JP2001500853A - Pharmaceutical compounds - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は微小管系を崩壊するために、抗新生物薬剤として、また癌の治療のために使用できる新規クリプトフィシン化合物を提供する。本発明はさらにこれらの新規クリプトフィシン化合物を投与するための製剤を提供する。   (57) [Summary] The present invention provides novel cryptophysin compounds that can be used to disrupt the microtubule system, as antineoplastic agents, and for treating cancer. The present invention further provides formulations for administering these novel cryptophysin compounds.

Description

【発明の詳細な説明】 医薬化合物 この発明は医薬品および有機化学の分野に関し、抗微小管薬として有用な新規 クリプトフィシン（ｃｒｙｐｔｏｐｈｙｃｉｎ）化合物を提供する。 新生物病はその細胞の増殖に正常な制御を受けない細胞の増殖によって特徴付 けられ、ヒト、およびその他の哺乳類における死因の主なものである。癌の化学 療法における臨床的経験はこの疾患を処置するためには新規でさらに有効な薬剤 が必要であることを証明している。 真核生物細胞の微小管系は細胞骨格の主な構成成分であって、動的な集合およ び分解である。これはチューブリンのヘテロダイマーであって、重合して微小管 を形成する。微小管は細胞の構造、代謝および***の制御において鍵となる役割 を演じている。微小管の動的状態はその正常な機能に対して決定的である。細胞 ***に関しては、チューブリンが重合して微小管となり、それが有糸***の紡錘 体を形成する。有糸***での紡錘体の利用が終了するとこの微小管は次に解重合 する。従って、微小管の重合または解重合を妨害し、それで有糸***を阻害する 薬剤は臨床的使用に最も有効な癌の化学療法剤を包含する。 これに加えて、本発明の化合物は殺糸状菌作用も示す。さらにこの微小管系を 阻害する性能を有するこれら薬剤は研究目的のためにも使用できる。 ある種のクリプトフィシン化合物は文献公知である。しかしながら、溶解性お よび安定性がさらに高いクリプトフィシン化合物が望ましい。さらに、クリプト フィシン化合物の種類がさらに広範囲であれば癌患者に別の治療法を追加できよ う。本発明者は今回、全合成法を使用して製造でき、従って、医薬的に有用な薬 剤として開発するために好適な、新規なクリプトフィシン化合物を発見した。こ のクリプトフィシン環系は商業的に購入できるアミノ酸を使用して好都合に完成 されるものである。 本発明は式Ｉ：［式中、 Ａｒはフェニルまたは単純な非置換、置換の芳香族、ヘテロ芳香族基、Ｃ₁〜Ｃ_{1 2} −アルキル、Ｃ₂〜Ｃ₁₂−アルケン、Ｃ₂〜Ｃ₁₂−アルキン、ＮＲ⁵¹Ｒ⁵²、ＯＲ^{5 3} 、および式Ａｒ’： で示される基から構成される群から選択される。 Ｒ⁵¹は水素およびＣ₁〜Ｃ₃−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁵²は水素およびＣ₁〜Ｃ₃−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁵³はＣ₁〜Ｃ₁₂−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁵⁴は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、単純な芳香族、フェニル、ＣＯＯＲ⁵⁷、ＰＯ₃ Ｈ、ＳＯ₃Ｈ、ＳＯ₂Ｒ⁵⁸、ＮＲ⁵⁹Ｒ⁶⁰、ＮＨＯＲ⁶¹、ＮＨＣＨＲ^61'、ＣＮ、Ｎ Ｏ₂、ハロゲン、ＯＲ⁶²、およびＳＲ⁶³から構成される群から選択される。 Ｒ⁵⁵は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、単純な芳香族、フェニル、ＣＯＯＲ⁵⁷、ＰＯ₃ Ｈ、ＳＯ₃Ｈ、ＳＯ₂Ｒ⁵⁸、ＮＲ⁵⁹Ｒ⁶⁰、ＮＨＯＲ⁶¹、ＮＨＣＨＲ^61'、ＣＮ、Ｎ Ｏ₂、ハロゲン、ＯＲ⁶²、およびＳＲ⁶³から構成される群から選択される。 Ｒ⁵⁶は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、単純な芳香族、フェニル、ＣＯＯＲ⁵⁷、ＰＯ₃ Ｈ、ＳＯ₃Ｈ、ＳＯ₂Ｒ⁵⁸、ＮＲ⁵⁹Ｒ⁶⁰、ＮＨＯＲ⁶¹、ＮＨＣＨＲ^61'、 ＣＮ、ＮＯ₂、ハロゲン、ＯＲ⁶²、およびＳＲ⁶³から構成される群から選択され る。 Ｒ⁵⁷は水素およびＣ₁〜Ｃ₁₂−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁵⁸は水素およびＣ₁〜Ｃ₁₂−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁵⁹は水素、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルおよびフルオレニルメトキシカルボニル（ ＦＭＯＣ）から構成される群から選択される。 Ｒ⁶⁰は水素および（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁶¹は水素、ＯＲ⁶⁴、ＣＨ₂ＮＨＲ⁶⁵、ＮＨＲ⁶⁵、およびフルオレニルメトキシ カルボニル（ＦＭＯＣ）から構成される群から選択される。 Ｒ^61'は水素、ＯＲ⁶⁴、ＣＨ₂ＮＨＲ⁶⁵、ＮＨＲ⁶⁵およびフルオレニルメトキシカ ルボニル（ＦＭＯＣ）から構成される群から選択される。 Ｒ⁶²は水素およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキルから選択される。 Ｒ⁶³は水素およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキルから選択される。 Ｒ⁶⁴は水素、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル、ＣＨ₂ＮＲ⁶⁶Ｒ⁶⁷から構成される群から 選択される。 Ｒ⁶⁵は水素およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキル、ＮＨ₂、およびフルオレニルメトキシカ ルボニル（ＦＭＯＣ）から構成される群から選択される。 Ｒ⁶⁶は水素およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキルおよびフルオレニルメトキシカルボニル（ ＦＭＯＣ）から構成される群から選択される。 Ｒ⁶⁷は水素およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ¹およびＲ²はおのおの独立にハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、アミノ、モノ（Ｃ₁〜Ｃ₆ ）−アルキルアミノ、ジ（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルアミノ、トリ（Ｃ₁〜Ｃ₆）−ア ルキルアンモニウム、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルチオ、ジ（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル スルホニウム、スルフェート、ホスフェート、ＯＲ³¹、およびＳＲ³¹から構成さ れる群から選択される［但し、Ｒ¹およびＲ²から構成される群から選択されるも のの１個はＯＨ、ＳＨ、ＯＲ³¹およびＳＲ³¹から構成される群から選択されるも のとする］か、または Ｒ¹とＲ²とは一緒になってエポキシド環、アジリジン環、エピスルフィド環、ス ルフェート環、シクロプロピル環またはモノアルキルホスフェート環を形成し てもよく、または Ｒ¹とＲ²とはＣ₁₈およびＣ₁₇と一緒になって、Ｃ₁₈とＣ₁₇との間の第二の結合を 形成してもよい。 Ｒ³は低級アルキル基である。 Ｒ⁷はＨ、低級アルキル基、およびＤ−およびＬ−アミノ酸の側鎖全てから構成 される群から選択される。 Ｒ³¹はＰ、Ｓ、（Ｃ₁〜Ｃ₁₂）−アルキル、Ｂ、Ｒ³²、およびＳｉから構成され る群から選択される。 Ｒ³²はアミノ酸、炭水化物、アミノ糖、（サッカライド）_q、 Ｃ（Ｏ）（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル−Ｒ³⁸、および式： で示される基から構成される群から選択される。 Ｒ³⁴は（Ｃ₁〜Ｃ₄）−アルキルである。 Ｒ³⁵は水素または（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキルである。 Ｒ³⁶はＯＨ、ハロ、（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル、ＯＲ³⁴、ＮＯ₂、ＮＨ₂、またはヘ テロ芳香環である。 Ｒ³⁸はＣＯＯＲ³⁹、式： で示される基、ＮＨ₂、またはアミノ酸である。 Ｒ³⁹はＨまたは（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルである。 Ｒ⁴⁰、Ｒ⁴¹、およびＲ⁴²はおのおの水素、ＯＲ⁴³、ハロ、ＮＨ₂、ＮＯ₂、ＯＰＯ₃ （Ｒ⁴⁶）₂、−Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルフェニル、およびＲ⁴⁵から構 成される群から独立に選択される。 Ｒ⁴³はＣ₁〜Ｃ₆−アルキルである。 Ｒ⁴⁵は芳香族基および置換芳香族基から構成される群から選択される。 Ｒ⁴⁶はＨ、Ｎａ、および−Ｃ（ＣＨ₃）₃から構成される群から選択される。 ｑは２、３、または４である］ で示される新規クリプトフィシン化合物またはその医薬的に許容される塩を提供 する。 本発明は医薬製剤、式Ｉで示される化合物の有効量を使用して微小管系を崩壊 する方法、式Ｉで示される化合物の有効量を投与することを包含する哺乳類細胞 の増殖を阻止する方法、および式Ｉで示される化合物の有効量を投与することを 包含する哺乳類の新生物病を処置する方法を提供する。また、カビによる感染症 に罹患した、または感染のおそれある動物に抗カビ的有効量の式Ｉで示される化 合物を投与することからなる微生物感染症を制御する方法も提供する。 本明細書で使用する用語「単純なアルキル」は飽和または不飽和の、分枝鎖ま たは直線状鎖であってもよいＣ₁〜Ｃ₇−アルキルを示すものとする。決してこれ らに限定するものではないが、その例としてはメチル、エチル、ｎ−プロピル、 イソプロピル、ｎ−ブチル、プロペニル、エテニル、ｓｅｃ−ブチル、ｎ−ペン チル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、メチル化されたブチル 基、ペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、メチル化されたペンチ ル基、その他も包含する。用語「アルケニル」は二重結合を１個から３個有する 前記定義のアルキル基を示す。用語「アルキニル」は少なくとも１個の三重結合 を有する前記定義のアルキル基を示す。アルキニルが三重結合を１個だけを有す るのは特に好ましい。ｎ’が１から１２までの整数である用語Ｃ₁〜Ｃ_n'−アル キルは１個から指定された数までの炭素原子を有するアルキル基を意味する。こ のＣ₁〜Ｃ_n'−アルキルは直線状鎖または分枝状鎖であることができる。 本明細書で使用する用語「Ｄ−およびＬ−アミノ酸」は次のアミノ酸のＤ−型 およびＬ−型の双方を示し、包含する：アラニン、ロイシン、イソロイシン、バ リン、セリン、グルタメート、グルタミン、アスパルテート、トリプトファン、 リジン、アルギニン、チロシン、ヒスチジン、メチオニン、フェニルアラニン、 アスパラギン、システイン、グリシン、プロリン、およびスレオニン。従って、 用語「Ｄ−およびＬ−アミノ酸の側鎖全て」は有機酸基およびアミノ基の両方に 結合する炭素に結合している基を意味する。例えば、これらに限定するものでは ないが、アラニンの−ＣＨ₃、ロイシンのＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）₂、などである。 本明細書で使用する用語「アミノ酸」はアミノ基を含む有機酸を意味する。こ の用語は天然起源のおよび合成の両方のアミノ酸を包含するので、そのアミノ基 は必ずしもそうでなくてもよいが、酸の隣に結合する炭素に結合することができ る。このアミノ酸基は酸官能基を経て母核分子に結合する。この用語は、決して これらに限定するものではないのであるが、（ＣＨ₂）₂ＮＨ₂ＣＯＯＨ、ＣＨ₂Ｃ Ｈ（ＮＨ₂）ＣＨ₂ＣＯＯＨ、ＣＨ₃ＣＨ₂（ＮＨ₂）ＣＨ₂ＣＯＯＨ、ＣＨ₃ＳＣＨ₂ ＣＨ₂（ＮＨ₂）ＣＨＣＯＯＨ、その他も示すものとする。 本明細書で使用する用語「炭水化物」は炭素、水素、および酸素からなる一群 の置換基を示すが、その水素と酸素との比率は水と同じ比率であるか、または水 と同じ比率に近いものである。用語「炭水化物」はさらにアルデヒドまたはケト ン−アルコールであるか、または加水分解によってアルデヒドまたはケトンを産 生する化合物を示す。用語「炭水化物」は熟練した専門家が共通に理解するもの である。この用語は決してこれに限定するものではないが、例えばＣ₁₂Ｈ₂₂Ｏ₁₁ およびＣ₆Ｈ₁₀Ｏ₅なども示す。 本明細書で使用する用語「アミノ糖」は炭水化物分子上の可能な位置のどこか にアミノ置換基を１個から３個含有する炭水化物基を示す。 本明細書で使用する用語「サッカライド」は二糖類または多糖類を形成するた めの炭水化物サブユニットを示す。この用語は決してこれに限定するものではな いが、例えば乳糖、麦芽糖、ショ糖、果糖、澱粉、その他も意味する。 本明細書で使用する用語「置換フェニル」は単純なアルキル、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ およびＩから構成される群から独立に選択されたものであってもよい非炭化水素 性置換基を１個から３個を有するフェニル基を示すものとする。 本明細書で使用する用語「置換ベンジル」は単純なアルキル、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ およびＩから構成される群から独立に選択されたものであってもよい非炭化水素 性置換基を１個から３個を有するベンジル基を示すものとする。ここに、これら の置換基は可能な炭素原子のいずれに結合していてもよいものとする。 本明細書で使用する用語「シクロアルキル」は飽和Ｃ₃〜Ｃ₈−シクロアルキル 基を示し、この基はＣ₁〜Ｃ₃−アルキル、ハロ、およびＯＲ²²から構成される群 から選択された０個から３個の置換基を有していてもよい。このＲ²²は水素およ びＣ₁〜Ｃ₃−アルキルから選択される。この置換基は可能な炭素原子のいずれに 結合していてもよい。特に好適には、このシクロアルキルは置換または非置換の シクロヘキシルを示す。 本明細書で使用する用語「低級アルコキシル基」は酸素原子に結合する炭素原 子１個から５個までを有するアルキル基のいずれかを意味する。本明細書で使用 する用語「低級アルキル基」は炭素原子１個から６個までを有するアルキル基を 意味し、直線状または非直線状炭化水素鎖を包含し、これらに限定するものでは ないが、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチ ル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、メチル化されたブチル基、ペンチル、 ｔｅｒｔ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、およびメチル化されたペンチル基など を含む。本明細書で使用する用語「アリル置換アルケン」はアリル性の置換を含 む炭素原子１個から７個までを有するアルケンのいずれかを意味する。本明細書 で使用する用語「不飽和低級アルキル」は、Ｃ₁は明らかに構想外であるが、そ の不飽和低級アルキル置換基の中に１個から２個までの二重結合が存在する前記 に定義の低級アルキル基を意味する。好適な不飽和低級アルキルは−ＣＨ₂−Ｃ Ｈ＝ＣＨ₂である。用語「低級アルキル−Ｃ₃〜Ｃ₅−シクロアルキル」はＣ₃〜Ｃ₅ −シクロアルキル基で置換されたＣ₁〜Ｃ₆−アルキルを示す。好適な低級アル キル−Ｃ₃〜Ｃ₅−シクロアルキル基は−ＣＨ₂−シクロプロピルであって、この 基はクリプトフィシン化合物の骨格構造のＲ⁹にＣＨ₂を介して結合している。 本明細書で使用する用語「エポキシ環」は骨格が炭素２個および酸素原子１個 から構成される三員環を意味する。本明細書で使用する用語「アジリジン環」は 骨格が炭素２個および窒素原子１個から構成される三員環を意味する。本明細書 で使用する用語「スルフィド環」は骨格が炭素２個および硫黄原子１個から構成 される三員環を意味する。本明細書で使用する用語「エピスルフィド環」は骨格 が炭素２個および硫黄原子１個から構成される三員環を意味する。本明細書で使 用する用語「スルフェート基」は炭素−炭素−酸素−硫黄−酸素骨格から構成さ れており、この硫黄原子に結合する追加的酸素原子２個を有する５員環を意味す る。本明細書で使用する用語「シクロプロピル環」は骨格が炭素原子３個から構 成される三員環を意味する。本明細書で使用する用語「モノアルキルホスフェー ト環」は炭素−炭素−酸素−燐−酸素骨格から構成されており、この燐原子に結 合する追加的酸素原子２個を有し、その中の１個が低級アルキル基を持っている ５員環を意味する。 本明細書で使用する「単純な非置換芳香族基」は単環の共役系内に４ｎ＋２電 子を有する通常の芳香族環を示し、これに限定するものではないが、例えばフェ ニル、フリル、ピロリル、チエニル、ピリジル、その他、または双環系、これに 限定するものではないが、例えばインドリルまたはナフチルなどである。 本明細書で使用する「単純な置換芳香族基」はハロゲンおよび低級アルキル基 から構成される群から選択された１個の基で置換されたフェニル基を示す。 本明細書で使用する「ヘテロ芳香族基」は酸素、窒素、および硫黄から構成さ れる群から選択された非炭素置換を１個またはそれ以上含む芳香環を示す。これ に限定するものではないが、３員から８員を有する芳香環であって、その環系の 少なくとも１員がヘテロ原子であり、その環系のその余の員が炭素であるものが 最も好適である。 本明細書で使用する「ハロゲン」または「ハロ」は周期律表で歴史的にハロゲ ンとして知られている基の構成員を示す。ハロゲン化方法には、これに限定する ものではないが、ハロゲン化水素の付加反応、高温での置換、光ハロゲン化、そ の他を包含するが、これらの方法は熟練した専門家には知られている。 本明細書で使用する用語「哺乳類」は、高等脊椎動物の哺乳類を示すものとす る。用語「動物」には、これに限定するものではないが、哺乳類、爬虫類、両生 類、および魚類を包含するものとする。用語「哺乳類」は、これに限定するもの ではないが、ヒトを包含する。本明細書で使用する用語「処置」は指定した病状 の予防または一旦樹立した病状の緩和または排除を包含する。本明細書で請求す るクリプトフィシン化合物は動物の保健の目的のため、ならびにヒトである患者 の処置のために有用であることができる。 この発明の化合物を製造する工程は最も好ましくは溶媒の存在下に実行する。 熟練した専門家は標準的な方策を使用して適当な溶媒を選択できる。適当な不活 性有機溶媒には、これらに限定するものではないが、例えばテトラヒドロフラン （ＴＨＦ）およびジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）など、熟練した専門家に知ら れているものを含む。ＤＭＦは特に好適である。水性溶媒は本明細書で利用する 工程のいずれかのために適当なものもあるかもしれない。所望ならばその工程を 推進するために、このような水性溶媒のｐＨを調節してもよい。 この発明の好適な特徴点を次に表形式で示すが、その特徴を独立に選択して、 この発明の好適な態様を提供してもよい。この発明は決して次の特徴に限定され るものではない： Ａ）Ｒ⁶がクロロ メトキシ フェニルである； Ｂ）Ｒ⁷がエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチルま たはイソペンチルである； Ｃ）Ｒ⁷がイソプロピルである； Ｄ）Ｒ³がメチルである； Ｅ）Ａｒ’がＮＲ⁵⁹Ｒ⁶⁰、ＮＨＯＲ⁶¹、ＮＨＣＨＲ^61'から構成される群から選 択された置換基を有するフェニルである； Ｆ）Ｒ¹およびＲ²がエポキド環を形成する； Ｇ）Ｒ⁷がメチルである； Ｈ）Ｒ²がグリシネートである； Ｉ）Ｒ²がアシレートである； Ｊ）式Ｉで示される化合物が微小管系の崩壊のために使用される； Ｋ）式Ｉで示される化合物が抗新生物剤として使用される； Ｌ）式Ｉで示される化合物が哺乳類の癌の処置に使用される； Ｍ）式Ｉで示される化合物が抗カビ剤として使用される； Ｎ）式Ｉで示される化合物が抗細菌剤として使用される； Ｏ）Ａｒがフェニルである； Ｐ）ＡｒがＯＨ、ＯＣＨ₃、ハロ、およびメチルから構成される群から選択され た基の１個または２個で置換されたフェニルである； Ｑ）Ｒ²がハロゲン、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリア ルキルアンモニウム、アルキルチオ、ジアルキルスルホニウム、スルフェート、 ホスフェート、ＯＲ³¹、およびＳＲ³¹から構成される群から選択される。 Ｒ）式Ｉで示される化合物がカビ感染症の治療に使用される； Ｓ）Ａｒ’がパラ エチル 置換フェニルである；および Ｔ）Ａｒ’がパラ メチル 置換フェニルである。 本発明は対象に本明細書に開示する医薬的または動物薬的な組成物の有効量を 投与して細胞の増殖を阻止することを包含する哺乳類細胞の過剰増殖に起因する 病理学的状態の緩和方法を提供する。この発明の好適な態様の一つにおいては、 本方法はさらにその病理学的状態を緩和することを指向する治療剤を少なくとも １種追加して対象に投与することを包含する。この発明の好適な態様の一つにお いては、その病理学的な状態が新生物の形成によって特徴付けられる。本発明の さらに好適な態様においてはこの新生物は乳腺、肺小胞、肺非小胞、大腸直腸、 白血病、黒色腫、膵臓のアドレノカルチノマ、中枢神経系（ＣＮＳ）、卵巣、前 立腺、軟部組織または骨、頭部または頚部の肉腫、膵臓および食道を含む胃部、 胃、骨髄腫、膀胱、腎臓、甲状腺を含む神経内分泌、および非ホジキン病および ホジキン病などの新生物から構成される群から選択される。 本明細書で使用する「新生物」は細胞の異常増殖である新生物を示し、この増 殖は正常な増殖制限の対象にならないために発生する。本明細書で使用する「抗 新生物剤」は細胞の新生物的表現型を阻止し、除去し、遅延させ、または逆転す る化合物、組成物、混合物、共混合物、または配合物のいずれかである。 抗有糸***剤はその作用の分子的機構に基づいて３群に分類される。第一の群 はコルヒチンおよびコルセミドを含む薬剤からなり、チューブリンを封鎖するこ とによって微小管の形成を阻止する。第二の群はビンブラスチンおよびビンクリ スチンを含む薬剤からなり、チューブリンのパラクリスタル的集合形成を誘導す る。ビンブラスチンおよびビンクリスチンは良く知られている抗癌剤であって、 その有糸***紡錘体微小管を崩壊する作用は過剰増殖細胞を優先的に阻害する。 第三の群はタキソールを含む薬剤からなり、チューブリンの重合を促進して微小 管を安定化させる。 多数の腫瘍細胞による薬剤耐性および多重薬剤耐性表現型の発現および新生物 に対する抗微小管薬剤の臨床的に証明された作用機序は薬剤非耐性新生物細胞に 細胞毒性を示し、同様に薬剤耐性の表現型を有する新生物細胞に細胞毒性を示す 抗微小管薬剤の開発を要求している。 癌の治療に当たっては、化学療法、外科手術、放射線療法、生物学的応答修飾 剤による治療、および免疫療法が現在使用されている。治療の各態様にはその分 野における通常の専門家に知られている特定の適用があり、新生物細胞の完全な 破壊に到達するための試みにはそれらの１種または全部を採用してもよい。さら に、組合せ的化学療法、すなわち式Ｉで示される化合物をその他の新生物剤と組 み合わせて利用する化学療法も本発明の主題によって提供され、組合せ療法は単 一の抗新生物剤よりも一般に有効性が高い。そこで、本発明の別の側面は非毒性 付加塩を含む前記の利点を提供する、式Ｉで示される化合物少なくとも１種の治 療的有効量を含む組成物を提供する。この組成物はまた生理学的に許容される液 剤、ゲル剤、または固体担体、希釈剤、アジュバントおよび添加剤と共に提供さ れる。この担体、アジュバントおよび添加剤は米国薬局方ＸＸＩＩ版、米国民医 薬品集ＸＶＩＩ版、Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ・Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ 社、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ（１９８９年）にも記載されている。その他の処 置法は「ＡＨＦＳ・Ｄｒｕｇ・Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＡＨＦＳ社医薬品情報 ）」、１９９３年版、Ａｍｅｒｉｃａｎ・Ｈｏｓｐｉｔａｌ・Ｆｏｒｍｕｌａｒ ｙ・Ｓｅｒｖｉｃｅ社、５２２〜６６０頁に記載されている。これらの文献はい ずれも熟練した専門家には良く知られており、容易に入手できる。 本発明はさらに、式Ｉで示される化合物少なくとも１種および別の抗新生物剤 少なくとも１種を含有し、新生物病を処置するために使用される医薬的組成物を 提供する。式Ｉで示される化合物と組合せて使用してもよい抗新生物薬剤には、 「Ｍｅｒｃｋ・Ｉｎｄｅｘ（メルクインデックス）」、１１版、１６〜１７頁、 Ｍｅｒｃｋ社（１９８９年）に記載されているものを包含する。この「Ｍｅｒｃ ｋ・Ｉｎｄｅｘ」は広く認められており、熟練した専門家には容易に入手可能で ある。 この発明の別の態様においては、抗新生物剤は、決してこれらに限定されるも のではないが、メトトレキセート、５−フルオロウラシル、６−メルカプトプリ ン、シトシン・アラビノシド、ヒドロキシウレア、および２−クロロデオキシア デノシンから構成される群から選択されるものを包含するものであってもよい、 抗代謝剤であってもよい。本発明の別の態様においては、意図される抗新生物剤 は、決してこれらに限定されるものではないが、シクロホスファミド、メファラ ン、ブスルファン、パラプラチン、クロロアンブシル、およびナイトロゲンマス タードから構成される群から選択されるものを包含するものであってもよい、ア ルキル化剤である。さらに別の態様においては、この抗新生物剤は、決してこれ らに限定されるものではないが、ビンクリスチン、ビンブラスチン、タキソール およびエトポシドから構成される群から選択されるものを包含するものであって もよい、植物アルカロイドである。さらに別の態様においては、意図されるこの 抗新生物剤は、決してこれらに限定されるものではないが、ドキソルビシン、ダ ウノルビシン、マイトマイシンＣ、およびブレオマイシンから構成される群から 選択されるものを包含するものであってもよい、抗生物質である。さらに別の態 様においては、意図するこの抗新生物剤は、決してこれらに限定されるものでは ないが、カルステロン、ディオモスタノボロン・プロピオネート、エピチオスタ ノール、メピチオスタン、テストロラクトン、タモキシフェン、ポリエストラジ オール・ホスフェート、メゲステロール・アセテート、フルタミド、ニルタミド およびトリロタンから構成される群から選択されるものを包含するものであって もよい、ホルモンである。 さらに別の態様においては、意図されるこの抗新生物剤は、決してこれらに限 定されるものではないが、Ｌ−アスパラギナーゼおよび、たとえばこれに限定す るものではないがアムサクリンのようなアミノアクリジン誘導体から構成される 群から選択されるものを包含するものであってもよい、酵素である。その他の抗 新生物剤には「Ｈａｎｄｂｏｏｋ・ｏｆ・Ｃａｎｃｅｒ・Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａ ｐｙ（癌化学療法ハンドブック）」、３版、Ｌｉｔｔｌｅ・Ｂｒｏｗｎ社（１９ ９１年）、Ｓｋｅｅｌ，Ｒｏｌａｎｄ−Ｔ．著、「Ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉ ｃ・Ｄｒｕｇｓ・ａｎｄ・Ｂｉｏｌｏｇｉｃ・Ｒｅｓｐｏｎｓｅ・Ｍｏｄｉｆｉ ｅｒ：Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ，Ｕｓｅ・ａｎｄ・Ｔｏｘｉｃｉｔｙ・ｏ ｆ・Ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ・Ｕｓｅｆｕ・Ａｇｅｎｔｓ（抗新生物剤および生物 学的応答修飾剤：臨床的に有用な薬剤の分類、用法および毒性）」に掲載されて いるものを包含する。 これらの化合物および組成物は動物薬的使用の目的で哺乳類に投与することが できる。例えば、家畜動物はヒトの臨床的患者と殆ど同一の方法で処置できる。 一般に、治療的効果に必要な用量は使用の形態、投与の態様、ならびに個々の宿 主の特定的な必要性に従って変動するものである。典型的にはその用量は約０． ００１から１０００ｍｇ／ｋｇ宿主体重までの範囲、さらに通常には０．０１か ら１０ｍｇ／ｋｇ宿主体重までの範囲にある。または、これとは別に、これらの 範囲内の用量は所望の利益が得られるまで、一時にまたはＩＶ注射として、投与 できる。事実、薬剤用量ならびに投与経路は相対的な有効性、相対的な毒性、腫 瘍の増殖特性および式Ｉで示される化合物が細胞周期におよぼす効果、薬剤の薬 力学、患者の年齢、性、身体的状況、およびそれ以前の処置に基づいて選択しな ければならず、これらは熟練した専門家が決定できる。 式Ｉで示される化合物は別の抗新生物剤とともに、または別の抗新生物剤なし に、そのままでまたは塩の型で治療用組成物に製剤化してもよい。医薬的に許容 される非毒性塩は、例えばナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、 第二鉄の水酸化物のような無機塩基から誘導されるもの、およびイソプロピルア ミン、トリエチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカイ ン、その他のような有機塩基から誘導されるものであってもよい、塩基の付加塩 を包含する。許容される非毒性塩はまた遊離のカチオン性基との酸付加塩として 形成されたものであってもよく、一般には例えば塩酸または燐酸のような無機酸 または、たとえば酢酸、シュウ酸、酒石酸、マンデル酸、その他のような有機酸 と共に形成されるものである。さらに本発明が熟練した専門家に提供する追加的 添加剤は、例えば米国薬局方に見出される。 ある担体がある治療用組成物に加えるために適当かどうかは採用する投与経路 に依存する。例えば、抗新生物用組成物は経口投与用に製剤化してもよい。この ような組成物は典型的には液剤または懸濁剤としてまたは固体の剤型中に製剤化 される。通常、経口投与用製剤は結合剤、充填剤、担体、保存剤、安定化剤、乳 化剤、緩衝剤、マンニトール、乳糖、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、サッカ リンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウム、その他のような添加剤を含有 する。これらの組成物は液剤、懸濁剤、錠剤、ピル剤、カプセル剤、持続性放出 用製剤、または粉剤の形であってもよく、典型的には活性成分を１％から９５％ 含有する。さらに好ましくはこの組成物は約２％から約７０％の活性成分を含有 する。 本発明の組成物は液剤、懸濁剤、または乳液剤のいずれかとして注射剤に製剤 化してもよい。固体の製剤は注射の前に液体中に溶解し、または懸濁するのに適 当である。このような注射剤は皮下注射、静脈注射、腹腔注射、筋肉内注射、ク モ膜下注射、または胸膜腔内注射として投与してもよい。活性成分または添加剤 には生理学的に許容され、活性成分と適合する希釈剤、担体、または添加剤を混 合することが多い。適当な希釈剤および添加剤は、例えば水、食塩水、デキスト ロース、グリセリン、その他およびこれらの組合せである。これに加えて、所望 ならばこれらの組成物は、たとえば湿潤化剤または乳化剤、安定化剤またはｐＨ 緩衝化剤など少量の補助剤を含有していてもよい。 本発明はさらに、哺乳類細胞の増殖を阻止するために十分な量の式Ｉで示され る化合物とこれらの細胞とを接触させることによって、哺乳類細胞の増殖を阻止 するために式Ｉで示される化合物を使用する方法を提供する。好適な態様の一つ は過剰増殖している哺乳類細胞の増殖を阻止する方法である。この発明の目的に は「過剰増殖している哺乳類細胞」は哺乳類細胞であって、増殖の特徴的な制限 （例えばプログラムされた細胞死）の対象とならないものである。さらに好適な 態様ではこの哺乳類細胞がヒトのものである。本発明はさらに式Ｉで示される化 合物少なくとも１種および少なくとも１種の抗新生物剤と哺乳類細胞とを接触す る方法を提供する。ここに意図する抗新生物剤の型は前記した。 本発明はさらに多剤耐性表現型を含む薬剤耐性表現型を有する過剰増殖哺乳類 細胞の増殖を阻止するために十分な量で、式Ｉで示される化合物とこの細胞とを 接触させることによって過剰増殖細胞の増殖を阻止するために、式Ｉで示される 化合物を使用する方法を提供する。好適な態様ではこの哺乳類細胞がヒトのもの である。本発明はさらに式Ｉで示される化合物および別の前記した抗新生物剤を 少なくとも１種接触させる方法を提供する。 本発明は過剰増殖細胞の増殖を阻止するために対象に有効量の式Ｉで示される 化合物を含有する医薬的組成物を投与することによって哺乳類細胞の過剰増殖に 起因する病理学的状態、例えば新生物病、を緩和する方法を提供する。本明細書 で使用する「病理学的状態」は正常な増殖限定の対象とならない哺乳類細胞の増 殖に起因する病理を示す。このような細胞の増殖は前記のような新生物に起因す ることもある。 さらに好適な態様ではこの新生物細胞はヒトのものである。本発明は式Ｉで示 される化合物を他の治療剤ならびに他種の抗新生物剤と組合せて利用してそのよ うな病理学的状態を緩和する方法を提供する。 本発明の化合物の有効性は熟練した専門家に知られている標準的な方法を使用 して評価できる。このような方法の数例は次の通りである： この発明の化合物は病原性カビに対して有用であることは発見されている。