JP2002505298A - 前立腺癌治療に有用な結合体 - Google Patents
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Abstract
(57)【要約】
遊離前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）によって選択的に蛋白分解的に開裂するアミノ酸配列を有するオリゴペプチドと公知の細胞傷害性薬剤を含む化学的結合体が開示されている。本発明の結合体は、オリゴペプチドとビンブラスチンの間のヒドロキシルアルキルアミノ連結基を特徴とする。そのような結合体は、前立腺癌および良性前立腺過形成（ＢＰＨ）の治療において有用である。さらには、ビンカアルカロイド系薬剤の誘導体である新規な細胞傷害性薬剤も開示されている。
Description
【０００１】 （技術分野） （背景技術） １９９６年で、米国において３１万７０００人の男性が前立腺癌と診断されて
いると予想され、４２０００人の米国人男性がその疾患によって死亡する（Garn
ick, M.B.(1994), The Dilemmas of Prostate Cancer. Scientific American, A
pril:72-81）。そこで、前立腺癌は、米国男性で最も高頻度で診断される悪性腫
瘍（皮膚の悪性腫瘍以外で）であり、その群における癌関連の死亡の２番目に多
い原因である（肺癌に次いで）。
いると予想され、４２０００人の米国人男性がその疾患によって死亡する（Garn
ick, M.B.(1994), The Dilemmas of Prostate Cancer. Scientific American, A
pril:72-81）。そこで、前立腺癌は、米国男性で最も高頻度で診断される悪性腫
瘍（皮膚の悪性腫瘍以外で）であり、その群における癌関連の死亡の２番目に多
い原因である（肺癌に次いで）。
【０００２】 前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）は、３３ｋＤａの一本鎖糖蛋白であり、ほとんど
専らヒトの前立腺上皮によって産生され、ヒト***中０．５〜２．０ｍｇ／ｍＬ
の濃度で生じる（Nadji, M., Taber, S.Z., Castro, A., et al.(1981) Cancer
48:1229; Papsidero, L., Kuriyama,M., Wang, M., et al.(1981). JNCI 66:37;
Qui, S.D., Young, C.Y.F., Bihartz, D.L., et al.(1990), J.Urol.144:1550;
Wang, M.C., Valenzuela, L.A., Murphy, G.P., et al.(1979). Invest.Urol.1
7:159）。１個の炭水化物単位がアスパラギン残基の位置４５に結合し、総分子 量は２〜３ｋＤａである。ＰＳＡは、キモトリプシン様の特異性を有するプロテ
アーゼである（Christensson, A., Laurell, C.B., Lilja, H.(1990). Eur.J.Bi
ochem.194:755-763）。ＰＳＡが主として、***捕捉ゲル中の主要蛋白であるセ メノゲリンＩ（Semenogelin I）およびセメノゲリンＩＩ、ならびにフィブロネ クチンの蛋白分解によって***時に生じるゲル構造の溶解の原因であることが明
らかになっている（Lilja, H.(1985). J.Clin.Invest.76:1899; Lilja, H., Old
bring, J.Rannevik, G., et al.(1987). J.Clin.Invest.80:281; McGee, R.S.,
Herr, J.C.(1988). Biol.Reprod.39:499）。ゲル形成蛋白のＰＳＡ介在蛋白分解
によって、いくつかの可溶性のセメノゲリンＩ断片およびセメノゲリンＩＩ断片
、ならびに可溶性のフィブロネクチン断片が生じ、それには射出***の液状化お
よび徐々に運動性となる***の放出が伴う（Lilja,H., Laurell,C.B.(1987). Sc
and.J.Clin.Lab.Invest. 44: 447; McGee, R.S., Herr, J.C.(1987). Biol.Repr
od.37:431）。さらに、ＰＳＡは蛋白分解的にＩＧＦＢＰ−３（インシュリン様 成長因子結合蛋白３）を分解して、ＩＧＦがＰＳＡ分泌細胞の成長を特異的に刺
激できるようにすると考えられる（Cohen et al., (1992) J.Clin.Endo.& Meta.
75:1046-1053）。
専らヒトの前立腺上皮によって産生され、ヒト***中０．５〜２．０ｍｇ／ｍＬ
の濃度で生じる（Nadji, M., Taber, S.Z., Castro, A., et al.(1981) Cancer
48:1229; Papsidero, L., Kuriyama,M., Wang, M., et al.(1981). JNCI 66:37;
Qui, S.D., Young, C.Y.F., Bihartz, D.L., et al.(1990), J.Urol.144:1550;
Wang, M.C., Valenzuela, L.A., Murphy, G.P., et al.(1979). Invest.Urol.1
7:159）。１個の炭水化物単位がアスパラギン残基の位置４５に結合し、総分子 量は２〜３ｋＤａである。ＰＳＡは、キモトリプシン様の特異性を有するプロテ
アーゼである（Christensson, A., Laurell, C.B., Lilja, H.(1990). Eur.J.Bi
ochem.194:755-763）。ＰＳＡが主として、***捕捉ゲル中の主要蛋白であるセ メノゲリンＩ（Semenogelin I）およびセメノゲリンＩＩ、ならびにフィブロネ クチンの蛋白分解によって***時に生じるゲル構造の溶解の原因であることが明
らかになっている（Lilja, H.(1985). J.Clin.Invest.76:1899; Lilja, H., Old
bring, J.Rannevik, G., et al.(1987). J.Clin.Invest.80:281; McGee, R.S.,
Herr, J.C.(1988). Biol.Reprod.39:499）。ゲル形成蛋白のＰＳＡ介在蛋白分解
によって、いくつかの可溶性のセメノゲリンＩ断片およびセメノゲリンＩＩ断片
、ならびに可溶性のフィブロネクチン断片が生じ、それには射出***の液状化お
よび徐々に運動性となる***の放出が伴う（Lilja,H., Laurell,C.B.(1987). Sc
and.J.Clin.Lab.Invest. 44: 447; McGee, R.S., Herr, J.C.(1987). Biol.Repr
od.37:431）。さらに、ＰＳＡは蛋白分解的にＩＧＦＢＰ−３（インシュリン様 成長因子結合蛋白３）を分解して、ＩＧＦがＰＳＡ分泌細胞の成長を特異的に刺
激できるようにすると考えられる（Cohen et al., (1992) J.Clin.Endo.& Meta.
75:1046-1053）。
【０００３】 α−１−抗キモトリプシンと複合体形成したＰＳＡが血清ＰＳＡの支配的な分
子形であり、検出される血清ＰＳＡの９５％までを占めると考えられる（Christ
ensson, A.,Bjork, T., Nilsson, O.,et al(1993). J.Urol.150:100-105; Lilja
, H., Christensson, A., Dahlen, U.(1991). Clin.Chem.37:1618-1625; Stenma
n, U.H., Leinoven,J., Alfthan, H., et al.(1991). Cancer Res.51:222-226）
。前立腺組織は（正常、良性過形成または悪性組織）は主に、成熟した酵素的に
活性な形のＰＳＡを放出することが示唆されており、それはその形がα−１−抗
キモトリプシンと複合体を形成する上で必要であるからである（Mast, A.E., En
ghild,J.J., Pizzo, S.V., et al.(1991). Biochemistry 30:1723-1730; Perlmu
tter, D.H., Glover, G.I., Rivetna, M., et al.(1990). Proc.Natl.Acad.Sci.
USA 87:3753-3757）。従って、前立腺ＰＳＡ分泌細胞の微小環境ではＰＳＡは、
阻害分子と複合体形成していない、成熟した酵素的に活性な形で処理・分泌され
ると考えられる。ＰＳＡはさらに、α−２−マクログロブリンとも安定な複合体
を形成するが、それによってＰＳＡの封入とＰＳＡエピトープの完全な喪失が生
じることから、その複合体形成のin vivoでの意義については不明である。遊離 の複合体を形成していない形のＰＳＡは、血清ＰＳＡ中ではわずかである（Chri
stensson, A.,Bjork, T., Nilsson, O.,et al(1993). J.Urol.150:100-105; Lil
ja, H., Christensson, A., Dahlen, U.(1991). Clin.Chem. 37:1618-1625）。 この形の血清ＰＳＡの大きさは、***中のＰＳＡのものと同様であるが（Lilja,
H., Christensson, A., Dahlen, U.(1991).Clin.Chem. 37:1618-1625）、その 遊離形の血清ＰＳＡが酵素原；体内で開裂した不活性形の成熟ＰＳＡ；または酵
素活性を発現するＰＳＡであるか否かに関してはまだ不明である。しかしながら
、遊離の３３ｋＤａ形ＰＳＡの検出血清濃度と比較して、血清中の未反応α−１
−抗キモトリプシンおよびα−２−マクログロブリンの両方がモル比的にかなり
過剰であることから（１００〜１０００倍）、その遊離形の血清ＰＳＡが酵素活
性を発現するとは考えにくい（Christensson, A.,Bjork, T., Nilsson, O.,et a
l(1993). J.Urol.150:100-105; Lilja, H., Christensson, A., Dahlen, U.(199
1). Clin.Chem. 37:1618-1625）。
子形であり、検出される血清ＰＳＡの９５％までを占めると考えられる（Christ
ensson, A.,Bjork, T., Nilsson, O.,et al(1993). J.Urol.150:100-105; Lilja
, H., Christensson, A., Dahlen, U.(1991). Clin.Chem.37:1618-1625; Stenma
n, U.H., Leinoven,J., Alfthan, H., et al.(1991). Cancer Res.51:222-226）
。前立腺組織は（正常、良性過形成または悪性組織）は主に、成熟した酵素的に
活性な形のＰＳＡを放出することが示唆されており、それはその形がα−１−抗
キモトリプシンと複合体を形成する上で必要であるからである（Mast, A.E., En
ghild,J.J., Pizzo, S.V., et al.(1991). Biochemistry 30:1723-1730; Perlmu
tter, D.H., Glover, G.I., Rivetna, M., et al.(1990). Proc.Natl.Acad.Sci.
USA 87:3753-3757）。従って、前立腺ＰＳＡ分泌細胞の微小環境ではＰＳＡは、
阻害分子と複合体形成していない、成熟した酵素的に活性な形で処理・分泌され
ると考えられる。ＰＳＡはさらに、α−２−マクログロブリンとも安定な複合体
を形成するが、それによってＰＳＡの封入とＰＳＡエピトープの完全な喪失が生
じることから、その複合体形成のin vivoでの意義については不明である。遊離 の複合体を形成していない形のＰＳＡは、血清ＰＳＡ中ではわずかである（Chri
stensson, A.,Bjork, T., Nilsson, O.,et al(1993). J.Urol.150:100-105; Lil
ja, H., Christensson, A., Dahlen, U.(1991). Clin.Chem. 37:1618-1625）。 この形の血清ＰＳＡの大きさは、***中のＰＳＡのものと同様であるが（Lilja,
H., Christensson, A., Dahlen, U.(1991).Clin.Chem. 37:1618-1625）、その 遊離形の血清ＰＳＡが酵素原；体内で開裂した不活性形の成熟ＰＳＡ；または酵
素活性を発現するＰＳＡであるか否かに関してはまだ不明である。しかしながら
、遊離の３３ｋＤａ形ＰＳＡの検出血清濃度と比較して、血清中の未反応α−１
−抗キモトリプシンおよびα−２−マクログロブリンの両方がモル比的にかなり
過剰であることから（１００〜１０００倍）、その遊離形の血清ＰＳＡが酵素活
性を発現するとは考えにくい（Christensson, A.,Bjork, T., Nilsson, O.,et a
l(1993). J.Urol.150:100-105; Lilja, H., Christensson, A., Dahlen, U.(199
1). Clin.Chem. 37:1618-1625）。
【０００４】 ＰＳＡの血清測定は、前立腺の腺癌の治療をモニタリングする上で有用である
（Duffy, M.S.(1989). Ann.Clin.Biochem.26:379-387; Brawer, M.K. and Lange
, P.H.(1989). Urol.Suppl.5:11-16; Hara, M. and Kimura, H.(1989).J.Lab.Cl
in.Med.113:541-548）。ただし、良性の前立腺過形成において、ならびに前立腺
の手術創後にも、正常血清濃度を超えたＰＳＡが報告されている（Lilja, H., C
hristensson, A., Dahlen, U.(1991).Clin.Chem.37:1618-1625）。広く見られる
転移性前立腺癌を示す前立腺切除患者において血清ＰＳＡが検出可能であること
から、前立腺の転移も免疫的に活性なＰＳＡを分泌することが知られている（Fo
rd, T.F., Butcher, D.N., Masters, R.W., et al.(1985). Brit.J.Urology, 57
:50-55）。従って、ＰＳＡの蛋白分解活性によって活性化されると考えられる細
胞毒性化合物は、前立腺細胞特異的であるとともに、ＰＳＡ分泌前立腺転移に特
異的でもあるはずである。
（Duffy, M.S.(1989). Ann.Clin.Biochem.26:379-387; Brawer, M.K. and Lange
, P.H.(1989). Urol.Suppl.5:11-16; Hara, M. and Kimura, H.(1989).J.Lab.Cl
in.Med.113:541-548）。ただし、良性の前立腺過形成において、ならびに前立腺
の手術創後にも、正常血清濃度を超えたＰＳＡが報告されている（Lilja, H., C
hristensson, A., Dahlen, U.(1991).Clin.Chem.37:1618-1625）。広く見られる
転移性前立腺癌を示す前立腺切除患者において血清ＰＳＡが検出可能であること
から、前立腺の転移も免疫的に活性なＰＳＡを分泌することが知られている（Fo
rd, T.F., Butcher, D.N., Masters, R.W., et al.(1985). Brit.J.Urology, 57
:50-55）。従って、ＰＳＡの蛋白分解活性によって活性化されると考えられる細
胞毒性化合物は、前立腺細胞特異的であるとともに、ＰＳＡ分泌前立腺転移に特
異的でもあるはずである。
【０００５】 米国特許４２０３８９８号には、ビンカ薬のＣ−３メチルエステルが修飾され
れたビンカアルカロイド細胞傷害性薬剤の誘導体について記載されている。
れたビンカアルカロイド細胞傷害性薬剤の誘導体について記載されている。
【０００６】 従って本発明の目的は、遊離前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）によって選択的に酵
素的開裂を受け、ヒドロキシルアルキルアミノ連結基を会して細胞傷害性薬剤に
連結しているオリゴペプチドを含む、前立腺癌治療に有用な新規な抗癌剤組成物
を提供することにある。
素的開裂を受け、ヒドロキシルアルキルアミノ連結基を会して細胞傷害性薬剤に
連結しているオリゴペプチドを含む、前立腺癌治療に有用な新規な抗癌剤組成物
を提供することにある。
【０００７】 本発明の別の目的は、前記新規抗癌組成物の投与を含む前立腺癌の治療方法を
提供することにある。
提供することにある。
【０００８】 本発明のさらに別の目的は、ビンカアルカロイド系細胞傷害性薬剤の新規細胞
毒誘導体を提供することにある。
毒誘導体を提供することにある。
【０００９】 （発明の開示） 遊離前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）によって選択的に蛋白分解的開裂を起こすア
ミノ酸配列を有するオリゴペプチドを有する化学的結合体ならびに細胞傷害性薬
剤が開示される。本発明の結合体は、オリゴペプチドとビンカアルカロイド薬と
の間のヒドロキシアルキルアミン連結基を特徴とする。そのような結合体は、前
立腺癌および良性前立腺過形成（ＢＰＨ）の治療において有用である。さらには
、前記ビンカアルカロイドのＣ−２３エステルが、未置換または好適に置換され
たヒドロキシアルキルアミンに置き換わっているビンカアルカロイド薬の新規な
細胞毒性アルカロイドも開示されている。
ミノ酸配列を有するオリゴペプチドを有する化学的結合体ならびに細胞傷害性薬
剤が開示される。本発明の結合体は、オリゴペプチドとビンカアルカロイド薬と
の間のヒドロキシアルキルアミン連結基を特徴とする。そのような結合体は、前
立腺癌および良性前立腺過形成（ＢＰＨ）の治療において有用である。さらには
、前記ビンカアルカロイドのＣ−２３エステルが、未置換または好適に置換され
たヒドロキシアルキルアミンに置き換わっているビンカアルカロイド薬の新規な
細胞毒性アルカロイドも開示されている。
【００１０】 （発明を実施するための最良の形態） 本発明は、前立腺癌の治療に有用な新規な抗癌組成物に関する。そのような組
成物は、細胞傷害性薬剤、好ましくはビンカ剤に対して化学連結基を介して共有
結合的に結合したオリゴペプチドを含むものである。前記オリゴペプチドは、遊
離前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）によって選択的に認識され、遊離前立腺特異的抗
原の酵素活性によって蛋白分解的に開裂することができるオリゴマーから選択さ
れる。そのようなオリゴペプチドと細胞傷害性薬剤の組み合わせは結合体と称す
ることができる。
成物は、細胞傷害性薬剤、好ましくはビンカ剤に対して化学連結基を介して共有
結合的に結合したオリゴペプチドを含むものである。前記オリゴペプチドは、遊
離前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）によって選択的に認識され、遊離前立腺特異的抗
原の酵素活性によって蛋白分解的に開裂することができるオリゴマーから選択さ
れる。そのようなオリゴペプチドと細胞傷害性薬剤の組み合わせは結合体と称す
ることができる。
【００１１】 本発明の結合体は、前記オリゴペプチドのＣ−末端とビンカ薬との間の連結基
を特徴とする。詳細にはその連結基は、置換されていても良いヒドロキシアルキ
ルアミン部分であり、最も好ましくは連結基は、立体障害のあるヒドロキシアル
キルアミン部分を有する。さらに好ましくは、オリゴペプチドの連結基への結合
は、連結基の水酸基部分とのエステル結合を介したものである。
を特徴とする。詳細にはその連結基は、置換されていても良いヒドロキシアルキ
ルアミン部分であり、最も好ましくは連結基は、立体障害のあるヒドロキシアル
キルアミン部分を有する。さらに好ましくは、オリゴペプチドの連結基への結合
は、連結基の水酸基部分とのエステル結合を介したものである。
【００１２】 理想的には、ＰＳＡ蛋白分解的開裂部位を有するオリゴペプチドが、化学的連
結基を介して細胞傷害性薬剤に結合していて変化を受けていない場合には、ビン
カ薬の細胞毒活性は、大幅に低減されるか生じない。さらに理想的には、開裂部
位で、結合しているオリゴペプチドが蛋白分解的に開裂したときに、細胞傷害性
薬剤の細胞毒活性が大幅に高くなるか、あるいは未修飾の細胞傷害性薬剤の活性
に戻る。
結基を介して細胞傷害性薬剤に結合していて変化を受けていない場合には、ビン
カ薬の細胞毒活性は、大幅に低減されるか生じない。さらに理想的には、開裂部
位で、結合しているオリゴペプチドが蛋白分解的に開裂したときに、細胞傷害性
薬剤の細胞毒活性が大幅に高くなるか、あるいは未修飾の細胞傷害性薬剤の活性
に戻る。
【００１３】 好ましくは、未変化の化学連結基を有するビンカ薬は、標的ガン細胞に対する
未修飾ビンカ薬の細胞毒性の少なくとも７５％の細胞毒性を示す。化学連結基が
なおビンカ薬に共有結合的に結合しているビンカ薬のそのような誘導体自体、細
胞毒性薬と考えることができる。
未修飾ビンカ薬の細胞毒性の少なくとも７５％の細胞毒性を示す。化学連結基が
なおビンカ薬に共有結合的に結合しているビンカ薬のそのような誘導体自体、細
胞毒性薬と考えることができる。
【００１４】 さらに前記オリゴペプチドは、遊離の酵素的に活性なＰＳＡ存在下でのオリゴ
ペプチド類の開裂と比較して、ヒト血清に内在する酵素などの非ＰＳＡ蛋白分解
酵素存在下で開裂しないかあるいは非常に遅い速度で開裂するオリゴペプチドか
ら選択されることが好ましい。
ペプチド類の開裂と比較して、ヒト血清に内在する酵素などの非ＰＳＡ蛋白分解
酵素存在下で開裂しないかあるいは非常に遅い速度で開裂するオリゴペプチドか
ら選択されることが好ましい。
【００１５】 以上の理由から、前記オリゴペプチドが、短いペプチド配列、好ましくは１０
アミノ酸未満の配列を有することが望ましい。最も好ましくはオリゴペプチドは
、７個または６個のアミノ酸を有する。結合体は好ましくは短いアミノ酸配列を
有することから、接合体の溶解性は、細胞傷害性薬剤成分の全体的な疎水性によ
って大きく影響されると考えられる。従って、親水性置換基を有するアミノ酸を
オリゴペプチド配列に組み込むことができるか、あるいはＮ末端ブロック基を選
択して、細胞傷害性薬剤によるそのような疎水的寄与を相殺または低減させるこ
とができる。アミノ酸と疎水性置換基および溶解性を高めるＮ末端ブロック基と
の組み合わせを１個の結合体において用いることもできる。
アミノ酸未満の配列を有することが望ましい。最も好ましくはオリゴペプチドは
、７個または６個のアミノ酸を有する。結合体は好ましくは短いアミノ酸配列を
有することから、接合体の溶解性は、細胞傷害性薬剤成分の全体的な疎水性によ
って大きく影響されると考えられる。従って、親水性置換基を有するアミノ酸を
オリゴペプチド配列に組み込むことができるか、あるいはＮ末端ブロック基を選
択して、細胞傷害性薬剤によるそのような疎水的寄与を相殺または低減させるこ
とができる。アミノ酸と疎水性置換基および溶解性を高めるＮ末端ブロック基と
の組み合わせを１個の結合体において用いることもできる。
【００１６】 本発明のこの態様を行う上で必要ではないが、本発明の１実施態様は、遊離Ｐ
ＳＡおよび組織近傍に存在する他の天然蛋白分解酵素の蛋白分解活性によって、
オリゴペプチドと化学連結基が細胞毒性薬から分離することで、前記細胞傷害性
薬剤またはオリゴペプチド／連結基単位の一部を保持しているが細胞毒性が残っ
ている細胞傷害性薬剤を、蛋白分解的開裂の箇所で生理環境中に提供する結合体
である。前記結合体の医薬的に許容される塩も含まれる。
ＳＡおよび組織近傍に存在する他の天然蛋白分解酵素の蛋白分解活性によって、
オリゴペプチドと化学連結基が細胞毒性薬から分離することで、前記細胞傷害性
薬剤またはオリゴペプチド／連結基単位の一部を保持しているが細胞毒性が残っ
ている細胞傷害性薬剤を、蛋白分解的開裂の箇所で生理環境中に提供する結合体
である。前記結合体の医薬的に許容される塩も含まれる。
【００１７】 化学連結基を介して細胞傷害性薬剤に結合しているオリゴペプチドは、遊離Ｐ
ＳＡによる識別が最大であって、遊離ＰＳＡによって最も容易に蛋白分解的開裂
を起こすオリゴペプチドである必要はないことは明らかである。そこで、そのよ
うな抗癌組成物で組み込むべく選択されるオリゴペプチドは、それの遊離ＰＳＡ
による選択的蛋白分解的開裂およびそのような開裂によって生じる細胞傷害性薬
剤−蛋白分解残基結合体（あるいは、理想的状況であると思われる場合には、未
修飾の細胞傷害性薬剤）の細胞毒活性の両方について選択する。蛋白分解的ＰＳ
Ａ開裂に関連して使用される「選択的」という用語は、ランダムなアミノ酸配列
を有するオリゴペプチドの開裂と比較して、遊離ＰＳＡによる本発明のオリゴペ
プチド成分の開裂の方が速度が大きいことを意味するものである。従って、本発
明のオリゴペプチド成分は、遊離ＰＳＡの好ましい基質である。「選択的」とい
う用語はさらに、オリゴペプチドが、そのオリゴペプチドにおける２個の特定の
アミノ酸間で、遊離ＰＳＡによって蛋白分解的に開裂することをも示す。
ＳＡによる識別が最大であって、遊離ＰＳＡによって最も容易に蛋白分解的開裂
を起こすオリゴペプチドである必要はないことは明らかである。そこで、そのよ
うな抗癌組成物で組み込むべく選択されるオリゴペプチドは、それの遊離ＰＳＡ
による選択的蛋白分解的開裂およびそのような開裂によって生じる細胞傷害性薬
剤−蛋白分解残基結合体（あるいは、理想的状況であると思われる場合には、未
修飾の細胞傷害性薬剤）の細胞毒活性の両方について選択する。蛋白分解的ＰＳ
Ａ開裂に関連して使用される「選択的」という用語は、ランダムなアミノ酸配列
を有するオリゴペプチドの開裂と比較して、遊離ＰＳＡによる本発明のオリゴペ
プチド成分の開裂の方が速度が大きいことを意味するものである。従って、本発
明のオリゴペプチド成分は、遊離ＰＳＡの好ましい基質である。「選択的」とい
う用語はさらに、オリゴペプチドが、そのオリゴペプチドにおける２個の特定の
アミノ酸間で、遊離ＰＳＡによって蛋白分解的に開裂することをも示す。
【００１８】 本発明のオリゴペプチド成分は、遊離前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）によって選
択的に識別され、遊離前立腺特異的抗原の酵素活性によって蛋白分解的に開裂す
ることができる。そのようなオリゴペプチドには、下記のものから選択されるオ
リゴマーが含まれる。
択的に識別され、遊離前立腺特異的抗原の酵素活性によって蛋白分解的に開裂す
ることができる。そのようなオリゴペプチドには、下記のものから選択されるオ
リゴマーが含まれる。
