JP2002069059A - ピラジノン環を含む新規なオピオイドペプチド誘導体 - Google Patents
ピラジノン環を含む新規なオピオイドペプチド誘導体Info
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【課題】 優れた鎮痛作用物質の提供
【解決手段】 下記式
（式中ｎは同一または異なって１−８を表す。）で表さ
れるオピオイドペプチド誘導体またはその塩。特に５−
メチル−３，６−ビス［４−（２′，６′−ジメチルチ
ロシル）アミノブチル］−２−（１Ｈ）−ピラジノン及
びその塩。
れるオピオイドペプチド誘導体またはその塩。特に５−
メチル−３，６−ビス［４−（２′，６′−ジメチルチ
ロシル）アミノブチル］−２−（１Ｈ）−ピラジノン及
びその塩。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、オピオイドレセプ
ターを介して優れた生理活性作用を有し、特にμ−オピ
オイドレセプターに低濃度で親和性を示す新規ペプチド
誘導体及びその塩に関する。更には、少なくとも一種の
該ペプチド誘導体またはその塩を有効成分として含んで
なる医薬に関する。
ターを介して優れた生理活性作用を有し、特にμ−オピ
オイドレセプターに低濃度で親和性を示す新規ペプチド
誘導体及びその塩に関する。更には、少なくとも一種の
該ペプチド誘導体またはその塩を有効成分として含んで
なる医薬に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】ペプチ
ドは、単位構造であるアミノ酸の配列により様々な生理
活性を示すことが知られている。またペプチドを構成す
るアミノ酸を他のアミノ酸または他の基等に変換するこ
とによりペプチドミメティクスとして得られた化合物は
固有の異なる生理活性を示す。脳内に存在する生理活性
ペプチドとして、鎮痛効果等に関わっているエンケファ
リン(Enkephalin)等、オピオイドと総称されるペプチド
について数多くの研究がなされており、その過程でオピ
オイド及びオピオイド構造を模したオピオイドミメティ
クス(opioidmimetics)に関する多くの研究がなされてい
る。鎮痛効果の発現は、リガンド−レセプター間の相互
作用によることが報告されている。オピオイドレセプタ
ー作用物質としては、従来からモルヒネが広く知られて
おり、その類縁体であるオピオイド（モルヒネ様）鎮痛
剤が、癌性疼痛及び皮膚移植や水痘−帯状疱疹発症後の
激しい痛みを抑えるために臨床的に使用されている。し
かしながら、これらの呼吸中枢抑制作用などの中枢神経
抑制作用、消化管の平滑筋緊張や耽溺性、耐性などの副
作用も重篤であり、一層改善された鎮痛剤の開発が、特
に強度の痛みをもたらす癌末期、帯状疱疹における疱疹
後痛の症例等多くの分野で強く要請されている。本発明
者らは、最近、ジペプチジルクロロメチルケトンからピ
ラジノン環を形成させる反応を完成し、該ピラジノン環
を鋳型とするオピオイドミメティクスの合成に成功し、
これらオピオイドミメティクスのなかに、弱いながらμ
−オピオイドレセプターと特異的に結合する化合物を見
出し、報告した[Okada et al., Tetrahedron 55, 14391
-14406 (1999)]。
ドは、単位構造であるアミノ酸の配列により様々な生理
活性を示すことが知られている。またペプチドを構成す
るアミノ酸を他のアミノ酸または他の基等に変換するこ
とによりペプチドミメティクスとして得られた化合物は
固有の異なる生理活性を示す。脳内に存在する生理活性
ペプチドとして、鎮痛効果等に関わっているエンケファ
リン(Enkephalin)等、オピオイドと総称されるペプチド
について数多くの研究がなされており、その過程でオピ
オイド及びオピオイド構造を模したオピオイドミメティ
クス(opioidmimetics)に関する多くの研究がなされてい
る。鎮痛効果の発現は、リガンド−レセプター間の相互
作用によることが報告されている。オピオイドレセプタ
ー作用物質としては、従来からモルヒネが広く知られて
おり、その類縁体であるオピオイド（モルヒネ様）鎮痛
剤が、癌性疼痛及び皮膚移植や水痘−帯状疱疹発症後の
激しい痛みを抑えるために臨床的に使用されている。し
かしながら、これらの呼吸中枢抑制作用などの中枢神経
抑制作用、消化管の平滑筋緊張や耽溺性、耐性などの副
作用も重篤であり、一層改善された鎮痛剤の開発が、特
に強度の痛みをもたらす癌末期、帯状疱疹における疱疹
後痛の症例等多くの分野で強く要請されている。本発明
者らは、最近、ジペプチジルクロロメチルケトンからピ
ラジノン環を形成させる反応を完成し、該ピラジノン環
を鋳型とするオピオイドミメティクスの合成に成功し、
これらオピオイドミメティクスのなかに、弱いながらμ
−オピオイドレセプターと特異的に結合する化合物を見
出し、報告した[Okada et al., Tetrahedron 55, 14391
-14406 (1999)]。
【０００３】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、ピラジノ
ン環を鋳型にもち、強い鎮痛効果を示す新たなオピオイ
ドミメティクスの探索と研究を行なった結果、上記ピラ
ジノン誘導体中のチロシンに代えて２，６−ジメチルチ
ロシン（以下Ｄｍｔと略記する。）を導入することによ
りμ−オピオイドレセプターに対して高い特異的親和性
を示し、モルヒネを凌駕する強力な、またモルヒネとは
異なった様式の鎮痛効果を示すことを見出し、本発明を
完成したものである。
ン環を鋳型にもち、強い鎮痛効果を示す新たなオピオイ
ドミメティクスの探索と研究を行なった結果、上記ピラ
ジノン誘導体中のチロシンに代えて２，６−ジメチルチ
ロシン（以下Ｄｍｔと略記する。）を導入することによ
りμ−オピオイドレセプターに対して高い特異的親和性
を示し、モルヒネを凌駕する強力な、またモルヒネとは
異なった様式の鎮痛効果を示すことを見出し、本発明を
完成したものである。
【０００４】即ち、本発明は下記式
【化２】 （式中ｎは同一または異なって１−８を表す。）で表さ
れるオピオイドペプチド誘導体またはその塩に関する。
本発明は、また上記式（１）で表されるオピオイドペプ
チド誘導体またはその塩を有効成分とする医薬に関す
る。本発明は、また上記式（１）で表されるオピオイド
ペプチド誘導体またはその塩を有効成分とする鎮痛剤に
関する。本発明は、上記式（１）によって表されるオピ
オイドペプチド誘導体またはその塩を有効成分とする、
μ−オピオイドレセプターに対して高い特異的親和性を
示すμ―オピオイドレセプターアゴニスト活性化剤にも
関する。なお、上記式（１）で表されるオピオイドペプ
チド誘導体は、ピラジノン環の３，６位側鎖にアミド結
合を介して２，６−ジメチルチロシン(Ｄｍｔ)が結合し
たものであり、ＤｍｔはＬ体を意味する。
れるオピオイドペプチド誘導体またはその塩に関する。
本発明は、また上記式（１）で表されるオピオイドペプ
チド誘導体またはその塩を有効成分とする医薬に関す
る。本発明は、また上記式（１）で表されるオピオイド
ペプチド誘導体またはその塩を有効成分とする鎮痛剤に
関する。本発明は、上記式（１）によって表されるオピ
オイドペプチド誘導体またはその塩を有効成分とする、
