JP2002516279A - Peripheral benzodiazepine receptor ligand - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 末梢ベンゾジアゼピン受容体に高い親和度にて結合する化合物は抗炎症剤として有用である。こうした化合物としては、ＰＫ１１１９５などのイソキノリン誘導体、Ｒｏ５−４８６４などのベンゾジアゼピン誘導体が含まれる。こうした化合物によって哺乳類における炎症状態を治療するための方法が提供される。こうした化合物を含む薬学的組成物が開示される。炎症状態を治療するうえで治療学的に有効な化合物を同定するための方法が提供される。   (57) [Summary] Compounds that bind with high affinity to peripheral benzodiazepine receptors are useful as anti-inflammatory agents. Such compounds include isoquinoline derivatives such as PK11195 and benzodiazepine derivatives such as Ro5-4864. Such compounds provide a method for treating an inflammatory condition in a mammal. Pharmaceutical compositions containing such compounds are disclosed. Methods are provided for identifying compounds that are therapeutically effective in treating an inflammatory condition.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】 （発明の分野） 本発明は抗炎症剤として末梢ベンゾジアゼピンレセプターに対し高親和性にて
結合する化合物の利用に関する。この様な化合物にはイソキノリン及びベンゾジ
アゼピン誘導体が含まれる。これら化合物はチューマチ関節炎、エリテマトーデ
ス、シューグレン症候群、骨関節炎、多発性硬化症、ベーチェット病、一過性動
脈炎及びアルツハイマー型痴呆の様なヒト疾患の治療に利用できるだろう。[0001] The present invention relates to the use of compounds that bind with high affinity to peripheral benzodiazepine receptors as anti-inflammatory agents. Such compounds include isoquinoline and benzodiazepine derivatives. These compounds may be used in the treatment of human diseases, such as rheumatoid arthritis, lupus erythematosus, Sjogren's syndrome, osteoarthritis, multiple sclerosis, Behcet's disease, transient arteritis and Alzheimer's dementia.

【０００２】 （従来の技術） 歴史的に、ベンゾジアゼピンレセプターには２種類の大分類が報告されている
：中枢型及び末梢型。ジアゼパム、フルニトラセパン及びクロナゼパンの様な中
枢型ベンゾジアゼピンレセプターに関するリガンドは、ＧＡＢＡレセプターとの
相互作用を生じ、ＧＡＢＡ（ガンマ−アミノ酪酸）の活性を促進する。これらリ
ガンドは、抗痙攣、筋弛緩、鎮静及び抗不安特性を有している。これらは臨床的
に広く利用されている。レセプターは脳内に極めて多いが、末梢にも見いだされ
ている。[0002] Historically, two major classes of benzodiazepine receptors have been reported: central and peripheral. Ligands for central benzodiazepine receptors, such as diazepam, flunitrasepan and clonazepan, cause interaction with GABA receptors and promote the activity of GABA (gamma-aminobutyric acid). These ligands have anticonvulsant, muscle relaxant, sedative and anxiolytic properties. These are widely used clinically. Receptors are extremely abundant in the brain, but are also found peripherally.

【０００３】 ４’−クロロジアゼパム（Ｒｏ５−４８６４）及び（１−（２−クロロフェニ
ル）−Ｎ−メチル−Ｎ−（１−メチルプロピル）−３−イソキノリンカルボキシ
アミド（ＰＫ−１１１９５）の様な末梢ベンゾジアゼピンレセプターに対し選択
であるリガンドは、ＧＡＢＡレセプターを相互作用せず、中枢型ベンゾジアゼピ
ンレセプターリガンドと同一の薬物特性を持たない。その代わり、それらは中枢
神経系を含む全身に広く分布している末梢ベンゾジアゼピンレセプターに結合す
る。末梢ベンゾジアゼピンレセプターリガンドは明瞭な薬物特性を持たず、従っ
てその利用に関し一般に受け入れられている臨床適用は無い。[0003] Peripherals such as 4'-chlorodiazepam (Ro5-4864) and (1- (2-chlorophenyl) -N-methyl-N- (1-methylpropyl) -3-isoquinolinecarboxamide (PK-11195) Ligands that are selective for benzodiazepine receptors do not interact with GABA receptors and do not have the same drug properties as central benzodiazepine receptor ligands, instead they are peripherally distributed widely throughout the body, including the central nervous system. Binds to benzodiazepine receptors.Peripheral benzodiazepine receptor ligands do not have distinct drug properties, and thus have no generally accepted clinical applications for their use.

【０００４】 本明細書に於いて、“末梢ベンゾジアゼピンレセプター”とは、中枢ベンゾジ
アゼピンレセプターの分類と区別される末梢ベンゾジアゼピンレセプターの分類
を意味し、そして“末梢ベンゾジアゼピンレセプターリガンド”とは、末梢ベン
ゾジアゼピンレセプターに高い親和性にて結合するリガンドを意味する。[0004] As used herein, "peripheral benzodiazepine receptor" refers to a class of peripheral benzodiazepine receptors that is distinct from the class of central benzodiazepine receptors, and "peripheral benzodiazepine receptor ligands" refer to peripheral benzodiazepine receptors. A ligand that binds with high affinity is meant.

【０００５】 ＰＫ１１１９５は末梢ベンゾジアゼピンレセプターに対し特に高い親和性を
有している。ＰＫ１１１９５のヒト脳組織に関する平衡解離定数、または親和性
（Ｋｄ）は４．３ｎＭ（Ｄｏｂｌｅら、１９８７）と算定されている。マウス末
梢マクロファージに関するその親和性は５．６ｎＭと報告されている（Ｚａｖａ
ｌａとＬｅｎｆａｎｔ、１９８７ｂ）。[0005] PK11195 has a particularly high affinity for peripheral benzodiazepine receptors. The equilibrium dissociation constant, or affinity (Kd), of PK11195 for human brain tissue has been calculated to be 4.3 nM (Doble et al., 1987). Its affinity for mouse peripheral macrophages has been reported to be 5.6 nM (Zava
la and Lenfant, 1987b).

【０００６】 末梢ベンゾジアゼピンレセプターから結合ＰＫ１１１９５を置換する化合物の
能力（Ｋｉ）は、これらレセプターに対する化合物の結合の相対的強さを示す簡
便な尺度である。脳では、それはＰＫ１１１９５自体に対しては３．５ｎＭ、１
−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ａ−メチル−２−フェニルキノリン−４−プロプラナミド
（ＰＫ−１４０６７）に関しては４４ｎＭ、Ｒｏ５−４８６４については１７８
ｎＭであることが決定されている。これに対し、中枢性ベンゾジアゼピンレセプ
ターリガンドであるクロナゼパンに関する値は４６，０００ｎＭである（Ｄｏｂ
ｌｅら、１９８７）。[0006] The ability of a compound to displace bound PK11195 from peripheral benzodiazepine receptors (Ki) is a convenient measure of the relative strength of compound binding to these receptors. In the brain, it is 3.5 nM for PK11195 itself, 1
44 nM for -N, N-dimethyl-a-methyl-2-phenylquinoline-4-propranamide (PK-14067) and 178 for Ro5-4864.
It has been determined to be nM. In contrast, the value for the central benzodiazepine receptor ligand clonazepan is 46,000 nM (Dob
le et al., 1987).

【０００７】 末梢ベンゾヂアセピンレセプターは、独占的に会合してはいないとしてもミト
コンドリア外膜に強く会合していると言われている。これらレセプターとミトコ
ンドリアとに予想される会合（Ｓｎｙｄｅｒら、１９９０；Ｈｉｒｓｃｈら、１
９８９）は、それらがミトコンドリア呼吸に影響するという提言を導いた。しか
しこの見解に対しては、レセプター密度とリガンドの呼吸促進能力との間の相関
関係は乏しいという理由から意義が唱えられている（Ｚｉｓｔｅｒｅｒら、１９
９２）。[0007] Peripheral benzodiazepine receptors are said to be strongly associated, if not exclusively, with the outer mitochondrial membrane. Possible association between these receptors and mitochondria (Snyder et al., 1990; Hirsch et al., 1).
989) have led to the suggestion that they affect mitochondrial respiration. However, this view is challenged because the correlation between receptor density and ligand's ability to stimulate respiration is poor (Zisterer et al., 19).
92).

【０００８】 免疫機能に対する末梢ベンゾジアセピンレセプターリガンドについて報告され
ている効果は多様であり、多くの観点において矛盾している。ＲＫ１１１９５は
、ｉｎ ｖｉｔｒｏに於けるマイトージェン−由来のＴ−及びＢ−細胞刺激を阻
害することが示されており、この特性は多くの中枢ベンゾジアゼピンリガンドと
共通している（Ｒａｍｓｅｉｒら、１９９３；Ｂｅｓｓｌｅｒら、１９９２）。
これに対し、ＰＫ１１１９５は炎症反応を増強するヒツジ赤血球により感作され
たマウスでは、抗体産生を刺激することも報告されている（ＬｅｎｆａｎｔとＺ
ａｖａｌａ、１９８６；Ｚａｖａｌａら、１９８４；ＺａｖａｌａとＬｅｎｆａ
ｎｔ、１９８７ｂ）。Ｒｏ５−４８６４を含む末梢ベンゾジアゼピンレセプター
リガンドは、アラキドン酸の刺激を受けたマクロファージ類似Ｐ３８８Ｄ１細胞
の呼吸バーストシステムを増強することも報告されている。同様の状況において
ＰＫ１１１９５は殆ど作用しないとも報告されている（ＺａｖａｌａとＬｅｎｆ
ａｎｔ、１９８７ａ）。[0008] The reported effects of peripheral benzodiazepine receptor ligands on immune function are diverse and contradictory in many respects. RK11195 has been shown to inhibit mitogen-derived T- and B-cell stimulation in vitro, a property common to many central benzodiazepine ligands (Ramseir et al., 1993; Bessler et al.). , 1992).
In contrast, PK11195 has also been reported to stimulate antibody production in mice sensitized by sheep erythrocytes that enhance the inflammatory response (Lenfant and Z.
avala, 1986; Zavala et al., 1984; Zavala and Lenfa.
nt, 1987b). Peripheral benzodiazepine receptor ligands, including Ro5-4864, have also been reported to enhance the respiratory burst system of arachidonic acid-stimulated macrophage-like P388D1 cells. It has also been reported that PK11195 has little effect in similar situations (Zavala and Lenf).
ant, 1987a).

【０００９】 脳では、末梢ベンゾジアゼピンレセプターはグリア細胞に不随している。しか
し、脳におけるこれらレセプターの生理学的機能は不明である。多くの著者らが
カイニン酸、虚血又は新生物傷害により、ラット脳内の末梢ベンゾジアゼピンレ
セプターのレベルが増加すると報告している。同様の見解は脳腫瘍、新生物、多
発性硬化症、脳血管病及びアルツハイマー病患者の脳組織についても報告されて
いる（Ｄｉｏｒｉｏら、１９９１；Ｌｅｏｎｇら、１９９４）。[0009] In the brain, peripheral benzodiazepine receptors are associated with glial cells. However, the physiological function of these receptors in the brain is unknown. Many authors report that kainate, ischemia or neoplastic injury increases peripheral benzodiazepine receptor levels in rat brain. Similar views have been reported on brain tissue from patients with brain tumors, neoplasms, multiple sclerosis, cerebrovascular disease and Alzheimer's disease (Diorio et al., 1991; Leong et al., 1994).