【００１９】 ａ）ＡｓｎＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号１）、 ｂ）ＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２）、 ｃ）ＡｓｎＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＴｙｒ｜Ｓｅｒ（配列番号３）、 ｄ）ＡｓｎＬｙｓＡｌａＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号４）、 ｅ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号５）、 ｆ）ＬｙｓＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号６）、 ｇ）ｈＡｒｇＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号７）、 ｈ）ｈＡｒｇＣｈａＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号８）、 ｉ）ＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号９）、 ｊ）ＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号１０）、 ｋ）ＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＮｌｅ（配列番号１１）、 ｌ）ＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号１２）、 ｍ）ＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＮｌｅ（配列番号１３）、 ｎ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号１４）、 ｏ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号ｌ５）、 ｐ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号１６）、 ｑ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号ｌ７）、 ｒ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号ｌ８）、 ｓ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号１９）、 ｔ）ＨａａＸａａＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２０）、 ｕ）ＨａａＸａａＬｙｓＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２１）、 ｖ）ＨａａＸａａｈＡｒｇＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２２）、 ｗ）ＨａａＸａａｈＡｒｇＣｈａＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２３）、 ｘ）ＨａａＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２４）、 ｙ）ＨａａＸａａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２５）、 ｚ）ＨａａＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２６）、 ａａ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号１０６）、 ｂｂ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号１０７）、 ｃｃ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＡｂｕ（配列番号１０８）。
【００２０】 上記において、Ｈａａは親水性部分で置換された環状アミノ酸であり、ｈＡｒ
ｇはホモアルギニンであり、Ｘａａはアミノ酸であり、Ｃｈａはシクロヘキシル
アラニンであり、Ａｂｕは２−アミノ酪酸であり、Ｃｈｇはシクロヘキシルグリ
シンである。
ｇはホモアルギニンであり、Ｘａａはアミノ酸であり、Ｃｈａはシクロヘキシル
アラニンであり、Ａｂｕは２−アミノ酪酸であり、Ｃｈｇはシクロヘキシルグリ
シンである。
【００２１】 本発明の１実施態様において、前記オリゴペプチドには、下記のものから選択
されるオリゴマーが含まれる。
されるオリゴマーが含まれる。
【００２２】 ａ）ＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号２７）、 ｂ）ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号２８）、 ｃ）ＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号２９）、 ｅ）ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号３０）、 ｆ）ＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号３１）、 ｇ）ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号３２）、 ｈ）ＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号３３）、 ｉ）ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号３４）、 ｊ）４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号３５）、 ｋ）４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号３６）、 ｌ）ＡｌａＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号３７）、 ｍ）ＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号３８）、 ｎ）ＡｌａＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号３９）、 ｏ）ＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号４０）、 ｐ）４−ＨｙｐＡｌａＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号４１）、 ｑ）４−ＨｙｐＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号４２）。
【００２３】 上記において、４−Ｈｙｐは４−ヒドロキシプロリンであり、Ｘａａはアミノ
酸であり、ｈＡｒｇはホモアルギニンであり、Ｃｈａはシクロヘキシルアラニン
であり、Ｃｈｇはシクロヘキシルグリシンである。
酸であり、ｈＡｒｇはホモアルギニンであり、Ｃｈａはシクロヘキシルアラニン
であり、Ｃｈｇはシクロヘキシルグリシンである。
【００２４】 本発明のより好ましい実施態様において、前記オリゴペプチドは、下記のもの
から選択されるオリゴマーが含まれる。
から選択されるオリゴマーが含まれる。
【００２５】 ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号４３）、 ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号４４）、 ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号４５）、 ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号４６）、 ＳｅｒＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号４７）、 ＳｅｒＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号４８）、 ＳｅｒＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号４９）、 ＳｅｒＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号５０）、 ＳｅｒＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号５１）、 ＳｅｒＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号５２）、 （Ｎ−メチル−Ｓｅｒ）ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号
５３）、 （Ｎ−メチル−Ｓｅｒ）ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号
５４）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号５５）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号５６）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号５７）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号５８）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号５９）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号６０）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号６１）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号６２）、 ４−ＨｙｐＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号６３）、 ４−ＨｙｐＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号６４）、 （３、４−ジＨｙｐ）ＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号６
５）および （３、４−ジＨｙｐ）ＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号６
６）。
５３）、 （Ｎ−メチル−Ｓｅｒ）ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号
５４）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号５５）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号５６）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号５７）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号５８）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号５９）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号６０）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号６１）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号６２）、 ４−ＨｙｐＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号６３）、 ４−ＨｙｐＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号６４）、 （３、４−ジＨｙｐ）ＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号６
５）および （３、４−ジＨｙｐ）ＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号６
６）。
【００２６】 上記において、４−Ｈｙｐは４−ヒドロキシプロリンであり、３，４−ジＨｙ
ｐは３，４−ジヒドロキシプロリンであり、Ｃｈｇはシクロヘキシルグリシンで
ある。
ｐは３，４−ジヒドロキシプロリンであり、Ｃｈｇはシクロヘキシルグリシンで
ある。
【００２７】 上記ならびに発明の詳細な説明の他の箇所で使用の「アミノ酸配列を有するオ
リゴマー」という表記は、そのアミノ酸配列に、記載された特定のアミノ酸配列
を含み、従って遊離ＰＳＡによって記載のアミノ酸配列内で蛋白分解的に開裂す
る約３個〜約１００個のアミノ酸残基のオリゴマーを指す。好ましくはそのオリ
ゴマーは、５〜１０アミノ酸残基である。そこで例えば、ｈＡｒｇＳｅｒＡｌａ
ＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号６７）にはアミノ酸配列ＣｈｇＧｌｎ｜
ＳｅｒＬｅｕ（配列番号１２）があることから、本発明の範囲に含まれるものと
考えられる。さらにオリゴマーｈＡｒｇＳｅｒ４−ＨｙｐＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ
Ｌｅｕ（配列番号６８）にはアミノ酸配列４−ＨｙｐＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅ
ｕ（配列番号６９）があることから、本発明の範囲に含まれるものと考えられる
。そのようなオリゴマーは、セメノゲリンＩおよびセメノゲリンＩＩを含まない
ことは明らかである。
リゴマー」という表記は、そのアミノ酸配列に、記載された特定のアミノ酸配列
を含み、従って遊離ＰＳＡによって記載のアミノ酸配列内で蛋白分解的に開裂す
る約３個〜約１００個のアミノ酸残基のオリゴマーを指す。好ましくはそのオリ
ゴマーは、５〜１０アミノ酸残基である。そこで例えば、ｈＡｒｇＳｅｒＡｌａ
ＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号６７）にはアミノ酸配列ＣｈｇＧｌｎ｜
ＳｅｒＬｅｕ（配列番号１２）があることから、本発明の範囲に含まれるものと
考えられる。さらにオリゴマーｈＡｒｇＳｅｒ４−ＨｙｐＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ
Ｌｅｕ（配列番号６８）にはアミノ酸配列４−ＨｙｐＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅ
ｕ（配列番号６９）があることから、本発明の範囲に含まれるものと考えられる
。そのようなオリゴマーは、セメノゲリンＩおよびセメノゲリンＩＩを含まない
ことは明らかである。
【００２８】 ペプチド化学分野の当業者であれば、元のオリゴペプチドの生理活性が修飾オ
リゴペプチドにおいて保存されるような形で、生理活性ペプチド中のある種のア
ミノ酸を、他の同族、等立体化学および／または等電子的なアミノ酸によって置
き換えることが可能なことは容易に理解できよう。ある種の人工的アミノ酸およ
び修飾された天然アミノ酸を用いて、本発明のオリゴペプチド中の相当する天然
アミノ酸に置き換えることもできる。そこで例えば、チロシンを、３−ヨードチ
ロシン、２−メチルチロシン、３−フルオロチロシン、３−メチルチロシンなど
で置き換えることができる。さらに例えば、リジンを、Ｎ’−（２−イミダゾリ
ル）リジンなどで置き換えることができる。以下のアミノ酸置換リストは、例示
を目的としたものであって、本発明を限定するものではない。
リゴペプチドにおいて保存されるような形で、生理活性ペプチド中のある種のア
ミノ酸を、他の同族、等立体化学および／または等電子的なアミノ酸によって置
き換えることが可能なことは容易に理解できよう。ある種の人工的アミノ酸およ
び修飾された天然アミノ酸を用いて、本発明のオリゴペプチド中の相当する天然
アミノ酸に置き換えることもできる。そこで例えば、チロシンを、３−ヨードチ
ロシン、２−メチルチロシン、３−フルオロチロシン、３−メチルチロシンなど
で置き換えることができる。さらに例えば、リジンを、Ｎ’−（２−イミダゾリ
ル）リジンなどで置き換えることができる。以下のアミノ酸置換リストは、例示
を目的としたものであって、本発明を限定するものではない。
【００２９】
【表２】
【００３０】 そこで例えば、当業者には公知の方法によって、以下のオリゴペプチドを合成
することができ、それらは遊離ＰＳＡによって蛋白分解的に開裂を受けると予想
される。
することができ、それらは遊離ＰＳＡによって蛋白分解的に開裂を受けると予想
される。
【００３１】 ＡｓｎＡｒｇＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号７０） ＡｓｎＬｙｓＶａｌＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号７１） ＡｓｎＬｙｓＭｅｔＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号７２） ＡｓｎＬｙｓＬｅｕＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号７３） ＡｓｎＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号７４） ＧｌｎＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号７５） Ａｓｎ４−ＨｙｐＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号７６） Ａｓｎ４−ＨｙｐＶａｌＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号７７） ４−ＨｙｐＡｌａＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号７８） （３、４−ジヒドロキシプロリン）ＡｌａＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ
（配列番号７９） ３−ヒドロキシプロリンＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号８０） ４−ＨｙｐＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号８１）。
（配列番号７９） ３−ヒドロキシプロリンＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号８０） ４−ＨｙｐＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号８１）。
【００３２】 アミノ酸配列内に「｜」の記号が入っているのは、遊離ＰＳＡによってオリゴ
ペプチドが蛋白分解的に開裂するその配列内の箇所を指している。
ペプチドが蛋白分解的に開裂するその配列内の箇所を指している。
【００３３】 本発明の化合物は不斉中心を持つことができ、ラセミ体、ラセミ混合物、およ
び個々のジアステレオマーとして得られる場合があり、光学異性体などの全ての
可能な異性体を有し得るものであって、それらはいずれも本発明に含まれる。別
段の断りがない限り、示してあるアミノ酸は、天然の「Ｌ」立体配置を有するも
のと理解される。
び個々のジアステレオマーとして得られる場合があり、光学異性体などの全ての
可能な異性体を有し得るものであって、それらはいずれも本発明に含まれる。別
段の断りがない限り、示してあるアミノ酸は、天然の「Ｌ」立体配置を有するも
のと理解される。
【００３４】 本発明においては、開示のアミノ酸は、以下に示すような従来の３文字および
１文字の略称の両方によって識別される。
１文字の略称の両方によって識別される。
【００３５】
【表３】
【００３６】 本明細書および図においては、以下の略称を用いて、指定のアミノ酸および部
分を示す。
分を示す。
【００３７】 ｈＲまたはｈＡｒｇ：ホモアルギニン ｈＹまたはｈＴｙｒ：ホモチロシン Ｃｈａ：シクロヘキシルアミン Ａｍｆ：４−アミノメチルフェニルアラニン ＤＡＰ：１，３−ジアミノプロピル ＤＰＬ：２−（４，６−ジメチルピリミジニル）リジン （イミダゾリル）Ｋ：Ｎ’−（２−イミダゾリル）リジン Ｍｅ２ＰＯ３−Ｙ：Ｏ−ジメチルホスホチロシン Ｏ−Ｍｅ−Ｙ：Ｏ−メチルチロシン ＴＩＣ：１，２，３，４−テトラヒドロ−３−イソキノリンカルボン酸 ＤＡＰ：１，３−ジアミノプロパン ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸 ＡＡ：酢酸 ３ＰＡＬ：３−ピリジルアラニン ４−Ｈｙｐ：４−ヒドロキシプロリン ｄＡｃ−Ｖｉｎ：４−ｄｅｓ−アセチルビンブラスチン Ｔｒｔ：トリチル。
【００３８】 本発明のオリゴペプチド−細胞傷害性薬剤結合体などのペプチジル治療薬が、
アセチル基、ベンゾイル基、ピバロイル基などの好適な保護基で保護されたオリ
ゴペプチド置換基の末端アミノ部分を有することが好ましいことは、当業界では
公知であり、本発明において明らかである。そのような末端アミノ基の保護によ
って、温血動物の血漿中に存在する外因性アミノペプチダーゼの作用によるその
ようなペプチジル治療薬の酵素分解が低減または消失する。そのような保護基に
はさらに、親水性官能基の存在に基づいて選択される親水性ブロック基などがあ
る。結合体の親水性を高めることから、結合体の水溶性を高めるブロック基には
、ヒドロキシ化アルカノイル、ポリヒドロキシ化アルカノイル、ポリエチレング
リコール、グリコシレート類、糖類およびクラウンエーテル類などがあるが、こ
れらに限定されるものではない。Ｎ−末端の人工的アミノ酸部分も、外因性アミ
ノペプチダーゼによるそのような酵素分解を改善することができる。
アセチル基、ベンゾイル基、ピバロイル基などの好適な保護基で保護されたオリ
ゴペプチド置換基の末端アミノ部分を有することが好ましいことは、当業界では
公知であり、本発明において明らかである。そのような末端アミノ基の保護によ
って、温血動物の血漿中に存在する外因性アミノペプチダーゼの作用によるその
ようなペプチジル治療薬の酵素分解が低減または消失する。そのような保護基に
はさらに、親水性官能基の存在に基づいて選択される親水性ブロック基などがあ
る。結合体の親水性を高めることから、結合体の水溶性を高めるブロック基には
、ヒドロキシ化アルカノイル、ポリヒドロキシ化アルカノイル、ポリエチレング
リコール、グリコシレート類、糖類およびクラウンエーテル類などがあるが、こ
れらに限定されるものではない。Ｎ−末端の人工的アミノ酸部分も、外因性アミ
ノペプチダーゼによるそのような酵素分解を改善することができる。
【００３９】 好ましくはＮ−末端保護基は下記のものから選択される。
【００４０】 ａ）アセチル、
【００４１】
【化１７】
【００４２】 上記において、 Ｒ１およびＲ２は独立に、 ａ）水素、 ｂ）未置換または置換アリール、未置換または置換複素環、Ｃ３〜Ｃ１０シク
ロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、ハロゲン、Ｃ１〜
Ｃ６パーフルオロアルキル、Ｒ６Ｏ−、Ｒ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、（Ｒ６）２ＮＣ
（Ｏ）−、Ｒ６ ２Ｎ−Ｃ（ＮＲ６）−、Ｒ７Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｒ ６ Ｃ（Ｏ）−、Ｎ３、−Ｎ（Ｒ６）２またはＲ７ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６−、 ｃ）未置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル、 ｄ）置換Ｃ１〜Ｃ６アルキルであって、その置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル上の置換
基が未置換または置換アリール、未置換または置換複素環、Ｃ３〜Ｃ１０シクロ
アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｒ６Ｏ−、Ｒ７Ｓ（
Ｏ）２ＮＨ、Ｒ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、（Ｒ６）２ＮＣ（Ｏ）−、Ｒ６ ２Ｎ−Ｃ（
ＮＲ６）−、ＣＮ、Ｒ６Ｃ（Ｏ）−、Ｎ３、−Ｎ（Ｒ６）２およびＲ７ＯＣ（Ｏ
）−ＮＲ６−から選択されるもの から選択されるか；あるいは Ｒ１とＲ２が一体となって、炭素原子のうちの１個がＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、−ＮＣ
（Ｏ）−、ＮＨおよび−Ｎ（ＣＯＲ７）−から選択される部分によって置き換わ
っていても良い−（ＣＨ２）ｓ−を形成しており； Ｒ６は、水素、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、Ｃ１〜Ｃ６ア
ルキルおよびＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルから選択され； Ｒ７は、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、Ｃ１〜Ｃ６アルキル
およびＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルから選択され； ｍは０、１または２であり； ｎは１、２、３または４であり； ｐはゼロまたは１〜１００の整数であり； ｑは０または１であり、ただしｐがゼロの場合ｑは１であり； ｒは１、２または３であり、 ｓは３、４または５である。
ロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、ハロゲン、Ｃ１〜
Ｃ６パーフルオロアルキル、Ｒ６Ｏ−、Ｒ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、（Ｒ６）２ＮＣ
（Ｏ）−、Ｒ６ ２Ｎ−Ｃ（ＮＲ６）−、Ｒ７Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｒ ６ Ｃ（Ｏ）−、Ｎ３、−Ｎ（Ｒ６）２またはＲ７ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６−、 ｃ）未置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル、 ｄ）置換Ｃ１〜Ｃ６アルキルであって、その置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル上の置換
基が未置換または置換アリール、未置換または置換複素環、Ｃ３〜Ｃ１０シクロ
アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｒ６Ｏ−、Ｒ７Ｓ（
Ｏ）２ＮＨ、Ｒ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、（Ｒ６）２ＮＣ（Ｏ）−、Ｒ６ ２Ｎ−Ｃ（
ＮＲ６）−、ＣＮ、Ｒ６Ｃ（Ｏ）−、Ｎ３、−Ｎ（Ｒ６）２およびＲ７ＯＣ（Ｏ
）−ＮＲ６−から選択されるもの から選択されるか；あるいは Ｒ１とＲ２が一体となって、炭素原子のうちの１個がＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、−ＮＣ