μ−オピオイドレセプターに対して高い特異的親和性を
示すμ―オピオイドレセプターアゴニスト活性化剤にも
関する。なお、上記式（１）で表されるオピオイドペプ
チド誘導体は、ピラジノン環の３，６位側鎖にアミド結
合を介して２，６−ジメチルチロシン(Ｄｍｔ)が結合し
たものであり、ＤｍｔはＬ体を意味する。
【０００５】
【発明の実施の形態】上記式（１）で表されるオピオイ
ドペプチド誘導体及びその塩は、液相法により容易に合
成できる。例えば、式（１）においてｎが４であるオピ
オイドペプチド誘導体の塩酸塩は、５−メチル−３，６
−ビス（４−アミノブチル）−２（１Ｈ）−ピラジノ
ン]とＢｏｃ−Ｄｍｔ−ＯＨをＢＯＰ試薬（ベンゾトリ
アゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホ
スホニュウムヘキサフルオロホスフェイト)により結合
させ、得られるペプチド誘導体をジオキサン中の塩酸で
処理することにより得ることができる。
ドペプチド誘導体及びその塩は、液相法により容易に合
成できる。例えば、式（１）においてｎが４であるオピ
オイドペプチド誘導体の塩酸塩は、５−メチル−３，６
−ビス（４−アミノブチル）−２（１Ｈ）−ピラジノ
ン]とＢｏｃ−Ｄｍｔ−ＯＨをＢＯＰ試薬（ベンゾトリ
アゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホ
スホニュウムヘキサフルオロホスフェイト)により結合
させ、得られるペプチド誘導体をジオキサン中の塩酸で
処理することにより得ることができる。
【０００６】オピオイドペプチド誘導体（１）の合成ル
ートをその塩酸塩を例にとり、以下に示す。
ートをその塩酸塩を例にとり、以下に示す。
【化３】 （上記式中、ｎは１−８を表す。） 原料の１つである５−メチル−３，６−ビス（４−アミ
ノブチル）−２（１Ｈ）−ピラジノンはＯｋａｄａらの
方法[Tetrahedron 55, 14391-14406 (1999)]により合成
することができる。他の原料である５−メチル−３−
（４−アミノＣ1-8アルキル），６−（４−アミノＣ1-8
アルキル）−２（１Ｈ）−ピラジノンは上記方法あるい
はＯｋａｄａらの他の方法[Chem. Pharm. Bull. 46(9)1
374-1382(1998)]に準じて合成できる。また２，６−ジ
メチルチロシンは参考例に示す如く、Ｄｙｇｏｓらの方
法[Synthesis, 741 (1991)]に従って合成することがで
きる。
ノブチル）−２（１Ｈ）−ピラジノンはＯｋａｄａらの
方法[Tetrahedron 55, 14391-14406 (1999)]により合成
することができる。他の原料である５−メチル−３−
（４−アミノＣ1-8アルキル），６−（４−アミノＣ1-8
アルキル）−２（１Ｈ）−ピラジノンは上記方法あるい
はＯｋａｄａらの他の方法[Chem. Pharm. Bull. 46(9)1
374-1382(1998)]に準じて合成できる。また２，６−ジ
メチルチロシンは参考例に示す如く、Ｄｙｇｏｓらの方
法[Synthesis, 741 (1991)]に従って合成することがで
きる。
【０００７】本発明のオピオイドペプチド誘導体（１）
の合成において、目的とするペプチド誘導体またはその
中間体は、例えば、イオンクロマトグラフィー、ゲルろ
過クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、再結
晶、抽出等、種々の方法を適宜組み合せて単離、精製す
ればよい。また、かくして得られるオピオイドペプチド
誘導体（１）は、常法に従って有機もしくは無機の酸を
用いてそれぞれの塩に変換することができる。本発明の
好ましいオピオイドペプチド誘導体は式（１）において
ｎが３または４である化合物である。また好ましい塩は
塩酸塩、メタンスルホン酸塩等の薬学的に許容される塩
である。
の合成において、目的とするペプチド誘導体またはその
中間体は、例えば、イオンクロマトグラフィー、ゲルろ
過クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、再結
晶、抽出等、種々の方法を適宜組み合せて単離、精製す
ればよい。また、かくして得られるオピオイドペプチド
誘導体（１）は、常法に従って有機もしくは無機の酸を
用いてそれぞれの塩に変換することができる。本発明の
好ましいオピオイドペプチド誘導体は式（１）において
ｎが３または４である化合物である。また好ましい塩は
塩酸塩、メタンスルホン酸塩等の薬学的に許容される塩
である。
【０００８】本発明のオピオイドペプチド誘導体につい
て、実験例に示す通り、マウス脳由来オピオイド受容体
を用いたレセプター競合アッセイを行なうことによって
オピオイド受容体親和性を測定し、モルモット回腸（Ｇ
ＰＩ）法及びマウスの輸精管（ＭＶＤ）法によりアゴニ
ストであるかアンタゴニストであるかを試験し、最終的
にＴａｉｌ ｐｒｅｓｓｕｒｅ法により鎮痛効果を測定
し、本発明のピオイドペプチド誘導体の薬理効果を確認
した。
て、実験例に示す通り、マウス脳由来オピオイド受容体
を用いたレセプター競合アッセイを行なうことによって
オピオイド受容体親和性を測定し、モルモット回腸（Ｇ
ＰＩ）法及びマウスの輸精管（ＭＶＤ）法によりアゴニ
ストであるかアンタゴニストであるかを試験し、最終的
にＴａｉｌ ｐｒｅｓｓｕｒｅ法により鎮痛効果を測定
し、本発明のピオイドペプチド誘導体の薬理効果を確認
した。
【０００９】本発明の式（１）で表されるオピオイドペ
プチド誘導体及びその塩は、オピオイドレセプターに対
する特異的親和性を有し、鎮痛効果など種々のモルヒネ
様生理活性を発現する。
プチド誘導体及びその塩は、オピオイドレセプターに対
する特異的親和性を有し、鎮痛効果など種々のモルヒネ
様生理活性を発現する。
【００１０】従って、本発明のオピオイドペプチド誘導
体（１）及びその塩は、鎮痛作用のみならずオピオイド
ペプチドがそのレセプターを経由して発現する種々の中
枢性及び末梢性反応、例えば麻酔、呼吸、脈動、消化管
機能、ホルモン分泌調節、心筋収縮調節など生理学的作
用を発揮することが明らかである。本発明のオピオイド
ペプチド誘導体（１）及びその塩は、鎮痛薬またはその
他のオピオイドレセプター活性に関連した神経疾患の治
療薬または予防薬として用いることが可能である。本発
明のオピオイドペプチド誘導体（１）またはその塩の投
与経路としては、経口投与、非経口投与、直腸投与、舌
下投与、外用塗布または脊髄管腔内の硬膜外注入や、く
も膜下注入など種々の投与経路によって、それぞれに適
した適宜の基剤、賦形剤など薬学的に許容しうる担体や
添加剤と混合して医薬製剤として患者に投与することが
できる。
体（１）及びその塩は、鎮痛作用のみならずオピオイド
ペプチドがそのレセプターを経由して発現する種々の中
枢性及び末梢性反応、例えば麻酔、呼吸、脈動、消化管
機能、ホルモン分泌調節、心筋収縮調節など生理学的作
用を発揮することが明らかである。本発明のオピオイド
ペプチド誘導体（１）及びその塩は、鎮痛薬またはその
他のオピオイドレセプター活性に関連した神経疾患の治
療薬または予防薬として用いることが可能である。本発
明のオピオイドペプチド誘導体（１）またはその塩の投
与経路としては、経口投与、非経口投与、直腸投与、舌
