JP2003527450A - Ｎ−ヒドロキシアセトアニリドの様な増強剤 - Google Patents

Ｎ−ヒドロキシアセトアニリドの様な増強剤

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JP2003527450A JP2000547302A JP2000547302A JP2003527450A JP 2003527450 A JP2003527450 A JP 2003527450A JP 2000547302 A JP2000547302 A JP 2000547302A JP 2000547302 A JP2000547302 A JP 2000547302A JP 2003527450 A JP2003527450 A JP 2003527450A
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enhancer
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polyporus
rhizoctonia
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Novo Nordisk AS
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Abstract

(57)【要約】 本発明は、溶液中の染料を漂白する方法であって、水溶液中で前記染料をラッカーゼ及び式−ＮＯＨ−ＣＯ−の増強剤、特にＮ−ヒドロキシアセトアニリドと接触させることを含んで成る方法を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 発明の分野 本発明はラッカーゼ酵素及び増強剤によって染料を漂白する非常に効果的な方
法に関する。本発明はまた、洗剤組成物に関する。 従来技術
【０００２】 染色した織物から浸出される着色物質をフェノール酸化酵素によって漂白する
ことができることは、早くから明らかであった。この方法における染料の転移を
防ぐためのペルオキシダーゼ又はオキシダーゼの使用は、国際公開第９１／０５
８３９号に記載されている。促進剤、増強剤又は媒介物として記載されている、
ある酸化可能な物質、例えば金属イオン；フェノール性化合物、例えば７−ヒド
ロキシクマリン、バニリン、及びｐ−ヒドロキシベンゼンスルホン酸は、酵素的
な漂白反応を増強することができる（国際公開第９１／０５８３９号を参照のこ
と）。
【０００３】 増強剤の他の型もまた開示されており、例えばフェノチアジン、フェノキサジ
ン、メチルシリンガート（methylsyringate)及びアセトシリンゴン（acetosyrin
gone）である（国際公開第９４／１２６２１号、第９５／０１４２６号及び第９
５／０１４２６号を参照のこと）。
【０００４】 増強剤の更に別の型は、国際公開第９４／２９４２５号及び第９７／４８７８
６号に開示のＮＯ，ＮＯＨ又はＨ−Ｎ（Ｒ）−ＯＨを含む脂肪族、環状脂肪族、
ヘテロ環式及び芳香族の化合物である。国際公開第９４／２９４２５号及び第９
７／４８７８６号において、ベンゾトリアゾールは染料を漂白するための増強剤
として好ましい。
【０００５】 溶液中で、ラッカーゼと一緒になって染料を漂白するために非常に効果的であ
る、選択された一群の−ＮＯＨ化合物の提供が、本発明の目的である。 発明の要約
【０００６】 溶液中で染料を漂白するために、ラッカーゼと一緒に使用される場合、選択さ
れた一群の−ＮＯＨ化合物が増強剤として非常によく機能することは、当時驚く
べきことに見出された。
【０００７】 従って、本発明は溶液中で染料を漂白する方法を提供し、これは水溶液中で前
記染料をラッカーゼ及び以下の式：
【化５】 （ここでＡは：
【化６】 であり、そしてＢはＨ、又はＣ１−Ｃ４非分枝アルキルであり、ここで前記アル
キルはエーテル基を含んでいてもよく、そしてＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６
はＨ，ＮＨ２，ＣＯＯＨ，ＣＮ，ＳＯ３Ｈ，ＣＨ３，ＣＯＣＨ３，ＮＯ２，ＯＣ
Ｈ３，ＮＲ７Ｒ８，ＣＯＯＲ９、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１０であり、ここでＲ７
，Ｒ８，Ｒ９及びＲ１０はＣ１−Ｃ２の非分枝アルキルである）の増強剤と接触
させることを含んで成る。 発明の詳細な説明増強剤
【０００８】 本発明は、溶液中での染料の漂白方法に関し、これは水溶液中で前記染料をラ
ッカーゼ及び以下の式：
【化７】 （ここでＡは：
【化８】 であり、そしてＢはＨ、又はＣ１−Ｃ４非分枝アルキルであり、ここで前記アル
キルはエーテル基を含んでいてもよく、そしてＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６
はＨ，ＮＨ２，ＣＯＯＨ，ＳＯ３Ｈ，ＣＮ，ＣＨ３，ＣＯＣＨ３，ＮＯ２，ＯＣ
Ｈ３，ＮＲ７Ｒ８，ＣＯＯＲ９、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１０であり、ここでＲ７
，Ｒ８，Ｒ９及びＲ１０はＣ１−Ｃ２の非分枝アルキルであり；特にＲ２，Ｒ３
