホニルクロリド（１．４５ｇ、７．０８ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１０分間撹拌した。次いで、ジイソプロピルエチルアミン（１．５３ｍｌ、１１．８１ｍｍｏｌ）を添加し、そして透明な黄色の溶液を周囲温度で１８時間撹拌した。次いで、この反応混合物を酢酸エチル（１００ｍｌ）で希釈し、そして１Ｎ　ＨＣｌ（１０ｍｌ）で洗浄し、続いてブライン（１０ｍｌ）で洗浄した。硫酸ナトリウムで乾燥した後、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタンで溶出し、続いてジクロロメタン中１〜５％の酢酸エチルからなる勾配で溶出する）によって精製して、８４０ｍｌ（５２％）の生成物を得た。ジクロロメタン中５％酢酸エチルにおいての、最終生成物のＴｌｃは、０．５２のＲｆを有する１つのスポットを示した。
【０２１０】
（実施例１１）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン（ｔｅｒｔ−ブチルエーテル）（１１）の調製）
【０２１１】
【化４７】

ジオキサン（２０ｍｌ）中の実施例１０の化合物（１．０ｇ、３．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、２．０ＮのＬｉＯＨ（３．３３ｍｌ、６．６７ｍｍｏｌ）を滴下した。この溶液を周囲温度で一晩撹拌した。過剰のジオキサンを減圧下で除去した。この反応混合物を、水とメタノールの１：１の混合物で希釈し、そして予備洗浄したＤＯＷＥＸ（５０×８−４００）イオン交換樹脂（３０ｍｌ）に通した。この樹脂をメタノールおよび水で徹底的にリンスした。合わせた濾液を減圧下で濃縮して、１．１０ｇの表題化合物を黄色の糊状物として得た。
【０２１２】
（実施例１２）
（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−３，４−デヒドロプロリンｐ−シアノベンジルアミド（１２）の調製）
【０２１３】
【化４８】

アセトニトリル（７．５ｍｌ）中の、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−３，４−デヒドロプロリン（０．４ｇ、１．８８ｍｍｏｌ）、４−（アミノメチル）ベンジルニトリル（化合物６、０．４７ｇ、２．８２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．５４ｇ、２．８２ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．２９ｇ、１．８８ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（１．６４ｍｌ、９．３９ｍｍｏｌ）の溶液を、周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、そして得られた残渣を、酢酸エチル（２５ｍｌ）および０．５Ｍ　ＨＣｌ（５ｍｌ）に再懸濁した。酢酸エチル層を、水、続いて、０．５Ｍ　ＨＣｌ（５ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２×５ｍｌ）、およびブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧下で除去し、そして粗生成物を、４／１の酢酸エチル／ヘキサンで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、５６１ｍｇの純粋な生成物を得た（９１．３％）。この生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜７５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）により、１０．５分で溶出した。
【０２１４】
（実施例１３）
（３，４−デヒドロプロリン−４−シアノベンジルアミド塩酸塩（１３）の調製）
【０２１５】
【化４９】

酢酸エチル（５．７ｍｌ）中の実施例１２の化合物（０．４７ｇ、１．４４ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸エチル中５Ｍの無水ＨＣｌ（１．４４ｍｌ）を添加し、この反応系を周囲温度で一晩撹拌した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、３６３ｍｇ（９５％）の白色固体を得た。
【０２１６】
（実施例１４）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン（ｔｅｒｔ−ブチルエーテル）−プロリン（デヒドロ）−４−シアノベンジルアミド（１４）の調製）
【０２１７】
【化５０】

アセトニトリル（１．２ｍｌ）中の、実施例１１の化合物（０．１０ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、実施例１３の化合物（０．０９２ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．０９１ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）、およびＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．０５３ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の溶液を、１０分間撹拌した。次いで、２，４，６−コリジン（０．２０９ｍｌ、１．５８ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。得られた残渣を、酢酸エチル（５０ｍｌ）および１Ｎ　ＨＣｌ（１０ｍｌ）に再懸濁した。酢酸エチル層を、１Ｎ　ＨＣｌ（１０ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１５ｍｌ）、およびブライン（１５ｍｌ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウムで乾燥して、黄色のシロップ状物を得た（１６０ｍｇ、９４％）。生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣで単一のピークであった（２０分にわたって、５〜９０％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸において、ｔ_Ｒ＝１１分）。
【０２１８】
（実施例１５）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−３，４−デヒドロプロリン−４−シアノベンジルアミド（１５）の調製）
【０２１９】
【化５１】

ジクロロメタン（０．６ｍｌ）中の実施例１４の化合物（０．１６ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（０．６ｍｌ）を添加した。この反応混合物を周囲温度で１時間撹拌した。この反応混合物を、１０ｍｌのｎ−ヘプタンで希釈し、そして減圧下で濃縮した。残渣を、アセトニトリル（５ｍｌ）およびｎ−ヘプタン（１０ｍｌ）に再懸濁し、そして減圧下で濃縮して、１８３ｍｇの生成物を得た。
【０２２０】
（実施例１６）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−３，４−ジヒドロプロリン−４−ヒドロキシアミジノベンジルアミド（１６）の調製）
【０２２１】
【化５２】

メタノール（１．２２ｍｌ）中の実施例１５の生成物（１４３ｍｇ、０．３０５ｍｍｏｌ）の溶液に、ヒドロキシアミンヒドロクロリド（０．０３６ｍｇ、０．５１９ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、Ｎ−メチルモルホリン（５７μｌ、０．５１９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。分析用ＨＰＬＣは、反応が完全ではなかったことを示唆した。さらなるヒドロキシアミンヒドロクロリド（０．０３６ｍｇ、０．５１９ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（５７μｌ、０．５１９ｍｍｏｌ）を添加し、周囲温度で一晩撹拌し続けた。この反応混合物を減圧下で濃縮した。粗生成物を、分取用ＨＰＬＣで精製した。生成物を含む画分を、０．１％　ＴＦＡを含む５〜２０％の水性アセトニトリルで溶出し、そしてプールし、そして凍結乾燥して、１６ｍｇの表題化合物を白色粉末として得た。
【０２２２】
（実施例１７）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−３，４−ジヒドロプロリン−ｐ−アミジノベンジルアミド（１７）の調製）
【０２２３】
【化５３】

酢酸（０．３０ｍｌ）および水（０．０３ｍｌ）中の実施例１６の生成物（１５ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）に、活性亜鉛粉（１９ｍｇ）を添加した。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。この亜鉛粉を、ガラスロートを使用して濾過し、そして濾液を分取用ＨＰＬＣで精製した。生成物を含む画分を、０．１％　ＴＦＡを含む５〜２０％の水性アセトニトリルで溶出し、そしてプールし、そして凍結乾燥して、７ｍｇの表題化合物を白色粉末として得た。この生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜５０％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）により、数分で溶出した。
【０２２４】
（実施例１８）
（ビス（ベンジルオキシカルボニル）グアニジン（１８）の調製）
【０２２５】
【化５４】

表題の化合物の合成を、文献に記載されるように（ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ、第３５巻、第７号、９７７−９８０頁）、および以下に記載されるように実施した。
【０２２６】
メタノール（５．５ｍｌ）中７Ｎの無水アンモニア中の、Ｎ，Ｎ’−ビス（ベンジルオキシカルボニル）−Ｓ−メチルイソチオウレア（１ｇ、２．７９ｍｍｏｌ）を周囲温度で一晩撹拌した。この反応混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（１０ｍｌ）で希釈した。有機相を、飽和炭酸水素ナトリウムで２度、ブラインで１度洗浄した（各１０ｍｌ）。硫酸ナトリウムで乾燥した後、粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィーに供し、酢酸エチル／ヘキサン（３／２）で溶出して０．８７ｇの白色固体を得た。次いで、この生成物を、酢酸エチル：ヘキサン（１：１）溶媒系中で再結晶化して、３３７ｍｇ（３７％）の純粋な生成物を得た（ｍｐ＝１５１℃）。
【０２２７】
（実施例１９）
（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル―４−アミノ―１−ブタノール（１９）の調製）
【０２２８】
【化５５】

テトラヒドロフラン（４５ｍｌ）中の４−アミノ―１−ブタノール（１ｇ、１１．２２ｍｍｏｌ）の溶液に、無水Ｂｏｃ（２．２０ｇ、１０．１０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．８４ｇ、２８．０４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、室温で一晩攪拌した。この反応混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（２５０ｍｌ）およびＨＣｌ（５０ｍｌ）で希釈した。相を分離し、有機相を１Ｎ　ＨＣｌ、水およびブライン（各５０ｍｌ）で洗浄した。硫酸ナトリウムで乾燥した後、生成物（１．９ｇ（９９％））を透明な油状物を得た。
【０２２９】
（実施例２０）
（Ｎ，Ｎ’−ビス（ベンジルオキシカルボニル）アグマチントリフルオロ酢酸塩（２０）の合成）
【０２３０】
【化５６】

乾燥トルエン（６．６ｍｌ）中に化合物１８（実施例１８の生成物（０．２ｇ、０．６１ｍｍｏｌ））およびトリフェニルホスフィン（０．１２ｇ、０．４６ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下で、シリンジを介して化合物１９（実施例１９の生成物）を添加した。この混合物を、０℃に冷却し、ジエチルアゾジカルボキシレート（０．０８０ｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を、１５分間にわたって滴下した。この反応混合物を、室温で一晩攪拌して、酢酸エチル／ヘキサン（３／２）でのｔｌｃは、反応の完了を確認した。５滴の水を添加し、そして溶媒を減圧下でエバポレートした。粗標品をフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、ヘキサン／酢酸エチル（９／１）次いでヘキサン／酢酸エチル（３／２）で溶出し、純粋な生成物（８３ｍｇ（７４％））を得た。次いで、ジクロロメタンおよびトリフルオロ酢酸（各１ｍｌ）で、この生成物を周囲温度にて１時間処理した。減圧下での溶媒の除去によって、生成物２０（８０ｍｇ）を得た。
【０２３１】
（実施例２１）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン−アグマチン−ｇ−Ｎ，Ｎ’−ビス（ベンジルオキシカルボニル（２１）の調製）
【０２３２】
【化５７】

実施例４の化合物（０．０５ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、ならびに実施例２０の化合物（０．０６５ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．０６５ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、およびヒドロキシベンゾトリアゾル（０．０２６ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の溶液を、アセトニトリル（０．６７ｍｌ）中で１０分間攪拌した。次いで、２，４，６−コリジン（Ｃｏｌｌｉｄｉｎｅ）（０．１１ｍｌ、０．８４ｍｍｏｌ）を添加して、反応混合物を周囲温度で一晩攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、生じた残渣を酢酸エチルおよび１Ｎ　ＨＣｌ（各５ｍｌ）中で再懸濁した。酢酸エチル相を１Ｎ　ＨＣｌ（５ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２×５ｍｌ）およびブライン（５ｍｌ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウムで固体（１１４ｍｇ、９４％）に乾燥した。
【０２３３】
（実施例２２）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン−アラニン−アグマチン（２２）の調製）
【０２３４】
【化５８】

実施例２１の化合物（１１４ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を、メタノール（１５ｍｌ）中に溶解し、炭素上のパラジウム（１５ｍｇ）の存在下でＰａｒｒ振盪機（４０ｐｓｉ）で一晩水素化した。触媒を濾過して除いた。反応混合物を水で３５ｍｌまで希釈し、分取用ＨＰＬＣで精製した。生成物を含む画分を、０．１％　ＴＦＡを含む５〜２０％の水性アセトニトリルで溶出し、そしてプールし、そして凍結乾燥して、１６ｍｇの表題化合物を白色粉末として得た。
【０２３５】
（実施例２３）
（２−シアノ−５−メチルチオフェン（２３）の調製）
【０２３６】
【化５９】

ＤＭＦ（１０ｍｌ）中、２−ブロモ−５−メチルチオフェン（ＴＣＩ　ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）（５ｇ、２８ｍｍｏｌ）および銅（Ｉ）（Ａｌｄｒｉｃｈ、２．５３ｇ、２８ｍｍｏｌ）の溶液を、その還流温度にて４時間加熱した。周囲温度にまで冷却した後、酢酸エチル（５００ｍｌ）および１０％　ＮａＣＮ水溶液（５００ｍｌ）を添加した。分離後、水相を酢酸エチル（３００ｍｌ）で抽出し、そして合わせた有機相を油状物に濃縮した。油状物を、さらにフラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製し、表題の化合物（３．０３ｇ、８７％）を得た。ＴＬＣ：Ｒｆ　０．３０（１：１のヘキサン／酢酸エチル）；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ　２．５５（ｍ，３Ｈ）、６．７６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）、７．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）。
【０２３７】
（実施例２４）
（２−シアノ−５−（ブロモメチル）チオフェン（２４）の調製）
【０２３８】
【化６０】

ＣＣｌ_４（Ａｌｄｒｉｃｈ、６０ｍｌ）中、２−シアノ−５−チオフェン（化合物２３、３．０ｇ、２４ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモサクシニミド（Ａｌｄｒｉｃｈ、４．８ｇ、２７ｍｍｏｌ）、および２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（Ａｌｄｒｉｃｈ、０．４ｇ、２．４ｍｍｏｌ）をその還流温度で５時間加熱した。周囲温度まで冷却した後、溶媒を除去して黄色の油状物を得た。この油状物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル（１：１））で精製して表題の化合物（４．５ｇ、９１％）を得た。ＴＬＣ：Ｒｆ　０．９１（１：１のヘキサン／酢酸エチル）；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ　４．６６（ｓ，２Ｈ）、７．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ）、７．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ）。
【０２３９】
（実施例２５）
（２−シアノ−５−（アジドメチル）チオフェン（２５）の調製）
【０２４０】
【化６１】

ＤＭＦ（Ａｌｄｒｉｃｈ、６０ｍｌ）中、２−シアノ−５−（ブロモメチル）チオフェン（化合物２４、３．５ｇ、１７．３ｍｍｏｌ）およびアジ化ナトリウム（Ａｌｄｒｉｃｈ、１．７ｇ、２６ｍｍｏｌ）をその周囲温度で１０時間攪拌した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中、２０％　酢酸エチル）で表題の化合物（２．３５ｇ、８３％）を得た。^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ　４．５６（ｓ，２Ｈ）、７．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ）、７．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．７Ｈｚ）。
【０２４１】
（実施例２６）
（２−シアノ−５−（アミノメチル）チオフェン（２６）の調製）
【０２４２】
【化６２】

ＴＨＦ（Ａｌｄｒｉｃｈ、４０ｍｌ）中および水（１０ｍｌ）、トリフェニルホスフィン（Ａｌｄｒｉｃｈ、５．７ｇ）を、０℃で、２−シアノ−５−（アジドメチル）チオフェン（化合物２５、２．５ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。生じた溶液を、室温にまで温め、周囲温度で１０時間攪拌した。ＲＰ　ＨＰＬＣ精製によって、表題の化合物（２．３ｇ、９４％）を得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）：１３９（Ｍ＋１）；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ　４．０１（ｓ，２Ｈ）、４．７５（ｂｒ　ｓ，２Ｈ，ＮＨ_２）、６．８２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ）、７．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ）。
【０２４３】
（実施例２７）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン−アラニン−２−シアノ−５−（メチルアミド）チオフェン（２７）の調製）
【０２４４】
【化６３】

実施例４の化合物（４、８６０ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）、ならびに実施例２６の化合物（２６、４００ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（５５６ｍｇ、２．９４ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾル（４８８ｍｇ、３．１９ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（１．５ｍｍｏｌ、８．７ｍｍｏｌ）の溶液を、周囲温度で一晩攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、生じた残渣を酢酸エチル（５０ｍｌ）および１Ｎ　炭酸水素ナトリウム（１０ｍｌ）中で再懸濁した。酢酸エチル相を１Ｎ　炭酸水素ナトリウム（１０ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１５ｍｌ）およびブライン（１５ｍｌ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウムで固体（１１４ｍｇ、９４％）に乾燥して黄色の油状物を得た。粗生成物を、フラッシュカラムクロマトグラフィーに供し、４／５／１の比のサクサンエチル／ヘキサン／メタノールで溶出した。生成物を、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（３０分にわたる５〜７５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸で、ｔ_Ｒ＝８．５）により、３：１混合のジアステレオマーであった。低解像度質量分析で、所望の質量を確認した（ＭＨ^＋４１７）。
【０２４５】
（実施例２８）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン−アラニン−２−ヒドロキシアミジノ−５−（メチルアミド）チオフェン（２８）の合成）
【０２４６】
【化６４】

実施例２７の生成物（２２０ｍｇ、０．５３ｍｏｌ）のメタノール（５ｍｌ）溶液に、ヒドロキシアミンヒドロクロリド（１８４ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＮ−メチルモルホリン（２９０μｌ、２．６４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、室温で一晩攪拌した。このメタノール混合物を、減圧下で濃縮し、そしてこの残りの残渣をエチレンアセテートで希釈し、そして飽和重炭酸ナトリウムおよびブライン（各々１０ｍｌ）で洗浄した。この有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、そして減圧下で濃縮し、黄色の油状物（１２０ｍｇ、５０％）を得た。この生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（ｔ_Ｒ＝５分（５〜７５％の水性アセトニトリル中の０．１％トリフルオロ酢酸で２０分間））によると３：１のジアステレオマーの混合物であった。低分解度マススペクトルで、所望の質量を確認した（ＭＨ^＋　４５０．５）。
【０２４７】
（実施例２９）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−セリン−アラニン−２−アミジノ−５−（メチルアミド）チオフェン（２９）の合成）
【０２４８】
【化６５】

実施例２８の生成物（６０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）（酢酸（１．３ｍｌ）および水（０．１３ｍｌ）中）に、８７ｍｇの活性亜鉛ダストを添加した。この反応混合物を、室温で一晩攪拌した。この亜鉛ダストを、ガラスロートを使用して濾過し、そしてこの濾液を分取ＨＰＬＣによって精製した。この生成物を含む画分は、０．１％のＴＦＡを含む０〜２０％の水性アセトニトリル中に溶出した。これらを所蔵し、そして凍結乾燥して７ｇの表題化合物を白色粉末として得た。生成物の３：２のジアステレオマー混合物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（５〜５０％の水性アセトニトリル中の０．１％トリフルオロ酢酸で２０分間）によって１３分で溶出した。低分解度マススペクトルで、所望の質量を確認した（ＭＨ^＋　４３４）。
【０２４９】
（実施例３０）
（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−３，４−メタノプロリン（３０）の合成（以下の工程Ａ〜Ｅ））
（工程Ａ．Ｎ−ベンジル−３，４−メタノプロリノール（ｂ）の合成）
【０２５０】
【化６６】

ベンジリデン開始剤（ａ）の混合物（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９９，６４（２）、５４７）（４．６ｇ、２１．４ｍｍｏｌ）と水素化アルミニウムリチウム（１．０Ｍ（ＴＨＦ中）、６４ｍｌ、６４ｍｍｏｌ）を５時間還流状態で加熱した。０℃まで冷却した後、残りの水素化アルミニウムを、飽和硫酸ナトリウム水溶液（５ｍｌ）を注意深く１５分かけて滴下してクエンチした。この混合物を、酢酸エチル（２００ｍｌ）で希釈し、次いでセライトを通じて濾過した。この濾液を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮して粗Ｎ−ベンジルアミノアルコール（３．４５ｇ）を得、これをさらなる精製なしで次の工程に実施した。
【０２５１】
（工程Ｂ．Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３，４−メタノプロリノールの合成）
【０２５２】
【化６７】

粗Ｎ−ベンジル−３，４−メタノプロリノール（工程Ａ、（ｂ））（３ｇ、１４．７６ｍｍｏｌ）の溶液（１０％のＰｄ／Ｃ（３００ｍｇ）を含むメタノール（１２０ｍｌ）および濃ＨＣｌ（１．５ｍｌ）中）を５０ｐｓｉで１６時間水素付加した。この反応混合物を濾過して、炭素担架触媒を除去し、そして濾液を濃縮した。この残渣を水／ジオキサン（１００ｍｌ）中に溶解し、そしてジイソプロピルエチルアミン（３．２ｍｌ）を添加した。ベンジルクロロホルメート（２．７６ｍｌ、１６．２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を一晩攪拌した。この反応混合物を、濃縮し、１ＭのＨＣｌ（１００ｍｌ）に溶解し、そして酢酸エチル（３×２００ｍｌ）で溶出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過しそして濃縮した。この残渣を、１：３の酢酸エチル／ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、Ｎ−Ｃｂｚ−３，４−メタノプロリノール（２．４ｇ）が得られた。
【０２５３】
（工程Ｃ．Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３，４−メタノプロリノールの合成）
【０２５４】
【化６８】

０℃で攪拌する、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３，４−メタノプロリノール（２．２ｇ、８．９０ｍｍｏｌ）のアセトン（６８ｍｌ）溶液に、Ｊｏｎｅｓ試薬（６．６ｍｌ）を５分間かけて添加した［Ｊｏｎｅｓ試薬：三酸化クロム（１３．４ｇ）および濃硫酸（１１．５ｍｌ）を全体積５０ｍｌまで水で希釈して調製される］。０℃で３時間攪拌した後、イソプロパノール（１１ｍｌ）を添加し、そしてさらに１０分間攪拌し続けた。この反応混合物を水（４００ｍｌ）で希釈し、そして酢酸エチル（３×５００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、そして濃縮してＮ−Ｃｂｚ−３，４−メタノプロリン（２．２５ｇ、９６ｇ）を得た。
【０２５５】
（工程Ｄ．３，４−メタノプロリンヒドロクロリド塩の合成）
【０２５６】
【化６９】

Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３，４−メタノプロリン（上記工程Ｃから得られた）（１．２３ｇ、４．７１ｍｍｏｌ）の溶液（エタノール（４７ｍｌ）および０．５ＭのＨＣＬ（９．４２ｍｌ）中）に、炭素触媒上の１０％パラジウムを添加した。この反応混合物を、一晩常圧で水素付加した。この触媒を濾別し、そしてこの濾液を減圧下で濃縮し、７６７ｍｇの純粋な生成物を得た。この生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（５〜７５％の水性アセトニトリル中の０．１％トリフルオロ酢酸で２０分間）によって１４分で溶出した。
【０２５７】
（工程Ｅ．ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−３，４−メタノプロリンの調製）
【０２５８】
【化７０】

３，４−メタノプロリンヒドロクロリド塩（上記工程Ｄから）（１．０４ｇ、６．３８ｍｍｏｌ）の溶液（ジオキサンおよび水（各々２５ｍｌ）中）に、炭酸カリウム（１．７６ｇ、１２．７ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ−無水物（２．７８ｇ、１２．７６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、室温で一晩攪拌した。このジオキサンを減圧下で除去し、そして残りの残渣をジエチルエーテルで希釈した。この相を分離し、そして水相をジエチルエーテル（１×２５ｍｌ）で抽出した。水相を１Ｎの塩酸でｐＨ＜３まで酸性化して、そして酢酸エチル（３×２５ｍｌ）で抽出した。この有機相を、硫酸ナトリウムで乾燥し、デカンテーションし、そして減圧下で濃縮し、７４５ｍｇ（５０％）の生成物を得た。この生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（５〜７５％の水性アセトニトリル中の０．１％トリフルオロ酢酸で２０分間）によって１２．５分で溶出した。
【０２５９】
（実施例３１）
（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−３，４−メタノプロリン−４−シアノベンジルアミド（３１）の調製）
【０２６０】
【化７１】

実施例３０の化合物（工程Ｅ）（０．７０ｇ、３．０８２ｍｍｏｌ）、ｐ−シアノベナイルアミンヒドロクロリド塩（０．７８４ｇ、４．６４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．８８ｇ、４．６２ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．４７ｇ、３．０８２ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２．６８ｍｌ、１５．４１ｍｍｏｌ）の溶液を、室温でアセトニトリル（１２ｍｌ）中で攪拌した。１８時間後、この溶媒を減圧下で除去し、そして残りの残渣を酢酸エチル（１５０ｍｌ）中で再懸濁し、そして０．５ＭのＨＣｌ（２×１５ｍｌ）、ブライン（１×１５ｍｌ）、飽和重炭酸ナトリウム（２×１５ｍｌ）、およびブライン（１×１５ｍｌ）で連続的に洗浄した。この有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、デカンテーションし、そして減圧下で濃縮した。この粗生成物を、４／１の酢酸エチル／へキサンで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって生成し、８２２ｍｇ（７０％）の生成物を得た。
【０２６１】
（実施例３２）
（３，４−メタノプロリン−４−シアノベンジルアミドヒドロクロリド塩（３２）の調製）
【０２６２】
【化７２】

実施例３１の化合物（１ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（１１．７ｍｌ）溶液に、５Ｍの無水ＨＣｌ（酢酸エチル（２．９３ｍｌ）中）を添加し、そしてこの混合物を、一晩室温で攪拌した。この反応混合物を、減圧下で濃縮し、６４５ｍｇ（７９％）の白色固体を得た。
【０２６３】
（実施例３３）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン（ｔｅｒｔ−ブチルエーテル）−３，４−メタノプロリン−４−シアノベンジルアミン（３３）の調製）
【０２６４】
【化７３】

実施例１１の化合物（０．１０ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、化合物３２の化合物（０．１０５ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．０７３ｇ、０．３８ｍｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．０４９ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（０．２８ｍｌ、１．５９ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で一晩攪拌した。この溶媒を、減圧下で除去し、そして残りの残渣を、酢酸エチル（５０ｍｌ）および１ＮのＨＣｌ（１０ｍｌ）中で再懸濁した。この酢酸エチル相を、１ＮのＨＣｌ（１０ｍｌ）、飽和重炭酸ナトリウム（２×１５ｍｌ）およびブライン（１５ｍｌ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウムで乾燥した。この有機相を、デカンテーションして、減圧下で濃縮して、１７１ｍｇの生成物を得た。
【０２６５】
（実施例３４）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−３、４−メタノプロリン−４−シアノベンジルアミン（３４）の調製）
【０２６６】
【化７４】

実施例３３の化合物（０．１７ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４ｍｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（４ｍｌ）を添加した。この混合物を、室温で１時間攪拌した。この反応混合物を、１０ｍｌのｎ−ヘプタンで希釈し、そして減圧下で濃縮した。この残渣を、５ｍｌのアセトニトリルおよび１０ｍｌのｎ−へプタン中で再懸濁し、そして減圧下で濃縮し、１５４ｍｇの生成物を得た。
【０２６７】
（実施例３５）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−３，４−メタンプロリン−４−ヒドロキシアミジノベンジルアミド（３５）の調製）
【０２６８】
【化７５】

１．３ｍｌメタノール中の実施例３４の生成物（１５４ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（０．１１ｇ、１．５８ｍｍｏｌ）を加え、続いて、Ｎ−メチルモルホリン（２０９μｌ、１．９０２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、一晩周囲温度で攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮した。粗生成物を、水中２５％のアセトニトリルに再懸濁させ、そして分取用ＨＰＬＣで精製した。０．１％ＴＦＡ溶液を含む０−２０％の水性アセトニトリルで溶出する生成物を含む画分をプールし、凍結乾燥して、１９．５ｍｇの表題化合物を白色粉末として得た。低分解能質量分光法によって、所望の質量（ＭＨ^＋５１６）が確認された。
【０２６９】
（実施例３６）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−３，４−メタノプロリン−ｐ−アミジノベンジルアミド（３６）の調製）
【０２７０】
【化７６】

酢酸（０．４１ｍｌ）および水（０．０４１ｍｌ）中の実施例３５の生成物（１９．５ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）に、２７ｍｇの活性化亜鉛末を加えた。反応混合物を、一晩室温で攪拌した。亜鉛末を。ガラスロートを使用して濾過し、そして濾液を分取用ＨＰＬＣによって精製した。０．１％ＴＦＡを含む０−２０％の水性アセトニトリルで溶出する生成物を含む画分をプールし、凍結乾燥して、１５ｍｇの表題化合物を白色粉末として得た。生成物は、５−５０％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸で２０分間にわたって、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣによって１０．５分に溶出した。低分解質量分光法によって、所望の質量（ＭＨ＋５００）が確認された。
【０２７１】
（実施例３７）
（４−トリフルオロアセトアミドメチルアニリン（７−２）の調製）
【０２７２】
【化７７】

４−ニトロベンジルアミン（７−１）（４．０ｇ、２１ｍｍｏｌ）を無水トリフルオロ酢酸（１５ｍｌ）に、この混合物を氷上で冷却しながら、加えた。この混合物を室温まで温め、そして一晩攪拌した。この懸濁液を氷（約２００ｇ）に注ぎ、そして曇った懸濁液を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２×１００ｍｌ）で抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、そして溶媒を除去して透明な油状物を得た。この油状物を、ＭｅＯＨ（５０ｍｌ）中のＰｄ／Ｃ（１０％／３００ｍｇ）とともにＰａｒｒフラスコ中で一晩振盪させた。固体を濾過により除去し、そして溶媒を減圧下で除去して表題化合物（７−２）に対応する白色固体を得た（４．５ｇ、定量的収率）。
【０２７３】
（実施例３８）
（Ｎ−［（４−トリフルオロアセトアミドメチル）フェニル］−Ｎ’−Ｎ’’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジン（７−３）の調製）
【０２７４】
【化７８】

４−トリフルオロアセトアミドメチルアニリン（７−２）（２７９ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍｌ）中のＮ−Ｎ’−ジ−Ｂｏｃ−Ｎ’’−トリフルオロメタンスルホニル−グアニジン（Ｊ．Ｏｒｇ．ｃｈｅｍ．１９９８、６３、３８０４−３８０５に記載される手順に従って調製される）（５００ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）、ＴＦＡ（１０８μｌ、１．２８ｍｍｏｌ）の攪拌混合物に加えた。反応混合物を、６時間攪拌した。この混合物を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３０ｍｌ）で希釈し、そしてＨＣｌ（１Ｍ、２０ｍｌ）、ブライン（２０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去して固体を得た。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９９：１）によって、表題化合物に対応する白色固体を得た（３５０ｍｇ、５２％）。
【０２７５】
（実施例３９）
（Ｎ−［（４−アミノメチル）フェニル］−Ｎ’−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグアニジン（７−４）の調製）
【０２７６】
【化７９】

炭酸カリウム（５００ｍｇ）を、Ｈ_２Ｏ／ＭｅＯＨ（２：１５、１７ｍｌ）中のＮ−［（４−トリフルオロアセトアミドメチル）フェニル］−Ｎ’−Ｎ’’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジン（７−３）（３００ｍｇ、０．８３３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加え、そしてこの混合物を一晩攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、そして得られる残渣をＨ_２Ｏ（１０ｍｌ）に溶解させ、そしてＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（９：１、３×１０ｍｌ）で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、そして減圧下で除去して、表題化合物（１５０ｍｇ、６８％）に対応する白色固体を得た。
【０２７７】
（実施例４０）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニン−（４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグアニジノ）ベンジルアミド（７−５）の調製）
【０２７８】
【化８０】

アセトニトリル（２．０ｍｌ）中のＮ−［（４−アミノメチル）フェニル］−Ｎ’−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグアニジン（７−４）（３６ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート（５０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（７４ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（２７ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（６８μｌ、０．３９ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で一晩攪拌した。溶液をＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）で希釈し、ＨＣｌ（１Ｍ、１０ｍｌ）、ＮａＨＣＯ_３（飽和、１０ｍｌ）、ブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、そして減圧下で除去して、油状物を得た。ＨＰＬＣ精製（ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）によって、表題化合物として綿毛状の白色固体を得た（３５ｍｇ、４５％）、ＭＳ（エレクトロンスプレー）５７７（Ｍ＋１）。
【０２７９】
（実施例４１）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニン−４−グアニジノベンジルアミド（７−６）の調製）
【０２８０】
【化８１】

ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＴＦＡ（１：１、６００μｌ）の混合物中のベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニン−（４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグアニジノ）ベンジルアミド（７−５）（９．０ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）の溶液を、９０分間室温で攪拌した。溶媒を減圧下で除去して透明な油状物を得た。ＨＰＬＣ精製（ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）によって、表題化合物として綿毛状の白色固体を得た（５．０ｍｇ、６６％）、ＭＳ（エレクトロンスプレー）４７７（Ｍ＋１）。
【０２８１】
（実施例４２）
（３−トリフルオロアセトアミドメチルアニリン（８−２）の調製）
【０２８２】
【化８２】

３−ニトロベンジルアミン（８−１）（３．０ｇ、１６ｍｍｏｌ）を無水トリフルオロ酢酸（３０ｍｌ）に、この混合物を氷上で冷却しながら加え、この混合物を一晩攪拌した。懸濁液を氷（約２００ｇ）に注ぎ、そして曇った懸濁液をＣＨ_２Ｃｌ_２（２×１００ｍｌ）で抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、そして溶媒を除去して、透明な油状物を得た。この油状物をＭｅＯＨ（３０ｍｌ）中のＰｄ／Ｃ（１０％、３００ｍｇ）とともにＰａｒｒフラスコ中で一晩振盪させた。固体を濾過により除去し、そして溶媒を減圧下で除去して表題化合物に対応する固体を得た（３．３ｇ、９５％）。
【０２８３】
（実施例４３）
（Ｎ−［（３−トリフルオロアセトアミドメチル）フェニル］−Ｎ’−Ｎ’’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジン（８−３）の調製）
【０２８４】
【化８３】

３−トリフルオロアセトアミドメチルアニリン（８−２）（実施例４２の生成物）（５００ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍｌ）中のＮ−Ｎ’−ジ−Ｂｏｃ−Ｎ’’−トリフルオロメタンスルホニル−グアニジン（Ｊ．Ｏｒｇ．ｃｈｅｍ．１９９８、６３、３８０４−３８０５に記載される手順に従って調製される）（９８６ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（６４２μｌ、４．５８ｍｍｏｌ）の攪拌混合物に加え、この混合物を、２４時間攪拌した。この混合物を、ＨＣｌ（１Ｍ、１０ｍｌ）、ブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去して固体を得た。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９８：２）によって、表題化合物に対応する白色固体を得た（４７９ｍｇ、５５％）。ＭＳ（エレクトロンスプレー）４６１（Ｍ＋１）。
【０２８５】
（実施例４４）
（Ｎ−［（３−アミノメチル）フェニル］−Ｎ’−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグアニジン（８−４）の調製）
【０２８６】
【化８４】

炭酸カリウム（１．０ｇ）を、Ｈ_２Ｏ／ＭｅＯＨ（１：１、４ｍｌ）中のＮ−［（３−トリフルオロアセトアミドメチル）フェニル］−Ｎ’−Ｎ’’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジン（８−３）（実施例４３の生成物）（４５０ｍｇ、０．９７８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加え、そしてこの混合物を一晩攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、そして得られる残渣をＨ_２Ｏ（１０ｍｌ）に溶解させ、そしてＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（９：１、３×１０ｍｌ）で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、そして減圧下で除去して、表題化合物（２３２ｍｇ、９０％）に対応する白色固体を得た。
【０２８７】
（実施例４５）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニン−３−グアニジノベンジルアミド（８−５）の調製）
【０２８８】
【化８５】

アセトニトリル（２．０ｍｌ）中のＮ−［（３−アミノメチル）フェニル］−Ｎ’−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルグアニジン（８−４）（実施例４４の生成物）（１３０ｍｇ、０．４９２ｍｍｏｌ）、ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート（１９０ｍｇ、０．４９２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３８０ｍｇ、０．７３９ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（１３６ｍｇ、０．７３９ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（２５８μｌ、１．４８ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で一晩攪拌した。溶液をＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）で希釈し、ＨＣｌ（１Ｍ、１０ｍｌ）、ＮａＨＣＯ_３（飽和、１０ｍｌ）、ブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、そして減圧下で除去して、油状物を得た。この油状物をＣＨ_２Ｃｌ_２／ＴＦＡ（１：１、３ｍｌ）の混合物で処理し、室温で２時間攪拌した。溶媒を減圧下で除去して透明な油状物を得た。ＨＰＬＣ精製（ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）によって、表題化合物として綿毛状の白色固体を得た（８０ｍｇ、３４％）、ＭＳ（エレクトロンスプレー）４７７（Ｍ＋１）。
【０２８９】
（実施例４６）
（２−ニトロ−５−（４−トリフルオロアセトアミドメチル）−チオフェン（９−２）の調製）
【０２９０】
【化８６】

２−アミノメチルチオフェン（９−１）（５．０ｇ、４４ｍｍｏｌ）を一部ずつ攪拌無水トリフルオロ酢酸（２０ｍｌ）に、この混合物を氷上で冷却しながら加え、そしてこの混合物を１時間攪拌した。この溶液に、ＫＮＯ_３（８．９ｇ、８８ｍｍｏｌ）を一部ずつ−２０℃で加えた。均一な溶液を周囲温度まで温め、そして一晩攪拌した。得られた懸濁液を氷（約２００ｇ）に注ぎ、そしてＣＨ_２Ｃｌ_２（２×１００ｍｌ）で抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、そして溶媒を除去して固体を得た。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２）によって、表題化合物に対応する白色固体を得た（３．３ｇ、２９％）。ＭＳ（エレクトロンスプレー）２５５（Ｍ＋１）。
【０２９１】
（実施例４７）
（Ｎ−［２−（５−トリフルオロアセトアミドメチル）チオフェニル］−Ｎ’−Ｎ’’−（ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジン（９−３）の調製）
【０２９２】
【化８７】

２−ニトロ−５−（４−トリフルオロアセトアミドメチル）−チオフェン（９−２）（１．０ｇ、３．９ｍｍｏｌ）を、０℃のＭｅＯＨ中のＨＣｌの飽和溶液に添加した。ＳｎＣｌ_２（４．４ｇ）を、１５分間かけて滴下し、そしてこの混合物を３０分間攪拌した。その溶液を濃縮し、次いで、ＮａＨＣＯ_３（１０ｍｌ）で希釈した。この溶液をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し（２×２０ｍｌ）、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去して、２−アミノ−５−（４−トリフルオロアセトアミドメチル）−チオフェンを黄色の油状物として得た（ＮＭＲによる純度＞９５％、０．８０ｇ、９５％）。この化合物を、さらに精製することなく次の工程ですぐに使用した。
【０２９３】
２−アミノ−５−（４−トリフルオロアセトアミドメチル）−チオフェン（０．８０ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍｌ）中のＮ−Ｎ’−ジ−Ｂｏｃ−Ｎ’’−トリフルオロメタンスルホニル−グアニジン（１．５ｇ、３．８ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（１．１ｍｌ、７．８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に添加した。この混合物を２４時間攪拌した。この混合物を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍｌ）で希釈し、そしてＨＣｌ（１Ｍ、２０ｍｌ）、ブライン（２０ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥した。その溶媒を減圧下で除去して、油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９８：２）により、表題化合物（９−３）に対応する油状物（１５０ｍｇ、９％）を得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）：４６７（Ｍ＋１）。
【０２９４】
（実施例４８）
（Ｎ−［５−４−アミノメチル）チオフェニル］−Ｎ’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニン（９−４）の調製）
【０２９５】
【化８８】

炭酸カリウム（５００ｍｇ）を、Ｈ_２Ｏ／ＭｅＯＨ（１：１、４ｍｌ）中のＮ−［２−（５−トリフルオロアセトアミドメチル）チオフェニル］−Ｎ’−Ｎ’’−（ビス−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジン（９−３）（１５０ｍｇ、０．３２２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に添加し、そしてこの混合物を一晩攪拌した。その溶媒を減圧下で除去した。残りの残渣をＨ_２Ｏ（１０ｍＬ）中に溶解し、そしてＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（９５：５、３×１０ｍｌ）で抽出した。その有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥した。溶媒を減圧下で除去して、表題化合物に対応する黄色固体を得た（１５０ｍｇ、６８％）。
【０２９６】
（実施例４９）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニン−［５−（２−グアニジノ）チオフェン］（９−５）の調製）
【０２９７】
【化８９】

アセトニトリル（３．０ｍＬ）中の、Ｎ−［５−（４−アミノメチル）チオフェニル］−Ｎ’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニン（９−４）（７７ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート（１１０ｍｇ、０．２８５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１６２ｍｇ、０．４２７ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（５８ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１９９μＬ、１．１３ｍｍｏｌ）の溶液を、周囲温度で一晩攪拌した。この溶液をＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）で希釈し、ＨＣｌ（１Ｍ、１０ｍｌ）、ＮａＨＣＯ_３（飽和、１０ｍＬ）、およびブライン（１０ｍｌ）で洗浄した。その有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去して油状物を得た。この油状物に、ＴＦＡ／ＣＨ_２Ｃｌ_２（１：１、２ｍｌ）を添加し；この混合物を３時間攪拌した。ＨＰＬＣ精製（ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ、０．１％　ＴＨＦ）により、表題化合物に対応するふわふわした白色固体（３ｍｇ）を得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）：４８３（Ｍ＋１）。
【０２９８】
（実施例５０）
（６−ブロモメチルニコチノニトリル（１１−２）の調製）
【０２９９】
【化９０】

四塩化炭素（３００ｍｌ）中の６−メチルニコチノニトリル（１１−１）（Ｌａｎｃａｓｔｅｒ）（１５ｇ、１２７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−ブロモスクシンイミド（２７．１２ｇ、１５２．４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を脱気し、そして窒素でパージし、そしてＡＩＢＮ（２，２’−アゾビスイソブチロニトリル）（２．０８ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）を添加した。８５℃で７時間の後、ＡＩＢＮの別のバッチ（１．０４ｇ）を添加し、そしてさらに１時間攪拌し続けた。溶媒の除去後、粗生成物を、酢酸エチル／ヘキサン中のフラッシュカラムクロマトグラフィーにかけて、１０ｇの純粋な物質（４０％）を得た。
【０３００】
（実施例５１）
（６−アジドメチルニコチノニトリル（１１−３）の調製）
【０３０１】
【化９１】

ＤＭＦ（１００ｍｌ）中の６−ブロモメチルニコチノニトリル（１１−２）（８．０ｇ、４０．６ｍｍｏｌ）の溶液に、アジ化ナトリウム（３．１７ｇ、４８．８ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で一晩攪拌した。この反応混合物を４００ｍｌのジエチルエーテルおよび１００ｍｌの水で希釈し、そしてその層を分離した。その水層をジエチルエーテル（２×１００ｍｌ）再抽出した。合わせたエーテル抽出物をブライン（２×１００ｍｌ）で洗浄し、次いでＭｇＳＯ_４で乾燥し、そして濾過して、６．５３ｇの生成物を白色固体として得た。
【０３０２】
（実施例５２）
（３−ヒドロキシアミジノ−６−アジドメチルピリジン（１１−４）の調製）
【０３０３】
【化９２】

メタノール（１００ｍｌ）中の実施例５１のアジド（１１−３）（６．４６ｇ、４０．６ｍｍｏｌ）の溶液に、塩酸ヒドロキシアミン（３．９５ｇ、５６．８４ｍｍｏｌ）を添加し、その後トリエチルアミン（９．６ｍｌ）を添加した。この溶液を６５℃で４時間加熱した。その溶媒を減圧下で除去し、そして残りの残渣を酢酸エチル（３００ｍｌ）および水（１００ｍｌ）で抽出した。その水層を酢酸エチル（２×２００ｍｌ）で再抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで（２×１００ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、そしてエバポレートして表題生成物（１１−４）（７．８ｇ）を得た。
【０３０４】
（実施例５３）
（３−ヒドロキシアミジノ−６−アミノメチルピリジン（１１−５）の調製）
【０３０５】
【化９３】

ＴＨＦ／水（８０ｍｌ／５ｍｌ）中の実施例５２のアジド（１１−４）（７．８ｇ、４０．６ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフェニルホスフィン（１２．８ｇ、４８．７２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応混合物を室温で一晩攪拌した。その溶媒を乾固するまで除去し、そして残りの残渣を１００ｍｌ　１Ｎ　ＨＣｌおよび１００ｍｌの水で希釈した。水層を、ジクロロメタンで数回抽出した。水層をアルカリ樹脂（Ｂｉｏ　Ｒａｄ　ＡＧ　１−Ｘ８）で塩基性（ｐＨ約９）にした。その樹脂を濾過し、そして水で徹底的に洗浄した。合わせた洗浄物を減圧下で乾燥して白色固体（６．６０ｇ）を得た。
【０３０６】
（実施例５４）
（３−ヒドロキシアミジノ−６−アミノメチル（Ｂｏｃ）ピリジン（１１−６）の調製）
【０３０７】
【化９４】

ジオキサン（６ｍｌ）および水（６ｍｌ）中の実施例５３の生成物（１１−５）（０．５ｇ、３．０１ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（８３２ｍｇ、６．０２ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、Ｂｏｃ−無水物（０．６６ｇ、３．０１ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。この反応混合物を濃縮し、そして残りの残渣を酢酸エチルに溶解し、そして炭酸水素ナトリウム（飽和）およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（８／２の酢酸エチル／ヘキサン、続いて、酢酸エチルおよび９／１のジクロロメタン／メタノール）にかけて、０．４３ｇの生成物を白色固体として得た。ＮＭＲ　δ（ｐｐｍ）　ＣＤＣｌ_３：８．８（ｄ，１Ｈ）、７．９（ｄｄ，１Ｈ）、７．３（ｄ，１Ｈ）、６．６（ｂｓ，１Ｈ）、５．５（ｂｓ，１Ｈ）、４．８（ｂｓ，１Ｈ）、４．４（ｄ，２Ｈ）、１．４（ｓ，１Ｈ）。
【０３０８】
（実施例５５）
（３−イソプロピルオキシアミジノ−６−アミノメチル（Ｂｏｃ）ピリジン（１１−７）の調製）
【０３０９】
【化９５】

ジメチルホルムアミド（５ｍｌ）中の実施例５４の生成物（１１−６）（０．４３ｇ、１．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、２−ヨードプロパン（２１０μｌ、２．１ｍｍｏｌ）を添加し、続いて炭酸セシウム（０．６８ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。この反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして炭酸水素ナトリウム（飽和）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮して、オレンジ色の油状物を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー（１／１の酢酸エチル／ヘキサン、続いて、酢酸エチル）にかけて、２２９ｍｇ（５３％）の生成物を結晶性の固体として得た。ＮＭＲ　δ（ｐｐｍ）ＣＤＣｌ_３：８．８（ｄ，１Ｈ）、７．９（ｄｄ，１Ｈ）、７．３（ｄ，１Ｈ）、５．５（ｂｓ，１Ｈ）、４．７（ｂｓ，２Ｈ）、４．４（ｄ，１Ｈ）、１．４（ｓ，９Ｈ）、１．３（ｄ，６Ｈ）。
【０３１０】
（実施例５６）
（Ｂｏｃ−Ａｌａ−３−イソプロピルオキシアミジノ−６−アミノメチルピリジン（１１−８）の調製）
【０３１１】
【化９６】

実施例５５の化合物（１１−７）（２２９ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）をジオキサン（１ｍｌ）中に溶解し、そしてジオキサン中４Ｎ　ＨＣｌ（１ｍｌ）の溶液で、室温で１時間処理した。溶媒を減圧下で除去して、２９０ｍｇの白色固体を得た。次いで、この生成物をアセトニトリル（４．１２ｍｌ）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（５３８μｌ、３．０９ｍｍｏｌ）で中和し、そしてカップリング剤として、ＥＤＣ（１９７ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１５７．６ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を使用して、Ｂｏｃ−アラニン（１９５ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）に結合した。室温で一晩撹拌した後、溶媒を減圧下で除去し、そして残りの残渣を酢酸エチルで希釈した。有機層を、炭酸水素ナトリウム（飽和）およびブラインで数回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮して、黄色がかった油状物を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー（９／１の酢酸エチル／ヘキサン、続いて、酢酸エチル）にかけて、１８１ｍｇの白色の油状物を得た（４６％）。ＮＭＲ　δ（ｐｐｍ）ＣＤＣｌ_３：８．７（ｄ，１Ｈ）、７．９（ｄｄ，１Ｈ）、７．３（ｄ，１Ｈ）、７．１（ｂｓ，１Ｈ）、５．０（ｂｓ，１Ｈ）、４．７（ｂｓ，２Ｈ）、４．６（ｄ，２Ｈ）、４．３（ｍ，１Ｈ）、４．１（ｍ，１Ｈ）、１．４（ｓ，９Ｈ）、１．３９（ｄ，３Ｈ）、１．３（ｄ，６Ｈ）。
【０３１２】
（実施例５７）
（ベンジルスルホニル−ｄＳｅｒ（ｔＢｕ）−Ａｌａ−３−イソプロピルオキシアミジノ−６−アミノメチルピリジン（１１−９）の調製）
【０３１３】
【化９７】

