JP2004059618A

JP2004059618A - Polysaccharide complex and its production method

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Publication number: JP2004059618A
Application number: JP2002216408A
Authority: JP
Inventors: Yumiko Kato; 加藤　友美子; Ryukichi Matsuo; 松尾　龍吉; Junichi Kaminaga; 神永　純一
Original assignee: Toppan Printing Co Ltd
Current assignee: Toppan Inc
Priority date: 2002-07-25
Filing date: 2002-07-25
Publication date: 2004-02-26
Anticipated expiration: 2022-07-25
Also published as: JP4356289B2

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a polysaccharide complex which has good processibility, can be easily and inexpensively obtained through a simple purification process, and has a uniform structure; of which the carboxy groups or amino groups for forming an ion complex can be controlled; and which is given an aimed performance by an additive and is excellent in biocompatibility and biodegradability; and its production method. <P>SOLUTION: This polysaccharide complex is formed from chitosan and an oxidized polysaccharide prepared by at least introducing a carboxy group or its salt group into the 6-position of a pyranose ring of a polysaccharide by oxidation and contains at least one additive for modification and/or at least one modification additive component for a polysaccharide. <P>COPYRIGHT: (C)2004,JPO

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生分解性、生体親和性に優れる天然物由来の多糖類の複合体に関するものであり、その、水系での簡便な製造方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
近年、天然多糖類は新しいタイプの生分解性高分子材料として、また生体親和性材料として注目され、その利用について多くの研究がなされ、数々の知見が報告されている。
【０００３】
特にキチン、キトサンは生物活性効果のある生体親和性材料として注目されている。
キトサンはカニやエビなどの甲殻類、カブトムシやコオロギなどの昆虫類の骨格物質として存在し、また菌類や細胞壁にも存在するキチン（Ｎ−アセチルＤ−グルコサミン残基が多数、β−（１，４）−結合した多糖類）の脱アセチル化合物でグルコサミンのβ−（１，４）−結合した多糖類であり、唯一の天然カチオン性多糖類としても利用されている。
【０００４】
一方、ポリカチオン性物質とポリアニオン性物質からなるポリイオンコンプレックス材料は、水系で容易に調製できて、水に不溶な物質が得られることから、従来から様々な提案がなされている（特開平６−１００４６８号公報、特開平７−３３６８２号公報、特開１１−１３０６９７号公報、特開２００２−６３８号公報等）。例えば、天然物であるヒアルロン酸やコンドロイチン、キチン、キトサン、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、デキストラン等の多糖類、及びカルボキシメチルセルロース等の多等類誘導体、またゼラチンやポリアミノ酸及びポリペプチド及びタンパク質、さらにはポリアクリル酸等の合成高分子を利用したポリイオンコンプレックスがある。
【０００５】
しかし、合成高分子は、分子内でのカチオン性基或いはアニオン性基のコントロールが可能で、様々な物性のポリイオンコンプレックスを調製し易い反面、生分解性や生体親和性に乏しく、適用範囲が限定される。
また生分解性や、生体親和性に優れる天然材料も、タンパク質材料にはヒトや動物由来のウイルス感染の危険性があり、天然多糖類では、天然物故にカチオン性、或いはアニオン性の官能基のコントロールはできず、多様な要求物性に対応するポリイオンコンプレックスを形成することが難しいという欠点を有する。
さらにカルボキシメチルセルロース等の従来の多糖類誘導体では、置換度はコントロールできても、分子内、或いは分子間での置換基分布はバラバラであり、生体内での分解や代謝の機序が明確ではないという問題点を有していた。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、加工適性の良く、簡便な精製工程で容易かつ安価に得ることができ、構造が均一で、イオンコンプレックスを形成するカルボキシル基やアミノ基が制御可能で、添加剤により目的に応じた性能を有し、また生体適合性、生分解性に優れる多糖類複合体及びその製造方法を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
請求項１の発明は、少なくとも酸化により多糖類のピラノース環の６位にカルボキシル基又はその塩を導入した酸化多糖類とキトサンからなる多糖類複合体であって、１種類以上の多糖類の改質用添加剤及び／または改質添加成分を含むことを特徴とする多糖類複合体である。
【０００８】
請求項２の発明は、前記酸化多糖類と前記キトサンによりポリイオンコンプレックス構造を形成されていることを特徴とする請求項１に記載の多糖類複合体である。
【０００９】
請求項３の発明は、前記酸化多糖類が、水に溶解又は分散させた多糖類を水系で、Ｎ−オキシル化合物の触媒の存在下、酸化剤を用いて酸化する方法により得られ、かつ天然多糖類のピラノース環中６位の１級水酸基を選択的に酸化されてなることを特徴とする請求項１および２のいずれかに記載の多糖類複合体である。
【００１０】
請求項４の発明は、前記キトサンとして、その構成単糖であるグルコサミンとＮ−アセチルグルコサミンの比率が、４５：５５から５５：４５の範囲にあることを特徴とする請求項１から３のいずれかに記載の多糖類複合体である。
【００１１】
請求項５の発明は、前記改質用添加剤及び／または改質添加成分が、多糖類複合体の物性、構造、性能、および加工性を改質させるものであることを特徴とする請求項１から４のいずれかに記載の多糖類複合体である。
【００１２】
請求項６の発明は、１種類以上の多糖類の改質用添加剤及び／または改質添加成分を溶解または分散させた水溶液中に、多糖類のピラノース環の６位にカルボキシル基又はその塩を導入した酸化多糖類とキトサンを添加することにより、ポリイオンコンプレックスを形成させて水不溶化することを特徴とする多糖類複合体の製造方法である。
【００１３】
請求項７の発明は、多糖類のピラノース環の６位にカルボキシル基又はその塩を導入した酸化多糖類とキトサンと１種類以上の多糖類の改質用添加剤及び／または改質添加成分を、共に溶解又は分散させた水溶液を、酸又はアルカリで中和処理することにより、酸化多糖類とキトサンのポリイオンコンプレックスを形成させて水不溶化することを特徴とする多糖類複合体の製造方法である。
【００１４】
請求項８の発明は、多糖類のピラノース環の６位にカルボキシル基又はその塩を導入した酸化多糖類及びキトサンを溶解又は分散させた水溶液を予め別々に調製しておき、その一方或いは双方、或いは両水溶液とは別に、１種類以上の多糖類の改質用添加剤及び／または改質添加成分を溶解或いは分散させ、各水溶液を混合することでポリイオンコンプレックスを形成させて水不溶化することを特徴とする多糖類複合体の製造方法である。
【００１５】
請求項９の発明は、前記酸化多糖類が、水に溶解又は分散させた多糖類を水系で、Ｎ−オキシル化合物の触媒の存在下、酸化剤を用いて酸化する方法により得られ、かつ天然多糖類のピラノース環中６位の１級水酸基を選択的に酸化されてなることを特徴とする請求項６から８のいずれかに記載の多糖類複合体の製造方法である。
【００１６】
請求項１０の発明は、前記キトサンとして、その構成単糖であるグルコサミンとＮ−アセチルグルコサミンの比率が、４５：５５から５５：４５の範囲にあることを特徴とする請求項６から９のいずれかに記載の多糖類複合体の製造方法である。
【００１７】
請求項１１の発明は、前記改質用添加剤が、多糖類複合体の物性、構造、性能、および加工性を改質させるものであることを特徴とする請求項６から１０のいずれかに記載の多糖類複合体の製造方法である。
【００１８】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の詳細を説明する。
本発明の多糖類複合体は、選択性の高い酸化方法により多糖類のピラノース環の６位にカルボキシル基又はその塩を導入した酸化多糖類をポリアニオン成分とし、構成単糖であるＮ−アセチルグルコサミンとグルコサミンの比率をコントロールしたキトサンをポリカチオン成分として、両者のポリイオンコンプレックスを形成して、１種類以上の多糖類の改質用添加剤及び／または改質添加成分を含んでなることを特徴とするものである。
【００１９】
先ず、本発明においてポリイオンコンプレックスを形成するためのポリアニオン成分となる酸化多糖類について説明する。本発明に用いられる酸化多糖類は、天然多糖類のピラノース環の６位を選択的に酸化し、カルボキシル基またはその塩を導入したウロン酸構造を有する多糖類である。原料の天然多糖類としては、その種類、由来などは特に限定されるものではないが、ほとんど単一の構成単糖が直鎖状に連なったセルロース、キチン、デンプン等は、原料の調達、酸化処理の容易さ、また酸化により生成するウロン酸の安全性の観点から、特に好ましい。
【００２０】
本発明に用いられる酸化多糖類は、カルボキシメチル化など多糖類への誘導体化によるカルボキシル基の導入とは異なり、１つのピラノース環内に１つだけ６位に選択的にカルボキシル基が導入され、分子間、分子内での分布が均一であり、且つ、水酸基へエステル結合またはエーテル結合により置換基を導入するものではない為、ポリイオンコンプレックスを形成する際の立体障害による影響が少ない。また、生体内外で分解された後の置換基の影響がない。例えばセルロースが酸化されたものはセロウロン酸と呼ばれ、グルクロン酸がβ−１，４結合で連なっている。デンプンが酸化されたものはアミロウロン酸と呼ばれ、グルクロン酸がα−１，４結合で連なっている。キチンが酸化されたものはキトウロン酸または６−オキシキチンと呼ばれ、Ｎ−アセチルグルコサミノウロン酸（Ｎ−アセチルグルコサミンの６位炭素がカルボキシル基になったもの）がβ−１，４結合で連なっている。
【００２１】
天然にもアルギン酸、ペクチン、ヒアルロン酸などウロン酸類は存在するが、主にヘテロ多糖類が多く、天然物故に糖残基の分布や導入される側鎖の影響など、制御不能な部分が多く、本発明のポリアニオン成分としては好ましくない。本発明に用いられるポリアニオン成分は、酸化度を制御してウロン酸の割合をコントロールした酸化多糖類であることが一つの特徴である。
【００２２】
以下、本発明の酸化多糖類を得る為の酸化方法について述べる。
本発明における酸化方法はＮ−オキシル化合物などの触媒の存在下で、水に溶解又は分散させた多糖類を水系で処理することを特徴とするもので、多糖類のピラノース環の６位を選択的に酸化して、カルボキシル基又はその塩を導入することができる。
【００２３】
本発明の酸化多糖類は、Ｎ−オキシル化合物（オキソアンモニウム塩）の存在下、酸化剤を用いて、原料の多糖類を酸化することにより得ることができる。Ｎ−オキシル化合物としては、２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジン−Ｎ−オキシル（以下ＴＥＭＰＯと称する）などが挙げられる。この酸化方法では、酸化の程度に応じて、カルボキシル基を均一かつ効率よく導入できる。Ｎ−オキシル化合物は触媒としての量で済み、例えば、多糖類の構成単糖のモル数に対し、１０ｐｐｍ〜５％あれば充分であるが、０．０５％から３％が好ましい。
【００２４】
酸化剤としては、ハロゲン、次亜ハロゲン酸，亜ハロゲン酸や過ハロゲン酸又はそれらの塩、ハロゲン酸化物、窒素酸化物、過酸化物など、目的の酸化反応を推進し得る酸化剤であれば、いずれの酸化剤も使用できる。
【００２５】
さらに本酸化方法では、臭化物やヨウ化物との共存下で酸化反応を行うと、温和な条件下でも酸化反応を円滑に進行させることができ、カルボキシル基の導入効率を大きく改善できる。この臭化物又はヨウ化物の使用量は、酸化反応を促進できる範囲で選択でき、例えば、多糖類の構成単糖のモル数に対し０〜１００％である。しかし、反応効率の点から、１〜５０％が好ましい。
【００２６】
本発明における多糖類の酸化方法では、例えばＮ−オキシル化合物にはＴＥＭＰＯを用い、臭化ナトリウムの存在下、酸化剤として次亜塩素酸ナトリウムを用いて行うのが特に好ましい。
【００２７】
また、構成単糖残基の１級水酸基への酸化の選択性を上げ、副反応を抑える目的で、反応温度は室温以下、より好ましくは系内を５℃以下で反応させることが望ましい。さらに、反応中は系内をアルカリ性に保つことが好ましい。この時のｐＨは９〜１３、より好ましくはｐＨ１０〜１２に保つとよい。
【００２８】
ここで、この酸化方法はｐＨを一定値に保つ際に添加されるアルカリの量により酸化度を制御できることを特徴としている。糖残基１モルに対し、添加するアルカリが１モルであると、全ての糖残基中６位の一級水酸基がカルボキシル基にまで酸化される。
従って、アルカリや前記酸化剤の添加量を少なくして、カルボキシル基の導入量を少なくすれば、ポリイオンコンプレックスを形成する際の酸化多糖類とキトサンとの接点が少なくなり、多糖類複合体の物性を制御することが可能である。
【００２９】
また、原料となる多糖類の結晶性が高い場合、酸化効率が悪くなるが、それぞれの溶解し得る溶媒に一旦溶解させ、再生処理を施すことで、酸化効率を改善することができる。
【００３０】
また、酸化多糖類の６位カルボキシル基は、ナトリウム塩など塩で存在する方が安定であり、これらの酸化多糖類の塩は水溶性が高い。またこの酸化多糖類塩の水溶液に塩酸などの酸を添加するか、イオン交換樹脂で処理することにより、脱塩したＣＯＯＨ型の酸化多糖類を得ることができる。特に、前記したアミロウロン酸、及びキトウロン酸（または６−オキシキチン）は、ＣＯＯＨ型でも水溶性を示す。
【００３１】
続いて、本発明においてポリイオンコンプレックスを形成するためのポリカチオン成分となるキトサンについて説明する。
Ｎ−アセチルグルコサミンと、グルコサミンがβ−１、４グリコシド結合した多糖で、一般にグルコサミンの割合が高いものをキトサン、Ｎ−アセチルグルコサミンの割合が高いものをキチンという。キチンは蟹やエビの骨格物質として、また菌類などの細胞壁に存在し、脱灰、除タンパク、脂質および色素の除去などの精製工程を経て得られるものであり、キトサンはこれらの工程と同時か、或いは上記工程で得られたキチンを、さらに酸やアルカリで加水分解して脱アセチル化処理することにより得られるのが一般的である。また、構成単糖であるＮ−アセチルグルコサミンとグルコサミンは生体内にも存在し、生体内外において容易に分解し、その安全性は高いと言える。
【００３２】
本発明に用いられるキトサンとしては、上記した一般的なキトサンが適用可能であり、原料や精製方法、重合度等については特に限定されるものではない。また、構成単糖中のグルコサミンの割合は２０から１００％であることが望ましい。グルコサミンはカチオン性の遊離のアミノ基を有するため、この割合は本発明の多糖類複合体の物性を制御する上で重要な因子となるものである。
【００３３】
Ｎ−アセチルグルコサミンとグルコサミンの割合、つまりＮ−アセチル基とアミノ基の割合は、酸やアルカリでの加水分解による脱アセチル化や、逆に無水酢酸などを用いたＮ−アセチル化の手法により制御可能である。脱アセチル化反応においては加水分解の反応時間により、Ｎ−アセチル化反応においては試薬の添加量により、アミノ基の割合を制御できる。
【００３４】
ここで、キトサンは希酸溶液に対して塩を形成して溶解するが、中性からアルカリ性では水不溶である。しかしグルコサミンとＮ−アセチルグルコサミンの比率が、４５：５５から５５：４５の範囲では幅広いｐＨ領域で水に可溶であることが知られている。この水溶性キトサンを調製する場合は、均一系でのＮ−アセチル化或いは脱アセチル化を行うことが重要となる。
【００３５】
この水溶性キトサンは、幅広いｐＨ領域の水に可溶なため、酸性溶液ではもちろん、前記ウロン酸塩のアルカリ性を示す水溶液中でも溶解し、アルカリ性水溶液でもウロン酸とキトサンの均一な分布の複合体を製造することができる。
【００３６】
また、この水溶性キトサンを対イオンなく水に溶解させたものと、ウロン酸のＣＯＯＨ型を用いてポリイオンコンプレックスを形成させた複合体は、対イオンの除去作業を必要とせず、工程を短縮できるとともに、生体内における塩の影響もない。
【００３７】
ここで、キトサンのグルコサミンとＮ−アセチルグルコサミンの比率は、一般に脱アセチル化度或いはＮ−アセチル化度（（Ｎ−アセチル化度（％））＝１００％−（脱アセチル化度（％）））と呼ばれるが、コロイド滴定や、ＫＢｒ錠剤法による赤外分光法（ＩＲ）、或いは酸性溶液に溶解して核磁気共鳴分光法（ＮＭＲ）などにより求めることができる。
【００３８】
本発明には、多糖類複合体中に多糖類の改質用添加剤及び／または改質添加成分を含ませることができる。改質用添加剤は、複合の物性、構造、性能、および加工性を改質させる目的で添加させるものであれば、物質や種類や形態は、特に限定されるものではないが、多孔化剤、架橋剤、界面活性剤、耐水化剤、撥水剤、充填剤、分解促進剤、接着剤、可塑剤、カップリング剤、抗菌剤、柔軟剤、滑剤、増量剤、着色剤、紫外線吸収剤、又はこれらの混合物からなる添加剤成分が挙げられ、要求物性に応じて選定される。また、これらの添加剤及び／又は添加成分を含むということは、多糖類複合体に添加などをすることにより、組成物中に添加剤及び／又は添加成分が含まれている状態をいう。また、これら添加剤及び／又は添加成分は、多糖類複合体と結合し一体化していてもよいし、そうでなくてもよい。また、添加剤及び／又は添加成分は少なくとも一度含まれている状態でいればよく、加えた後除去することにより改質してもよい。
【００３９】
例えば、多複合体の伸びやフレキシビリティを改善する為に、複合体に多孔化剤を添加することができる。中空、スポンジ状の構造物を複合体に担持させることも多孔化剤を添加する一つの手法である。また、中和により複合体を製造する際にカルボキシル基やアミノ基の対イオンが塩を生じる。この塩は、複合体中に均一に分散しており、後の水洗により除去することが可能である。塩を除去した複合体は、多孔化しており、多孔化していない複合体と比較して伸びが大きく、フレキシビリティが大きいなどの物性が付与される。これらの塩も一つの多孔化剤と言える。