，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６はＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ３Ｈ，ＣＨ３，ＣＯＣＨ３，ＯＣＨ
３，ＮＲ７Ｒ８、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ９であり、ここでＲ７，Ｒ８、及びＲ９
はＣ１−Ｃ２の非分枝アルキルであり；特にＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６の
少なくとも３つはＨであるべきである）の増強剤と接触させることを含んで成る
。
【０００９】 好ましい態様において、ＢはＨ、又はＣ１−Ｃ２の非分枝アルキルであり、そ
してＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６はＨ，ＮＨ２，ＣＯＯＨ，ＳＯ３Ｈ，ＣＮ
，ＣＨ３，ＣＯＣＨ３，ＮＯ２，ＯＣＨ３，ＮＲ７Ｒ８，ＣＯＯＲ９、又はＮＯ
Ｈ−ＣＯ−Ｒ１０であり、ここでＲ７，Ｒ８，Ｒ９、及びＲ１０はＣ１−Ｃ２の
非分枝アルキルであり；特にＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６はＨ，ＣＯＯＨ，
ＳＯ３Ｈ，ＣＨ３，ＣＯＣＨ３，ＯＣＨ３，ＮＲ７Ｒ８、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ
９であり、ここでＲ７，Ｒ８、及びＲ９はＣ１−Ｃ２の非分枝アルキルであり；
特にＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６の少なくとも３つはＨであるべきである。
【００１０】 別の好ましい態様において、ＢはＨ、又はＣＨ３であり、そしてＲ２，Ｒ３，
Ｒ４，Ｒ５及びＲ６はＨ，ＮＨ２，ＣＯＯＨ，ＳＯ３Ｈ，ＣＮ，ＣＨ３，ＣＯＣ
Ｈ３，ＮＯ２，ＯＣＨ３，ＮＲ７Ｒ８，ＣＯＯＲ９、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１０
であり、ここでＲ７，Ｒ８，Ｒ９、及びＲ１０はＣ１−Ｃ２の非分枝アルキルで
あり；特にＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６はＨ，ＣＯＯＨ，ＳＯ３Ｈ，ＣＨ３
，ＣＯＣＨ３，ＯＣＨ３，ＮＲ７Ｒ８、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ９であり、ここで
Ｒ７，Ｒ８、及びＲ９はＣ１−Ｃ２の非分枝アルキルであり；特にＲ２，Ｒ３，
Ｒ４，Ｒ５及びＲ６の少なくとも３つはＨであるべきである。
【００１１】 特に好ましい態様において、前記増強剤はＮ−ヒドロキシアセトアニリドであ
る。
【００１２】 本発明の増強剤は１〜１０００μＭ、好ましくは５〜５００μＭ、及び更に好
ましくは１０〜２００μＭの濃度で存在することができる。増強剤の製造
【００１３】 本出願に記載の増強剤を、当業者に公知の方法を用いて製造することができ；
一般的な方法はOrganic Syntheses 67, 1989, p. 187-192に概説されている。増
強剤のいくつかはまた、商業的に入手可能である。
【００１４】 Ｎ−ヒドロキシアセトアニリドは、Organic Syntheses 67, 1989, p. 187-192
に記載の様に製造された。酵素
【００１５】 本発明のラッカーゼ酵素は、典型的に水溶液のリットル当たり１〜１００００
μｇの酵素タンパク質、特に水溶液のリットル当たり５〜２０００μｇの酵素タ
ンパク質、特に水溶液のリットル当たり５〜１０００μｇの酵素タンパク質の濃
度において存在することができる。
【００１６】 要求される分子酸素は、通常大気からの十分な量で存在するだろう。更にＯ2
が必要とされるならば、追加の酸素を加えることができる。ラッカーゼ及びラッカーゼ関連酵素
【００１７】 本発明に従い、ラッカーゼ又はラッカーゼ関連酵素は、溶液中の染料を漂白す
べきときに、上述した選択される一群の−ＮＯＨ化合物と一緒に使用される好ま
しい酵素である。
【００１８】 この発明に関連して、ラッカーゼ及びラッカーゼ関連酵素は酵素分類（ＥＣ
１．１０．３．２）に含まれるいずれかのラッカーゼ酵素、酵素分類（ＥＣ １
．１０．３．１）に含まれるいずれかのカテコール酸化酵素、酵素分類（ＥＣ
１．３．３．５）に含まれるいずれかのビリルビンオキシダーゼ酵素又は酵素分
類（ＥＣ １．１４．１８．１）に含まれるいずれかのモノフェノールモノオキ
シゲナーゼ酵素を含んで成る。
【００１９】 上述の酵素は植物、細菌又は菌類（糸状菌及び酵母を含む）由来であることが
でき、そして適当な例はアスペルギルス（Aspergillus)、ニューロスポラ（Neur
ospora）、例えばＮ．クラッサ（N. crassa)、ポドスポラ（Podospora)、ボツリ
チス（Botrytis）、コリビア（Collybia）、フォメス（Fomes)、レンチヌス（Le
ntinus）、プレウロツス（Pleurotus)、トラメテス（Trametes）、例えば、Ｔ．
ビロサ（T. villosa）及びＴ．ベルシコロル（T. versicolor)、リゾクトニア（
Rhizoctonia)、例えばＲ．ソラニ（R. solani)、コプリヌス（Coprinus）、例え
ば、Ｃ．シネレウス（C. cinereus)、Ｃ．コマタス（C. comatus）、Ｃ．フリエ