実施例５６の化合物（１１−８）（１８１ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）をジオキサン（１ｍｌ）に溶解し、そしてジオキサン（１ｍｌ）中４Ｎ　ＨＣｌで、室温で１．５時間処理した。溶媒を減圧下で除去して、２００ｍｇの白色固体を得た。次いで、この生成物をアセトニトリル（５ｍｌ）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（２９８μｌ、１．７１ｍｍｏｌ）で中和し、そしてカップリング剤としてＥＤＣ（１０９ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（９６ｇｍ、０．６３ｍｍｏｌ）を使用して、ＢｎＳＯ_２−ｄＳｅｒ（ｔＢｕ）ＯＨ（１８０ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）に結合した。室温で一晩撹拌した後、溶媒を減圧下で除去し、そして得られた残渣を酢酸エチルで希釈した。有機層を、炭酸水素ナトリウム（飽和）およびブラインで数回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮して、固体（２５０ｍｇ、７６％）を得た。この生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜７５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）により、１１．５分で溶出した。ＭＳ（エレクトロスプレー）：５７７（Ｍ＋１）。
【０３１４】
（実施例５８）
（ベンジルスルホニル−ｄＳｅｒ−Ａｌａ−３−イソプロピルオキシアミジノ−６−アミノメチルピリジン（１１−１０）の調製）
【０３１５】
【化９８】

実施例５７の化合物（１１−９）（１３７ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を、室温で１時間、それぞれ２ｍｌのジクロロメタンおよびトリフルオロ酢酸で処理した。減圧下で溶媒を除去して、１６９ｍｇのオレンジ色の油状物を得た。この生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜９０％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）により、９分で溶出した。
【０３１６】
（実施例５９）
（ベンジルスルホニル−ｄＳｅｒ−Ａｌａ−３−アミジノ−６−アミノメチルピリジン（１１−１１）の調製）
【０３１７】
【化９９】

水（８ｍｌ）および酢酸（０．８ｍｌ）中の実施例５８の生成物（１１−１０）（７４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を、活性亜鉛分（９１ｍｇ）で４５分間処理した。この溶液を濾過し、そしてこの濾液を逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８）によって精製した。この生成物は、逆相ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜２５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）により、１１分で溶出した。ＭＳ（エレクトロスプレー）：４６３（Ｍ＋１）。
【０３１８】
（Ｂ．特定の中間化合物の合成経路）
（ｉ）実施例６０〜９７は、本発明の化合物を調製する際に使用される特定の中間体の合成を記載する。図１〜５もまた参照のこと。
（実施例６０）
（Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−Ａｌａ−ＯＭｅ酢酸塩（１−３）の合成の準備）
【０３１９】
【化１００】

Ｎ−α−Ｃｂｚ−Ｄ−セリン（１−１）（Ｂａｃｈｅｍ、４．９７ｇ、１６．８ｍｍｏｌ）、アラニンメチルエステル塩酸塩（１−２）（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、４．７ｇ、３３．７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（６．５ｇ、３３．７ｍｍｏｌ）、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．６ｇ、１６．８ｍｍｏｌ）を合わせ、そしてアセトニトリル（６７ｍｌ）を添加した。スラリーとして１０分間撹拌した後、ジイソプロピルエチルアミン（１４．４ｍｌ、８４ｍｍｏｌ）を添加し、そして得られた透明な混合物をさらに１８時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、そして残渣を酢酸エチル（５００ｍｌ）に懸濁した。この溶液を、０．５Ｍ　ＨＣｌ（２×１００ｍｌ）で洗浄し、続いて、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１００ｍｌ）およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄した。次いで、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去して、Ｃｂｚ−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−Ａｌａ−ＯＭｅを、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜７５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸において、ｔ_Ｒ＝１６．９）による単一のピークとして定量的な収率で得た。
【０３２０】
次いで、Ｃｂｚ−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−Ａｌａ−ＯＭｅを、エタノール／酢酸／水（１５０ｍｌの４：１：１の混合物）に溶解した。このフラスコに窒素を充填し、そして１０％の炭素担持パラジウム（１．５ｇ）を添加した。この混合物を、４５ｐｓｉで２時間水素化した。このパラジウム触媒を濾過し、そして溶媒を減圧下で除去して、４．５８ｇ（収率９５％）の表題化合物を、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜７５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸において、ｔ_Ｒ＝８．０分）による単一のピークとして得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＝２４７．２）。
【０３２１】
（実施例６１）
（ベンゼンスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−Ａｌａ−ＯＭｅ（１−４）の調製）
【０３２２】
【化１０１】

アセトニトリル（１３ｍｌ）中の実施例６０の化合物（１−３）（１．０ｇ、３．３ｍｍｏｌ）の撹拌スラリーに、ベンゼンスルホニルクロリド（０．８７ｇ、４．９ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物に、ジイソプロピルエチルアミン（１．６７ｍｌ、９．８ｍｍｏｌ）を、１時間かけて５回に分けて添加した。この混合物をさらに１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、そして残渣を酢酸エチル（１００ｍｌ）に懸濁した。この溶液を、０．５Ｍ　ＨＣｌ（２×１０ｍｌ）で洗浄し、続いて、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍｌ）およびブライン（１×１０ｍｌ）で洗浄した。次いで、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（５０％ヘキサン／酢酸エチルで溶出する）で精製して、０．５４ｇ、１．４ｍｍｏｌの生成物を、収率４３％で得た。この生成物は、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜７５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸において、ｔ_Ｒ＝２０．２分）による単一のピークであった。^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）：７．５−７．９ｐｐｍ（ｍ，５Ｈ）、４．３ｐｐｍ（ｑ，１Ｈ）、３．９ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ）、３．７（ｓ，３Ｈ）、３．４ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、３．５（ｍ，１Ｈ）、１．３ｐｐｍ（ｄ，３Ｈ）、１．０５ｐｐｍ（ｓ，９Ｈ）。
【０３２３】
（実施例６２）
（ベンゼンスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−Ａｌａ−ＯＨ（１−５）の調製）
【０３２４】
【化１０２】

メタノール（９ｍｌ）中の実施例６１の化合物（１−４）（０．５３ｇ、１．４ｍｍｏｌ）に、１．０Ｍ　水酸化リチウム（３．０ｍｌ、３ｍｍｏｌ）を添加した。１８時間撹拌した後、この反応混合物を、ＤＯＷＥＸ（５×８−４００）イオン交換樹脂のカラムに注ぎ入れ、そしてメタノール／水（６０ｍｌの１：１の混合物）で溶出した。メタノールを減圧下で除去し、そして残りの水を凍結乾燥して、０．４９ｇ、１．３ｍｍｏｌ（９５％）の表題化合物を、逆相（Ｃ１８）ＨＰＬＣ（２０分にわたって、５〜７５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸において、ｔ_Ｒ＝１３．５分）による単一のピークとして得た。^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）：７．９ｐｐｍ（ｄ，２Ｈ）、７．６ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ）、７．５ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ）、４．２５ｐｐｍ（ｑ，１Ｈ）、３．９ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ）、３．５ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、３．４ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）、１．３ｐｐｍ（ｄ，３Ｈ）、１．０７５ｐｐｍ（ｓ，９Ｈ）。
【０３２５】
（実施例６３）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−ＯＭｅの調製）
【０３２６】
【化１０３】

アセトニトリル（３９ｍｌ）中のＤ−セリン（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）メチルエステル塩酸塩（２．０７ｇ、９．８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、α−トルエンスルホニルクロリド（１．８６ｇ、９．８ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物に、ジイソプロピルエチルアミン（３．７ｍｌ、２１．５ｍｍｏｌ）を、１時間かけて５回に分けて添加した。この混合物をさらに１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、そして残渣を酢酸エチル（１００ｍｌ）に懸濁した。この溶液を、０．５Ｍ　ＨＣｌ（２×１００ｍｌ）で洗浄し、続いて、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍｌ）およびブライン（１×１０ｍｌ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去して、２．８４ｇの表題化合物を、収率８８％で得た。Ｒ_ｆ＝０．４（４：１の酢酸エチル：ヘキサン）。
【０３２７】
（実施例６４）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−ＯＨの調製）
【０３２８】
【化１０４】

メタノール（５４ｍｌ）中の実施例６３の化合物（２．６６ｇ、８．１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、１．０Ｍの水酸化リチウム（１７．８ｍｌ、１７．８ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を１８時間撹拌し、次いで、１０ｍｌのＤＯＷＥＸ（５０×８−４００）イオン交換樹脂のカラムに注ぎ入れ、そしてメタノール：水（６０ｍｌの１：１の混合物）で溶出した。メタノールを減圧下で除去し、そして残りの水溶液を凍結乾燥して、２．４７ｇの表題化合物を収率９７％で得た。ｔ_Ｒ＝１４．８分（２０分にわたって、５〜７５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）。
【０３２９】
（実施例６５）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−Ａｌａ−ＯＭｅの調製）
【０３３０】
【化１０５】

実施例６４の化合物（１．０ｇ、３．２ｍｍｏｌ）、アラニンメチルエステル塩酸塩（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、０．８９ｇ、６．３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１．２２ｇ、６．３ｍｍｏｌ）、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．４９ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を合わせ、そしてアセトニトリル（１３ｍｌ）を添加した。得られたスラリーを１０分間撹拌した後、ジイソプロピルエチルアミン（２．７１ｍｌ、１５．８ｍｍｏｌ）を添加し、そして得られた透明な混合物を、さらに１８時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、そして残渣を酢酸エチル（１００ｍｌ）に懸濁した。この溶液を、０．５Ｍ　ＨＣｌ（２×１０ｍｌ）で洗浄し、続いて、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１０ｍｌ）およびブライン（１×１０ｍｌ）で洗浄した。次いで、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、そして溶媒を減圧下で除去して、１．２２ｇの表題化合物を収率９７％で得た。ｔ_Ｒ＝１６．２分（２０分にわたって、５〜７５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）。
【０３３１】
（実施例６６）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−Ａｌａ−ＯＨの調製）
【０３３２】
【化１０６】

メタノール（２２ｍｌ）中の実施例６５の化合物（１．２２ｇ、３．１ｍｍｏｌ）に、１Ｍの水酸化リチウム（７．２ｍｌ、７．２ｍｍｏｌ）を添加した。１８時間撹拌した後、この反応混合物を、１０ｍｌのＤＯＷＥＸ（５０×８−４００）イオン交換樹脂のカラムに注ぎ入れ、そしてメタノール：水（６０ｍｌの１：１の混合物）で溶出した。メタノールを減圧下で除去し、そして水溶液を凍結乾燥して、１．１６ｇの表題化合物を収率９１％で得た。ｔ_Ｒ＝１３．２分（２０分にわたって、５〜７５％水性アセトニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）。
【０３３３】
（実施例６７）
（ｉ−ブトキシカルボニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−ＯＭｅの調製）
【０３３４】
【化１０７】

テトラヒドロフラン（２００ｍｌ）中のＨＣｌ−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−ＯＭｅ（１５ｇ，７１ｍｍｏｌ，Ｂａｃｈｅｍ）の撹拌均質溶液に、飽和炭酸水素ナトリウム（８０ｍｌ）を添加し、次いで、イソブチルクロロホルメート（１９．４５ｇ，１４２ｍｍｏｌ）を添加した。層を分離し、そして水層を酢酸エチル（５０ｍｌ）で洗浄した。有機相を合わせ、そして溶媒を減圧下で除去した。この残渣を、酢酸エチル（１００ｍｌ）中に懸濁し、そして１Ｍ　ＨＣｌ（１００ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（１００ｍｌ）、およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄した。この有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、脱色炭（例えば、商標名Ｄａｒｃｏのもとで販売されているもの）で処理し、濾過し、そして減圧下で溶媒を除去して、定量的収率の表題化合物を得た。Ｒ_ｆ＝０．３（２０％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０３３５】
（実施例６８）
（ｉ−ブトキシカルボニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−ＯＨの調製）
【０３３６】
【化１０８】

テトラヒドロフラン（７８ｍｌ）中の実施例６７の化合物（１９．５１ｇ，７０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水酸化リチウム（７８ｍｍｏｌ，３．２８ｇ）を添加した。この反応混合物を、出発物質がＴＬＣ（２０％酢酸エチル／ヘキサン）によって観察されなくなるまで、３時間強力に撹拌した。この溶液を、濃ＨＣｌで約ｐＨ２まで酸性化し、そして減圧下で溶媒を除去した。粗生成物を、酢酸エチル中に懸濁し、そして飽和炭酸水素ナトリウム（２×，７５ｍｌ）で抽出した。合わせた炭酸水素ナトリウム洗浄物を、６Ｍ　ＨＣｌで酸性化し、そして分離された油を、酢酸エチル（２×１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を、硫酸マグネシウムで乾燥させ、Ｄａｒｃｏで処理し、濾過し、そして減圧下で溶媒を除去して、定量的収率の表題化合物を得た。Ｒ_ｆ＝０．０１（２０％酢酸エチル（ヘキサン中））。
【０３３７】
（実施例６９）
（ｉ−ブトキシカルボニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−Ａｌａ−ＯＭｅの調製）
【０３３８】
【化１０９】

アセトニトリル（２８０ｍｌ）中の実施例６８の化合物（１６．５ｇ，６３ｍｍｏｌ），ＨＣｌ−Ａｌａ−ＯＭｅ（１０．６ｇ，７６ｍｍｏｌ），１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１０．２ｇ，７６ｍｍｏｌ），およびＥＤＣ（１６．３３ｇ，８５ｍｍｏｌ）の溶液（０℃）に、４−メチルモルホリン（３５ｍｌ，３１５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、０℃で１時間撹拌し、次いで、周囲温度で７２時間撹拌した。この溶媒を、減圧下で除去し、そして生じた残渣を、酢酸エチル（３００ｍｌ）および１Ｍ　ＨＣｌ（３５０ｍｌ）中に懸濁した。水層を分離し、そして酢酸エチル（３００ｍｌ）で洗浄した。合わせた酢酸エチル層を合わせて、１Ｍ　ＨＣｌ（３００ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（４００ｍｌ）、およびブライン（２００ｍｌ）で洗浄した。有機層を、硫酸マグネシウムで乾燥させ、Ｄａｒｃｏ脱色炭で処理し、そして濾過した。溶媒を減圧下で除去して、２１．４８ｇの表題化合物（収率９８％）を得た。
【０３３９】
（実施例７０）
（ｉ−ブトキシカルボニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−ＯＨの調製）
【０３４０】
【化１１０】

実施例６９の化合物（２１ｇ，５８ｍｍｏｌ）を、トリフルオロ酢酸（１１０ｍｌ）中に溶解し；生じた混合物を、３５分間撹拌した。この溶液を、氷浴中で冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム（６３０ｍｌ）を添加し、次いで、ｐＨ＝７を生じるまで、４５分間にわたり固形炭酸水素ナトリウム（７０ｇ）を添加した。この水溶液を、酢酸エチル（３×２５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥させ、Ｄａｒｃｏ脱色炭で処理し、そして濾過した。溶媒を真空下で除去して、定量的収率のｉ−ブトキシカルボニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−ＯＭｅを得た。
【０３４１】
テトラヒドロフラン（６８ｍｌ）中の粗残渣の撹拌溶液に、水中（１７ｍｌ）の水酸化リチウム（２．７ｇ，６４ｍｍｏｌ，，１．１ｅｑ．）を添加した。この反応混合物を、ＴＬＣ（９：１　ジクロロメタン／イソプロパノール）によって観察される出発物質がもはや存在しなくなるまで、０．５時間強力に撹拌した。この溶液を、６Ｍ　ＨＣｌ（１３ｍｌ）で約ｐＨ２まで酸性化し、そして減圧下で溶媒を除去した。粗生成物を、酢酸エチル（４００ｍｌ）および水（５０ｍｌ）中に懸濁した。水層を、酢酸エチル（２００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、そして真空下で溶媒を除去して、１３．９４ｇの表題化合物を得た（収率８６％）。Ｒ_ｆ＝０．３（９０：３０：５　クロロホルム／メタノール／酢酸）。
【０３４２】
（実施例７１）
（Ｎ−α−（３−フェニルプロピル）−Ｄ−セリン−ｔ−ブチルエーテルメチルエステルの調製）
【０３４３】
【化１１１】

セリンＯ−ｔ−ブチルエーテルメチルエステル（１．５０ｇ，７．１ｍｍｏｌ）、ヒドロシンナムアルデヒド（１．４０ｍｌ，１０．６ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（１．１８ｍｌ，８．５ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（７０ｍｌ）中で４時間還流した。この溶液を室温まで冷却させた後、水素化ホウ素ナトリウム（０．４６ｇ，１２ｍｍｏｌ）を、二部分に分けて、撹拌溶液に添加した。この反応混合物を、周囲温度で３０分間撹拌し；この溶液を、減圧下で濃縮した。この残渣を、酢酸エチル１．０Ｍ　ＨＣｌ間で分配した。有機層を、１．０Ｎ　ＨＣｌで洗浄した。水層を、４０％ＮａＯＨでｐＨ１０まで塩基性化し、次いで、酢酸エチル（２×）で抽出した。合わせた有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥させ；溶媒を、真空下で除去した。この残渣を、１０〜３０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出するシリカゲル（１×６インチカラム）に対するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１５０ｍｇ（収率７％）の表題化合物を得た。Ｒ_ｆ＝０．６０（５０％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０３４４】
（実施例７２）
（Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−α−（３−フェニルプロピル）−Ｄ−セリン−ｔ−ブチルエーテルメチルエステルの調製）
【０３４５】
【化１１２】

実施例７１の化合物（１５０ｍｇ，０．５１ｍｍｏｌ）、ジ−ｔ−ブチルジカルボネート（１６７ｍｇ，０．７７ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．１３ｍｌ，０．７７ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（２ｍｌ）中で、周囲温度にて一晩撹拌した。この反応混合物を、減圧下で濃縮した。この残渣を、酢酸エチル（２０ｍｌ）で希釈し、１．０Ｎ　ＨＣｌ（２×）、飽和炭酸水素ナトリウム（２×）、およびブライン（１×）で連続的に洗浄した。溶媒を真空下で除去して、２０６ｍｇの定量的収率の表題化合物を得た。Ｒ_ｆ＝０．７４（５０％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０３４６】
（実施例７３）
（Ｎ−α−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−α−（３−フェニルプロピル）−Ｄ−セリン−ｔ−ブチルエーテルの調製）
【０３４７】
【化１１３】

メタノール（３．５ｍｌ）中の実施例７２の化合物（２０６ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ）の溶液に、１．０Ｎ　ＬｉＯＨ（０．６３ｍｌ，０．６３ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。この溶液は濁り、次いで、５分間で均質になった。この反応混合物を、周囲温度で一晩撹拌させた。さらなる１．０Ｎ　ＬｉＯＨ（１．４７ｍｌ）を添加した。２時間後、さらなる１．０Ｎ　ＬｉＯＨ（１．０ｍｌ）を添加した。出発物質がＴＬＣ（５０％酢酸エチル／ヘキサン）によって観察されなくなった後で、この反応混合物をＤＯＷＥＸ（５０×８−４００）イオン交換樹脂を用いてｐＨ４まで酸性化した。この溶液を濾過し、メタノールでリンスし、次いで、水でリンスした。この溶液を減圧下で濃縮し、次いで、凍結乾燥させて、黄色油として、１８９ｍｇの表題化合物（収率９５％）を得た。Ｒ_ｆ＝０．０４（５０％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０３４８】
（実施例７４）
（ｉ−ブトキシカルボニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−ブチル）−ＯＨ（２−２）の調製）
【０３４９】
【化１１４】

水（５１ｍｌ）中のＤ−セリン−Ｏ−ｔ−ブチルエーテル（２−１）の溶液（１０．５ｇ，６５．３ｍｍｏｌ）に、炭酸ナトリウム（２０．１ｇ，１９６．２ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、イソブチルクロロホルメート（９．８ｍｌ，７５．２ｍｍｏｌ）を添加した。３時間後に、この混合物は濁り、そしてさらに３時間撹拌した。６時間後、この溶液を６Ｍ　ＨＣｌ（約５０ｍｌ）で酸性化した。次いで、この反応混合物を、酢酸エチル（３×２００ｍｌ）で抽出した。最初の抽出後、水層を塩化ナトリウムで飽和し、そして酢酸エチル（２×２００ｍｌ）で抽出した。酢酸エチル層を合わせ、そして硫酸ナトリウムで乾燥させ、次いで、真空下で溶媒を除去して、白色固体として１７．０ｇ（収率９９．５％）の表題化合物を得た。ＨＰＬＣ：ｔ＝１８．５分間（５％〜７５％アセトニトリル勾配（０．１％水性ＴＦＡ緩衝液中）、４．６×２５０ｍｍ，５ミクロン粒子，１００オングストローム孔，Ｃ１８カラム、１ｍｌ／分流速において）。ＮＭＲ（ＣＤＣ１_３）：５．５ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ），４．４５ｐｐｍ（ｂｓ，１Ｈ），３．８２〜３．９５ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ），３．５２〜３．６ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ），１．８５〜１．９７ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ），１．２ｐｐｍ（ｓ，９Ｈ），０．９ｐｐｍ（ｄ，６Ｈ）。
【０３５０】
（実施例７５）
（ｉ−ブトキシカルボニル−Ｄ−Ｓｅｒ（ｔ−Ｂｕ）−Ｌ−Ａｌａ−Ｏ−ｔ−Ｂｕ（２−３）の調製）
【０３５１】
【化１１５】

アセトニトリル（１５３ｍｌ）中の実施例７４の化合物（２−２）（１０ｇ，３８．３ｍｍｏｌ）、Ｌ−アラニンｔ−ブチルエステル、ＨＣｌ塩（１０．４３ｇ，５７．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１１．０５ｇ，５７ｍｍｏｌ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール（５．８５ｇ，３８．３ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１５分間撹拌した。ジイソプロピルエチルアミン（３２．７ｍｌ，１９１ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの反応混合物を１８時間撹拌した。溶媒を、減圧下で除去し：生じた残渣を、酢酸エチル（１０００ｍｌ）および１Ｍ　ＨＣｌ（１００ｍｌ）中に再懸濁した。酢酸エチル層を、０．５Ｍ　ＨＣｌ（１００ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２×１００ｍｌ）、およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄した。酢酸エチル層を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして溶媒を真空下で除去して、定量的収率の表題化合物を得た。ＨＰＬＣ：ｔ_ｒ＝１８．７分間（５％〜９０％アセトニトリル勾配（０．１％水性ＴＦＡ緩衝液中）、４．６×２５０ｍｍ，５ミクロン粒子，１００オングストローム孔，Ｃ１８カラム、１ｍｌ／分流速において）。ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：７．１５ｐｐｍ（ｂｓ，１Ｈ），５．６ｐｐｍ（ｂｓ，１Ｈ），４．４〜４．５ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ），４．２ｐｐｍ（ｂｓ，１Ｈ），３．８７〜３．９５ｐｐｍ（ｍ，３Ｈ），３．３〜３．４ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ），１．８５〜１．９５ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ），１．４５ｐｐｍ（ｓ，９Ｈ），１．３９ｐｐｍ（ｄ，３Ｈ），１．２ｐｐｍ（ｓ，９Ｈ），０．９ｐｐｍ（ｄ，６Ｈ）。
【０３５２】
（実施例７６）
（ｉ−ブトキシカルボニル−Ｄ−Ｓｅｒ−Ｌ−Ａｌａ−ＯＨ（２−４）の調製）
【０３５３】
【化１１６】

ジクロロメタン（３５ｍｌ）中の実施例７５（２−３）の化合物の溶液（７．１５ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）に、トリフルオロ酢酸（３５ｍｌ）を加えた。この混合物を２時間撹拌し、次いで溶媒を減圧下で除去した。トルエンを加え、そして溶媒を真空に移動させ、トリフルオロ酢酸を除去した。次いで、表題の化合物の、粘着性の黄色の油状物としての収量を、次の工程に移した。０．１％の水溶性ＴＦＡ緩衝液中の５％〜９０％のアセトニトリル勾配で、４．６×２５０ｍｍ、５ミクロン粒子、１００オングストローム孔、Ｃ１８カラムにおいて、１ｍｌ／分の流速で、ｔ_ｒ＝１０．５分。
【０３５４】
（実施例７７）
（２−シアノ−５−メチルチオフェン（３−２）の調製）
【０３５５】
【化１１７】

ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の２−ブロモ−５−メチルチオフェン（３−１）（ＴＣＩ　ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、５ｇ、２８ｍｍｏｌ）とシアン化銅（Ｉ）（Ａｌｄｒｉｃｈ、２．５３ｍｇ、２８ｍｍｏｌ）の溶液を還流で４時間加熱した。周囲温度まで冷却した後、酢酸エチル（５００ｍｌ）および１０％のＮａＣＮ水溶液（５００ｍｌ）を加えた。水相と有機相の分離後、水相を酢酸エチル（３００ｍｌ）を用いて抽出した。混合した有機相を、油状物まで濃縮し、これをさらにフラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）によって精製し、表題の化合物（３．０３ｇ、８７％）を得た。ＴＬＣ：Ｒｆ０．３０（１：１のヘキサン／酢酸エチル）；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ２．５５（ｍ、３Ｈ）、６．７６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６Ｈｚ）、７．４２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６Ｈｚ）。
【０３５６】
（実施例７８）
（２−シアノ−５−（ブロモメチル）チオフェン（３−３）の調製）
【０３５７】
【化１１８】

ＣＣｌ_４（Ａｌｄｒｉｃｈ、６０ｍｌ）中の２−シアノ−５−メチルチオフェン（化合物３−２、３．０ｍｇ、２４ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（Ａｌｄｒｉｃｈ、４．８ｇ、２７ｍｍｏｌ）および２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（Ａｌｄｒｉｃｈ、０．４ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の溶液を、還流で５時間加熱した。周囲温度まで冷却した後、溶媒を真空下で除去し、黄色の油状物を得た。この油状物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（１：１のヘキサン／酢酸エチル）によって精製し、表題の化合物（４．５ｇ、９１％）を得た。ＴＬＣ：Ｒｆ０．９１（１：１のヘキサン／酢酸エチル）；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ４．６６（ｓ、２Ｈ）、７．１０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．８Ｈｚ）、７．４８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．８Ｈｚ）。
【０３５８】
（実施例７９）
（２−シアノ−５−（アジドメチル）チオフェン（３−４）の調製）
【０３５９】
【化１１９】

ＤＭＦ（Ａｌｄｒｉｃｈ、６０ｍｌ）中の２−シアノ−５−（ブロモメチル）チオフェン（化合物３−３、３．５ｇ、１７．３ｍｍｏｌ）およびアジ化ナトリウム（Ａｌｄｒｉｃｈ、１．７ｇ、２６ｍｍｏｌ）の溶液を、周囲温度で１０時間撹拌した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中の２０％の酢酸エチル）によって表題の化合物（２．３５ｇ、８３％）を得た。ＴＬＣ：Ｒｆ０．４８（ヘキサン中の２０％の酢酸エチル）；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ４．５６（ｓ、２Ｈ）、７．０１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．７Ｈｚ）、７．５５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．７Ｈｚ）。
【０３６０】
（実施例８０）
（２−シアノ−５−（アミノメチル）チオフェン（３−５）の調製）
【０３６１】
【化１２０】

トリフェニルホスフィン（Ａｌｄｒｉｃｈ、５．７ｇ）を、ＴＨＦ（Ａｌｄｒｉｃｈ、４０ｍｌ）および水（１０ｍｌ）中の２−シアノ−５−（アジドメチル）チオフェン（化合物３−４、２．５ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で加えた。この水溶液を、室温まで温め、そして周囲温度で１０時間撹拌した。ＲＰ−ＨＰＬＣ精製によって、表題の化合物（２．３ｇ、９４％）を得た。ＭＳ（エレクロトスプレー）：１３９（Ｍ＋１）；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ４．０１（ｓ、２Ｈ）、４．７５（ｂｒ　ｓ、２Ｈ、ＮＨ_２）；６．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．５Ｈｚ）；７．０８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．５Ｈｚ）。
【０３６２】
（実施例８１）
（２−シアノ−５−（ｔ−ブトキシカルビニルアミノメチル）チオフェン（３−６）の調製）
【０３６３】
【化１２１】

炭酸カリウム（Ａｌｄｒｉｃｈ、２ｇ）を、水（４ｍｌ）および１，４−ジオキサン（Ａｌｄｒｉｃｈ）中の２−シアノ−５−（アミノメチル）チオフェン（３−５、０．６ｇ、４ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ_２Ｏ（Ｆｌｕｋａ、０．９５ｇ、４ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。得られた混合物を、周囲温度で１２時間撹拌した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（１：１のヘキサン／酢酸エチル）によって表題の化合物（０．５８ｇ、５６％）を得た。ＭＳ（エレクロトスプレー）：２３９（Ｍ＋１）；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ１．４４（ｓ、９Ｈ）、４．５５（ｓ、２Ｈ）、４．９０（ｂｒ　ｓ、１Ｈ、ＮＨ）；６．８８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６Ｈｚ）；７．０７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６Ｈｚ）。
【０３６４】
（実施例８２）
（２−（Ｎ−ヒドロキシアミジニル）−５−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル）チオフェン（３−７）の調製）
【０３６５】
【化１２２】

メタノール（５ｍｌ）中の２−シアノ−５−（ｔ−ブトキシカルビニルアミノメチル）チオフェン（化合物３−６、５６０ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）、ヒドロキシルアミン塩酸塩（Ａｌｄｒｉｃｈ、３３０ｍｇ、４．８ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン（Ａｌｄｒｉｃｈ、１ｍｌ、９．１ｍｍｏｌ）の溶液を、周囲温度で１２時間撹拌した。得られた混合物を、周囲温度で１２時間撹拌した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（５：９５：１のイソプロピルアルコール／塩化メチレン／トリエチルアミン）によって表題の化合物（５５０ｍｇ、８６％）を得た。ＭＳ（エレクロトスプレー）：２７２（Ｍ＋１）。
【０３６６】
（実施例８３）
（２−アミジニル−５−（アミノメチル）チオフェン（３−８）の調製）
【０３６７】
【化１２３】

１０％のＰｄ−ｏｎ−Ｃ（Ａｌｄｒｉｃｈ、１００ｍｇ）を、メタノール（１０ｍｌ）中の２−（Ｎ−ヒドロキシアミジニル）−５−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル））チオフェン（化合物３−７、９００ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。得られた混合物をＰａｒｒ装置において、室温で１０時間水素化した（Ｈ_２の４５ｐｓｉ）。濾過によって触媒を除去し、そして溶媒を真空下でエバポレートし、Ｂｏｃ保護された中間体［９００ｍｇ、９４％、ＭＳ（エレクトロスプレー）２５６（Ｍ＋１）］を得、これを、１，４−ジオキサン（Ａｌｄｒｉｃｈ、５ｍｌ）中の４ＭのＨＣｌで、周囲温度で３時間処理し、表題の化合物（４６０ｍｇ、８４％）を得た。ＭＳ（エレクロトスプレー）：５６（Ｍ＋１）；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）：δ４．４３（ｓ、２Ｈ）、７．４２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．５Ｈｚ）７．７８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．５Ｈｚ）。
【０３６８】
（実施例８４）
（２−［Ｎ−（プロピロキシ）アミジニル］−５−（アミノメチル）チオフェン（３−９）の精製）
【０３６９】
【化１２４】

ＣｓＣＯ_３（Ａｌｄｒｉｃｈ、０．５ｇ）を、ＤＭＦ中の２−（Ｎ−ヒドロキシアミジニル）−５−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル）チオフェン（化合物３−７、２７１ｍｇ、１．０ｍｌ）およびヨードプロパン（Ａｌｄｒｉｃｈ、２００ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この反応混合物を、周囲温度で１０時間撹拌した。フラッシュカラムクロマトグラフィー（５：９５：１のイソプロピルアルコール／塩化メチレン／トリエチルアミン）によって、Ｂｏｃ保護された中間体［ＭＳ（エレクロトスプレー）３１４（Ｍ＋１）］を得、これを、１，４−ジオキサン（Ａｌｄｒｉｃｈ）中の４ＭのＨＣｌで、周囲温度で３時間処理し、表題の化合物（２０１ｍｇ、８１％）を得た。表題の化合物（５５０ｍｇ、８６％）を得た。ＭＳ（エレクロトスプレー）：２１４（Ｍ＋１）；^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ０．９５（ｔ、３Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、１．５５（ｂｒ　ｓ、２Ｈ、ＮＨ_２）、１．７０（ｍ、２Ｈ）、４．００（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、４．０１（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、４．７０（ｂｒ　ｓ、２Ｈ、ＮＨ_２）、６．８０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６Ｈｚ）、７．０８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．６Ｈｚ）。
【０３７０】
（実施例８５）
（α−アジド−４−シアノトルエン（４−２）の調製）
【０３７１】
【化１２５】

アジ化ナトリウム（Ａｌｄｒｉｃｈ、３．５ｇ、５４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１００ｍｌ）中のｐ−シアノベンジルブロミド（Ａｌｄｒｉｃｈ、１０ｇ、５１ｍｍｏｌ）の溶液に加え、そして得られた混合物を、周囲温度で５時間撹拌した。次いで、この反応混合物を水（３５０ｍｌ）で希釈し、そしてエーテル（２×１００ｍｌ）で抽出した。混合された有機相を、ブラインで洗浄し、そして乾燥させた（ＭｇＳＯ_４）。溶媒の除去によって、表題の化合物（８ｇ、９６％）を得た。^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ４．４２（ｓ、２Ｈ）、７．４１（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．６５（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）。
【０３７２】
（実施例８６）
（ｐ−シアノベンジルアミン（４−３）の調製）
【０３７３】
【化１２６】

１０％のＰｄ−ｏｎ−ｃ（Ａｌｄｒｉｃｈ、８００ｍｇ）触媒を、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）中のα−アジド−４−シアノトルエン（化合物４−２、８ｇ、５１ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この反応混合物を、Ｐａｒｒ装置において１１時間水素化した（Ｈ_２、４５ｐｓｉ）。濾過によって触媒を除去し、そして溶媒を真空下で除去し、表題の化合物（６．３ｇ、９３％）を得た。^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ３．８５（ｓ、２Ｈ）、７．４５（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．１）、７．６０（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．７８（ｓ、２Ｈ、ＮＨ_２）。
【０３７４】
（実施例８７）
（４−（アミノメチル）フェニル−Ｎ−ヒドロキシアミジン（４−４）の調製）
【０３７５】
【化１２７】

ヒドロキシアミン塩酸塩（７ｇ）を、メタノール（１００ｍｌ）中の化合物４−３（７ｇ）およびＮＭＭ（４ｍｌ）の溶液に加えた。この混合物を、周囲温度で３日間撹拌した。この化合物を、ＲＰ　ＨＰＬＣによって精製し、表題の化合物（７ｇ、８９％）を得た。ＭＳ（エレクロトスプレー）：１６６（Ｍ＋１）。
【０３７６】
（実施例８８）
（４−（アミノメチル）フェニルアミジン（４−５）の調製）
【０３７７】
【化１２８】

１０％のＰｄ−ｏｎ−ｃ（Ａｌｄｒｉｃｈ、８００ｍｇ）を、メタノール（１５０ｍｌ）中の４−（アミノメチル）フェニル−Ｎ−ヒドロキシアミジン（化合物４−４、７ｇ）の溶液に加えた。この反応混合物を、Ｐａｒｒ装置において４８時間水素化した（Ｈ_２、４５ｐｓｉ）。濾過によって触媒を除去し、そして溶媒を真空下で除去し、表題の化合物（６．３ｇ、９９％）を得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）：１５０（Ｍ＋１）。
【０３７８】
（実施例８９）
（２−フルオロ−４−シアノトルエン（５−２）の調製）
【０３７９】
【化１２９】

シアン化銅（Ｉ）（Ａｌｄｒｉｃｈ、３．６ｇ、４０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（６０ｍｌ）中の４−ブロモ−２−フルオロトルエン（Ａｌｄｒｉｃｈ、５ｇ、２７ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この反応混合物を、１５０℃で１１時間加熱した。室温まで冷却した後、この混合物を、水とＥｔＯＡｃ（それぞれ５００ｍｌ）との間で分配した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、そして溶媒を真空下で除去し、表題の化合物（２．０８、５８％）を得た。。^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ２．３６（ｓ、３Ｈ）、７．３０（ｍ、３Ｈ）、７．３５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）。
【０３８０】
（実施例９０）
（３−フルオロ−４−（ブロモメチル）ベンゾニトリル（５−３）の調製）
【０３８１】
【化１３０】

ＮＢＳ（Ａｌｄｒｉｃｈ、３．０２ｇ、１７ｍｍｏｌ）およびベンゾイルペルオキシド（Ａｌｄｒｉｃｈ、０．３７ｇ、１．５ｍｍｏｌ）を、ＣＣｌ_４中の２−フルオロ−４−シアノトルエン（化合物５−２、２．０８ｇ、１５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を、８０℃で１４時間加熱した。周辺の温度まで冷却後、その混合物を、エーテル（１００ｍｌ）で希釈し、そして水性Ｎａ_２Ｓ_３Ｏ_３で洗浄して、そして乾燥（ＭｇＳＯ_４）した。真空下での溶媒の除去が、黄色油を導き、その油をフラッシュクトマトグラフィーで精製した。表題の化合物５−３（１．４ｇ、４２％）を副産物（３−フルオロ−４−（ブロモメチル）ベンゾニトリル（５−４）（１．０ｇ、３０％））と共に得た。表題の化合物（５−３）について：^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣ１_３）：δ４．４６（ｓ、２Ｈ）、７．３５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．４２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．５２（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）。副産物（５−４）について：^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣ１_３）：δ６．９０（ｓ、１Ｈ）、７．３５（ｄ、ＩＨ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．５５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．９６（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）。
【０３８２】
（実施例９１）
（３−フルオロ−４−（アジドメチル）ベンゾニトリル（５−５）の調製）
【０３８３】
【化１３１】

アジ化ナトリウム（Ａｌｄｒｉｃｈ、０．６３ｇ、９．８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１５ｍｌ）中の３−フルオロ−４−（ブロモメチル）ベンゾニトリル（化合物５−３、１．４ｇ、６．５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。周辺の温度で２０時間撹拌後、反応混合物をＥｔＯＡｃおよび水（各１００ｍＬ）の中に分割した。次いで、有機層を乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、そして溶媒を真空下で除去して表題の化合物（０．９９５ｇ、８６％）を得た。^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣ１_３）：δ４．５０（Ｓ、２Ｈ）、７．３８（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５２（ｍ、２Ｈ）。
【０３８４】
（実施例９２）
（３−フルオロ−４−（アジドメチル）フェニル−Ｎ−ヒロドキシアミジン（５−６）の調製）
【０３８５】
【化１３２】

ヒドロキシルアミン塩酸塩（Ａｌｄｒｉｃｈ、８００ｍｇ、１１．６ｍｍｏｌ）を、メタノール（２５ｍｌ）中の３−フルオロ−４−（アジドメチル）ベンゾニトリル（化合物５−５、１．２ｇ、６．８ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（２ｍｌ）の溶液に添加した。室温で３日間撹拌後、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、鹹水で洗浄した。溶媒を真空下で除去して表題の化合物（１．３８、８２％）を生じた。^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）：δ４．４１（ｓ、２Ｈ）、７．４５（ｍ、３Ｈ）。
【０３８６】
（実施例９３）
（３−フルオロ−４−（アジドメチル）フェニル（−Ｎ−プロピルオキシ）アミジン（５−７）の調製）
【０３８７】
【化１３３】

炭酸セシウム（Ａｌｄｒｉｃｈ、３．２ｇ、９．９ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２０ｍｌ）中のヨードプロパン（１ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）および３−フルオロ−４−（アジドメチル）フェニル−Ｎ−ヒロドキシアミジン（化合物５−６、１．３８ｇ、６．６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を、５０℃で２０時間加熱した。周辺の温度まで冷却後、水を添加して、生じた混合物をエーテルで抽出した。有機層を鹹水で洗浄して、乾燥（ＭｇＳＯ_４）した。フラッシュクロマトグラフィーで、表題の化合物（１．０３ｇ、６２％）を得た。^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣ１_３）：δ０．９９（ｔ、３Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、１．７５（ｍ、２Ｈ）、４．０８（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、４．４０（ｓ、２Ｈ）、４．７８（ｂｒ　ｓ、２Ｈ）、７．４０（ｍ、３Ｈ）。
【０３８８】
（実施例９４）
（３−フルオロ−４−（アミノメチル）フェニル（−Ｎ−プロピルオキシ）アミジン（５−８）の調製）
【０３８９】
【化１３４】

トリフェニルホスフィン（Ａｌｄｒｉｃｈ、１．６ｇ、６．２ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１５ｍｌ）中の３−フルオロ−４−（アジドメチル）フェニル（−Ｎ−プロピルオキシ）アミジン（化合物５−７、１．０３ｇ、４．１ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を、周辺の温度で２０時間撹拌した。ｐＨ＝１４までＮａＯＨ（３Ｍ）をこの反応混合物に添加した。生じた溶液をＥｔＯＡｃで抽出した（２×１００ｍｌ）。組み合わせた有機層を鹹水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）した。溶媒を真空下で除去して表題の化合物（８２５ｍｇ、７７％）を得た。^１Ｈ　ＮＭＲ　（ＣＤ_３ＯＤ）：δ０．９８（ｔ、３Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、１．７２（ｍ、２Ｈ）、３．８２（ｓ、２Ｈ）、３．９５（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．３５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．４０（ｍ、２Ｈ）
（実施例９５）
（Ｎ−α−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−ブチル）−Ｌ−Ａｌａ　ｔ−ブチル　エステルの調製）
【０３９０】
【化１３５】

アセトニトリル（１００ｍｌ）中のＮ−α−Ｃｂｚ−Ｄ−セリン　ｔ−ブチル　エーテル（５．０２ｇ、１７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＥＤＣ（４．９０ｇ、２５．５ｍｍｏｌ、１．５当量）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．６０ｇ、１７ｍｍｏｌ）を添加した。４５分間撹拌した後、アラニン　ｔ−ブチル　エステル、ＨＣｌ塩（３．５５ｇ、１９．６ｍｍｏｌ、１．１５当量）および４−メチルモルホリン（７．５ｍｌ、６８ｍｍｏｌ、４当量）を添加した。この反応混合物を、１．５時間撹拌した。ＴＬＣによって、反応が完了したことを示した。この反応混合物を、減圧下で濃縮した。この残留物を酢酸エチル（１００ｍｌ）に溶解し、次いで１Ｎ　ＨＣｌ、飽和重炭酸ナトリウム、水および鹹水（各２５ｍｌ）で連続して洗浄した。溶媒をインヴァキュオで除去して、油を得、静置して結晶化した。表題の化合物（６．９５ｇ）を９７％収量でペール黄色固体として得た。Ｒ_ｆ＝０．６３（ジクロロメタン中５％イソプロパノール）。
【０３９１】
（実施例９６）
（Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−ブチル）−Ｌ−Ａｌａ　ｔ−ブチル　エステルの調製）
【０３９２】
【化１３６】

メタノール中の実施例９５の化合物（１．１４ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）の溶液を、バルーンの圧力で１．５時間水酸化パラジウム（１１０ｍｇ）上で硬化した。この反応混合物を、セライト（ｃｅｌｉｔｅ）を介して濾過し、そして溶媒をインヴァキュオで除去して、黄色油として定量収量で表題の化合物を生じた。Ｒ_ｆ＝０．４４（ジクロロメタン中５％メタノール）。
【０３９３】
（実施例９７）
（フェネチルスルホニル−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−ブチル）−Ｌ−Ａｌａ　ｔ−ブチル　エステルの調製）
【０３９４】
【化１３７】

氷浴で冷却されたアセトニトリル（１００ｍｌ）中の実施例９６の化合物（４．２ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）および塩化フェネチルスルホニル（３．５８ｇ、１７．５ｍｍｏｌ、１．２当量）の撹拌溶液に、２，４，６−コリジン（４．８ｍｌ、３６．５ｍｍｏｌ、２．５当量）を添加した。この反応混合物を、室温まで暖め、次いで一晩撹拌し得た。この反応混合物を、減圧下で濃縮した。残留物を酢酸エチル（８０ｍｌ）に溶解し；生じた溶液を、１．０Ｎ　ＨＣｌ、飽和重炭酸ナトリウム、水および鹹水で連続して洗浄し、次いで硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒をインヴァキュオで除去した。残留物をシリカゲルを介してクロマトグラフィーして、０〜６０％酢酸エチル／ヘキサンで溶離した。表題の化合物を、黄色油として８９％収量で単離した。Ｒｆ＝０．８４（ジクロロメタン中５％メタノール）。
【０３９５】
（Ｃ．Ｐ３でアシルエステルまたは炭酸エステルを有する化合物の合成経路）
（実施例９８）
（ｎ−ブチルスルホニル−Ｄ−（イソプロピルオキシカルボニル）セリン−アラニン−４−アミジノベンジルアミドの調製）
【０３９６】
【化１３８】

氷浴で冷却したピリジン（１００ｍｌ）中の実施例９の化合物（２．３２ｇ、４．３ｍｍｏｌ）の溶液に、クロロ蟻酸イソプロピル（トルエン中で２１ｍｌの１Ｍ溶液、２１ｍｍｌ、５当量）を添加した。反応を、完全であると決定するまで分析ＨＰＬＣでモニターした。この反応混合物を、トルエン（３００ｍｌ）で希釈し；溶媒を減圧下で除去した。残留物を、アセトニトリル（４００ｍｌ）に溶解して、溶媒を減圧下で除去した。残留物をアセトニトリル（３０ｍｌ）および酢酸エチル（３０ｍｌ）に溶解した。エーテルを添加し、そして沈殿物を単離した。この固体をエーテルで洗浄し、次いでインヴァキュオで乾燥した。この固体をエーテルおよび酢酸エチルで洗浄（２×２００ｍｌの１：１混合物）し、次いでインヴァキュオで乾燥して表題の化合物を得た。
【０３９７】
（実施例９９）
実施例９８のプロトコールに次いで、有名なクロロ蟻酸イソプロピルの置換を用いて、以下の化合物を調製した：
【０３９８】
【表１】

（実施例１００）
（（４−アミノ−３−ニトロ−ベンジル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
【０３９９】
【化１３９】

ＴＨＦ（１Ｍ、４０ｍＬ）中のＢＨ_３の一部を、氷浴中で冷却しながら、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の４−アミノ−３−ニトロ−５−ベンゾニトリル（１．５ｇ、９．２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、１０分間にわたって滴下した。室温まで加温して得られた黄色混合物を、２時間攪拌し、０℃でＨＣｌ（６Ｍ、２０ｍＬ）でクエンチした。溶媒を真空下で除去し；残渣をＨ_２Ｏで希釈し、ｐＨをＮａＯＨ（１Ｍ）を使用して約１０に調整した。水層をＣＨ_２Ｃｌ_２（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥した。溶媒を除去し、黄色固体１．２ｇ（７８％）を得、これをさらに精製することなく、次の合成工程に使用した。
【０４００】
固体（５００ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のＢＯＣ−ＯＮ（７５４ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）の均一混合物に加えた。この得られた混合物を室温で一晩攪拌した。この混合物をＮａＨＣＯ_３水溶液で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａＳＯ_４で乾燥した。溶媒を真空下で除去し、油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９９：１）によって、表題化合物を、静置の際に固化した黄色固体として得た（７６０ｍｇ、９５％）、ＭＳ（エレクトロスプレー）２６８（Ｍ＋１）。
【０４０１】
（実施例１０１）
（（３，４−ジアミノ−ベンジル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
【０４０２】
【化１４０】

ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の（４−アミノ−３−ニトロ−ベンジル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５００ｍｇ、１．８７ｍｍｏｌ）およびＰｄ（炭素担持１０％、１００ｍｇ）を、Ｈ_２（４０ｐｓｉ）下で３時間振盪した。触媒を濾過によって除去し、溶媒を真空下で除去し油状物を得、これを次の工程（実施例１０２）にすぐに使用した。
【０４０３】
（実施例１０２）
（（２−アミノ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−イルメチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
【０４０４】
【化１４１】

（３，４−ジアミノ−ベンジル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５００ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）を、ＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏ（１：１、１０ｍＬ）中のＣＮＢｒ（２６７ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ_３（３５４ｍｇ、４．２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加え、この混合物を４８時間攪拌した。この溶媒を真空下で除去し、白色固体を得、これをさらなる単離なしに、次の合成工程に使用した。ＭＳ（エレクトロスプレー）２６３（Ｍ＋１）。
【０４０５】
（実施例１０３）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニン−５−（２−アミノベンズイミダゾリル）メチルアミドの調製）
【０４０６】
【化１４２】

（２−アミノ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−イルメチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５０ｍｇ、０．３７０３ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（１．０ｍＬ）中のベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート（１１１ｍｇ、０．３３７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１９２ｍｇ、０．５０６ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（６９ｍｇ、０．５０６ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（１７４μＬ、１．０１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加えた。この混合物を室温で一晩攪拌した。ＨＰＬＣ精製（ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）によって、表題化合物として綿状白色固体を得た（２５ｍｇ、２４％）、ＭＳ（エレクトロスプレイ）４７５（Ｍ＋１）。
【０４０７】
（実施例１０４）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニン−４−（２−アミノイミダゾリル）−プロピルアミドの調製）
【０４０８】
【化１４３】