（Ｏ）−、ＮＨおよび−Ｎ（ＣＯＲ７）−から選択される部分によって置き換わ
っていても良い−（ＣＨ２）ｓ−を形成しており； Ｒ６は、水素、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、Ｃ１〜Ｃ６ア
ルキルおよびＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルから選択され； Ｒ７は、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、Ｃ１〜Ｃ６アルキル
およびＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルから選択され； ｍは０、１または２であり； ｎは１、２、３または４であり； ｐはゼロまたは１〜１００の整数であり； ｑは０または１であり、ただしｐがゼロの場合ｑは１であり； ｒは１、２または３であり、 ｓは３、４または５である。
【００４３】 本発明の結合体で使用される細胞傷害性薬剤は、アルキル化剤、増殖抑制剤、
チューブリン結合剤から選択される。ヒドロキシアルキルアミン連結基を介して
開裂可能なオリゴマーに連結することができる好ましい種類の細胞傷害性薬剤に
は例えば、メトトレキセート類、ビンカ薬類（ビンカアルカロイド細胞傷害性薬
剤とも称される）、マイトマイシン類およびブレオマイシン類などがある。それ
らの種類のうち特に有用なものとしては例えば、アミノプテリン、メトトレキセ
ート、メトプテリン、ジクロロ−メトトレキセート、マイトマイシンＣ、ポルフ
ィロマイシン、メルファラン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ロイロシジン
（leurosidine）、ビンデシン、ロイロシンなどがある。他の有用な細胞傷害性 薬剤には、シスプラチンおよびシクロホスファミドなどがある。当業者であれば
、所望の細胞傷害性薬剤に対して化学修飾を施して、その化合物の反応を、本発
明の結合体を得る上でより簡便なものとすることができる。
チューブリン結合剤から選択される。ヒドロキシアルキルアミン連結基を介して
開裂可能なオリゴマーに連結することができる好ましい種類の細胞傷害性薬剤に
は例えば、メトトレキセート類、ビンカ薬類（ビンカアルカロイド細胞傷害性薬
剤とも称される）、マイトマイシン類およびブレオマイシン類などがある。それ
らの種類のうち特に有用なものとしては例えば、アミノプテリン、メトトレキセ
ート、メトプテリン、ジクロロ−メトトレキセート、マイトマイシンＣ、ポルフ
ィロマイシン、メルファラン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ロイロシジン
（leurosidine）、ビンデシン、ロイロシンなどがある。他の有用な細胞傷害性 薬剤には、シスプラチンおよびシクロホスファミドなどがある。当業者であれば
、所望の細胞傷害性薬剤に対して化学修飾を施して、その化合物の反応を、本発
明の結合体を得る上でより簡便なものとすることができる。
【００４４】 好ましい細胞傷害性薬剤には、ビンカアルカロイド系細胞傷害性薬剤がある。
その種類の特異に有用なものとしては例えば、ビンブラスチン、デスアセチルビ
ンブラスチン、ビンクリスチン、ロイロシジン、ビンデシン、ビノレルビン（vi
norelbine）、ナベルビン、ロイロシンなどがある。当業者であれば、所望の細 胞傷害性薬剤に対して化学修飾を施して、その化合物の反応を、本発明の結合体
を得る上でより簡便なものとすることができる。
その種類の特異に有用なものとしては例えば、ビンブラスチン、デスアセチルビ
ンブラスチン、ビンクリスチン、ロイロシジン、ビンデシン、ビノレルビン（vi
norelbine）、ナベルビン、ロイロシンなどがある。当業者であれば、所望の細 胞傷害性薬剤に対して化学修飾を施して、その化合物の反応を、本発明の結合体
を得る上でより簡便なものとすることができる。
【００４５】 本発明において好ましい細胞傷害性薬剤群には、以下の式の薬剤などがある。
【００４６】
【化１８】 式中、 Ｒ１５はＨ、ＣＨ３またはＣＨＯであり； Ｒ１７およびＲ１８が単独で存在する場合、Ｒ１８はＨであり、Ｒ１６および
Ｒ１７のうちの一方がエチルであり、他方はＨまたはＯＨであり； Ｒ１７およびＲ１８がそれらが結合している炭素一体となっている場合、それ
らはＲ１６がエチルの場合にオキシラン環を形成しており； Ｒ９は水素、（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）−ＣＯまたは塩素置換（Ｃ１〜Ｃ３アル
キル）−ＣＯである。
Ｒ１７のうちの一方がエチルであり、他方はＨまたはＯＨであり； Ｒ１７およびＲ１８がそれらが結合している炭素一体となっている場合、それ
らはＲ１６がエチルの場合にオキシラン環を形成しており； Ｒ９は水素、（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）−ＣＯまたは塩素置換（Ｃ１〜Ｃ３アル
キル）−ＣＯである。
【００４７】 前記細胞傷害性薬剤が好ましい細胞傷害性薬剤ビンブラスチンである本発明の
オリゴペプチド−細胞傷害性薬剤結合体は、下記一般式Ｉによって表すことがで
きるか、あるいはそれの医薬的に許容される塩である。
オリゴペプチド−細胞傷害性薬剤結合体は、下記一般式Ｉによって表すことがで
きるか、あるいはそれの医薬的に許容される塩である。
【００４８】
【化１９】
【００４９】 式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）によって選択的に
識別され、遊離前立腺特異的抗原の酵素活性によって蛋白分解的に開裂すること
ができるオリゴペプチドであり； ＸＬは−ＮＨ−（ＣＲ３ ２）ｕ（ＣＲ４ ２）ｖ−Ｏ−および
識別され、遊離前立腺特異的抗原の酵素活性によって蛋白分解的に開裂すること
ができるオリゴペプチドであり； ＸＬは−ＮＨ−（ＣＲ３ ２）ｕ（ＣＲ４ ２）ｖ−Ｏ−および
【００５０】
【化２０】 から選択され； Ｒは ａ）水素、 ｂ）−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ１ａ、
【００５１】
【化２１】 ｆ）エトキシスクアレートおよび ｇ）コチニニル から選択され； Ｒ１およびＲ２は独立に、 ａ）水素、 ｂ）未置換または置換アリール、未置換または置換複素環、Ｃ３〜Ｃ１０シク
ロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、ハロゲン、Ｃ１〜
Ｃ６パーフルオロアルキル、Ｒ６Ｏ−、Ｒ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、（Ｒ６）２ＮＣ
（Ｏ）−、Ｒ６ ２Ｎ−Ｃ（ＮＲ６）−、Ｒ７Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｒ ６ Ｃ（Ｏ）−、Ｎ３、−Ｎ（Ｒ６）２またはＲ７ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６−、 ｃ）未置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル、 ｄ）置換Ｃ１〜Ｃ６アルキルであって、その置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル上の置換
基が未置換または置換アリール、未置換または置換複素環、Ｃ３〜Ｃ１０シクロ
アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｒ６Ｏ−、Ｒ７Ｓ（
Ｏ）２ＮＨ、Ｒ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、（Ｒ６）２ＮＣ（Ｏ）−、Ｒ６ ２Ｎ−Ｃ（
ＮＲ６）−、ＣＮ、Ｒ６Ｃ（Ｏ）−、Ｎ３、−Ｎ（Ｒ６）２およびＲ７ＯＣ（Ｏ
）−ＮＲ６−から選択されるもの から選択されるか；あるいは Ｒ１とＲ２が一体となって、炭素原子のうちの１個がＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、−ＮＣ
（Ｏ）−、ＮＨおよび−Ｎ（ＣＯＲ７）−から選択される部分によって置き換わ
っていても良い−（ＣＨ２）ｓ−を形成しており； Ｒ１ａはＣ１〜Ｃ６アルキル、ヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ポリ
ヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ヒドロキシ化アリール、ポリヒドロキ
シ化アリールまたはアリールであり； Ｒ３およびＲ４は独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ ８ シクロアルキル、ポリヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ヒドロキシ化
アリール、ポリヒドロキシ化アリールおよびアリールから選択されるか；あるい
は １個のＲ３と１個のＲ４が一体となって、未置換であるかＯＨおよびＣ１〜Ｃ ６ アルキルから選択される１個もしくは２個の置換基によって置換された−（Ｃ
Ｈ２）ｗ−を形成しており；あるいは Ｒ３が同一炭素上の別のＲ３と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り；あるいは Ｒ４が同一炭素上の別のＲ４と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り； Ｒ５はＯＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され； Ｒ６は水素、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、Ｃ１〜Ｃ６アル
キルおよびＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルから選択され； Ｒ７はアリール、置換アリール、複素環、置換複素環、Ｃ１〜Ｃ６アルキルお
よびＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルから選択され； Ｒ９は水素、（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）−ＣＯまたは塩素置換（Ｃ１〜Ｃ３アル
キル）−ＣＯであり； ｎは１、２、３または４であり； ｐはゼロまたは１〜１００の整数であり； ｑは０または１であり、ただしｐがゼロの場合ｑは１であり； ｒは１、２または３であり、 ｓは４、５または６であり； ｔは３または４であり； ｕおよびｖは独立に、０、１、２または３から選択され； ｗは２、３または４であり； ｘは３、４または５であり； ｙは１、２または３である。
ロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、ハロゲン、Ｃ１〜
Ｃ６パーフルオロアルキル、Ｒ６Ｏ−、Ｒ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、（Ｒ６）２ＮＣ
（Ｏ）−、Ｒ６ ２Ｎ−Ｃ（ＮＲ６）−、Ｒ７Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｒ ６ Ｃ（Ｏ）−、Ｎ３、−Ｎ（Ｒ６）２またはＲ７ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６−、 ｃ）未置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル、 ｄ）置換Ｃ１〜Ｃ６アルキルであって、その置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル上の置換
基が未置換または置換アリール、未置換または置換複素環、Ｃ３〜Ｃ１０シクロ
アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｒ６Ｏ−、Ｒ７Ｓ（
Ｏ）２ＮＨ、Ｒ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、（Ｒ６）２ＮＣ（Ｏ）−、Ｒ６ ２Ｎ−Ｃ（
ＮＲ６）−、ＣＮ、Ｒ６Ｃ（Ｏ）−、Ｎ３、−Ｎ（Ｒ６）２およびＲ７ＯＣ（Ｏ
）−ＮＲ６−から選択されるもの から選択されるか；あるいは Ｒ１とＲ２が一体となって、炭素原子のうちの１個がＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、−ＮＣ
（Ｏ）−、ＮＨおよび−Ｎ（ＣＯＲ７）−から選択される部分によって置き換わ
っていても良い−（ＣＨ２）ｓ−を形成しており； Ｒ１ａはＣ１〜Ｃ６アルキル、ヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ポリ
ヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ヒドロキシ化アリール、ポリヒドロキ
シ化アリールまたはアリールであり； Ｒ３およびＲ４は独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ ８ シクロアルキル、ポリヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ヒドロキシ化
アリール、ポリヒドロキシ化アリールおよびアリールから選択されるか；あるい
は １個のＲ３と１個のＲ４が一体となって、未置換であるかＯＨおよびＣ１〜Ｃ ６ アルキルから選択される１個もしくは２個の置換基によって置換された−（Ｃ
Ｈ２）ｗ−を形成しており；あるいは Ｒ３が同一炭素上の別のＲ３と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り；あるいは Ｒ４が同一炭素上の別のＲ４と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り； Ｒ５はＯＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され； Ｒ６は水素、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、Ｃ１〜Ｃ６アル
キルおよびＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルから選択され； Ｒ７はアリール、置換アリール、複素環、置換複素環、Ｃ１〜Ｃ６アルキルお
よびＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルから選択され； Ｒ９は水素、（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）−ＣＯまたは塩素置換（Ｃ１〜Ｃ３アル
キル）−ＣＯであり； ｎは１、２、３または４であり； ｐはゼロまたは１〜１００の整数であり； ｑは０または１であり、ただしｐがゼロの場合ｑは１であり； ｒは１、２または３であり、 ｓは４、５または６であり； ｔは３または４であり； ｕおよびｖは独立に、０、１、２または３から選択され； ｗは２、３または４であり； ｘは３、４または５であり； ｙは１、２または３である。
【００５２】 好ましくはｕは１であり、ｖは１である。
【００５３】 好ましくは少なくとも１個のＲ３が、フェニル、シクロヘキシルおよびシクロ
ペンチルから選択される。
ペンチルから選択される。
【００５４】 好ましくは少なくとも１個のＲ４が、フェニル、シクロヘキシル、シクロペン
チルおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される。
チルおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される。
【００５５】 好ましくはＲ１およびＲ２は独立に、水素、ＯＨ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１ 〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アラルキルおよびアリールから選択される。
【００５６】 好ましくはビンカアルカロイド細胞傷害性薬剤のＣ−２３カルボニルへの基Ｘ Ｌ の結合は、ＸＬ基の窒素を介してのものである。
【００５７】 好ましくはＸＬは、以下の基あるいはそれの光学異性体から選択される。
【００５８】
【化２２】
【００５９】
【化２３】
【００６０】 より好ましくは、ＸＬは下記の基あるいはそれの光学異性体から選択される。
【００６１】
【化２４】
【００６２】 本発明の結合体のオリゴペプチドのある種のものは、用語「Ｈａａ」によって
前述で表した親水性部分で置換された環状アミノ酸を有しており、それは下記式
によって表すこともできる。
前述で表した親水性部分で置換された環状アミノ酸を有しており、それは下記式
によって表すこともできる。
【００６３】
【化２５】 式中、 Ｒ５はＨＯ−およびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され； Ｒ６は水素、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＨＯ−およびＣ１〜Ｃ６アルコ
キシから選択され； ｔは３または４である。
キシから選択され； ｔは３または４である。
【００６４】 下記の構造
【００６５】
【化２６】 は、環に５員または６員を有する環状アミン部分であって、フェニル環またはシ
クロヘキシル環に融合していても良い環状アミンを表す。そのような環状アミン
部分の例としては、以下の具体的な構造があるが、これらに限定されるものでは
ない。
クロヘキシル環に融合していても良い環状アミンを表す。そのような環状アミン
部分の例としては、以下の具体的な構造があるが、これらに限定されるものでは
ない。
【００６６】
【化２７】
【００６７】 １個のＲ３と１個のＲ４が一体となって−（ＣＨ２）ｗ−を形成している場合
、シクロアルキル部分は環に５〜７員を有する。そのようなシクロアルキル部分
の例いは、以下の具体的な構造などがあるが、これらに限定されるものではない
。
、シクロアルキル部分は環に５〜７員を有する。そのようなシクロアルキル部分
の例いは、以下の具体的な構造などがあるが、これらに限定されるものではない
。
【００６８】
【化２８】
【００６９】 本発明の結合体は不斉中心を持つことができ、ラセミ体、ラセミ混合物、およ
び個々のジアステレオマーとして得られる場合があり、光学異性体などの全ての
可能な異性体を有し得るものであって、それらはいずれも本発明に含まれる。い
ずれかの変数（例：アリール、複素環、Ｒ３など）がいずれかの構成部分に複数
個ある場合、各場合におけるそれの定義は、あらゆる他の場合とは独立である。
例えば、ＨＯ（ＣＲ３Ｒ３）２−は、ＨＯＣＨ２ＣＨ２−、ＨＯＣＨ２ＣＨ（Ｏ
Ｈ）−、ＨＯＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＯＨ）−などを表す。さらに、置換基および
／または変数は、そのような組み合わせによって安定な化合物が得られる場合に
のみ許容されるものである。
び個々のジアステレオマーとして得られる場合があり、光学異性体などの全ての
可能な異性体を有し得るものであって、それらはいずれも本発明に含まれる。い
ずれかの変数（例：アリール、複素環、Ｒ３など）がいずれかの構成部分に複数
個ある場合、各場合におけるそれの定義は、あらゆる他の場合とは独立である。
例えば、ＨＯ（ＣＲ３Ｒ３）２−は、ＨＯＣＨ２ＣＨ２−、ＨＯＣＨ２ＣＨ（Ｏ
Ｈ）−、ＨＯＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＯＨ）−などを表す。さらに、置換基および
／または変数は、そのような組み合わせによって安定な化合物が得られる場合に
のみ許容されるものである。
【００７０】 本明細書で使用される「アルキル」ならびにアラルキルおよび類似の用語のア
ルキル部分は、指定数の炭素原子を有する分岐および直鎖の両方の飽和脂肪族炭
化水素基を含むものであり、「アルコキシ」は、酸素架橋を介して結合した指定
数の炭素原子数のアルキル基を表す。
ルキル部分は、指定数の炭素原子を有する分岐および直鎖の両方の飽和脂肪族炭
化水素基を含むものであり、「アルコキシ」は、酸素架橋を介して結合した指定
数の炭素原子数のアルキル基を表す。
【００７１】 本明細書で使用する場合、「塩素置換アルキル」とは、指定数の炭素原子を有
する分岐および直鎖の両方の飽和脂肪族炭化水素基であって、塩素原子で置換さ
れているものを含むものである。例を挙げると、クロロメチル、１−クロロエチ
ル、２−クロロエチル、１−クロロプロピル、２−クロロプロピルなどがあるが
、これらに限定されるものではない。
する分岐および直鎖の両方の飽和脂肪族炭化水素基であって、塩素原子で置換さ
れているものを含むものである。例を挙げると、クロロメチル、１−クロロエチ
ル、２−クロロエチル、１−クロロプロピル、２−クロロプロピルなどがあるが
、これらに限定されるものではない。
【００７２】 本明細書で使用する場合、「シクロアルキル」とは、指定数の炭素原子を有す
る非芳香族環状炭化水素基を含むものである。シクロアルキルの例としては、シ
クロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどがある。
る非芳香族環状炭化水素基を含むものである。シクロアルキルの例としては、シ
クロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどがある。
【００７３】 「アルケニル」基には、指定数の炭素原子を有し、１個またはいくつかの二重
結合を有する基などがある。アルケニル基の例としては、ビニル、アリル、イソ
プロペニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、シクロプロペニル、シクロ
ブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、１−プロペニル、２−ブテニ
ル、２−メチル−２−ブテニル、イソプレニル、ファルネシル、ゲラニル、ゲラ
ニルゲラニルなどがある。
結合を有する基などがある。アルケニル基の例としては、ビニル、アリル、イソ
プロペニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、シクロプロペニル、シクロ
ブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、１−プロペニル、２−ブテニ
ル、２−メチル−２−ブテニル、イソプレニル、ファルネシル、ゲラニル、ゲラ
ニルゲラニルなどがある。
【００７４】 「アルキニル」基には、指定数の炭素原子を有し、１個の三重結合を有する基
などがある。アルキニル基の例としてはアセチレン、２−ブチニル、２−ペンチ
ニル、３−ペンチニルなどがある。
などがある。アルキニル基の例としてはアセチレン、２−ブチニル、２−ペンチ
ニル、３−ペンチニルなどがある。
【００７５】 本明細書で使用される「ハロゲン」または「ハロ」とは、フッ素、塩素、臭素
およびヨウ素を意味する。
およびヨウ素を意味する。
【００７６】 本明細書で使用される「アリール」ならびにアラルキルおよびアロイルのアリ
ール部分は、少なくとも１個の環が芳香族である、各環が７員以下の安定な単環
式または二環式炭素環を意味するものである。そのようなアリール要素の例とし
ては、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、
フェナントリル、アントリルまたはアセナフチルなどがある。
ール部分は、少なくとも１個の環が芳香族である、各環が７員以下の安定な単環
式または二環式炭素環を意味するものである。そのようなアリール要素の例とし
ては、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、
フェナントリル、アントリルまたはアセナフチルなどがある。
【００７７】 本明細書で使用される複素環という用語は、飽和または不飽和である安定な５
〜７員の単環式環あるいは安定な８〜１１員の二環式環であって、炭素原子およ
びＮ、ＯおよびＳからなる群から選択される１〜４個のヘテロ原子からなり、上
記で定義のいずれかの複素環がベンゼン環に融合している二環式基などの基を表
す。複素環は、安定な構造が得られるヘテロ原子または炭素原子で結合すること
ができる。そのような複素環要素の例としては、アゼピニル、ベンズイミダゾリ
ル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオ
ピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾ
リル、クロマニル、シノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニ
ル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、フリ
ル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、インドリニル、インド
リル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリジニ
ル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オ
キサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、２−オキソピペラジニ
ル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、ピペリジル、ピペラジ
ニル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピ
リミジニル、ピロリジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキザリ
ニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリ
ニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホシド、チアゾリル、チアゾリ
ニル、チエノフリル、チエノチエニルおよびチエニルなどがあるが、これらに限
定されるものではない。
〜７員の単環式環あるいは安定な８〜１１員の二環式環であって、炭素原子およ
びＮ、ＯおよびＳからなる群から選択される１〜４個のヘテロ原子からなり、上
記で定義のいずれかの複素環がベンゼン環に融合している二環式基などの基を表
す。複素環は、安定な構造が得られるヘテロ原子または炭素原子で結合すること
ができる。そのような複素環要素の例としては、アゼピニル、ベンズイミダゾリ
ル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオ
ピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾ
リル、クロマニル、シノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニ
ル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、フリ
ル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、インドリニル、インド