シィ（C. friesii）、及びＣ．プリカチリス（C. plicatilis)、プサチレラ（Ps
atyrella）、例えばＰ．コンデレアナ（P. condelleana）、パナエオラス（Pana
eolus)、例えばＰ．パピリオナセウス（P. papilionaceus）、マイセリオフソラ
（Myceliophthora）、例えばＭ．サーモフィラ（M. thermophila）、シタリジウ
ム（Scytalidium)、例えばＳ．サーモフィラム（S. thermophilum)、ポリポラス
（Polyporus)、例えば、Ｐ．ピンシツス（P. pinsitus)、パイクノポラス（Pycn
oporus）、例えばＰ．シンナバリナス（P. cinnabarinus)、フレビア（Phlebia)
、例えばＰ．ラジダ（P. radita)、（国際公開第９２／０１０４６号）、又はコ
リオルス（Coriolus)、例えばＣ．ヒルスツス（C. hirsutus）（日本特許第２−
２３８８８５号）の菌株由来のラッカーゼを含む。
【００２０】 コプリナス、マイセリオフソラ、ポリポラス、パイクノポラス、シタリジウム
又はリゾクトニア由来のラッカーゼが好ましく；特にコプリナス・シネレウス、
マイセリオフソラ・サーモフィラ、ポリポラス・ピンシツス、パイクノポラス・
シンナバリナス、シタリジウム・サーモフィラム又はリゾクトニア・ソラニ由来
のラッカーゼである。
【００２１】 前記ラッカーゼ又は前記ラッカーゼ関連酵素は更に、前記ラッカーゼをコード
するＤＮＡ配列及び前記ラッカーゼをコードするＤＮＡ配列を発現させる機能を
コードするＤＮＡ配列を有する組換えＤＮＡベクターで形質転換した宿主細胞を
、培養液中で前記ラッカーゼ酵素を発現させる条件下培養し、そして前記培養液
から前記ラッカーゼを回収することを含んで成る方法によって生成可能なもので
あることができる。ラッカーゼ活性（ＬＡＣＵ）の決定
【００２２】 ラッカーゼ活性は、好気的条件下でのシリンガルダジン（syringaldazin)の酸
化から決定される。生成される青紫色を５３０nmで光度測定する。分析条件は１
９mMのシリンガルダジン、２３mMのトリス／マレイン酸緩衝液、pH７．５、３０
℃、１分の反応時間である。
【００２３】 １ラッカーゼユニット（ＬＡＣＵ）は、これらの条件下で、１分当たり１．０
μmoleのシリンガルダジンの変換を触媒する酵素量である。ラッカーゼ活性（ＬＡＭＵ）の決定
【００２４】 ラッカーゼ活性は、好気的条件下でのシリンガルダジンの酸化から決定される
。生成される青紫色を５３０nmで光度測定する。分析条件は１９mMのシリンガル
ダジン、２３mMのトリス／マレイン酸緩衝液、pH７．５、３０℃、１分の反応時
間である。
【００２５】 １ラッカーゼユニット（ＬＡＭＵ）は、これらの条件で、１分当たり１．０μ
moleのシリンガルダジンの変換を触媒する酵素量である。染料又は着色料
【００２６】 好ましい態様において、本発明の方法は織物の染料又は着色料、あるいは溶液
中の織物の染料又は着色料の漂白のための適用を見出す。
【００２７】 着色料及び染料は、幅広い種類の天然及び合成の化合物である。染料／着色料
の以下の記述は、請求した本発明の範囲を限定するあらゆる方法であることを意
図しない。
【００２８】 合成織物用染料は、典型的にアゾ化合物（１又は複数のアゾ、又はジアゼンジ
イル、基を有する）であり、Ａｃｉｄ Ｒｅｄ １５１，Ｄｉｒｅｃｔ Ｂｌｕ
ｅ １，Ｄｉｒｅｃｔ Ｂｒｏｗｎ ４４、及びＯｒａｎｇｅ II、又はアント
ラキノン化合物、例えばＡｃｉｄ Ｂｌｕｅ ４５によって例示される。
【００２９】 他の構造的なモチーフは、Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｂｌｕｅ １９の様な、これら
のものと一緒に生ずることがある。
【００３０】 いくつかの染料は更に、織物の表面に結合することができる基を有し（反応性
染料）、そしていくつかの染料は金属イオンと錯化する。これらの修飾は、本発
明の適用可能性にたいてい影響しないだろう。
【００３１】 異なる構造はインジゴ部分であり、例えば可溶性染料のインジゴカルミンであ
る。
【００３２】 他の染料及び着色料は天然起源のものであることができ、あるいは天然の構造
と同一又は類似として合成されうる。植物の供給源から抽出可能な着色物質のカ
テゴリーの例は、ポリフェノール、アントシアニン及びカロテノイド化合物であ
る。工業的適用
【００３３】 本発明の具体的な態様は、家庭及び工業での洗濯の過程によって提供される。
【００３４】 その様な洗浄又はすすぎの過程において、織物上に存在する染料及び着色料は
洗浄又はすすぎの溶液に達することができ、そして洗濯物の変色を招くことがあ
る。本発明の方法による溶液中の着色化合物の漂白は、この不所望の効果を打ち
消すことができる。
【００３５】 本発明を、織物上に存在する汚れを漂白するためにも使用することができる：
これらの汚れは典型的に赤ワイン、果物、例えばクロフサスグリ、サクランボ、
イチゴ及びトマト（特にケチャップ及びスパゲッティのソース）、野菜、例えば
ニンジン及びビートの根、茶、コーヒー、香辛料、例えばカレー粉及びパプリカ
、草、又はボールペン／インクに由来する。
【００３６】 別の具体的な態様において、織物を処理する間にプロセス水に浸出した染料を