また、複合体中の結合を強化し、強度を上げる為に、架橋剤を添加し、多糖類中に含ませることができる。架橋剤はカルボジイミドやエポキシ系の架橋剤など種類や形態は特に限定されるものではなく、要求物性や目的に応じて選定される。
また、複合体の分解性を向上させる為に複合体中に各種分解促進剤を添加することができる。分解促進剤には、酵素やデンプンなどが挙げられる。
【００４０】
本発明の多糖類複合体は、前記した酸化多糖類、キトサン、添加剤成分の３成分を必須成分として、その他に、医薬成分、農薬、抗菌剤、防カビ剤、防虫剤、芳香剤、防臭剤、脱臭剤などの薬効成分や、薬効を調整するための成分や、ポリイオンコンプレックスを形成する際に二次的に生成する成分等を含んでいても構わない。また上記の必須３成分も、それぞれ１種類或いは２種類以上を組み合わせて用いても構わない。さらに各成分の混合比も、ポリイオンコンプレックスを形成する範囲であれば特に限定されず、要求物性に合わせて調整されるべきものである。
【００４１】
また、複合体を形成する酸化多糖類とキトサンは分子レベルで複合化させる為にも、適した溶媒で溶解させてポリイオンコンプレックスを形成させることが好ましい。本発明では特に水を媒体として用いるのが好ましく、必要に応じてアルコールやアセトンなどの有機溶媒を添加することもできる。また溶液中の酸化多糖類或いはキトサン或いは添加剤の濃度もこれらの複合体が形成する範囲にあれば特に限定されるものではなく、複合体の要求特性に応じて選択できるものである。
以下に本発明の多糖類複合体のポリイオンコンプレックスを形成する方法を例示する。
【００４２】
まず第１の方法は、添加剤成分を溶解または分散させた水溶液に、前記酸化多糖類又はその塩の粉末或いは水溶液と、前記キトサン又はその塩の粉末或いは水溶液を添加すると、酸化多糖類とキトサンはポリイオンコンプレックスを形成して水に不溶化する。この際予め溶液中に存在した添加剤成分は多糖類複合体中に取り込まれ、添加剤成分を包含した本発明の多糖類複合体が得られる。必要に応じて、水洗処理を施せば、対イオン同士の塩を除去することができる。また均一な多糖類複合体を得るためには十分に攪拌しながら混合することが好ましい。
【００４３】
さらに第２の方法では、まず前記酸化多糖類と前記キトサン及び添加剤成分を共に溶解又は分散させた溶液を調製し、よく攪拌しながら酸又はアルカリで中和処理することにより、酸化多糖類とキトサンのポリイオンコンプレックスを形成させて水不溶化するとともに、添加剤成分を包含させて本発明の多糖類複合体を得ることができる。必要に応じて、水洗することで中和により生じた塩を除去することが可能である。また中和の手法は特に限定されるものではなく、複合体の要求特性に応じて選択できる。
【００４４】
酸化多糖類は幅広いｐＨ領域で溶解する為、酸性の溶液にも溶解する。従ってキトサンの酸性水溶液に粉末、或いは水溶液で酸化多糖類を添加して溶解させると、両多糖類を溶解した酸性水溶液を調製できる。また逆に、脱アセチル化度が４５から５５％の水溶性キトサンは幅広いｐＨ領域で水に溶解するため、酸化多糖類のアルカリ性の水溶液に粉末、或いは水溶液で水溶性キトサンを添加して溶解させると、両多糖類を溶解したアルカリ性水溶液を調製できる。従って添加する添加剤成分の特性に合わせて、酸性とアルカリ性の液性を選択することも可能である。
【００４５】
この方法により得られる多糖類複合体は、カチオン性、アニオン性の両多糖類が均一に分散した溶液からポリイオンコンプレックスを形成する為に、含まれる多糖類の分布がより均一な複合体となる。さらにこの多糖類複合体はポーラスな構造を有する為に水に膨潤させたときの引張り伸びが大きいなどの特徴を有する。
【００４６】
さらに第３の方法は、前記酸化多糖類及び前記キトサンを溶解又は分散させた水溶液を予め別々に調製しておき、各々の水溶液を混合することでポリイオンコンプレックスを形成することを特徴とするものである。この際、添加剤成分は両多糖類溶液の一方或いは双方、或いは両水溶液とは別に調製しておいて、混合することにより、添加剤成分を包含した多糖類複合体を得ることができる。
【００４７】
ここでキトサンとして脱アセチル化度が４５から５５％の水溶性キトサンを、酸化多糖類として予め対イオンを除いたＣＯＯＨ型を用いて、それぞれの水溶液を混合してポリイオンコンプレックスを形成すると、対イオン塩の生成がなく、塩の除去作業を必要とせず、また生体内における塩の影響もないため、特に好ましい。
【００４８】
水溶液を混合する手法は特に限定されるものではなく、複合体の要求特性に応じて選択できる。例えば酸化多糖類或いはキトサンの一方の溶液をキャストして乾燥皮膜を形成してから、その上にもう一方の溶液をキャストしてその界面にポリイオンコンプレックスを形成する等の手法も適用できる。
【００４９】
上記に３通りの本発明の多糖類複合体の製造方法を詳しく説明したが、さらに、前記酸化多糖類と前記キトサンからポリイオンコンプレックスを形成させてから、添加剤溶液を塗布、添加剤溶液に浸漬、或いは添加剤成分を貼り合わせたりすることで多糖類複合体に添加剤成分を担持させても構わない。
【００５０】
また、本発明の多糖類複合体は必要に応じ乾燥させることもできる。乾燥後の複合体は水に溶解しないが膨潤する為、乾燥させた複合体を水などの溶媒で膨潤させて形状を変化させたり、貼り合わせたり、積層したりすることも可能である。
また多糖類複合体の形状としては、スポンジ状、板状、フィルム状、顆粒状、繊維状、ゲル状、フレーク状、パウダー状など任意に選定できる。
【００５１】
こうして得られる本発明の多糖類複合体は、例えば図１に示すように酸化多糖類由来のＣＯＯ⁻とキトサン由来のＮＨ^３＋によりイオンコンプレックス構造が形成された多糖類複合体のマトリックス中に添加剤成分を包含しているものである。
本発明の多糖類複合体は、天然多糖類と生体適合性の高いウロン酸類と、Ｎ−アセチルグルコサミン及びグルコサミンから成り、容易に生分解或いは代謝されるため、経口投与の医薬品、経皮吸収用の医薬品、及び外科手術等で生体内にて利用される医療用材料、および農薬、食品、化粧品等として利用できる。さらに本発明では、ポリイオンコンプレックスを形成するカルボキシル基とアミノ基を制御できることから、および多糖類複合体の物理的特性等をコントロールしやすく、様々な要求特性に対応することが可能となる。
【００５２】
【実施例】
以下、本発明を実施例に基づいて具体的に説明する。
【００５３】
＜製造例１＞
（酸化デンプン（アミロウロン酸ナトリウム塩）の調製）
原料のデンプンは市販のコンスターチを用いた。デンプン５ｇを水１００ｍｌに加熱溶解させ、冷却しておく。このデンプン溶液に、ＴＥＭＰＯ０．１ｇ、臭化ナトリウム１．２５ｇを溶解させた水溶液を加えた。次に、反応系を冷却し、次亜塩素酸ナトリウム水溶液（Ｃｌ＝５％）５０ｇを添加し、酸化反応を開始した。反応温度は常に５℃以下に維持した。反応中は系内のｐＨが低下するが、０．５Ｎ−ＮａＯＨ水溶液を逐次添加し、ｐＨ１０．７５に調整した。そして６位の１級水酸基の全モル数に対し、１００％のモル数に対応するアルカリ添加量に達した時点で、エタノールを添加し、反応を停止させ、水：アルコール＝２：８よりなる溶液により充分洗浄した後、アセトンで脱水し、４０℃で減圧乾燥させ、白い粉末状の酸化度１００％の酸化デンプンを得た（図２）。
【００５４】
＜製造例２＞
（酸化セルロース（セロウロン酸ナトリウム塩）の調製）
原料のセルロースは市販の再生セルロースを用いた。セルロース５ｇを水３５０ｍｌに懸濁させた。このセルロース溶液に、ＴＥＭＰＯ０．１ｇ、臭化ナトリウム１．２５ｇを溶解させた水溶液を加えた。次に、反応系を冷却し、次亜塩素酸ナトリウム水溶液（Ｃｌ＝５％）５０ｇを添加し、酸化反応を開始した。反応温度は常に５℃以下に維持した。反応中は系内のｐＨが低下するが、０．５Ｎ−ＮａＯＨ水溶液を逐次添加し、ｐＨ１０．７５に調整した。そして６位の１級水酸基の全モル数に対し、１００％のモル数に対応するアルカリ添加量に達した時点で、エタノールを添加し、反応を停止させ、水：アルコール＝２：８よりなる溶液により充分洗浄した後、アセトンで脱水し、４０℃で減圧乾燥させ、白い粉末状の酸化度１００％の酸化セルロースを得た（図３）。
【００５５】
＜製造例３＞
（酸化度６０％の酸化セルロース（ナトリウム塩）の調製）
次亜塩素酸ナトリウム水溶液を３０ｇにする以外は酸化セルロースの調製１と同様の調整を繰り返し、酸化反応を開始した。ｐＨ維持の為に添加した０．５Ｎ−ＮａＯＨ水溶液が３７ｍｌ（グルコース残基のモル数に対し６０ｍｏｌ％の水酸化ナトリウム）に達したところで反応を停止した。以降酸化セルロースの調製と同様の洗浄を繰り返し、酸化度６０％の酸化セルロース（ナトリウム塩）を得た。
【００５６】
＜製造例４＞
（酸化キチン（キトウロン酸ナトリウム塩）の調製）
原料となるキチンには蟹ガラから脱灰、除タンパク、脂質および色素の除去などの工程を経て得られた市販のキチンを用いた。
キチンを１０ｇ、４５％水酸化ナトリウム水溶液１５０ｇに浸漬し、室温以下で２時間攪拌した。これに、砕いた氷を８５０ｇ、周りを氷水などで冷やし、攪拌しながら添加した。このアルカリ処理によりキチンはほぼ溶解する。塩酸で中和し、十分に水洗した後、乾燥させないものを試料とした。
この５％キチン懸濁液１００ｇに、ＴＥＭＰＯ０．１ｇ、臭化ナトリウム１．２５ｇを溶解させた水溶液を加え、キチンの固形重量の全体に対する濃度が約２ｗｔ％になるよう調製した。次に、反応系を冷却し、次亜塩素酸ナトリウム水溶液（Ｃｌ＝５％）３５ｇを添加し、酸化反応を開始した。反応温度は常に５℃以下に維持した。反応中は系内のｐＨが低下するが、０．５Ｎ−ＮａＯＨ水溶液を逐次添加し、ｐＨ１０．７５に調整した。そして６位の１級水酸基の全モル数に対し、１００％のモル数に対応するアルカリ添加量に達した時点で、エタノールを添加し、反応を停止させ、水：アルコール＝２：８よりなる溶液により充分洗浄した後、アセトンで脱水し、４０℃で減圧乾燥させ、白い粉末状の酸化度１００％の酸化キチンを得た（図４）。
【００５７】
＜製造例５〜８＞
（酸化多糖類のＣＯＯＨ型の調製）
上記製造例１〜４の酸化多糖類はナトリウム塩として単離される。この粉末をそれぞれ２％水溶液とし、塩酸を用いてｐＨを１に調製した。過剰のエタノールで沈殿濾過、水：アセトン＝１：７よりなる溶液により充分脱塩した後、アセトンで脱水し、４０℃で減圧乾燥させ、上記したそれぞれの酸化多糖類（アミウロン酸、セロウロン酸、酸化度６０％の酸化セルロース、キトウロン酸）のＣＯＯＨ型を得た。
【００５８】
＜製造例９＞
（Ｎ−アセチル化度３０％のキトサンの調製）
脱アセチル化度１００％のキトサン５ｇを１０％酢酸９５ｇに溶解し、メタノール５００ｇで希釈し、攪拌しながら無水酢酸０．９５ｇを加え、室温で１５時間攪拌した。２Ｎ−ＮａＯＨ水溶液を加えて中和するとフレークが析出するので、これを濾過し、メタノール及び水：アセトン＝１：７よりなる溶液により充分に洗浄した後、アセトンで脱水し、４０℃で減圧乾燥させて、フレーク状のＮ−アセチル化度３０％のキトサンを得た（図５）。
【００５９】
＜製造例１０＞
（Ｎ−アセチル化度５０％の水溶性キトサンの調製）
脱アセチル化度１００％のキトサン５ｇを１０％酢酸９５ｇに溶解し、メタノール５００ｇで希釈し、攪拌しながら無水酢酸１．５９ｇを加え、室温で１５時間攪拌した。２Ｎ−ＮａＯＨ水溶液を加えて中和するとフレークが析出するので、これを濾過し、メタノール及び水：アセトン＝１：７よりなる溶液により充分に洗浄した後、アセトンで脱水し、４０℃で減圧乾燥させて、フレーク状のＮ−アセチル化度５０％のキトサンを得た（図６、図７）。このキトサンは水溶性であり、１ｗｔ％の水溶液でｐＨ８．２であった。さらに酸やアルカリを加えてｐＨを変動させても溶解していた。
【００６０】
＜製造例１１＞
（Ｎ−アセチル化度６０％のキトサンの調製）
脱アセチル化度１００％のキトサン５ｇを１０％酢酸９５ｇに溶解し、メタノール５００ｇで希釈し、攪拌しながら無水酢酸１．９０ｇを加えると１時間程でゲル化したが、そのまま室温で１５時間静置した。２Ｎ−ＮａＯＨ水溶液を加えて中和して濾過し、メタノール及び水：アセトン＝１：７よりなる溶液により充分に洗浄した後、アセトンで脱水し、４０℃で減圧乾燥させて、フレーク状のＮ−アセチル化度６０％のキトサンを得た（図８）。
【００６１】
＜試験例１＞
製造例２、４、６の酸化多糖類、及び製造例９、１０のＮ−アセチル化キトサン、および微結晶セルロース粉末、さらに置換度０．７のカルボキシメチルセルロースナトリウム塩について、下記の方法にて、土壌中の好気性微生物による生分解性を評価した。結果を図９に示す。カルボキシルメチルセルロースナトリウム塩が殆ど分解しないのに対して、本発明の原料となる酸化多糖類およびキトサンは、ほぼセルロースと同様に分解することが分かる。
【００６２】
（生分解性の評価方法）
八幡物産（株）製の微生物酸化分解測定装置（ＭＯＤＡ）を用い、試験土壌として、水分６０％に調整した標準コンポスト（八幡物産（株）製　ＹＫ−２）２５０ｃｃと、水分１８％に調整した海砂２５０ｃｃを混合したものを用いた。試料１０ｇを試験土壌と均一に混合して、カラム状の反応筒に充填し、反応筒内の温度を３５℃で一定に保持した。さらに反応筒下方より水蒸気を飽和した脱炭酸空気を４０ｍｌ／分で通気し、反応筒上部からはガス漏れなく配管されて、アンモニアガスを除くために硫酸水浴中を通り、水分を除くためにシリカゲルと塩化カルシウムを充填した吸湿筒を通り、さらにソーダタルク及びソーダライムを充填した吸収筒に導かれる。試料が好気的に生分解して発生する二酸化炭素は全て、吸収筒に吸収されるため、吸収筒の重量変化から生分解により発生した二酸化炭素量を定量できるものである。なお試料を入れない試験土壌のみの空試験を同時に行い、空試験で発生した二酸化炭素量を差し引いて、分解により発生した二酸化炭素量を求めた。試料１０ｇ中の炭素含量から理論的に発生する二酸化炭素量を算出し、理論量に対する発生二酸化炭素量の割合を生分解度として、図９に示した。
【００６３】
＜実施例１＞
製造例１０で作成したＮ−アセチル化度５０％の水溶性キトサン１ｇと、製造例２で作製したセロウロン酸ナトリウム塩１ｇを０．１Ｎ−塩酸溶液１００ｍＬに溶解した。その後、０．２Ｎ−ＮａＯＨ水溶液を加えてｐＨ７に調製し、ゲルを生成、実施例１の複合体を得た。この複合体中には中和により生成した塩化ナトリウムが包含されていた。この塩化ナトリウムは複合体の多孔化剤として働き、複合体が多孔化された。水洗により塩化ナトリウムを除去した複合体は、微細かつ均一な孔を持ったスポンジ状の構造を取り、吸水量が増加するなどの特徴を示した。
【００６４】
＜実施例２＞
製造例１０で作成したＮ−アセチル化度５０％の水溶性キトサン１ｇと、製造例１で作製したアミロウロン酸ナトリウム塩１ｇを０．１Ｎ−酢酸溶液１００ｍＬに溶解した。その後、０．２Ｎ−ＮａＯＨ水溶液を加えてｐＨ７に調製し、ゲルを生成させた。この複合体を６０℃のオーブンで乾燥させ、実施例２の複合体を得た。この複合体中には中和により生成した酢酸ナトリウムが包含されている。
【００６５】
＜比較例１＞
製造例１０で作成したＮ−アセチル化度５０％の水溶性キトサンの１ｗｔ％水溶液１００ｍＬに、製造例５で作製したアミロウロン酸のＣＯＯＨ型の２ｗｔ％水溶液５０ｍＬを攪拌しながら混合するとゲルが生成した。この複合体を６０℃のオーブンで乾燥させ、比較例１の多糖類複合体を得た。
【００６６】
＜実施例２と比較例１の評価＞
実施例２と比較例１の複合体を水に浸漬した。どちらも膨潤はするが溶解しなかった。１時間後、複合体の引張り伸びを測定した。その結果、実施例２は比較例１の複合体の１．５〜２倍の伸び率を示した。生成した酢酸ナトリウムが、複合体の伸び率を改善したことが分かった。
【００６７】
なお、上記実施例で用いなかった製造例の材料や製造例に記載していない材料を用いても本発明の多糖類複合体を得ることができる。
【００６８】
【発明の効果】
本発明によれば、水不溶性の多糖類複合体を簡便な方法で容易かつ安価に得ることができ、さらに、改質用添加剤を含ませることにより多糖類複合体の物性や、構造、性能、および加工性を容易に改質することができる。また本発明の多糖類複合体は、天然多糖類と化学構造が制御されたウロン酸構造を有する酸化多糖類と、Ｎ−アセチルグルコサミン及びグルコサミンよりなるキトサンからなるポリイオンコンプレックスであるため、容易に生分解し、生体親和性が高いことから、経口投与の医薬品、経皮吸収用の医薬品、及び外科手術等で生体内にて利用される医療用材料、および農薬、食品、化粧品等として利用できる。
さらに本発明では、従来の天然物材料からなるポリイオンコンプレックスと違い、ポリイオンコンプレックスを形成するカルボキシル基とアミノ基を制御できることから、構造が明確で安全性が高く、多糖類複合体の物理的特性等をコントロールしやすく、様々な要求特性に対応することが可能となる。
さらに本発明によれば、ＣＯＯＨ型の酸化多糖類とアセチル化率を制御した水溶性キトサンを用いることで、中性領域での添加剤成分を包含した複合化が可能であり、酸やアルカリによる中和処理を必要とせず、塩の影響をなくすことも可能で、且つ酸性、アルカリ性の両領域で完全に水溶性となる複合体を得ることができる。
【００６９】
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の多糖類複合体の一実施例を示す化学構造式である。
【図２】本発明に用いるアミロウロン酸ナトリウム塩を重水に溶解して測定した^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルと原料のデンプンを重水に溶解して測定した^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルである。
【図３】本発明に用いるセロウロン酸ナトリウム塩を重水に溶解して測定した^１３Ｃ−ＮＭＲのスペクトルである。
【図４】本発明に用いるキトウロン酸ナトリウム塩を重水に溶解して測定した^１３Ｃ−ＮＭＲのスペクトルである。
【図５】本発明に用いる３０％Ｎ−アセチル化キトサンを塩化重水素酸重水溶液に溶解して測定した^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
【図６】本発明に用いる５０％Ｎ−アセチル化キトサンを塩化重水素酸重水溶液に溶解して測定した^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
【図７】本発明に用いる５０％Ｎ−アセチル化キトサンを重水に溶解して測定した^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
【図８】本発明に用いる６０％Ｎ−アセチル化キトサンを塩化重水素酸重水溶液に溶解して測定した^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
【図９】本発明に用いる酸化多糖類、及びキトサンの、試験例１に従い測定した生分解度を示すグラフである。[0001]
TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION
The present invention relates to a complex of a polysaccharide derived from a natural product having excellent biodegradability and biocompatibility, and to a simple aqueous-based production method thereof.