【００１０】 ラット脳に対するカイニン酸傷害後、ＰＫ１１１９５の結合は時間及びマクロ
ファージの出現を伴う空間的局在に於いて増加したが、ＰＫ１１１９５結合はア
ストロ細胞の出現とは明らかに相関していなかった（Ｍｙｅｒｓら、１９９１）
。ヒト神経膠腫のＰＥＴ研究では、ＰＫ１１１９５の大きな増加が認められたが
、Ｒｏ５−４８６４については認められなかった（Ｊｕｎｋら、１９８９）。Following kainate injury to rat brain, PK11195 binding was increased in time and spatial localization with the appearance of macrophages, but PK11195 binding was not clearly correlated with the appearance of astrocytic cells ( Myers et al., 1991).
. PET studies of human glioma showed a large increase in PK11195, but not for Ro5-4864 (Junk et al., 1989).

【００１１】 末梢ベンゾジアゼピンレセプターの阻害的アゴニストは、損傷を受けた中枢神
経系組織の快復を加速するのに有用である（Ｇｅｅ、１９９３）。この作用に関
し提言されたメカニズムは、グリア細胞及びマクロファージの阻害、ならびに急
性傷害部位に於けるマクロファージによるサイトカイン産生の阻害である。しか
し、Ｔａｕｐｉｎら（１９９１、１９９３）は、炎症性サイトカインであるイン
ターロイキン−１及び腫瘍壊死因子は、末梢ベンゾジアゼピンレセプターリガン
ドにより減少するのではなく、むしろ増加することを見いだした。[0011] Inhibitory agonists of peripheral benzodiazepine receptors are useful for accelerating the recovery of damaged central nervous system tissue (Gee, 1993). The proposed mechanisms for this effect are the inhibition of glial cells and macrophages, and the inhibition of cytokine production by macrophages at the site of acute injury. However, Taupin et al. (1991, 1993) found that the inflammatory cytokines interleukin-1 and tumor necrosis factor were increased rather than decreased by peripheral benzodiazepine receptor ligands.

【００１２】 まとめると、当分野に於ける技術及び教示は一定しておらず、ＭｃＧｅｅｒら
の米国特許出願（第０８／５２０，２１１号）にも末梢ベンゾジアゼピンレセプ
ターの機能に関する包括劇コンセプト、あるいはそのリガンドの薬学的特性は認
められない。In summary, the techniques and teachings in the art are variable, and McGeer et al., US patent application Ser. No. 08 / 520,211 also includes a comprehensive drama concept on the function of the peripheral benzodiazepine receptor, or its concept. No pharmaceutical properties of the ligand are observed.

【００１３】 （発明の概要） 発明は、高親和性をもって末梢ベンゾジアゼピンレセプターに結合するリガン
ドが、抗炎症剤として機能することを開示する。哺乳動物における炎症状態を治
療する方法が提供される。方法は、この様な治療を必要とする哺乳動物に、末梢
ベンゾジアゼピンレセプターに高親和性にて結合する化合物を治療有効量投与す
ることを含む。これは、０．１−１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲、または医師
または獣医師により決定される概算（薬剤の分子量に基づき、０．３−３２０マ
イクロモル／ｋｇ／日）の投与量を必要するだろう。好ましくは、化合物は末梢
ベンゾジアゼピンレセプターに対しマイクロモル又はマイクロモル以下の親和性
にて結合する、例えばＰＫ１１１９５又は薬物学的に許容されるその塩より成る
グループから選択される。SUMMARY OF THE INVENTION The invention discloses that ligands that bind to peripheral benzodiazepine receptors with high affinity function as anti-inflammatory agents. Methods for treating an inflammatory condition in a mammal are provided. The method comprises administering to a mammal in need of such treatment a therapeutically effective amount of a compound that binds with high affinity to the peripheral benzodiazepine receptor. This may require a dose in the range of 0.1-100 mg / kg body weight / day, or an approximate dose determined by a physician or veterinarian (0.3-320 micromol / kg / day, based on molecular weight of drug). will do. Preferably, the compound binds with a micromolar or submicromolar affinity to the peripheral benzodiazepine receptor, eg is selected from the group consisting of PK11195 or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

【００１４】 発明は、不活性もしくは生理学的に活性である、１又はそれ以上の適合性の薬
学的に許容されるアジュバントまたは希釈体と組み合わせた末梢ベンゾジアゼピ
ンレセプターリガンドを含む薬学的組成体を含む。これら組成体は経口、非経口
、又は直腸経路あるいは局所的に投与できるだろう。末梢ベンゾジアゼピンレセ
プターリガンドを含む発明の組成体は、組成体が炎症状態の治療に利用できるこ
とを示すラベルを含む包装材料内に包装されるだろう。The invention includes a pharmaceutical composition comprising a peripheral benzodiazepine receptor ligand in combination with one or more compatible pharmaceutically acceptable adjuvants or diluents that are inert or physiologically active. These compositions could be administered orally, parenterally, or rectally or topically. Compositions of the invention that include a peripheral benzodiazepine receptor ligand will be packaged in a packaging material that includes a label indicating that the composition can be used for treating an inflammatory condition.

【００１５】 本発明は、哺乳動物内の炎症状態の治療に治療効果的である化合物を同定する
方法を提供する。方法は以下の化合物の選択を含む。 （１）マイクロモルまたはマイクロモル以下の親和性にて末梢ベンゾジアゼピン
レセプターに結合し；そして（２）ＭＲＬ−ｌｐｒマウス内の炎症症状の治療に
治療効果的である。[0015] The present invention provides methods for identifying compounds that are therapeutically effective in treating an inflammatory condition in a mammal. The method involves the selection of the following compounds. (1) binds to peripheral benzodiazepine receptors with micromolar or submicromolar affinity; and (2) is therapeutically effective in treating inflammatory conditions in MRL-lpr mice.

【００１６】 抗炎症性化合物を同定する方法に取り込むことができる追加段階は以下を含む
。すなわち、（１）培養マクロファージ内の呼吸バーストを阻害する化合物を選
択すること、（２）ＴＨＰ−１細胞の様な培養単球型細胞より、炎症性作用物質
により刺激を受け分泌された産物の神経毒作用を阻害する化合物を選択すること
；そして、（３）正常なヒトの脳組織に比べてヒトアルツハイマーの脳組織に対
する結合の増加を示す化合物を選択すること。[0016] Additional steps that can be incorporated into a method for identifying an anti-inflammatory compound include the following. That is, (1) selecting a compound that inhibits respiratory burst in cultured macrophages, and (2) producing a product stimulated and secreted by an inflammatory agent from cultured monocyte-type cells such as THP-1 cells. Selecting a compound that inhibits neurotoxic effects; and (3) selecting a compound that exhibits increased binding of human Alzheimer's to brain tissue relative to normal human brain tissue.

【００１７】 発明の様々な観点に利用される化合物は、以下より成るグループより選択され
る：ＰＫ１１１９５，ＰＫ−１４０６７，ＰＫ１４１０５，Ｒｏ５−６９９３，
Ｒｏ５−４８６４，Ｒｏ５−６９００，Ｒｏ５−６９４５，Ｒｏ５−６６６９，
Ｒｏ５−６９０２，Ｒｏ５−６５３１，Ｒｏ５−３４４８，ジアセパム，Ｒｏ７
−５５２０，Ｒｏ５−５１１５，Ｒｏ５−４６０８，Ｒｏ５−６５２４，Ｒｏ５
−５１２２。いずれの場合も、化合物は好ましくは１−（２−クロロフェニル）
−Ｎ−メチル−Ｎ−（１−メチルプロピル）−３−イソキノリンカルボキシアミ
ド（ＰＫ１１１９５）である。The compounds utilized in various aspects of the invention are selected from the group consisting of: PK11195, PK-14067, PK14105, Ro5-6993.
Ro5-4864, Ro5-6900, Ro5-6945, Ro5-6669,
Ro5-6902, Ro5-6531, Ro5-3448, diasepam, Ro7
−5520, Ro5-5115, Ro5-4608, Ro5-6524, Ro5
-5122. In each case, the compound is preferably 1- (2-chlorophenyl)
-N-methyl-N- (1-methylpropyl) -3-isoquinolinecarboxamide (PK11195).

【００１８】 （発明の詳細な説明） 本発明は、新規分類の抗炎症性化合物としての、高親和性末梢ベンゾジアゼピ
ンレセプターリガンドの利用を開示する。本分類化合物は、ＰＫ１１１９５の様
なイソキノリン誘導体、及びＲｏ５−４８６４の様なベンゾジアゼピン誘導体を
含む。以下の実施例は、これら薬物の抗炎症性薬物学的プロフィールを規定する
ための４種類のアッセイを含む、本発明の各種観点を例示する。これらアッセイ
は、以下の理由に基づき、抗炎症性作用物質としての高親和性末梢ベンゾジアゼ
ピンレセプターリガンドの利用を確立する。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The present invention discloses the use of high affinity peripheral benzodiazepine receptor ligands as a new class of anti-inflammatory compounds. This class of compounds includes isoquinoline derivatives such as PK11195 and benzodiazepine derivatives such as Ro5-4864. The following examples illustrate various aspects of the invention, including four assays for defining the anti-inflammatory pharmacological profile of these drugs. These assays establish the use of high affinity peripheral benzodiazepine receptor ligands as anti-inflammatory agents for the following reasons.

【００１９】 （１）ＭＲＬ−ｌｐｒマウス自己免疫疾患に於ける増強された治療効果。本疾
患は各種ヒト疾患：リューマチ関節炎（ＫｏｏｐｍａｎとＧａｙ、１９８８）、
エリテマトーデス（Ｂａｒｔｌｅｔｔら、１９８８）、シューグレン症候群（Ｈ
ａｙａｓｈｉら、１９９４）、結合組織疾患（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ、１９８８）
、行動及び神経学的傷害（Ｓａｋｉｃら、１９９３）及びＣＮＳ炎症（Ｎｏｇｅ
ｌｗｅｉｄら、１９９１）の一般に認識されたモデルである。ＰＫ１１１９５は
、通常の抗炎症剤に比べ、この自己免疫疾患により強力な病理予防を示す。(1) Enhanced therapeutic effect in MRL-lpr mouse autoimmune disease. This disease is various human diseases: rheumatoid arthritis (Koopman and Gay, 1988),
Lupus erythematosus (Bartlett et al., 1988), Sjogren's syndrome (H
ayashi et al., 1994), connective tissue disease (Rosenberg, 1988).
, Behavioral and neurological injuries (Sakic et al., 1993) and CNS inflammation (Noge
lweid et al., 1991). PK11195 shows a stronger pathological prevention by this autoimmune disease than usual anti-inflammatory agents.

