【０００１】
【発明が属する技術分野】
本発明はＲＮＡ分析において障害となるＲＮａｓｅを短時間でかつ簡便に無害化できる方法及び装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ＲＮＡを取り扱う実験や分析ではＲＮＡを分解するＲＮａｓｅの混入が問題となる。即ち、ＲＮＡは非常に分解されやすく、ＲＮａｓｅというたんぱく質（酵素）によって簡単に分解されてしまう。ＲＮａｓｅは汗や唾液に含まれており、実験器具や実験環境中にも多く存在するため、ＲＮＡ分析の時にはＲＮａｓｅをいかに無害化するかが大きな鍵となる。
【０００３】
たんぱく質は通常、加熱や紫外線照射によって変性し失活するが、ＲＮａｓｅは安定なたんぱく質で、煮沸やオートクレーブでは分解できない。実験器具や実験容器からＲＮａｓｅを除去するには、従来、乾熱滅菌（１８０℃、８時間以上）や薬品による除去が行われているが、時間がかかる、薬品が残留するなどの欠点があった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
前述の様に、ＲＮａｓｅの除去には時間がかかり、また薬品が残ってしまうという問題があった。本発明の課題は短時間でかつＲＮａｓｅを完全に除去することである。
【０００５】
本発明の目的は、文献（日立評論， Ｖｏｌ．７９， Ｎｏ．１０， ｐｐ．５１ （１９９７）「ダメージレスを実現するオゾンアッシング装置」、第４１回応用物理学関係連合講演会２８ａＺＦ−１ （１９９４）「ＵＶ／Ｏ３アッシングにおける添加ガスの効果」）にある様なオゾンアッシング技術を用いて、実験器具や実験容器などから簡単にＲＮａｓｅを除く方法及び装置を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明の手段は、オゾンガスを加熱して、或いはオゾンガスに紫外線を照射して、或いは加熱と紫外線照射を併用して生成される酸素ラジカルでＲＮａｓｅを酸化し、水と二酸化炭素に変えて揮発除去する。
【０００７】
【発明の実施の形態】
【０００８】
＜実施例１＞
本発明のＲＮａｓｅ無害化のシーケンスを図１を用いて説明する。実験器具や容器を反応室に設置し、ヒータ、または赤外線ランプ、または遠赤外線ヒータによって、或いはこれらを併用して１００〜３００℃に加熱する、或いは加熱しながら、オゾン発生機で発生させたオゾンガスを反応室に導き、熱或いは紫外線照射、或いは熱と紫外線照射の両方によってオゾンガスを分解し酸素ラジカルを生成する。生成した酸素ラジカルによってＲＮａｓｅを酸化し、二酸化炭素と水に変えて揮発除去する。反応室で消費されなかったオゾンガスはオゾン分解器によって酸素に分解して排気する。反応室から実験器具や容器を処理後直ぐに取り出したい場合は、オゾンガスの供給を停止し、残存オゾンガスを窒素、酸素、空気などのガスでパージした後に取り出す。
【０００９】
＜実施例２＞
本発明によるＲＮａｓｅの無害化装置の反応室を図２に示す。プレート７上に置かれたガラス製反応容器６に、１から導入したオゾンガスをノズル２を介して放出する。オゾンガスはビーカなどの被洗浄冶具３に放出され、その表面で分解され酸素ラジカルを生成する。被洗浄冶具表面のＲＮａｓｅがこの酸素ラジカルと反応し、二酸化炭素と水になり排気口８から残存オゾンと共に排出される。反応を加速するため、必要に応じて紫外線ランプ５または赤外線ランプ５を用いる、或いは紫外線ランプと赤外線ランプ５を併用する。
【００１０】
【発明の効果】
本発明によれば、ＲＮａｓｅを短時間（濃度１％以上のオゾンガスを用いた場合、３０分以下で無害化できた。）で簡便に無害化でき、ＲＮＡ析のスピードアップが図れる。また、本発明はＲＮａｓｅを酸化し揮発除去するのでＲＮａｓｅを完全に無害化できる。また、本発明はＲＮａｓｅに限らず一般のたんぱく質など生化学分析に用いられる器具の洗浄、μ−ＴＡＳ（Ｍｉｃｒｏ Ｔｏｔａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｓｙｓｔｅｍ）、Ｌａｂ−ｏｎ−ａ−Ｃｈｉｐ、ＤＮＡチップなどの流路の洗浄にも適用できる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明のＲＮａｓｅの無害化シーケンスを説明するための図である。
【図２】本発明のＲＮａｓｅ無害化装置の反応室の一実施例を示す模式図である。
【符号の説明】
１ オゾンガス導入口
２ ノズル
３ ビーカなどの被洗浄冶具
４ ヒータ
５ 紫外線ランプまたは赤外線ランプ
６ ガラス製反応容器
７ プレート
８ 排気口[0001]
TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION
TECHNICAL FIELD The present invention relates to a method and an apparatus capable of detoxifying RNase, which is an obstacle in RNA analysis, in a short time and simply.