下投与、外用塗布または脊髄管腔内の硬膜外注入や、く
も膜下注入など種々の投与経路によって、それぞれに適
した適宜の基剤、賦形剤など薬学的に許容しうる担体や
添加剤と混合して医薬製剤として患者に投与することが
できる。
【００１１】本発明のオピオイドペプチド誘導体（１）
またはその塩の投与量は、投与を必要とする患者の年
齢、疾患や症状の重篤度、投与経路などによって変動す
るが、通常は０．０１ないし５００ｍｇ／ｋｇ体重を一
日あたり一回または数回に分けて投与すればよい。
またはその塩の投与量は、投与を必要とする患者の年
齢、疾患や症状の重篤度、投与経路などによって変動す
るが、通常は０．０１ないし５００ｍｇ／ｋｇ体重を一
日あたり一回または数回に分けて投与すればよい。
【００１２】なお、本明細書において使用する下記略号
の意味は以下の通りである。 Ｂｏｃ: tert-ブトキシカルボニル Ｚ：ベンジルオキシカルボニル ＤＩＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸 ＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス
（ジメチルアミノ）ホスホニュウムヘキサフルオロホス
フェイト ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン ＡｃＯＥｔ：酢酸エチル ＭｅＣＮ：アセトニトリル ＨＥＰＥＳ：Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン
−Ｎ’−（２−エタンスルホン酸） ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド ＧＤＰ：グアノシン５’−ジホスフェイト ＤＰＤＰＥ：[Ｄ−Ａｌａ2，Ｄ−Ｐｅｎ5］−エンケフ
ァリン ＤＡＤＯ：[Ｄ−Ａｌａ2，Ｍｅ−Ｐｈｅ4，Ｇｌｙ−ｏ
ｌ5］−エンケファリン
の意味は以下の通りである。 Ｂｏｃ: tert-ブトキシカルボニル Ｚ：ベンジルオキシカルボニル ＤＩＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸 ＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス
（ジメチルアミノ）ホスホニュウムヘキサフルオロホス
フェイト ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン ＡｃＯＥｔ：酢酸エチル ＭｅＣＮ：アセトニトリル ＨＥＰＥＳ：Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン
−Ｎ’−（２−エタンスルホン酸） ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド ＧＤＰ：グアノシン５’−ジホスフェイト ＤＰＤＰＥ：[Ｄ−Ａｌａ2，Ｄ−Ｐｅｎ5］−エンケフ
ァリン ＤＡＤＯ：[Ｄ−Ａｌａ2，Ｍｅ−Ｐｈｅ4，Ｇｌｙ−ｏ
ｌ5］−エンケファリン
【００１３】以下に実施例、参考例並びに実験例を挙げ
て本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらに
限定されるものではない。
て本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらに
限定されるものではない。
【実施例】実施例１（合成実験） 融点は未補正、微量融点測定器（柳本製作所製）で測定
した。旋光度は日本分光ＤＩＰ−１０００型で測定し
た。高速液体クロマトグラフィー（HPLC）はＷａｔｅｒ
ｓ ｍｏｄｅｌ ６００Ｅを使用した。保持時間はｔＲで
示した。カラムはＣＯＳＭＯＳＩＬ Ｃ１８ (4.6ラ250m
m)、移動相にはＡ: 0.05% ＴＦＡ水溶液、Ｂ: 0.05% Ｔ
ＦＡ−ＭｅＣＮ溶液を用いた。流速は１ml/min、検知は
２２０nmで分析した。薄相クロマトグラフィー（TLC）
はＫｉｅｓｅｌｇｅｌ ６０Ｇ(Merck社製)を用いて行っ
た。展開溶媒にはＲｆ1(ヘキサン:AcOEt=1:1)、Ｒｆ2(C
HCl3:MeOH:AcOH=90:8:2)、Ｒｆ3(n-BuOH:AcOH:ピリジ
ン:H2O=4:1:1:2)、Ｒｆ4(CHCl3:MeOH:H2O=8:3:1, 下層)
を用いた。発色試薬としてアミノ基の検出には０．１％
ニンヒドリン−アセトン溶液を用いた。Ｂｏｃ保護体の
検出には臭化水素−ニンヒドリン法を用いた。ピラジノ
ン誘導体の検出には１０％硫酸セリウム溶液またはＵＶ
を用いた。質量分析にはＫｒａｔｏｓ ＭＡＬＤＩ II型
質量分析装置を用い、ＭＡＬＤＩ法により行った。
した。旋光度は日本分光ＤＩＰ−１０００型で測定し
た。高速液体クロマトグラフィー（HPLC）はＷａｔｅｒ
ｓ ｍｏｄｅｌ ６００Ｅを使用した。保持時間はｔＲで
示した。カラムはＣＯＳＭＯＳＩＬ Ｃ１８ (4.6ラ250m
m)、移動相にはＡ: 0.05% ＴＦＡ水溶液、Ｂ: 0.05% Ｔ
ＦＡ−ＭｅＣＮ溶液を用いた。流速は１ml/min、検知は
２２０nmで分析した。薄相クロマトグラフィー（TLC）
はＫｉｅｓｅｌｇｅｌ ６０Ｇ(Merck社製)を用いて行っ
た。展開溶媒にはＲｆ1(ヘキサン:AcOEt=1:1)、Ｒｆ2(C
HCl3:MeOH:AcOH=90:8:2)、Ｒｆ3(n-BuOH:AcOH:ピリジ
ン:H2O=4:1:1:2)、Ｒｆ4(CHCl3:MeOH:H2O=8:3:1, 下層)
を用いた。発色試薬としてアミノ基の検出には０．１％
ニンヒドリン−アセトン溶液を用いた。Ｂｏｃ保護体の
検出には臭化水素−ニンヒドリン法を用いた。ピラジノ
ン誘導体の検出には１０％硫酸セリウム溶液またはＵＶ
を用いた。質量分析にはＫｒａｔｏｓ ＭＡＬＤＩ II型
質量分析装置を用い、ＭＡＬＤＩ法により行った。
【００１４】Ｂｏｃ−Ｌｙｓ(Ｚ)−Ｌｙｓ(Ｚ)−ＣＨ2
Ｃｌの合成：Ｂｏｃ−Ｌｙｓ(Ｚ)−ＯＨ(2.19g, 5.76mm
ol)のＴＨＦ(60ml)溶液を、氷−食塩で−15℃に冷却
し、Ｎ−メチルモルホリン（NMM）(0.633ml, 5.76mmol)
とクロロギ酸イソブチル(0.754ml, 5.76mmol)を加え
た。１０分間撹拌後、Ｈ−Ｌｙｓ(Ｚ)−ＣＨ2Ｃｌ・Ｈ
Ｃｌ[Ｂｏｃ−Ｌｙｓ(Ｚ)−ＣＨ2Ｃｌ(1.98g, 4.80mmo
l)と８．４ Ｎ ＨＣｌ/ジオキサン(2.86ml, 24.0mmol)
より調製]とＮＭＭ(0.528ml,4.80mmol)のＤＭＦ(60ml)
溶液に加え０℃にて１時間、続いて室温にて一晩撹拌し
た。減圧下溶媒を留去後、残渣をＡｃＯＥｔに溶解し、
ＡｃＯＥｔ層を１０％クエン酸水溶液、５％ＮａＨＣＯ
3水溶液、ついで水で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒を留去後、残渣にエーテルを加え、生じた結晶
をろ取し、目的物を得た。 収量 1.98g (59.5%) 融点 127-129℃, [α]D 25-20.3°(c=0.5, CHCl3), Rf1
0.32. 元素分析 C34H47ClN4O8 計算値: C, 60.4; H, 7.01; N, 8.32. 実験値: C, 60.5; H, 7.01; N, 8.22.