【００２０】 （２）培養マクロファージに於ける呼吸バースト活性のダウンレギュレーショ
ン。ＰＫ１１１９５は、通常の抗炎症剤に比べより強力なダウンレギュレーター
である。(2) Down-regulation of respiratory burst activity in cultured macrophages. PK11195 is a more potent down-regulator than normal anti-inflammatory agents.

【００２１】 （３）抗炎症剤による刺激に続く、培養ＳＹ５Ｙ（神経型）細胞に対する、培
養ＴＨＰ−１（単球型）細胞より分泌された産物の毒作用からの防御。ＰＫ１１
１９５及びＲｏ５−４８６４は、いくつかの通常の抗炎症薬に比べより効果的な
神経保護剤である。(3) Protection from toxic effects of products secreted from cultured THP-1 (monocyte) cells on cultured SY5Y (neural type) cells following stimulation with anti-inflammatory agents. PK11
195 and Ro5-4864 are more effective neuroprotective agents than some common anti-inflammatory drugs.

【００２２】 （４）神経学的に正常な脳組織に比較し、アルツハイマー病脳組織に対し増強
された高親和性結合。Ｔ−細胞、反応性ミクログリア（マクロファージ）及び反
応性アストロ細胞（Ｉｔａｇａｋｉら、１９８６）を含む、中枢神経系に於ける
抗炎症反応に含まれる細胞は、アルツハイマー病に関連している。従って、アル
ツハイマー病組織は、中枢神経系の炎症性疾患のモデルである。ＰＫ１１１９５
及びＲｏ５−４８６４は共に、神経学的に正常な脳組織に比べアルツハイマー脳
組織に対しより大きな親和性結合を示すが、その差はＰＫ１１１９５に関しより
大きい。(4) Enhanced high-affinity binding to Alzheimer's disease brain tissue compared to neurologically normal brain tissue. Cells involved in the anti-inflammatory response in the central nervous system, including T-cells, reactive microglia (macrophages) and reactive astrocytic cells (Itagaki et al., 1986), have been implicated in Alzheimer's disease. Thus, Alzheimer's disease tissue is a model for inflammatory diseases of the central nervous system. PK11195
And Ro5-4864 both show greater affinity binding to Alzheimer's brain tissue compared to neurologically normal brain tissue, but the difference is greater for PK11195.

【００２３】 まとめると、上記アッセイの結果は動物及びヒトの炎症性疾患の治療に於ける
ＰＫ１１１９５及び末梢ベンゾジアセピンレセプターリガンドの有用性を推測さ
せる。これらは、リューマチ関節炎、エリテマトーデス、シューグレン症候群、
骨関節炎、多発性硬化症、炎症性大腸疾患、ベーチェット病、重症筋無力症、一
過性動脈炎、橋本病、疱疹状皮膚炎及び、慢性炎症が基礎的病理を悪化させる（
以下詳細を論ずる様に）アルツハイマー病を含むその他の疾患を含むが、これに
限定されるものではない。[0023] In summary, the results of the above assays suggest the utility of PK11195 and peripheral benzodiazepine receptor ligands in treating inflammatory diseases in animals and humans. These include rheumatoid arthritis, lupus erythematosus, Sjogren's syndrome,
Osteoarthritis, multiple sclerosis, inflammatory bowel disease, Behcet's disease, myasthenia gravis, transient arteritis, Hashimoto's disease, herpes dermatitis, and chronic inflammation exacerbate the underlying pathology (
Other diseases, including but not limited to Alzheimer's disease (as discussed in detail below).

【００２４】 実施例１ ＭＲＬ−Ｌｐｒマウスに於ける炎症状態の治療 ＭＬＲ−ｌｐｒマウスは広く研究されている、自然に得に重篤な自己免疫疾患
を発症するマウスである。これら動物では、各種のヒトの突発性炎症及び自己免
疫疾患に認められる病理が再現される。従って、病理はそれら複数の組合せを表
すものの、これらは各ヒト疾患に関する優れたモデルと考えられている。それら
はリューマチ関節炎（ＫｏｏｐｍａｎとＧａｙ、１９８８）、エリテマトーデス
（Ｂａｒｔｌｅｔｔら、１９８８）及びシューグレン症候群（Ｈａｙａｓｈｉら
、１９９４）に関する最も優れた動物モデルと考えられている。それらは複数の
ヒトの関節炎に認められる様な血管結合組織病を示す（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ、１
９８８）。それらは、アルツハイマー型痴呆や多発性硬化症の様な病気に於いて
は単独に認められるが、エリテマトーデスやシューグレン症候群では症候群の一
部としても認められる行動及び神経性疾患（Ｓａｋｉｃら、１９９３）ならびに
ＣＮＳ炎症の証拠（Ｖｏｇｅｌｗｅｉｄら、１９９１）を発症する。病気の病理
の重傷度と包括性より、モデルは特に抗炎症剤スクリーニングに必要とされるモ
デルと考えられている。病気の特徴は、Ｂ−リンパ細胞及びＴ−リンパ細胞の浸
潤であり、それが典型的な自己免疫疾患であることを示している。障害は、滑膜
炎症、滑膜細胞増殖、パンヌス形成、及び関節軟骨壊死及び骨破壊を含む。強力
な抗炎症剤のみがこの遺伝的障害を伴う被害を阻害するだろう。ＭＲＬ−ｌｐｒ
株のマウスは４から５ヶ月齢に自然に軽度の形態の病気を発症する。その発症と
重篤度は、１３−１４週齢にて１０ｍｇ／ｍｌの熱不活化Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌ
ｏｓｉｓを追加したフレンドのアジュバント（ＣＦＡ）の注射により増強され、
１ヶ月以内に動物の６７−８２％に影響が出た（Ｒａｔｋａｙら、１９９４；Ｒ
ａｔｋａｙら、１９９３）。 Example 1 Treatment of inflammatory conditions in MRL-Lpr mice MLR-lpr mice are widely studied and naturally develop severe autoimmune diseases. In these animals, the pathology observed in various human inflammations and autoimmune diseases is reproduced. Thus, although pathology represents a combination of these, they are considered excellent models for each human disease. They are considered the best animal models for rheumatoid arthritis (Koopman and Gay, 1988), lupus erythematosus (Bartlett et al., 1988) and Sjogren's syndrome (Hayashi et al., 1994). They show vascular connective tissue disease as seen in multiple human arthritis (Rosenberg, 1).
988). They are found alone in diseases such as Alzheimer's dementia and multiple sclerosis, but also in behavioral and neurological diseases that are also recognized as part of the syndrome in lupus erythematosus and Sjogren's syndrome (Sakic et al., 1993). As well as evidence of CNS inflammation (Vogelweid et al., 1991). Due to the severity and comprehensiveness of the pathology of the disease, the model is considered to be a model particularly required for anti-inflammatory drug screening. A hallmark of the disease is the infiltration of B-lymphocytes and T-lymphocytes, indicating that it is a typical autoimmune disease. Disorders include synovial inflammation, synovial cell proliferation, pannus formation, and articular cartilage necrosis and bone destruction. Only powerful anti-inflammatory drugs will inhibit the damage associated with this genetic disorder. MRL-lpr
Strain mice develop a mild form of the disease spontaneously at 4 to 5 months of age. Its onset and severity were 10 mg / ml heat-inactivated M. pneumoniae at 13-14 weeks of age. tubercul
enhanced by injection of a friend's adjuvant (CFA) with the addition of osis,
Within one month 67-82% of the animals were affected (Ratkay et al., 1994; R
atkay et al., 1993).

【００２５】 第１組の実験では、１３−１４週齢のＭＲＬ−ｌｐｒ株のマウスに、１０ｍｇ
／ｍｌの熱不活化Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓを追加したＣＦＡ０．０５ｍｌ
を、標準的手法に従い２カ所の胸部皮膚内に注射し、さらにアルコールに溶解さ
れたＰＫ１１１９５を毎日注射により皮下投与した。毎日の注射は１４日目まで
続けられた。動物は３０日目に屠殺され、関節を組織病理学的に調べた。４種類
のＰＫ１１１９５投与量を使用した：０．０１ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝１５）、０．１
ｍｇ／ｋｇ（Ｎ＝１０）、０．５ｍｇ／ｋｇ（Ｎ＝９）及び１ｍｇ／ｋｇ（Ｎ＝
７）。結果はＣＦＡのみを投与された（ｎ＝１４）、またはＣＦＡとエタノール
のみによる治療を受けた（ｎ＝８）同腹子の結果と比較された。屠殺後、動物は
滑膜下炎症、滑膜肥大、軟骨破壊及びパヌアス形成、ならびに骨破壊に関し評価
された。Ｒａｔｋａｙらの（１９９３）評価システムを使った結果を表１に示す
。ＰＫ１１１９５はコントロールマウスに観察された全組織学的スコアを、最低
用量である０．０１ｍｇ／ｋｇにおいてさえ低下させた。Ｒａｔｋａｙら（１９
９４）により得られた結果に比べ、０．１ｍｇ／ｋｇ用量のＰＫ１１１９５はイ
ンドメタシン投与の１０倍以上、シクロスポリン投与ならびに関節注射１日目の
６０コバルト源からの３Ｇｙの放射線全身照射の４０倍以上効果的であった。In a first set of experiments, 13-14 week old MRL-lpr strain mice were
/ Ml heat inactivation. 0.05ml of CFA with addition of tuberculosis
Was injected into the breast skin in two places according to standard procedures, and PK11195 dissolved in alcohol was subcutaneously administered daily by injection. Daily injections continued until day 14. Animals were sacrificed on day 30 and joints were examined histopathologically. Four PK11195 doses were used: 0.01 mg / kg (n = 15), 0.1
mg / kg (N = 10), 0.5 mg / kg (N = 9) and 1 mg / kg (N =
7). Results were compared to those of littermates that received CFA alone (n = 14) or were treated with CFA and ethanol only (n = 8). After sacrifice, animals were evaluated for subsynovial inflammation, synovial hypertrophy, cartilage destruction and pannus formation, and bone destruction. The results using the Ratkay et al. (1993) evaluation system are shown in Table 1. PK11195 reduced the overall histological score observed in control mice, even at the lowest dose of 0.01 mg / kg. Ratkay et al. (19
94), PK11195 at a dose of 0.1 mg / kg is more than 10 times more effective than indomethacin administration and more than 40 times more effective than cyclosporine administration and whole body irradiation of 3 Gy from 60 cobalt source on the first day of joint injection. It was a target.

【００２６】[0026]

【表１】 アルコールはマウスに対し刺激性の賦形剤であることが分かっているため、以
下の実験ではＰＫ１１１９５に関してはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を非
刺激性溶媒として選んだ。これら実験におけるアジュバント関節炎導入法は同じ
である。[Table 1] Since alcohol is known to be an irritating excipient for mice, dimethyl sulfoxide (DMSO) was chosen as the non-irritating solvent for PK11195 in the experiments below. The adjuvant arthritis induction method in these experiments is the same.