本発明の方法によって漂白し、不所望の沈着を防ぐことができる。
【００３７】 別の具体的な態様において、本発明の方法は廃水、例えば化学又は医薬産業か
ら、染料の製造から、染物工場から、又は織物産業からの廃水の処理における適
用を見出し、前記方法は、本発明の増強剤の存在下でのラッカーゼによる前記廃
水の処理を含んで成る。
【００３８】 上述した過程及び本発明の他の適用において、前記増強剤を前記過程の始め又
はその後で、１又は複数の添加において加えることができる。洗剤組成物
【００３９】 本発明の増強剤は加えられ、そしてその結果、洗剤組成物の成分となることが
できる。
【００４０】 本発明の洗剤組成物を例えば、染色した織物の前処理に適している洗濯用添加
組成物及びリンス剤を加えた織物用柔軟剤組成物を含む、手又は機械による洗濯
の洗剤組成物として調製することができ、あるいは一般的な家庭での固い表面を
清掃する作業における使用のための洗剤組成物として調製することができ、ある
いは手又は機械による皿洗いの作業のために調製することができる。
【００４１】 具体的な観点において、本発明は、本発明の増強剤、及びラッカーゼを含んで
成る洗剤添加物を提供する。前記洗剤添加物及び洗剤組成物は、１又は複数の他
の酵素、例えばプロテアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、アミラーゼ、カルボヒド
ラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナーゼ、アラビナーゼ、ガラクトナー
ゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、例えばラッカーゼ、及び／又はペルオキシダ
ーゼを含んで成ることがある。
【００４２】 一般に、選択される酵素の特性は前記の選択される洗剤と適合するべきであり
、（すなわちpH至適性、他の酵素的及び非酵素的活性成分との適合性など）、そ
して前記酵素は有効量で存在するべきである。プロテアーゼ ：適当なプロテアーゼは、動物、植物又は微生物起源のものを含む
。微生物起源のものが好ましい。化学的に修飾されるか、又はタンパク質工学的
に処理された変異体が含まれる。前記プロテアーゼは、セリンプロテアーゼ又は
メタロプロテアーゼであることができ、好ましくはアルカリ性の、微生物のプロ
テアーゼ又はトリプシン様プロテアーゼである。アルカリ性プロテアーゼの例は
ズブチリシンであり、特にバチルス（Bacillus）由来のもの、例えばズブチリシ
ンＮｏｖｏ、ズブチリシンＣａｒｌｓｂｅｒｇ、ズブチリシン３０９、ズブチリ
シン１４７及びズブチリシン１６８（国際公開第８９／０６２７９号に記載）で
ある。トリプシン様プロテアーゼの例はトリプシン（例えばブタ又はウシ起源の
もの）並びに国際公開第８９／０６２７０号及び第９４／２５５８３号に記載の
フサリウム（Fusarium）のプロテアーゼである。
【００４３】 有用なプロテアーゼの例は、国際公開第９２／１９７２９号、第９８／２０１
１５号、第９８／２０１１６号、及び第９８／３４９４６号に記載の変異体であ
り、特に１又は複数の以下の位置：２７，３６，５７，７６，８７，９７，１０
１，１０４，１２０，１２３，１６７，１７０，１９４，２０６，２１８，２２
２，２２４，２３５及び２７４における置換を有する変異体である。
【００４４】 好ましい商業的に入手可能なプロテアーゼ酵素はＡｌｃａｌａｓｅ（商標）、
Ｓａｖｉｎａｓｅ（商標）、Ｐｒｉｍａｓｅ（商標）、Ｄｕｒａｌａｓｅ（商標
）、Ｅｓｐｅｒａｓｅ（商標）、及びＫａｎｎａｓｅ（商標）（Novo Nordisk A
/S）、Ｍａｘａｔａｓｅ（商標）、Ｍａｘａｃａｌ（商標）、Ｍａｘａｐｅｍ（
商標）、Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ（商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ（商標）、Ｐｕｒａｆ
ｅｃｔ ＯｘＰ（商標）、ＦＮ２（商標）、及びＦＮ３（商標）（Genencor Int
ernational Inc.)を含む。リパーゼ ：適当なリパーゼは細菌又は菌類起源のものを含む。化学的に修飾する
か、又はタンパク質工学的に処理された変異体が含まれる。有用なリパーゼの例
はフミコラ（Humicola）［異名サーモミセス（Thermomyces)］由来、例えば欧州
特許第２５８ ０６８号及び第３０５ ２１６号に記載のＨ．ラヌギノサ（lanu
ginosa）［Ｔ．ラヌギノサス（lanuginosus)］由来、又は国際公開第９６／１３
５８０号に記載のＨ．インソレンス（insolens）由来のリパーゼ、シュードモナ
ス（Pshudomonas)のリパーゼ、例えばＰ．アルカリジェネス（alcaligenes)若し
くはＰ．シュードアルカリジェネス（pseudoalcaliganes）(欧州特許第２１８
２７２号）、Ｐ．セパシア（cepacia)（欧州特許第３３１ ３７６号）、Ｐ．ス
タットゼリ（stutzeri）（英国特許第１，３７２，０３４号）、Ｐ．フルオレッ
センス（fluorescens)、シュードモナススピーシス菌株ＳＤ７０５（国際公開第
９５／０６７２０号及び第９６／２７００２号）、Ｐ．ウィスコンシネンシス（
国際公開第９６／１２０１２号）由来のリパーゼ、バチルスのリパーゼ、例えば