４−（２−アミノイミダゾリル）−プロピルアミンＨＣｌ（５０ｍｇ、０．２３６ｍｍｏｌ）（Ｏｌｏｆｓｏｎら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９８、６３、１２４８の手順に従って調製した）を、アセトニトリル（１．０ｍＬ）中のベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート（７８ｍｇ、０．２３６ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１７９ｍｇ、０．４７２ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（６４ｍｇ、０．４７２ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（１６４μＬ、０．９４３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加えた。この混合物を室温で一晩攪拌した。ＨＰＬＣ精製（ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）によって、表題化合物として綿状白色固体を得た。ＭＳ（エレクトロスプレイ）４５３（Ｍ＋１）。
【０４０９】
（実施例１０５）
（（４−アミノ−２−クロロ−ベンジル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
【０４１０】
【化１４４】

ＴＨＦ（１Ｍ、３６ｍＬ）中のＢＨ_３の一部を、氷浴中で冷却しながら、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の４−アミノ−２−クロロ−５−ベンゾニトリル（２．０ｇ、１３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、１０分間にわたって滴下した。室温まで加温して得られた黄色混合物を、２時間攪拌し、０℃でＨＣｌ（６Ｍ、２０ｍＬ）でクエンチした。溶媒を真空下で除去した。残渣をＨ_２Ｏで希釈し、ｐＨをＮａＯＨ（１Ｍ）を使用して約１０に調整した。水層をＣＨ_２Ｃｌ_２（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥した。溶媒を除去し、黄色油状物（２．５ｇ、１００％）を得、これをさらに精製することなく、次の合成工程に使用した。
【０４１１】
油状物（５００ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）（前の工程から）を、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のＢＯＣ−ＯＮ（６６４ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ）の均一混合物に加え、得られた混合物を室温で一晩攪拌した。この混合物を、ＮａＨＣＯ_３水溶液で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａＳＯ_４で乾燥した。溶媒を真空下で除去し、無色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９９：１）によって、表題化合物を、静置の際に固化した黄色固体として得た。ＭＳ（エレクトロスプレイ）２５７（Ｍ＋１）。
【０４１２】
（実施例１０６）
（［（４−ＢＯＣ−アミノマテオメチル）−３−クロロフェニル］−Ｎ’−Ｎ’’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジンの調製）
【０４１３】
【化１４５】

（４−アミノ−２−クロロ−ベンジル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２５０ｍｇ、０．９７８ｍｍｏｌ）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）中のＮ−Ｎ’−ジ−Ｂｏｃ−Ｎ’’−トリフルオロメタンスルホニル−グアニジン（３４３ｍｇ、０．８７９ｍｍｏｌ）、ＴＦＡ（１０８μＬ、１．２８ｍｍｏｌ）の攪拌混合物に加えた。この混合物を２４時間攪拌した。この混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）で希釈し、ＨＣｌ（１Ｍ、２０ｍＬ）、ブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥した。溶媒を真空下で除去し、固体を得た。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９９：１）によって、表題化合物に対応する油状物（１５０ｍｇ、３４％）を得た。
【０４１４】
（実施例１０７）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニン−４−グアニジノ−２−クロロベンジルアミドの調製）
【０４１５】
【化１４６】

ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＴＦＡ（１：１、２ｍＬ）の混合物中の［（４−ＢＯＣ−アミノマテオメチル）−３−クロロフェニル］−Ｎ’−Ｎ’’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジン（１００ｍｇ、０．２０１ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で９０分間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、透明な油状物を得、これをさらに精製することなく、次の合成工程に使用した。
【０４１６】
油状物（前の工程から）を、アセトニトリル（５．０ｍＬ）中のベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート（６９ｍｇ、０．２０９ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１５７ｍｇ、０．４１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（５７ｍｇ、０．４１８ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（１４５μＬ、０．８３６ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加えた。この混合物を室温で一晩攪拌した。ＨＰＬＣ精製（ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）によって、表題化合物を綿状白色固体（２５ｍｇ、２４％）、ＭＳ（エレクトロスプレイ）５１１（Ｍ＋１）として得た。
【０４１７】
（実施例１０８）
（（６−アミノ−ピリジン−３−イルメチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
【０４１８】
【化１４７】

ＴＨＦ（１Ｍ、４０ｍＬ）中のＢＨ_３の一部を、氷浴中で冷却しながら、ＴＨＦ（５ｍＬ）中の４−アミノ−２−クロロ−５−ベンゾニトリル（２．０ｇ、１４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、１０分間にわたって滴下した。室温まで加温して得られた黄色混合物を、２時間攪拌し、０℃でＨＣｌ（６Ｍ、２０ｍＬ）でクエンチした。溶媒を真空下で除去した。残渣をＨ_２Ｏで希釈し、ｐＨをＮａＯＨ（１Ｍ）を使用して約１０に調整した。水層をＣＨ_２Ｃｌ_２（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥した；溶媒を除去し、固体（２．８ｇ、１００％）を得た。
【０４１９】
この固体（２．０ｇ、１３ｍｍｏｌ）を、ＣＨ_３ＣＮ（１０ｍＬ）中のＢＯＣ−ＯＮ（３．４ｍｇ、１４ｍｍｏｌ）の均一混合物に加え、混合物を室温で一晩攪拌した。この混合物をＮａＨＣＯ_３水溶液で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａＳＯ_４で乾燥した。溶媒を真空下で除去し、無色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９９：１）によって、表題化合物を、静置の際に固化した油状物として得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）２２６（Ｍ＋１）。
【０４２０】
（実施例１０９）
（［（３−ＢＯＣ−アミノマテオメチル）−ピリジニル］−Ｎ’−Ｎ’’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジンの調製）
【０４２１】
【化１４８】

（６−アミノ−ピリジン−３−イルメチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４００ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）の一部を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）中のＮ−Ｎ’−ジ−Ｂｏｃ−Ｎ’’−トリフルオロメタンスルホニル−グアニジン（７６５ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（３８５ｍＬ、２．６７ｍｍｏｌ）の攪拌混合物に加えた。得られた混合物を２４時間攪拌した。この混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）で希釈し、ＨＣｌ（１Ｍ、２０ｍＬ）、ブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥した。溶媒を真空下で除去し、固体を得た。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９９：１）によって、表題化合物に対応する油状物を得た。ＭＳ（エレクトロスプレイ）４６６（Ｍ＋１）。
【０４２２】
（実施例１１０）
（ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニン−４−グアニジノ−（２−ピリジニル）メチルアミド）
【０４２３】
【化１４９】

ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＴＦＡ（１：１、２ｍＬ）の混合物中の［（３−ＢＯＣ−アミノマテオメチル）−ピリジニル］−Ｎ’−Ｎ’’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グアニジン（１００ｍｇ、０．２１５ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で９分間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、透明な油状物を得た。この油状物を、アセトニトリル（１．０ｍＬ）中のベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート（６３ｍｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１４７ｍｇ、０．３８７ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（５２ｍｇ、０．３８７ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（１３５μＬ、０．７７４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加えた。この混合物を室温で一晩攪拌した。ＨＰＬＣ精製（ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）によって、表題化合物として、泡状白色固体（１５ｍｇ、１６％）を得た。ＭＳ（エレクトロスプレイ）４７８（Ｍ＋１）。
【０４２４】
（実施例Ａ）
（特異性決定のためのインビトロ酵素アッセイ）
本発明の化合物が、ウロキナーゼ触媒性活性の選択的インヒビターとして働く能力を、この酵素の活性を５０％まで阻害した試験化合物の濃度（ＩＣ_５０）を決定することによって、およびこの値を以下の関連のセリンプロテアーゼの全てまたはいくつかについて決定された値と比較することによって、評価した：組換え組織プラスミノゲン活性化因子（ｒｔ−ＰＡ）、プラスミン、活性化プロテインＣ、キモトリプシン、第Ｘａ因子、トロンビンおよびトリプシン。
【０４２５】
全てのアッセイについて用いた緩衝液は、ＨＢＳＡ（１０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．１％ウシ血清アルブミン）であった。
【０４２６】
ＩＣ_５０決定のためのアッセイは、コーニング（Ｃｏｒｎｉｎｇ）マイクロタイタープレートの適切なウェルにおいて以下を合わせることによって実施した：５０μｌのＨＢＳＡ、ＨＢＳＡ中で希釈した特定の濃度（広範な濃度範囲をカバーする）の５０μｌの試験化合物（またはＶ_０（非阻害速度）測定についてはＨＢＳＡ単独）、およびＨＢＳＡ中で希釈した５０μｌの酵素。環境温度での３０分間のインキュベーション後、以下で特定した濃度で５０μｌの基質をこのウェルに添加し、２００μｌの最終容量（約４倍Ｋｍ）を得た。発色性基質加水分解の最初の速度を、テルモＭａｘ（登録商標）カイネティックマイクロプレートリーダーを用いて４０５ｎｍでの吸収の変化によって５分間の間隔にわたって測定し、ここで添加した基質の５％未満を利用した。加水分解の最初の速度における５０％の低下を起こした添加したインヒビターの濃度をＩＣ_５０値と規定した。Ｋｉは、ＩＣ_５０値から算出し得る。
【０４２７】
（ウロキナーゼアッセイ）
ＤｉａＰｈａｒｍａ　Ｇｒｏｕｐ　Ｉｎｃ．から入手した、発色性基質１５０ｍＭ　Ｓ−２４４４（Ｌ−ピログルタミル−グリシル−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリン塩酸塩）を用いて、ウロキナーゼ触媒活性を決定した。Ａｂｂｏｔｔ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓにより製造された、ウロキナーゼ（Ａｂｂｏｋｉｎａｅ）を、Ｐｒｉｏｒｉｔｙ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから入手し、使用の前にＨＢＳＡアッセイ緩衝液中で７５０ｐＭに希釈した。このアッセイ緩衝液は、０．１％ＢＳＡを含有するＨＢＳ（１０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ７．４）であった。ＩＣ_５０値を用いてＫｉを算出した。
【０４２８】
（トロンビン（ｆＩＩａ）アッセイ）
発色性基質であるＰｅｆａｃｈｒｏｍｅ　ｔ−ＰＡ（Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍ　　Ｌｔｄ．から入手した、ＣＨ_３ＳＯ_２−Ｄ−ヘキサヒドロチロシン−グリシル−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリン）を用いて、酵素活性を決定した。この基質を使用前に、脱イオン水中で再構成した。精製したヒトαトロンビンは、Ｅｎｚｙｍｅ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．から入手した。全てのアッセイについて用いた緩衝液は、ＨＢＳＡ（１０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１５０ｍＭ塩化ナトリウム、０．１％ウシ血清アルブミン）であった。
【０４２９】
ＩＣ_５０決定は、適切なウェルにおいてＨＢＳＡ（５０μｌ）、α−トロンビン（５０μｌ）（最終酵素濃度が０．５ｎＭである）およびインヒビター（５０μｌ）（広範な濃度範囲をカバーする）を合わせ、そして基質であるＰｅｆａｃｈｒｏｍｅ−ｔ−ＰＡ（５０μｌ）（最終基質濃度が２５０μＭであり、約５倍Ｋｍ）の添加の前に、室温で３０分間インキュベートすることによって行った。Ｐｅｆａｃｈｒｏｍｅ　ｔ−ＰＡ加水分解の最初の速度を、テルモＭａｘ（登録商標）カイネティックマイクロプレートリーダーを用いて４０５ｎｍでの吸収の変化によって５分間の間隔にわたって測定し、ここで添加した基質の５％未満を利用した。加水分解の最初の速度における５０％の低下を起こした添加したインヒビターの濃度をＩＣ_５０値と規定した。
【０４３０】
（第Ｘａ因子）
第Ｘａ因子の触媒活性を、ＤｉａＰｈａｒｍａ　Ｇｒｏｕｐ（Ｆｒａｎｋｌｉｎ，ＯＨ）から入手した、発色性基質Ｓ−２７６５（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−アルギニン−Ｌ−グリシン−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリン）を用いて、決定した。全ての基質は、使用前に脱イオン水で再構成した。Ｓ−２７６５の最終濃度は２５０μＭであった（約５倍Ｋｍ）。精製したヒト第Ｘ因子を、Ｅｎｚｙｍｅ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ（Ｓｏｕｔｈ　Ｂｅｎｄ，ＩＮ）から入手し、そして第Ｘａ因子（ＦＸａ）を、記載（Ｂｏｃｋ，Ｐ．Ｅ．，Ｃｒａｉｇ、Ｐ．Ａ．，Ｏｌｓｏｎ，Ｓ．Ｔ．，およびＳｉｎｇｈ，Ｐ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２７３：３７５〜３８８（１９８９））のとおり、第Ｘ因子を活性化して調製した。この酵素をアッセイ前にＨＢＳＡ中に希釈して、最終濃度０．２５ｎＭとした。
【０４３１】
（組換え組織プラスミノーゲン活性化因子（ｒｔ−ＰＡ）アッセイ）
ｒｔ−ＰＡ触媒性活性を、基質として、Ｐｅｆａｃｈｒｏｍｅ　ｔ−ＰＡ（Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍａ　Ｌｔｄ．から入手した、ＣＨ_３ＳＯ_２−Ｄ−ヘキサヒドロチロシン−グリシル−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリン）を用いて決定した。この基質は、脱イオン水中に作製し、続いてアッセイの前にＨＢＳＡ中で希釈し、最終濃度５００μＭ（約３倍Ｋｍ）とした。ヒトｒｔ−ＰＡ（Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標））をＧｅｎｅｎｔｅｃｈ　Ｉｎｃ．から入手した。酵素を脱イオン水中で再構成し、アッセイの前にＨＢＳＡ中に希釈して、最終濃度を１．０ｎＭとした。
【０４３２】
（プラスミンアッセイ）
プラスミン触媒活性を、ＤｉａＰｈａｒｍａ　Ｇｒｏｕｐから入手した、発色性基質であるＳ−２３６６［Ｌ−ピログルタミル−Ｌ−プロリル−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリン塩酸塩］を用いて決定した。この基質は、脱イオン水中で作製し、続いてアッセイ前にＨＢＳＡ中で希釈して、最終濃度３００μＭとした（約２．５倍Ｋｍ）。精製したヒトプラスミンをＥｎｚｙｍｅ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃから入手した。この酵素をアッセイ前に、ＨＢＳＡ中に希釈して、最終濃度を１．０ｎＭとした。
【０４３３】
（活性化プロテインＣ（ａＰＣ）アッセイ）
発色性基質である、Ｐｅｆａｃｈｒｏｍｅ　ＰＣ（Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍａ　Ｌｔｄ．から入手した、δ−カルボベンジルオキシＤ−リジン−Ｌプロリル−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリンジヒドロクロライド）を用いて、ａＰＣ触媒活性を決定した。この基質を、脱イオン水中に作製し、続いてアッセイの前にＨＢＳＡ中に希釈して、最終濃度４００μＭとした（約３倍Ｋｍ）。精製したヒトａＰＣは、Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃから入手した。この酵素をアッセイ前に、ＨＢＳＡ中に希釈して、最終濃度１．０ｎＭとした。
【０４３４】
（キモトリプシンアッセイ）
ＤｉａＰｈａｒｍａ　Ｇｒｏｕｐから入手した、発色性基質である、Ｓ−２５８６（メトキシ−スクシニル−Ｌ−アルギニン−Ｌ−プロリル−Ｌ−チロシル−ｐ−ニトロアニリド）を用いて、キモトリプシン触媒性活性を決定した。この基質を、脱イオン水中に作製し、続いてアッセイの前にＨＢＳＡ中に希釈して、最終濃度１００μＭとした（約９倍Ｋｍ）。精製した（３×−結晶化；ＣＤＩ）ウシ膵臓αキモトリプシンをＷｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｒｐから入手した。この酵素を脱イオン水中に再構成して、アッセイ前に、ＨＢＳＡ中に希釈し、最終濃度０．５ｎＭとした。
【０４３５】
（トリプシンアッセイ）
ＤｉａＰｈａｒｍａ　Ｇｒｏｕｐから入手した、発色性基質である、Ｓ−２２２２（ベンゾイル−Ｌ−イソロイシン−Ｌ−グルタミン酸−［γ−メチルエステル］−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリド）を用いて、トリプシン触媒性活性を決定した。この基質を、脱イオン水中に作製し、続いてアッセイの前にＨＢＳＡ中に希釈して、最終濃度２５０μＭとした（約４倍Ｋｍ）。精製した（３×−結晶化；ＴＲＬ３）ウシ膵臓αトリプシンをＷｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｒｐから入手した。この酵素を脱イオン水中に再構成して、アッセイ前に、ＨＢＳＡ中に希釈し、最終濃度０．５ｎＭとした。
【０４３６】
（表ＩＡおよびＩＢ）
表ＩＡおよびＩＢは、他のセリンプロテアーゼに比較してウロキナーゼの阻害に関して高い程度の特異性を示す、本発明の化合物について上記に列挙した特定の酵素についてのＫ_ｉ値またはＩＣ_５０値を示している。
【０４３７】
【表２】

【０４３８】
【表３】

（実施例Ｂ）
（インビボでの新脈管形成のインヒビターとしての試験化合物の評価）
標準的な新脈管形成アッセイである、ニワトリＣＡＭ（ニワトリ胚絨毛尿膜）モデルを用いて、試験化合物が新脈管形成を阻害する能力を評価する。このモデルは、新しい血管の形成に影響する試験化合物の活性を評価するための確立されたモデルである。
【０４３９】
塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）の０．５μｇ／ｍｌ溶液で飽和したフィルターディスクを、１０日齢のニワトリ胚のＣＡＭ上に置き、新脈管形成を誘導する。２４時間後、０〜１μｇの試験化合物（総容量１００μｌの滅菌ＰＢＳ中に含有）を、胚中に静脈注射する。約４８時間後、この胚を屠殺して、フィルターディスクおよび周囲のＣＡＭ組織を分析用に切り出す。フィルターの閉じ込めた領域内の血管分枝ポイントの数をカウントすることによって新脈管形成を定量する［Ｂｒｏｏｋｓ，Ｐ．Ｃ．ら、Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　１２０：２５７〜２６９（１９９９）］。脈管形成係数は、実験群と未処理のコントロール胚との間の血管分枝ポイントの数の差異として規定する。各実験群は、８〜１０のニワトリ胚を含む。
【０４４０】
（実施例Ｃ）
（ニワトリ胚モデルにおけるヒト腫瘍細胞の増殖を阻害する試験化合物の評価）
ニワトリ胚モデルを用いてインビボでヒト腫瘍細胞の増殖を阻害する試験化合物の活性を評価する。ヒト線維肉腫細胞（ＨＴ　１０８０）の単一細胞懸濁液（総容量４０μｌ中に４×１０^５細胞を含有する）を、Ｂｒｏｏｋｓら（「Ｂｒｏｏｋｓ，Ｐ．Ｃ．ら、「Ｉｎｔｅｇｒｉｎ　α_ｖβ_３　Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ　Ｐｒｏｍｏｔｅ　Ｔｕｍｏｒ　Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｂｙ　Ｉｎｄｕｃｉｎｇ　Ａｐｏｔｏｓｉｓ　ｏｆ　Ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ　Ｂｌｏｏｄ　Ｖｅｓｓｅｌｓ」Ｃｅｌｌ　７９：１１５７〜１１６４（１９９４）」）によって記載されるように、１０日齢のニワトリ胚に適用する。２４時間後、０〜１０μｇの試験化合物を胚に静脈注射する。化合物のこの単回投与後、コントロール胚および処理胚を合計７日間インキュベートし、次いで屠殺する。腫瘍を切り出し、周囲のＣＡＭ組織を取り除いて、秤量する。本実施例において切り出した腫瘍の湿重量を表にする。各実験群には、ニワトリ胚を１０〜１２含む。
【図面の簡単な説明】
【図１】
図１は、本発明の化合物を合成する際に有用な中間体の溶液相合成についての反応スキームを示す。化合物１−１は、Ｎ−α−Ｃｂｚ−Ｄ−セリン（Ｏ−ｔ−ブチル）であり、化合物１−２は、アラニンメチルエステル塩酸塩である。この図において、「ｉ」〜「ｉｖ」は、以下のように定義される：ｉ）ＥＤＣ、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールおよびアセトニトリル、ジイソプロピルエチルアミンにより、Ｃｂｚ−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｏ−ｔ−ブチル）−Ａｌａ−ＯＭｅを生じる；（ｉｉ）エタノール／酢酸／水（４：１：１）、１０％炭素担持Ｐｄ、４５ｐｓｉのＨ_２で２時間、後処理の後収率９５％；ｉｉｉ）アセトニトリル、塩化ベンゼンスルホニル、ジイソプロピルエチルアミン、後処理の後収率４３％；およびｉｖ）メタノール、１．０Ｍ水酸化リチウム、ＤＯＷＥＸイオン交換樹脂上での酸性化、メタノール／水で溶出、後処理の後収率９５％。実施例６０〜６２もまた参照のこと。
【図２】
図２は、本発明の化合物の調製に有用な中間体を調製するために使用され得る溶液相合成経路についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｉｉｉ」は、以下のように定義される：ｉ）イソブチルクロロホルメート、炭酸ナトリウム、水、後処理の後収率９９．５％；ｉｉ）アラニンｔ−ブチルエステル塩酸塩、ＥＤＣ、およびアセトニトリル中のヒドロキシベンゾトリアゾール；ジイソプロピルエチルアミン、後処理の後定量的収率；およびｉｉｉ）ＴＦＡ、ＤＣＭ、後処理の後定量的収率。実施例７４〜７６もまた参照のこと。
【図３】
図３は、本発明の化合物の調製において使用され得る中間体の合成についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｘｉ」は、以下のように規定される：ｉ）ＣｕＣＮ、ＤＭＦ、還流（４時間）；ｉｉ）ＥｔＯＡｃ、１０％ＮａＣＮ水溶液；ｉｉｉ）Ｎ−ブロモスクシンイミド、２，２’−アゾ−イソブチロニトリル、ＣＣｌ_４、還流（５時間）；ｉｖ）ＮａＮ_３、ＤＭＦ；ｖ）トリフェニルホスフィン、ＴＨＦ、水、０℃、攪拌（１０時間）；ｖｉ）Ｋ_２ＣＯ_３、Ｂｏｃ_２Ｏ、水、ジオキサン；ｖｉｉ）ヒドロキシルアミンＨＣｌ、ＮＭＭ、ＭｅＯＨ；ｖｉｉｉ）１０％Ｐｄ／Ｃ、ＭｅＯＨ、４５ｐｓｉ　Ｈ_２（１０時間）；ｉｘ）ジオキサン中４Ｍ　ＨＣｌ；ｘ）ＤＭＦ中ＣｓＣＯ_３、ヨードプロパン；およびｘｉ）４Ｍ　ＨＣｌ、ジオキサン、３時間、室温。
【図４】
図４は、本発明の化合物の調製に使用され得る中間体の合成についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｉｖ」は、以下のように規定される：ｉ）ＮａＮ_３、ＤＭＦ；ｉｉ）１０％Ｐｄ／Ｃ、ＥｔＯＡｃ、４５ｐｓｉ　Ｈ_２（１１時間）；ｉｉｉ）ヒドロキシルアミンＨＣｌ、ＮＭＭ、ＭｅＯＨ；およびｉｖ）１０％Ｐｄ／Ｃ、ＭｅＯＨ、４５ｐｓｉ　Ｈ_２（４８時間）。
【図５】
図５は、本発明の化合物の調製において使用され得る中間体の合成についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｖｉｉ」は、以下のように規定される：ｉ）Ｃｕ（Ｉ）ＣＮ、ＤＭＦ；ｉｉ）ＮＢＳ、過酸化ベンゾイル、ＣＣｌ_４、８０℃（１４時間）；ｉｉｉ）ＮａＮ_３、ＤＭＦ、攪拌（２０時間）；ｉｖ）ヒドロキシルアミンＨＣｌ、ＮＭＭ、ＭｅＯＨ、攪拌（３日間）；ｖ）ＣｓＣＯ_３、ヨードプロパン、ＤＭＦ、５０℃（２０時間）；ｖｉ）トリフェニルホスフィン、ＴＨＦ、攪拌（２０時間）；およびｖｉｉ）ｐＨ１４まで３Ｍ　ＮａＯＨ。
【図６】
図６は、Ｒ_２が−ＣＨ_２ＯＡ_１であり、そしてＡ_１が−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_６である場合の本発明の化合物の合成についての反応スキームを示し、これを中間体として使用する（実施例９の化合物）。この図において、「ｉ」は：ｉ）ピリジン、Ｒ_６ＣＯＣｌと規定される。
【図７】
図７は、本発明の特定の化合物の合成についての反応スキームを示す。この図において，「ｉ」〜「ｖｉ」は、以下のように規定される：ｉ）無水トリフルオロ酢酸、０℃、一晩攪拌；氷、ＣＨ_２Ｃ１_２、Ｎａ_２ＳＯ_４；ｉｉ）Ｐｄ／Ｃ（１０％）、ＭｅＯＨ中（一晩）；ｉｉｉ）Ｎ−Ｎ’−ジ−Ｂｏｃ−Ｎ’’−トリフルオロメタンスルホニル−グアニジン、ＴＥＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_２、６時間；ＨＣ１、ブライン、Ｎａ_２ＳＯ_２；カラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ　９９：１）；ｉｖ）炭酸カリウム、Ｈ_２Ｏ／ＭｅＯＨ（２：１５）、一晩；ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（９：１）、Ｎａ_２ＳＯ_４；ｖ）ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート、ＨＡＴＵ、ＨＯＡＴ、ＤＩＥＡ，、アセトニトリル、一晩；ＥｔＯＡｃ、ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ_３、ブライン；ＨＰＬＣ（ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）；ｖｉ）ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＴＦＡ（１：１）、９０分；ＨＰＬＣ（ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）。
【図８】
図８は、本発明の特定の化合物合成についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｖ」は以下のように規定される：ｉ）無水トリフルオロ酢酸、一晩攪拌；氷、ＣＨ_２Ｃｌ_２、Ｎａ_２ＳＯ_４；ｉｉ）Ｐｄ／Ｃ（１０％）ＭｅＯＨ中（一晩）；ｉｉｉ）Ｎ−Ｎ’−Ｂｏｃ−Ｎ’’−トリフルオロメタンスルホニル−グアニジン、ＴＥＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_２、２４時間；ＨＣｌ、ブライン、Ｎａ_２ＳＯ_４；カラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ　９８：２）；ｉｖ）炭酸カリウム、Ｈ_２Ｏ／ＭｅＯＨ（１：１）、一晩；Ｈ_２Ｏ、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（９：１）、Ｎａ_２ＳＯ_４；およびｖ）ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート、ＨＡＴＵ、ＨＯＡＴ、ＤＩＥＡ、アセトニトリル中、室温、一晩；ＥｔＯＡｃ、ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ_３、ブライン；ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＴＦＡ（１：１）、室温、２時間、ＨＰＬＣ（ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ、０．１％ＴＦＡ）。
【図９】
図９は、本発明の化合物の合成についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｖｉ」は、以下のように規定される：ｉ）無水トリフルオロ酢酸、０℃、１時間；ｉｉ）ＫＮＯ_３；−２０℃、一晩攪拌；ＣＨ_２Ｃｌ_２、Ｎａ_２ＳＯ_４、カラムクロマトグラフィー；ｉｉｉ）ＭｅＯＨ中ＨＣｌ、０℃、ＳｎＣ１_２、３０分攪拌、ＮａＨＣＯ_３、ＣＨ_２Ｃｌ_２、Ｎａ_２ＳＯ_４；ｉｖ）Ｎ_１Ｎ’−ジ−Ｂｏｃ−Ｎ’’−トリフルオロメタンスルホニル−グアニジン、ＴＥＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_３、攪拌２４時間；ＨＣｌ（１Ｍ）、ブライン、Ｎａ_２ＳＯ_４、カラムクロマトグラフィー；ｖ）Ｋ_２ＣＯ_３、Ｈ_２Ｏ／ＭｅＯＨ（１：１）、一晩攪拌；Ｈ_２Ｏ、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（９５：５）、Ｎａ_２ＳＯ_４；およびｖｉ）ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート、ＨＡＴＵ、ＨＯＡＴ、ＤＩＥＡ、ＡｃＮ、一晩攪拌；ＥｔＯＡｃ、ＨＣｌ（１Ｍ）、ＮａＨＣＯ_３水溶液、ブライン、Ｎａ_２ＳＯ_４；ＨＰＬＣ。
【図１０Ａ】
図１０Ａは、本発明の特定の好ましい化合物を示す。
【図１０Ｂ】
図１０Ｂは、本発明の特定の好ましい化合物を示す。
【図１０Ｃ】
図１０Ｃは、本発明の特定の好ましい化合物を示す。
【図１０Ｄ】
図１０Ｄは、本発明の特定の好ましい化合物を示す。
【図１０Ｅ】
図１０Ｅは、本発明の特定の好ましい化合物を示す。
【図１０Ｆ】
図１０Ｆは、本発明の特定の好ましい化合物を示す。
【図１１】
図１１は、本発明の化合物の合成についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｘｉｉ」は、以下のように規定される：ｉ）ＣＣｌ_４、Ｎ−ブロモスクシンイミド；Ｎ_２、ＡＩＢＮ、攪拌、フラッシュクロマトグラフィー；ｉｉ）ＤＭＦ、ＮａＮ_３、一晩攪拌、ジエチルエーテル、水、ブライン、ＭｇＳＯ_４、濾過；（ｉｉｉ）ＭｅＯＨ、ＴＥＡ、６５℃、４時間；ＥｔＯＡｃ、Ｈ_２Ｏ、ブライン、ＭｇＳＯ_４；ｉｖ）ＴＨＦ／水、Ｐｈ_３Ｐ、一晩攪拌；１Ｎ　ＨＣｌ、Ｈ_２Ｏ、ＤＣＭ、ｐＨ約９；ｖ）ジオキサン／水、Ｋ_２ＣＯ_３、Ｂｏｃ_２Ｏ、一晩攪拌；ＥｔＯＡｃ、ＮａＨＣＯ_３水溶液、ブライン、Ｎａ_２ＳＯ_４、フラッシュカラムクロマトグラフィー；ｖｉ）ＤＭＦ、２−ヨードプロパン、ＣｓＣＯ_３；ＥｔＯＡｃ、ＮａＨＣＯ_３水溶液、Ｎａ_２ＳＯ_４、フラッシュカラムクロマトグラフィー；ｖｉｉ）ジオキサン、ジオキサン中４Ｎ　ＨＣｌ、溶媒除去；ｖｉｉｉ）ＡｃＮ、ＤＩＥＡ；Ｂｏｃ−アラニン、ＥＤＣ、ＨＯＢｔ、一晩攪拌；ＥｔＯＡｃ、ＮａＨＣＯ_３水溶液、ブライン、Ｎａ_２ＳＯ_４、フラッシュカラムクロマトグラフィー；ｉｘ）ジオキサン、ジオキサン中４Ｎ　ＨＣｌ、溶媒除去、ｘ）ＡｃＮ、ＤＩＥＡ、ＢｎＳＯ_２−ｄＳｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、ＥＤＣ、ＨＯＢｔ、一晩攪拌；ＥｔＯＡｃ、ＮａＨＣＯ_３水溶液、ブライン、Ｎａ_２ＳＯ_４、ＲＰ−ＨＰＬＣ；ｘｃ）ＤＣＭ、ＴＦＡ；ＲＰ−ＨＰＬＣ；およびｘｉｉ）Ｈ_２Ｏ、ＨＯＡｃ、Ｚｎ粉末；ＲＰ−ＨＰＬＣ。
【図１２】
図１２は、本発明の化合物の合成についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｖｉ」は、以下のように規定される：ｉ）ＥＤＣ、ＨＯＢｔ，、ＤＩＥＡおよびＣＨ_３ＣＮ；ｉｉ）ＴＦＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_２；ｉｉｉ）ＢＮＳＯ_２−ｄＳｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、ＥＤＣ、ＨＯＢｔ、２，４，６−コリジン、ＣＨ_３ＣＮ；ｉｖ）ヒドロキシルアミン塩酸塩；ｖ）Ｚｎ／酢酸；およびｖｉ）ＴＦＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_２。
【図１３Ａ】
図１３Ａは、本発明の特定の好ましい化合物を示す。
【図１３Ｂ】
図１３Ｂは、本発明の特定の好ましい化合物を示す。
【図１３Ｃ】．
図１３Ｃは、本発明の特定の好ましい化合物を示す。
【図１４】
図１４は、本発明の化合物の合成についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｖ」は、以下のように規定される：ｉ）ＢＨ_３、ＴＨＦ、収率７８％；ｉｉ）ＢＯＣ−ＯＮ、収率９５％；ｉｉｉ）Ｐｄ／Ｃ；Ｈ_２、収率８１％；ｉｖ）ＣＮＢｒ、ＮａＨＣＯ_３、ＣＨ_３ＣＮ、Ｈ_２Ｏ；ｖ）ＴＦＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_２；およびｖｉ）ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート、ＨＡＴＵ、ＨＯＡＴ、ＤＩＥＡ、ＣＨ_３ＣＮ。
【図１５】
図１５は、本発明の化合物の合成についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｉｉｉ」は、以下のように規定される：ｉ）塩化チオニル、ＭｅＯＨ；ｉｉ）Ｎａ／Ｈｇ（５％）、ＣＮＮＨ_２、還流、収率６２％；およびｉｉｉ）ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート、ＨＡＴＵ、ＨＯＡＴ、ＤＩＥＡ、ＣＨ_３ＣＮ。
【図１６】
図１６は、本発明の化合物の合成についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｖｉ」は、以下のように規定される：ｉ）ＢＨ_３、ＴＨＦ；ｉｉ）ｃｌ／ジオキサン、定量的収率；ｉｉｉ）ＢＯＣ−ＯＮ、ＴＨＦ；ｉｖ）ＴＥＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_２；ｖ）ＴＦＡ／ＣＨ_２Ｃｌ_２；およびｖｉ）ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート、ＨＡＴＵ、ＨＯＡＴ、ＤＩＥＡ、ＣＨ_３ＣＮ。
【図１７】
図１７は、本発明の化合物の合成についての反応スキームを示す。この図において、「ｉ」〜「ｖｉ」は、以下のように規定される：ｉ）ＢＨ_３、ＴＨＦ；ｉｉ）ＨＣｌ、定量的収率；ｉｉｉ）ＢＯＣ−ＯＮ、ＴＨＦ；ｉｖ）ＴＥＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_２；Ｖ）ＴＦＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_２；およびｖｉ）ベンジルスルホニル−Ｄ−セリン−Ｌ−アラニンカルボキシレート、ＨＡＴＵ、ＨＯＡＴ、ＤＩＥＡ、ＣＨ_３ＣＮ。[0001]
(Cross-reference of related applications)
This application is a continuation-in-part of U.S. Patent Application No. 09 / 733,645 (filed on December 7, 2000), which is a continuation of U.S. Application No. 09 / 637,483 (filed on August 11, 2000). (These disclosures are incorporated herein by reference).
[0002]
(Field of the Invention)
Urokinase is an enzyme involved in tumor cell metastasis, neovascularization, and other activities. One object of the present invention is to provide novel compounds that are active as urokinase inhibitors that can be used to inhibit the activity of urokinase and thereby attenuate its deleterious effects. It is another object of the present invention to provide new compounds that inhibit angiogenesis, especially those associated with pathological conditions.
[0003]
(Background and introduction of the invention)
Urinary plasminogen activator (uPA; urokinase) is a serine protease within the trypsin / chymotrypsin family. In its pathological condition, three forms of uPA are seen: single-stranded pro-uPA, double-stranded uPA, and low-molecular-weight uPA (lacking the N-terminal domain). The pro-enzyme, pro-uPA, is converted to u-PA by cleaving the peptide bond at K158-I159. The resulting double-stranded uPA is linked by disulfide bonds and has an M of about 50 kD. _r , And a C-terminal serine proteinase domain.
[0004]
uPA activity is concentrated on the cell surface upon binding to its receptor, uPAR. uPAR is a single-chain glycosylphosphatidylinositol (GPI) -immobilized membrane receptor. The N-terminal 92 amino acids of uPAR play a major role in binding to uPA and pro-uPA. Receptors for uPA are found on T cells, NK cells, monocytes, and neutrophils, as well as on vascular endothelial cells, fibroblasts, smooth muscle cells, keratinocytes, placental trophoblasts, hepatocytes, and a wide variety of tumor cells. Are located in
[0005]
After conversion of pro-uPA to uPA, which occurs primarily with uPAR on the cell surface, uPA activates prosminogen to plasmin. Activation occurs upon cleavage at residue PGR-VV for human plasminogen or residue SGR-IV for bovine plasminogen. Since plasminogen is also present on the cell surface, this activation cascade concentrates u-PA and plasmin activity on the plasma membrane. Plasmin has many roles, including the activity of additional uPA and other enzymes, digestion of fibrin, and digestion of components of the extracellular matrix (ECM). Digestion of the ECM surrounding the tumor removes the ECM as a physical barrier to metastatic cells, and the metastatic cells are then free to leave the primary tumor and invade the second site. For a review of the role of the uPA / uPAR system in cancer metastasis, see "The Urokinase-type Plasminogen Activator System in Cancer Metastasis: A Review", Andreasen et al., Int. J. Canc. 72: 1-22 (1997).
[0006]
The correlation between poor levels of uPA and high rates of metastasis and poor prognosis has been described in certain tumors, particularly breast cancer [Quax et al. Cell Biol. 115: 191-199 (1991); Duffy et al., Cancer Res. 50: 6827-6829 (1990)]. For example, the following tumors showed high levels of uPA and / or uPA activity and high rates of metastasis: lung [Oka et al., Cancer Res. 51: 3522-3525 (1991)], bladder [Hasui et al., Int. J. Cancer 50: 871-873 (1992)], stomach [Nekarda et al., Lancet 343: 117 (1994)], uterine cancer [Kobayashi et al., Cancer. Res. 54: 6539-6548 (1994)], ovaries [Kuhn et al., Gynecol. Oncol. 55: 401-409 (1994)], kidney [Hofman et al., Cancer 78: 487-492 (1996)], brain [Bindahl et al. Neuro-Oncol. 22: 101-110 (1994)], and soft tissue sarcomas [Chong et al., Int. J. Cancer (Pred. Oncol.) 69: 268-272 (1996)]. Overproduction of uPA has been reported to result in increased skeletal metastasis by prostate cancer cells in vivo [Achbarou et al., Cancer Res. 54: 2372-377 (1994)].
[0007]
Inhibition or reduction of uPA activity, or disruption / inhibition of the interaction between uPA and its receptor (uPAR), has been shown to have a positive effect on the maintenance of extracellular matrix and an inhibitory effect on metastasis [Ossowski and Reich Ossowski, Cell 52: 321-328 (1988); Ossowski, J. et al., Cell 35: 611-619 (1983); Cell Biol. 107: 2437-2445 (1988); Wilhelm et al., Clin. Exp. Metastasis 13: 296-302 (1995); Achbarou et al., Cancer Res. 54: 2372-377 (1994); Crowley et al., Proc. Natl. Acad. Sci. ScL USA 90: 5021-5025 (1993); Kook et al., EMBO J. Clin. 13: 3983-3991 (1994)]. The results of such experimental studies suggest that uPA-catalyzed plasminogen activity is rate-limiting for tumor progression, local tumor invasion and / or distant metastasis formation. [Andreasen et al., Int. J. Canc. 72: 1-22 (1997)].
[0008]
The effects of the uPA system on cell migration and invasion are thought to be due both to the photolytic effect of plasmin-mediated degradation of the extracellular matrix and to the more direct interaction of the uPA receptor with components of the extracellular matrix. Degradation of the extracellular matrix allows metastatic cells to enter the matrix, while the interaction between the uPA receptor and the matrix itself assists the cells in its migration. Localization of the uPA / plasmin system on the cell surface or on the leading edge of metastatic cells is consistent with the putative role of uPA in metastasis [Plesner et al., Stem Cells 15: 398-408 (1997). )].
[0009]
The interaction of uPA with vitronectin, a component of the extracellular matrix, mediates cell adhesion and can be enhanced if uPAR is bound by uPA. Cell surface adhesion molecules (integrins) also appear to be involved in this adhesion function (particularly β-1 and β-2 integrins) [Paysant et al., Br. J. Haematol. 100: 45-51 (1998); Simon et al., Blood 88: 3185-3194 (1996)]. CD11b / CD18 integrins can associate with the uPA-uPAR complex and promote adhesion of cells bearing these receptors (eg, neutrophils, leukocytes).
[0010]
The uPA / uPAR system is also involved in establishing new vasculature, ie, neovascularization.
[0011]
Establishment of new vasculature is needed to sustain primary and metastatic tumor growth. Pathological neovascularization also includes retinal disease, rubeosis iritis, proliferative vitreoretinopathy inflammatory disease, diabetic retinopathy, chronic uveitis, Fuchs iris heterochromic iridocyclitis, neovascular glaucoma, Characterization of corneal or ocular nerve neovascularization, vascular disease, pterygium, glaucoma surgery bleb failure, hyperkeratosis, keloids and polyps formation (see EP 451,130). . Unwanted angiogenesis can also occur in the following conditions, or can be the result of the following activities: macular degradation, retinopathy of prematurity, corneal transplant rejection, post-lenopathyosis, pandemic keratoconjunctivitis, vitamin A Deficiency, contact lens overwear, atrophic keratoconjunctivitis, upper limbal keratitis, pterygium keratoconjunctivitis, sogren's disease, rosacea acne, fryctenulosis, syphilis, leprosy Non-Mycobacteria infection, lipid degeneration, chemical burn, bacterial or fungal ulcer, herpes simplex or shingles infection, protozoal infection, kaposi's sarcoma, Mohren's ulcer, terien marginal degeneration, marginal keratolysis, trauma, chronic joint Rheumatism, systemic lupus, polyarteritis, Wegener sarcoidosis, Adenitis, Stevens-Johnson disease, radial keratotomy, sickle cell anemia, sarcoid, fibropseudoxanthoma, Paget disease, venous or arterial occlusion, carotid occlusive disease, chronic uveitis, chronic choriotitis , Lyme disease, Eales disease, Bechets disease, Myopia, congenital structural deficiency of the optic nerve head (Optic pit), Stargardt's disease, Flatitis, Chronic retinal detachment, Hyperviscosity syndrome, Toxoplasmosis , Laser complications, abnormal growth of fibrous muscular tissue, hemangiomas, Ausler-Weber-Randue, solid tumors, blood borne tumors, AIDS, ocular neovascular disease ), Deformability Node disease, chronic inflammation, Crohn's disease, ulcerative colitis, rhabdomyosarcoma tumor, retinoblastoma tumor, Ewing sarcoma tumor, neuroblastoma tumor, osteosarcoma tumor, leukemia, psoriasis, atherosclerosis Disease, pemphigoid [described in US Pat. No. 5,712,291].
[0012]
Antagonists of uPA / uPAR binding (the EGF-like domain of uPA fused to IgG Fc) were stated to inhibit neovascularization and proliferation of murine B16 melanoma [Min et al., Cancer Res. 56: 2428-2433 (1996)]. The correlation stated between microvascular density, vascular invasion and uPA levels in breast cancer is consistent with this finding [Hildenbrand et al., Brit. J. Cancer 72: 818-823 (1995)]. The known uPA inhibitor amiloride has also been described to inhibit various neovascular pathologies [Glaser et al., EP 451,130; Avery et al., Arch. Ophthamol. 108: 1474-1476 (1990)].
[0013]
There are two major physiological inhibitors of uPA, PAI-1 and PAI-2, which are members of the serpin family of proteinase inhibitors. The binding of serpins to their cognate proteases involves a number of interactions between the amino acids of each protein, resulting in a separin-reactive loop (Ser-Ala-Arg-Met-Ala (SEQ ID NO: 1 for PAI-1), 2 includes those in Thr-Gly-Arg-Thr-Gly (SEQ ID NO: 2). Introduction of exogenous PAI-2 into laboratory animals has been reported to inhibit the rate of lung metastasis [Evans and Lin, Amer. Surg. 61: 692-697 (1995); Mueller et al., Proc. Natl. Acad. Sci. ScL USA 92: 205-209 (1995)]. The ability of PAI-1 to inhibit metastasis has not yet been consistently demonstrated. The gene for PAI-1 and means for its recombinant expression are disclosed in Loscutoff et al., US Pat. No. 4,952,512. Recombinant and native human PAI-2 are disclosed in Stephens et al., US Pat. No. 5,422,090.
[0014]
The most widely studied uPA inhibitors may be within the class of the inhibitors 4-substituted benzo [b] thiophene-2-carboxamidines, B428 (4-iodo-benzo [b] thiophene-2-carboxamidine) and B623 And its members [Tole et al., Cancer Res. 53: 2555-2559 (1993); Bridges et al., Bioorg. Med. Chem. 1: 403-410 (1993); Bridges et al., U.S. Patent No. 5,340,833]. Infusion of B428 in experimental rats seeded with tumor cells was stated to inhibit uPAR gene expression, reduce primary tumor volume, and reduce metastasis [Xing et al., Cancer Res. 57: 3585-3593 (1997)]. Daily intraperitoneal treatment of tumor-bearing mice with B428 or B623 blocks metastasis to muscle and fat but does not inhibit tumor-induced angiogenesis or reduce the rate of sudden lung metastasis Was. In fact, B623 enhanced the formation of lung metastases (Alonso et al., Breast Cancer Res. Treat. 40: 209-223 (1996)). Infusion of B248 in a syngeneic model of rat prostate cancer also led to a reduction in primary tumor volume and weight, and metastasis [Rabbani et al., Int. J. Cancer 63: 840-845 (1995)].
[0015]
Other known inhibitors of uPA include p-aminobenzamidine, which is a competitive inhibitor of uPA, and amiloride. Both compounds have been shown to reduce tumor size in experimental animals [Jankan et al., Cancer Res. 57: 559-563 (1997); Billstrom et al., Int. J. Cancer 61: 542-547 (1995)]. Recently, epigallo-catechin-3 gallate (EGCG), a polyphenol found in green tea, was reported to bind to uPA and inhibit its activity [Jankun et al., Nature 387: 561 (1997)]. These investigators concluded that EGCG was a weaker inhibitor of uPA than amiloride, but suggested that EGCG could be consumed at much higher doses than amiloride without toxic effects. A competitive inhibitor of uPA, α-N-benzylsulfonyl-p-aminophenylalanine, is disclosed in US Pat. No. 4,165,258 by Pye et al.
[0016]
Other approaches for inhibiting the uPA / uPAR system include the development of bifunctional hybrid molecules consisting of the uPAR-binding domain of uPA and PAI-2, which inhibit uPA and bind uPAR in vitro. [Ballance et al., Eur. J. Biochem. 207: 177-183 (1992)]. Antagonists of uPAR have also been studied [Doyle and Rosenberg, US Pat. No. 5,656,726; Min et al., Cancer Res. 56: 2428-2433 (1996)], antisense oligonucleotides complementary to uPA were similarly studied [Wilhelm et al., Clin. Exp. Metast. 13: 296-302 (1995); Inversen and Scholar, US Patent No. 5,552,390]. Antibodies directed against uPAR and said to inhibit the binding of uPA to UPAR are disclosed by Dano et al. in US Pat. No. 5,519,120. Small molecules that are said to inhibit urokinase, along with various other serine proteases, include those disclosed by Abe et al. In US Pat. Nos. 5,508,385 and 5,153,176, and Takano et al. J. Pharmacol. Exp. Therapeut. 271: 1027-1033 (1994).
[0017]
Compounds that directly inhibit u-PA binding to uPAR have been developed (Crowley et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 5021-5025 (1993); Goodson et al., Proc. Natl. Acad. USA 91: 7129-7133 (1994); Kobayashi et al., Brit. J. Cancer 67: 537-544 (1993), and Int. J. Cancer 57: 727-733 (1994), and J. Biol. Chem. 270: 8361-8366 (1995); Lu et al., FEBS Lett. 356: 56-59 (1994) and FEBS Lett. 380: 21-24 (1996)).
[0018]
In addition, prohepatocyte growth factor (HGF), a cell migration stimulating protein, is a substrate for uPA [Naldinie et al. 11: 4825-4833 (1992)]. Direct cleavage of the 66 kDa extracellular matrix protein and fibronectin by uPA has also been reported, suggesting a more direct role for uPA in promoting cell migration [Quigley et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 84: 2776-2780 (1987)]. Thus, inhibition of uPA can affect these activities as well.
[0019]
(Summary of the Invention)
The present invention relates to novel peptidic non-covalent urokinase inhibitors. This compound has an arginine mimetic at P1. These compounds have activity as potent inhibitors of urokinase, and are therefore useful in reducing their harmful cavitation. The compounds of the present invention are active in inhibiting angiogenesis, especially in inhibiting angiogenesis associated with pathological processes.
[0020]
Accordingly, in one aspect, the invention relates to the following compounds of formula (I) and pharmaceutically acceptable salts thereof:
[0021]
Embedded image