【００２７】 第２の実験シリーズは、第１の実験と同一の基準を利用し、ＤＭＳＯに溶解し
たＰＫ１１１９５のＭＲＬ−ｌｐｒアジュバント関節炎防止能を試験した。０日
目より開始し（ＣＦＡ注射の日）、動物は無処置（ｎ＝１０）のまま、あるいは
０．１ｍｌＤＭＳＯ単独（ｎ＝１４）、又は０．１ｍｌＤＭＳＯに溶解したＰＫ
１１１９５の各種用量を３０日に屠殺するまで皮下投与した。ＰＫ１１１９５は
日用量０．０１ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝６）、０．１ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝６）、０．５ｍ
ｇ／ｋｇ（ｎ＝１９）及び１ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝６）投与された。未処置の動物の
約８０％が視認できる関節炎を発症した。高用量のＰＫ１１１９５を投与された
動物では視認できる腫脹の頻度は大きく減少し、病気の発症も遅延した。この臨
床評価は屠殺後、関節の組織学的解析によって確認された。用量反応効果が認め
られ（表２）、１ｍｇ／ｋｇのＰＫ１１１９５が最も高い予防作用を示した。Ｄ
ＭＳＯ単独が、＜０．０５の有意差レベルには達しないものの、軽度の効果を持
つことは興味深い。A second series of experiments tested the ability of PK11195 dissolved in DMSO to prevent MRL-lpr adjuvant arthritis using the same criteria as the first experiment. Starting from day 0 (day of CFA injection), animals remain untreated (n = 10), or PK dissolved in 0.1 ml DMSO alone (n = 14) or 0.1 ml DMSO.
Various doses of 11195 were administered subcutaneously until sacrifice on day 30. PK11195 has a daily dose of 0.01 mg / kg (n = 6), 0.1 mg / kg (n = 6), 0.5 m
g / kg (n = 19) and 1 mg / kg (n = 6). Approximately 80% of untreated animals developed visible arthritis. In animals receiving high doses of PK11195, the frequency of visible swelling was greatly reduced and disease onset was delayed. This clinical evaluation was confirmed by histological analysis of the joints after sacrifice. A dose-response effect was observed (Table 2), and PK11195 at 1 mg / kg showed the highest protective effect. D
It is interesting that MSO alone does not reach a significance level of <0.05, but has a mild effect.

【００２８】[0028]

【表２】 これら２シリーズの実験は、ＰＫ１１１９５が良く確立されているＭＲＬ−ｌ
ｐｒ動物モデルに於いて関節炎導入に対する予防効果を持つことを立証した。[Table 2] These two series of experiments demonstrate that PK11195 is well established MRL-1
It has been demonstrated to have a protective effect on the induction of arthritis in a pr animal model.

【００２９】 第３の実験シリーズは、一度確立されたＭＲＬ−ｌｐｒ関節炎を阻害するＰＫ
１１１９５の能力を試験した。マウスを０日目に先の２シリーズの実験同様にし
てＣＦＡにおりプライムした。ＤＭＳＯ単独処理、またはＤＭＳＯ中のＰＫ１１
１９５による処理は、明瞭な腫脹が現れた１０日目まで開始されなかった。それ
から０．１ｍｌＤＭＳＯ中のＰＫ１１１９５又は０．１ｍｌのＤＭＳＯのみを屠
殺する３０日目まで毎日皮下投与した。アジュバントを注射されたコントロール
群（ｎ＝１０）の紅斑及び腫脹は実験全期間を通じ明瞭であった。ＤＭＳＯ単独
（ｎ＝１３）及び投与量０．０３ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝８）、０．３ｍｇ／ｋｇ（ｎ
＝１６）、及び３．０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝１６）のＰＫ１１１９５は治療群であっ
た。３．０ｍｇ／ｋｇのＰＫ１１１９５は腫脹を大きく軽減した（表３）。この
ことは、３０日目に屠殺した後に行った組織学的解析により確認された。３ｍｇ
／ｋｇのＰＫ１１１９５は関節の組織病理を軽減した（表４）。[0029] The third series of experiments involved PKs that inhibit the once established MRL-lpr arthritis.
11195 abilities were tested. Mice were primed on day 0 in CFA as in the previous two series of experiments. DMSO alone or PK11 in DMSO
Treatment with 195 was not started until day 10 when overt swelling appeared. Then either PK11195 in 0.1 ml DMSO or 0.1 ml DMSO alone was administered subcutaneously daily until day 30 at sacrifice. Erythema and swelling in the control group (n = 10) injected with adjuvant were clear throughout the experiment. DMSO alone (n = 13) and doses of 0.03 mg / kg (n = 8), 0.3 mg / kg (n
= 16), and PK11195 at 3.0 mg / kg (n = 16) were in the treatment group. 3.0 mg / kg PK11195 significantly reduced swelling (Table 3). This was confirmed by histological analysis performed after sacrifice on day 30. 3mg
/ Kg PK11195 reduced joint histopathology (Table 4).

【００３０】 本実験シリーズは、ＰＫ１１１９５が、ＭＲＬ−ｌｐｒモデルに既に確立され
た関節炎に顕著な治療効果を有することを立証した。This series of experiments has demonstrated that PK11195 has a significant therapeutic effect on arthritis already established in the MRL-lpr model.

【００３１】[0031]

【表３】 [Table 3]

【００３２】[0032]

【表４】 実施例２ 培養マクロファージに於ける呼吸バーストの阻害 呼吸バーストシステムは腹膜マクロファージの様な担当食細胞が有する攻撃メ
カニズムである。主な機能はスーパーオキサイドラジカルを産生して敵対的侵入
者より体を守ることであるが、不適当な活性化は宿主組織を損傷する。酸化スト
レスはより危険な炎症付随現象の一つと信じられている。呼吸バーストシステム
は、培養マッシュマクロファージにより、補体蛋白質によりオプソニン化された
ザイモサン粒子への曝露（ＫｌｅｇｅｒｉｓとＭｃＧｅｅｒ、１９９４）を含む
様々な様式にて活性化される。腹膜マクロファージをオプソニン化されたザイモ
サンに曝露する前後に投与したＰＫ１１１９５の呼吸バースト阻害能を表５に示
す。１０^-4では、オプソニン化ザイモサン前後に関わらず、ＰＫ１１１９５は呼
吸バーストを５０％以上阻害した。このことは、効果がプソニン化されたザイモ
サンレセプターより下流にあるか、又は無関係であることを示している。表５は
また炎症性疾患に効果的である３種類の薬剤：インドメタシン、プレドニゾン及
びダプソンの効果比較も示している。これら薬剤はいずれもＰＫ１１１９５に比
べると実質的に効果は低く、オプソニン化ザイモサン前に比べ、後に投与された
場合により阻害が低いことを示す傾向にある。これらのデータは、ＰＫ１１１９
５が良く知られている抗炎症剤に比べ、呼吸バーストをより強力、かつ異なるメ
カニズムにより阻害することを示している。それは末梢ベンゾジアセピンレセプ
ターに関するプロトタイプベンゾジアゼピンリガンドである４−クロロジアゼパ
ムより効果的である。[Table 4] Example 2 Inhibition of respiratory burst in cultured macrophages The respiratory burst system is an attack mechanism possessed by phagocytic cells such as peritoneal macrophages. Its primary function is to produce superoxide radicals to protect the body from hostile invaders, but inappropriate activation damages host tissues. Oxidative stress is believed to be one of the more dangerous inflammatory phenomena. The respiratory burst system is activated by cultured mash macrophages in a variety of ways, including exposure to zymosan particles opsonized by complement proteins (Klegeris and McGeer, 1994). Table 5 shows the respiratory burst inhibitory ability of PK11195 administered before and after exposing peritoneal macrophages to opsonized zymosan. At 10 ^-4 , PK11195 inhibited respiratory burst by more than 50%, before and after opsonized zymosan. This indicates that the effect is downstream or independent of the psoninated zymosan receptor. Table 5 also shows a comparison of the effects of three drugs that are effective in inflammatory diseases: indomethacin, prednisone and dapsone. Both of these agents are substantially less effective than PK11195 and tend to show less inhibition when administered later than before opsonized zymosan. These data are based on PK1119
5 shows that respiratory burst is more potent and inhibits by different mechanisms than well known anti-inflammatory agents. It is more effective than 4-chlorodiazepam, a prototype benzodiazepine ligand for the peripheral benzodiazepine receptor.

【００３３】[0033]

【表５】 実施例３ 炎症メディエーターに刺激された単球ＴＨＰ−１細胞の分泌産物を
要因とする神経ＳＹ５Ｙ細胞に対する細胞毒性の低減 [Table 5] Example 3 Secretion products of monocyte THP-1 cells stimulated by inflammatory mediators
Reduction of cytotoxicity to neural SY5Y cells as a factor

【００３４】 ＴＨＰ−１細胞などの単球型培養細胞は、炎症性物質によって刺激されると、
それらの凝集体において培養ニューロンに対して毒性の産物を分泌する。 ヒト単球ＴＨＰ−１細胞を、５％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含む１ｍｌのダル
ベッコの改質イーグル培地栄養混合物−Ｆ１２中で２４ウエルプレートに１ウエ
ル当たり５×１０⁵細胞の濃度でプレートした。１μｇ／ｍｌのリポ多糖（ＬＰ
Ｓ）と３３３Ｕ／ｍｌのインターフェロン−γ（ＩＦＮ―γ）からなる炎症性刺
激を加える前に、ＴＨＰ−１細胞を薬剤の存在下または不在下に３０分間インキ
ュベートした。加湿した５％ＣＯ₂／９５％空気雰囲気下に３７℃で２４時間イ
ンキュベートした後、細胞フリー上清の０．５ｍｌアリコートを、２４時間前に
プレートしたＳＹ５Ｙ細胞を含むウエルに移した。７２時間培養した後、溶解し
た細胞から培地中に放出された乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）の量によって細
胞死を評価した。生存細胞は、ホルマザン染料３−（４，５−ジメチルチアゾル
−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を還元す
る培養細胞の能力によって測定した。When monocyte-type cultured cells such as THP-1 cells are stimulated by an inflammatory substance,
They secrete products that are toxic to cultured neurons in their aggregates. Human monocyte THP-1 cells were plated at a concentration of 5 × 10 ⁵ cells per well in 24-well plates in 1 ml of Dulbecco's Modified Eagle Medium Nutrient Mixture-F12 containing 5% fetal bovine serum (FBS). . 1 μg / ml lipopolysaccharide (LP
THP-1 cells were incubated for 30 minutes in the presence or absence of the drug before adding an inflammatory stimulus consisting of S) and 333 U / ml interferon-γ (IFN-γ). After incubation for 24 hours at 37 ° C. in a humidified 5% CO ₂ /95% air atmosphere, a 0.5 ml aliquot of the cell-free supernatant was transferred to wells containing SY5Y cells plated 24 hours ago. After culturing for 72 hours, cell death was evaluated by the amount of lactate dehydrogenase (LDH) released from the lysed cells into the medium. Viable cells were measured by the ability of the cultured cells to reduce the formazan dye 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT).

