JP2003508502A - Methods and compositions for the production of long-lasting antineoplastic agents - Google Patents
Methods and compositions for the production of long-lasting antineoplastic agentsInfo
- Publication number
- JP2003508502A JP2003508502A JP2001521398A JP2001521398A JP2003508502A JP 2003508502 A JP2003508502 A JP 2003508502A JP 2001521398 A JP2001521398 A JP 2001521398A JP 2001521398 A JP2001521398 A JP 2001521398A JP 2003508502 A JP2003508502 A JP 2003508502A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- derivative
- group
- taxol
- blood
- reactive group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
- A61K9/0073—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy
- A61K9/0075—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy for inhalation via a dry powder inhaler [DPI], e.g. comprising micronized drug mixed with lactose carrier particles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
- A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
- A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/643—Albumins, e.g. HSA, BSA, ovalbumin or a Keyhole Limpet Hemocyanin [KHL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/08—Bronchodilators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
- A61P5/16—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4 for decreasing, blocking or antagonising the activity of the thyroid hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/06—Antiarrhythmics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Oncology (AREA)
- Virology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Surgery (AREA)
- Obesity (AREA)
- Transplantation (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Hematology (AREA)
Abstract
(57)【要約】 抗腫瘍薬剤の誘導体が調製される。この誘導体は、1つ以上の血液成分、特に、移動性血液成分と共有結合を形成し得る。癌の処置において使用するための医薬の製造のための組成物の使用が提供され、この組成物は、タキソールおよびそのアナログの誘導体を含み、ここで、この誘導体は、血液成分中のアミノ基、ヒドロキシル基またはチオール基と反応して安定な共有結合を形成する反応性基を含み、この反応性基は、N−ヒドロキシスクシンイミド、N−ヒドロキシ−スルホスクシンイミドおよびマレイミド基から選択される。 (57) [Summary] Derivatives of the antitumor agent are prepared. The derivative may form a covalent bond with one or more blood components, especially mobile blood components. Provided is the use of a composition for the manufacture of a medicament for use in the treatment of cancer, the composition comprising a derivative of taxol and its analogs, wherein the derivative comprises an amino group in a blood component, It includes a reactive group that reacts with a hydroxyl or thiol group to form a stable covalent bond, wherein the reactive group is selected from N-hydroxysuccinimide, N-hydroxy-sulfosuccinimide and maleimide groups.
Description
【0001】
(発明の分野)
本発明は、改変された抗腫瘍性薬剤に関する。特に、本発明は、インビボで血
液成分と共有結合を形成可能なように改変された抗腫瘍性薬剤に関する。FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to modified antitumor agents. In particular, the present invention relates to antitumor agents modified so that they can form covalent bonds with blood components in vivo.
【0002】
(発明の背景)
窒素マスタードの抗腫瘍性性質の50年以上の前の発見以来、癌化学療法は、
科学の努力のこれまでに拡大してきた領域であり、そして、手術および放射線治
療と共に癌処置の重要な成分であった。化学療法はかつて、手術および/または
放射線治療によって治療可能であると診断された患者にとって、生存期間を延ば
すための方法としてのみ受け入れられたが、現在は、癌の2千以上の改変体のほ
とんど全てにおける処置の様式として認識されている。BACKGROUND OF THE INVENTION Since more than 50 years ago the discovery of the antitumor properties of nitrogen mustard, cancer chemotherapy has
It has been an ever expanding area of scientific effort, and has been an important component of cancer treatment along with surgery and radiation therapy. Chemotherapy was once accepted as the only way to prolong survival for patients previously diagnosed as treatable by surgery and / or radiation therapy, but nowadays most of the more than 2,000 variants of cancer It is recognized as the mode of treatment in all.
【0003】
現代の癌化学療法は、代表的には、2つまたは3つの異なった抗腫瘍性薬剤の
組み合わせを含み、そして、技術における進歩および医療の知識は、癌の多数の
形態において患者が回復の見込みを大いに改善してきた。癌治療における抗腫瘍
性薬剤の役割は、癌の形態に依存して広範に変化する。例えば、化学療法は、し
ばしば、卵巣、精巣、***、膀胱、およびその他の癌、白血病およびリンパ腫に
おける治療の主な工程であり、そして、一般的に、肉腫、黒色腫、骨髄腫、およ
びその他の大多数の処置における放射線治療と組み合わせて使用される。対照的
に、化学療法は、最終手段のみとしてか、または、多数の固形腫瘍(例えば、膵
臓および肺の癌)のための一時的な処置としてしばしば使用される。腫瘍または
他の新生物のそれぞれのクラス内で例外が存在する。Modern cancer chemotherapies typically involve the combination of two or three different anti-neoplastic agents, and advances in technology and medical knowledge have shown that patients with multiple forms of cancer have It has greatly improved the prospect of recovery. The role of anti-neoplastic agents in cancer treatment varies widely depending on the morphology of the cancer. For example, chemotherapy is often the major step of treatment in ovaries, testes, breast, bladder, and other cancers, leukemias and lymphomas, and is commonly used for sarcomas, melanomas, myelomas, and other Used in combination with radiation therapy in most procedures. In contrast, chemotherapy is often used as a last resort only or as a temporary treatment for many solid tumors (eg, pancreatic and lung cancers). Exceptions exist within each class of tumor or other neoplasm.
【0004】
天然の抗腫瘍性薬剤は、乏しい生物学的利用性、広範な第1の代謝通過、およ
び短い半減期に苦しみ、これらの薬剤が、患者に対して絶えず注入される必要性
を生じる。さらに、癌細胞を殺すことによって、癌に対して有用であるが、抗腫
瘍性薬剤はまた、正常細胞に対してしばしば有毒であり、この毒性は、それらの
制御されない体内分布に関連する。Natural antineoplastic agents suffer from poor bioavailability, widespread first metabolic transit, and short half-life, resulting in the need for these agents to be constantly infused into patients. . Moreover, although useful against cancer by killing cancer cells, anti-neoplastic agents are also often toxic to normal cells, which toxicity is associated with their uncontrolled biodistribution.
【0005】
従って、抗腫瘍性薬剤の半減期を延長するための方法の必要性が存在する。少
なくとも2つの刊行物が、この問題を伝えている。Kingの欧州特許出願番号
0554708A1は、ヒドラゾン結合を使用して薬物に付着されたリガンドで
改変した薬物、およびヒドラゾン結合を介して運搬するように付着された薬剤を
開示する。さらに、KratzのPCT出願WO98/10794は、マレイミ
ドまたはN−ヒドロキシスクシンイミドエステル化合物に由来する少なくとも1
つのHS基、HO基、H2N基を有するトランスフェリン、アルブミンおよびポ
リエチルグリコールの結合体を開示する。Accordingly, there is a need for methods to extend the half-life of antitumor agents. At least two publications convey this issue. King's European Patent Application No. 0554708A1 discloses a drug modified with a ligand attached to a drug using a hydrazone bond, and an agent attached for delivery via the hydrazone bond. Furthermore, Kratz's PCT application WO 98/10794 discloses at least one derived from a maleimide or N-hydroxysuccinimide ester compound.
Disclosed is a conjugate of transferrin, albumin and polyethylglycol with one HS group, HO group, H 2 N group.
【0006】
これらの刊行物に開示される結合体は、エキソビボで行なわれる方法を用いて
作製される。このような方法は、ヒト血清を獲得する工程、この血清由来の所望
のキャリア(例えば、アルブミンまたはトランスフェリン)を精製する工程、特
異的反応基(例えば、Kingの出願において開示された「リガンド」)と、精
製されたタンパク質を反応させる工程、およびインビボでの使用に適した組成物
を獲得するために結合体を再び精製する工程を必要とする。このような方法は、
非常に侵襲性で、長ったらしく、そして、高価である。従って、インビトロでの
結合の工程を必要とせずインビボに導入され得るより優れた生物学的利用性を有
する抗癌薬物を開発する必要性が存在する。The conjugates disclosed in these publications are made using methods performed ex vivo. Such methods include obtaining human serum, purifying a desired carrier (eg, albumin or transferrin) from the serum, specific reactive groups (eg, “ligand” disclosed in King's application). And reacting the purified protein, and repurifying the conjugate to obtain a composition suitable for in vivo use. Such a method
Very invasive, lengthy, and expensive. Therefore, there is a need to develop anti-cancer drugs with better bioavailability that can be introduced in vivo without the need for a step of conjugation in vitro.
【0007】
(発明の要旨)
本発明は、抗腫瘍性薬剤の新規の化学的に反応性の誘導体、このような誘導体
を合成する方法、およびインビボでこのような誘導体を使用する方法に関する。
本発明の抗腫瘍性薬剤誘導体は、可動性血液タンパク質上で、利用可能な官能基
とインビボで反応し、共有結合を形成し得、その結果、生じた共有結合結合体は
、これらの抗癌活性を実質的に保持する。SUMMARY OF THE INVENTION The present invention relates to novel chemically reactive derivatives of antitumor agents, methods of synthesizing such derivatives, and methods of using such derivatives in vivo.
The anti-neoplastic drug derivatives of the present invention can react in vivo with available functional groups on mobile blood proteins to form covalent bonds, so that the resulting covalent conjugates are bound to these anti-cancer compounds. Substantially retain activity.
【0008】
本発明の1つの局面は、医薬の製造における組成物(抗腫瘍性薬剤およびその
アナログの誘導体を含む組成物)の使用に関する。この誘導体は、血液成分上の
アミノ基、ヒドロキシル基、またはチオール基と反応する反応基を含み、安定な
共有結合を形成する。反応基は、癌処置における使用のために、N−ヒドロキシ
ルスクシンイミド、N−ヒドロキシ−スルホスクシンイミドおよびマレイミド基
から選択される。本発明で使用される抗腫瘍性薬剤の特定の例としては、タキソ
ール、メトトレキサート、ヒドロキシウレア、タモキシフェン、マイトマイシン
C、およびそれらのアナログが挙げられる。誘導体と反応性である血液成分の特
定の例としては、血液タンパク質、さらに特定には、血液タンパク質のチオール
基、そして、なおさらに特定には、アルブミンが挙げられる。One aspect of the present invention relates to the use of the composition (the composition comprising a derivative of an antitumor drug and its analogs) in the manufacture of a medicament. This derivative contains reactive groups that react with amino, hydroxyl, or thiol groups on blood components to form stable covalent bonds. The reactive group is selected from N-hydroxyl succinimide, N-hydroxy-sulfosuccinimide and maleimide groups for use in treating cancer. Specific examples of anti-neoplastic agents used in the present invention include taxol, methotrexate, hydroxyurea, tamoxifen, mitomycin C, and analogs thereof. Particular examples of blood components that are reactive with the derivative include blood proteins, more specifically blood protein thiol groups, and even more particularly albumin.
【0009】
本発明の別の局面は、インビボで抗腫瘍性薬剤の半減期を延長するための方法
に関する。これらの方法は、以下の工程を包含する:反応基を、ファルマコフォ
ア(pharmacophore)領域から十分に離れた部位に接着することに
よって、抗腫瘍性薬剤を改変する工程であって、その結果、抗腫瘍性薬剤誘導体
が、実質的にその治療活性を保持し、そして、血液成分上の官能基と共有結合を
形成し得る、工程;ならびに、上記反応基と血液成分上の官能基との間で共有結
合を形成し、抗腫瘍性薬剤誘導体−血液成分結合体を形成する工程であって、そ
れによって、抗腫瘍性薬剤の半減期を延長する、工程。具体的には、本発明は、
共有結合の形成の前に、インビボで抗腫瘍性薬剤誘導体の投与の工程が発生し、
その結果、抗腫瘍性薬剤誘導体−血液成分結合体が、インビボで形成される方法
を含む。Another aspect of the invention relates to a method for extending the half-life of an antitumor agent in vivo. These methods include the following steps: modifying the anti-neoplastic agent by attaching the reactive group to a site well away from the pharmacophore region, such that: An anti-tumor drug derivative substantially retains its therapeutic activity and is capable of forming a covalent bond with a functional group on the blood component; and between the reactive group and the functional group on the blood component. Forming a covalent bond with the anti-neoplastic agent derivative-blood component conjugate with the step of increasing the half-life of the anti-neoplastic agent. Specifically, the present invention is
The step of administration of the antineoplastic drug derivative occurs in vivo prior to formation of the covalent bond,
As a result, methods of forming anti-tumor drug derivative-blood component conjugates in vivo are included.
【0010】
本発明のなお別の局面は、抗腫瘍性薬剤誘導体およびこのような誘導体を作製
する方法を含む。この抗腫瘍性薬剤誘導体は、抗腫瘍性薬剤、および血液成分上
の官能基と反応可能である反応基(例えば、マレイミドまたはN−ヒドロキシス
クシンイミド(NHS))と共に連結基を含む。特異的な抗腫瘍性薬剤誘導体と
しては、ドキソルビシン、タキソール、メトトレキサート、ヒドロキシウレア、
タモキシフェン、マイトマイシンC、白金錯体、ビンカアルカロイド、およびそ
れらのアナログの誘導体が挙げられる。Yet another aspect of the invention includes antineoplastic drug derivatives and methods of making such derivatives. The anti-tumor drug derivative comprises a linking group with the anti-tumor drug and a reactive group capable of reacting with a functional group on the blood component (eg, maleimide or N-hydroxysuccinimide (NHS)). Specific antitumor drug derivatives include doxorubicin, taxol, methotrexate, hydroxyurea,
Included are derivatives of tamoxifen, mitomycin C, platinum complexes, vinca alkaloids, and their analogs.
【0011】
インビボで血液成分と反応させることおよびそこに結合させることによって、
本発明の抗腫瘍性薬剤誘導体は、血液を介して、適切な部位またはレセプターへ
と送達され得る。非結合体化抗腫瘍性薬剤と比較して、結合体化分子は、血流に
おける半減期を延長した。従って、結合体化抗腫瘍性薬剤は、非結合体化親薬物
と比較して、延長した期間抗癌活性を維持可能であり、そして、このような活性
に、減少した副作用を提供する。By reacting with and binding to a blood component in vivo,
The anti-tumor drug derivative of the present invention can be delivered to an appropriate site or receptor via blood. The conjugated molecule extended the half-life in the bloodstream as compared to the unconjugated anti-tumor drug. Thus, the conjugated anti-neoplastic agent can maintain anti-cancer activity for an extended period of time compared to the unconjugated parent drug, and provide such activity with reduced side effects.
【0012】
本発明は、抗腫瘍性薬剤誘導体および可動性血液成分の結合体をさらに含む。
これは、反応基としてのマレイミド(マレイミド−抗腫瘍性薬剤)で誘導した抗
腫瘍性薬剤を使用する間質細胞および血液骨細胞の血清アルブミン、IgG、タ
ンパク質などの可動性内因性タンパク質の特定の標識、ならびに、反応基として
NHS(NHS抗腫瘍性薬剤)および反応基としてのスルホ−NHS(スルホN
HS−抗腫瘍性薬剤)を使用して誘導した抗腫瘍性薬剤を使用する可動性血液タ
ンパク質の非特異的標識を含む。本発明は、哺乳動物宿主に、新規の抗腫瘍性薬
剤誘導体またはそれらの結合体を投与する工程を包含する、インビボで抗癌活性
を提供するための方法をさらに含む。The present invention further comprises conjugates of antineoplastic drug derivatives and mobile blood components.
This is specific for mobile endogenous proteins such as serum albumin, IgG, proteins of stromal cells and blood bone cells using maleimide (maleimide-antitumor drug) -derived antitumor drug as a reactive group. Label, and NHS as reactive group (NHS antitumor drug) and sulfo-NHS as reactive group (sulfoN
HS-Anti-tumor drug) non-specific labeling of mobile blood proteins with an anti-tumor drug induced using. The invention further includes a method for providing in vivo anti-cancer activity comprising administering to a mammalian host a novel anti-tumor drug derivative or conjugate thereof.
【0013】
本発明はまた、例えば、宿主の血流から所望でない過度の結合体を除去するた
めに、このような結合体を局在化および結合する抗体の使用に関する。本発明は
また、血液における抗腫瘍性薬剤結合体のレベルを検出するための抗体の使用に
関する。The present invention also relates to the use of antibodies to localize and bind such conjugates, eg, to remove unwanted excess conjugates from the bloodstream of the host. The invention also relates to the use of the antibody to detect the level of anti-neoplastic drug conjugate in blood.
【0014】
一般的に、本発明に従う抗腫瘍性薬剤誘導体は、以下の式:
A−X−R−D
の化合物であって、ここで、
Aは、抗腫瘍性薬剤であり、
Xは、選択的官能基であり、例えば、エーテル、チオエーテル、二級または三
級アミン、二級または三級アミド、エステル、チオエステル、イミン、ヒドラゾ
ン、セミカルバゾン、アセタール、ヘミアセタール、ケタール、ヘミケタール、
アミナール、ヘミアミナール、スルホン酸、硫酸、スルホンアミド、スルホンア
ミデート、リン酸、ホスホルアミド、ホスホネート、またはホスホルアミデート
であり(これらに限定されない)、
Rは、任意の連結基であり、例えば、非存在(nullity)(ここで、X
は、Dに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1〜10、任意のフルオロアルキ
ルC1〜10またはフルオロ置換アルキル鎖C1〜10の任意の組み合わせ、−(Z−
CH2CH2−Z)n−、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−などのアルキルまたはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたはチ
オエーテルであって(これらに限定されない)、ここで、n=1〜4であって、
そして、Zは、OまたはS、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−のような構造
で二置換されたオルト、メタもしくはパラベンゼンのいずれかであって、ここで
、Yは、CH2、O、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]、フラン、
チオフェン、ピラン、オキサゾール、またはチアゾールで二置換された複素環の
任意の組み合わせであり、そして、
Dは、フェノールエステル、チオールエステル、アルキルエステル、リン酸エ
ステルなどを含む、エステルまたは混合無水物またはイミデートのいずれかとし
ての、例えば、カルボキシル基、ホスホリル基、またはアシル基などの反応基で
あり、ならびに、例えば、N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)、N−ヒド
ロキシ−スルホスクシンイミド(スルホ−NHS)などのスクシミジル基および
マレイミド基、マレイミド酸(マレイミドプロピオン酸(MPA)を含むがこれ
に限定されない)およびマレインイミドエステルなどのマレイミド基である。In general, an antitumor drug derivative according to the present invention is a compound of the formula: A-X-R-D wherein A is an anti-tumor drug and X is Selective functional groups, such as ethers, thioethers, secondary or tertiary amines, secondary or tertiary amides, esters, thioesters, imines, hydrazones, semicarbazones, acetals, hemiacetals, ketals, hemiketals,
Aminal, hemiaminal, sulfonic acid, sulfuric acid, sulfonamide, sulfonamidate, phosphoric acid, phosphoramide, phosphonate, or phosphoramidate, R is any linking group, eg, non- Presence (where X
Is directly bonded to D), any alkyl chain C 1-10 , any fluoroalkyl C 1-10 or any combination of fluoro-substituted alkyl chains C 1-10 ,-(Z-
CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - be any ether or thioether containing alkyl or fluoroalkyl chain, such as but not limited to, where a n = 1 to 4,
Then, Z is, O, or S, -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- structure disubstituted ortho like, be either meta or para benzene, Here, Y is CH 2 , O, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl], furan,
An ester or mixed anhydride or imidate, which is any combination of heterocycles disubstituted with thiophene, pyran, oxazole, or thiazole, and D includes phenolic ester, thiol ester, alkyl ester, phosphate ester, and the like. A reactive group such as a carboxyl group, a phosphoryl group, or an acyl group, and succimidyl such as N-hydroxysuccinimide (NHS) or N-hydroxy-sulfosuccinimide (sulfo-NHS) Groups and maleimide groups, maleimide groups such as, but not limited to, maleimidic acid (including but not limited to maleimidopropionic acid (MPA)) and maleinimide esters.
【0015】
連結基としてのRの使用は、任意であることに注意しなければならない。いく
つかの場合では、抗腫瘍性薬剤の治療活性をより保持するために、連結基を使用
することが、有利であり得るかまたは必要でさえあり得る。しかし、他の場合で
は、反応基(D)の抗腫瘍性薬剤の感受性官能基(X)への直接の付着は、抗腫
瘍性薬剤の治療活性を十分に保存し得るので、連結基の使用は必要でなくてもよ
い。It has to be noted that the use of R as a linking group is optional. In some cases, it may be advantageous or even necessary to use a linking group to better retain the therapeutic activity of the anti-neoplastic agent. However, in other cases, the direct attachment of the reactive group (D) to the sensitive functional group (X) of the anti-neoplastic agent may well preserve the therapeutic activity of the anti-neoplastic agent, so the use of a linking group May not be necessary.
【0016】 本発明の特定の抗腫瘍性薬剤誘導体は、以下の式:[0016] Certain anti-tumor drug derivatives of the present invention have the formula:
【0017】[0017]
【化3】 の化合物のようなドキソルビシン誘導体、以下の式:[Chemical 3] A doxorubicin derivative, such as a compound of the formula:
【0018】[0018]
【化4】 の化合物のようなタキソール誘導体、以下の式:[Chemical 4] A taxol derivative, such as a compound of the formula:
【0019】[0019]
【化5】 の化合物のようなメトトレキサート誘導体、以下の式:[Chemical 5] A methotrexate derivative, such as a compound of the formula:
【0020】[0020]
【化6】 の化合物のようなヒドロキシウレア誘導体、以下の式:[Chemical 6] A hydroxyurea derivative, such as a compound of the formula:
【0021】[0021]
【化7】 の化合物のようなタモキシフェン誘導体、以下の式:[Chemical 7] A tamoxifen derivative, such as a compound of the formula:
【0022】[0022]
【化8】 の化合物のようなマイトマイシンC誘導体、以下の式:[Chemical 8] A mitomycin C derivative, such as a compound of the formula:
【0023】[0023]
【化9】 の化合物のようなビンクリスチン誘導体、を含む。[Chemical 9] Vincristine derivatives, such as the compounds of.
【0024】
(発明の詳細な説明)
本発明の目的のために、そして、発明の完全な理解を保証するために、以下の
定義を提供する:
抗腫瘍性薬剤−抗腫瘍性薬剤は、例えば、フルオロピリミジン、ピリミジンヌ
クレオシド、プリン、白金アナログ、アントラサイクリン/アントラセネジオン
、ポドフィロトキシン、カンプトセシン、ホルモンおよびホルモンアナログ、酵
素、タンパク質および抗体、ビンカアルカロイド、タキサンまたはコルヒチン、
抗ホルモン剤、葉酸代謝拮抗薬、抗微小管剤、アルキル化剤(古典的なおよび非
古典的な)、抗代謝剤、抗生物質、トポイソメラーゼインヒビター、抗ウイルス
剤、ならびに雑多な細胞障害性薬剤(例えば、ヒドロキシウレア、ミトタン、融
合毒素、PZA、ブリオスタチン(bryostatin)、レチノイド、酪酸
および誘導体、ペントサン、フマギリンならびにその他)のような抗癌剤である
。全ての抗腫瘍性薬物の目的は、癌細胞の増殖および拡大(緩解)を除去(治療
)するかまたは遅延させることである。上記に列挙された抗腫瘍性薬剤の大部分
は、癌細胞に対して影響を与えて直接殺す、主に細胞障害性活性を有することに
よってこの目的を追求する。他の抗腫瘍性薬物は、癌細胞死に影響を与える体の
天然の免疫性を刺激する。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION For the purposes of the present invention, and in order to ensure a full understanding of the invention, the following definitions are provided: Anti-tumor agent—Antineoplastic agent, eg , Fluoropyrimidines, pyrimidine nucleosides, purines, platinum analogs, anthracyclines / anthracenesions, podophyllotoxins, camptothecins, hormones and hormone analogs, enzymes, proteins and antibodies, vinca alkaloids, taxanes or colchicines,
Antihormonal agents, antifolates, antimicrotubule agents, alkylating agents (classical and nonclassical), antimetabolites, antibiotics, topoisomerase inhibitors, antiviral agents, and miscellaneous cytotoxic agents ( For example, anti-cancer agents such as hydroxyurea, mitotan, fusion toxins, PZA, bryostatin, retinoids, butyric acid and derivatives, pentosan, fumagillin and others). The purpose of all anti-neoplastic drugs is to eliminate (treat) or delay the growth and spread (remission) of cancer cells. Most of the anti-neoplastic agents listed above pursue this end by having predominantly cytotoxic activity, which affects and directly kills cancer cells. Other anti-neoplastic drugs stimulate the body's natural immunity, which affects cancer cell death.
【0025】
本発明で使用される抗腫瘍性薬剤は、不斉炭素原子または1つ以上の不斉中心
を有し得、従って、光学異性体およびジアステレオマーを生じ得る。立体化学に
関せずに示される場合、本発明で使用される抗腫瘍性薬剤は、このような光学異
性体およびジアステレオマー;ならびに、ラセミおよび溶解した、鏡像異性体的
に純粋なRおよびS立体異性体;ならびにRおよびS立体異性体の他の混合物、
そして、その薬学的に受容可能な塩を含む。それぞれの抗腫瘍性薬剤は、体内に
、標的部位(例えば、レセプター)と相互作用するファルマコフォア領域を含む
。The anti-tumor agents used in the present invention may have asymmetric carbon atoms or one or more asymmetric centers and thus give rise to optical isomers and diastereomers. When indicated without regard to stereochemistry, the anti-tumor agents used in the present invention include such optical isomers and diastereomers; and racemic and dissolved enantiomerically pure R and S stereoisomer; and other mixtures of R and S stereoisomers,
And the pharmaceutically acceptable salt is included. Each anti-neoplastic agent contains a pharmacophore region within the body that interacts with a target site (eg, a receptor).
【0026】
反応基:反応基は、共有結合を形成し得る官能基である。このような反応基は
、連結基(以下に定義されるように)および加水分解安定の結合を介してか、ま
たは必要に応じて連結基なしで、目的の抗腫瘍性薬剤へ連結されるかまたは結合
される。反応基は、水性環境において一般的に安定であり、そして、エステルで
あるかまたは混合無水物またはイミデートのいずれかとしての、通常カルボキシ
ル基、リン酸基、または便利なアシル基であって、それによって、血液成分上の
標的部位のアミノ基、ヒドロキシ基またはチオール基などの官能基と共有結合を
形成し得る。大部分については、このエステルは、フェノール化合物を含むかま
たはチオールエステル、アルキルエステル、リン酸エステルなどであり得る。反
応基としては、例えば、N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)、N−ヒドロ
キシ−スルホスクシンイミド(スルホ−NHS)などのスクシミジル基およびマ
レイミド基、マレイミド酸(マレイミドプロピオン酸(MPA)を含むがこれに
限定されない)およびマレイミドエステルなどのマレイミド基を含む。本発明の
さらに好ましい実施形態では、血液成分上の官能基は、チオール基であり、そし
て、反応基は、マレイミド基である。Reactive group: A reactive group is a functional group capable of forming a covalent bond. Such reactive groups are linked to the antitumor agent of interest through a linking group (as defined below) and a hydrolytically stable bond, or optionally without a linking group. Or be combined. The reactive group is generally stable in an aqueous environment and is usually a carboxyl group, a phosphate group, or a convenient acyl group, either as an ester or as a mixed anhydride or imidate, Can form covalent bonds with functional groups such as amino, hydroxy or thiol groups at target sites on blood components. For the most part, the ester comprises a phenolic compound or may be a thiol ester, an alkyl ester, a phosphoric acid ester and the like. Examples of the reactive group include, but are not limited to, a succimidyl group such as N-hydroxysuccinimide (NHS) and N-hydroxy-sulfosuccinimide (sulfo-NHS), a maleimide group, and a maleimidic acid (maleimidopropionic acid (MPA)). ) And maleimide groups such as maleimide esters. In a further preferred embodiment of the invention, the functional group on the blood component is a thiol group and the reactive group is a maleimide group.
【0027】
感受性官能基−感受性官能基は、治療薬剤の潜在的な反応部位を示す原子の基
である。存在する場合、感受性の官能基は、連結基−反応基改変についての付着
地点として選択され得る。感受性官能基としては、カルボキシル、アミノ、チオ
ール、ヒドロキシル、エーテル、チオエーテル、二級または三級アミン、二級ま
たは三級アミド、エステル、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾ
ン、アセタール、ヘミアセタール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミ
アミナール、スルホン酸、硫酸、スルホンアミド、スルホンアミデート、リン酸
、ホスホルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデートが挙げられるが、
これらに限定されない。Sensitive Functional Group-A sensitive functional group is a group of atoms that represents a potential reactive site for a therapeutic agent. When present, sensitive functional groups can be selected as attachment points for linking group-reactive group modifications. Sensitive functional groups include carboxyl, amino, thiol, hydroxyl, ether, thioether, secondary or tertiary amine, secondary or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal. , Aminal, hemiaminal, sulfonic acid, sulfuric acid, sulfonamide, sulfonamidate, phosphoric acid, phosphoramide, phosphonate, or phosphonamidate,
It is not limited to these.
【0028】
官能基:官能基は、可動性タンパク質および固定タンパク質を含む、血液成分
上の基である。抗腫瘍性薬剤上の反応基は、これと反応し、共有結合を形成する
。官能基は、通常、結合してエステル反応基となるヒドロキシル基、結合してマ
レイミド、イミデートおよびチオエステル基となるチオール基、結合して活性化
カルボキシル基、リン酸基または任意の他のアシル基となるアミノ基を含む。Functional group: A functional group is a group on blood components, including mobile and fixed proteins. Reactive groups on the anti-tumor drug react with it to form covalent bonds. The functional group is usually a hydroxyl group which is bound to an ester reactive group, a thiol group which is bound to a maleimide, an imidate and a thioester group, an activated carboxyl group, a phosphate group or any other acyl group. Including the amino group.
【0029】
血液成分:血液成分は、固定または可動性のいずれかであり得る。固定化血液
成分は、非可動性血液成分であり、そして、組織、膜レセプター、間質性タンパ
ク質、フィブリンタンパク質、コラーゲン、血小板、内皮細胞、上皮細胞および
会合膜および膜レセプター、体細胞、骨格細胞および平滑筋細胞、ニューロン成
分、骨細胞および破骨細胞、ならびに、特に循環系およびリンパ系に関連した全
ての体組織を含む。可動性血液成分は、延長した期間(一般的に5分を超えない
)(最も頻繁には1分)、固定した位置を有さない血液成分である。これらの血
液成分は、膜関連ではなく、そして、血液中に延長した期間存在し、そして、少
なくとも0.1μg/mlの最小濃度で存在する。可動性血液成分としては、血
清アルブミン、トランスフェリン、フェリチンおよびIgMおよびIgGなどの
免疫グロブリンが挙げられる。可動性血液成分の半減期は、少なくとも約12時
間である。Blood component: The blood component can be either fixed or mobile. Immobilized blood components are immobile blood components, and are tissues, membrane receptors, interstitial proteins, fibrin proteins, collagen, platelets, endothelial cells, epithelial cells and associated membrane and membrane receptors, somatic cells, skeletal cells. And smooth muscle cells, neuronal components, osteocytes and osteoclasts, and all body tissues particularly associated with the circulatory and lymphatic systems. A mobile blood component is a blood component that does not have a fixed position for an extended period (generally no more than 5 minutes) (most often 1 minute). These blood components are not membrane associated and are present in blood for an extended period of time and are present at a minimum concentration of at least 0.1 μg / ml. Mobile blood components include serum albumin, transferrin, ferritin and immunoglobulins such as IgM and IgG. The mobile blood component has a half-life of at least about 12 hours.
【0030】
保護基:保護基は、抗腫瘍性薬剤が、自分自身と反応するのを防ぐために利用
される化学部分である。具体的には、本発明で使用される抗腫瘍性薬剤のヒドロ
キサミン部分は、t−ブチル、アリール、ベンジル、テトラヒドロピラニル、t
−ブチルオキシカルボニル、t−ブチルジメチルシリルおよびトリメチルシリル
を含むがそれらに限定されない保護基を使用して保護される。Protecting group: A protecting group is a chemical moiety utilized to prevent an anti-tumor drug from reacting with itself. Specifically, the hydroxamine moieties of the anti-neoplastic agents used in the present invention include t-butyl, aryl, benzyl, tetrahydropyranyl, t
Protected using protecting groups including but not limited to -butyloxycarbonyl, t-butyldimethylsilyl and trimethylsilyl.