[0002]
[Prior art]
In recent years, natural polysaccharides have attracted attention as a new type of biodegradable polymer material and as a biocompatible material, and many studies have been made on their use, and numerous findings have been reported.
[0003]
In particular, chitin and chitosan are attracting attention as biocompatible materials having a bioactive effect.
Chitosan exists as a skeletal substance of crustaceans such as crabs and shrimps, insects such as beetles and crickets, and chitin (many N-acetyl D-glucosamine residues, β- (1, 4) -linked polysaccharide) is a deacetylated compound and β- (1,4) -linked polysaccharide of glucosamine, and is also used as the only natural cationic polysaccharide.
[0004]
On the other hand, a polyion complex material comprising a polycationic substance and a polyanionic substance can be easily prepared in an aqueous system, and a substance insoluble in water can be obtained. No. 100468, JP-A-7-33682, JP-A-11-130697, JP-A-2002-638, and the like. For example, natural products such as hyaluronic acid, chondroitin, chitin, chitosan, sodium alginate, pectin, polysaccharides such as dextran, and polyhedral derivatives such as carboxymethylcellulose, gelatin, polyamino acids and polypeptides and proteins, and moreover, There is a polyion complex using a synthetic polymer such as acrylic acid.
[0005]
However, synthetic polymers can control cationic or anionic groups in the molecule, making it easy to prepare polyion complexes of various physical properties, but are poor in biodegradability and biocompatibility, and their application range is limited. Is done.
In addition, natural materials that are excellent in biodegradability and biocompatibility also have a risk of virus infection derived from humans and animals in protein materials, and natural polysaccharides have cationic or anionic functional groups due to natural products. It cannot be controlled and has the disadvantage that it is difficult to form a polyion complex corresponding to various required physical properties.
Furthermore, in conventional polysaccharide derivatives such as carboxymethylcellulose, even though the degree of substitution can be controlled, the distribution of substituents within a molecule or between molecules varies, and the mechanism of decomposition and metabolism in vivo is not clear. There was a problem that.
[0006]
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is that it has good processability, can be easily and inexpensively obtained in a simple purification step, has a uniform structure, and can control a carboxyl group or an amino group forming an ion complex. It is an object of the present invention to provide a polysaccharide conjugate having appropriate performance, excellent biocompatibility and biodegradability, and a method for producing the same.
[0007]
[Means for Solving the Problems]
The invention of claim 1 is a polysaccharide complex comprising chitosan and an oxidized polysaccharide in which a carboxyl group or a salt thereof is introduced at least to the 6-position of the pyranose ring of the polysaccharide by oxidation, and wherein at least one polysaccharide is modified. A polysaccharide complex comprising a quality additive and / or a modifying additive component.
[0008]
The invention according to claim 2 is the polysaccharide complex according to claim 1, wherein a polyion complex structure is formed by the oxidized polysaccharide and the chitosan.
[0009]
The invention according to claim 3 is characterized in that the oxidized polysaccharide is obtained by a method of oxidizing a polysaccharide dissolved or dispersed in water in an aqueous system using an oxidizing agent in the presence of an N-oxyl compound catalyst, and The polysaccharide conjugate according to any one of claims 1 and 2, wherein the primary hydroxyl group at the 6-position in the pyranose ring of the polysaccharide is selectively oxidized.
[0010]
The invention according to claim 4 is characterized in that, as the chitosan, a ratio of glucosamine and N-acetylglucosamine as constituent monosaccharides is in a range of 45:55 to 55:45. Or a polysaccharide conjugate.
[0011]
The invention according to claim 5 is characterized in that the modifying additive and / or modifying additive component modifies physical properties, structure, performance, and processability of the polysaccharide complex. 5. The polysaccharide complex according to any one of 1 to 4.
[0012]
The invention of claim 6 provides a carboxyl group or a salt thereof at the 6-position of the pyranose ring of the polysaccharide in an aqueous solution in which one or more polysaccharide modifying additives and / or modifying additive components are dissolved or dispersed. A method for producing a polysaccharide complex, characterized in that a polyion complex is formed and water-insolubilized by adding an oxidized polysaccharide into which is introduced and chitosan.
[0013]
The invention of claim 7 provides an oxidized polysaccharide in which a carboxyl group or a salt thereof is introduced at the 6-position of the pyranose ring of the polysaccharide, chitosan, and one or more polysaccharide modifying additives and / or modifying components. And a solution in which both dissolved or dispersed are neutralized with an acid or an alkali to form a polyion complex of oxidized polysaccharide and chitosan, thereby insolubilizing the polysaccharide. .
[0014]
The invention according to claim 8 is that an aqueous solution in which an oxidized polysaccharide in which a carboxyl group or a salt thereof is introduced at the 6-position of the pyranose ring of the polysaccharide and chitosan is dissolved or dispersed is separately prepared in advance, and one or both of them are prepared. Alternatively, separately from both aqueous solutions, one or more kinds of polysaccharide modifying additives and / or modifying additive components are dissolved or dispersed, and the respective aqueous solutions are mixed to form a polyion complex to make water insoluble. A method for producing a polysaccharide complex, which is a feature of the present invention.
[0015]
The invention according to claim 9 is that the oxidized polysaccharide is obtained by a method of oxidizing a polysaccharide dissolved or dispersed in water in an aqueous system using an oxidizing agent in the presence of a catalyst of an N-oxyl compound, and The method for producing a polysaccharide complex according to any one of claims 6 to 8, wherein the primary hydroxyl group at the 6-position in the pyranose ring of the polysaccharide is selectively oxidized.
[0016]
The invention according to claim 10 is characterized in that, as the chitosan, a ratio of glucosamine and N-acetylglucosamine which are constituent monosaccharides is in a range of 45:55 to 55:45. Or a method for producing a polysaccharide complex.
[0017]
The invention according to claim 11 is characterized in that the modifying additive modifies the physical properties, structure, performance, and processability of the polysaccharide complex, wherein the modifying additive modifies the properties of the polysaccharide complex. A method for producing the polysaccharide conjugate according to the above.
[0018]
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
Hereinafter, details of the present invention will be described.
The polysaccharide conjugate of the present invention is characterized in that an oxidized polysaccharide obtained by introducing a carboxyl group or a salt thereof at the 6-position of the pyranose ring of the polysaccharide by a highly selective oxidation method is used as a polyanion component, and N-acetylglucosamine is a constituent monosaccharide. And chitosan having a controlled ratio of glucosamine and glucosamine as a polycation component, forming a polyion complex of both, and comprising one or more polysaccharide modifying additives and / or modifying additive components. Is what you do.
[0019]
First, an oxidized polysaccharide serving as a polyanion component for forming a polyion complex in the present invention will be described. The oxidized polysaccharide used in the present invention is a polysaccharide having a uronic acid structure into which a carboxyl group or a salt thereof is introduced by selectively oxidizing the 6-position of the pyranose ring of the natural polysaccharide. The type and origin of the natural polysaccharide as the raw material are not particularly limited, but cellulose, chitin, starch, etc., in which almost a single constituent monosaccharide is linearly linked, are obtained by procuring the raw material and oxidizing it. It is particularly preferable from the viewpoint of ease of treatment and safety of uronic acid generated by oxidation.
