JP2001501925A - 自己免疫疾患に対する物質としてのタンパク質の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、動物の臓器から過塩素酸により抽出されたタンパク質の、自己免疫疾患、特にアテローム硬化症、関節炎、多発性硬化症、糖尿病に対して活性な医薬の調製のための使用。

Description

【発明の詳細な説明】 自己免疫疾患に対する物質としてのタンパク質の使用 本発明は、動物の臓器、特に哺乳動物の肝臓から抽出可能なタンパク質の、自 己免疫疾患、特にアテローム硬化症、関節炎、多発性硬化症、糖尿病に対して活 性な医薬の調製のための使用に関する。 完全フロイントアジュバントの投与は、慢性関節リューマチに酷似した実験的 関節炎をラットにおいて誘導し得ることが証明されている。一方、アジュバント のウサギへの投与は、関節炎病状ではなく、アテローム硬化症を誘導する。行わ れた研究は、どちらの病変においても、熱ショックタンパク質６０（ＨＳＰ６０ ）として同定された内因性因子に対する免疫反応性が存在することを実証した。 続く研究は、これらの観察を確認し、完全フロイントアジュバントの投与はＨＳ Ｐ６０の投与によって置換することができ、その結果同じ病状を導くことができ ることを証明した。その後、アジュバント、ＨＳＰ６０またはそのフラグメント によるラットの前処理は、依然として不明な機作であるものの、関節炎の発生を 予防し、一方、アジュバントに続く投与は疾患の進行を悪化させることが証明さ れた。 より最近になって、アジュバントでの前処理が、一般的に言って自己免疫疾患 と定義することができる他の実験的病状、例えば、糖尿病または実験的アレルギ ー性脳脊髄炎（ＥＡＥ）も予防することが証明された。最終的に、ＨＳＰ６０は 、多数の自己抗原に構造的類似性を有することがわかり、そのため、現在までに 観察されたものより幅広い病状に関連することが予想される。 ＷＯ９２／１０１９７は、過塩素酸によって哺乳動物の臓器から抽出可能なタ ンパク質画分、抗癌剤としてのそれらの使用を開示した。これらの画分中では、 ３つの主要な成分を同定することができ、それらはゲル電気泳動で分子量５０、 １４および１０KDaを有していた。これら３つの成分を含有する精製された抽出 物を、以下ではＵＫ１０１という。唯一ではないならメインである１４KDaタン パク質成分の配列は記載した活性の原因であって、それは以下の表１およびＷＯ ９６／０２５６７に報告され、他の著者により記載されたそれに関係しているこ とが判った（Levy-Favatier，Eur.Biochem．1903，212(3)665-73）のであ るが、それは、新規に同定された配列がシャペロニンとして知られているタンパ ク質のファミリー（それにはＨＳＰ自身も属している）に属することを予想して いた。 ＷＯ９２／１０１９７に記載されたタンパク質およびＷＯ９６／０２５６７の それら（以下ＵＫ１１４という）は、ともかく、シャペロニンまたは類似のタン パク質ではこれまで観察されなかった性質を示している。より具体的には、該タ ンパク質は自己免疫疾患、特にアテローム硬化状態、例えば、臓器移植により誘 導されたアテローム硬化症、関節炎、多発性硬化症および糖尿病の予防および処 置に用いることができることが見出された。 本発明は、好ましくは精製されたタンパク質ＵＫ１０１およびＵＫ１１４の、 臓器移植後のアテローム硬化症、関節炎、多発性硬化症および糖尿病のような自 己免疫疾患の予防および治療用医薬の調製のための使用に関する。 さらに、本発明は、ＵＫ１１４に対して少なくとも８０％、好ましくは少なく とも９０％という高い相同性の程度を示すタンパク質の使用を包含する。抗アテローム硬化活性 今日では、臓器移植の失敗のより頻繁な原因はもはや拒絶ではなく、移植され た臓器の血管と宿主のそれとの間の接触点でのじゅく状斑(atheroscleroticplaq ue)の形成であることが確かめられている。この病状は、サイクロスポリンのよ うな通常の免疫抑制剤により悪化するが、一方ＡＺＴ（非常に傷害性であるが） の使用は有用であるようである。 タンパク質ＵＫ１０１およびＵＫ１１４の活性は、従来のアテローム硬化症モ デル（完全フロイントアジュバントで前処理したウサギのそれ）および移植アテ ローム硬化症モデルの両方を用いて実証された。第１の症例の場合、アジュバン トによる皮下処置は、２１日以内にじゆく状斑の腸骨分岐部および大動脈弓での 形成を誘導した。ＵＫ１０１またはＵＫ１１４による前処理（７日前）は、アジ ュバントのみでの処置（全ての動物において疾患の進行を導く）と比較して、病 状の進行を高い百分率の症例において有意に妨げた。 一方、移植アテローム硬化の実験的モデルは、ラットにおいて、動脈レベルで 、 静脈バイパスからなる。短時間後、宿主の血管レベルでのじゅく状班の形成は、 それがヒトの病状において起こるように観察された。ＵＫ１０１またはＵＫ１１ ４による前処理（７日前）は、移植前に前処理をしなかった動物で観察されるも のと比較して、病状の進行を高い百分率の症例において有意に阻害した。抗関節炎活性 この活性は、従来の関節炎モデル（アジュバントで誘導した関節炎）を用いて 証明された。このモデルでは、Lewisラットに尾基部に完全フロイントアジュバ ントを注射した：７日以内に、後肢に病状が現われ、膨張および間接変性により 特徴付けられた。病状は第１４日〜第２１日目にそのピークに達し、その後肢が 正常な状態に戻るまで低下した。ＵＫ１０１またはＵＫ１１４による前処理（７ 日前）は、１００％の動物で病状の進行を導くアジュバントのみでの処置と比較 して、高い百分率の症例において病状の進行を妨げた。アジュバント投与後のＵ Ｋ１０１またはＵＫ１１４での処置は病状の進行を悪化させた。 したがって、ＵＫ１０１およびＵＫ１１４は、関節炎および慢性関節リューマ チのような病状の進行を改変するか、あるいは、それを妨げることができると考 えられる。多発性硬化症に対する活性 これは、従来の多発性硬化症モデル：実験的アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ） を用いて証明した。この病状は、Lewisラットの皮下にモルモットの脊髄ホモジ ネートを完全フロイントアジュバントと共に注射することにより誘導される。病 状は、後肢から始まる進行性麻痺として現れ（免疫原の投与から約１２日目に始 まる）、約第２１日目に最大に達し、約第３０日目に緩解を受ける。ＵＫ１０１ またはＵＫ１１４での前処理（７日前）は、１００％の動物で病状の進行を導く 骨髄ホモジネートとアジュバントでの処置と比較して、高い百分率の症例で病状 の進行を妨げ、重篤度のより低い病状が現われた。 したがって、ＵＫ１０１およびＵＫ１１４は、多発性硬化症のような病状の進 行を変化させるか、あるいは妨げることができると考えられる。抗糖尿病活性 これは、誕生の４５日付近で自発的に糖尿病を発生するＢＢラットにより示さ れる従来の糖尿病モデルを用いて証明された。この動物を、誕生の３０日目にＵ Ｋ１０１またはＵＫ１１４で処置し、病状の進行を未処理の対照動物と比較して 観察した。前処理は実験モデルにおける発病率および病状の重篤度を低下させる ことが見出された。異なる部位で腫瘍におかされており、さらに糖尿病にも罹っ ている幾人かの患者を、ＵＫ１０１による特別処置のコースにおいてこの物質に より処置した。処置した全ての患者が、腫瘍の病状に対する効果とは独立して、 インスリン治療を辞める程に糖尿病の病状の緩解を示した。 したがって、ＵＫ１０１およびＵＫ１１４は糖尿病の経緯を変化させるかそれ を予防することができると考えられる。 抗糖尿病活性は、実際に、今日までその件数は限られているが、糖尿病に罹っ ている患者においてin vivoで確認された。 本発明のタンパク質は、適切な処方、主に注射可能なものを用いて投与するこ とができる。 投与のパターン（投与の用量、頻度など）は、患者の状態、疾患の時期などの 要因に応じて、状況により決定されるが、通常、一日当たり１〜１００ｍｇが適 切であろう。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (31)優先権主張番号 ＭＩ９６Ａ００１９２１ (32)優先日 平成８年９月18日(1996．9．18) (33)優先権主張国 イタリア（ＩＴ） (31)優先権主張番号 ＭＩ９６Ａ００１９２２ (32)優先日 平成８年９月18日(1996．9．18) (33)優先権主張国 イタリア（ＩＴ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ， ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，Ｆ Ｉ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ， ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，Ｍ Ｗ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ， ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．哺乳動物肝臓から過塩素酸により抽出可能なタンパク質の、自己免疫疾患に 対して活性な医薬の調製のための使用。 ２．タンパク質が以下の配列： を有する、請求項１記載の使用。 ３．用いるタンパク質が、請求項２記載のタンパク質と少なくとも８０％の相同 性を有する請求項１記載の使用。 ４．活性成分として請求項１〜３のいずれか１項記載のタンパク質を適切な賦形 剤との混合物で含む医薬組成物。 ５．移植後のアテローム硬化症の予防および処置用医薬の調製のための請求項１ 記載の使用。 ６．関節炎の予防および処置用医薬の調製のための請求項１記載の使用。 ７．多発性硬化症の予防および処置用医薬の調製のための請求項１記載の使用。 ８．糖尿病の予防および処置用医薬の調製のための請求項１記載の使用。