例 えば、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ・ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓを処置するための有用 性は酵母窒素基デキストロース寒天培地を使用するＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ・ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓに対する検査結果で例示できる。この検定を実施するには 本発明の化合物をトゥイーン２０添加ジメチルスルホキシド中に溶解する。無菌 蒸留水／１０％ＤＭＳＯで２倍段階希釈を行い、希釈検定寒天プレートにおける 最終薬剤濃度を０．００８μｇ／ｍＬから１６．０μｇ／ｍＬまでの範囲とし、 Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ・ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓの拡大標本８４株に対する検 定を行う。Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ・ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ分離株標本８４株 に対する最小阻止濃度を測定して所望の抗カビ作用を例示する。 本化合物をヒトの鼻咽頭癌腫細胞系統であるＫＢ、ヒトの結腸直腸アドレノカ ルチノマ細胞系統であるＬｏＶｏに対する最小阻止濃度についてコルベット検定 法、Ｃｏｒｂｅｔｔ，Ｔ．Ｈ．ほか著、「Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ・Ａｎｔｉｃａｎ ｃｅｒ．Ｄｒｕｇｓ：Ｍｏｄｅｌｓ．ａｎｄ．Ｃｏｎｃｅｐｔｓ・ｆｏｒ・Ｄｒ ｕｇ・Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ・ａｎｄ・Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（細胞傷害性抗癌 剤：薬剤発見および開発のためのモデルと概念）」、３５〜８７頁、Ｋｌｕｗｅ ｒ・Ａｃａｄｅｍｉｃ・Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ：Ｎｏｒｗｅｌｌ、１９９２年参 照、を使用して検索する。また、化合物の評価に使用されるＶａｌｅｒｉｏｔｅ ほか著、「Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ・ａｎｄ・Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ・ｏｆ・Ａｎ ｔｉｃａｎｃｅｒ・Ａｇｅｎｔｓ（抗癌剤の発見と開発）」、Ｋｌｕｗｅｒ・Ａ ｃａｄｅｍｉｃ・Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、Ｎｏｒｗｅｌｌ、１９９３年も参照。 最も活性の高い化合物はさらにコルベット検定法を使用して、細胞型の異なる ４種、例えばマウス白血病、マウス固形癌、ヒトの固形癌、および悪性度の低い 繊維芽細胞、に対する細胞傷害性について評価される。 本化合物はさらにマウスに移植された、薬剤耐性腫瘍も含む、広範囲なマウス およびヒトの腫瘍について評価される。 その後の検定では担癌率Ｔ／Ｃ（処置動物での平均担癌対非処置動物での平均 担癌）を使用する。Ｎａｔｉｏｎａｌ・Ｃａｎｃｅｒ・Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅの基 準によれば、４２％以下のＴ／Ｃ値は有効であると考えられ；Ｎａｔｉｏｎａｌ ・Ｃａｎｃｅｒ・Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅの基準によれば、１０％以下のＴ／Ｃ値は 臨床用の可能性がある著効を有すると考えられる。材料 ビンブラスチン、サイトカラシンＢ、テトラメチルロダミン・イソシアネート （ＴＲＩＴＣ）−ファロイジン、スルフロダミンＢ（ＳＲＢ）およびβ−チュー ブリンおよびビメンチンに対する抗体は有名な販売業者から入手できる。イーグ ル塩を含有するイーグルの基本培地（ＢＭＥ）およびウシ胎児血清（ＦＢＳ）も 購入できる。細胞系統 ジャーカットＴ細胞白血病系統およびＡ−１０ラット大動脈平滑筋細胞はＡｍｅ ｒｉｃａｎ・Ｔｙｐｅ・Ｃｕｌｔｕｒｅ・Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから入手してＦ ＢＳ１０％と硫酸ゲンタマイシン５０μｇ／ｍＬとを含有するＢＭＥ中で培養す る。ヒトの卵巣癌細胞（ＳＫＯＶ３）およびビンブラスチンに対する耐性から選 択された副次的系統（ＳＫＶＬＢＩ）はＯｎｔａｒｉｏ・Ｃａｎｃｅｒ・Ｉｎｓ ｔｉｔｕｔｅのＶｉｃｔｏｒ・Ｌｉｎｇ博士から恵与された。これら両細胞系統 はＦＢＳ１０％と硫酸ゲンタマイシン５０μｇ／ｍＬとを含有するＢＭＥ中に 保存する。Ｐ−グリコプロテイン−過剰発現細胞に対する選択圧を保持するため にＳＫＶＬＢＩ細胞に継代培養の２４時間後にビンブラスチンを最終濃度１μｇ ／ｍＬまで添加する。細胞増殖および細胞周期休止検定法 細胞増殖検定法はＳｋｅｈａｎほかが記載した通りに行う。ジャーカット細胞に ついては、培養物をＳｋｅｈａｎが記載した指定薬剤で処理し、血球計数計で計 数して全細胞数を測定する。有糸***中の細胞百分率はＰＢＳ中で０．４％ギム ザ染色し、続いてＰＢＳで迅速に洗浄することによって測定する。一処置当り少 なくとも１０００個の細胞を有糸***像について評価し、計数した細胞の総数に 対する有糸***像を示す細胞の比率として有糸***指数を算出する。免疫螢光検定法 カバーグラス上のＢＭＥ／１０％ＦＢＳ中でＡ−１０細胞を全面成長近くまで増 殖させる。ＰＢＳ中の化合物を指定最終濃度まで添加し、細胞をさらに２４時間 インキュベーションする。微小管および中間径フィラメントの染色のために、細 胞を冷メタノールで固定し、１０％ウシ血清含有ＰＢＳとインキュベーションし て非特異的結合部位を封鎖する。細胞をモノクローナルの抗−β−チューブリン またはモノクローナルの抗−ビメンチンのいずれかと製造社が推奨する希釈率で ３７℃で６０分間インキュベーシヨンする。続いて結合した一次抗体をフルオレ ッセイン結合ウサギ抗マウスＩｇＧと４５分間インキュベーションして可視化す る。このカバーグラスを顕微鏡スライドグラスに載せて螢光パターンを検査し、 フルオレッセインに対するエピ螢光測定装置を装備したＺｅｉｓｓ社光学顕微鏡 Ｉｌｌを使用して写真撮影する。微小管の染色には、細胞を３％パラホルムアル デヒドで固定し、０．２％トリトンＸ−１００で透過性とし、水素化ホウ素ナト リウム（１ｍｇ／ｍＬ）で化学的に還元する。次に１００ｎＭ−ＴＲＩＴＣ−フ ァロイジン含有ＰＢＳを添加し、この混合物を３７℃で４５分間インキュベーシ ョンする。ＰＢＳで細胞を迅速に洗浄した後、カバーグラスを載せ、直ちに前記 のように写真撮影をする。クリプトフィシンおよびビンブラスチンがジャーカット細胞の増殖および細胞周 期に及ぼす効果 細胞増殖および有糸***中細胞百分率に及ぼすクリプトフィシン化合物および ビンブラスチンの効果について用量−応答曲線を測定する。サイトカラシンＢ、ビンブラスチンおよびクリプトフィシンが細胞骨格に及ぼす 効果 大動脈平滑筋（Ａ−１０）細胞をカバーグラス上で増殖させ、ＰＢＳ、２μＭ −サイトカラシンＢ、１００ｎＭ−ビンブラスチンまたは１０ｎＭ−クリプトフ ィシン化合物で処理する。２４時間後、微小管およびビメンチン中間径フィラメ ントを間接的免疫螢光法によって可視化し、ミクロフィラメントをＴＲＩＴＣ− ファロイジンを使用して染色する。各薬剤の形態学的効果を検査する。非処理細 胞は核周辺微小管形成中心で完成される繊細な微小管網を表示する。ビメンチン 中間径フィラメントは細胞質全体に均等に分布していたが、ミクロフィラメント の束は細胞の主軸にそって濃縮していた。サイトカラシンＢはパラ結晶性残留物 の蓄積を伴ってミクロフィラメントの完全な解重合を起こした。この化合物は微 小管または中間径フィラメントのいずれの分布にも影響を与えなかった。クリプ トフィシン処理微小管およびビメンチン中間体では微小管の減少状態およびリメ ンチン中間径フィラメントの崩壊が観察される。クリプトフィシンおよびビンブラスチンがタキソール安定化微小管に及ぼす効果 Ａ−１０細胞を（０μＭまたは１０μＭ）−タキソールで３時間処理した後、 ＰＢＳ、１００ｎＭ−ビンブラスチンまたは１０ｎＭ−クリプトフィシン化合物 を添加する。２４時間後、微小管の形成を前記のようにして免疫螢光法によって 検査する。対照細胞でのものと比較して、タキソール処理細胞中の微小管は全般 に、特に細胞極領域では、束状に集合していた。前記と同様に、非前処理細胞に おいてはビンブラスチンは微小管に完全な解重合を起こした。しかしながら、タ キソールで前処理すると、ビンブラスチンに反応しての微小管の解重合は予防さ れた。同様にして、タキソールで前処理するとクリプトフィシン化合物でも微小 管は観察される。ビンブラスチンおよびクリプトフィシンによる微小管解重合の可逆性 Ａ−１０細胞を１００ｎＭ−ビンブラスチンまたは１０ｎＭ−クリプトフィシ ンで２４時間処理すると微小管の完全な解重合を起こす。次に細胞を洗浄し、薬 剤不含培地中で１時間または２４時間インキュベーションする。微小管は迅速に 再重合を起こし、ビンブラスチンを除去して１時間後には明確なレベルの微小管 を示し、２４時間後には形態学的に完全なレベルでの回復を示した。この細胞を この発明のクリプトフィシン化合物で処理し、クリプトフィシン化合物を除去し て１時間または２４時間後に可視化して微小管の状態を観察する。ビンブラスチンおよびクリプトフィシンの組合せが細胞増殖に及ぼす効果 ＳＫＯＶ３細胞をクリプトフィシンとビンブラスチンとの組合せで４８時間処 理する。次に生存する細胞の百分率を測定して、各組合せについてＩＣ₅₀を算出 する。ＳＫＯＶ３およびＳＫＶＬＢＩ細胞に対するクリプトフィシン、ビンブラスチン およびタキソールの毒性 ＳＫＶＬＢＩ細胞はＰ−グリコプロテインを過剰に発現するので、抗癌性天然 物薬剤には耐性である。タキソール、ビンブラスチン、およびクリプトフィシン 化合物がＳＫＯＶ３細胞およびＳＫＶＬＢＩ細胞の増殖を阻止する性能を観察す る。タキソールは、ＳＫＯＶ３細胞およびＳＫＶＬＢＩ細胞に対するＩＣ₅₀それ ぞれ１ｎＭおよび８０００ｎＭで、両細胞系統の増殖を用量依存的に阻止した。 ビンブラスチンも、ＳＫＯＶ３細胞およびＳＫＶＬＢＩ細胞に対するＩＣ₅₀それ ぞれ０．３５ｎＭおよび４２００ｎＭで、両細胞系統の増殖を阻止した。この発 明のクリプトフィシン化合物も、ＳＫＯＶ３細胞およびＳＫＶＬＢＩ細胞に対す るＩＣ₅₀約１ｐＭから約１０００ｐＭで、活性を示す。 上述の通り、本発明が、微小管ネットワークの崩壊および有糸***の阻止によ って作用する、細胞増殖の強力な阻害剤である新規なクリプトフィシン化合物を 提供することを証明できる。これらの研究でクリプトフィシン化合物は微小管の 形成を崩壊させ、有糸***を含む正常な細胞機能を崩壊することを例証できる。 たとえばコルヒチンおよびビンカアルカロイドのような、古典的な抗微小管剤 は細胞***を有糸***の段階で休止させる。これらの薬剤のいずれか一つが細胞 増殖に及ぼす効果を本クリプトフィシン化合物のものと比較することは適切であ ると思われる。この目的のために、ビンカアルカロイドであるビンブラスチンを 古典的な抗有糸***剤の代表として選択した。従ってジャーカットＴ細胞白血病 細胞系統の細胞増殖および細胞周期進行に及ぼすクリプトフィシン化合物および ビンブラスチンの効果を比較する。 抗有糸***効果は有糸***紡錘体内の微小管の崩壊によつて共通に媒介される ので、クリプトフィシン化合物が細胞骨格の構造に及ぼす影響は螢光顕微鏡的に 特性解析する。クリプトフィシン化合物またはビンブラスチンのいずれかで処理 した細胞の免疫螢光染色の結果、両化合物が微小管の完全な喪失を起こすことが 証明される。ＳＫＯＶ３細胞での同様な研究結果は、クリプトフィシン化合物の 抗微小管効果は平滑筋細胞系統に特有なものではないことを証明できる。ヒトの結腸癌ＧＣ３による検索 ９６ウェル板に選択したウェルにヒトの結腸癌ＧＣ３細胞（検定培地１００μ Ｌ中１×１０細胞／ウェル）を接種して、２４時間後に被験化合物を添加した。 ９６ウェル板に選択した他のウェルに細胞不含の検定用培地を添加した。検定用 培地（ＲＭＰＩ−１６４０を培地に使用した；しかし、この細胞が生存できるも のならばいずれの培地も許容されるであろうと思われる）に１０％ウシ胎児透析 血清および２５ｍＭ−ＨＥＰＥＳ緩衝液を添加した。 被験化合物は検査まで褐色ビン中に保存した。被験試料の燐酸緩衝食塩水（Ｐ ＢＳ）希釈液を調製する直前にジメチルスルホキシド保存溶液（２００μｇ／ｍ Ｌ）を新たに調製した。ジメチルスルホキシド溶液をＰＢＳで１：２０まで希釈 すると最終濃度は１０μｇ／ｍＬになった。順次に１：３倍の希釈液をＰＢＳを 使用（前段の試料０．５ｍＬをＰＢＳ１ｍＬで）して調製した。検定にはファル コン社２０５４管を使用した。 被験化合物の各希釈液１０μＬ試料をＧＣ３プレートのウェルに三重に添加し た。プレートを約３７℃で７２時間インキュベーションした。ウェルの各々に３ −［４，５−ジメチル−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウム・ブロ ミド塩（「ＭＴＴ」５ｍｇ／ＰＢＳｍＬ）貯蔵溶液１０μＬを添加した。プレー トを３７℃で約１時間インキュベーションした。プレートを遠心分離し、培地を ウェルからデカンテーションして除去し、ウェルの各々に酸性イソプロパノール （イソプロパノール中０．０４Ｎ−ＨＣｌ溶液）１００μＬを添加した。プレー トを１時間以内に検査波長５７０ｎｍ（ＳｐｅｃｔｒａＭａｘリーダー）で測定 した。 式Ｉで示される化合物を評価すると、本化合物は本明細書に記載する請求項の 処置方法において有用であることができることが示唆される。さらに本化合物は 微小管系の崩壊のために有用であると思われる。 この発明の化合物の製造は活性エステルおよび、要すればそれに続くクロマト グラフィーおよび酸で誘導する脱保護を含む、数種のプロトコルを使用して完成 できる。 Ｒ¹またはＲ²がカルボン酸に由来するいずれのエステルの調製にも酸塩化物、 酸無水物、および通常の活性化試薬（たとえば、カルボジイミド類）²を用いる 種々の技術が含まれている。反応に関与するアルコール以外の溶媒はいずれも使 用できる。エステル化を援助するためには、いかなる温和な塩基および／または 触媒（アミン、炭酸塩）も使用できる。 カルバメートから対応する塩への変換は強酸、即ち塩酸、硫酸の水素、燐酸の 水素、硝酸の水素、過塩素酸の水素からなる鉱酸または、たとえばトリフルオロ 酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸、およびメタンスルホン酸のような有機の強酸に よって行われる。これと同じ酸を使用すれば、対応する遊離塩基から新規な塩を 製造できるであろう。 Ｇｃ３検定で検査したこの発明の化合物はＩＣ₅₀値が１以下から約７００ｎＭ までの範囲であった。しかしながら、最も典型的な値は１００ｎＭ以下である。 本明細書に記載する工程は最も好ましくは溶媒存在下に実行される。前記工程 については専門家が適切な溶媒を選択できる。不活性の有機溶媒は殊に好適であ る；しかしながら、特定の条件下では水溶液が適切である。例えば、Ｒ²⁷が水素 であってＲ¹³がＢＯＣである場合には溶媒としては水を基本とするものが有効で あると思われる。 本明細書に記載する反応式の生成物はさらに標準的方法を用いて別のクリプト フィシン化合物を提供するために誘導できる。 前記の反応式および下記の実施例を参考にして、専門家は所望の化合物を製造 するために適する出発物質および試薬を利用できる。 例えばエステル出発物質は次の通りにして製造できる： ［Ｒ⁶は前記定義の意味を有する］ このエステル製造のための反応式は、熟練した専門家に便宜を与えるために、 この反応式の特定的適用例１個を提供する本明細書の製造例でさらに説明する。 このエステル製造のための反応式は、本発明請求項のＡｒ置換基にも適用できる 。反応式の提示は記載したフェニル環のみに合成反応を限定することを意図する ものではない。そうではなくて、専門家はこの明細書に請求する化合物について 必要な所望の出発物質を提供するためにこの工程を広く適用できる。 必要な反応時間は出発物質および操作温度に関連する。所与の工程での最適な 反応時間はいつものように短い反応時間が望ましい生産量および長い反応時間が 望ましい最大収率の競合する到達目標を勘案して決定される妥協の産物である。 本発明をさらに例示するために次の実施例を提供する。決して本発明の範囲を 以下の実施例にまたは実施例で限定することを意図するものではない。 製造例１ 第１工程：５−フェニル−ペンタン−２（Ｅ）−エン−酸メチルエステル． ホス ホノ酢酸トリメチルエステル（３７６ｇ、４１７ｍＬ、２．０７モル）のＴＨＦ （７５０ｍＬ）溶液をメカニカルスターラーおよびＮ₂導入口を装着した３Ｌの 三頚丸底フラスコ中で０℃で撹拌した。冷却した溶液に、滴下漏斗からニートの テトラメチルグアニジン（２３９ｇ、２６０ｍＬ、２．０７モル）を滴加した。 冷たい透明な薄黄色溶液を０℃で２５分間撹拌した。ヒドロシンナムアルデヒド （９０％、２５３ｇ、２４８ｍＬ、１．９モル）のＴＨＦ（１２５ｍＬ）溶液を 反応溶液中に徐々に滴加した。添加完了後、反応物を１０時間撹拌して室温まで 戻した。ＧＣは生成物と出発物質との比率９５：５を示した。反応容器に水５０ ０ｍＬを添加し、反応物を一夜撹拌すると二層となった。有機層を分離し、水層 をｔ−ＢｕＯＭｅで抽出した。有機層を集め、ＭｇＳＯ₄上で乾燥し、次に真空 濃縮して橙色油状物を得た。この粗製生成物を１２９℃／０．３ｍｍＨｇで蒸留 し、透明な淡黄色油状物として３６０．５ｇ、収率９１．７％で得た。 ＥＩＭＳ（ｍ／ｚ）：１９０（１３；Ｍ＋），１５９（４１），１３１（９０） ，１３０（６２），１１７（２２），１０４（１２），９５（５７），９１（１ ００），７７（２１），６５（５９）。 ＨＲＥＩＭＳ（ｍ／ｚ）：１９０．０９９８（Ｃ₁₂Ｈ₁₄Ｏ₂、Ｄ−０．４ｍｎｕ ）。ＵＶλｍａｘ（ε）：２１０（８４００），２６０（２３０）ｎｍ。ＩＲν ｍａｘ：３０２７，２９４９，１７２３，１６５８，１４５４，１３１９，１２ ０３，９７８，７００ｃｍ^-1。¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：７．１５〜７．３ （Ｐｈ−Ｈ５，ｂｍ），７．００（３−Ｈ，ｄｔ，１５．６／６．６），５．８ ４（２−Ｈ，ｄｔ，１５．６／１．２），３．７０（ＯＭｅ，ｓ），２．７６（ ５−Ｈ２，ｔ，７．２），２．５１（４−Ｈ２，ｂｄｔ，６．６／７．２）。¹³ Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ：１６６．９（１），１４８．３（３），１４０． ６（Ｐｈ−１’），１２８．４／１２８．２（Ｐｈ−２’／３’／５’／６’） ，１２６．１（Ｐｈ−４’），１２１．４（２），５１．３（ＯＭ ｅ），３４．２／３３．８（４／５）。第２工程：５−フェニル−ペンタン−２（Ｅ）−エン−１−オール． 熱電対、メ カニカルスターラーおよびＮ₂導入口を装着した１２Ｌの四頚丸底フラスコにエ ノエートエステル（３１０．５ｇ、１．５モル）のＴＨＦ（１．５Ｌ）溶液を注 入し、ｉ−ＰｒＯＨ／ＣＯ₂浴で−７１℃まで冷却した。反応容器にＤＩＢＡＬ （２．５Ｌ、トルエン中の１．５Ｍ−溶液、３．７５モル）を反応温度が＜−５ ０℃に維持される速度で滴加した。添加完了後、反応物を＜−５０℃の反応温度 で一夜撹拌した。１６時間後に、ＴＬＣ（３：１、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、Ｓｉ Ｏ₂）が出発物質の不在を示した。反応温度を−１５℃まで戻した。反応を徐々 に１Ｎ−ＨＣｌ（１５０ｍＬ）で停止させた。この時、反応物はゼラチン状固体 になった。この半固体をスパチュラを用いて壊し、１Ｎ−ＨＣｌ（２００ｍＬ） を添加して混合物を流動性にした。濃ＨＣｌ（６２５ｍＬ）を注入して二層系を 形成させた。両層を分離し、生成物をｔ−ＢｕＯＭｅで抽出した。この有機層を ＭｇＳＯ₄上で乾燥し、真空濃縮して透明な淡黄色油状物２４７．８ｇを得た。 この粗製生成物を１４５℃／０．２５ｍｍＨｇで蒸留して２０９．７ｇ、８６． ２％を得た。 ＥＩＭＳ（ｍ／ｚ）：１６２（１；Ｍ＋），１４４（１６），１２９（７），１ １７（９），１０８（６），９２（１７），９１（１００），７５（５），６５ （１２）。ＨＲＥＩＭＳ（ｍ／ｚ）：１６２．１０４９（Ｃ₁₁Ｈ₁₄Ｏ、Ｄ−０． ４ｍｎｕ）。ＵＶλｍａｘ（ε）：２０６（９９００），２６０（３６０）ｎｍ 。ＩＲνｍａｘ：３３５６，２９２４，１６０３，１４９６，１４５４，９７０ ，７４６，７００ｃｍ^-1。¹Ｈ−ＮＭＲδ：７．１５〜７．３（Ｐｈ−Ｈ５，ｍ ），５．７０（３−Ｈ，ｄｔ，１５．６／６．０），５．６１（２−Ｈ，ｄｔ， １５．６／４．８），４．０２（１−Ｈ２，ｄ，４．８），２．６８（５−Ｈ２ ，ｔ，７．２），２．４０（ＯＨ，ｂｓ），２．３６（４−Ｈ２，ｄｔ，６．０ ／７．２）。¹³Ｃ−ＮＭＲδ：１４１．６（Ｐｈ，１’），１３１．８（３）， １２９．５（２），１２８．３／１２８．２（Ｐｈ−２’／３’／５’／６’） ，１２５．７（Ｐｈ，４’），６３．３（１），３５．４／３３．８（４／５） 。第３工程：（２Ｓ，３Ｓ）−２，３−エポキシ−５−フェニル−１−ペンタノー ル． メカニカルスターラー、熱電対およびＮ₂導入口を装着した１Ｌの三頚丸底 フラスコにＣＨ₂Ｃｌ₂（３５０ｍＬ）、３０ｇの乾燥４Åモレキュラーシーブス およびＬ−（＋）−酒石酸ジメチルエステル（７．６２ｇ、０．０３７モル）を 添加した。得られた混合物を−２０℃まで冷却し、Ｔｉ（Ｏ−ｉ−Ｐｒ）₄（９ ．２ｍＬ、０．０３１モル）で処理し、続いてｔ−ブチルハイドロパーオキシド （４．０Ｍ、ＣＨ₂Ｃｌ₂溶液、１８２ｍＬ、０．７８モル）を反応温度²−２０ ℃に維持される速度で滴加した。添加完了後、反応物をさらに３０分間撹拌した 後、反応温度²−２０℃に維持される速度でアリルアルコール(５０ｇ、０．３１ モル)のＣＨ₂Ｃｌ₂（３０ｍＬ）溶液で処理した。反応物を同温で５時間撹拌し 、次に濾過し、０℃の硫酸第一鉄七水和物（１３２ｇ）および酒石酸（４０ｇ） の水（４００ｍＬ）溶液中に入れた。この混合物を２０分間撹拌した後、分液漏 斗に移し、ｔ−ＢｕＯＭｅ（２×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を集めてＮａ Ｃｌ含有３０％ＮａＯＨ溶液と０℃で１時間撹拌した。再び両層を分離し、水層 をｔ−ＢｕＯＭｅで抽出した。有機層を集めて食塩水で洗い、ＭｇＳＯ₄上で乾 燥し、濃縮してコハク色の油状物５２．８ｇを得た。第４工程：（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−５−フェニルペンタ ン−１−オール． メカニカルスターラー、熱電対およびＮ₂導入口を装着した５ Ｌの三頚丸底フラスコにヘキサン（１Ｌ）を添加し、０℃に冷却した。２．０Ｍ −Ｍｅ₃Ａｌのヘキサン溶液（８００ｍＬ、１．６モル）を添加し、続いて前記 のエポキシド（１２０ｇ、０．６７７モル）のヘキサン（２５０ｍＬ）／ＣＨ₂ Ｃｌ₂（５０ｍＬ）溶液を温度が２０℃以下に維持される速度で添加した。添加 完了後、曇りのある反応混合物を５℃で３５分間撹拌し、１０％ＨＣｌ（３００ ｍＬ）の溶液を滴加し、続いて濃ＨＣｌ（３５０ｍＬ）を添加した。両層を分離 し、有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄上で乾燥した。揮発性物質を真空除去 した後、油状物１２２．１ｇを得た。第５工程：トシル酸（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−５−フェニ ルペンタン−１−イルエステル． メカニカルスターラーおよび窒素導入口を装着 した２Ｌの三頚丸底フラスコに前記ジオール（５８ｇ、０．３０モル）、ジブチ ル錫オキシド（１．５ｇ、０．００６モル、２モル％）、塩化トルエンスルホニ ル(５７．５ｇ、０．３０モル)、ＣＨ₂Ｃｌ₂(５８０ｍＬ)およびトリエチルアミ ン（４２．０ｍＬ、０．３０モル）を添加した。得られた混合物を室温で２時間 （反応は１時間以内に完了していたのだが）撹拌し、濾過し、水洗し、ＭｇＳＯ₄ 上で乾燥した。揮発性物質の真空濃縮は淡コハク色油状物１０４．１ｇを与え た。第６工程：トシル酸（２Ｒ，３Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル ）オキシ］−３−メチル−５−フェニルペンタン−１−イルエステル． 前記トシ レート（１００ｇ、０．２９モル）およびトリエチルアミン（８１．０ｍＬ、０ ．５８モル）のＣＨ₂Ｃｌ₂（１２００ｍＬ）溶液をニートのＴＢＳ−ＯＴｆ（９ ９ｍＬ、０．４３モル）で滴加処理し、続いて、さらに２０分間撹拌を続けた。 反応物を食塩水で２回洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濃縮乾固した。油状物を最 少量のヘキサンに溶解し、シリカ床で濾過し、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（９：１） で溶離して僅かにコハク色の油状物１３４ｇを得た。第７工程：トシル酸（２Ｒ，３Ｒ，５ＲＳ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチ ルシリル）オキシ］−３−メチル−５−ブロモ−５−フェニルペンタン−１−イ ルエステル． メカニカルスターラー、還流冷却器および窒素導入口を装着した５ Ｌの三頚丸底フラスコにＣＣｌ₄（１６８０ｍＬ）、ＴＢＳ・Ｔｓ（１４０ｇ、 ０．３０モル）、ＮＢＳ（６５ｇ、０．３６５モル）およびＡＩＢＮ（１６．５ ｇ、０．１０モル）を添加した。この混合物を撹拌しつつ高真空で脱気して脱ガ スし、窒素を再充填（×３）した。この反応混合物を次に加熱還流すると色が暗 褐色になった。１５分間激しく撹拌した後、反応混合物は明黄色になり、クロマ トグラフィー分析は反応終了を示した。室温まで冷却後、反応物を濾過し、濾液 を濃縮乾固した。残渣をヘキサンに再溶解し、再度濾過し、濃縮乾固するとコハ ク色油状物として１７０．３ｇを得た。第８工程：トシル酸（２Ｒ，３Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル ）オキシ］−３−メチル−５−フェニルペンタン−４（Ｅ）−エン−１−イルエ ステル． メカニカルスターラー、還流冷却器および窒素導入口を装着した２Ｌの 三頚丸底フラスコに前記ブロミド（１００ｇ、０．１８６モル）のアセトニトリ ル（７００ｍＬ）溶液を添加した。ＤＢＵ（８３．６ｍＬ、０．５５７モル） を添加して得られた暗褐色溶液を１５分間撹拌下に還流した。室温まで冷却後に 、溶媒を真空除去し、残渣をＣＨ₂Ｃｌ₂（２００ｍＬ）中で砕き、シリカ床を通 して濾過した。揮発性物質を再度蒸発させ、残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、水、食 塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄上で乾燥し、濃縮乾固した。分取ｍｐｌｃ（Ｐｒｅｐ ・５００）クロマトグラフィーは所望の不飽和化合物（５０．３ｇ、この４工程 にわたって６０％収率）を与えた。第９工程：（３Ｓ，４Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ ］−４−メチル−６−フェニルヘキサン−５（Ｅ）−エン−１−ニトリル． この トシレート（５０ｇ、０．１１モル）をＤＭＳＯ（１Ｌ）に溶解し、ＫＣＮ（１ ４．２ｇ、０．２２モル）と水（２５ｍＬ）とで処理し、得られた混合物を窒素 下に６０℃で１８時間撹拌した。室温まで冷却後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１ Ｌ）と水（１Ｌ）との間に分配した。水層をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で抽出し て、有機層を集めて食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。シリカ上でＣＨ₂ Ｃｌ₂によりフラッシュクロマトグラフィーして所望のニトリルを９２％収率で 得た。第１０工程：（５Ｓ，６Ｒ）−５−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキ シ］−６−メチル−８−フェニルオクタ−２（Ｅ），７（Ｅ−ジエン酸メチルエ ステル． このニトリル（１４．６７ｇ、４６．５ミリモル）をトルエン（２００ ｍＬ）に溶解し、窒素中で−７８℃まで冷却した。激しく撹拌しながらこれに１ ．５Ｍ−ＤＩＢＡＬトルエン溶液（３７．２ｍＬ、５５．８ミリモル）を滴加し た。添加完了後、冷浴を除去し、反応物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を 注意深く１Ｎ−ＨＣｌに注入し、この混合物を室温で３０分間撹拌した。両層を 分離し、有機層を酒石酸ナトリウムカリウム飽和水溶液（×２）、食塩水で洗浄 し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥した。揮発性物質を真空除去し、粗製淡黄色油状物を次 の縮合反応に直接使用した。 前節からの粗製アルデヒドをＴＨＦ（９０ｍＬ）に溶解し、窒素下に室温でホス ホノ酢酸トリメチルエステル（９．０３ｍＬ、５５．８ミリモル）およびテトラ メチルグアニジン（７．０ｍＬ、５５．８ミリモル）で処理した。反応混合物を １６時間撹拌し、次にＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）との間に 分配した。水層をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で逆抽出し、有機層を集めて水、食 塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥した。揮発性物質を真空除去し、粗製の黄色 油状物（１７．０ｇ）をシリカゲル上でＣＨ₂Ｃｌ₂：シクロヘキサン(１：１〜 ２：１)を用いてクロマトグラフし、所望エステルを１３．６７ｇ得た。収率： ７８．５％。 実施例１ （２Ｓ）−２−［２’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−１’−（Ｓ ）−メチル］−４−メチルペンタン酸アリルエステル（２ａ）の合成 (２Ｓ)−２−ヒドロキシ−４−メチルペンタン酸アリルエステル（１）８４６ｍ ｇ(５．０２ミリモル、０．９５当量)、Ｎ−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)− Ｌ−アラニン１ｇ（５．２９ミリモル）、および４−ジメチルアミノピリジン（ ＤＭＡＰ）１２２ｍｇ（１．０６ミリモル、０．２当量）を乾燥塩化メチレン８ ｍＬ中で混合し、窒素雰囲気下に０℃（氷浴）で撹拌した。１，３−ジシクロヘ キシルカルボジイミド（ＤＣＣ）１．２ｇ（５．８２ミリモル、１．１当量）を 一度に添加し、反応物を室温で一夜撹拌した。この反応物を濾紙を用いて濾過し 、５％ＮａＨＣＯ₃と食塩水とで抽出する後処理を行った。この塩化メチレン溶 液をＮａ₂ＳＯ₄上で乾燥し、次に真空除去した。粗製油状物をＳｉＯ₂上でフラ ッシュクロマトグラフ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）して、無色油状物として （２ａ）を１．４５ｇ（８０％）得た。 ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３０９（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。 ＩＲ（ｃｍ^-1）（ＣＨＣｌ₃）：３４４２，２９８２，２９６３，２９３７，１ ７４５，１７１１，１５０３，１３６９，１１６３。¹ Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ：５．８４〜５．９３（ｍ，１Ｈ） 、 ５．２８（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝１７．１Ｈｚと５．５Ｈｚ）、５．０９〜５．１３ （ｍ，１Ｈ）、５．０１（ｂｒｓ，１Ｈ）、４．６２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．７Ｈ ｚ）、４．３５〜４．４１（ｍ，１Ｈ）、１．６５〜１．８５（ｍ，３Ｈ）、１ ．４５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ）、１．４４（ｓ，９Ｈ）、０．９５（ｄ，３Ｈ ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、０．９３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）。 質量分析（ＦＤ）：３４４（Ｍ⁺＋Ｈ）。 元素分析：Ｃ₁₇Ｈ₂₉ＮＯ₆として 計算値Ｃ５９．４６；Ｈ８．５１；Ｎ４．０８。 実験値Ｃ５９．６３；Ｈ８．４８；Ｎ４．１１。（２Ｓ）−２−［２’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−１’−（Ｓ ）−イソプロピル］−４−メチルペンタン酸アリルエステル（２ｂ）の合成 化合物（２ｂ）は化合物（２ａ）用の操作法に準じて製造した（８６％）。 ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４４７（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。 ＩＲ（ｃｍ^-1）（ＣＨＣｌ₃）：２９６６，１７４３，１７１２，１５０３，１ ３６８，１１７３，１１５８。¹ Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ：５．８５〜５．９４（ｍ，１Ｈ） 、５．２８（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝１６Ｈｚと８Ｈｚ）、５．０６〜５．１０（ｍ， １Ｈ）、５．０１（ｂｒｓ，１Ｈ）、４．６２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、 ４．２９〜４．３３（ｍ，１Ｈ）、２．２５〜２．２９（ｍ，１Ｈ）、１．６４ 〜１．８５（ｍ，３Ｈ）、１．４４（ｓ，９Ｈ）、０．８５〜１．０６（ｍ，１ ２Ｈ）。 質量分析（ＦＤ）：３７２（Ｍ⁺＋Ｈ）。 元素分析：Ｃ₁₉Ｈ₃₃ＮＯ₆として 計算値Ｃ６１．４３；Ｈ８．９５；Ｎ３．７７。 実験値Ｃ６１．７１；Ｈ９．１２；Ｎ３．８８。