[0020]
The oxidized polysaccharide used in the present invention is different from the introduction of a carboxyl group by derivatization to a polysaccharide such as carboxymethylation, in which only one carboxyl group is selectively introduced into the 6-position within one pyranose ring, Since the intermolecular and intramolecular distributions are uniform and no substituent is introduced into the hydroxyl group by an ester bond or an ether bond, there is little influence of steric hindrance when forming a polyion complex. Further, there is no influence of the substituent after being decomposed in vivo and outside. For example, oxidized cellulose is called cellouronic acid, and glucuronic acid is linked by β-1,4 bonds. The oxidized starch is called amyluronic acid, and glucuronic acid is linked by α-1,4 bonds. The oxidized chitin is called chitouronic acid or 6-oxychitin, and N-acetylglucosaminouronic acid (N-acetylglucosamine having a carboxyl group at the 6-position carbon) has β-1,4 bond. It is linked in.
[0021]
Although uronic acids such as alginic acid, pectin, and hyaluronic acid also exist in nature, there are many heteropolysaccharides, and there are many uncontrollable parts due to natural products, such as the distribution of sugar residues and the influence of introduced side chains, It is not preferable as the polyanion component of the present invention. One feature of the polyanion component used in the present invention is that it is an oxidized polysaccharide in which the ratio of uronic acid is controlled by controlling the degree of oxidation.
[0022]
Hereinafter, an oxidation method for obtaining the oxidized polysaccharide of the present invention will be described.
The oxidation method in the present invention is characterized in that a polysaccharide dissolved or dispersed in water is treated with an aqueous system in the presence of a catalyst such as an N-oxyl compound, and the 6-position of the pyranose ring of the polysaccharide is selected. It can be oxidized to introduce a carboxyl group or a salt thereof.
[0023]
The oxidized polysaccharide of the present invention can be obtained by oxidizing the raw material polysaccharide using an oxidizing agent in the presence of an N-oxyl compound (oxoammonium salt). Examples of the N-oxyl compound include 2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidine-N-oxyl (hereinafter referred to as TEMPO). In this oxidation method, a carboxyl group can be uniformly and efficiently introduced according to the degree of oxidation. The amount of the N-oxyl compound used as a catalyst may be sufficient. For example, 10 ppm to 5% is sufficient for the number of moles of the constituent monosaccharide of the polysaccharide, but 0.05% to 3% is preferable.
[0024]
As the oxidizing agent, any oxidizing agent capable of promoting the intended oxidation reaction, such as halogen, hypohalous acid, halogenous acid or perhalic acid or a salt thereof, halogen oxide, nitrogen oxide, or peroxide can be used. Any oxidizing agent can be used.
[0025]
Further, in the present oxidation method, when the oxidation reaction is performed in the presence of bromide or iodide, the oxidation reaction can proceed smoothly even under mild conditions, and the efficiency of carboxyl group introduction can be greatly improved. The amount of the bromide or iodide can be selected within a range that can promote the oxidation reaction, and is, for example, 0 to 100% based on the number of moles of the monosaccharide constituting the polysaccharide. However, from the viewpoint of reaction efficiency, 1 to 50% is preferable.
[0026]
In the method for oxidizing a polysaccharide in the present invention, for example, it is particularly preferable to use TEMPO for the N-oxyl compound and use sodium hypochlorite as an oxidizing agent in the presence of sodium bromide.
[0027]
In order to increase the selectivity of oxidation of the constituent monosaccharide residues to primary hydroxyl groups and suppress side reactions, the reaction is preferably performed at room temperature or lower, more preferably at 5 ° C. or lower in the system. Further, it is preferable to keep the inside of the system alkaline during the reaction. At this time, the pH is preferably kept at 9 to 13, more preferably 10 to 12.
[0028]
Here, this oxidation method is characterized in that the degree of oxidation can be controlled by the amount of alkali added when the pH is maintained at a constant value. If the added alkali is 1 mole per 1 mole of the sugar residue, the primary hydroxyl group at the 6-position in all the sugar residues is oxidized to a carboxyl group.
Therefore, if the amount of the alkali or the oxidizing agent is reduced and the amount of the carboxyl group introduced is reduced, the number of contact points between the oxidized polysaccharide and chitosan at the time of forming the polyion complex is reduced, and the physical properties of the polysaccharide complex are reduced. Can be controlled.
[0029]
Further, when the polysaccharide as a raw material has high crystallinity, the oxidation efficiency is deteriorated. However, the oxidation efficiency can be improved by dissolving the polysaccharide once in a solvent capable of dissolving the same and then performing a regeneration treatment.
[0030]
The carboxyl group at the 6-position of the oxidized polysaccharide is more stable when it is present as a salt such as a sodium salt, and the salt of these oxidized polysaccharides has high water solubility. Further, by adding an acid such as hydrochloric acid to the aqueous solution of the oxidized polysaccharide salt or treating with an ion exchange resin, a desalted COOH-type oxidized polysaccharide can be obtained. In particular, the above-mentioned amylouronic acid and chitouronic acid (or 6-oxychitin) show water solubility even in the COOH type.
[0031]
Subsequently, chitosan which is a polycation component for forming a polyion complex in the present invention will be described.
In general, N-acetylglucosamine and a polysaccharide in which glucosamine is β-1,4 glycosidicly bonded and having a high ratio of glucosamine are called chitosan, and those having a high ratio of N-acetylglucosamine are called chitin. Chitin exists as a skeletal substance in crabs and shrimp and in the cell walls of fungi, etc., and is obtained through purification processes such as demineralization, protein removal, removal of lipids and pigments, and chitosan can be used simultaneously with these processes. Alternatively, it is generally obtained by further hydrolyzing the chitin obtained in the above step with an acid or alkali and subjecting it to deacetylation treatment. In addition, N-acetylglucosamine and glucosamine, which are constituent monosaccharides, also exist in a living body, are easily decomposed inside and outside the living body, and can be said to be highly safe.
[0032]
As the chitosan used in the present invention, the above-described general chitosan can be applied, and the raw material, the purification method, the degree of polymerization, and the like are not particularly limited. Further, the ratio of glucosamine in the constituent monosaccharide is desirably 20 to 100%. Since glucosamine has a cationic free amino group, this ratio is an important factor in controlling the physical properties of the polysaccharide complex of the present invention.
[0033]
The ratio of N-acetylglucosamine to glucosamine, that is, the ratio of N-acetyl group to amino group, is controlled by a method of deacetylation by hydrolysis with an acid or alkali, or N-acetylation using acetic anhydride or the like. It is possible. In the deacetylation reaction, the ratio of amino groups can be controlled by the reaction time of hydrolysis, and in the N-acetylation reaction, by the amount of reagent added.
[0034]
Here, chitosan forms a salt and dissolves in a dilute acid solution, but is insoluble in water from neutral to alkaline. However, it is known that when the ratio of glucosamine to N-acetylglucosamine is in the range of 45:55 to 55:45, it is soluble in water in a wide pH range. When preparing this water-soluble chitosan, it is important to perform N-acetylation or deacetylation in a homogeneous system.
[0035]
Since this water-soluble chitosan is soluble in water in a wide pH range, it dissolves not only in an acidic solution but also in an aqueous solution showing the alkalinity of the uronic acid salt, and even in an alkaline aqueous solution, a complex having a uniform distribution of uronic acid and chitosan can be formed. Can be manufactured.