リル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリジニ
ル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オ
キサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、２−オキソピペラジニ
ル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、ピペリジル、ピペラジ
ニル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピ
リミジニル、ピロリジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキザリ
ニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリ
ニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホシド、チアゾリル、チアゾリ
ニル、チエノフリル、チエノチエニルおよびチエニルなどがあるが、これらに限
定されるものではない。
【００７８】 本明細書で使用される「置換Ｃ１−８アルキル」、「置換アリール」および「
置換複素環」には、化合物の残りの部分への結合箇所以外に１〜３個の置換基を
有する部分が含まれる。そのような別の置換基は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＦ３、Ｎ
Ｈ２、Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）２、ＮＯ２、ＣＮ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｏ
−、−ＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｓ（Ｏ）ｍ−、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｃ
（Ｏ）ＮＨ−、Ｈ２Ｎ−Ｃ（ＮＨ）−、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｃ（Ｏ）−、（
Ｃ１〜Ｃ６アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、Ｎ３、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）ＯＣ（Ｏ）
ＮＨ−およびＣ１〜Ｃ２０アルキルから選択される。
置換複素環」には、化合物の残りの部分への結合箇所以外に１〜３個の置換基を
有する部分が含まれる。そのような別の置換基は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＦ３、Ｎ
Ｈ２、Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）２、ＮＯ２、ＣＮ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｏ
−、−ＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｓ（Ｏ）ｍ−、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｃ
（Ｏ）ＮＨ−、Ｈ２Ｎ−Ｃ（ＮＨ）−、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｃ（Ｏ）−、（
Ｃ１〜Ｃ６アルキル）ＯＣ（Ｏ）−、Ｎ３、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）ＯＣ（Ｏ）
ＮＨ−およびＣ１〜Ｃ２０アルキルから選択される。
【００７９】 Ｒ１とＲ２、同一炭素上の２個のＲ３、あるいは同一炭素上の２個のＲ４が一
体となって−（ＣＨ２）ｓ−または−（ＣＨ２）ｗ−を形成している場合、その
ように定義された環状部分には以下のものなどがあるが、これらに限定されるも
のではない。
体となって−（ＣＨ２）ｓ−または−（ＣＨ２）ｗ−を形成している場合、その
ように定義された環状部分には以下のものなどがあるが、これらに限定されるも
のではない。
【００８０】
【化２９】
【００８１】 Ｒ１とＲ２が一体となって−（ＣＨ２）ｓ−を形成している場合、そのように
定義された含ヘテロ原子環状部分には以下のものなどがあるが、これらに限定さ
れるものではない。
定義された含ヘテロ原子環状部分には以下のものなどがあるが、これらに限定さ
れるものではない。
【００８２】
【化３０】
【００８３】 本明細書で使用する場合、「ヒドロキシ化」という用語は、そのように記載さ
れる環系の置換可能な炭素上でのヒドロキシ部分による置換を表す。本明細書で
使用される場合、「ポリヒドロキシ化」という用語は、そのように記載される環
系の置換可能な２個以上の炭素上での２個、３個または４個のヒドロキシ部分に
よる置換を表す。
れる環系の置換可能な炭素上でのヒドロキシ部分による置換を表す。本明細書で
使用される場合、「ポリヒドロキシ化」という用語は、そのように記載される環
系の置換可能な２個以上の炭素上での２個、３個または４個のヒドロキシ部分に
よる置換を表す。
【００８４】 本明細書で使用する場合、「コチニニル」という用語は、以下の構造またはそ
れのジアステレオマーを表す。
れのジアステレオマーを表す。
【００８５】
【化３１】
【００８６】 本明細書で使用する場合、「４−エトキシスクアレート」という用語は、以下
の構造を表す。
の構造を表す。
【００８７】
【化３２】
【００８８】 以下の化合物またはそれらの医薬的に許容される塩は、本発明のオリゴペプチ
ド−デスアセチルビンブラスチン結合体の具体例である。
ド−デスアセチルビンブラスチン結合体の具体例である。
【００８９】
【化３３】
【００９０】
【化３４】
【００９１】
【化３５】
【００９２】 本発明のオリゴペプチド、ペプチドサブユニットおよびペプチド誘導体（「ペ
プチド」とも称する）は、従来のペプチド合成法、好ましくは固相法によって、
その構成アミノ酸から合成することができる。次に、得られたペプチドを逆相高
速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって精製する。
プチド」とも称する）は、従来のペプチド合成法、好ましくは固相法によって、
その構成アミノ酸から合成することができる。次に、得られたペプチドを逆相高
速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって精製する。
【００９３】 標準的なペプチド合成法については、各種文献に開示されている（例：Schroe
der et al., “The Peptides”, Vol.I, Academic Press 1965; Bodansky et al
., “Peptide Synthesis”, Interscience Publishers, 1966; McOmie(ed.) “P
rotective Groups in Organic Chemistry”, Plenum Press, 1973; Barany et a
l., “The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology” 2, Chapter 1, Academi
c Press, 1980; Stewart et al., “Solid Phase Peptide Synthesis”, Second
Edition, Pierce Chemical Company, 1984）。これらの著作の記載は、参照に よって本明細書に組み込まれるものとする。
der et al., “The Peptides”, Vol.I, Academic Press 1965; Bodansky et al
., “Peptide Synthesis”, Interscience Publishers, 1966; McOmie(ed.) “P
rotective Groups in Organic Chemistry”, Plenum Press, 1973; Barany et a
l., “The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology” 2, Chapter 1, Academi
c Press, 1980; Stewart et al., “Solid Phase Peptide Synthesis”, Second
Edition, Pierce Chemical Company, 1984）。これらの著作の記載は、参照に よって本明細書に組み込まれるものとする。
【００９４】 標準的なペプチド合成法によって本発明の結合体に組み込むことができる親水
性置換基を有する好適に置換された環状アミノ酸はそれ自体市販されているか、
あるいは当業界で公知の方法または本明細書に記載の方法によって容易に合成さ
れる。そこで、好適に置換されたプロリン類の合成については、各種論文および
そこに引用の参考文献に記載されている（J. Ezquerra et al, J. Org. Chem.,
60: 2925-2930 (1995); P Gill and W. D. Lubell, J. Org. Chem.., 60: 2658-
2659 (1995);およびM. W. Holladay et al., J. Med. Chem., 34: 457-461 (199
1)）。これら著作の記載は、引用によって本明細書に含まれるものとする。
性置換基を有する好適に置換された環状アミノ酸はそれ自体市販されているか、
あるいは当業界で公知の方法または本明細書に記載の方法によって容易に合成さ
れる。そこで、好適に置換されたプロリン類の合成については、各種論文および
そこに引用の参考文献に記載されている（J. Ezquerra et al, J. Org. Chem.,
60: 2925-2930 (1995); P Gill and W. D. Lubell, J. Org. Chem.., 60: 2658-
2659 (1995);およびM. W. Holladay et al., J. Med. Chem., 34: 457-461 (199
1)）。これら著作の記載は、引用によって本明細書に含まれるものとする。
【００９５】 本発明の化合物の医薬的に許容される塩には、例えば無毒性の無機酸または有
機酸から形成されるような、本発明の化合物の従来の無毒性塩などがある。例え
ばそのような従来の無毒性塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、
リン酸、硝酸などの無機酸から誘導されるもの；ならびに酢酸、プロピオン酸、
コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、
アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、
グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香
酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタン二スルホン酸、
シュウ酸、イセチオン酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸から得られる塩などが
ある。
機酸から形成されるような、本発明の化合物の従来の無毒性塩などがある。例え
ばそのような従来の無毒性塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、
リン酸、硝酸などの無機酸から誘導されるもの；ならびに酢酸、プロピオン酸、
コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、
アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、
グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香
酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタン二スルホン酸、
シュウ酸、イセチオン酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸から得られる塩などが
ある。
【００９６】 ＰＳＡ開裂部位を有するオリゴペプチドおよび細胞傷害性薬剤を有する本発明
の結合体は同様に、医薬化学の分野で公知の方法によって合成することができる
。例えば、細胞傷害性薬剤の遊離アミノ酸部分は、カルボキシル末端でオリゴペ
プチドに共有結合的に付着して、アミド結合を形成することができる。同様に、
オリゴペプチドのアミン部分と細胞傷害性薬剤のカルボキシル部分の共有結合的
カップリングによってアミド結合を形成することができる。それに関して、ヘキ
サフルオロリン酸２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，３，３−
テトラメチルウロニウム（ＨＢＴＵとして知られる）および１−ヒドロキシベン
ゾトリアゾール水和物（ＨＯＢＴとして知られる）、ジシクロヘキシル−カルボ
ジイミド（ＤＣＣ）、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−カル
ボジイミド（ＥＤＣ）、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）、ヘキサフル
オロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ
）ホスホニウム（ＢＯＰ）などの試薬を、併用でまたは単独で使用することがで
きる。
の結合体は同様に、医薬化学の分野で公知の方法によって合成することができる
。例えば、細胞傷害性薬剤の遊離アミノ酸部分は、カルボキシル末端でオリゴペ
プチドに共有結合的に付着して、アミド結合を形成することができる。同様に、
オリゴペプチドのアミン部分と細胞傷害性薬剤のカルボキシル部分の共有結合的
カップリングによってアミド結合を形成することができる。それに関して、ヘキ
サフルオロリン酸２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，３，３−
テトラメチルウロニウム（ＨＢＴＵとして知られる）および１−ヒドロキシベン
ゾトリアゾール水和物（ＨＯＢＴとして知られる）、ジシクロヘキシル−カルボ
ジイミド（ＤＣＣ）、Ｎ−エチル−Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−カル
ボジイミド（ＥＤＣ）、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）、ヘキサフル
オロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ
）ホスホニウム（ＢＯＰ）などの試薬を、併用でまたは単独で使用することがで
きる。
【００９７】 さらに本発明の結合体は、ＰＳＡ開裂部位と細胞傷害性薬剤との間の非ペプチ
ド結合によって形成することができる。例えば、細胞傷害性薬剤を、その細胞傷
害性薬剤の水酸基部分を介してオリゴペプチドのカルボキシル末端に共有結合的
に付着させることで、エステル連結を形成することができる。それに関して、Ｈ
ＢＴＵおよびＨＯＢＴの併用、ＢＯＰおよびイミダゾールの併用、ＤＣＣおよび
ＤＭＡＰの併用などの試薬を利用することができる。そのカルボン酸は、ニトロ
フェニルエステルなどを形成することで活性化し、ＤＢＵ（１，８−ジアザビシ
クロ［５，４，０］−７−ウンデセン）の存在下に反応させることができる。
ド結合によって形成することができる。例えば、細胞傷害性薬剤を、その細胞傷
害性薬剤の水酸基部分を介してオリゴペプチドのカルボキシル末端に共有結合的
に付着させることで、エステル連結を形成することができる。それに関して、Ｈ
ＢＴＵおよびＨＯＢＴの併用、ＢＯＰおよびイミダゾールの併用、ＤＣＣおよび
ＤＭＡＰの併用などの試薬を利用することができる。そのカルボン酸は、ニトロ
フェニルエステルなどを形成することで活性化し、ＤＢＵ（１，８−ジアザビシ
クロ［５，４，０］−７−ウンデセン）の存在下に反応させることができる。
【００９８】 当業者であれば、本発明の化合物の合成において、出発化合物および中間体に
おける各種の反応性官能基を保護しながら、分子の他の部分に対して所望の反応
を行う必要が生じる場合があることは明らかである。所望の反応が終了した後、
または所望の時間後に、そのような保護基は加水分解手段または水素化手段など
によって除去されるのが普通である。そのような保護および脱保護の段階は、有
機化学において従来から行われている技術である。当業者には、本発明の化合物
の製造において有用であると考えられる保護基について記載のある文献がある（ Protective Groups in Organic Chemistry , McOmie, ed., Plenum Press, NY, N
Y(1973)およびProtective Groups in Organic Synthesis, Greene, ed., John W
iley & Sons, NY, NY(1981)）。
おける各種の反応性官能基を保護しながら、分子の他の部分に対して所望の反応
を行う必要が生じる場合があることは明らかである。所望の反応が終了した後、
または所望の時間後に、そのような保護基は加水分解手段または水素化手段など
によって除去されるのが普通である。そのような保護および脱保護の段階は、有
機化学において従来から行われている技術である。当業者には、本発明の化合物
の製造において有用であると考えられる保護基について記載のある文献がある（ Protective Groups in Organic Chemistry , McOmie, ed., Plenum Press, NY, N
Y(1973)およびProtective Groups in Organic Synthesis, Greene, ed., John W
iley & Sons, NY, NY(1981)）。
【００９９】 例としてのみであるが、有用なアミノ保護基には、例えばホルミル基、アセチ
ル基、ジクロロアセチル基、プロピオニル基、ヘキサノイル基、３，３−ジエチ
ルヘキサノイル基、γ−クロロブチリル基などのＣ１〜Ｃ１０アルカノイル基；
ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、アリルオキシ
カルボニル基、４−ニトロベンジルオキシカルボニル基、フルオレニルメチルオ
キシカルボニル基およびシンナモイルオキシカルボニル基などのＣ１〜Ｃ１０ア
ルコキシカルボニル基およびＣ５〜Ｃ１５アリールオキシカルボニル基；２，２
，２−トリクロロエトキシカルボニル基などのハロ−（Ｃ１〜Ｃ１０）−アルコ
キシカルボニル基；ならびにベンジル基、フェネチル基、アリル基、トリチル基
などのＣ１〜Ｃ１５アリールアルキル基およびアルケニル基などがあり得る。他
の一般に使用されるアミノ保護基には、アセト酢酸メチルまたはアセト酢酸エチ
ルなどのβ−ケトエステル類を用いて得られたエナミンの形のものがある。
ル基、ジクロロアセチル基、プロピオニル基、ヘキサノイル基、３，３−ジエチ
ルヘキサノイル基、γ−クロロブチリル基などのＣ１〜Ｃ１０アルカノイル基；
ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、アリルオキシ
カルボニル基、４−ニトロベンジルオキシカルボニル基、フルオレニルメチルオ
キシカルボニル基およびシンナモイルオキシカルボニル基などのＣ１〜Ｃ１０ア
ルコキシカルボニル基およびＣ５〜Ｃ１５アリールオキシカルボニル基；２，２
，２−トリクロロエトキシカルボニル基などのハロ−（Ｃ１〜Ｃ１０）−アルコ
キシカルボニル基；ならびにベンジル基、フェネチル基、アリル基、トリチル基
などのＣ１〜Ｃ１５アリールアルキル基およびアルケニル基などがあり得る。他
の一般に使用されるアミノ保護基には、アセト酢酸メチルまたはアセト酢酸エチ
ルなどのβ−ケトエステル類を用いて得られたエナミンの形のものがある。
【０１００】 有用なカルボキシ保護基には例えば、メチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、デシル
基などのＣ１〜Ｃ１０アルキル基；２，２，２−トリクロロエチル基および２−
ヨードエチル基などのハロ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基；ベンジル基、４−メトキ
シベンジル基、４−ニトロベンジル基、トリフェニルメチル基、ジフェニルメチ
ル基などのＣ５〜Ｃ１５アリールアルキル基；アセトキシメチル基、プロピオン
オキシメチル基などのＣ１〜Ｃ１０アルカノイルオキシメチル基；ならびにフェ
ナシル基、４−ハロフェナシル基、アリル基、ジメチルアリル基、トリメチルシ
リル基などのトリ−（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）シリル基、β−ｐ−トルエンスルホ
ニルエチル、β−ｐ−ニトロフェニル−チオエチル基、２，４，６−トリメチル
ベンジル基、β−メチルチオエチル基、フタルイミドメチル基、２，４−ジニト
ロフェニルスルフェニル基、２−ニトロベンズヒドリル基および関連する基など
の基があり得る。
基などのＣ１〜Ｃ１０アルキル基；２，２，２−トリクロロエチル基および２−
ヨードエチル基などのハロ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基；ベンジル基、４−メトキ
シベンジル基、４−ニトロベンジル基、トリフェニルメチル基、ジフェニルメチ
ル基などのＣ５〜Ｃ１５アリールアルキル基；アセトキシメチル基、プロピオン
オキシメチル基などのＣ１〜Ｃ１０アルカノイルオキシメチル基；ならびにフェ
ナシル基、４−ハロフェナシル基、アリル基、ジメチルアリル基、トリメチルシ
リル基などのトリ−（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）シリル基、β−ｐ−トルエンスルホ
ニルエチル、β−ｐ−ニトロフェニル−チオエチル基、２，４，６−トリメチル
ベンジル基、β−メチルチオエチル基、フタルイミドメチル基、２，４−ジニト
ロフェニルスルフェニル基、２−ニトロベンズヒドリル基および関連する基など
の基があり得る。
【０１０１】 同様に、有用な水酸基保護基には例えば、ホルミル基、クロロアセチル基、ベ
ンジル基、ベンズヒドリル基、トリチル基、４−ニトロベンジル基、トリメチル
シリル基、フェナシル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、メトキシメチル基、テロラヒド
ロピラニル基などがあり得る。
ンジル基、ベンズヒドリル基、トリチル基、４−ニトロベンジル基、トリメチル
シリル基、フェナシル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、メトキシメチル基、テロラヒド
ロピラニル基などがあり得る。
【０１０２】 ビンブラスチンまたはデスアセチルビンブラスチンと組み合わせたオリゴペプ
チドの好ましい実施態様に関して、以下の反応図式に、本発明の結合体の合成を
示してある。
チドの好ましい実施態様に関して、以下の反応図式に、本発明の結合体の合成を
示してある。
【０１０３】 反応図式Ｉには、本発明のオリゴペプチドとビンカアルカロイド系細胞傷害性
薬剤ビンブラスチン誘導体の結合体であって、オリゴペプチドのＣ末端に連結基
を介してビンブラスチンが結合しているものの合成を示してある。さらに図式Ｉ
には、連結基単位を加えた後に、Ｃ−４位の水酸基部分が再度アセチル化された
結合体の合成を示してある。出願人らは、脱アセチルビンブラスチン結合体も有
効であり、中間体と無水酢酸とを反応させる段階と次のアミノ脱保護の段階を行
わないことで製造することができる。オリゴペプチドを有するアミノ酸の官能基
が求核性水酸基部分と競合すると考えられる場合には、オリゴペプチドの残りの
ペプチド部分を組み込む前に、ヒドロキシアルキルアミン連結基に１個のアミノ
酸を付加させることが有利であると考えられる。別法として、そのような競合官
能基がオリゴペプチドに存在しない場合には、オリゴペプチドを１反応段階で連
結基に結合させることができる。
薬剤ビンブラスチン誘導体の結合体であって、オリゴペプチドのＣ末端に連結基
を介してビンブラスチンが結合しているものの合成を示してある。さらに図式Ｉ
には、連結基単位を加えた後に、Ｃ−４位の水酸基部分が再度アセチル化された
結合体の合成を示してある。出願人らは、脱アセチルビンブラスチン結合体も有
効であり、中間体と無水酢酸とを反応させる段階と次のアミノ脱保護の段階を行
わないことで製造することができる。オリゴペプチドを有するアミノ酸の官能基
が求核性水酸基部分と競合すると考えられる場合には、オリゴペプチドの残りの
ペプチド部分を組み込む前に、ヒドロキシアルキルアミン連結基に１個のアミノ
酸を付加させることが有利であると考えられる。別法として、そのような競合官
能基がオリゴペプチドに存在しない場合には、オリゴペプチドを１反応段階で連
結基に結合させることができる。
【０１０４】
【化３６】 オリゴペプチド*は、Ｃ末端アミノ酸を持たない開裂可能なオリゴペプチドで ある。
【０１０５】
【化３７】
【０１０６】
【化３８】
【０１０７】 ビンカ薬ビンブラスチンの誘導体である本発明の新規な細胞傷害性薬剤は、下
記一般式ＩＩによって表すことができるか、あるいはそれの医薬的に許容される
塩または光学異性体である。
記一般式ＩＩによって表すことができるか、あるいはそれの医薬的に許容される
塩または光学異性体である。
【０１０８】
【化３９】 式中、 ＸＬは−ＮＨ−（ＣＲ３ ２）ｕ（ＣＲ４ ２）ｖ−Ｏ−および
【０１０９】
【化４０】 から選択され； Ｒ３およびＲ４は独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ ８ シクロアルキル、ポリヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ヒドロキシ化
アリール、ポリヒドロキシ化アリールおよびアリールから選択されるか；あるい
は １個のＲ３と１個のＲ４が一体となって、未置換であるかＯＨおよびＣ１〜Ｃ ６ アルキルから選択される１個もしくは２個の置換基によって置換された−（Ｃ
Ｈ２）ｗ−を形成しており；あるいは Ｒ３が同一炭素上の別のＲ３と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り；あるいは Ｒ４が同一炭素上の別のＲ４と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り； Ｒ５はＯＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され； Ｒ９は水素、（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）−ＣＯまたは塩素置換（Ｃ１〜Ｃ３アル
キル）−ＣＯであり； ｒは１、２または３であり、 ｕおよびｖは独立に、０、１、２または３から選択され； ｗは２、３または４であり； ｘは３、４または５である。
アリール、ポリヒドロキシ化アリールおよびアリールから選択されるか；あるい
