JP2001249133A - Immunological test piece - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an immunological test piece allowing a subject to easily, surely and sanitarily apply a specimen thereto, while providing more accurate test results. SOLUTION: A first non-absorbent film 20 having a sample application slit 21 formed outside of the area of a fixation phase 11 in which a first antibody reacting with a substance to be tested within a sample is fixed, and a second non-absorbent film 30 provided with a cutout 31 for supplying a spreading solution to an absorbent base material 10 formed with the fixation phase 11, are stuck to both sides of the base material 10. A colored identification area 22 is provided in an area around the slit 21 in the first non-absorbent film 10 and in a range which does not overlap with the fixation phase 11.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は免疫学的検査片に関
する。具体的には、糞便等の検体を簡単に検査でき、し
かも、正確かつ衛生的に検査し得る免疫学的検査片に関
するものである。The present invention relates to an immunological test strip. More specifically, the present invention relates to an immunological test strip that can easily test a specimen such as feces and that can accurately and hygienically test.

【０００２】[0002]

【従来の技術】糞便等の検体を試料とする検査として、
潜血成分、特にヒトヘモグロビンの有無を調べる便潜血
検査や、小児ウイルス性胃腸炎の主原因であるロタウイ
ルスを検出する検査等がある。この検査として、検体の
糞便中から被検物質を簡便に検出する方法として、酵素
標識抗体や着色標識抗体を用いた抗体免疫クロマト法が
知られている。2. Description of the Related Art As a test using a specimen such as feces as a sample,
There are fecal occult blood tests to check for the presence of occult blood components, particularly human hemoglobin, and tests to detect rotavirus, the main cause of childhood viral gastroenteritis. As this test, an antibody immunochromatography method using an enzyme-labeled antibody or a colored-labeled antibody is known as a method for simply detecting a test substance from feces of a specimen.

【０００３】この免疫クロマトグラフ法は、一般に、被
検物質と特異的に結合し得る第一の抗体を固定化した固
定相を有する吸水性基材からなる検査片の一端より、被
検物質と特異的に結合し得る第二の抗体（標識抗体）と
被検液との混合物を吸収させて展開させ、固定相におい
て該混合物中で結合した標識抗体−被検物質の複合体と
第一の抗体とを結合させることにより、固定相上に捕捉
させるものである。[0003] In this immunochromatography method, generally, a test substance consisting of a water-absorbing substrate having a stationary phase on which a first antibody capable of specifically binding to a test substance is immobilized is applied to the test substance from one end. A mixture of a second antibody (labeled antibody) capable of specifically binding and a test solution is absorbed and developed, and the complex of the labeled antibody-test substance bound in the mixture in the stationary phase is combined with the first antibody. By binding to an antibody, it is captured on a stationary phase.

【０００４】この方法によれば、試料（糞便）を希釈し
予め標識抗体と反応させる必要があるため、操作が煩雑
になる。また、実際の便潜血検査では、被験者自身が自
宅等で糞便を採取し緩衝液と混合した被検液の状態で放
置されるケースが多い。この結果、被検液中のヒトヘモ
グロビンが腸内細菌や消化酵素等により変性し、第二の
抗体などと結合しにくくなる恐れがあった。According to this method, it is necessary to dilute a sample (feces) and react it with a labeled antibody in advance, so that the operation becomes complicated. In actual fecal occult blood tests, there are many cases where the subject himself or herself collects stool at home or the like and is left in the state of a test solution mixed with a buffer solution. As a result, human hemoglobin in the test solution may be denatured by intestinal bacteria, digestive enzymes, or the like, and may not be easily bound to the second antibody or the like.

【０００５】そこで、かかる問題を解決するため、糞便
等の検体を吸水性基材に直接塗布した後、免疫クロマト
法に従い、配置された糞便中の被検物質に標識抗体を結
合させ、これを試薬としての展開液によって吸水性基材
上の固定相まで展開させて、標識抗体−被検物質の複合
体を固定相に補足させる方法が開発されている。In order to solve such a problem, a sample such as stool is directly applied to a water-absorbing substrate, and then a labeled antibody is bound to the test substance in the stool arranged according to the immunochromatography method. A method has been developed in which a stationary phase on a water-absorbent substrate is developed with a developing solution as a reagent so that a complex of a labeled antibody and a test substance is captured on the stationary phase.

【０００６】この方法においては精度よく検出するため
に微量かつほぼ一定量の糞便を塗布する必要があり、そ
のためには、例えば図３に示すような免疫学的検査片１
が用いられていた。図３は当該検査片１を示す説明図で
あって、同図（ａ）はその分解斜視図、同図（ｂ）はそ
の断面図である。この検査片１は、同図（ａ）に示すよ
うに、上記第一の抗体が固定化された吸水性基材１０
が、２枚の非吸水性フィルム２０，３０で挟み込まれた
構造をしている。In this method, it is necessary to apply a small amount and a substantially constant amount of feces for accurate detection. For this purpose, for example, an immunological test strip 1 as shown in FIG.
Was used. 3A and 3B are explanatory views showing the test piece 1, wherein FIG. 3A is an exploded perspective view and FIG. 3B is a cross-sectional view. As shown in FIG. 1A, the test piece 1 includes a water-absorbent substrate 10 on which the first antibody is immobilized.
However, it has a structure sandwiched between two non-water-absorbing films 20 and 30.

【０００７】いずれか一方の非吸水性フィルム２０に
は、試料塗布用のスリット２１が設けられている。ま
た、残る一方の非吸水性フィルム３０の一端には切欠き
３１が設けられ、吸水性基材１０の露出領域から、展開
液が供給される。また、上記スリット２１は、第一の抗
体が固定化された固定相１１の領域外に形成されてお
り、展開液によって展開された試料中の被検物質が固定
相１１に補足されるようになっている。One of the non-water-absorbing films 20 is provided with a slit 21 for applying a sample. A notch 31 is provided at one end of the remaining non-water-absorbing film 30, and a developing solution is supplied from an exposed region of the water-absorbing substrate 10. Further, the slit 21 is formed outside the region of the stationary phase 11 on which the first antibody is immobilized, so that the test substance in the sample developed by the developing solution is captured by the stationary phase 11. Has become.

【０００８】この検査片１においては、適当量の検体と
なる糞便をスリット２１を含むその周辺領域に塗布した
後、ヘラなどの適当な部材を用いて過剰に塗布された糞
便を擦り切り排除する操作を行っていた。このようにす
ることで、スリット２１中に必要量の試料を容易に残す
ことができる。In this test strip 1, an operation of applying an appropriate amount of stool serving as a sample to the peripheral area including the slit 21 and scraping off the excessively applied stool using an appropriate member such as a spatula is performed. Had gone. By doing so, a required amount of sample can be easily left in the slit 21.

【０００９】[0009]

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、吸水性
基材１０は、標識抗体−被検物質−第一の抗体複合体の
発色を見やすくするため、一般に白色のものが用いられ
る。また、２枚の非吸水性フィルム２０，３０は透明若
しくは白色半透明のものが使用され、この結果、糞便が
塗布されるスリット２１の視認性が悪くなり、糞便の塗
布領域が非常に判別しにいという問題を生じていた。However, as the water-absorbing substrate 10, a white one is generally used in order to make it easier to see the color of the labeled antibody-test substance-first antibody complex. In addition, the two non-water-absorbing films 20 and 30 are transparent or translucent white, and as a result, the visibility of the slit 21 to which feces are applied becomes poor, and the fecal application area is very discriminated. The problem of scenting had arisen.

【００１０】さらに、糞便等の塗布操作は一般的に被験
者が行うが、専門の検査者とは異なり、操作に不慣れで
あり、糞便塗布領域が判別しにくいため、塗布部領域の
スリット２１に正確に塗布できず、また必要以上の糞便
が塗布されやすく、正確な検査結果が得られないという
問題点もあった。さらに、必要以上に糞便が塗布された
場合には、ヘラ等を用いて擦り切った際、検査片１上か
ら糞便のはみ出し等が生じ、不衛生であった。[0010] Furthermore, the application of feces and the like is generally performed by the subject, but unlike a specialized examiner, the user is unfamiliar with the operation and it is difficult to determine the feces application area. In addition, there was also a problem that feces more than necessary were easily applied and accurate test results could not be obtained. Furthermore, when feces were applied more than necessary, the feces protruded from the test piece 1 and the like when the hair was scraped off with a spatula or the like, which was unsanitary.

【００１１】本発明は、上記従来技術の問題点に鑑みて
なされたものであって、被験者が容易かつ確実に、しか
も衛生的に検体を塗布できると共に、より正確な検査結
果を得ることのできる免疫学的検査片を提供することに
ある。The present invention has been made in view of the above-mentioned problems of the prior art, and enables a subject to apply a sample easily, reliably, and sanitarily, and to obtain a more accurate test result. To provide an immunological test strip.

【００１２】[0012]

【課題を解決するための手段】本発明の免疫学的検査片
は、１若しくは２以上の抗体が固定化された領域を有す
る吸水性基材の両面に非吸水性フィルムが積層され、何
れか一方の非吸水性フィルムの前記抗体が固定化された
領域外に、試料塗布用のスリットが形成された免疫学的
検査片において、前記スリットが形成された非吸水性フ
ィルムの当該スリットの周辺領域に、前記固定化領域に
重ならない範囲で、着色が施された識別領域が設けられ
たことを特徴としている。According to the immunological test strip of the present invention, a non-water-absorbing film is laminated on both sides of a water-absorbing substrate having a region where one or more antibodies are immobilized. In an immunological test strip in which a slit for applying a sample is formed outside a region where the antibody is immobilized on one non-water-absorbing film, a peripheral region of the slit of the non-water-absorbing film in which the slit is formed Further, a colored identification area is provided in a range not overlapping the fixed area.

【００１３】また、ケースに収納された検査片上に試料
を塗布するための開口が当該ケースに開設された免疫学
的検査具に用いられる検査片においては、前記開口に対
応する領域内に、識別領域が設けられたことを特徴とす
るものである。[0013] In the test strip used for an immunological test tool provided with an opening for applying a sample onto the test strip housed in the case, the discrimination area is provided in an area corresponding to the opening. An area is provided.

【００１４】[0014]

【発明の実施の形態】図１は本発明の一実施の形態に係
る免疫学的検査片１を示す分解斜視図であって、当該検
査片１は、吸水性基材１０の両面に透明な非吸水性フィ
ルム２０，３０が貼り合わせられて構成されている。こ
の検査片１は、従来の検査片１とほぼ同様な構成をして
おり、スリット２１が形成された非吸水性フィルム２０
表面の一定領域に、着色が施され、識別領域２２が設け
られている点で異なっているのみである。FIG. 1 is an exploded perspective view showing an immunological test strip 1 according to an embodiment of the present invention. The test strip 1 is transparent on both surfaces of a water-absorbent substrate 10. The non-water-absorbing films 20 and 30 are bonded together. The test piece 1 has substantially the same configuration as the conventional test piece 1, and has a non-water-absorbing film 20 in which a slit 21 is formed.
The only difference is that a certain area on the surface is colored and an identification area 22 is provided.

【００１５】吸水性基材１０としては、適用試料に対し
て免疫クロマト法が適用可能な材料であれば、特に限定
されるものではない。即ち、被検物質を含有する被検
液、例えば、食品から抽出した溶液や培養液の上澄み、
便懸濁（溶解）溶液などを吸収できるもの、あるいはこ
れらを緩衝液によって希釈液を吸収し、試料内の被検物
質や標識された第二の抗体を展開できるものであればよ
い。また、試料である糞便中の被検物質が、標識された
第二の抗体や、固定化された第一の抗体と十分な反応を
行なうための時間を確保するために適度な吸水性を有す
るものが好ましい。The water-absorbing substrate 10 is not particularly limited as long as it is a material to which an immunochromatography method can be applied to a sample to be applied. That is, a test solution containing a test substance, for example, the supernatant of a solution or culture solution extracted from food,
Any substance capable of absorbing a stool suspension (dissolution) solution or the like, or any substance capable of absorbing a diluent with a buffer solution and developing a test substance or a labeled second antibody in a sample may be used. In addition, the test substance in the stool, which is a sample, has an appropriate water absorbency in order to secure sufficient time for performing a sufficient reaction with the labeled second antibody or the immobilized first antibody. Are preferred.

【００１６】吸水性が劣る場合には、被検物質と第二の
抗体が固定相１１に到達するのに長時間を要し正確な結
果を得ることができなくなる恐れがある。一方、吸水性
が余りに高い場合には、被検物質と第二の抗体の複合体
が第一の抗体と十分な反応を行なうことが困難となる。If the water absorption is poor, it takes a long time for the test substance and the second antibody to reach the stationary phase 11, and there is a possibility that accurate results cannot be obtained. On the other hand, if the water absorption is too high, it is difficult for the complex of the test substance and the second antibody to sufficiently react with the first antibody.

【００１７】従って、吸水性基材１０としては、このよ
うな吸水性を満足させるものが好適に用いられ、具体例
として、例えば、レーヨンやポリエステルなどからなる
不織布、ろ紙、ガラス繊維紙、ガラスフィルター、ニト
ロセルロースフィルター、酢酸セルロースフィルター、
多孔質材料等からなるものが挙げられる。Therefore, as the water-absorbing substrate 10, a material that satisfies such water-absorbing properties is preferably used. Specific examples thereof include nonwoven fabrics made of rayon or polyester, filter paper, glass fiber paper, and glass filter. , Nitrocellulose filter, cellulose acetate filter,
Examples include those made of a porous material.

【００１８】この吸水性基材１０は、上記観点から、通
常約３〜１０ｍｍ程度の幅を有する短冊状に作製され、
その長さは、上記吸水性基材１０の吸水性や展開液の種
類等に応じて適宜定められる。From the above point of view, the water-absorbent substrate 10 is usually made into a strip having a width of about 3 to 10 mm,
The length is appropriately determined according to the water absorption of the water-absorbing substrate 10 and the type of the developing solution.

【００１９】また、当該吸水性基材１０の吸水性を調整
したり、試料中に存在するタンパク質等の非特異的吸着
を抑制するために、吸水性基材１０に、親水性重合体や
界面活性剤を被覆又は含浸させてもよい。さらに、本発
明においては、同一の材料からなる基材のみならず、二
種以上の材料を用いることもでき、複数の層を積層した
ものや、複数の層を展開方向に接合されたものも用いる
ことができる。In order to adjust the water absorption of the water-absorbent substrate 10 and to suppress non-specific adsorption of proteins and the like present in the sample, a hydrophilic polymer or an interface The activator may be coated or impregnated. Furthermore, in the present invention, not only the base material made of the same material, but also two or more kinds of materials can be used. Can be used.

【００２０】当該吸水性基材１０には、被検物質−第二
の抗体（標識抗体）複合体と反応する第一の抗体が固定
化された領域、すなわち固定相１１が形成される。当該
第一の抗体としては、被検物質若しくは第二の抗体に対
する抗体であり、通常の免疫学的測定に用いられる公知
のものを適宜選択すればよく、被検物質に対する抗体の
みならず、第二の抗体に対する抗体であってもよい。当
該抗体としては、ウサギやヤギ、ヒツジ等由来のポリク
ロナール抗体、モノクロナール抗体などが挙げられる。On the water-absorbent substrate 10, a region where the first antibody which reacts with the test substance-second antibody (labeled antibody) complex is immobilized, that is, a stationary phase 11 is formed. The first antibody is an antibody against the test substance or the second antibody, and may be appropriately selected from known antibodies used for ordinary immunological measurement. It may be an antibody against the second antibody. Examples of the antibody include polyclonal antibodies and monoclonal antibodies derived from rabbits, goats, sheep and the like.

【００２１】固定相１１を設ける位置は、展開液によっ
て展開された標識抗体複合体等と反応できるように設定
され、通常、吸水性基材１０の中央領域より端部側に設
けられる。また、第一の抗体を固定化する方法としても
特に限定されるものではないが、公知の物理的吸着法や
共有結合法などが好ましい方法である。The position where the stationary phase 11 is provided is set so that it can react with the labeled antibody complex and the like developed by the developing solution, and is usually provided on the end side of the central region of the water-absorbent substrate 10. In addition, the method for immobilizing the first antibody is not particularly limited, but a known physical adsorption method or a covalent bonding method is a preferable method.

【００２２】このように固定相１１が設けられた吸水性
基材１０の両面に、非吸水性フィルム２０，３０が貼着
される。当該非吸水性フィルム２０，３０としては、ポ
リマーフィルム、例えばポリエステルフィルムなど展開
液により影響を受けない材質のものが用いられる。この
非吸水性フィルム２０，３０を積層する方法も検出性に
影響を与えなければいずれの方法でもよく、好ましい方
法として、非吸水性フィルム２０，３０に接着剤を塗布
した後に、吸水性基材１０を重ねて接着する方法等が挙
げられる。The non-water-absorbing films 20 and 30 are attached to both surfaces of the water-absorbing substrate 10 provided with the stationary phase 11 as described above. As the non-water-absorbing films 20, 30, a material that is not affected by the developing liquid, such as a polymer film, for example, a polyester film is used. The method of laminating the non-water-absorbing films 20 and 30 may be any method as long as it does not affect the detectability. 10 and a method of bonding them together.

【００２３】何れかの一方の非吸水性フィルム２０は、
吸水性基材１０の全面を覆うように設けられ（以下、
「第一の非吸水性フィルム」と称する。）、一方残る非
吸水性フィルム３０（以下、「第二の非吸水性フィル
ム」と称する。）は、端部に吸水性基材１０を露出させ
るための切欠き３１が設けられている。当該切欠き３１
は、被検物質を展開させるための展開液を吸水性基材１
０に吸収させるためのものであって、スリット２１に対
して固定相１１と反対側端部に設けられる。もちろん、
この切欠き３１の代わりに、第二の非吸水性フィルム３
０に多数の穿孔を設け、展開液を吸収させるようにする
こともできるのは言うまでもない。One of the non-water-absorbing films 20 is
Provided so as to cover the entire surface of the water-absorbing substrate 10 (hereinafter, referred to as
It is referred to as "first non-water-absorbing film". On the other hand, the remaining non-water-absorbing film 30 (hereinafter, referred to as a “second non-water-absorbing film”) has a notch 31 at an end to expose the water-absorbing substrate 10. The notch 31
The developing solution for developing the test substance is mixed with the water-absorbing substrate 1.
The slit 21 is provided at the end opposite to the stationary phase 11 with respect to the slit 21. of course,
Instead of this notch 31, the second non-water-absorbing film 3
Needless to say, a number of perforations may be provided in the zero to absorb the developing solution.

【００２４】また、第一の非吸水性フィルム２０には、
微量かつほぼ一定量の試料を上記吸水性基材１０に塗布
するためのスリット２１が、ほぼその中央領域に設けら
れている。スリット２１の形状は、第一の非吸水性フィ
ルム２０を貫通するものであればその形状は限定される
ものではないが、好ましい形状としては吸水性基材１０
の幅方向に長くなった矩形状や楕円形状である。このと
き、スリット２１の幅が吸水性基材１０の幅方向に対し
て小さい場合には、展開液による試料中の被検物質の拡
散が不十分となり、第一の抗体固定相１１での発色に斑
が生じるからである。The first non-water-absorbing film 20 includes
A slit 21 for applying a small amount and a substantially constant amount of the sample to the water-absorbing substrate 10 is provided substantially in a central region thereof. The shape of the slit 21 is not limited as long as it penetrates through the first non-water-absorbing film 20.
Are elongated in the width direction. At this time, if the width of the slit 21 is small in the width direction of the water-absorbent substrate 10, diffusion of the test substance in the sample by the developing solution becomes insufficient, and color development in the first antibody stationary phase 11 occurs. This is because spots occur on the surface.

【００２５】これら２つの非吸水性フィルム２０，３０
の厚さも特に限定されるものではないが、第一の非吸水
性フィルム２０においては、３ｍｍ以下にするのが好ま
しい。厚過ぎる場合、塗布した試料である糞便の乾燥に
時間が掛かり、この間に糞便中の被検物質が変性する恐
れがあるからである。These two non-water-absorbing films 20 and 30
The thickness of the first non-water-absorbing film 20 is not particularly limited, but is preferably 3 mm or less. If the thickness is too thick, it takes time to dry the applied feces, and during this time, the test substance in the feces may be denatured.

【００２６】本発明においては、当該第一の非吸水性フ
ィルム２０の前記スリット２１周辺領域に着色が施さ
れ、スリット２１の位置を識別容易にする識別領域２２
が形成されている。この識別領域２２は、第一の非吸水
性フィルム２０の外面に形成されるのが好ましく、少な
くともスリット２１の周囲でかつスリット２１が容易に
判別できる程度の領域であり、固定相１１領域に重なら
ない範囲で設けられる。より具体的に言えば、後述する
図２に示すような免疫学的検査具１００において、試料
塗布時において、試料塗布用の窓（試料窓１１６）から
見える範囲内に設けるのが好ましい。In the present invention, an area around the slit 21 of the first non-water-absorbing film 20 is colored so that the position of the slit 21 can be easily identified.
Are formed. This identification region 22 is preferably formed on the outer surface of the first non-water-absorbing film 20, is a region at least around the slit 21 and the extent that the slit 21 can be easily distinguished, and overlaps with the stationary phase 11 region. It is provided in the range which does not become. More specifically, in the immunological test tool 100 as shown in FIG. 2 to be described later, it is preferable to provide the sample within a range visible from a sample application window (sample window 116) at the time of applying the sample.

【００２７】この識別領域２２への着色は、一般には非
水溶性のインクであれば特に制限なく用いられ、有機溶
剤系のインクや熱溶融インク等を使用できる。また、着
色の色としては、スリット２１が識別できればよいが、
上記吸水性基材１０が白色系であることを考慮すれば、
赤や青、緑等の明色系、より好ましくはこれらの原色が
好適に用いられる。また、識別領域２２の厚みは、でき
る限り薄いほど好ましく、１〜５μｍ程度がよい。この
とき、厚くなりすぎると、第一の非吸水性フィルム２０
の厚みが増えるのと同様の結果になり、塗布した糞便の
乾燥に時間を要することになって、良好な結果が得られ
なくなる恐れがある。The coloring of the identification area 22 is generally performed without any particular limitation as long as it is a water-insoluble ink, and an organic solvent-based ink, a hot-melt ink, or the like can be used. Further, as the coloring color, it is sufficient that the slit 21 can be identified,
Considering that the water-absorbent substrate 10 is white,
Bright colors such as red, blue, and green, more preferably, these primary colors are suitably used. Further, the thickness of the identification region 22 is preferably as thin as possible, and is preferably about 1 to 5 μm. At this time, if it is too thick, the first non-water-absorbing film 20
The result is similar to an increase in the thickness of the stool, and it takes a long time to dry the applied feces, so that a good result may not be obtained.

【００２８】この検査片１においては、当該識別領域２
２内に納まる程度に検体である試料（糞便）を塗布する
のが好ましい。この場合、検査片１には着色された識別
領域２２が形成されているため、当該識別領域２２を目
安にして、試料（糞便）の塗布位置が一目で判別でき
る。また、識別領域２２が形成されているために、当該
領域２２が塗布量の目安ともなるため、過剰の塗布を防
ぐこともできるものである。In the test piece 1, the identification area 2
It is preferable to apply a sample (feces), which is a specimen, to such an extent that it fits within 2. In this case, since the test piece 1 has the colored identification region 22 formed thereon, the application position of the sample (feces) can be determined at a glance using the identification region 22 as a guide. In addition, since the identification region 22 is formed, the region 22 serves as a measure of the amount of application, so that excessive application can be prevented.

【００２９】このようにして、試料がスリット２１の周
辺領域に塗布された後、余分な試料はヘラ等で擦り切り
除去された後、従来例と同様にして使用される。具体的
に説明を加えると、展開液としては、例えばリン酸緩衝
液、グリシン緩衝液、ホウ酸緩衝液等で、ｐＨ５〜９付
近のものが用いられる。試料中の被検物質と第二の抗体
（標識抗体）との結合は、試料中の被検物質が固定相１
１領域に到達する前であればいつでもよい。例えば、展
開液に標識化された第二の抗体を含有させておき、この
液を試料、第一の抗体の順序で通過するように吸水性基
材１０に吸収させるようにしてもよく、予め、標識化さ
れた第二の抗体も、図示はしないが吸水性基材１０に固
定化させておき、試料中の被検物質が第二の抗体、第一
の抗体の順序で通過するようにして展開液を吸収させる
ことにすることもできる。After the sample is applied to the peripheral area of the slit 21 in this way, the excess sample is scraped off with a spatula or the like, and then used as in the conventional example. More specifically, as a developing solution, for example, a phosphate buffer, a glycine buffer, a borate buffer, or the like having a pH of about 5 to 9 is used. The binding between the test substance in the sample and the second antibody (labeled antibody) is determined when the test substance in the sample
It may be any time before reaching one area. For example, the developing solution may contain a labeled second antibody, and the solution may be absorbed by the water-absorbent substrate 10 so as to pass through the sample and the first antibody in this order. Although not shown, the labeled second antibody is also immobilized on the water-absorbing substrate 10 so that the test substance in the sample passes through the second antibody and the first antibody in this order. It is also possible to absorb the developing solution.

【００３０】また、第二の抗体としても、被検物質若し
くは第一の抗体に対する抗体で、通常の免疫学的測定に
用いられる公知のものを適宜選択すれば良い。具体的に
は、第二の抗体と同様、ウサギやヤギ、ヒツジ等由来の
ポリクロナール抗体、モノクロナール抗体などが挙げら
れる。標識としては、目視確認が容易な着色粒子が好ま
しく用いられ、当該着色粒子として、例えば、金、銀、
銅などのコロイド状金属粒子、着色化高分子ラテックス
粒子、顔料粒子等が用いられるが、特に金属コロイド粒
子、着色化ラテックス粒子が好ましい。これらの着色粒
子の粒子径は、用いられる吸水性基材１０に目詰まりし
ない範囲とすることが好ましく、０．０１μｍ〜３μｍ
程度がよい。As the second antibody, an antibody against the test substance or the first antibody may be appropriately selected from known antibodies used for ordinary immunological measurement. Specifically, similarly to the second antibody, polyclonal antibodies and monoclonal antibodies derived from rabbits, goats, sheep and the like can be mentioned. As the label, colored particles that are easy to visually confirm are preferably used. As the colored particles, for example, gold, silver,
Colloidal metal particles such as copper, colored polymer latex particles, pigment particles and the like are used, and metal colloid particles and colored latex particles are particularly preferred. The particle diameter of these colored particles is preferably in a range that does not cause clogging of the water-absorbing substrate 10 used, and is 0.01 μm to 3 μm.
Good degree.

【００３１】第二の抗体に着色粒子を結合する方法は従
来より知られている物理吸着法や化学結合法が用いられ
る。特に、官能基を粒子表面に有する着色粒子を用い、
これを共有結合法によって第二の抗体に結合する方法が
好ましい。例えば、アミノ基やカルボキシル基を有する
着色粒子に、結合試薬として水溶性カルボジイミドを用
いて抗体を共有結合させる方法が例示される。As a method for binding the colored particles to the second antibody, a conventionally known physical adsorption method or chemical bonding method is used. In particular, using colored particles having a functional group on the particle surface,
A preferred method is to bind this to the second antibody by a covalent bonding method. For example, a method of covalently binding an antibody to colored particles having an amino group or a carboxyl group using a water-soluble carbodiimide as a binding reagent is exemplified.

【００３２】このようにして、当該検査片１を単独での
み用いることもできるが、当該検査片１は、適当な免疫
学的検査具１００に用いて使用できるものでもある。当
該免疫学的検査具１００としては、例えば、特開平１０
−１３２８１６号公報や特開平１０−１３２８２０号公
報に開示したものが挙げられる。図２はこのような検査
片１が使用される検査具１００の一例を示す説明図であ
って、同図（ａ）はその断面図、同図（ｂ）はその平面
図、同図（ｃ）はその裏面図である。As described above, the test piece 1 can be used alone, but the test piece 1 can also be used for an appropriate immunological test tool 100. As the immunological test tool 100, for example,
And Japanese Patent Application Laid-Open No. 10-132820. FIG. 2 is an explanatory view showing an example of an inspection tool 100 in which such an inspection piece 1 is used, wherein FIG. 2 (a) is a sectional view, FIG. 2 (b) is a plan view thereof, and FIG. ) Is a rear view thereof.

【００３３】当該免疫学的検査具１００は、検査片１を
収納するケース部１１０と、検査片１上に載置された余
分な試料を擦り切り排除するための擦切片１２１が備え
られた蓋板１２０とを具備している。ケース部１１０
は、検査片１を載置する下ケース１１２と、蓋板１２０
を摺動自在に挿入可能に備えた上ケース１１１とから構
成されている。下ケース１１２には、検査片１の固定相
１１領域に対応する位置に、判定窓１１３が開口されて
おり、判定窓１１３には透明フィルム１１４が下ケース
１１２の内面に貼り合わせられている。また、当該下ケ
ース１１２には、検査片１の切欠き３１位置に対応して
試薬窓１１５が開口されており、露出された検査片１の
吸水性基材１０に展開液を吸収させることができるよう
になっている。さらに、上ケース１１１には、図２
（ａ）（ｂ）に示すように、蓋板１２０を引き出した際
に、検査片１のスリット２１を含むその周辺領域を露出
させるための試料窓１１６が開口されている。従って、
当該検査具１００を用いる場合には、試料窓１１６から
綿棒等を用いて試料を塗布できるようになっている。ま
た、蓋板１２０の先端部には、塗布された余分な試料を
擦り切るための擦切片１２１が備えられている。なお、
図２に示す免疫学的検査具１００は、特願平１０−１３
２８１６号に開示されたものと同様であるので、その詳
細については当該公報を参照されたい。The immunological test tool 100 has a cover plate provided with a case portion 110 for storing the test piece 1 and a slicing piece 121 for scraping and removing an excess sample placed on the test piece 1. 120. Case part 110
Is a lower case 112 on which the test piece 1 is placed, and a lid plate 120.
And an upper case 111 slidably inserted. A judgment window 113 is opened in the lower case 112 at a position corresponding to the stationary phase 11 region of the test piece 1, and a transparent film 114 is bonded to the inner surface of the lower case 112 in the judgment window 113. In addition, a reagent window 115 is opened in the lower case 112 at a position corresponding to the notch 31 of the test piece 1 so that the developing liquid can be absorbed by the exposed water-absorbing base material 10 of the test piece 1. I can do it. Further, in the upper case 111, FIG.
As shown in (a) and (b), when the cover plate 120 is pulled out, a sample window 116 for exposing a peripheral region including the slit 21 of the test piece 1 is opened. Therefore,
When the inspection tool 100 is used, a sample can be applied from the sample window 116 using a cotton swab or the like. Further, at the tip of the cover plate 120, a slicing piece 121 for slicing off the applied extra sample is provided. In addition,
The immunological test device 100 shown in FIG.
Since it is the same as that disclosed in No. 2816, refer to the official gazette for details.

【００３４】このような検査具１００に用いる検査片１
においては、図２に示すように、上記第一の非吸水性フ
ィルム２０の試料窓１１６に対応する領域内に着色を施
し、識別領域２２が形成されている。このとき、好まし
くは試料窓１１６よりも小さな領域に識別領域２２を設
けるのが好ましい。こうすることにより、より少量の試
料のみを塗布できるからである。An inspection piece 1 used for such an inspection tool 100
2, the region corresponding to the sample window 116 of the first non-water-absorbent film 20 is colored to form the identification region 22 as shown in FIG. At this time, it is preferable to provide the identification region 22 in a region smaller than the sample window 116. By doing so, it is possible to apply only a smaller amount of the sample.

【００３５】このように試料窓１１６に対応する領域に
着色を施すことにより、スリット２１が試料窓１１６内
部に位置していることを容易かつ確実に把握することが
できる。また、このような検査具１００に検査片１を装
着する場合、スリット２１の有無の確認が容易でないた
め装着ミスを引き起こす場合があったが、このようにス
リット２１の周辺領域を着色しておくことにより、装着
ミスをすることなく、確実に検査片１を装着できるとい
うメリットもある。このような識別領域２２を設けてお
くことにより、塗布量の目安が一目で分かり、余分な塗
布量を減らすことにつながる。なお、試料窓１１６に対
応する領域よりも広い範囲で着色を施し、識別領域２２
を形成することにしてもよいのはもちろんである。By coloring the region corresponding to the sample window 116 in this manner, it is possible to easily and reliably grasp that the slit 21 is located inside the sample window 116. In addition, when the test piece 1 is mounted on such a test tool 100, it is difficult to confirm the presence or absence of the slit 21. This may cause a mounting error. However, the peripheral area of the slit 21 is colored in this way. Accordingly, there is also an advantage that the test piece 1 can be securely mounted without making a mounting error. By providing such an identification area 22, a guide of the amount of application can be understood at a glance, which leads to a reduction of an unnecessary amount of application. It should be noted that coloring is performed in a wider range than the region corresponding to the sample window 116, and the identification region 22 is colored.
May of course be formed.

【００３６】また、免疫学的検査具１００としては、上
記例示した検査具１００のみならず、検査片１に設けら
れた試料塗布用のスリット２１周辺領域に対応した試料
窓１１６を具備する検査具１００であれば、その構造は
特に限定されることなく使用できるものである。As the immunological test tool 100, not only the test tool 100 described above but also a test tool having a sample window 116 corresponding to the area around the sample application slit 21 provided on the test piece 1 is used. If it is 100, the structure can be used without any particular limitation.

【００３７】さらに上記実施の形態として、第一の抗体
及び標識された第二の抗体を用いた場合について説明し
たが、検査片１としては、被検試料を検査片１上に塗布
し、展開液によって展開させた上で、検査片１上に固定
された抗体と反応させることを目的とするものであれ
ば、上記実施の形態に限られず、複数の抗体を吸水性基
材１０上に固定したものであっても適用できるのは言う
までもない。In the above embodiment, the case where the first antibody and the labeled second antibody are used has been described. As the test piece 1, a test sample is applied on the test piece 1 and developed. The present invention is not limited to the above embodiment as long as it is intended to react with the antibody fixed on the test piece 1 after being developed with the liquid, and a plurality of antibodies are fixed on the water-absorbing substrate 10. Needless to say, even if it is done, it can be applied.

【００３８】[0038]

【発明の効果】本発明によれば、スリットが形成された
第一の非吸水性フィルムに着色が施された識別領域が設
けられているので、被験者は直ちに試料の塗布領域を判
別することができる。このため、容易かつ確実に必要な
試料（糞便）を塗布できる。また、識別領域があるため
に、塗布量の目安が一目で分かり、識別領域にのみ試料
を塗布しやすい。このため、余分な試料が塗布されにく
く、良好な結果を確実に得ることができる。According to the present invention, the first non-water-absorbing film in which the slit is formed is provided with the colored identification area, so that the subject can immediately determine the application area of the sample. it can. Therefore, a required sample (feces) can be easily and reliably applied. In addition, since there is an identification area, a guide of the application amount can be understood at a glance, and it is easy to apply the sample only to the identification area. For this reason, an extra sample is hardly applied, and a good result can be reliably obtained.

【００３９】また、ケースに収納された検査片上に試料
を塗布するための試料窓が開設された免疫学的検査具に
用いられる場合であって、前記試料窓に対応する領域に
識別領域を着色が施された場合には、良好な結果が得ら
れるだけでなく、検査片の表裏が明確に区別されると共
にスリット位置が確実に把握できるため、ケース装着時
の装填ミスなども防げる。The present invention is also used for an immunological test tool having a sample window for applying a sample on a test piece housed in a case, and an identification area is colored in an area corresponding to the sample window. Is performed, not only good results can be obtained, but also the front and back of the test piece can be clearly distinguished and the slit position can be reliably grasped, so that loading errors when mounting the case can be prevented.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図１】本発明の一実施の形態に係る免疫学的検査片を
示す分解斜視図である。FIG. 1 is an exploded perspective view showing an immunological test strip according to one embodiment of the present invention.

【図２】同上の免疫学的検査片が使用される免疫学的検
査具の一例を示す説明図であって、同図（ａ）はその断
面図、同図（ｂ）はその平面図、同図（ｃ）はその裏面
図である。FIG. 2 is an explanatory view showing an example of an immunological test device using the above immunological test strip, wherein FIG. 2 (a) is a cross-sectional view, FIG. 2 (b) is a plan view thereof, FIG. 3C is a rear view thereof.

【図３】従来例である免疫学的検査片の説明図であっ
て、同図（ａ）はその分解斜視図、同図（ｂ）はその断
面図である。3A and 3B are explanatory views of a conventional immunological test strip, wherein FIG. 3A is an exploded perspective view and FIG. 3B is a cross-sectional view thereof.

【符号の説明】[Explanation of symbols]

１ 免疫学的検査片 １０ 吸水性基材 １１ 第一の抗体が固定された固定相 ２０ 第一の非吸水性フィルム ２１ スリット ２２ 着色された識別領域 ３０ 第二の非吸水性フィルム ３１ 展開液を吸収させるための切欠き １００ 免疫学的検査具 １１０ ケース部 １１１ 上ケース １１２ 下ケース １１３ 判定窓 １１４ 透明フィルム １１５ 試薬窓 １１６ 試料窓 １２０ 蓋板 １２１ 擦切片 REFERENCE SIGNS LIST 1 immunological test strip 10 water-absorbent substrate 11 stationary phase on which first antibody is immobilized 20 first non-water-absorbent film 21 slit 22 colored identification area 30 second non-water-absorbent film 31 Notch for absorption 100 Immunological test tool 110 Case part 111 Upper case 112 Lower case 113 Judgment window 114 Transparent film 115 Reagent window 116 Sample window 120 Cover plate 121 Scraping section

Claims (2)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 １若しくは２以上の抗体が固定化された
領域を有する吸水性基材の両面に非吸水性フィルムが積
層され、何れか一方の非吸水性フィルムの前記抗体が固
定化された領域外に、試料塗布用のスリットが形成され
た免疫学的検査片において、 前記スリットが形成された非吸水性フィルムの当該スリ
ットの周辺領域に、前記固定化領域に重ならない範囲
で、着色が施された識別領域が設けられたことを特徴と
する免疫学的検査片。1. A non-water-absorbing film is laminated on both surfaces of a water-absorbing substrate having one or more antibody-immobilized regions, and the antibody of one of the non-water-absorbing films is immobilized. Outside the area, in the immunological test strip in which a slit for sample application is formed, in the peripheral area of the slit of the non-water-absorbing film in which the slit is formed, in a range that does not overlap the immobilization area, coloring is performed. An immunological test strip, wherein the applied identification area is provided. 【請求項２】 ケースに収納された検査片上に試料を塗
布するための開口が当該ケースに開設された免疫学的検
査具に用いられる免疫学的検査片であって、 前記開口に対応する領域内に、識別領域が設けられたこ
とを特徴とする請求項１記載の免疫学的検査片。2. An immunological test strip used for an immunological test tool opened in the case, the opening corresponding to the sample being applied to the test piece stored in the case, wherein the area corresponds to the opening. The immunological test strip according to claim 1, wherein an identification area is provided therein.