Ｃｌの合成：Ｂｏｃ−Ｌｙｓ(Ｚ)−ＯＨ(2.19g, 5.76mm
ol)のＴＨＦ(60ml)溶液を、氷−食塩で−15℃に冷却
し、Ｎ−メチルモルホリン（NMM）(0.633ml, 5.76mmol)
とクロロギ酸イソブチル(0.754ml, 5.76mmol)を加え
た。１０分間撹拌後、Ｈ−Ｌｙｓ(Ｚ)−ＣＨ2Ｃｌ・Ｈ
Ｃｌ[Ｂｏｃ−Ｌｙｓ(Ｚ)−ＣＨ2Ｃｌ(1.98g, 4.80mmo
l)と８．４ Ｎ ＨＣｌ/ジオキサン(2.86ml, 24.0mmol)
より調製]とＮＭＭ(0.528ml,4.80mmol)のＤＭＦ(60ml)
溶液に加え０℃にて１時間、続いて室温にて一晩撹拌し
た。減圧下溶媒を留去後、残渣をＡｃＯＥｔに溶解し、
ＡｃＯＥｔ層を１０％クエン酸水溶液、５％ＮａＨＣＯ
3水溶液、ついで水で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒を留去後、残渣にエーテルを加え、生じた結晶
をろ取し、目的物を得た。 収量 1.98g (59.5%) 融点 127-129℃, [α]D 25-20.3°(c=0.5, CHCl3), Rf1
0.32. 元素分析 C34H47ClN4O8 計算値: C, 60.4; H, 7.01; N, 8.32. 実験値: C, 60.5; H, 7.01; N, 8.22.
【００１５】３，６−ビス（４−ベンジルオキシカルボ
ニルアミノブチル）−５−メチル−２（１Ｈ）−ピラジ
ノンの合成：Ｈ−Ｌｙｓ(Ｚ)−Ｌｙｓ(Ｚ)−ＣＨ2Ｃｌ
・ＨＣｌ[Ｂｏｃ−Ｌｙｓ(Ｚ)−Ｌｙｓ(Ｚ)−ＣＨ2Ｃｌ
(1.50g, 2.16mmol)と７．０ Ｎ ＨＣｌ/ジオキサン(3.0
9ml,21.6mmol)より調製]のＭｅＣＮ(100ml)溶液を２時
間加熱還流した。減圧下溶媒を留去後、残渣をＣＨＣｌ
3に溶解し、ＣＨＣｌ3層を水で洗浄後、硫酸ナトリウム
で乾燥した。溶媒を留去後、残渣にエーテルを加え、生
じた結晶をろ取し、目的物を得た。 収量 558mg (49.6%) 融点 158-160℃, Rf2 0.63. 元素分析 C29H36N4O5 計算値: C, 66.9; H, 6.97; N, 10.8. 実験値: C, 66.8; H, 7.03; N, 10.7.
ニルアミノブチル）−５−メチル−２（１Ｈ）−ピラジ
ノンの合成：Ｈ−Ｌｙｓ(Ｚ)−Ｌｙｓ(Ｚ)−ＣＨ2Ｃｌ
・ＨＣｌ[Ｂｏｃ−Ｌｙｓ(Ｚ)−Ｌｙｓ(Ｚ)−ＣＨ2Ｃｌ
(1.50g, 2.16mmol)と７．０ Ｎ ＨＣｌ/ジオキサン(3.0
9ml,21.6mmol)より調製]のＭｅＣＮ(100ml)溶液を２時
間加熱還流した。減圧下溶媒を留去後、残渣をＣＨＣｌ
3に溶解し、ＣＨＣｌ3層を水で洗浄後、硫酸ナトリウム
で乾燥した。溶媒を留去後、残渣にエーテルを加え、生
じた結晶をろ取し、目的物を得た。 収量 558mg (49.6%) 融点 158-160℃, Rf2 0.63. 元素分析 C29H36N4O5 計算値: C, 66.9; H, 6.97; N, 10.8. 実験値: C, 66.8; H, 7.03; N, 10.7.
【００１６】３，６−ビス（４−アミノブチル）−５−
メチル−２（１Ｈ）−ピラジノンの合成：３，６−ビス
（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−５−
メチル−２（１Ｈ）−ピラジノン(350mg, 0.672mmol)を
６０％酢酸水溶液（30ml）に溶解し、Ｐｄ存在下接触還
元を行った。Ｐｄをろ過により取り除き、ろ液を留去
後、残渣にエーテルを加え生じた結晶をろ取し、目的物
を得た。 収量 240mg (95.9%) 融点 170-178℃, Rf3 0.11. 元素分析 C13H24N4O ・2AcOH・0.5H2O 計算値: C, 53.5; H, 8.72; N, 14.7. 実験値: C, 53.4; H, 8.23; N, 14.6.
メチル−２（１Ｈ）−ピラジノンの合成：３，６−ビス
（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−５−
メチル−２（１Ｈ）−ピラジノン(350mg, 0.672mmol)を
６０％酢酸水溶液（30ml）に溶解し、Ｐｄ存在下接触還
元を行った。Ｐｄをろ過により取り除き、ろ液を留去
後、残渣にエーテルを加え生じた結晶をろ取し、目的物
を得た。 収量 240mg (95.9%) 融点 170-178℃, Rf3 0.11. 元素分析 C13H24N4O ・2AcOH・0.5H2O 計算値: C, 53.5; H, 8.72; N, 14.7. 実験値: C, 53.4; H, 8.23; N, 14.6.
【００１７】３，６−ビス[４−（Ｎα-Ｂｏｃ-Ｄｍ
ｔ）−アミノブチル）−５−メチル−２（１Ｈ）−ピラ
ジノンの合成：３，６−ビス（４−アミノブチル）−５
−メチル−２（１Ｈ）−ピラジノン(50mg, 0.153mmol)]
をＤＭＦ(15ml)に溶解し、氷−食塩で−15℃に冷却し、
Ｂｏｃ−Ｄｍｔ−ＯＨ(113mg, 0.367mmol)、ＢＯＰ(162
mg, 0.367mmol)、ＤＩＥＡ(62.8μl, 0.367mmol)を順々
に加え、室温で４時間撹拌した。減圧下溶媒を留去後、
残渣をＡｃＯＥｔに溶解し、ＡｃＯＥｔ層を１０％クエ
ン酸水溶液、５％ＮａＨＣＯ3、ついで飽和食塩水で洗
浄後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去後、残査
にエーテルを加え、生じた結晶をろ取し、目的物を得
た。 収量 91 mg (72.7 %) 融点 122-125℃, [α]D 25 +25.3°(c=0.5, MeOH), Rf4
0.79. 元素分析 C45H66N6O9 計算値: C, 64.7; H, 7.97; N, 10.1. 実験値: C, 64.5; H,8.01; N, 10.0.
ｔ）−アミノブチル）−５−メチル−２（１Ｈ）−ピラ
ジノンの合成：３，６−ビス（４−アミノブチル）−５
−メチル−２（１Ｈ）−ピラジノン(50mg, 0.153mmol)]
をＤＭＦ(15ml)に溶解し、氷−食塩で−15℃に冷却し、
Ｂｏｃ−Ｄｍｔ−ＯＨ(113mg, 0.367mmol)、ＢＯＰ(162
mg, 0.367mmol)、ＤＩＥＡ(62.8μl, 0.367mmol)を順々
に加え、室温で４時間撹拌した。減圧下溶媒を留去後、
残渣をＡｃＯＥｔに溶解し、ＡｃＯＥｔ層を１０％クエ
ン酸水溶液、５％ＮａＨＣＯ3、ついで飽和食塩水で洗
浄後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去後、残査
にエーテルを加え、生じた結晶をろ取し、目的物を得
た。 収量 91 mg (72.7 %) 融点 122-125℃, [α]D 25 +25.3°(c=0.5, MeOH), Rf4
0.79. 元素分析 C45H66N6O9 計算値: C, 64.7; H, 7.97; N, 10.1. 実験値: C, 64.5; H,8.01; N, 10.0.