【００３５】 培養細胞上清のＬＤＨ活性は、ＤｅｃｋｅｒおよびＬｏｈｍａｎｎ−Ｍａｔｈ
ｈｅｓ（１９８８年）により記載された、ヨードニトロテトラゾリウム染料ＩＮ
Ｔのホルマザン生成物の生成を比色分析により精察する酵素アッセイにより測定
した。光学密度を測定し、ＬＤＨの量を以下の式で計算された特異的細胞溶解（
％）として表した。The LDH activity of the cultured cell supernatant was determined by Decker and Lohmann-Math.
iodonitrotetrazolium dye IN, described by Hes (1988)
The formation of the formazan product of T was measured by an enzyme assay probed by colorimetry. The optical density was measured, and the amount of LDH was calculated based on the specific cell lysis (calculated by the following formula).
%).

【００３６】 ％溶解細胞＝１００×〔ΔＡ（処理）−ΔＡ（非処理）〕／ΔＡ（溶解） 〔式中、ΔＡは、バックグラウンド吸光度を差し引いた４９０ｎｍでの上清の
吸光度であり、ΔＡ（処理）は、薬剤処理した細胞由来の上清に関する測定値で
あり、ΔＡ（非処理）は、新鮮な培地でのみインキュベートした細胞由来の上清
に関する測定値であり、ΔＡ（溶解）は、１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００で完
全に溶解させた細胞由来の上清に関する測定値である〕。% Lysed cells = 100 × [ΔA (treated) −ΔA (untreated)] / ΔA (lysed) wherein ΔA is the absorbance of the supernatant at 490 nm after subtracting the background absorbance, and ΔA (Treatment) is the measured value for the supernatant from cells treated with the drug, ΔA (untreated) is the measured value for the supernatant from cells incubated only in fresh medium, and ΔA (lysis) is This is a measurement value for a supernatant derived from cells completely lysed with 1% Triton X-100.]

【００３７】 ＭＴＴアッセイは、Ｍｏｓｍａｎｎ（１９８３年）およびＨａｎｓｅｎら（１
９８９年）によって記載された方法で実施した。この方法は、死滅細胞ではなく
生存細胞によってＭＴＴを有色ホルマザンに転換することに基づいている。ＳＹ
５Ｙ細胞の生存力は、ＳＹ５Ｙ培養細胞にＭＴＴを１ｍｇ／ｍｌの最終濃度まで
加えて測定した。プレートを一晩３７℃下に置き、１００μｌのアリコートを９
６ウエルプレートに移し、対応フィルターを備えたプレート読み取り装置を用い
て５７０ｎｍでの光学密度を測定した。以下の式により生存細胞の百分率を計算
した。The MTT assay is described in Mosmann (1983) and Hansen et al.
989). This method is based on converting MTT to colored formazan by viable cells rather than dead cells. SY
The viability of 5Y cells was measured by adding MTT to SY5Y cultured cells to a final concentration of 1 mg / ml. The plate was placed at 37 ° C. overnight and a 100 μl aliquot was
The plate was transferred to a 6-well plate, and the optical density at 570 nm was measured using a plate reader equipped with a corresponding filter. The percentage of viable cells was calculated according to the following formula:

【００３８】 ％生存細胞＝１００×〔ＯＤ（処理）−ＯＤ（溶解）〕／〔ＯＤ（非処理）−
ＯＤ（溶解）〕 （式中、ＯＤは光学密度である）。ＬＤＨ実験において、処理とは、薬剤で処
理した細胞を指し、非処理とは、新鮮な培地でのみインキュベートした細胞を指
し、溶解とは、１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００で完全溶解させた細胞を指す。% Viable cells = 100 × [OD (treatment) −OD (lysis)] / [OD (untreated) −
OD (dissolution)] (where OD is the optical density). In LDH experiments, treatment refers to cells treated with the drug, untreated refers to cells incubated only in fresh medium, and lysis refers to cells completely lysed with 1% Triton X-100. .

【００３９】 結果を表６に示す。これらの結果は、ＰＫ１１１９５もＲｏ５−４８６４も、
２×１０^-6Ｍ〜５×１０^-5Ｍの範囲の用量で神経培養細胞に対する毒性を有意に
阻害したことを示している。このアッセイにおいて上記と同等な濃度で効果を示
さなかった物質には、プレドニゾン、デキサメタゾンおよびプロペントフィリン
などの周知の抗炎症剤が含まれる。Table 6 shows the results. These results show that both PK11195 and Ro5-4864
The results show that the dose in the range of 2 × 10 ⁻⁶ M to ⁵ × 10 ⁻⁵ M significantly inhibited the toxicity to cultured nerve cells. Substances that did not work as well in this assay at comparable concentrations include well-known anti-inflammatory agents such as prednisone, dexamethasone and propentofylline.

【００４０】[0040]

【表６】 これらの実験は、ＰＫ１１１９５およびＲｏ５−４８６４が周知の炎症メディ
エーターであるリポ多糖およびγ−インターフェロンによる炎症誘発後に単球型
細胞により分泌された神経毒性産物に対して保護作用を有することを立証してい
る。[Table 6] These experiments demonstrate that PK11195 and Ro5-4864 have a protective effect on neurotoxic products secreted by monocyte-type cells following induction of inflammation by the well-known inflammatory mediators lipopolysaccharide and γ-interferon. I have.

【００４１】 実施例４： ヒトアルツハイマー脳組織への結合 今までのところ、組織中の推定末梢ベンゾジアゼピンレセプターのレベルを測
定し得る唯一の方法は、ＰＫ１１１９５などの特異的リガンドの高親和性結合に
よるものである。アルツハイマー脳組織と正常脳組織におけるレベルを比較する
ために、アルツハイマー脳組織と正常脳組織に対するＰＫ１１１９５の高親和性
結合を評価した。Ｓｃｈｏｅｍａｋｅｒら（１９８３年）の標準法を用いた。 Example 4 Binding to Human Alzheimer Brain Tissues So far, the only way that the levels of putative peripheral benzodiazepine receptors in tissues can be determined is by high affinity binding of specific ligands such as PK11195. It is. To compare levels in Alzheimer's and normal brain tissues, high affinity binding of PK11195 to Alzheimer's and normal brain tissues was evaluated. The standard method of Schoemaker et al. (1983) was used.

【００４２】 アルツハイマー脳組織と対照脳組織についての結果を表７に示す。この表に示
されているように、アルツハイマーの場合は、対照脳組織の場合よりＰＫ１１１
９５の結合が２．７倍も高かった。これは、Ｒｏ５−４８６４に関して観察され
た差（ＭｃＧｅｅｒら、１９８８年）より大きい。Table 7 shows the results for Alzheimer's brain tissue and control brain tissue. As shown in this table, Alzheimer's PK111 was higher than that of control brain tissue.
The binding of 95 was 2.7 times higher. This is greater than the difference observed for Ro5-4864 (McGeer et al., 1988).

【００４３】[0043]

【表７】 他のイソキノリン誘導体またはベンゾジアゼピン誘導体の力価をＰＫ１１１９
５と比較し得る基準は、競合的結合アッセイにおいてＰＫ１１１９５を置換する
それらの能力である（Ｄｏｂｌｅら、１９８７年）。[Table 7] The titer of other isoquinoline or benzodiazepine derivatives was determined by PK1119.
A criterion that can be compared to 5 is their ability to displace PK11195 in a competitive binding assay (Doble et al., 1987).

【００４４】 実施例５： 新規な抗炎症化合物の同定法 本発明は、哺乳動物の炎症症状を治療するために治療上有効な化合物を同定す
る方法を提供する。この方法は、（１）末梢ベンゾジアゼピンレセプターにマイ
クロモルまたはサブマイクロモル濃度の親和性で結合する化合物、および（２）
ＭＲＬ−１ｐｒマウスの炎症症状の治療に治療上有効な化合物を選択する工程を
含む。 Example 5: Methods for identifying novel anti-inflammatory compounds The present invention provides methods for identifying compounds that are therapeutically effective for treating inflammatory conditions in mammals. This method comprises: (1) a compound that binds to peripheral benzodiazepine receptors with micromolar or submicromolar affinity; and (2)
Selecting a compound that is therapeutically effective in treating inflammatory conditions in the MRL-1pr mouse.

【００４５】 抗炎症化合物の同定法には、追加の工程：（１）培養マクロファージの呼吸性
バーストを阻害する化合物を選択する工程、（２）炎症性刺激に暴露した後の単
球型培養細胞による神経毒性産物の分泌を阻害する化合物を選択する工程、また
は、（３）正常なヒト脳組織に比べてアルツハイマー脳組織に対して増大結合を
示す化合物を選択する工程を加え得る。Additional methods for identifying anti-inflammatory compounds include: (1) selecting compounds that inhibit respiratory burst of cultured macrophages, (2) monocyte-type cultured cells after exposure to inflammatory stimuli Or a step of (3) selecting a compound that shows increased binding to Alzheimer's brain tissue compared to normal human brain tissue.

【００４６】 抗炎症化合物を同定する方法において、利用される化合物は、ＰＫ１１１９５
、ＰＫ−１４０６７、ＰＫ１４１０５、Ｒｏ５−６９９３、Ｒｏ５−４８６４、
Ｒｏ５−６９００、Ｒｏ５−６９４５、Ｒｏ５−６６６９、Ｒｏ５−６９０２、
Ｒｏ５−６５３１、Ｒｏ５−３４４８、ジアゼパム、Ｒｏ７−５５２０、Ｒｏ５
−５１１５、Ｒｏ５−４６０８、Ｒｏ５−６５２４、Ｒｏ５−５１２２、これら
の化合物の治療上許容し得る塩またはこれらの化合物の混合物もしくはそれらの
塩からなる群から選択し得る。In the method of identifying an anti-inflammatory compound, the compound utilized is PK11195
, PK-14067, PK14105, Ro5-6993, Ro5-4864,
Ro5-6900, Ro5-6945, Ro5-6669, Ro5-6902,
Ro5-6531, Ro5-3448, diazepam, Ro7-5520, Ro5
-5115, Ro5-4608, Ro5-6524, Ro5-5122, a therapeutically acceptable salt of these compounds or a mixture of these compounds or salts thereof.