【0031】
連結基:連結基は、反応基を抗腫瘍性薬剤に連結または結合する化学的部分で
ある。連結基は、1以上のアルキル基、フルオロアルキル基、アルコキシ基、ア
ルケニル基、アルキル基で置換されたアルキニル基またはアミノ基、シクロアル
キル基、多環基、アリール基、ポリアリール基、置換アリール基、複素環基、お
よび置換複素環基を含み得る。連結基はまた、ポリエトキシアミノ酸(例えば、
AEA((2−アミノ)エトキシ酢酸)または好ましい連結基AEEA([2−
(2−アミノ)エトキシ])エトキシ酢酸)を含み得る。Linking group: A linking group is a chemical moiety that links or attaches a reactive group to an antitumor agent. The linking group is one or more alkyl groups, fluoroalkyl groups, alkoxy groups, alkenyl groups, alkynyl groups or amino groups substituted with alkyl groups, cycloalkyl groups, polycyclic groups, aryl groups, polyaryl groups, substituted aryl groups, It may include a heterocyclic group and a substituted heterocyclic group. The linking group can also be a polyethoxy amino acid (eg,
AEA ((2-amino) ethoxyacetic acid) or a preferred linking group AEEA ([2-
(2-amino) ethoxy]) ethoxyacetic acid).
【0032】
抗腫瘍性薬剤誘導体−抗腫瘍性薬剤誘導体は、反応基を付着することによって
、改変された抗腫瘍性薬剤である。この反応基は、連結基を介してかまたは必要
に応じて連結基を使用せずに、抗腫瘍性薬剤に付着され得る。通常、抗腫瘍性薬
剤誘導体は、血液成分上の機能基と反応し得る反応基と共に、抗腫瘍性薬剤分子
および連結基を含む。抗腫瘍性薬剤誘導体はインビボで投与され得、その結果、
血液成分との結合がインビボで発生するか、または、それらは、インビトロで最
初に血液成分に結合され得、そして、得られた結合体化抗腫瘍性薬剤(以下に定
義されるように)をインビボで投与した。Anti-tumor Drug Derivatives-Antineoplastic drug derivatives are anti-tumor drugs modified by attaching reactive groups. The reactive group can be attached to the anti-neoplastic agent via a linking group or optionally without a linking group. Generally, the anti-tumor drug derivative comprises an anti-tumor drug molecule and a linking group with a reactive group capable of reacting with a functional group on the blood component. The antineoplastic drug derivative may be administered in vivo, so that
Binding to blood components occurs in vivo, or they may be first bound to blood components in vitro, and the resulting conjugated antitumor agent (as defined below). It was administered in vivo.
【0033】
結合体化抗腫瘍性薬剤−結合体化抗腫瘍性薬剤は、抗腫瘍性薬剤誘導体の反応
基(連結基を使用してかまたは使用しないでのいずれかで抗腫瘍性薬剤に連結し
た)と血液成分の官能基との間で形成された共有結合を介して血液成分に結合体
化された抗腫瘍性薬剤誘導体である。本願で使用される場合、用語「結合体化抗
腫瘍性薬剤」は、特に結合体化抗腫瘍性薬剤(例えば、「結合体化ドキソルビシ
ン」または「結合体化タキソール」)について特異的に作製された。血液成分と
結合体化することによって、抗腫瘍性薬剤誘導体は、血液を介して、患者の適切
な部位またはレセプターへと送達され得る。Conjugated anti-tumor drug—The conjugated anti-tumor drug is linked to the anti-tumor drug either with or without the reactive group of the anti-tumor drug derivative (with or without a linking group). And a functional group of a blood component, the derivative of an antitumor drug conjugated to the blood component via a covalent bond formed. As used herein, the term "conjugated anti-tumor agent" is specifically created for a conjugated anti-tumor agent (eg, "conjugated doxorubicin" or "conjugated taxol"). It was By conjugation with blood components, the anti-neoplastic drug derivative can be delivered via the blood to the appropriate site or receptor in the patient.
【0034】
これらの定義を考慮すると、本発明は、共有結合を介して、血液成分上の利用
可能な反応性官能基と反応し得る抗腫瘍性薬剤の誘導体である組成物に関する。
本発明はまた、このような誘導体、このような血液成分との組み合わせ、誘導体
を作製するこのような方法、およびこれらの使用についての方法に関する。これ
らの方法は、患者に対する抗腫瘍性薬剤それ自体の投与と比較して、問題の抗腫
瘍性薬剤の効果的な治療寿命を延長する工程を含む。In view of these definitions, the present invention relates to compositions that are derivatives of anti-neoplastic agents capable of reacting via covalent bonds with available reactive functional groups on blood components.
The invention also relates to such derivatives, combinations with such blood components, such methods of making derivatives, and methods for their use. These methods include the step of prolonging the effective therapeutic life of the anti-neoplastic agent in question compared to the administration of the anti-neoplastic agent itself to the patient.
【0035】
血液成分上の官能基と共有結合を形成するために、当業者は、ヒドロキシ部分
が必要なレベルにおいて生理学的に受容可能である場合、反応基として、広範な
種々の活性カルボシキル基、特にエステルを使用し得る。多数の異なったヒドロ
キシル基が使用され得るが、最も便利なものは、N−ヒドロキシスクシンイミド
(NHS)、N−ヒドロキシ−スルホスクシンイミド(スルホ−NHS)、マレ
イミド、マレイミド酸(マレイミドプロピオン酸(MPA)を含むがこれに限定
されない)、ならびに、マレイミドエステルである。本発明の好ましい実施形態
では、血液成分上の官能基はチオール基あり、反応基はマレイミドである。To form a covalent bond with a functional group on a blood component, one of skill in the art will appreciate that a wide variety of active carboxyl groups may be used as reactive groups when the hydroxy moieties are physiologically acceptable at the required levels. In particular esters may be used. A number of different hydroxyl groups can be used, but the most convenient are N-hydroxysuccinimide (NHS), N-hydroxy-sulfosuccinimide (sulfo-NHS), maleimide, maleimidic acid (maleimidopropionic acid (MPA)). (Including but not limited to), as well as maleimide esters. In a preferred embodiment of the invention, the functional group on the blood component is a thiol group and the reactive group is maleimide.
【0036】
本発明の目的は、タンパク質キャリア上に、インヒビターの選択的結合体化を
介して、しかしこれらの顕著な抗癌性性質を改変することなく、これらのインヒ
ビターに、改善したバイオアベイラビリティ、延長した半減期およびより優れた
分布を付与するために、抗腫瘍性薬剤を誘導体化することである。本発明のため
の好ましいキャリアは、アルブミン(これは、次いで、マレイミド部分で誘導体
化した抗腫瘍性薬剤によって、その遊離チオールを介して結合体化された)であ
るがこれに限定されない。The object of the present invention is to improve the bioavailability of these inhibitors on protein carriers via selective conjugation of the inhibitors, but without modifying their outstanding anti-cancer properties. The derivatization of anti-tumor agents to confer an extended half-life and better distribution. A preferred carrier for the present invention is, but not limited to, albumin, which is then conjugated via an anti-tumor agent derivatized with a maleimide moiety via its free thiol.
【0037】
(1.本発明で使用される抗腫瘍性薬剤)
現在、承認された抗腫瘍性薬物の約20の認識されたクラスが存在する。この
分類は、特定の薬物によって共有される共通の構造かまたは薬物による作用の共
通のメカニズムに基づいて一般化される。いくつかの薬物は、2つ以上のクラス
に分類されるが、一般的に、受け入れられた分類は、以下のようである(分類は
、特定の順序で列挙されるのではない):フルオロピリミジン、ピリミジンヌク
レオシド、プリン、白金アナログ、アントラサイクリン/アントラセンジオン、
ポドフィロトキシン、カンプトセシン、ホルモンおよびホルモンアナログ、酵素
、タンパク質および抗体、ビンカアルカロイド、タキサン、抗ホルモン剤、葉酸
代謝拮抗薬、抗微小管剤、アルキル化剤(古典的なおよび非古典的な)、抗代謝
剤、抗生物質、トポイソメラーゼインヒビター、抗ウイルス剤、ならびに以下に
より詳細に記載されるような雑多な細胞障害性薬剤。1. Antitumor Agents Used in the Present Invention Currently, there are about 20 recognized classes of approved antitumor drugs. This classification is generalized based on the common structure shared by a particular drug or the common mechanism of action by a drug. Some drugs fall into more than one class, but generally the accepted classifications are as follows (classifications are not listed in any particular order): Fluoropyrimidines , Pyrimidine nucleosides, purines, platinum analogs, anthracyclines / anthracenediones,
Podophyllotoxin, camptothecin, hormones and hormone analogs, enzymes, proteins and antibodies, vinca alkaloids, taxanes, antihormonal agents, antifolates, antimicrotubule agents, alkylating agents (classical and nonclassical) , Antimetabolites, antibiotics, topoisomerase inhibitors, antivirals, and miscellaneous cytotoxic agents as described in more detail below.
【0038】
分類によって組織化された一般的に公知の商業的に承認された(または積極的
に開発中の)抗腫瘍性薬剤のいくつかの部分的な列挙は、以下のようである:
フルオロピリミジン(例えば、5−FU、フルオロデオキシウリジン、フトラ
フール、5’−デオキシフルオロウリジン、UFT、S−1およびカペシタビン
)などのピリミジンアナログ;
デオキシシチジン、シトシン、アラビノシド、5−アザシトシン、9−β−ア
ラビノフラノシル(arabinofuranosyl)、ゲムシタビン(ge
mcitabine)、および5−アザシトシン−アラビノシンなどのピリミジ
ンヌクレオシド;
6−メルカプトプリン、チオグアニン、アザチオプリン、アロプリノール、ク
ラドリビン(cladribine)、フルダラビン(fludarabine
)、ペントスタチン、および2−クロロアデノシンなどのプリンおよびプリンア
ナログ;
シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、テトラプラチン、白金−
DACH、オルマプラチン、CI−973、およびJM−216などの白金アナ
ログおよび白金配位錯体;
ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダウルビシン、およびミ
トキサントロンなどのアントラサイクリンまたはアントラセンジオン;
エトポシドおよびテニポシドなどのエピドフィロトシシン;
イリノテカン、トポテカン、9−アミノカンプトセシン、10,11−メチレ
ンジオキシカンプトセシン、9−ニトロカンプトセシン、およびTAS 103
などのカンプトセシン;
ジエチルスチルベストロール、タモキシフェン、トレミフェン、トルムデック
ス(tolmudex)、チミタック(thymitaq)、フルタミド、ビカ
ールタミド(bicalutamide)、フィナステリド、エストラジオール
、トリオキシフェン(trioxifene)、ドロロキシフェン(drolo
xifene)、メドロキシプロゲストロンアセテート、メゲストロールアセテ
ート、アミノグルテチミド、テストラクトンおよびその他などのホルモンおよび
ホルモンアナログ;
アスパラギナーゼ、インターロイキン、インターフェロン、ロイプロリド、ぺ
グアスパルガーゼ(pegaspargase)およびその他などの酵素、タン
パク質および抗体;
ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン(vinorelbine)
、ビンデシンなどのビンカアルカロイド;
パクリタキセルおよびドセタキセル(docetaxel)およびコルヒチン
などのタキサン;
アナストロゾール(anastrozole)などの抗ホルモン剤;
メトトレキサート(アメトプテリン)、アミノプテリン、トリメトレキサート
、トリメトプリム、ピリトレキシム(pyritrexim)、ピリメタミン、
エダトレキサート(edatrexate)およびMDAMなどの葉酸代謝拮抗
薬;
タキサンおよびビンカアルカロイドなどの抗微小管剤;
窒素マスタード(メクロレタミン、クロラムブシル、メルファラン、ウラシル
マスタード)、オキサアザホスホリン(イホスファミド、シクロホスファミド、
ペルホスファミド、トロホスファミド)、アルキルスルホネート(ブスルファン
)、ニトロソウレア(カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン)、チオテ
パ、ダカルパジンおよびその他などのアルキル化剤(伝統的なおよび非伝統的な
);
上記に列挙された、プリン、ピリミジンおよびヌクレオシドなどの抗代謝剤;
アントラサイクリン/アントラセネジオン、ブレオマイシン、ダクチノマイシ
ン、マイトマイシン、プリカマイシン(plicamycin)、ペントスタチ
ン、ストレプトゾシン、ダウノルビジン(ルビマイシン)、およびドキソルビシ
ンなどの抗生物質;
カンプトテシン(Topo I)、エピポドフィロトキシン(epipodo
phyllotoxin)、m−AMSA、およびエリプチシン(Topo I
I)などのトポイソメラーゼインヒビター;
AZT、ザルシタビン(zalcitabine)、ゲムシタビン(gemc
itabine)、ジダノシン、およびその他などの抗ウイルス剤;ならびに
ヒドロキシウレア、ミトタン、融合トキシン、PZA、ブリオスタチン(br
yostatin)、レチノイド、酪酸および誘導体、ペントサン、フマギリン
(fumagillin)、ならびにその他などの雑多な細胞傷害剤。Some partial listings of commonly known commercially approved (or actively developing) anti-neoplastic agents organized by classification are as follows: Fluoro Pyrimidine analogs such as pyrimidines (eg, 5-FU, fluorodeoxyuridine, futrafur, 5′-deoxyfluorouridine, UFT, S-1 and capecitabine); deoxycytidine, cytosine, arabinoside, 5-azacytosine, 9-β-arabi. Arabinofuranosyl, gemcitabine (ge)
and pyrimidine nucleosides such as 5-azacytosine-arabinosine; 6-mercaptopurine, thioguanine, azathioprine, allopurinol, cladribine, fludarabine.
), Pentostatin, and purines and purine analogs such as 2-chloroadenosine; cisplatin, carboplatin, oxaliplatin, tetraplatin, platinum-
Platinum analogs and platinum coordination complexes such as DACH, olmaplatin, CI-973, and JM-216; anthracyclines or anthracenediones such as doxorubicin, daunorubicin, epirubicin, idaurubicin, and mitoxantrone; epidophyllo such as etoposide and teniposide. Tosicin; irinotecan, topotecan, 9-aminocamptothecin, 10,11-methylenedioxycamptothecin, 9-nitrocamptothecin, and TAS 103.
Camptothecins such as; diethylstilbestrol, tamoxifen, toremifene, tolmudex, thymitaq, flutamide, bicarutamide, finasteride, estradiol, trioxyphene, droloxifene.
xifene), medroxyprogestrone acetate, megestrol acetate, aminoglutethimide, test lactone and other hormones and hormone analogs; asparaginase, interleukins, interferons, leuprolide, pegaspargase and others Enzymes, proteins and antibodies of vincristine, vinblastine, vinorelbine
, Vinca alkaloids such as vindesine; taxanes such as paclitaxel and docetaxel and colchicine; antihormonal agents such as anastrozole; methotrexate (amethopterin), aminopterin, trimetrexate, trimethoprim, pyritrex (p), pyritrex (p), pyritrex (p). Pyrimethamine,
Antifolate drugs such as edatrexate and MDAM; anti-microtubule agents such as taxanes and vinca alkaloids; nitrogen mustard (mechlorethamine, chlorambucil, melphalan, uracil mustard), oxaazaphosphorine (ifosfamide, cyclophosphamide,
Alkylating agents (traditional and non-traditional) such as perphosphamide, trophosphamide), alkyl sulfonates (busulfan), nitrosoureas (carmustine, lomustine, streptozocin), thiotepa, dacarpazine and others; the purines listed above. Antibiotics such as, pyrimidine and nucleosides; antibiotics such as anthracycline / anthracenesion, bleomycin, dactinomycin, mitomycin, plicamycin, pentostatin, streptozocin, daunorubidine (rubimicin), and doxorubicin; camptothecin. (Topo I), epipodophyllotoxin (epipodo
phyllotoxin), m-AMSA, and ellipticine (Topo I)
I) such as topoisomerase inhibitors; AZT, zalcitabine, gemcitabine (gemc)
Itabine), didanosine, and other antiviral agents; as well as hydroxyurea, mitotanes, fused toxins, PZA, bryostatin (br
Miscellaneous cytotoxic agents such as yostatin), retinoids, butyric acid and derivatives, pentosan, fumagillin, and others.
【0039】
任意の抗腫瘍性薬物に関する主な困難および原因は、正常な健康細胞に対する
その細胞毒性である。上記列挙された薬物(および現在開発中のこれらの薬物)
は、治療学的に有効な用量を付与された場合でさえ、重篤なおよびしばしば生命
を脅かす有毒な副作用を媒介する可能性を有する。効果的な用量で使用するのに
安全な抗腫瘍性薬剤を開発するために広範な努力がなされてきたが、このような
薬物に関連した有毒な副作用がほとんど常に存在する。有毒な副作用の特定の症
状は、多数の腫瘍学の教科書、刊行物、特許、および他の印刷物のいずれかにお
いて、入手可能である。本発明の化合物はより優れた生物学的利用性を有してお
り、従って、大量に投与される必要はなく、これらは、非誘導体化抗腫瘍性薬剤
よりもより優れた安全プロフィールを有する。A major difficulty and cause for any anti-tumor drug is its cytotoxicity on normal healthy cells. Drugs listed above (and these drugs currently in development)
Has the potential to mediate serious and often life-threatening toxic side effects even when given a therapeutically effective dose. Although extensive efforts have been made to develop antitumor agents that are safe to use in effective doses, the toxic side effects associated with such drugs are almost always present. The specific symptoms of toxic side effects are available in any of the numerous oncology textbooks, publications, patents, and other printed materials. The compounds of the invention have better bioavailability and therefore do not need to be administered in large doses, they have a better safety profile than underivatized antitumor agents.
【0040】
(2.作用の機構)
作用および毒性の詳細な機構(証明された機構および推定されている機構の両
方)が、先行技術全体を通して詳細に示されている。これらの機構の概要を、抗
腫瘍性薬物の代謝、および悪性疾患に対する効果、ならびに健康な組織に対する
効果を概説するために以下に示す。2. Mechanism of Action Detailed mechanisms of action and toxicity (both proven and putative) are detailed throughout the prior art. An overview of these mechanisms is provided below to outline the metabolism of anti-neoplastic drugs, and their effects on malignant disease, as well as on healthy tissues.
【0041】
(A.抗ホルモン)
この名称が示唆するように、抗ホルモン抗腫瘍性薬物は、末端レセプター器官
でホルモン作用をブロックすることによって、細胞傷害性活性を発揮する。いく
つかの異なる型の新生物は、細胞複製を蔓延させるために、ホルモン刺激を必要
とする。抗ホルモン剤は、ホルモン作用をブロックすることによって、新形成細
胞から複製に必要な刺激を奪う。細胞が、そのライフサイクルの終末に到達した
場合、それらの細胞は、***することおよびさらなる悪性細胞を産生することな
く、通常死滅する。A. Antihormones As the name suggests, antihormonal antitumor drugs exert cytotoxic activity by blocking hormonal action at terminal receptor organs. Several different types of neoplasms require hormonal stimulation in order to spread cell replication. By blocking hormonal action, antihormonal agents deprive neoplastic cells of the stimuli needed for replication. When cells reach the end of their life cycle, they usually die without dividing and producing additional malignant cells.
【0042】
抗ホルモン薬物は、***、子宮、前立腺、精巣および他の性特異的器官の悪性
疾患についての処置として種々の程度の成功とともに使用されてきた。抗ホルモ
ン薬物は、一般的に、男性においてはアンドロゲンのレセプターを標的化し、そ
して女性においてはエストロゲンまたはプロゲステロンのレセプターを標的化す
る。近年では、多くの研究がアロマターゼインヒビターの開発に向けられており
、このアロマターゼインヒビターは、エストロゲンへのアンドロゲンの変換をブ
ロックすることによって、間接的にエストロゲンの血中濃度を低下させる。抗ホ
ルモン抗腫瘍性薬剤は、本質的に、ステロイドまたは非ステロイドとして分類さ
れる。Antihormonal drugs have been used with varying degrees of success as treatments for malignancies of the breast, uterus, prostate, testis and other sex-specific organs. Antihormonal drugs generally target the androgen receptor in males and the estrogen or progesterone receptor in females. In recent years, much research has been directed to the development of aromatase inhibitors, which indirectly reduce blood levels of estrogen by blocking the conversion of androgens to estrogens. Antihormonal antitumor agents are essentially classified as steroids or non-steroids.
【0043】
抗ホルモン抗腫瘍性薬剤の毒性は、一般的に、軽度〜中程度である。この薬剤
は通常、天然の生理的因子の類似体に近いので、これらはその作用機構において
比較的特異的であり、そして、DNA合成を阻害せず、このことにより、すべて
の抗腫瘍性薬剤の大半で見られる重篤な副作用を最小化する。The toxicity of anti-hormonal anti-neoplastic agents is generally mild to moderate. Because they are usually close to analogs of natural physiological factors, they are relatively specific in their mechanism of action and do not inhibit DNA synthesis, which makes all anti-neoplastic agents Minimize the serious side effects found in most.
【0044】
抗ホルモン療法における毒性の発現としては、ホルモン欠損に通常関係するそ
の効果(例えば、のぼせ、体重増加(および、体重減少)、皮膚発疹、挫瘡など
)が挙げられる。悪心および嘔吐が時折生じ得るが、GI窮迫は通常、軽度〜中
程度であり、そして通常、用量の低下を必要としない。抗ホルモン療法は通常、
ホルモンに対して陽性応答を示す患者に制限される。The manifestation of toxicity in antihormonal therapy includes its effects normally associated with hormone deficiency, such as hot flashes, weight gain (and weight loss), skin rashes, acne and the like. Although nausea and vomiting can occasionally occur, GI distress is usually mild to moderate and usually does not require dose reduction. Antihormonal therapy is usually
Limited to patients with a positive response to hormones.
【0045】
(B.葉酸拮抗剤)
葉酸拮抗剤は、ジヒドロ葉酸還元酵素(DHFR)(細胞複製において重要な
酵素)の作用を阻害することによって、細胞傷害性活性を発揮する。DHFRは
、ジヒドロ葉酸を、その活性な完全に還元されたテトラヒドロ形態へと還元する
ことが周知である。テトラヒドロ葉酸は、プリン(これは、DNAへの重要な前
駆体である)のデノボ合成における補酵素として作用する。テトラヒドロ葉酸プ
ールの枯渇はまた、チミジル酸の生合成を阻害し、これは、デオキシチミジンホ
スフェート(dTMP)(DNAヌクレオチド前駆体)へのデオキシウリジンホ
スフェート(dUMP)の変換をブロックする。(B. Folate Antagonist) A folate antagonist exerts a cytotoxic activity by inhibiting the action of dihydrofolate reductase (DHFR) (an enzyme important in cell replication). DHFR is well known to reduce dihydrofolate to its active, fully reduced tetrahydro form. Tetrahydrofolate acts as a coenzyme in the de novo synthesis of purines, which are important precursors to DNA. Depletion of the tetrahydrofolate pool also inhibits thymidylate biosynthesis, which blocks the conversion of deoxyuridine phosphate (dUMP) to deoxythymidine phosphate (dTMP) (DNA nucleotide precursor).
【0046】
多くの葉酸拮抗薬物が、米国における使用を認可されているが、唯一メトトレ
キサートのみが、市販されている認可された抗腫瘍性薬剤である。他の認可され
た葉酸拮抗剤は、ヒトDHFRよりもはるかに優れた強度および頻度で細菌DH
FRに結合するその性向に起因して、主に抗感染薬物として使用されている。メ
トトレキサート自体はまた、慢性関節リウマチ、乾癬、および関連した炎症型疾
患の処置において、ならびに***、子宮、精巣、卵巣の癌に対する処置、ならび
に種々の形態の白血病(例えば、急性リンパ性白血病)に対する処置において使
用されている。1つの薬剤メトトレキサートは、絨毛癌(稀な型の癌)に対して
治効がある。Although many antifolate drugs are licensed for use in the United States, only methotrexate is the only licensed antitumor drug on the market. Other licensed antifolates have bacterial DHs with far greater strength and frequency than human DHFR.
Due to its propensity to bind FR, it is mainly used as an anti-infective drug. Methotrexate itself is also used in the treatment of rheumatoid arthritis, psoriasis, and related inflammatory diseases, and for the treatment of cancers of the breast, uterus, testis, ovary and for various forms of leukemia (eg acute lymphocytic leukemia). Used in. One drug, methotrexate, is curative for choriocarcinoma, a rare type of cancer.
【0047】
葉酸拮抗剤は、広範な多種多様の毒性および他の不適切な効果を生じる。血液
学的毒性は、メトトレキサートおよび他の葉酸拮抗剤に関連した主要な用量制限
的毒性である。葉酸拮抗剤に関連する他の毒性および不適切な効果としては、以
下が挙げられる:神経毒性(これは、時折、重篤かつ回復不能である);胃腸毒
性、主に、口内炎(mucositis)、悪心、下痢、嘔吐、食欲不振など;
肝毒性;皮膚科学毒性、しばしば、発疹、脱毛、および組織炎症によって発現さ
れる;肺毒性;腎毒性;および他の不適切な毒性副作用。葉酸拮抗剤は、一般的
に、低い治療的指数および毒性副作用の高い発生率を伴う薬物として認識されて
いる。Antifolates produce a wide variety of toxic and other inadequate effects. Hematological toxicity is the major dose limiting toxicity associated with methotrexate and other antifolates. Other toxic and inadequate effects associated with antifolates include: neurotoxicity (which is sometimes severe and irreversible); gastrointestinal toxicity, mainly mucositis, Nausea, diarrhea, vomiting, loss of appetite, etc .;
Hepatotoxicity; Dermatological toxicity, often manifested by rash, hair loss, and tissue inflammation; Pulmonary toxicity; Nephrotoxicity; and other inappropriate toxic side effects. Antifolates are generally recognized as drugs with a low therapeutic index and a high incidence of toxic side effects.
【0048】
(C.微小管毒(antimicrotubule)薬剤)
微小管毒薬剤は、細胞の微小管の正常な機能を破壊することによって、細胞分
裂を妨げる。微小管は、細胞の重要な要素であり、細胞***の間の複製染色体の
分離において重要な役割を果たし、そして多くの間期細胞機能(例えば、細胞の
形状および足場の維持、細胞内輸送、分泌、神経伝達など)を担う。C. Antimicrotubule Agents Microtubule agents interfere with cell division by disrupting the normal function of the microtubules of cells. Microtubules are an important element of cells, play an important role in segregating replicating chromosomes during cell division, and in many interphase cell functions such as maintaining cell shape and scaffolding, intracellular trafficking, Secretion, neurotransmission, etc.).
【0049】
微小管に影響する抗腫瘍性薬剤の2つのクラスが、タキサン(パクリタキセル
およびドセタキセルは、このクラスの代表的薬剤である)およびビンカアルカロ
イド類(ビンクリスチン、ビンブラスチン、およびビノレルビンは、このクラス
の認可されたメンバーである)である。Two classes of anti-neoplastic agents that affect microtubules are taxanes (paclitaxel and docetaxel are representatives of this class) and vinca alkaloids (vincristine, vinblastine, and vinorelbine are members of this class). It is an authorized member).
【0050】
タキサンおよびビンカアルカロイド類は、植物由来の天然に存在する化合物の
天然または半合成的に誘導体化されたアナログである。特に、タキサンは、ヨー
ロッパイチイ(Taxus baccata)の針状葉および小枝、または北米
西岸原産イチイ(Pacific yew)(Taxus brevifoli
a)の樹皮由来である。現時点で最も広く知られたタキサンは、パクリタキセル
(Taxol(登録商標))およびドセタキセル(Taxotere(登録商標
))であり、これらは、抗腫瘍性薬剤として広く有名である。Taxanes and vinca alkaloids are naturally occurring or semi-synthetically derivatized analogs of naturally occurring compounds of plant origin. In particular, the taxanes are needles and twigs of the European yew (Taxus baccata) or the Pacific yew (Taxus brevifoli) native to the West Coast of North America.
It is derived from the bark of a). The most widely known taxanes at this time are paclitaxel (Taxol®) and docetaxel (Taxotere®), which are widely known as antitumor agents.
【0051】
ビンカアルカロイド類としては、ビンクリスチン(Oncovin(登録商標
))、ビンブラスチン(Velban(登録商標)、およびビノレルビン(Na
velbine(登録商標))が挙げられ、そしてこれらは一般的に、ツルニチ
ニチソウ植物(Cantharanthus roseus)由来である。これ
らの薬物もまた、抗腫瘍性薬剤として広く有名である。Vinca alkaloids include vincristine (Oncovin®), vinblastine (Velban®), and vinorelbine (Na).
velbine®), and these are generally derived from the periwinkle plant (Cantharanthus roseus). These drugs are also widely known as antitumor agents.
【0052】
これらの作用機構は異なるが、タキサンおよびビンカアルカロイド類の両方は
、細胞微小管に対してその生物学的効果を発揮する。タキサンは、チューブリン
(紡錘体微小管のタンパク質サブユニット)の重合を促進するように作用する。
この最終結果は、微小管の脱重合の阻害であり、これは、安定かつ非機能的な微
小管の形成を引き起こす。これは、微小管系における動的平衡を壊し、そして細
胞周期を後期G2およびM期に停止させ、これにより細胞複製を阻害する。Despite their different mechanisms of action, both taxanes and vinca alkaloids exert their biological effects on cellular microtubules. Taxanes act to promote the polymerization of tubulin, a protein subunit of spindle microtubules.
The end result of this is the inhibition of microtubule depolymerization, which leads to the formation of stable and non-functional microtubules. This disrupts the dynamic equilibrium in the microtubule system and arrests the cell cycle in late G 2 and M phases, thereby inhibiting cell replication.
【0053】
タキサンと同様に、ビンカアルカロイド類はまた、細胞内の微小管系に影響を
及ぼすように作用する。タキサンとは対照的に、ビンカアルカロイド類は、チュ
ーブリンに結合し、そして微小管へのチューブリンサブユニットの重合を阻害ま
たは防止する。ビンカアルカロイド類はまた、微小管の脱重合を誘導し、これに
より、微小管アセンブリを阻害し、そして細胞の中期停止を媒介する。ビンカア
ルカロイド類はまた、核酸およびタンパク質の合成;アミノ酸、サイクリックA
MP、およびグルタチオンの合成;細胞性呼吸に対して効果を発揮し;そして、
より高濃度で免疫抑制活性を発揮する。Like taxanes, vinca alkaloids also act to affect the intracellular microtubule system. In contrast to taxanes, vinca alkaloids bind to tubulin and inhibit or prevent polymerization of tubulin subunits into microtubules. Vinca alkaloids also induce microtubule depolymerization, thereby inhibiting microtubule assembly and mediating metaphase arrest of cells. Vinca alkaloids are also used in the synthesis of nucleic acids and proteins; amino acids, cyclic A
MP and glutathione synthesis; exerts an effect on cellular respiration; and
It exerts immunosuppressive activity at higher concentrations.
【0054】
タキサンおよびビンカアルカロイド類は両方とも、低い治療的指数を有する毒
性化合物である。神経毒性および骨髄抑制は、とりわけ、最も一般的に報告され
ているこれらの薬物の臨床毒性である。Both taxanes and vinca alkaloids are toxic compounds with a low therapeutic index. Neurotoxicity and myelosuppression are among the most commonly reported clinical toxicities of these drugs.
【0055】
タキサンは、多くの異なる毒性副作用および不適切な副作用を患者に引き起こ
すことが示されている。タキサンの最もよく知られた重篤な副作用は、神経毒性
および血液学的毒性、特に重篤な好中球減少症および血小板減少症である。タキ
サンはまた、推奨される投薬量で、高いパーセンテージの患者において過敏感反
応を引き起こし;GI効果(悪心、下痢、および嘔吐が一般的である);脱毛;
および他の不適切な効果を引き起こす。Taxanes have been shown to cause many different toxic and inadequate side effects in patients. The most well-known serious side effects of taxanes are neurotoxicity and hematological toxicity, especially severe neutropenia and thrombocytopenia. Taxanes also cause hypersensitivity reactions in a high percentage of patients at the recommended dosages; GI effects (nausea, diarrhea, and vomiting are common); hair loss;
And cause other inappropriate effects.
【0056】
ビンカアルカロイド類は、主に、以下と関連する:神経毒性効果(ビンクリス
チンを受容した患者における主要な副作用);血液学的毒性(白血球減少症は、
しばしば、ビンブラスチンの場合において重篤かつ用量制限的である);胃腸効
果(悪心、下痢、および嘔吐);脱毛;組織過敏および壊死(特に、注射部位)
;および他の有害な不適切な効果。Vinca alkaloids are primarily associated with: neurotoxic effects (a major side effect in patients receiving vincristine); hematological toxicity (leukopenia
Often severe and dose limiting in the case of vinblastine); gastrointestinal effects (nausea, diarrhea, and vomiting); hair loss; tissue hypersensitivity and necrosis (especially at the injection site)
And other harmful and inappropriate effects.