Ｂ．ズブチリス（subtilis)（Dartois et al. (1993), Biochemica et Biophysi
ca Acta, 1131, 253-360)、Ｂ．ステアロサーモフィラス（stearothermophilus)
（日本特許第６４／７４４９９２号）又はＢ．プミラス（pumilus)（国際公開第
９１／１６４２２号）由来のリパーゼを含む。 他の例は、リパーゼ変異体、例えば国際公開第９２／０５２４９号、第９４／
０１５４１号、欧州特許第４０７ ２２５号、第２６０ １０５号、国際公開第
９５／３５３８１号、第９６／００２９２号、第９５／３０７４４号、第９４／
２５５７８号、第９５／１４７８３号、第９５／２２６１５号、第９７／０４０
７９号及び第９７／０７２０２号に記載のものである。
【００４５】 好ましい商業的に入手可能なリパーゼ酵素はＬｉｐｏｌａｓｅ（商標）、Ｌｉ
ｐｏｌａｓｅ Ｕｌｔｒａ（商標）及びＬｉｐｏＰｒｉｍｅ（商標）（Novo Nor
disk A/S）を含む。アミラーゼ ：適当なアミラーゼ（α及び／又はβ）は、細菌又は菌類起源のもの
を含む。化学的に修飾されるか、又はタンパク質工学的に処理された変異体が含
まれる。アミラーゼは、例えばバチルス、例えば英国特許第１，２９６，８３９
号に更に詳細に記載のＢ．リチェニホルミス（licheniformis)の特別の菌株から
得られるα−アミラーゼを含む。
【００４６】 有用なアミラーゼの例は、国際公開第９４／０２５９７号、第９４／１８３１
４号、第９６／２３８７３号、及び第９７／４３４２４号に記載の変異体であり
、特に１又は複数の以下の位置：１５，２３，１０５，１０６，１２４，１２８
，１３３，１５４，１５６，１８１，１８８，１９０，１９７，２０２，２０８
，２０９，２４３，２６４，３０４，３０５，３９１，４０８、及び４４４にお
ける置換を有する変異体である。
【００４７】 商業的に入手可能なアミラーゼは、Ｄｕｒａｍｙｌ（商標）、Ｔｅｒｍａｍｙ
ｌ（商標）、Ｆｕｎｇａｍｙｌ（商標）及びＢＡＮ（商標）（Novo Nordisk A/S
）、Ｒａｐｉｄａｓｅ（商標）及びＰｕｒａｓｔａｒ（商標）（Genecor Intern
ational Inc.）である。セルラーゼ ：適当なセルラーゼは、細菌又は菌類起源のものを含む。化学的に修
飾されるか、又はタンパク質工学的に処理された変異体が含まれる。適当なセル
ラーゼは、バチルス、シュードモナス、フミコラ、フサリウム、チエラビア（Th
ielavia)、アクレモニウム（Acremoniumu)の属由来のセルラーゼ、例えば米国特
許第４，４３５，３０７号、第５，６４８，２６３号、第５，６９１，１７８号
、第５，７７６，７５７号及び国際公開第８９／０９２５９号に開示のフミコラ
・インソレンス、ミセリオフソラ・サーモフィリア（Myceliophthora thermophi
lia)及びフサリウム・オキシスポラムから産生した菌類のセルラーゼを含む。
【００４８】 特に適当なセルラーゼは色彩保護の利益を有するアルカリ性又は中性のセルラ
ーゼである。その様なセルラーゼの例は、欧州特許第０ ４９５ ２５７号、第
０ ５３１ ３７２号、国際公開第９６／１１２６２号、第９６／２９３９７号
、第９８／０８９４０号に記載のセルラーゼである。他の例はセルラーゼ変異体
、例えば国際公開第９４／０７９９８号、欧州特許第０ ５３１ ３１５号、米
国特許第５，４５７，０４６号、第５，６８６，５９３号、第５，７６３，２５
４号、国際公開第９５／２４４７１号、第９８／１２３０７号及びＰＣＴ／ＤＫ
９８／００２９９に記載されているものである。
【００４９】 商業的に入手可能なセルラーゼは、Ｃｅｌｌｕｚｙｍｅ（商標）、及びＣａｒ
ｅｚｙｍｅ（商標）（Novo Nordisk A/S）、Ｃｌａｚｉｎａｚｅ（商標）、及び
Ｐｕｒａｄａｘ ＨＡ（商標）（Genencor International Inc.)及びＫＡＣ−５
００（Ｂ）（商標）（Kao Corporation)を含む。ペルオキシダーゼ／オキシダーゼ ：適当なペルオキシダーゼ／オキシダーゼは、
植物、細菌又は菌類起源のものを含む。化学的に修飾されるか、又はタンパク質
工学的に処理された変異体が含まれる。有用なペルオキシダーゼの例は、コプリ
ナス（Coprinus）由来、例えばＣ．シネレウス（cinereus）由来のペルオキシダ
ーゼ、並びにその変異体、例えば国際公開第９３／２４６１８号、第９５／１０
６０２号、及び第９８／１５２５７号に記載のものを含む。
【００５０】 商業的に入手可能なペルオキシダーゼはＧｕａｒｄｚｙｍｅ（商標）（Novo N
ordisk A/S）を含む。
【００５１】 前記の洗剤用酵素は、１又は複数の酵素を含む別々の添加物を加えることによ
って、あるいはこれらの酵素全てを含んで成る複合添加物を加えることによって
洗剤組成物中に含まれることができる。本発明の洗剤用添加物、すなわち別々の
添加物又は複合添加物を、例えば顆粒、液体、スラリーなどとして調製すること
ができる。好ましい洗剤用添加物製剤は顆粒、特に無粉塵性顆粒、液体、特に安
定化した液体、又はスラリーである。
【００５２】 無粉塵性顆粒を、例えば米国特許第４，１０６，９９１号及び第４，６６１，
４５２号に開示された様に製造することができ、そして当業界で知られている方
法によって任意にコートすることができる。ロウ性コーティング材料の例は、平