【００４７】 実施例６： 治療法 哺乳動物の炎症症状の治療法を提供する。この方法は、炎症症状の治療を要す
る哺乳動物に、治療上有効量の化合物またはその化合物の医薬上許容し得る塩を
投与することを含み、化合物は、末梢ベンゾジアゼピンレセプターにマイクロモ
ルまたはサブマイクロモル濃度の親和性で結合する化合物からなる群から選択さ
れる。この方法は、哺乳動物が人間であり、化合物がヒト末梢ベンゾジアゼピン
レセプターにマイクロモルまたはサブマイクロモル濃度の親和性で結合する場合
に実施し得る。炎症症状は、慢性関節リューマチ、エリテマトーデス、シェーグ
レン症候群、骨関節症、多発性硬化症、ベーチェット病、側頭動脈炎であってよ
いが、それらには限定されず、抗炎症剤の使用を必要とするいずれの炎症性疾患
であってもよい。あるいは、炎症症状は、アルツハイマー型痴呆であってもよく
、末梢ベンゾジアゼピンレセプターは脳に見出されるものであってもよい。アル
ツハイマー型痴呆は、脳の慢性炎症を特徴とし、かつ抗炎症治療に応答すること
が示されたので、上記カテゴリーに包含される（米国特許第５，１９２，７５３
号、ヨーロッパ特許第０ ６４２ ３３６ Ｂ１号）。 Example 6 Therapeutic Methods A method for treating inflammatory conditions in a mammal is provided. The method comprises administering to a mammal in need of treatment for an inflammatory condition, a therapeutically effective amount of a compound or a pharmaceutically acceptable salt of the compound, wherein the compound is administered to peripheral benzodiazepine receptors at micromolar or submicromolar levels. It is selected from the group consisting of compounds that bind with a concentration of affinity. This method may be practiced where the mammal is a human and the compound binds to human peripheral benzodiazepine receptor with micromolar or sub-micromolar affinity. The inflammatory condition can be, but is not limited to, rheumatoid arthritis, lupus erythematosus, Sjogren's syndrome, osteoarthritis, multiple sclerosis, Behcet's disease, temporal arteritis, and requires the use of anti-inflammatory agents. Any inflammatory disease. Alternatively, the inflammatory condition may be Alzheimer's dementia and the peripheral benzodiazepine receptor may be one found in the brain. Alzheimer's dementia is included in the above category because it is characterized by chronic inflammation of the brain and has been shown to respond to anti-inflammatory treatments (US Pat. No. 5,192,753)
No. 0 642 336 B1).

【００４８】 好ましい化合物はＰＫ１１１９５である。しかし、化合物は、ＰＫ１１１９５
、ＰＫ−１４０６７、ＰＫ１４１０５、Ｒｏ５−６９９３、Ｒｏ５−４８６４、
Ｒｏ５−６９００、Ｒｏ５−６９４５、Ｒｏ５−６６６９、Ｒｏ５−６９０２、
Ｒｏ５−６５３１、Ｒｏ５−３４４８、ジアゼパム、Ｒｏ７−５５２０、Ｒｏ５
−５１１５、Ｒｏ５−４６０８、Ｒｏ５−６５２４、Ｒｏ５−５１２２、これら
の化合物の治療上許容し得る塩またはこれらの化合物の混合物もしくはそれらの
塩、あるいは末梢ベンゾジアゼピンレセプターに上記のものと同等またはそれ以
上の高さの親和性で結合する他の化合物からなる群から選択し得る。A preferred compound is PK11195. However, the compound is PK11195
, PK-14067, PK14105, Ro5-6993, Ro5-4864,
Ro5-6900, Ro5-6945, Ro5-6669, Ro5-6902,
Ro5-6531, Ro5-3448, diazepam, Ro7-5520, Ro5
-5115, Ro5-4608, Ro5-6524, Ro5-5122, therapeutically acceptable salts of these compounds or mixtures of these compounds or salts thereof, or peripheral benzodiazepine receptors with equivalent or greater than the above. It may be selected from the group consisting of other compounds that bind with high affinity.

【００４９】 実施例７： 配合物 本発明は、末梢ベンゾジアゼピンレセプターリガンドと組み合わせて、不活性
または生理的に活性であってよい１種以上の医薬上許容し得る適合性アジュバン
トまたは希釈剤を含む医薬組成物を含む。これらの組成物は、経口、非経口もし
くは経直腸または局所的に投与し得る。末梢ベンゾジアゼピンレセプターリガン
ドはＰＫ１１１９５であってよい。しかし、リガンドは、ＰＫ１１１９５、ＰＫ
−１４０６７、ＰＫ１４１０５、Ｒｏ５−６９９３、Ｒｏ５−４８６４、Ｒｏ５
−６９００、Ｒｏ５−６９４５、Ｒｏ５−６６６９、Ｒｏ５−６９０２、Ｒｏ５
−６５３１、Ｒｏ５−３４４８、ジアゼパム、Ｒｏ７−５５２０、Ｒｏ５−５１
１５、Ｒｏ５−４６０８、Ｒｏ５−６５２４、Ｒｏ５−５１２２、これらの化合
物の治療上許容し得る塩またはこれらの化合物の混合物もしくはそれらの塩、あ
るいは末梢ベンゾジアゼピンレセプターに上記のものと同等またはそれ以上の高
さの親和性で結合する他の化合物からなる群から選択し得る。 Example 7: Formulation The present invention relates to a medicament comprising one or more pharmaceutically acceptable compatible adjuvants or diluents which may be inert or physiologically active in combination with a peripheral benzodiazepine receptor ligand. Composition. These compositions may be administered orally, parenterally or rectally or topically. The peripheral benzodiazepine receptor ligand may be PK11195. However, the ligands are PK11195, PK11
-14067, PK14105, Ro5-6993, Ro5-4864, Ro5
-6900, Ro5-6945, Ro5-6669, Ro5-6902, Ro5
-6531, Ro5-3448, diazepam, Ro7-5520, Ro5-51
15, Ro5-4608, Ro5-6524, Ro5-5122, therapeutically acceptable salts of these compounds or mixtures of these compounds or salts thereof, or high levels of peripheral benzodiazepine receptors equal to or higher than those described above. May be selected from the group consisting of other compounds that bind with high affinity.

【００５０】 錠剤、丸剤、散剤（ゼラチンカプセルもしくはカシェ剤）または顆粒剤を経口
投与用の固体組成物として用い得る。これらの組成物において、本発明の有効成
分は、スターチ、セルロース、スクロース、ラクトースまたはシリカなどの１種
以上の不活性希釈剤と混合し得る。これらの組成物はさらに、希釈剤以外の物質
、例えば、ステアリン酸マグネシウムもしくはタルクなどの１種以上の潤滑剤、
着色剤、コーティング（糖剤）またはラッカーを含み得る。Tablets, pills, powders (gelatin capsules or cachets) or granules can be used as solid compositions for oral administration. In these compositions, the active ingredients of the present invention may be mixed with one or more inert diluents, such as starch, cellulose, sucrose, lactose or silica. These compositions may further comprise substances other than diluents, for example, one or more lubricants such as magnesium stearate or talc,
It may contain coloring agents, coatings (sugars) or lacquers.

【００５１】 水、エタノール、グリセロール、安息香酸、ベンジルアルコール、安息香酸ナ
トリウム、ジメチルスルホキシド、植物油または液体パラフィンなどの不活性希
釈剤を含む医薬上許容し得る溶剤、懸濁剤、エマルション、シロップ剤およびエ
リキシル剤を経口投与用の液体組成物として用い得る。これらの組成物は、希釈
剤以外の物質、例えば、湿潤剤、甘味剤、増粘剤、矯味矯臭剤または安定剤を含
み得る。Pharmaceutically acceptable solvents, suspensions, emulsions, syrups and the like, including inert diluents such as water, ethanol, glycerol, benzoic acid, benzyl alcohol, sodium benzoate, dimethyl sulfoxide, vegetable oil or liquid paraffin; Elixirs may be used as liquid compositions for oral administration. These compositions may contain substances other than diluents, for example wetting, sweetening, thickening, flavoring or stabilizing agents.

【００５２】 非経口投与用の無菌組成物は、非水性溶剤、懸濁剤またはエマルションである
のが好ましい。水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル、安息香酸、ベンジルアルコール、安息香酸ナトリウム、ジメチルスルホキシ
ド、植物油、特にオリーブ油、注射可能な有機酸エステル、例えばオレイン酸エ
チルもしくは他の適当な有機溶媒を溶剤または担体として用い得る。[0052] The sterile composition for parenteral administration is preferably a non-aqueous solvent, suspension or emulsion. Water or ethanol, propylene glycol, polyethylene glycol, benzoic acid, benzyl alcohol, sodium benzoate, dimethyl sulfoxide, vegetable oils, especially olive oil, injectable organic acid esters such as ethyl oleate or other suitable organic solvent or carrier Can be used as

【００５３】 これらの組成物はさらに、アジュバント、特に湿潤剤、張度調節剤、乳化剤、
分散剤および安定剤を含み得る。滅菌は、いくつかの方法、例えば、滅菌物質を
取り込む無菌濾過、照射または加熱によって実施し得る。これらの組成物は、使
用時に注射に適した無菌媒質に溶解し得る無菌固体組成物の形態で調製してもよ
い。These compositions further comprise adjuvants, especially wetting agents, tonicity adjusting agents, emulsifiers,
It may contain dispersants and stabilizers. Sterilization can be performed in several ways, for example by aseptic filtration, irradiation or heating to incorporate the sterile material. These compositions may be prepared in the form of a sterile solid composition that can be dissolved at the time of use in a sterile medium suitable for injection.

【００５４】 直腸内投与用組成物は、有効生成物に加えて、ココアバター、半合成グリセリ
ドまたはポリエチレングリコールなどの賦形剤を含む座薬または直腸内カプセル
である。Compositions for rectal administration are suppositories or rectal capsules which contain, in addition to the active product, excipients such as cocoa butter, semi-synthetic glycerides or polyethylene glycols.

【００５５】 局所投与用組成物は、例えば、クリーム、軟膏、ローション、目薬、うがい剤
、点鼻薬またはエアゾールであってよい。 用量は、求められる作用、治療期間および用いられる投与経路に応じて異なる
。一般に、医師（または獣医）が、治療を受ける患者の年齢、体重およびその患
者に特異的な他のすべての要素に応じて適切な用量を決定する。凡その用量範囲
は、ＭＲＬ−１ｐｒマウス慢性関節リューマチモデルにおける障害に抵抗するの
に有効であると証明された用量範囲、すなわち、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇから
選択し得るが、最も確実な用量は、１日当たり体重１ｋｇにつき１〜１０ｍｇで
ある。The composition for topical administration may be, for example, a cream, ointment, lotion, eye drop, mouthwash, nasal drop or aerosol. The dose will depend on the effect sought, the duration of the treatment and the route of administration used. In general, the physician (or veterinarian) will decide the appropriate dose depending on the age, weight and any other factors specific to the patient being treated. The approximate dose range can be selected from the dose range proven to be effective in resisting disorders in the MRL-1pr mouse rheumatoid arthritis model, ie, 0.1-100 mg / kg, but the most reliable dose Is 1 to 10 mg / kg body weight per day.