here,
(A) X is -S (O) ₂ -, -N (R ')-S (O) ₂ -,-(C = O)-, -OC (= O)-, -NH-C (= O)-, -P- (O) (R ')-, and a direct bond. Wherein R ′ is independently hydrogen, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms, aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, or aralkyl of about 7 to about 16 carbon atoms, provided that X is -P In the case of (O) (R ')-, R' is not hydrogen;
(B) R ₁ Is selected from the group consisting of:
(1) Unsubstituted or Y ₁ And Y ₂ Alkyl of 1 to about 12 carbon atoms, substituted with one or two substituents selected from the group consisting of:
(2) alkyl of 1 to about 3 carbon atoms substituted with cycloalkyl of about 3 to about 8 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Alkyl substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(3) a cycloalkyl of 3 to about 15 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or has ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A cycloalkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(4) 4 to about 10 ring atom heterocycloalkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1 or 2 and the heterocycloalkyl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A heterocycloalkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(5) 4 to about 10 ring atom heterocyclo having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1, or 2, and the heterocyclo is
[0022]
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And where
[0023]
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Is a 5-7 membered heterocycle having 3-6 ring carbon atoms, wherein V is -CH ₂ -, -O-, -S (= O)-, -S (O) ₂ -Or -S-, wherein the heterocyclo is unsubstituted or has ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heterocyclo, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(6) alkenyl of from 2 to about 6 carbon atoms, unsubstituted or substituted with cycloalkyl of from about 3 to about 8 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or has Y on the ring. ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Alkenyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(7) aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, wherein the aryl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ An aryl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(8) about 5 to about 14 ring atom heteroaryl having a ring atom selected from carbon and a heteroatom, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Heteroaryl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaryl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(9) an aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, wherein the aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the aralkyl is unsubstituted, Or Y on this aryl ring ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Aralkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(10) a heteroaralkyl of about 5 to about 14 ring atoms having a ring atom selected from carbon and a heteroatom, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the heteroaralkyl is unsubstituted on the ring or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaralkyl, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(11) an aralkenyl of about 8 to about 16 carbon atoms, wherein the aralkenyl is unsubstituted or has Y on the aryl ring ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Aralkenyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(12) about 5 to about 14 ring atom heteroaralkenyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; The heteroaralkenyl can be unsubstituted or substituted on this ring carbon with Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaralkenyl, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
[0024]
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(17) a fused carbocyclic alkyl of about 9 to about 15 carbon atoms,
(18) difluoromethyl or perfluoroalkyl of 1 to about 12 carbon atoms,
(19) perfluoroaryl of about 6 to about 14 carbon atoms,
(20) a perfluoroaralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, and
(21) hydrogen when X is a direct bond;
Here, each Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Are independently selected, and
(I) halogen, cyano, nitro, tetrazolyl, guanidino, amidino, methylguanidino, -CF ₃ , -CF ₂ CF ₃ , -CH (CF ₃ ) ₂ , -C (OH) (CF ₃ ) ₂ , -OCF ₃ , -OCF ₂ H, -OCF ₂ CF ₃ , -OC (O) NH ₂ , -OC (O) NHZ ₁ , -OC (O) NZ ₁ Z ₂ , -NHC (O) Z ₁ , -NHC (O) NH ₂ , -NHC (O) NZ ₁ , -NHC (O) NZ ₁ Z ₂ , -C (O) OH, -C (O) OZ ₁ , -C (O) NH ₂ , -C (O) NHZ ₁ , -C (O) NZ ₁ Z ₂ , -P (O) ₃ H ₂ , -P (O) ₃ (Z ₁ ) ₂ , -S (O) ₃ H, -S (O) _m Z ₁ , -Z ₁ , -OZ ₁ , -OH, -NH ₂ , -NHZ ₁ , -NZ ₁ Z ₂ , -C (= NH) NH ₂ , -C (= NOH) NH ₂ , -N-morpholino, and -S (O) _m (CF ₂ ) _q CF ₃ Wherein m is 0, 1 or 2; q is an integer from 0 to 5; ₁ And Z ₂ Is independently alkyl of 1 to about 12 carbon atoms, aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, heteroaryl of about 5 to about 14 ring atoms, aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, and about 5 to about 15 carbon atoms. Selected from the group consisting of heteroaralkyls of about 14 ring atoms, or
(Ii) Y ₁ And Y ₂ Are together -O [C (Z ₃ ) (Z ₄ )] _r O- or -O [C (Z ₃ ) (Z ₄ )] _{r + 1} -Where r is an integer from 1 to 4 and Z ₃ And Z ₄ Is independently hydrogen, alkyl of 1 to about 12 carbon atoms, aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, heteroaryl of about 5 to about 14 ring atoms, aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, and about Selected from the group consisting of heteroaralkyl of 5 to about 14 ring atoms;
(C) R ₂ Is -CH ₃ , -C ₂ H ₅ ,-(CH ₂ ) ₂ OH,-(CH ₂ ) ₂ OA ₁ , -CH (R ₅ ) OH, -CH (R ₅ ) OA ₁ , And -CH ₂ NH-X'-R ₆ Selected from the group consisting of ₁ Is -C (= O) OR ₆ , -C (= O) R ₆ Or -C (= O) NR ₅ R ₆ X ′ is —S (O) ₂ -, -S (O) ₂ -N (R ")-,-(C = O)-, -C (= O) -O-, -C (= O) -NH-, -P (O) (R")-, and a direct bond Wherein R "is hydrogen, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms, aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, or aralkyl of about 7 to about 16 carbon atoms, with the proviso that When X ′ is —P (O) (R ″) —, R ″ is not hydrogen; ₅ Is selected from the group consisting of:
(1) Unsubstituted or Y ₁ And Y ₂ Alkyl of 1 to about 4 carbon atoms, substituted with 1-2 substituents selected from the group consisting of
(2) alkyl of 1 to about 3 carbon atoms substituted with cycloalkyl of 3 to about 6 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or ₁ , Y ₂ , And Y ₃ An alkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(3) a cycloalkyl of 3 to about 6 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or has a Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A cycloalkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(4) 4 to about 6 ring atom heterocycloalkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1 or 2 and the heterocycloalkyl is unsubstituted or Y is ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A heterocycloalkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(5) 4 to about 6 ring atom heterocyclo having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1, or 2, and the heterocyclo is
[0025]
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And where
[0026]
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Is a 5-7 membered heterocycle having 3-6 ring carbon atoms, wherein V is -CH ₂ -, -O-, -S (= O)-, -S (O) ₂ -Or -S-, wherein the heterocyclo is unsubstituted or ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heterocyclo, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(6) alkenyl of from 2 to about 6 carbon atoms, unsubstituted or substituted with cycloalkyl of from about 3 to about 6 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or has Y on the ring. ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Alkenyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(7) phenyl which is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Phenyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(8) about 5 to about 6 ring atom heteroaryl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Heteroaryl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaryl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(9) alkyl of 1 to about 4 carbon atoms substituted with phenyl, wherein the phenyl is unsubstituted or has Y on the phenyl ring ₁ , Y ₂ , And Y ₃ An alkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(10) a heteroaralkyl of about 5 to about 6 ring atoms having a ring atom selected from carbon and a heteroatom, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; The aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the heteroaralkyl is unsubstituted on the ring or Y on the ring. ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaralkyl, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(11) an aralkenyl of about 8 to about 12 carbon atoms, wherein the aralkenyl is unsubstituted or has Y on the aryl ring ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Aralkenyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(12) about 5 to about 6 ring atom heteroaralkenyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; The heteroaralkenyl can be unsubstituted or substituted on this ring carbon with Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaralkenyl, mono-, di-, or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(13) hydrogen; and
R ₆ Is selected from the group consisting of:
(1) Unsubstituted or Y ₁ And Y ₂ Alkyl of 1 to about 12 carbon atoms, substituted with 1-2 substituents selected from the group consisting of:
(2) alkyl of 1 to about 3 carbon atoms substituted with cycloalkyl of 3 to about 8 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or ₁ , Y ₂ , And Y ₃ An alkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(3) a cycloalkyl of 3 to about 15 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or has ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A cycloalkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(4) 4 to about 10 ring atom heterocycloalkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1 or 2 and the heterocycloalkyl is unsubstituted or Y is ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A heterocycloalkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(5) 4 to about 10 ring atom heterocyclo having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1, or 2, and the heterocyclo is
[0027]
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And where
[0028]
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Is a 5-7 membered heterocycle having 3-6 ring carbon atoms, wherein V is -CH ₂ -, -O-, -S (= O)-, -S (O) ₂ -Or -S-, wherein the heterocyclo is unsubstituted or ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heterocyclo, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(6) aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, wherein the aryl is unsubstituted or ₁ , Y ₂ , And Y ₃ An aryl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(7) about 5 to about 14 ring atom heteroaryl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Heteroaryl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaryl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(8) an aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, wherein the aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the aralkyl is unsubstituted, Or Y on this aryl ring ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Aralkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(9) about 5 to about 14 ring atom heteroaralkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; The aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the heteroaralkyl is unsubstituted on the ring or Y on the ring. ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Hetero-aralkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(10) Hydrogen, provided that A ₁ Is -C (= O) OR ₆ If R ₆ Is not hydrogen;
(D) R ₃ Is selected from H or methyl, or R ₃ And R _4a And R _4b Are selected together as described in (f);
(E) (i) R _4a Is the configuration of S, and H, -CH ₂ -S-CH ₃ , -CH ₂ OH, -CH ₂ CN, lower alkyl of 1 to about 3 carbon atoms, -CH ₂ C≡CH, -CH ₂ CH = CH ₂ And -CH = CH ₂ And R is selected from the group consisting of _4b Is hydrogen;
(Ii) R _4a And R _4b Is independently lower alkyl of 1-3 carbon atoms;
(Iii) R _4a And R _4b Are selected together and-(CH ₂ ) _k Wherein k is 5 or 6 to provide spirocycloalkyl; or
(Iv) R ₃ , And R _4a And R _4b Are selected together as described in (f);
(F) Or R ₃ And R _4a Are selected together to be in the S configuration to form prolyl, pipecolyl, azetidine-2-carbonyl, 4-hydroxyprolyl, 3-hydroxyprolyl, 4-aminoprolyl, 4-(-CH ₂ NH ₂ ) -Prolyl, 3,4-methanoprolyl, and 3,4-dehydroprolyl provide a group selected from the group consisting of _4b Is hydrogen;
(G) R ₇ Is hydrogen or alkyl of 1 to about 4 carbon atoms;
(H) E is QT,
Here, (i) Q is -C (R _Thirteen R ₁₄ ) _t -, R ₈ And R ₉ A phenyl, R ₈ Or R ₈ And R ₉ A 5- or 6-membered heterocyclic ring having 1-2 heteroatoms, substituted with ₈ And R ₉ Selected from the group consisting of a 9 or 10 membered heterocyclic ring having 1-2 heteroatoms substituted with a heterocyclic atom selected from nitrogen and sulfur;
(Ii) T is -C (= NR ₁₀ ) NHR ₁₁ , -NH-C (= NR ₁₀ ) NHR ₁₁ , And -NHR _Fifteen Selected from the group consisting of:
Where R ₈ And R ₉ Is independently hydrogen, hydroxy, halogen, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms substituted with alkoxy of 1 to about 4 carbon atoms, alkoxy of 1 to about 6 carbon atoms R, and trifluoromethyl; ₁₀ And R ₁₁ Is independently hydrogen, hydroxy, alkoxy of 1 to about 3 carbon atoms, trihydrocarbylsilyl of 3 to about 16 carbon atoms, alkyl of 1 to about 3 carbon atoms, or —C (＝ O) R ₁₂ Where R ₁₀ And R ₁₁ Are not both hydroxy or both alkoxy; R ₁₂ Is hydrogen, alkyl of 1 to about 6 carbon atoms, alkoxy of 1 to about 6 carbon atoms, or (CF ₂ ) _j CF ₃ Wherein j is 0, 1, 2 or 3; _Thirteen And R ₁₄ R is independently selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl of 1 to about 3 carbon atoms; _Fifteen Is hydrogen, alkyl of 1 to about 6 carbon atoms, and-(CF ₂ ) _h CF ₃ Wherein h is 0, 1, 2, or 3, and t is an integer from 0-6.
[0029]
The compounds of the present invention have a P as shown in Formula Ia below. ₁ , P ₂ , P ₃ And P ₄ It can be divided into parts named:
[0030]
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Where X, R ₁ , R ₂ , R ₃ , R ₄ , R ₇ And E are as defined for formula (I). Thus, the P of the compound of formula (I) ₁ Or the part called P1 is the following part:
[0031]
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P of the compound of formula (I) ₂ Or the part called P2 is the following part:
[0032]
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P of the compound of formula (I) ₃ Or the part called P3 is the following part:
[0033]
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The invention is based, among other factors, on the inventors' discovery that the novel compounds of the invention are active as inhibitors of urokinase. The compounds of the present invention show activity in inhibiting angiogenesis.
[0034]
In another aspect, the invention relates to a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound of the invention and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0035]
In yet another aspect, the invention relates to methods of using the compounds and pharmaceutical compositions of the invention for inhibiting urokinase.
[0036]
(Definition)
In accordance with the present invention and as used herein, the following terms, unless otherwise indicated, are defined to have the following meanings.
[0037]
The term "alkenyl" refers to an unsaturated aliphatic group having at least one double bond.
[0038]
The term "alkyl" refers to saturated aliphatic groups, including straight-chain, branched-chain and cyclic (including polycyclic) groups.
[0039]
The terms “alkoxy” and “alkoxyl” refer to a group having the formula R—O—, where R is an alkyl group.
[0040]
The term "alkoxycarbonyl" refers to -C (O) OR where R is alkyl.
[0041]
The term "aralkenyl" refers to an alkenyl group substituted with an aryl group. Preferably, the alkenyl group has 2 to about 6 carbon atoms.
[0042]
The term "aralkyl" refers to an alkyl group substituted with an aryl group. Suitable aralkyl groups include benzyl, phenethyl, and the like, all of which may be optionally substituted. Preferably, the alkyl group has 1 to about 6 carbon atoms.
[0043]
The term "aryl" refers to an aromatic group having at least one ring having a conjugated pi-electron system, and includes carbocyclic aryl, heterocyclic aryl, and biaryl groups, all of which are required Can be substituted accordingly.
[0044]
The term "aryloxy" refers to a group having the formula RO-, wherein R is an aryl group.
[0045]
The term "aralkoxy" refers to a group having the formula RO-, wherein R is an aralkyl group.
[0046]
The term "amino acid" refers to both the natural and unnatural amino acids of these D and L stereoisomers, if the stereoisomeric forms of D and L are possible in the structure. Analog. Natural amino acids include alanine (Ala), arginine (Arg), asparagine (Asn), aspartic acid (Asp), cysteine (Cys), glutamine (Gln), glutamic acid (Glu), glycine (Gly), and histidine (His). , Isoleucine (Ile), leucine (Leu), lysine (Lys), methionine (Met), phenylalanine (Phe), proline (Pro), serine (Ser), threonine (Thr), tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr) And valine (Val). Unnatural amino acids include, but are not limited to, azetidine carboxylic acid, 2-amino adipic acid, 3-amino adipic acid, β-alanine, amino propionic acid, 2-amino butyric acid, 4-amino Butyric acid, 6-aminocaproic acid, 2-aminoheptanoic acid, 2-aminoisobutyric acid, 3-aminoisobutyric acid, 2-aminopimelic acid, 2,4 diaminoisobutyric acid, demosine, 2,2′-diaminopimelic acid, 2,3 -Diaminopropionic acid, N-ethylglycine, N-ethylasparagine, hydroxylysine, allohydroxylysine, 3-hydroxyproline, 4-hydroxyproline, isodesmosine, alloisoleucine, N-methylglycine, N-methylisoleucine, N-methylba Phosphorus, norvaline, norleucine, ornithine and pipecolic acid. Amino acid analogs include natural and non-natural amino acids, either reversibly or irreversibly chemically blocked or modified at the N-terminal amino group or side group, such as methionine sulfoxide. , Methionine sulfone, S- (carboxymethyl) -cysteine, S- (carboxymethyl) -cysteine sulfoxide and S- (carboxymethyl) -cysteine sulfone.
[0047]
The term "amino acid analog" refers to an amino acid in which either the C-terminal carboxy group, the N-terminal amino group, or a side chain functional group has been chemically modified to another functional group. For example, aspartic acid- (β-methyl ester) is an amino acid analog of aspartic acid; N-ethylglycine is an amino acid analog of glycine; or alanine carboxamide is an amino acid analog of alanine.
[0048]
The term "amino acid residue" refers to a group having the following structure: (1) -C (O) -R-NH-, where R is typically -CH (R ') Wherein R ′ is H or a carbon-containing substituent; or (2)
[0049]
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Wherein p is 1, 2 or 3 and represents an azetidine carboxylic acid residue, a proline residue or a pipecolic acid residue, respectively.
[0050]
"Biaryl" refers to phenyl substituted with a carbocyclic or heterocyclic aryl as defined herein, ortho, meta or para to the point of attachment of the phenyl ring.
[0051]
"Brine" refers to a saturated aqueous solution of sodium chloride.
[0052]
"Carbocyclic aryl" refers to an aromatic group wherein the ring atoms of the aromatic ring are carbon atoms. Carbocyclic aryl groups include monocyclic carbocyclic aryl groups and naphthyl groups, all of which can be optionally substituted. Suitable carbocyclic aryl groups include phenyl and naphthyl. Suitable substituted carbocyclic aryl groups include indene and phenyl substituted with one or two substituents. The substituents are advantageously lower alkyl, hydroxy, lower alkoxy, lower alkoxycarbonyl, halogen, trifluoromethyl, difluoromethyl, nitro, cyano, and the like. Substituted (substituted) naphthyl is defined as Y as defined herein above for formula (I). ₁ , Y ₂ And / or Y ₃ By naphthyl, more preferably 1-naphthyl or 2-naphthyl.
[0053]
“Cycloalkenyl” refers to cyclic alkenyl groups. Suitable cycloalkenyl groups include, for example, cyclopentyl and cyclohexyl.
[0054]
“Cycloalkyl” refers to a cyclic alkyl group having at least one ring, and includes a polycyclic group including a condensed cyclic alkyl group. Suitable cycloalkyl groups include, for example, cyclohexyl, cyclopropyl, cyclopentyl, and cycloheptyl.
[0055]
“Cyclohexylmethyl” refers to CH ₂ Refers to a cyclohexyl group bonded to.
[0056]
"Fused carbocyclic" refers to a polycyclic fused carbocyclic ring having both aromatic and non-aromatic rings. Suitable fused carbocyclic rings include fluorenyl, tetralin, and the like.
[0057]
“Fused carbocyclic alkyl” refers to an alkyl group substituted with a fused carbocyclic ring moiety (preferably a polycyclic fused carbocyclic ring containing both aromatic and non-aromatic rings) Say. Suitable fused carbocyclic alkyl groups include fluorenylmethyl and the like.
[0058]
The term "halogen" refers to fluorine, chlorine, bromine and iodine.
[0059]
"Heteroaralkenyl" refers to an alkenyl group substituted with a heteroaryl and is described in "Handbook of Chemistry and Physics", 49th edition, 1968, R.A. C. Weast, The Chemical Rubber Co. , Cleveland, OH. In particular, Section C, Rules for Naming Organic Compounds, B.C. See Fundamental Heterocyclic Systems. Preferably, the alkenyl group has 2 to about 6 carbon atoms.
[0060]
"Heteroaralkyl" refers to an alkyl group substituted with a heteroaryl, such as picolyl, and is described in "Handbook of Chemistry and Physics", 49th Edition, 1968, R.A. C. Weast, The Chemical Rubber Co. , Cleveland, OH. In particular, Section C, Rules for Naming Organic Compounds, B.C. See Fundamental Heterocyclic Systems. Preferably, the alkyl group has 1 to about 6 carbon atoms.
[0061]
"Heteroaryl" refers to an aromatic group having from 1 to 14 carbon atoms and the remainder of the ring atoms being heteroatoms, and "Handbook of Chemistry and Physics", 49th edition, 1968, R . C. Weast, The Chemical Rubber Co. , Cleveland, OH. In particular, Section C, Rules for Naming Organic Compounds, B.C. See Fundamental Heterocyclic Systems. Suitable heteroatoms include oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1 or 2 and suitable heterocyclic aryls include furanyl, thienyl, pyridyl, pyrrolyl, pyrimidyl, pyrazinyl, imidazolyl and the like.
[0062]
“Heterocyclo” refers to a reduced heterocyclic ring system consisting of carbon, nitrogen, oxygen and / or sulfur atoms and is disclosed in “Handbook of Chemistry and Physics”, 49th ed., 1968, R.A. C. Weast, The Chemical Rubber Co. , Cleveland, OH. In particular, Section C, Rules for Naming Organic Compounds, B.C. See Fundamental Heterocyclic Systems.
[0063]
"Heterocycloalkyl" refers to an alkyl group substituted with a heterocyclo group and is described in "Handbook of Chemistry and Physics", 49th edition, 1968, R.A. C. Weast, The Chemical Rubber Co. , Cleveland, OH. Heterocyclic systems described in. In particular, Section C.I. Rules for Naming Organic Compounds, B.C. See Fundamental Heterocyclic Systems. Preferably, the alkyl group has about 1 to about 6 carbon atoms.
[0064]
The term "lower" as referred to herein in connection with an organic radical or organic group refers to one or more carbon atoms, preferably four or less, and advantageously one or two carbon atoms. Have a radical or group defined. Such radicals or groups may be straight-chain or branched.
[0065]
“Perfluoroalkyl” refers to an alkyl group in which all hydrogens have been replaced by fluorine.
[0066]
“Perfluoroaryl” refers to an aryl group in which all hydrogens have been replaced by fluorine.
[0067]
"Perfluoroarylalkyl" refers to an aralkyl group in which all hydrogens in the aryl moiety have been replaced with fluorine.
[0068]
“Pharmaceutically acceptable salts” include salts of the compounds of the present invention, which are derived from combinations of the compounds of the present invention with organic or inorganic acids. In practice, use of the salt form is the same as use of the base form. The compounds of the present invention are useful in both free base and salt form, and both forms are considered to be within the scope of the present invention.
[0069]
"AcN", "CH ₃ “CN” or “MeCN” refers to acetonitrile.
[0070]
"AIBN" refers to 2,2'-azobisisobutyronitrile.
[0071]
"Bn" refers to benzyl.
[0072]
"Boc" refers to t-butoxycarbonyl.
[0073]
"Boc ₂ "O" refers to Boc anhydride (di-tert-butyl carbonate).
[0074]
"BOC-ON" refers to 2- (tert-butoxycarbonyloxyamino) -2-phenylacetonitrile.
[0075]
"BzlSO ₂ "Refers to benzylsulfonyl.
[0076]
“Cbz” or “CBz” refers to benzyloxycarbonyl.
[0077]
"CNNH ₂ "Or" H ₂ "NCN" refers to cyanamide.
[0078]
"CsCO ₃ "Refers to cesium carbonate.
[0079]
"DCA" refers to dichloroacetic acid.
[0080]
"DCC" refers to N, N'-dicyclohexylcarbodiimide.
[0081]
"DCM" or "CH ₂ Cl ₂ "Refers to dichloromethane.
[0082]
"DIEA" refers to diisopropylethylamine.
[0083]
"DMF" refers to N, N-dimethylformamide.
[0084]
"DMSO" refers to dimethyl sulfoxide.
[0085]
"DMAP" refers to 4-N, N-dimethylaminopyridine.
[0086]
"EDC" refers to 1-ethyl-3- (3-dimethylamino-propyl) carbodiimide hydrochloride.
[0087]
"Et ₃ "N" or "TEA" refers to triethylamine.
[0088]
"EtOAc" refers to ethyl acetate.
[0089]
"EtOH" refers to ethanol.
[0090]
“HATU” refers to O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate.
[0091]
"HBTU" means 2- (1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate.
[0092]
“HCl” means hydrochloric acid.
[0093]
"HOAc" means acetic acid.
[0094]
"HOAt or HOAT" means 1-hydroxy-7-azabenzotriazole.
[0095]
"HOBt" means 1-hydroxybenzotriazole monohydrate.
[0096]
“I-BuOCOCl” means isobutyl chloroformate.
[0097]
"HPLC" means high performance liquid chromatography.
[0098]
"LiAlH ₄ "Means lithium aluminum hydride.
[0099]
"LiAlH ₂ (OEt) ₂ "Means lithium aluminum hydride diethoxide.
[0100]
"Me" means methyl.
[0101]
“MeOH” means methanol.
[0102]
"NMM" means N-methylmorpholine.
[0103]
"NBS" means N-bromosuccinimide.
[0104]
"PhB (OH) ₂ "Means phenylboronic acid.
[0105]
"Ph ₃ P "or" PPh ₃ "Means triphenylphosphine.
[0106]
"PyBOP" means benzotriazol-yl (ly) -oxy-tris-pyrrolidino-phosphonium hexafluorophosphate.
[0107]
"RP-HPLC" means reverse phase high performance liquid chromatography.
[0108]
"TFA" means trifluoroacetic acid.
[0109]
"THF" means tetrahydrofuran.
[0110]
"TLC" means thin layer chromatography.
[0111]
(Detailed description of the invention)
The following compounds and pharmaceutically acceptable salts thereof:
[0112]
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here,
(A) X is -S (O) ₂ -, -N (R ')-S (O) ₂ -,-(C = O)-, -OC (= O)-, -NH-C (= O)-, -P- (O) (R ')-, and a direct bond. Wherein R ′ is independently hydrogen, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms, aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, or aralkyl of about 7 to about 16 carbon atoms, provided that X is -P In the case of (O) (R ')-, R' is not hydrogen;
(B) R ₁ Is selected from the group consisting of:
(1) Unsubstituted or Y ₁ And Y ₂ Alkyl of 1 to about 12 carbon atoms, substituted with one or two substituents selected from the group consisting of:
(2) alkyl of 1 to about 3 carbon atoms substituted with cycloalkyl of about 3 to about 8 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Alkyl substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(3) a cycloalkyl of 3 to about 15 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or has ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A cycloalkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(4) 4 to about 10 ring atom heterocycloalkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1 or 2 and the heterocycloalkyl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A heterocycloalkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(5) 4 to about 10 ring atom heterocyclo having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1, or 2, and the heterocyclo is
[0113]
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And where
[0114]
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Is a 5-7 membered heterocycle having 3-6 ring carbon atoms, wherein V is -CH ₂ -, -O-, -S (= O)-, -S (O) ₂ -Or -S-, wherein the heterocyclo is unsubstituted or has ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heterocyclo, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(6) alkenyl of from 2 to about 6 carbon atoms, unsubstituted or substituted with cycloalkyl of from about 3 to about 8 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or has Y on the ring. ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Alkenyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(7) aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, wherein the aryl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ An aryl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(8) about 5 to about 14 ring atom heteroaryl having a ring atom selected from carbon and a heteroatom, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Heteroaryl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaryl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(9) an aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, wherein the aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the aralkyl is unsubstituted, Or Y on this aryl ring ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Aralkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(10) a heteroaralkyl of about 5 to about 14 ring atoms having a ring atom selected from carbon and a heteroatom, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the heteroaralkyl is unsubstituted on the ring or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaralkyl, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(11) an aralkenyl of about 8 to about 16 carbon atoms, wherein the aralkenyl is unsubstituted or has Y on the aryl ring ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Aralkenyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(12) about 5 to about 14 ring atom heteroaralkenyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; The heteroaralkenyl can be unsubstituted or substituted on this ring carbon with Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaralkenyl, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
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(17) a fused carbocyclic alkyl of about 9 to about 15 carbon atoms,
(18) difluoromethyl or perfluoroalkyl of 1 to about 12 carbon atoms,
(19) perfluoroaryl of about 6 to about 14 carbon atoms,
(20) a perfluoroaralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, and
(21) hydrogen when X is a direct bond;
Here, each Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Are independently selected, and
(I) halogen, cyano, nitro, tetrazolyl, guanidino, amidino, methylguanidino, -CF ₃ , -CF ₂ CF ₃ , -CH (CF ₃ ) ₂ , -C (OH) (CF ₃ ) ₂ , -OCF ₃ , -OCF ₂ H, -OCF ₂ CF ₃ , -OC (O) NH ₂ , -OC (O) NHZ ₁ , -OC (O) NZ ₁ Z ₂ , -NHC (O) Z ₁ , -NHC (O) NH ₂ , -NHC (O) NZ ₁ , -NHC (O) NZ ₁ Z ₂ , -C (O) OH, -C (O) OZ ₁ , -C (O) NH ₂ , -C (O) NHZ ₁ , -C (O) NZ ₁ Z ₂ , -P (O) ₃ H ₂ , -P (O) ₃ (Z ₁ ) ₂ , -S (O) ₃ H, -S (O) _m Z ₁ , -Z ₁ , -OZ ₁ , -OH, -NH ₂ , -NHZ ₁ , -NZ ₁ Z ₂ , -C (= NH) NH ₂ , -N-morpholino, and -S (O) _m (CF ₂ ) _q CF ₃ Wherein m is 0, 1 or 2; q is an integer from 0 to 5; ₁ And Z ₂ Is independently alkyl of 1 to about 12 carbon atoms, aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, heteroaryl of about 5 to about 14 ring atoms, aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, and about 5 to about 15 carbon atoms. Selected from the group consisting of heteroaralkyls of about 14 ring atoms, or
(Ii) Y ₁ And Y ₂ Are together -O [C (Z ₃ ) (Z ₄ )] _r O- or -O [C (Z ₃ ) (Z ₄ )] _{r + 1} -Where r is an integer from 1 to 4 and Z ₃ And Z ₄ Is independently hydrogen, alkyl of 1 to about 12 carbon atoms, aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, heteroaryl of about 5 to about 14 ring atoms, aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, and about Selected from the group consisting of heteroaralkyl of 5 to about 14 ring atoms;
(C) R ₂ Is -CH ₃ , -C ₂ H ₅ ,-(CH ₂ ) ₂ OH,-(CH ₂ ) ₂ OA ₁ , -CH (R ₅ ) OH, -CH (R ₅ ) OA ₁ , And -CH ₂ NH-X'-R ₆ Selected from the group consisting of ₁ Is -C (= O) OR ₆ , -C (= O) R ₆ Or -C (= O) NR ₅ R ₆ X ′ is —S (O) ₂ -, -S (O) ₂ -N (R ")-,-(C = O)-, -C (= O) -O-, -C (= O) -NH-, -P (O) (R")-, and a direct bond Wherein R "is hydrogen, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms, aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, or aralkyl of about 7 to about 16 carbon atoms, with the proviso that When X ′ is —P (O) (R ″) —, R ″ is not hydrogen; ₅ Is selected from the group consisting of:
(1) Unsubstituted or Y ₁ And Y ₂ Alkyl of 1 to about 4 carbon atoms, substituted with 1-2 substituents selected from the group consisting of
(2) alkyl of 1 to about 3 carbon atoms substituted with cycloalkyl of 3 to about 6 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or ₁ , Y ₂ , And Y ₃ An alkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(3) a cycloalkyl of 3 to about 6 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or has a Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A cycloalkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(4) 4 to about 6 ring atom heterocycloalkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1 or 2 and the heterocycloalkyl is unsubstituted or Y is ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A heterocycloalkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(5) 4 to about 6 ring atom heterocyclo having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1, or 2, and the heterocyclo is
[0116]
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And where
[0117]
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Is a 5-7 membered heterocycle having 3-6 ring carbon atoms, wherein V is -CH ₂ -, -O-, -S (= O)-, -S (O) ₂ -Or -S-, wherein the heterocyclo is unsubstituted or ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heterocyclo, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(6) alkenyl of from 2 to about 6 carbon atoms, unsubstituted or substituted with cycloalkyl of from about 3 to about 6 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or has Y on the ring. ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Alkenyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(7) phenyl which is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Phenyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(8) about 5 to about 6 ring atom heteroaryl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Heteroaryl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaryl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(9) alkyl of 1 to about 4 carbon atoms substituted with phenyl, wherein the phenyl is unsubstituted or has Y on the phenyl ring ₁ , Y ₂ , And Y ₃ An alkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(10) a heteroaralkyl of about 5 to about 6 ring atoms having a ring atom selected from carbon and a heteroatom, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; The aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the heteroaralkyl is unsubstituted on the ring or Y on the ring. ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaralkyl, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(11) an aralkenyl of about 8 to about 12 carbon atoms, wherein the aralkenyl is unsubstituted or has Y on the aryl ring ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Aralkenyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(12) about 5 to about 6 ring atom heteroaralkenyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; The heteroaralkenyl can be unsubstituted or substituted on this ring carbon with Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaralkenyl, mono-, di-, or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(13) hydrogen; and
R ₆ Is selected from the group consisting of:
(1) Unsubstituted or Y ₁ And Y ₂ Alkyl of 1 to about 12 carbon atoms, substituted with 1-2 substituents selected from the group consisting of:
(2) alkyl of 1 to about 3 carbon atoms substituted with cycloalkyl of 3 to about 8 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or ₁ , Y ₂ , And Y ₃ An alkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(3) a cycloalkyl of 3 to about 15 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or has ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A cycloalkyl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(4) 4 to about 10 ring atom heterocycloalkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1 or 2 and the heterocycloalkyl is unsubstituted or Y is ₁ , Y ₂ , And Y ₃ A heterocycloalkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(5) 4 to about 10 ring atom heterocyclo having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Wherein i is 0, 1, or 2, and the heterocyclo is
[0118]
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And where
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Is a 5-7 membered heterocycle having 3-6 ring carbon atoms, wherein V is -CH ₂ -, -O-, -S (= O)-, -S (O) ₂ -Or -S-, wherein the heterocyclo is unsubstituted or ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heterocyclo, monosubstituted, disubstituted, or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(6) aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, wherein the aryl is unsubstituted or ₁ , Y ₂ , And Y ₃ An aryl, mono-, di- or trisubstituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(7) about 5 to about 14 ring atom heteroaryl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Heteroaryl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Heteroaryl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(8) an aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, wherein the aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the aralkyl is unsubstituted, Or Y on this aryl ring ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Aralkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(9) about 5 to about 14 ring atom heteroaralkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; The aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the heteroaralkyl is unsubstituted on the ring or Y on the ring. ₁ , Y ₂ , And Y ₃ Hetero-aralkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(10) Hydrogen, provided that A ₁ Is -C (= O) OR ₆ If R ₆ Is not hydrogen;
(D) R ₃ Is selected from H or methyl, or R ₃ And R _4a And R _4b Are selected together as described in (f);
(E) (i) R _4a Is the configuration of S, and H, -CH ₂ -S-CH ₃ , -CH ₂ OH, -CH ₂ CN, lower alkyl of 1 to about 3 carbon atoms, -CH ₂ C≡CH, -CH ₂ CH = CH ₂ And -CH = CH ₂ And R is selected from the group consisting of _4b Is hydrogen;
(Ii) R _4a And R _4b Is independently lower alkyl of 1-3 carbon atoms;
(Iii) R _4a And R _4b Are selected together and-(CH ₂ ) _k Wherein k is 5 or 6 to provide spirocycloalkyl; or
(Iv) R ₃ , And R _4a And R _4b Are selected together as described in (f);
(F) Or R ₃ And R _4a Are selected together to be in the S configuration to form prolyl, pipecolyl, azetidine-2-carbonyl, 4-hydroxyprolyl, 3-hydroxyprolyl, 4-aminoprolyl, 4-(-CH ₂ NH ₂ ) -Prolyl, 3,4-methanoprolyl, and 3,4-dehydroprolyl provide a group selected from the group consisting of _4b Is hydrogen;
(G) R ₇ Is hydrogen or alkyl of 1 to about 4 carbon atoms;
(H) E is QT,
Here, (i) Q is -C (R _Thirteen R ₁₄ ) _t -, R ₈ And R ₉ A phenyl, R ₈ Or R ₈ And R ₉ A 5- or 6-membered heterocyclic ring having 1-2 heteroatoms, substituted with ₈ And R ₉ Selected from the group consisting of a 9 or 10 membered heterocyclic ring having 1-2 heteroatoms substituted with a heterocyclic atom selected from nitrogen and sulfur;
(Ii) T is -C (= NR ₁₀ ) NHR ₁₁ , -NH-C (= NR ₁₀ ) NHR ₁₁ , And -NHR _Fifteen Selected from the group consisting of:
Where R ₈ And R ₉ Is independently hydrogen, hydroxy, halogen, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms substituted with alkoxy of 1 to about 4 carbon atoms, alkoxy of 1 to about 6 carbon atoms R, and trifluoromethyl; ₁₀ And R ₁₁ Is independently hydrogen, hydroxy, alkoxy of 1 to about 3 carbon atoms, trihydrocarbylsilyl of 3 to about 16 carbon atoms, alkyl of 1 to about 3 carbon atoms, or —C (＝ O) R ₁₂ Where R ₁₀ And R ₁₁ Are not both hydroxy or both alkoxy; R ₁₂ Is hydrogen, alkyl of 1 to about 6 carbon atoms, alkoxy of 1 to about 6 carbon atoms, or (CF ₂ ) _j CF ₃ Wherein j is 0, 1, 2 or 3; _Thirteen And R ₁₄ R is independently selected from the group consisting of hydrogen and lower alkyl of 1 to about 3 carbon atoms; _Fifteen Is hydrogen, alkyl of 1 to about 6 carbon atoms, and-(CF ₂ ) _h CF ₃ Wherein h is 0, 1, 2, or 3, and t is an integer from 0-6.
[0120]
According to another aspect of the present invention, preferred compounds are those wherein E is -C (R _Thirteen R ₁₄ ) _t And T is -NHR _Fifteen Wherein the compound of formula (I) is not included. According to a more preferred aspect, preferred compounds of formula I are those wherein Q is R ₈ And R ₉ A phenyl, R ₈ Or R ₈ And R ₉ Selected from the group consisting of a 5- or 6-membered heterocyclic ring having 1-2 heteroatoms and a 9- or 10-membered heterocyclic ring having 1-2 heteroatoms substituted with Wherein the heteroatoms include compounds selected from the group consisting of nitrogen and sulfur. More preferably, Q is R ₈ And R ₉ Is phenyl substituted with More preferably, T is -C (= NR ₁₀ ) NHR ₁₁ Or -NHC (= NR ₁₀ ) NHR ₁₁ It is.
[0121]
According to one aspect of the present invention, preference is given to compounds of the formula I, wherein E is selected from the group consisting of:
[0122]
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[0123]
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[0124]
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[0125]
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Preferred X groups include -S (O) ₂ -, -OC (= O)-, -NH-C (= O)-, and direct bonds. Particularly preferred is -S (O) ₂ -And -OC (= O)-.
[0126]
Preferred R ₁ The groups include alkyl, especially isobutyl, 2-ethylhexyl, methyl, n-butyl, isopropyl, cyclohexylmethyl and cyclohexylpropyl; cycloalkyl, especially (-) methyl, (+) methyl, and cyclohexyl; aryl, In particular, naphthyl and phenyl; aralkyl, especially benzyl, 3-phenylpropyl, and 2-phenylethyl; and fused carbocyclic alkyl, especially fluorenylmethyl. Particularly preferred R ₁ Groups include phenyl, benzyl, 2-phenylethyl, isobutyl, n-butyl and 3-phenylpropyl.
[0127]
R ₁ A preferred combination of -X- is phenyl-S (O) ₂ -, Benzyl-S (O) ₂ -, 2-phenylethyl-S (O) ₂ -, 3-phenylpropyl-S (O) ₂ -, N-butyl-S (O) ₂ -, Benzyl-OC (= O)-, and isobutyl-OC (= O)-.
[0128]
Preferred R ₂ As a group, -CH ₃ , -C ₂ H ₅ , -CH ₂ NH-X'-R ₅ And -CH (R ₅ ) OH, where R ₅ Is hydrogen, alkyl, especially methyl, or alkyl. The preferred chirality at the α-carbon is R. When chiral, the preferred chirality at the β carbon is R. Preferred R ₂ The group is d-seryl (-CH (R ₅ ) OH, where R ₅ Is H), (R, R) d-allothrenyl (-CH (R ₅ ) OH, where R ₅ Is methyl), d-2-aminobutyryl, N-β-methyloxycarbonyl-d-2,3-diaminopropionyl (—CH ₂ NH-X'-R ₅ , Where R ₅ Is CH ₃ And X ′ is (—C ＝ O) O—), N-β- (2-phenylethylcarbonyl) -d-2,3-diaminopropynyl (—CH ₂ NH-R ₅ , Where R ₅ Is 2-phenylethyl and X ′ is — (C ＝ O) —), N-β-benzyloxycarbonyl-d-2,3-diaminopropionyl (—CH ₂ NH-X'-R ₅ , Where R ₅ Is benzyl, and X ′ is — (C ＝ O) O—) and d-alanyl (—CH ₂ R defining the P3 position ₂ Group. Particularly preferred R ₂ The group is P ₃ With d-seryl (R ₅ Is H) or (R, R) d-allothrenyl (R ₅ Is methyl) ₂ Group.
[0129]
Alternative preferred R ₂ As a group,-(CH ₂ ) ₂ OA ₁ And -CH (R ₅ ) OA ₁ , More preferably -CH (R ₅ ) OA ₁ And preferably R ₅ Is H. More preferred R ₂ Is selected such that P3 is defined as an acyl or carbonate of d-seryl. R ₂ Is-(CH ₂ ) ₂ OA ₁ Or -CH (R ₅ ) OA ₁ Can act as prodrugs.
[0130]
R ₃ And R ₄ Are preferred when both are not selected ₃ The group is hydrogen. R ₃ And R ₄ Are preferred when both are not selected ₄ The group is methyl, vinyl, allyl or propargyl. R ₃ And R ₄ Are selected together, prolyl, 3-hydroxy-prolyl, 4-hydroxyprolyl, 3,4-dehydroprolyl, 3,4-methanoprolyl, and azetidine-2-carbonyl- define the group at P2 Is the preferred choice for
[0131]
Preferred R ₇ The groups include hydrogen.
[0132]
Preferred E groups are those wherein Q is R ₈ And R ₉ A phenyl, R ₈ And R ₉ Substituted with pyridyl, or R ₈ And T is -C (= NR ₁₀ ) NHR ₁₁ Or -NH-C (= NR ₁₀ ) NHR ₁₁ And an E group.
[0133]
Preferred E groups include 4-amidinophenyl, 4-guanidinophenyl, 3-amidinopropyl, and 5- (2-amidino-thienyl). Particularly preferred E groups include 4-amidinophenyl and 4-guanidinophenyl.
[0134]
Among the compounds of the present invention, a preferred compound is R which defines d-serine or d-allothreonine or acyl or a carbonate thereof at the P3 position of the compound. ₂ An element and R at P1 defining an amidinophenyl, guanidinophenyl or amidinothienyl group ₂ Includes compounds with elements. Particular preference is given to i) R ₃ And hydrogen and R ₄ (P2 is alanine), or ii) R such that P2 is prolyl, azetidine-2-carbonyl, 3,4-methanoprolyl or 3,4-dehydroprolyl. ₃ And R ₄ Is any of the compounds selected together.
[0135]
Preferred compounds of the present invention include those shown in FIGS. 10A-10F and FIGS. 13A-13C. Particularly preferred are compounds D, F, I, J, K, L, O, R, T, U, V, AE, AH, AJ, AN and AV of FIGS. 10A-10F and the BG of FIGS. 13A-13C. , BJ, BK and BQ.
[0136]
Also particularly preferred are the compounds of the following formula (I): compound AX (X = S (O) ₂ , R ₁ = 4-chlorobenzyl, R ₂ = -CH ₂ OH, R ₃ = H, R ₄ = CH ₃ , R ₇ = H and E = 4-amidinophenyl), AY (X = SO ₂ , R ₁ = 3-chlorobenzyl, R ₂ = -CH ₂ OH, R ₃ = H, R ₄ = CH ₃ , R ₇ = H and E = 4-amidinophenyl) and AZ (X = SO ₂ , R ₁ = 2-fluorobenzyl, R ₂ = -CH ₂ OH, R ₃ = H, R ₄ = CH ₃ , R ₇ = H and E = 4-amidinophenyl).
[0137]
(2. Preparation of preferred compounds)
FIGS. 1-5 show synthetic schemes for the synthesis of intermediates that can be used in the preparation of certain compounds of the present invention.
[0138]
FIG. 1 shows a solution phase synthesis for the synthesis of intermediates useful in preparing compounds of the present invention. See Examples 60-62. See also Examples 95-97.
[0139]
Examples 63-66, 67-70 and 71-73 show solution phase syntheses for the synthesis of intermediates useful in the synthesis of certain compounds of the present invention.
[0140]
FIG. 2 illustrates an alternative synthetic route for preparing intermediates useful in preparing compounds of the present invention using solution phase synthesis.
[0141]
FIG. 6 shows a reaction scheme for the preparation of compounds of the invention having a hydroxyl esterified to P3.
[0142]
FIG. 7 shows a reaction scheme for the preparation of compounds of the invention having 4-guanidinophenyl at P1.
[0143]
FIG. 8 shows a reaction scheme for the preparation of compounds of the invention having 3-guanidinophenyl at P1.
[0144]
FIG. 9 shows a reaction scheme for the preparation of compounds of the invention having 2-guanidinophenyl at P1.
[0145]
FIG. 11 shows a reaction scheme for the preparation of compounds of the invention having 3-amidinopyridyl at P1.
[0146]
FIG. 12 shows a reaction scheme for the synthesis of compounds of the invention having 4-amidinopyridyl at P1.
[0147]
FIG. 14 shows a reaction scheme for the synthesis of compounds of the invention having a bicyclic heterocyclic group at P1.
[0148]
FIG. 15 shows a reaction scheme for the synthesis of compounds of the invention having an amino-imidazolyl group at P1.
[0149]
FIG. 16 shows a reaction scheme for compounds of the present invention having a 2-chloro-4-guanidinophenyl group at P1.
[0150]
FIG. 17 shows a reaction scheme for the synthesis of compounds of the invention having a guanidino-pyridyl group at P1.
[0151]
A preferred method of chemically coupling (eg, for an amide linkage functional group) involves the formation of a peptide bond by using conventional coupling reagents known in the art. See, for example, Bodanszky, N.M. See Peptide Chemistry, pp. 55-73, Springer-Verlag, New York (1988) and the references cited herein. Chemical coupling is by either a one-step or two-step method. In one-step coupling, two coupling partners are directly coupled. Preferred coupling reagents for the coupling partner of the one-step coupling include DCC with HOBt, EDC with HOBt, HOAt, HBTU or EDC with TBTU. In a two-step coupling, an activated ester or anhydride of the C-terminal carboxyl group of one coupling partner is formed before it is coupled to the other coupling partner.
[0152]
For the preparation of certain compounds having hydrogenation sensitive substituents, it is preferred to avoid using hydrogen gas with palladium on carbon. Hydrogen, cyano, nitro, or -SZ ₁ Another preferred method of preparing compounds of the present invention that contain a hydrogenation sensitive group such as an alkenyl or allyl moiety substituted with boron tris (trifluoroacetic acid), B (OOCOCF ₃ ) ₃ , Using the N of the arginine group ^g -Cleavage of the nitro. This reagent is used at 0 ° C. for BBr in dichloroamine. ₃ And CF ₃ Prepared by reaction of COOH. This reagent is also commercially available. In general, N ^g -The nitro compound is treated at 0 ° C with boron tris (trifluoroacetic acid) in trifluoroacetic acid. For example, Fieser, M .; And Fieser, L .; F. , Reagents for Organic Synthesis, p. 46, John Wiley & Sons, New York (1974); And Bauer, W.C. Angew. Chem. , Internet. Ed., 12, 147 (1973).
[0153]
Further, another preferred reagent for selective nitro group cleavage is titanium trichloride. This reagent is commercially available. N ^g The nitro compound was treated with titanium trichloride in aqueous methanol containing ammonium acetate buffer, followed by exposing the reaction to air or dimethyl sulfoxide. For example, Freidinger, R.A. M. Hirschmann, R .; And Veber, D .; F. , J. et al. org. Chem. 43, 4800 (1978).
[0154]
FIG. 6 shows a reaction scheme for the synthesis of compounds of the present invention, where R ₂ Is -CH ₂ OA ₁ And A ₁ Is -C (= O) R ₆ Is:
[0155]
Embedded image