は １個のＲ３と１個のＲ４が一体となって、未置換であるかＯＨおよびＣ１〜Ｃ ６ アルキルから選択される１個もしくは２個の置換基によって置換された−（Ｃ
Ｈ２）ｗ−を形成しており；あるいは Ｒ３が同一炭素上の別のＲ３と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り；あるいは Ｒ４が同一炭素上の別のＲ４と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り； Ｒ５はＯＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され； Ｒ９は水素、（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）−ＣＯまたは塩素置換（Ｃ１〜Ｃ３アル
キル）−ＣＯであり； ｒは１、２または３であり、 ｕおよびｖは独立に、０、１、２または３から選択され； ｗは２、３または４であり； ｘは３、４または５である。
【０１１０】 好ましくはｕは１であり、ｖは１である。
【０１１１】 好ましくは少なくとも１個のＲ３が、フェニル、シクロヘキシルおよびシクロ
ペンチルから選択される。
ペンチルから選択される。
【０１１２】 好ましくは少なくとも１個のＲ４が、フェニル、シクロヘキシル、シクロペン
チルおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される。
チルおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される。
【０１１３】 以下の化合物あるいはその化合物の医薬的に許容される塩または光学異性体は
、本発明のビンカ薬ビンブラスチンの誘導体の具体例である。
、本発明のビンカ薬ビンブラスチンの誘導体の具体例である。
【０１１４】
【化４１】
【０１１５】
【化４２】
【０１１６】
【化４３】
【０１１７】 本発明の結合体および新規な細胞傷害性薬剤の医薬的に許容される塩には、例
えば無毒性の無機酸または有機酸から形成されるような、本発明の化合物（発明
化合物とも称する）の従来の無毒性塩などがある。例えばそのような従来の無毒
性塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機
酸から誘導されるもの；ならびに酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸
、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パルモ
（palmoic）酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミ ン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマ
ル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタン二スルホン酸、シュウ酸
、イセチオン酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸から得られる塩などがある。
えば無毒性の無機酸または有機酸から形成されるような、本発明の化合物（発明
化合物とも称する）の従来の無毒性塩などがある。例えばそのような従来の無毒
性塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機
酸から誘導されるもの；ならびに酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸
、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パルモ
（palmoic）酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミ ン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマ
ル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタン二スルホン酸、シュウ酸
、イセチオン酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸から得られる塩などがある。
【０１１８】 本発明の化合物の医薬的に許容される塩は、従来の化学的方法によって、塩基
性部分を有する本発明の化合物から合成することができる。通常その塩は、イオ
ン交換クロマトグラフィーによって、あるいは好適な溶媒または各種混合溶媒中
で化学量論量または過剰量の所望の塩形成性無機もしくは有機酸と遊離塩基とを
反応させることで製造される。
性部分を有する本発明の化合物から合成することができる。通常その塩は、イオ
ン交換クロマトグラフィーによって、あるいは好適な溶媒または各種混合溶媒中
で化学量論量または過剰量の所望の塩形成性無機もしくは有機酸と遊離塩基とを
反応させることで製造される。
【０１１９】 本発明のオリゴペプチド−細胞傷害性薬剤結合体は、本発明の結合体およびそ
れに対する医薬的に許容される担体、賦形剤または希釈剤を含む医薬組成物の形
で患者に投与される。
れに対する医薬的に許容される担体、賦形剤または希釈剤を含む医薬組成物の形
で患者に投与される。
【０１２０】 本明細書で使用される「医薬的に許容される」という用語は、ヒト、ウマ、ブ
タ、ウシ、ネズミ、イヌ、ネコその他の哺乳動物などの温血動物ならびにトリそ
の他の温血動物の治療または診断で有用な薬剤を指す。好ましい投与形態は非経
口的なものであり、特には静脈、筋肉、皮下、腹腔内またはリンパの経路による
ものである。そのような製剤は、当業者には公知の担体、希釈剤または賦形剤を
用いて調製することができる（それに関しては、例えばRemington′s Pharmaceu tical Sciences , 16th ed., 1980, Mack Publishing Company, ed.by Osol et a
l.参照）。そのような組成物は、ヒト血清アルブミン等の血清蛋白などの蛋白、
リン酸化合物などの緩衝剤または緩衝物質、他の塩、あるいは電解質などを含む
ことができる。好適な希釈剤には例えば、無菌水、等張生理食塩水、希ブドウ糖
水溶液、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどの多
価アルコールまたはそのようなアルコールの混合物などがあり得る。組成物は、
フェネチルアルコール、メチルパラベンおよびプロピルパラベン、チメロサール
などの保存剤を含むことができる。所望に応じて、組成物には、メタ重亜硫酸ナ
トリウムまたは重亜硫酸ナトリウムなどの酸化防止剤を約０．０５〜約０．２０
重量％で含有させることができる。
タ、ウシ、ネズミ、イヌ、ネコその他の哺乳動物などの温血動物ならびにトリそ
の他の温血動物の治療または診断で有用な薬剤を指す。好ましい投与形態は非経
口的なものであり、特には静脈、筋肉、皮下、腹腔内またはリンパの経路による
ものである。そのような製剤は、当業者には公知の担体、希釈剤または賦形剤を
用いて調製することができる（それに関しては、例えばRemington′s Pharmaceu tical Sciences , 16th ed., 1980, Mack Publishing Company, ed.by Osol et a
l.参照）。そのような組成物は、ヒト血清アルブミン等の血清蛋白などの蛋白、
リン酸化合物などの緩衝剤または緩衝物質、他の塩、あるいは電解質などを含む
ことができる。好適な希釈剤には例えば、無菌水、等張生理食塩水、希ブドウ糖
水溶液、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどの多
価アルコールまたはそのようなアルコールの混合物などがあり得る。組成物は、
フェネチルアルコール、メチルパラベンおよびプロピルパラベン、チメロサール
などの保存剤を含むことができる。所望に応じて、組成物には、メタ重亜硫酸ナ
トリウムまたは重亜硫酸ナトリウムなどの酸化防止剤を約０．０５〜約０．２０
重量％で含有させることができる。
【０１２１】 本明細書で使用する場合、「組成物」という用語は、特定の量で指定の成分を
含む製品、ならびに指定量での特定成分の組み合わせによって直接または間接に
得られる製品を含むものである。
含む製品、ならびに指定量での特定成分の組み合わせによって直接または間接に
得られる製品を含むものである。
【０１２２】 静脈投与用には、組成物の調製は好ましくは、患者に投与される量が結合体約
０．０１〜約１ｇとなるように行う。好ましくは、投与量は結合体約０．２ｇ〜
約１ｇの範囲となるようにする。本発明の結合体は、治療対象の疾患の状態また
は変えるべき生理効果、結合体の投与方法、患者の年齢、体重および状態、なら
びに担当医師が決定する他の要素などの要素に応じて広い用量範囲で有効である
。そこで、ある患者に投与される量は、個々の患者ごとに決定されなければなら
ない。
０．０１〜約１ｇとなるように行う。好ましくは、投与量は結合体約０．２ｇ〜
約１ｇの範囲となるようにする。本発明の結合体は、治療対象の疾患の状態また
は変えるべき生理効果、結合体の投与方法、患者の年齢、体重および状態、なら
びに担当医師が決定する他の要素などの要素に応じて広い用量範囲で有効である
。そこで、ある患者に投与される量は、個々の患者ごとに決定されなければなら
ない。
【０１２３】 式ＩＩの新規細胞傷害性薬剤を臨床的に使用する際に臨床医は、ロイロクリス
チン、ビンブラスチンおよびビンデシンの臨床的使用の場合同様に、それらの薬
剤を最初に、同じ媒体中で同じ経路によって、同種の腫瘍に対して投与すると考
えられる。当然のことながら、用量レベルにおける差は、式ＩＩの細胞傷害性薬
剤と特定の種類の腫瘍に対する公知のビンカアルカロイド系薬剤との間の相対的
活性に基づいたものになると考えられる。式ＩＩの細胞傷害性薬剤が有用である
と考えられる具体的な癌には、血液腫瘍（慢性筋原性（myologenis）白血病（Ｃ
ＭＬ）および急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ））、前立腺癌および卵巣癌など
があるが、これらに限定されるものではない。
チン、ビンブラスチンおよびビンデシンの臨床的使用の場合同様に、それらの薬
剤を最初に、同じ媒体中で同じ経路によって、同種の腫瘍に対して投与すると考
えられる。当然のことながら、用量レベルにおける差は、式ＩＩの細胞傷害性薬
剤と特定の種類の腫瘍に対する公知のビンカアルカロイド系薬剤との間の相対的
活性に基づいたものになると考えられる。式ＩＩの細胞傷害性薬剤が有用である
と考えられる具体的な癌には、血液腫瘍（慢性筋原性（myologenis）白血病（Ｃ
ＭＬ）および急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ））、前立腺癌および卵巣癌など
があるが、これらに限定されるものではない。
【０１２４】 式ＩＩの新規細胞傷害性薬剤は、哺乳動物、好ましくはヒトに対して、標準的
な医薬上の実務に従って、単独で、あるいは好ましくは、医薬組成物中で医薬的
に許容される担体もしくは希釈剤、適宜にミョウバンのような公知の補助剤と組
み合わせて投与することができる。その化合物は、経口投与あるいは静脈投与、
筋肉投与、腹腔内投与、皮下投与、直腸投与および局所投与などの非経口投与で
投与することができる。
な医薬上の実務に従って、単独で、あるいは好ましくは、医薬組成物中で医薬的
に許容される担体もしくは希釈剤、適宜にミョウバンのような公知の補助剤と組
み合わせて投与することができる。その化合物は、経口投与あるいは静脈投与、
筋肉投与、腹腔内投与、皮下投与、直腸投与および局所投与などの非経口投与で
投与することができる。
【０１２５】 本発明による細胞傷害性薬剤の経口使用の場合、選択化合物を例えば、錠剤も
しくはカプセルの形で、あるいは水溶液または懸濁液の形で投与することができ
る。経口用のカプセルの場合、通常使用される担体には、乳糖およびコーンスタ
ーチなどがあり、ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤が一般に添加される。
カプセルの形での経口投与の場合、有用な希釈剤には、乳糖および乾燥コーンス
ターチなどがある。経口投与用に水系懸濁液が必要な場合、有効成分を乳化剤お
よび懸濁剤と組み合わせる。所望に応じて、ある種の甘味剤および／または香味
剤を加えることができる。筋肉投与、腹腔内投与、皮下投与および静脈投与の場
合、有効成分の無菌溶液が調製されるのが普通であり、溶液のｐＨは好適に調節
・緩衝しなければならない。静脈投与の場合、溶質の総濃度を制御して、調製液
を等張性としなければならない。
しくはカプセルの形で、あるいは水溶液または懸濁液の形で投与することができ
る。経口用のカプセルの場合、通常使用される担体には、乳糖およびコーンスタ
ーチなどがあり、ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤が一般に添加される。
カプセルの形での経口投与の場合、有用な希釈剤には、乳糖および乾燥コーンス
ターチなどがある。経口投与用に水系懸濁液が必要な場合、有効成分を乳化剤お
よび懸濁剤と組み合わせる。所望に応じて、ある種の甘味剤および／または香味
剤を加えることができる。筋肉投与、腹腔内投与、皮下投与および静脈投与の場
合、有効成分の無菌溶液が調製されるのが普通であり、溶液のｐＨは好適に調節
・緩衝しなければならない。静脈投与の場合、溶質の総濃度を制御して、調製液
を等張性としなければならない。
【０１２６】 式ＩＩの細胞傷害性薬剤は、薬剤の活性および毒性の両方に応じて、１週間ま
たは２週間に１回もしくは２回、哺乳動物の体重１ｋｇ当たり０．０１〜１ｍｇ
、好ましくは０．１〜１ｍｇの割合で投与することができる。治療用量を得る別
の方法は体表面積に基づいたものであり、７日または１４日ごとに、哺乳動物の
体表面積１ｍ２当たり０．１〜１０ｍｇの用量範囲とする。
たは２週間に１回もしくは２回、哺乳動物の体重１ｋｇ当たり０．０１〜１ｍｇ
、好ましくは０．１〜１ｍｇの割合で投与することができる。治療用量を得る別
の方法は体表面積に基づいたものであり、７日または１４日ごとに、哺乳動物の
体表面積１ｍ２当たり０．１〜１０ｍｇの用量範囲とする。
【０１２７】 本発明の細胞傷害性薬剤は、治療対象となる状態に対して特に有用であること
から選択される他の公知の治療薬と併用することもできる。例えば本発明の化合
物は、公知の抗癌剤および細胞傷害性薬剤と組み合わせて有用であると考えられ
る。
から選択される他の公知の治療薬と併用することもできる。例えば本発明の化合
物は、公知の抗癌剤および細胞傷害性薬剤と組み合わせて有用であると考えられ
る。
【０１２８】 以下の実施例に具体的な試薬および反応条件が説明してあるが、本発明の精神
および範囲に含まれると考えられる修正が可能であることは、当業者には明らか
である。従って、以下の製造および実施例は本発明をさらに詳細に説明するため
のものであって、本発明を限定するものではない。
および範囲に含まれると考えられる修正が可能であることは、当業者には明らか
である。従って、以下の製造および実施例は本発明をさらに詳細に説明するため
のものであって、本発明を限定するものではない。
【０１２９】 実施例 実施例１ ４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−（１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−２−ヒ
ドロキシ−３−シクロヘキシルイソプロピルアミド酢酸塩（１−３） 段階Ａ：４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−ヒドラジド（１−１） 硫酸ビンブラスチン（Sigma V-1377）６．０ｇ（６．６ｍｍｏｌ）のサンプル
を、窒素下で１：１（容量基準）純粋エタノール／無水ヒドラジン１００ｍＬに
溶かし、溶液を６０〜６５℃の油浴で２３時間加熱した。冷却後、溶液の溶媒留
去を行って濃厚ペーストを得て、それをＣＨ２Ｃｌ２３５０ｍＬと２．５％Ｎａ
ＨＣＯ３水溶液２００ｍＬとの間で分配した。水層をＣＨ２Ｃｌ２１００ｍＬず
つで２回抽出し、３つの有機層をそれぞれＨ２Ｏ各１００ｍＬ（２回）および飽
和ＮａＣｌ（１回）で洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、
溶媒を減圧下に除去して、６時間の真空乾燥後に、標題化合物を白色結晶固体（
１−１）として得た。
ドロキシ−３−シクロヘキシルイソプロピルアミド酢酸塩（１−３） 段階Ａ：４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−ヒドラジド（１−１） 硫酸ビンブラスチン（Sigma V-1377）６．０ｇ（６．６ｍｍｏｌ）のサンプル
を、窒素下で１：１（容量基準）純粋エタノール／無水ヒドラジン１００ｍＬに
溶かし、溶液を６０〜６５℃の油浴で２３時間加熱した。冷却後、溶液の溶媒留
去を行って濃厚ペーストを得て、それをＣＨ２Ｃｌ２３５０ｍＬと２．５％Ｎａ
ＨＣＯ３水溶液２００ｍＬとの間で分配した。水層をＣＨ２Ｃｌ２１００ｍＬず
つで２回抽出し、３つの有機層をそれぞれＨ２Ｏ各１００ｍＬ（２回）および飽
和ＮａＣｌ（１回）で洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、
溶媒を減圧下に除去して、６時間の真空乾燥後に、標題化合物を白色結晶固体（
１−１）として得た。
【０１３０】 段階Ｂ：（１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−２−ヒドロキシ−３−シクロヘキシルイソ プロピルアミン（ＨＣＡＰ）（１−２） （１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−ノルエフェドリン２．００ｇの酢酸５０ｍＬ／水１
０ｍＬ溶液をＩｒブラック触媒５００ｍｇと、パールの装置で６２ｐｓｉにて水
素化した。２４時間後、追加の触媒を加え、反応をさらに２４時間続けた。反応
液をセライト層で濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、黄褐色泡状物（１−２）を
得た。
０ｍＬ溶液をＩｒブラック触媒５００ｍｇと、パールの装置で６２ｐｓｉにて水
素化した。２４時間後、追加の触媒を加え、反応をさらに２４時間続けた。反応
液をセライト層で濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、黄褐色泡状物（１−２）を
得た。
【０１３１】 ＦＡＢＭＳ：１５８。
【０１３２】 段階Ｃ：４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−（１Ｓ，２Ｒ）−（＋） −２−ヒドロキシ−３−シクロヘキシルイソプロピルアミド（ＨＣＡＰ−（ｄＡ ｃ）ビンブラスチン（１−３）の製造 ４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−ヒドラジド０．９２２ｇ（１．２
ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液をアルゴン下に冷却して−１５℃とし、４
Ｍ ＨＣｌのジオキサン溶液を用いてｐＨ＜１．５（濡れた０〜２．５の範囲の 試験紙）の酸性とし、次に亜硝酸イソアミル０．２１ｍＬ（１．３当量）を加え
、１０〜１５℃で１時間撹拌することで、in situでアジドに変換した。ＤＩＥ Ａを加えることでｐＨを７とし、段階ＢからのＨＣＡＰ（１−２）０．３７ｇ（
２．４ｍｍｏｌ）のスラリーを加え、反応液を０℃で１０時間撹拌したところ、
その時点で分析ＨＰＬＣ（Ａ＝０．１％ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ；Ｂ＝０．１％ＴＦＡ／
ＣＨ３ＣＮ）によるモニタリングでカップリングは完了していた。反応液を減圧
下に少量まで濃縮し、溶離液として９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配
を用いた０．１％トリフルオロ酢酸／アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、１
５μＭ、１００Ａ、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる 精製を行った。均一分画を回収し、減圧下に濃縮し、凍結乾燥して、標題化合物
をＴＦＡ塩として得た（１−３）。
ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液をアルゴン下に冷却して−１５℃とし、４
Ｍ ＨＣｌのジオキサン溶液を用いてｐＨ＜１．５（濡れた０〜２．５の範囲の 試験紙）の酸性とし、次に亜硝酸イソアミル０．２１ｍＬ（１．３当量）を加え
、１０〜１５℃で１時間撹拌することで、in situでアジドに変換した。ＤＩＥ Ａを加えることでｐＨを７とし、段階ＢからのＨＣＡＰ（１−２）０．３７ｇ（
２．４ｍｍｏｌ）のスラリーを加え、反応液を０℃で１０時間撹拌したところ、
その時点で分析ＨＰＬＣ（Ａ＝０．１％ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ；Ｂ＝０．１％ＴＦＡ／
ＣＨ３ＣＮ）によるモニタリングでカップリングは完了していた。反応液を減圧
下に少量まで濃縮し、溶離液として９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配
を用いた０．１％トリフルオロ酢酸／アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、１
５μＭ、１００Ａ、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる 精製を行った。均一分画を回収し、減圧下に濃縮し、凍結乾燥して、標題化合物
をＴＦＡ塩として得た（１−３）。
【０１３３】 ＦＡＢＭＳ：８９３； ＨＰＬＣ：波長２１４ｎｍで純度９９％、保持時間＝１８．４２分（Vydac C1
8, ３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ −Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
8, ３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ −Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
【０１３４】 第３表には、実施例１に記載の化合物ならびに実施例１に記載の手順によって
製造したが、段階Ｃで適切なアミンを用いた他のビンカ薬誘導体を示してある。
別段の断りがない限り、結合体のトリフルオロ酢酸塩を製造し、試験を行った。
製造したが、段階Ｃで適切なアミンを用いた他のビンカ薬誘導体を示してある。
別段の断りがない限り、結合体のトリフルオロ酢酸塩を製造し、試験を行った。
【０１３５】
【表４】 上記表において、（ｄＡｃ）−ＶＩＮは下記の構造である。
【０１３６】
【化４４】 上記式中、化合物の残りの部分への結合は、ヒドロキシアルキルアミンの窒素
を介してである。
を介してである。
【０１３７】 実施例２ ４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−（Ｎ−アセチル−４−トランス−
Ｌ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−ＨＣＡＰ）アミド酢酸
塩（２−７）の製造 段階Ａ：Ｎ−アセチル−４−トランス−Ｌ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ −Ｇｌｎ−ＯＨ（２−１）（配列番号８７） Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｗａｎｇ樹脂０．５ｍｍｏｌ（０．８０ｇ）を
原料とし、ＡＢＩモデル４３０Ａペプチド合成装置で保護ペプチドを合成した。
そのプロトコールでは、保護アミノ酸Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍ
ｏｃ−Ｃｈｇ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−４−トランス−Ｈｙｐ（ｔＢｕ）−ＯＨおよび
酢酸をそれぞれ４倍過剰（２．０ｍｍｏｌ）使用した（２回のカップリング）。
各カップリングサイクル時に、２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液を用いてＦｍｏｃ
保護を外した。カップリングは、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン中でのＤＣＣお
よびＨＯＢｔ活性化を用いて行った。合成完了後、ペプチド樹脂を乾燥させた。
ペプチド樹脂１．３ｇを、アルゴン下室温で２時間にわたって９５％ＴＦＡ：２
．５％Ｈ２Ｏ：２．５％トリイソプロピルシラン（２０ｍＬ）で処理した。ＴＦ
Ａの留去後、残留物をエーテルで洗浄し、濾過し、乾燥させて粗ペプチドを得た
。それについて、溶離液として１００％から７０％Ａへの６０分間の直線勾配を
用いた０．１％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、Ｄｅ
ｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を行った。９９％以 上（ＨＰＬＣ）の純度を有する生成物を含む分画を回収して、標題化合物を得た
。
Ｌ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−ＨＣＡＰ）アミド酢酸
塩（２−７）の製造 段階Ａ：Ｎ−アセチル−４−トランス−Ｌ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ −Ｇｌｎ−ＯＨ（２−１）（配列番号８７） Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｗａｎｇ樹脂０．５ｍｍｏｌ（０．８０ｇ）を
原料とし、ＡＢＩモデル４３０Ａペプチド合成装置で保護ペプチドを合成した。
そのプロトコールでは、保護アミノ酸Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍ
ｏｃ−Ｃｈｇ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−４−トランス−Ｈｙｐ（ｔＢｕ）−ＯＨおよび
酢酸をそれぞれ４倍過剰（２．０ｍｍｏｌ）使用した（２回のカップリング）。
各カップリングサイクル時に、２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液を用いてＦｍｏｃ
保護を外した。カップリングは、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン中でのＤＣＣお
よびＨＯＢｔ活性化を用いて行った。合成完了後、ペプチド樹脂を乾燥させた。
ペプチド樹脂１．３ｇを、アルゴン下室温で２時間にわたって９５％ＴＦＡ：２
．５％Ｈ２Ｏ：２．５％トリイソプロピルシラン（２０ｍＬ）で処理した。ＴＦ
Ａの留去後、残留物をエーテルで洗浄し、濾過し、乾燥させて粗ペプチドを得た