（２Ｓ）−２−［２’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−１’−（Ｓ ）−メチル］−４−メチルペンタン酸（３ａ）の合成 （２Ｓ）−２−［２’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−１’−（Ｓ ）−メチル］−４−メチルペンタン酸アリルエステル（２ａ）８２７ｍｇ（２． ４１ミリモル）を乾燥テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）５０ｍＬに溶解し、窒素雰 囲気下に室温で撹拌した。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ ０）２７９ｍｇ（０．２４１ミリモル、０．１当量）を添加し、続いて乾燥モル ホリン２．３１ｍＬ（２６．５ミリモル、１１当量）を添加した。１時間後にＴ ＬＣ（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）は反応の完了を示した。反応物をジエチル エーテル（２００ｍＬ）で希釈し、次に１Ｎ−ＨＣｌで抽出し、続いて５％Ｎａ ＨＣＯ₃で抽出した。５％ＮａＨＣＯ₃水の層を集め、１Ｎ−ＨＣｌでｐＨ２まで 酸性とし、ジエチルエーテル（６００ｍＬ）で抽出した。エーテル抽出物を集め て食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥した。エーテルを真空除去して黄色固体 （３ａ）７１４ｍｇ（９８％）を得た。 ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１１４（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）。 ＩＲ（ｃｍ^-1）（ＣＨＣｌ₃）：２９８２，２９６３，１７４６，１７１３，１ ５０３，１３６９，１１６３。¹ Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ：７．７０（ｂｒｓ，１Ｈ）、５． １３〜５．０６（ｍ，２Ｈ）、４．４１〜４．３４（ｍ，１Ｈ）、１．７０〜１ ．８７（ｍ，３Ｈ）、１．４４（ｂｒｓ，１２Ｈ）、０．９６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝ ６．２Ｈｚ）、０．９３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ）。 質量分析（ＦＤ）：３０４（Ｍ⁺＋Ｈ）。 元素分析：Ｃ₁₄Ｈ₂₅ＮＯ₆として 計算値Ｃ５５．４３；Ｈ８．３１；Ｎ４．６２。 実験値Ｃ５５．６５；Ｈ８．３７；Ｎ４．６８。（２Ｓ）−２−［２’−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−１’−（Ｓ ）−イソプロピル］−４−メチルペンタン酸（３ｂ）の合成 化合物（３ｂ）は化合物（３ａ）用の操作法に準じて製造した（８１％）。 ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１８３（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）。 ＩＲ（ｃｍ^-1）（ＣＨＣｌ₃）：２９６６，２９３６，１７２７，１７１４，１ ５０４，１３９３，１３６９，１１５９。¹ Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ：５．１０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９． １Ｈｚと３．７Ｈｚ）、５．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．１Ｈｚ）、４．２９（ｄ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．１Ｈｚと４．１Ｈｚ）、２．２６〜２．３０（ｍ，１Ｈ）、 １．６８〜１．８８（ｍ，３Ｈ）、１．４４（ｂｒｓ，９Ｈ）、０．９１〜１． ０２（ｍ，１２Ｈ）。 質量分析（ＦＤ）：３３２（Ｍ⁺＋Ｈ）。 元素分析：Ｃ₁₆Ｈ₂₉ＮＯ₆として 計算値Ｃ５７．９９；Ｈ８．８２；Ｎ４．２２。 実験値Ｃ５８．２２；Ｈ８．７２；Ｎ４．３９。化合物（５ａ）の合成 化合物（４）２１３ｍｇ（０．３６２ミリモル）、（２Ｓ）−２−［２’−（ｔ ｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−１’−（Ｓ）−メチル］−４−メチルペ ンタノエート（３ａ）１１７ｍｇ（０．５３６ミリモル、１．５当量）およびＤ ＭＡＰ１１ｍｇ（０．０９ミリモル、０．２当量）を直火乾燥丸底フラスコ中で 窒素雰囲気下に塩化メチレン３ｍＬに溶解した。ＤＣＣ１１８ｍｇ（０．５７２ ミリモル、１．１当量）を次に一度に添加し、反応物を一夜撹拌した。ＴＬＣ（ ５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）は反応の完了を示した。反応物を濾紙を通して濾 過し、５％ＮａＨＣＯ₃および食塩水による抽出後処理を行った。塩化メチレン 層をＮａ₂ＳＯ₄上で乾燥し、次に真空除去した。次に粗製の固体をＳｉＯ₂上の フラッシュクロマトグラフィー（３５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付して白色固 体（５ａ）２５９ｍｇ（８２％）を得た。 ＴＬＣ：Ｒｆ＝。 ＩＲ（ｃｍ^-1）（ＫＢｒ）ν：。 ＵＶ（９５％ＥｔＯＨ）λ：。¹ Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ：７．１８〜７．３７（ｍ，７Ｈ） 、７．０５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚと１．７Ｈｚ）、６．８２（ｄ，１Ｈ ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）、６．６５〜６．７８（ｍ，１Ｈ）、６．４０（ｄ，１Ｈ， Ｊ＝１５．７Ｈｚ）、６．０１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．８Ｈｚと８．８Ｈｚ） 、５．８６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．８Ｈｚ）、５．３５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８． ０Ｈｚと２．３Ｈｚ）、５．０１（ｍ，２Ｈ）、４．９６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９ ．４Ｈｚと３．６Ｈｚ）、４．８０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ）、４．７４ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ）、４．４２（ｍ，１Ｈ）、３．８５（ｓ，３Ｈ ）、３．２０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４．０Ｈｚと５．９Ｈｚ）、３．０６（ｄ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４．０Ｈｚと７．８Ｈｚ）、２．４７〜２．５９（ｍ，３Ｈ） 、１．４３〜１．７９（ｍ，６Ｈ）、１．４１（ｓ，９Ｈ）、１．１１（ｄ，３ Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、０．８８（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、０．８１ （ ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）。 質量分析（ＦＤ）：。 元素分析：Ｃ₄₁Ｈ₅₂Ｃｌ₄Ｎ₂Ｏ₁₀として計算値に一致。化合物（５ｂ）の合成 化合物（４）５００ｍｇ（０．８４８ミリモル）、（２Ｓ）−２−［２’−（ｔ ｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−１’−（Ｓ）−メチル］−４−メチルペ ンタノエート（３ｂ）２６７ｍｇ（０．８０６ミリモル、１．０５当量）および ＤＭＡＰ２１ｍｇ（０．１７２ミリモル、０．２当量）を直火乾燥丸底フラスコ 中で窒素雰囲気下に塩化メチレン５ｍＬ中に溶解した。ＤＣＣ１９２ｍｇ（０． ９３３ミリモル、１．１当量）を次に一度に添加し、反応物を一夜撹拌した。Ｔ ＬＣ（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）は反応の完了を示した。反応物を濾紙を通 して濾過し、５％ＮａＨＣＯ₃および食塩水による抽出後処理を行った。塩化メ チレン層をＮａ₂ＳＯ₄上で乾燥し、次に真空除去した。次に粗製の固体をＳｉＯ₂ 上のフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に付して 白色固体（５ｂ）６８２ｍｇ（８９％）を得た。 ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４４７（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。 ＩＲ（ｃｍ^-1）（ＫＢｒ）ν：２９６５，２９３４，１７５２，１７１６，１６ ８０，１６４５，１５０４，１３６８，１２８２，１１５８，１０６７。 ＵＶ（９５％ＥｔＯＨ）λ：２３２ｎｍ（ε＝２２６７２），２４７ｎｍ（ε ＝２１８８９）。¹ Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ：７．１６〜７．３２（ｍ，７Ｈ） 、７．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）、６．６６〜６．８４（ｍ，２Ｈ）、 ６．４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、６．０１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８ Ｈｚと１５．９Ｈｚ）、５．８６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ）、５．４７（ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．９Ｈｚ）、５．０３〜５．１４（ｍ，２Ｈ）、４．９１（ｄ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．９Ｈｚと３．８Ｈｚ）、４．７６（ｓ，２Ｈ）、４．３８（ ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．５Ｈｚと４．１Ｈｚ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、３．２０ （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４．０Ｈｚと５．７Ｈｚ）、３．０５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝ １４．０Ｈｚと７．３Ｈｚ）、２．４６〜２．５９（ｍ，３Ｈ）、２．２６〜２ ．３２（ｍ，１Ｈ）、１．４４〜１．７８（ｍ，３Ｈ）、１．４２（ｓ，９Ｈ） 、１．１１（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ）、１．０３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈ ｚ）、０．９５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、０．８７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６． ４Ｈｚ）、０．８０（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ）。 質量分析（ＦＤ）：９０２（Ｍ⁺）。 元素分析：Ｃ₄₃Ｈ₅₆Ｃｌ₄Ｎ₂Ｏ₁₀として 計算値：Ｃ５７．２１；Ｈ６．２５；Ｎ３．１０。 実験値：Ｃ５８．０９；Ｈ７．０４；Ｎ３．２６。化合物（６ａ）の合成 化合物（５ａ）２４９ｍｇ（０．２８５ミリモル）および亜鉛末１ｇを氷酢酸１ ０ｍＬに溶解した。反応物を１時間超音波処理した。ＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ／ ＣＨＣｌ₃）は出発物質を示さなかったので、亜鉛をセライト床で濾過し、濾液 を真空濃縮して灰白色固体を得た。次にこの粗製固体をトリフルオロ酢酸（Ｔ ＦＡ）１２ｍＬに溶解し、室温で１時間撹拌した。ＴＦＡを真空除去し、得られ た油状物をＭｅＯＨで撹拌すると白色固体が形成された。この固体を集めて高真 空で乾燥して化合物（６ａ）のＴＦＡ塩１５０ｍｇ（７０％）を得た。 ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．１６９（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）。 ＩＲ（ｃｍ^-1）（ＫＢｒ）ν：２９６０，１７６８，１７４５，１６４０，１５ ０４，１３９１，１２５８，１１９８。 ＵＶ（９５％ＥｔＯＨ）λ：２３２ｎｍ（ε＝２４７９５），２４７ｎｍ（ε＝ ２６７６３）。¹ Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ：７．１５〜７．３４（ｍ，７Ｈ） 、７．０７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚと１．５Ｈｚ）、６．９０（ｄ，１Ｈ ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．５５〜６．６１（ｍ，１Ｈ）、６．４３（ｄ，１Ｈ， Ｊ＝１５．８Ｈｚ）、５．９４〜６．０８（ｍ，２Ｈ）、４．８６〜５．０２（ ｍ，４Ｈ）、４．４６〜４．５０（ｍ，１Ｈ）、４．０１〜４．０６（ｍ，１Ｈ ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、３．０９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．６Ｈｚと５．４ Ｈｚ）、２．８８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．６Ｈｚと７．０Ｈｚ）、２．４２〜 ２．６５（ｍ，３Ｈ）、１．４９〜１．６６（ｍ，７Ｈ）、１．１２（ｄ，３Ｈ ，Ｊ＝６．７Ｈｚ）、０．７８（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、０．６９（ｄ， ３Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ）。 質量分析（ＦＤ）：６４３（Ｍ⁺＋Ｈ）。 元素分析：Ｃ₃₄Ｈ₄₃ＣｌＮ₂Ｏ₈（ＴＦＡ塩）として 計算値：Ｃ５７．１０；Ｈ５．８６；Ｎ３．７０。 実験値：Ｃ６２．９７；Ｈ６．４９；Ｎ４．４２。化合物（６ｂ）の合成 化合物（６ｂ）は化合物（６ａ）用の操作法に準じて製造した（７２％）。 ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３６９（２０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）。 ＩＲ（ｃｍ^-1）（ＫＢｒ）ν：２９６２，２９３５，１７４７，１６７５，１６ ４６，１６０６，１５０２，１３９０，１２５７，１１９６，１０６５。 ＵＶ（９５％ＥｔＯＨ）λ：２３２ｎｍ（ε＝２２８８２），２５１ｎｍ（ε＝ ２５４９３）。¹ Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ：８．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．２ Ｈｚ）、７．１７〜７．３７（ｍ，７Ｈ）、６．９８〜７．１３（ｍ，３Ｈ）、 ６．７０〜６．８６（ｍ，２Ｈ）、６．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ）、６ ．４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ）、５．８６〜６．０５（ｍ，２Ｈ）、５ ．１１〜５．１５（ｍ，１Ｈ）、４．８７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．５Ｈｚと２． ８Ｈｚ）、４．６０〜４．６２（ｍ，１Ｈ）、３．８５（ｂｒｓ，３Ｈ）、３． ５９（ｂｒｓ，１Ｈ）、３．０５〜３．２１（ｍ，１Ｈ）、２．４６〜２．６０ （ｍ，３Ｈ）、２．２７〜２．３２（ｍ，１Ｈ）、１．４５〜１．７６（ｍ，３ Ｈ）、１．１１（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、０．９４〜１．０６（ｍ，６Ｈ ）、０．８６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ）、０．７９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．３ Ｈｚ）。 質量分析（ＦＤ）：６７２（Ｍ⁺＋Ｈ）。 元素分析：Ｃ₃₆Ｈ₄₇ＣｌＮ₂Ｏ₈（ＴＦＡ塩）として 計算値：Ｃ５８．１２；Ｈ６．１６；Ｎ３．５７。 実験値：Ｃ６３．３５；Ｈ７．０２；Ｎ４．７３。化合物（７ａ）の合成 化合物（６ａ）１３３ｍｇ（０．１７６ミリモル）を乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホ ルムアミド（ＤＭＦ）４０ｍＬに溶解し、アルゴン雰囲気下に室温で撹拌した。 ペンタフルオロフェニルジフェニルホスフィネート（ＦＤＰＰ）８８ｍｇ（０． １２２９リモル、１．３当量）を次に添加し、反応物を１６時間撹拌した。ＴＬ Ｃ（２０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）が反応完了を示したので、ＤＭＦを真空除去 した。得られた油状物をヘキサンとかきまぜて固体を得、これをＳｉＯ₂上でフ ラッシュクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）に付して、環化生成 物（７ａ）６０ｍｇ（出発物質としてのＴＦＡ塩を基準にして５５％）を白色固 体として得た。 ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．６７７（５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃）。 ＩＲ（ｃｍ^-1）（ＫＢｒ）ν：３３２２，３２８６，２９５０，１７５６，１７ ３５，１６６３，１６４３，１５３９，１５０３，１２５８，１２１４，１０６ ６，９７１，７４６，６９３。 ＵＶ（９５％ＥｔＯＨ）λ：２４９ｎｍ（ε＝１９８４０）。¹ Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ：７．２０〜７．３４（ｍ，７Ｈ） 、７．１１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚと１．９Ｈｚ）、６．８３（ｄ，１Ｈ ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．７０〜６．７７（ｍ，１Ｈ）、６．３４〜６．４３（ ｍ，２Ｈ）、６．０２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．８Ｈｚと８．８Ｈｚ）、５．７ ６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５Ｈｚ）、５．６４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ）、５ ．１１〜５．１８（ｍ，１Ｈ）、４．７８〜４．８６（ｍ，２Ｈ）、４．６２〜 ４．６８（ｍ，１Ｈ）、３．８６（ｓ，３Ｈ）、３．１８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１ ４．２Ｈｚと８．０Ｈｚ）、２．８２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４．２Ｈｚと７．１ Ｈｚ）、２．４５〜２．６３（ｍ，２Ｈ）、２．３７〜２．４２（ｍ，１Ｈ）、 １．５５〜１．６５（ｍ，２Ｈ）、１．４０（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）、１ ．１４（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、０．７１〜０．７４（ｍ，６Ｈ）。 質量分析（ＦＤ）：６２４（Ｍ⁺−Ｈ）。 元素分析：Ｃ₃₄Ｈ₄₁ＣｌＮ₂Ｏ₇として 計算値：Ｃ６５．３２；Ｈ６．６１；Ｎ４．４８。 実験値：Ｃ６５．１２；Ｈ６．４４；Ｎ４．４７。 実施例２ 化合物（７ｂ）の合成 化合物（７ｂ）は化合物（７ａ）用の操作法に準じて製造した（４８％）。 ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３５１（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。 ＩＲ（ｃｍ^-1）（ＫＢｒ）ν：３３４９，３２９０，２９６８，２９５８，１７ ５２，１７３２，１６５７，１６３３，１５３５，１５０６，１２５５，１１７ ５，１０６７，１０１６，６９１。 ＵＶ（９５％ＥｔＯＨ）λ：２３０ｎｍ（ε＝２１３９９）；２４９ｎｍ（ε＝ ２５１５８）。¹ Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ：７．１９〜７．３９（ｍ，７Ｈ） 、７．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）、６．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈ ｚ）、６．７１（ｍ，１Ｈ）、６．５４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ）、６． ４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ）、５．９５〜６．０５（ｍ，１Ｈ）、５． ７６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ）、５．５４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．９Ｈｚ） 、５．２０（ｍ，１Ｈ）、４．７８〜４．８９（ｍ，２Ｈ）、４．４１（ｄｄ， １Ｈ，Ｊ＝１０．６Ｈｚと４．９Ｈｚ）、３．８７（ｓ，３Ｈ）、３．１９（ｄ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４．６Ｈｚと６．９Ｈｚ）、２．８５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１４ ．６Ｈｚと７．９Ｈｚ）、２．３０〜２．６３（ｍ，４Ｈ）、１．３７〜１．６ ６（ｍ，２Ｈ）、１．１３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、０．９６〜０．９９ （ｍ，６Ｈ）、０．７４（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ）、０．７０（ｄ，３Ｈ， Ｊ＝６．２Ｈｚ）。 質量分析（ＦＤ）：６５２（Ｍ⁺−Ｈ）。 元素分析：Ｃ₃₆Ｈ₄₅ＣｌＮ₂Ｏ₇として 計算値：Ｃ６６．２０；Ｈ６．９４；Ｎ４．２９。 実験値：Ｃ６５．９４；Ｈ６．８６；Ｎ４．２３。 実施例３ エポキシド（８ａ）および（９ａ）の合成 化合物（７ａ）５０ｍｇ（０．０８ミリモル）を乾燥塩化メチレン３ｍＬに溶解 し、窒素雰囲気下に室温で撹拌した。ｍ−クロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ）２ ８ｍｇ（０．１６ミリモル、２当量）を次に添加して、反応をＨＰＬＣ（２×３ ．９ｍｍ×１５０ｍｍ、Ｎｏｖａｐａｋ、Ｃ₁₈カラム、８０％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ 、１．０ｍＬ／分、λ＝２５６ｎｍ）で監視した。反応物を４．５時間撹拌した がＨＰＬＣは反応が５０％しか完了していないことを示したので、ｍ−ＣＰＢＡ ２８ｍｇ（２当量）を追加した。一夜（２４時間）撹拌後、ＨＰＬＣでは出発物 質を示さず、２／１の比率で形成したエポキシド２種（８ａ）および（９ａ）を 示した。この反応物を塩化メチレンで希釈し、５％ＮａＨＣＯ₃および食塩水で 洗浄した。この塩化メチレンを次にＮａ₂ＳＯ₄上で乾燥し、真空濃縮して粗製の 白色固体を得て、これを次の条件下にセミ分取用逆相Ｃ₁₈ＨＰＬＣカラムで精製 した： カラム：「Ｒａｉｎｉｎ」２．５ｃｍ×３０ｃｍセミ分取用逆相Ｃ₁₈ＨＰＬＣカ ラム。 溶媒：６８％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ、イソクラティック溶離。 流速：２０ｍＬ／分。 λ：２２０ｎｍ。 エポキシド（８ａ）：β−異性体、保持時間（２×３．９ｍｍ×１５０ｍｍ、Ｎ ｏｖａｐａｋ、Ｃ₁₈カラム、８０％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ、１．０ｍＬ／分、λ＝２ ２０ｎｍ）：７．５１分。 エポキシド（９ａ）：α−異性体、保持時間（２×３．９ｍｍ×１５０ｍｍ、Ｎ ｏｖａｐａｋ、Ｃ₁₈カラム、８０％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ、１．０ｍＬ／分、λ＝２ ２０ｎｍ）：８．３３分。 実施例４ エポキシド（８ｂ）および（９ｂ）の合成 化合物（８ｂ）および（９ｂ）は化合物（８ａ）および（９ａ）用の操作法に準 じて製造したが、但し、精製にはこれと異なるカラムを使用した。 カラム：Ｔｅｃｈｎｉｋｒｏｍ、「ｋｒｏｍａｓｉｌ」２ｃｍ×２５ｃｍセミ分 取用逆相Ｃ₁₈ＨＰＬＣカラム（５ｍ）。 溶媒：５０％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ〜７０％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ勾配、２時間。 流速：２８ｍＬ／分。 λ：２２０ｎｍ。 エポキシド（８ｂ）：β−異性体、保持時間（２×３．９ｍｍ×１５０ｍｍ、Ｎ ｏｖａｐａｋ−Ｃ₁₈カラム、７０％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ、１．０ｍＬ／分、λ＝２ ２０ｎｍ）：１４．６分。 エポキシド（９ｂ）：α−異性体、保持時間（２×３．９ｍｍ×１５０ｍｍ、 Ｎｏｖａｐａｋ−Ｃ₁₈カラム、７０％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ、１．０ｍＬ／分、λ＝ ２２０ｎｍ）：１６．６分。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION                                Pharmaceutical compounds   The present invention relates to the fields of pharmaceuticals and organic chemistry, Cryptophycin compounds are provided.   Neoplastic disease is characterized by proliferation of cells that do not normally control their proliferation It is the leading cause of death in humans and other mammals. Cancer chemistry Clinical experience in therapy suggests new and more effective drugs to treat this disease Has proved necessary.   The microtubule system of eukaryotic cells is a major component of the cytoskeleton, dynamic assembly and And decomposition. This is a heterodimer of tubulin that polymerizes into microtubules To form Microtubules play a key role in controlling cell structure, metabolism and division Is playing. The dynamic state of a microtubule is critical to its normal function. cell With respect to fission, tubulin polymerizes into microtubules, which are the mitotic spindles. Form the body. After mitotic use of the spindle is complete, the microtubules are then depolymerized. I do. Therefore, it interferes with microtubule polymerization or depolymerization, thereby inhibiting mitosis Drugs include cancer chemotherapeutics that are most effective for clinical use.   In addition, the compounds according to the invention also exhibit a fungicidal action. In addition, this microtubule system These agents with the ability to inhibit can also be used for research purposes.   Certain cryptophysin compounds are known in the literature. However, solubility and Cryptophysin compounds with higher stability and stability are desirable. In addition, crypto A wider range of physin compounds could add another treatment to cancer patients U. The present inventors have now prepared using a total synthesis method, and thus have a pharmaceutically useful drug. Novel cryptophysin compounds have been discovered that are suitable for development as agents. This Cryptophysin Ring System Conveniently Completed Using Commercially Available Amino Acids Is what is done.   