【００１８】５−メチル−３，６−ビス[４−（２’,
６’−ジメチルチロシル）アミノブチル]−２（１Ｈ）
−ピラジノン塩酸塩(化合物Ｉ）の合成：３，６−ビス
[４−（Ｎα−Ｂｏｃ−Ｄｍｔ）−アミノブチル）−５
−メチル−２（１Ｈ）−ピラジノン(50mg, 0.060mmol)
をＴＦＡ(138μl, 1.80mmol)とアニソール(13.8μl)よ
り脱Ｂｏｃ化後、１mol dm-3 ＨＣｌ(120μl, 0.12mmo
l)を加え、凍結乾燥し非晶質として目的物を得た。 収量30mg(70.7%), [α]D 25 +63.7°(c=0.17, H2O), Rf4 0.42, TOF-MS m/
z: 635.7 [(M+H)+, calc.for C35H50N6O5: 634.8], tR
20.28 (min). ＨＰＬＣ分析条件Ａ:Ｂ=９０:１０で５分間溶出後、４
０分かけてＡ:Ｂ=１０:９０までＭｅＣＮ濃度を挙げた.
６’−ジメチルチロシル）アミノブチル]−２（１Ｈ）
−ピラジノン塩酸塩(化合物Ｉ）の合成：３，６−ビス
[４−（Ｎα−Ｂｏｃ−Ｄｍｔ）−アミノブチル）−５
−メチル−２（１Ｈ）−ピラジノン(50mg, 0.060mmol)
をＴＦＡ(138μl, 1.80mmol)とアニソール(13.8μl)よ
り脱Ｂｏｃ化後、１mol dm-3 ＨＣｌ(120μl, 0.12mmo
l)を加え、凍結乾燥し非晶質として目的物を得た。 収量30mg(70.7%), [α]D 25 +63.7°(c=0.17, H2O), Rf4 0.42, TOF-MS m/
z: 635.7 [(M+H)+, calc.for C35H50N6O5: 634.8], tR
20.28 (min). ＨＰＬＣ分析条件Ａ:Ｂ=９０:１０で５分間溶出後、４
０分かけてＡ:Ｂ=１０:９０までＭｅＣＮ濃度を挙げた.
【００１９】参考例１ Ｂｏｃ−Ｄｍｔ−ＯＨの合成：Ｒｆ1の展開溶媒の組成
はクロロホルム：メタノール：酢酸(90:8:2)であり、Ｒ
ｆ2の展開溶媒の組成はブタノール：酢酸：水(4:1:5,上
層)である。３，５−ジメチルフェノール(20ｇ,0.164mm
ol)をメタノール(300ml)に溶解し、濃塩酸(130ml)を加
えた。ヨウ素酸カリウム(10.5g, 0.049mol)とヨウ化カ
リウム(19.1g, 0.115mol)を水(260ml)に溶解し、水溶液
を上記メタノール溶液に撹拌しながらゆっくり室温で加
えた。反応溶液に飽和食塩水(200ml)を加え、さらに３
０分間撹拌し、粗結晶を吸引ろ過で集めた。粗結晶をト
ルエン(400ml)に溶解し、不溶物をセライトを通じてろ
過した。ろ液を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去
し、残渣にヘキサンを加えて結晶化し、結晶を吸引ろ過
で集め４−ヨード−３，５−ジメチルフェノールを得
た。 収量 20g(収率:49%), 融点125−129℃, Rf1=0.71.
はクロロホルム：メタノール：酢酸(90:8:2)であり、Ｒ
ｆ2の展開溶媒の組成はブタノール：酢酸：水(4:1:5,上
層)である。３，５−ジメチルフェノール(20ｇ,0.164mm
ol)をメタノール(300ml)に溶解し、濃塩酸(130ml)を加
えた。ヨウ素酸カリウム(10.5g, 0.049mol)とヨウ化カ
リウム(19.1g, 0.115mol)を水(260ml)に溶解し、水溶液
を上記メタノール溶液に撹拌しながらゆっくり室温で加
えた。反応溶液に飽和食塩水(200ml)を加え、さらに３
０分間撹拌し、粗結晶を吸引ろ過で集めた。粗結晶をト
ルエン(400ml)に溶解し、不溶物をセライトを通じてろ
過した。ろ液を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去
し、残渣にヘキサンを加えて結晶化し、結晶を吸引ろ過
で集め４−ヨード−３，５−ジメチルフェノールを得
た。 収量 20g(収率:49%), 融点125−129℃, Rf1=0.71.
【００２０】４−ヨード−３，５−ジメチルフェノール
(20.8g, 0.084mol)をピリジン(21.5ml)に溶解し、無水
酢酸(10.3ml, 0.109mol)を加えて、５０℃で３０分間撹
拌した。０．５mol/l 塩酸水溶液(350ml)を加えて２時
間撹拌した。生じた沈殿をろ取し、水で洗浄、乾燥し４
−ヨード−３，５−ジメチルフェニルアセテートを得
た。収量 23g(収率:95%), 融点40−42℃, Rf1=0.78.
(20.8g, 0.084mol)をピリジン(21.5ml)に溶解し、無水
酢酸(10.3ml, 0.109mol)を加えて、５０℃で３０分間撹
拌した。０．５mol/l 塩酸水溶液(350ml)を加えて２時
間撹拌した。生じた沈殿をろ取し、水で洗浄、乾燥し４
−ヨード−３，５−ジメチルフェニルアセテートを得
た。収量 23g(収率:95%), 融点40−42℃, Rf1=0.78.
【００２１】４−ヨード−３，５−ジメチルフェニルア
セテート(23g, 0.079mol)、メチル−２−アセトアミド
アクリレート(12.5g, 0.087mol)、トリ−（２−メチル
フェニル）ホスフィン(1.2g, 0.004mol)、トリエチルア
ミン(22.3ml, 0.159mol)および酢酸Ｐｄ（II）(0.36g,
0.002mol)をアセトニトリル(8.3ml)に加え、２０時間還
流した。反応溶液を室温まで冷やし、メタノールを加
え、セライトを通じて不溶物をろ過した。ろ液を濃縮
し、残渣（オイル）をＡｃＯＥｔに溶かして後、ＡｃＯ
Ｅｔ層を飽和食塩水で洗浄した。ＡｃＯＥｔ層を取り、
フロリジールを加えて一晩撹拌した。ＡｃＯＥｔ層を更
に硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去し、残渣にヘキ
サンを加えて結晶化し、粗結晶を吸引ろ過で集めた（1
6.7g)。粗結晶のうち６ｇをクロロホルムに溶解し、ク
ロロホルムで充填したシリカゲルカラム(3.6x36cm)にア
プライした。溶出クロロホルム溶液(2.5 〜 3.0 l)の画
分を集め、溶媒を留去し、残渣にヘキサンを加え、生じ
た結晶を吸引ろ過で集め、メチル（Ｚ）−２−アセトア
ミド−３−（４−アセトキシ−２，６−ジメチルフェニ
ル）−２−プロペネイトを得た。 収量 3.2g(収率:41%), 融点152−156℃, Rf1=0.48.