【００５６】 実施例８： 製品 末梢ベンゾジアゼピンリガンドを含む本発明の組成物は、この組成物が炎症症
状の治療に使用し得ることを示すラベルを含む包装材中に包装し得る。そのよう
な症状には、慢性関節リューマチ、エリテマトーデス、シェーグレン症候群、骨
関節症、多発性硬化症、ベーチェット病、側頭動脈炎およびアルツハイマー型痴
呆が含まれる。本発明の組成物の末梢ベンゾジアゼピンレセプターリガンドは、
末梢ベンゾジアゼピンレセプターに対してマイクロモルまたはサブマイクロモル
濃度の親和性を示すもの、例えば、ＰＫ１１１９５であるのが好ましい。リガン
ドは、ＰＫ１１１９５、ＰＫ−１４０６７、ＰＫ１４１０５、Ｒｏ５−６９９３
、Ｒｏ５−４８６４、Ｒｏ５−６９００、Ｒｏ５−６９４５、Ｒｏ５−６６６９
、Ｒｏ５−６９０２、Ｒｏ５−６５３１、Ｒｏ５−３４４８、ジアゼパム、Ｒｏ
７−５５２０、Ｒｏ５−５１１５、Ｒｏ５−４６０８、Ｒｏ５−６５２４、Ｒｏ
５−５１２２、これらの化合物の治療上許容し得る塩またはこれらの化合物の混
合物もしくはそれらの塩、あるいは末梢ベンゾジアゼピンレセプターに上記のも
のと同等またはそれ以上の高さの親和性で結合する他の化合物からなる群から選
択し得る。 Example 8: Product A composition of the present invention comprising a peripheral benzodiazepine ligand can be packaged in a packaging material containing a label indicating that the composition can be used in the treatment of inflammatory conditions. Such conditions include rheumatoid arthritis, lupus erythematosus, Sjogren's syndrome, osteoarthritis, multiple sclerosis, Behcet's disease, temporal arteritis and Alzheimer's dementia. The peripheral benzodiazepine receptor ligand of the composition of the present invention comprises:
Preferably, it exhibits micromolar or submicromolar affinity for the peripheral benzodiazepine receptor, for example, PK11195. The ligands are PK11195, PK-14067, PK14105, Ro5-6993.
, Ro5-4864, Ro5-6900, Ro5-6945, Ro5-6669
, Ro5-6902, Ro5-6531, Ro5-3448, diazepam, Ro
7-5520, Ro5-5115, Ro5-4608, Ro5-6524, Ro
5-5122, therapeutically acceptable salts of these compounds or mixtures of these compounds or their salts, or other compounds that bind to peripheral benzodiazepine receptors with a similar or higher affinity than those described above May be selected from the group consisting of:

【００５７】 上述の開示に鑑み、本発明の精神および範囲を逸脱しなければ、本発明の実施
に際しては多くの変更および改良を行い得ることは当業者には自明であろう。従
って、本発明の範囲は、特許請求の範囲によって規定される内容に従って判断さ
れるべきである。In light of the above disclosure, it will be apparent to those skilled in the art that many modifications and variations can be made in the practice of the present invention without departing from the spirit and scope of the invention. Therefore, the scope of the present invention should be determined in accordance with the contents defined by the appended claims.

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書[Procedural Amendment] Submission of translation of Article 34 Amendment of the Patent Cooperation Treaty

【提出日】平成１２年７月５日（２０００．７．５）[Submission date] July 5, 2000 (2007.5.5)

【手続補正１】[Procedure amendment 1]

【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement

【補正対象項目名】特許請求の範囲[Correction target item name] Claims

【補正方法】変更[Correction method] Change

【補正内容】[Correction contents]

【特許請求の範囲】[Claims]

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 29/00 Ａ６１Ｐ 29/00 １０１ １０１ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ， ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，Ｌ Ｓ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ， ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，Ｅ Ｅ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ， ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，Ｍ Ｄ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ， ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，Ｕ Ｚ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 マックギア、パトリック エル． カナダ国 Ｖ６Ｔ １Ｃ１ ブリティッシ ュ コロンビア バンクーバー ウエスト セカンド アベニュー 4727 (72)発明者 ウォーターフィールド、ジェイ．ダグラス カナダ国 Ｖ６Ｌ ３Ａ４ ブリティッシ ュ コロンビア バンクーバー ブレンハ イム ストリート 4610 (72)発明者 マックギア、イーディス ジー． カナダ国 Ｖ６Ｔ １Ｃ１ ブリティッシ ュ コロンビア バンクーバー ウエスト セカンド アベニュー 4727 (72)発明者 クレゲリス、アンディス カナダ国 Ｖ６Ｍ ２Ｔ８ ブリティッシ ュ コロンビア バンクーバー ウエスト サーティーセブンス アベニュー 2945 Ｆターム(参考） 4C084 AA17 NA14 ZA162 ZB112 ZB152 ZC412 ZC422 ZC542 4C086 AA01 AA02 BC30 BC56 MA01 MA04 NA14 ZA16 ZB11 ZB15 ZC41 ZC42 ZC54 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. ⁷ Identification symbol FI Theme coat ゛ (Reference) A61P 29/00 A61P 29/00 101 101 (81) Designated country EP (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG), AP (GH, GM, KE, LS, MW, SD, SZ, UG, ZW), EA (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM ), AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CU, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, B, GE, GH, GM, GW, HU, ID, IL, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MD, MG, MK , MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, UA, UG, US, UZ, VN, YU, ZW (72) Inventor McGear, Patrick El. Canada V6T 1C1 British Columbia Vancouver West 2nd Avenue 4727 (72) Inventor Waterfield, Jay. Douglas Canada V6L 3A4 British Columbia Vancouver Brenheim Street 4610 (72) Inventor McGear, Edith G. Canada V6T 1C1 British Columbia Vancouver West 2nd Ave 4727 (72) Inventor Cregeris, Andis Canada V6M 2T8 British Columbia Vancouver West 37th Ave 2945 F-term (reference) 4C084 AA17 NA112 ZAB ZAB ZA ZZAB ZA12 ZA12 ZAB ZAB ZA12 ZAB ZA12 ZAB ZAB ZA12 ZAB ZA12 ZAB ZA12 ZAB ZA12 ZAB ZA12 ZAB ZAB ZA12 ZAB ZAB ZA12 ZAB4A08 BC30 BC56 MA01 MA04 NA14 ZA16 ZB11 ZB15 ZC41 ZC42 ZC54