The present invention provides a compound of formula I:[Where, Ar is phenyl or a simple unsubstituted, substituted aromatic, heteroaromatic group, C₁~ C_{1 Two} -Alkyl, C_Two~ C₁₂-Alkene, C_Two~ C₁₂-Alkyne, NR⁵¹R⁵², OR^{Five Three} And the formula Ar ': Is selected from the group consisting of the groups represented by R⁵¹Is hydrogen and C₁~ C_Three-Selected from the group consisting of alkyl. R⁵²Is hydrogen and C₁~ C_Three-Selected from the group consisting of alkyl. R⁵³Is C₁~ C₁₂-Selected from the group consisting of alkyl. R⁵⁴Is hydrogen, C₁~ C₆-Alkyl, simple aromatic, phenyl, COOR⁵⁷, PO_Three H, SO_ThreeH, SO_TwoR⁵⁸, NR⁵⁹R⁶⁰, NHOR⁶¹, NHCHR^{61 '}, CN, N O_Two, Halogen, OR⁶², And SR⁶³Selected from the group consisting of R⁵⁵Is hydrogen, C₁~ C₆-Alkyl, simple aromatic, phenyl, COOR⁵⁷, PO_Three H, SO_ThreeH, SO_TwoR⁵⁸, NR⁵⁹R⁶⁰, NHOR⁶¹, NHCHR^{61 '}, CN, N O_Two, Halogen, OR⁶², And SR⁶³Selected from the group consisting of R⁵⁶Is hydrogen, C₁~ C₆-Alkyl, simple aromatic, phenyl, COOR⁵⁷, PO_Three H, SO_ThreeH, SO_TwoR⁵⁸, NR⁵⁹R⁶⁰, NHOR⁶¹, NHCHR^{61 '}, CN, NO_Two, Halogen, OR⁶², And SR⁶³Selected from the group consisting of You. R⁵⁷Is hydrogen and C₁~ C₁₂-Selected from the group consisting of alkyl. R⁵⁸Is hydrogen and C₁~ C₁₂-Selected from the group consisting of alkyl. R⁵⁹Is hydrogen, (C₁~ C₆) -Alkyl and fluorenylmethoxycarbonyl ( FMOC). R⁶⁰Is hydrogen and (C₁~ C₆) -Alkyl. R⁶¹Is hydrogen, OR⁶⁴, CH_TwoNHR⁶⁵, NHR⁶⁵, And fluorenylmethoxy Selected from the group consisting of carbonyl (FMOC). R^{61 '}Is hydrogen, OR⁶⁴, CH_TwoNHR⁶⁵, NHR⁶⁵And fluorenylmethoxyca It is selected from the group consisting of rubonyl (FMOC). R⁶²Is hydrogen and C₁~ C₆-Selected from alkyl. R⁶³Is hydrogen and C₁~ C₆-Selected from alkyl. R⁶⁴Is hydrogen, (C₁~ C₆) -Alkyl, CH_TwoNR⁶⁶R⁶⁷From the group consisting of Selected. R⁶⁵Is hydrogen and C₁~ C₆-Alkyl, NH_Two, And fluorenylmethoxyca It is selected from the group consisting of rubonyl (FMOC). R⁶⁶Is hydrogen and C₁~ C₆Alkyl and fluorenylmethoxycarbonyl ( FMOC). R⁶⁷Is hydrogen and C₁~ C₆-Selected from the group consisting of alkyl. R¹And R^TwoAre independently halogen, OH, SH, amino, mono (C₁~ C₆ ) -Alkylamino, di (C₁~ C₆) -Alkylamino, tri (C₁~ C₆) -A Rukylammonium, (C₁~ C₆) -Alkylthio, di (C₁~ C₆) -Alkyl Sulfonium, sulfate, phosphate, OR³¹, And SR³¹Composed of [Where R¹And R^TwoSelected from the group consisting of Is OH, SH, OR³¹And SR³¹Selected from the group consisting of Or] R¹And R^TwoTogether with an epoxide ring, an aziridine ring, an episulfide ring, Forms a phosphate, cyclopropyl or monoalkyl phosphate ring Or R¹And R^TwoIs C₁₈And C₁₇Together with C₁₈And C₁₇A second bond between It may be formed. R^ThreeIs a lower alkyl group. R⁷Is composed of H, a lower alkyl group, and all side chains of D- and L-amino acids. Selected from the group. R³¹Are P, S, (C₁~ C₁₂) -Alkyl, B, R³², And Si Group. R³²Is amino acids, carbohydrates, amino sugars, (saccharides)_q, C (O) (C₁~ C₆) -Alkyl-R³⁸, And the formula: Is selected from the group consisting of the groups represented by R³⁴Is (C₁~ C_Four) -Alkyl. R³⁵Is hydrogen or (C₁~ C_Three) -Alkyl. R³⁶Is OH, halo, (C₁~ C_Three) -Alkyl, OR³⁴, NO_Two, NH_TwoOr f It is a terrorist aromatic ring. R³⁸Is COOR³⁹,formula: A group represented by_TwoOr amino acids. R³⁹Is H or (C₁~ C₆) -Alkyl. R⁴⁰, R⁴¹, And R⁴²Each hydrogen, OR⁴³, Halo, NH_Two, NO_Two, OPO_Three (R⁴⁶)_Two, -O (C₁~ C₆) -Alkylphenyl, and R⁴⁵From Independently selected from the group formed. R⁴³Is C₁~ C₆-Alkyl. R⁴⁵Is selected from the group consisting of aromatic groups and substituted aromatic groups. R⁴⁶Is H, Na, and -C (CH_Three)_ThreeSelected from the group consisting of q is 2, 3, or 4] And a pharmaceutically acceptable salt thereof. I do.   The present invention relates to the use of a pharmaceutical formulation, an effective amount of a compound of formula I, to disrupt the microtubule system. Mammalian cell comprising administering an effective amount of a compound of Formula I A method of inhibiting the growth of a compound of formula I, and administering an effective amount of a compound of formula I. Provided are methods of treating neoplastic diseases of a encompassing mammal. Infection caused by mold An antifungal effective amount of a compound of formula I in an animal afflicted with or at risk of infection. Also provided is a method of controlling a microbial infection comprising administering a compound.   As used herein, the term “simple alkyl” refers to a saturated or unsaturated, branched or unbranched chain. Or C which may be a linear chain₁~ C₇-Alkyl. Never this Examples include, but are not limited to, methyl, ethyl, n-propyl, Isopropyl, n-butyl, propenyl, ethenyl, sec-butyl, n-pen Butyl, isobutyl, tert-butyl, sec-butyl, methylated butyl Group, pentyl, tert-pentyl, sec-pentyl, methylated pliers And other groups. The term "alkenyl" has 1 to 3 double bonds It represents an alkyl group as defined above. The term "alkynyl" refers to at least one triple bond And an alkyl group as defined above having the formula: Alkynyl has only one triple bond Is particularly preferred. The term C wherein n 'is an integer from 1 to 12₁~ C_{n '}-Al Kill means an alkyl group having from one to the specified number of carbon atoms. This C₁~ C_{n '}-Alkyl can be straight-chain or branched.   As used herein, the term "D- and L-amino acids" refers to the D-forms of the following amino acids And L-forms are shown and encompassed: alanine, leucine, isoleucine, ba Phosphorus, serine, glutamate, glutamine, aspartate, tryptophan, Lysine, arginine, tyrosine, histidine, methionine, phenylalanine, Asparagine, cysteine, glycine, proline, and threonine. Therefore, The term "all side chains of D- and L-amino acids" refers to both organic and amino acid groups. A group attached to the carbon to which it is attached is meant. For example, if you are not limited to these No, but -CH of alanine_Three, Leucine CH_TwoCH (CH_Three)_Two, And so on.   As used herein, the term "amino acid" refers to an organic acid that contains an amino group. This The term encompasses both naturally occurring and synthetic amino acids, so the amino group Can, but need not, be attached to the carbon that is attached next to the acid. You. This amino acid group is attached to the core molecule via the acid function. This term never Although not limited to these, (CH_Two)_TwoNH_TwoCOOH, CH_TwoC H (NH_Two) CH_TwoCOOH, CH_ThreeCH_Two(NH_Two) CH_TwoCOOH, CH_ThreeSCH_Two CH_Two(NH_Two) CHCOOH and others.   The term "carbohydrate" as used herein is a group consisting of carbon, hydrogen, and oxygen Wherein the ratio of hydrogen to oxygen is the same as water, or It is close to the same ratio as. The term "carbohydrate" also refers to aldehydes or keto Is an alcohol or produces aldehydes or ketones by hydrolysis. Shows the compound produced. The term "carb" is something commonly understood by skilled professionals It is. The term is in no way limited to, for example, C₁₂H_{twenty two}O₁₁ And C₆H_TenO_FiveAnd so on.   As used herein, the term "amino sugar" refers to any of the possible positions on a carbohydrate molecule. Shows carbohydrate groups containing one to three amino substituents.   As used herein, the term "saccharide" is used to form a disaccharide or polysaccharide. 1 shows a carbohydrate subunit for the present invention. This term is in no way limiting However, it also means, for example, lactose, maltose, sucrose, fructose, starch, and the like.   As used herein, the term “substituted phenyl” refers to simple alkyl, Cl, Br, F A non-hydrocarbon, which may be independently selected from the group consisting of A phenyl group having from 1 to 3 sexual substituents.   As used herein, the term “substituted benzyl” refers to simple alkyl, Cl, Br, F A non-hydrocarbon, which may be independently selected from the group consisting of A benzyl group having from 1 to 3 sexual substituents. Here these May be bonded to any of the possible carbon atoms.   As used herein, the term "cycloalkyl" refers to a saturated C_Three~ C₈-Cycloalkyl Represents a group, which is a C₁~ C_Three-Alkyl, halo, and OR^{twenty two}Group consisting of And may have 0 to 3 substituents selected from This R^{twenty two}Is hydrogen and And C₁~ C_Three-Selected from alkyl. The substituent can be on any of the possible carbon atoms They may be combined. Particularly preferably, the cycloalkyl is substituted or unsubstituted. Shows cyclohexyl.   As used herein, the term "lower alkoxyl" refers to a carbon atom bonded to an oxygen atom. It refers to any alkyl group having from 1 to 5 offspring. As used herein The term "lower alkyl" refers to an alkyl group having from 1 to 6 carbon atoms. Means and includes but is not limited to linear or non-linear hydrocarbon chains But not for example, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobuty Tert-butyl, sec-butyl, methylated butyl group, pentyl, tert-pentyl, sec-pentyl, methylated pentyl group and the like including. As used herein, the term “allyl-substituted alkene” includes allylic substitutions. Alkenes having from 1 to 7 carbon atoms. This specification The term "unsaturated lower alkyl" used in₁Is clearly unexpected, but Wherein from 1 to 2 double bonds are present in the unsaturated lower alkyl substituents of Means a lower alkyl group as defined above. A preferred unsaturated lower alkyl is -CH_Two-C H = CH_TwoIt is. The term "lower alkyl-C_Three~ C_Five-Cycloalkyl "is C_Three~ C_Five -C substituted by a cycloalkyl group₁~ C₆-Represents alkyl. Suitable lower Al Kill-C_Three~ C_Five-A cycloalkyl group is -CH_Two-Cyclopropyl, which is Group is R in the skeletal structure of the cryptophycin compound.⁹To CH_TwoAre coupled through.   As used herein, the term "epoxy ring" refers to a skeleton having two carbon atoms and one oxygen atom. Means a three-membered ring. The term “aziridine ring” as used herein is defined as It means a three-membered ring whose skeleton is composed of two carbon atoms and one nitrogen atom. This specification The term "sulfide ring" used in the above is a skeleton composed of two carbon atoms and one sulfur atom Means a three-membered ring. As used herein, the term “episulfide ring” refers to a skeleton Represents a three-membered ring composed of two carbon atoms and one sulfur atom. Used in this specification The term "sulfate group" as used comprises a carbon-carbon-oxygen-sulfur-oxygen skeleton. A 5-membered ring having two additional oxygen atoms attached to this sulfur atom You. As used herein, the term "cyclopropyl ring" has a skeleton consisting of three carbon atoms. Means a three-membered ring formed. As used herein, the term "monoalkyl phosphate" The ring is composed of a carbon-carbon-oxygen-phosphorus-oxygen skeleton, and is bonded to this phosphorus atom. Has two additional oxygen atoms that combine, one of which has a lower alkyl group Means a 5-membered ring.   As used herein, a “simple unsubstituted aromatic group” is a 4n + 2 electron within a monocyclic conjugated system. Represents a normal aromatic ring having an atom, for example, but not limited to, Nil, furyl, pyrrolyl, thienyl, pyridyl, other, or bicyclic, For example, but not limited to, indolyl or naphthyl.   As used herein, "simple substituted aromatic group" refers to halogen and lower alkyl groups Represents a phenyl group substituted with one group selected from the group consisting of:   As used herein, a "heteroaromatic group" is composed of oxygen, nitrogen, and sulfur. 4 shows an aromatic ring containing one or more non-carbon substitutions selected from the group consisting of: this But not limited to an aromatic ring having 3 to 8 members, and Those in which at least one member is a heteroatom and the remaining members of the ring system are carbon Most preferred.   As used herein, "halogen" or "halo" is Indicates members of the group known as Halogenation method is limited to this Although not specified, addition reaction of hydrogen halide, substitution at high temperature, photohalogenation, These methods are known to the skilled practitioner.   As used herein, the term "mammal" is intended to indicate a higher vertebrate mammal. You. The term "animal" includes, but is not limited to, mammals, reptiles, and amphibians And fish. The term "mammal" is limited to this But not including humans. As used herein, the term "treatment" refers to a designated medical condition Prevention or amelioration or elimination of an established condition. Claim here Cryptophycin compounds are used for animal health purposes as well as in human patients Can be useful for the treatment of   The step of preparing the compounds of this invention is most preferably performed in the presence of a solvent. Skilled professionals can select a suitable solvent using standard strategies. Proper inactivity Examples of the organic solvent include, but are not limited to, tetrahydrofuran. (THF) and dimethylformamide (DMF) Including those that have been DMF is particularly preferred. Aqueous solvents are utilized herein Some may be suitable for any of the processes. If you want The pH of such aqueous solvents may be adjusted for propulsion.   Preferred features of the invention are set forth below in tabular form, with the features being independently selected and A preferred embodiment of the present invention may be provided. This invention is in no way limited to the following features: Not something: A) R⁶Is chloromethoxyphenyl; B) R⁷Are ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, pentyl Or isopentyl; C) R⁷Is isopropyl; D) R^ThreeIs methyl; E) Ar 'is NR⁵⁹R⁶⁰, NHOR⁶¹, NHCHR^{61 '}Selected from the group consisting of Phenyl with the selected substituents; F) R¹And R^TwoForm an epoxide ring; G) R⁷Is methyl; H) R^TwoIs glycinate; I) R^TwoIs acylate; J) The compounds of the formula I are used for disruption of the microtubule system; K) compounds of formula I are used as anti-neoplastic agents; L) the compounds of formula I are used for the treatment of cancer in mammals; M) compounds of formula I are used as antifungal agents; N) compounds of formula I are used as antibacterial agents; O) Ar is phenyl; P) Ar is OH, OCH_ThreeSelected from the group consisting of, halo, and methyl Phenyl substituted with one or two of the following groups: Q) R^TwoIs halogen, amino, monoalkylamino, dialkylamino, tria Rukylammonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfate, Phosphate, OR³¹, And SR³¹Selected from the group consisting of R) the compounds of formula I are used for the treatment of mold infections; S) Ar 'is para-ethyl-substituted phenyl; and T) Ar 'is paramethyl-substituted phenyl.   The present invention provides a subject with an effective amount of a pharmaceutical or veterinary composition disclosed herein. Due to overgrowth of mammalian cells, including administering to block cell growth Methods for alleviating pathological conditions are provided. In one preferred embodiment of the present invention, The method further comprises at least a therapeutic agent directed to alleviating the pathological condition. Administering one additional type to the subject. One of the preferred embodiments of the present invention is as follows. Thus, the pathological condition is characterized by neoplasia formation. Of the present invention In a more preferred embodiment, the neoplasm is a mammary gland, a pulmonary vesicle, a non-pulmonary vesicle, a colorectal rectum, Leukemia, melanoma, adrenocarcinomas of the pancreas, central nervous system (CNS), ovary, anterior Gonads, soft tissue or bones, sarcomas of the head or neck, stomach including pancreas and esophagus, Neuroendocrine, including stomach, myeloma, bladder, kidney, thyroid, and non-Hodgkin's disease and It is selected from the group consisting of neoplasms such as Hodgkin's disease.   As used herein, "neoplasm" refers to a neoplasm, which is an abnormal growth of cells, and Breeding occurs because it is not subject to normal growth restrictions. As used herein, "anti- Neoplastics block, eliminate, delay or reverse the neoplastic phenotype of cells Compound, composition, mixture, co-mixture, or compound.   Antimitotic agents are divided into three groups based on the molecular mechanism of action. First group Consists of drugs, including colchicine and colcemide, and can block tubulin. This prevents the formation of microtubules. The second group is vinblastine and vincristine Consists of drugs containing stin and induces paracrystalline assembly of tubulin You. Vinblastine and vincristine are well known anti-cancer drugs, Its action of disrupting mitotic spindle microtubules preferentially inhibits hyperproliferative cells. The third group consists of drugs containing taxol, which promote the polymerization of tubulin and Stabilize the tube.   