セテート(23g, 0.079mol)、メチル−２−アセトアミド
アクリレート(12.5g, 0.087mol)、トリ−（２−メチル
フェニル）ホスフィン(1.2g, 0.004mol)、トリエチルア
ミン(22.3ml, 0.159mol)および酢酸Ｐｄ（II）(0.36g,
0.002mol)をアセトニトリル(8.3ml)に加え、２０時間還
流した。反応溶液を室温まで冷やし、メタノールを加
え、セライトを通じて不溶物をろ過した。ろ液を濃縮
し、残渣（オイル）をＡｃＯＥｔに溶かして後、ＡｃＯ
Ｅｔ層を飽和食塩水で洗浄した。ＡｃＯＥｔ層を取り、
フロリジールを加えて一晩撹拌した。ＡｃＯＥｔ層を更
に硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去し、残渣にヘキ
サンを加えて結晶化し、粗結晶を吸引ろ過で集めた（1
6.7g)。粗結晶のうち６ｇをクロロホルムに溶解し、ク
ロロホルムで充填したシリカゲルカラム(3.6x36cm)にア
プライした。溶出クロロホルム溶液(2.5 〜 3.0 l)の画
分を集め、溶媒を留去し、残渣にヘキサンを加え、生じ
た結晶を吸引ろ過で集め、メチル（Ｚ）−２−アセトア
ミド−３−（４−アセトキシ−２，６−ジメチルフェニ
ル）−２−プロペネイトを得た。 収量 3.2g(収率:41%), 融点152−156℃, Rf1=0.48.
【００２２】メチル（Ｚ）−２−アセトアミド−３−
（４−アセトキシ−２，６−ジメチルフェニル）−２−
プロペネイト(2.0g, 0.007mol)を蒸留ＡｃＯＥｔ(50ml)
に溶解し、これに窒素ガスを通しながら３０分間撹拌し
た。（Ｒ，Ｒ）−（−）−１，２−ビス[（Ｏ−メトキ
シフェニル）（フェニル）ホスフィノ]エタン（１，５
−シクロオクタジエン）ロジウム（Ｉ）テトラフルオロ
ボレート(0.25g, 0.0003mol)を加えた後、溶液中の酸素
を除いて、水素ガス圧３ｋｇ／ｃｍ2で加圧し、６０℃
で８時間反応した。ＨＰＬＣで原料の消失を確認し、反
応溶液を室温まで冷却し、ロジウム触媒をろ過して除い
た。ろ液にフロリジール(2g)を加え、１時間撹拌した。
フロリジールをろ過し、溶媒を留去し、残渣にヘキサン
を加え、生じた結晶を吸引ろ過し、４−アセトキシ−Ｎ
−アセチル−２，６−ジメチル−Ｌ−チロシンメチルエ
ステルを得た。 収量 1.98g(収率:94%), 融点108−109℃, Rf1=0.48.
（４−アセトキシ−２，６−ジメチルフェニル）−２−
プロペネイト(2.0g, 0.007mol)を蒸留ＡｃＯＥｔ(50ml)
に溶解し、これに窒素ガスを通しながら３０分間撹拌し
た。（Ｒ，Ｒ）−（−）−１，２−ビス[（Ｏ−メトキ
シフェニル）（フェニル）ホスフィノ]エタン（１，５
−シクロオクタジエン）ロジウム（Ｉ）テトラフルオロ
ボレート(0.25g, 0.0003mol)を加えた後、溶液中の酸素
を除いて、水素ガス圧３ｋｇ／ｃｍ2で加圧し、６０℃
で８時間反応した。ＨＰＬＣで原料の消失を確認し、反
応溶液を室温まで冷却し、ロジウム触媒をろ過して除い
た。ろ液にフロリジール(2g)を加え、１時間撹拌した。
フロリジールをろ過し、溶媒を留去し、残渣にヘキサン
を加え、生じた結晶を吸引ろ過し、４−アセトキシ−Ｎ
−アセチル−２，６−ジメチル−Ｌ−チロシンメチルエ
ステルを得た。 収量 1.98g(収率:94%), 融点108−109℃, Rf1=0.48.
【００２３】４−アセトキシ−Ｎ−アセチル−２，６−
ジメチル−Ｌ−チロシンメチルエステル(8.0g, 0.026mo
l)に濃塩酸(52ml, 0.52mol)を加え２時間還流した。−
５℃まで冷却し、生じた結晶を吸引ろ過し、デシケータ
で乾燥して２，６−ジメチル−Ｌ−チロシン・モノ塩酸
塩を得た。 収量 5.7g(収率:83%), 融点190℃, [α]D 25＝＋６３．
４°(c =1.0, AcOH)
ジメチル−Ｌ−チロシンメチルエステル(8.0g, 0.026mo
l)に濃塩酸(52ml, 0.52mol)を加え２時間還流した。−
５℃まで冷却し、生じた結晶を吸引ろ過し、デシケータ
で乾燥して２，６−ジメチル−Ｌ−チロシン・モノ塩酸
塩を得た。 収量 5.7g(収率:83%), 融点190℃, [α]D 25＝＋６３．
４°(c =1.0, AcOH)
【００２４】２，６−ジメチル−Ｌ−チロシン・モノ塩
酸塩(4.7g, 0.018mol)を水（20ml)に溶解し、トリエチ
ルアミン(4.9ml, 0.036mol)を加えた。ジ−t-ブチルジ
カルボネイト(3.9g, 0.020mol)をジオキサン(20ml)に溶
解し、上記水溶液に加えた。反応液を室温で一晩撹拌し
た。反応終了後、溶媒を留去し、残渣のオイルをクエン
酸水溶液に懸濁し、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層を飽
和食塩水、水で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒を留去し、残渣にヘキサンを加えて結晶化し
た。結晶を吸引ろ過し目的のＢｏｃ−Ｄｍｔ−ＯＨを得
た。 収量 5.4g(収率:97%), 融点174−177℃, Rf2=0.80. 元素分析値 C16H23NO5・0.1H2O 計算値：C,61.8; H,7.51; N,4.50 実験値: C,61.8; H,7.54; N,4.45
酸塩(4.7g, 0.018mol)を水（20ml)に溶解し、トリエチ
ルアミン(4.9ml, 0.036mol)を加えた。ジ−t-ブチルジ
カルボネイト(3.9g, 0.020mol)をジオキサン(20ml)に溶
解し、上記水溶液に加えた。反応液を室温で一晩撹拌し
た。反応終了後、溶媒を留去し、残渣のオイルをクエン
酸水溶液に懸濁し、ＡｃＯＥｔで抽出した。有機層を飽
和食塩水、水で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒を留去し、残渣にヘキサンを加えて結晶化し
た。結晶を吸引ろ過し目的のＢｏｃ−Ｄｍｔ−ＯＨを得
た。 収量 5.4g(収率:97%), 融点174−177℃, Rf2=0.80. 元素分析値 C16H23NO5・0.1H2O 計算値：C,61.8; H,7.51; N,4.50 実験値: C,61.8; H,7.54; N,4.45
【００２５】実験例１ オピオイドレセプター親和性の測定：実施例１で合成し
たオピオイドペプチド誘導体[化合物（Ｉ）]について、
公知の方法に従って、μ−及びδ−オピオイドレセプタ
ー親和性をラット脳組織から得たシナプス膜分画を用い
た競合的レセプターアッセイにより求めた。即ち、平均
体重が３００〜３５０ｇであるＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗ
ｌｅｙ系ラットを断首して致死させた後、小脳を除去し
た脳組織を５０μg/ml 大豆トリプシンインヒビターを
含む０．３２ M ショ糖と １０ mM ＨＥＰＥＳ (pH 7.
5)でホモジナイズし、分画遠沈してシナプス膜分画（ｐ
２分画）を得、これから内在性リガンドを除去するため
１００ mM ＮａＣｌ、０．１ mM ＧＤＰ、大豆トリプシ
ンインヒビターを含む５０ mM ＨＥＰＥＳ (pH 7.5)で
プレインキュベートした。
たオピオイドペプチド誘導体[化合物（Ｉ）]について、
公知の方法に従って、μ−及びδ−オピオイドレセプタ
ー親和性をラット脳組織から得たシナプス膜分画を用い
た競合的レセプターアッセイにより求めた。即ち、平均
体重が３００〜３５０ｇであるＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗ
ｌｅｙ系ラットを断首して致死させた後、小脳を除去し
た脳組織を５０μg/ml 大豆トリプシンインヒビターを
含む０．３２ M ショ糖と １０ mM ＨＥＰＥＳ (pH 7.
5)でホモジナイズし、分画遠沈してシナプス膜分画（ｐ
２分画）を得、これから内在性リガンドを除去するため
１００ mM ＮａＣｌ、０．１ mM ＧＤＰ、大豆トリプシ
ンインヒビターを含む５０ mM ＨＥＰＥＳ (pH 7.5)で
プレインキュベートした。
【００２６】μ−オピオイドレセプターアゴニストであ
るトリチウム標識化[3Ｈ]ＤＡＧＯ及びδ−オピオイド
レセプター選択性の高いトリチウム標識化[3Ｈ]ＤＰＤ
ＰＥをそれぞれ放射性リガンドとして使用し、該シナプ
ス膜の一部を被験ペプチド誘導体と共に一定時間インキ
ュベートすることによって、シナプス膜分画に対する放
射性リガンドと化合物（Ｉ）との交換反応に基づく競合
的レセプター結合アッセイ(Radiolabeled receptor ass
ay: RRA)を行なった。この際目的リガンドとの交換反応
を一定条件下で行なった後、シナプス膜分画に残存する
放射線を測定し、シナプス膜分画に吸着したリガンド量
を算出するのであるが、放射性リガンドと目的リガンド
との間で競合してレセプターとの結合がおこるものと仮
定し、放射性リガンドの最大特異的結合を５０％阻害す
る濃度（ＩＣ50）を求め、これから親和性結合定数[Aff
inity constant (Ki)]をＣｈｅｎｇらの方法[Biochem.P
harmcol., 22, 3099 (1973)]により算出した。得られた
結果を表１に示す。
るトリチウム標識化[3Ｈ]ＤＡＧＯ及びδ−オピオイド
レセプター選択性の高いトリチウム標識化[3Ｈ]ＤＰＤ
ＰＥをそれぞれ放射性リガンドとして使用し、該シナプ
ス膜の一部を被験ペプチド誘導体と共に一定時間インキ
ュベートすることによって、シナプス膜分画に対する放
射性リガンドと化合物（Ｉ）との交換反応に基づく競合
的レセプター結合アッセイ(Radiolabeled receptor ass
ay: RRA)を行なった。この際目的リガンドとの交換反応
を一定条件下で行なった後、シナプス膜分画に残存する
放射線を測定し、シナプス膜分画に吸着したリガンド量
を算出するのであるが、放射性リガンドと目的リガンド
との間で競合してレセプターとの結合がおこるものと仮
定し、放射性リガンドの最大特異的結合を５０％阻害す
る濃度（ＩＣ50）を求め、これから親和性結合定数[Aff
inity constant (Ki)]をＣｈｅｎｇらの方法[Biochem.P
harmcol., 22, 3099 (1973)]により算出した。得られた
結果を表１に示す。
【００２７】
【表１】表１．化合物（Ｉ）（式（１）のｎ＝４）のμ
−及びδ−レセプターに対する親和性と選択性 化合物（Ｉ）がμ−レセプターに対して０．１１４nMと
非常に低い濃度で親和性を有することが確認された。
−及びδ−レセプターに対する親和性と選択性 化合物（Ｉ）がμ−レセプターに対して０．１１４nMと
非常に低い濃度で親和性を有することが確認された。
【００２８】実験例２ 各種オピオイドレセプターに対するアゴニスト・アンタ
ゴニスト活性の測定：モルモット回腸（ＧＰＩ）及びマ
ウスの輸精管（ＭＶＤ）を用い、化合物（Ｉ）のアゴニ
スト・アンタゴニスト活性に関するアッセイ試験を行な
った。即ち、体重が３００ｇ前後の雄性モルモットを放
血死させて、回盲結合部位に直近の回腸から長さ１０cm
程度の回腸片を摘出し、３６℃にてイオン保持したＫｒ
ｅｂｓ等張液を満たしたマグヌス管内に、アイソトニッ
クトランスデューサーにより１ｇの静止張力をかけた状
態で載置し、次いで酸素通気処理（95％O2／5%CO2）を
行なった。次いで３０Ｖで０．５ミリ秒の電気刺激を与
えてモルモット回腸縦走筋を収縮させ、収縮が安定した
後ペプチダーゼインヒビターを添加し、化合物（Ｉ）を
加えて、モルモット回腸縦走筋の電気収縮の変化増幅器
と記録計とに接続したＧｒａｓｓＦＴＯ ０．３トラン
スデューサーによってモニターした。オピオイド活性
は、化合物（Ｉ）添加後の収縮抑制と塩酸ナロキソン添
加による収縮抑制解除とによって判定した。なお、モル
モット回腸縦走筋の電気収縮を５０％抑制する濃度を測
定し、これをＩＣ50とした。また、マウスＭＶＤアッセ
イにおいて、モルモット回腸の代わりにマウス輸精管を
用いて同様の操作を行ない、マウス輸精管の電気収縮を
５０％抑制する濃度ＩＣ50を測定した。なお、ＧＰＩア
ッセイにおいては、オピオイド作用は主としてμ−オピ
オイド受容体によって仲介され、一方、ＭＶＤアッセイ
においては電気収縮の阻害はδ−オピオイド受容体との
相互作用によることが明らかにされているので、それぞ
れの電気収縮を５０％抑制する濃度は、アゴニスト効力
であるものとみなした。化合物（Ｉ）について得られた
結果を表２に示す。
ゴニスト活性の測定：モルモット回腸（ＧＰＩ）及びマ
ウスの輸精管（ＭＶＤ）を用い、化合物（Ｉ）のアゴニ
スト・アンタゴニスト活性に関するアッセイ試験を行な
った。即ち、体重が３００ｇ前後の雄性モルモットを放
血死させて、回盲結合部位に直近の回腸から長さ１０cm
程度の回腸片を摘出し、３６℃にてイオン保持したＫｒ
ｅｂｓ等張液を満たしたマグヌス管内に、アイソトニッ
クトランスデューサーにより１ｇの静止張力をかけた状
態で載置し、次いで酸素通気処理（95％O2／5%CO2）を
行なった。次いで３０Ｖで０．５ミリ秒の電気刺激を与
えてモルモット回腸縦走筋を収縮させ、収縮が安定した
後ペプチダーゼインヒビターを添加し、化合物（Ｉ）を
加えて、モルモット回腸縦走筋の電気収縮の変化増幅器
と記録計とに接続したＧｒａｓｓＦＴＯ ０．３トラン
スデューサーによってモニターした。オピオイド活性
は、化合物（Ｉ）添加後の収縮抑制と塩酸ナロキソン添
加による収縮抑制解除とによって判定した。なお、モル
モット回腸縦走筋の電気収縮を５０％抑制する濃度を測
定し、これをＩＣ50とした。また、マウスＭＶＤアッセ
イにおいて、モルモット回腸の代わりにマウス輸精管を
用いて同様の操作を行ない、マウス輸精管の電気収縮を
５０％抑制する濃度ＩＣ50を測定した。なお、ＧＰＩア
ッセイにおいては、オピオイド作用は主としてμ−オピ
オイド受容体によって仲介され、一方、ＭＶＤアッセイ
においては電気収縮の阻害はδ−オピオイド受容体との
相互作用によることが明らかにされているので、それぞ
れの電気収縮を５０％抑制する濃度は、アゴニスト効力
であるものとみなした。化合物（Ｉ）について得られた
結果を表２に示す。
【００２９】
【表２】表２．化合物（Ｉ）のμ及びδ−レセプターに
対するアゴニスト・アンタゴニスト活性 この結果から化合物（Ｉ）はアゴニストであることがわ
かる。
対するアゴニスト・アンタゴニスト活性 この結果から化合物（Ｉ）はアゴニストであることがわ
かる。
【００３０】実験例３ 動物実験による鎮痛効果：Ｈ.Ｔａｋａｇｉら（Europea
n J. Pahrmcol., 56, 205-208 (1979)）のマウス大槽内
注射法によって、被験薬のそれぞれを生理食塩水に溶解
した溶液を１０μl/マウスの用量でマウス大槽内(i.c.
v.)に投与し、次いでＨ.ＴａｋａｇｉらのＴａｉｌ Ｐ
ｒｅｓｓｕｒｅ法に従って、投与処置したマウス尾根部
に圧力測定装置（UGO BASILE社製）を用いて加圧し、そ
の圧力を徐々に高めて、マウスがもがき反応を起こすと
きの閾値圧を測定した。なおマウスは一群５匹とし、陽
性対照薬として塩酸モルヒネを用い、また大槽内投与直
後に回転運動を示したマウスは解析から除外した。実験
結果を閾値圧の時間経過のグラフとして図１−３に示
す。これらのグラフから、化合物（Ｉ）は０．０６μg/
マウスの用量で投与した場合、優れた鎮痛効果を発揮し
た。これは鎮痛効果の発現が早く、用量１μg/マウスの
塩酸モルヒネに匹敵し、持続性に関してはモルヒネのそ
れとは様式がやや異なることがわかる。また図３から化
合物（Ｉ）は塩酸ナルトレキソンの作用に拮抗すること
がわかる。
n J. Pahrmcol., 56, 205-208 (1979)）のマウス大槽内
注射法によって、被験薬のそれぞれを生理食塩水に溶解
した溶液を１０μl/マウスの用量でマウス大槽内(i.c.
v.)に投与し、次いでＨ.ＴａｋａｇｉらのＴａｉｌ Ｐ
ｒｅｓｓｕｒｅ法に従って、投与処置したマウス尾根部
に圧力測定装置（UGO BASILE社製）を用いて加圧し、そ
の圧力を徐々に高めて、マウスがもがき反応を起こすと
きの閾値圧を測定した。なおマウスは一群５匹とし、陽
性対照薬として塩酸モルヒネを用い、また大槽内投与直
後に回転運動を示したマウスは解析から除外した。実験
結果を閾値圧の時間経過のグラフとして図１−３に示
す。これらのグラフから、化合物（Ｉ）は０．０６μg/
マウスの用量で投与した場合、優れた鎮痛効果を発揮し
た。これは鎮痛効果の発現が早く、用量１μg/マウスの
塩酸モルヒネに匹敵し、持続性に関してはモルヒネのそ
れとは様式がやや異なることがわかる。また図３から化
合物（Ｉ）は塩酸ナルトレキソンの作用に拮抗すること
がわかる。
【００３１】
【発明の効果】本発明のオピオイドペプチド誘導体
（１）またはその塩は、文献に未記載の新規化合物であ
り、上記した試験法において確認されたようにオピオイ
ドレセプターに対する特異的親和性を有し、鎮痛効果な
ど種々のモルヒネ様生理活性を発現する。
（１）またはその塩は、文献に未記載の新規化合物であ
り、上記した試験法において確認されたようにオピオイ
ドレセプターに対する特異的親和性を有し、鎮痛効果な
ど種々のモルヒネ様生理活性を発現する。
【図１】 モルヒネの鎮痛効果を示す。
【図２】 本発明のペプチド誘導体の鎮痛効果を示す。
【図３】 本発明のペプチド誘導体と塩酸ナルトレキソ
ンの併用時の鎮痛効果を示す。
ンの併用時の鎮痛効果を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 津田 裕子 兵庫県明石市魚住町清水1440−１ (72)発明者 横井 利夫 兵庫県明石市荷山町1661−27 (72)発明者 岡田 芳男 兵庫県明石市朝霧台3776−122 (72)発明者 シャロン・ディ・ブライアント アメリカ合衆国27514ノースカロライナ州 チャペル・ヒル、オーク・トゥリー・ドラ イブ805番 (72)発明者 ローレンス・エイチ・ラザラス アメリカ合衆国27707ノースカロライナ州 ダーラム、モリッシュ・ヒル・ロード4840 番 (72)発明者 安保 明博 宮城県黒川郡富谷町明石台２−14−３ (72)発明者 佐々木 有亮 宮城県仙台市泉区加茂３−16−６ Ｆターム(参考） 4C086 AA01 AA02 AA03 BC48 MA01 MA04 NA14 ZA08 ZC03
Claims (5)
- 【請求項１】 下記式（１）で表されるオピオイドペプ
チド誘導体またはその塩。 【化１】 （式中、２，６−ジメチル−チロシル基はＬ体であり、
ｎは同一または異なって１−８を表す。） - 【請求項２】 式（１）において、ｎが４である請求項
１のオピオイドペプチド誘導体またはその塩。 - 【請求項３】 請求項１に記載のオピオイドペプチド誘
導体またはその塩を有効成分とする医薬。 - 【請求項４】 請求項１に記載のオピオイドペプチド誘
導体またはその塩を有効成分とする鎮痛剤。 - 【請求項５】 請求項２に記載のオピオイドペプチド誘
導体またはその塩を有効成分とする鎮痛剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000257244A JP2002069059A (ja) | 2000-08-28 | 2000-08-28 | ピラジノン環を含む新規なオピオイドペプチド誘導体 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000257244A JP2002069059A (ja) | 2000-08-28 | 2000-08-28 | ピラジノン環を含む新規なオピオイドペプチド誘導体 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002069059A true JP2002069059A (ja) | 2002-03-08 |
Family
ID=18745735
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000257244A Pending JP2002069059A (ja) | 2000-08-28 | 2000-08-28 | ピラジノン環を含む新規なオピオイドペプチド誘導体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2002069059A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003064375A1 (en) * | 2002-01-29 | 2003-08-07 | Teikoku Seiyaku Co., Ltd. | New opioid derivative |
| JP2012077083A (ja) * | 2010-09-30 | 2012-04-19 | Nicholas V Perricone | Ｓｚｅｔｏ−Ｓｃｈｉｌｌｅｒペプチドの局所麻酔的使用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH11512086A (ja) * | 1995-08-18 | 1999-10-19 | アストラ・アクチエボラーグ | 新規なオピオイドペプチド |
-
2000
- 2000-08-28 JP JP2000257244A patent/JP2002069059A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH11512086A (ja) * | 1995-08-18 | 1999-10-19 | アストラ・アクチエボラーグ | 新規なオピオイドペプチド |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003064375A1 (en) * | 2002-01-29 | 2003-08-07 | Teikoku Seiyaku Co., Ltd. | New opioid derivative |
| JP2012077083A (ja) * | 2010-09-30 | 2012-04-19 | Nicholas V Perricone | Ｓｚｅｔｏ−Ｓｃｈｉｌｌｅｒペプチドの局所麻酔的使用 |
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Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100907 |
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| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20110125 |