均分子量１０００〜２００００を有するポリエチレンオキシド生成物（ポリエチ
レングリコール、ＰＥＧ）；１６〜５０のエチレンオキシド単位を有するエトキ
シル化ノニルフェノール；アルコールが１２〜２０の炭素原子を含み、そして１
５〜８０のエチレンオキシド単位が存在するエトキシル化脂肪アルコール；脂肪
アルコール；脂肪酸；並びに脂肪酸のモノ−及びジ−及びトリグリセリドである
。流動床技術による適用に適した皮膜形成コーティング材料の例は、英国特許第
１４８３５９１号に与えられている。液体酵素調製物は、例えばポリオール、例
えばプロピレングリコール、糖又は糖アルコール、乳酸又はホウ酸を確立された
方法に従い加えることによって安定化することができる。保護酵素を欧州特許第
２３８，２１６号に開示された方法に従い製造することができる。
【００５３】 本発明の洗剤組成物は、便利な形態のいずれか、例えば棒、錠剤、粉末、顆粒
、ペースト又は液体であることができる。液体洗剤は、典型的に最大７０％の水
及び０〜３０％の有機溶媒を含む水性、又は非水性であることができる。
【００５４】 前記洗剤組成物は、１又は複数の界面活性剤を含んで成り、これは半極性を含
む非イオン性及び／又は陰イオン性及び／又は陽イオン性及び／又は両イオン性
であってもよい。前記界面活性剤は重量当たり０．１％〜６０％の濃度で存在す
る。
【００５５】 その中に含まれる際、前記洗剤は通常約１％〜約４０％の陰イオン性界面活性
剤、例えば直鎖状アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルファーオレフィンスルホ
ン酸塩、アルキル硫酸塩（脂肪アルコール硫酸塩）、アルコールエトキシ硫酸塩
、第２級アルカンスルホン酸塩、アルファースルホ脂肪酸メチルエステル、アル
キル若しくはアルケニルコハク酸又はセッケンを含むだろう。
【００５６】 その中に含まれる際、前記洗剤は通常約０．２％〜約４０％の非イオン性界面
活性剤、例えばアルコールエトキシラート、ノニルフェノールエトキシラート、
アルキルポリグリコシド、アルキルジメチルアミンオキシド、エトキシル化脂肪
酸モノエタノールアミド、脂肪酸モノエタノールアミド、ポリヒドロキシアルキ
ル脂肪酸アミド、又はグルコサミンのＮ−アシルＮ−アルキル誘導体（“グルカ
ミド（glucamide)”）を含むだろう。
【００５７】 前記洗剤は０〜６５％の洗剤用ビルダー又は錯化剤、例えばゼオライト、二リ
ン酸塩、三リン酸塩、ホスホン酸塩、カルボン酸塩、クエン酸塩、ニトリロ三酢
酸、エチレンジアミン四酢酸、ジエチレントリアミン五酢酸、アルキル若しくは
アルケニルコハク酸、可溶性ケイ酸塩又は層状ケイ酸塩（例えばＨｏｅｃｈｓｔ
のＳＫＳ−６）を含むことができる。
【００５８】 前記洗剤は、１又は複数のポリマーを含んで成ることができる。例としてはカ
ルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、
ポリビニルアルコール、ポリビニルピリジン−Ｎ−オキシド、ポリビニルイミダ
ゾール、ポリカルボキシラート、例えばポリアクリラート、マレイン酸／アクリ
ル酸共重合体及びラウリルメタクリラート／アクリル酸共重合体がある。
【００５９】 前記洗剤は漂白系を含むことができ、これはＨ2Ｏ2 供給源、例えば過ホウ酸
塩又は過カルボン酸塩を含んで成ることができ、これを過酸形成漂白活性化剤、
例えばテトラアセチルエチレンジアミン又はノナノイルオキシベンゼンスルホン
酸塩と組合わせることができる。あるいは、前記漂白系は例えばアミド、イミド
、又はスルホン型の過酸を含んで成ることができる。
【００６０】 本発明の前記洗剤組成物の酵素は従来の安定化剤、例えばプロピレングリコー
ル又はグリセロール、糖又は糖アルコール、乳酸、ホウ酸、又はホウ酸誘導体、
例えば芳香族ホウ酸エステル、あるいはフェニルホウ素酸誘導体、例えば４−ホ
ルミルフェニルホウ素酸を用いて安定化されることがあり、そして前記組成物を
例えば国際公開第９２／１９７０９号及び第９２／１９７０８号に記載されてい
る様に調製することができる。
【００６１】 前記洗剤はまた、従来の洗剤の成分、例えばクレー、起泡増進剤、石鹸泡抑制
剤、抗腐蝕剤、汚れの懸濁剤、抗汚れ沈着剤、染料、殺菌剤、蛍光増白剤、ヒド
ロトロープ、変色阻害剤、又は香料を含む織物用コンディショナーを含むことが
できる。
【００６２】 現在、前記洗剤組成物において、いずれかの酵素を洗浄液のリットル当たり０
．０１〜１００mgの酵素タンパク質、好ましくは洗浄液のリットル当たり０．０
５〜５mgの酵素タンパク質、特に洗浄液のリットル当たり０．１〜１mgの酵素タ
ンパク質に相当する量で加えることができる。
【００６３】 本発明の増強剤及びラッカーゼは、引用によって本明細書に組入れられる国際
公開第９７／０７２０２号に開示されている洗剤用製剤に更に組入れられること
がある。
【００６４】 更に以下の例は本発明を例示し、そしてそれらは請求した様な本発明の範囲を
限定するあらゆる方法であることを意図しない。 例１様々なラッカーゼ及び様々なＮＯＨ型増強剤を用いるメチルオレンジの漂白 材料及び方法酵素 国際公開第９７／０８３２５号に記載の様に製造し、pH９のホウ酸に対して透析
した、５７．５ＬＡＭＵ／mlの組換えコプリナス・シネレウスのラッカーゼ（ｒ