Expression and neoplasia of drug-resistant and multidrug-resistant phenotypes by multiple tumor cells Clinically proven mechanism of action of anti-microtubule drugs against cancer is in non-drug resistant neoplastic cells Cytotoxic, also cytotoxic to neoplastic cells with a drug-resistant phenotype Requires the development of anti-microtubule agents.   In treating cancer, chemotherapy, surgery, radiation therapy, biological response modification Drug treatment and immunotherapy are currently used. Each aspect of the treatment There are certain applications known to the ordinary expert in the field, One or all of them may be employed in an attempt to reach destruction. Further In addition, combination chemotherapy, ie, combining a compound of formula I with other neoplastic agents Combination chemotherapy is also provided by the subject matter of the present invention, and combination therapy is a monotherapy. It is generally more effective than one antineoplastic agent. Thus, another aspect of the invention is non-toxic Treatment of at least one compound of formula I, which provides the aforementioned advantages including addition salts A composition comprising a therapeutically effective amount is provided. The composition may also comprise a physiologically acceptable liquid Agent, gel, or provided with solid carriers, diluents, adjuvants and additives It is. This carrier, adjuvant and excipients are available in the United States Pharmacopeia XXII Edition, U.S.A. Chemical Collection XVII version, U.S.A. S. Pharmacopeia Convention Co., Rockville, MD (1989). Other places Placement method is "AHFS / Drug / Information (AHFS Pharmaceutical Information ) ", 1993 edition, American Hospital Formula y-Service, pages 522-660. Yes, these documents Deviations are also well known to skilled professionals and are readily available.   The invention further relates to at least one compound of the formula I and another anti-neoplastic agent A pharmaceutical composition comprising at least one and used for treating a neoplastic disease. provide. Antineoplastic agents which may be used in combination with a compound of formula I include: “Merck Index”, 11th edition, pp. 16-17, Includes those described in Merck (1989). This "Merc "k-Index" is widely recognized and readily available to skilled professionals. is there.   In another aspect of the invention, the antineoplastic agent is in no way limited to these. But not methotrexate, 5-fluorouracil, 6-mercaptopril , Cytosine arabinoside, hydroxyurea, and 2-chlorodeoxya It may include those selected from the group consisting of denosine. It may be an antimetabolite. In another aspect of the invention, intended anti-neoplastic agents Is, but by no means limited to, cyclophosphamide, mefara , Busulfan, paraplatin, chloroambucil, and nitrogen mass May include those selected from the group consisting of It is an alkylating agent. In yet another embodiment, the antineoplastic agent never Vincristine, vinblastine, taxol, but not limited to And those selected from the group consisting of etoposide and May be a plant alkaloid. In yet another aspect, the intended Antineoplastic agents include, but are not limited to, doxorubicin, daxorubicin, From the group consisting of unorubicin, mitomycin C, and bleomycin Antibiotics, which may include those selected. Yet another state In certain embodiments, the intended antineoplastic agent is in no way limited to these No, but not for carsterone, diomostanobolone propionate, epithiosta Nord, mepithiostan, testrolactone, tamoxifen, polyestradi All phosphate, megesterol acetate, flutamide, nilutamide And those selected from the group consisting of trilotane May be a hormone.   In yet another embodiment, the contemplated antineoplastic agent is in no way limited to these. Although not specified, L-asparaginase and, for example, and without limitation, Consists of aminoacridine derivatives such as amsacrine An enzyme, which may include one selected from the group. Other anti Neobiotics include "Handbook of Cancer, Chemothera py (Cancer Chemotherapy Handbook), 3rd Edition, Little Brown (19 91), Skeel, Roland-T. Author, "Antineoplasty c-Drugs-and-Biologic-Response-Modify er: Classification, Use ・ Toxicity ・ o f. Clinically Usefu Agents (anti-neoplastic agents and organisms) Response Modifiers: Classification, Usage and Toxicity of Clinically Useful Drugs) Includes   These compounds and compositions can be administered to mammals for veterinary use. it can. For example, livestock animals can be treated in much the same way as human clinical patients. In general, the dose required for a therapeutic effect will depend on the mode of use, the mode of administration and the particular It will vary according to the specific needs of the Lord. Typically, the dose will be about 0. Range from 001 to 1000 mg / kg host body weight, more usually 0.01 To 10 mg / kg host body weight. Or separately, these Doses within the range may be administered at once or as an IV injection until the desired benefit is obtained. it can. In fact, drug dosages and routes of administration may vary in relative efficacy, relative toxicity, The growth characteristics of tumors and the effect of compounds of formula I on the cell cycle, Do not select based on mechanics, patient age, gender, physical condition, and previous treatment. Must be determined by a skilled professional.   Compounds of Formula I may be with or without another antineoplastic agent Alternatively, it may be formulated into the therapeutic composition as such or in the form of a salt. Pharmaceutically acceptable Non-toxic salts used are, for example, sodium, potassium, ammonium, calcium, Those derived from inorganic bases such as ferric hydroxide, and isopropyl alcohol Min, triethylamine, 2-ethylaminoethanol, histidine, procaine Base addition salts which may be derived from organic bases such as Is included. Acceptable non-toxic salts are also available as acid addition salts with free cationic groups May be formed, and are generally inorganic acids such as, for example, hydrochloric acid or phosphoric acid. Or organic acids such as acetic acid, oxalic acid, tartaric acid, mandelic acid, etc. It is formed together with. Additional additional features that the present invention provides to skilled professionals Additives are found, for example, in the United States Pharmacopeia.   The route of administration employed will determine whether a carrier is suitable for addition to a therapeutic composition. Depends on. For example, an anti-neoplastic composition may be formulated for oral administration. this Such compositions are typically formulated as solutions or suspensions or in solid dosage forms Is done. Oral preparations usually include binders, fillers, carriers, preservatives, stabilizers, Agent, buffer, mannitol, lactose, starch, magnesium stearate, sacchar Contains additives such as sodium phosphate, cellulose, magnesium carbonate, etc. I do. These compositions include solutions, suspensions, tablets, pills, capsules, sustained release Formulation, or in the form of a powder, typically containing 1% to 95% of the active ingredient. contains. More preferably, the composition contains from about 2% to about 70% of the active ingredient I do.   The composition of the present invention may be formulated into an injection as a liquid, suspension, or emulsion. It may be. Solid formulations are suitable for dissolution or suspension in a liquid prior to injection. That's right. Such injections include subcutaneous injections, intravenous injections, intraperitoneal injections, intramuscular injections, and injections. It may be administered as an intrathecal injection or as an intrapleural injection. Active ingredients or additives Contains a diluent, carrier or excipient that is physiologically acceptable and compatible with the active ingredient. Often match. Suitable diluents and additives include, for example, water, saline, dext Loin, glycerin, others and combinations thereof. In addition to this These compositions may then be used, for example, as wetting or emulsifying agents, stabilizing agents or pH. A small amount of an auxiliary agent such as a buffering agent may be contained.   The present invention further provides a compound of formula I in an amount sufficient to inhibit the growth of mammalian cells. Contacting these compounds with these compounds inhibits the growth of mammalian cells To provide a method of using a compound of formula I to One of the preferred embodiments Is a method of inhibiting the growth of overgrown mammalian cells. For the purpose of this invention Is a "hyperproliferating mammalian cell" is a mammalian cell, a characteristic limitation of growth (Eg, programmed cell death). More suitable In embodiments, the mammalian cell is human. The invention further relates to compounds of the formula I Contacting at least one and at least one anti-neoplastic agent with a mammalian cell Provide a way to The types of anti-neoplastic agents contemplated herein are described above.   The invention further provides a hyperproliferative mammal having a drug resistant phenotype, including a multidrug resistant phenotype. The compound of formula I and the cell are combined in an amount sufficient to inhibit the growth of the cell. To inhibit the growth of hyperproliferative cells by contacting, Methods for using the compounds are provided. In a preferred embodiment, the mammalian cell is human It is. The present invention further relates to a compound of formula I and another antineoplastic agent as defined above. At least one method of contacting is provided.   The present invention provides an effective amount of Formula I in a subject for inhibiting the growth of hyperproliferating cells. Administering a pharmaceutical composition containing the compound may result in the overgrowth of mammalian cells. Methods are provided for alleviating the resulting pathological condition, eg, neoplastic disease. This specification The "pathological condition" used in this study refers to the proliferation of mammalian cells that are not subject to normal growth limitation. Shows pathology due to breeding. Such cell growth is due to the neoplasm as described above. Sometimes.   In a further preferred embodiment, the neoplastic cells are human. The present invention is represented by Formula I Of the compounds used in combination with other therapeutic agents as well as other types of antineoplastic agents. To alleviate such pathological conditions.   The effectiveness of the compounds of the invention is determined using standard methods known to the skilled expert Can be evaluated. Some examples of such methods are as follows:   The compounds of this invention have been found to be useful against pathogenic fungi. An example For example, useful for treating Cryptococcus neoformans Cryptococcus using yeast nitrogen-based dextrose agar medium This can be exemplified by an inspection result for neoformans. To perform this test The compound of the invention is dissolved in Tween 20 added dimethyl sulfoxide. Aseptic Perform a two-fold serial dilution with distilled water / 10% DMSO and use a dilution assay agar plate. Final drug concentrations ranging from 0.008 μg / mL to 16.0 μg / mL, Analysis of 84 expanded specimens of Cryptococcus neoformans Perform settings. 84 Cryptococcus neoformans isolates The minimum inhibitory concentration against is measured to illustrate the desired antifungal action.   The compound is expressed in human nasopharyngeal carcinoma cell line KB, human colorectal adrenoca Corvette test for minimum inhibitory concentration for rutinoma cell line LoVo Law, Corbett, T .; H. Other authors, "Cytotoxic Antican cer. Drugs: Models. and. Concepts for Dr ug ・ Discovery ・ and ・ Development (cytotoxic anticancer Agents: Models and Concepts for Drug Discovery and Development) ", pp. 35-87, Kluwe r Academic Publishers: Norwell, 1992 , Search using. Valeriote used for evaluation of compounds Other authors, "Discovery and Development" of An Ticancer Agents (Discovery and Development of Anticancer Agents) ", Kluwer A See also, Cademic Publishers, Norwell, 1993.   The most active compounds are further differentiated in cell types using the Corvette assay 4 species, eg, murine leukemia, murine solid tumor, human solid tumor, and low grade It is evaluated for cytotoxicity against fibroblasts.   The compound was also implanted in a wide range of mice, including drug-resistant tumors. And human tumors.   In subsequent tests, the tumor-bearing rate T / C (mean tumor-bearing in treated animals versus mean in untreated animals) Cancer-bearing). National Cancer Institute According to the standards, a T / C value of 42% or less is considered valid; National According to the Cancer Institute standard, a T / C value of 10% or less is It is considered to have significant potential for clinical use.material   Vinblastine, cytochalasin B, tetramethylrhodamine isocyanate (TRITC) -Phalloidin, Sulfrodamine B (SRB) and β-Chu Antibodies to Blin and Vimentin are available from well-known distributors. Eag Eagle's basal medium (BME) and fetal bovine serum (FBS) Can be purchased.Cell lineage Jurkat T cell leukemia line and A-10 rat aortic smooth muscle cells were Ame Riccan ・ Type ・ Culture ・ Collection from F Culture in BME containing 10% BS and 50 μg / mL gentamicin sulfate You. Selected for resistance to human ovarian cancer cells (SKOV3) and vinblastine The selected subsidiary system (SKVLBI) is Ontario Cancer Ins Courtesy of Dr. Victor Ling of Titute. Both of these cell lines Is in BME containing 10% FBS and 50 μg / mL gentamicin sulfate. save. To maintain selective pressure on P-glycoprotein-overexpressing cells Vinblastine was added to SKVLBI cells at a final concentration of 1 μg 24 hours after subculture. / ML.Cell proliferation and cell cycle arrest assays Cell proliferation assays are performed as described by Skehan et al. Jurkat cells For this, the culture was treated with the specified drug described by Skehan and counted with a hemocytometer. Count and determine total cell number. The percentage of cells in mitosis is 0.4% gims in PBS Measured by staining and then quickly washing with PBS. Small per treatment At least 1000 cells were evaluated for mitosis and the total number of cells counted The mitotic index is calculated as the ratio of cells showing the mitotic image to the mitotic index.Immunofluorescence assay Expand A-10 cells in BME / 10% FBS on cover glass to near full growth Let them breed. Compounds in PBS are added to the specified final concentration and cells are incubated for an additional 24 hours Incubate. Fine staining for microtubules and intermediate filaments The cells were fixed with cold methanol and incubated with PBS containing 10% bovine serum. To block non-specific binding sites. Cells are transformed into monoclonal anti-β-tubulin Or any of the monoclonal anti-vimentins at the dilution recommended by the manufacturer. Incubate at 37 ° C for 60 minutes. Subsequently, the bound primary antibody was Visualize by incubation for 45 minutes with sane-conjugated rabbit anti-mouse IgG You. Place the cover glass on a microscope slide and inspect the fluorescence pattern. Zeiss optical microscope equipped with an epifluorimeter for fluorescein Take a picture using Ill. Cells are stained with 3% paraformal for microtubule staining. Fixed with dehyde, permeable with 0.2% Triton X-100, and sodium borohydride Chemically reduce with lium (1 mg / mL). Next, 100 nM-TRITC-F Alloidin-containing PBS was added and the mixture was incubated at 37 ° C for 45 minutes. To work. After quickly washing the cells with PBS, place a cover glass on the Take a photo like.Cryptophysin and vinblastine increase Jurkat cell proliferation and cell circumference Effect on the period   Effects of cryptophysin compounds on cell proliferation and cell percentage during mitosis and A dose-response curve is measured for the effect of vinblastine.Effect of cytochalasin B, vinblastine and cryptophysin on cytoskeleton effect   Aortic smooth muscle (A-10) cells were grown on coverslips, PBS, 2 μM -Cytochalasin B, 100 nM-vinblastine or 10 nM-cryptov Treat with glycine compound. 