。それについて、溶離液として１００％から７０％Ａへの６０分間の直線勾配を
用いた０．１％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、Ｄｅ
ｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を行った。９９％以 上（ＨＰＬＣ）の純度を有する生成物を含む分画を回収して、標題化合物を得た
。
【０１３８】 ＦＡＢＭＳ：６１５．３； ペプチド含有量：１．０３ｎｍｏｌ／ｍｇ； ＨＰＬＣ：波長２１４ｎｍで純度９９％、保持時間＝１０．１６分（Vydac C1
8, ３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５０％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦ Ａ−Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
8, ３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５０％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦ Ａ−Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
【０１３９】 同様にして、Ｎ−ヒドロキシアセチル−Ａｂｕ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇ
ｌｎ−Ｓｅｒ−ＯＨ（３−１）（配列番号８８）を製造した。
ｌｎ−Ｓｅｒ−ＯＨ（３−１）（配列番号８８）を製造した。
【０１４０】 段階Ｂ：Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−ノルエフェドリン（２−２） （１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−ノルエフェドリン１．５１ｇ（１０ｍｍｏｌ）の１
，４−ジオキサン（２０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）および１Ｎ ＮａＯＨ（１０ｍ Ｌ）混合物溶液を撹拌しながら氷水浴で冷却した。ジ−（ｔ−ブチル）ジカーボ
ネート（２．４ｇ、１１ｍｍｏｌ）を約２０分間かけて少量ずつ加えた。反応液
を冷却下に２時間撹拌し、次に室温でさらに１時間撹拌した。溶液を濃縮してほ
とんどのジオキサンを除去し、氷浴で冷却し、酢酸エチル（３０ｍＬ）層で覆い
、１Ｎ ＫＨＳＯ４でｐＨ２の酸性とした。水相をＥｔＯＡｃで２回抽出した。 合わせた抽出液を水、ブラインで洗浄し、濃縮し、乾燥して、所望の生成物を白
色結晶固体として得た（２−２）。
，４−ジオキサン（２０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）および１Ｎ ＮａＯＨ（１０ｍ Ｌ）混合物溶液を撹拌しながら氷水浴で冷却した。ジ−（ｔ−ブチル）ジカーボ
ネート（２．４ｇ、１１ｍｍｏｌ）を約２０分間かけて少量ずつ加えた。反応液
を冷却下に２時間撹拌し、次に室温でさらに１時間撹拌した。溶液を濃縮してほ
とんどのジオキサンを除去し、氷浴で冷却し、酢酸エチル（３０ｍＬ）層で覆い
、１Ｎ ＫＨＳＯ４でｐＨ２の酸性とした。水相をＥｔＯＡｃで２回抽出した。 合わせた抽出液を水、ブラインで洗浄し、濃縮し、乾燥して、所望の生成物を白
色結晶固体として得た（２−２）。
【０１４１】 ＦＡＢＭＳ：２５２。
【０１４２】 段階Ｃ：Ｎ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰ（２−３） Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−ノルエフェドリン（２−２）２．３８
ｇの酢酸５０ｍＬ／Ｈ２Ｏ１０ｍＬ溶液を、Ｉｒブラック触媒５００ｍｇで、２
４時間にわたりパールの装置にて６０ｐｓｉで水素化した。反応液をセライト層
濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、黄褐色泡状物（２−３）を得た。
ｇの酢酸５０ｍＬ／Ｈ２Ｏ１０ｍＬ溶液を、Ｉｒブラック触媒５００ｍｇで、２
４時間にわたりパールの装置にて６０ｐｓｉで水素化した。反応液をセライト層
濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、黄褐色泡状物（２−３）を得た。
【０１４３】 ＦＡＢＭＳ：２５８．２。
【０１４４】 段階Ｄ：Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｓｅｒ−Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰ エステル（２−４） Ｎ−Ｚ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ１．９５ｇ（６．６ｍｍｏｌ）、Ｎ−Ｂｏｃ
−ＨＣＡＰ（２−３）１．５４ｇ（６．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ１．２６ｇ（６．
６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ１４６ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）の脱水ＣＨ２Ｃｌ２ （３０ｍＬ）溶液を処理し、得られた溶液をＮ２雰囲気中、室温で１２時間撹拌
した。溶媒を減圧下に除去し、残留物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）に溶かし、溶
液を０．５Ｎ ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）およびブラインで抽 出し、脱水し、濃縮して、粗カップリング生成物（２−４）を得た。
−ＨＣＡＰ（２−３）１．５４ｇ（６．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ１．２６ｇ（６．
６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ１４６ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）の脱水ＣＨ２Ｃｌ２ （３０ｍＬ）溶液を処理し、得られた溶液をＮ２雰囲気中、室温で１２時間撹拌
した。溶媒を減圧下に除去し、残留物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）に溶かし、溶
液を０．５Ｎ ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）およびブラインで抽 出し、脱水し、濃縮して、粗カップリング生成物（２−４）を得た。
【０１４５】 同様にして、Ｎ−Ｚ−Ｐｒｏ−ＯＨとＮ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰアルコール（２−
３）とのカップリングによって、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｐｒｏ−Ｎ−
ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰエステル（３−２）を製造した。
３）とのカップリングによって、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｐｒｏ−Ｎ−
ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰエステル（３−２）を製造した。
【０１４６】 段階Ｅ：Ｈ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰエステル（２−５ ） （２−４）２．０ｇのＥｔＯＨ９０ｍＬ、水２０ｍＬおよび酢酸１０ｍＬ溶液
を、Ｐｄ（ＯＨ）２触媒２００ｍｇで、パール装置で５０ｐｓｉにて３時間水素
化した。反応液をセライト層濾過し、減圧下に濃縮して少量とし、溶離液として
９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢酸
−アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラムで の分取ＨＰＬＣによる精製を行った。９９％以上（ＨＰＬＣ）の純度を有する生
成物を含む分画を回収して、中間体（２−５）を得た。
を、Ｐｄ（ＯＨ）２触媒２００ｍｇで、パール装置で５０ｐｓｉにて３時間水素
化した。反応液をセライト層濾過し、減圧下に濃縮して少量とし、溶離液として
９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢酸
−アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラムで の分取ＨＰＬＣによる精製を行った。９９％以上（ＨＰＬＣ）の純度を有する生
成物を含む分画を回収して、中間体（２−５）を得た。
【０１４７】 ＦＡＢＭＳ：４０１．３。
【０１４８】 同様にして、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｐｒｏ−Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣ
ＡＰエステル（３−２）の水素化によって、Ｈ−Ｐｒｏ−Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣ
ＡＰエステル（３−３）を製造した。
ＡＰエステル（３−２）の水素化によって、Ｈ−Ｐｒｏ−Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣ
ＡＰエステル（３−３）を製造した。
【０１４９】 段階Ｆ：Ｎ−アセチル−４−トランス−Ｌ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ −Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−ＨＣＡＰアミン（２−６）（配列番号８２） Ｎ−アセチル−４−トランス−Ｌ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ
−ＯＨ（２−１）６１４ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、Ｈ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｎ−
ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰエステル（２−５）４００ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、ＥＤ
Ｃ２２９ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）およびＯＤＢＨＴ（３，４−ジヒドロ−３−ヒ
ドロキシ−４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン）８１ｍｇ（０．５ｍｍ
ｏｌ）のＤＭＦ（７ｍＬ）溶液をＮ２雰囲気下に０℃で１０時間撹拌した。溶媒
を減圧下に除去し、残留物をエーテルで洗浄し、乾燥させた。粗生成物を、アル
ゴン下に室温で２時間、９５％ＴＦＡ：５％Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）で処理した。Ｔ
ＦＡを留去した後、残留物について、溶離液として９５％から５０％Ａへの６０
分間の直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル水溶液溶媒
系を用いて、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を 行った。９９％以上（ＨＰＬＣ）の純度を有する生成物を含む分画を回収して、
中間体化合物（２−６）を得た。
−ＯＨ（２−１）６１４ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、Ｈ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｎ−
ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰエステル（２−５）４００ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、ＥＤ
Ｃ２２９ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）およびＯＤＢＨＴ（３，４−ジヒドロ−３−ヒ
ドロキシ−４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン）８１ｍｇ（０．５ｍｍ
ｏｌ）のＤＭＦ（７ｍＬ）溶液をＮ２雰囲気下に０℃で１０時間撹拌した。溶媒
を減圧下に除去し、残留物をエーテルで洗浄し、乾燥させた。粗生成物を、アル
ゴン下に室温で２時間、９５％ＴＦＡ：５％Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）で処理した。Ｔ
ＦＡを留去した後、残留物について、溶離液として９５％から５０％Ａへの６０
分間の直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル水溶液溶媒
系を用いて、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を 行った。９９％以上（ＨＰＬＣ）の純度を有する生成物を含む分画を回収して、
中間体化合物（２−６）を得た。
【０１５０】 ＦＡＢＭＳ：８４１．８； ペプチド含有量：８６３．３９Ｎｍｏｌ／ｍｇ； ＨＰＬＣ：波長２１４ｎｍで純度９９％、保持時間＝１３．７分（Vydac C18,
３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ− Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ− Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
【０１５１】 同様にして、Ｎ−ヒドロキシアセチル−Ａｂｕ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇ
ｌｎ−Ｓｅｒ−ＯＨ（３−１）とＨ−Ｐｒｏ−Ｎ−ｔ−Ｂｕｔ−ＨＣＡＰエステ
ル（３−３）とをカップリングさせ、次に脱保護を行って、Ｎ−ヒドロキシアセ
チル−Ａｂｕ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−ＨＣＡＰア
ミン（３−４）（配列番号８９）を製造した。
ｌｎ−Ｓｅｒ−ＯＨ（３−１）とＨ−Ｐｒｏ−Ｎ−ｔ−Ｂｕｔ−ＨＣＡＰエステ
ル（３−３）とをカップリングさせ、次に脱保護を行って、Ｎ−ヒドロキシアセ
チル−Ａｂｕ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−ＨＣＡＰア
ミン（３−４）（配列番号８９）を製造した。
【０１５２】 段階Ｇ：４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−（Ｎ−Ａｃ−４−トラン ス−Ｌ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−ＨＣＡＰ）アミド 酢酸塩（２−７） ４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−ヒドラジド０．４６１ｇ（０．６
ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液をアルゴン下に冷却して−１５℃とし、４
Ｍ ＨＣｌのジオキサン溶液を用いてｐＨ＜１．５（濡れた０〜２．５の範囲の 試験紙）の酸性とし、次に亜硝酸イソアミル０．１０５ｍＬ（１．３当量）を加
え、１０〜１５℃で１時間撹拌することで、in situでアジドに変換した。ＤＩ ＥＡを加えることでｐＨを７とし、段階Ｆからのアミン誘導体（２−６）５５５
ｍｇ（０．６６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を０℃で２４時間撹拌し、溶離液とし
て９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢
酸／アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、１５μＭ、１００Ａ、Ｄｅｌｔａ−
Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を行った。均一分画を回収し 、減圧下に濃縮し、凍結乾燥して、標題化合物をＴＦＡ塩として得た。それをＡ
Ｇ４×４樹脂（１００〜２００メッシュ、遊離塩基型、ＢＩＯ−ＲＡＤ）によっ
てＨＯＡｃ塩４２０ｍｇに変換した（２−７）。
ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液をアルゴン下に冷却して−１５℃とし、４
Ｍ ＨＣｌのジオキサン溶液を用いてｐＨ＜１．５（濡れた０〜２．５の範囲の 試験紙）の酸性とし、次に亜硝酸イソアミル０．１０５ｍＬ（１．３当量）を加
え、１０〜１５℃で１時間撹拌することで、in situでアジドに変換した。ＤＩ ＥＡを加えることでｐＨを７とし、段階Ｆからのアミン誘導体（２−６）５５５
ｍｇ（０．６６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を０℃で２４時間撹拌し、溶離液とし
て９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢
酸／アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、１５μＭ、１００Ａ、Ｄｅｌｔａ−
Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を行った。均一分画を回収し 、減圧下に濃縮し、凍結乾燥して、標題化合物をＴＦＡ塩として得た。それをＡ
Ｇ４×４樹脂（１００〜２００メッシュ、遊離塩基型、ＢＩＯ−ＲＡＤ）によっ
てＨＯＡｃ塩４２０ｍｇに変換した（２−７）。
【０１５３】 ＥＳ＋：１５７６．７； ペプチド含有量：４６１．８１Ｎｍｏｌ／ｍｇ； Ｓｅｒ３．０４；Ｈｙｐ１．０７；Ｃｈｇ１．０２；Ｇｌｕ１．００； ＨＰＬＣ：波長２１４ｎｍで純度９９％、保持時間＝１８．３１分（Vydac C1
8, ３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ −Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
8, ３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ −Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
【０１５４】 同様にして、４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−ヒドラジド（１−１
）とＯＨ−アセチル−Ａｂｕ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｐｒ
ｏ−ＨＣＡＰアミン（３−４）とをカップリングさせて、４−デス−アセチルビ
ンブラスチン−２３−（Ｎ−ヒドロキシアセチル−Ａｂｕ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃ
ｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−ＨＣＡＰ）アミド（３−５）を製造した。
）とＯＨ−アセチル−Ａｂｕ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｐｒ
ｏ−ＨＣＡＰアミン（３−４）とをカップリングさせて、４−デス−アセチルビ
ンブラスチン−２３−（Ｎ−ヒドロキシアセチル−Ａｂｕ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃ
ｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−ＨＣＡＰ）アミド（３−５）を製造した。
【０１５５】 ４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−（Ｎ−ヒドロキシ−Ａｃ−Ａｂｕ −Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−ＨＣＡＰ）アミド酢酸塩（３−５ ） ＥＳ＋：１６６１．９； ペプチド含有量：４９９．８７Ｎｍｏｌ／ｍｇ； Ｓｅｒ２．９８；Ａｂｕ１．０１；Ｃｈｇ１．０２；Ｇｌｕ１．００；Ｐｒｏ
０．９８； ＨＰＬＣ：波長２１４ｎｍで純度９９％、保持時間＝１８．８３分（Vydac C1
8, ３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ −Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
０．９８； ＨＰＬＣ：波長２１４ｎｍで純度９９％、保持時間＝１８．８３分（Vydac C1
8, ３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ −Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
【０１５６】 実施例２Ａ ４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−（Ｎ−アセチル−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ
−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−ＨＣＡＰ）アミド酢酸塩（２Ａ−７）の製
造 段階Ａ：Ｎ−アセチル−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−ＯＨ（２ Ａ−１） Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｗａｎｇ樹脂０．５ｍｍｏｌ（０．８０ｇ）を
原料とし、ＡＢＩモデル４３０Ａペプチド合成装置で保護ペプチドを合成した。
そのプロトコールでは、保護アミノ酸Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍ
ｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｈｇ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−
ＯＨおよび酢酸をそれぞれ４倍過剰（２．０ｍｍｏｌ）使用した（２回のカップ
リング）。各カップリングサイクル時に、２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液を用い
てＦｍｏｃ保護を外した。カップリングは、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン中で
のＤＣＣおよびＨＯＢｔ活性化を用いて行った。合成完了後、ペプチド樹脂を乾
燥させた。ペプチド樹脂１．３ｇを、アルゴン下室温で２時間にわたって９５％
ＴＦＡ：２．５％Ｈ２Ｏ：２．５％トリイソプロピルシラン（２０ｍＬ）で処理
した。ＴＦＡの留去後、残留物をエーテルで洗浄し、濾過し、乾燥させて粗ペプ
チドを得た。それについて、溶離液として１００％から７０％Ａへの６０分間の
直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル水溶液溶媒系を用
いて、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を行った 。９９％以上（ＨＰＬＣ）の純度を有する生成物を含む分画を回収して、標題化
合物を得た。
−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−ＨＣＡＰ）アミド酢酸塩（２Ａ−７）の製
造 段階Ａ：Ｎ−アセチル−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−ＯＨ（２ Ａ−１） Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｗａｎｇ樹脂０．５ｍｍｏｌ（０．８０ｇ）を
原料とし、ＡＢＩモデル４３０Ａペプチド合成装置で保護ペプチドを合成した。
そのプロトコールでは、保護アミノ酸Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍ
ｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｈｇ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−
ＯＨおよび酢酸をそれぞれ４倍過剰（２．０ｍｍｏｌ）使用した（２回のカップ
リング）。各カップリングサイクル時に、２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液を用い
てＦｍｏｃ保護を外した。カップリングは、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン中で
のＤＣＣおよびＨＯＢｔ活性化を用いて行った。合成完了後、ペプチド樹脂を乾
燥させた。ペプチド樹脂１．３ｇを、アルゴン下室温で２時間にわたって９５％
ＴＦＡ：２．５％Ｈ２Ｏ：２．５％トリイソプロピルシラン（２０ｍＬ）で処理
した。ＴＦＡの留去後、残留物をエーテルで洗浄し、濾過し、乾燥させて粗ペプ
チドを得た。それについて、溶離液として１００％から７０％Ａへの６０分間の
直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル水溶液溶媒系を用
いて、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を行った 。９９％以上（ＨＰＬＣ）の純度を有する生成物を含む分画を回収して、標題化
合物を得た。
【０１５７】 ＦＡＢＭＳ：５８９．５； ペプチド含有量：１．０１Ｎｍｏｌ／ｍｇ； ＨＰＬＣ：波長２１４ｎｍで純度９９％、保持時間＝１０．７分（Vydac C18,
３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５０％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ −Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５０％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ −Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