ＣｃＬ）。 国際公開第９５／３３８３６号に記載の様に製造した、１４１９ＬＡＭＵ／mlの
組換えミセリオフソラ・サーモフィリアのラッカーゼ（ｒＭｔＬ）。 国際公開第９６／００２９０号に記載の様に製造した、１３３０ＬＡＣＵ／mlの
組換えポリポラス・ピンシツスのラッカーゼ。緩衝液 Ｂｒｉｔｔｏｎ−Ｒｏｂｉｎｓｏｎ緩衝液は： ０．１Ｍ リン酸塩 ０．１Ｍ ホウ酸塩 ０．１Ｍ 酢酸塩 から成る。染料 メチルオレンジ（Merck 、ドイツ）増強剤 Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド １−ヒドロキシベンゾトリアゾール ２−ヒドロキシピリジン−Ｎ−オキシド Ｎ−ベンゾイル−Ｎ−フェニルヒドロキシルアミン 安息香酸［６−（メチルスルホニル）インドール−１−イル］エステル（ＰＦＣ
−２０２） シアヌル酸 ３−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン Ｎ−ヒドロキシフタルイミド ２−エチル−５−フェニルイソオキサゾリウム−４′−スルホン酸塩、Ｈ２Ｏ ｐ，ｐ′−アゾキシフェネトール キノリン−Ｎ−オキシド イソ−キノリン−Ｎ−オキシド ジ−２−ピリジルケトンオキシム漂白アッセイ 最終濃度 ５０μｌ メチルオレンジ、ＡｂｓＵ464nm〜７ １．４ＡｂｓＵ １２５μｌ ０．１Ｍ Britton-Robinson緩衝液 ５０mM ２５μｌ ２mM 媒介物（又は水） ０．２mM ５０μｌ ラッカーゼ希釈液
【００６５】 反応を酵素の添加によって開始した。４６４nmの吸光度を、３０℃で、Ｃｏｂ
ａｓ Ｆａｒａ上で３分間（５秒ごとに読み取り）追った。最初の漂白速度を漸
進曲線の最初の直線部分から決定した。結果及び考察
【００６６】 上文に列挙したＮ−ＯＨ化合物を、メチルオレンジの漂白におけるラッカーゼ
媒介物として、３つの組換えラッカーゼ（ｒＰｐＬ，ｒＭｔＬ及びｒＣｃＬ）と
一緒に、様々なpH値で試験した。全ての反応データを表１〜３に要約する。大き
な負の数値は最良の性能を表わす。
【００６７】 本件の表から、Ｏ＝Ｃ−Ｎ−ＯＨ型の増強剤（Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド
を参照のこと）は前記の他のＮ−ＯＨ型の増強剤と比較して驚くほど良いことが
見てとれる。
【００６８】
【表１】
【００６９】
【表２】
【００７０】
【表３】
【００７１】 例２ラッカーゼ及び新規−ＮＯＨ−ＣＯ−型媒介物によるメチルオレンジの漂白 材料及び方法酵素 例１に記載したポリポラス・ピンシツスのラッカーゼ染料 メチルオレンジ（Merck 、ドイツ）増強剤 Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド Ｎ−（４−シアノフェニル）−Ｎ−ヒドロキシアセトアミド（ＣＡＳ ８０５８
４−６５−２）漂白アッセイ ５０μｌ ０．１μｇ／ml メチルオレンジ １２５μｌ ０．１Ｍ Britton-Robinson緩衝液（例１を参照のこと） ２５μｌ ２mM 媒介物又は水（対照標準として） ５０μｌ ラッカーゼ希釈液（１：４００）
【００７２】 メチルオレンジ、緩衝液及び媒介物をマイクロ滴定プレート中で混合し、そし
て前記の反応をラッカーゼの添加によって開始する。吸光度を、１５分後に４５
０nmで測定する。 結果及び考察
【００７３】 Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド及びＮ−（４−シアノフェニル）−Ｎ−ヒドロ
キシアセトアミドを、メチルオレンジの漂白における媒介物として、ラッカーゼ
と共にpH４〜６で試験した。反応データを表４に要約する。低い値は最良の性能
を表わす。
【００７４】 本データはＮ−（４−シアノフェニル）−Ｎ−ヒドロキシアセトアミドが溶液
中の染料の漂白でＮ−ヒドロキシアセトアニリドと同程度に効果的であることを
示す。
【００７５】
【表４】
【００７６】 例３ラッカーゼ及びＮ−ヒドロキシアセトアニリドによる様々な染料の漂白 材料及び方法酵素 濃度が１７２６ＬＡＣＵ／mlであることを除いて、例１に記載した様なポリポラ
ス・ピンシツスのラッカーゼ染料 Ａｃｉｄ ｂｌｕｅ １１３（Aldrich) ＣＳＢ（Aldrich) Ａｃｉｄ ｂｌｕｅ ４５（Aldrich) Ｃｉｂａｃｈｒｏｎ Ｍａｒｉｎｅ（Ciba Specialty Chemicals）増強剤 Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド漂白アッセイ ５０μｌ 染料溶液 １２５μｌ ０．１Ｍ Britton-Robinson緩衝液、pH５（例１を参照のこと） ２５μｌ ２mM 媒介物又は水（対照標準として） ５０μｌ ラッカーゼ希釈液（１：４００）又は水（対照標準として）
【００７７】 染料、緩衝液及び媒介物をマイクロ滴定プレート中で混合し、そして前記の反
応をラッカーゼの添加によって開始する。吸光度を５分後に５９５nmで測定する
。 結果及び考察
【００７８】 Ｎ−ヒドロキシアセトアニリドを、様々な染料の漂白における媒介物としてラ
ッカーゼと共に使用した。反応データを表５に要約する。低い値は最良の性能を
表わす。
【００７９】 本データは前記媒介物がいくつかの異なる染料の漂白を増強することを示す。
【００８０】
【表５】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ， ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，Ｇ Ｅ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ， ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，Ｍ Ｎ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ， ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，Ｚ Ａ，ＺＷ Ｆターム(参考） 4H003 DA01 DB01 EB17 EB22 EC01 EC02 EC03 ED02 FA06 FA12 FA15

Claims (13)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 溶液中での染料の漂白方法であって、水溶液中で、前記染料
    をラッカーゼ及び以下の式： 【化１】 （ここでＡは： 【化２】 であり、そしてＢはＨ、又はＣ１−Ｃ４非分枝アルキルであり、ここで前記アル
    キルはエーテル基を含んでいてもよく、そしてＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ６
    はＨ，ＮＨ２，ＣＯＯＨ，ＳＯ３Ｈ，ＣＮ，ＣＨ３，ＣＯＣＨ３，ＮＯ２，ＯＣ
    Ｈ３，ＮＲ７Ｒ８，ＣＯＯＲ９、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１０であり、ここでＲ７
    ，Ｒ８，Ｒ９及びＲ１０はＣ１−Ｃ２の非分枝アルキルである）の増強剤と接触
    させることを含んで成る方法。
  2. 【請求項２】 前記増強剤がＮ−ヒドロキシアセトアニリドである、請求項
    １に記載の方法。
  3. 【請求項３】 前記ラッカーゼが微生物のラッカーゼである、請求項１に記
    載の方法。
  4. 【請求項４】 前記ラッカーゼがコプリヌス（Coprinus）、マイセリオフソ
    ラ（Myceliophthora）、ポリポラス（Polyporus)、パイクノポラス（Pycnoporus
    ）、シタリジウム（Scytalidium)又はリゾクトニア（Rhizoctonia)由来である、
    請求項３に記載の方法。
  5. 【請求項５】 前記ラッカーゼがコプリヌス・シネレウス（Coprinus ciner
    eus)、マイセリオフソラ・サーモフィリア（Myceliophthora thermophilia)、ポ
    リポラス・ピンシタス（Polyporus pinsitus）、パイクノポラス・シンナバリナ
    ス（Pycnoporus cinnabarinus)、シタリジウム・サーモフィラム（Scytalidium
    thermophilium)又はリゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）由来である、
    請求項４に記載の方法。
  6. 【請求項６】 複数の織物を洗浄溶液中で一緒に洗浄するときに、前記方法
    が、染め織物から別の織物への、織物染料の転移を阻害する、請求項１〜５のい
    ずれか１項に記載の方法。
  7. 【請求項７】 前記増強剤が、前記の方法の始め又は途中で加えられる、請
    求項６に記載の方法。
  8. 【請求項８】 前記増強剤の濃度が１〜１０００μＭの濃度範囲にある、請
    求項１に記載の方法。
  9. 【請求項９】 ラッカーゼ、界面活性剤及び以下の式： 【化３】 （ここでＡは： 【化４】 であり、そしてＢはＨ、又はＣ１−Ｃ４の非分枝アルキルであり、ここで前記ア
    ルキルはエーテル基を含んでいてもよく、そしてＲ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５及びＲ
    ６はＨ，ＮＨ２，ＣＯＯＨ，ＳＯ３Ｈ，ＣＮ，ＣＨ３，ＣＯＣＨ３，ＮＯ２，Ｏ
    ＣＨ３，ＮＲ７Ｒ８，ＣＯＯＲ９、又はＮＯＨ−ＣＯ−Ｒ１０であり、ここでＲ
    ７，Ｒ８，Ｒ９及びＲ１０はＣ１−Ｃ２の非分枝アルキルである）の増強剤を含
    んで成る洗剤組成物。
  10. 【請求項１０】 前記増強剤がＮ−ヒドロキシアセトアニリドである、請求
    項９に記載の洗剤組成物。
  11. 【請求項１１】 前記ラッカーゼがコプリヌス、マイセリオフソラ、ポリポ
    ラス、パイクノポラス、シタリジウム又はリゾクトニア由来である、請求項９に
    記載の方法。
  12. 【請求項１２】 前記ラッカーゼがコプリヌス・シネレウス、マイセリオフ
    ソラ・サーモフィリア、ポリポラス・ピンシタス、パイクノポラス・シンナバリ
    ナス、シタリジウム・サーモフィラム又はリゾクトニア・ソラニ由来である、請
    求項１１に記載の方法。
  13. 【請求項１３】 １又は複数の他の酵素、特にプロテアーゼ、リパーゼ、ア
    ミラーゼ、セルラーゼ、及び／又はクチナーゼを更に含んで成る、請求項９〜１
    ２のいずれか１項に記載の洗剤組成物。
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