24 hours later, microtubules and vimentin intermediate filament Cells were visualized by indirect immunofluorescence, and the microfilaments were Stain using phalloidin. Examine the morphological effects of each drug. Unprocessed The vesicle displays a delicate microtubule network completed at the perinuclear microtubule-forming center. Vimentin Intermediate filaments were evenly distributed throughout the cytoplasm, whereas microfilaments Bundles were concentrated along the major axis of the cells. Cytochalasin B is a paracrystalline residue Complete depolymerization of the microfilaments with the accumulation of. This compound is fine It did not affect the distribution of either tubules or intermediate filaments. Klip Decreased microtubule status and liming in toficin-treated microtubules and vimentin intermediates. Collapse of the intermediate filaments is observed.Effects of cryptophysin and vinblastine on taxol-stabilized microtubules   After treating A-10 cells with (0 μM or 10 μM) -taxol for 3 hours, PBS, 100 nM-vinblastine or 10 nM-cryptophycin compound Is added. After 24 hours, microtubule formation was determined by immunofluorescence as described above. inspect. Microtubules in taxol-treated cells were generally higher than those in control cells. In particular, in the cell pole region, the cells gathered in bundles. As above, for non-pretreated cells In this case, vinblastine caused complete depolymerization of microtubules. However, Pretreatment with xol prevents the depolymerization of microtubules in response to vinblastine Was. Similarly, when pretreated with taxol, small amounts of Tubes are observed.Reversibility of microtubule depolymerization by vinblastine and cryptophysin   A-10 cells were treated with 100 nM vinblastine or 10 nM Treatment for 24 hours causes complete depolymerization of the microtubules. Next, wash the cells, Incubate in agent-free medium for 1 or 24 hours. Microtubules quickly One hour after re-polymerization and removal of vinblastine, well-defined levels of microtubules And showed a morphologically complete level of recovery after 24 hours. This cell Treatment with the cryptophysin compound of the present invention to remove the cryptophysin compound 1 hour or 24 hours later, and observe the state of the microtubules.Effect of combination of vinblastine and cryptophysin on cell proliferation   SKOV3 cells were treated with a combination of cryptophysin and vinblastine for 48 hours. Manage. The percentage of surviving cells was then measured and the IC for each combination was determined.₅₀Calculate I do.Cryptophysin, vinblastine against SKOV3 and SKVLBI cells And taxol toxicity   SKVLBI cells overexpress P-glycoprotein and therefore have anticancer natural Resistant to drug substances. Taxol, vinblastine, and cryptophysin Observe the ability of compounds to inhibit the growth of SKOV3 and SKVLBI cells You. Taxol is an IC against SKOV3 and SKVLBI cells₅₀It At 1 nM and 8000 nM, respectively, growth of both cell lines was blocked in a dose-dependent manner. Vinblastine also has an IC against SKOV3 and SKVLBI cells.₅₀It At 0.35 nM and 4200 nM, respectively, growth of both cell lines was blocked. This departure The bright cryptophysin compound also inhibits SKOV3 and SKVLBI cells. IC₅₀It exhibits activity from about 1 pM to about 1000 pM.   As mentioned above, the present invention provides for the disruption of the microtubule network and the prevention of mitosis. A novel cryptophysin compound that is a potent inhibitor of cell proliferation We can prove that we provide. In these studies, cryptophysin compounds were found It can be illustrated that disrupting formation and disrupting normal cellular functions, including mitosis.   Classic anti-microtubule agents such as colchicine and vinca alkaloids Halts cell division at the stage of mitosis. One of these drugs is a cell It is appropriate to compare the effect on proliferation with that of the cryptophycin compound. It seems to be that. For this purpose, the vinca alkaloid vinblastine is Selected as representative of classic antimitotic agents. Therefore Jurkat T cell leukemia Effects of cryptophysin compounds on cell proliferation and cell cycle progression of cell lines and Compare the effects of vinblastine.   Antimitotic effects are commonly mediated by disruption of microtubules in the mitotic spindle Therefore, the effect of cryptophycin compounds on the structure of the cytoskeleton was examined by fluorescence microscopy. Perform characteristic analysis. Treated with either cryptophysin compound or vinblastine Immunofluorescence staining of isolated cells may show that both compounds cause complete loss of microtubules. Proven. Similar findings in SKOV3 cells indicate that cryptophycin compounds It can be shown that the anti-microtubule effect is not unique to smooth muscle cell lineages.Search by human colon cancer GC3   In a selected well of a 96-well plate, human colon cancer GC3 cells (assay medium 100 μl) (1 × 10 cells / well in L) and test compounds were added 24 hours later. Cell-free assay medium was added to the other wells selected in the 96-well plate. For certification Medium (RMPI-1640 was used for the medium; however, Any medium would be acceptable if used) Serum and 25 mM HEPES buffer were added.   Test compounds were stored in brown bottles until testing. The phosphate buffered saline (P BS) Immediately before preparing a diluent, a dimethyl sulfoxide stock solution (200 μg / m L) was prepared fresh. Dimethyl sulfoxide solution diluted 1:20 with PBS Then, the final concentration was 10 μg / mL. Serially 1: 3 dilution of PBS with PBS It was prepared by using (0.5 mL of the sample in the previous stage with 1 mL of PBS). Fal for the test 2054 tubes from Kon Company were used.   A 10 μL sample of each dilution of the test compound was added in triplicate to the wells of the GC3 plate. Was. Plates were incubated at about 37 ° C. for 72 hours. 3 in each of the wells -[4,5-dimethyl-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium bromide 10 μL of a mid salt (“MTT” 5 mg / PBS mL) stock solution was added. play The cells were incubated at 37 ° C. for about 1 hour. Centrifuge plate and remove medium Decant off the wells and add acidic isopropanol to each of the wells. 100 μL (0.04 N HCl solution in isopropanol) was added. play Measurement within one hour at an inspection wavelength of 570 nm (SpectraMax reader) did.   Upon evaluation of a compound of Formula I, the compound is characterized by the claims described herein. It is suggested that it can be useful in a method of treatment. In addition, the compound It appears to be useful for disruption of the microtubule system.   The preparation of the compounds according to the invention is effected by the active ester and, if necessary, the subsequent chromatography. Complete using several protocols, including chromatography and acid-induced deprotection it can.   R¹Or R^TwoIs an acid chloride in the preparation of any ester derived from carboxylic acid, Acid anhydrides and common activating reagents (eg carbodiimides)^TwoUse Various techniques are included. Use any solvent other than the alcohol involved in the reaction. Can be used. To aid in the esterification, any mild base and / or Catalysts (amines, carbonates) can also be used.   The conversion of the carbamate to the corresponding salt is carried out with strong acids, namely hydrochloric acid, hydrogen of sulfuric acid, phosphoric acid. Mineral acids consisting of hydrogen, hydrogen of nitric acid, hydrogen of perchloric acid or, for example, trifluoro Strong organic acids such as acetic acid, p-toluenesulfonic acid, and methanesulfonic acid This is done. Using the same acid, a new salt can be formed from the corresponding free base. Could be manufactured.   The compounds of the invention, tested in the Gc3 assay, have IC₅₀Value is less than 1 to about 700 nM Was in the range. However, the most typical values are below 100 nM.   The steps described herein are most preferably performed in the presence of a solvent. The process For, specialists can select an appropriate solvent. Inert organic solvents are particularly preferred. However, under certain conditions, aqueous solutions are suitable. For example, R²⁷Is hydrogen And R¹³Is a BOC, a water-based solvent is effective. It appears to be.   The products of the reactions described herein can be further purified using standard methods Derived to provide a ficin compound.   With reference to the above reaction formulas and the following examples, experts prepare the desired compounds. Suitable starting materials and reagents are available for   For example, the ester starting material can be prepared as follows: [R⁶Has the meaning defined above.]   The reaction scheme for the production of this ester is, for convenience to the skilled expert, This is further illustrated in the Preparation Examples herein which provide one specific application of this reaction scheme. This reaction scheme for the preparation of the ester is also applicable to the Ar substituent of the present invention. . The presentation of the reaction scheme is intended to limit the synthetic reaction to only the listed phenyl rings Not something. Rather, experts agree that the compounds claimed in this specification This process is widely applicable to provide the required starting materials required.   The required reaction time depends on the starting materials and the operating temperature. Optimal for a given process The reaction time is usually short, the desired reaction time and the long reaction time It is the result of a compromise determined in view of the competing goals of the desired maximum yield.   The following examples are provided to further illustrate the present invention. Never limit the scope of the invention It is not intended to be limited to or by the following Examples.                                 Production Example 1 First step: 5-phenyl-pentane-2 (E) -ene-acid methyl ester. Hos Trimethyl honoacetate (376 g, 417 mL, 2.07 mol) in THF (750 mL) solution with mechanical stirrer and N_Two3L with inlet Stir at 0 ° C. in a three-necked round bottom flask. Add neat neat through the dropping funnel to the cooled solution. Tetramethylguanidine (239 g, 260 mL, 2.07 mol) was added dropwise. The cold, clear, pale yellow solution was stirred at 0 ° C. for 25 minutes. Hydrocinnamaldehyde (90%, 253 g, 248 mL, 1.9 mol) in THF (125 mL) It was slowly added dropwise into the reaction solution. After the addition is complete, stir the reaction for 10 hours to room temperature I put it back. GC showed a 95: 5 ratio of product to starting material. Water 50 in the reaction vessel 0 mL was added and the reaction was stirred overnight, forming two layers. Separate the organic layer and the aqueous layer Was extracted with t-BuOMe. Collect the organic layer and add MgSO_FourDry on, then vacuum Concentration gave an orange oil. Distill this crude product at 129 ° C / 0.3mmHg Thus, 360.5 g was obtained as a clear pale yellow oily substance in a yield of 91.7%. EIMS (m / z): 190 (13; M +), 159 (41), 131 (90) , 130 (62), 117 (22), 104 (12), 95 (57), 91 (1 00), 77 (21), 65 (59). HREIMS (m / z): 190.0998 (C₁₂H₁₄O_Two, D-0.4 mnu ). UVλ max (ε): 210 (8400), 260 (230) nm. IRν max: 3027, 2949, 1723, 1658, 1454, 1319, 12 03,978,700cm^-1.¹H-NMR (CDCl_Three) Δ: 7.15 to 7.3 (Ph-H5, bm), 7.00 (3-H, dt, 15.6 / 6.6), 5.8 4 (2-H, dt, 15.6 / 1.2), 3.70 (OMe, s), 2.76 ( 5-H2, t, 7.2), 2.51 (4-H2, bdt, 6.6 / 7.2).¹³ C-NMR (CDCl_Three) Δ: 166.9 (1), 148.3 (3), 140. 6 (Ph-1 '), 128.4 / 128.2 (Ph-2' / 3 '/ 5' / 6 ') , 126.1 (Ph-4 '), 121.4 (2), 51.3 (OM e), 34.2 / 33.8 (4/5).Second step: 5-phenyl-pentan-2 (E) -en-1-ol. Thermocouple, Canal stirrer and N_TwoPlace in a 12L four-necked round bottom flask equipped with an inlet. A solution of the nonate ester (310.5 g, 1.5 mol) in THF (1.5 L) was poured. And i-PrOH / CO_TwoCooled to -71 ° C in bath. DIBAL in reaction vessel (2.5 L, 1.5 M solution in toluene, 3.75 mol) at a reaction temperature <-5. Drip was added at a rate maintained at 0 ° C. After the addition is complete, the reaction is brought to a reaction temperature <-50 ° C. And stirred overnight. After 16 hours, TLC (3: 1, hexane: EtOAc, Si O_Two) Indicated the absence of starting material. The reaction temperature was returned to -15C. Reaction gradually Was stopped with 1N HCl (150 mL). At this time, the reaction product is a gelatinous solid Became. This semi-solid is broken using a spatula, and 1N-HCl (200 mL) is used. Was added to make the mixture flowable. Inject concentrated HCl (625 mL) to create a two-layer system Formed. The layers were separated and the product was extracted with t-BuOMe. This organic layer MgSO_FourDry over and concentrate in vacuo to give 247.8 g of a clear, pale yellow oil. The crude product was distilled at 145 ° C./0.25 mmHg to give 209.7 g, 86. 2% was obtained. EIMS (m / z): 162 (1; M +), 144 (16), 129 (7), 1 17 (9), 108 (6), 92 (17), 91 (100), 75 (5), 65 (12). HREIMS (m / z): 162.1049 (C₁₁H₁₄O, D-0. 4 mnu). UVλmax (ε): 206 (9900), 260 (360) nm . IRνmax: 3356, 2924, 1603, 1496, 1454, 970 , 746,700cm^-1.¹H-NMR δ: 7.15 to 7.3 (Ph-H5, m ), 5.70 (3-H, dt, 15.6 / 6.0), 5.61 (2-H, dt, 15.6 / 4.8), 4.02 (1-H2, d, 4.8), 2.68 (5-H2 , T, 7.2), 2.40 (OH, bs), 2.36 (4-H2, dt, 6.0). /7.2).¹³C-NMR [delta]: 141.6 (Ph, 1 '), 131.8 (3), 129.5 (2), 128.3 / 128.2 (Ph-2 '/ 3' / 5 '/ 6') , 125.7 (Ph, 4 '), 63.3 (1), 35.4 / 33.8 (4/5). .Third step: (2S, 3S) -2,3-epoxy-5-phenyl-1-pentanoe Le. Mechanical stirrer, thermocouple and N_Two1L 3-neck round bottom with inlet CH in flask_TwoCl_Two(350mL), 30g of dried 4Å molecular sieves And L-(+)-tartaric acid dimethyl ester (7.62 g, 0.037 mol) Was added. The resulting mixture is cooled to -20 ° C and Ti (Oi-Pr)_Four(9 . 