【０１５８】 段階Ｂ：Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−ノルエフェドリン（２Ａ−２ ） （１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−ノルエフェドリン１．５１ｇ（１０ｍｍｏｌ）の１
，４−ジオキサン（２０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）および１Ｎ ＮａＯＨ（１０ｍ Ｌ）混合物溶液を撹拌しながら氷水浴で冷却した。ジ−（ｔ−ブチル）ジカーボ
ネート（２．４ｇ、１１ｍｍｏｌ）を約２０分間かけて少量ずつ加えた。反応液
を冷却下に２時間撹拌し、次に室温でさらに１時間撹拌した。溶液を濃縮してほ
とんどのジオキサンを除去し、氷浴で冷却し、酢酸エチル（３０ｍＬ）層で覆い
、１Ｎ ＫＨＳＯ４でｐＨ２の酸性とした。水相をＥｔＯＡｃで２回抽出した。 合わせた抽出液を水、ブラインで洗浄し、濃縮し、乾燥して、所望の生成物を白
色結晶固体として得た。
，４−ジオキサン（２０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）および１Ｎ ＮａＯＨ（１０ｍ Ｌ）混合物溶液を撹拌しながら氷水浴で冷却した。ジ−（ｔ−ブチル）ジカーボ
ネート（２．４ｇ、１１ｍｍｏｌ）を約２０分間かけて少量ずつ加えた。反応液
を冷却下に２時間撹拌し、次に室温でさらに１時間撹拌した。溶液を濃縮してほ
とんどのジオキサンを除去し、氷浴で冷却し、酢酸エチル（３０ｍＬ）層で覆い
、１Ｎ ＫＨＳＯ４でｐＨ２の酸性とした。水相をＥｔＯＡｃで２回抽出した。 合わせた抽出液を水、ブラインで洗浄し、濃縮し、乾燥して、所望の生成物を白
色結晶固体として得た。
【０１５９】 ＦＡＢＭＳ：２５２。
【０１６０】 段階Ｃ：Ｎ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰ（２Ａ−３） Ｎ−Ｂｏｃ−（１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−ノルエフェドリン（２Ａ−２）２．３
８ｇの酢酸５０ｍＬ／Ｈ２Ｏ１０ｍＬ溶液を、Ｉｒブラック触媒５００ｍｇで、
２４時間にわたりパールの装置にて６０ｐｓｉで水素化した。反応液をセライト
層濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、黄褐色泡状物を得た。
８ｇの酢酸５０ｍＬ／Ｈ２Ｏ１０ｍＬ溶液を、Ｉｒブラック触媒５００ｍｇで、
２４時間にわたりパールの装置にて６０ｐｓｉで水素化した。反応液をセライト
層濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、黄褐色泡状物を得た。
【０１６１】 ＦＡＢＭＳ：２５８．２。
【０１６２】 段階Ｄ：Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｐｒｏ−Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰ エステル（２Ａ−４） Ｎ−Ｚ−Ｐｒｏ−ＯＨ１．６２ｇ（６．６ｍｍｏｌ）、Ｎ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰ
（２Ａ−３）１．５４ｇ（６．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ１．２６ｇ（６．６ｍｍｏ
ｌ）およびＤＭＡＰ１４６ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）の脱水ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍ
Ｌ）溶液を処理し、得られた溶液をＮ２雰囲気中、室温で１２時間撹拌した。溶
媒を減圧下に除去し、残留物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）に溶かし、溶液を０．
５Ｎ ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）およびブラインで抽出し、脱 水し、濃縮して、粗カップリング生成物を得た。
（２Ａ−３）１．５４ｇ（６．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ１．２６ｇ（６．６ｍｍｏ
ｌ）およびＤＭＡＰ１４６ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）の脱水ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍ
Ｌ）溶液を処理し、得られた溶液をＮ２雰囲気中、室温で１２時間撹拌した。溶
媒を減圧下に除去し、残留物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）に溶かし、溶液を０．
５Ｎ ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）およびブラインで抽出し、脱 水し、濃縮して、粗カップリング生成物を得た。
【０１６３】 段階Ｅ：Ｈ−Ｐｒｏ−Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰエステル（２Ａ−５） （２Ａ−４）２．０ｇのＥｔＯＨ９０ｍＬ、水２０ｍＬおよび酢酸１０ｍＬ溶
液を、Ｐｄ（ＯＨ）２触媒２００ｍｇで、パール装置で５０ｐｓｉにて３時間水
素化した。反応液をセライト層濾過し、減圧下に濃縮して少量とし、溶離液とし
て９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢
酸−アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラム での分取ＨＰＬＣによる精製を行った。９９％以上（ＨＰＬＣ）の純度を有する
生成物を含む分画を回収して、中間体（２Ａ−５）を得た。
液を、Ｐｄ（ＯＨ）２触媒２００ｍｇで、パール装置で５０ｐｓｉにて３時間水
素化した。反応液をセライト層濾過し、減圧下に濃縮して少量とし、溶離液とし
て９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢
酸−アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ Ｃ１８カラム での分取ＨＰＬＣによる精製を行った。９９％以上（ＨＰＬＣ）の純度を有する
生成物を含む分画を回収して、中間体（２Ａ−５）を得た。
【０１６４】 ＦＡＢＭＳ：３５６．３。
【０１６５】 段階Ｆ：Ｎ−アセチル−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ− ＨＣＡＰアミン（２Ａ−６） Ｎ−アセチル−４−Ｓｅｒ−Ｃｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−ＯＨ（２−１
）５８９ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、Ｈ−Ｐｒｏ−Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰエス
テル（２Ａ−５）３５６ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ２２９ｍｇ（１．２ｍ
ｍｏｌ）およびＯＤＢＨＴ（３，４−ジヒドロ−３−ヒドロキシ−４−オキソ−
１，２，３−ベンゾトリアジン）８１ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７ｍＬ
）溶液をＮ２雰囲気下に０℃で１０時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留
物をエーテルで洗浄し、乾燥させた。粗生成物を、アルゴン下に室温で２時間、
９５％ＴＦＡ：５％Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）で処理した。ＴＦＡを留去した後、残留
物について、溶離液として９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配を用いた
０．１％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、Ｄｅｌｔａ
−Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を行った。９９％以上（Ｈ ＰＬＣ）の純度を有する生成物を含む分画を回収して、標題化合物（２−６）を
得た。
）５８９ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、Ｈ−Ｐｒｏ−Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−ＨＣＡＰエス
テル（２Ａ−５）３５６ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ２２９ｍｇ（１．２ｍ
ｍｏｌ）およびＯＤＢＨＴ（３，４−ジヒドロ−３−ヒドロキシ−４−オキソ−
１，２，３−ベンゾトリアジン）８１ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７ｍＬ
）溶液をＮ２雰囲気下に０℃で１０時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留
物をエーテルで洗浄し、乾燥させた。粗生成物を、アルゴン下に室温で２時間、
９５％ＴＦＡ：５％Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）で処理した。ＴＦＡを留去した後、残留
物について、溶離液として９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配を用いた
０．１％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、Ｄｅｌｔａ
−Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を行った。９９％以上（Ｈ ＰＬＣ）の純度を有する生成物を含む分画を回収して、標題化合物（２−６）を
得た。
【０１６６】 ＦＡＢＭＳ：８２５．５； ペプチド含有量：８９３．６Ｎｍｏｌ／ｍｇ； ＨＰＬＣ：波長２１４ｎｍで純度９９％、保持時間＝１５．２分（Vydac C18,
３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ− Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ− Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
【０１６７】 段階Ｇ：４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−（Ｎ−Ａｃ−Ｓｅｒ−Ｃ ｈｇ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−ＨＣＡＰ）アミド酢酸塩（２Ａ−７） ４−デス−アセチルビンブラスチン−２３−ヒドラジド０．４６１（０．６ｍ
ｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液をアルゴン下に冷却して−１５℃とし、４Ｍ
ＨＣｌのジオキサン溶液を用いてｐＨ＜１．５（濡れた０〜２．５の範囲の試 験紙）の酸性とし、次に亜硝酸イソアミル０．１０５ｍＬ（１．３当量）を加え
、１０〜１５℃で１時間撹拌することで、in situでアジドに変換した。ＤＩＥ Ａを加えることでｐＨを７とし、段階Ｆからのアミン誘導体（２Ａ−６）５４５
ｍｇ（０．６６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を０℃で２４時間撹拌し、溶離液とし
て９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢
酸／アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、１５μＭ、１００Ａ、Ｄｅｌｔａ−
Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を行った。均一分画を回収し 、減圧下に濃縮し、凍結乾燥して、標題化合物をＴＦＡ塩として得た。それをＡ
Ｇ４×４樹脂（１００〜２００メッシュ、遊離塩基型、ＢＩＯ−ＲＡＤ）によっ
て標題化合物に変換した（２Ａ−７）。
ｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液をアルゴン下に冷却して−１５℃とし、４Ｍ
ＨＣｌのジオキサン溶液を用いてｐＨ＜１．５（濡れた０〜２．５の範囲の試 験紙）の酸性とし、次に亜硝酸イソアミル０．１０５ｍＬ（１．３当量）を加え
、１０〜１５℃で１時間撹拌することで、in situでアジドに変換した。ＤＩＥ Ａを加えることでｐＨを７とし、段階Ｆからのアミン誘導体（２Ａ−６）５４５
ｍｇ（０．６６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を０℃で２４時間撹拌し、溶離液とし
て９５％から５０％Ａへの６０分間の直線勾配を用いた０．１％トリフルオロ酢
酸／アセトニトリル水溶液溶媒系を用いて、１５μＭ、１００Ａ、Ｄｅｌｔａ−
Ｐａｋ Ｃ１８カラムでの分取ＨＰＬＣによる精製を行った。均一分画を回収し 、減圧下に濃縮し、凍結乾燥して、標題化合物をＴＦＡ塩として得た。それをＡ
Ｇ４×４樹脂（１００〜２００メッシュ、遊離塩基型、ＢＩＯ−ＲＡＤ）によっ
て標題化合物に変換した（２Ａ−７）。
【０１６８】 ＥＳ＋：１５６０．９； ペプチド含有量：５８６．８Ｎｍｏｌ／ｍｇ； Ｓｅｒ３．０４；Ｃｈｇ１．０１；Ｇｌｕ１．００；Ｐｒｏ０．９７； ＨＰＬＣ：波長２１４ｎｍで純度９９％、保持時間＝１３．４分（Vydac C18,
３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ− Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
３０分間かけて９５％Ａ／Ｂから５％Ａ／Ｂへの勾配、Ａ＝０．１％ＴＦＡ− Ｈ２Ｏ、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ−ＣＨ３ＣＮ）。
【０１６９】 第４表には、実施例２および２Ａに記載の化合物ならびに実施例２および２Ａ
に記載の手順によって製造したが、適切なアミンおよびブロック基アシル化を用
いた他のペプチド−ビンカ薬結合体を示してある。別段の断りがない限り、結合
体の酢酸塩を製造し、試験を行った。
に記載の手順によって製造したが、適切なアミンおよびブロック基アシル化を用
いた他のペプチド−ビンカ薬結合体を示してある。別段の断りがない限り、結合
体の酢酸塩を製造し、試験を行った。
【０１７０】
【表５】
【０１７１】 表中、４−トランス−Ｌ−Ｈｙｐは、トランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリ
ンであり； Ｐｈｅｏｌはフェニルアラニノールであり； Ｓａｒはサルコシンであり； ＰＩＰはピペコリン酸であり； Ａｂｕは２−アミノ酪酸であり； γ−Ａｂｕは４−アミノ酪酸であり； （ｄＡｃ）−ＶＩＮは第３表について説明した通りであり； （ＨＣＡＰ）−（ｄＡｃ）−ＶＩＮは下記のものであり：
ンであり； Ｐｈｅｏｌはフェニルアラニノールであり； Ｓａｒはサルコシンであり； ＰＩＰはピペコリン酸であり； Ａｂｕは２−アミノ酪酸であり； γ−Ａｂｕは４−アミノ酪酸であり； （ｄＡｃ）−ＶＩＮは第３表について説明した通りであり； （ＨＣＡＰ）−（ｄＡｃ）−ＶＩＮは下記のものであり：
【０１７２】
【化４５】 ｎ＞１の場合、値は平均である。
【０１７３】 実施例３ オリゴペプチド−ビンカ薬結合体の遊離ＰＳＡによる識別の評価 実施例３に記載の方法に従って製造した結合体をそれぞれ、ＰＳＡ消化緩衝液
（５０ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタンｐＨ７．４、１４０ｍＭ
ＮａＣｌ）に溶かし、その溶液をＰＳＡにモル比１００：１で加えた。別法と して、使用したＰＳＡ消化緩衝液を５０ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）−アミ
ノメタンｐＨ７．４、１４０ｍＭ ＮａＣｌとする。各種反応時間後に、トリフ ルオロ酢酸（ＴＦＡ）を最終濃度１％（容量基準）となるまで加えることで反応
を停止する。別法として、反応を１０ｍＭ ＺｎＣｌ２で停止する。反応停止し た液を、０．１％ＴＦＡ水溶液／アセトニトリル勾配を用いる逆相Ｃ１８カラム
でのＨＰＬＣによって分析した。評価結果を第４表に示してある。第４には、酵
素的に活性な遊離のＰＳＡによって、示したオリゴヌクレオチド−細胞傷害性薬
剤結合体が５０％開裂するのに要する時間量（分単位）を示してある。別段の断
りがない限り、接合体の酢酸塩について試験を行った。
（５０ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタンｐＨ７．４、１４０ｍＭ
ＮａＣｌ）に溶かし、その溶液をＰＳＡにモル比１００：１で加えた。別法と して、使用したＰＳＡ消化緩衝液を５０ｍＭトリス（ヒドロキシメチル）−アミ
ノメタンｐＨ７．４、１４０ｍＭ ＮａＣｌとする。各種反応時間後に、トリフ ルオロ酢酸（ＴＦＡ）を最終濃度１％（容量基準）となるまで加えることで反応
を停止する。別法として、反応を１０ｍＭ ＺｎＣｌ２で停止する。反応停止し た液を、０．１％ＴＦＡ水溶液／アセトニトリル勾配を用いる逆相Ｃ１８カラム
でのＨＰＬＣによって分析した。評価結果を第４表に示してある。第４には、酵
素的に活性な遊離のＰＳＡによって、示したオリゴヌクレオチド−細胞傷害性薬
剤結合体が５０％開裂するのに要する時間量（分単位）を示してある。別段の断
りがない限り、接合体の酢酸塩について試験を行った。
【０１７４】 実施例４ ビンカ薬のペプチド誘導体の細胞毒性のin vitroでのアッセイ 未修飾ビンカ薬によって殺されることがわかっている細胞系に対する、実施例
１に記載の方法に従って製造したビンカアルカロイド誘導体の細胞毒性ならびに
実施例２および２Ａに記載の方法に従って製造した開裂可能なオリゴペプチド−
ビンカ薬結合体の細胞毒性を、アラマー・ブルーアッセイで評価した。具体的に
は、９６ウェルプレート中のＬＮＣａＰ前立腺腫瘍細胞、Ｃｏｌｏ３２０ＤＭ細
胞（Ｃ３２０とも称される）、Ｔ２４膀胱癌細胞またはＴ４７Ｄ乳癌細胞の細胞
培地を、各種濃度の所定の結合体を含む培地で希釈した（最終プレートウェル容
量２００μＬ）。細胞を３７℃で３日間インキュベートし、アラマー・ブルー２
０μＬをアッセイウェルに加える。細胞をさらにインキュベートし、アラマー・
ブルーを加えてから４時間後および７時間後に、２つの波長５７０ｎｍおよび６
００ｎｍでＥＬ−３１０ ＥＬＩＳＡ読取装置でアッセイプレートを読み取った 。次に、対照（細胞傷害性薬剤または結合体なし）培地との比較で、各種濃度の
被験結合体での相対的生存率（パーセント）を計算した。そのアッセイの結果は
第３表および第５表に示してある。別段の断りがない限り、細胞傷害性薬剤のＴ
ＦＡ塩と結合体の酢酸塩について試験を行った。
１に記載の方法に従って製造したビンカアルカロイド誘導体の細胞毒性ならびに
実施例２および２Ａに記載の方法に従って製造した開裂可能なオリゴペプチド−
ビンカ薬結合体の細胞毒性を、アラマー・ブルーアッセイで評価した。具体的に
は、９６ウェルプレート中のＬＮＣａＰ前立腺腫瘍細胞、Ｃｏｌｏ３２０ＤＭ細
胞（Ｃ３２０とも称される）、Ｔ２４膀胱癌細胞またはＴ４７Ｄ乳癌細胞の細胞
培地を、各種濃度の所定の結合体を含む培地で希釈した（最終プレートウェル容
量２００μＬ）。細胞を３７℃で３日間インキュベートし、アラマー・ブルー２
０μＬをアッセイウェルに加える。細胞をさらにインキュベートし、アラマー・
ブルーを加えてから４時間後および７時間後に、２つの波長５７０ｎｍおよび６
００ｎｍでＥＬ−３１０ ＥＬＩＳＡ読取装置でアッセイプレートを読み取った 。次に、対照（細胞傷害性薬剤または結合体なし）培地との比較で、各種濃度の
被験結合体での相対的生存率（パーセント）を計算した。そのアッセイの結果は
第３表および第５表に示してある。別段の断りがない限り、細胞傷害性薬剤のＴ
ＦＡ塩と結合体の酢酸塩について試験を行った。
【０１７５】
【表６】 表中、４−トランス−Ｌ−Ｈｙｐはトランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン
であり； （ｄＡｃ）−ＶＩＮは第３表について記載した通りであり； （ＨＣＡＰ）−（ｄＡｃ）−ＶＩＮ、Ｓａｒ、Ａｂｕ、γ−ＡｂｕおよびＰＩ
Ｐは第４表について記載した通りである。
であり； （ｄＡｃ）−ＶＩＮは第３表について記載した通りであり； （ＨＣＡＰ）−（ｄＡｃ）−ＶＩＮ、Ｓａｒ、Ａｂｕ、γ−ＡｂｕおよびＰＩ
Ｐは第４表について記載した通りである。
【０１７６】 実施例５ ペプチジル−細胞傷害性薬剤結合体のin vivoでの効力 ＬＮＣａＰ．ＦＧＣ細胞またはＣ３２０細胞をトリプシン処理し、成長培地に
再懸濁し、２００×ｇで６分間遠心する。細胞を、血清を含まないα−ＭＥＭに
再懸濁し、カウントする。所望数の細胞を含む適切な容量のこの溶液を円錐形遠
心管に移し入れ、前述のように遠心し、適切な容量のａ−ＭＥＭ−マトリゲル（
Matrigel）の冷１：１混合物に再懸濁させる。この懸濁液を氷上で保管して、動
物への接種に供する。
再懸濁し、２００×ｇで６分間遠心する。細胞を、血清を含まないα−ＭＥＭに
再懸濁し、カウントする。所望数の細胞を含む適切な容量のこの溶液を円錐形遠
心管に移し入れ、前述のように遠心し、適切な容量のａ−ＭＥＭ−マトリゲル（
Matrigel）の冷１：１混合物に再懸濁させる。この懸濁液を氷上で保管して、動
物への接種に供する。
【０１７７】 ハーラン（Harlan）スプラグ・ドウリー雄ヌードマウス（１０〜１２週齢）を
麻酔を施さずに拘束し、２２Ｇ針を用いる皮下注射によって左脇腹に細胞懸濁液
０．５ｍＬを接種する。マウスには、約５×１０５個のＤｕＰＲＯ細胞または１
．５×１０７個のＬＮＣａＰ．ＦＧＣ細胞のいずれかを接種する。
麻酔を施さずに拘束し、２２Ｇ針を用いる皮下注射によって左脇腹に細胞懸濁液
０．５ｍＬを接種する。マウスには、約５×１０５個のＤｕＰＲＯ細胞または１
．５×１０７個のＬＮＣａＰ．ＦＧＣ細胞のいずれかを接種する。
【０１７８】 腫瘍細胞を接種した後、マウスを下記の２つのプロトコールのいずれかで処置
する。
する。
【０１７９】 プロトコールＡ： 細胞接種の１日後、動物に０．１〜０．５ｍＬの容量の被験結合体、ビンカ薬
または媒体対照（無菌水）を投与する。結合体およびビンカ薬の用量は、最初に
非致死最大量とするが、その後はそれより低い力価とすることができる。同じ用
量を５日間にわたって２４時間間隔で投与する。１０日後、マウスから採血を行
い、ＰＳＡの血清濃度を測定する。同様の血清ＰＳＡ濃度を、５〜１０日間隔で
測定する。５．５週間経過後、マウスを屠殺し、存在する腫瘍の重量を測定し、
血清ＰＳＡを再度測定する。アッセイの開始時および終了後に、動物の体重を測
定する。
または媒体対照（無菌水）を投与する。結合体およびビンカ薬の用量は、最初に
非致死最大量とするが、その後はそれより低い力価とすることができる。同じ用
量を５日間にわたって２４時間間隔で投与する。１０日後、マウスから採血を行
い、ＰＳＡの血清濃度を測定する。同様の血清ＰＳＡ濃度を、５〜１０日間隔で
測定する。５．５週間経過後、マウスを屠殺し、存在する腫瘍の重量を測定し、
血清ＰＳＡを再度測定する。アッセイの開始時および終了後に、動物の体重を測
定する。
【０１８０】 プロトコールＢ 細胞接種から１０日後、動物から採血を行い、ＰＳＡの血清濃度を求める。次
に、動物をそのＰＳＡ血清濃度に従って群分けする。細胞接種から１４〜１５日
後に、動物に容量０．１〜０．５ｍＬの被験結合体、ビンカ薬または媒体対照（
無菌水）を投与する。結合体およびビンカ薬の用量は、最初に非致死最大量とす
るが、その後はそれより低い力価とすることができる。同じ用量を５日間にわた
って２４時間間隔で投与する。５〜１０日間隔で、血清ＰＳＡ濃度を測定する。
５．５週間経過後、マウスを屠殺し、存在する腫瘍の重量を測定し、血清ＰＳＡ
を再度測定する。アッセイの開始時および終了後に、動物の体重を測定する。
に、動物をそのＰＳＡ血清濃度に従って群分けする。細胞接種から１４〜１５日
後に、動物に容量０．１〜０．５ｍＬの被験結合体、ビンカ薬または媒体対照（
無菌水）を投与する。結合体およびビンカ薬の用量は、最初に非致死最大量とす
るが、その後はそれより低い力価とすることができる。同じ用量を５日間にわた
って２４時間間隔で投与する。５〜１０日間隔で、血清ＰＳＡ濃度を測定する。
５．５週間経過後、マウスを屠殺し、存在する腫瘍の重量を測定し、血清ＰＳＡ
を再度測定する。アッセイの開始時および終了後に、動物の体重を測定する。
【０１８１】 実施例６ 内因性非ＰＳＡプロテアーゼ類による結合体の蛋白分解的開裂のin vitroでの
測定 段階Ａ：蛋白分解組織抽出物の取得 手順はいずれも４℃で行う。適切な動物を屠殺し、関連する組織を摘出し、液
体窒素で保存する。冷凍組織を乳鉢と乳棒を用いて粉砕し、粉砕組織をポッター
−エルベジェー（Potter-Elvejeh）ホモジナイザーに移し、２倍容量の緩衝液Ａ
（１．１５％ＫＣｌを含む５０ｍＭＴｒｉｓ、ｐＨ７．５）を加える。次に組織
について、最初は緩く合わせた乳棒で、次に堅く合わせた乳棒を用いて、２０行
程の粉砕を行う。ホモジネートを旋回バケットローター（swinging bucket roto
r）（ＨＢ４−５）で１００００×ｇで遠心し、ペレットを廃棄し、再上清を１ ０００００×ｇ（Ｔｉ７０）で遠心する。上清（サイトゾル）を保存する。
測定 段階Ａ：蛋白分解組織抽出物の取得 手順はいずれも４℃で行う。適切な動物を屠殺し、関連する組織を摘出し、液
体窒素で保存する。冷凍組織を乳鉢と乳棒を用いて粉砕し、粉砕組織をポッター
−エルベジェー（Potter-Elvejeh）ホモジナイザーに移し、２倍容量の緩衝液Ａ
（１．１５％ＫＣｌを含む５０ｍＭＴｒｉｓ、ｐＨ７．５）を加える。次に組織
について、最初は緩く合わせた乳棒で、次に堅く合わせた乳棒を用いて、２０行
程の粉砕を行う。ホモジネートを旋回バケットローター（swinging bucket roto
r）（ＨＢ４−５）で１００００×ｇで遠心し、ペレットを廃棄し、再上清を１ ０００００×ｇ（Ｔｉ７０）で遠心する。上清（サイトゾル）を保存する。
【０１８２】 緩衝液Ａを上記で用いた段階で使用したのと同じ容量として、ペレットを緩衝
液Ｂ（１．１５％ＫＣｌを含む１０ｍＭ ＥＤＴＡ、pH７．５）に再懸濁する。 懸濁液をダウンス（dounce）ホモジナイザーで均質化し、溶液を１０００００×
ｇで遠心する。上清を廃棄し、上記で使用した量の１／２量を用いて、ペレット
を緩衝液Ｃ（０．２５Ｍショ糖を含む１０ｍＭリン酸カルシウム緩衝液、ｐＨ７
．４）に再懸濁させ、ダウンスホモジナイザーで均質化する。
液Ｂ（１．１５％ＫＣｌを含む１０ｍＭ ＥＤＴＡ、pH７．５）に再懸濁する。 懸濁液をダウンス（dounce）ホモジナイザーで均質化し、溶液を１０００００×
ｇで遠心する。上清を廃棄し、上記で使用した量の１／２量を用いて、ペレット
を緩衝液Ｃ（０．２５Ｍショ糖を含む１０ｍＭリン酸カルシウム緩衝液、ｐＨ７
．４）に再懸濁させ、ダウンスホモジナイザーで均質化する。