[0036]
In addition, a complex in which this water-soluble chitosan is dissolved in water without a counter ion and a complex in which a polyion complex is formed using a COOH type of uronic acid can eliminate the need for counter ion removal work, thereby shortening the process. In addition, there is no influence of salts in the living body.
[0037]
Here, the ratio of glucosamine to N-acetylglucosamine of chitosan is generally the degree of deacetylation or the degree of N-acetylation ((N-acetylation degree (%)) = 100%-(deacetylation degree (%)). ) Can be determined by colloid titration, infrared spectroscopy (IR) by a KBr tablet method, or nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR) after dissolving in an acidic solution.
[0038]
In the present invention, a polysaccharide modifying additive and / or a modifying additive component can be included in the polysaccharide complex. As long as the modifying additive is added for the purpose of modifying the physical properties, structure, performance, and processability of the composite, the substance, type, and form are not particularly limited. , Cross-linking agent, surfactant, water-proofing agent, water-repellent agent, filler, decomposition accelerator, adhesive, plasticizer, coupling agent, antibacterial agent, softener, lubricant, extender, coloring agent, ultraviolet absorber Or an additive component consisting of a mixture thereof, and is selected according to required physical properties. In addition, including these additives and / or additional components means a state in which the additives and / or additional components are included in the composition by adding to the polysaccharide complex. In addition, these additives and / or additive components may or may not be bonded to and integrated with the polysaccharide complex. Further, the additive and / or additive component may be contained at least once, and may be modified by being added and then removed.
[0039]
For example, a porous agent can be added to the composite in order to improve the elongation and flexibility of the multi-composite. Carrying a hollow or sponge-like structure on the composite is also one method of adding a porogen. When a complex is produced by neutralization, a counter ion of a carboxyl group or an amino group forms a salt. This salt is uniformly dispersed in the complex, and can be removed by subsequent washing with water. The complex from which the salt has been removed is porous, and has properties such as greater elongation and greater flexibility than non-porous composites. These salts can also be said to be one porogen.
Further, in order to strengthen the bond in the complex and increase the strength, a crosslinking agent can be added and included in the polysaccharide. The type and form of the cross-linking agent such as carbodiimide and epoxy-based cross-linking agent are not particularly limited, and are selected according to required physical properties and purposes.
Further, various kinds of decomposition accelerators can be added to the composite to improve the decomposability of the composite. Degradation promoters include enzymes and starch.
[0040]
The polysaccharide complex of the present invention comprises the above-mentioned oxidized polysaccharide, chitosan, and additive components as essential components, and in addition, a pharmaceutical component, a pesticide, an antibacterial agent, a fungicide, an insect repellent, an aromatic, a deodorant. It may contain a medicinal component such as an agent and a deodorant, a component for adjusting the medicinal effect, a component that is formed secondarily when forming a polyion complex, and the like. The above three essential components may be used alone or in combination of two or more. Further, the mixing ratio of each component is not particularly limited as long as it is within a range for forming a polyion complex, and should be adjusted according to required physical properties.
[0041]
In order to form a complex at a molecular level, the oxidized polysaccharide and the chitosan forming the complex are preferably dissolved in a suitable solvent to form a polyion complex. In the present invention, it is particularly preferable to use water as a medium, and an organic solvent such as alcohol or acetone can be added as necessary. The concentration of the oxidized polysaccharide or chitosan or the additive in the solution is not particularly limited as long as these complexes are formed, and can be selected according to the required characteristics of the complex.
Hereinafter, a method for forming a polyion complex of the polysaccharide complex of the present invention will be exemplified.
[0042]
First, a first method is to add a powder or an aqueous solution of the oxidized polysaccharide or a salt thereof, and a powder or an aqueous solution of the chitosan or a salt thereof to an aqueous solution in which an additive component is dissolved or dispersed. Forms a polyion complex and becomes insoluble in water. At this time, the additive component that was previously present in the solution is taken into the polysaccharide complex, and the polysaccharide complex of the present invention containing the additive component is obtained. If necessary, a salt washing between the counter ions can be removed by performing a water washing treatment. In order to obtain a uniform polysaccharide complex, it is preferable to mix with sufficient stirring.
[0043]
Further, in the second method, first, a solution in which the oxidized polysaccharide and the chitosan and the additive component are dissolved or dispersed together is prepared, and the solution is neutralized with an acid or an alkali while stirring well, so that the oxidized polysaccharide and The polysaccharide complex of the present invention can be obtained by forming a polyion complex of chitosan for water insolubilization and including an additive component. If necessary, it is possible to remove salts generated by neutralization by washing with water. The method of neutralization is not particularly limited, and can be selected according to the required characteristics of the complex.
[0044]
Since oxidized polysaccharides dissolve in a wide pH range, they also dissolve in acidic solutions. Therefore, when a powder or an aqueous solution of an oxidized polysaccharide is added to and dissolved in an acidic aqueous solution of chitosan, an acidic aqueous solution in which both polysaccharides are dissolved can be prepared. Conversely, water-soluble chitosan having a degree of deacetylation of 45 to 55% dissolves in water in a wide pH range, and is dissolved by adding water-soluble chitosan as a powder or an aqueous solution to an alkaline aqueous solution of oxidized polysaccharide. Then, an alkaline aqueous solution in which both polysaccharides are dissolved can be prepared. Therefore, it is also possible to select acidic and alkaline liquid properties according to the characteristics of the additive component to be added.
[0045]
The polysaccharide complex obtained by this method forms a polyion complex from a solution in which both cationic and anionic polysaccharides are uniformly dispersed, so that the distribution of the contained polysaccharide becomes a more uniform complex. Further, the polysaccharide complex has a porous structure, and thus has a feature such as a large tensile elongation when swollen in water.
[0046]
Further, the third method is characterized in that aqueous solutions in which the oxidized polysaccharide and the chitosan are dissolved or dispersed are separately prepared in advance, and a polyion complex is formed by mixing the respective aqueous solutions. is there. At this time, the additive component is prepared separately from one or both of the both polysaccharide solutions, or both aqueous solutions, and mixed to obtain a polysaccharide complex including the additive component.
[0047]
Here, water-soluble chitosan having a degree of deacetylation of 45 to 55% as chitosan and COOH type from which counter ions have been removed in advance as oxidized polysaccharides are mixed to form a polyion complex. It is particularly preferable because no salt is generated, no salt removing operation is required, and there is no influence of the salt in the living body.
[0048]
The method of mixing the aqueous solution is not particularly limited, and can be selected according to the required characteristics of the composite. For example, a method in which one solution of oxidized polysaccharide or chitosan is cast to form a dry film, and then the other solution is cast thereon to form a polyion complex at the interface between them is also applicable.