An intermediate such as 6-1 (the compound of Example 9) can be prepared by acid chloride R in the presence of a base such as pyridine. ₆ Reacts with COCl. R ₂ Is-(CH ₂ ) ₂ OA ₁ Or -CH (R ₅ ) OA ₁ And A ₁ Is -C (= O) R ₆ Are preferably in the presence of a base such as pyridine with a suitable acid chloride derivative (R ₆ COCl) and an appropriate intermediate corresponding to 6-1.
[0156]
R ₂ Is-(CH ₂ ) ₂ OA ₁ Or -CH (R ₅ ) OA and A ₁ Is -C (= O) OR ₆ Is a compound represented by R ₂ Is-(CH ₂ ) ₂ OH or -CH (R ₅ )) Can be conveniently prepared by treating the corresponding compound, which is OH, with the appropriate chloroform derivative. P ₁ In preparing compounds having an amidino or guanidino group, it may be preferable to cap the P3 hydroxyl with a carbonate group before deprotecting the amidino or guanidino group. Therefore, it is preferred to treat the corresponding intermediate with a chloroform derivative (see, eg, Example 8). The product was then hydrogenated and optionally treated under hydrolysis conditions to yield the product (see, for example, Examples 16, 21, 28, 35 and 40).
[0157]
(3. Selection of preferred compounds)
According to one aspect of the present invention, preferred compounds of the present invention are selected for their potency and selectivity for inhibiting serine proteases, especially urokinase. Such an evaluation is routinely performed in vitro according to the procedure as set forth in Example A. As described herein and generally known, the target serine protease and its substrate are combined under assay conditions that allow the reaction of the protease with the substrate. The assay is performed in the absence of the test compound and in the presence of increasing concentrations of the test compound. The concentration of the test compound at which 50% serine protease activity is inhibited by the test compound is determined by the IC ₅₀ Value (inhibitory concentration) or EC ₅₀ (Effective density) value. Relatively low IC within a series of test compounds or groups of test compounds ₅₀ Value or EC ₅₀ These compounds with high values have relatively high IC ₅₀ Value or EC ₅₀ It is believed that they are more potent inhibitors of serine proteases than those compounds that have values. IC ₅₀ Measurements are often used for simpler assays, except that EC ₅₀ Is often used for more complex assays (eg, cell-based assays). K _i Is an IC ₅₀ Is calculated from
[0158]
Preferred compounds according to this aspect of the invention have a K less than or equal to 100 nM as measured in an in vitro assay for inhibition of urokinase activity. _i Has a value. Particularly preferred compounds have a K less than 30 nM. _i Has a value.
[0159]
Test compounds are also evaluated for selectivity for serine proteases. As described in the Examples and generally known, test compounds are assayed for their potency against a panel of serine proteases or other enzymes, and the IC ₅₀ Value or EC ₅₀ A value is determined for each test compound in each assay system. Low IC for target enzymes (eg, urokinase) ₅₀ Value or EC ₅₀ Value or corresponding low K _i Relatively high ICs for compounds that show values and other enzymes in the test panel (eg, tissue plasminogen activator, thrombin, factor Xa) ₅₀ Value or EC ₅₀ Compounds that show a value are considered to be selective for the target enzyme. Generally, a compound will have its IC in a targeted enzyme assay. ₅₀ Value or EC ₅₀ Value (or K _i Value) is the next smallest IC measured in the enzyme selectivity panel. ₅₀ Value or EC ₅₀ If it is at least one order of magnitude smaller than the value, it is considered selective.
[0160]
Preferred compounds of the invention have a K of less than 100 nM as measured in an in vitro assay for inhibition of urokinase activity. _i Has a value. Particularly preferred compounds have an IC measured in an in vitro tPA inhibition assay. ₅₀ K in in vitro urokinase inhibition assay that is at least one order of magnitude smaller than _i Has a value. IC greater than 100 ₅₀ tPA assay: K _i Compounds having a selectivity ratio in the urokinase assay are particularly preferred.
[0161]
The compounds of the present invention are also evaluated for their activity in vivo. The type of assay chosen for the evaluation of a test compound will depend on the pathological condition being treated or prevented by the use of the compound, as well as the route of administration being evaluated for the test compound.
[0162]
For example, to evaluate the activity of compounds of the present invention to reduce tumor growth via inhibition of urokinase, Jankun et al. [Canc. Res. 57: 559-563, 1997] can be used. Briefly, SCID mice are injected with DU145, an ATCC cell line that expresses high levels of uPA, and LnCaP that does not express uPA. After the tumor is established, the mice are provided with the test compound according to a dosing regime determined from the in vitro characteristics of the compound. The Jankun et al. Compound was administered in water. Tumor volume measurements are taken twice a week for about 5 weeks. A compound is considered active if the animal receiving the compound exhibits a reduced tumor volume as compared to an animal receiving the appropriate control compound. Furthermore, a comparison of the effect of the compound in animals injected with DU145 cells versus LnCaP cells may indicate whether the effect of the compound was due to inhibition of urokinase or not.
[0163]
Another in vivo experimental model designed to evaluate the effect of p-aminobenzamidine (a compound referred to as a urokinase inhibitor compound) on decreasing tumor volume is described in Billstrom et al. [Int. J. Cancer 61: 542-547, 1995].
[0164]
To assess the ability of the compounds of the present invention to reduce the occurrence of metastasis or inhibit metastasis, Kobayashi et al. [Int. J. Canc. 57: 727-733d, 1994] can be used. Briefly, mouse xenografts selected for high lung colony forming ability are injected intravenously into C57B1 / 6 mice (experimental metastasis) or subcutaneously into the abdominal wall (spontaneous injection). Metastasis). Various concentrations of the compound to be tested can be mixed with the tumor cells in Matrigel prior to injection. Daily intraperitoneal injections of test compound are given either 1-6 days or 7-13 days after tumor inoculation. Animals are sacrificed approximately 3-4 weeks after tumor inoculation and lung tumor colonies are counted. Evaluation of the resulting data will allow decisions regarding the effects of the test compound, optimal dosing and routes of administration.
[0165]
The activity of the compounds of the invention on decreasing tumor volume and metastasis may be assessed by Rabbani et al. [Int. J. Cancer 63: 840-845, 1995]. There were Mat LyLu tumor cells overexpressing uPA injected into the flank of Copenhagen rats. The animals were implanted using an osmotic minipump to continuously administer various doses of the test compound for up to three weeks. Tumor mass and tumor volume of experimental and control animals were evaluated during the experiment, as were metastatic growth. Evaluation of the resulting data allowed decisions regarding test compound efficacy, optimal dosing, and routes of administration. Some of these authors are described by Xing et al. [Canc. Res. 57: 3585-3593, 1997] describes a related protocol.
[0166]
To evaluate the inhibitory activity of the compounds of the present invention on neovascularization, a rabbit corneal neovascularization model could be used. Avery et al. [Arch. Ophthalmol. 108: 1474-1475, 1990] describe anesthetizing a New Zealand white rabbit, then making a central corneal incision, and forming a radical corneal pocket. A slow release prostaglandin pellet was placed in this pocket to induce neovascularization. Test compounds were administered intraperitoneally for 5 days, and on day 5, animals were sacrificed. The effect of this test compound is to examine periodic pictures taken of the limbus, which can be used to calculate the area of neovascular response and thus the limbal neovascularization Is evaluated by Areas of reduced neovascularization as compared to appropriate controls indicate that the test compound was effective in reducing or inhibiting neovascularization.
[0167]
An angiogenesis model used to evaluate the effects of test compounds in preventing angiogenesis is described by Min et al. [Canc. Res. 56: 2428-2433, 1996]. C57BL6 mice receive a subcutaneous injection of Matrigel mixture containing bFGF (as an angiogenesis inducer) with or without test compound. Five days later, the animals are sacrificed and Matrigel plugs are photographed where neovascularization can be visualized. Experimental animals receiving Matrigel and an effective amount of the test compound show less angiogenesis than control animals or experimental animals receiving little or no effective dose of the compound.
[0168]
In vivo systems in which a test compound is designed for its ability to limit the spread of a primary tumor are described in Crowley et al. [Proc. Natl. Acad. Sci. 90: 5021-5025, 1993]. Nude mice are injected with tumor cells (PC3) engineered to express CAT (chloramphenicol acetyltransferase). The cells secrete large amounts of uPA and exhibit a saturating amount of uPA activity that binds to uPAR on the cell surface. The compound to be tested for its ability to reduce tumor size and / or metastasis is administered to the animal and a subsequent measurement of tumor size and / or metastatic growth is made. In addition, CAT levels detected in various organs provide an indication of the ability of the test compound to inhibit metastasis; the detection of less CAT in tissues of treated animals relative to control animals indicates that CAT expression transferred to that tissue Indicates fewer cells.
[0169]
An in vivo experimental model designed to evaluate the ability of test compounds to inhibit urokinase using the tumor cell line F3II (referred to as highly invasive) is described in Alonso et al. [Breast Canc. Res. Treat. 40: 209-223, 1996]. This group describes in vivo studies on toxicity determination, tumor growth, invasiveness, spontaneous metastasis, experimental lung metastasis and angiogenesis assays.
[0170]
The CAM model (chick embryo chorioallantoic membrane model) (first described by L. Ossowski in 1998 [J. Cell Biol. 107: 2437-2445, 1988]) was used to evaluate the urokinase inhibitory activity of test compounds. Provide another way. In this CAM model, tumor cell invasion through the chorioallantoic membrane depends on the presence of catalytically active uPA. Contacting the CAM with the tumor cells in the presence of an urokinase inhibitor causes little or no invasion of the tumor cells through the membrane. Thus, CAM assays are performed with CAM and tumor cells in the presence and absence of various concentrations of the test compound. Tumor cell invasion is measured under conditions that provide an indication of the urokinase inhibitory activity of the compound. Compounds with urokinase inhibitory activity correlate with less tumor invasion.
[0171]
This CAM model is also used in standard assays of angiogenesis (ie, effects on new blood vessel formation) (Brooks, PC; Montgomery, AMP; and Cheresh, D. A., Methods in Molecular Biology 129: 257-269 (1999)). According to this model, a filter disk containing an angiogenesis-inducing factor (eg, basic fibroblast growth factor (bFGF)) is placed on the CAM. Diffusion of cytokines into the CAM induces local angiogenesis, which is accomplished in several ways, for example by counting the number of vessel branch points in the CAM just below the filter disk. Can be measured. The ability of the compounds of the invention to inhibit cytokine-induced angiogenesis can be tested using this model. The test compound can be added to a filter disk containing an angiogenesis-inducing factor, placed directly on a membrane, or administered entirely. The extent of neovascularization in the presence and / or absence of a test compound can be compared using this model. The formation of fewer new blood vessels in the presence of the test compound is an indicator of anti-angiogenic activity. Since some of the compounds of the present invention are active as inhibitors of urokinase, anti-angiogenic activity against such compounds may suggest that urokinase plays a significant role in angiogenesis.
[0172]
(4. Pharmaceutical composition)
In another aspect, the invention includes a pharmaceutical composition prepared for storage or administration, comprising a therapeutically effective amount of a compound of the invention in a pharmaceutically acceptable carrier.
[0173]
The therapeutically effective amount of a compound of the present invention will depend on the route of administration, the type of mammal being treated, and the physical characteristics of the particular mammal under consideration. These factors and their relationship to determine this amount are well known to those skilled in the medical arts. The amount and method of administration may be tailored to achieve optimal efficacy, but will depend on such factors as weight, diet, concurrent medication and other factors which those skilled in the medical arts will recognize.
[0174]
Therapeutically effective amounts of the compounds of the present invention can vary widely depending on the desired effect and therapeutic index. Typically, dosages will be between about 0.01 mg / kg body weight and 100 mg / kg body weight, preferably between about 0.01 mg / kg body weight and 10 mg / kg body weight.
[0175]
Pharmaceutically acceptable carriers for therapeutic use are well known in the pharmaceutical arts, and are described, for example, in Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R., edited by Gennaro, 1985). For example, sterile saline and phosphate buffered saline at physiological pH can be used. Preservatives, stabilizers, dyes and even flavoring agents may be provided in the pharmaceutical composition. For example, sodium benzoate, sorbic acid, esters of p-hydroxybenzoic acid may be added as preservatives. Ibid, 1449. In addition, antioxidants and suspending agents may be used. Ibid.
[0176]
The pharmaceutical compositions of the present invention may be formulated and used as tablets, capsules or elixirs for oral administration; suppositories for rectal administration; sterile compositions and suspensions for injection administration. Dosage and manner of administration may be varied to achieve optimal efficacy, but will depend on such factors as weight, diet, concomitant medications and other factors which those skilled in the medical arts will recognize.
[0177]
Where administration is parenteral (eg, daily intravenous), the injectable pharmaceutical composition may be in a conventional form (either as a liquid solution or suspension), a solution in liquid prior to infusion or It may be prepared in a solid form suitable for suspension, or as an emulsion. Suitable excipients are, for example, water, saline, dextrose, mannitol, lactose, lecithin, albumin, sodium glutamate and the like. In addition, if desired, injectable pharmaceutical compositions can contain small amounts of non-toxic auxiliary substances such as wetting agents, pH buffering agents, and the like. If desired, absorption enhancing preparations (eg, liposomes) can be utilized.
[0178]
(5. Usefulness)
Compounds of the invention having urokinase inhibitory activity and / or an activity of reducing or inhibiting angiogenesis (including angiogenesis and neovascularization) can be used both in vitro and in vivo for many applications, Some of these are described herein below.
[0179]
The compounds of the present invention are active as inhibitors of urokinase and specifically bind to urokinase. Thus, these compounds containing sites suitable for ligation to a solid / gel support can be used to purify urokinase from a sample or to remove urokinase from a sample using conventional affinity chromatography procedures. For chromatography, it can be used in vitro. These compounds can be attached or linked to affinity chromatography, either directly or through a suitable linker support, using conventional methods. See, for example, Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons (edited by JE Colligan et al., 1997) and Protein Purification Protocols, Humana Press (ed. S. Doonan, 1966) and references therein.
[0180]
Compounds of the present invention having urokinase inhibitory activity are useful in in vitro activity to measure tPA activity in a sample. In assays measuring total plasminogen activating activity in blood samples, compounds of the invention having urokinase inhibitory activity inactivate a portion of plasminogen activation due to uPA (knock out), which indicates that tPA activity Allows for the calculation of the portion of total plasminogen activation due to UPA activity and total plasminogen activity due to uPA activity. Use of such assays to monitor tPA activity allows for better dose control in patients receiving tPA. These assays also monitor uPA / tPA activity in tissue samples (eg, from biopsies) or for any clinical condition where the measurement of plasminogen activator activity is assisted. Can be used to These assays can also be used to monitor plasminogen activator activity, where the patient has been treated with a non-endogenous compound having plasminogen activator activity, such as streptokinase or staphylokinase.
[0181]
The compounds of the present invention are used in vivo for the treatment of pathological conditions ameliorated by decreased urokinase activity. For example, these compounds inhibit metalloprotease activation by the uPA-plasmin cascade in synovial fluid and can therefore be used in the treatment of arthritis.
[0182]
These compounds are believed to be useful in reducing or inhibiting metabolism, neovascularization and extracellular matrix degradation in tumors and other neoplasms. These compounds are characterized by pathological neovascularization, such as retinal diseases, retinopathies, and other conditions, including those described in the Background and Introduction of the Invention herein. It is useful as a therapeutic agent in treating a given condition.
[0183]
Another use for compounds of the invention having urokinase inhibitory activity is as an antidote if large amounts of exogenous urokinase are given to a patient for other purposes (eg, to dissolve thrombus). is there.
[0184]
The compounds of the present invention may be used in treating conditions characterized by inflammation due to their anti-inflammatory effects from inhibition of urokinase, thereby blocking mediators of cell adhesion or migration. Such anti-inflammatory applications include treatment of stroke and complications of organ transplantation.
[0185]
The invention includes a method for preventing or treating a condition in a mammal suspected of having a condition that is attenuated by inhibition of urokinase, the method comprising providing a therapeutically effective amount of a compound or pharmaceutical composition of the invention. And administering to the mammal.
[0186]
The compounds or pharmaceutical compositions of the invention are usually administered in vivo in a mammal, preferably a human. In using them in vivo, the compounds or pharmaceutical compositions can be administered in a variety of modes (orally, parenterally, intravenously, intravenously, subcutaneously, intramuscularly) using different modes of administration. (Colonally, rectally, nasally, or intraperitoneally). Administration is preferably oral, for example by tablets, capsules or elixir taken daily.
[0187]
In practicing the methods of the present invention, the compounds or pharmaceutical compositions of the present invention are administered alone or in combination with each other, or in combination with other therapeutic or in vivo diagnostic agents.
[0188]
As will be apparent to those skilled in the medical arts, a "therapeutically effective amount" of a compound or pharmaceutical composition of the invention will vary with the age, weight, and species of mammal used, the particular compound used, the particular It will vary depending on the mode and effect desired and the therapeutic indication. As these factors and their relationship to determining this amount are well known in the medical arts, determining a therapeutically effective dosage level (the amount necessary to achieve the desired result of inhibiting uPA activity) Is within the skill of the art. Typically, administration of a compound or pharmaceutical composition of the invention will be initiated at a lower dosage level, which will be increased until the desired effect of inhibiting uPA activity is achieved to the desired extent. Defines a therapeutically effective amount. For the compounds of the present invention, alone or as part of a pharmaceutical composition, such doses will be between about 0.01 mg / kg body weight and 100 mg / kg body weight, preferably about 0.01 mg / kg body weight. It is between body weight and 10 mg / kg body weight.
[0189]
To assist in understanding, the invention will now be further illustrated by the following examples. These examples should, of course, not be construed as specifically limiting the invention, as they pertain to the present invention, and are hereby deemed known or later developed and within the purview of those skilled in the art. Certain such variations of the invention are considered to be within the scope of the invention as described herein and claimed above.
[0190]
(Example)
(A. Synthesis of specific compound of the present invention)
(Example 1)
(Preparation of n-butylsulfonyl-D-serine (tert-butyl ether) -methyl ester (1))
[0191]
Embedded image

A solution of HCl.H-dSer (tBu) -OMe (2 g, 9.44 mmol) and n-butylsulfonyl chloride (1.1 ml, 8.50 mmol) in tetrahydrofuran (38) was stirred at room temperature for 10 minutes. . Then diisopropylethylamine (5.75 ml, 33.07 mmol) was added and the cloudy yellow solution was stirred overnight at ambient temperature. The reaction mixture was then diluted with ethyl acetate (200ml) and washed with 1N HCl then brine (20ml each). After drying over anhydrous sodium sulfate, the solvent was removed under reduced pressure. The scaly yellow solid (1.56 g, 62%) was determined to be pure by tlc (5% ethyl acetate in hexane).
[0192]
(Example 2)
(Preparation of n-butylsulfonyl-D-serine (tert-butyl ether) (2))
[0193]
Embedded image

To a solution of compound 1 (1.46 g, 4.94 mmol) in dioxane (32.95 ml) was added 2.0 N LiOH (5.44 ml, 10.87 mmol) dropwise. The cloudy yellow solution was stirred overnight at ambient temperature. When starting material was no longer observed by tlc (5% ethyl acetate / hexane), excess dioxane was removed under reduced pressure. The reaction mixture was diluted with a 1: 1 mixture of water and ethanol and passed through a previously washed DOWEX (50 × 8-400) ion exchange resin (30 ml). The resin was thoroughly rinsed with methanol and water. The combined filtrate was concentrated under reduced pressure to give 1.44 g of the title compound as a creamy solid in quantitative yield.
[0194]
(Example 3)
(Preparation of n-butylsulfonyl-D-serine (tert-butyl ether) -alanine tert-butyl ester (3))
[0195]
Embedded image

Compound of Example 2 (0.50 g, 1.79 mmol), alanine tert-butyl ester hydrochloride (0.65 g, 3.58 mmol), EDC (0.68 g, 3.57 mmol), N-hydroxybenzotriazole (0 A solution of .27 g, 1.79 mmol) and diisopropylethylamine (1.56 ml, 8.94 mmol) was stirred in acetonitrile (18 ml) at ambient temperature. After 18 hours, the solvent was removed under reduced pressure and the resulting residue was resuspended in ethyl acetate (50 ml) and 1N HCl (10 ml). The ethyl acetate layer was washed with 1N HCl (10 ml), saturated sodium bicarbonate (2 × 15 ml) and brine (15 ml), then dried over sodium sulfate. The solvent was removed under reduced pressure and the crude was purified by flash column chromatography (eluting with 50% ethyl acetate / hexane) to give 429 mg (59%) of the product. This product was purified by reverse layer (C18) HPLC (0.1% trifluoroacetic acid in 5-90% aqueous acetonitrile over 20 minutes). _R = 9 min).
[0196]
(Example 4)
(Preparation of n-butylsulfonyl-D-serine-alanine (4))
[0197]
Embedded image

To a solution of the compound of Example 3 (0.42 g, 1.02 mmol) in dichloromethane (4.2 ml) was added trifluoroacetic acid (4.2 ml). The reaction mixture was stirred at ambient temperature for 1 hour. The reaction mixture was diluted with 50 ml n-heptane and concentrated under reduced pressure. The residue was resuspended in 10 ml acetonitrile and 50 ml n-heptane and concentrated under reduced pressure to give 410 mg of the product.
[0198]
(Example 5)
(Preparation of α-azido-4-cyanotoluene (5))
[0199]
Embedded image

Sodium azide (Aldrich, 3.5 g, 54 mmol) is added to a solution of α-bromotoluene nitrile (Aldrich, 10 g, 51 mmol) in DMF (100 ml) and the resulting mixture is allowed to stand at ambient temperature for 5 hours Stirred. The reaction mixture was then diluted with water (350ml) and extracted with ether (2x100ml). The combined organic layers were washed with brine and dried (MgSO ₄ ). Removal of the solvent gave the title compound (8 g, 96%). ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 4.42 (s, 2H), 7.41 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.65 (d, 2H, J = 8.1 Hz).
[0200]
(Example 6)
(Preparation of tolyl (6) in 4- (aminomethyl) benzyl)
[0201]
Embedded image

A catalyst of 10% Pd on carbon (Aldrich, 800 mg) was added to a solution of α-azido-4-cyanotoluene (Compound 5, 8 g, 51 mmol) in EtOAc (150 ml). The reaction mixture was hydrogenated on a Parr apparatus for 11 hours (H ₂ , 45 psi). The catalyst was filtered off and the solvent was removed under reduced pressure to give the title compound (6.3 g, 93%). ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 3.85 (s, 2H), 7.45 (d, 2H, J = 8.1), 7.60 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.78 (s, 2H, NH ₂ ).
[0202]
(Example 7)
(Preparation of n-butylsulfonyl-D-serine-alanine-4-cyanobenzylamide (7))
[0203]
Embedded image

Compound 4 (150 mg, 0.51 mmol), 4- (aminomethyl) benzylnitrile (Compound 6, 171 mg, 1.02 mmol), EDC (195 mg, 1.02 mmol), and N-hydroxy in acetonitrile (5.1 ml) A solution of benzotriazole (78 mg, 0.51 mmol) was stirred at ambient temperature for 10 minutes. Then 2,4,6-collidine (0.34 ml, 2.54 mmol) was added and the reaction mixture was stirred overnight at ambient temperature. The solvent was removed under reduced pressure and the resulting residue was resuspended in ethyl acetate (100ml) and 0.5M HCl (10ml). The ethyl acetate layer was washed with water, followed by 0.5M HCl (10 ml), saturated sodium bicarbonate (2 × 10 ml) and brine (15 ml), then dried over sodium sulfate. The solvent was removed under reduced pressure to give 237 mg of product. The product eluted at 9.5 minutes by reverse phase (C18) HPLC (0.1% trifluoroacetic acid in 5-75% aqueous acetonitrile over 20 minutes).
[0204]
(Example 8)
(Preparation of n-butylsulfonyl-D-serine-alanine-4-hydroxyamidinobenzylamide (8))
[0205]
Embedded image

To a solution of the product of Example 7 (117 mg, 0.285 mmol) in methanol (1.14 ml) was added hydroxyamine hydrochloride (33.7 mg, 0.485 mmol) followed by N-methylmorpholine ( 53 μl, 0.485 mmol) were added. The reaction mixture was stirred overnight at ambient temperature, then at 50 ° for 6 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The crude product was used for the next step (Example 9) without further purification. The product eluted at 6.5 minutes by reverse phase (C18) HPLC (0.1% trifluoroacetic acid in 5-50% aqueous acetonitrile over 20 minutes).
[0206]
(Example 9)
(Preparation of n-butylsulfonyl-D-serine-alanine-4-amidinobenzylamide (9))
[0207]
Embedded image

To the product of Example 8 (126 mg, 0.285 mmol) in acetic acid (2.85 ml) and water (0.28 ml) was added active zinc powder (185 mg). The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The zinc powder was filtered using a glass funnel and the filtrate was purified by preparative HPLC. Product containing fractions were eluted with 5-20% aqueous acetonitrile containing 0.1% TFA and pooled and lyophilized to give 35 mg of the title compound as a white powder. The product eluted at 6.0 minutes by reverse phase (C18) HPLC (0.1% trifluoroacetic acid in 5-50% aqueous acetonitrile over 20 minutes).
[0208]
(Example 10)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine (tert-butyl ether) -methyl ester (10))
[0209]
Embedded image

A solution of HCl.H-dSer (tBu) -OMe (1 g, 4.72 mmol) and phenethylsulfonyl chloride (1.45 g, 7.08 mmol) in acetonitrile (19 ml) was stirred at room temperature for 10 minutes. Then diisopropylethylamine (1.53 ml, 11.81 mmol) was added and the clear yellow solution was stirred at ambient temperature for 18 hours. The reaction mixture was then diluted with ethyl acetate (100ml) and washed with 1N HCl (10ml) followed by brine (10ml). After drying over sodium sulfate, the solvent was removed under reduced pressure. The crude product was purified by flash column chromatography (eluting with dichloromethane followed by a gradient consisting of 1-5% ethyl acetate in dichloromethane) to give 840 ml (52%) of the product. . The final product Tlc in 5% ethyl acetate in dichloromethane showed one spot with an Rf of 0.52.
[0210]
(Example 11)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine (tert-butyl ether) (11))
[0211]
Embedded image

To a solution of the compound of Example 10 (1.0 g, 3.03 mmol) in dioxane (20 ml) was added 2.0 N LiOH (3.33 ml, 6.67 mmol) dropwise. The solution was stirred overnight at ambient temperature. Excess dioxane was removed under reduced pressure. The reaction mixture was diluted with a 1: 1 mixture of water and methanol and passed through a pre-washed DOWEX (50 × 8-400) ion exchange resin (30 ml). The resin was thoroughly rinsed with methanol and water. The combined filtrate was concentrated under reduced pressure to give 1.10 g of the title compound as a yellow paste.
[0212]
(Example 12)
(Preparation of tert-butyloxycarbonyl-3,4-dehydroproline p-cyanobenzylamide (12))
[0213]
Embedded image

Tert-Butyloxycarbonyl-3,4-dehydroproline (0.4 g, 1.88 mmol), 4- (aminomethyl) benzylnitrile (compound 6, 0.47 g, 2.82 mmol) in acetonitrile (7.5 ml). ), EDC (0.54 g, 2.82 mmol), N-hydroxybenzotriazole (0.29 g, 1.88 mmol), and diisopropylethylamine (1.64 ml, 9.39 mmol) were stirred at ambient temperature overnight. did. The solvent was removed under reduced pressure and the resulting residue was resuspended in ethyl acetate (25ml) and 0.5M HCl (5ml). The ethyl acetate layer was washed with water followed by 0.5 M HCl (5 ml), saturated sodium bicarbonate (2 × 5 ml), and brine (10 ml), and then dried over sodium sulfate. The solvent was removed under reduced pressure and the crude product was purified by flash column chromatography eluting with 4/1 ethyl acetate / hexane to give 561 mg of pure product (91.3%). The product eluted at 10.5 minutes by reverse phase (C18) HPLC (0.1% trifluoroacetic acid in 5-75% aqueous acetonitrile over 20 minutes).
[0214]
(Example 13)
(Preparation of 3,4-dehydroproline-4-cyanobenzylamide hydrochloride (13))
[0215]
Embedded image

To a solution of the compound of Example 12 (0.47 g, 1.44 mmol) in ethyl acetate (5.7 ml) was added 5M anhydrous HCl in ethyl acetate (1.44 ml) and the reaction was allowed to proceed at ambient temperature. Stirred overnight. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure to give 363 mg (95%) of a white solid.
[0216]
(Example 14)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine (tert-butyl ether) -proline (dehydro) -4-cyanobenzylamide (14))
[0219]
Embedded image

Compound of Example 11 (0.10 g, 0.32 mmol), Compound of Example 13 (0.092 g, 0.34 mmol), EDC (0.091 g, 0.48 mmol) in acetonitrile (1.2 ml), And a solution of N-hydroxybenzotriazole (0.053 g, 0.35 mmol) was stirred for 10 minutes. Then 2,4,6-collidine (0.209 ml, 1.58 mmol) was added and the reaction mixture was stirred at ambient temperature overnight. The solvent was removed under reduced pressure. The residue obtained was resuspended in ethyl acetate (50 ml) and 1N HCl (10 ml). The ethyl acetate layer was washed with 1N HCl (10 ml), saturated sodium bicarbonate (2 × 15 ml), and brine (15 ml), then dried over sodium sulfate to give a yellow syrup (160 mg, 94%). The product was a single peak on reversed-phase (C18) HPLC (t over 20 minutes in 5-90% aqueous 0.1% trifluoroacetic acid in acetonitrile at t _R = 11 minutes).
[0218]
(Example 15)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-3,4-dehydroproline-4-cyanobenzylamide (15))
[0219]
Embedded image

To a solution of the compound of Example 14 (0.16 g, 0.30 mmol) in dichloromethane (0.6 ml) was added trifluoroacetic acid (0.6 ml). The reaction mixture was stirred at ambient temperature for 1 hour. The reaction mixture was diluted with 10 ml of n-heptane and concentrated under reduced pressure. The residue was resuspended in acetonitrile (5 ml) and n-heptane (10 ml) and concentrated under reduced pressure to give 183 mg of the product.
[0220]
(Example 16)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-3,4-dihydroproline-4-hydroxyamidinobenzylamide (16))
[0221]
Embedded image

To a solution of the product of Example 15 (143 mg, 0.305 mmol) in methanol (1.22 ml) was added hydroxyamine hydrochloride (0.036 mg, 0.519 mmol) followed by N-methylmorpholine ( 57 μl, 0.519 mmol) was added. The reaction mixture was stirred overnight at ambient temperature. Analytical HPLC indicated that the reaction was not complete. Additional hydroxyamine hydrochloride (0.036 mg, 0.519 mmol) and N-methylmorpholine (57 μl, 0.519 mmol) were added and stirring continued at ambient temperature overnight. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The crude product was purified by preparative HPLC. The fractions containing the product were eluted with 5-20% aqueous acetonitrile containing 0.1% TFA and pooled and lyophilized to give 16 mg of the title compound as a white powder.
[0222]
(Example 17)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-3,4-dihydroproline-p-amidinobenzylamide (17))
[0223]
Embedded image

To the product of Example 16 (15 mg, 0.030 mmol) in acetic acid (0.30 ml) and water (0.03 ml) was added activated zinc powder (19 mg). The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The zinc powder was filtered using a glass funnel and the filtrate was purified by preparative HPLC. The fractions containing the product were eluted with 5-20% aqueous acetonitrile containing 0.1% TFA and pooled and lyophilized to give 7 mg of the title compound as a white powder. The product eluted in minutes by reverse phase (C18) HPLC (0.1% trifluoroacetic acid in 5-50% aqueous acetonitrile over 20 minutes).
[0224]
(Example 18)
(Preparation of bis (benzyloxycarbonyl) guanidine (18))
[0225]
Embedded image

The synthesis of the title compound was carried out as described in the literature (tetrahedron Letters, Vol. 35, No. 7, pages 977-980) and as described below.
[0226]
N, N′-bis (benzyloxycarbonyl) -S-methylisothiourea (1 g, 2.79 mmol) in 7N anhydrous ammonia in methanol (5.5 ml) was stirred overnight at ambient temperature. The reaction mixture was concentrated and the residue was diluted with ethyl acetate (10ml). The organic phase was washed twice with saturated sodium bicarbonate and once with brine (10 ml each). After drying over sodium sulfate, the crude product was subjected to flash column chromatography, eluting with ethyl acetate / hexane (3/2) to give 0.87 g of a white solid. The product was then recrystallized in an ethyl acetate: hexane (1: 1) solvent system to give 337 mg (37%) of pure product (mp = 151 ° C.).
[0227]
(Example 19)
(Preparation of tert-butyloxycarbonyl-4-amino-1-butanol (19))
[0228]
Embedded image

To a solution of 4-amino-1-butanol (1 g, 11.22 mmol) in tetrahydrofuran (45 ml) was added anhydrous Boc (2.20 g, 10.10 mmol) and triethylamine (2.84 g, 28.04 mmol). The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The reaction mixture was concentrated and the residue was diluted with ethyl acetate (250ml) and HCl (50ml). The phases were separated and the organic phase was washed with 1N HCl, water and brine (50 ml each). After drying over sodium sulfate, the product (1.9 g (99%)) gave a clear oil.
[0229]
(Example 20)
(Synthesis of N, N'-bis (benzyloxycarbonyl) agmatine trifluoroacetate (20))
[0230]
Embedded image

A solution of compound 18 (the product of Example 18 (0.2 g, 0.61 mmol)) and triphenylphosphine (0.12 g, 0.46 mmol) in dry toluene (6.6 ml) was added with a syringe under nitrogen. Compound 19 (product of Example 19) was added via. The mixture was cooled to 0 ° C. and diethyl azodicarboxylate (0.080 g, 0.46 mmol) was added dropwise over 15 minutes. The reaction mixture was stirred overnight at room temperature and tlc with ethyl acetate / hexane (3/2) confirmed the completion of the reaction. Five drops of water were added and the solvent was evaporated under reduced pressure. The crude preparation was purified by flash column chromatography, eluting with hexane / ethyl acetate (9/1) then hexane / ethyl acetate (3/2) to give the pure product (83 mg (74%)). The product was then treated with dichloromethane and trifluoroacetic acid (1 ml each) at ambient temperature for 1 hour. Removal of the solvent under reduced pressure provided the product 20 (80 mg).
[0231]
(Example 21)
(Preparation of n-butylsulfonyl-D-serine-agmatine-gN, N′-bis (benzyloxycarbonyl (21))
[0232]
Embedded image

The compound of Example 4 (0.05 g, 0.17 mmol) and the compound of Example 20 (0.065 g, 0.17 mmol), EDC (0.065 g, 0.34 mmol), and hydroxybenzotriazole (0. (026 g, 0.17 mmol) was stirred in acetonitrile (0.67 ml) for 10 minutes. Then, 2,4,6-collidine (0.11 ml, 0.84 mmol) was added and the reaction mixture was stirred overnight at ambient temperature. The solvent was removed under reduced pressure and the resulting residue was resuspended in ethyl acetate and 1N HCl (5 ml each). The ethyl acetate phase was washed with 1N HCl (5 ml), saturated sodium bicarbonate (2 × 5 ml) and brine (5 ml), then dried over sodium sulfate to a solid (114 mg, 94%).
[0233]
(Example 22)
(Preparation of n-butylsulfonyl-D-serine-alanine-agmatine (22))
[0234]
Embedded image

The compound of Example 21 (114 mg, 0.17 mmol) was dissolved in methanol (15 ml) and hydrogenated on a Parr shaker (40 psi) overnight in the presence of palladium on carbon (15 mg). The catalyst was removed by filtration. The reaction mixture was diluted to 35 ml with water and purified by preparative HPLC. The fractions containing the product were eluted with 5-20% aqueous acetonitrile containing 0.1% TFA and pooled and lyophilized to give 16 mg of the title compound as a white powder.
[0235]
(Example 23)
(Preparation of 2-cyano-5-methylthiophene (23))
[0236]
Embedded image

A solution of 2-bromo-5-methylthiophene (TCI chemicals) (5 g, 28 mmol) and copper (I) (Aldrich, 2.53 g, 28 mmol) in DMF (10 ml) was heated at its reflux temperature for 4 hours. . After cooling to ambient temperature, ethyl acetate (500 ml) and 10% aqueous NaCN (500 ml) were added. After separation, the aqueous phase was extracted with ethyl acetate (300ml) and the combined organic phases were concentrated to an oil. The oil was further purified by flash column chromatography (ethyl acetate) to give the title compound (3.03 g, 87%). TLC: Rf 0.30 (1: 1 hexane / ethyl acetate); ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 2.55 (m, 3H), 6.76 (d, 1H, J = 3.6 Hz), 7.42 (d, 1H, J = 3.6 Hz).
[0237]
(Example 24)
(Preparation of 2-cyano-5- (bromomethyl) thiophene (24))
[0238]
Embedded image

CCl ₄ (Aldrich, 60 ml), 2-cyano-5-thiophene (compound 23, 3.0 g, 24 mmol), N-bromosuccinimide (Aldrich, 4.8 g, 27 mmol), and 2,2′-azobisisomid Butyronitrile (Aldrich, 0.4 g, 2.4 mmol) was heated at its reflux temperature for 5 hours. After cooling to ambient temperature, the solvent was removed to give a yellow oil. The oil was purified by flash column chromatography (hexane / ethyl acetate (1: 1)) to give the title compound (4.5 g, 91%). TLC: Rf 0.91 (1: 1 hexane / ethyl acetate); ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 4.66 (s, 2H), 7.01 (d, 1H, J = 3.7 Hz), 7.55 (d, 1H, J = 3.7 Hz).
[0239]
(Example 25)
(Preparation of 2-cyano-5- (azidomethyl) thiophene (25))
[0240]
Embedded image

2-Cyano-5- (bromomethyl) thiophene (compound 24, 3.5 g, 17.3 mmol) and sodium azide (Aldrich, 1.7 g, 26 mmol) in DMF (Aldrich, 60 ml) at ambient temperature for 10 hours Stirred. Flash column chromatography (20% ethyl acetate in hexane) provided the title compound (2.35 g, 83%). ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 4.56 (s, 2H), 7.01 (d, 1H, J = 3.7 Hz), 7.55 (d, 1H, J = 3.7 Hz).
[0241]
(Example 26)
(Preparation of 2-cyano-5- (aminomethyl) thiophene (26))
[0242]
Embedded image

In THF (Aldrich, 40 ml) and in water (10 ml), triphenylphosphine (Aldrich, 5.7 g) at 0 ° C. was added 2-cyano-5- (azidomethyl) thiophene (compound 25, 2.5 g, 10 mmol). Added to the solution. The resulting solution was warmed to room temperature and stirred at ambient temperature for 10 hours. RP HPLC purification provided the title compound (2.3 g, 94%). MS (electrospray): 139 (M + 1); ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 4.01 (s, 2H), 4.75 (br s, 2H, NH ₂ ), 6.82 (d, 1H, J = 3.5 Hz), 7.08 (d, 1H, J = 3.5 Hz).
[0243]
(Example 27)
(Preparation of n-butylsulfonyl-D-serine-alanine-2-cyano-5- (methylamido) thiophene (27))
[0244]
Embedded image

The compound of Example 4 (4, 860 mg, 2.9 mmol), the compound of Example 26 (26, 400 mg, 2.9 mmol), EDC (556 mg, 2.94 mmol), N-hydroxybenzotriazole (488 mg, 3 .19 mmol) and a solution of diisopropylethylamine (1.5 mmol, 8.7 mmol) was stirred overnight at ambient temperature. The solvent was removed under reduced pressure and the resulting residue was resuspended in ethyl acetate (50ml) and 1N sodium bicarbonate (10ml). The ethyl acetate phase was washed with 1N sodium bicarbonate (10 ml), saturated sodium bicarbonate (2 × 15 ml) and brine (15 ml), then dried over sodium sulfate to a solid (114 mg, 94%) to a yellow oil Got. The crude product was subjected to flash column chromatography and eluted with 4/5/1 ratio succinethyl / hexane / methanol. The product was purified by reverse phase (C18) HPLC (0.1% trifluoroacetic acid in 5-75% aqueous acetonitrile over 30 minutes, t _R = 8.5), resulting in a 3: 1 mixture of diastereomers. The desired mass was confirmed by low resolution mass spectrometry (MH ⁺ 417).
[0245]
(Example 28)
(Synthesis of n-butylsulfonyl-D-serine-alanine-2-hydroxyamidino-5- (methylamido) thiophene (28))
[0246]
Embedded image

To a solution of the product of Example 27 (220 mg, 0.53 mol) in methanol (5 ml) was added hydroxyamine hydrochloride (184 mg, 2.64 mmol) followed by N-methylmorpholine (290 μl, 2.64 mmol). Was added. The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The methanol mixture was concentrated under reduced pressure, and the remaining residue was diluted with ethylene acetate and washed with saturated sodium bicarbonate and brine (10 ml each). The organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under reduced pressure to give a yellow oil (120mg, 50%). This product is obtained on reversed phase (C18) HPLC (t _R = 5 min (5-75% aqueous 0.1% trifluoroacetic acid in acetonitrile for 20 min) gave a 3: 1 mixture of diastereomers. The low-resolution mass spectrum confirmed the desired mass (MH ⁺ 450.5).
[0247]
(Example 29)
(Synthesis of n-butylsulfonyl-D-serine-alanine-2-amidino-5- (methylamido) thiophene (29))
[0248]
Embedded image

To the product of Example 28 (60 mg, 0.13 mmol) in acetic acid (1.3 ml) and water (0.13 ml) was added 87 mg of activated zinc dust. The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The zinc dust was filtered using a glass funnel and the filtrate was purified by preparative HPLC. The fractions containing this product eluted in 0-20% aqueous acetonitrile containing 0.1% TFA. These were kept and lyophilized to give 7 g of the title compound as a white powder. The 3: 2 mixture of diastereomers of the product eluted at 13 minutes by reverse phase (C18) HPLC (5% to 50% aqueous 0.1% trifluoroacetic acid in acetonitrile for 20 minutes). The low-resolution mass spectrum confirmed the desired mass (MH ⁺ 434).
[0249]
(Example 30)
(Synthesis of tert-butyloxycarbonyl-3,4-methanoproline (30) (the following steps A to E))
(Step A. Synthesis of N-benzyl-3,4-methanoprolinol (b))
[0250]
Embedded image

A mixture of benzylidene initiator (a) (J. Org. Chem. 1999, 64 (2), 547) (4.6 g, 21.4 mmol) and lithium aluminum hydride (1.0 M in THF), 64 ml, 64 mmol ) Was heated at reflux for 5 hours. After cooling to 0 ° C., the remaining aluminum hydride was quenched by careful dropwise addition of saturated aqueous sodium sulfate (5 ml) over 15 minutes. The mixture was diluted with ethyl acetate (200ml) and then filtered through celite. The filtrate was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated to give crude N-benzylamino alcohol (3.45 g), which was carried on to the next step without further purification.
[0251]
(Step B. Synthesis of N-benzyloxycarbonyl-3,4-methanoprolinol)
[0252]
Embedded image

A solution of crude N-benzyl-3,4-methanoprolinol (Step A, (b)) (3 g, 14.76 mmol) in methanol (120 ml) containing 10% Pd / C (300 mg) and concentrated HCl (1 0.5 ml) was hydrogenated at 50 psi for 16 hours. The reaction mixture was filtered to remove the carbon-supported catalyst and the filtrate was concentrated. This residue was dissolved in water / dioxane (100 ml) and diisopropylethylamine (3.2 ml) was added. Benzyl chloroformate (2.76 ml, 16.2 mmol) was added and the reaction mixture was stirred overnight. The reaction mixture was concentrated, dissolved in 1M HCl (100 ml) and eluted with ethyl acetate (3 × 200 ml). The combined organic phases were dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated. The residue was purified by flash chromatography using 1: 3 ethyl acetate / hexane to give N-Cbz-3,4-methanoprolinol (2.4 g).
[0253]
(Step C. Synthesis of N-benzyloxycarbonyl-3,4-methanoprolinol)
[0254]
Embedded image

To a solution of N-benzyloxycarbonyl-3,4-methanoprolinol (2.2 g, 8.90 mmol) in acetone (68 ml) stirred at 0 ° C., Jones reagent (6.6 ml) was added over 5 minutes. [Jones reagent: prepared by diluting chromium trioxide (13.4 g) and concentrated sulfuric acid (11.5 ml) with water to a total volume of 50 ml]. After stirring at 0 ° C. for 3 hours, isopropanol (11 ml) was added and stirring was continued for another 10 minutes. The reaction mixture was diluted with water (400ml) and extracted with ethyl acetate (3x500ml). The combined organic phases were dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated to give N-Cbz-3,4-methanoproline (2.25 g, 96 g).
[0255]
(Step D. Synthesis of 3,4-methanoproline hydrochloride salt)
[0256]
Embedded image

A solution of N-benzyloxycarbonyl-3,4-methanoproline (obtained from step C above) (1.23 g, 4.71 mmol) in ethanol (47 ml) and 0.5 M HCL (9.42 ml). To this was added 10% palladium on carbon catalyst. The reaction mixture was hydrogenated at normal pressure overnight. The catalyst was filtered off and the filtrate was concentrated under reduced pressure to give 767 mg of pure product. The product eluted at 14 minutes by reverse phase (C18) HPLC (5-75% 0.1% trifluoroacetic acid in aqueous acetonitrile for 20 minutes).
[0257]
(Step E. Preparation of tert-butyloxycarbonyl-3,4-methanoproline)
[0258]
Embedded image

To a solution of 3,4-methanoproline hydrochloride salt (from step D above) (1.04 g, 6.38 mmol) in dioxane and water (25 ml each), potassium carbonate (1.76 g, 12.7 mmol) and Boc-anhydride (2.78 g, 12.76 mmol) was added. The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The dioxane was removed under reduced pressure and the remaining residue was diluted with diethyl ether. The phases were separated and the aqueous phase was extracted with diethyl ether (1 × 25 ml). The aqueous phase was acidified with 1N hydrochloric acid to pH <3 and extracted with ethyl acetate (3 × 25 ml). The organic phase was dried over sodium sulfate, decanted and concentrated under reduced pressure to give 745 mg (50%) of the product. The product eluted at 12.5 minutes by reverse phase (C18) HPLC (5-75% 0.1% trifluoroacetic acid in aqueous acetonitrile for 20 minutes).
[0259]
(Example 31)
(Preparation of tert-butyloxycarbonyl-3,4-methanoproline-4-cyanobenzylamide (31))
[0260]
Embedded image

Compound of Example 30 (Step E) (0.70 g, 3.082 mmol), p-cyanobenaylamine hydrochloride salt (0.784 g, 4.64 mmol), EDC (0.88 g, 4.62 mmol), N A solution of -hydroxybenzotriazole (0.47 g, 3.082 mmol) and diisopropylethylamine (2.68 ml, 15.41 mmol) was stirred in acetonitrile (12 ml) at room temperature. After 18 hours, the solvent was removed under reduced pressure, and the remaining residue was resuspended in ethyl acetate (150 ml) and 0.5 M HCl (2 × 15 ml), brine (1 × 15 ml), saturated Washed sequentially with sodium carbonate (2 × 15 ml) and brine (1 × 15 ml). The organic phase was dried over sodium sulfate, decanted and concentrated under reduced pressure. The crude product was purified by flash column chromatography eluting with 4/1 ethyl acetate / hexane to give 822 mg (70%) of the product.
[0261]
(Example 32)
(Preparation of 3,4-methanoproline-4-cyanobenzylamide hydrochloride salt (32))
[0262]
Embedded image

To a solution of the compound of Example 31 (1 g, 2.93 mmol) in ethyl acetate (11.7 ml) was added 5M anhydrous HCl in ethyl acetate (2.93 ml) and the mixture was allowed to stand at room temperature overnight. Stirred. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure to give 645 mg (79%) of a white solid.
[0263]
(Example 33)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine (tert-butyl ether) -3,4-methanoproline-4-cyanobenzylamine (33))
[0264]
Embedded image

Compound of Example 11 (0.10 g, 0.32 mmol), Compound 32 (0.105 g, 0.38 mmol), EDC (0.073 g, 0.38 mmol), N-hydroxybenzotriazole (0.049 g, 0.32 mmol) and a solution of diisopropylethylamine (0.28 ml, 1.59 mmol) was stirred at room temperature overnight. The solvent was removed under reduced pressure and the remaining residue was resuspended in ethyl acetate (50 ml) and 1N HCl (10 ml). The ethyl acetate phase was washed with 1N HCl (10 ml), saturated sodium bicarbonate (2 × 15 ml) and brine (15 ml), then dried over sodium sulfate. The organic phase was decanted and concentrated under reduced pressure to give 171 mg of the product.
[0265]
(Example 34)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-3,4-methanoproline-4-cyanobenzylamine (34))
[0266]
Embedded image