【０１８３】 上記２種類の溶液（サイトゾルおよび膜）の蛋白含有量をブラッドフォード（
Bradford）アッセイを用いて測定する。アッセイ用小分け試料を取り、液体Ｎ２ で冷凍する。小分け試料を−７０℃で保存する。
Bradford）アッセイを用いて測定する。アッセイ用小分け試料を取り、液体Ｎ２ で冷凍する。小分け試料を−７０℃で保存する。
【０１８４】 段階Ｂ：蛋白分解的開裂アッセイ 各時点において、反応緩衝液中のペプチド−ビンカ薬結合体２０μｇおよび前
段階Ａに記載の方法に従って取得し、ブラッドフォード法によって測定を行った
組織蛋白１５０μｇを、最終容量２００μＬの溶液となるように緩衝液（５０ｍ
Ｍ ＴＲＩＳ、１４０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．２）に入れる。アッセイ反応を０
、３０、６０、１２０および１８０分間行い、０．１Ｍ ＺｎＣｌ２９μＬで反 応停止し、直ちに沸騰水に９０秒間入れる。反応生成物について、溶離液を水／
アセトニトリル（３０分間かけて５％から５０％アセトニトリルとする）とする
ＶＹＤＡＣ Ｃ１８ １５ｃｍカラムを用いるＨＰＬＣによって分析する。
段階Ａに記載の方法に従って取得し、ブラッドフォード法によって測定を行った
組織蛋白１５０μｇを、最終容量２００μＬの溶液となるように緩衝液（５０ｍ
Ｍ ＴＲＩＳ、１４０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．２）に入れる。アッセイ反応を０
、３０、６０、１２０および１８０分間行い、０．１Ｍ ＺｎＣｌ２９μＬで反 応停止し、直ちに沸騰水に９０秒間入れる。反応生成物について、溶離液を水／
アセトニトリル（３０分間かけて５％から５０％アセトニトリルとする）とする
ＶＹＤＡＣ Ｃ１８ １５ｃｍカラムを用いるＨＰＬＣによって分析する。
【配列表】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｄ 519/04 Ｃ０７Ｋ 5/09 Ｃ０７Ｋ 5/09 5/12 5/12 7/06 ＺＮＡ 7/06 ＺＮＡ Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＤ， ＧＥ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，Ｋ Ｇ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ， ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，Ｔ Ｔ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ Ｆターム(参考） 4C072 QQ07 4C084 AA02 AA17 BA01 BA08 BA16 BA17 CA30 DC50 NA13 ZA812 ZB262 4C086 AA01 AA02 CB14 MA01 MA04 NA13 ZA81 ZB26 4H045 AA10 AA30 BA13 BA14 EA28 FA34
Claims (33)
- 【請求項１】 オリゴペプチドに結合した細胞傷害性薬剤を含む前立腺癌治
療に有用な結合体であって、前記オリゴペプチドが遊離前立腺特異的抗原によっ
て選択的に蛋白分解的に開裂するアミノ酸配列を有し、結合手段が置換されてい
ても良いヒドロキシアルキルアミノ化学連結基を介してである結合体または該結
合体の医薬的に許容される塩。 - 【請求項２】 前記オリゴペプチドが、前記化学連結基の水酸基部分を有す
る結合とのエステル結合によって前記化学的連結基に結合している請求項１に記
載の結合体。 - 【請求項３】 前記細胞傷害性薬剤がビンカアルカロイド系細胞傷害性薬剤
である請求項１に記載の結合体。 - 【請求項４】 前記細胞傷害性薬剤が、 ａ）ビンブラスチン、 ｂ）４−デスアセチルビンブラスチン、 ｃ）ビンクリスチン、 ｄ）ロイロシジンおよび ｅ）ビンデシン というビンカアルカロイド系細胞傷害性薬剤から選択される請求項３に記載の結
合体。 - 【請求項５】 前記細胞傷害性薬剤がビンブラスチンおよび４−デスアセチ
ルビンブラスチンから選択される請求項４に記載の結合体。 - 【請求項６】 前記オリゴペプチドが ａ）ＡｓｎＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号１）、 ｂ）ＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２）、 ｃ）ＡｓｎＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＴｙｒ｜Ｓｅｒ（配列番号３）、 ｄ）ＡｓｎＬｙｓＡｌａＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号４）、 ｅ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号５）、 ｆ）ＬｙｓＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号６）、 ｇ）ｈＡｒｇＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号７）、 ｈ）ｈＡｒｇＣｈａＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号８）、 ｉ）ＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号９）、 ｊ）ＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号１０）、 ｋ）ＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＮｌｅ（配列番号１１）、 ｌ）ＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号１２）、 ｍ）ＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＮｌｅ（配列番号１３）、 ｎ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号１４）、 ｏ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号ｌ５）、 ｐ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号１６）、 ｑ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号ｌ７）、 ｒ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号ｌ８）、 ｓ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号１９）、 ｔ）ＨａａＸａａＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２０）、 ｕ）ＨａａＸａａＬｙｓＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２１）、 ｖ）ＨａａＸａａｈＡｒｇＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２２）、 ｗ）ＨａａＸａａｈＡｒｇＣｈａＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２３）、 ｘ）ＨａａＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２４）、 ｙ）ＨａａＸａａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２５）、 ｚ）ＨａａＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２６）、 ａａ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号１０６）、 ｂｂ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号１０７）、 ｃｃ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＡｂｕ（配列番号１０８） （上記において、Ｈａａは親水性部分で置換された環状アミノ酸であり、ｈＡｒ
ｇはホモアルギニンであり、Ｘａａはアミノ酸であり、Ｃｈａはシクロヘキシル
アラニンであり、Ａｂｕは２−アミノ酪酸であり、Ｃｈｇはシクロヘキシルグリ
シンである）から選択されるオリゴマーを有する請求項１に記載の結合体。 - 【請求項７】 前記オリゴペプチドが、 ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号４３）、 ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号４４）、 ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号４５）、 ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号４６）、 ＳｅｒＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号４７）、 ＳｅｒＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号４８）、 ＳｅｒＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号４９）、 ＳｅｒＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号５０）、 ＳｅｒＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号５１）、 ＳｅｒＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号５２）、 （Ｎ−メチル−Ｓｅｒ）ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号
５３）、 （Ｎ−メチル−Ｓｅｒ）ＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号
５４）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号５５）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号５６）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号５７）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号５８）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号５９）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号６０）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号６１）、 ４−ＨｙｐＳｅｒＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号６２）、 ４−ＨｙｐＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号６３）、 ４−ＨｙｐＡｌａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号６４）、 （３、４−ジＨｙｐ）ＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号６
５）および （３、４−ジＨｙｐ）ＳｅｒＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号６
６） （上記において、４−Ｈｙｐは４−ヒドロキシプロリンであり、３，４−ジＨｙ
ｐは３，４−ジヒドロキシプロリンであり、Ｃｈｇはシクロヘキシルグリシンで
ある）から選択されるオリゴマーを有する請求項１に記載の結合体。 - 【請求項８】 下記式Ｉの結合体または該結合体の医薬的に許容される塩。 【化１】 ［式中、オリゴペプチドは、遊離前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）によって選択的
に識別され、遊離前立腺特異的抗原の酵素活性によって蛋白分解的に開裂するこ
とができるオリゴペプチドであり； ＸＬは−ＮＨ−（ＣＲ３ ２）ｕ（ＣＲ４ ２）ｖ−Ｏ−および 【化２】 から選択され； Ｒは ａ）水素、 ｂ）−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ１ａ、 【化３】 ｆ）エトキシスクアレートおよび ｇ）コチニニル から選択され； Ｒ１およびＲ２は独立に、 ａ）水素、 ｂ）未置換または置換アリール、未置換または置換複素環、Ｃ３〜Ｃ１０シク
ロアルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、ハロゲン、Ｃ１〜
Ｃ６パーフルオロアルキル、Ｒ６Ｏ−、Ｒ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、（Ｒ６）２ＮＣ
（Ｏ）−、Ｒ６ ２Ｎ−Ｃ（ＮＲ６）−、Ｒ７Ｓ（Ｏ）２ＮＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｒ ６ Ｃ（Ｏ）−、Ｎ３、−Ｎ（Ｒ６）２またはＲ７ＯＣ（Ｏ）ＮＲ６−、 ｃ）未置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル、 ｄ）置換Ｃ１〜Ｃ６アルキルであって、その置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル上の置換
基が未置換または置換アリール、未置換または置換複素環、Ｃ３〜Ｃ１０シクロ
アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｒ６Ｏ−、Ｒ７Ｓ（
Ｏ）２ＮＨ、Ｒ６Ｃ（Ｏ）ＮＲ６−、（Ｒ６）２ＮＣ（Ｏ）−、Ｒ６ ２Ｎ−Ｃ（
ＮＲ６）−、ＣＮ、Ｒ６Ｃ（Ｏ）−、Ｎ３、−Ｎ（Ｒ６）２およびＲ７ＯＣ（Ｏ
）−ＮＲ６−から選択されるもの から選択されるか；あるいは Ｒ１とＲ２が一体となって、炭素原子のうちの１個がＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、−ＮＣ
（Ｏ）−、ＮＨおよび−Ｎ（ＣＯＲ７）−から選択される部分によって置き換わ
っていても良い−（ＣＨ２）ｓ−を形成しており； Ｒ１ａはＣ１〜Ｃ６アルキル、ヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ポリ
ヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ヒドロキシ化アリール、ポリヒドロキ
シ化アリールまたはアリールであり； Ｒ３およびＲ４は独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ ８ シクロアルキル、ポリヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ヒドロキシ化
アリール、ポリヒドロキシ化アリールおよびアリールから選択されるか；あるい
は １個のＲ３と１個のＲ４が一体となって、未置換であるかＯＨおよびＣ１〜Ｃ ６ アルキルから選択される１個もしくは２個の置換基によって置換された−（Ｃ
Ｈ２）ｗ−を形成しており；あるいは Ｒ３が同一炭素上の別のＲ３と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り；あるいは Ｒ４が同一炭素上の別のＲ４と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り； Ｒ５はＯＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され； Ｒ６は水素、アリール、置換アリール、複素環、置換複素環、Ｃ１〜Ｃ６アル
キルおよびＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルから選択され； Ｒ７はアリール、置換アリール、複素環、置換複素環、Ｃ１〜Ｃ６アルキルお
よびＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルから選択され； Ｒ９は水素、（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）−ＣＯまたは塩素置換（Ｃ１〜Ｃ３アル
キル）−ＣＯであり； ｎは１、２、３または４であり； ｐはゼロまたは１〜１００の整数であり； ｑは０または１であり、ただしｐがゼロの場合ｑは１であり； ｒは１、２または３であり、 ｓは４、５または６であり； ｔは３または４であり； ｕおよびｖは独立に、０、１、２または３から選択され； ｗは２、３または４であり； ｘは３、４または５であり； ｙは１、２または３である。］ - 【請求項９】 前記オリゴペプチドが、 ａ）ＡｓｎＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号１）、 ｂ）ＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２）、 ｃ）ＡｓｎＬｙｓＩｌｅＳｅｒＴｙｒＴｙｒ｜Ｓｅｒ（配列番号３）、 ｄ）ＡｓｎＬｙｓＡｌａＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号４）、 ｅ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号５）、 ｆ）ＬｙｓＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号６）、 ｇ）ｈＡｒｇＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号７）、 ｈ）ｈＡｒｇＣｈａＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号８）、 ｉ）ＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号９）、 ｊ）ＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号１０）、 ｋ）ＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＮｌｅ（配列番号１１）、 ｌ）ＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号１２）、 ｍ）ＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＮｌｅ（配列番号１３）、 ｎ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号１４）、 ｏ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号ｌ５）、 ｐ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＶａｌ（配列番号１６）、 ｑ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＶａ１（配列番号ｌ７）、 ｒ）ＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号ｌ８）、 ｓ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＬｅｕ（配列番号１９）、 ｔ）ＨａａＸａａＳｅｒＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２０）、 ｕ）ＨａａＸａａＬｙｓＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２１）、 ｖ）ＨａａＸａａｈＡｒｇＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２２）、 ｗ）ＨａａＸａａｈＡｒｇＣｈａＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２３）、 ｘ）ＨａａＴｙｒＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２４）、 ｙ）ＨａａＸａａＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２５）、 ｚ）ＨａａＣｈｇＧｌｎ｜Ｓｅｒ（配列番号２６）、 ａａ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＳｅｒ（配列番号１０６）、 ｂｂ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＰｒｏ（配列番号１０７）、 ｃｃ）ＳｅｒＣｈｇＧｌｎ｜ＳｅｒＡｂｕ（配列番号１０８） （上記において、Ｈａａは親水性部分で置換された環状アミノ酸であり、ｈＡｒ
ｇはホモアルギニンであり、Ｘａａはアミノ酸であり、Ｃｈａはシクロヘキシル
アラニンであり、Ａｂｕは２−アミノ酪酸であり、Ｃｈｇはシクロヘキシルグリ
シンである）から選択されるアミノ酸配列を有するオリゴマーである請求項８に
記載の結合体または該結合体の光学異性体。 - 【請求項１０】 Ｘａａがアラニン、セリンまたはイソロイシンであり、Ｈ
ａａがトランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンである請求項９に記載の結合体
または該結合体の光学異性体。 - 【請求項１１】 ＸＬが下記の群から選択される請求項８に記載の結合体ま
たは該結合体の光学異性体。 【化４】 【化５】 【化６】 - 【請求項１２】 ＸＬが下記の群から選択される請求項８に記載の結合体ま
たは該結合体の光学異性体。 【化７】 【化８】 - 【請求項１３】 下記のものから選択される請求項８に記載の結合体または
該結合体の医薬的に許容される塩もしくは光学異性体。 【表１】 - 【請求項１４】 下記のものから選択される化合物または該化合物の医薬的
に許容される塩もしくは光学異性体。 【化９】 【化１０】 【化１１】 - 【請求項１５】 医薬担体とそれに分散している治療上有効な量の請求項１
に記載の化合物を含む医薬組成物。 - 【請求項１６】 医薬担体とそれに分散している治療上有効な量の請求項８
に記載の化合物を含む医薬組成物。 - 【請求項１７】 医薬担体とそれに分散している治療上有効な量の請求項１
４に記載の化合物を含む医薬組成物。 - 【請求項１８】 前立腺癌の治療方法であって、その治療を必要とする哺乳
動物に対して、治療上有効な量の請求項１５に記載の組成物を投与する段階を有
する方法。 - 【請求項１９】 前立腺癌の治療方法であって、その治療を必要とする哺乳
動物に対して、治療上有効な量の請求項１６に記載の組成物を投与する段階を有
する方法。 - 【請求項２０】 前立腺癌の治療方法であって、その治療を必要とする哺乳
動物に対して、治療上有効な量の請求項１７に記載の組成物を投与する段階を有
する方法。 - 【請求項２１】 良性前立腺過形成の治療方法であって、その治療を必要と
する哺乳動物に対して、治療上有効な量の請求項１５に記載の組成物を投与する
段階を有する方法。 - 【請求項２２】 良性前立腺過形成の治療方法であって、その治療を必要と
する哺乳動物に対して、治療上有効な量の請求項１６に記載の組成物を投与する
段階を有する方法。 - 【請求項２３】 良性前立腺過形成の治療方法であって、その治療を必要と
する哺乳動物に対して、治療上有効な量の請求項１７に記載の組成物を投与する
段階を有する方法。 - 【請求項２４】 請求項１に記載の化合物と医薬的に許容される担体とを組
み合わせることで得られる医薬組成物。 - 【請求項２５】 請求項１に記載の化合物と医薬的に許容される担体とを組
み合わせる段階を有する医薬組成物の製造方法。 - 【請求項２６】 下記式ＩＩの化合物または該化合物の医薬的に許容される
塩もしくは光学異性体。 【化１２】 ［式中、 ＸＬは−ＮＨ−（ＣＲ３ ２）ｕ（ＣＲ４ ２）ｖ−Ｏ−および 【化１３】 から選択され； Ｒ３およびＲ４は独立に、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ ８ シクロアルキル、ポリヒドロキシ化Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、ヒドロキシ化
アリール、ポリヒドロキシ化アリールおよびアリールから選択されるか；あるい
は １個のＲ３と１個のＲ４が一体となって、未置換であるかＯＨおよびＣ１〜Ｃ ６ アルキルから選択される１個もしくは２個の置換基によって置換された−（Ｃ
Ｈ２）ｗ−を形成しており；あるいは Ｒ３が同一炭素上の別のＲ３と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り；あるいは Ｒ４が同一炭素上の別のＲ４と一体となって、−（ＣＨ２）ｘ−を形成してお
り； Ｒ５はＯＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され； Ｒ９は水素、（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）−ＣＯまたは塩素置換（Ｃ１〜Ｃ３アル
キル）−ＣＯであり； ｒは１、２または３であり、 ｕおよびｖは独立に、０、１、２または３から選択され； ｗは２、３または４であり； ｘは３、４または５である。］ - 【請求項２７】 ｕが１であり、ｖが１であり、少なくとも１個のＲ３が、
フェニル、シクロヘキシルおよびシクロペンチルから選択される請求項２６に記
載の化合物。 - 【請求項２８】 少なくとも１個のＲ４が、フェニル、シクロヘキシル、シ
クロペンチルおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される請求項２７に記載の化合
物。 - 【請求項２９】 下記のものから選択される請求項２６に記載の化合物また
は該化合物の医薬的に許容される塩。 【化１４】 【化１５】 【化１６】 - 【請求項３０】 医薬担体とそれに分散している治療上有効な量の請求項２
６に記載の化合物を含む医薬組成物。 - 【請求項３１】 医薬担体とそれに分散している治療上有効な量の請求項２
９に記載の化合物を含む医薬組成物。 - 【請求項３２】 癌の治療方法であって、その治療を必要とする哺乳動物に
対して、治療上有効な量の請求項２６に記載の組成物を投与する段階を有する方
法。 - 【請求項３３】 癌の治療方法であって、その治療を必要とする哺乳動物に
対して、治療上有効な量の請求項２９に記載の組成物を投与する段階を有する方
法。
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-
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