[0049]
The three methods for producing the polysaccharide complex of the present invention have been described in detail above. Further, after forming a polyion complex from the oxidized polysaccharide and the chitosan, an additive solution is applied and immersed in the additive solution. Alternatively, the additive component may be supported on the polysaccharide complex by laminating the additive component.
[0050]
Further, the polysaccharide complex of the present invention can be dried if necessary. Since the composite after drying does not dissolve in water but swells, the dried composite can be swollen with a solvent such as water to change its shape, be bonded, or laminated.
The shape of the polysaccharide complex can be arbitrarily selected, such as sponge, plate, film, granule, fiber, gel, flake, and powder.
[0051]
The polysaccharide complex of the present invention obtained in this way is, for example, as shown in FIG. ⁻ And NH from chitosan ³⁺ Wherein the additive component is contained in the matrix of the polysaccharide complex in which the ion complex structure is formed.
The polysaccharide complex of the present invention is composed of uronic acids having high biocompatibility with natural polysaccharides, N-acetylglucosamine and glucosamine, and is easily biodegraded or metabolized. It can be used as a medical product, a medical material used in a living body in a surgical operation or the like, and an agrochemical, a food, a cosmetic, and the like. Further, in the present invention, since the carboxyl group and the amino group forming the polyion complex can be controlled, and the physical properties of the polysaccharide complex can be easily controlled, and it is possible to meet various required properties.
[0052]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be specifically described based on examples.
[0053]
<Production Example 1>
(Preparation of oxidized starch (amyluronate sodium salt))
As a raw material starch, a commercially available constarch was used. 5 g of starch is dissolved in 100 ml of water by heating and cooled. To this starch solution was added an aqueous solution in which 0.1 g of TEMPO and 1.25 g of sodium bromide were dissolved. Next, the reaction system was cooled, and 50 g of an aqueous solution of sodium hypochlorite (Cl = 5%) was added to start an oxidation reaction. The reaction temperature was always kept below 5 ° C. During the reaction, the pH in the system was lowered, but the pH was adjusted to 10.75 by sequentially adding a 0.5N-NaOH aqueous solution. Then, when the alkali addition amount corresponding to the mole number of 100% with respect to the total mole number of the primary hydroxyl group at the 6-position is reached, ethanol is added to stop the reaction, and water: alcohol = 2: 8. After being sufficiently washed with the solution, it was dehydrated with acetone and dried under reduced pressure at 40 ° C. to obtain oxidized starch having a degree of oxidation of 100% as a white powder (FIG. 2).
[0054]
<Production Example 2>
(Preparation of oxidized cellulose (cellouronic acid sodium salt))
Commercially available regenerated cellulose was used as the raw material cellulose. 5 g of cellulose was suspended in 350 ml of water. To this cellulose solution was added an aqueous solution in which 0.1 g of TEMPO and 1.25 g of sodium bromide were dissolved. Next, the reaction system was cooled, and 50 g of an aqueous solution of sodium hypochlorite (Cl = 5%) was added to start an oxidation reaction. The reaction temperature was always kept below 5 ° C. During the reaction, the pH in the system was lowered, but the pH was adjusted to 10.75 by sequentially adding a 0.5N-NaOH aqueous solution. Then, when the alkali addition amount corresponding to the mole number of 100% with respect to the total mole number of the primary hydroxyl group at the 6-position is reached, ethanol is added to stop the reaction, and water: alcohol = 2: 8. After being sufficiently washed with the solution, it was dehydrated with acetone and dried under reduced pressure at 40 ° C. to obtain white powdery oxidized cellulose having an oxidation degree of 100% (FIG. 3).
[0055]
<Production Example 3>
(Preparation of oxidized cellulose (sodium salt) having a degree of oxidation of 60%)
The same adjustment as in Preparation 1 of oxidized cellulose was repeated except that the amount of the aqueous solution of sodium hypochlorite was changed to 30 g, and the oxidation reaction was started. The reaction was stopped when the 0.5 N NaOH aqueous solution added for maintaining the pH reached 37 ml (60 mol% sodium hydroxide based on the number of moles of glucose residues). Thereafter, the same washing as in the preparation of oxidized cellulose was repeated to obtain oxidized cellulose (sodium salt) having an oxidation degree of 60%.
[0056]
<Production Example 4>
(Preparation of oxidized chitin (chitouronic acid sodium salt))
As the chitin as a raw material, a commercially available chitin obtained through steps such as demineralization, deproteinization, removal of lipids and pigments from crab shells was used.
10 g of chitin and 150 g of a 45% aqueous sodium hydroxide solution were immersed and stirred at room temperature or lower for 2 hours. To this, 850 g of crushed ice, the surroundings were cooled with ice water or the like, and added with stirring. Chitin is substantially dissolved by this alkali treatment. After neutralizing with hydrochloric acid and washing thoroughly with water, a sample that was not dried was used as a sample.
To 100 g of this 5% chitin suspension, an aqueous solution in which 0.1 g of TEMPO and 1.25 g of sodium bromide were added was prepared so that the concentration of chitin with respect to the total solid weight was about 2 wt%. Next, the reaction system was cooled, and 35 g of an aqueous solution of sodium hypochlorite (Cl = 5%) was added to start an oxidation reaction. The reaction temperature was always kept below 5 ° C. During the reaction, the pH in the system was lowered, but the pH was adjusted to 10.75 by sequentially adding a 0.5N-NaOH aqueous solution. Then, when the alkali addition amount corresponding to the mole number of 100% with respect to the total mole number of the primary hydroxyl group at the 6-position is reached, ethanol is added to stop the reaction, and water: alcohol = 2: 8. After sufficiently washing with a solution, the solution was dehydrated with acetone and dried under reduced pressure at 40 ° C. to obtain a white powdery chitin oxide having an oxidation degree of 100% (FIG. 4).
[0057]
<Production Examples 5 to 8>
(Preparation of COOH form of oxidized polysaccharide)
The oxidized polysaccharides of Production Examples 1 to 4 are isolated as sodium salts. These powders were each made into a 2% aqueous solution, and the pH was adjusted to 1 using hydrochloric acid. Precipitation filtration with excess ethanol, sufficient desalting with a solution consisting of water: acetone = 1: 7, dehydration with acetone, drying at 40 ° C. under reduced pressure, and the above-mentioned oxidized polysaccharides (amiuronic acid, cellouronic acid, A COOH type of oxidized cellulose (chitouronic acid) having a degree of oxidation of 60% was obtained.
[0058]
<Production Example 9>
(Preparation of chitosan having a degree of N-acetylation of 30%)
5 g of chitosan having a degree of deacetylation of 100% was dissolved in 95 g of 10% acetic acid, diluted with 500 g of methanol, 0.95 g of acetic anhydride was added with stirring, and the mixture was stirred at room temperature for 15 hours. The flakes precipitate when neutralized by adding an aqueous 2N-NaOH solution. The flakes are filtered, sufficiently washed with a solution of methanol and water: acetone = 1: 7, dehydrated with acetone, and dried at 40 ° C. under reduced pressure. As a result, flaky chitosan having a degree of N-acetylation of 30% was obtained (FIG. 5).
[0059]
<Production Example 10>
(Preparation of water-soluble chitosan having a degree of N-acetylation of 50%)
5 g of chitosan having a degree of deacetylation of 100% was dissolved in 95 g of 10% acetic acid, diluted with 500 g of methanol, added with 1.59 g of acetic anhydride with stirring, and stirred at room temperature for 15 hours. The flakes precipitate when neutralized by adding an aqueous 2N-NaOH solution. The flakes are filtered, sufficiently washed with a solution of methanol and water: acetone = 1: 7, dehydrated with acetone, and dried at 40 ° C. under reduced pressure. As a result, flaky chitosan having a degree of N-acetylation of 50% was obtained (FIGS. 6 and 7). This chitosan was water-soluble and had a pH of 8.2 in a 1 wt% aqueous solution. Further, it was dissolved even when the pH was changed by adding an acid or an alkali.
[0060]
<Production Example 11>
(Preparation of chitosan with N-acetylation degree of 60%)
5 g of chitosan having a degree of deacetylation of 100% was dissolved in 95 g of 10% acetic acid, diluted with 500 g of methanol, and 1.90 g of acetic anhydride was added with stirring to gelate in about 1 hour. Was placed. A 2N-NaOH aqueous solution was added to neutralize the mixture, and the mixture was filtered, washed thoroughly with a solution of methanol and water: acetone = 1: 7, dehydrated with acetone, dried at 40 ° C. under reduced pressure, and dried in flake N -Chitosan having a degree of acetylation of 60% was obtained (FIG. 8).
[0061]
<Test Example 1>
With respect to the oxidized polysaccharides of Production Examples 2, 4, and 6, and the N-acetylated chitosan of Production Examples 9 and 10, and microcrystalline cellulose powder, and a carboxymethylcellulose sodium salt having a substitution degree of 0.7, the following method was used. Biodegradability by aerobic microorganisms in soil was evaluated. FIG. 9 shows the results. It can be seen that while sodium carboxymethylcellulose hardly decomposes, oxidized polysaccharides and chitosan, which are the raw materials of the present invention, decompose almost in the same manner as cellulose.
[0062]
(Method of evaluating biodegradability)
Using a microbial oxidative degradation measurement device (MODA) manufactured by Yawata Bussan Co., Ltd., 250 cc of standard compost (YK-2 manufactured by Yawata Bussan Co., Ltd.) adjusted to 60% moisture and 18% water were used as test soil. What mixed 250cc of sea sand was used. 10 g of the sample was uniformly mixed with the test soil, filled in a column-shaped reaction tube, and the temperature in the reaction tube was kept constant at 35 ° C. In addition, decarbonated air saturated with water vapor is passed from the bottom of the reaction tube at 40 ml / min. The piping is connected without gas leakage from the top of the reaction tube, passes through a sulfuric acid water bath to remove ammonia gas, and silica gel to remove water. And calcium chloride, and then into an absorption cylinder filled with soda talc and soda lime. Since all carbon dioxide generated by aerobic biodegradation of the sample is absorbed by the absorption cylinder, the amount of carbon dioxide generated by biodegradation can be quantified from the weight change of the absorption cylinder. In addition, the blank test of only the test soil without a sample was performed at the same time, and the amount of carbon dioxide generated by the decomposition was obtained by subtracting the amount of carbon dioxide generated in the blank test. The amount of carbon dioxide theoretically generated was calculated from the carbon content in 10 g of the sample, and the ratio of the amount of generated carbon dioxide to the theoretical amount is shown in FIG. 9 as the degree of biodegradation.
[0063]
<Example 1>
1 g of the water-soluble chitosan having a degree of N-acetylation of 50% prepared in Production Example 10 and 1 g of sodium cellouronate prepared in Production Example 2 were dissolved in 100 mL of a 0.1 N hydrochloric acid solution. Thereafter, the pH was adjusted to 7 by adding a 0.2N-NaOH aqueous solution, a gel was formed, and the complex of Example 1 was obtained. The complex contained sodium chloride formed by neutralization. This sodium chloride served as a porous agent for the composite, and the composite was made porous. The complex from which sodium chloride was removed by washing with water had a sponge-like structure having fine and uniform pores, and exhibited characteristics such as an increase in water absorption.
[0064]
<Example 2>
1 g of the water-soluble chitosan having an N-acetylation degree of 50% prepared in Production Example 10 and 1 g of the amyluronate sodium salt prepared in Production Example 1 were dissolved in 100 mL of a 0.1 N acetic acid solution. Thereafter, the pH was adjusted to 7 by adding a 0.2N-NaOH aqueous solution to generate a gel. The composite was dried in an oven at 60 ° C. to obtain the composite of Example 2. This complex contains sodium acetate produced by neutralization.
[0065]
<Comparative Example 1>
A gel was formed when 50 mL of a 2 wt% aqueous solution of a COOH type of amyluronic acid produced in Production Example 5 was mixed with 100 mL of a 1 wt% aqueous solution of water-soluble chitosan having a N-acetylation degree of 50% produced in Production Example 10 while stirring. . This complex was dried in an oven at 60 ° C. to obtain a polysaccharide complex of Comparative Example 1.
[0066]
<Evaluation of Example 2 and Comparative Example 1>
The composite of Example 2 and Comparative Example 1 was immersed in water. Both swelled but did not dissolve. One hour later, the composite was measured for tensile elongation. As a result, Example 2 showed an elongation of 1.5 to 2 times that of the composite of Comparative Example 1. It was found that the generated sodium acetate improved the elongation of the composite.
[0067]
The polysaccharide complex of the present invention can be obtained by using the materials of the production examples that were not used in the above Examples and the materials not described in the production examples.
[0068]
【The invention's effect】
According to the present invention, a water-insoluble polysaccharide complex can be obtained easily and inexpensively by a simple method, and furthermore, the physical properties, structure, and performance of the polysaccharide complex can be obtained by adding a modifying additive. , And processability can be easily modified. In addition, the polysaccharide complex of the present invention is a polyion complex composed of a natural polysaccharide, an oxidized polysaccharide having a uronic acid structure whose chemical structure is controlled, and a polyion complex composed of N-acetylglucosamine and chitosan composed of glucosamine. Since it is decomposed and has high biocompatibility, it can be used as a drug for oral administration, a drug for percutaneous absorption, a medical material used in vivo in a surgical operation or the like, a pesticide, food, cosmetics, and the like.
Furthermore, in the present invention, unlike the conventional polyion complex made of natural materials, the carboxyl group and the amino group forming the polyion complex can be controlled, so that the structure is clear and the safety is high, and the physical properties of the polysaccharide complex are improved. Is easy to control, and it is possible to respond to various required characteristics.
Further, according to the present invention, by using a COOH-type oxidized polysaccharide and a water-soluble chitosan whose acetylation rate is controlled, it is possible to form a complex including an additive component in a neutral region, and to use an acid or an alkali. A complex that does not require a neutralization treatment, can eliminate the influence of salts, and is completely water-soluble in both acidic and alkaline regions can be obtained.
[0069]
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a chemical structural formula showing one embodiment of the polysaccharide conjugate of the present invention.
FIG. 2 shows a measurement by dissolving amyluronate sodium salt used in the present invention in heavy water. ¹³ Measured by dissolving C-NMR spectrum and raw material starch in heavy water ¹³ It is a C-NMR spectrum.
FIG. 3 shows a solution obtained by dissolving cellouronic acid sodium salt used in the present invention in heavy water. ¹³ It is a C-NMR spectrum.
FIG. 4 shows the results obtained by dissolving chitouronic acid sodium salt used in the present invention in heavy water. ¹³ It is a C-NMR spectrum.
FIG. 5 shows a measurement obtained by dissolving 30% N-acetylated chitosan used in the present invention in a heavy aqueous solution of chlorodeuteric acid. ¹ It is an H-NMR spectrum.
FIG. 6 shows a measurement obtained by dissolving 50% N-acetylated chitosan used in the present invention in a heavy aqueous solution of deuterated chlorohydric acid. ¹ It is an H-NMR spectrum.
FIG. 7: 50% N-acetylated chitosan used in the present invention was dissolved in heavy water and measured. ¹ It is an H-NMR spectrum.
FIG. 8 shows a measurement obtained by dissolving 60% N-acetylated chitosan used in the present invention in a heavy aqueous solution of chlorodeuteric acid. ¹ It is an H-NMR spectrum.
FIG. 9 is a graph showing the degree of biodegradation of the oxidized polysaccharide and chitosan used in the present invention, measured according to Test Example 1.