【0057】
(D.アルキル化剤)
この名称が意味するように、アルキル化剤は一般的に、DNAをアルキル化す
ること、直接的に細胞の複製サイクルを妨げることによって、細胞傷害性活性を
発揮する。上記の一般的列挙において記載したように、抗腫瘍性アルキル化剤は
、その一般的な構造およびそれがDNAをアルキル化するように作用する機構に
基づいて、多数のサブクラスに分類される。D. Alkylating Agents As the name implies, alkylating agents generally exert cytotoxic activity by alkylating DNA, directly impeding the cell's replication cycle. Demonstrate. As described in the general listing above, antineoplastic alkylating agents fall into a number of subclasses based on their general structure and the mechanism by which they act to alkylate DNA.
【0058】
抗腫瘍性アルキル化剤のいくつかのサブクラスは、化学療法剤として市販され
ている。最もよく知られているのは、ナイトロジェンマスタードであり、これに
は、クロラムブシル、メクロレタミン、メルファラン、ウラシルマスタードなど
が含まれる。Several subclasses of antitumor alkylating agents are commercially available as chemotherapeutic agents. The best known are the nitrogen mustards, which include chlorambucil, mechlorethamine, melphalan, uracil mustard, and the like.
【0059】
オキサアザホスホリンは、ナイトロジェンマスタードのサブタイプであり、そ
してこれにはイホスファミド、シクロホスファミド、トロホスファミド(tro
phosphamide)などが含まれる。アルキル化剤として作用し、そして
本出願日の時点で市販されている抗腫瘍性薬物の他の型としては、アルキルスル
ホネート(ブスルファン)およびニトロソ尿素(カルムスチン、ロムスチン、お
よびある程度のストレプトゾシン)が挙げられる。他の抗腫瘍性薬物はまた、D
NAおよび/またはRNAをアルキル化する能力を有する。ダカルバジンおよび
プロカルバジンは、DNAのアルキル化物質(alkylator)として作用
する、米国において現在認可されている薬物である。Oxazaphosphorin is a subtype of nitrogen mustard and includes ifosfamide, cyclophosphamide, trophosphamide (tro
phosphamide) and the like are included. Other types of antitumor drugs that act as alkylating agents and are commercially available as of the filing date of this application include alkyl sulfonates (busulfan) and nitrosoureas (carmustine, lomustine, and to some extent streptozocin). To be Other anti-tumor drugs are also D
It has the ability to alkylate NA and / or RNA. Dacarbazine and procarbazine are currently approved drugs in the United States that act as DNA alkylators.
【0060】
抗腫瘍性アルキル化剤は、広範な多種多様の毒性および他の不適切な副作用を
生じる。血液学的毒性は、すべてのアルキル化剤と関連する主要な用量制限的毒
性であり、そしてしばしば重篤である。アルキル化剤と関連する他の毒性および
不適切な効果としては、以下が挙げられる:神経毒性;胃腸毒性、主に、悪心、
下痢、嘔吐、食欲不振など;肝毒性;皮膚科学的および局所的領域の感受性、し
ばしば、発疹、脱毛、および組織炎症および壊死によって発現される;肺効果;
尿生殖器効果(***は、しばしば、シクロホスファミド療法を受けてい
る患者において重篤である);および他の不適切な毒性副作用。抗腫瘍性アルキ
ル化剤は、低い治療的指数および毒性副作用の高い発生率を伴う薬物として、広
く認識されている。Antitumor alkylating agents produce a wide variety of toxicities and other inadequate side effects. Hematological toxicity is the major dose limiting toxicity associated with all alkylating agents and is often severe. Other toxic and inadequate effects associated with alkylating agents include: neurotoxicity; gastrointestinal toxicity, primarily nausea,
Diarrhea, vomiting, loss of appetite, etc .; hepatotoxicity; dermatological and topical sensitivity, often expressed by rash, hair loss, and tissue inflammation and necrosis; pulmonary effects;
Urogenital effects (hemorrhagic cystitis is often severe in patients receiving cyclophosphamide therapy); and other inadequate toxic side effects. Anti-tumor alkylating agents are widely recognized as drugs with a low therapeutic index and a high incidence of toxic side effects.
【0061】
(E.代謝拮抗物質)
代謝拮抗物質は一般的に、偽性(fraudulent)ヌクレオチドを細胞
DNAに置き換え、それによって細胞***を破壊することによってか、またはD
NAの複製を妨げる重要な細胞性酵素を阻害することによって、細胞傷害性活性
を発揮する。代謝拮抗物質は、必ず、プリン(グアニンまたはアデノシン)塩基
またはピリミジン(シチジンまたはチミジン)塩基(結合した糖部分を有するか
、または有さない)から構成される。E. Antimetabolites Antimetabolites generally replace fraudulent nucleotides with cellular DNA, thereby disrupting cell division, or D
It exerts cytotoxic activity by inhibiting key cellular enzymes that interfere with NA replication. Antimetabolites are always composed of purine (guanine or adenosine) bases or pyrimidine (cytidine or thymidine) bases, with or without a sugar moiety attached.
【0062】
プリン代謝拮抗物質は、特に、種々の形態の小児白血病の処置において、広範
に使用される抗白血病薬物である。6−メルカプトプリン(6−MP)が、19
40年代中期から急性リンパ芽球性白血病(ALL)の処置として投与されてき
た。6−チオグアニン(6−TG)は、急性骨髄性白血病(AML)における寛
解誘導物質として、現在使用されている。アザチオプリン(これは、6−MPの
プロドラッグである)は、臨床上の移植における免疫抑制剤として広範に使用さ
れている。一般的に、プリン代謝拮抗物質は、白血病と比較した場合の固形腫瘍
細胞の寿命延長におそらく起因して、固形腫瘍に対して有効ではない。Purine antimetabolites are widely used anti-leukemic drugs, especially in the treatment of various forms of childhood leukemia. 6-mercaptopurine (6-MP) has 19
It has been administered as a treatment for acute lymphoblastic leukemia (ALL) since the mid-40's. 6-Thioguanine (6-TG) is currently used as a remission inducer in acute myelogenous leukemia (AML). Azathioprine, which is a prodrug of 6-MP, is widely used as an immunosuppressant in clinical transplantation. In general, purine antimetabolites are not effective against solid tumors, probably due to increased lifespan of solid tumor cells when compared to leukemia.
【0063】
他の細胞傷害性薬剤と同様に、プリン代謝拮抗物質はまた、正常な健康な細胞
の機能に影響を及ぼす。プリン代謝拮抗物質によって最も影響を受ける細胞は、
急速に増殖する細胞(これは、比較的短い寿命を有する)、すなわち、骨髄およ
び上部GI管において見出される細胞である。Like other cytotoxic agents, purine antimetabolites also affect the function of normal healthy cells. The cells most affected by purine antimetabolites are:
Cells that grow rapidly, which have a relatively short lifespan, that is, cells found in the bone marrow and upper GI tract.
【0064】
プリン代謝拮抗物質は一般的に、狭い範囲の毒性および他の不適切な効果を生
じる。血液学的毒性は、6−メルカプトプリン、アザチオプリン、6−チオグア
ニン、および他のプリン代謝拮抗物質と関連した主要な用量制限的毒性である。
特に、白血球減少症、貧血、および血小板減少症は、これらの薬物に関して広範
に報告された効果である。プリン代謝拮抗物質と関連した他の毒性および不適切
な効果としては、胃腸毒性、主に、悪心、下痢、および嘔吐;肝毒性;および他
の不適切な毒性副作用が挙げられる。プリン代謝拮抗物質は、一般的に、低い治
療的指数および毒性副作用の高い発生率を伴う薬物として認識されている。Purine antimetabolites generally produce a narrow spectrum of toxicity and other inadequate effects. Hematological toxicity is the major dose limiting toxicity associated with 6-mercaptopurine, azathioprine, 6-thioguanine, and other purine antimetabolites.
In particular, leukopenia, anemia, and thrombocytopenia are widely reported effects for these drugs. Other toxic and inadequate effects associated with purine antimetabolites include gastrointestinal toxicity, primarily nausea, diarrhea, and vomiting; liver toxicity; and other inadequate toxic side effects. Purine antimetabolites are generally recognized as drugs with a low therapeutic index and a high incidence of toxic side effects.
【0065】
一般的に、ヌクレオシドアナログはすべて、インビボにおいて通常デオキシシ
チジンキナーゼによって、その対応するヌクレオチドへとリン酸化を受ける。こ
の活性形態では、これらの薬物はすべて強力な代謝拮抗物質であり、そしてDN
A複製に必要な1以上の酵素を阻害すると推定されている。多くの抗腫瘍性ヌク
レオシドは、S期に(そしておそらく、G、S境界で)細胞周期特異的に作用す
る。抗腫瘍性代謝拮抗物質が阻害すると考えられるいくつかの酵素としては、リ
ボヌクレオチドレダクターゼ、DNAポリメラーゼ、チミジル酸シンテターゼ、
ウラシルリボシドホスホリラーゼ、DNAプライマーゼなどが挙げられる。細胞
複製酵素のその阻害が理由で、多くの抗腫瘍性ヌクレオシドはまた、抗ウイルス
活性を示す。In general, all nucleoside analogs are phosphorylated in vivo, usually by deoxycytidine kinase, to their corresponding nucleotides. In this active form, these drugs are all potent antimetabolites, and DN
It is presumed to inhibit one or more enzymes required for A replication. Many anti-neoplastic nucleosides act in the S phase (and possibly at the G, S boundary) in a cell cycle specific manner. Some enzymes that antitumor antimetabolites may inhibit include ribonucleotide reductase, DNA polymerase, thymidylate synthetase,
Examples include uracil riboside phosphorylase and DNA primase. Many antitumor nucleosides also exhibit antiviral activity because of their inhibition of cell replication enzymes.
【0066】
ヌクレオシド代謝拮抗物質は、広範な多種多様の毒性および他の不適切な効果
を生じる。血液学的毒性は、すべての抗腫瘍性ヌクレオシドと関連する主要な用
量制限的毒性であり、そしてしばしば重篤である。ヌクレオシドと関連する他の
毒性および不適切な効果としては、以下が挙げられる:神経毒性、これは時折、
重篤かつ回復不能である;胃腸毒性、主に、悪心、下痢、嘔吐、食欲不振など;
肝毒性;皮膚科学的毒性、しばしば、発疹、脱毛、および組織炎症によって発現
される;肺効果;および他の不適切な毒性副作用。抗腫瘍性ヌクレオシドは、低
い治療的指数および毒性副作用の高い発生率を伴う薬物として、一般的に認識さ
れている。Nucleoside antimetabolites produce a wide variety of toxicity and other inadequate effects. Hematological toxicity is the major dose limiting toxicity associated with all anti-neoplastic nucleosides and is often severe. Other toxic and inappropriate effects associated with nucleosides include: neurotoxicity, which occasionally
Severe and irreversible; gastrointestinal toxicity, mainly nausea, diarrhea, vomiting, loss of appetite;
Hepatotoxicity; dermatological toxicity, often manifested by rash, hair loss, and tissue inflammation; pulmonary effects; and other inappropriate toxic side effects. Anti-tumor nucleosides are generally recognized as drugs with a low therapeutic index and a high incidence of toxic side effects.
【0067】
(F.アントラサイクリン/アントラセンジオン)
このクラスの抗腫瘍性薬物はまた、抗生物質作用活性を有し、そして本来、こ
のような目的のために開発された。これらの化合物の主な作用機構は確定されて
いないが、これらは、開裂可能な複合体の形成によりトポイソメラーゼII(T
opo II)を阻害することによって作用すると推定されている。他の機構も
また、アントラサイクリンの広範な活性スペクトルを説明するために提案されて
いる。F. Anthracyclines / Anthracenediones This class of antineoplastic drugs also possesses antibiotic activity and was originally developed for such purposes. Although the main mechanism of action of these compounds has not been determined, they do not form topoisomerase II (T) due to the formation of a cleavable complex.
It is presumed to act by inhibiting opo II). Other mechanisms have also been proposed to explain the broad spectrum of activity of anthracyclines.
【0068】
その広範な活性スペクトルが理由で、アントラサイクリンおよびアントラセン
ジオンジオン(anthracenedionedione)は、ここ25年間
にわたって広範に研究され、報告されてきた。現在、米国において使用を認可さ
れた3つのこれらの薬剤(ドキソルビシン、ダウノルビシン、およびミトザント
ロン)が存在し、そしてさらに2つ(エピルビシンおよびイダルビシン)が欧州
において使用を認可されている。Due to its broad spectrum of activity, anthracyclines and anthracenedionediones have been extensively studied and reported over the last 25 years. Currently, there are three of these agents licensed for use in the United States (doxorubicin, daunorubicin, and mitozantrone), and two more (epirubicin and idarubicin) are licensed for use in Europe.
【0069】
他の細胞傷害性薬剤と同様に、抗腫瘍性アントラサイクリンおよびアントラセ
ンジオンもまた、正常な健康な細胞の機能に影響を及ぼす。特に、これらの薬剤
の使用は、他の抗腫瘍性薬剤では観察されていない型の心臓毒性と関連付けられ
ている。心臓毒性は、一般的ではない(約20%が、重大な問題に遭う)が、慢
性および生命を脅かすことになり得る。うっ血性心不全および他の等しく重篤な
心臓病が、アントラサイクリン化学療法を受けている患者において時折生じる。
大半の場合、有害な心臓効果は、蓄積用量と関係し、そしていくつかの場合に、
この効果は回復不能である。Like other cytotoxic agents, anti-neoplastic anthracyclines and anthracenediones also affect normal healthy cell function. In particular, the use of these agents has been associated with a type of cardiotoxicity that has not been observed with other anti-neoplastic agents. Cardiotoxicity, although uncommon (about 20% suffers serious problems), can be chronic and life-threatening. Congestive heart failure and other equally severe heart diseases occasionally occur in patients receiving anthracycline chemotherapy.
In most cases, adverse cardiac effects are associated with cumulative dose, and in some cases,
This effect is irreversible.
【0070】
抗腫瘍性アントラサイクリンおよびアントラセンジオンは、一般的に、他の毒
性および不適切な効果を生じ得る。血液学的毒性は、すべての抗腫瘍性アントラ
サイクリンおよびアントラセンジオンと関連する主要な用量制限的毒性である。
特に、白血球減少症、貧血、および血小板減少症が、これらの薬物に関して広範
に報告された効果である。抗腫瘍性アントラサイクリンおよびアントラセンジオ
ンと関連する他の毒性および不適切な効果としては、以下が挙げられる:胃腸毒
性、主に、口内炎(悪心、下痢、および嘔吐もまた頻繁に伴う);脱毛(これは
、ほぼ全ての患者において生じる);管外遊出後の重篤な局所的組織損傷;およ
び他の不適切な毒性副作用。抗腫瘍性アントラサイクリンおよびアントラセンジ
オンは、非常に広範な活性スペクトルを有するが、低い治療的指数および毒性副
作用の高い発生率を伴う薬物として、一般的に認識されている。Antitumor anthracyclines and anthracenediones can generally cause other toxic and inadequate effects. Hematological toxicity is the major dose limiting toxicity associated with all antineoplastic anthracyclines and anthracenediones.
In particular, leukopenia, anemia, and thrombocytopenia are widely reported effects for these drugs. Other toxic and inadequate effects associated with antineoplastic anthracyclines and anthracenediones include: gastrointestinal toxicity, mainly stomatitis (also frequently associated with nausea, diarrhea, and vomiting); hair loss ( This occurs in almost all patients); severe local tissue damage after extravasation; and other inadequate toxic side effects. Antitumor anthracyclines and anthracenediones have a very broad spectrum of activity, but are generally recognized as drugs with a low therapeutic index and a high incidence of toxic side effects.
【0071】
アントラサイクリンおよびアントラセンジオンの毒性効果を組み合わせる手段
は、以前に存在していなかった。この薬物の用量を低下させること、または中止
することが必要であったが、これは逆に寛解または治癒の確率に影響を及ぼす。
近年、実験薬物ICRF 187(これは、EDTAのジアミドアナログを形成
するように代謝する)は、アントラサイクリンおよびアントラセンジオンの蓄積
心臓毒性を改善するにおいて、いくらかの効力を示した。No means existed before to combine the toxic effects of anthracyclines and anthracenediones. It was necessary to lower the dose of this drug or to discontinue it, which in turn affects the probability of remission or cure.
Recently, the experimental drug ICRF 187, which metabolizes to form the diamide analog of EDTA, has shown some efficacy in ameliorating the accumulated cardiotoxicity of anthracyclines and anthracenediones.
【0072】
(G.他の抗生物質)
抗腫瘍性抗生物質は、多様な機構を通してその細胞傷害性活性を発揮する。ペ
ントスタチンは、プリンアナログであり、そしてこのクラスの代謝拮抗物質とし
て作用する。ブレオマイシンは、ほぼ1500ダルトンの分子量を有する糖タン
パク質であり、そして酸化的にDNAを切断する。アクチノマイシン(ダクチノ
マイシンとしても公知)は、RNAおよびタンパク質の合成を阻害する。プリカ
マイシン(ミトラマイシン)は、DNAに結合し、そしてマイトマイシンおよび
ストレプトゾシンは、DNAアルキル化剤である。G. Other Antibiotics Antitumor antibiotics exert their cytotoxic activity through a variety of mechanisms. Pentostatin is a purine analog and acts as an antimetabolite of this class. Bleomycin is a glycoprotein with a molecular weight of approximately 1500 daltons and oxidatively cleaves DNA. Actinomycin (also known as dactinomycin) inhibits RNA and protein synthesis. Plicamycin (mitramycin) binds to DNA, and mitomycin and streptozocin are DNA alkylating agents.
【0073】
抗生物質と関連した毒性は、類似の作用機構を有する他の薬剤と類似している
。血液学的毒性は、これらの薬物と全く共通しており、そして時折、重篤かつ用
量制限的である。これらの薬物の大半はまた、組織に対して極めて刺激的であり
、従って、局所的管外遊出が問題となる。さらに、ミトラマイシンは、特に、こ
の薬物の延長使用または高用量に伴って、血小板減少誘導性出血性症候群と関連
する。The toxicity associated with antibiotics is similar to other drugs with similar mechanisms of action. Hematological toxicity is quite common with these drugs, and is sometimes severe and dose limiting. Most of these drugs are also highly irritating to tissues, thus local extravasation is a problem. Furthermore, mitramycin is associated with thrombocytopenia-induced hemorrhagic syndrome, especially with prolonged use or high doses of this drug.
【0074】
抗腫瘍性抗生物質は、最も古いクラスの腫瘍学的薬物(アクチノマイシンが、
1954年に臨床に導入された)の1つであり、そして依然としてなお、小児新
生物(アクチノマイシン)、精巣新生物(ブレオマイシン)、および多くの他の
任意の固形腫瘍の処置において、広範に使用されている。Antitumor antibiotics are the oldest class of oncological drugs (actinomycin
It was first introduced clinically in 1954) and is still widely used in the treatment of pediatric neoplasms (actinomycin), testicular neoplasms (bleomycin), and many other solid tumors. Has been done.
【0075】
(H.トポイソメラーゼインヒビター)
トポイソメラーゼインヒビターは、比較的新しく導入された抗腫瘍性薬剤であ
り、現在、より多くの薬剤が、研究および開発の種々の段階にある。トポイソメ
ラーゼに関する情報が多く開発されるにつれて、これらの酵素を阻害するより多
くの薬剤が恐らく研究される。H. Topoisomerase Inhibitors Topoisomerase inhibitors are relatively newly introduced antitumor agents, and more are currently in various stages of research and development. As more information about topoisomerases develops, more drugs that inhibit these enzymes will probably be studied.
【0076】
トポイソメラーゼ(本明細書中以降では、Topo IおよびTopo II
という)は、DNA鎖の自由な回転を可能にするために、複製の間に一過的なD
NA鎖の破壊を開始する偏在性の細胞性酵素である。これらの酵素の機能は、D
NAの複製プロセスに対して重要である。これらがなければ、DNAヘリックス
におけるねじれた鎖は、自由な回転を妨げ、DNA鎖は、適切に分離し得ず、そ
してこの細胞は最終的に、***することなく死滅する。Topo Iは、DNA
一本鎖切断の3’末端に連鎖するが、Topo IIは、二本鎖DNA切断の5
’末端に連鎖する。Topoisomerase (hereinafter, Topo I and Topo II
Said to allow a transient rotation of the DNA strands so that a transient D
It is a ubiquitous cellular enzyme that initiates NA strand breaks. The function of these enzymes is D
Important for NA replication process. In the absence of these, the twisted strands in the DNA helix prevent free rotation, the DNA strands cannot properly separate, and the cell eventually dies without division. Topo I is DNA
Linked to the 3'end of the single-strand break, Topo II is
'Link to the end.
【0077】
(エピポドフィロトキシン(epipodopyllotoxin))
エピポドフィロトキシンは、Topo IIの作用を阻害する。天然のポドフ
ィロトキシンは、ポドヒルムおよびマンドレーク植物由来であり、そしてこれら
の植物の抽出物は、数世紀にわたって民間療法の供給源であった。天然に存在す
るポドフィロトキシンおよび半合成エピポドフィロトキシンの両方の抗腫瘍性特
性の発見は、30年より長く遡る。(Epipodophyllotoxin) Epipodophyllotoxin inhibits the action of Topo II. Natural podophyllotoxins are derived from the Podhirum and Mandrake plants, and extracts of these plants have been the source of folk remedies for centuries. The discovery of antitumor properties of both naturally occurring and semisynthetic epipodophyllotoxins goes back more than 30 years.
【0078】
天然に存在するポドフィロトキシンは、グルコシド環を有さず、そしてE−環
におけるC4位がメトキシ部分である。作用機構は十分に理解されていないが、
E−環ヒドロキシは、Topo IIを阻害することによって二本鎖DNA破壊
の誘導を担うと推定されるが、グリコシド部分は、合成薬物誘導体の、紡錘体微
小管アセンブリの妨害を妨げると考えられる。Naturally occurring podophyllotoxin has no glucoside ring and the C4 position in the E-ring is a methoxy moiety. The mechanism of action is not fully understood,
While the E-ring hydroxy is presumed to be responsible for inducing double-stranded DNA breaks by inhibiting Topo II, the glycoside moiety is believed to prevent the interference of synthetic drug derivatives with spindle microtubule assembly.
【0079】
エトポシド(およびエトポシドホスフェート(これは、エトポシドの水溶性プ
ロドラッグである))は現在、種々の癌(精巣新生物、肺癌、リンパ腫、神経芽
細胞腫、AIDS関連カポージ肉腫、ウィルムス腫、種々の型の白血病などを含
む)の治療に使用されている。テニポシドは、FDAにより認可され、そして難
治性小児白血病のための治療として、1992年に米国において市販され始めた
比較的新しい薬物である。テニポシドはまた、膀胱癌、リンパ腫、神経芽細胞腫
、小細胞肺癌、および特定のCNS腫瘍に対する活性を示しているが、このよう
な用途については認可されていない。Etoposide (and etoposide phosphate, which is a water-soluble prodrug of etoposide), is currently used in a variety of cancers (testicular neoplasm, lung cancer, lymphoma, neuroblastoma, AIDS-related Kaposi's sarcoma, Wilms tumor, (Including various types of leukemia, etc.). Teniposide is a relatively new drug approved by the FDA and started to be marketed in the US in 1992 as a treatment for refractory childhood leukemia. Teniposide has also shown activity against bladder cancer, lymphoma, neuroblastoma, small cell lung cancer, and certain CNS tumors, but has not been approved for such use.
【0080】
エトポシドおよびテニポシドの両方は、十分に水溶性ではなく(10.mu.
g/mL未満)、そして実際のIV送達のためには有機溶媒で処方されなければ
ならない。エトポシドはまた、液体充填カプセルとして経口投薬形態で利用可能
である。Both etoposide and teniposide are not sufficiently water soluble (10.mu.
g / mL), and must be formulated with an organic solvent for actual IV delivery. Etoposide is also available in oral dosage form as liquid filled capsules.
【0081】
エピポドフィロトキシンの主要な用量制限的毒性は、好中球減少症であり、こ
れはしばしば、他の抗腫瘍性薬剤または照射で処置された患者の間で特に重篤で
ある。他の血液学的毒性が、一般的に報告されており、脱毛、GI窮迫、神経学
的毒性、過敏感反応なども同様に報告されている。さらに、エトポシドを受けて
いるいくらかの患者は、うっ血性心不全および/または心筋梗塞に罹患し、これ
らはしばしば、この薬物を送達するために使用された大量の生理食塩水希釈(そ
していくつかの場合では、送達速度)に起因した。The major dose limiting toxicity of epipodophyllotoxin is neutropenia, which is often particularly severe among patients treated with other antineoplastic agents or radiation. . Other hematological toxicities have been commonly reported, including hair loss, GI distress, neurological toxicities, hypersensitivity reactions, and the like. In addition, some patients receiving etoposide suffer from congestive heart failure and / or myocardial infarction, which often result in large saline dilutions (and in some cases Then, the delivery rate).
【0082】
ポドフィロトキシンは、複雑な薬物速度論的特性を示す。エトポシドは、イン
ビボで少なくとも6つの独立した代謝産物に破壊する。これらの代謝産物の少な
くとも2つ(グルクロニドおよびトランスヒドロキシ酸代謝産物)は、ほとんど
細胞傷害性活性を有さないことが公知であり、そしてこの薬物の血液学的毒性を
担うと推定されている。エトポシドホスフェートは、エトポシドに急速に変換さ
れるので、同じ代謝産物、毒性、および薬物速度論的特性もまた、このプロドラ
ッグに起因する。テニポシドは、エトポシドと同程度に広範に研究されているが
、類似の特性を有すると推定されている。Podophyllotoxin exhibits complex pharmacokinetic properties. Etoposide breaks down in vivo into at least six independent metabolites. At least two of these metabolites (glucuronide and transhydroxy acid metabolites) are known to have little cytotoxic activity and are presumed to be responsible for the hematological toxicity of the drug. Since etoposide phosphate is rapidly converted to etoposide, the same metabolite, toxicity, and pharmacokinetic properties also result from this prodrug. Teniposide has been studied as extensively as etoposide, but is presumed to have similar properties.
【0083】
(カンプトセシン(camptothecin))
カンプトセシンは、30年より長い間にわたって公知であるが、抗腫瘍性薬剤
としてのその有用性は、近年発見されたに過ぎない。発見と導入との間のギャッ
プは主に、これらの化合物によって示される非常に乏しい水溶性に起因する。活
性化合物の発見後ほぼ20年間、投与を容易にするために、研究は、より水溶性
の高いカンプトセシンの発見に向けられていた。Camptothecin Camptothecin has been known for more than 30 years, but its usefulness as an antitumor agent has only recently been discovered. The gap between discovery and introduction is largely due to the very poor water solubility exhibited by these compounds. For nearly 20 years after the discovery of active compounds, research was directed to the discovery of the more water-soluble camptothecin to facilitate administration.
【0084】
研究者らは、投与のために薬物の水溶性を増加させる試みにおいて、水酸化ナ
トリウムで脂肪親和性薬物を処方した。不幸なことに、これらの処方物は本質的
に不活性であり、そしてまた、インビボで非常に毒性であった。1980年代中
期には、塩基性pH条件において、カンプトセシン誘導体が加水分解され、E−
環ラクトンが開環してカルボキシル化アニオンを形成することが発見された。こ
の形態の化合物は、ラクトン形態のわずか1/10以下の抗腫瘍性活性を有する
ことが発見され、そしてまた、健康な細胞に対して高度に毒性であることが発見
された。Researchers have formulated lipophilic drugs with sodium hydroxide in an attempt to increase the water solubility of the drug for administration. Unfortunately, these formulations were essentially inert and were also highly toxic in vivo. In the mid-1980s, camptothecin derivatives were hydrolyzed under basic pH conditions to give E-
It was discovered that the ring lactone opened to form a carboxylated anion. This form of the compound was found to have antitumor activity no more than 1/10 that of the lactone form and was also found to be highly toxic to healthy cells.
【0085】
その活性なラクトン形態を維持した水溶性カンプトセシン誘導体の開発に対す
るこの発見以来、多くの研究が捧げられてきた。これらの流れに沿って、近年認
可されたイリノテカン(CPT−11)およびトポテカンが開発された。イリノ
テカンは、SN38(10−ヒドロキシ−7−エチルCPT)として公知のCP
Tの高度に活性な高度に脂肪親和性の誘導体の水溶性プロドラッグである。トポ
テカンは、CPTの10−ヒドロキシ誘導体の9−ジメチルアミノエチル部分を
組み込む。Much research has been devoted since this discovery to the development of water soluble camptothecin derivatives that retained their active lactone form. Along these lines, recently approved irinotecan (CPT-11) and topotecan were developed. Irinotecan is a CP known as SN38 (10-hydroxy-7-ethyl CPT).
It is a water-soluble prodrug of a highly active, highly lipophilic derivative of T. Topotecan incorporates the 9-dimethylaminoethyl moiety of the 10-hydroxy derivative of CPT.
【0086】
多くの他の抗腫瘍性薬剤と同様に、CPT誘導体の主要な毒性は、血液学的毒
性およびGI窮迫である。イリノテカンは、重篤な下痢(これはしばしば、用量
制限的である)、ならびに好中球減少症、口内炎、他のGI窮迫、脱毛および肝
機能の上昇と関連する。トポテカンの毒性は同様であるが、下痢は通常重篤では
ない。As with many other antineoplastic agents, the major toxicities of CPT derivatives are hematological toxicity and GI distress. Irinotecan is associated with severe diarrhea, which is often dose limiting, as well as neutropenia, stomatitis, other GI distress, hair loss and elevated liver function. Topotecan has similar toxicity, but diarrhea is usually not severe.
【0087】
カンプトセシンは、一般的に、低い治療的指数および毒性副作用の高い発生率
を伴う薬物として認識されている。カンプトセシンの毒性副作用を減少させる防
御剤の同時投与は、より安全かつより有効な化学療法レジメンを与える。これは
さらに、より高い用量の抗腫瘍性薬物が与えられることを可能にし得、それによ
って処置の成功確率を高める。Camptothecin is generally recognized as a drug with a low therapeutic index and a high incidence of toxic side effects. Co-administration of a protective agent that reduces the toxic side effects of camptothecin provides a safer and more effective chemotherapeutic regimen. This may further allow higher doses of anti-neoplastic drugs to be given, thereby increasing the probability of successful treatment.
【0088】
(I.白金錯体)
これらの抗新形成特性の発見は、30年よりも前のことなので、白金錯体は、
多くの多様な型の固形腫瘍についての治療剤として開発されている。2つのこの
ような錯体(シスプラチンおよびカルボプラチン)は、(両方は、単一の薬剤と
して、ならびに精巣、卵巣、肺、膀胱、および他の器官の腫瘍に関する併用療法
において)現在広範な用途がある。(I. Platinum Complex) Since the discovery of these antineoplastic properties was more than 30 years ago, the platinum complex was
It has been developed as a therapeutic agent for many diverse types of solid tumors. Two such complexes (cisplatin and carboplatin) currently have widespread use (both as single agents and in combination therapy for tumors of the testes, ovaries, lungs, bladder, and other organs).
【0089】
白金錯体の作用機構は、広範に研究されている。白金錯体は、DNAに共有結
合して、それによりDNA機能を破壊し、直接細胞死をもたらすことが発見され
ている。白金錯体はまた、タンパク質に自由に結合し、そしてタンパク質を結合
した白金がまた、DNAに影響し得ると予想される。The mechanism of action of platinum complexes has been extensively studied. It has been discovered that platinum complexes covalently bind to DNA, thereby disrupting DNA function and leading directly to cell death. Platinum complexes also bind freely to proteins, and it is expected that protein-bound platinum may also affect DNA.
【0090】
シスプラチンの毒性の発現は、カルボプラチンの毒性とは全く異なる。累積的
に、用量制限腎毒性は、シスプラチン治療と共通するが、求電子性アルキル化剤
に類似する血液学的毒性は、主に、カルボプラチンに関する毒性である。シスプ
ラチンおよびカルボプラチンの両方はまた、胃腸障害(主に、悪心および嘔吐な
らびに神経毒性効果)に関係している。The onset of toxicity of cisplatin is quite different from that of carboplatin. Cumulatively, dose limiting nephrotoxicity is common with cisplatin treatment, while hematological toxicities similar to electrophilic alkylating agents are primarily carboplatin related. Both cisplatin and carboplatin are also associated with gastrointestinal disorders (mainly nausea and vomiting and neurotoxic effects).
【0091】
白金錯体は、インビボで広範に代謝されないので、身体内に存在する白金種は
、錯体と水との反応性に依存して、ヒドロキシル化およびアクア化錯体を形成す
る。さらに、白金錯体は、腎臓排出を介して身体から大部分が排出され、そして
腎臓に存在する酸性状態は、これらの(新形成に対して)一般的に不活性でかつ
毒性の種の形成を支持する傾向にある。特に、シスプラチンの塩素原子は、ヒド
ロキシル部分およびアコ部分により、酸性条件下(これは、しばしば、薬物と関
係する重篤な腎毒性を説明する)で容易に置換される。Since platinum complexes are not extensively metabolized in vivo, the platinum species present in the body form hydroxylated and aquated complexes depending on the reactivity of the complex with water. Moreover, platinum complexes are largely excreted from the body via renal excretion, and the acidic conditions present in the kidneys lead to the formation of these generally (to neoplasia) and toxic species. Tends to support. In particular, the chlorine atom of cisplatin is easily replaced by the hydroxyl and aco moieties under acidic conditions, which often explains the severe nephrotoxicity associated with drugs.
【0092】
シスプラチンおよびカルボプラチンの両方は、非常に親油性の化合物であり、
このことは、これらが細胞膜を容易に通過することを可能にする。ヒドロキシル
化およびアクア化形態は、非常に低い脂質溶解性(詳細には、中性またはわずか
にアルカリ性のpH)の形態である。これは、一般的に不活性な薬物のこれらの
形態を説明する。さらに、シスプラチンの排除は、カルボプラチンよりも、より
迅速に生じる。このことは、毒性の異なる徴候を説明する。Both cisplatin and carboplatin are highly lipophilic compounds,
This allows them to easily cross the cell membrane. The hydroxylated and aquated forms are forms of very low lipid solubility (in particular neutral or slightly alkaline pH). This explains these forms of the generally inactive drug. Moreover, the elimination of cisplatin occurs more rapidly than carboplatin. This explains the different signs of toxicity.
【0093】
他の毒性は、白金錯体が、神経毒性、聴器毒性(特に、カルボプラチンにおい
て)、胃腸障害(主に悪心および嘔吐)などであることに関係する。Other toxicities are associated with platinum complexes such as neurotoxicity, ototoxicity (especially in carboplatin), gastrointestinal disorders (mainly nausea and vomiting).
【0094】
(J.他の薬物)
類似の毒性効果、すなわち、骨髄抑制、胃腸障害、高血圧、腎毒性、肝毒性、
粘膜炎などに起因する血液学的毒性は、殆どの抗新形成剤とある程度関係する。
目的の任意の癌治療計画は、患者の生命を延ばすこと、および生活の質を改善す
るを必然的に含むので、毒性の徴候は、代替物に対して慎重に検討される。J. Other Drugs Similar toxic effects, namely myelosuppression, gastrointestinal disorders, hypertension, nephrotoxicity, hepatotoxicity,
Hematological toxicity, such as due to mucositis, is associated with most anti-neoplastic agents to some extent.
Because any cancer treatment regime of interest involves prolonging the patient's life and improving the quality of life, the signs of toxicity are carefully considered for alternatives.
【0095】
(3.抗新形成剤誘導体)
本発明の抗新形成剤誘導体は、反応基を付着させることにより修飾された抗新
形成剤を含む。反応基は、連結基を介して、または必要に応じて、連結基を用い
ないで、抗新形成剤に付着され得る。一般に、抗新形成剤誘導体は、抗新形成分
子および血液成分における官能基と反応し得る反応基を有する連結基を含む。抗
新形成剤誘導体は、インビボで投与され得、その結果、血液成分との結合体がイ
ンビボで生じるか、またはこれらは、初めに、インビトロで血液成分に結合体化
し得、そしてインビボで投与される(以下に記載されるような)結合体化抗新形
成剤を生じる。(3. Anti-neoplastic Derivative) The anti-neoplastic agent derivative of the present invention comprises an anti-neoplastic agent modified by attaching a reactive group. The reactive group can be attached to the antineoplastic agent via a linking group, or optionally without a linking group. Generally, an antineoplastic derivative comprises a linking group having a reactive group capable of reacting with a functional group in the antineoplastic molecule and blood components. The anti-neoplastic agent derivative may be administered in vivo such that conjugates with blood components occur in vivo, or they may first be conjugated to blood components in vitro and administered in vivo. Results in a conjugated anti-neoplastic agent (as described below).
【0096】
タンパク質上の官能基との共有結合を形成するために、活性基として、広範な
種々の活性なカルボキシル基、特にエステル、を用い得る。ここで、ヒドロキシ
ル部分は、抗新形成剤を誘導体化するのに必要とされるレベルで、薬学的に受容
可能である。多数の多様なヒドロキシル基が、これらの連結剤に用いられ得るが
、最も簡便な物は、N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)、およびN−ヒド
ロキシ−スルホスクシンイミド(スルホ−NHS)である。A wide variety of active carboxyl groups, especially esters, can be used as active groups to form covalent bonds with functional groups on proteins. Here, the hydroxyl moiety is pharmaceutically acceptable at the level required to derivatize the antineoplastic agent. A large number of diverse hydroxyl groups can be used for these linking agents, but the most convenient are N-hydroxysuccinimide (NHS), and N-hydroxy-sulfosuccinimide (sulfo-NHS).
【0097】
一級アミンは、以下のスキーム1Aに図示するように、NHSエステルについ
ての主な標的である。アクセス可能なα−アミノ基は、NHSエステルと反応す
るタンパク質のN−末端に存在する。しかし、タンパク質上のα−アミノ基は、
NHSカップリングに望ましくないか、またはNHSカップリングを利用可能で
はない。5つのアミノ酸が、これらの側鎖中で窒素を有するが、リシンのε−ア
ミンのみが、NHSエステルと有意に反応する。以下のスキーム1Aに示される
ように、NHSエステル結合体化反応が一級アミンと反応する場合に、アミド結
合が形成され、N−ヒドロキシスクシンイミドを放出する。Primary amines are the main targets for NHS esters, as illustrated in Scheme 1A below. An accessible α-amino group is present at the N-terminus of proteins that react with NHS esters. However, the α-amino group on the protein is
Not desirable for NHS coupling, or NHS coupling is not available. Five amino acids have nitrogens in their side chains, but only the ε-amine of lysine reacts significantly with NHS esters. As shown in Scheme 1A below, when the NHS ester conjugation reaction reacts with a primary amine, an amide bond is formed, releasing N-hydroxysuccinimide.
【0098】[0098]
【化10】
本発明の好ましい実施形態では、タンパク質上の官能基は、チオール基であり
、そしてこの反応基は、γ−マレイミド−ブチルアラミド(GMBA)またはM
PAのような基を含むマレイミドである。マレイミド基は、反応混合物のpHが
、6.5と7.4の間を維持する場合、以下の図1Bに示されるように、タンパ
ク質上のスルフヒドリル基について最も選択性である。pH7.0で、マレイミ
ド基とスルフヒドリルとの反応の速度は、アミンとの反応よりも1000倍速い
。マレイミド基とスルフヒドリル基との間の安定なチオエステル連結が形成され
、これは生理学的条件下で切断され得ない。[Chemical 10] In a preferred embodiment of the invention, the functional group on the protein is a thiol group and the reactive group is γ-maleimido-butyl aramid (GMBA) or M.
It is a maleimide containing a group such as PA. The maleimido group is most selective for sulfhydryl groups on the protein when the pH of the reaction mixture is maintained between 6.5 and 7.4, as shown in Figure 1B below. At pH 7.0, the rate of reaction of maleimide groups with sulfhydryls is 1000 times faster than reaction with amines. A stable thioester linkage is formed between the maleimide group and the sulfhydryl group, which cannot be cleaved under physiological conditions.
【0099】[0099]
【化11】
本発明の抗新形成剤誘導体を生成する様式は、非常に広範であり、これは、分
子を含む種々の要素の性質に依存する。合成手順は、単純であり、高収率を提供
し、かつ高度に精製された生成物を可能にするように選択される。通常、化学反
応基は、最終段階(例えば、カルボキシル基を用いる、活性エステルを形成する
ためのエステル化は、合成の最終工程である)として作製される。各抗新形成剤
は、リンカーおよび反応試薬を用いる誘導体化を受けるように選択され、そして
以下の基準に従って修飾される。[Chemical 11] The manner in which the antineoplastic derivative of the present invention is produced is very widespread, depending on the nature of the various elements, including the molecule. Synthetic procedures are selected to be simple, provide high yields, and allow highly purified products. Generally, the chemically reactive group is created as the last step (eg, esterification to form an active ester using a carboxyl group is the final step in the synthesis). Each anti-neoplastic agent is selected to undergo derivatization with a linker and reaction reagent and is modified according to the following criteria.
【0100】
初めに、ファルマコフォア領域の位置は、当業者により、以前に公開された構
造−活性−相関関係(Structure-Activity-Relation
ship(SAR))研究に従って決定される。例えば、タキソールおよびドセ
タキセルの構造活性相関関係は研究されており、そして十分に探索されている。
生体結合体は、エステルの形態でC2’位に付着されており、そして活性は維持
される(F.Dosioら、Journal of Controlled R
elease,1997,47,293-304;V.Shashouaら、米
国特許第5,795,909号、1998年8月18日)。ドセタキセルの3’
位で、親油性アミドの使用は活性を維持する(F.Gueritte-Voeg
oleinら、J.Med.Chem.,1991,34,992-998;F
.Gueritte-Voegoleinら、欧州特許出願253739、19
87年7月16日、およびC.S.Swindellら、Bioorg.Med
.Chem.Lett.,1994,4,1531-1536)。ドキソルビシ
ンの場合、修飾の全ては、C14位にあるので、この位置はファルマコフォア領
域から最も取り除かれる(B.Patelliら、DE2627146、197
6年12月30日;F.Arcamoneら、DE2557537、1976年
7月8年;D.H.Kingら、欧州特許出願294294 A2、1988年
12月7日)。マイトマイシンCの場合、修飾に最良の位置は、N−1a位であ
る(N.Umemotoら、J.Appl.Biochem.,1984,6,
297-307;T.Tanakaら、Biol.Pharm.Bull.,1
996,19,774-777およびR.L.Barton,欧州特許出願36
8668、1988年11月10日)。ビンクリスチンの場合、修飾に最良の位
置は、C23位である(R.L.Barton,欧州特許出願368668、1
988年11月10日)。First, the location of the pharmacophore region was determined by those skilled in the art as previously published Structure-Activity-Relationships (Structure-Activity-Relation).
determined according to the ship (SAR) study. For example, the structure-activity relationships of taxol and docetaxel have been studied and well explored.
The bioconjugate is attached at the C2 'position in the form of an ester and remains active (F. Dosio et al., Journal of Controlled R).
Release, 1997, 47, 293-304; Shashoua et al., U.S. Patent No. 5,795,909, August 18, 1998). 3'of docetaxel
In position, the use of lipophilic amides maintains activity (F. Guerite-Voeg
olein et al. Med. Chem. , 1991, 34, 992-998; F
. Guerite-Voegolein et al., European Patent Application 253739, 19
July 16, 1987, and C.I. S. Swindell et al., Bioorg. Med
. Chem. Lett. , 1994, 4,1531-1536). In the case of doxorubicin, this modification is most removed from the pharmacophore region since all of the modifications are at the C14 position (B. Patelli et al., DE 2627146, 197).
December 30, 6; F. Arcamore et al., DE 2557537, 8 July 1976; H. King et al., European Patent Application 294294 A2, December 7, 1988). In the case of mitomycin C, the best position for modification is at position N-1a (N. Umemoto et al., J. Appl. Biochem., 1984, 6, 6.
297-307; Tanaka et al., Biol. Pharm. Bull. , 1
996, 19, 774-777 and R.M. L. Barton, European Patent Application 36
8668, November 10, 1988). In the case of vincristine, the best position for modification is at the C23 position (RL Barton, European Patent Application 368668, 1,
(November 10, 988).
【0101】
次いで、抗新形成剤は、ファルマコフォア領域から十分に離れた部位で修飾さ
れて、修飾薬物と生物学的レセプターとの間の強力な結合干渉を防ぎ、その結果
、抗新形成剤が、その治療的活性(すなわち、治療的活性は、わずかに10倍減
少する)を維持する。The antineoplastic agent is then modified at a site well away from the pharmacophore region to prevent strong binding interference between the modified drug and the biological receptor, resulting in antineoplastic formation. The agent retains its therapeutic activity (ie, the therapeutic activity is reduced only 10-fold).
【0102】
最後に、化学修飾の部位を一定に保つことは、抗新形成の生物学的活性は、リ
ンカーの長さおよび性質を改変することにより最適化される。特定の抗新形成剤
誘導体のいくつかの例を以下に与える。Finally, keeping the site of chemical modification constant, the antineoplastic biological activity is optimized by modifying the length and nature of the linker. Some examples of specific antineoplastic derivatives are given below.
【0103】 (A.ドキソルビシン誘導体) 抗新形成誘導体の1つの例は、式Iのドキソルビシン誘導体である:[0103] (A. Doxorubicin derivative) One example of an antineoplastic derivative is the doxorubicin derivative of formula I:
【0104】[0104]
【化12】
ここで:
Xは、エーテル、チオエーテル、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドま
たは三級アミド、エステル、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾ
ン、アセタール、ヘミアセタール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミ
アミナール、スルホネート、スルフェート、スルホンアミド、スルホンアミデー
ト、ホスフェート、ホスホルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデート
、好ましくは一級アミドを含むがこれらに限定されない感受性の官能基であり;
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環、好ま
しくはアルキル鎖C1-6であり得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。破線の
C−X結合は、二者択一で、単結合かまたは二重結合の存在を示す。[Chemical 12] Where: X is an ether, thioether, secondary or tertiary amine, secondary amide or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal, aminal, hemiaminal, sulfonate. , Sulphates, sulphonamides, sulphonamidates, phosphates, phosphoramides, phosphonates, or phosphonamidates, preferably sensitive functional groups including but not limited to primary amides; R is a free radical as defined above. An optional linking group, eg, R, is absent (where X is directly attached to D), any alkyl chain C 1-10 , any fluoroalkyl C 1-10 or any combination of fluoro-substitutions. Alkyl chain C 1-10 ,-(Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination) ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. May be, but is not limited to, a substituted heterocycle, preferably an alkyl chain C 1-6 ; and D is a reactive group as defined above, preferably a maleimido group. The dashed C—X bond, as an alternative, indicates the presence of a single or double bond.
【0105】 抗新形成剤誘導体の別の例は、式IIのドキソルビシン誘導体である:[0105] Another example of an antineoplastic derivative is the doxorubicin derivative of formula II:
【0106】[0106]
【化13】
ここで:
Xは、エーテル、チオエーテル、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドま
たは三級アミド、エステル、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾ
ン、アセタール、ヘミアセタール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミ
アミナール、スルホネート、スルフェート、スルホンアミド、スルホンアミデー
ト、ホスフェート、ホスホルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデート
、好ましくは一級アミドを含むがこれらに限定されない感受性の官能基であり;
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環、好ま
しくはアルキル鎖C1-6であり得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。破線の
C−X結合は、二者択一で、単結合かまたは二重結合の存在を示す。[Chemical 13] Where: X is an ether, thioether, secondary or tertiary amine, secondary amide or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal, aminal, hemiaminal, sulfonate. , Sulphates, sulphonamides, sulphonamidates, phosphates, phosphoramides, phosphonates, or phosphonamidates, preferably sensitive functional groups including but not limited to primary amides; R is a free radical as defined above. An optional linking group, eg, R, is absent (where X is directly attached to D), any alkyl chain C 1-10 , any fluoroalkyl C 1-10 or any combination of fluoro-substitutions. Alkyl chain C 1-10 ,-(Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination) ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. May be, but is not limited to, a substituted heterocycle, preferably an alkyl chain C 1-6 ; and D is a reactive group as defined above, preferably a maleimido group. The dashed C—X bond, as an alternative, indicates the presence of a single or double bond.
【0107】 抗新形成剤誘導体の別の例は、式IIIのドキソルビシン誘導体である:[0107] Another example of an antineoplastic derivative is the doxorubicin derivative of formula III:
【0108】[0108]
【化14】
ここで:
Vは、O、N、S、またはCであり;
Wは、O、N、S、またはCであり;
nは、0または1であり;そして
Qは非存在、または酸素、硫黄、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドま
たは三級アミド、酸化リン、または置換もしくは非置換炭素原子である(好まし
くは、Vは酸素であり、Qは非存在であり、そしてWは一級アミンである);
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環、好ま
しくは−CH2−であり得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。破線の
C−X結合およびC−V結合は、二者択一で、単結合かまたは二重結合の存在を
示す。[Chemical 14] Where: V is O, N, S, or C; W is O, N, S, or C; n is 0 or 1; and Q is absent or oxygen, sulfur , Secondary or tertiary amines, secondary or tertiary amides, phosphorus oxides, or substituted or unsubstituted carbon atoms (preferably V is oxygen, Q is absent, and W is primary). R is an optional linking group as defined above, eg, R is absent (where X is directly attached to D), any alkyl chain C 1-10 , Any fluoroalkyl C 1-10 or any combination of fluoro-substituted alkyl chains C 1-10 ,-(Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination), ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. substituted heterocycle, such as, preferably is -CH 2 - obtained (but not limited to); and D is a reactive group, as defined above, preferably a maleimide group. The dashed C-X and C-V bonds, as an alternative, indicate the presence of a single or double bond.
【0109】
(B.タキソール誘導体)
本発明の目的のために、誘導体化タキソールは、たとえ低下した活性の証拠が
存在しても、開環位置に反応基(すなわち、遊離のアルコール)を付着させるこ
とにより合成された。生体結合体は、エステルの形態でC2’位に付着され、そ
して活性は維持される(F.Dosioら、Journal of Contr
olled Release,1997,47,293-304)。本発明者ら
は、この結合が非常に脆弱で、そしてインビボで切断され得ると考える(Mag
riら、J.Med.Chem.,1989,32,788-792)。B. Taxol Derivatives For the purposes of the present invention, derivatized taxol will attach a reactive group (ie, a free alcohol) at the ring opening position, even in the presence of evidence of reduced activity. Was synthesized by The bioconjugate is attached at the C2 'position in the form of an ester and activity is maintained (F. Dosio et al., Journal of Contr.
rolled Release, 1997, 47, 293-304). We believe that this bond is very weak and can be cleaved in vivo (Mag.
ri et al. Med. Chem. , 1989, 32, 788-792).
【0110】 本発明に従うタキソール誘導体の1つの例は、式IVの化合物である:[0110] One example of a taxol derivative according to the invention is a compound of formula IV:
【0111】[0111]
【化15】
ここで:
Xは、エーテル、チオエーテル、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドま
たは三級アミド、エステル、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾ
ン、アセタール、ヘミアセタール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミ
アミナール、スルホネート、スルフェート、スルホンアミド、スルホンアミデー
ト、ホスフェート、ホスホルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデート
、好ましくは−NH−もしくは−CO−を含むがこれらに限定されない感受性の
官能基であり;
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環、好ま
しくはアルキル鎖C1-6もしくは−(O−CH2−CH2−O)1-2−CH2−CH2
−であり得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。[Chemical 15] Where: X is an ether, thioether, secondary or tertiary amine, secondary amide or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal, aminal, hemiaminal, sulfonate. , Sulphate, sulphonamide, sulphonamidate, phosphate, phosphoramide, phosphonate or phosphonamidate, preferably a sensitive functional group including but not limited to -NH- or -CO-; R is defined above. An optional linking group such as R is absent (where X is directly bonded to D), any alkyl chain C 1-10 , any fluoroalkyl C 1-10 or any A fluoro-substituted alkyl chain C 1-10 ,-(Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination) ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. A substituted heterocycle such as, but not limited to, an alkyl chain C 1-6 or — (O—CH 2 —CH 2 —O) 1-2 —CH 2 —CH 2 —; and D Is a reactive group as defined above, preferably a maleimide group.
【0112】 本発明に従うタキソール誘導体の別の例は、式Vの化合物である:[0112] Another example of a taxol derivative according to the invention is a compound of formula V:
【0113】[0113]
【化16】
ここで:
Xは、エーテル、チオエーテル、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドま
たは三級アミド、エステル、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾ
ン、アセタール、ヘミアセタール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミ
アミナール、スルホネート、スルフェート、スルホンアミド、スルホンアミデー
ト、ホスフェート、ホスホルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデート
、好ましくは−CO−(アミド)を含むがこれらに限定されない感受性の官能基
であり;
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環、好ま
しくはアルキル鎖C1-6であり得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。[Chemical 16] Where: X is an ether, thioether, secondary or tertiary amine, secondary amide or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal, aminal, hemiaminal, sulfonate. , Sulfate, sulfonamide, sulfonamidate, phosphate, phosphoramide, phosphonate, or phosphonamidate, preferably a sensitive functional group including but not limited to -CO- (amide); R is defined above. An optional linking group such as R is absent (where X is directly attached to D), any alkyl chain C 1-10 , any fluoroalkyl C 1-10 or any Combined fluoro-substituted alkyl chains C 1-10 ,-(Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination) ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. May be, but is not limited to, a substituted heterocycle, preferably an alkyl chain C 1-6 ; and D is a reactive group as defined above, preferably a maleimido group.
【0114】 (C.メトトレキサート誘導体) 本発明に従うメトトレキサート誘導体の1つの例は、式VIの化合物である:[0114] (C. Methotrexate derivative) One example of a methotrexate derivative according to the invention is a compound of formula VI:
【0115】[0115]
【化17】
ここで:
Xは、エーテル、チオエーテル、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドま
たは三級アミド、エステル、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾ
ン、アセタール、ヘミアセタール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミ
アミナール、スルホネート、スルフェート、スルホンアミド、スルホンアミデー
ト、ホスフェート、ホスホルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデート
、好ましくは−NH−(一級アミド)を含むがこれらに限定されない感受性の官
能基であり;
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環、好ま
しくはアルキル鎖C1-6であり得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。[Chemical 17] Where: X is an ether, thioether, secondary or tertiary amine, secondary amide or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal, aminal, hemiaminal, sulfonate. , Sulfate, sulfonamide, sulfonamidate, phosphate, phosphoramide, phosphonate, or phosphonamidate, preferably a sensitive functional group including but not limited to -NH- (primary amide); R is defined above. An optional linking group such as R is absent (where X is directly bonded to D), any alkyl chain C 1-10 , any fluoroalkyl C 1-10 or any A fluoro-substituted alkyl chain C 1-10 ,-(Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination) ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. May be, but is not limited to, a substituted heterocycle, preferably an alkyl chain C 1-6 ; and D is a reactive group as defined above, preferably a maleimido group.
【0116】
本発明に従うメトトレキサート誘導体の1つの例は、式VIIの化合物である
:One example of a methotrexate derivative according to the present invention is a compound of formula VII:
【0117】[0117]
【化18】
ここで:
Xは、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドまたは三級アミド、エステル
、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾン、アセタール、ヘミアセ
タール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミアミナール、スルホネート
、スルフェート、スルホンアミド、スルホンアミデート、ホスフェート、ホスホ
ルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデート、好ましくは−NH−を含
むがこれらに限定されない感受性の官能基であり;
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環、好ま
しくはアルキル鎖C1-6であり得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。[Chemical 18] Where: X is a secondary or tertiary amine, secondary amide or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal, aminal, hemiaminal, sulfonate, sulfate, sulfone. Amide, sulfonamidate, phosphate, phosphoramide, phosphonate, or phosphonamidate, preferably a sensitive functional group including but not limited to -NH-; R is an optional linkage as defined above. A group, eg R, is absent (where X is directly attached to D), any alkyl chain C 1-10 , any fluoroalkyl C 1-10 or any combination of fluoro-substituted alkyl chains C 1-10 ,-(Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination) ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. May be, but is not limited to, a substituted heterocycle, preferably an alkyl chain C 1-6 ; and D is a reactive group as defined above, preferably a maleimido group.
【0118】 (D.オキシウレア誘導体) 本発明に従うオキシウレアの1つの例は、式VIIIの化合物である:[0118] (D. Oxyurea derivative) One example of an oxyurea according to the present invention is a compound of formula VIII:
【0119】[0119]
【化19】
ここで:
Xは、エーテル、チオエーテル、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドま
たは三級アミド、エステル、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾ
ン、アセタール、ヘミアセタール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミ
アミナール、スルホネート、スルフェート、スルホンアミド、スルホンアミデー
ト、ホスフェート、ホスホルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデート
、好ましくは−CO−(一級アミド)を含むがこれらに限定されない感受性の官
能基であり;
R’は、アルキルC1-6、フルオロアルキルC1-6、置換もしくは非置換のアリ
ールまたはヘテロアリールであり;
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環、好ま
しくはアルキル鎖C1-6であり得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。[Chemical 19] Where: X is an ether, thioether, secondary or tertiary amine, secondary amide or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal, aminal, hemiaminal, sulfonate. R'is an alkyl C; 1-6 , fluoroalkyl C 1-6 , substituted or unsubstituted aryl or heteroaryl; R is an optional linking group as defined above, eg, R is absent (wherein X is directly bonded to D), any Kill chain C 1-10, optionally fluoroalkyl C 1-10 or any combination fluoro-substituted alkyl chain C 1-10, - (Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination) ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. May be, but is not limited to, a substituted heterocycle, preferably an alkyl chain C 1-6 ; and D is a reactive group as defined above, preferably a maleimido group.
【0120】 (E.タモキシフェン誘導体) 本発明に従うタモキシフェンの1つの例は、式IXの化合物である:[0120] (E. Tamoxifen derivative) One example of tamoxifen according to the invention is a compound of formula IX:
【0121】[0121]
【化20】
ここで:
Xは、エーテル、チオエーテル、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドま
たは三級アミド、エステル、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾ
ン、アセタール、ヘミアセタール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミ
アミナール、スルホネート、スルフェート、スルホンアミド、スルホンアミデー
ト、ホスフェート、ホスホルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデート
、好ましくは−NH−CO−(一級アミド)を含むがこれらに限定されない感受
性の官能基であり;
R’は、水素、アルキル、アリール、またはアシル、好ましくはメチルであり
;
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環、好ま
しくはアルキル鎖C1-6であり得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。[Chemical 20] Where: X is an ether, thioether, secondary or tertiary amine, secondary amide or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal, aminal, hemiaminal, sulfonate. R'is a sensitive functional group including, but not limited to, Hydrogen, alkyl, aryl, or acyl, preferably methyl; R is an optional linking group as defined above, eg, R is absent (where X is directly bonded to D). ), Any alkyl chain C 1-10 , any full Oroalkyl C 1-10 or any combination of fluoro-substituted alkyl chains C 1-10 ,-(Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination) ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. May be, but is not limited to, a substituted heterocycle, preferably an alkyl chain C 1-6 ; and D is a reactive group as defined above, preferably a maleimido group.
【0122】 (F.マイトマイシンC誘導体) 本発明に従うマイトマイシンCの1つの例は、式Xの化合物である:[0122] (F. Mitomycin C derivative) One example of mitomycin C according to the present invention is a compound of formula X:
【0123】[0123]
【化21】
ここで:
Xは、エーテル、チオエーテル、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドま
たは三級アミド、エステル、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾ
ン、アセタール、ヘミアセタール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミ
アミナール、スルホネート、スルフェート、スルホンアミド、スルホンアミデー
ト、ホスフェート、ホスホルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデート
、好ましくは−CO−(アミド)を含むがこれらに限定されない感受性の官能基
であり;
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環、好ま
しくはアルキル鎖C1-6であり得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。[Chemical 21] Where: X is an ether, thioether, secondary or tertiary amine, secondary amide or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal, aminal, hemiaminal, sulfonate. , Sulfate, sulfonamide, sulfonamidate, phosphate, phosphoramide, phosphonate, or phosphonamidate, preferably a sensitive functional group including but not limited to -CO- (amide); R is defined above. An optional linking group such as R is absent (where X is directly attached to D), any alkyl chain C 1-10 , any fluoroalkyl C 1-10 or any Combined fluoro-substituted alkyl chains C 1-10 ,-(Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination) ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. May be, but is not limited to, a substituted heterocycle, preferably an alkyl chain C 1-6 ; and D is a reactive group as defined above, preferably a maleimido group.
【0124】
(G.5−フルオロウラシル)
5−フルオロウラシルの誘導体の生成物である本発明の化合物は、4つの立体
異性体の混合物である。これらの4つの異性体は、式XI A、XI B、XI
C、およびXI Dの化合物である。(G.5-Fluorouracil) The compound of the present invention, which is a product of a derivative of 5-fluorouracil, is a mixture of four stereoisomers. These four isomers have the formula XI A, XI B, XI
C and XID compounds.
【0125】[0125]
【化22】
ここで:
Xは、エーテル、チオエーテル、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドま
たは三級アミド、エステル、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾ
ン、アセタール、ヘミアセタール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミ
アミナール、スルホネート、スルフェート、スルホンアミド、スルホンアミデー
ト、ホスフェート、ホスホルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデート
、好ましくは−CO−(エステルまたはアミド)を含むがこれらに限定されない
感受性の官能基であり;
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環、好ま
しくはアルキル鎖C1-6であり得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。[Chemical formula 22] Where: X is an ether, thioether, secondary or tertiary amine, secondary amide or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal, aminal, hemiaminal, sulfonate. R is a sensitive functional group including, but not limited to, An optional linking group as defined, eg, R, is absent (where X is directly attached to D), any alkyl chain C 1-10 , any fluoroalkyl C 1-10 or Any combination of fluoro-substituted alkyl chains C 1-10 ,-(Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination) ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. May be, but is not limited to, a substituted heterocycle, preferably an alkyl chain C 1-6 ; and D is a reactive group as defined above, preferably a maleimido group.
【0126】 (H.ビンクリスチン) 本発明に従うビンクリスチン誘導体の1つの例は、式XIIの化合物である:[0126] (H. vincristine) One example of a vincristine derivative according to the present invention is a compound of formula XII:
【0127】[0127]
【化23】
ここで:
Xは、二級アミンまたは三級アミン、二級アミドまたは三級アミド、エステル
、チオエステル、イミン、ヒドラゾン、セミカルバゾン、アセタール、ヘミアセ
タール、ケタール、ヘミケタール、アミナール、ヘミアミナール、スルホネート
、スルフェート、スルホンアミド、スルホンアミデート、ホスフェート、ホスホ
ルアミド、ホスホネート、またはホスホンアミデートを含むがこれらに限定され
ない感受性の官能基であり;
Rは、上記で規定されるような自由選択の連結基、例えば、Rは、非存在(こ
の場合、XはDに直接結合される)、任意のアルキル鎖C1-10、任意のフルオロ
アルキルC1-10もしくは任意の組合せのフルオロ置換アルキル鎖C1-10、−(Z
-CH2CH2-Z)n-、−(Z−CF2CH2−Z)n−、−(Z−CH2CF2−Z
)n−(ここで、n=1−4そしてZはOもしくはSのいずれかである)のよう
なアルキル鎖もしくはフルオロアルキル鎖を含む任意のエーテルまたは任意のチ
オエーテル、−Y−C6H4−、−Y−C6H4−Y−(ここで、Yは、CH2、O
、S、NH、NR[R=H、アルキル、アシル]の任意の組合せである)のよう
な構造を有する、オルト、メタ、もしくはパラの二置換ベンゼン、フラン、チオ
フェン、ピラン、オキサゾール、もしくはチアゾールのような置換複素環であり
得(これらに限定されない);そして
Dは、上記に規定したような反応基、好ましくはマレイミド基である。[Chemical formula 23] Where: X is a secondary or tertiary amine, secondary amide or tertiary amide, ester, thioester, imine, hydrazone, semicarbazone, acetal, hemiacetal, ketal, hemiketal, aminal, hemiaminal, sulfonate, sulfate, sulfone R is a sensitive functional group including, but not limited to, amide, sulfonamidate, phosphate, phosphoramide, phosphonate, or phosphonamidate; R is an optional linking group as defined above, eg, R is , Absent (where X is directly bonded to D), any alkyl chain C 1-10 , any fluoroalkyl C 1-10 or any combination of fluoro-substituted alkyl chains C 1-10 ,-( Z
-CH 2 CH 2 -Z) n - , - (Z-CF 2 CH 2 -Z) n -, - (Z-CH 2 CF 2 -Z
) N - (where, n = 1-4 and Z is any ether or any thioether containing alkyl chain or fluoroalkyl chains, such as O or is either S), -Y-C 6 H 4 -, - Y-C 6 H 4 -Y- ( where, Y is, CH 2, O
, S, NH, NR [R = H, alkyl, acyl] in any combination) ortho, meta, or para disubstituted benzene, furan, thiophene, pyran, oxazole, or thiazole. (But not limited to) substituted heterocycles; and D is a reactive group as defined above, preferably a maleimide group.
【0128】
(4.結合体化抗新形成剤)
抗新形成剤が本発明の従って誘導体化された後、これを用いてインビボまたは
インビトロのいずれかで結合体化抗新形成剤を形成する。このような結合体は、
抗新形成剤誘導体の反応基(連結基を有するかまたは有さないかのいずれかの抗
新形成剤誘導体に付着される)と血液成分の官能基との間で形成される共有結合
を介する血液成分に結合体化される抗新形成剤誘導体を含む。本発明の抗新形成
剤誘導体は、以下により詳細に記載されるような血液成分の特異的標識または非
特異的標識による結合体に用いられ得る。4. Conjugated Anti-neoplastic Agent After the anti-neoplastic agent has been derivatized according to the present invention, it is used to form a conjugated anti-neoplastic agent either in vivo or in vitro. . Such a conjugate is
Via a covalent bond formed between the reactive group of the antineoplastic derivative (attached to the antineoplastic derivative with or without a linking group) and the functional group of the blood component Includes antineoplastic derivatives that are conjugated to blood components. The anti-neoplastic agent derivatives of the present invention can be used in conjugates with specific or non-specific labeling of blood components as described in more detail below.
【0129】
(A.特異的標識)
好ましくは、本発明の抗腫瘍薬剤誘導体は、移動性の血液タンパク質上のチオ
ール基と特異的に反応するように設計される。このような反応は、好ましくは、
マレイミド(例えば、GMBS、MPAまたは他のマレイミドから調製された)
で誘導体化された抗腫瘍薬剤の、移動性の血液タンパク質(例えば、血清アルブ
ミンまたはIgG)上のチオール基への共有結合によって確立される。A. Specific Labeling Preferably, the antitumor drug derivative of the present invention is designed to specifically react with a thiol group on a mobile blood protein. Such a reaction is preferably
Maleimide (eg, prepared from GMBS, MPA or other maleimide)
Is established by covalent attachment of a derivatized anti-tumor drug to thiol groups on mobile blood proteins (eg, serum albumin or IgG).
【0130】
特定の状況下で、マレイミドでの特異的標識は、NHSまたはスルホ−NHS
のような基での移動性タンパク質の非特異的標識を超える、いくつかの利点を提
供する。チオール基は、アミノ基よりもインビボで多く存在しない。従って、本
発明のマレイミド誘導体は、より少ないタンパク質に共有結合する。例えば、ア
ルブミン(最も多く存在する血液タンパク質)には、単一のチオール基しか存在
しない。従って、抗腫瘍薬剤−マレイミド−アルブミン結合体は、約1:1のモ
ル比の抗腫瘍薬剤:アルブミンを含む傾向にある。アルブミンに加えて、IgG
分子(クラスII)もまた、遊離チオールを有する。IgG分子および血清アル
ブミンは、血中の可溶性タンパク質の大部分を構成するので、これらはまた、マ
レイミド−抗腫瘍薬剤への共有結合に利用可能な、血中の遊離チオール基の大部
分を構成する。Under certain circumstances, specific labeling with maleimide is NHS or sulfo-NHS
Offers several advantages over non-specific labeling of mobile proteins with groups such as Thiol groups are less abundant in vivo than amino groups. Therefore, the maleimide derivative of the present invention covalently binds fewer proteins. For example, albumin, the most abundant blood protein, has only a single thiol group. Therefore, the anti-tumor drug-maleimide-albumin conjugate tends to contain a molar ratio of about 1: 1 anti-tumor drug: albumin. IgG in addition to albumin
Molecules (class II) also have free thiols. Since IgG molecules and serum albumin make up the majority of soluble proteins in blood, they also make up the majority of free thiol groups in blood available for covalent attachment to maleimide-antitumor drugs. .
【0131】
さらに、遊離チオール基含有血液タンパク質間においても、アルブミン自体の
固有の特性に起因して、マレイミドでの特異的標識は、抗腫瘍薬剤−マレイミド
−アルブミン結合体の優先的な形成を導く。アルブミンの単一の遊離チオール基
は、種間で高度に保存されており、アミノ酸残基34(Cys34)に位置する。
アルブミンのCys34は、他の遊離チオール含有タンパク質上の遊離チオールと
比較して、増加した反応性を有することが、近年実証されてきた。これは、アル
ブミンのCys34のpK値が非常に低い(5.5)ことに一部起因する。これは
、一般的なシステイン残基の代表的なpK値(代表的には、約8である)よりも
はるかに低い。この低いpKに起因して、正常な生理学的条件下で、アルブミン
のCys34は、主にイオン化形態で存在し、これが、その反応性を劇的に増加す
る。Cys34の低いpK値に加えて、Cys34の反応性を増強する別の因子は、
その位置であり、これは、アルブミンの領域Vの1ループの表面に近い間隙(c
revice)にある。この位置は、Cys34を、全ての種のリガンド対して非
常に利用可能にし、そして遊離ラジカルのトラップおよび遊離チオールのスカベ
ンジャーとしてのCys34の生物学的役割における重要な因子である。これらの
特性は、Cys34を、抗腫瘍薬剤−マレイミドと高度に反応性にし、そしてこの
反応速度の加速度は、他の遊離チオール含有タンパク質との抗腫瘍薬剤−マレイ
ミドの反応速度と比べて、1000倍程度大きいものであり得る。Furthermore, even among blood proteins containing free thiol groups, specific labeling with maleimide leads to preferential formation of antitumor drug-maleimide-albumin conjugates due to the unique properties of albumin itself. . The single free thiol group of albumin is highly conserved among species and is located at amino acid residue 34 (Cys 34 ).
It has recently been demonstrated that albumin Cys 34 has increased reactivity compared to free thiols on other free thiol-containing proteins. This is partly due to the very low pK value of Cys 34 for albumin (5.5). This is much lower than the typical pK value for common cysteine residues, which is typically around 8. Due to this low pK, under normal physiological conditions, Cys 34 of albumin exists mainly in the ionized form, which dramatically increases its reactivity. In addition to the low pK value of Cys 34, another factor which enhances the reactivity of Cys 34 is,
Its position, which is close to the surface of one loop of region V of albumin (c
device). This position makes Cys 34 highly available to ligands of all species, and is a key factor in Cys 34 's biological role as a trap for free radicals and a scavenger for free thiols. These properties make Cys 34 highly reactive with the anti-tumor drug-maleimide, and the acceleration of this reaction rate is 1000 times that of the anti-tumor drug-maleimide with other free thiol-containing proteins. It can be about twice as large.
【0132】
抗腫瘍薬剤−マレイミド−アルブミン結合体の別の利点は、Cys34で特異的
な、アルブミンへの抗腫瘍薬剤の1:1での負荷に関連する、その再現性である
。他の技術(例えば、遊離アミンのグルタルアルデヒド、DCC、EDCおよび
他の化学活性化のような)は、この選択性を欠く。例えば、アルブミンは、52
個のリジン残基を含み、そのうち25〜30個は、アルブミンの表面に位置し、
そして結合に利用されやすい。これらのリジン残基を活性化すること、またはこ
れらのリジン残基を介して結合するように抗腫瘍薬剤を改変することは、不均一
な結合体の集団を生じる。1:1のモル比の抗腫瘍薬剤:アルブミンが使用され
る場合でさえ、収率は、複数の結合体生成物からなり、これらのいくつかは、1
個のアルブミンにつき0、1、2またはそれ以上の抗腫瘍薬剤を含み、そしてそ
の各々は、この25〜30個の利用可能なリジン部位の任意の1つでランダムに
結合された抗腫瘍薬剤を有する。多くの可能な組み合わせを考慮すると、各バッ
チの正確な組成および性質の特徴付けは困難になり、そしてバッチごとの再現性
は、ほぼ不可能であり、このような結合体を、治療剤として望ましくないものに
する。さらに、アルブミンのリジン残基を介する結合体は、少なくとも1個のア
ルブミン分子あたり多くの治療剤を送達する利点を有するようであるが、研究で
は、1:1の比の治療剤:アルブミンが好ましいことが示されている。Steh
leら、「The Loading Rate Determines Tum
or Targeting Properties of Methotrex
ate−Albumin Conjugates in Rats」、Anti
−Cancer Drugs、第8巻、677−685頁(1997)(その全
体が本明細書中で援用される)による論文において、著者らは、グルタルアルデ
ヒドを介して結合体化された1:1の比の抗癌メトトレキサート:アルブミンが
、最も望まれる結果を生じたことを報告する。これらの結合体は、腫瘍細胞に取
り込まれるが、5:1〜20:1のメトトレキサート分子を有する結合体は、変
化したHPLCプロフィールを有し、そしてインビボで肝臓に迅速に取り込まれ
た。これらの高い比では、アルブミンに対するコンフォメーション変化が、治療
剤キャリアとしてのその有効性を減少することを推測される。Another advantage of the antitumor drug-maleimide-albumin conjugate is its reproducibility, which is specific for Cys 34 and is associated with a 1: 1 loading of the antitumor drug on albumin. Other techniques, such as the free amine glutaraldehyde, DCC, EDC and other chemical activations, lack this selectivity. For example, albumin is 52
Lysine residues, 25-30 of which are located on the surface of albumin,
And it is easy to use for joining. Activating these lysine residues, or modifying the antitumor drug to bind through these lysine residues, results in a heterogeneous population of conjugates. Even when a 1: 1 molar ratio of anti-tumor drug: albumin was used, the yield consisted of multiple conjugate products, some of which
There are 0, 1, 2 or more antitumor agents per albumin, each of which contains an antitumor agent randomly linked at any one of the 25-30 available lysine sites. Have. Given the many possible combinations, it is difficult to characterize the exact composition and properties of each batch, and batch-to-batch reproducibility is nearly impossible, making such conjugates desirable as therapeutic agents. I don't have it. Furthermore, conjugates via lysine residues of albumin appear to have the advantage of delivering many therapeutic agents per at least one albumin molecule, although studies have favored a 1: 1 ratio of therapeutic agent: albumin. Is shown. Steh
le et al., “The Loading Rate Determines Tum.
or Targeting Properties of Methotrex
ate-Albumin Conjugates in Rats ", Anti
In a paper by Cancer Drugs, Vol. 8, pp. 677-685 (1997), which is incorporated herein in its entirety, the authors describe a 1: 1 conjugation via glutaraldehyde. We report that a ratio of anti-cancer methotrexate: albumin produced the most desired results. These conjugates were taken up by tumor cells, whereas those with 5: 1-20: 1 methotrexate molecules had altered HPLC profiles and were rapidly taken up by the liver in vivo. It is speculated that at these high ratios, conformational changes to albumin diminish its effectiveness as a therapeutic agent carrier.
【0133】
インビボでのマレイミド−抗腫瘍薬剤の制御された投与によって、インビボで
のアルブミンおよびIgGの特異的標識を制御し得る。代表的な投与において、
80〜90%の投与されたマレイミド−抗腫瘍薬剤が、アルブミンを標識し、5
%未満が、IgGを標識する。例えば、グルタチオンのような遊離チオールの微
量の標識もまた生じる。このような特異的標識は、インビボ用途に好ましい。な
ぜなら、これは、その投与された薬剤の推定される半減期の正確な計算を可能に
するからである。Controlled administration of maleimide-antitumor agents in vivo can control the specific labeling of albumin and IgG in vivo. In a typical administration,
80-90% of the administered maleimide-antitumor drug labeled albumin, 5
Less than% labels IgG. For example, trace labeling of free thiols such as glutathione also occurs. Such specific labels are preferred for in vivo applications. This is because it allows an accurate calculation of the estimated half-life of the administered drug.
【0134】
制御された特異的なインビボ標識を提供することに加え、マレイミド−抗腫瘍
薬剤は、血清アルブミンおよびIgGのエキソビボでの特異的標識を提供し得る
。このようなエキソビボ標識は、血清アルブミンおよび/またはIgGを含有す
る血液、血清または生理食塩水溶液へ、マレイミド−抗腫瘍薬剤を添加すること
を包含する。一旦マレイミド−抗腫瘍薬剤でエキソビボで改変されると、これら
の血液、血清または生理食塩水溶液は、インビボ処置のために血液に再投与され
得る。In addition to providing controlled specific in vivo labeling, maleimide-antitumor agents can provide ex vivo specific labeling of serum albumin and IgG. Such ex vivo labeling involves adding a maleimide-antitumor drug to blood, serum or saline solution containing serum albumin and / or IgG. Once modified ex vivo with a maleimide-antitumor drug, these blood, serum or saline solutions can be readministered into the blood for in vivo treatment.
【0135】
NHS−抗腫瘍薬剤と比較して、マレイミド−抗腫瘍薬剤は、水溶液の存在下
および遊離アミンの存在下で一般的に安定である。マレイミド−抗腫瘍薬剤は、
遊離チオールと反応するだけなので、マレイミド−抗腫瘍薬剤をそれ自体との反
応から防止するための保護基は、一般に必要ではない。加えて、抗腫瘍薬剤のそ
の増加した安定性は、HPLCのようなさらなる精製工程の使用を可能にし、イ
ンビボしように適切な高度に精製された生成物を調製する。最後に、この増加し
た化学安定性は、より長い貯蔵寿命を有する生成物を提供する。Compared to NHS-antitumor agents, maleimide-antitumor agents are generally stable in the presence of aqueous solutions and in the presence of free amines. Maleimide-antitumor agents are
Protecting groups to prevent the maleimide-antitumor drug from reacting with itself are generally not required as they only react with free thiols. In addition, its increased stability of anti-tumor agents allows the use of additional purification steps such as HPLC to prepare highly purified products suitable for in vivo use. Finally, this increased chemical stability provides the product with a longer shelf life.
【0136】
(B.非特異的標識)
本発明の抗腫瘍薬剤はまた、血液成分の非特異的標識のために誘導体化され得
る。アミノ基への結合が、特に、アミド結合の形成を用いて、一般に、非特異的
標識のために使用される。このような結合を形成するために、抗腫瘍薬剤に結合
される化学的に反応性の基として、広範な種の活性カルボキシル基(特に、エス
テル)を使用し得、ここで、ヒドロキシル部分は、必要とされるレベルで生理学
的に受容可能である。多くの異なるヒドロキシル基が、これらの連結剤において
使用され得るが、最も簡便なのは、N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)お
よびN−ヒドロキシスルホスクシンイミド(スルホ−NHS)である。B. Non-Specific Labeling The anti-tumor agents of the present invention can also be derivatized for non-specific labeling of blood components. Coupling to amino groups is commonly used for non-specific labeling, especially with the formation of amide bonds. To form such a bond, a wide variety of active carboxyl groups (particularly esters) can be used as chemically reactive groups attached to antitumor agents, where the hydroxyl moiety is Physiologically acceptable at the required level. Many different hydroxyl groups can be used in these linking agents, but the most convenient are N-hydroxysuccinimide (NHS) and N-hydroxysulfosuccinimide (sulfo-NHS).
【0137】
利用され得る他の連結剤は、米国特許第5,612,034号(本明細書によ
って参考として本明細書中に援用される)に記載される。Other linking agents that may be utilized are described in US Pat. No. 5,612,034, hereby incorporated by reference.
【0138】
非特異的抗腫瘍薬剤の化学的に反応性の基がインビボで反応し得る種々の部位
としては、細胞(特に、赤血球(エリスロサイト)および血小板)およびタンパ
ク質(例えば、免疫グロブリン(IgGおよびIgMを含む)、血清アルブミン
、フェリチン、ステロイド結合タンパク質、トランスフェリン、サイロキシン結
合タンパク質、α−2−マクログロブリン)などが挙げられる。これらの抗腫瘍
薬剤誘導体が反応し、長期存続(long−lived)されないレセプターは
、一般に、約3日以内でヒト宿主から排除される。上記に示したタンパク質(こ
れらの細胞のタンパク質を含む)は、特に、血中濃度に基づく半減期に関して、
少なくとも3日では血流中に存続し、そして5日以上(通常、60日を超えない
、より通常には、30日を超えない)存続し得る。[0138] The various sites to which chemically reactive groups of non-specific anti-tumor agents may react in vivo include cells (especially erythrocytes and platelets) and proteins (eg immunoglobulins (IgG). And IgM), serum albumin, ferritin, steroid binding protein, transferrin, thyroxine binding protein, α-2-macroglobulin) and the like. Receptors to which these anti-tumor drug derivatives react and are not long-lived are generally cleared from the human host within about 3 days. The proteins shown above (including those of these cells) are especially relevant for blood concentration-based half-life,
It can persist in the bloodstream for at least 3 days and for 5 days or more (usually not more than 60 days, more usually not more than 30 days).
【0139】
大部分については、反応は、血中の移動性成分(特に、血液タンパク質および
細胞、より特に、血液タンパク質および赤血球)との反応である。「移動性」に
よって、その成分が、任意の長期間の間(一般に、5分を超えない、より通常に
は、1分を超えない)で一定の位置を有さないことを意図されるが、これらの血
液成分のいくつかは、長期間の間比較的定常であり得る。最初に、標識されたタ
ンパク質および細胞の比較的不均一な集団が存在する。しかし、大部分について
は、投与後数日以内のそれらの集団は、血流中の標識されたタンパク質の半減期
に依存して、それらの最初の集団から実質的に変化する。従って、通常約3日以
上以内で、IgGが、血流中の主な標識されたタンパク質となる。For the most part, the reaction is with mobile components in the blood, especially blood proteins and cells, more particularly blood proteins and red blood cells. By “mobility” is meant that the component does not have a constant position for any extended period of time (generally no more than 5 minutes, more usually no more than 1 minute). , Some of these blood components may be relatively stationary for long periods of time. First, there is a relatively heterogeneous population of labeled proteins and cells. However, for the most part, their population within days after administration varies substantially from their original population, depending on the half-life of the labeled protein in the bloodstream. Thus, typically within about 3 days or more, IgG becomes the predominant labeled protein in the bloodstream.
【0140】
通常、投与後5日目までに、IgG、血清アルブミンおよび赤血球は、血液中
の結合体化された成分のうちの、少なくとも60モル%であり、通常、少なくと
も約75モル%であり、IgG、IgM(実質的にはより低い程度で)および血
清アルブミンが、非細胞性結合体化成分のうち、少なくとも約50モル%、通常
、少なくとも約75モル%、より通常には、少なくとも約80モル%である。Typically, by day 5 post-administration, IgG, serum albumin, and red blood cells will be at least 60 mol%, and usually at least about 75 mol% of the conjugated components in blood. , IgG, IgM (to a substantially lesser extent) and serum albumin are at least about 50 mol%, usually at least about 75 mol%, more usually at least about 50% of the acellular conjugation component. It is 80 mol%.
【0141】
血液成分への非特異的な抗腫瘍薬剤のこれらの所望の結合体は、患者へのこれ
らの抗腫瘍薬剤の直接投与によってインビボで調製され得、患者は、ヒトまたは
他の哺乳動物であり得る。投与は、ボーラス形態であり得るか、またはメーター
ドフロー(metered flow)などを使用する注入によって長期にわた
って緩やかに導入され得る。These desired conjugates of non-specific anti-tumor agents to blood components can be prepared in vivo by direct administration of these anti-tumor agents to patients, where the patient is a human or other mammal. Can be. Administration can be in bolus form or can be slowly introduced over time by infusion, such as using metered flow.
【0142】
所望の場合、目的の結合体はまた、血液と本発明の抗腫瘍薬剤誘導体とを合わ
せて、血液成分上の反応性官能基への抗腫瘍薬剤誘導体の共有結合を可能にし、
次いで、これらの結合体化された血液の宿主への返送または投与によって、エキ
ソビボで調製され得る。さらに、上記はまた、個々の血液成分または限定された
数の成分(例えば、赤血球、免疫グロブリン、血清アルブミンなど)を最初に精
製し、そしてその成分(単数または複数)を化学的に反応性のこれらの抗腫瘍薬
剤とエキソビボで合わせることによって達成され得る。次いで、この標識された
血液または血液成分は、宿主に戻され、目的の治療的に有効な結合体をインビボ
で提供し得る。血液はまた、エキソビボでの取り扱いの間、凝集を防止するよう
処理され得る。If desired, the conjugate of interest may also combine blood with an anti-tumor drug derivative of the invention to allow covalent attachment of the anti-tumor drug derivative to a reactive functional group on a blood component,
They can then be prepared ex vivo by returning or administering these conjugated blood to the host. Furthermore, the above also purifies the individual blood components or a limited number of components (eg erythrocytes, immunoglobulins, serum albumin, etc.) first, and the component (s) is chemically reactive. It can be achieved by combining with these anti-tumor agents ex vivo. This labeled blood or blood component can then be returned to the host to provide the therapeutically effective conjugate of interest in vivo. Blood can also be treated to prevent aggregation during ex vivo handling.
【0143】
(5.抗腫瘍薬剤誘導体の治療的使用)
本発明の化合物(実施例に詳述される化合物を含むが、これらに限定されない
)は、抗癌活性を有する。抗癌活性を有する抗腫瘍薬剤の誘導体として、本発明
の化合物は、例えば、種々の疾患の処置に有用である:***、結腸、直腸、肺、
口腔咽頭部、下咽頭、食道、胃、膵臓、肝臓、胆嚢、胆管、小腸、尿路(腎臓、
膀胱および尿路上皮を含む)、女性の生殖管(子宮頸部、子宮、子宮内膜、卵巣
、絨毛癌および炎症性の(festational)栄養膜疾患を含む)、男性
の生殖管(前立腺、精嚢、精巣および生殖細胞腫瘍を含む)、内分泌腺(甲状腺
、副腎および下垂体を含む)、皮膚(血管腫(hmangiomas)、黒色腫
、肉腫(軟性組織の骨から生じる)およびカポージ肉腫、ウィルムス腫瘍、横紋
筋肉腫を含む)の原発性および転移性の固形腫瘍および癌腫;頭部および頸部、
脳、神経、眼および髄膜の腫瘍(星状細胞腫、神経膠腫、神経膠芽細胞腫、網膜
芽細胞腫、神経腫、神経芽細胞腫を含む);骨髄の腫瘍および造血系腫瘍、造血
悪性疾患(例えば、白血病)から生じる固形腫瘍(緑色腫、プラスマ細胞腫、菌
状息肉腫の斑および腫瘍、ならびに皮膚T細胞リンパ腫/白血病を含む);急性
リンパ性白血病、急性顆粒球性白血病および慢性顆粒球性白血病;リンパ腫(ホ
ジキンリンパ腫および非ホジキンリンパ腫を含む);自己免疫疾患(リウマチ、
免疫性関節炎および変形性関節症を含む)の予防;眼性疾患(糖尿病性網膜症、
未熟児網膜症、角膜移植拒絶、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、ルベオーシ
ス、網膜新生血管形成(黄斑変性および低酸素症に起因する)を含む);眼の異
常な新生血管形成状態;皮膚疾患(乾癬を含む);血管疾患(血管腫およびアテ
ローム性斑内の毛細血管増殖を含む);心筋脈管形成;斑新生血管形成;血友病
関節炎;血管線維腫;創傷顆粒化;内皮細胞の過剰または異常な刺激によって特
徴付けられる疾患(腸接着、クローン病、アテローム性硬化症、強皮症および過
形成性瘢痕、ならびに潰瘍(Helicobactorer pilori)を
含む病理学的結果として新脈管形成を有する疾患を含む);慢性関節リウマチ、
骨原性肉腫、変形性関節症、オステオペニア(例えば、骨粗しょう症)、歯周炎
、歯肉炎、角膜表皮潰瘍または胃潰瘍、腫瘍の転移および浸潤および増殖、網膜
症、創傷治癒(眼の炎症、軟性組織および骨組織の疾患、歯肉炎/歯周病)、血
管疾患(再狭窄)動脈瘤(anneuerysm)炎症、自己免疫疾患、および
稀な癌(例えば、絨毛癌)。5. Therapeutic Uses of Antitumor Drug Derivatives The compounds of the present invention, including but not limited to the compounds detailed in the Examples, have anticancer activity. As derivatives of anti-tumor agents with anti-cancer activity, the compounds of the invention are useful, for example, in the treatment of various diseases: breast, colon, rectum, lung,
Oropharynx, hypopharynx, esophagus, stomach, pancreas, liver, gallbladder, bile duct, small intestine, urinary tract (kidney,
Bladder and urothelium), female reproductive tract (including cervix, uterus, endometrium, ovary, choriocarcinoma and vestibular trophoblastic disease), male reproductive tract (prostate, sperm) Sac, testicular and germ cell tumors, endocrine glands (including thyroid gland, adrenal glands and pituitary gland), skin (hmangiomas), melanomas, sarcomas (derived from soft tissue bones) and Kaposi's sarcoma, Wilms tumor , Including rhabdomyosarcoma) solid tumors and carcinomas; head and neck;
Tumors of the brain, nerves, eyes and meninges (including astrocytomas, gliomas, glioblastomas, retinoblastomas, neuromas, neuroblastomas); marrow tumors and hematopoietic tumors, Solid tumors (including chloromas, plasmacytomas, mycosis fungoides plaques and tumors, and cutaneous T-cell lymphoma / leukemia) resulting from hematopoietic malignancies (eg, leukemia); acute lymphocytic leukemia, acute granulocytic leukemia And chronic granulocytic leukemia; lymphoma (including Hodgkin lymphoma and non-Hodgkin lymphoma); autoimmune disease (rheumatism,
Prevention of immune arthritis and osteoarthritis; ocular diseases (diabetic retinopathy,
Retinopathy of prematurity, corneal transplant rejection, post lens fibrosis, neovascular glaucoma, rubeosis, retinal neovascularization (due to macular degeneration and hypoxia); abnormal neovascularization of the eye; skin disease (Including psoriasis); vascular disease (including hemangiomas and capillary proliferation within atherosclerotic plaques); myocardial angiogenesis; plaque neovascularization; hemophilia arthritis; angiofibroma; wound granulation; Having angiogenesis as a pathological result including diseases characterized by excessive or abnormal stimulation (enteric adhesion, Crohn's disease, atherosclerosis, scleroderma and hyperplastic scars, and ulcers (Helicobacter pilori)) (Including diseases); rheumatoid arthritis,
Osteogenic sarcoma, osteoarthritis, osteopenia (eg, osteoporosis), periodontitis, gingivitis, corneal epidermal or gastric ulcer, tumor metastasis and invasion and proliferation, retinopathy, wound healing (eye inflammation, Diseases of soft and bone tissues, gingivitis / periodontal disease, vascular disease (restenosis) inflammation of the aneurysm, autoimmune diseases, and rare cancers (eg choriocarcinoma).
【0144】
本発明の化合物はまた、単独あるいは脈管形成疾患を処置するために患者に慣
用的に投与される放射療法および/または他の化学療法処置との組み合わせで使
用される場合に、上記の腫瘍からの転移を予防するために有用である。例えば、
固形腫瘍の処置において使用される場合、本発明の化合物は、α−インターフェ
ロン(inferon)、COMP(シクロホスファミド、ビンクリスチン、メ
トトレキサートおよびプレドニゾン)、エトポシド、mBACOD(メトトレキ
サート、ブレオマイシン、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ビンクリスチ
ンおよびデキサメサゾン)、PROMACE/MOPP(プレドニゾン、メトト
レキサート、ドキソルビシン、シクロホスファミド、タキソール、エトポシド/
メクロレタミン(mechloetamine)、ビンクリスチン、プレドニゾ
ンおよびプロカルバジン)、ビンクリスチン、ビンブラスチン、アンギオインヒ
ビン(angioinhibin)、TNP−470、ペントサンポリサルフェ
ート、血小板因子−4、アンギオスタチン、LM−609、SU−101、CM
−101、テクガラン(techgalan)、サリドマイド、SP−PGなど
のような化学療法剤と共に投与され得る。他の化学療法剤としては、アルキル化
剤(例えば、ナイトロジェンマスタード(メクロレタミン、メルファンクロラム
ブシル、シクロホスファミドおよびイホスファミドを含む);ニトロソウレア類
(カルムスチン、ロムスチン、セムスチンおよびストレプトゾシンを含む);ア
ルキルスルホン酸(ブスルファンを含む));トリアジン(ダカルバジンを含む
);エチレンイミン(ethyenimine)(チオテパおよびヘキサメチル
メラミンを含む);葉酸アナログ(メトトレキサートを含む);ピリミジンアナ
ログ(5−FU、シトシンアラビノシドを含む);プリンアナログ(6−メルカ
プトプリンおよび6−チオグアニンを含む);抗腫瘍抗生物質(アクチノマイシ
ンDを含む);アントラサイクリン(ドキソルビシン、ブレオマイシン、マイト
マイシンCおよびミトラマイシン(methramycine)を含む);ホル
モンおよびホルモンアンタゴニスト(タモキシフェンおよびコルチコステロイド
を含む)ならびにmioscellaneous薬剤(シスプラチンおよびブレ
キナルを含む);プラスミノゲン(クリングル−5)のフラグメントならびに他
のインテグリン結合基質由来のフラグメントが挙げられる。例えば、腫瘍は、微
小転移の静止を広げ、そしていかなる残存する原発性の腫瘍の増殖を阻害するた
めに、手術、放射療法または化学療法と、抗腫瘍薬剤誘導体の投与によって、慣
用的に処置され得る。The compounds of the invention may also be used as described above, when used alone or in combination with radiotherapy and / or other chemotherapeutic treatments that are routinely administered to patients to treat angiogenic disorders. It is useful for preventing metastases from tumors of For example,
When used in the treatment of solid tumors, the compounds of the present invention may be used in combination with α-inferon, COMP (cyclophosphamide, vincristine, methotrexate and prednisone), etoposide, mBACOD (methotrexate, bleomycin, doxorubicin, cyclophosphamide). , Vincristine and dexamethasone), PROMACE / MOPP (prednisone, methotrexate, doxorubicin, cyclophosphamide, taxol, etoposide /
Mechloetamine, vincristine, prednisone and procarbazine), vincristine, vinblastine, angioinhibin, TNP-470, pentosan polysulfate, platelet factor-4, angiostatin, LM-609, SU-101, CM.
-101, techgalan, thalidomide, SP-PG and the like may be administered with chemotherapeutic agents. Other chemotherapeutic agents include alkylating agents such as nitrogen mustards (including mechlorethamine, melphan chlorambucil, cyclophosphamide and ifosfamide); nitrosoureas (including carmustine, lomustine, semustine and streptozocin). ); Alkyl sulfonic acid (including busulfan)); Triazine (including dacarbazine); Ethyleneimine (including thiotepa and hexamethylmelamine); Folic acid analog (including methotrexate); Pyrimidine analog (5-FU, cytosine) Arabinoside); purine analogues (including 6-mercaptopurine and 6-thioguanine); antitumor antibiotics (including actinomycin D); anthracyclines (doxorubicin, bleo) Isins, including mitomycin C and methramycin); hormones and hormone antagonists (including tamoxifen and corticosteroids) and bioscellaneous drugs (including cisplatin and brequinal); fragments of plasminogen (kringle-5) and other integrins. Examples include fragments derived from the binding substrate. For example, tumors are routinely treated by surgery, radiation therapy or chemotherapy with the administration of anti-tumor drug derivatives to spread the stasis of micrometastases and inhibit the growth of any remaining primary tumor. obtain.
【0145】
(6.抗腫瘍薬剤誘導体の投与)
本発明に従って、抗腫瘍薬剤誘導体は、任意の経路による投与によって調製さ
れ得るか、または任意の経路によって投与され得る。抗腫瘍薬剤誘導体は、生理
学的に受容可能な媒体(例えば、脱イオン水、リン酸緩衝化生理食塩水(PBS
)、生理食塩水、水性エタノールまたは他のアルコール、血漿、タンパク質溶液
、マンニトール、水性グルコース、アルコール、植物油など)において投与され
る。含まれ得る他の添加剤としては、緩衝液(媒体が一般に約5〜10の範囲の
pHで緩衝化され、緩衝液が一般に約50〜250mMの濃度範囲である)、塩
(その塩の濃度は、一般に約5〜500mMの範囲にある)、生理学的に受容可
能な安定剤などが挙げられる。これらの組成物は、簡便な保存および輸送のため
に凍結乾燥化され得る。6. Administration of Antitumor Drug Derivatives In accordance with the present invention, antitumor drug derivatives can be prepared by administration by any route or can be administered by any route. The anti-tumor drug derivative is a physiologically acceptable medium (eg, deionized water, phosphate buffered saline (PBS)
), Saline, aqueous ethanol or other alcohol, plasma, protein solution, mannitol, aqueous glucose, alcohol, vegetable oil, etc.). Other additives that may be included include buffers (vehicles generally buffered at a pH in the range of about 5-10, buffers generally in the concentration range of about 50-250 mM), salts (concentrations of the salts). Are generally in the range of about 5-500 mM), physiologically acceptable stabilizers and the like. These compositions can be lyophilized for convenient storage and shipping.
【0146】
目的の抗腫瘍薬剤誘導体は、大部分について、非経口的(例えば、脈管内(I
V)、動脈内(IA)、筋内(IM)、皮下(SC)など)で投与される。投与
は、輸液による適切な状態にあり得る。いくつかの例において、官能基の反応が
比較的ゆっくりである場合、投与は、経口、鼻内、膣内、直腸、経皮またはエア
ロゾルであり得、その結合体の性質は、血管系への輸送を可能にする。通常、単
回注射が使用されるが、1回より多い注射も、所望の場合には使用され得る。抗
腫瘍薬剤誘導体は、任意の簡便な手段(シリンジ、トロカール、カテーテルなど
を含む)によって投与され得る。投与の特定の形態は、投与される量に依存して
変化する(単回ボーラスまたは連続投与のいずれであるか、など)。好ましくは
、投与は、脈管内であり、導入部位は、本発明には重要でなく、好ましくは、速
い血流が存在する部位(例えば、静脈内、末梢静脈または中心静脈)である。他
の経路は、投与が徐放技術または保護マトリクスと組み合わせられる用途を見い
出し得る。抗腫瘍薬剤、アナログまたは誘導体が、血液成分と反応し得るように
、血液中で効果的に分散されることが意図される。結合体の濃度は、広範に変化
し、一般には、約1pg/ml〜50mg/mlの範囲である。脈管内投与され
る全量は、一般に、約0.1mg/ml〜約10mg/mlの範囲であり、より
通常には、約1mg/ml〜約5mg/mlの範囲である。Anti-tumor drug derivatives of interest are for the most part parenteral (eg intravascular (I
V), intraarterial (IA), intramuscular (IM), subcutaneous (SC), etc.). Administration can be in the appropriate state by infusion. In some cases, where the reaction of the functional groups is relatively slow, the administration may be oral, nasal, vaginal, rectal, transdermal or aerosol, the nature of the conjugate of which is to the vasculature. Enable transportation. Usually a single injection is used, but more than one injection can be used if desired. The anti-tumor drug derivative can be administered by any convenient means, including syringes, trocars, catheters and the like. The particular form of administration will vary depending on the dose administered (whether a single bolus or continuous administration, etc.). Preferably the administration is intravascular and the site of introduction is not critical to the invention and is preferably the site where fast blood flow is present (eg intravenous, peripheral or central vein). Other routes may find use in which administration is combined with sustained release techniques or protective matrices. It is contemplated that the anti-tumor drug, analog or derivative is effectively dispersed in the blood so that it may react with blood components. Conjugate concentrations vary widely and generally range from about 1 pg / ml to 50 mg / ml. The total amount administered intravascularly will generally be in the range of about 0.1 mg / ml to about 10 mg / ml, more usually in the range of about 1 mg / ml to about 5 mg / ml.
【0147】
血液中の長期存続する成分(例えば、免疫グロブリン、血清アルブミン、赤血
球および血小板)への結合によって、多くの利点が生じる。抗腫瘍薬剤化合物の
活性は、数日〜数週間にわたる。1回の投与のみが、この期間の間に与えられる
必要とされるだけである。より高い特異性が達成され得る。なぜなら、この活性
化合物は、大きい分子に主に結合され、細胞内に取り込まれて他の生理学的プロ
セスを干渉する可能性が低いからである。Binding to long-lived components in the blood, such as immunoglobulins, serum albumin, red blood cells and platelets, results in many advantages. The activity of anti-tumor drug compounds ranges from days to weeks. Only one dose need be given during this period. Higher specificity can be achieved. This is because the active compound is predominantly bound to large molecules and is unlikely to be taken up intracellularly and interfere with other physiological processes.
【0148】
哺乳動物宿主の血液は、抗腫瘍薬剤化合物の存在について1回以上モニターさ
れ得る。宿主の血液の一部またはサンプルを取り出して、抗腫瘍薬剤が、治療的
に活性であるのに十分な量でこの長期存続する血液成分に結合しているか否かを
決定し得、その後、血中の抗腫瘍薬剤化合物のレベルを決定し得る。所望の場合
、抗腫瘍薬剤誘導体分子がどの血液成分に結合されたかもまた決定し得る。これ
は、特に、非特異的な抗腫瘍薬剤誘導体を使用する場合に重要である。特異的な
マレイミド抗腫瘍薬剤誘導体について、血清アルブミンおよびIgGの半減期を
計算することがはるかに簡単になる。The blood of a mammalian host can be monitored one or more times for the presence of anti-tumor drug compounds. A portion or sample of the host's blood may be removed to determine if the anti-tumor drug is bound to this long-lived blood component in an amount sufficient to be therapeutically active, and then the blood The level of the anti-tumor drug compound in can be determined. If desired, it can also be determined to which blood component the antitumor drug derivative molecule was bound. This is especially important when using non-specific anti-tumor drug derivatives. Calculating serum albumin and IgG half-lives for specific maleimide antitumor drug derivatives is much easier.
【0149】
従って、本発明は、このような血液成分(特に血液タンパク質(例えば、アル
ブミン))との抗腫瘍薬剤誘導体の結合体、ならびにヒトまたは他の哺乳動物患
者へのこれらの投与方法に関する。The invention therefore relates to conjugates of antitumor drug derivatives with such blood components, in particular blood proteins (eg albumin), as well as methods for their administration to human or other mammalian patients.
【0150】
(7.抗腫瘍薬剤誘導体の濃度および薬物速度論決定)
本発明の別の局面は、抗腫瘍薬剤の誘導体および結合体に特異的な抗体を使用
して生物学的サンプル(例えば、血液)中の抗腫瘍薬剤の誘導体および結合体の
濃度を決定するための方法、およびこのような抗腫瘍薬剤、アナログならびに/
あるいはそれらの誘導体または結合体に潜在的に関連する毒性に対する処置とし
てのこのような抗体の使用に関する。これは有利であり、なぜなら、患者におけ
るインビボでの抗腫瘍薬剤誘導体の安定性および生存性の増加は、処置の間の新
たな問題(毒性についての可能性の増加を含む)を生じるからである。特定の抗
腫瘍薬剤誘導体に対して特異性を有する抗腫瘍薬剤抗体(モノクローナルまたは
ポリクローナルのいずれか)の使用は、任意のこのような問題の媒介を補助し得
る。抗体は、その特定の抗腫瘍薬剤誘導体あるいはこの薬剤の免疫原性フラグメ
ントまたはこの薬剤の抗原決定基に対応する合成免疫原で免疫した宿主から生成
または誘導され得る。好ましい抗体は、抗腫瘍薬剤誘導体のネイティブ形態、誘
導体形態および結合体形態に対する、高い特異性および親和性を有する。このよ
うな抗体はまた、酵素、蛍光色素または放射性標識で標識され得る。7. Concentration and Pharmacokinetic Determination of Antitumor Drug Derivatives Another aspect of the invention is the use of antibodies specific for antitumor drug derivatives and conjugates in biological samples (eg, Method for determining the concentration of derivatives and conjugates of antitumor agents in blood), and such antitumor agents, analogues and / or
Alternatively, it relates to the use of such antibodies as a treatment for the toxicity potentially associated with their derivatives or conjugates. This is advantageous because the increased stability and survival of an anti-tumor drug derivative in vivo in a patient creates new problems during treatment, including an increased likelihood of toxicity. . The use of anti-tumor drug antibodies (either monoclonal or polyclonal) with specificity for a particular anti-tumor drug derivative may help mediate any such problems. Antibodies may be generated or derived from a host immunized with a particular anti-tumor drug derivative or immunogenic fragment of this drug or a synthetic immunogen corresponding to an antigenic determinant of this drug. Preferred antibodies have high specificity and affinity for the native, derivative and conjugate forms of antitumor drug derivatives. Such antibodies may also be labeled with enzymes, fluorescent dyes or radioactive labels.
【0151】
誘導化抗腫瘍剤に特異的な抗体は、誘導化抗腫瘍剤−特異的抗体の誘導のため
の精製された抗腫瘍剤を用いることによって産生され得る。抗体の誘導によって
、動物への注射による免疫応答の刺激だけでなく、合成抗体または他の特異的に
結合する分子の産生における類似の工程(例えば、組換え免疫グロブリンライブ
ラリーのスクリーニング)も意図される。モノクロナール抗体およびポリクロナ
ール抗体の両方は、当該分野で周知の手順によって産生され得る。Antibodies specific for derivatized anti-tumor agents can be produced by using purified anti-tumor agents for the induction of derivatized anti-tumor agent-specific antibodies. The induction of antibodies contemplates not only stimulation of the immune response by injection into animals, but also similar steps in the production of synthetic antibodies or other specifically binding molecules (eg, screening of recombinant immunoglobulin libraries). It Both monoclonal and polyclonal antibodies can be produced by procedures well known in the art.
【0152】
抗治療剤抗体を使用して、抗腫瘍剤誘導体の投与によって誘導される毒性を処
置し得、そしてエキソビボまたはインビボで使用され得る。エキソビボ法として
は、固体支持体に固定した抗治療剤抗体を使用する毒性のための免疫透析処置が
挙げられる。インビボ法としては、抗体−薬剤複合体のクリアランスを誘導する
のに有効な量での抗治療剤抗体の投与が挙げられる。Anti-therapeutic agent antibodies may be used to treat toxicity induced by administration of anti-tumor agent derivatives and may be used ex vivo or in vivo. Ex vivo methods include immunodialysis treatment for toxicity using anti-therapeutic antibody immobilized on a solid support. In vivo methods include administration of the anti-therapeutic agent antibody in an amount effective to induce clearance of the antibody-drug complex.
【0153】
この抗体を使用して、滅菌条件下で患者の血液とこの抗体とを接触させること
によってこの血液からエキソビボで抗腫瘍剤誘導体を除去し得る。例えば、この
抗体を固定するか、またはカラムマトリクス上に固定し得、そしてこの患者の血
液は、患者から取り出され得、そしてこのマトリクス上を通過され得る。抗腫瘍
剤誘導体または結合体は抗体に結合され、次いで、低濃度の抗腫瘍剤誘導体また
は結合体を含む血液は、患者の循環器系に戻され得る。除去される抗腫瘍剤化合
物の量は、圧力および流速を調節することによって制御され得る。この抗腫瘍剤
誘導体および結合体の、患者の血液の血漿成分からの優先的な除去は、例えば、
半透過膜の使用か、または抗治療抗体を含むマトリクス上に血漿成分を透過する
先行技術において公知の方法によって細胞成分から血漿成分をまず分離すること
によって効果的であり得る。あるいは、抗腫瘍剤−結合体化血球(赤血球を含む
)の優先的な除去は、患者の血液中の血球を収集し、そして濃縮し、そしてこれ
らの血球を、固定された抗治療抗体と接触させ、患者の血液の血清成分の排除を
することによって効果的であり得る。The antibody can be used to remove antineoplastic drug derivatives ex vivo from the blood by contacting the antibody with the blood of a patient under sterile conditions. For example, the antibody can be immobilized or immobilized on a column matrix, and the patient's blood can be removed from the patient and passed over the matrix. The anti-tumor agent derivative or conjugate is conjugated to the antibody, and blood containing low concentrations of the anti-tumor agent derivative or conjugate can then be returned to the patient's circulatory system. The amount of anti-tumor drug compound removed can be controlled by adjusting the pressure and flow rate. Preferential removal of this antineoplastic derivative and conjugate from the plasma component of the patient's blood has been described by
It can be effective by first separating the plasma component from the cellular component by the use of a semi-permeable membrane or by methods known in the prior art to permeate the plasma component on a matrix containing anti-therapeutic antibodies. Alternatively, preferential removal of anti-tumor agent-conjugated blood cells (including red blood cells) collects and concentrates blood cells in the patient's blood and contacts these blood cells with immobilized anti-therapeutic antibody. And may be effective by eliminating serum components of the patient's blood.
【0154】
抗治療抗体は、インビボで患者に非経口的に投与され得る。この患者は、治療
のための抗腫瘍剤誘導体または結合体を受けている。この抗体は、抗腫瘍剤化合
物および結合体を結合する。一旦結合すると、抗腫瘍剤誘導体活性は、完全にブ
ロックされ、それによって患者の血流における生物学的に効果的な濃度の抗腫瘍
剤誘導体を減少し、そして有害な副作用を最小化されなければ、妨害される。さ
らに、結合抗体−抗腫瘍剤複合体は、抗腫瘍剤化合物および複合体の、患者の血
流からのクリアランスを容易にする。The anti-therapeutic antibody may be administered to a patient parenterally in vivo. This patient has received a therapeutic anti-tumor agent derivative or conjugate. This antibody binds anti-tumor drug compounds and conjugates. Once bound, the antineoplastic derivative activity must be completely blocked, thereby reducing the biologically effective concentration of the antineoplastic derivative in the patient's bloodstream and minimizing adverse side effects. , Disturbed. In addition, the bound antibody-anti-tumor agent complex facilitates clearance of the anti-tumor agent compound and conjugate from the patient's bloodstream.
【0155】
本発明の抗腫瘍剤誘導体の薬物速度論プロフィールを決定するために、14C放
射能標識は、最も効果的な方法である。なぜならば、このような少量の薬物が、
投与後に効力を示すのに必要であるからである。本発明において記載される化合
物の薬物速度論プロフィールは、曲線下での領域(AUC)に関して説明される
。このAUCは、この場合、この反応基が1つの工程で結合されるか、または加
水分解的に不安定な結合と結合される場合、市販の14C標識した薬物を用いて測
定される。複数工程合成を含む場合は、反応基上の14C放射能標識を有し、そし
て最終工程またはこの合成における非常に遅い段階のいずれかにおいて抗腫瘍剤
に結合される。薬物速度論評価は、適切な濃度の放射能標識した抗腫瘍剤誘導体
における生理学的に適切な溶液をラットに単一ボーラス用量で胸部における腹腔
内を介してか、または好ましくは、尾部の静脈における静脈内を介してか、また
は頸部動脈に最初に注射することによってなされる。測定は、以下の時点で行う
:−2時間、0時間、0.25時間、0.5時間、1時間、2時間、4時間、2
4時間、48時間。ここで適切な数の試料が、各時点において使用される。この
AUCは、血液、および種々の器官(肝臓、腎臓、心臓、肺、脳、脂肪、筋肉お
よび骨を含んでもよいし、含まなくてもよい)についての時間に対してプロット
された放射能カウントから評価される。インビトロ活性が減少する場合でも、改
善された薬物速度論プロフィールは、薬力学的効果を改善し、そして大きな効力
を生じ、そして副作用を減少した。The 14 C radiolabel is the most effective method for determining the pharmacokinetic profile of antitumor drug derivatives of the present invention. Because such a small amount of drug
This is because it is necessary to show efficacy after administration. The pharmacokinetic profiles of the compounds described in this invention are described in terms of the area under the curve (AUC). The AUC is then measured using a commercially available 14 C-labeled drug when the reactive group is attached in one step or with a hydrolytically labile bond. When including a multi-step synthesis, it has a 14 C radiolabel on the reactive group and is attached to the antineoplastic agent either in the final step or at a very late step in the synthesis. Pharmacokinetic evaluation was performed by intraperitoneally intraperitoneally in the chest at a single bolus dose to rats with physiologically relevant solutions in radiolabeled antitumor drug derivatives at appropriate concentrations or, preferably, in the tail vein. It is done either intravenously or by first injecting the carotid artery. The measurements are taken at the following times: -2 hours, 0 hours, 0.25 hours, 0.5 hours, 1 hour, 2 hours, 4 hours, 2 hours.
4 hours, 48 hours. Here, the appropriate number of samples is used at each time point. This AUC is a count of radioactivity plotted against time for blood and various organs, which may or may not include liver, kidney, heart, lung, brain, fat, muscle and bone. Evaluated from. Even if the in vitro activity was reduced, the improved pharmacokinetic profile improved the pharmacodynamic effect and produced greater efficacy and reduced side effects.
【0156】
十分に記載された本発明は、ここで、以下の非限定的な実施例によって例示さ
れる。本発明は、本発明の範囲を限定するというよりはむしろ本発明を例示する
以下の実施例を参照することによってより容易に理解される。The fully described invention is now illustrated by the following non-limiting examples. The invention will be more readily understood by reference to the following examples which illustrate the invention rather than limit the scope of the invention.
【0157】
(実施例1)
(分子内に他の感受性官能基がないカルボン酸からのNHS誘導体の合成)
分子内に他の感受性官能基のないカルボン酸を含む改変されるべき化合物薬物
(1mmol)およびN−ヒドロキシスクシンイミド(1.1mmol)の、無
水CH2Cl2(10mL)中の溶液に、EDC(2.2mmol)を添加する。
この溶液を室温で20時間または完了するまで撹拌する。次いで、この反応物を
、水、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そ
して減圧下で濃縮する。この残渣を最小量の溶媒に溶解し、そしてクロマトグラ
フィーにより精製するか、または適切な溶媒系から再結晶して、NHS誘導体を
得る。(Example 1) (Synthesis of NHS derivative from carboxylic acid having no other sensitive functional group in molecule) Compound drug to be modified containing carboxylic acid having no other sensitive functional group in the molecule (1 mmol ) and N- hydroxysuccinimide (1.1 mmol), in solution in anhydrous CH 2 Cl 2 (10mL), adding EDC (2.2 mmol).
The solution is stirred at room temperature for 20 hours or until complete. The reaction is then washed with water, saturated sodium chloride, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue is dissolved in a minimum amount of solvent and purified by chromatography or recrystallized from a suitable solvent system to give the NHS derivative.
【0158】
(実施例2)
(アミノ官能基および/またはチオール官能基ならびにカルボン酸を含む分子
からの、NHS誘導体の合成)
遊離のアミノ基またはチオール基が分子内に存在する場合には、これらの官能
基を、NHS誘導体の添加を行う前に、保護することが好ましい。例えば、分子
が遊離アミノ基を含む場合には、実施例1に記載する化学を実施する前に、この
アミンをFmocまたは好ましくはtBocで保護されたアミンに転換すること
が、必要である。このアミン官能基は、NHS誘導体の調製の後に、脱保護され
ない。従って、この方法は、薬理学的な所望の効果を誘導するためにアミン基が
遊離している必要はない化合物のみに対して、適用される。分子の元の生物学的
特性を保持するためにはアミノ基が遊離している必要がある場合には、実施例3
〜6に記載される、別の型の化学を実施しなければならない。Example 2 Synthesis of NHS Derivatives from Molecules Containing Amino and / or Thiol Functional Groups and Carboxylic Acids If free amino or thiol groups are present in the molecule, these It is preferred to protect the functional groups of (1) before the addition of the NHS derivative. For example, if the molecule contains a free amino group, it is necessary to convert this amine to an Fmoc or preferably tBoc protected amine before carrying out the chemistry described in Example 1. This amine functional group is not deprotected after preparation of the NHS derivative. Therefore, this method applies only to compounds that do not need to have an amine group free to induce the desired pharmacological effect. Example 3 where the amino group needs to be free to retain the original biological properties of the molecule.
Another type of chemistry, described in ~ 6, must be performed.
【0159】
(実施例3)
(アミノ官能基またはチオール官能基を含み、そしてカルボン酸を含まない分
子からの、NHS誘導体の合成)
選択された分子がカルボン酸を含まない場合には、二官能性リンカーのアレイ
を使用して、この分子を反応性NHS誘導体に転換し得る。例えば、DMF中に
エチレングリコール−ビス(スクシンイミジルスクシネート)(EGS)および
トリエチルアミンを溶解し、そして遊離アミノ含有分子(EGFが多い10:1
の比で)に添加することにより、モノNHS誘導体が生成する。Example 3 Synthesis of NHS Derivatives from Molecules Containing Amino or Thiol Functional Groups and No Carboxylic Acids If the selected molecule is carboxylic acid free, then difunctional. An array of reactive linkers can be used to convert this molecule into a reactive NHS derivative. For example, ethylene glycol-bis (succinimidyl succinate) (EGS) and triethylamine are dissolved in DMF and free amino-containing molecules (EGF-rich 10: 1).
In the ratio of 1) to produce the mono-NHS derivative.
【0160】
チオール誘導体化分子からNHS誘導体を生成するためには、DMF中のN−
[4−マレイミドブチルオキシ]スクシンイミドエステル(GMBS)およびト
リエチルアミンを使用し得る。このマレイミド基は、遊離チオールと反応し、そ
してNHS誘導体が、この反応混合物から、シリカゲルでのクロマトグラフィー
またはHPLCによって精製される。To produce NHS derivatives from thiol derivatized molecules, N- in DMF is used.
[4-Maleimidobutyloxy] succinimide ester (GMBS) and triethylamine may be used. The maleimide group reacts with the free thiol and the NHS derivative is purified from the reaction mixture by chromatography on silica gel or HPLC.
【0161】
(実施例4)
(複数の化学的官能基を含む分子からの、NHS誘導体の合成)
各場合を分析し、そして異なる様式で解決しなければならない。しかし、市販
の保護基および二官能性リンカーの大きなアレイのおかげで、本発明は、分子を
誘導体化するための好ましくはほんの1工程(実施例1または3に記載されるよ
うな)の化学、または2工程(実施例2に記載され、そして感受性基の事前の保
護を包含する)、または3工程(保護、活性化、および脱保護)を用いて、任意
の分子に適用可能である。例外的な状況下においてのみ、分子を活性なNHS誘
導体またはマレイミド誘導体に転換するために、複数工程(3工程を超える)の
合成を使用する必要がある。Example 4 Synthesis of NHS Derivatives from Molecules Containing Multiple Chemical Functional Groups Each case must be analyzed and solved in a different manner. However, because of the large array of commercially available protecting groups and bifunctional linkers, the present invention preferably uses only one step of chemistry to derivatize the molecule (as described in Example 1 or 3), Alternatively, two steps (as described in Example 2 and including prior protection of sensitive groups) or three steps (protection, activation, and deprotection) can be used to apply to any molecule. Only under exceptional circumstances it is necessary to use a multi-step (more than three steps) synthesis to convert the molecule into an active NHS or maleimide derivative.
【0162】
(実施例5)
(遊離アミノ基および遊離カルボン酸を含む分子からの、マレイミド誘導体の
合成)
マレイミド誘導体を、アミノ誘導体化分子から生成するためには、DMF中の
N−[4−マレイミドブチルオキシ]スクシンイミドエステル(GMBS)およ
びトリエチルアミンを使用し得る。このスクシンイミドエステル基は、遊離アミ
ノ酸と反応し、そしてマレイミド誘導体が、この反応混合物から、結晶化または
シリカでのクロマトグラフィーまたはHPLCによって、精製される。Example 5 Synthesis of Maleimide Derivatives from Molecules Containing Free Amino Groups and Free Carboxylic Acids To generate maleimide derivatives from amino derivatized molecules, N- [4- in DMF was used. Maleimidobutyloxy] succinimide ester (GMBS) and triethylamine may be used. The succinimide ester group reacts with the free amino acid and the maleimide derivative is purified from the reaction mixture by crystallization or chromatography on silica or HPLC.
【0163】
(実施例6)
(複数の他の官能基を含み、そして遊離カルボン酸を含まない分子からの、マ
レイミド誘導体の合成)
選択された分子がカルボン酸を含まない場合には、二官能性架橋剤のアレイを
使用して、この分子を反応性のNHS誘導体に転換し得る。例えば、マレイミド
プロピオン酸(MPA)を遊離アミンとカップリングさせて、DMF中のHBT
U/HOBt/DIEA活性化を使用して、遊離アミンとMPAのカルボン酸と
の反応によって、マレイミド誘導体を生成し得る。Example 6 Synthesis of Maleimide Derivatives from Molecules Containing Multiple Other Functional Groups and No Free Carboxylic Acids If the selected molecule is carboxylic acid free, then difunctional. An array of reactive crosslinkers can be used to convert the molecule into a reactive NHS derivative. For example, coupling maleimidopropionic acid (MPA) with a free amine to give HBT in DMF.
U / HOBt / DIEA activation can be used to generate maleimide derivatives by reaction of free amines with carboxylic acids of MPA.
【0164】 (実施例7) (ドキソルビシン誘導体(MPA−AEEA−ドキソルビシン)の調製)[0164] (Example 7) (Preparation of doxorubicin derivative (MPA-AEEA-doxorubicin))
【0165】[0165]
【化24】
ドキソルビシン誘導体MPA−AEEA−ドキソルビシンを合成するために、
ドキソルビシンを、以下の手順の使用によって、最初に14−ブロモドキソルビ
シンに転換する:
ドキソルビシン塩酸塩(226mg)を、4mLの無水メタノールに溶解し、
そして0.2mLのオルトギ酸メチルおよび8mLのジオキサンと混合する。0
.83mLの塩化メチレン中臭素溶液(10%w/w)を添加した後に、この反
応を室温で40分間行う。この反応混合物を50mLの乾燥ジエチルエーテルに
注ぎ、そして形成する沈殿物を遠心分離によって収集する。この上清液を廃棄す
る。5mLの乾燥エーテルで2回洗浄した後に、この沈殿物を、撹拌しながら1
2mLのアセトンで室温で1時間処理する。処理した沈殿物を遠心分離により収
集し、エーテルで2回リンスし、そして乾燥させて、226mgの14−ブロモ
ドキソルビシンの赤色粉末を得る(収率87%)。[Chemical formula 24] In order to synthesize the doxorubicin derivative MPA-AEEA-doxorubicin,
Doxorubicin is first converted to 14-bromodoxorubicin by using the following procedure: Doxorubicin hydrochloride (226 mg) was dissolved in 4 mL anhydrous methanol,
Then mix with 0.2 mL methyl orthoformate and 8 mL dioxane. 0
. After addition of 83 mL bromine solution in methylene chloride (10% w / w), the reaction is carried out at room temperature for 40 minutes. The reaction mixture is poured into 50 mL dry diethyl ether and the precipitate that forms is collected by centrifugation. Discard this supernatant. After washing twice with 5 mL of dry ether, the precipitate was stirred 1
Treat with 2 mL of acetone at room temperature for 1 hour. The treated precipitate is collected by centrifugation, rinsed twice with ether and dried to give 226 mg of 14-bromodoxorubicin red powder (yield 87%).
【0166】
次いで、得られた14−ブロモドキソルビシンを、14−ブロモドキソルビシ
ンをN,N−ジメチルホルムアミド(DMF)中のアミノ−AEEA−MPAで
、ジイソプロピルエチルアミン(DIEA)の存在下で処理し、そして60℃で
1時間加熱することによって、単一工程でMPA−AEEA−ドキソルビシンに
転換する。具体的には、DMC(2mL)およびジイソプロピルエチルアミン(
0.2mL)中の、14−ブロモドキソルビシン(0.1mmol)およびME
EA−EDA.HCl([N−(2−アミノ)エチル2−(2−マレイミド)エ
トキシエトキシアセトアミド、0.4mmol]を、2時間かまたは(TLCに
より)完了するまで撹拌する。この反応混合物を、減圧下で濃縮し、そしてその
残基をエーテルで粉砕する。この生成物を、5〜60%アセトニトリルのグラジ
エントを使用する分取HPLCで精製して、MPA−AEEA−ドキソルビシン
を得る。この手順は、14−臭素を置換するための窒素原子の使用に限定されな
い。当業者はまた、アルコレート、二級アミン、一級もしくは二級アミデートま
たは一級もしくは二級スルホンアミデートを使用し得る。The resulting 14-bromodoxorubicin is then treated with 14-bromodoxorubicin with amino-AEEA-MPA in N, N-dimethylformamide (DMF) in the presence of diisopropylethylamine (DIEA), and Conversion to MPA-AEEA-doxorubicin is carried out in a single step by heating at 60 ° C. for 1 hour. Specifically, DMC (2 mL) and diisopropylethylamine (
14-bromodoxorubicin (0.1 mmol) and ME in 0.2 mL)
EA-EDA. Stir HCl ([N- (2-amino) ethyl 2- (2-maleimido) ethoxyethoxyacetamide, 0.4 mmol] for 2 h or until complete (by TLC). The reaction mixture under reduced pressure. Concentrate and triturate the residue with ether.The product is purified by preparative HPLC using a gradient of 5-60% acetonitrile to give MPA-AEEA-doxorubicin. It is not limited to the use of a nitrogen atom to replace bromine.Practitioners in the art may also use alcoholates, secondary amines, primary or secondary amidates or primary or secondary sulfonamidates.
【0167】 (実施例8) (ドキソルビシン誘導体(MPA−ドキソルビシン)の調製)[0167] (Example 8) (Preparation of doxorubicin derivative (MPA-doxorubicin))
【0168】[0168]
【化25】
MPA−ドキソルビシンを合成するために、上記実施例7で合成した14−ブ
ロモドキソルビシン(0.1mmol)を、DMF中のアジ化ナトリウムでの処
理によって、まず14−アジドに転換する。アジドを合成するために、14−ブ
ロモドキソルビシンを、MeOH中のBoc2O(0.4mmol)で60分間
または完了するまで処理する。この溶媒をエバポレートし、そしてその残渣を、
次の工程に使用する。次の工程において、DMF(0.1mL)中の、この残渣
に含まれる粗製生成物(0.1mmol)およびNaN3(0.4mmol)を
、室温で16時間または完了するまで(TLC)撹拌する。この生成物を塩化メ
チレンで抽出し、そして合わせた塩化メチレン層を水で洗浄し、そして乾燥する
。この溶媒をエバポレートし、そしてその残渣を、シリカゲルでのフラッシュカ
ラムクロマトグラフィーで精製して、ドキソルビシンアジドを得る。[Chemical 25] To synthesize MPA-doxorubicin, 14-bromodoxorubicin (0.1 mmol) synthesized in Example 7 above is first converted to 14-azide by treatment with sodium azide in DMF. To synthesize the azide, 14-bromodoxorubicin is treated with Boc 2 O (0.4 mmol) in MeOH for 60 minutes or until complete. The solvent was evaporated and the residue was
Used in the next step. In the next step, the crude product (0.1 mmol) and NaN 3 (0.4 mmol) contained in this residue in DMF (0.1 mL) is stirred at room temperature for 16 hours or until complete (TLC). . The product is extracted with methylene chloride and the combined methylene chloride layers are washed with water and dried. The solvent is evaporated and the residue is purified by flash column chromatography on silica gel to give doxorubicin azide.
【0169】
次いで、14−アジドドキソルビシンを、以下の方法を使用してアミノドキソ
ルビシンに転換する:1,3−プロパンジチオール(0.3ml)を、DMF(
1ml)中のドキソルビシンアジド(0.1mmol)の溶液に、室温で添加す
る。この反応混合物を、16時間または完了するまで撹拌する。この溶媒を減圧
下でエバポレートし、14−アミノドキソルビシンを得、これを、次の工程にお
いて粗製生成物として使用する。14-Azidoxorubicin is then converted to aminodoxorubicin using the following method: 1,3-propanedithiol (0.3 ml) is added to DMF (
To a solution of doxorubicin azide (0.1 mmol) in 1 ml) at room temperature. The reaction mixture is stirred for 16 hours or until complete. The solvent is evaporated under reduced pressure to give 14-aminodoxorubicin, which is used as crude product in the next step.
【0170】
N−メチルモルホリン(1mmol)を、アミノドキソルビシン(0.1mm
ol)およびスクシニル3−マレイミドプロパノエート(3−MPA)を含む塩
化メチレン溶液(10mL)に添加する。この反応物を、30分間または完了す
るまで撹拌する。塩化メチレンを水で洗浄し、乾燥する(Na2SO4)。この溶
媒をエバポレートし、そして生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーによ
って精製する。次いで、この生成物をTFA(0.5mL)で10分間処理する
。TFAをエバポレートし、そしてその残渣を分取HPLCで精製して、MPA
−ドキソルビシンを得る。N-methylmorpholine (1 mmol) was added to aminodoxorubicin (0.1 mm
ol) and succinyl 3-maleimidopropanoate (3-MPA) in methylene chloride solution (10 mL). The reaction is stirred for 30 minutes or until complete. The methylene chloride is washed with water and dried (Na 2 SO 4 ). The solvent is evaporated and the product is purified by flash column chromatography. The product is then treated with TFA (0.5 mL) for 10 minutes. The TFA was evaporated and the residue was purified by preparative HPLC to give MPA
Obtain doxorubicin.
【0171】 (実施例9) (ドキソルビシン誘導体(NHS−C6−ドキソルビシン)の調製)[0171] (Example 9) (Preparation of doxorubicin derivative (NHS-C6-Doxorubicin))
【0172】[0172]
【化26】
NHS−C6−ドキソルビシンを合成するために、実施例8において調製した
14−アミノドキソルビシンを、DMF(0.5mL)中のジ−N−ヒドロキシ
スクシニルアジペート(0.14mmol)と室温で1時間反応させることによ
って、6炭素鎖に転換する。次いで、この反応混合物を濃縮し、その残渣をジク
ロロメタンで希釈したTFAで処理し、再度濃縮し、そして得られるNHS−C
6−ドキソルビシンを、HPLCによって精製する。[Chemical formula 26] To synthesize NHS-C6-Doxorubicin, 14-aminodoxorubicin prepared in Example 8 is reacted with di-N-hydroxysuccinyl adipate (0.14 mmol) in DMF (0.5 mL) for 1 hour at room temperature. To convert to a 6 carbon chain. The reaction mixture is then concentrated, the residue treated with TFA diluted with dichloromethane, concentrated again and the resulting NHS-C.
6-Doxorubicin is purified by HPLC.
【0173】
(実施例10)
(タキソール誘導体(MPA−AEE−タキソール)の調製)
あらゆる切断を防ぐために、加水分解的に安定な結合としてエーテル結合を選
択した。MPA−AEE−タキソールの合成を、以下にタキソールから記載する
。Example 10 Preparation of Taxol Derivative (MPA-AEE-Taxol) The ether bond was chosen as the hydrolytically stable bond to prevent any cleavage. The synthesis of MPA-AEE-Taxol is described below from Taxol.
【0174】[0174]
【化27】
タキソールを、以下の方法によって、MPA−AEE−タキソール誘導体に転
換する:アセトニトリル(2mL)中のタキソール(0.02mmol)および
Ag2CO3(0.1mmol)を、0℃に冷却する。この混合物に、2−マレイ
ミドエチル−2’−ヨードエチルエーテル(MPA−AEE−I)(0.02m
mol)を添加する。この反応物を、2時間または完了するまで撹拌する。沈殿
物を濾過によって除去し、そしてアセトニトリルで洗浄する。この濾液をエバポ
レートして、残渣を得、この残渣を、5〜60%のアセトニトリルのグラジエン
トを使用して分取HPLCで精製し、所望のMPA−AEE−タキソール誘導体
およびその位置異性体を得る。[Chemical 27] Taxol is converted to the MPA-AEE-Taxol derivative by the following method: Taxol (0.02 mmol) and Ag 2 CO 3 (0.1 mmol) in acetonitrile (2 mL) are cooled to 0 ° C. To this mixture was added 2-maleimidoethyl-2'-iodoethyl ether (MPA-AEE-I) (0.02m).
mol) is added. The reaction is stirred for 2 hours or until complete. The precipitate is removed by filtration and washed with acetonitrile. The filtrate is evaporated to give a residue which is purified by preparative HPLC using a gradient of 5-60% acetonitrile to give the desired MPA-AEE-Taxol derivative and its regioisomer.
【0175】 (実施例11) (タキソール誘導体(MPA−タキソール)の調製)[0175] (Example 11) (Preparation of taxol derivative (MPA-taxol))
【0176】[0176]
【化28】
MPA−タキソールを調製するために、N,N−ジメチルホルムアミド(1m
l)中のタキソール(0.02mmol)の溶液に、N−メチルモルホリン(0
.03mmol)の存在下で、スクシニル3−マレイミドプロパノエート(0.
025mmol)の溶液を添加し、そしてこの反応混合物を、室温で16時間撹
拌する。この溶媒を減圧下でスリップし、そしてその残渣を、5〜60%のアセ
トニトリルのグラジエントを使用してHPLCで精製し、所望のMPA−タキソ
ール誘導体およびその位置異性体を得る。[Chemical 28] To prepare MPA-Taxol, N, N-dimethylformamide (1 m
To a solution of taxol (0.02 mmol) in 1), N-methylmorpholine (0
. Succinyl 3-maleimidopropanoate (0.
A solution of 025 mmol) is added and the reaction mixture is stirred for 16 hours at room temperature. The solvent is slipped under reduced pressure and the residue is purified by HPLC using a gradient of 5-60% acetonitrile to give the desired MPA-taxol derivative and its regioisomer.
【0177】 (実施例12) (タキソール誘導体(MPA−EEA−タキソール)の調製)[0177] (Example 12) (Preparation of taxol derivative (MPA-EEA-taxol))
【0178】[0178]
【化29】
MPA−EEA−ドセタキセル(docetaxel)を調製するために、ド
セタキセルを、ジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸で処理することによって、
まず遊離アミノ化合物に転換する(ドセタキセル(0.1mmol)を、TFA
(0.5mL)で10分間処理する)。TFAをエバポレートし、そしてアミノ
ドセタキセルを含むその残渣を、次の工程に使用する。[Chemical 29] To prepare MPA-EEA-docetaxel, by treating docetaxel with trifluoroacetic acid in dichloromethane,
First, it is converted to a free amino compound (docetaxel (0.1 mmol) is converted to TFA).
(Treat with 0.5 mL for 10 minutes). The TFA is evaporated and the residue containing aminodocetaxel is used in the next step.
【0179】
N−メチルモルホリンを、アミノドセタキセル(0.1mmol)およびスク
シニル2−(2−マレイミド)エトキシエトキシアセテート(MEEAのコハク
酸エステル)(0.2mmol)を含むTHF溶液(5mL)に添加する。この
反応物を、30分間または完了するまで撹拌する。この溶媒をエバポレートし、
そしてその残渣を分取HPLCにより精製して、MPA−EEA−ドセタキセル
を得る。N-Methylmorpholine is added to a THF solution (5 mL) containing aminodocetaxel (0.1 mmol) and succinyl 2- (2-maleimido) ethoxyethoxyacetate (MEEA succinate) (0.2 mmol). . The reaction is stirred for 30 minutes or until complete. Evaporate this solvent,
Then, the residue is purified by preparative HPLC to obtain MPA-EEA-docetaxel.
【0180】
このプロセスは、このセットの条件に限定されず、当業者はまた、アミノ化合
物がジクロロメタンに溶解され、そしてビス−(トリメチルシリル)−トリフル
オロアセトアミドで処理されて、この遊離アルコールをシリル化する条件を、使
用し得る。濃縮し、そしてDMFに再溶解し、そしてMPA−EEA−CO2H
およびエチル−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド(EDC)またはジシク
ロヘキシルカルボジイミド(DCC)を添加し、そして16時間反応させる。こ
の反応の残渣を、メタノールに溶解し、そして触媒量のTFAを添加し、そして
この混合物を2時間反応させる。次いで、この反応混合物を濃縮し、そしてその
残渣をHPLCにより精製して、MPA−EEA−ドセタキセルを得る。The process is not limited to this set of conditions and one skilled in the art will also know that the amino compound is dissolved in dichloromethane and treated with bis- (trimethylsilyl) -trifluoroacetamide to silylate the free alcohol. The conditions to be used can be used. Concentrated and redissolved in DMF, and MPA-EEA-CO 2 H
And ethyl-dimethylaminopropylcarbodiimide (EDC) or dicyclohexylcarbodiimide (DCC) are added and allowed to react for 16 hours. The residue of this reaction is dissolved in methanol and a catalytic amount of TFA is added and the mixture is allowed to react for 2 hours. The reaction mixture is then concentrated and the residue is purified by HPLC to give MPA-EEA-docetaxel.
【0181】 (実施例13) (タキソール誘導体(C3’−NHS−グルタミル−ドセタキセル)の調製)[0181] (Example 13) (Preparation of taxol derivative (C3'-NHS-glutamyl-docetaxel))
【0182】[0182]
【化30】
上記実施例12において合成したアミノドセタキセル(0.1mmol)を、
THF(10mL)中の無水コハク酸(0.2mmol)およびN−メチルモル
ホリンと反応させ、そして60分間または完了するまで撹拌する。THFをエバ
ポレートし、そしてその残渣をEtOAcで抽出する。合わせたEtOAc層を
水で洗浄し、そして乾燥する(Na2SO4)。この溶媒をエバポレートし、そし
てその残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、コハク酸誘
導体を得る。[Chemical 30] Aminodocetaxel (0.1 mmol) synthesized in Example 12 above was added to
React with succinic anhydride (0.2 mmol) and N-methylmorpholine in THF (10 mL) and stir for 60 minutes or until complete. THF is evaporated and the residue is extracted with EtOAc. The combined EtOAc layers are washed with water and dried (Na 2 SO 4 ). The solvent is evaporated and the residue is purified by flash column chromatography to give the succinic acid derivative.
【0183】
上記で得られた残渣(0.1mmol)を、DCC(0.12mmol)およ
びN−ヒドロキシスクシンイミド(10mmol)で60分間または完了するま
で処理する。その生成物をEtOAcで抽出し、そしてこの抽出物を水で洗浄し
、そして乾燥する(Na2SO4)。この溶媒をエバポレートし、そして残渣を分
取HPLCにより精製して、C3’−NHS−グルタミル−ドセタキセルを得る
。The residue (0.1 mmol) obtained above is treated with DCC (0.12 mmol) and N-hydroxysuccinimide (10 mmol) for 60 minutes or until complete. The product is extracted with EtOAc, and the extract is washed with water and dried (Na 2 SO 4 ). The solvent is evaporated and the residue is purified by preparative HPLC to give C3'-NHS-glutamyl-docetaxel.
【0184】 (実施例14) (タキソール誘導体(C3’−MPA−アジピル−ドセタキセル)の調製)[0184] (Example 14) (Preparation of taxol derivative (C3'-MPA-adipyl-docetaxel))
【0185】[0185]
【化31】
上記実施例12で合成したアミノドセタキセル(0.1mmol)を、THF
中のジスクシニルアジペート(0.2mmol)およびN−メチルモルホリン(
0.4mmol)と反応させ、そして室温で60分間または完了するまで撹拌す
る。THFをエバポレートし、そしてその残渣を分取HPLCで精製して、3C
’−MPA−アジピル−ドセタキセルを得る。[Chemical 31] Aminodocetaxel (0.1 mmol) synthesized in Example 12 was treated with THF.
Disuccinyl adipate (0.2 mmol) and N-methylmorpholine (
0.4 mmol) and stir at room temperature for 60 minutes or until complete. THF was evaporated and the residue was purified by preparative HPLC to give 3C.
'-MPA-adipyl-docetaxel is obtained.
【0186】 (実施例15) (メトトレキサート誘導体(MPA−EEA−メトトレキサート)の調製)[0186] (Example 15) (Preparation of methotrexate derivative (MPA-EEA-methotrexate))
【0187】[0187]
【化32】
MPA−EEA−メトトレキサートを合成するために、メトトレキサートのア
ミン基を、適切な溶媒(好ましくは、メタノール)中でのジ−t−ブチルオキシ
カルボニル無水物との反応によって、まずBoc誘導体として保護する。具体的
には、メタノール(10mL)中のメトトレキサート(1mmol)を、Boc 2
O(4mmol)で30分間処理する。メタノールをエバポレートし、そして
粗製生成物を、シリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーまたは分取
HPLCにより精製して、保護されたメトトレキサートを得る。[Chemical 32]
In order to synthesize MPA-EEA-methotrexate, the methotrexate
The min group is treated with di-t-butyloxy in a suitable solvent (preferably methanol).
It is first protected as a Boc derivative by reaction with carbonyl anhydride. concrete
Was methotrexate (1 mmol) in methanol (10 mL) with Boc 2
Treat with O (4 mmol) for 30 minutes. Evaporate the methanol, and
The crude product is purified by flash column chromatography on silica gel or preparative.
Purify by HPLC to give the protected methotrexate.
【0188】
次に、保護されたメトトレキサート(1mmol)を、Ac2O(10mL)
で40℃で60分間処理する。過剰のAc2Oを減圧下でエバポレートする。エ
ーテルを粉砕して、残っている溶媒を除去し、そして生成物であるメトトレキサ
ート無水物を、乾燥させて精製する。粗製生成物を、次の工程に使用する。Next, the protected methotrexate (1 mmol) was added to Ac 2 O (10 mL).
At 40 ° C. for 60 minutes. Excess Ac 2 O is evaporated under reduced pressure. The ether is triturated to remove residual solvent, and the product, methotrexate anhydrate, is dried and purified. The crude product is used in the next step.
【0189】
N−メチルモルホリン(2mmol)を、粗製メトトレキサート無水物(1m
mol)およびMEEA−EDA.HCl(1.2mmol)を含む塩化メチレ
ン溶液(40mL)に添加する。この反応物を室温で30分間撹拌する。塩化メ
チレンをHCl(1N)および水で洗浄し、そして乾燥させる(Na2SO4)。
この反応は、アミド生成物の混合物を生じる。第1のアミド生成物は、遠位カル
ボキシレートでの反応の結果であり、そして第2のアミド生成物は、近位カルボ
キシレートでの反応の結果である。これらの化合物を、クロマトグラフィーによ
って分離し、次いで個々の化合物を、ジクロロメタンに希釈されたTFAで脱保
護し、濃縮し、そしてその残渣をHPLCによって精製する。これらの化合物の
各々をTFAで処理し、そしてその生成物を分取HPLCで精製し、以下に示す
ような脱保護された生成物を得る。N-methylmorpholine (2 mmol) was added to crude methotrexate anhydride (1 m
mol) and MEEA-EDA. Add to methylene chloride solution (40 mL) containing HCl (1.2 mmol). The reaction is stirred at room temperature for 30 minutes. Methylene chloride is washed with HCl (1N) and water and dried (Na 2 SO 4 ).
This reaction produces a mixture of amide products. The first amide product is the result of the reaction at the distal carboxylate, and the second amide product is the result of the reaction at the proximal carboxylate. These compounds are separated by chromatography, then the individual compounds are deprotected with TFA diluted in dichloromethane, concentrated and the residue is purified by HPLC. Each of these compounds is treated with TFA and the product is purified by preparative HPLC to give the deprotected product as shown below.
【0190】[0190]
【化33】
(実施例16)
(メトトレキサート誘導体(NHS−メトトレキサート)の調製)
最初に、t−ブチルメトトレキサートを、Rosowskyら、J.Med.
Chem.,1991,34,574−579により記載される手順に従って、
調製した。リンカーの付着の好ましい部位は、上記刊行物に記載されるSARに
基づく位置である。[Chemical 33] Example 16 (Preparation of Methotrexate Derivative (NHS-Methotrexate)) First, t-butyl methotrexate was added to Rosowsky et al. Med.
Chem. , 1991, 34, 574-579,
Prepared. The preferred site of attachment of the linker is the SAR-based position described in the above publications.
【0191】[0191]
【化34】
次いで、t−Bu−メトトレキサートを、ジ−t−ブトキシカルボニル無水物
を使用して、以下にさらに詳細に記載するように、ジBoc誘導体に転換する。
次いで、カップリング剤としてDCCを使用して、HOBTの存在下で、室温で
、カプロン酸のメチルエステルをこのジBoc誘導体にカップリングさせ、化合
物Cを与える。次いで、化合物Cのメチルエステルを、メタノールおよび水中の
希水酸化ナトリウムを使用して加水分解し、そしてpH4まで酸性化し、次いで
、酢酸エチルを用いて抽出し、乾燥させ(Na2SO4)、そして濃縮して、残渣
を得、この残渣を、ジクロロメタン中NMMの存在下でイソブチルクロロホルメ
ートと混合無水物をまず形成することによって、コハク酸エステルに転換する。
次いで、この残渣を、ジクロロメタンに希釈したTFAを使用して脱保護し、そ
して濃縮し、そしてこの残渣を、HPLCにより精製して、NHS−メトトレキ
サートを得る。[Chemical 34] The t-Bu-methotrexate is then converted to the di-Boc derivative using di-t-butoxycarbonyl anhydride as described in further detail below.
The methyl ester of caproic acid is then coupled to this diBoc derivative at room temperature in the presence of HOBT using DCC as the coupling agent to give compound C. The methyl ester of compound C was then hydrolyzed using dilute sodium hydroxide in methanol and water and acidified to pH 4, then extracted with ethyl acetate, dried (Na 2 SO 4 ). It is then concentrated to give a residue, which is converted to the succinate ester by first forming a mixed anhydride with isobutyl chloroformate in the presence of NMM in dichloromethane.
The residue is then deprotected using TFA diluted in dichloromethane and concentrated and the residue is purified by HPLC to give NHS-methotrexate.
【0192】[0192]
【化35】
より詳細に記載すると、MeOH(10mL)中のt−Bu−メトトレキサー
ト(1mmol)およびBoc2O(24mmol)を、60分間または完了す
るまで撹拌する。MeOHをエバポレートし、そしてその残渣を、フラッシュカ
ラムクロマトグラフィーによって精製して、ジBoc−メトトレキサートを得る
。このジBoc−メトトレキサート(1mmol)、DCC(2mmol)およ
びHOBT(2mmol)を、ジクロロメタン(910mL)中室温で120分
間撹拌する。次いで、メチル6−アミノカプロエート(2mmol)を添加する
。この反応物を、60分間または完了するまで撹拌する。この反応を、AcOH
(1mL)でクエンチする。沈殿物を濾過によって除去する。その濾液を水で洗
浄し、そして乾燥する(Na2SO4)。この溶媒をエバポレートし、そしてその
残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物Cを得る。[Chemical 35] More specifically, t-Bu-methotrexate (1 mmol) and Boc 2 O (24 mmol) in MeOH (10 mL) are stirred for 60 minutes or until complete. MeOH is evaporated and the residue is purified by flash column chromatography to give diBoc-methotrexate. The di-Boc-methotrexate (1 mmol), DCC (2 mmol) and HOBT (2 mmol) are stirred in dichloromethane (910 mL) at room temperature for 120 minutes. Then methyl 6-aminocaproate (2 mmol) is added. The reaction is stirred for 60 minutes or until complete. This reaction is
Quench with (1 mL). The precipitate is removed by filtration. The filtrate is washed with water and dried (Na 2 SO 4 ). The solvent is evaporated and the residue is purified by flash column chromatography to give compound C.
【0193】
化合物C(1mmol)を、NaOH(1N、10mL)で30分間または完
了するまで処理する。この水溶液を、AcOHによってpH4に調整する。生成
物をEtOAcで抽出する。合わせた抽出物を水で洗浄し、乾燥する(Ns2S
O4)。この溶媒をエバポレートし、そしてその残渣を、フラッシュカラムクロ
マトグラフィーによって精製して、カルボン酸を得る。この酸(1mmol)を
、ジクロロメタン(20mL)中N−メチルモルホリンの存在下で、イソブチル
クロロホルメート(2mmol)で−20℃で30分間処理する。N−ヒドロキ
シスクシンイミド(4mmol)を添加する。この反応物を、室温で60分間撹
拌する。この塩化メチレン溶液を、HCl(1N)で洗浄し、そして乾燥させる
。この溶媒をエバポレートし、そしてこの残渣を、フラッシュカラムクロマトグ
ラフィーで精製する。この生成物を、TFA(5mL)で30分間処理する。T
FAをエバポレートし、そしてその残渣を、分取HPLCで精製して、NHS−
メトトレキサートを得る。Compound C (1 mmol) is treated with NaOH (1N, 10 mL) for 30 minutes or until complete. The pH of this aqueous solution is adjusted to 4 with AcOH. The product is extracted with EtOAc. The combined extracts are washed with water and dried (Ns2S
O4). The solvent is evaporated and the residue is purified by flash column chromatography to give the carboxylic acid. This acid (1 mmol) is treated with isobutyl chloroformate (2 mmol) in the presence of N-methylmorpholine in dichloromethane (20 mL) at −20 ° C. for 30 minutes. N-hydroxysuccinimide (4 mmol) is added. The reaction is stirred at room temperature for 60 minutes. The methylene chloride solution is washed with HCl (1N) and dried. The solvent is evaporated and the residue is purified by flash column chromatography. The product is treated with TFA (5 mL) for 30 minutes. T
FA was evaporated and the residue was purified by preparative HPLC to give NHS-
Get Methotrexate.
【0194】 (実施例17) (ヒドロキシウレア誘導体(MPA−EEA−ヒドロキシウレア)の調製)[0194] (Example 17) (Preparation of hydroxyurea derivative (MPA-EEA-hydroxyurea))
【0195】[0195]
【化36】
MPA−EEA−ヒドロキシウレアを調製するために、まず、トルエン(50
mL)中の2−(2−マレイミド)エトキシエトキシアセトアミド(10mmo
l)を四酢酸鉛(20mmol)で2時間または完了するまで処理する。この反
応混合物を水で洗浄し、そして乾燥する(Na2SO4)。トルエンをエバポレー
トし、そしてその残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーに
より精製して、イソシアネート誘導体を得る。次に、このイソシアネート誘導体
(5mmol)を、ヒドロキシアミン塩酸塩(5mmol)とともに塩化メチレ
ン(30mL)中で−40℃に冷却する。この反応混合物に、N−メチルモルホ
リン(5mmol)をゆっくりと添加する。この反応物を室温まで昇温させる。
この塩化メチレン溶液を、HCl(1N)、水で洗浄し、乾燥する(Na2SO4
)。生成物であるMPA−EEA−ヒドロキシウレアを、シリカゲルでのフラッ
シュカラムクロマトグラフィーによって精製する。[Chemical 36] To prepare MPA-EEA-hydroxyurea, first, toluene (50
2- (2-maleimido) ethoxyethoxyacetamide (10 mmo in mL).
l) is treated with lead tetraacetate (20 mmol) for 2 hours or until complete. The reaction mixture is washed with water and dried (Na 2 SO 4 ). Toluene is evaporated and the residue is purified by flash column chromatography on silica gel to give the isocyanate derivative. The isocyanate derivative (5 mmol) is then cooled to -40 ° C in methylene chloride (30 mL) with hydroxyamine hydrochloride (5 mmol). To this reaction mixture is slowly added N-methylmorpholine (5 mmol). The reaction is warmed to room temperature.
The methylene chloride solution is washed with HCl (1N), water and dried (Na 2 SO 4 ). The product MPA-EEA-hydroxyurea is purified by flash column chromatography on silica gel.
【0196】 (実施例18) (タモキシフェン誘導体(MPA−タモキシフェン)の調製)[0196] (Example 18) (Preparation of tamoxifen derivative (MPA-tamoxifen))
【0197】[0197]
【化37】
MPA−タモキシフェンを調製するために、塩化メシル(12mmol)を、
2−[4−(1,2−ジフェニルブテニル)フェノキシ]エタノール(G.C.
Crawey EP 19377 B1、1982年4月4日)(10mmol
)およびトリエチルアミン(12mmol)を含むDMF(20mL)溶液に、
0℃で添加する。この反応物を、60分間または完了するまで撹拌する。次いで
、NaN3(30mmol)を添加し、そしてこの反応混合物を50℃で60分
間撹拌する。この溶媒を、減圧下でエバポレートする。その残渣をフラッシュク
ロマトグラフィーによって精製して、2−[4−(1,2−ジフェニルブテニル
)フェノキシ]エチルアジドを得る。[Chemical 37] To prepare MPA-tamoxifen, mesyl chloride (12 mmol) was added to
2- [4- (1,2-diphenylbutenyl) phenoxy] ethanol (G.C.
Crawey EP 19377 B1, April 4, 1982) (10 mmol
) And triethylamine (12 mmol) in DMF (20 mL) solution,
Add at 0 ° C. The reaction is stirred for 60 minutes or until complete. NaN 3 (30 mmol) is then added and the reaction mixture is stirred at 50 ° C. for 60 minutes. The solvent is evaporated under reduced pressure. The residue is purified by flash chromatography to give 2- [4- (1,2-diphenylbutenyl) phenoxy] ethyl azide.
【0198】
還流中に、ギ酸(95%、50mmol)を、タモキシフェンアジド(10m
mol)およびPd(OAc)2(0.5mmol)のメタノール混合物に滴下
する。この反応物を30分間還流撹拌する。触媒を濾過によって除去し、そして
溶媒をエバポレートして乾固させる、粗製タモキシフェンアミン生成物を、次の
工程に使用する。Formic acid (95%, 50 mmol) was added to tamoxifen azide (10 m) at reflux.
mol) and Pd (OAc) 2 (0.5 mmol) in a mixture of methanol. The reaction is stirred at reflux for 30 minutes. The crude tamoxifen amine product, which is the catalyst removed by filtration and the solvent evaporated to dryness, is used in the next step.
【0199】
ジイソプロピルエチルアミン(12mmol)を、タモキシフェンアミン(1
0mmol)およびスクシニル3−マレイミドプロパノエート(12mmol)
を含む塩化メチレン(30mL)溶液に添加する。この反応物を、60分間また
は完了するまで撹拌する。この塩化メチレン溶液を、HCl、水で洗浄し、そし
て乾燥する。溶媒をエバポレートして残渣を得、この残渣を、フラッシュカラム
クロマトグラフィーで精製して、MPA−タモキシフェンを得る。Diisopropylethylamine (12 mmol) was added to tamoxifen amine (1
0 mmol) and succinyl 3-maleimidopropanoate (12 mmol)
To a methylene chloride (30 mL) solution containing. The reaction is stirred for 60 minutes or until complete. The methylene chloride solution is washed with HCl, water and dried. The solvent is evaporated to give a residue which is purified by flash column chromatography to give MPA-tamoxifen.
【0200】 (実施例19) (タモキシフェン誘導体(NHS−アジピル−タモキシフェン)の調製)[0200] (Example 19) (Preparation of tamoxifen derivative (NHS-adipyl-tamoxifen))
【0201】[0201]
【化38】
上記で調製したタモキシフェン一級アミン(1mmol)を、ジスクシニルア
ジペート(2mmol)およびN−メチルモルホリン(2mmol)とともに、
塩化メチレン(10mL)中で、60分間または反応が完了するまで撹拌する。
この塩化メチレンを水で洗浄し、そして乾燥する。この溶媒をエバポレートし、
そしてその残渣を、シリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製
して、6炭素鎖のN−ヒドロキシコハク酸エステルを得る。[Chemical 38] Tamoxifen primary amine (1 mmol) prepared above, along with disuccinyl adipate (2 mmol) and N-methylmorpholine (2 mmol),
Stir in methylene chloride (10 mL) for 60 minutes or until the reaction is complete.
The methylene chloride is washed with water and dried. Evaporate this solvent,
The residue is then purified by flash column chromatography on silica gel to give N-hydroxysuccinate with 6 carbon chains.
【0202】 (実施例19) (マイトマイシン誘導体(N−1a−MPA−マイトマイシンC)の調製)[0202] (Example 19) (Preparation of mitomycin derivative (N-1a-MPA-mitomycin C))
【0203】[0203]
【化39】
N−1a−MPA−マイトマイシンCを調製するために、マイトマイシンC(
1mmol)を、塩化メチレン(10mL)中スクシニル3−マレイミドプロパ
ノエート(1.2mmol)で16時間または完了するまで処理する。この塩化
メチレンを水で洗浄し、そして乾燥する(Na2SO4)。この溶媒をエバポレー
トし、そしてその残渣を分取HPLCで精製して、N−1a−MPA−マイトマ
イシンCを得る。[Chemical Formula 39] To prepare N-1a-MPA-mitomycin C, mitomycin C (
1 mmol) is treated with succinyl 3-maleimidopropanoate (1.2 mmol) in methylene chloride (10 mL) for 16 hours or until complete. The methylene chloride is washed with water and dried (Na 2 SO 4 ). The solvent is evaporated and the residue is purified by preparative HPLC to give N-1a-MPA-mitomycin C.
【0204】
(実施例20)
(マイトマイシン誘導体(N−1a−NHS−アジピル−マイトマイシンC)
の調製)Example 20 (Mitomycin derivative (N-1a-NHS-adipyl-mitomycin C)
Preparation)
【0205】[0205]
【化40】
マイトマイシンCを、以下の方法を使用して、DMF中でジ−N−ヒドロキシ
スクシニルアジペートと反応させることによって、6炭素鎖のN−ヒドロキシコ
ハク酸エステルに転換する。[Chemical 40] Mitomycin C is converted to a 6 carbon chain N-hydroxysuccinate by reacting with di-N-hydroxysuccinyl adipate in DMF using the following method.
【0206】
マイトマイシンC(1mmol)を、塩化メチレン(10mL)中のジスクシ
ニルアジペート(1mmol)で16時間または完了するまで処理する。この塩
化メチレンを水で洗浄し、そして乾燥する(Na2SO4)。この溶媒をエバポレ
ートし、そして残渣を、分取HPLCで精製して、N−1a−NHS−アジピル
−マイトマイシンCを得る。Mitomycin C (1 mmol) is treated with disuccinyl adipate (1 mmol) in methylene chloride (10 mL) for 16 hours or until complete. The methylene chloride is washed with water and dried (Na 2 SO 4 ). The solvent is evaporated and the residue is purified by preparative HPLC to give N-1a-NHS-adipyl-mitomycin C.
【0207】
(実施例21)
(ビンクリスチン誘導体(MPA−ビンクリスチン)の調製)
文献(B.C.Laguzzaら、米国特許第4,801,688号、198
9年1月31日、Culliman、米国特許第4,203,898号、198
0年5月)に記載されるヒドラジド官能基を使用して、C23カルボニルまたは
環上のC3位において、ビンクリスチンアナログに反応性基を付着させることに
よって、MPA−ビンクリスチンを調製する。Example 21 Preparation of Vincristine Derivative (MPA-Vincristine) Literature (BC Laguzza et al., US Pat. No. 4,801,688, 198).
31 January 1997, Culliman, U.S. Pat. No. 4,203,898, 198.
MPA-Vincristine is prepared by attaching a reactive group to the vincristine analog at the C23 carbonyl or C3 position on the ring using the hydrazide functional group described in (May 0).
【0208】[0208]
【化41】
より具体的には、ビンクリスチン(25mg、0.027mmol)または代
替的には、ビンブラスチン(N1位において、ホルミルの代わりにメチル基を有
する)をエタノール(0.5mL)に溶解し、そして無水ヒドラジン(0.2m
mol)で処理する。この混合物を、密封した試験管内で60℃に4時間加熱す
る。この反応混合物を減圧下および真空下で濃縮し、そしてその残渣をフラッシ
ュカラムクロマトグラフィーにより精製して、ビンクリスチンヒドラジドを得る
。ビンクリスチンヒドラジド(0.01mmol)をDMF(0.5ml)に溶
解し、そしてDMF(0.1ml)中のスクシニル3−マレイミドプロパノエー
ト(0.015mmol)の溶液を室温で添加し、そしてこの反応混合物を室温
で16時間撹拌する。この反応混合物を減圧下で濃縮し、そしてその残渣を、先
に記載した条件を用いるHPLCにより精製して、4−デスアセチル−MPA−
ビンクリスチンを得る。[Chemical 41] More specifically, vincristine (25 mg, 0.027 mmol) or, alternatively, vinblastine (having a methyl group at the N 1 position instead of formyl) is dissolved in ethanol (0.5 mL), and anhydrous hydrazine is added. (0.2m
mol). The mixture is heated to 60 ° C. for 4 hours in a sealed test tube. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure and under vacuum, and the residue is purified by flash column chromatography to give vincristine hydrazide. Vincristine hydrazide (0.01 mmol) was dissolved in DMF (0.5 ml) and a solution of succinyl 3-maleimidopropanoate (0.015 mmol) in DMF (0.1 ml) was added at room temperature and the reaction The mixture is stirred at room temperature for 16 hours. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure and the residue is purified by HPLC using the conditions described above to give 4-desacetyl-MPA-
Get vincristine.
【0209】
次に、塩化メチレン(30ml)中の4−デスアセチル−MPA−ビンクリス
チン(0.005mmol)を、無水酢酸(0.5M塩化メチレン溶液20μl
)およびトリエチルアミン(0.5M塩化メチレン溶液20μl)で、0℃で処
理する。この混合物を、室温で2時間撹拌する。この反応混合物を、塩化メチレ
ンで希釈し、そして飽和重炭酸塩およびブラインで洗浄し、乾燥し(Na2SO4
)、そして濃縮する。その残渣をHPLCで精製して、MPA−ビンクリスチン
およびC3アセチルMPA−ビンクリスチンを得る。C3アセチルMPA−ビン
クリスチンを、湿潤シリカの存在下でMPA−ビンクリスチンに転換し得る(H
argrove,米国特許第3,392,173号、1968年7月)。Next, 4-desacetyl-MPA-vincristine (0.005 mmol) in methylene chloride (30 ml) was added to acetic anhydride (0.5 M methylene chloride solution 20 μl).
) And triethylamine (20 μl of 0.5 M methylene chloride solution) at 0 ° C. The mixture is stirred at room temperature for 2 hours. The reaction mixture is diluted with methylene chloride and washed with saturated bicarbonate and brine, dried (Na 2 SO 4 ) and concentrated. The residue is purified by HPLC to give MPA-Vincristine and C3 Acetyl MPA-Vincristine. C3 acetyl MPA-Vincristine can be converted to MPA-Vincristine in the presence of wet silica (H
Argrove, U.S. Pat. No. 3,392,173, July 1968).
【0210】
(実施例22)
(インビボでの半減期)
本発明による抗腫瘍剤誘導体のインビボでの半減期は、抗腫瘍剤誘導体のイン
ビボ投与およびこの誘導体の内因性タンパク質へのインビボでの結合の調査によ
って決定され得る。特に、ウサギに、本発明による抗腫瘍剤誘導体の溶液を注射
する。血液サンプルを採取し、そして反応性基(例えば、マレイミド)の存在に
ついて、ゲル電気泳動を用いて分析する。非誘導体化抗腫瘍剤について同じ手順
を行って、コントロールとして供する。Example 22 In Vivo Half-Life The in vivo half-life of an anti-tumor agent derivative according to the invention is determined by the in vivo administration of the anti-tumor agent derivative and its binding to the endogenous protein in vivo. Can be determined by a survey of. In particular, rabbits are injected with a solution of the antitumor drug derivative according to the invention. Blood samples are taken and analyzed for the presence of reactive groups (eg maleimide) using gel electrophoresis. The same procedure is performed for the underivatized antitumor agent and serves as a control.
【0211】
あるいは、放射標識した抗腫瘍剤誘導体(例えば、125I標識抗腫瘍剤誘導体
)を、試験群およびコントロール群に注射し得る。動物に、1%ヒト血清アルブ
ミンを有するグルコース5%中に希釈した50μg/Kgの結合体のゆっくりと
した注射(5分間)によって与える。注射の1日後、動物に10μキュリーの12 5
I標識抗腫瘍剤誘導体(1動物あたり100μg)を与える。抗腫瘍剤誘導体
の注射の1時間後、動物を屠殺し、そして種々の血液および組織標本を採集する
。コントロール動物に、125I標識非誘導体化抗腫瘍剤を与える。比放射活性を
、ガンマカウンターを用いて測定し、そして血液1mlあたりのcpmまたは組
織1グラム
あたりのcpmで表す。Alternatively, a radiolabeled anti-tumor agent derivative (eg, 125 I-labeled anti-tumor agent derivative) can be injected into the test and control groups. Animals are given by slow injection (5 minutes) of 50 μg / Kg conjugate diluted in 5% glucose with 1% human serum albumin. One day after injection, giving animals 10μ Curie 12 5 I-labeled anti-tumor agent derivative (100 [mu] g per animal). One hour after injection of the antineoplastic derivative, the animals are sacrificed and various blood and tissue specimens are collected. Control animals receive 125 I-labeled underivatized antitumor agent. Specific radioactivity was measured using a gamma counter and is expressed in cpm per ml blood or cpm per gram tissue.
【0212】
(実施例23)
(RBCおよび血漿タンパク質に対するNHS−抗腫瘍剤の結合)
RBCおよび血漿タンパク質に対するNHS−抗腫瘍剤の結合を測定するため
に、DMSO中に可溶化した5mg(約1.5mg/kg)および50mg(約
15mg/kg)のNHS−抗腫瘍剤(例えば、NHS−C6−ドキソルビシン
、C3’−NHS−グルタミル−ドセタキセル(C3’−NHS−glutam
yl−docetaxel)、NHS−メトトレキサート、N−1−a−NHS
−アジピル−マイトマイシンCまたはNHS−アジピル−タモキシフェン)をウ
サギに注射し得る。次いで、血液サンプルを、同じ日に注射の0.5時間後、1
時間後、2時間後および4時間後に、次いで、例えば、注射の1日後、2日後、
3日後、6日後、9日間後、13日後、20日後、27日後、34日後、41日
後、48日後および55日後に採取する。RBCに対するNHS−抗腫瘍剤の結
合は、フローサイトメトリーによって示される。血漿タンパク質に対するNHS
−抗腫瘍剤の結合は、免疫ブロッティングによって分析される。血漿タンパク質
は、還元条件下(10mM DTT)で、10%ポリアクリルアミドゲル(クー
マシーブルー染色)において分離される。Example 23 NHS-Antineoplastic Agent Binding to RBCs and Plasma Proteins To measure NHS-antineoplastic agent binding to RBCs and plasma proteins, 5 mg solubilized in DMSO (approximately 1 0.5 mg / kg) and 50 mg (about 15 mg / kg) of NHS-antitumor agents (eg NHS-C6-doxorubicin, C3′-NHS-glutamyl-docetaxel (C3′-NHS-glutam).
yl-docetaxel), NHS-methotrexate, N-1-a-NHS
-Adipyl-mitomycin C or NHS-adipyl-tamoxifen) may be injected into rabbits. Blood samples were then taken on the same day, 0.5 hours after injection, 1
Hours, 2 hours and 4 hours, then, for example, 1 day, 2 days after injection,
Samples will be collected after 3, 6, 9, 9, 13, 20, 27, 34, 41, 48 and 55 days. NHS-anti-tumor agent binding to RBCs is demonstrated by flow cytometry. NHS for plasma proteins
-The binding of antitumor agents is analyzed by immunoblotting. Plasma proteins are separated on a 10% polyacrylamide gel (Coomassie blue stain) under reducing conditions (10 mM DTT).
【0213】
(実施例24)
(RBCおよび血漿タンパク質に対するMPA−抗腫瘍剤の結合)
RBCおよび血漿タンパク質に対するMPA−抗腫瘍剤の結合を測定するため
に、DMSO中に可溶化した5mg(約1.5mg/kg)および50mg(約
15mg/kg)のMPA−抗腫瘍剤(例えば、MPA−ドキソルビシン、MP
A−AEEA−ドキソルビシン、MPA−AEE−タキソール、MPA−タキソ
ール、MPA−EEA−ドセタキセル、MPA−EEA−メトトレキサート、M
PA−EEA−ヒドロキシウレア、MPA−タモキシフェン、N−1a−MPA
−マイトマイシンCまたはMPA−ビンクリスチン)をウサギに注射し得る。次
いで、血液サンプルを、同じ日に注射の0.5時間後、1時間後、2時間後およ
び4時間後に、次いで、例えば、注射の1日後、2日後、3日後、6日後、9日
間後、13日後、20日後、27日後、34日後、41日後、48日後および5
5日に採取する。RBCに対するMPA−抗腫瘍剤の結合は、フローサイトメト
リーによって示される。血漿タンパク質に対するMPA−抗腫瘍剤の結合は、免
疫ブロッティングによって分析される。血漿タンパク質は、還元条件下(10m
M DTT)で、10%ポリアクリルアミドゲル(クーマシーブルー染色)にお
いて分離される。Example 24 MPA-Antineoplastic Agent Binding to RBCs and Plasma Proteins To measure MPA-antitumor agent binding to RBCs and plasma proteins, 5 mg solubilized in DMSO (approximately 1 0.5 mg / kg) and 50 mg (about 15 mg / kg) MPA-antitumor agent (eg MPA-doxorubicin, MP
A-AEEA-doxorubicin, MPA-AEE-taxol, MPA-taxol, MPA-EEA-docetaxel, MPA-EEA-methotrexate, M
PA-EEA-hydroxyurea, MPA-tamoxifen, N-1a-MPA
-Mitomycin C or MPA-Vincristine) may be injected into rabbits. The blood samples are then taken on the same day at 0.5, 1, 2 and 4 hours post injection, and then, for example, 1 day, 2 days, 3 days, 6 days, 9 days after injection. , 13 days, 20 days, 27 days, 34 days, 41 days, 48 days and 5 days
Collect on the 5th day. MPA-anti-tumor agent binding to RBCs is shown by flow cytometry. MPA-antitumor agent binding to plasma proteins is analyzed by immunoblotting. Plasma proteins are stored under reducing conditions (10m
MDTT) and separated on a 10% polyacrylamide gel (Coomassie blue stain).
【0214】
(実施例25)
(ドキソルビシン誘導体の抗腫瘍効果)
マウスにおけるドキソルビシンの抗腫瘍効果を、本発明によるドキソルビシン
誘導体と比較することによって、本発明によるドキソルビシン誘導体の抗腫瘍効
果を決定し得る。原発性腎臓腫瘍を、マウス腎臓における腎臓癌細胞の被膜下注
射によって誘導する。次いで、ドキソルビシンおよび本発明によるドキソルビシ
ン誘導体を投与し、そしてそれらの抗腫瘍効果を比較する。用いられ得るサンプ
ル投薬量としては以下が挙げられる:ドキソルビシンについて4×10mmol
/kg(4×6mg/kg、Mr=580.0g/molに等しい)およびドキ
ソルビシン誘導体について4×20mmol/kg(4×16.7mg/kg、
Mr=807.8g/molに等しい)。24時間後、両方の処置群における体
重減少を測定して、非誘導体化ドキソルビシンに対して比較したドキソルビシン
誘導体の効力を決定する。Example 25 Antitumor Effect of Doxorubicin Derivatives The antitumor effect of doxorubicin derivatives according to the present invention can be determined by comparing the antitumor effect of doxorubicin in mice with the doxorubicin derivative according to the present invention. Primary kidney tumors are induced by subcapsular injection of kidney cancer cells in mouse kidney. Then doxorubicin and the doxorubicin derivatives according to the invention are administered and their antitumor effects are compared. Sample dosages that can be used include: 4 × 10 mmol for doxorubicin
/ Kg (4 × 6 mg / kg, equal to M r = 580.0 g / mol) and 4 × 20 mmol / kg for doxorubicin derivative (4 × 16.7 mg / kg,
M r = equal to 807.8 g / mol). After 24 hours, weight loss in both treatment groups is measured to determine the potency of doxorubicin derivatives compared to underivatized doxorubicin.
【0215】
本発明をその特定の実施形態に関連して記載してきたが、一般に、本発明の原
理に従い、そして本発明が属する当該分野における公知または習慣的な実施に入
るような、そして本明細書中に上記で記載した必須の特徴に適用され得るような
、そして添付の特許請求の範囲の範囲に従うような、本開示からのこのような発
展物を含む、任意のバリエーション、使用または適用を本発明のさらなる改変お
よびその適用が包含することが意図されることが可能であることが理解される。Although the present invention has been described in relation to particular embodiments thereof, it is generally in accordance with the principles of the present invention and as such may enter into known or customary practice in the art to which the invention pertains, and the present specification. Any variation, use or application, including such developments from the present disclosure, as may be applied to the essential features described above in the text, and in accordance with the scope of the appended claims It is understood that further modifications of the invention and their applications can be intended to be covered.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 FI テーマコート゛(参考) A61P 35/00 A61P 35/00 // C07D 207/452 C07D 207/452 405/12 405/12 475/08 475/08 487/14 487/14 519/04 519/04 (81)指定国 EP(AT,BE,CH,CY, DE,DK,ES,FI,FR,GB,GR,IE,I T,LU,MC,NL,PT,SE),OA(BF,BJ ,CF,CG,CI,CM,GA,GN,GW,ML, MR,NE,SN,TD,TG),AP(GH,GM,K E,LS,MW,MZ,SD,SL,SZ,TZ,UG ,ZW),EA(AM,AZ,BY,KG,KZ,MD, RU,TJ,TM),AE,AG,AL,AM,AT, AU,AZ,BA,BB,BG,BR,BY,BZ,C A,CH,CN,CR,CU,CZ,DE,DK,DM ,DZ,EE,ES,FI,GB,GD,GE,GH, GM,HR,HU,ID,IL,IN,IS,JP,K E,KG,KP,KR,KZ,LC,LK,LR,LS ,LT,LU,LV,MA,MD,MG,MK,MN, MW,MX,MZ,NO,NZ,PL,PT,RO,R U,SD,SE,SG,SI,SK,SL,TJ,TM ,TR,TT,TZ,UA,UG,US,UZ,VN, YU,ZA,ZW (72)発明者 リガー, ロジャー カナダ国 ジェイ4ダブリュー 2エム9 ケベック, ブロッサード, ティサロ ン 6960 (72)発明者 ファン, シーツァイ カナダ国 エイチ9ジェイ 3エックス2 ケベック, カークランド, ドウノー 153 (72)発明者 ミルナー, ピーター ジー. アメリカ合衆国 カリフォルニア 94022, ロス アルトス ヒルズ, マヌエラ ロード 14690 (72)発明者 スミス, ダモン カナダ国 エイチ3ワイ 2ゼット4 ケ ベック, モントリオール, ウエストマ ウント, ホルトン アベニュー 22 (72)発明者 エズリン, アラン エム. アメリカ合衆国 カリフォルニア 94556, モラガ, クィンタス レーン 110 Fターム(参考) 4C050 AA01 BB01 CC04 DD01 EE02 FF02 GG03 HH04 4C063 AA01 BB08 CC72 DD04 EE01 4C069 AD08 CC04 4C072 QQ04 QQ07 UU01 4C086 AA01 AA02 BC06 BC08 CB03 CB09 CB21 GA02 GA07 MA01 MA04 NA13 NA14 ZB26 ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (51) Int.Cl. 7 Identification code FI theme code (reference) A61P 35/00 A61P 35/00 // C07D 207/452 C07D 207/452 405/12 405/12 475/08 475/08 487/14 487/14 519/04 519/04 (81) Designated countries EP (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU , MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG), AP (GH, GM, K) E, LS, MW, MZ, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZW), EA (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM), AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, A, BB, BG, BR, BY, BZ, CA, CH, CN, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR , HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VN, YU , ZA, ZW (72) Inventor Rigger, Roger Canada J 4 W 2 2 M 9 Quebec, Brossard, Tissalon 6960 (72) Inventor Fan, Cetsey Canada H 9 J 3 X 2 Quebec, Kirkland, Donow 153 ( 72) Inventor Milner, Peter Gee. United States California 94022, Los Altos Hills, Manuela Road 14690 (72) Inventor Smith, Damon Canada H3W2Z4 Quebec, Montreal, Westmount, Holton Avenue 22 (72) Inventor Ezrin, Alan Em. United States California 94556, Moraga, Quintas Lane 110 F-term (reference) 4C050 AA01 BB01 CC04 DD01 EE02 FF02 GG03 HH04 4C063 AA01 BB08 CC72 DD04 EE01 4C069 AD08 CC04 4C072 QQ04 QQ07 UU01 4C086 CB07 MA14 NA14 BC14 NA14 NA02 BC01 NA14 BC02 MA14 NA02 BC02 MA14 NA02 ZB26
Claims (20)
の使用であって、該組成物が、タキソールおよびそのアナログの誘導体を含み、
ここで、該誘導体が、血液成分中のアミノ基、ヒドロキシル基またはチオール基
と反応して安定な共有結合を形成する反応性基を含み、該反応性基が、N−ヒド
ロキシスクシンイミド、N−ヒドロキシ−スルホスクシンイミドおよびマレイミ
ド基から選択される、組成物の使用。1. Use of a composition for the manufacture of a medicament for use in the treatment of cancer, said composition comprising taxol and its analog derivatives.
Here, the derivative contains a reactive group which reacts with an amino group, a hydroxyl group or a thiol group in a blood component to form a stable covalent bond, and the reactive group contains N-hydroxysuccinimide or N-hydroxy group. -Use of a composition selected from sulfosuccinimide and maleimide groups.
の組成物の使用。2. Use of a composition according to claim 1, wherein the derivative reacts with blood proteins.
請求項1に記載の組成物の使用。3. The derivative reacts with a thiol group on a blood protein,
Use of the composition according to claim 1.
請求項1に記載の組成物の使用。4. The derivative reacts with albumin to form a covalent bond,
Use of the composition according to claim 1.
ヒドロキシスルホスクシンイミドである、請求項1に記載の組成物の使用。5. The reactive group is N-hydroxysuccinimide or N-
Use of the composition according to claim 1, which is hydroxysulfosuccinimide.
成物の使用。6. Use of the composition according to claim 1, wherein the reactive group is a maleimide group.
ための方法であって、以下: (a)該タキソールまたはそのアナログを、タキソール誘導体がその治療活性
を十分に保持し、そして血液成分上の官能基と共有結合を形成し得るように、反
応性基をファルマコフォア領域から十分に離れた部位に結合させて該タキソール
誘導体を形成することによって改変する工程; (b)該タキソール誘導体を宿主に投与する工程;および (c)該反応性基と血液成分上の官能基との間でインビボで共有結合を形成し
て、タキソール誘導体−血液成分結合体を形成し、それによって、該タキソール
またはそのアナログの寿命を延ばす、工程、 を包含する、方法。8. A method for extending the longevity of taxol or an analogue thereof in vivo, comprising: (a) the taxol or analogue thereof being retained by a taxol derivative sufficiently to retain its therapeutic activity and a blood component. Modifying by reacting a reactive group at a site sufficiently distant from the pharmacophore region to form a taxol derivative so that a covalent bond can be formed with the above functional group; (b) the taxol derivative (C) forming a covalent bond in vivo between the reactive group and a functional group on a blood component to form a taxol derivative-blood component conjugate, thereby Prolonging the life of taxol or its analogs.
法。9. The method of claim 8, wherein the reactive group is a maleimide group.
される、請求項9に記載の方法。10. The method of claim 9, wherein the reactive group is attached to the taxol via a linking group.
法。11. The method of claim 8, wherein the blood component is albumin.
よびそのアナログの誘導体の有効量を薬学的に受容可能なキャリアと共に含み、
ここで、該誘導体が、血液成分中のアミノ基、ヒドロキシル基またはチオール基
と反応して安定な共有結合を形成する反応性基を含み、該反応性基が、N−ヒド
ロキシスクシンイミド、N−ヒドロキシ−スルホスクシンイミドおよびマレイミ
ド基からなる群より選択される、組成物。12. A pharmaceutical composition for treating cancer, comprising an effective amount of taxol and its analog derivatives together with a pharmaceutically acceptable carrier.
Here, the derivative contains a reactive group which reacts with an amino group, a hydroxyl group or a thiol group in a blood component to form a stable covalent bond, and the reactive group contains N-hydroxysuccinimide or N-hydroxy group. A composition selected from the group consisting of sulfosuccinimide and maleimide groups.
2に記載の組成物。13. The derivative of claim 1, wherein the derivative is covalently linked to a blood protein.
The composition according to 2.
、請求項13に記載の組成物。14. The composition of claim 13, wherein the derivative reacts with thiol groups on blood proteins.
記載の組成物。15. The composition of claim 14, wherein the blood protein comprises albumin.
−ヒドロキシスルホスクシンイミドである、請求項12に記載の組成物。16. The reactive group is N-hydroxysuccinimide or N.
-The composition of claim 12, which is -hydroxysulfosuccinimide.
の組成物。17. The composition according to claim 12, wherein the reactive group is a maleimide group.
ール誘導体を含む、結合体。19. A conjugate comprising the taxol derivative according to claim 18 covalently bound to a blood protein.
9に記載の結合体。20. The blood protein comprises serum albumin.
9. The conjugate according to item 9.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US15268199P | 1999-09-07 | 1999-09-07 | |
US60/152,681 | 1999-09-07 | ||
PCT/IB2000/001427 WO2001017614A2 (en) | 1999-09-07 | 2000-09-07 | Methods and compositions containing succinimide or maleimide derivatives of antineoplastic agents |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2003508502A true JP2003508502A (en) | 2003-03-04 |
Family
ID=22543945
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2001521356A Pending JP2003508501A (en) | 1999-09-07 | 2000-09-07 | Pulmonary delivery for biological binding |
JP2001521398A Pending JP2003508502A (en) | 1999-09-07 | 2000-09-07 | Methods and compositions for the production of long-lasting antineoplastic agents |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2001521356A Pending JP2003508501A (en) | 1999-09-07 | 2000-09-07 | Pulmonary delivery for biological binding |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
EP (2) | EP1235618A2 (en) |
JP (2) | JP2003508501A (en) |
AU (3) | AU781380B2 (en) |
CA (2) | CA2383798A1 (en) |
WO (2) | WO2001017614A2 (en) |
Families Citing this family (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7601691B2 (en) | 1999-05-17 | 2009-10-13 | Conjuchem Biotechnologies Inc. | Anti-obesity agents |
AU2002233089B2 (en) | 2001-02-16 | 2005-12-22 | Conjuchem Biotechnologies Inc. | Long lasting glucagon-like peptide 2 (GLP-2) for the treatment of gastrointestinal diseases and disorders |
US6759029B2 (en) | 2001-05-24 | 2004-07-06 | Alexza Molecular Delivery Corporation | Delivery of rizatriptan and zolmitriptan through an inhalation route |
US6737042B2 (en) | 2001-05-24 | 2004-05-18 | Alexza Molecular Delivery Corporation | Delivery of drug esters through an inhalation route |
US20070122353A1 (en) | 2001-05-24 | 2007-05-31 | Hale Ron L | Drug condensation aerosols and kits |
US20030051728A1 (en) | 2001-06-05 | 2003-03-20 | Lloyd Peter M. | Method and device for delivering a physiologically active compound |
US6441163B1 (en) | 2001-05-31 | 2002-08-27 | Immunogen, Inc. | Methods for preparation of cytotoxic conjugates of maytansinoids and cell binding agents |
ES2242860T3 (en) | 2001-05-31 | 2005-11-16 | Conjuchem, Inc. | LONG LIFE FUSION PEPTIDIC INHIBITORS AGAINST HIV INFECTIONS. |
US6706686B2 (en) | 2001-09-27 | 2004-03-16 | The Regents Of The University Of Colorado | Inhibition of histone deacetylase as a treatment for cardiac hypertrophy |
NZ563604A (en) * | 2001-11-29 | 2009-04-30 | Theracos Inc | Compounds for treatment of inflammation, diabetes and related disorders |
EP1530588A2 (en) * | 2002-07-31 | 2005-05-18 | Conjuchem, Inc. | Long lasting natriuretic peptide derivatives |
US7230101B1 (en) | 2002-08-28 | 2007-06-12 | Gpc Biotech, Inc. | Synthesis of methotrexate-containing heterodimeric molecules |
EP1610808A4 (en) * | 2003-03-26 | 2011-04-06 | Sudhir Paul | Covalent attachment of ligands to nucleophilic proteins guided by non-covalent binding |
CA2526475A1 (en) | 2003-05-21 | 2004-12-02 | Alexza Pharmaceuticals, Inc. | Optically ignited or electrically ignited self-contained heating unit and drug-supply unit employing same |
DE10356346A1 (en) * | 2003-11-28 | 2005-06-23 | TransMIT Gesellschaft für Technologietransfer mbH | Invention relating to the prophylaxis and therapy of diseases caused by or caused by thrombus formation |
US20080228069A1 (en) * | 2003-12-01 | 2008-09-18 | Mediphysics, Inc. | Novel Differential Imaging Method |
CA2565658A1 (en) * | 2004-05-06 | 2005-11-17 | Conjuchem Biotechnologies Inc. | Compounds for specific viral target |
KR101364912B1 (en) * | 2005-08-19 | 2014-02-21 | 엔도사이트, 인코포레이티드 | Multi-drug ligand conjugates |
CN100475270C (en) | 2006-01-20 | 2009-04-08 | 清华大学 | Medicine for treating tumor, and application thereof |
CN101002945B (en) | 2006-01-20 | 2012-09-05 | 清华大学 | Novel complex used for treating tumor |
WO2008047241A2 (en) | 2006-10-16 | 2008-04-24 | Conjuchem Biotechnologies Inc. | Modified corticotropin releasing factor peptides and uses thereof |
CN101219219B (en) | 2007-01-10 | 2013-02-13 | 北京普罗吉生物科技发展有限公司 | Complex containing vascellum chalone or fragment, preparation method and application thereof |
US20080216828A1 (en) | 2007-03-09 | 2008-09-11 | Alexza Pharmaceuticals, Inc. | Heating unit for use in a drug delivery device |
JP5554702B2 (en) * | 2007-06-05 | 2014-07-23 | パカ パルモナリー ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | Methods and compositions for delivering drugs to the lung |
AU2009324637B2 (en) | 2008-12-10 | 2016-09-08 | Paka Pulmonary Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for delivery of medicaments to the lungs |
WO2016067252A1 (en) | 2014-10-31 | 2016-05-06 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Powder formulation |
SG11202009338SA (en) | 2018-03-23 | 2020-10-29 | Carmot Therapeutics Inc | Modulators of g-protein coupled receptors |
CN111138435A (en) * | 2020-01-08 | 2020-05-12 | 宜昌博仁凯润药业有限公司 | Modified methotrexate and preparation method and application thereof |
Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH01211530A (en) * | 1988-02-16 | 1989-08-24 | Pola Chem Ind Inc | Antitumor agent |
JPH04346918A (en) * | 1991-05-23 | 1992-12-02 | Mitsubishi Kasei Corp | Drug-containing protein bound liposome |
JPH09503511A (en) * | 1993-10-15 | 1997-04-08 | レッドセル,インコーポレイティド | Cell and serum protein anchors and conjugates |
WO1998000171A2 (en) * | 1996-07-01 | 1998-01-08 | Conjuchem, Inc. | Conjugates of thrombin inhibitors and endogenes carriers |
WO1998013059A1 (en) * | 1996-09-27 | 1998-04-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Hydrolyzable prodrugs for delivery of anticancer drugs to metastatic cells |
JP2001500133A (en) * | 1996-09-11 | 2001-01-09 | フェリックス クラッツ | Antitumor conjugate of transferrin, albumin and polyethylene glycol |
JP2001519784A (en) * | 1997-03-20 | 2001-10-23 | エンゾン,インコーポレーテッド | Non-antigenic branched polymer conjugate |
JP2002512640A (en) * | 1998-03-23 | 2002-04-23 | コンジュケム,インコーポレーテッド | Local delivery of sustained therapeutics |
JP2003501486A (en) * | 1999-06-09 | 2003-01-14 | カーテーベー トゥモーアフォルシュングス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | Preparation of injectable pharmaceutical preparations |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS62138430A (en) * | 1985-12-12 | 1987-06-22 | Teijin Ltd | Production of conjugate of methotrexate with protein |
DE4122210C2 (en) * | 1991-07-04 | 1999-04-01 | Deutsches Krebsforsch | Tumor-active compound-serum albumin conjugates, process for their preparation and their use |
WO1997023243A1 (en) * | 1995-12-22 | 1997-07-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Branched hydrazone linkers |
-
2000
- 2000-09-07 CA CA002383798A patent/CA2383798A1/en not_active Abandoned
- 2000-09-07 AU AU74406/00A patent/AU781380B2/en not_active Ceased
- 2000-09-07 AU AU74404/00A patent/AU7440400A/en not_active Abandoned
- 2000-09-07 CA CA002383794A patent/CA2383794A1/en not_active Abandoned
- 2000-09-07 WO PCT/IB2000/001427 patent/WO2001017614A2/en active Application Filing
- 2000-09-07 EP EP00962766A patent/EP1235618A2/en not_active Withdrawn
- 2000-09-07 WO PCT/IB2000/001429 patent/WO2001017568A2/en active IP Right Grant
- 2000-09-07 JP JP2001521356A patent/JP2003508501A/en active Pending
- 2000-09-07 EP EP00962764A patent/EP1212120A2/en not_active Withdrawn
- 2000-09-07 JP JP2001521398A patent/JP2003508502A/en active Pending
-
2005
- 2005-08-22 AU AU2005203768A patent/AU2005203768A1/en not_active Withdrawn
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH01211530A (en) * | 1988-02-16 | 1989-08-24 | Pola Chem Ind Inc | Antitumor agent |
JPH04346918A (en) * | 1991-05-23 | 1992-12-02 | Mitsubishi Kasei Corp | Drug-containing protein bound liposome |
JPH09503511A (en) * | 1993-10-15 | 1997-04-08 | レッドセル,インコーポレイティド | Cell and serum protein anchors and conjugates |
WO1998000171A2 (en) * | 1996-07-01 | 1998-01-08 | Conjuchem, Inc. | Conjugates of thrombin inhibitors and endogenes carriers |
JP2001500133A (en) * | 1996-09-11 | 2001-01-09 | フェリックス クラッツ | Antitumor conjugate of transferrin, albumin and polyethylene glycol |
WO1998013059A1 (en) * | 1996-09-27 | 1998-04-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Hydrolyzable prodrugs for delivery of anticancer drugs to metastatic cells |
JP2001519784A (en) * | 1997-03-20 | 2001-10-23 | エンゾン,インコーポレーテッド | Non-antigenic branched polymer conjugate |
JP2002512640A (en) * | 1998-03-23 | 2002-04-23 | コンジュケム,インコーポレーテッド | Local delivery of sustained therapeutics |
JP2003501486A (en) * | 1999-06-09 | 2003-01-14 | カーテーベー トゥモーアフォルシュングス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | Preparation of injectable pharmaceutical preparations |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA, vol. 1118, JPN7009002733, pages 83 - 90, ISSN: 0001336003 * |
J.MED.CHEM., vol. 43, JPN6009026653, pages 1253 - 1256, ISSN: 0001336004 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2001017568A3 (en) | 2002-07-11 |
AU7440600A (en) | 2001-04-10 |
EP1212120A2 (en) | 2002-06-12 |
WO2001017614A2 (en) | 2001-03-15 |
AU2005203768A1 (en) | 2005-09-15 |
CA2383794A1 (en) | 2001-03-15 |
CA2383798A1 (en) | 2001-03-15 |
EP1235618A2 (en) | 2002-09-04 |
JP2003508501A (en) | 2003-03-04 |
WO2001017568A2 (en) | 2001-03-15 |
AU781380B2 (en) | 2005-05-19 |
AU7440400A (en) | 2001-04-10 |
WO2001017614A3 (en) | 2002-02-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2003508502A (en) | Methods and compositions for the production of long-lasting antineoplastic agents | |
EP0294294B1 (en) | Amine derivatives of anthracycline antibiotics | |
JP2021073200A (en) | Bioorthogonal compositions | |
KR102612882B1 (en) | Pharmacokinetic enhancement of bifunctional chelates and their uses | |
US5667764A (en) | Compounds, compositions and methods for binding bio-affecting substances to surface membranes of bio-particles | |
US4950738A (en) | Amine derivatives of anthracycline antibiotics | |
JP2021073272A (en) | Drug delivery conjugates and methods for treating diseases caused by psma expressing cells | |
EP1447099B1 (en) | Antineoplastic polyethylene conjugates of cytostatic compounds and pharmaceuticals comprising same | |
JP3292301B2 (en) | Complexing agents and targeting radioimmunological reagents useful in therapeutic and diagnostic imaging compositions and methods | |
JP2001520189A (en) | Formulations and methods for reducing the toxicity of antitumor agents | |
JP2002537347A (en) | Texane derivatives for targeted therapy of cancer | |
JP4794735B2 (en) | Vitamin B12 derivatives and methods for producing them | |
EP0643706A1 (en) | Compounds, compositions and methods for binding bio-affecting substances to surface membranes of bio-particles | |
JP2000515542A (en) | Long-acting drugs and pharmaceutical compositions containing them | |
JP2022506299A (en) | A novel cell proliferation inhibitory conjugate with an integrin ligand | |
KR20200004861A (en) | IGF-1R monoclonal antibodies and uses thereof | |
US6372719B1 (en) | ανβ3 integrin antagonists in combination with chemotherapeutic agents | |
JP2022552757A (en) | Camptothecin class drugs and their antibody conjugates | |
US20090324489A1 (en) | Wortmannin conjugates and uses thereof | |
US5144012A (en) | Cytotoxic drug conjugates | |
EP0990661A1 (en) | Proactive antitumor compounds | |
CN110183504A (en) | A kind of gemcitabine pro-drug and its preparation method and application with tumor-targeting | |
Goerlach et al. | In vitro antitumor activity of 2'-deoxy-5-fluorouridine-monoclonal antibody conjugates | |
EP1889639A2 (en) | Methods and compositions containing succinimide or maleimide derivatives of antineoplastic agents, for producing long lasting antineoplastic agents | |
TW200845960A (en) | Wortmannin-rapalog conjugate and uses thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20051108 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20071025 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090602 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20091029 |