To a solution of the compound of Example 33 (0.17 g, 0.32 mmol) in dichloromethane (4 ml) was added trifluoroacetic acid (4 ml). The mixture was stirred at room temperature for 1 hour. The reaction mixture was diluted with 10 ml of n-heptane and concentrated under reduced pressure. The residue was resuspended in 5 ml of acetonitrile and 10 ml of n-heptane and concentrated under reduced pressure to give 154 mg of the product.
[0267]
(Example 35)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-3,4-methaneproline-4-hydroxyamidinobenzylamide (35))
[0268]
Embedded image

To a solution of the product of Example 34 (154 mg, 0.32 mmol) in 1.3 ml methanol was added hydroxylamine hydrochloride (0.11 g, 1.58 mmol) followed by N-methylmorpholine (209 μl, 1 .902 mmol) was added. The reaction mixture was stirred overnight at ambient temperature. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The crude product was resuspended in 25% acetonitrile in water and purified by preparative HPLC. Fractions containing product eluting with 0-20% aqueous acetonitrile containing 0.1% TFA solution were pooled and lyophilized to give 19.5 mg of the title compound as a white powder. By low-resolution mass spectroscopy, the desired mass (MH ⁺ 516) was confirmed.
[0269]
(Example 36)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-3,4-methanoproline-p-amidinobenzylamide (36))
[0270]
Embedded image

To the product of Example 35 (19.5 mg, 0.041 mmol) in acetic acid (0.41 ml) and water (0.041 ml) was added 27 mg of activated zinc dust. The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. Zinc powder. Filtration was performed using a glass funnel and the filtrate was purified by preparative HPLC. Fractions containing the product eluting with 0-20% aqueous acetonitrile containing 0.1% TFA were pooled and lyophilized to give 15 mg of the title compound as a white powder. The product eluted at 10.5 minutes by reverse phase (C18) HPLC with 5% 0.1% trifluoroacetic acid in aqueous 50% acetonitrile for 20 minutes. Low resolution mass spectroscopy confirmed the desired mass (MH + 500).
[0271]
(Example 37)
(Preparation of 4-trifluoroacetamidomethylaniline (7-2))
[0272]
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4-Nitrobenzylamine (7-1) (4.0 g, 21 mmol) was added to trifluoroacetic anhydride (15 ml) while cooling this mixture on ice. The mixture was warmed to room temperature and stirred overnight. The suspension is poured on ice (about 200 g) and the cloudy suspension is ₂ Cl ₂ (2 × 100 ml) and extracted with Na ₂ SO ₄ , And the solvent was removed to give a clear oil. This oil was shaken in a Parr flask overnight with Pd / C (10% / 300 mg) in MeOH (50 ml). The solid was removed by filtration and the solvent was removed under reduced pressure to give a white solid corresponding to the title compound (7-2) (4.5 g, quantitative yield).
[0273]
(Example 38)
(Preparation of N-[(4-trifluoroacetamidomethyl) phenyl] -N′-N ″ -bis (tert-butoxycarbonyl) guanidine (7-3))
[0274]
Embedded image

4-trifluoroacetamidomethylaniline (7-2) (279 mg, 1.28 mmol) was added to CH ₂ Cl ₂ N-N'-di-Boc-N "-trifluoromethanesulfonyl-guanidine (prepared according to the procedure described in J. Org. Chem. 1998, 63, 3804-3805) (500 mg, 1.28 mmol), and a stirred mixture of TFA (108 μl, 1.28 mmol). The reaction mixture was stirred for 6 hours. This mixture is converted to CH ₂ Cl ₂ (30 ml) and washed with HCl (1M, 20 ml), brine (20 ml), ₂ SO ₄ And the solvent was removed under reduced pressure to give a solid. Column chromatography (CH ₂ Cl ₂ / MeOH, 99: 1) to give a white solid corresponding to the title compound (350 mg, 52%).
[0275]
(Example 39)
(Preparation of N-[(4-aminomethyl) phenyl] -N′-tert-butoxycarbonylguanidine (7-4))
[0276]
Embedded image

Potassium carbonate (500 mg) ₂ N-[(4-trifluoroacetamidomethyl) phenyl] -N′-N ″ -bis (tert-butoxycarbonyl) guanidine (7-3) in O / MeOH (2:15, 17 ml) (300 mg, 0 .833 mmol) and the mixture was stirred overnight. The solvent is removed under reduced pressure and the resulting residue is ₂ O (10 ml) and CH ₂ Cl ₂ / MeOH (9: 1, 3 × 10 ml). Organic layer ₂ SO ₄ And removed under reduced pressure to give a white solid corresponding to the title compound (150 mg, 68%).
[0277]
(Example 40)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine- (4- (N-tert-butoxycarbonylguanidino) benzylamide (7-5))
[0278]
Embedded image

N-[(4-aminomethyl) phenyl] -N'-tert-butoxycarbonylguanidine (7-4) (36 mg, 0.14 mmol) in acetonitrile (2.0 ml), benzylsulfonyl-D-serine-L- A solution of alanine carboxylate (50 mg, 0.13 mmol), HATU (74 mg, 0.20 mmol), HOAT (27 mg, 0.020 mmol), and DIEA (68 μl, 0.39 mmol) was stirred at room temperature overnight. The solution was diluted with EtOAc (20 ml), HCl (1M, 10 ml), NaHCO ₃ (Saturated, 10 ml), washed with brine (10 ml) and removed under reduced pressure to give an oil. HPLC purification (CH ₃ CN, H ₂ O, 0.1% TFA) gave a fluffy white solid as the title compound (35 mg, 45%), MS (electron spray) 577 (M + 1).
[0279]
(Example 41)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine-4-guanidinobenzylamide (7-6))
[0280]
Embedded image

CH ₂ Cl ₂ / TFA (1: 1, 600 μl) in a mixture of benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine- (4- (N-tert-butoxycarbonylguanidino) benzylamide (7-5) (9.0 mg, 0.1 mg). 016 mmol) was stirred for 90 minutes at room temperature.The solvent was removed under reduced pressure to give a clear oil.HPLC purification (CH ₃ CN, H ₂ O, 0.1% TFA) gave a fluffy white solid as the title compound (5.0 mg, 66%), MS (electron spray) 477 (M + 1).
[0281]
(Example 42)
(Preparation of 3-trifluoroacetamidomethylaniline (8-2))
[0282]
Embedded image

3-Nitrobenzylamine (8-1) (3.0 g, 16 mmol) was added to trifluoroacetic anhydride (30 ml) while cooling the mixture on ice and the mixture was stirred overnight. The suspension is poured on ice (about 200 g) and the cloudy suspension is washed with CH ₂ Cl ₂ (2 × 100 ml) and extracted with Na ₂ SO ₄ And dried to give a clear oil. This oil was shaken in a Parr flask overnight with Pd / C (10%, 300 mg) in MeOH (30 ml). The solid was removed by filtration and the solvent was removed under reduced pressure to give a solid corresponding to the title compound (3.3 g, 95%).
[0283]
(Example 43)
(Preparation of N-[(3-trifluoroacetamidomethyl) phenyl] -N′-N ″ -bis (tert-butoxycarbonyl) guanidine (8-3))
[0284]
Embedded image

3-trifluoroacetamidomethylaniline (8-2) (product of Example 42) (500 mg, 2.29 mmol) was added to CH ₂ Cl ₂ NN′-di-Boc-N ″ -trifluoromethanesulfonyl-guanidine (prepared according to the procedure described in J. Org. Chem. 1998, 63, 3804-3805) (1086 ml) (986 mg, 2.52 mmol) and TEA (642 μl, 4.58 mmol) were added and the mixture was stirred for 24 hours. The mixture was washed with HCl (1 M, 10 ml), brine (10 ml) and Na ₂ SO ₄ And the solvent was removed under reduced pressure to give a solid. Column chromatography (CH ₂ Cl ₂ / MeOH, 98: 2) to give a white solid corresponding to the title compound (479 mg, 55%). MS (electron spray) 461 (M + 1).
[0285]
(Example 44)
(Preparation of N-[(3-aminomethyl) phenyl] -N′-tert-butoxycarbonylguanidine (8-4))
[0286]
Embedded image

Potassium carbonate (1.0 g) ₂ N-[(3-trifluoroacetamidomethyl) phenyl] -N′-N ″ -bis (tert-butoxycarbonyl) guanidine (8-3) in O / MeOH (1: 1, 4 ml) (Example 43) (450 mg, 0.978 mmol) was added and the mixture was stirred overnight. The solvent is removed under reduced pressure and the resulting residue is ₂ O (10 ml) and CH ₂ Cl ₂ / MeOH (9: 1, 3 × 10 ml). Organic layer ₂ SO ₄ And removed under reduced pressure to give a white solid corresponding to the title compound (232 mg, 90%).
[0287]
(Example 45)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine-3-guanidinobenzylamide (8-5))
[0288]
Embedded image

N-[(3-Aminomethyl) phenyl] -N'-tert-butoxycarbonylguanidine (8-4) (product of Example 44) in acetonitrile (2.0 ml) (130 mg, 0.492 mmol), benzyl A solution of sulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate (190 mg, 0.492 mmol), HATU (380 mg, 0.739 mmol), HOAT (136 mg, 0.739 mmol), and DIEA (258 μl, 1.48 mmol) Stirred overnight at room temperature. The solution was diluted with EtOAc (20 ml), HCl (1M, 10 ml), NaHCO ₃ (Saturated, 10 ml), washed with brine (10 ml) and removed under reduced pressure to give an oil. This oil is CH ₂ Cl ₂ / TFA (1: 1, 3 ml) and stirred at room temperature for 2 hours. The solvent was removed under reduced pressure to give a clear oil. HPLC purification (CH ₃ CN, H ₂ O, 0.1% TFA) gave a fluffy white solid as the title compound (80 mg, 34%), MS (electron spray) 477 (M + 1).
[0289]
(Example 46)
(Preparation of 2-nitro-5- (4-trifluoroacetamidomethyl) -thiophene (9-2))
[0290]
Embedded image

2-Aminomethylthiophene (9-1) (5.0 g, 44 mmol) was added in portions to stirring trifluoroacetic anhydride (20 ml) while cooling the mixture on ice, and the mixture was stirred for 1 hour. Add KNO to this solution ₃ (8.9 g, 88 mmol) was added in portions at -20 <0> C. The homogeneous solution was warmed to ambient temperature and stirred overnight. The resulting suspension is poured onto ice (about 200 g) and CH ₂ Cl ₂ (2 × 100 ml) and extracted with Na ₂ SO ₄ And dried to remove the solvent to give a solid. Column chromatography (CH ₂ Cl ₂ ) Provided a white solid corresponding to the title compound (3.3 g, 29%). MS (electron spray) 255 (M + 1).
[0291]
(Example 47)
(Preparation of N- [2- (5-trifluoroacetamidomethyl) thiophenyl] -N′-N ″-(bis-tert-butoxycarbonyl) guanidine (9-3))
[0292]
Embedded image

2-Nitro-5- (4-trifluoroacetamidomethyl) -thiophene (9-2) (1.0 g, 3.9 mmol) was added to a saturated solution of HCl in MeOH at 0 <0> C. SnCl ₂ (4.4 g) was added dropwise over 15 minutes and the mixture was stirred for 30 minutes. The solution is concentrated, then NaHCO ₃ (10 ml). This solution is CH ₂ Cl ₂ (2 × 20 ml), Na ₂ SO ₄ And the solvent was removed under reduced pressure to give 2-amino-5- (4-trifluoroacetamidomethyl) -thiophene as a yellow oil (purity by NMR> 95%, 0.80 g, 95%). This compound was used immediately in the next step without further purification.
[0293]
2-Amino-5- (4-trifluoroacetamidomethyl) -thiophene (0.80 g, 3.6 mmol) was added to CH ₂ Cl ₂ (20 ml) was added to a stirred solution of NN′-di-Boc-N ″ -trifluoromethanesulfonyl-guanidine (1.5 g, 3.8 mmol) and TEA (1.1 ml, 7.8 mmol). The mixture was stirred for 24 hours. This mixture is converted to CH ₂ Cl ₂ (20 ml) and washed with HCl (1M, 20 ml), brine (20 ml), ₂ SO ₄ And dried. The solvent was removed under reduced pressure to give an oil. Column chromatography (CH ₂ Cl ₂ / MeOH, 98: 2) to give an oil (150 mg, 9%) corresponding to the title compound (9-3). MS (electrospray): 467 (M + l).
[0294]
(Example 48)
(Preparation of (N- [5-4-aminomethyl) thiophenyl] -N '-(tert-butoxycarbonyl) guanine (9-4))
[0295]
Embedded image

Potassium carbonate (500 mg) ₂ N- [2- (5-trifluoroacetamidomethyl) thiophenyl] -N′-N ″-(bis-tert-butoxycarbonyl) guanidine (9-3) in O / MeOH (1: 1, 4 ml) 150 mg, 0.322 mmol) was added to the stirred solution and the mixture was stirred overnight. The solvent was removed under reduced pressure. The remaining residue is H ₂ Dissolved in O (10 mL) and CH ₂ Cl ₂ / MeOH (95: 5, 3 x 10 ml). The organic layer is Na ₂ SO ₄ And dried. The solvent was removed under reduced pressure to give a yellow solid corresponding to the title compound (150mg, 68%).
[0296]
(Example 49)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine- [5- (2-guanidino) thiophene] (9-5))
[0297]
Embedded image

N- [5- (4-Aminomethyl) thiophenyl] -N ′-(tert-butoxycarbonyl) guanine (9-4) (77 mg, 0.29 mmol), benzylsulfonyl-D in acetonitrile (3.0 mL). A solution of -serine-L-alanine carboxylate (110 mg, 0.285 mmol), HATU (162 mg, 0.427 mmol), HOAT (58 mg, 0.42 mmol) and DIEA (199 μL, 1.13 mmol) was added at ambient temperature. Stirred overnight. The solution was diluted with EtOAc (20 ml), HCl (1M, 10 ml), NaHCO ₃ (Saturated, 10 mL), and brine (10 ml). The organic layer is Na ₂ SO ₄ And the solvent was removed under reduced pressure to give an oil. TFA / CH ₂ Cl ₂ (1: 1, 2 ml) was added; the mixture was stirred for 3 hours. HPLC purification (CH ₃ CN, H ₂ O, 0.1% THF) gave a fluffy white solid (3 mg) corresponding to the title compound. MS (electrospray): 483 (M + 1).
[0298]
(Example 50)
(Preparation of 6-bromomethylnicotinonitrile (11-2))
[0299]
Embedded image

To a solution of 6-methylnicotinonitrile (11-1) (Lancaster) (15 g, 127 mmol) in carbon tetrachloride (300 ml) was added N-bromosuccinimide (27.12 g, 152.4 mmol). The resulting solution was degassed and purged with nitrogen, and AIBN (2,2'-azobisisobutyronitrile) (2.08 g, 12.6 mmol) was added. After 7 hours at 85 ° C., another batch of AIBN (1.04 g) was added and stirring continued for an additional hour. After removal of the solvent, the crude product was subjected to flash column chromatography in ethyl acetate / hexane to give 10 g of pure material (40%).
[0300]
(Example 51)
(Preparation of 6-azidomethylnicotinonitrile (11-3))
[0301]
Embedded image

To a solution of 6-bromomethylnicotinonitrile (11-2) (8.0 g, 40.6 mmol) in DMF (100 ml) was added sodium azide (3.17 g, 48.8 mmol). The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The reaction mixture was diluted with 400 ml of diethyl ether and 100 ml of water, and the layers were separated. The aqueous layer was re-extracted with diethyl ether (2 × 100 ml). The combined ether extracts were washed with brine (2 × 100 ml) and then MgSO ₄ And filtered to give 6.53 g of the product as a white solid.
[0302]
(Example 52)
(Preparation of 3-hydroxyamidino-6-azidomethylpyridine (11-4))
[0303]
Embedded image

To a solution of the azide (11-3) of Example 51 (6.46 g, 40.6 mmol) in methanol (100 ml) was added hydroxyamine hydrochloride (3.95 g, 56.84 mmol) followed by triethylamine (9.9. 6 ml) was added. The solution was heated at 65 ° C. for 4 hours. The solvent was removed under reduced pressure, and the remaining residue was extracted with ethyl acetate (300ml) and water (100ml). The aqueous layer was re-extracted with ethyl acetate (2 × 200 ml). The combined organic extracts were washed with brine (2 × 100 ml) and MgSO ₄ And evaporated to give the title product (11-4) (7.8 g).
[0304]
(Example 53)
(Preparation of 3-hydroxyamidino-6-aminomethylpyridine (11-5))
[0305]
Embedded image

To a solution of the azide (11-4) of Example 52 (7.8 g, 40.6 mmol) in THF / water (80 ml / 5 ml) was added triphenylphosphine (12.8 g, 48.72 mmol). The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The solvent was removed to dryness and the remaining residue was diluted with 100 ml 1N HCl and 100 ml water. The aqueous layer was extracted several times with dichloromethane. The aqueous layer was made basic (pH about 9) with an alkali resin (Bio Rad AG 1-X8). The resin was filtered and washed thoroughly with water. The combined washes were dried under reduced pressure to give a white solid (6.60 g).
[0306]
(Example 54)
(Preparation of 3-hydroxyamidino-6-aminomethyl (Boc) pyridine (11-6))
[0307]
Embedded image

To a solution of the product of Example 53 (11-5) (0.5 g, 3.01 mmol) in dioxane (6 ml) and water (6 ml) was added potassium carbonate (832 mg, 6.02 mmol) followed by , Boc-anhydride (0.66 g, 3.01 mmol) was added. The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The reaction mixture was concentrated and the remaining residue was dissolved in ethyl acetate and washed with sodium bicarbonate (sat.) And brine. The organic layer was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated. Flash column chromatography (8/2 ethyl acetate / hexane followed by ethyl acetate and 9/1 dichloromethane / methanol) gave 0.43 g of the product as a white solid. NMR δ (ppm) CDCl ₃ : 8.8 (d, 1H), 7.9 (dd, 1H), 7.3 (d, 1H), 6.6 (bs, 1H), 5.5 (bs, 1H), 4.8 ( bs, 1H), 4.4 (d, 2H), 1.4 (s, 1H).
[0308]
(Example 55)
(Preparation of 3-isopropyloxyamidino-6-aminomethyl (Boc) pyridine (11-7))
[0309]
Embedded image

To a solution of the product of Example 54 (11-6) (0.43 g, 1.39 mmol) in dimethylformamide (5 ml) was added 2-iodopropane (210 μl, 2.1 mmol) followed by cesium carbonate (0.68 g, 2.1 mmol) was added. The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The reaction mixture was diluted with ethyl acetate and washed with sodium hydrogen carbonate (sat.). The organic layer was dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated to give an orange oil. Flash column chromatography (1/1 ethyl acetate / hexane followed by ethyl acetate) provided 229 mg (53%) of the product as a crystalline solid. NMR δ (ppm) CDCl ₃ : 8.8 (d, 1H), 7.9 (dd, 1H), 7.3 (d, 1H), 5.5 (bs, 1H), 4.7 (bs, 2H), 4.4 ( d, 1H), 1.4 (s, 9H), 1.3 (d, 6H).
[0310]
(Example 56)
(Preparation of Boc-Ala-3-isopropyloxyamidino-6-aminomethylpyridine (11-8))
[0311]
Embedded image

Compound (11-7) of Example 55 (229 mg, 0.74 mmol) was dissolved in dioxane (1 ml) and treated with a solution of 4N HCl in dioxane (1 ml) at room temperature for 1 hour. The solvent was removed under reduced pressure to give 290 mg of a white solid. This product was then dissolved in acetonitrile (4.12 ml), neutralized with diisopropylethylamine (538 μl, 3.09 mmol), and as coupling agents EDC (197 mg, 1.03 mmol) and HOBt (157.6 mg). , 1.03 mmol) to Boc-alanine (195 mg, 1.03 mmol). After stirring at room temperature overnight, the solvent was removed under reduced pressure and the remaining residue was diluted with ethyl acetate. The organic layer was washed several times with sodium bicarbonate (saturated) and brine, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated to give a yellowish oil. Flash column chromatography (9/1 ethyl acetate / hexane followed by ethyl acetate) provided 181 mg of a white oil (46%). NMR δ (ppm) CDCl ₃ : 8.7 (d, 1 H), 7.9 (dd, 1 H), 7.3 (d, 1 H), 7.1 (bs, 1 H), 5.0 (bs, 1 H), 4.7 ( bs, 2H), 4.6 (d, 2H), 4.3 (m, 1H), 4.1 (m, 1H), 1.4 (s, 9H), 1.39 (d, 3H), 1.3 (d, 6H).
[0312]
(Example 57)
(Preparation of benzylsulfonyl-dSer (tBu) -Ala-3-isopropyloxyamidino-6-aminomethylpyridine (11-9))
[0313]
Embedded image

Compound (11-8) of Example 56 (181 mg, 0.48 mmol) was dissolved in dioxane (1 ml) and treated with 4N HCl in dioxane (1 ml) at room temperature for 1.5 hours. The solvent was removed under reduced pressure to give 200 mg of a white solid. This product was then dissolved in acetonitrile (5 ml), neutralized with diisopropylethylamine (298 μl, 1.71 mmol), and EDC (109 mg, 0.57 mmol) and HOBt (96 gm, 0.63 mmol) as coupling agents Using BnSO ₂ -Coupled to dSer (tBu) OH (180 mg, 0.57 mmol). After stirring overnight at room temperature, the solvent was removed under reduced pressure and the resulting residue was diluted with ethyl acetate. The organic layer was washed several times with sodium bicarbonate (saturated) and brine, dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated to give a solid (250 mg, 76%). The product eluted at 11.5 minutes by reverse phase (C18) HPLC (0.1% trifluoroacetic acid in 5-75% aqueous acetonitrile over 20 minutes). MS (electrospray): 577 (M + 1).
[0314]
(Example 58)
(Preparation of benzylsulfonyl-dSer-Ala-3-isopropyloxyamidino-6-aminomethylpyridine (11-10))
[0315]
Embedded image

Compound (11-9) of Example 57 (137 mg, 0.24 mmol) was treated with 2 ml each of dichloromethane and trifluoroacetic acid at room temperature for 1 hour. Removal of the solvent under reduced pressure gave 169 mg of an orange oil. The product eluted at 9 minutes by reverse phase (C18) HPLC (0.1% trifluoroacetic acid in 5-90% aqueous acetonitrile over 20 minutes).
[0316]
(Example 59)
(Preparation of benzylsulfonyl-dSer-Ala-3-amidino-6-aminomethylpyridine (11-11))
[0317]
Embedded image

The product of Example 58 (11-10) (74 mg, 0.14 mmol) in water (8 ml) and acetic acid (0.8 ml) was treated with active zinc (91 mg) for 45 minutes. The solution was filtered and the filtrate was purified by reverse phase HPLC (C18). The product eluted at 11 minutes by reverse phase HPLC (0.1% trifluoroacetic acid in 5-25% aqueous acetonitrile over 20 minutes). MS (electrospray): 463 (M + l).
[0318]
(B. Synthesis route of specific intermediate compound)
(I) Examples 60-97 describe the synthesis of certain intermediates used in preparing compounds of the present invention. See also FIGS.
(Example 60)
(Preparation for synthesis of D-Ser (Ot-Bu) -Ala-OMe acetate (1-3))
[0319]
Embedded image

N-α-Cbz-D-serine (1-1) (Bachem, 4.97 g, 16.8 mmol), alanine methyl ester hydrochloride (1-2) (Novabiochem, 4.7 g, 33.7 mmol), EDC ( 6.5 g, 33.7 mmol), and 1-hydroxybenzotriazole (2.6 g, 16.8 mmol) were combined and acetonitrile (67 ml) was added. After stirring as a slurry for 10 minutes, diisopropylethylamine (14.4 ml, 84 mmol) was added and the resulting clear mixture was stirred for another 18 hours. The solvent was removed under reduced pressure and the residue was suspended in ethyl acetate (500ml). The solution was washed with 0.5M HCl (2 × 100 ml), followed by saturated sodium bicarbonate (2 × 100 ml) and brine (100 ml). The organic layer was then dried over sodium sulfate and the solvent was removed under reduced pressure to give Cbz-D-Ser (Ot-Bu) -Ala-OMe by reversed phase (C18) HPLC (over 20 min. In 0.1% trifluoroacetic acid in 5-75% aqueous acetonitrile, t _R = 16.9) as a single peak in quantitative yield.
[0320]
Cbz-D-Ser (Ot-Bu) -Ala-OMe was then dissolved in ethanol / acetic acid / water (150 ml of a 4: 1: 1 mixture). The flask was filled with nitrogen and 10% palladium on carbon (1.5 g) was added. The mixture was hydrogenated at 45 psi for 2 hours. The palladium catalyst was filtered and the solvent was removed under reduced pressure to give 4.58 g (95% yield) of the title compound by reverse phase (C18) HPLC (5-75% aqueous acetonitrile over 20 min. In 1% trifluoroacetic acid, t _R = 8.0 min) as a single peak. MS (M + H = 247.2).
[0321]
(Example 61)
(Preparation of benzenesulfonyl-D-Ser (Ot-Bu) -Ala-OMe (1-4))
[0322]
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To a stirred slurry of compound (1-3) of Example 60 (1.0 g, 3.3 mmol) in acetonitrile (13 ml) was added benzenesulfonyl chloride (0.87 g, 4.9 mmol). To this mixture was added diisopropylethylamine (1.67 ml, 9.8 mmol) in 5 portions over 1 hour. The mixture was stirred for another hour. The solvent was removed under reduced pressure and the residue was suspended in ethyl acetate (100ml). The solution was washed with 0.5M HCl (2 × 10 ml), followed by saturated sodium bicarbonate (2 × 10 ml) and brine (1 × 10 ml). The organic layer was then dried over sodium sulfate and the solvent was removed under reduced pressure. The residue was purified by flash chromatography (eluting with 50% hexane / ethyl acetate) to give 0.54 g, 1.4 mmol of product in 43% yield. The product was purified by reverse phase (C18) HPLC (0.1% trifluoroacetic acid in 5-75% aqueous acetonitrile over 20 min. _R = 20.2 min). ¹ H NMR (CD ₃ OD): 7.5-7.9 ppm (m, 5H), 4.3 ppm (q, 1H), 3.9 ppm (t, 1H), 3.7 (s, 3H), 3.4 ppm (m, 1H). ), 3.5 (m, 1H), 1.3 ppm (d, 3H), 1.05 ppm (s, 9H).
[0323]
(Example 62)
(Preparation of benzenesulfonyl-D-Ser (Ot-Bu) -Ala-OH (1-5))
[0324]
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To compound (1-4) of Example 61 (0.53 g, 1.4 mmol) in methanol (9 ml) was added 1.0 M lithium hydroxide (3.0 ml, 3 mmol). After stirring for 18 hours, the reaction mixture was poured onto a column of DOWEX (5 × 8-400) ion exchange resin and eluted with methanol / water (60 ml of a 1: 1 mixture). The methanol was removed under reduced pressure and the remaining water was lyophilized to give 0.49 g, 1.3 mmol (95%) of the title compound by reverse phase (C18) HPLC (5-75% aqueous over 20 min. In 0.1% trifluoroacetic acid in acetonitrile, t _R = 13.5 min). ¹ H NMR (CD ₃ OD): 7.9 ppm (d, 2H), 7.6 ppm (t, 1H), 7.5 ppm (t, 2H), 4.25 ppm (q, 1H), 3.9 ppm (t, 1H), 3. 5 ppm (m, 1H), 3.4 ppm (m, 1H), 1.3 ppm (d, 3H), 1.075 ppm (s, 9H).
[0325]
(Example 63)
(Preparation of Benzylsulfonyl-D-Ser (Ot-Bu) -OMe)
[0326]
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To a stirred solution of D-serine (Ot-Bu) methyl ester hydrochloride (2.07 g, 9.8 mmol) in acetonitrile (39 ml) was added α-toluenesulfonyl chloride (1.86 g, 9.8 mmol). did. To this mixture was added diisopropylethylamine (3.7 ml, 21.5 mmol) in 5 portions over 1 hour. The mixture was stirred for another hour. The solvent was removed under reduced pressure and the residue was suspended in ethyl acetate (100ml). The solution was washed with 0.5 M HCl (2 × 100 ml), followed by saturated sodium bicarbonate (2 × 10 ml) and brine (1 × 10 ml). The organic layer was dried over sodium sulfate and the solvent was removed under reduced pressure to give 2.84 g of the title compound in 88% yield. R _f = 0.4 (4: 1 ethyl acetate: hexane).
[0327]
(Example 64)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-Ser (Ot-Bu) -OH)
[0328]
Embedded image

To a stirred solution of the compound of Example 63 (2.66 g, 8.1 mmol) in methanol (54 ml) was added 1.0 M lithium hydroxide (17.8 ml, 17.8 mmol). The reaction mixture was stirred for 18 hours, then poured onto a column of 10 ml DOWEX (50 × 8-400) ion exchange resin and eluted with methanol: water (60 ml of a 1: 1 mixture). The methanol was removed under reduced pressure and the remaining aqueous solution was lyophilized to give 2.47 g of the title compound in 97% yield. t _R = 14.8 minutes (0.1% trifluoroacetic acid in 5-75% aqueous acetonitrile over 20 minutes).
[0329]
(Example 65)
(Preparation of Benzylsulfonyl-D-Ser (Ot-Bu) -Ala-OMe)
[0330]
Embedded image

The compound of Example 64 (1.0 g, 3.2 mmol), alanine methyl ester hydrochloride (Novabiochem, 0.89 g, 6.3 mmol), EDC (1.22 g, 6.3 mmol), and 1-hydroxybenzotriazole ( 0.49 g, 3.2 mmol) were combined and acetonitrile (13 ml) was added. After stirring the resulting slurry for 10 minutes, diisopropylethylamine (2.71 ml, 15.8 mmol) was added and the resulting clear mixture was stirred for another 18 hours. The solvent was removed under reduced pressure and the residue was suspended in ethyl acetate (100ml). The solution was washed with 0.5M HCl (2 × 10 ml), followed by saturated sodium bicarbonate (2 × 10 ml) and brine (1 × 10 ml). The organic layer was then dried over sodium sulfate and the solvent was removed under reduced pressure to give 1.22 g of the title compound in 97% yield. t _R = 16.2 minutes (0.1% trifluoroacetic acid in 5-75% aqueous acetonitrile over 20 minutes).
[0331]
(Example 66)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-Ser (Ot-Bu) -Ala-OH)
[0332]
Embedded image

To the compound of Example 65 (1.22 g, 3.1 mmol) in methanol (22 ml) was added 1 M lithium hydroxide (7.2 ml, 7.2 mmol). After stirring for 18 hours, the reaction mixture was poured onto a column of 10 ml DOWEX (50 × 8-400) ion exchange resin and eluted with methanol: water (60 ml of a 1: 1 mixture). The methanol was removed under reduced pressure and the aqueous solution was lyophilized to give 1.16 g of the title compound in 91% yield. t _R = 13.2 minutes (0.1% trifluoroacetic acid in 5-75% aqueous acetonitrile over 20 minutes).
[0333]
(Example 67)
(Preparation of i-butoxycarbonyl-D-Ser (Ot-Bu) -OMe)
[0334]
Embedded image

To a stirred, homogeneous solution of HCl-D-Ser (Ot-Bu) -OMe (15 g, 71 mmol, Bachem) in tetrahydrofuran (200 ml) was added saturated sodium bicarbonate (80 ml), followed by isobutyl chloroformate. (19.45 g, 142 mmol) was added. The layers were separated and the aqueous layer was washed with ethyl acetate (50ml). The organic phases were combined and the solvent was removed under reduced pressure. The residue was suspended in ethyl acetate (100ml) and washed with 1M HCl (100ml), saturated sodium bicarbonate (100ml), and brine (100ml). The organic layer was dried over magnesium sulfate, treated with decolorizing carbon (eg, sold under the trade name Darco), filtered, and the solvent was removed under reduced pressure to give a quantitative yield. The title compound was obtained. R _f = 0.3 (20% ethyl acetate / hexane).
[0335]
(Example 68)
(Preparation of i-butoxycarbonyl-D-Ser (Ot-Bu) -OH)
[0336]
Embedded image

To a stirred solution of the compound of Example 67 (19.51 g, 70 mmol) in tetrahydrofuran (78 ml) was added lithium hydroxide (78 mmol, 3.28 g). The reaction mixture was stirred vigorously for 3 hours until no starting material was observed by TLC (20% ethyl acetate / hexane). The solution was acidified to about pH 2 with concentrated HCl and the solvent was removed under reduced pressure. The crude product was suspended in ethyl acetate and extracted with saturated sodium hydrogen carbonate (2x, 75ml). The combined sodium bicarbonate washes were acidified with 6M HCl, and the separated oil was extracted with ethyl acetate (2 × 100 ml). The combined organic layers were dried over magnesium sulfate, treated with Darco, filtered, and the solvent was removed under reduced pressure to give a quantitative yield of the title compound. R _f = 0.01 (20% ethyl acetate in hexane).
[0337]
(Example 69)
(Preparation of i-butoxycarbonyl-D-Ser (Ot-Bu) -Ala-OMe)
[0338]
Embedded image

Compound of Example 68 (16.5 g, 63 mmol), HCl-Ala-OMe (10.6 g, 76 mmol), 1-hydroxybenzotriazole (10.2 g, 76 mmol) in acetonitrile (280 ml), and EDC (16. To a solution (0 ° C.) of (33 g, 85 mmol) was added 4-methylmorpholine (35 ml, 315 mmol). The mixture was stirred at 0 ° C. for 1 hour and then at ambient temperature for 72 hours. The solvent was removed under reduced pressure and the resulting residue was suspended in ethyl acetate (300ml) and 1M HCl (350ml). The aqueous layer was separated and washed with ethyl acetate (300ml). The combined ethyl acetate layers were washed with 1M HCl (300 ml), saturated sodium bicarbonate (400 ml), and brine (200 ml). The organic layer was dried over magnesium sulfate, treated with Darco decolorizing carbon and filtered. The solvent was removed under reduced pressure to give 21.48 g of the title compound (98% yield).
[0339]
(Example 70)
(Preparation of i-butoxycarbonyl-D-Ser-Ala-OH)
[0340]
Embedded image

The compound of Example 69 (21 g, 58 mmol) was dissolved in trifluoroacetic acid (110 ml); the resulting mixture was stirred for 35 minutes. The solution was cooled in an ice bath and saturated sodium bicarbonate (630 ml) was added, followed by solid sodium bicarbonate (70 g) over a period of 45 minutes until pH = 7. This aqueous solution was extracted with ethyl acetate (3 × 250 ml). The combined organic extracts were combined, dried over magnesium sulfate, treated with Darco decolorizing carbon, and filtered. The solvent was removed under vacuum to give a quantitative yield of i-butoxycarbonyl-D-Ser-Ala-OMe.
[0341]
To a stirred solution of the crude residue in tetrahydrofuran (68 ml) was added lithium hydroxide (2.7 g, 64 mmol, 1.1 eq.) In water (17 ml). The reaction mixture was stirred vigorously for 0.5 h until no more starting material was observed as observed by TLC (9: 1 dichloromethane / isopropanol). The solution was acidified with 6 M HCl (13 ml) to about pH 2 and the solvent was removed under reduced pressure. The crude product was suspended in ethyl acetate (400ml) and water (50ml). The aqueous layer was extracted with ethyl acetate (200ml). The combined organic layers were dried over magnesium sulfate, filtered, and the solvent was removed under vacuum to give 13.94 g of the title compound (86% yield). R _f = 0.3 (90: 30: 5 chloroform / methanol / acetic acid).
[0342]
(Example 71)
(Preparation of N-α- (3-phenylpropyl) -D-serine-t-butyl ether methyl ester)
[0343]
Embedded image

Serine Ot-butyl ether methyl ester (1.50 g, 7.1 mmol), hydrocinnamaldehyde (1.40 ml, 10.6 mmol), and triethylamine (1.18 ml, 8.5 mmol) in tetrahydrofuran (70 ml). Refluxed for 4 hours. After allowing the solution to cool to room temperature, sodium borohydride (0.46 g, 12 mmol) was added to the stirring solution in two portions. The reaction mixture was stirred at ambient temperature for 30 minutes; the solution was concentrated under reduced pressure. This residue was partitioned between ethyl acetate 1.0 M HCl. The organic layer was washed with 1.0N HCl. The aqueous layer was basified with 40% NaOH to pH 10, then extracted with ethyl acetate (2x). Layers were dried over sodium sulfate; the solvent was removed under vacuum. The residue was purified by flash chromatography on silica gel (1 × 6 inch column) eluting with 10-30% ethyl acetate / hexane to give 150 mg (7% yield) of the title compound. R _f = 0.60 (50% ethyl acetate / hexane).
[0344]
(Example 72)
(Preparation of N-α-t-butoxycarbonyl-N-α- (3-phenylpropyl) -D-serine-t-butyl ether methyl ester)
[0345]
Embedded image

Example 71 (150 mg, 0.51 mmol), di-t-butyl dicarbonate (167 mg, 0.77 mmol) and diisopropylethylamine (0.13 ml, 0.77 mmol) in tetrahydrofuran (2 ml) at ambient temperature And stirred overnight. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was diluted with ethyl acetate (20 ml) and washed sequentially with 1.0 N HCl (2 ×), saturated sodium bicarbonate (2 ×), and brine (1 ×). The solvent was removed under vacuum to give 206 mg of the title compound in quantitative yield. R _f = 0.74 (50% ethyl acetate / hexane).
[0346]
(Example 73)
(Preparation of N-α-t-butoxycarbonyl-N-α- (3-phenylpropyl) -D-serine-t-butyl ether)
[0347]
Embedded image

To a solution of the compound of Example 72 (206 mg, 0.52 mmol) in methanol (3.5 ml) was added 1.0 N LiOH (0.63 ml, 0.63 mmol) dropwise. The solution turned cloudy and then became homogenous in 5 minutes. The reaction mixture was allowed to stir at ambient temperature overnight. Additional 1.0 N LiOH (1.47 ml) was added. After 2 hours, an additional 1.0 N LiOH (1.0 ml) was added. After no more starting material was observed by TLC (50% ethyl acetate / hexane), the reaction mixture was acidified to pH 4 using DOWEX (50 × 8-400) ion exchange resin. The solution was filtered, rinsed with methanol and then with water. The solution was concentrated under reduced pressure and then lyophilized to give 189 mg of the title compound (95% yield) as a yellow oil. R _f = 0.04 (50% ethyl acetate / hexane).
[0348]
(Example 74)
(Preparation of i-butoxycarbonyl-D-Ser (Ot-butyl) -OH (2-2))
[0349]
Embedded image

To a solution of D-serine-Ot-butyl ether (2-1) (10.5 g, 65.3 mmol) in water (51 ml) was added sodium carbonate (20.1 g, 196.2 mmol), Isobutyl chloroformate (9.8 ml, 75.2 mmol) was added. After 3 hours, the mixture became cloudy and was stirred for a further 3 hours. After 6 hours, the solution was acidified with 6M HCl (about 50 ml). Then the reaction mixture was extracted with ethyl acetate (3 × 200 ml). After the first extraction, the aqueous layer was saturated with sodium chloride and extracted with ethyl acetate (2 × 200 ml). The ethyl acetate layers were combined and dried over sodium sulfate, then the solvent was removed under vacuum to give 17.0 g (99.5% yield) of the title compound as a white solid. HPLC: t = 18.5 min (5% to 75% acetonitrile gradient in 0.1% aqueous TFA buffer), 4.6 × 250 mm, 5 micron particles, 100 Å pore, C18 column, 1 ml / min flow rate ). NMR (CDC1 ₃ ): 5.5 ppm (m, 1H), 4.45 ppm (bs, 1H), 3.82 to 3.95 ppm (m, 3H), 3.52 to 3.6 ppm (m, 1H), 1.85 1.97 ppm (m, 1H), 1.2 ppm (s, 9H), 0.9 ppm (d, 6H).
[0350]
(Example 75)
(Preparation of i-butoxycarbonyl-D-Ser (t-Bu) -L-Ala-Ot-Bu (2-3))
[0351]
Embedded image

Compound (2-2) of Example 74 (10 g, 38.3 mmol), L-alanine t-butyl ester, HCl salt (10.43 g, 57.4 mmol) in acetonitrile (153 ml), EDC (11.05 g, A solution of 57 mmol) and hydroxybenzotriazole (5.85 g, 38.3 mmol) was stirred at room temperature for 15 minutes. Diisopropylethylamine (32.7 ml, 191 mmol) was added and the reaction mixture was stirred for 18 hours. The solvent was removed under reduced pressure: the resulting residue was resuspended in ethyl acetate (1000 ml) and 1M HCl (100 ml). The ethyl acetate layer was washed with 0.5 M HCl (100 ml), saturated sodium bicarbonate (2 × 100 ml), and brine (100 ml). The ethyl acetate layer was dried over sodium sulfate and the solvent was removed under vacuum to give a quantitative yield of the title compound. HPLC: t _r = 18.7 minutes (5% to 90% acetonitrile gradient (in 0.1% aqueous TFA buffer), 4.6 x 250 mm, 5 micron particles, 100 Angstrom pore, C18 column, 1 ml / min flow rate). NMR (CDCl ₃ ): 7.15 ppm (bs, 1H), 5.6 ppm (bs, 1H), 4.4 to 4.5 ppm (m, 1H), 4.2 ppm (bs, 1H), 3.87 to 3.95 ppm ( m, 3H), 3.3-3.4 ppm (m, 1H), 1.85-1.95 ppm (m, 1H), 1.45 ppm (s, 9H), 1.39 ppm (d, 3H), 1 .2 ppm (s, 9H), 0.9 ppm (d, 6H).
[0352]
(Example 76)
(Preparation of i-butoxycarbonyl-D-Ser-L-Ala-OH (2-4))
[0353]
Embedded image

To a solution of the compound of Example 75 (2-3) (7.15 g, 18.4 mmol) in dichloromethane (35 ml) was added trifluoroacetic acid (35 ml). The mixture was stirred for 2 hours, then the solvent was removed under reduced pressure. Toluene was added and the solvent was transferred to a vacuum to remove trifluoroacetic acid. The yield of the title compound as a sticky yellow oil was then transferred to the next step. A gradient of 5% to 90% acetonitrile in 0.1% aqueous TFA buffer at 4.6 × 250 mm, 5 micron particles, 100 Å pore, C18 column at a flow rate of 1 ml / min, t _r = 10.5 minutes.
[0354]
(Example 77)
(Preparation of 2-cyano-5-methylthiophene (3-2))
[0355]
Embedded image

A solution of 2-bromo-5-methylthiophene (3-1) (TCI chemicals, 5 g, 28 mmol) and copper (I) cyanide (Aldrich, 2.53 mg, 28 mmol) in DMF (10 ml) at reflux for 4 hours Heated. After cooling to ambient temperature, ethyl acetate (500 ml) and 10% aqueous NaCN (500 ml) were added. After separation of the aqueous and organic phases, the aqueous phase was extracted with ethyl acetate (300 ml). The combined organic phases were concentrated to an oil, which was further purified by flash column chromatography (ethyl acetate) to give the title compound (3.03 g, 87%). TLC: Rf 0.30 (1: 1 hexane / ethyl acetate); ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 2.55 (m, 3H), 6.76 (d, 1H, J = 3.6 Hz), 7.42 (d, 1H, J = 3.6 Hz).
[0356]
(Example 78)
(Preparation of 2-cyano-5- (bromomethyl) thiophene (3-3))
[0357]
Embedded image

CCl ₄ (Aldrich, 60 ml), 2-cyano-5-methylthiophene (compound 3-2, 3.0 mg, 24 mmol), N-bromosuccinimide (Aldrich, 4.8 g, 27 mmol) and 2,2′-azobisiso A solution of butyronitrile (Aldrich, 0.4 g, 2.4 mmol) was heated at reflux for 5 hours. After cooling to ambient temperature, the solvent was removed under vacuum to give a yellow oil. The oil was purified by flash column chromatography (1: 1 hexane / ethyl acetate) to give the title compound (4.5 g, 91%). TLC: Rf 0.91 (1: 1 hexane / ethyl acetate); ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 4.66 (s, 2H), 7.10 (d, 1H, J = 3.8 Hz), 7.48 (d, 1H, J = 3.8 Hz).
[0358]
(Example 79)
(Preparation of 2-cyano-5- (azidomethyl) thiophene (3-4))
[0359]
Embedded image

A solution of 2-cyano-5- (bromomethyl) thiophene (compound 3-3, 3.5 g, 17.3 mmol) and sodium azide (Aldrich, 1.7 g, 26 mmol) in DMF (Aldrich, 60 ml) was added to the surroundings. Stirred at temperature for 10 hours. Flash column chromatography (20% ethyl acetate in hexane) provided the title compound (2.35 g, 83%). TLC: Rf 0.48 (20% ethyl acetate in hexane); ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 4.56 (s, 2H), 7.01 (d, 1H, J = 3.7 Hz), 7.55 (d, 1H, J = 3.7 Hz).
[0360]
(Example 80)
(Preparation of 2-cyano-5- (aminomethyl) thiophene (3-5))
[0361]
Embedded image

Triphenylphosphine (Aldrich, 5.7 g) was added to a solution of 2-cyano-5- (azidomethyl) thiophene (compound 3-4, 2.5 g, 10 mmol) in THF (Aldrich, 40 ml) and water (10 ml). At 0 ° C. The aqueous solution was warmed to room temperature and stirred at ambient temperature for 10 hours. RP-HPLC purification provided the title compound (2.3 g, 94%). MS (Electrospray): 139 (M + 1); ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 4.01 (s, 2H), 4.75 (br s, 2H, NH ₂ 6.82 (d, 1H, J = 3.5 Hz); 7.08 (d, 1H, J = 3.5 Hz).
[0362]
(Example 81)
(Preparation of 2-cyano-5- (t-butoxycarbylaminomethyl) thiophene (3-6))
[0363]
Embedded image

Potassium carbonate (Aldrich, 2 g) was added to 2-cyano-5- (aminomethyl) thiophene (3-5, 0.6 g, 4 mmol) in water (4 ml) and 1,4-dioxane (Aldrich), Boc ₂ O (Fluka, 0.95 g, 4 mmol) was added to the solution. The resulting mixture was stirred at ambient temperature for 12 hours. Flash column chromatography (1: 1 hexane / ethyl acetate) provided the title compound (0.58 g, 56%). MS (Electrospray): 239 (M + 1); ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 1.44 (s, 9H), 4.55 (s, 2H), 4.90 (br s, 1H, NH); 6.88 (d, 1H, J = 3.6 Hz); 7.07 (D, 1H, J = 3.6 Hz).
[0364]
(Example 82)
(Preparation of 2- (N-hydroxyamidinyl) -5- (t-butoxycarbonylaminomethyl) thiophene (3-7))
[0365]
Embedded image

2-cyano-5- (t-butoxycarbylaminomethyl) thiophene (compounds 3-6, 560 mg, 2.44 mmol), hydroxylamine hydrochloride (Aldrich, 330 mg, 4.8 mmol) and 4 in methanol (5 ml) A solution of -methylmorpholine (Aldrich, 1 ml, 9.1 mmol) was stirred at ambient temperature for 12 hours. The resulting mixture was stirred at ambient temperature for 12 hours. Flash column chromatography (5: 95: 1 isopropyl alcohol / methylene chloride / triethylamine) provided the title compound (550 mg, 86%). MS (electrospray): 272 (M + 1).
[0366]
(Example 83)
(Preparation of 2-amidinyl-5- (aminomethyl) thiophene (3-8))
[0367]
Embedded image

10% of Pd-on-C (Aldrich, 100 mg) was added to 2- (N-hydroxyamidinyl) -5- (t-butoxycarbonylaminomethyl)) thiophene (Compound 3-7, 900 mg, 3.3 mmol). The resulting mixture was hydrogenated in a Parr apparatus at room temperature for 10 hours (H ₂ 45 psi). The catalyst was removed by filtration and the solvent was evaporated under vacuum to give the Boc-protected intermediate [900 mg, 94%, MS (electrospray) 256 (M + 1)], which was converted to 1,4-dioxane ( Treatment with 4M HCl in Aldrich (5 ml) at ambient temperature for 3 hours afforded the title compound (460 mg, 84%). MS (electrospray): 56 (M + 1); ¹ H NMR (CD ₃ OD): δ 4.43 (s, 2H), 7.42 (d, 1H, J = 3.5 Hz) 7.78 (d, 1H, J = 3.5 Hz).
[0368]
(Example 84)
(Purification of 2- [N- (propoxy) amidinyl] -5- (aminomethyl) thiophene (3-9))
[0369]
Embedded image

CsCO ₃ (Aldrich, 0.5 g) was treated with 2- (N-hydroxyamidinyl) -5- (t-butoxycarbonylaminomethyl) thiophene (compound 3-7, 271 mg, 1.0 ml) and iodopropane (DMF) in DMF. Aldrich (200 mg, 1.2 mmol). The reaction mixture was stirred at ambient temperature for 10 hours. Flash column chromatography (5: 95: 1 isopropyl alcohol / methylene chloride / triethylamine) gave the Boc protected intermediate [MS (Electrospray) 314 (M + 1)], which was combined with 1,4-dioxane Treatment with 4M HCl in (Aldrich) at ambient temperature for 3 hours afforded the title compound (201 mg, 81%). The title compound (550 mg, 86%) was obtained. MS (electrospray): 214 (M + 1); ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 0.95 (t, 3H, J = 7.5 Hz), 1.55 (brs, 2H, NH ₂ ), 1.70 (m, 2H), 4.00 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 4.01 (d, 2H, J = 7.5 Hz), 4.70 (brs, 2H, NH ₂ ), 6.80 (d, 1H, J = 3.6 Hz), 7.08 (d, 1H, J = 3.6 Hz).
[0370]
(Example 85)
(Preparation of α-azido-4-cyanotoluene (4-2))
[0371]
Embedded image

Sodium azide (Aldrich, 3.5 g, 54 mmol) is added to a solution of p-cyanobenzyl bromide (Aldrich, 10 g, 51 mmol) in DMF (100 ml) and the resulting mixture is stirred at ambient temperature for 5 hours did. The reaction mixture was then diluted with water (350ml) and extracted with ether (2x100ml). The combined organic phases were washed with brine and dried (MgSO ₄ ). Removal of the solvent provided the title compound (8 g, 96%). ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 4.42 (s, 2H), 7.41 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.65 (d, 2H, J = 8.1 Hz).
[0372]
(Example 86)
(Preparation of p-cyanobenzylamine (4-3))
[0373]
Embedded image

10% Pd-on-c (Aldrich, 800 mg) catalyst was added to a solution of α-azido-4-cyanotoluene (Compound 4-2, 8 g, 51 mmol) in EtOAc (150 ml). The reaction mixture was hydrogenated on a Parr apparatus for 11 hours (H ₂ , 45 psi). The catalyst was removed by filtration and the solvent was removed under vacuum to give the title compound (6.3 g, 93%). ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 3.85 (s, 2H), 7.45 (d, 2H, J = 8.1), 7.60 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.78 (s, 2H, NH) ₂ ).
[0374]
(Example 87)
(Preparation of 4- (aminomethyl) phenyl-N-hydroxyamidine (4-4))
[0375]
Embedded image

Hydroxyamine hydrochloride (7 g) was added to a solution of compound 4-3 (7 g) and NMM (4 ml) in methanol (100 ml). The mixture was stirred at ambient temperature for 3 days. This compound was purified by RP HPLC to give the title compound (7 g, 89%). MS (Electrospray): 166 (M + 1).
[0376]
(Example 88)
(Preparation of 4- (aminomethyl) phenylamidine (4-5))
[0377]
Embedded image

10% Pd-on-c (Aldrich, 800 mg) was added to a solution of 4- (aminomethyl) phenyl-N-hydroxyamidine (Compound 4-4, 7 g) in methanol (150 ml). The reaction mixture was hydrogenated in a Parr apparatus for 48 hours (H ₂ , 45 psi). The catalyst was removed by filtration and the solvent was removed under vacuum to give the title compound (6.3 g, 99%). MS (electrospray): 150 (M + 1).
[0378]
(Example 89)
(Preparation of 2-fluoro-4-cyanotoluene (5-2))
[0379]
Embedded image

Copper (I) cyanide (Aldrich, 3.6 g, 40 mmol) was added to a solution of 4-bromo-2-fluorotoluene (Aldrich, 5 g, 27 mmol) in DMF (60 ml). The reaction mixture was heated at 150 ° C. for 11 hours. After cooling to room temperature, the mixture was partitioned between water and EtOAc (500 ml each). Dry the organic phase (MgSO 4 ₄ ) And the solvent was removed under vacuum to give the title compound (2.08, 58%). . ¹ H NMR (CDCl ₃ ): Δ 2.36 (s, 3H), 7.30 (m, 3H), 7.35 (d, 1H, J = 8.1 Hz).
[0380]
(Example 90)
(Preparation of 3-fluoro-4- (bromomethyl) benzonitrile (5-3))
[0381]
Embedded image

NBS (Aldrich, 3.02 g, 17 mmol) and benzoyl peroxide (Aldrich, 0.37 g, 1.5 mmol) were added to CCl ₄ Was added to a solution of 2-fluoro-4-cyanotoluene (compound 5-2, 2.08 g, 15 mmol) therein. The reaction mixture was heated at 80 C for 14 hours. After cooling to ambient temperature, the mixture was diluted with ether (100 ml) and aqueous Na ₂ S ₃ O ₃ And dried (MgSO 4) ₄ )did. Removal of the solvent under vacuum led to a yellow oil, which was purified by flash chromatography. The title compound 5-3 (1.4 g, 42%) was obtained with a by-product (3-fluoro-4- (bromomethyl) benzonitrile (5-4) (1.0 g, 30%)). For the title compound (5-3): ¹ 1 H NMR (CDC1 ₃ ): Δ 4.46 (s, 2H), 7.35 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.42 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.52 (t, 1H, J = 8.0 Hz). By-product (5-4): ¹ 1 H NMR (CDC1 ₃ ): Δ 6.90 (s, 1H), 7.35 (d, IH, J = 8.0 Hz), 7.55 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.96 (t, 1H, J) = 8.0 Hz).
[0382]
(Example 91)
(Preparation of 3-fluoro-4- (azidomethyl) benzonitrile (5-5))
[0383]
Embedded image

Sodium azide (Aldrich, 0.63 g, 9.8 mmol) was added to a solution of 3-fluoro-4- (bromomethyl) benzonitrile (Compound 5-3, 1.4 g, 6.5 mmol) in DMF (15 ml). Was added. After stirring at ambient temperature for 20 hours, the reaction mixture was partitioned between EtOAc and water (100 mL each). The organic layer is then dried (MgSO 4 ₄ ) And the solvent was removed in vacuo to give the title compound (0.995 g, 86%). ¹ 1 H NMR (CDC1 ₃ ): Δ 4.50 (S, 2H), 7.38 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.52 (m, 2H).
[0384]
(Example 92)
(Preparation of 3-fluoro-4- (azidomethyl) phenyl-N-hydroxyamidine (5-6))
[0385]
Embedded image

Hydroxylamine hydrochloride (Aldrich, 800 mg, 11.6 mmol) was treated with 3-fluoro-4- (azidomethyl) benzonitrile (compound 5-5, 1.2 g, 6.8 mmol) and NMM (2 ml) in methanol (25 ml). ). After stirring at room temperature for 3 days, the reaction mixture was diluted with EtOAc and washed with brine. The solvent was removed under vacuum to yield the title compound (1.38, 82%). ¹ H NMR (CD ₃ OD): [delta] 4.41 (s, 2H), 7.45 (m, 3H).
[0386]
(Example 93)
(Preparation of 3-fluoro-4- (azidomethyl) phenyl (-N-propyloxy) amidine (5-7))
[0387]
Embedded image

Cesium carbonate (Aldrich, 3.2 g, 9.9 mmol) was added to iodopropane (1 ml, 10 mmol) and 3-fluoro-4- (azidomethyl) phenyl-N-hydroxyamidine (compound 5- 6, 1.38 g, 6.6 mmol). The reaction mixture was heated at 50 C for 20 hours. After cooling to ambient temperature, water was added and the resulting mixture was extracted with ether. The organic layer is washed with brine and dried (MgSO ₄ )did. Flash chromatography provided the title compound (1.03 g, 62%). ¹ 1 H NMR (CDC1 ₃ ): Δ 0.99 (t, 3H, J = 7.5 Hz), 1.75 (m, 2H), 4.08 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 4.40 (s, 2H), 4.78 (br s, 2H), 7.40 (m, 3H).
[0388]
(Example 94)
(Preparation of 3-fluoro-4- (aminomethyl) phenyl (-N-propyloxy) amidine (5-8))
[0389]
Embedded image

Triphenylphosphine (Aldrich, 1.6 g, 6.2 mmol) was added to 3-fluoro-4- (azidomethyl) phenyl (-N-propyloxy) amidine (1.03 g of compound 5-7, THF, 15 ml). 4.1 mmol). The reaction mixture was stirred at ambient temperature for 20 hours. NaOH (3M) was added to the reaction mixture until pH = 14. The resulting solution was extracted with EtOAc (2 × 100 ml). The combined organic layers are washed with brine and dried (MgSO ₄ )did. The solvent was removed under vacuum to give the title compound (825mg, 77%). ¹ H NMR (CD ₃ OD): δ 0.98 (t, 3H, J = 7.5 Hz), 1.72 (m, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.95 (t, 2H, J = 7.5 Hz) , 7.35 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.40 (m, 2H)
(Example 95)
(Preparation of N-α-benzyloxycarbonyl-D-Ser (Ot-butyl) -L-Alat-butyl ester)
[0390]
Embedded image

To a solution of N-α-Cbz-D-serine t-butyl ether (5.02 g, 17 mmol) in acetonitrile (100 ml) was added EDC (4.90 g, 25.5 mmol, 1.5 equivalents) and 1-hydroxybenzo. Triazole (2.60 g, 17 mmol) was added. After stirring for 45 minutes, alanine t-butyl ester, HCl salt (3.55 g, 19.6 mmol, 1.15 eq) and 4-methylmorpholine (7.5 ml, 68 mmol, 4 eq) were added. The reaction mixture was stirred for 1.5 hours. TLC showed the reaction was complete. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. This residue was dissolved in ethyl acetate (100 ml) and then washed successively with 1 N HCl, saturated sodium bicarbonate, water and brine (25 ml each). The solvent was removed in vacuo to give an oil which crystallized on standing. The title compound (6.95 g) was obtained in 97% yield as a pale yellow solid. R _f = 0.63 (5% isopropanol in dichloromethane).
[0391]
(Example 96)
(Preparation of D-Ser (Ot-butyl) -L-Alat-butyl ester)
[0392]
Embedded image

A solution of the compound of Example 95 (1.14 g, 2.69 mmol) in methanol was cured over palladium hydroxide (110 mg) at balloon pressure for 1.5 hours. The reaction mixture was filtered through celite and the solvent was removed in vacuo to yield the title compound as a yellow oil in quantitative yield. R _f = 0.44 (5% methanol in dichloromethane).
[0393]
(Example 97)
(Preparation of phenethylsulfonyl-D-Ser (Ot-butyl) -L-Alat-butyl ester)
[0394]
Embedded image

To a stirred solution of the compound of Example 96 (4.2 g, 14.6 mmol) and phenethylsulfonyl chloride (3.58 g, 17.5 mmol, 1.2 equiv) in acetonitrile (100 ml) cooled in an ice bath was added , 4,6-collidine (4.8 ml, 36.5 mmol, 2.5 equiv) was added. The reaction mixture was allowed to warm to room temperature and then stirred overnight. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was dissolved in ethyl acetate (80 ml); the resulting solution was washed successively with 1.0 N HCl, saturated sodium bicarbonate, water and brine, then dried over sodium sulfate. The solvent was removed with Invacuo. The residue was chromatographed over silica gel, eluting with 0-60% ethyl acetate / hexane. The title compound was isolated as a yellow oil in 89% yield. Rf = 0.84 (5% methanol in dichloromethane).
[0395]
(C. Synthesis route of compound having acyl ester or carbonate at P3)
(Example 98)
(Preparation of n-butylsulfonyl-D- (isopropyloxycarbonyl) serine-alanine-4-amidinobenzylamide)
[0396]
Embedded image

To a solution of the compound of Example 9 (2.32 g, 4.3 mmol) in pyridine (100 ml) cooled in an ice bath was added isopropyl chloroformate (21 ml of a 1 M solution in toluene, 21 mml, 5 eq). The reaction was monitored by analytical HPLC until determined to be complete. The reaction mixture was diluted with toluene (300 ml); the solvent was removed under reduced pressure. The residue was dissolved in acetonitrile (400ml) and the solvent was removed under reduced pressure. The residue was dissolved in acetonitrile (30ml) and ethyl acetate (30ml). Ether was added and the precipitate was isolated. The solid was washed with ether and then dried in Invacuo. The solid was washed with ether and ethyl acetate (2 × 200 ml of a 1: 1 mixture) and then dried in vacuo to give the title compound.
[0397]
(Example 99)
Following the protocol of Example 98, using the famous substitution of isopropyl chloroformate, the following compounds were prepared:
[0398]
[Table 1]

(Example 100)
(Preparation of (4-amino-3-nitro-benzyl) -carbamic acid tert-butyl ester)
[0399]
Embedded image

BH in THF (1 M, 40 mL) ₃ Was added dropwise over 10 minutes to a stirred solution of 4-amino-3-nitro-5-benzonitrile (1.5 g, 9.2 mmol) in THF (20 mL) while cooling in an ice bath. . The yellow mixture obtained upon warming to room temperature was stirred for 2 hours and quenched at 0 ° C. with HCl (6M, 20 mL). The solvent is removed under vacuum; ₂ Dilute with O and adjust the pH to about 10 using NaOH (1M). CH layer ₂ Cl ₂ (3 × 50 mL). The combined organic layers are ₂ SO ₄ And dried. The solvent was removed, yielding 1.2 g (78%) of a yellow solid, which was used for the next synthetic step without further purification.
[0400]
The solid (500 mg, 3.0 mmol) was added to a homogeneous mixture of BOC-ON (754 mg, 3.0 mmol) in THF (10 mL). The resulting mixture was stirred overnight at room temperature. The mixture is treated with NaHCO ₃ Diluted with aqueous solution, CH ₂ Cl ₂ (3 × 50 mL). The combined organic layers were washed with NaSO ₄ And dried. The solvent was removed under vacuum to give an oil. Column chromatography (CH ₂ Cl ₂ / MeOH, 99: 1) to give the title compound as a yellow solid which solidified on standing (760 mg, 95%), MS (electrospray) 268 (M + 1).
[0401]
(Example 101)
(Preparation of (3,4-diamino-benzyl) -carbamic acid tert-butyl ester)
[0402]
Embedded image

(4-Amino-3-nitro-benzyl) -carbamic acid tert-butyl ester (500 mg, 1.87 mmol) and Pd (10% on carbon, 100 mg) in MeOH (10 mL) were treated with H ₂ (40 psi) for 3 hours. The catalyst was removed by filtration and the solvent was removed under vacuum to give an oil which was used immediately in the next step (Example 102).
[0403]
(Example 102)
(Preparation of (2-amino-1H-benzimidazol-5-ylmethyl) -carbamic acid tert-butyl ester)
[0404]
Embedded image

(3,4-Diamino-benzyl) -carbamic acid tert-butyl ester (500 mg, 2.10 mmol) was added to CH ₃ CN / H ₂ CNBr (267 mg, 2.52 mmol) and NaHCO 3 in O (1: 1, 10 mL) ₃ (354 mg, 4.2 mmol) was added and the mixture was stirred for 48 hours. The solvent was removed under vacuum to give a white solid, which was used for the next synthetic step without further isolation. MS (Electrospray) 263 (M + l).
[0405]
(Example 103)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine-5- (2-aminobenzimidazolyl) methylamide)
[0406]
Embedded image

(2-Amino-1H-benzimidazol-5-ylmethyl) -carbamic acid tert-butyl ester (50 mg, 0.3703 mmol) was treated with benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate in acetonitrile (1.0 mL). (111 mg, 0.337 mmol), HATU (192 mg, 0.506 mmol), HOAT (69 mg, 0.506 mmol), and DIEA (174 μL, 1.01 mmol) were added to a stirred solution. The mixture was stirred overnight at room temperature. HPLC purification (CH ₃ CN, H ₂ O, 0.1% TFA) gave a flocculent white solid as the title compound (25 mg, 24%), MS (electrospray) 475 (M + 1).
[0407]
(Example 104)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine-4- (2-aminoimidazolyl) -propylamide)
[0408]
Embedded image

4- (2-Aminoimidazolyl) -propylamine HCl (50 mg, 0.236 mmol) (prepared according to the procedure of Olofson et al., J. Org. Chem. 1998, 63, 1248) was prepared in acetonitrile (1.0 mL). A stirred solution of benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate (78 mg, 0.236 mmol), HATU (179 mg, 0.472 mmol), HOAT (64 mg, 0.472 mmol), and DIEA (164 μL, 0.943 mmol) Added. The mixture was stirred overnight at room temperature. HPLC purification (CH ₃ CN, H ₂ O, 0.1% TFA) to give a flocculent white solid as the title compound. MS (electrospray) 453 (M + l).
[0409]
(Example 105)
(Preparation of (4-amino-2-chloro-benzyl) -carbamic acid tert-butyl ester)
[0410]
Embedded image

BH in THF (1 M, 36 mL) ₃ Was added dropwise over 10 minutes to a stirred solution of 4-amino-2-chloro-5-benzonitrile (2.0 g, 13 mmol) in THF (10 mL) while cooling in an ice bath. The yellow mixture obtained upon warming to room temperature was stirred for 2 hours and quenched at 0 ° C. with HCl (6M, 20 mL). The solvent was removed under vacuum. Residue is H ₂ Dilute with O and adjust the pH to about 10 using NaOH (1M). CH layer ₂ Cl ₂ (3 × 50 mL). The combined organic layers are ₂ SO ₄ And dried. The solvent was removed to give a yellow oil (2.5 g, 100%) which was used without further purification in the next synthetic step.
[0411]
The oil (500 mg, 2.6 mmol) (from the previous step) was added to a homogeneous mixture of BOC-ON (664 mg, 2.7 mmol) in THF (10 mL) and the resulting mixture was stirred at room temperature overnight. . The mixture is treated with NaHCO ₃ Diluted with aqueous solution, CH ₂ Cl ₂ (3 × 50 mL). The combined organic layers were washed with NaSO ₄ And dried. The solvent was removed under vacuum to give a colorless oil. Column chromatography (CH ₂ Cl ₂ / MeOH, 99: 1) gave the title compound as a yellow solid which solidified on standing. MS (electrospray) 257 (M + l).
[0412]
(Example 106)
(Preparation of [(4-BOC-aminomateomethyl) -3-chlorophenyl] -N′-N ″ -bis (tert-butoxycarbonyl) guanidine)
[0413]
Embedded image

(4-Amino-2-chloro-benzyl) -carbamic acid tert-butyl ester (250 mg, 0.978 mmol) was added to CH ₂ Cl ₂ (5 mL) was added to a stirred mixture of NN′-di-Boc-N ″ -trifluoromethanesulfonyl-guanidine (343 mg, 0.879 mmol), TFA (108 μL, 1.28 mmol). The mixture was stirred for 24 hours. This mixture is taken to CH ₂ Cl ₂ (20 mL) and washed with HCl (1 M, 20 mL), brine (10 mL). Organic layer ₂ SO ₄ And dried. The solvent was removed under vacuum to give a solid. Column chromatography (CH ₂ Cl ₂ / MeOH, 99: 1) to give an oil (150 mg, 34%) corresponding to the title compound.
[0414]
(Example 107)
(Preparation of benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine-4-guanidino-2-chlorobenzylamide)
[0415]
Embedded image

CH ₂ Cl ₂ [(4-BOC-aminomateomethyl) -3-chlorophenyl] -N′-N ″ -bis (tert-butoxycarbonyl) guanidine (100 mg, 0.201 mmol) in a mixture of / TFA (1: 1, 2 mL) ) Was stirred at room temperature for 90 minutes. The solvent was removed under vacuum to give a clear oil, which was used for the next synthetic step without further purification.
[0416]
The oil (from the previous step) was combined with benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate (69 mg, 0.209 mmol), HATU (157 mg, 0.418 mmol), HOAT (57 mg) in acetonitrile (5.0 mL). , 0.418 mmol) and DIEA (145 μL, 0.836 mmol). The mixture was stirred overnight at room temperature. HPLC purification (CH ₃ CN, H ₂ O, 0.1% TFA) gave the title compound as a flocculent white solid (25 mg, 24%), MS (electrospray) 511 (M + 1).
[0417]
(Example 108)
(Preparation of (6-amino-pyridin-3-ylmethyl) -carbamic acid tert-butyl ester)
[0418]
Embedded image

BH in THF (1 M, 40 mL) ₃ Was added dropwise over 10 minutes to a stirred solution of 4-amino-2-chloro-5-benzonitrile (2.0 g, 14 mmol) in THF (5 mL) while cooling in an ice bath. The yellow mixture obtained upon warming to room temperature was stirred for 2 hours and quenched at 0 ° C. with HCl (6M, 20 mL). The solvent was removed under vacuum. Residue is H ₂ Dilute with O and adjust the pH to about 10 using NaOH (1M). CH layer ₂ Cl ₂ (3 × 50 mL). The combined organic layers are ₂ SO ₄ The solvent was removed to give a solid (2.8 g, 100%).
[0419]
This solid (2.0 g, 13 mmol) was added to CH 2 ₃ To a homogeneous mixture of BOC-ON (3.4 mg, 14 mmol) in CN (10 mL) was added and the mixture was stirred at room temperature overnight. The mixture is treated with NaHCO ₃ Diluted with aqueous solution, CH ₂ Cl ₂ (3 × 50 mL). The combined organic layers were washed with NaSO ₄ And dried. The solvent was removed under vacuum to give a colorless oil. Column chromatography (CH ₂ Cl ₂ / MeOH, 99: 1) gave the title compound as an oil which solidified on standing. MS (Electrospray) 226 (M + l).
[0420]
(Example 109)
(Preparation of [(3-BOC-aminomateomethyl) -pyridinyl] -N′-N ″ -bis (tert-butoxycarbonyl) guanidine)
[0421]
Embedded image

A portion of (6-amino-pyridin-3-ylmethyl) -carbamic acid tert-butyl ester (400 mg, 1.78 mmol) was converted to CH ₂ Cl ₂ (5 mL) was added to a stirred mixture of NN′-di-Boc-N ″ -trifluoromethanesulfonyl-guanidine (765 mg, 1.96 mmol) and TFA (385 mL, 2.67 mmol). The resulting mixture was stirred for 24 hours. This mixture is taken to CH ₂ Cl ₂ (20 mL) and washed with HCl (1 M, 20 mL), brine (10 mL). Organic layer ₂ SO ₄ And dried. The solvent was removed under vacuum to give a solid. Column chromatography (CH ₂ Cl ₂ / MeOH, 99: 1) to give an oil corresponding to the title compound. MS (electrospray) 466 (M + l).
[0422]
(Example 110)
(Benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine-4-guanidino- (2-pyridinyl) methylamide)
[0423]
Embedded image

CH ₂ Cl ₂ Of [(3-BOC-aminomateomethyl) -pyridinyl] -N'-N "-bis (tert-butoxycarbonyl) guanidine (100 mg, 0.215 mmol) in a mixture of / TFA (1: 1, 2 mL). The solution was stirred at room temperature for 9 minutes. The solvent was removed under vacuum to give a clear oil. This oil was treated with benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate (63 mg, 0.194 mmol), HATU (147 mg, 0.387 mmol), HOAT (52 mg, 0.387 mmol) in acetonitrile (1.0 mL). , And DIEA (135 μL, 0.774 mmol). The mixture was stirred overnight at room temperature. HPLC purification (CH ₃ CN, H ₂ O, 0.1% TFA) gave a white foamy solid (15 mg, 16%) as the title compound. MS (electrospray) 478 (M + l).
[0424]
(Example A)
(In vitro enzyme assay for specificity determination)
The ability of the compounds of the present invention to act as selective inhibitors of urokinase catalytic activity was determined by the concentration of test compound that inhibited the activity of this enzyme by 50% (IC ₅₀ ) And by comparing this value to the values determined for all or some of the following related serine proteases: recombinant tissue plasminogen activator (rt-PA), plasmin Activated protein C, chymotrypsin, factor Xa, thrombin and trypsin.
[0425]
The buffer used for all assays was HBSA (10 mM HEPES, pH 7.5, 150 mM sodium chloride, 0.1% bovine serum albumin).
[0426]
IC ₅₀ The assay for the determination was performed by combining the following in appropriate wells of a Corning microtiter plate: 50 μl of HBSA, 50 μl of a specific concentration (covering a wide concentration range) diluted in HBSA Test compound (or V ₀ (Non-inhibition rate) HBSA alone for measurement), and 50 μl of enzyme diluted in HBSA. After a 30 minute incubation at ambient temperature, 50 μl of substrate at the concentration specified below was added to the wells to give a final volume of 200 μl (約 4 Km). The initial rate of chromogenic substrate hydrolysis was measured over a 5-minute interval by the change in absorbance at 405 nm using a Terumo Max® kinetic microplate reader, where less than 5% of the added substrate was used. The concentration of added inhibitor that caused a 50% reduction in the initial rate of hydrolysis was determined by the IC ₅₀ Value. Ki is IC ₅₀ It can be calculated from the value.
[0427]
(Urokinase assay)
DiaPharma Group Inc. Urokinase catalytic activity was determined using the chromogenic substrate 150 mM S-2444 (L-pyroglutamyl-glycyl-L-arginine-p-nitroaniline hydrochloride) obtained from Co., Ltd. Urokinase (Abokinae), manufactured by Abbott Laboratories, was obtained from Priority Pharmaceuticals and diluted to 750 pM in HBSA assay buffer before use. The assay buffer was HBS containing 0.1% BSA (10 mM HEPES, 150 mM sodium chloride, pH 7.4). IC ₅₀ Ki was calculated using the values.
[0428]
(Thrombin (fIIa) assay)
The chromogenic substrate Pefachrome t-PA (CHP obtained from Pentapharm Ltd. ₃ SO ₂ -D-hexahydrotyrosine-glycyl-L-arginine-p-nitroaniline) was used to determine the enzyme activity. This substrate was reconstituted in deionized water before use. Purified human α-thrombin is available from Enzyme Research Laboratories, Inc. Obtained from. The buffer used for all assays was HBSA (10 mM HEPES, pH 7.5, 150 mM sodium chloride, 0.1% bovine serum albumin).
[0429]
IC ₅₀ The determination combines HBSA (50 μl), α-thrombin (50 μl) (final enzyme concentration is 0.5 nM) and inhibitor (50 μl) (covers a wide concentration range) in the appropriate wells and is the substrate. This was performed by incubating at room temperature for 30 minutes before the addition of Pefachrome-t-PA (50 μl) (final substrate concentration is 250 μM, about 5 × Km). The initial rate of Pefachrome t-PA hydrolysis was measured over a 5-minute interval by the change in absorbance at 405 nm using a Terumo Max® kinetic microplate reader, where less than 5% of the substrate added Was used. The concentration of added inhibitor that caused a 50% reduction in the initial rate of hydrolysis was determined by the IC ₅₀ Value.
[0430]
(Factor Xa)
The catalytic activity of Factor Xa was determined by combining the chromogenic substrate S-2765 (N-benzyloxycarbonyl-D-arginine-L-glycine-L-arginine-p-nitroaniline) obtained from DiaPharma Group (Franklin, OH). Used and determined. All substrates were reconstituted with deionized water before use. The final concentration of S-2765 was 250 μM (approximately 5-fold Km). Purified human factor X was obtained from Enzyme Research Laboratories, Inc (South Bend, IN) and factor Xa (FXa) was described (Bock, PE, Craig, PA, Olson, PA). It was prepared by activating factor X as described in ST and Singh, P. Arch.Biochem.Biophys.273: 375-388 (1989)). The enzyme was diluted in HBSA prior to the assay to a final concentration of 0.25 nM.
[0431]
(Recombinant tissue plasminogen activator (rt-PA) assay)
The rt-PA catalytic activity was measured using Pefachrome t-PA (Pentapharma Ltd., CH ₃ SO ₂ -D-hexahydrotyrosine-glycyl-L-arginine-p-nitroaniline). This substrate was made in deionized water and subsequently diluted in HBSA prior to the assay to a final concentration of 500 μM (approximately 3-fold Km). Human rt-PA (Activase®) was purchased from Genentech Inc. Obtained from. The enzyme was reconstituted in deionized water and diluted in HBSA prior to the assay to a final concentration of 1.0 nM.
[0432]
(Plasmin assay)
Plasmin catalytic activity was determined using the chromogenic substrate S-2366 [L-pyroglutamyl-L-prolyl-L-arginine-p-nitroaniline hydrochloride] obtained from DiaPharma Group. This substrate was made in deionized water and subsequently diluted in HBSA prior to the assay to a final concentration of 300 μM (約 2.5-fold Km). Purified human plasmin was obtained from Enzyme Research Laboratories, Inc. The enzyme was diluted in HBSA prior to assay to a final concentration of 1.0 nM.
[0433]
(Activated protein C (aPC) assay)
The aPC catalytic activity was determined using a chromogenic substrate, Pefachrome PC (δ-carbobenzyloxy D-lysine-L prolyl-L-arginine-p-nitroaniline dihydrochloride, obtained from Pentapharma Ltd.). This substrate was made in deionized water and subsequently diluted in HBSA prior to the assay to a final concentration of 400 μM (approximately 3-fold Km). Purified human aPC was obtained from Hematological Technologies, Inc. This enzyme was diluted in HBSA to a final concentration of 1.0 nM prior to the assay.
[0434]
(Chymotrypsin assay)
The chromogenic substrate, S-2586 (methoxy-succinyl-L-arginine-L-prolyl-L-tyrosyl-p-nitroanilide), obtained from DiaPharma Group, was used to determine chymotrypsin catalytic activity. This substrate was made in deionized water and subsequently diluted in HBSA prior to the assay to a final concentration of 100 μM (（9-fold Km). Purified (3 × -crystallization; CDI) bovine pancreatic α-chymotrypsin was obtained from Worthington Biochemical Corp. The enzyme was reconstituted in deionized water and diluted in HBSA to a final concentration of 0.5 nM prior to the assay.
[0435]
(Trypsin assay)
Trypsin catalytic activity using S-2222 (benzoyl-L-isoleucine-L-glutamic acid- [γ-methyl ester] -L-arginine-p-nitroanilide), a chromogenic substrate, obtained from DiaPharma Group. It was determined. This substrate was made in deionized water and subsequently diluted in HBSA prior to the assay to a final concentration of 250 μM (approximately 4-fold Km). Purified (3x-crystallized; TRL3) bovine pancreatic alpha trypsin was obtained from Worthington Biochemical Corp. The enzyme was reconstituted in deionized water and diluted in HBSA to a final concentration of 0.5 nM prior to the assay.
[0436]
(Tables IA and IB)
Tables IA and IB show that for the compounds of the present invention, the K for specific enzymes listed above for the compounds of the invention shows a high degree of specificity for the inhibition of urokinase compared to other serine proteases. _i Value or IC ₅₀ Indicates the value.
[0437]
[Table 2]

[0438]
[Table 3]

(Example B)
(Evaluation of test compounds as inhibitors of angiogenesis in vivo)
A standard angiogenesis assay, the chicken CAM (chick embryo chorioallantoic membrane) model, is used to assess the ability of test compounds to inhibit angiogenesis. This model is an established model for assessing the activity of test compounds affecting new blood vessel formation.
[0439]
A filter disk saturated with a 0.5 μg / ml solution of basic fibroblast growth factor (bFGF) is placed on the CAM of a 10-day-old chick embryo to induce angiogenesis. Twenty-four hours later, 0-1 μg of test compound (contained in a total volume of 100 μl of sterile PBS) is injected intravenously into the embryo. After about 48 hours, the embryo is sacrificed and the filter disc and surrounding CAM tissue are excised for analysis. Angiogenesis is quantified by counting the number of vessel branch points in the confined area of the filter [Brooks, P .; C. Et al., Methods in Molecular Biology 120: 257-269 (1999)]. Angiogenic index is defined as the difference in the number of vascular branch points between the experimental group and untreated control embryos. Each experimental group contains 8-10 chicken embryos.
[0440]
(Example C)
(Evaluation of a test compound that inhibits the growth of human tumor cells in a chicken embryo model)
The activity of a test compound that inhibits the growth of human tumor cells in vivo is evaluated using a chicken embryo model. Single cell suspension of human fibrosarcoma cells (HT 1080) (4 × 10 4 in a total volume of 40 μl) ⁵ Cells (containing the cells) are described in Brooks et al. (“Brooks, PC et al.,“ Integrin α _v β ₃ Apply to 10-day-old chick embryos as described by Antagonists Promote Tumor Regression by Inducing Apotosis of Angiogenic Blood Vessels (Cell 79: 1157-1164 (1994)). Twenty-four hours later, embryos are injected intravenously with 0-10 μg of test compound. After this single dose of compound, control and treated embryos are incubated for a total of 7 days and then sacrificed. The tumor is excised, the surrounding CAM tissue is removed and weighed. Table 1 shows the wet weight of the tumor cut out in this example. Each experimental group contains 10-12 chicken embryos.
[Brief description of the drawings]
FIG.
FIG. 1 shows a reaction scheme for solution phase synthesis of intermediates useful in synthesizing compounds of the present invention. Compound 1-1 is N-α-Cbz-D-serine (Ot-butyl), and compound 1-2 is alanine methyl ester hydrochloride. In this figure, "i" to "iv" are defined as follows: i) Cbz-D-Ser (Ot-butyl)-by EDC, 1-hydroxybenzotriazole and acetonitrile, diisopropylethylamine. Yields Ala-OMe; (ii) ethanol / acetic acid / water (4: 1: 1), 10% Pd on carbon, 45 psi H ₂ 95% after workup for 2 hours; iii) acetonitrile, benzenesulfonyl chloride, diisopropylethylamine, 43% workup yield; and iv) methanol, 1.0M lithium hydroxide, on DOWEX ion exchange resin. , Elution with methanol / water, 95% yield after workup. See also Examples 60-62.
FIG. 2
FIG. 2 shows a reaction scheme for a solution phase synthesis route that can be used to prepare intermediates useful for preparing compounds of the present invention. In this figure, "i" to "iii" are defined as follows: i) isobutyl chloroformate, sodium carbonate, water, 99.5% post work-up yield; ii) alanine t-butyl. Hydroxybenzotriazole in ester hydrochloride, EDC, and acetonitrile; diisopropylethylamine, quantitative yield after workup; and iii) TFA, DCM, quantitative yield after workup. See also Examples 74-76.
FIG. 3
FIG. 3 shows a reaction scheme for the synthesis of intermediates that can be used in the preparation of the compounds of the present invention. In this figure, "i" to "xi" are defined as follows: i) CuCN, DMF, reflux (4 hours); ii) EtOAc, 10% aqueous NaCN; iii) N-bromosuccinimide, , 2'-azo-isobutyronitrile, CCl ₄ Reflux (5 hours); iv) NaN ₃ , DMF; v) triphenylphosphine, THF, water, 0 ° C, stirring (10 hours); vi) K ₂ CO ₃ , Boc ₂ O, water, dioxane; vii) hydroxylamine HCl, NMM, MeOH; viii) 10% Pd / C, MeOH, 45 psi H ₂ (10 hours); ix) 4M HCl in dioxane; x) CsCO in DMF ₃ And iodopropane; and xi) 4M HCl, dioxane, 3 hours, room temperature.
FIG. 4
FIG. 4 shows a reaction scheme for the synthesis of intermediates that can be used to prepare compounds of the present invention. In this figure, “i” to “iv” are defined as follows: i) NaN ₃ , DMF; ii) 10% Pd / C, EtOAc, 45 psi H ₂ (11 hours); iii) hydroxylamine HCl, NMM, MeOH; and iv) 10% Pd / C, MeOH, 45 psi H. ₂ (48 hours).
FIG. 5
FIG. 5 shows a reaction scheme for the synthesis of intermediates that can be used in the preparation of the compounds of the present invention. In this figure, “i” to “vii” are defined as follows: i) Cu (I) CN, DMF; ii) NBS, benzoyl peroxide, CCl ₄ , 80 ° C (14 hours); iii) NaN ₃ Iv, DMF, stirring (20 h); iv) hydroxylamine HCl, NMM, MeOH, stirring (3 days); v) CsCO ₃ Iodopropane, DMF, 50 ° C. (20 h); vi) triphenylphosphine, THF, stirring (20 h); and vii) 3M NaOH to pH14.
FIG. 6
FIG. ₂ Is -CH ₂ OA ₁ And A ₁ Is -C (= O) R ₆ Figure 9 shows a reaction scheme for the synthesis of compounds of the present invention where is used as an intermediate (compound of Example 9). In this figure, "i" is: i) pyridine, R ₆ COCl is defined.
FIG. 7
FIG. 7 shows a reaction scheme for the synthesis of certain compounds of the invention. In this figure, “i” to “vi” are defined as follows: i) trifluoroacetic anhydride, stirred at 0 ° C. overnight; ice, CH ₂ C1 ₂ , Na ₂ SO ₄ Ii) Pd / C (10%) in MeOH (overnight); iii) NN'-di-Boc-N "-trifluoromethanesulfonyl-guanidine, TEA, CH ₂ Cl ₂ , 6 hours; HC1, brine, Na ₂ SO ₂ Column chromatography (CH ₂ Cl ₂ / MeOH 99: 1); iv) potassium carbonate, H ₂ O / MeOH (2:15), overnight; CH ₂ Cl ₂ / MeOH (9: 1), Na ₂ SO ₄ V) benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate, HATU, HOAT, DIEA, acetonitrile, overnight; EtOAc, HCl, NaHCO ₃ , Brine; HPLC (CH ₃ CN, H ₂ O, 0.1% TFA); vi) CH ₂ Cl ₂ / TFA (1: 1), 90 min; HPLC (CH ₃ CN, H ₂ O, 0.1% TFA).
FIG. 8
FIG. 8 shows a reaction scheme for the synthesis of certain compounds of the present invention. In this figure, “i” to “v” are defined as follows: i) trifluoroacetic anhydride, stirred overnight; ice, CH ₂ Cl ₂ , Na ₂ SO ₄ Ii) Pd / C (10%) in MeOH (overnight); iii) NN'-Boc-N "-trifluoromethanesulfonyl-guanidine, TEA, CH ₂ Cl ₂ , 24 hours; HCl, brine, Na ₂ SO ₄ Column chromatography (CH ₂ Cl ₂ / MeOH 98: 2); iv) potassium carbonate, H ₂ O / MeOH (1: 1), overnight; H ₂ O, CH ₂ Cl ₂ / MeOH (9: 1), Na ₂ SO ₄ And v) benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate in HATU, HOAT, DIEA, acetonitrile, room temperature, overnight; EtOAc, HCl, NaHCO ₃ , Brine; CH ₂ Cl ₂ / TFA (1: 1), room temperature, 2 hours, HPLC (CH ₃ CN, H ₂ O, 0.1% TFA).
FIG. 9
FIG. 9 shows a reaction scheme for the synthesis of the compounds of the present invention. In this figure, “i” to “vi” are defined as follows: i) trifluoroacetic anhydride, 0 ° C., 1 hour; ii) KNO ₃ -20 ° C, stirring overnight; CH ₂ Cl ₂ , Na ₂ SO ₄ Column chromatography; iii) HCl in MeOH, 0 ° C., SnC1 ₂ , Stirred for 30 minutes, NaHCO ₃ , CH ₂ Cl ₂ , Na ₂ SO ₄ Iv) N ₁ N'-di-Boc-N "-trifluoromethanesulfonyl-guanidine, TEA, CH ₂ Cl ₃ , Stirring, 24 hours; HCl (1M), brine, Na ₂ SO ₄ , Column chromatography; v) K ₂ CO ₃ , H ₂ O / MeOH (1: 1), stirring overnight; H ₂ O, CH ₂ Cl ₂ / MeOH (95: 5), Na ₂ SO ₄ And vi) benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate, HATU, HOAT, DIEA, AcN, stirring overnight; EtOAc, HCl (1M), NaHCO; ₃ Aqueous solution, brine, Na ₂ SO ₄ HPLC.
FIG. 10A
FIG. 10A shows certain preferred compounds of the present invention.
FIG. 10B
FIG. 10B shows certain preferred compounds of the present invention.
FIG. 10C
FIG. 10C shows certain preferred compounds of the present invention.
FIG. 10D
FIG. 10D shows certain preferred compounds of the present invention.
FIG. 10E
FIG. 10E illustrates certain preferred compounds of the present invention.
FIG. 10F
FIG. 10F shows certain preferred compounds of the present invention.
FIG. 11
FIG. 11 shows a reaction scheme for the synthesis of the compounds of the present invention. In this figure, “i” to “xii” are defined as follows: i) CCl ₄ , N-bromosuccinimide; N ₂ , AIBN, stirring, flash chromatography; ii) DMF, NaN ₃ , Stirred overnight, diethyl ether, water, brine, MgSO ₄ (Iii) MeOH, TEA, 65 ° C., 4 hours; EtOAc, H ₂ O, brine, MgSO ₄ Iv) THF / water, Ph ₃ P, stirring overnight; 1N HCl, H ₂ O, DCM, pH about 9; v) dioxane / water, K ₂ CO ₃ , Boc ₂ O, stir overnight; EtOAc, NaHCO ₃ Aqueous solution, brine, Na ₂ SO ₄ , Flash column chromatography; vi) DMF, 2-iodopropane, CsCO ₃ ; EtOAc, NaHCO ₃ Aqueous solution, Na ₂ SO ₄ Flash column chromatography; vii) dioxane, 4N HCl in dioxane, solvent removal; viii) AcN, DIEA; Boc-alanine, EDC, HOBt, stirred overnight; EtOAc, NaHCO ₃ Aqueous solution, brine, Na ₂ SO ₄ Ix) dioxane, 4N HCl in dioxane, solvent removal, x) AcN, DIEA, BnSO ₂ -DSer (tBu) -OH, EDC, HOBt, stirred overnight; EtOAc, NaHCO ₃ Aqueous solution, brine, Na ₂ SO ₄ RP-HPLC; xc) DCM, TFA; RP-HPLC; and xii) H ₂ O, HOAc, Zn powder; RP-HPLC.
FIG.
FIG. 12 shows a reaction scheme for the synthesis of the compounds of the present invention. In this figure, “i” to “vi” are defined as follows: i) EDC, HOBt, DIEA and CH ₃ CN; ii) TFA, CH ₂ Cl ₂ Iii) BNSO ₂ -DSer (tBu) -OH, EDC, HOBt, 2,4,6-collidine, CH ₃ CN; iv) hydroxylamine hydrochloride; v) Zn / acetic acid; and vi) TFA, CH ₂ Cl ₂ .
FIG. 13A
FIG. 13A shows certain preferred compounds of the present invention.
FIG. 13B
FIG. 13B shows certain preferred compounds of the present invention.
FIG. 13C.
FIG. 13C shows certain preferred compounds of the present invention.
FIG. 14
FIG. 14 shows a reaction scheme for the synthesis of the compounds of the present invention. In this figure, “i” to “v” are defined as follows: i) BH ₃ , THF, 78% yield; ii) BOC-ON, 95% yield; iii) Pd / C; H ₂ , 81% yield; iv) CNBr, NaHCO ₃ , CH ₃ CN, H ₂ O; v) TFA, CH ₂ Cl ₂ And vi) benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate, HATU, HOAT, DIEA, CH ₃ CN.
FIG.
FIG. 15 shows a reaction scheme for the synthesis of the compounds of the present invention. In this figure, “i” to “iii” are defined as follows: i) thionyl chloride, MeOH; ii) Na / Hg (5%), CNNH ₂ Reflux, 62% yield; and iii) benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate, HATU, HOAT, DIEA, CH ₃ CN.
FIG.
FIG. 16 shows a reaction scheme for the synthesis of the compounds of the present invention. In this figure, “i” to “vi” are defined as follows: i) BH ₃ , THF; ii) cl / dioxane, quantitative yield; iii) BOC-ON, THF; iv) TEA, CH ₂ Cl ₂ V) TFA / CH ₂ Cl ₂ And vi) benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate, HATU, HOAT, DIEA, CH ₃ CN.
FIG.
FIG. 17 shows a reaction scheme for the synthesis of the compounds of the present invention. In this figure, “i” to “vi” are defined as follows: i) BH ₃ , THF; ii) HCl, quantitative yield; iii) BOC-ON, THF; iv) TEA, CH ₂ Cl ₂ V) TFA, CH ₂ Cl ₂ And vi) benzylsulfonyl-D-serine-L-alanine carboxylate, HATU, HOAT, DIEA, CH ₃ CN.

Claims

以下の式の化合物およびその薬学的に受容可能な塩であって：

ここで、
（ａ）Ｘは、−Ｓ（Ｏ）_２−、−Ｎ（Ｒ’）−Ｓ（Ｏ）_２−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｐ−（Ｏ）（Ｒ’）−、および直接結合からなるから選択され、ここで、Ｒ’は、独立して、水素、１〜約４炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、または約７〜約１６炭素原子のアラルキルであり、ただし、Ｘが−Ｐ（Ｏ）（Ｒ’）−の場合、Ｒ’は、水素ではない；
（ｂ）Ｒ_１は、以下からなる群から選択される：
（１）非置換、あるいはＹ_１およびＹ_２からなる群から選択される１つまたは２つの置換基で置換された、１〜約１２炭素原子のアルキル、
（２）約３〜約８炭素原子のシクロアルキルで置換された１〜約３炭素原子のアルキルであって、該シクロアルキルは、非置換であるか、またはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で置換される、アルキル、
（３）３〜約１５炭素原子のシクロアルキルであって、該シクロアルキルは、非置換であるか、あるいは該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、シクロアルキル、
（４）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、４〜約１０環原子のヘテロシクロアルキルであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここでｉは、０、１または２であり、該ヘテロシクロアルキルは、非置換であるか、あるいは該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロアルキル、
（５）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する４〜約１０環原子のヘテロシクロであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここで、ｉは０、１、または２であり、該ヘテロシクロは

を含み、ここで該

は、３〜６個の環炭素原子を有する５〜７員のヘテロ環であり、ここで、Ｖは、−ＣＨ_２−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）_２−または−Ｓ−であり、該ヘテロシクロは、非置換であるか、あるいは該環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロ、
（６）非置換または約３〜約８炭素原子のシクロアルキルで置換された、２〜約６炭素原子のアルケニルであって、該シクロアルキルは、非置換であるか、または該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アルケニル、
（７）約６〜約１４炭素原子のアリールであって、該アリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アリール、
（８）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、約５〜約１４環原子のヘテロアリールであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そして該ヘテロアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアリール、
（９）約７〜約１５炭素原子のアラルキルであって、該アラルキルは、非置換であるか、あるいは該アルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そして該アラルキルは、非置換であるか、あるいは該アリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルキル、
（１０）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、該ヘテロアラルキルは、非置換であるか、あるいは該アルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そして該ヘテロアラルキルは、該環上で非置換であるか、あるいは該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルキル、
（１１）約８〜約１６炭素原子のアラルケニルであって、該アラルケニルは、非置換であるか、あるいは該アリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルケニル、
（１２）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約１４環原子のヘテロアラルケニルであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そして該ヘテロアラルケニルは、非置換であるか、あるいは該環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルケニル、

（１７）約９〜約１５炭素原子の縮合炭素環式アルキル、
（１８）１〜約１２炭素原子のジフルオロメチルまたは過フルオロアルキル、
（１９）約６〜約１４炭素原子の過フルオロアリール、
（２０）約７〜約１５炭素原子の過フルオロアラルキル、および
（２１）Ｘが直接結合の場合、水素；
ここで、各Ｙ_１、Ｙ_２、およびＹ_３は、独立して選択され、そして以下
（ｉ）ハロゲン、シアノ、ニトロ、テトラゾリル、グアニジノ、アミジノ、メチルグアニジノ、−ＣＦ_３、−ＣＦ_２ＣＦ_３、−ＣＨ（ＣＦ_３）_２、−Ｃ（ＯＨ）（ＣＦ_３）_２、−ＯＣＦ_３、−ＯＣＦ_２Ｈ、−ＯＣＦ_２ＣＦ_３、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨＺ_１、−ＯＣ（Ｏ）ＮＺ_１Ｚ_２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｚ_１、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＺ_１、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＺ_１Ｚ_２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＺ_１、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＺ_１、−Ｃ（Ｏ）ＮＺ_１Ｚ_２、−Ｐ（Ｏ）_３Ｈ_２、−Ｐ（Ｏ）_３（Ｚ_１）_２、−Ｓ（Ｏ）_３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）_ｍＺ_１、−Ｚ_１、−ＯＺ_１、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨＺ_１、−ＮＺ_１Ｚ_２、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ_２、−Ｃ（＝ＮＯＨ）ＮＨ_２、−Ｎ−モルホリノ、および−Ｓ（Ｏ）_ｍ（ＣＦ_２）_ｑＣＦ_３からなる群から選択され、ここで、ｍは０、１または２であり、ｑは０〜５の整数であり、そしてＺ_１およびＺ_２は、独立して、１〜約１２炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、約５〜約１４環原子のヘテロアリール、約７〜約１５炭素原子のアラルキル、および約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルからなる群から選択される、あるいは
（ｉｉ）Ｙ_１およびＹ_２は、一緒に−Ｏ［Ｃ（Ｚ_３）（Ｚ_４）］_ｒＯ−または−Ｏ［Ｃ（Ｚ_３）（Ｚ_４）］_ｒ＋１−となるように選択され、ここで、ｒは、１〜４の整数であり、そしてＺ_３およびＺ_４は、独立して、水素、１〜約１２炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、約５〜約１４環原子のヘテロアリール、約７〜約１５炭素原子のアラルキル、および約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルからなる群から選択される；
（ｃ）Ｒ_２は、−ＣＨ_３、−Ｃ_２Ｈ_５、−（ＣＨ_２）_２ＯＨ、−（ＣＨ_２）_２ＯＡ_１、−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＨ、−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＡ_１、および−ＣＨ_２ＮＨ−Ｘ’−Ｒ_６からなる群から選択され、ここで、Ａ_１は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ_６、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_６または−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ_５Ｒ_６であり；Ｘ’は、−Ｓ（Ｏ）_２−、−Ｓ（Ｏ）_２−Ｎ（Ｒ”）−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ”）−、および直接結合からなる群から選択され、ここで、Ｒ”は、水素、１〜約４炭素原子のアルキル、約６〜約１４炭素原子のアリール、または約７〜約１６炭素原子のアラルキルであり、ただし、Ｘ’が−Ｐ（Ｏ）（Ｒ”）−の場合、Ｒ”は水素ではなく；Ｒ_５は、以下からなる群から選択される：
（１）非置換、あるいはＹ_１およびＹ_２からなる群から選択される１〜２個の置換基で置換された、１〜約４炭素原子のアルキル、
（２）３〜約６炭素原子のシクロアルキルで置換された１〜約３炭素原子のアルキルであって、該シクロアルキルは、非置換であるか、あるいは該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換または三置換される、アルキル、
（３）３〜約６炭素原子のシクロアルキルであって、該シクロアルキルは、非置換であるか、あるいは該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、シクロアルキル、
（４）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、４〜約６環原子のヘテロシクロアルキルであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここでｉは、０、１または２であり、該ヘテロシクロアルキルは、非置換であるか、または該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロアルキル、
（５）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する４〜約６環原子のヘテロシクロであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここで、ｉは０、１、または２であり、該ヘテロシクロは

を含み、ここで該

は、３〜６個の環炭素原子を有する５〜７員のヘテロ環であり、ここで、Ｖは、−ＣＨ_２−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）_２−または−Ｓ−であり、該ヘテロシクロは、非置換であるか、あるい該環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロ、
（６）非置換または約３〜約６炭素原子のシクロアルキルで置換された、２〜約６炭素原子のアルケニルであって、該シクロアルキルは、非置換であるか、または該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アルケニル、
（７）フェニルであって、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、フェニル、
（８）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、約５〜約６環原子のヘテロアリールであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そして該ヘテロアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアリール、
（９）フェニルで置換された１〜約４炭素原子のアルキルであって、該フェニルは、非置換であるか、あるいは該フェニル環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アルキル、
（１０）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約６環原子のヘテロアラルキルであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そして該ヘテロアラルキルは、非置換であるか、あるいは該アルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そして該ヘテロアラルキルは、該環上で非置換であるか、あるいは該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルキル、
（１１）約８〜約１２炭素原子のアラルケニルであって、該アラルケニルは、非置換であるか、あるいは該アリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルケニル、
（１２）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約６環原子のヘテロアラルケニルであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そして該ヘテロアラルケニルは、非置換であるか、あるいは該環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルケニル、ならびに
（１３）水素；そして
Ｒ_６は、以下からなる群から選択される：
（１）非置換、あるいはＹ_１およびＹ_２からなる群から選択される１〜２個の置換基で置換された、１〜約１２炭素原子のアルキル、
（２）３〜約８炭素原子のシクロアルキルで置換された１〜約３炭素原子のアルキルであって、該シクロアルキルは、非置換であるか、あるいは該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換または三置換される、アルキル、
（３）３〜約１５炭素原子のシクロアルキルであって、該シクロアルキルは、非置換であるか、あるいは該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、シクロアルキル、
（４）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、４〜約１０環原子のヘテロシクロアルキルであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここでｉは、０、１または２であり、該ヘテロシクロアルキルは、非置換であるか、または該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で、一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロアルキル、
（５）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する４〜約１０環原子のヘテロシクロであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、およびＳ（Ｏ）_ｉからなる群から選択され、ここで、ｉは０、１、または２であり、該ヘテロシクロは

を含み、ここで該

は、３〜６個の環炭素原子を有する５〜７員のヘテロ環であり、ここで、Ｖは、−ＣＨ_２−、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）_２−または−Ｓ−であり、該ヘテロシクロは、非置換であるか、あるい該環炭素上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロシクロ、
（６）約６〜約１４炭素原子のアリールであって、該アリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アリール、
（７）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する、約５〜約１４環原子のヘテロアリールであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そして該ヘテロアリールは、非置換であるか、あるいはＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアリール、
（８）約７〜約１５炭素原子のアラルキルであって、該アラルキルは、非置換であるか、または該アルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そして該アラルキルは、非置換であるか、あるいは該アリール環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、アラルキル、
（９）炭素およびヘテロ原子から選択される環原子を有する約５〜約１４環原子のヘテロアラルキルであって、ここで、該ヘテロ原子は、酸素、窒素、および硫黄から選択され、そして該ヘテロアラルキルは、非置換であるか、あるいは該アルキル鎖上でヒドロキシまたはハロゲンで置換され、そして該ヘテロアラルキルは、該環上で非置換であるか、あるいは該環上でＹ_１、Ｙ_２、およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換される、ヘテロアラルキル、ならびに
（１０）水素、ただし、Ａ_１が−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ_６である場合、Ｒ_６は水素ではない；
（ｄ）Ｒ_３は、Ｈまたはメチルから選択されるか、あるいはＲ_３ならびにＲ_４ａおよびＲ_４ｂは、一緒に（ｆ）に記載されるように選択される；
（ｅ）（ｉ）Ｒ_４ａは、Ｓの立体配置であり、そしてＨ、−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＣＮ、１〜約３炭素原子の低級アルキル、−ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ_２ＣＨ＝ＣＨ_２および−ＣＨ＝ＣＨ_２からなる群から選択され、そしてＲ_４ｂは、水素である；
（ｉｉ）Ｒ_４ａおよびＲ_４ｂは、独立して、１〜３炭素原子の低級アルキルである；
（ｉｉｉ）Ｒ_４ａおよびＲ_４ｂは、一緒に選択され、そして−（ＣＨ_２）_ｋ−であり、ここで、ｋは５または６であり、スピロシクロアルキルを提供する；または
（ｉｖ）Ｒ_３、ならびにＲ_４ａおよびＲ_４ｂは、（ｆ）に記載されるように一緒に選択される；
（ｆ）あるいは、Ｒ_３およびＲ_４ａは、Ｓの立体配置になるように一緒に選択されて、プロリル、ピペコリル、アゼチジン−２−カルボニル、４−ヒドロキシプロリル、３−ヒドロキシプロリル、４−アミノプロリル、４−（−ＣＨ_２ＮＨ_２）−プロリル、３，４−メタノプロリル、および３，４−デヒドロプロリルからなる群から選択される基をＰ２に提供し、そしてＲ_４ｂは水素である；
（ｇ）Ｒ_７は、水素または１〜約４炭素原子のアルキルである；ならびに
（ｈ）Ｅは、Ｑ−Ｔである、
ここで、（ｉ）Ｑは、−Ｃ（Ｒ_１３Ｒ_１４）_ｔ−、Ｒ_８およびＲ_９で置換されたフェニル、Ｒ_８またはＲ_８およびＲ_９で置換された、１〜２個のヘテロ原子を有する５員または６員の複素環式環、ならびにＲ_８およびＲ_９で置換された、１〜２個のヘテロ原子を有する９員または１０員の複素環式環からなる群から選択され、ここで、該ヘテロ原子は、窒素および硫黄から選択される；ならびに
（ｉｉ）Ｔは、−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１、および−ＮＨＲ_１５からなる群から選択される；
ここで、Ｒ_８およびＲ_９は、独立して、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、１〜約４炭素原子のアルキル、１〜約４炭素原子のアルコキシで置換された１〜約４炭素原子のアルキル、１〜約６炭素原子のアルコキシ、およびトリフルオロメチルからなる群から選択され；Ｒ_１０およびＲ_１１は、独立して、水素、ヒドロキシ、１〜約３炭素原子のアルコキシ、３〜約１６炭素原子のトリヒドロカルビルシリル、１〜約３炭素原子のアルキル、または−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_１２であり、ただし、Ｒ_１０およびＲ_１１は、両方ともヒドロキシまたは両方ともアルコキシではない；Ｒ_１２は、水素、１〜約６炭素原子のアルキル、１〜約６炭素原子のアルコキシ、または（ＣＦ_２）_ｊＣＦ_３であり、ここで、ｊは０、１、２または３である；Ｒ_１３およびＲ_１４の各々は、独立して、水素および１〜約３炭素原子の低級アルキルからなる群から選択される；Ｒ_１５は、水素、１〜約６炭素原子のアルキル、および−（ＣＦ_２）_ｈＣＦ_３からなる群から選択され、ここで、ｈは、０、１　　、２または３であり、そしてｔは、０〜６の整数である、
化合物およびその薬学的に受容可能な塩。A compound of the following formula and pharmaceutically acceptable salts thereof:

here,
(A) X is -S (O) _2- , -N (R ')-S (O) ₂ -,-(C = O)-, -OC (= O)-, -NH-C (= O)-, -P- (O) (R ')-, and a direct bond, wherein R' is independently hydrogen, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms, about 6 to An aryl of about 14 carbon atoms, or an aralkyl of about 7 to about 16 carbon atoms, provided that when X is -P (O) (R ')-, then R' is not hydrogen;
(B) R ₁ is selected from the group consisting of:
(1) alkyl of 1 to about 12 carbon atoms, unsubstituted or substituted with one or two substituents selected from the group consisting of Y ₁ and Y ₂ ;
(2) alkyl of 1 to about 3 carbon atoms substituted with cycloalkyl of about 3 to about 8 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or Y ₁ , Y ₂ , and Y ₃ Alkyl substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of
(3) a cycloalkyl of 3 to about 15 carbon atoms, 1 to the cycloalkyl is unsubstituted or _Y 1, _{Y 2,} and which is selected from the group consisting of _{Y 3} on the ring A cycloalkyl, mono-, di-, or tri-substituted with three substituents;
(4) 4 to about 10 ring atom heterocycloalkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Selected from the group, wherein i is 0, 1 or 2, and said heterocycloalkyl is unsubstituted or selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ , and Y ₃ on said ring Heterocycloalkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents,
(5) 4 to about 10 ring atom heterocyclo having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein said heteroatom is selected from the group consisting of oxygen, nitrogen, and S (O) _i. Wherein i is 0, 1, or 2, and the heterocyclo is

Where the said

Is a 5-7 membered heterocyclic ring having 3-6 ring carbon atoms, wherein, V _{is, -CH 2 -, - O -} , - S (= O) -, - S (O) ₂ - or -S-, the heterocycle may be unsubstituted or substituted with 1-3 substituents selected from _Y 1, _{Y 2,} and the group consisting of _{Y 3} on the ring carbons one A substituted, disubstituted or trisubstituted heterocyclo,
(6) alkenyl of from 2 to about 6 carbon atoms, unsubstituted or substituted with cycloalkyl of from about 3 to about 8 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or Y on the ring. Alkenyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of ₁ , Y ₂ and Y ₃ ;
(7) aryl of from about 6 to about 14 carbon atoms, wherein the aryl is unsubstituted or 1-3 substituents selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ and Y ₃ Aryl, mono-, di-, or tri-substituted with
(8) about 5 to about 14 ring atom heteroaryl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein said heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Heteroaryl is a heteroaryl, which is unsubstituted or mono-, di- or tri-substituted with one to three substituents selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ and Y ₃ .
(9) an aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, wherein the aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the aralkyl is unsubstituted, Or an aralkyl, which is mono-, di- or trisubstituted on the aryl ring with ₁ to 3 substituents selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ and Y ₃ .
(10) a heteroaralkyl of about 5 to about 14 ring atoms having a ring atom selected from carbon and a heteroatom, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the heteroaralkyl is unsubstituted on the ring or Y ₁ , Y ₂ , and Y on the ring monosubstituted with 1-3 substituents selected from the group consisting of _3, disubstituted, or trisubstituted, heteroaralkyl,
(11) A aralkenyl of about 8 to about 16 carbon atoms, said aralkenyl 1, is unsubstituted, or is selected from the group consisting of _Y 1, _{Y 2,} and _{Y 3} on the aryl ring Aralkenyl, mono-, di- or trisubstituted with three substituents,
(12) about 5 to about 14 ring atom heteroaralkenyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein said heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; The heteroaralkenyl is unsubstituted or mono-substituted, di-substituted, or substituted on the ring carbon with ₁ to 3 substituents selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ , and Y _3. Trisubstituted heteroaralkenyl,

(17) a fused carbocyclic alkyl of about 9 to about 15 carbon atoms,
(18) difluoromethyl or perfluoroalkyl of 1 to about 12 carbon atoms,
(19) perfluoroaryl of about 6 to about 14 carbon atoms,
(20) perfluoroaralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, and (21) hydrogen when X is a direct bond;
Wherein each Y ₁ , Y ₂ , and Y ₃ are independently selected and are (i) halogen, cyano, nitro, tetrazolyl, guanidino, amidino, methylguanidino, —CF ₃ , —CF ₂ CF ₃ _{_{_{_{, -CH (CF 3) 2,}}}} -C (OH) (CF 3) 2, -OCF 3, -OCF 2 H, -OCF 2 CF 3, -OC (O) NH 2, -OC (O) NHZ 1 _{_{_{_{, -OC (O) NZ 1 Z}}}} 2, -NHC (O) Z 1, -NHC (O) NH 2, -NHC (O) NZ 1, -NHC (O) NZ 1 Z 2, -C (O) _{_{_{OH, -C (O) OZ 1}}} , -C (O) NH 2, -C (O) NHZ 1, -C (O) NZ 1 Z 2, -P (O) 3 H 2, -P (O) _{_{_{_{3 (Z 1) 2, -S}}}} (O) 3 H, -S (O) m Z 1, -Z 1, -OZ 1, -OH _{_{_{-NH 2, -NHZ 1, -NZ 1}}} Z 2, -C (= NH) NH 2, -C (= NOH) NH 2, -N- morpholino, and _{_{_{-S (O) m (CF 2}}} ) q CF ₃ wherein m is 0, 1 or 2; q is an integer from 0 to 5; and Z ₁ and Z ₂ are independently from 1 to about 12 carbon atoms. Selected from the group consisting of alkyl, aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, heteroaryl of about 5 to about 14 ring atoms, aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, and heteroaralkyl of about 5 to about 14 ring atoms. that, or (ii) _{Y 1} and _{Y 2,} together _{_{-O [C (Z 3) (}} Z 4)] r O- or _{_{-O [C (Z 3) (}} Z 4)] r + 1 - become so is selected, wherein, r is a integer of from 1 to 4, and _{Z 3} and _{Z 4} Independently, hydrogen, alkyl of 1 to about 12 carbon atoms, aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, heteroaryl of about 5 to about 14 ring atoms, aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, and about 5 Selected from the group consisting of heteroaralkyls of up to about 14 ring atoms;
(C) _{R 2} _{_{_{_{is, -CH 3, -C 2 H 5}}}} , - (CH 2) 2 OH, - (CH 2) 2 OA 1, -CH (R 5) OH, -CH (R 5) OA 1 , and it is selected from the group consisting of _{_{-CH 2 NH-X'-R 6}} , _{wherein, A} 1 _{is, -C (= O) oR 6} , -C (= O) R 6 or -C (= O) be NR ₅ R _6; X _{_{'is, -S (O) 2 -,}} - S (O) 2 -N (R ") -, - (C = O) -, - C (= O) -O- , -C (= O) -NH-, -P (O) (R ")-, and a direct bond, wherein R" is hydrogen, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms, aryl of about 6 to about 14 carbon atoms or aralkyl of about 7 to about 16 carbon atoms, with the proviso, X 'is -P (O) (R ") - in the case of, R" is not hydrogen; _{R 5} Is a group consisting of Is et al selected:
(1) alkyl having 1 to about 4 carbon atoms, which is unsubstituted or substituted with 1 to 2 substituents selected from the group consisting of Y ₁ and Y ₂ ;
(2) alkyl of 1 to about 3 carbon atoms substituted with cycloalkyl of 3 to about 6 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or represents Y ₁ , Y ₂ , and monosubstituted with one to three substituents selected from the group consisting of Y _3, is disubstituted or trisubstituted, alkyl,
(3) cycloalkyl of 3 to about 6 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or _{1 to} ₃ on the ring selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ , and Y ₃ A cycloalkyl, mono-, di-, or tri-substituted with three substituents;
(4) 4 to about 6 ring atom heterocycloalkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom consists of oxygen, nitrogen, and S (O) _i Selected from the group, wherein i is 0, 1 or 2, and said heterocycloalkyl is unsubstituted or selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ , and Y ₃ on said ring Heterocycloalkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents,
(5) 4 to about 6 ring atom heterocyclo having a ring atom selected from carbon and heteroatom, wherein the heteroatom is selected from the group consisting of oxygen, nitrogen, and S (O) _i. Wherein i is 0, 1, or 2, and the heterocyclo is

Where the said

Is a 5-7 membered heterocyclic ring having 3-6 ring carbon atoms, wherein, V _{is, -CH 2 -, - O -} , - S (= O) -, - S (O) ₂ - or -S-, the heterocycle is unsubstituted or substituted, with 1-3 substituents selected from the group consisting of _Y 1, _{Y 2,} and _{Y 3} on one had the ring carbon Mono-, di- or trisubstituted heterocyclo,
(6) alkenyl of 2 to about 6 carbon atoms, unsubstituted or substituted with cycloalkyl of about 3 to about 6 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or Y on the ring. Alkenyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of ₁ , Y ₂ and Y ₃ ;
(7) phenyl, which is unsubstituted or mono-, di- or tri-substituted by 1 to 3 substituents selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ and Y ₃ , Phenyl,
(8) about 5 to about 6 ring atom heteroaryl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Heteroaryl is a heteroaryl, which is unsubstituted or mono-, di- or tri-substituted with one to three substituents selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ and Y ₃ .
(9) alkyl of 1 to about 4 carbon atoms substituted with phenyl, wherein the phenyl is unsubstituted or selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ , and Y ₃ on the phenyl ring Alkyl, mono-, di- or tri-substituted with one to three substituents
(10) a heteroaralkyl of about 5 to about 6 ring atoms having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatoms are selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; An aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the heteroaralkyl is unsubstituted on the ring or Y ₁ , Y ₂ , and Heteroaralkyl, mono-substituted, di-substituted or tri-substituted with 1 to 3 substituents selected from the group consisting of Y ₃ ,
(11) an aralkenyl of about 8 to about 12 carbon atoms, wherein the aralkenyl is unsubstituted or selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ , and Y ₃ on the aryl ring Aralkenyl, mono-, di- or trisubstituted with three substituents,
(12) about 5 to about 6 ring atom heteroaralkenyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; The heteroaralkenyl is unsubstituted or mono-substituted, di-substituted, or substituted on the ring carbon with ₁ to 3 substituents selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ , and Y _3. Trisubstituted heteroaralkenyl, and (13) hydrogen; and R ₆ is selected from the group consisting of:
(1) alkyl of 1 to about 12 carbon atoms, unsubstituted or substituted with one or two substituents selected from the group consisting of Y ₁ and Y ₂ ;
(2) alkyl of 1 to about 3 carbon atoms substituted with cycloalkyl of 3 to about 8 carbon atoms, wherein the cycloalkyl is unsubstituted or represents Y ₁ , Y ₂ , and monosubstituted with one to three substituents selected from the group consisting of Y _3, is disubstituted or trisubstituted, alkyl,
(3) a cycloalkyl of 3 to about 15 carbon atoms, 1 to the cycloalkyl is unsubstituted or _Y 1, _{Y 2,} and which is selected from the group consisting of _{Y 3} on the ring A cycloalkyl, mono-, di-, or tri-substituted with three substituents;
(4) 4 to about 10 ring atom heterocycloalkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatom comprises oxygen, nitrogen, and S (O) _i Selected from the group, wherein i is 0, 1 or 2, and said heterocycloalkyl is unsubstituted or selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ , and Y ₃ on said ring Heterocycloalkyl, mono-, di- or tri-substituted with 1 to 3 substituents,
(5) 4 to about 10 ring atom heterocyclo having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein said heteroatom is selected from the group consisting of oxygen, nitrogen, and S (O) _i. Wherein i is 0, 1, or 2, and the heterocyclo is

Where the said

Is a 5-7 membered heterocyclic ring having 3-6 ring carbon atoms, wherein, V _{is, -CH 2 -, - O -} , - S (= O) -, - S (O) ₂ - or -S-, the heterocycle is unsubstituted or substituted, with 1-3 substituents selected from the group consisting of _Y 1, _{Y 2,} and _{Y 3} on one had the ring carbon Mono-, di- or trisubstituted heterocyclo,
(6) aryl of about 6 to about 14 carbon atoms, wherein said aryl is unsubstituted or 1-3 substituents selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ and Y ₃ Aryl, mono-, di-, or tri-substituted with
(7) about 5 to about 14 ring atoms heteroaryl having a ring atom selected from carbon and heteroatoms, wherein the heteroatoms are selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; Heteroaryl is a heteroaryl, which is unsubstituted or mono-, di- or tri-substituted with one to three substituents selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ and Y ₃ .
(8) an aralkyl of about 7 to about 15 carbon atoms, wherein the aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the aralkyl is unsubstituted, Or an aralkyl, which is mono-, di- or trisubstituted on the aryl ring with ₁ to 3 substituents selected from the group consisting of Y ₁ , Y ₂ and Y ₃ .
(9) about 5 to about 14 ring atom heteroaralkyl having a ring atom selected from carbon and heteroatom, wherein the heteroatom is selected from oxygen, nitrogen, and sulfur; An aralkyl is unsubstituted or substituted on the alkyl chain with hydroxy or halogen, and the heteroaralkyl is unsubstituted on the ring or Y ₁ , Y ₂ , and monosubstituted with 1-3 substituents selected from the group consisting of Y _3, disubstituted, or trisubstituted, heteroaralkyl, and (10) hydrogen, provided that, _{a 1} is -C (= O) oR _{When 6} , R ₆ is not hydrogen;
(D) R ₃ is selected from H or methyl, or R ₃ and R _4a and R _4b are selected together as described in (f);
_(E) (i) _{R 4a} is a configuration of the S, and _{_{_{H, -CH 2 -S-CH 3}}} , -CH 2 OH, -CH 2 CN, 1~ about 3 lower alkyl carbon atoms, - CH ₂ C≡CH, —CH ₂ CH ＝ CH ₂ and —CH ＝ CH ₂ , and R _4b is hydrogen;
(Ii) R _4a and R _4b are independently lower alkyl of 1-3 carbon atoms;
(Iii) R _4a and R _4b are selected together and _are- (CH ₂ ) _k- , where k is 5 or 6, providing a spirocycloalkyl; or (iv) R ₃ And R _4a and R _4b are selected together as described in (f);
(F) Alternatively, R ₃ and R _4a are selected together to be in the configuration of S to form prolyl, pipecolyl, azetidine-2-carbonyl, 4-hydroxyprolyl, 3-hydroxyprolyl, 4- _{Aminopuroriru, 4 - (- CH 2 NH} 2) - prolyl, 3,4 Metanopuroriru, and a group selected from the group consisting of 3,4 Dehidoropuroriru provided to P2, and _{R 4b} is hydrogen;
(G) R ₇ is hydrogen or alkyl of 1 to about 4 carbon atoms; and (h) E is QT;
Here, (i) Q _{_{_{is, -C (R 13 R 14)}}} t -, phenyl substituted with _{R 8} and _{R 9,} substituted by _{R 8} or _{R 8} and _{R 9,} 1 to 2 hetero 5-membered or 6-membered heterocyclic ring having atoms, and substituted with R ₈ and R _9, is selected from one or two of the group consisting of heterocyclic ring 9-membered or 10-membered having heteroatoms Wherein the heteroatom is selected from nitrogen and sulfur; and (ii) T is —C (＝ NR ₁₀ ) NHR ₁₁ , —NH—C (＝ NR ₁₀ ) NHR ₁₁ , and —NHR ₁₅ Selected from the group consisting of:
Wherein R ₈ and R ₉ are independently hydrogen, hydroxy, halogen, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms, alkyl of 1 to about 4 carbon atoms substituted with alkoxy of 1 to about 4 carbon atoms, R ₁₀ and R ₁₁ are independently hydrogen, hydroxy, alkoxy of 1 to about 3 carbon atoms, and 3 to about 16 carbon atoms. Is an alkyl of 1 to about 3 carbon atoms, or —C (＝ O) R ₁₂ , wherein R ₁₀ and R ₁₁ are not both hydroxy or both alkoxy; R ₁₂ is hydrogen , alkyl of 1 to about 6 carbon atoms, 1 to about 6 carbon atoms alkoxy or _(CF _2), a j CF _3, where, j is 0, 1, 2 or _{3; R 13} And each _{R 14} is independently selected from the group consisting of lower alkyl of hydrogen and from 1 to about 3 carbon _{atoms; R 15} is hydrogen, alkyl of 1 to about 6 carbon atoms, and - (CF ₂ _H ) selected from the group consisting of CF ₃ , wherein h is 0, 1, 2, or 3 and t is an integer from 0 to 6,
Compounds and pharmaceutically acceptable salts thereof.

請求項１に記載の化合物であって、ここで、Ｅは、以下：

からなる群から選択される、化合物。2. The compound according to claim 1, wherein E is:

A compound selected from the group consisting of:

請求項１に記載の化合物であって、ここで、Ｅは、以下：

A compound selected from the group consisting of:

Ｘが、−Ｓ（Ｏ）_２−または−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−である、請求項３に記載の化合物。4. The compound according to claim 3, wherein X is -S (O) _2- or -OC (= O)-.

Ｒ_２が、−ＣＨ_３または−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＨである、請求項４に記載の化合物。R ₂ is -CH ₃ or -CH _(R 5) OH, The compound according to claim 4.

Ｒ_５が、水素、非置換アルキルまたはＹ_１で置換されたアルキルである、請求項５に記載の化合物。R ₅ is hydrogen, alkyl substituted with unsubstituted alkyl or Y _1, A compound according to claim 5.

Ｒ_２が、−ＣＨ_２ＯＨまたは−ＣＨ（ＣＨ_３）ＯＨである、請求項６に記載の化合物。R ₂ is _-CH 2 OH or -CH _(CH 3) OH, The compound according to claim 6.

Ｒ_２が−ＣＨ（ＣＨ_３）ＯＨであり、そしてＲの立体配置を有する、請求項７に記載の化合物。R ₂ is -CH _(CH 3) OH, and has a configuration of R, the compounds according to claim 7.

Ｒ_３が水素である、請求項７に記載の化合物。R ₃ is hydrogen, A compound according to claim 7.

Ｒ_４がメチルまたはプロパルギルであり、そしてＲ_４ｂが水素である、請求項９に記載の化合物。R ₄ is methyl or propargyl, and R _4b is hydrogen, A compound according to claim 9.

Ｒ_３およびＲ_４ａは一緒に選択されて、プロリル、ピペコリル、アゼチジン−２−カルボニル、４−ヒドロキシプロリル、３−ヒドロキシプロリル、３，４−メタノプロリル、および３，４−デヒドロプロリルからなる群から選択される基をＰ_２に提供し、そしてＲ_４ｂは水素である、請求項７に記載の化合物。R ₃ and R _4a are selected together and consist of prolyl, pipecolyl, azetidine-2-carbonyl, 4-hydroxyprolyl, 3-hydroxyprolyl, 3,4-methanoprolyl, and 3,4-dehydroprolyl providing a group selected from the group in P _2, and R _4b is hydrogen, a compound according to claim 7.

Ｒ_３およびＲ_４ａは一緒に選択されて、プロリル、４−ｃｉｓ−ヒドロキシプロリル、３，４−デヒドロプロリル、３，４−メタノプロリル、およびアゼチジン−２−カルボニルからなる群から選択される基をＰ_２に提供し、そしてＲ_４ｂは水素である、請求項１１に記載の化合物。R ₃ and R _4a are selected together to form a group selected from the group consisting of prolyl, 4-cis-hydroxyprolyl, 3,4-dehydroprolyl, 3,4-methanoprolyl, and azetidine-2-carbonyl providing a _{P 2,} and _{R 4b} is hydrogen, a compound according to claim 11.

Ｒ_５がＨである、請求項５に記載の化合物。The compound according to claim 5, wherein R ₅ is H.

Ｘが、−Ｓ（Ｏ）_２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−および直接結合からなる群から選択される、請求項３に記載の化合物。4. The compound of claim 3, wherein X is selected from the group consisting of -S (O) _2- , -OC (= O)-, -NH-C (= O)-, and a direct bond.

Ｘが、−Ｓ（Ｏ）_２−または−ＯＣ（＝Ｏ）−である、請求項１４に記載の化合物。15. The compound according to claim 14, wherein X is -S (O) _2- or -OC (= O)-.

Ｒ_１が、フェニル、ベンジル、２−フェニルエチル、イソブチル、ｎ−ブチル、３−フェニルプロピル、４−クロロベンジル、３−クロロベンジルおよび２−フルオロベンジルからなる群から選択される、請求項１５に記載の化合物。R ₁ is phenyl, benzyl, 2-phenylethyl, isobutyl, n- butyl, 3-phenylpropyl, 4-chlorobenzyl, is selected from the group consisting of 3-chlorobenzyl and 2-fluorobenzyl, to claim 15 A compound as described.

Ｒ_１−Ｘ−が、フェニル−Ｓ（Ｏ）_２−、ベンジル−Ｓ（Ｏ）_２−、２−フェニルエチル−Ｓ（Ｏ）_２−、３−フェニルプロピル−Ｓ（Ｏ）_２−；ｎ−ブチル−Ｓ（Ｏ）_２−、ベンジル−ＯＣ（＝Ｏ）−、イソブチル−ＯＣ（＝Ｏ）−、４−クロロベンジル−Ｓ（Ｏ）_２−、３−クロロベンジル−Ｓ（Ｏ）_２−、および２−フルオロベンジル−Ｓ（Ｏ）_２−からなる群から選択される、請求項１６に記載の化合物。R ₁ -X- is phenyl -S _{(O) 2} -, benzyl -S _(O) 2 -, 2- phenylethyl -S _(O) 2 -, 3- phenylpropyl -S _(O) 2 -; n -Butyl-S (O) _2- , benzyl-OC (= O)-, isobutyl-OC (= O)-, 4-chlorobenzyl-S (O) _2- , 3-chlorobenzyl-S (O) ₂ -, and 2-fluorobenzyl -S _{(O) 2} - is selected from the group consisting of a compound according to claim 16.

Ｒ_２が、Ｐ３にＤ−セリル基を提供するように選択される、請求項１７に記載の化合物。R ₂ is selected to provide a D- seryl group P3, compounds of claim 17.

Ｅが、４−アミジノフェニル、４−グアニジノフェニルまたは５−（２−アミジノ−チエニル）である、請求項１８に記載の化合物。The compound according to claim 18, wherein E is 4-amidinophenyl, 4-guanidinophenyl or 5- (2-amidino-thienyl).

請求項１９に記載の化合物であって、ここで、（ｉ）Ｒ_３およびＲ_４ａは、一緒に選択されて、プロリル、アゼチジン−２−カルボニル、３，４−メタノプロリル、および３，４−デヒドロプロリルからなる群から選択される基をＰ_２に提供するか、または（ｉｉ）Ｒ_３は水素であり、そしてＲ_４ａはメチルであり、そしてＲ_４ｂは水素である、化合物。A compound according to claim 19, wherein, (i) _{R 3} and _{R 4a} are selected together, prolyl, azetidine-2-carbonyl, 3,4 Metanopuroriru, and 3,4-dehydro or providing a group selected from the group consisting of prolyl the _{P 2,} or (ii) _{R 3} is hydrogen and _{R 4a} is methyl and _{R 4b} is hydrogen, compound.

Ｅが、４−アミジノフェニル、４−グアニジノフェニルまたは５−（２−アミジノ−チエニル）である、請求項１７に記載の化合物。18. The compound according to claim 17, wherein E is 4-amidinophenyl, 4-guanidinophenyl or 5- (2-amidino-thienyl).

請求項２１に記載の化合物であって、ここで、（ｉ）Ｒ_３およびＲ_４ａは一緒に選択されて、プロリル、アゼチジン−２−カルボニル、３，４−メタノプロリルおよび３，４−デヒドロプロリルからなる群から選択される基をＰ_２に提供するか、または（ｉｉ）Ｒ_３は水素であり、そしてＲ_４ａはメチルであり、そしてＲ_４ｂは水素である、化合物。A compound according to claim 21, wherein, (i) _{R 3} and _{R 4a} are selected together, prolyl, azetidine-2-carbonyl, 3,4 Metanopuroriru and 3,4 Dehidoropuroriru a group selected from the group consisting of providing a _{P 2} or (ii) _{R 3} is hydrogen and _{R 4a} is methyl and _{R 4b} is hydrogen, compound.

請求項１７に記載の化合物であって、ここで、（ｉ）Ｒ_３およびＲ_４ａは一緒に選択されて、プロリル、アゼチジン−２−カルボニル、３，４−メタノプロリルおよび３，４−デヒドロプロリルからなる群から選択される基をＰ_２に提供するか、または（ｉｉ）Ｒ_３は水素であり、そしてＲ_４ａはメチルであり、そしてＲ_４ｂは水素である、化合物。A compound according to claim 17, wherein, (i) _{R 3} and _{R 4a} are selected together, prolyl, azetidine-2-carbonyl, 3,4 Metanopuroriru and 3,4 Dehidoropuroriru a group selected from the group consisting of providing a _{P 2} or (ii) _{R 3} is hydrogen and _{R 4a} is methyl and _{R 4b} is hydrogen, compound.

Ｒ_２が、−ＣＨ_２ＮＨ（Ｘ’）（Ｒ_６）および−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＨからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。R ₂ is selected from the group consisting of _{-CH 2 NH (X ') (} R 6) , and -CH _(R 5) OH, a compound of claim 1.

Ｒ_５が、水素、非置換アルキル、Ｙ_１で置換されたアルキルおよび１〜４炭素原子のアルキルからなる群から選択され、該１〜４炭素原子のアルキルは、非置換フェニルあるいはＹ_１、Ｙ_２およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換されたフェニルで置換されたアルキルである、請求項２４に記載の化合物。R ₅ is hydrogen, unsubstituted alkyl, selected from the group consisting of alkyl substituted alkyl and 1-4 carbon atoms in Y _1, alkyl of the 1 to 4 carbon atoms, unsubstituted phenyl or Y _1, Y monosubstituted with 1-3 substituents selected from the group consisting of ₂ and Y _3, an alkyl substituted with disubstituted, or trisubstituted phenyl, a compound according to claim 24.

Ｒ_２が、Ｄ−セリル、（Ｒ，Ｒ）Ｄ−アロスレオニル、Ｄ−２−アミノブチリル、Ｎ−β−メチルオキシカルボニル−Ｄ−２，３−ジアミノプロピオニル、Ｎ−β−（２−フェニルエチルカルボニル）−Ｄ−２，３−ジアミノプロピオニル、およびＮ−β−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−２，３−ジアミノプロピオニルからなる群から選択される基をＰ３に提供するように選択される、請求項２５に記載の化合物。R ₂ is D-seryl, (R, R) D-arothreonyl, D-2-aminobutyryl, N-β-methyloxycarbonyl-D-2,3-diaminopropionyl, N-β- (2-phenylethylcarbonyl 26) is selected to provide P3 with a group selected from the group consisting of -D-2,3-diaminopropionyl, and N-β-benzyloxycarbonyl-D-2,3-diaminopropionyl. The compound according to the above.

Ｐ３が、Ｄ−セリルまたは（Ｒ，Ｒ）Ｄ−アロスレオニルである、請求項２６に記載の化合物。27. The compound according to claim 26, wherein P3 is D-seryl or (R, R) D-arothreonyl.

Ｒ_３が水素である、請求項１に記載の化合物。The compound according to claim 1, wherein R ₃ is hydrogen.

Ｒ_４ａが、メチル、ビニル、アリルまたはプロパルギルであり、そしてＲ_４ｂが水素である、請求項１に記載の化合物。The compound of claim 1, wherein R _4a is methyl, vinyl, allyl or propargyl, and R _4b is hydrogen.

Ｒ_３およびＲ_４ａが一緒に選択されて、プロリル、ピペコリル、アゼチジン−２−カルボニル、４−ヒドロキシプロリル、３−ヒドロキシプロリル、３，４−メタノプロリル、および３，４−デヒドロプロリルからなる群から選択される基をＰ２に提供し、そしてＲ_４ｂが水素である、請求項１に記載の化合物。R ₃ and R _4a are selected together and consist of prolyl, pipecolyl, azetidine-2-carbonyl, 4-hydroxyprolyl, 3-hydroxyprolyl, 3,4-methanoprolyl, and 3,4-dehydroprolyl 2. A compound according to claim 1, wherein a group selected from the group is provided for P2 and _R4b is hydrogen.

Ｒ_３およびＲ_４ａが一緒に選択されて、プロリル、４−ｃｉｓ−ヒドロキシプロリル、３，４−デヒドロプロリル、３，４−メタノプロリル、およびアゼチジン−２−カルボニルからなる群から選択される基をＰ２に提供し、そしてＲ_４ｂが水素である、請求項３０に記載の化合物。R ₃ and R _4a are selected together to form a group selected from the group consisting of prolyl, 4-cis-hydroxyprolyl, 3,4-dehydroprolyl, 3,4-methanoprolyl, and azetidine-2-carbonyl To P2 and R _4b is hydrogen.

Ｒ_２が、Ｄ−セリルおよび（Ｒ，Ｒ）Ｄ−アロスレオニルからなる群から選択される基をＰ３に提供するように選択される、請求項３１に記載の化合物。R ₂ is, D- seryl and (R, R) D- Arosureoniru a group selected from the group consisting of is selected to provide the P3, compounds of claim 31.

Ｒ_２が、Ｄ−セリルおよび（Ｒ，Ｒ）−Ｄ−アロスレオニルからなる群から選択される基をＰ３に提供するように選択され、Ｒ_３が水素であり、Ｒ_４ａがメチルであり、そしてＲ_４ｂが水素である、請求項１に記載の化合物。R ₂ is selected D- seryl and (R, R) a group selected from the group consisting of -D- Arosureoniru to provide the P3, _{R 3} is _{hydrogen, R 4a} is methyl and The compound of claim 1, wherein R _4b is hydrogen.

Ｒ_３およびＲ_４ａが一緒に選択されて、プロリル、アゼチジン−２−カルボニル、３，４−メタノプロリル、および３，４−デヒドロプロリルからなる群から選択される基をＰ２に提供し、そしてＲ_４ｂが水素である、請求項１に記載の化合物。R ₃ and _{R 4a} is selected together to provide prolyl, azetidine-2-carbonyl, 3,4 Metanopuroriru, and a group selected from the group consisting of 3,4 Dehidoropuroriru to P2, and R _2. The compound according to claim 1, wherein _4b is hydrogen.

Ｒ_２が−ＣＨ_２ＯＨであり、そして　Ｒの立体配置を有する、請求項７に記載の化合物。R ₂ is _-CH 2 OH, and have a configuration of R, the compounds according to claim 7.

Ｒ_２が、−（ＣＨ_２）_２ＯＡ_１または−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＡ_１である、請求項１に記載の化合物。R ₂ _{_{is, - (CH 2) 2 OA}} 1 , or -CH _(R 5) is OA _1, A compound according to claim 1.

Ｒ_２が−ＣＨ（Ｒ_５）ＯＡ_１である、請求項３６に記載の化合物。R ₂ is -CH _(R 5) OA _1, A compound according to claim 36.

Ｒ_５が、水素、非置換アルキル、Ｙ_１で置換されたアルキル、および１〜約４炭素原子のアルキルからなる群から選択され、該１〜約４炭素原子のアルキルは、非置換フェニルあるいはＹ_１、Ｙ_２およびＹ_３からなる群から選択される１〜３個の置換基で一置換、二置換、または三置換されたフェニルで置換されたアルキルである、請求項３７に記載の化合物。R ₅ is hydrogen, unsubstituted alkyl, selected from the group consisting of alkyl substituted alkyl, and from 1 to about 4 carbon atoms in Y _1, alkyl of the 1 to about 4 carbon atoms, unsubstituted phenyl or Y _1, Y ₂ and monosubstituted with one to three substituents selected from the group consisting of Y _3, is alkyl substituted with disubstituted, or trisubstituted phenyl, a compound according to claim 37.

Ｒ_２が、アシルおよびＤ−セリルのカルボン酸エステルからなる群から選択される基をＰ３に提供するように選択される、請求項３７に記載の化合物。R ₂ is selected to provide a group selected from the group consisting of carboxylic acid esters of acyl and D- seryl to P3, compounds of claim 37.

Ｒ_３が水素である、請求項３９に記載の化合物。R ₃ is hydrogen, A compound according to claim 39.

Ｒ_４ａが、メチル、ビニル、アリルまたはプロパルギルであり、そしてＲ_４ｂが水素である、請求項４０に記載の化合物。41. The compound of claim 40, wherein _R4a is methyl, vinyl, allyl or propargyl, and _R4b is hydrogen.

Ｒ_３およびＲ_４ａが一緒に選択されて、プロリル、ピペコリル、アゼチジン−２−カルボニル、４−ヒドロキシプロリル、３−ヒドロキシプロリル、３，４−メタノプロリルおよび３，４−デヒドロプロリルからなる群から選択される基をＰ２に提供し、そしてＲ_４ｂが水素である、請求項３９に記載の化合物。R ₃ and R _4a are selected together to form a group consisting of prolyl, pipecolyl, azetidine-2-carbonyl, 4-hydroxyprolyl, 3-hydroxyprolyl, 3,4-methanoprolyl and 3,4-dehydroprolyl _40. The compound of claim 39, wherein P2 provides a group selected from and _R4b is hydrogen.

Ｒ_２が、アシルおよびＤ−セリルのカルボン酸エステルからなる群から選択される基をＰ３に提供するように選択される、請求項１に記載の化合物。 _2. The compound of claim 1, wherein R2 is selected to provide P3 with a group selected from the group consisting of acyl and carboxylic esters of D-seryl.

Ｒ_３が水素であり、Ｒ_４ａがメチルであり、そしてＲ_４ｂが水素である、請求項４３に記載の化合物。R ₃ is _{hydrogen, R 4a} is methyl and _{R 4b} is hydrogen, A compound according to claim 43.

Ｒ_３およびＲ_４ａが一緒に選択されて、プロリル、アゼチジン−２−カルボニル、３，４−メタノプロリル、および３，４−デヒドロプロリルからなる群から選択される基をＰ２に提供し、そしてＲ_４ｂが水素である、請求項４３に記載の化合物。R ₃ and _{R 4a} is selected together to provide prolyl, azetidine-2-carbonyl, 3,4 Metanopuroriru, and a group selected from the group consisting of 3,4 Dehidoropuroriru to P2, and R _44. The compound of claim 43, wherein _4b is hydrogen.

図１０Ａ〜１０Ｆに示される化合物、化合物ＡＸ、化合物ＡＹおよび化合物ＡＺからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。The compound according to claim 1, wherein the compound is selected from the group consisting of the compounds shown in FIGS. 10A to 10F, compound AX, compound AY and compound AZ.

図１３Ａ〜１３Ｃに示される化合物からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。The compound of claim 1, wherein the compound is selected from the group consisting of the compounds shown in FIGS.

化合物ＢＧ、化合物ＢＪおよび化合物ＢＫからなる群から選択される、請求項４８に記載の化合物。49. The compound according to claim 48, wherein the compound is selected from the group consisting of compound BG, compound BJ, and compound BK.

化合物ＢＱである、請求項４８に記載の化合物。49. The compound of claim 48, which is compound BQ.

Ｑが、Ｒ_８およびＲ_９で置換されたフェニル、またはＲ_８およびＲ_９で置換されたピリジルである、請求項１に記載の化合物。Q is phenyl substituted with R ₈ and R _9, or pyridyl substituted with R ₈ and R _9, compounds of claim 1.

Ｔが、−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１または−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１である、請求項５１に記載の化合物。T _{is, -C} (= NR 10) is _{NHR 11} or _{-NH-C (= NR 10)} NHR 11, compound of claim 51.

ＴがＱの４位である、請求項５２に記載の化合物。53. The compound of claim 52, wherein T is at position 4 of Q.

Ｑが、Ｒ_８およびＲ_９で置換されたフェニルである、請求項５３に記載の化合物。Q is phenyl substituted with R ₈ and R _9, A compound according to claim 53.

Ｔが−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１である、請求項５４に記載の化合物。T is _{-NH-C (= NR 10)} NHR 11, compound of claim 54.

Ｑが、Ｒ_８およびＲ_９で置換されたピリジルである、請求項５３に記載の化合物。Q is a pyridyl substituted with R ₈ and R _9, A compound according to claim 53.

Ｔが−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＲ_１０）ＮＨＲ_１１である、請求項５６に記載の化合物。T is _{-NH-C (= NR 10)} NHR 11, compound of claim 56.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療有効量の請求項１に記載の化合物を含む、薬学的組成物。A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically effective amount of a compound of claim 1.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的に受容可能な量の請求項６に記載の化合物を含む、薬学的組成物。A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically acceptable amount of the compound of claim 6.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的に受容可能な量の請求項１７に記載の化合物を含む、薬学的組成物。A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically acceptable amount of the compound of claim 17.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的に受容可能な量の請求項２７に記載の化合物を含む、薬学的組成物。28. A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically acceptable amount of the compound of claim 27.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的に受容可能な量の請求項３０に記載の化合物を含む、薬学的組成物。A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically acceptable amount of the compound of claim 30.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的に受容可能な量の請求項３９に記載の化合物を含む、薬学的組成物。40. A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically acceptable amount of the compound of claim 39.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的に受容可能な量の請求項４１に記載の化合物を含む、薬学的組成物。42. A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically acceptable amount of a compound of claim 41.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的に受容可能な量の請求項４２に記載の化合物を含む、薬学的組成物。43. A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically acceptable amount of the compound of claim 42.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的有効量の請求項４４に記載の化合物を含む、薬学的組成物。A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically effective amount of a compound according to claim 44.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的有効量の請求項４５に記載の化合物を含む、薬学的組成物。46. A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically effective amount of a compound according to claim 45.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的有効量の請求項４７に記載の化合物を含む、薬学的組成物。48. A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically effective amount of a compound of claim 47.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的有効量の請求項４８に記載の化合物を含む、薬学的組成物。49. A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically effective amount of a compound according to claim 48.

薬学的に受容可能なキャリアおよび治療的有効量の請求項４９に記載の化合物を含む、薬学的組成物。50. A pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically effective amount of a compound according to claim 49.

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項１に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 1. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項６に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need of such treatment, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 6. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項１７に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。18. A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need thereof, comprising administering to the mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 17. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項２７に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。28. A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 27. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項３２に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。33. A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need of such treatment, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 32. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項３９に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。A method of treating a condition that is reversed by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 39. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項４１に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。47. A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 41. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項４２に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。48. A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 42. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項４４に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。47. A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 44. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項４５に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。47. A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 45. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項４７に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。48. A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 47. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項４８に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。49. A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need of said treatment, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 48. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物におけるウロキナーゼ活性を阻害または減少することによって回復する状態を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項４９に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。50. A method of treating a condition that is ameliorated by inhibiting or decreasing urokinase activity in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 49. A method comprising the step of:

処置の必要のある哺乳動物における血管形成を減少または阻害する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項４７に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。48. A method of reducing or inhibiting angiogenesis in a mammal in need of treatment, said method comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 47.

前記血管形成が病理学的状態に関連する、請求項８４に記載の方法。85. The method of claim 84, wherein said angiogenesis is associated with a pathological condition.

処置の必要のある哺乳動物における血管形成を減少または阻害する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、治療有効量の請求項４８に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。49. A method of reducing or inhibiting angiogenesis in a mammal in need of treatment, said method comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of a compound of claim 48.

前記血管形成が病理学的状態に関連する、請求項８６に記載の方法。87. The method of claim 86, wherein said angiogenesis is associated with a pathological condition.