Claims

少なくとも酸化により多糖類のピラノース環の６位にカルボキシル基又はその塩を導入した酸化多糖類とキトサンからなる多糖類複合体であって、１種類以上の多糖類の改質用添加剤及び／または改質添加成分を含むことを特徴とする多糖類複合体。A polysaccharide complex comprising chitosan and an oxidized polysaccharide in which a carboxyl group or a salt thereof has been introduced at least at the 6-position of the pyranose ring of the polysaccharide by oxidation, and one or more polysaccharide modifying additives and / or A polysaccharide complex comprising a modifying additive component.

前記酸化多糖類と前記キトサンによりポリイオンコンプレックス構造を形成されていることを特徴とする請求項１に記載の多糖類複合体。The polysaccharide complex according to claim 1, wherein a polyion complex structure is formed by the oxidized polysaccharide and the chitosan.

前記酸化多糖類が、水に溶解又は分散させた多糖類を水系で、Ｎ−オキシル化合物の触媒の存在下、酸化剤を用いて酸化する方法により得られ、かつ天然多糖類のピラノース環中６位の１級水酸基を選択的に酸化されてなることを特徴とする請求項１および２のいずれかに記載の多糖類複合体。The oxidized polysaccharide is obtained by a method of oxidizing a polysaccharide dissolved or dispersed in water in an aqueous system using an oxidizing agent in the presence of an N-oxyl compound catalyst. The polysaccharide conjugate according to any one of claims 1 and 2, wherein the primary hydroxyl group at the position is selectively oxidized.

前記キトサンとして、その構成単糖であるグルコサミンとＮ−アセチルグルコサミンの比率が、４５：５５から５５：４５の範囲にあることを特徴とする請求項１から３のいずれかに記載の多糖類複合体。The polysaccharide complex according to any one of claims 1 to 3, wherein the chitosan has a ratio of glucosamine and N-acetylglucosamine, which are constituent monosaccharides, in a range of 45:55 to 55:45. body.

前記改質用添加剤及び／または改質添加成分が、多糖類複合体の物性、構造、性能、および加工性を改質させるものであることを特徴とする請求項１から４のいずれかに記載の多糖類複合体。The method according to any one of claims 1 to 4, wherein the modifying additive and / or the modifying additive component is for modifying physical properties, structure, performance, and processability of the polysaccharide complex. The polysaccharide conjugate of the above.

１種類以上の多糖類の改質用添加剤及び／または改質添加成分を溶解または分散させた水溶液中に、多糖類のピラノース環の６位にカルボキシル基又はその塩を導入した酸化多糖類とキトサンを添加することにより、ポリイオンコンプレックスを形成させて水不溶化することを特徴とする多糖類複合体の製造方法。An oxidized polysaccharide in which a carboxyl group or a salt thereof is introduced at the 6-position of the pyranose ring in an aqueous solution in which one or more polysaccharide modifying additives and / or modifying additive components are dissolved or dispersed; A method for producing a polysaccharide complex, characterized in that a polyion complex is formed by adding chitosan to make it insoluble in water.

多糖類のピラノース環の６位にカルボキシル基又はその塩を導入した酸化多糖類とキトサンと１種類以上の多糖類の改質用添加剤及び／または改質添加成分を、共に溶解又は分散させた水溶液を、酸又はアルカリで中和処理することにより、酸化多糖類とキトサンのポリイオンコンプレックスを形成させて水不溶化することを特徴とする多糖類複合体の製造方法。An oxidized polysaccharide having a carboxyl group or a salt thereof introduced at the 6-position of the pyranose ring of the polysaccharide, a chitosan, and one or more polysaccharide modifying additives and / or modified additive components were dissolved or dispersed together. A method for producing a polysaccharide complex, comprising neutralizing an aqueous solution with an acid or alkali to form a polyion complex of oxidized polysaccharide and chitosan and insolubilizing it with water.

多糖類のピラノース環の６位にカルボキシル基又はその塩を導入した酸化多糖類及びキトサンを溶解又は分散させた水溶液を予め別々に調製しておき、その一方或いは双方、或いは両水溶液とは別に、１種類以上の多糖類の改質用添加剤及び／または改質添加成分を溶解或いは分散させ、各水溶液を混合することでポリイオンコンプレックスを形成させて水不溶化することを特徴とする多糖類複合体の製造方法。An aqueous solution in which a carboxyl group or a salt thereof is introduced at the 6-position of the pyranose ring of the polysaccharide and the oxidized polysaccharide and chitosan are dissolved or dispersed is separately prepared in advance, and one or both of them, or both aqueous solutions are separately prepared. Polysaccharide complex characterized by dissolving or dispersing one or more kinds of polysaccharide modifying additives and / or modifying additive components and mixing each aqueous solution to form a polyion complex to make water insoluble. Manufacturing method.

前記酸化多糖類が、水に溶解又は分散させた多糖類を水系で、Ｎ−オキシル化合物の触媒の存在下、酸化剤を用いて酸化する方法により得られ、かつ天然多糖類のピラノース環中６位の１級水酸基を選択的に酸化されてなることを特徴とする請求項６から８のいずれかに記載の多糖類複合体の製造方法。The oxidized polysaccharide is obtained by a method of oxidizing a polysaccharide dissolved or dispersed in water in an aqueous system using an oxidizing agent in the presence of an N-oxyl compound catalyst. The method for producing a polysaccharide complex according to any one of claims 6 to 8, wherein the primary hydroxyl group at the position 1 is selectively oxidized.

前記キトサンとして、その構成単糖であるグルコサミンとＮ−アセチルグルコサミンの比率が、４５：５５から５５：４５の範囲にあることを特徴とする請求項６から９のいずれかに記載の多糖類複合体の製造方法。The polysaccharide complex according to any one of claims 6 to 9, wherein the chitosan has a ratio of glucosamine to N-acetylglucosamine, which is a constituent monosaccharide thereof, is in a range of 45:55 to 55:45. How to make the body.

前記改質用添加剤が、多糖類複合体の物性、構造、性能、および加工性を改質させるものであることを特徴とする請求項６から１０のいずれかに記載の多糖類複合体の製造方法。The polysaccharide complex according to any one of claims 6 to 10, wherein the modifying additive modifies physical properties, structure, performance, and processability of the polysaccharide complex. Production method.