[0002]
[Prior art]
In experiments and analysis using RNA, contamination with RNase that degrades RNA poses a problem. That is, RNA is very easily decomposed, and is easily decomposed by a protein (enzyme) called RNase. Since RNase is contained in sweat and saliva and is abundant in laboratory instruments and experimental environments, how to render RNase harmless during RNA analysis is a key.
[0003]
Proteins are usually denatured and deactivated by heating or irradiation with ultraviolet light, but RNase is a stable protein that cannot be decomposed by boiling or autoclaving. Conventionally, dry heat sterilization (180 ° C., 8 hours or more) and removal by chemicals are used to remove RNase from laboratory instruments and experimental containers. However, there are disadvantages such as time consuming and residual chemicals. Was.
[0004]
[Problems to be solved by the invention]
As described above, there is a problem in that it takes time to remove RNase, and a chemical remains. An object of the present invention is to completely remove RNase in a short time.
[0005]
The purpose of the present invention is to review the literature (Hitachi Review, Vol. 79, No. 10, pp. 51 (1997) “Ozone Ashing Apparatus Realizing Damageless”, the 41st Joint Lecture on Applied Physics, 28aZF-1 ( 1994) An object of the present invention is to provide a method and an apparatus for easily removing RNase from experimental instruments and experimental containers by using an ozone ashing technique as described in "UV / O3 ashing").
[0006]
[Means for Solving the Problems]
Means of the present invention is to oxidize RNase with oxygen radicals generated by heating ozone gas, irradiating ozone gas with ultraviolet light, or by using both heating and ultraviolet irradiation, and converting it into water and carbon dioxide for volatilization and removal. I do.
[0007]
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
[0008]
<Example 1>
The RNase detoxification sequence of the present invention will be described with reference to FIG. Ozone gas generated by an ozone generator, with experimental equipment and containers placed in a reaction chamber, heated to 100 to 300 ° C by a heater, an infrared lamp, or a far infrared heater, or a combination thereof, or by heating Is introduced into the reaction chamber, and the ozone gas is decomposed by heat or ultraviolet irradiation, or both heat and ultraviolet irradiation to generate oxygen radicals. The RNase is oxidized by the generated oxygen radicals, converted into carbon dioxide and water, and volatilized and removed. Ozone gas not consumed in the reaction chamber is decomposed into oxygen by an ozone decomposer and exhausted. When it is desired to take out the experimental instruments and containers from the reaction chamber immediately after the treatment, supply of the ozone gas is stopped, and the remaining ozone gas is taken out after purging with a gas such as nitrogen, oxygen or air.
[0009]
<Example 2>
FIG. 2 shows the reaction chamber of the RNase detoxification apparatus according to the present invention. The ozone gas introduced from 1 is discharged through the nozzle 2 into the glass reaction vessel 6 placed on the plate 7. The ozone gas is released to the jig 3 to be cleaned such as a beaker, and is decomposed on its surface to generate oxygen radicals. The RNase on the surface of the jig to be cleaned reacts with the oxygen radicals to become carbon dioxide and water, and is discharged from the exhaust port 8 together with the remaining ozone. In order to accelerate the reaction, an ultraviolet lamp 5 or an infrared lamp 5 is used as necessary, or an ultraviolet lamp and an infrared lamp 5 are used in combination.
[0010]
【The invention's effect】
According to the present invention, RNase can be detoxified easily in a short time (when ozone gas having a concentration of 1% or more is used, it can be detoxified in 30 minutes or less), and the speed of RNA analysis can be increased. Further, the present invention oxidizes and volatilizes and removes RNase, so that RNase can be completely rendered harmless. In addition, the present invention is not limited to RNase, but also for cleaning instruments used for biochemical analysis such as general proteins, μ-TAS (Micro Total Analysis System), Lab-on-a-Chip, and DNA chips. Is also applicable.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a diagram for explaining a RNase detoxification sequence of the present invention.
FIG. 2 is a schematic view showing one embodiment of a reaction chamber of the RNase detoxification apparatus of the present invention.
[Explanation of symbols]
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 Ozone gas inlet 2 Nozzle 3 Jig to be cleaned, such as beaker 4 Heater 5 Ultraviolet lamp or infrared lamp 6 Glass reaction vessel 7 Plate 8 Exhaust port