2 mL, 0.031 mol) followed by t-butyl hydroperoxide (4.0M, CH_TwoCl_TwoSolution, 182 mL, 0.78 mol) at the reaction temperature^Two-20 Drops were added at a rate maintained at ° C. After the addition was complete, the reaction was stirred for an additional 30 minutes After, the reaction temperature^TwoAllyl alcohol (50 g, 0.31 Mole) CH_TwoCl_Two(30 mL). The reaction was stirred at the same temperature for 5 hours. And then filtered at 0 ° C. ferrous sulfate heptahydrate (132 g) and tartaric acid (40 g) In a solution of water (400 mL). After stirring this mixture for 20 minutes, the liquid Transfer to a funnel and extract with t-BuOMe (2 × 200 mL). The organic layer is collected and Na The mixture was stirred with a 30% NaOH solution containing Cl at 0 ° C. for 1 hour. Separate the two layers again, and Was extracted with t-BuOMe. The combined organic layers were washed with brine and dried over MgSO_FourDry on Drying and concentration gave 52.8 g of an amber oil.Fourth step: (2R, 3R) -2-hydroxy-3-methyl-5-phenylpentane N-1-ol. Mechanical stirrer, thermocouple and N_Two5 with inlet Hexane (1 L) was added to a 3 L three-necked round bottom flask and cooled to 0 ° C. 2.0M -Me_ThreeA hexane solution of Al (800 mL, 1.6 mol) was added, followed by Epoxide (120 g, 0.677 mol) in hexane (250 mL) / CH_Two Cl_Two(50 mL) solution was added at a rate to keep the temperature below 20 ° C. Addition After completion, the cloudy reaction mixture was stirred at 5 ° C. for 35 minutes and 10% HCl (300 (mL) was added dropwise, followed by the addition of concentrated HCl (350 mL). Separate both layers And the organic layer was washed with brine and dried over MgSO_FourDried on. Vacuum removal of volatile substances After that, 122.1 g of an oily substance was obtained.Fifth step: (2R, 3R) -2-hydroxy-3-methyl-5-phenyl tosylate Lupentan-1-yl ester. Equipped with mechanical stirrer and nitrogen inlet The above-mentioned diol (58 g, 0.30 mol) was placed in a 2 L three-necked round-bottomed flask, Tin oxide (1.5 g, 0.006 mol, 2 mol%), toluenesulfonyl chloride (57.5 g, 0.30 mol), CH_TwoCl_Two(580 mL) and triethylamido (42.0 mL, 0.30 mol) was added. Allow the resulting mixture at room temperature for 2 hours Stir (reaction was complete within 1 hour), filter, wash with water,_Four Dried on. Concentration of the volatiles in vacuo gave 104.1 g of a pale amber oil. Was.Sixth step: (2R, 3R) tosylate-2-[(tert-butyldimethylsilyl) ) Oxy] -3-methyl-5-phenylpentan-1-yl ester. The toshi Rate (100 g, 0.29 mol) and triethylamine (81.0 mL, 0 . 58 mol) CH_TwoCl_Two(1200 mL) solution with neat TBS-OTf (9 (9 mL, 0.43 mol), followed by stirring for a further 20 minutes. The reaction was washed twice with brine, washed with MgSO_FourAnd concentrated to dryness. Oily Dissolve in a small amount of hexane, filter through a bed of silica, hexane: EtOAc (9: 1) To give 134 g of a slightly amber oil.Seventh step: Tosylic acid (2R, 3R, 5RS) -2-[(tert-butyl dimethyl) Lucylyl) oxy] -3-methyl-5-bromo-5-phenylpentan-1-i Ruester. 5 equipped with mechanical stirrer, reflux condenser and nitrogen inlet L into the three-necked round bottom flask_Four(1680 mL), TBS / Ts (140 g, 0.30 mol), NBS (65 g, 0.365 mol) and AIBN (16.5). g, 0.10 mol). Degas the mixture by degassing with high vacuum while stirring. And refilled with nitrogen (x3). The reaction mixture is then heated to reflux and the color darkens It became brown. After 15 minutes of vigorous stirring, the reaction mixture becomes light yellow and Tomographic analysis indicated that the reaction was complete. After cooling to room temperature, the reaction was filtered and the filtrate Was concentrated to dryness. The residue was redissolved in hexane, filtered again, and concentrated to dryness. 170.3 g were obtained as a brown oil.Eighth step: (2R, 3R) -2-[(tert-butyldimethylsilyl) tosylate ) Oxy] -3-methyl-5-phenylpentane-4 (E) -en-1-ylue Steal. 2L equipped with mechanical stirrer, reflux condenser and nitrogen inlet Acetonitrile of the bromide (100 g, 0.186 mol) was placed in a three-necked round bottom flask. (700 mL) solution was added. DBU (83.6 mL, 0.557 mol) Was added and the dark brown solution obtained was refluxed with stirring for 15 minutes. After cooling to room temperature , The solvent is removed in vacuo and the residue is CH_TwoCl_Two(200 mL) and passed through a silica bed. And filtered. The volatiles were again evaporated, the residue was dissolved in EtOAc, water, Wash with brine, MgSO_FourDried over and concentrated to dryness. Preparative mplc (Prep 500) Chromatography is performed on the desired unsaturated compound (50.3 g, Over 60% yield).Ninth step: (3S, 4R) -3-[(tert-butyldimethylsilyl) oxy ] -4-Methyl-6-phenylhexane-5 (E) -en-1-nitrile. this Tosylate (50 g, 0.11 mol) was dissolved in DMSO (1 L) and KCN (1 4.2 g, 0.22 mol) and water (25 mL), and the resulting mixture was treated with nitrogen. Stirred at 60 ° C. for 18 hours. After cooling to room temperature, the reaction mixture was diluted with EtOAc (1 L) and water (1 L). Layer was extracted with EtOAc (500 mL). And the combined organic layers were washed with brine, Na_TwoSO_FourAnd dried. CH on silica_Two Cl_TwoChromatography to afford the desired nitrile in 92% yield Obtained.Tenth step: (5S, 6R) -5-[(tert-butyldimethylsilyl) oxy [S] -6-methyl-8-phenylocta-2 (E), 7 (methyl-E-dienoate Steal. The nitrile (14.67 g, 46.5 mmol) was added to toluene (200 mL) and cooled to −78 ° C. in nitrogen. 1 with vigorous stirring . 5M DIBAL toluene solution (37.2 mL, 55.8 mmol) was added dropwise. Was. After the addition was complete, the cooling bath was removed and the reaction was stirred at room temperature for 1 hour. The reaction mixture Carefully poured into 1N HCl and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. Both layers Separate and wash the organic layer with saturated aqueous sodium potassium tartrate (x2) and brine And Na_TwoSO_FourDried on. The volatiles were removed in vacuo and the crude pale yellow oil was filtered Was directly used for the condensation reaction. The crude aldehyde from the previous section was dissolved in THF (90 mL) and the phosphate was added at room temperature under nitrogen. Honoacetic acid trimethyl ester (9.03 mL, 55.8 mmol) and tetra Treated with methylguanidine (7.0 mL, 55.8 mmol). The reaction mixture Stir for 16 h, then between EtOAc (200 mL) and water (100 mL) Distributed. The aqueous layer was back extracted with EtOAc (100 mL) and the combined organic layers were combined with water, Wash with brine and Na_TwoSO_FourDried on. Volatiles are removed in vacuo and crude yellow The oil (17.0 g) was filtered over silica gel with CH._TwoCl_Two: Cyclohexane (1: 1 to 1) 2: 1) to give 13.67 g of the desired ester. yield: 78.5%.                                 Example 1 (2S) -2- [2 ′-(tert-butoxycarbonyl) amino-1 ′-(S Synthesis of) -methyl] -4-methylpentanoic acid allyl ester (2a) (2S) -2-hydroxy-4-methylpentanoic acid allyl ester (1) 846 m g (5.02 mmol, 0.95 equivalents), N- (tert-butoxycarbonyl)- 1 g (5.29 mmol) of L-alanine and 4-dimethylaminopyridine ( DMAP) 122 mg (1.06 mmol, 0.2 equiv) in dry methylene chloride 8 Mix in mL and stir at 0 ° C. (ice bath) under a nitrogen atmosphere. 1,3-dicyclohe 1.2 g (5.82 mmol, 1.1 equivalents) of xylcarbodiimide (DCC) One portion was added and the reaction was stirred at room temperature overnight. The reaction is filtered using filter paper. , 5% NaHCO_ThreeA post-treatment of extraction with and saline was performed. This methylene chloride solution The solution is Na_TwoSO_FourDry on and then remove in vacuo. The crude oil is converted to SiO_TwoHula on Wash chromatograph (10% EtOAc / hexane) as a colorless oil 1.45 g (80%) of (2a) was obtained. TLC: Rf = 0.309 (20% EtOAc / hexane). IR (cm^-1) (CHCl_Three): 3442, 2982, 2963, 2937, 1 745, 1711, 1503, 1369, 1163.¹ H-NMR (300 MHz, CDCl_Three) Δ: 5.84 to 5.93 (m, 1H) , 5.28 (dd, 2H, J = 17.1 Hz and 5.5 Hz), 5.09 to 5.13 (M, 1H), 5.01 (brs, 1H), 4.62 (d, 2H, J = 5.7H) z) 4.35 to 4.41 (m, 1H), 1.65 to 1.85 (m, 3H), 1 . 45 (d, 3H, J = 8 Hz), 1.44 (s, 9H), 0.95 (d, 3H) , J = 6.6 Hz), 0.93 (d, 3H, J = 6.6 Hz). Mass spectrometry (FD): 344 (M⁺+ H). Elemental analysis: C₁₇H₂₉NO₆As Calculated C 59.46; H 8.51; N 4.08. Found C59.63; H8.48; N4.11.(2S) -2- [2 ′-(tert-butoxycarbonyl) amino-1 ′-(S ) -Isopropyl] -4-methylpentanoic acid allyl ester (2b) Compound (2b) was prepared according to the procedure for compound (2a) (86%). TLC: Rf = 0.447 (20% EtOAc / hexane). IR (cm^-1) (CHCl_Three): 2966, 1743, 1712, 1503, 1 368, 1173, 1158.¹ H-NMR (300 MHz, CDCl_Three) Δ: 5.85 to 5.94 (m, 1H) , 5.28 (dd, 2H, J = 16 Hz and 8 Hz), 5.06-5.10 (m, 1H), 5.01 (brs, 1H), 4.62 (d, 2H, J = 5.6 Hz), 4.29 to 4.33 (m, 1H), 2.25 to 2.29 (m, 1H), 1.64 １1.85 (m, 3H), 1.44 (s, 9H), 0.85 to 1.06 (m, 1 2H). Mass spectrometry (FD): 372 (M⁺+ H). Elemental analysis: C₁₉H₃₃NO₆As Calculated C61.43; H8.95; N3.77. Experimental C61.71; H9.12; N3.88.(2S) -2- [2 ′-(tert-butoxycarbonyl) amino-1 ′-(S Synthesis of) -methyl] -4-methylpentanoic acid (3a) (2S) -2- [2 '-(tert-butoxycarbonyl) amino-1'-(S 8) mg (2.)-Methyl] -4-methylpentanoic acid allyl ester (2a). 41 mmol) was dissolved in 50 mL of dry tetrahydrofuran (THF), and the mixture was dissolved in a nitrogen atmosphere. Stirred at room temperature under ambient atmosphere. Tetrakis (triphenylphosphine) palladium ( 0) 279 mg (0.241 mmol, 0.1 eq) were added, followed by dry mole 2.31 mL (26.5 mmol, 11 eq) of holin was added. One hour later T LC (10% MeOH / CHCl_Three) Indicates the completion of the reaction. Reactant in diethyl Dilute with ether (200 mL), then extract with 1N HCl, followed by 5% Na HCO_ThreeExtracted. 5% NaHCO_ThreeCollect the water layer and add 1N HCl to pH2 It was made acidic and extracted with diethyl ether (600 mL). Collect ether extract And washed with saline, Na_TwoSO_FourDried on. Ether removed in vacuo to yellow solid 714 mg (98%) of (3a) were obtained. TLC: Rf = 0.114 (10% MeOH / CHCl_Three). IR (cm^-1) (CHCl_Three): 2982, 2963, 1746, 1713, 1 503, 1369, 1163.¹ H-NMR (300 MHz, CDCl_Three) Δ: 7.70 (brs, 1H); 13 to 5.06 (m, 2H), 4.41 to 4.34 (m, 1H), 1.70 to 1 . 87 (m, 3H), 1.44 (brs, 12H), 0.96 (d, 3H, J = 6.2 Hz), 0.93 (d, 3H, J = 6.2 Hz). Mass spectrometry (FD): 304 (M⁺+ H). Elemental analysis: C₁₄H_{twenty five}NO₆As Calculated C55.43; H8.31; N4.62. Found C55.65; H8.37; N4.68.(2S) -2- [2 ′-(tert-butoxycarbonyl) amino-1 ′-(S Synthesis of) -isopropyl] -4-methylpentanoic acid (3b) Compound (3b) was prepared according to the procedure for compound (3a) (81%). TLC: Rf = 0.183 (10% MeOH / CHCl_Three). IR (cm^-1) (CHCl_Three): 2966, 2936, 1727, 1714, 1 504,1393,1369,1159.¹ H-NMR (300 MHz, CDCl_Three) Δ: 5.10 (dd, 1H, J = 9. 1 Hz and 3.7 Hz), 5.03 (d, 1H, J = 9.1 Hz), 4.29 (d d, 1H, J = 9.1 Hz and 4.1 Hz), 2.26 to 2.30 (m, 1H), 1.68-1.88 (m, 3H), 1.44 (brs, 9H), 0.91-1. 02 (m, 12H). Mass spectrometry (FD): 332 (M⁺+ H). Elemental analysis: C₁₆H₂₉NO₆As Calculated C57.99; H8.82; N4.22. Found C58.22; H8.72; N4.39.Synthesis of compound (5a) 213 mg (0.362 mmol) of compound (4), (2S) -2- [2 '-(t ert-butoxycarbonyl) amino-1 '-(S) -methyl] -4-methylpe 117 mg (0.536 mmol, 1.5 eq) of tantanoate (3a) and D 11 mg (0.09 mmol, 0.2 equiv) of MAP in a direct-fired round bottom flask It was dissolved in 3 mL of methylene chloride under a nitrogen atmosphere. DCC 118 mg (0.572 Mmol, 1.1 equivalents) was then added in one portion and the reaction was stirred overnight. TLC ( (50% EtOAc / hexane) indicated the reaction was complete. Filter the reaction through filter paper 5% NaHCO_ThreeAnd post-extraction treatment with saline. Methylene chloride Na layer_TwoSO_FourDry on and then remove in vacuo. Then the crude solid is converted to SiO_Twoupper Flash chromatography (35% EtOAc / hexane) gave a white solid. 259 mg (82%) of body (5a) were obtained. TLC: Rf =. IR (cm^-1) (KBr) v :. UV (95% EtOH) λ:¹ H-NMR (300 MHz, CDCl_Three) Δ: 7.18 to 7.37 (m, 7H) , 7.05 (dd, 1H, J = 6.0 Hz and 1.7 Hz), 6.82 (d, 1H) , J = 7.4 Hz), 6.65 to 6.78 (m, 1H), 6.40 (d, 1H, J = 15.7 Hz), 6.01 (dd, 1H, J = 15.8 Hz and 8.8 Hz) 5.86 (d, 1H, J = 15.8 Hz), 5.35 (dd, 1H, J = 8. 0 Hz and 2.3 Hz), 5.01 (m, 2H), 4.96 (dd, 1H, J = 9) . 4 Hz and 3.6 Hz), 4.80 (d, 1H, J = 11.9 Hz), 4.74 (D, 1H, J = 11.9 Hz), 4.42 (m, 1H), 3.85 (s, 3H) ), 3.20 (dd, 1H, J = 14.0 Hz and 5.9 Hz), 3.06 (d d, 1H, J = 14.0 Hz and 7.8 Hz), 2.47 to 2.59 (m, 3H) 1.43 to 1.79 (m, 6H), 1.41 (s, 9H), 1.11 (d, 3 H, J = 6.8 Hz), 0.88 (d, 3H, J = 6.4 Hz), 0.81 ( d, 3H, J = 6.6 Hz). Mass spectrometry (FD): Elemental analysis: C₄₁H₅₂Cl_FourN_TwoO_TenAs calculated value.Synthesis of compound (5b) Compound (4) 500 mg (0.848 mmol), (2S) -2- [2 '-(t ert-butoxycarbonyl) amino-1 '-(S) -methyl] -4-methylpe 267 mg (0.806 mmol, 1.05 eq) of tantanoate (3b) and DMAP 21 mg (0.172 mmol, 0.2 eq.) In an open flame dry round bottom flask And dissolved in 5 mL of methylene chloride under a nitrogen atmosphere. 192 mg of DCC (0. 933 mmol, 1.1 eq.) Were then added in one portion and the reaction was stirred overnight. T LC (50% EtOAc / hexane) indicated the reaction was complete. Pass the reaction product through filter paper And filtered, 5% NaHCO_ThreeAnd post-extraction treatment with saline. Chloride The titanium layer is_TwoSO_FourDry on and then remove in vacuo. Then the crude solid is converted to SiO_Two Flash chromatography (30% EtOAc / hexane) on top 682 mg (89%) of a white solid (5b) were obtained. TLC: Rf = 0.447 (50% EtOAc / hexane). IR (cm^-1) (KBr) v: 2965, 2934, 1752, 1716, 16 80, 1645, 1504, 1368, 1282, 1158, 1067. UV (95% EtOH) λ: 232 nm (ε = 22672), 247 nm (ε = 21889).¹ H-NMR (300 MHz, CDCl_Three) Δ: 7.16 to 7.32 (m, 7H) 7.05 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 6.66 to 6.84 (m, 2H), 6.40 (d, 1H, J = 15.9 Hz), 6.01 (dd, 1H, J = 8.8) Hz and 15.9 Hz), 5.86 (d, 1H, J = 15.7 Hz), 5.47 ( d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.03 to 5.14 (m, 2H), 4.91 (d d, 1H, J = 9.9 Hz and 3.8 Hz), 4.76 (s, 2H), 4.38 ( dd, 1H, J = 9.5 Hz and 4.1 Hz), 3.84 (s, 3H), 3.20 (Dd, 1H, J = 14.0 Hz and 5.7 Hz), 3.05 (dd, 1H, J = 14.0 Hz and 7.3 Hz), 2.46 to 2.59 (m, 3H), 2.26 to 2 . 32 (m, 1H), 1.44-1.78 (m, 3H), 1.42 (s, 9H) , 1.11 (d, 3H, J = 6.7 Hz), 1.03 (d, 3H, J = 6.8 H) z), 0.95 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 0.87 (d, 3H, J = 6. 4 Hz), 0.80 (d, 3H, J = 6.5 Hz). Mass spectrometry (FD): 902 (M⁺). Elemental analysis: C₄₃H₅₆Cl_FourN_TwoO_TenAs Calculated: C 57.21; H 6.25; N 3.10. Found: C58.09; H7.04; N3.26.Synthesis of compound (6a) Compound (5a) (249 mg, 0.285 mmol) and zinc dust (1 g) were mixed with glacial acetic acid (1). Dissolved in 0 mL. The reaction was sonicated for 1 hour. TLC (10% MeOH / CHCl_Three) Showed no starting material, so the zinc was filtered through a bed of celite and the filtrate Was concentrated in vacuo to give an off-white solid. The crude solid is then treated with trifluoroacetic acid (T FA) Dissolved in 12 mL and stirred at room temperature for 1 hour. The TFA was removed in vacuo to give The resulting oil was stirred with MeOH to form a white solid. Collect this solid and Drying in the air yielded 150 mg (70%) of the TFA salt of compound (6a). TLC: Rf = 0.169 (10% MeOH / CHCl_Three). IR (cm^-1) (KBr) v: 2960, 1768, 1745, 1640, 15 04,1391,1258,1198. UV (95% EtOH) λ: 232 nm (ε = 24795), 247 nm (ε = 26763).¹ H-NMR (300 MHz, CD_ThreeOD) δ: 7.15 to 7.34 (m, 7H) , 7.07 (dd, 1H, J = 8.3 Hz and 1.5 Hz), 6.90 (d, 1H) , J = 8.4 Hz), 6.55 to 6.61 (m, 1H), 6.43 (d, 1H, J = 15.8 Hz), 5.94 to 6.08 (m, 2H), 4.86 to 5.02 ( m, 4H), 4.46 to 4.50 (m, 1H), 4.01 to 4.06 (m, 1H) ), 3.80 (s, 3H), 3.09 (dd, 1H, J = 13.6 Hz and 5.4) Hz), 2.88 (dd, 1H, J = 13.6 Hz and 7.0 Hz), 2.42 ~ 2.65 (m, 3H), 1.49 to 1.66 (m, 7H), 1.12 (d, 3H) , J = 6.7 Hz), 0.78 (d, 3H, J = 6.4 Hz), 0.69 (d, 3H, J = 6.5 Hz). Mass spectrometry (FD): 643 (M⁺+ H). Elemental analysis: C₃₄H₄₃ClN_TwoO₈(TFA salt) Calculated: C57.10; H5.86; N3.70. Experimental: C 62.97; H 6.49; N 4.42.Synthesis of compound (6b) Compound (6b) was prepared according to the procedure for compound (6a) (72%). TLC: Rf = 0.369 (20% MeOH / CHCl_Three). IR (cm^-1) (KBr) v: 2962, 2935, 1747, 1675, 16 46, 1606, 1502, 1390, 1257, 1196, 1065. UV (95% EtOH) λ: 232 nm (ε = 22882), 251 nm (ε = 25493).¹ H-NMR (300 MHz, CDCl_Three) Δ: 8.20 (d, 1H, J = 5.2) Hz), 7.17 to 7.37 (m, 7H), 6.98 to 7.13 (m, 3H), 6.70 to 6.86 (m, 2H), 6.60 (d, 1H, J = 5.9 Hz), 6 . 40 (d, 1H, J = 15.7 Hz), 5.86 to 6.05 (m, 2H), 5 . 11 to 5.15 (m, 1H), 4.87 (dd, 1H, J = 9.5 Hz and 2. 8 Hz), 4.60 to 4.62 (m, 1H), 3.85 (brs, 3H), 59 (brs, 1H), 3.05-3.21 (m, 1H), 2.46-2.60 (M, 3H), 2.27 to 2.32 (m, 1H), 1.45 to 1.76 (m, 3 H), 1.11 (d, 3H, J = 6.6 Hz), 0.94 to 1.06 (m, 6H ), 0.86 (d, 3H, J = 6.2 Hz), 0.79 (d, 3H, J = 6.3) Hz). Mass spectrometry (FD): 672 (M⁺+ H). Elemental analysis: C₃₆H₄₇ClN_TwoO₈(TFA salt) Calculated: C 58.12; H 6.16; N 3.57. Found: C 63.35; H 7.02; N 4.73.Synthesis of compound (7a) 133 mg (0.176 mmol) of compound (6a) was added to dry N, N-dimethylformin. Dissolved in 40 mL of Lumamide (DMF) and stirred at room temperature under an argon atmosphere. 88 mg of pentafluorophenyldiphenylphosphinate (FDPP) (0. 1229 mmol, 1.3 eq) were then added and the reaction was stirred for 16 hours. TL C (20% MeOH / CHCl_Three) Indicated that the reaction was complete, so DMF was removed in vacuo did. The resulting oil was stirred with hexane to give a solid,_TwoUp Rush chromatography (5% MeOH / CHCl_Three) 60 mg (55% based on TFA salt as starting material) of white solid (7a) Obtained as body. TLC: Rf = 0.677 (5% MeOH / CHCl_Three). IR (cm^-1) (KBr) v: 3322, 3286, 2950, 1756, 17 35, 1663, 1643, 1539, 1503, 1258, 1214, 106 6,971,746,693. UV (95% EtOH) [lambda]: 249 nm ([epsilon] = 19840).¹ H-NMR (300 MHz, CDCl_Three) Δ: 7.20 to 7.34 (m, 7H) , 7.11 (dd, 1H, J = 8.3 Hz and 1.9 Hz), 6.83 (d, 1H) , J = 8.4 Hz), 6.70-6.77 (m, 1H), 6.34-6.43 ( m, 2H), 6.02 (dd, 1H, J = 15.8 Hz and 8.8 Hz), 5.7 6 (d, 1H, J = 15 Hz), 5.64 (d, 1H, J = 10.1 Hz), 5 . 11 to 5.18 (m, 1H), 4.78 to 4.86 (m, 2H), 4.62 to 4.68 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.18 (dd, 1H, J = 1 4.2 Hz and 8.0 Hz), 2.82 (dd, 1H, J = 14.2 Hz and 7.1) Hz), 2.45 to 2.63 (m, 2H), 2.37 to 2.42 (m, 1H), 1.55 to 1.65 (m, 2H), 1.40 (d, 3H, J = 7.3 Hz), 1 . 14 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 0.71 to 0.74 (m, 6H). Mass spectrometry (FD): 624 (M⁺-H). Elemental analysis: C₃₄H₄₁ClN_TwoO₇As Calculated: C 65.32; H 6.61; N 4.48. Found: C65.12; H6.44; N4.47.                                 Example 2 Synthesis of compound (7b) Compound (7b) was prepared according to the procedure for compound (7a) (48%). TLC: Rf = 0.351 (50% EtOAc / hexane). IR (cm^-1) (KBr) v: 3349, 3290, 2968, 2958, 17 52, 1732, 1657, 1633, 1535, 1506, 1255, 117 5,1067,1016,691. UV (95% EtOH) λ: 230 nm (ε = 21399); 249 nm (ε = 25158).¹ H-NMR (300 MHz, CDCl_Three) Δ: 7.19 to 7.39 (m, 7H) , 7.12 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 6.83 (d, 1H, J = 8.5 H) z), 6.71 (m, 1H), 6.54 (d, 1H, J = 10.5 Hz), 6. 40 (d, 1H, J = 16.0 Hz), 5.95 to 6.05 (m, 1H), 5. 76 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 5.54 (d, 1H, J = 9.9 Hz) 5.20 (m, 1H), 4.78-4.89 (m, 2H), 4.41 (dd, 1H, J = 10.6 Hz and 4.9 Hz), 3.87 (s, 3H), 3.19 (d d, 1H, J = 14.6 Hz and 6.9 Hz), 2.85 (dd, 1H, J = 14 . 6 Hz and 7.9 Hz), 2.30 to 2.63 (m, 4H), 1.37 to 1.6 6 (m, 2H), 1.13 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 0.96-0.99 (M, 6H), 0.74 (d, 3H, J = 6.2 Hz), 0.70 (d, 3H, J = 6.2 Hz). Mass spectrometry (FD): 652 (M⁺-H). Elemental analysis: C₃₆H₄₅ClN_TwoO₇As Calculated: C 66.20; H 6.94; N 4.29. Experimental value: C65.94; H6.86; N4.23.                                 Example 3 Synthesis of epoxides (8a) and (9a) Dissolve 50 mg (0.08 mmol) of compound (7a) in 3 mL of dry methylene chloride Then, the mixture was stirred at room temperature under a nitrogen atmosphere. m-chloroperbenzoic acid (m-CPBA) 2 8 mg (0.16 mmol, 2 eq) were then added and the reaction was subjected to HPLC (2 × 3 . 9mm x 150mm, Novapak, C₁₈Column, 80% CH_ThreeCN / H_TwoO , 1.0 mL / min, λ = 256 nm). The reaction was stirred for 4.5 hours HPLC showed that the reaction was only 50% complete, so m-CPBA An additional 28 mg (2 equivalents) was added. After stirring overnight (24 hours), HPLC shows starting material The two epoxides (8a) and (9a) which did not show quality and were formed in a ratio of 2/1 Indicated. The reaction was diluted with methylene chloride and 5% NaHCO_ThreeAnd with saline Washed. This methylene chloride is then converted to Na_TwoSO_FourDried over and concentrated in vacuo to give the crude A white solid was obtained, which was separated under the following conditions by semi-preparative reverse phase C.₁₈Purification by HPLC column did: Column: “Rainin” 2.5 cm × 30 cm reverse-phase C for semi-preparative separation₁₈HPLC power Ram. Solvent: 68% CH_ThreeCN / H_TwoO, isocratic elution. Flow rate: 20 mL / min. λ: 220 nm. Epoxide (8a): β-isomer, retention time (2 × 3.9 mm × 150 mm, N ovapak, C₁₈Column, 80% CH_ThreeCN / H_TwoO, 1.0 mL / min, λ = 2 20 nm): 7.51 min. Epoxide (9a): α-isomer, retention time (2 × 3.9 mm × 150 mm, N ovapak, C₁₈Column, 80% CH_ThreeCN / H_TwoO, 1.0 mL / min, λ = 2 20 nm): 8.33 minutes.                                 Example 4 Synthesis of Epoxides (8b) and (9b) Compounds (8b) and (9b) were prepared according to the procedure for compounds (8a) and (9a). However, a different column was used for purification. Column: Technikrom, "kromasil" 2 cm x 25 cm semi Reverse phase C₁₈HPLC column (5 m). Solvent: 50% CH_ThreeCN / H_TwoO to 70% CH_ThreeCN / H_TwoO gradient, 2 hours. Flow rate: 28 mL / min. λ: 220 nm. Epoxide (8b): β-isomer, retention time (2 × 3.9 mm × 150 mm, N ovapak-C₁₈Column, 70% CH_ThreeCN / H_TwoO, 1.0 mL / min, λ = 2 20 nm): 14.6 minutes. Epoxide (9b): α-isomer, retention time (2 × 3.9 mm × 150 mm, Novapak-C₁₈Column, 70% CH_ThreeCN / H_TwoO, 1.0 mL / min, λ = 220 nm): 16.6 minutes.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｄ 273/08 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ， ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，Ｆ Ｉ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ， ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，Ｍ Ｘ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ， ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 グロスマン，コーラ・エス アメリカ合衆国46250インディアナ州 イ ンディアナポリス、バロン・コート5838番 (72)発明者 グルーバー，ジョゼフ・エム アメリカ合衆国46231インディアナ州 イ ンディアナポリス、サングロー・コート 8949番 (72)発明者 シー，チュアン アメリカ合衆国46033インディアナ州 カ ーメル、ペブルポイント・パス12532番──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. ⁷ Identification symbol FI Theme coat ゛ (Reference) C07D 273/08 A61K 37/02 (81) Designated country EP (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE), OA (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG), AP (GH, KE, LS, MW, SD, SZ, UG, ZW), EA (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM), AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CU, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, GB, GE, GH, HU, L, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT , RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, UA, UG, US, UZ, VN, YU, ZW (72) Inventor Grossman, Cola S United States 46250 Baron Court, 5838 (72), Indianapolis, Indiana Gruber, Joseph M. United States 46231 Sunglow Court, Indianapolis, Indiana, 8949 (72) Inventor Sea, Chuan, United States 46033 Carmel, Indiana, Pebble Point pass 12532

Claims (1)

【特許請求の範囲】 １．式Ｉ： ［式中、 Ａｒはフェニルまたは単純な非置換、置換の芳香族、ヘテロ芳香族基、Ｃ₁〜Ｃ_{1 2} −アルキル、Ｃ₂〜Ｃ₁₂−アルケン、Ｃ₂〜Ｃ₁₂−アルキン、ＮＲ⁵¹Ｒ⁵²、ＯＲ^{5 3} 、および式Ａｒ’： で示される基から構成される群から選択される。 Ｒ⁵¹は水素およびＣ₁〜Ｃ₃−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁵²は水素およびＣ₁〜Ｃ₃−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁵³はＣ₁〜Ｃ₁₂−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁵⁴は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、単純な芳香族、フェニル、ＣＯＯＲ⁵⁷、ＰＯ₃ Ｈ、ＳＯ₃Ｈ、ＳＯ₂Ｒ⁵⁸、ＮＲ⁵⁹Ｒ⁶⁰、ＮＨＯＲ⁶¹、ＮＨＣＨＲ^61'、ＣＮ、Ｎ Ｏ₂、ハロゲン、ＯＲ⁶²、およびＳＲ⁶³から構成される群から選択される。 Ｒ⁵⁵は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、単純な芳香族、フェニル、ＣＯＯＲ⁵⁷、ＰＯ₃ Ｈ、ＳＯ₃Ｈ、ＳＯ₂Ｒ⁵⁸、ＮＲ⁵⁹Ｒ⁶⁰、ＮＨＯＲ⁶¹、ＮＨＣＨＲ^61'、ＣＮ、Ｎ Ｏ₂、ハロゲン、ＯＲ⁶²、およびＳＲ⁶³から構成される群から選択される。 Ｒ⁵⁶は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、単純な芳香族、フェニル、ＣＯＯＲ⁵⁷、ＰＯ₃ Ｈ、ＳＯ₃Ｈ、ＳＯ₂Ｒ⁵⁸、ＮＲ⁵⁹Ｒ⁶⁰、ＮＨＯＲ⁶¹、ＮＨＣＨＲ^61'、ＣＮ、Ｎ Ｏ₂、ハロゲン、ＯＲ⁶²、およびＳＲ⁶³から構成される群から選択される。 Ｒ⁵⁷は水素およびＣ₁〜Ｃ₁₂−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁵⁸は水素およびＣ₁〜Ｃ₁₂−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁵⁹は水素、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルおよびフルオレニルメトキシカルボニル（ ＦＭＯＣ）から構成される群から選択される。 Ｒ⁶⁰は水素および（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ⁶¹は水素、ＯＲ⁶⁴、ＣＨ₂ＮＨＲ⁶⁵、ＮＨＲ⁶⁵およびフルオレニルメトキシカ ルボニル（ＦＭＯＣ）から構成される群から選択される。 Ｒ^61'は水素、ＯＲ⁶⁴、ＣＨ₂ＮＨＲ⁶⁵、ＮＨＲ⁶⁵およびフルオレニルメトキシカ ルボニル（ＦＭＯＣ）から構成される群から選択される。 Ｒ⁶²は水素およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキルから選択される。 Ｒ⁶³は水素およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキルから選択される。 Ｒ⁶⁴は水素、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル、ＣＨ₂ＮＲ⁶⁶Ｒ⁶⁷から構成される群から 選択される。 Ｒ⁶⁵は水素およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキル、ＮＨ₂、およびフルオレニルメトキシカ ルボニル（ＦＭＯＣ）から構成される群から選択される。 Ｒ⁶⁶は水素およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキルおよびフルオレニルメトキシカルボニル（ ＦＭＯＣ）から構成される群から選択される。 Ｒ⁶⁷は水素およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキルから構成される群から選択される。 Ｒ¹およびＲ²はおのおの独立にハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、アミノ、モノ（Ｃ₁〜Ｃ₆ ）−アルキルアミノ、ジ（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルアミノ、トリ（Ｃ₁〜Ｃ₆）−ア ルキルアンモニウム、（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルチオ、ジ（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキル スルホニウム、スルフェート、ホスフェート、ＯＲ³¹、およびＳＲ³¹から構成さ れる群から選択される［但し、このＲ¹およびＲ²から構成される群から選択され るものの１個はＯＨ、ＳＨ、ＯＲ³¹およびＳＲ³¹から構成される群から選択され るものとする］か、または Ｒ¹とＲ²とは一緒になってエポキシド環、アジリジン環、エピスルフィド環、ス ルフェート環、シクロプロピル環またはモノアルキルホスフェート環を形成して もよく、または Ｒ¹とＲ²とはＣ₁₈およびＣ₁₇と一緒になってＣ₁₈とＣ₁₇との間の第二の結合を 形成してもよい。 Ｒ³は低級アルキル基である。 Ｒ⁷はＨ、低級アルキル基、およびＤ−およびＬ−アミノ酸の側鎖全てから構成 される群から選択される。 Ｒ³¹はＰ、Ｓ、（Ｃ₁〜Ｃ₁₂）−アルキル、Ｂ、Ｒ³²、およびＳｉから構成され る群から選択される。 Ｒ³²はアミノ酸、炭水化物、アミノ糖、（サッカライド）_q、Ｃ（Ｏ）−（Ｃ₁〜 Ｃ₆）−アルキル−Ｒ³⁸、および式： で示される基から構成される群から選択される。 Ｒ³⁴は（Ｃ₁〜Ｃ₄）−アルキルである。 Ｒ³⁵は水素または（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキルである。 Ｒ³⁶はＯＨ、ハロ、（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル、ＯＲ³⁴、ＮＯ₂、ＮＨ₂、またはヘ テロ芳香環である。 Ｒ³⁸はＣＯＯＲ³⁹、式： で示される基、ＮＨ₂、またはアミノ酸である。 Ｒ³⁹はＨまたは（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルである。 Ｒ⁴⁰、Ｒ⁴¹、およびＲ⁴²はおのおの水素、ＯＲ⁴³、ハロ、ＮＨ₂、ＮＯ₂、ＯＰＯ₃ （Ｒ⁴⁶）₂、−Ｏ（Ｃ₁〜Ｃ₆）−アルキルフェニル、およびＲ⁴⁵から構成される 群から独立に選択される。 Ｒ⁴³はＣ₁〜Ｃ₆−アルキルである。 Ｒ⁴⁵は芳香族基および置換芳香族基から構成される群から独立に選択される。 Ｒ⁴⁶はＨ、Ｎａ、および−Ｃ(ＣＨ₃)₃から構成される群から独立に選択される。 ｑは２、３、または４である］ で示される化合物またはその医薬的に許容される塩。 ２．Ｒ⁷がイソプロピルである請求項１の化合物。 ３．Ｒ⁷がイソブチルである請求項１の化合物。 ４．Ｒ⁷がＤ−アミノ酸およびＬ−アミノ酸の側鎖から選択される請求項１ の化合物。 ５．Ａｒがパラメチル置換フェニルである請求項４の化合物。 ６．Ｒ²がＯＲ³¹である請求項４の化合物。 ７．Ｒ²がＳＲ³¹である請求項４の化合物。 ８．Ｒ³がメチルである請求項７の化合物。 ９．請求項１の化合物を有効量投与することを包含する哺乳類の微小管結合 を崩壊させる方法。 １０．請求項１の化合物を有効量与えることを包含する試験管内で微小管結合 を崩壊させる方法。 １１．請求項１の化合物を必要とする患者に有効量投与することを包含する哺 乳類の新生物を処置する方法。 １２．請求項１の化合物およびその化合物のための医薬的に許容される希釈剤 または担体の１種またはそれ以上を含有する製剤。 １３．請求項１の化合物を抗カビ的有効量投与することを包含するカビ感染症 に罹患しているか、またはその恐れある動物を処置する方法。 １４．動物が哺乳類である請求項１８の方法。 １５．動物がカビ感染症に感染しているものである請求項１８の方法。[Claims]     1. Formula I: [Where, Ar is phenyl or a simple unsubstituted, substituted aromatic, heteroaromatic group, C₁~ C_{1 Two} -Alkyl, C_Two~ C₁₂-Alkene, C_Two~ C₁₂-Alkyne, NR⁵¹R⁵², OR^{Five Three} And the formula Ar ': Is selected from the group consisting of the groups represented by R⁵¹Is hydrogen and C₁~ C_Three-Selected from the group consisting of alkyl. R⁵²Is hydrogen and C₁~ C_Three-Selected from the group consisting of alkyl. R⁵³Is C₁~ C₁₂-Selected from the group consisting of alkyl. R⁵⁴Is hydrogen, C₁~ C₆-Alkyl, simple aromatic, phenyl, COOR⁵⁷, PO_Three H, SO_ThreeH, SO_TwoR⁵⁸, NR⁵⁹R⁶⁰, NHOR⁶¹, NHCHR^{61 '}, CN, N O_Two, Halogen, OR⁶², And SR⁶³Selected from the group consisting of R⁵⁵Is hydrogen, C₁~ C₆-Alkyl, simple aromatic, phenyl, COOR⁵⁷, PO_Three H, SO_ThreeH, SO_TwoR⁵⁸, NR⁵⁹R⁶⁰, NHOR⁶¹, NHCHR^{61 '}, CN, N O_Two, Halogen, OR⁶², And SR⁶³Selected from the group consisting of R⁵⁶Is hydrogen, C₁~ C₆-Alkyl, simple aromatic, phenyl, COOR⁵⁷, PO_Three H, SO_ThreeH, SO_TwoR⁵⁸, NR⁵⁹R⁶⁰, NHOR⁶¹, NHCHR^{61 '}, CN, N O_Two, Halogen, OR⁶², And SR⁶³Selected from the group consisting of R⁵⁷Is hydrogen and C₁~ C₁₂-Selected from the group consisting of alkyl. R⁵⁸Is hydrogen and C₁~ C₁₂-Selected from the group consisting of alkyl. R⁵⁹Is hydrogen, (C₁~ C₆) -Alkyl and fluorenylmethoxycarbonyl ( FMOC). R⁶⁰Is hydrogen and (C₁~ C₆) -Alkyl. R⁶¹Is hydrogen, OR⁶⁴, CH_TwoNHR⁶⁵, NHR⁶⁵And fluorenylmethoxyca It is selected from the group consisting of rubonyl (FMOC). R^{61 '}Is hydrogen, OR⁶⁴, CH_TwoNHR⁶⁵, NHR⁶⁵And fluorenylmethoxyca It is selected from the group consisting of rubonyl (FMOC). R⁶²Is hydrogen and C₁~ C₆-Selected from alkyl. R⁶³Is hydrogen and C₁~ C₆-Selected from alkyl. R⁶⁴Is hydrogen, (C₁~ C₆) -Alkyl, CH_TwoNR⁶⁶R⁶⁷From the group consisting of Selected. R⁶⁵Is hydrogen and C₁~ C₆-Alkyl, NH_Two, And fluorenylmethoxyca It is selected from the group consisting of rubonyl (FMOC). R⁶⁶Is hydrogen and C₁~ C₆Alkyl and fluorenylmethoxycarbonyl ( FMOC). R⁶⁷Is hydrogen and C₁~ C₆-Selected from the group consisting of alkyl. R¹And R^TwoAre independently halogen, OH, SH, amino, mono (C₁~ C₆ ) -Alkylamino, di (C₁~ C₆) -Alkylamino, tri (C₁~ C₆) -A Rukylammonium, (C₁~ C₆) -Alkylthio, di (C₁~ C₆) -Alkyl Sulfonium, sulfate, phosphate, OR³¹, And SR³¹Composed of [Where R¹And R^TwoSelected from the group consisting of One of them is OH, SH, OR³¹And SR³¹Selected from the group consisting of Or] R¹And R^TwoTogether with an epoxide ring, an aziridine ring, an episulfide ring, Forming a phosphate, cyclopropyl or monoalkyl phosphate ring Well, or R¹And R^TwoIs C₁₈And C₁₇Together with C₁₈And C₁₇A second bond between It may be formed. R^ThreeIs a lower alkyl group. R⁷Is composed of H, a lower alkyl group, and all side chains of D- and L-amino acids. Selected from the group. R³¹Are P, S, (C₁~ C₁₂) -Alkyl, B, R³², And Si Group. R³²Is amino acids, carbohydrates, amino sugars, (saccharides)_q, C (O)-(C₁~ C₆) -Alkyl-R³⁸, And the formula: Is selected from the group consisting of the groups represented by R³⁴Is (C₁~ C_Four) -Alkyl. R³⁵Is hydrogen or (C₁~ C_Three) -Alkyl. R³⁶Is OH, halo, (C₁~ C_Three) -Alkyl, OR³⁴, NO_Two, NH_TwoOr f It is a terrorist aromatic ring. R³⁸Is COOR³⁹,formula: A group represented by_TwoOr amino acids. R³⁹Is H or (C₁~ C₆) -Alkyl. R⁴⁰, R⁴¹, And R⁴²Each hydrogen, OR⁴³, Halo, NH_Two, NO_Two, OPO_Three (R⁴⁶)_Two, -O (C₁~ C₆) -Alkylphenyl, and R⁴⁵Composed of Independently selected from group. R⁴³Is C₁~ C₆-Alkyl. R⁴⁵Is independently selected from the group consisting of aromatic groups and substituted aromatic groups. R⁴⁶Is H, Na, and -C (CH_Three)_ThreeAre independently selected from the group consisting of q is 2, 3, or 4] Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.     2. R⁷Is isopropyl.     3. R⁷Is isobutyl.     4. R⁷Is selected from the side chains of D-amino acids and L-amino acids. Compound.     5. 5. The compound of claim 4, wherein Ar is paramethyl substituted phenyl.     6. R^TwoIs OR³¹The compound of claim 4, which is     7. R^TwoIs SR³¹The compound of claim 4, which is     8. R^ThreeIs methyl.     9. A mammalian microtubule binding comprising administering an effective amount of a compound of claim 1. How to break up.   10. Microtubule binding in vitro comprising providing an effective amount of a compound of claim 1 How to break up.   11. Administering to a patient in need of the compound of claim 1 an effective amount. A method of treating a milk neoplasm.   12. A compound of claim 1 and a pharmaceutically acceptable diluent for said compound. Or a formulation containing one or more carriers.   13. A mold infection comprising administering an antifungal effective amount of a compound of claim 1. A method of treating an animal suffering from or at risk of being infected.   14． 19. The method of claim 18, wherein the animal is a mammal.   15. 19. The method of claim 18, wherein the animal is infected with a mold infection.