Claims (30)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 哺乳類における慢性炎症状態を緩和する方法であって、慢性
炎症状態を有する哺乳類に特定の化合物または薬学的に許容される該化合物の塩
もしくは誘導体を投与し、該化合物はマイクロモルまたはサブマイクロモル親和
度にて哺乳類の組織中の末梢ベンゾジアゼピン受容体に結合し、該化合物または
薬学的に許容される該化合物の塩もしくは誘導体は体重に対し１日当り０．１〜
１００ｍｇ／ｋｇの範囲の投与量にて前記哺乳類に投与されることを特徴とする
方法。1. A method for alleviating a chronic inflammatory condition in a mammal, comprising administering to the mammal having the chronic inflammatory condition a specific compound or a pharmaceutically acceptable salt or derivative of the compound, wherein the compound is administered in a micromolar form. Alternatively, it binds to peripheral benzodiazepine receptors in mammalian tissues with sub-micromolar affinity, and the compound or a pharmaceutically acceptable salt or derivative of the compound is present in an amount of from 0.1 to
A method comprising administering to said mammal a dose in the range of 100 mg / kg. 【請求項２】 前記哺乳類はヒトであり、前記化合物はヒト末梢ベンゾジア
ゼピン受容体にマイクロモルまたはサブマイクロモル親和度にて結合する請求項
１に記載の方法。2. The method of claim 1, wherein said mammal is a human and said compound binds to human peripheral benzodiazepine receptor with micromolar or submicromolar affinity. 【請求項３】 前記炎症状態はアルツハイマー型の痴呆症であり、前記末梢
ベンゾジアゼピン受容体は脳において見出される請求項２に記載の方法。3. The method of claim 2, wherein said inflammatory condition is Alzheimer's dementia and said peripheral benzodiazepine receptor is found in the brain. 【請求項４】 前記炎症状態は慢性関節リウマチである請求項２に記載の方
法。4. The method of claim 2, wherein said inflammatory condition is rheumatoid arthritis. 【請求項５】 前記炎症状態はエリトマトーデスである請求項２に記載の方
法。5. The method of claim 2, wherein said inflammatory condition is lupus erythematosus. 【請求項６】 前記炎症状態はシェーグレン症候群である請求項２に記載の
方法。6. The method of claim 2, wherein said inflammatory condition is Sjögren's syndrome. 【請求項７】 前記化合物は１−（２−クロロフェニル）−Ｎ−メチル−Ｎ
−（１−メチルプロピル）−３−イソキノリンカルボキシアミドである請求項１
乃至６のいずれか１項に記載の方法。7. The compound is 1- (2-chlorophenyl) -N-methyl-N
The compound according to claim 1, which is-(1-methylpropyl) -3-isoquinolinecarboxamide.
The method according to any one of claims 1 to 6. 【請求項８】 前記化合物は、ＰＫ１１１９５，ＰＫ−１４０６７，ＰＫ１
４１０５，Ｒｏ５−６９９３，Ｒｏ５−４８６４，Ｒｏ５−６９００，Ｒｏ５−
６９４５，Ｒｏ５−６６６９，Ｒｏ５−６９０２，Ｒｏ５−６５３１，Ｒｏ５−
３４４８，ジアゼパム，Ｒｏ７−５５２０，Ｒｏ５−５１１５，Ｒｏ５−４６０
８，Ｒｏ５−６５２４，Ｒｏ５−５１２２、これらの化合物の薬学的に許容され
る塩、またはこれらの化合物の混合物もしくはそれらの塩、または末梢ベンゾジ
アゼピン受容体に同程度以上の親和度にて結合する他の化合物からなる群から選
択される１以上の化合物である請求項１に記載の方法。8. The compound according to claim 1, wherein the compound is PK11195, PK-14067, PK1.
4105, Ro5-6993, Ro5-4864, Ro5-6900, Ro5-
6945, Ro5-6669, Ro5-6902, Ro5-6531, Ro5-
3448, diazepam, Ro7-5520, Ro5- 5115, Ro5-460
8, Ro5-6524, Ro5-5122, pharmaceutically acceptable salts of these compounds, or mixtures of these compounds or salts thereof, or other compounds that bind to peripheral benzodiazepine receptors with the same or higher affinity. The method according to claim 1, wherein the compound is one or more compounds selected from the group consisting of: 【請求項９】 前記化合物または薬学的に許容される該化合物の塩は哺乳類
に、経口、非経口、直腸、または局所投与される請求項１に記載の方法。9. The method of claim 1, wherein the compound or a pharmaceutically acceptable salt of the compound is administered orally, parenterally, rectally, or topically to a mammal. 【請求項１０】包装材料及び該包装材料内に入れられる薬学的組成物であっ
て、該薬学的組成物は炎症状態を治療するうえで治療学的に有効であり、該包装
材料は前記薬学的組成物を炎症状態を治療するうえで使用することが可能である
ことを示したラベルを含み、前記薬学的組成物は、末梢ベンゾジアゼピン受容体
にマイクロモルまたはサブマイクロモル親和度にて結合する化合物からなる群か
ら選択される化合物、または該化合物の薬学的に許容される塩を含むことを特徴
とする製造物。10. A packaging material and a pharmaceutical composition contained within the packaging material, wherein the pharmaceutical composition is therapeutically effective in treating an inflammatory condition, wherein the packaging material comprises the pharmaceutical composition. Wherein the pharmaceutical composition binds to a peripheral benzodiazepine receptor with micromolar or sub-micromolar affinity. A product comprising a compound selected from the group consisting of compounds, or a pharmaceutically acceptable salt of the compound. 【請求項１１】前記化合物はヒト末梢ベンゾジアゼピン受容体のアンタゴニ
ストである請求項１０に記載の製造物。11. The product according to claim 10, wherein said compound is an antagonist of a human peripheral benzodiazepine receptor. 【請求項１２】前記化合物は１−（２−クロロフェニル）−Ｎ−メチル−Ｎ
−（１−メチルプロピル）−３−イソキノリンカルボキシアミドである請求項１
０に記載の製造物。12. The compound according to claim 1, wherein the compound is 1- (2-chlorophenyl) -N-methyl-N
The compound according to claim 1, which is-(1-methylpropyl) -3-isoquinolinecarboxamide.
The product according to 0. 【請求項１３】前記炎症状態は慢性関節リウマチである請求項１２に記載の
製造物。13. The product of claim 12, wherein said inflammatory condition is rheumatoid arthritis. 【請求項１４】前記炎症状態はエリテマトーデスである請求項１２に記載の
製造物。14. The product of claim 12, wherein said inflammatory condition is lupus erythematosus. 【請求項１５】前記炎症状態はアルツハイマー型の痴呆症である請求項１２
に記載の製造物。15. The inflammatory condition is Alzheimer's dementia.
The product according to item 1. 【請求項１６】前記炎症状態はシェーグレン症候群である請求項１２に記載
の方法。16. The method of claim 12, wherein said inflammatory condition is Sjögren's syndrome. 【請求項１７】前記化合物は、ＰＫ１１１９５，ＰＫ−１４０６７，ＰＫ１
４１０５，Ｒｏ５−６９９３，Ｒｏ５−４８６４，Ｒｏ５−６９００，Ｒｏ５−
６９４５，Ｒｏ５−６６６９，Ｒｏ５−６９０２，Ｒｏ５−６５３１，Ｒｏ５−
３４４８，ジアゼパム，Ｒｏ７−５５２０，Ｒｏ５−５１１５，Ｒｏ５−４６０
８，Ｒｏ５−６５２４，Ｒｏ５−５１２２、これらの化合物の薬学的に許容され
る塩、またはこれらの化合物の混合物もしくはそれらの塩、または末梢ベンゾジ
アゼピン受容体に同程度以上の親和度にて結合する他の化合物からなる群から選
択される１以上の化合物である請求項１０に記載の方法。17. The compound according to claim 11, wherein the compound is PK11195, PK-14067, PK1.
4105, Ro5-6993, Ro5-4864, Ro5-6900, Ro5-
6945, Ro5-6669, Ro5-6902, Ro5-6531, Ro5-
3448, diazepam, Ro7-5520, Ro5- 5115, Ro5-460
8, Ro5-6524, Ro5-5122, pharmaceutically acceptable salts of these compounds, or mixtures of these compounds or salts thereof, or other compounds that bind to peripheral benzodiazepine receptors with the same or higher affinity. The method according to claim 10, which is one or more compounds selected from the group consisting of: 【請求項１８】哺乳類の炎症状態を治療するうえで治療学的に有効である化
合物を同定するための方法であって、 末梢ベンゾジアゼピン受容体にマイクロモルまたはサブマイクロモル親和度に
て結合し、 ＭＲＬ−ｌｐｒマウスにおける炎症症状を治療するうえで治療学的に有効であ
る化合物を選択することを特徴とする方法。18. A method for identifying a compound that is therapeutically effective in treating an inflammatory condition in a mammal, comprising: binding to a peripheral benzodiazepine receptor with micromolar or submicromolar affinity; A method comprising selecting a compound that is therapeutically effective in treating an inflammatory condition in MRL-lpr mice. 【請求項１９】培養したマクロファージにおける呼吸バーストを阻害する化
合物を選択する工程を更に含む請求項１８に記載の方法。19. The method of claim 18, further comprising the step of selecting a compound that inhibits respiratory burst in the cultured macrophages. 【請求項２０】炎症刺激物質による活性化によって単球型の細胞により分泌
される産物の神経毒作用を阻害する化合物を選択する工程を更に含む請求項１８
に記載の方法。20. The method of claim 18, further comprising the step of selecting a compound that inhibits the neurotoxic effect of a product secreted by monocyte cells upon activation by an inflammatory stimulant.
The method described in. 【請求項２１】正常なヒト脳組織への結合と比較してヒトアルツハイマーの
脳組織により高い結合性を示す化合物を選択する工程を更に含む請求項１８に記
載の方法。21. The method of claim 18, further comprising the step of selecting a compound that exhibits higher binding to human Alzheimer's brain tissue as compared to binding to normal human brain tissue. 【請求項２２】前記化合物は、ＰＫ１１１９５，ＰＫ−１４０６７，ＰＫ１
４１０５，Ｒｏ５−６９９３，Ｒｏ５−４８６４，Ｒｏ５−６９００，Ｒｏ５−
６９４５，Ｒｏ５−６６６９，Ｒｏ５−６９０２，Ｒｏ５−６５３１，Ｒｏ５−
３４４８，ジアゼパム，Ｒｏ７−５５２０，Ｒｏ５−５１１５，Ｒｏ５−４６０
８，Ｒｏ５−６５２４，Ｒｏ５−５１２２、これらの化合物の薬学的に許容され
る塩、またはこれらの化合物の混合物もしくはそれらの塩、または末梢ベンゾジ
アゼピン受容体に同程度以上の親和度にて結合する他の化合物からなる群から選
択される１以上の化合物である請求項１８に記載の方法。22. The compound according to claim 11, wherein the compound is PK11195, PK-14067, PK1.
4105, Ro5-6993, Ro5-4864, Ro5-6900, Ro5-
6945, Ro5-6669, Ro5-6902, Ro5-6531, Ro5-
3448, diazepam, Ro7-5520, Ro5- 5115, Ro5-460
8, Ro5-6524, Ro5-5122, pharmaceutically acceptable salts of these compounds, or mixtures of these compounds or salts thereof, or other compounds that bind to peripheral benzodiazepine receptors with the same or higher affinity. 19. The method according to claim 18, which is one or more compounds selected from the group consisting of: 【請求項２３】慢性炎症状態を有する哺乳類の慢性炎症状態を緩和すること
における、哺乳類組織中の末梢ベンゾジアゼピン受容体にマイクロモルまたはサ
ブマイクロモル親和度にて結合する１以上の化合物の使用において、前記哺乳類
に前記１以上の化合物、または前記１以上の化合物の薬学的に許容される塩を投
与し、該１以上の化合物または該１以上の化合物の薬学的に許容される塩は体重
に対し１日当り０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲の投与量にて前記哺乳類に投与
されることを特徴とする使用。23. The use of one or more compounds that bind with a micromolar or sub-micromolar affinity to peripheral benzodiazepine receptors in mammalian tissue in alleviating a chronic inflammatory condition in a mammal having the chronic inflammatory condition. Administering to said mammal one or more compounds, or a pharmaceutically acceptable salt of said one or more compounds, wherein said one or more compounds or pharmaceutically acceptable salts of said one or more compounds are relative to body weight; The use characterized in that it is administered to said mammal in a dose ranging from 0.1 to 100 mg / kg per day. 【請求項２４】前記哺乳類はヒトであり、前記１以上の化合物はヒト末梢ベ
ンゾジアゼピン受容体にマイクロモルまたはサブマイクロモル親和度にて結合す
る請求項２３に記載の使用。24. The use according to claim 23, wherein said mammal is a human and said one or more compounds binds to human peripheral benzodiazepine receptor with micromolar or submicromolar affinity. 【請求項２５】前記炎症状態はアルツハイマー型の痴呆症であり、前記末梢
ベンゾジアゼピン受容体は脳に見出される請求項２４に記載の使用。25. The use according to claim 24, wherein said inflammatory condition is Alzheimer's dementia and said peripheral benzodiazepine receptor is found in the brain. 【請求項２６】前記炎症状態は慢性関節リウマチである請求項２４に記載の
使用。26. The use according to claim 24, wherein said inflammatory condition is rheumatoid arthritis. 【請求項２７】前記炎症状態はエリテマトーデスである請求項２４に記載の
使用。27. The use according to claim 24, wherein said inflammatory condition is lupus erythematosus. 【請求項２８】前記炎症状態はシェーグレン症候群である請求項２４に記載
の使用。28. The use according to claim 24, wherein said inflammatory condition is Sjögren's syndrome. 【請求項２９】前記化合物は１−（２−クロロフェニル）−Ｎ−メチル−Ｎ
−（１−メチルプロピル）−３−イソキノリンカルボキシアミドである請求項２
３乃至２８のいずれか１項に記載の使用。29. The compound according to claim 1, wherein the compound is 1- (2-chlorophenyl) -N-methyl-N
3. It is-(1-methylpropyl) -3-isoquinolinecarboxamide.
Use according to any one of items 3 to 28. 【請求項３０】前記化合物は、ＰＫ１１１９５，ＰＫ−１４０６７，ＰＫ１
４１０５，Ｒｏ５−６９９３，Ｒｏ５−４８６４，Ｒｏ５−６９００，Ｒｏ５−
６９４５，Ｒｏ５−６６６９，Ｒｏ５−６９０２，Ｒｏ５−６５３１，Ｒｏ５−
３４４８，ジアゼパム，Ｒｏ７−５５２０，Ｒｏ５−５１１５，Ｒｏ５−４６０
８，Ｒｏ５−６５２４，Ｒｏ５−５１２２、これらの化合物の薬学的に許容され
る塩、またはこれらの化合物の混合物もしくはそれらの塩、または末梢ベンゾジ
アゼピン受容体に同程度以上の親和度にて結合する他の化合物からなる群から選
択される１以上の化合物である請求項２３乃至２８のいずれか１項に記載の使用
。30. The compound according to claim 17, wherein the compound is PK11195, PK-14067, PK1.
4105, Ro5-6993, Ro5-4864, Ro5-6900, Ro5-
6945, Ro5-6669, Ro5-6902, Ro5-6531, Ro5-
3448, diazepam, Ro7-5520, Ro5- 5115, Ro5-460
8, Ro5-6524, Ro5-5122, pharmaceutically acceptable salts of these compounds, or mixtures of these compounds or salts thereof, or other compounds that bind to peripheral benzodiazepine receptors with the same or higher affinity. The use according to any one of claims 23 to 28, which is one or more compounds selected from the group consisting of: