JP2001114636A

JP2001114636A - ヒアルロン酸産生及びカタラーゼ産生促進剤、線維芽細胞賦活剤、並びに皮膚外用剤

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Publication number: JP2001114636A
Application number: JP29236799A
Authority: JP
Inventors: Shoichi Yahagi; 彰一矢作; Yoshiko Tsurumi; 淑子鶴見
Original assignee: Noevir Co Ltd
Current assignee: Noevir Co Ltd
Priority date: 1999-10-14
Filing date: 1999-10-14
Publication date: 2001-04-24

Abstract

(57)【要約】【課題】より有効な皮膚の老化症状の防止
及び改善作用を有し、品質的にも安定な皮膚外用剤を得
るべく、抗酸化作用，線維芽細胞賦活作用等、複数の作
用を併せ持つ成分を検索し、皮膚外用剤に応用する。【解決手段】アマニンの極性溶媒による抽出物
を担体に含有させてヒアルロン酸産生促進剤、カタラー
ゼ産生促進剤、線維芽細胞賦活剤とし、さらに前記抽出
物を外用剤基剤に含有させて、皮膚外用剤とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、線維芽細胞を賦活
化し、そのカタラーゼ産生及びヒアルロン酸産生を促進
することにより、皮膚の老化防止に有用な効果を発揮し
得る皮膚外用剤に関する。さらに詳しくは、アマニンの
極性溶媒による抽出物を含有して成る皮膚外用剤に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】加齢や紫外線曝露によるしわの形成や弾
性の低下といった皮膚の老化症状の進行を防止し、或い
は改善するため、多くの皮膚外用剤が提案されてきた。
最近では自然志向及び植物志向を反映してか、植物抽出
成分において、ヒドロキシラジカル，一重項酸素，スー
パーオキシド等の活性酸素種や、脂質過酸化物等の消去
或いは生成抑制作用を有する抗酸化成分、真皮マトリッ
クスの構成成分であるコラーゲンやエラスチン，ヒアル
ロン酸等の分解を抑制したり、これらの産生を促進した
りする成分の検索が盛んに行われている。

【０００３】上記抗酸化成分としては、タンニン，フラ
ボノイド，ポリフェノール化合物等を含有する植物の抽
出物をはじめとして、種々の植物の抽出物が用いられて
いる。コラーゲンを分解するコラゲナーゼ活性を阻害す
る作用を有する成分としては、ザクロ実，レモンバーム
等（特開平７−１９６５２６）、タチジャコウソウ等
（特開平１１−７９９７０）の抽出物が、コラーゲンの
産生を促進する成分としては、キク科エレファントパス
属植物（特開平９−８７１３５）、ブナ科ブナ属植物の
木の芽（特開平１０−２０３９５２）等の抽出物が開示
されている。エラスチンを分解するエラスターゼ活性を
阻害する成分としては、シラカバ，ケイヒ，フユボダイ
ジュ，ナツボダイジュ，シナノキ等（特開平１１−１７
１７５８）、ベルゲニア・クラッシフォリア等（特開平
１１−１９９５０４）の抽出物が開示され、ヒアルロン
酸を分解するヒアルロニダーゼ活性を阻害する成分とし
ては、チョウジ，ビンロウジ等（特開平６−９３７
１）、チンピ，キンジツ等（特開平６−８０５７６）、
ウルシ科植物（特開平７−１０７６５）、マメ科植物
（特開平７−１０７６８）、アルニカ，ドクダミ等（特
開平１０−１３０１６２）などが、ヒアルロン酸の産生
を促進する成分としては、海藻であるアナアオサ（特開
平６−９４２２）の他、メソイ（特開平９−８７１６
３）、シソ科植物（特開平１０−９５７３５）、クワ科
植物（特開平１１−６０４９６）などが用いられてい
る。

【０００４】しかしながら、従来用いられてきた上記成
分の中には、皮膚の老化症状の防止，改善作用が十分で
はなく、皮膚外用剤に配合する場合、多量を用いなけれ
ばならなかったり、他の抗老化作用を有する成分と併用
する必要のあるものも存在していた。また、安定且つ一
定の品質を有する抽出物が得られないものも存在してい
た。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】そこで本発明において
は、より有効な皮膚の老化症状の防止及び改善作用を有
し、品質的にも安定な皮膚外用剤を得るべく、抗酸化作
用，線維芽細胞賦活作用等、複数の作用を併せ持つ成分
を検索し、皮膚外用剤に応用することを目的とした。

【０００６】

【課題を解決するための手段】上記課題を解決する上で
有用な成分の検索を行ったところ、アマニンの極性溶媒
による抽出物がヒアルロン酸産生促進作用，カタラーゼ
産生促進作用及び線維芽細胞賦活作用を有することを見
いだし、これを皮膚外用剤に含有させることにより、皮
膚の老化症状を有効に防止及び改善することができた。

【０００７】すなわち本発明においては、アマニンの極
性溶媒による抽出物を担体に含有させてヒアルロン酸産
生促進剤、カタラーゼ産生促進剤、線維芽細胞賦活剤と
し、さらに前記抽出物を外用剤基剤に含有させて、皮膚
外用剤とする。

【０００８】

【発明の実施の形態】本発明において抽出物を得るのに
用いるアマニン（Lini Semen）は、アマ科（Linaceae）
の一年生草本であるアマ（Linum usitatisimum L.）の
種子である。アマニンを常圧で圧搾して得られるアマニ
ン油については、塗料，印刷用インク，ワニス，皮膚擦
剤，軟膏等に応用されているが、極性溶媒による抽出物
の皮膚外用剤への応用については知られていない。

【０００９】本発明においては、アマニンは生のまま抽
出に供してもよいが、抽出効率を考えると、細切，乾
燥，粉砕等の処理を行った後に抽出を行うことが好まし
い。抽出は、抽出溶媒に浸漬して行う。抽出効率を上げ
るため撹拌を行ったり、抽出溶媒中でホモジナイズして
もよい。抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸
点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は抽出溶
媒の種類や抽出温度によっても異なるが、４時間〜１４
日間程度とするのが適切である。

【００１０】抽出溶媒としては、水の他、メタノール，
エタノール，プロパノール，イソプロパノール等の低級
アルコール、1,3-ブチレングリコール，プロピレングリ
コール，ジプロピレングリコール，グリセリン等の多価
アルコール、エチルエーテル，プロピルエーテル等のエ
ーテル類、酢酸エチル，酢酸ブチル等のエステル類、ア
セトン，エチルメチルケトン等のケトン類などの極性有
機溶媒を用いることができ、これらより１種又は２種以
上を選択して用いる。また、生理食塩水，リン酸緩衝
液，リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。

【００１１】アマニンの上記極性溶媒による抽出物は、
そのままでも本発明に係るヒアルロン酸産生促進剤等と
して用いることができるが、濃縮，乾固したものを水や
極性溶媒に再度溶解したり、或いはヒアルロン酸産生促
進作用等の生理作用を損なわない範囲で脱色，脱臭，脱
塩等の精製処理や分散処理を行った後に用いてもよい。
また保存のため、精製処理の後凍結乾燥し、用時に溶媒
に溶解して用いることもできる。本発明においては、ア
マニンの極性溶媒による抽出物又は前記処理物をそのま
ま、或いは水，低級アルコール等の水性担体、乳剤，ゲ
ル，クリーム，軟膏等の基剤に含有させてヒアルロン酸
産生促進剤，カタラーゼ産生促進剤，線維芽細胞賦活剤
とする。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプ
セル等に内包させることもできる。

【００１２】さらに本発明においては、アマニンの極性
溶媒による抽出物を外用剤基剤に含有させて、皮膚外用
剤とする。本発明に係る皮膚外用剤は、ローション剤，
乳剤，ゲル剤，クリーム剤，軟膏剤等の剤型で提供する
ことができる。また、化粧水，乳液，クリーム，パック
等の皮膚化粧料、メイクアップベースローション，メイ
クアップベースクリーム，乳液状又はクリーム状或いは
軟膏型のファンデーション，アイカラー，チークカラー
といったメイクアップ化粧料、ハンドクリーム，レッグ
クリーム，ボディローション等の身体用化粧料などとし
ても提供することができる。

【００１３】なお本発明に係る皮膚外用剤には、アマニ
ンの極性溶媒による抽出物の他に、油類，界面活性剤，
保湿剤，紫外線吸収剤，顔料，香料，防菌防黴剤等の一
般的な医薬品及び化粧料用原料や、他の活性酸素消去
剤，抗炎症剤，美白剤，皮膚細胞賦活剤等の生理活性成
分をも含有させることができる。なお本発明に係る皮膚
外用剤におけるアマニンの極性溶媒による抽出物の配合
量としては、その剤型により異なるが、０．０００１〜
１０．０重量％程度とするのが適当である。

【００１４】

【実施例】さらに本発明の特徴について、実施例により
詳細に説明する。

【００１５】［実施例１］ヒアルロン酸産生促進剤アマニンの乾燥粉砕物５００ｇを５０容量％のエタノー
ル水溶液１リットル中に浸漬し、２５℃で７日間静置し
た。その後植物粉末をろ別除去し、ろ液をヒアルロン酸
産生促進剤とした。

【００１６】［実施例２］カタラーゼ産生促進剤アマニン５００ｇを細切し、５０容量％エタノール水溶
液２リットル中に浸漬し、２０℃で５日間撹拌しながら
抽出した。次いでろ過してろ液を回収して凍結乾燥し、
再度５０容量％エタノール１００ｍｌに溶解して、カタ
ラーゼ産生促進剤とした。

【００１７】［実施例３］線維芽細胞賦活剤アマニン５００ｇの粉砕物を３０容量％エタノール・２
０容量％1,3-ブチレングリコール水溶液１．５リットル
中に浸漬し、室温で５日間撹拌抽出した。ろ過して得た
ろ液を減圧濃縮し、濃縮物を３０容量％エタノール水溶
液１００ｍｌに溶解して、線維芽細胞賦活剤とした。

【００１８】上記実施例１〜実施例３について、ヒアル
ロン酸産生促進作用，カタラーゼ産生促進作用及び線維
芽細胞賦活作用をそれぞれ評価した。

【００１９】まず、実施例１のヒアルロン酸産生促進作
用については、正常ヒト線維芽細胞を１ウェル当たり
２．０×１０⁴個となるように９６穴マイクロプレート
に播種し、実施例１を１２．５μｇ／ｍｌ〜１００μｇ
／ｍｌの各試験濃度含有する０．５容量％牛胎仔血清添
加ダルベッコ修正基礎培地（ＤＭＥＭ）にて３７℃で５
日間培養後、培養上清のヒアルロン酸量をEnzyme-linke
d immunosorbent assay（ＥＬＩＳＡ）により測定し
た。同時に線維芽細胞数を計測し、細胞当たりのヒアル
ロン酸産生量を算出して、実施例１を含有しない対照の
細胞当たりのヒアルロン酸産生量を１００としたヒアル
ロン酸産生インデックスにて表１に示した。

【００２０】

【表１】

【００２１】表１より、本発明に係るヒアルロン酸産生
促進剤は、５０μｇ／ｍｌ〜１００μｇ／ｍｌの濃度に
て線維芽細胞のヒアルロン酸産生を促進することが認め
られる。前記濃度範囲にて、対照の１．７〜１．８倍の
ヒアルロン酸産生の増加が認められていた。

【００２２】次に、実施例２のカタラーゼ産生促進作用
については、正常ヒト線維芽細胞を１ウェル当たり８．
０×１０⁴個となるように４８穴マイクロプレートに播
種し、実施例２を２５μｇ／ｍｌ〜１００μｇ／ｍｌの
各試験濃度含有する１．０容量％牛胎仔血清添加ＤＭＥ
Ｍにて３７℃で１日間培養後、細胞内のカタラーゼ量を
ＥＬＩＳＡにより測定した。同時に線維芽細胞の総タン
パク量を定量し、全タンパク量当たりのカタラーゼ量を
算出して、実施例２を含有しない対照の細胞当たりのカ
タラーゼ量を１００としたカタラーゼ産生インデックス
にて表２に示した。

【００２３】

【表２】

【００２４】表２より、本発明に係るカタラーゼ産生促
進剤は、５０μｇ／ｍｌ〜１００μｇ／ｍｌの濃度にて
線維芽細胞のカタラーゼ産生を促進することが認められ
る。１００μｇ／ｍｌの濃度においては、対照の１．６
倍のカタラーゼ産生を示していた。

【００２５】続いて、実施例３の線維芽細胞賦活作用に
ついては、正常ヒト線維芽細胞を１ウェル当たり２．０
×１０⁴個となるように９６穴マイクロプレートに播種
し、実施例３を１２．５μｇ／ｍｌ〜１００μｇ／ｍｌ
の各試験濃度含有する０．５容量％牛胎仔血清添加ＤＭ
ＥＭにて３７℃で２時間培養し、次いで2-(4,5-ジメチ
ル-2-チアゾリル)-3,5-ジフェニルテトラゾリウムブロ
ミド（ＭＴＴ）を２０μｇ／ｍｌ含有する培地に交換し
て３７℃で２時間培養し、テトラゾリウム環の開環によ
り生じるフォルマザンを５６０ｎｍにおける吸光度によ
り定量して評価した。なお、実施例３を添加せず、０．
５容量％牛胎仔血清添加ＤＭＥＭのみで培養した系を対
照とし、５．０容量％牛胎仔血清添加ＤＭＥＭで培養し
た系を陽性対照とした。結果は対照における吸光度を１
００として表した活性化指数により、表３に示した。

【００２６】

【表３】

【００２７】表３より明らかなように、本発明の実施例
３は２５μｇ／ｍｌの濃度で陽性対照と同程度の活性化
指数を示し、５０μｇ／ｍｌにおいては対照の１．６５
倍、１００μｇ／ｍｌでは対照の２倍以上の活性化指数
を示していた。

【００２８】続いて、本発明に係る皮膚外用剤について
の実施例の処方を示す。まず、各実施例にて用いたアマ
ニン抽出物の調製法について以下に示す。

【００２９】［アマニン抽出物１］アマニンの細切粉砕
物５００ｇを５０容量％のエタノール水溶液２リットル
中に浸漬し、室温で７日間静置した。その後植物粉末を
ろ別除去し、ろ液を回収した。

【００３０】［アマニン抽出物２］アマニン３００ｇを
細切粉砕し、５０容量％エタノール水溶液１．５リット
ル中に浸漬し、１５℃で１０日間撹拌しながら抽出し
た。次いでろ過してろ液を回収して凍結乾燥し、再度５
０容量％エタノール１００ｍｌに溶解した。

【００３１】［アマニン抽出物３］アマニン３００ｇの
粉砕物を５０容量％エタノール水溶液１．５リットル中
に浸漬し、室温で７日間撹拌抽出した。ろ過して得たろ
液を減圧濃縮して乾固し、乾固物を５０容量％エタノー
ル水溶液１００ｍｌに溶解した。

【００３２】［アマニン抽出物４］アマニン３５０ｇを
細切して３０容量％の1,3-ブチレングリコール水溶液１
リットル中に浸漬し、２５℃で７日間静置した。ろ過し
てろ液を回収し、２５０ｍｌとなるまで濃縮した。

【００３３】［アマニン抽出物５］アマニンの細切粉砕
物３２０ｇを生理食塩水１リットル中に浸漬し、２０℃
で５日間撹拌抽出した。その後植物粉末をろ別除去し、
ろ液を回収した。

【００３４】［アマニン抽出物６］アマニンの細切物４
００ｇをリン酸緩衝生理食塩水１．５リットル中に浸漬
し、２０℃で５日間撹拌抽出した。その後植物粉末をろ
別除去し、ろ液を回収した。

【００３５】［実施例４］皮膚用ローション剤（１）エタノール１０．０（重量％）（２）ヒドロキシエチルセルロース１．０（３）アマニン抽出物１０．５（４）パラオキシ安息香酸メチル０．１（５）精製水８８．４製法：(1)〜(4)を順次(5)に添加し、均一に溶解する。

【００３６】［実施例５］皮膚用乳剤（１）ステアリン酸０．２０（重量％）（２）セタノール１．５０（３）ワセリン３．００（４）流動パラフィン７．００（５）ポリオキシエチレン(10E.O.)モノオレイン酸１．５０エステル（６）酢酸トコフェロール０．５０（７）グリセリン５．００（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）水酸化カリウム０．０２（10）精製水８０．４３（11）アマニン抽出物２０．７５製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７０℃とする。一方、(7)〜(10)の水相成分を混
合，加熱して均一とし、７０℃とする。この水相成分に
前記油相成分を撹拌しながら徐々に添加して乳化し、冷
却した後４０℃にて(11)を添加，混合する。

【００３７】［実施例６］皮膚用ゲル剤（１）ジプロピレングリコール１０．０（重量％）（２）カルボキシビニルポリマー０．５（３）水酸化カリウム０．１（４）パラオキシ安息香酸メチル０．１（５）精製水８８．７（６）アマニン抽出物３０．６製法：(5)に(2)を均一に溶解した後、(1)に(4)を溶解し
て添加し、次いで(3)を加えて増粘させ、(6)を添加，混
合する。

【００３８】［実施例７］皮膚用クリーム剤（１）ミツロウ６．０（重量％）（２）セタノール５．０（３）還元ラノリン８．０（４）スクワラン２７．５（５）グリセリル脂肪酸エステル４．０（６）親油型グリセリルモノステアリン酸エステル２．０（７）ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン５．０モノラウリン酸エステル（８）プロピレングリコール５．０（９）パラオキシ安息香酸メチル０．１（10）精製水３５．４（11）アマニン抽出物１１．０（12）アマニン抽出物４１．０製法：(1)〜(7)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(8)〜(10)の水相成分を混合，溶解して７５
℃に加熱する。次いで、この水相成分に前記油相成分を
添加して予備乳化した後ホモミキサーにて均一に乳化
し、冷却後４０℃にて(11)，(12)を添加，混合する。

【００３９】［実施例８］皮膚用リポソーム剤（１）グリセリン２．０（重量％）（２）1,3-ブチレングリコール３．０（３）ポリオキシエチレン(25E.O.)オレイルエーテル０．２（４）エタノール１０．０（５）パラオキシ安息香酸メチル０．１（６）香料０．１（７）精製水７４．６（８）アマニン抽出物５内包リポソーム１０．０製法：(5)，(6)を(4)に溶解し、(1)〜(3)とともに(7)に
添加して均一に混合し、これに(8)を加えて分散する。
なお、(8)のアマニン抽出物５内包リポソームは、１０
０ｍｌのアマニン抽出物５に大豆レシチン８０ｇを添加
して６５℃で懸濁し、次いで超音波処理してリポソーム
を調製し、遠心分離により回収して調製した。

【００４０】［実施例９］水中油型乳剤性軟膏（１）白色ワセリン２５．０（重量％）（２）ステアリルアルコール２５．０（３）グリセリン１２．０（４）ラウリル硫酸ナトリウム１．０（５）パラオキシ安息香酸メチル０．１（６）精製水３３．４（７）アマニン抽出物６３．５製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃とする。一方、(5)，(6)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、７５℃とする。この水相成分に前記
油相成分を撹拌しながら徐々に添加して乳化し、冷却し
た後４０℃にて(7)を添加，混合する。

【００４１】［実施例１０］油中水型エモリエントクリーム（１）流動パラフィン３０．０（重量％）（２）マイクロクリスタリンワックス２．０（３）ワセリン５．０（４）ジグリセリルジオレイン酸エステル５．０（５）L-グルタミン酸ナトリウム１．６（６）L-セリン０．４（７）プロピレングリコール３．０（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１（９）アマニン抽出物４０．２（10）精製水５２．６（11）香料０．１製法：(5)，(6)を(10)の一部に溶解して５０℃とし、あ
らかじめ５０℃に加温した(4)に撹拌しながら徐々に添
加する。これをあらかじめ混合し、７０℃に加熱溶解し
た(1)〜(3)に均一に分散し、次いで(7)〜(9)を(10)の残
部に溶解して７０℃に加熱したものを撹拌しながら添加
し、ホモミキサーにて乳化する。冷却後、５０℃にて(1
1)を添加，混合する。

【００４２】［実施例１１］メイクアップベースクリーム（１）ステアリン酸１２．００（重量％）（２）セタノール２．００（３）グリセリルトリ2-エチルヘキサン酸エステル２．５０（４）自己乳化型グリセリルモノステアリン酸２．００エステル（５）プロピレングリコール１０．００（６）水酸化カリウム０．３０（７）アマニン抽出物５０．２５（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）精製水６９．２５（10）酸化チタン１．００（11）ベンガラ０．４０（12）黄酸化鉄０．１０（13）香料０．１０製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(5)〜(9)の水相成分を混合，加熱溶解し、こ
れに(10)〜(12)の顔料成分を添加してホモミキサーにて
均一に分散して７５℃とする。次いで、この水相成分に
前記油相成分を添加してホモミキサーにて均一に乳化
し、冷却後４０℃にて(13)を添加，混合する。

【００４３】［実施例１２］乳液状ファンデーション（１）ステアリン酸２．００（重量％）（２）スクワラン５．００（３）ミリスチン酸オクチルドデシル５．００（４）セタノール１．００（５）デカグリセリルモノイソパルミチン酸エステル９．００（６）1,3-ブチレンクリコール６．００（７）水酸化カリウム０．０８（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）精製水５３．３７（10）酸化チタン９．００（11）タルク７．４０（12）ベンガラ０．５０（13）黄酸化鉄１．１０（14）黒酸化鉄０．１０（15）香料０．１５（16）アマニン抽出物１０．２０製法：(1)〜(5)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(6)〜(9)の水相成分を混合，加熱溶解し、こ
れに(10)〜(14)の顔料成分を添加してホモミキサーにて
均一に分散して７５℃とする。次いで、この水相成分に
前記油相成分を添加してホモミキサーにて均一に乳化
し、冷却後４０℃にて(15)，(16)を添加，混合する。

【００４４】［実施例１３］ハンドクリーム（１）セタノール４．００（重量％）（２）ワセリン２．００（３）流動パラフィン１０．００（４）グリセリルモノステアリン酸エステル１．５０（５）ポリオキシエチレン(60E.O.)グリセリル２．５０イソステアリン酸エステル（６）酢酸トコフェロール０．２５（７）グリセリン２０．００（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）アマニン抽出物２０．１５（10）アマニン抽出物３０．１５（11）精製水５９．３５製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(7)〜(11)の水相成分を混合，加熱溶解して
７５℃とする。次いで、この水相成分に前記油相成分を
添加してホモミキサーにて均一に乳化する。

【００４５】上記本発明の実施例のうち実施例４〜実施
例９について、紫外線による皮膚のしわの形成に対する
防御効果を評価した。その際各実施例において、アマニ
ン抽出物１〜アマニン抽出物３を５０容量％エタノール
水溶液に、アマニン抽出物４を３０容量％1,3-ブチレン
グリコール水溶液に、アマニン抽出物５を生理食塩水
に、アマニン抽出物６をリン酸緩衝生理食塩水にそれぞ
れ代替して調製した比較例１〜比較例６についても、同
時に評価を行った。

【００４６】紫外線によるしわの形成に対する防御効果
は、ヘアレスマウス５匹を１群とし、各群について実施
例及び比較例をそれぞれ１日１回背部に塗布し、１Ｊ／
ｃｍ ²／週の長波長紫外線（ＵＶＡ）を５０週間照射
し、ヘアレスマウス皮膚におけるしわの形成状況を観察
し、次に示す判定基準に従って点数化して評価した。こ
の際、精製水のみを塗布した群を対照とした。結果は各
群の平均値を算出し、ＵＶＡ照射日数との関係により表
４に示した。

【００４７】［皮膚におけるしわの形成状況］しわの形成を全く認めない０点微小なしわの形成をわずかに認める１点軽微なしわの形成を明確に認める２点中程度のしわの形成を認める３点深いしわの形成を認める４点

【００４８】

【表４】

【００４９】表４より明らかなように、対照群において
は、ＵＶＡ照射日数が４０週を越える頃には皮膚に形成
されたしわの深さは中程度にまで達し、５０週後には深
いしわの形成が認められていた。これに対し本発明の実
施例塗布群では、いずれにおいても５０週後に微小或い
は軽微なしわの形成を認めた程度で、しわの形成は顕著
に抑制されていた。一方比較例塗布群では、酢酸トコフ
ェロールを含有する比較例２塗布群で形成されたしわの
程度の軽減がわずかに見られた他は、有意なしわの形成
抑制或いは軽減は認められなかった。

【００５０】続いて、上記実施例４〜実施例９及び比較
例１〜比較例６について、抗炎症作用及び創傷治癒促進
作用を評価した。背部皮膚に人工的に炎症又は創傷を形
成したマウス５匹を１群とし、各群において、実施例及
び比較例をそれぞれ０．５ｇずつ炎症部位又は創傷部位
に１日２回、７日間塗布した。７日目に各部位の状態を
観察し、抗炎症作用については「有効」，「やや有
効」，「無効」、創傷治癒促進作用については「完全治
癒」，「ほぼ治癒」，「治癒不完全」の３段階でそれぞ
れ評価し、各評価を得たマウスの数にて表５に示した。

【００５１】

【表５】

【００５２】表５より明らかなように、抗炎症作用につ
いては、本発明の実施例塗布群ではいずれにおいても無
効と評価されたマウスは見られず、２例以上のマウスに
おいて有効な抗炎症作用が認められた。また創傷治癒促
進効果についても、本発明の実施例塗布群では創傷治癒
の不完全なマウスはいずれにおいても認められておら
ず、２例以上のマウスで完全な治癒を認めていた。これ
に対し、比較例塗布群では、比較例２塗布群で２例にや
や有効な抗炎症作用が見られた他は、有効な抗炎症作用
は認められなかった。また比較例２塗布群で１例におい
て創傷の治癒傾向を認めた他は、いずれの塗布群におい
ても、創傷の治癒は不完全であった。

【００５３】次に、本発明の実施例４〜実施例１３につ
いて、６カ月間の実使用試験を行った。この際、実施例
１０〜実施例１３においても、各実施例において配合し
たアマニン抽出物を上記と同様に代替したものを比較例
７〜比較例１０とした。実使用試験は、パネラーとし
て、しわや皮膚弾性の低下といった皮膚の老化症状を顕
著に呈する４０才〜６０才代の女性を１群２０名として
用い、各群に実施例及び比較例をそれぞれブラインドに
て１日２回使用させて行った。使用試験開始前及び終了
後に皮膚の状態を観察し、しわ及び皮膚の弾性の改善状
況について「改善」，「やや改善」，「変化なし」の３
段階にて評価した。なお、しわの程度については写真撮
影及びレプリカ採取により、皮膚の弾性についてはキュ
ートメーターにより測定して評価した。結果は、各評価
を得たパネラー数にて表６に示した。

【００５４】

【表６】

【００５５】表６より明らかなように、本発明の実施例
使用群ではいずれにおいても、しわ，皮膚弾性ともに全
パネラーで症状の改善傾向が見られた。特に実施例４〜
実施例９及び実施例１３使用群では、しわについては４
０％以上、皮膚弾性については５０％以上のパネラーで
明らかな改善を認めていた。これに対して、比較例使用
群ではいずれにおいても、しわ，皮膚弾性ともに明確な
改善の見られたパネラーは存在せず、しわについては７
０％以上、皮膚弾性については７５％以上のパネラーで
皮膚の状態に変化は見られなかった。

【００５６】なお、本発明の実施例１〜実施例３におい
ては、１０℃以下で保存した場合、６カ月間にわたって
ヒアルロン酸産生促進作用をはじめ、それぞれの生理作
用はほぼ変化なく維持されていた。また、本発明の実施
例４〜実施例１３についても、２５℃で６カ月間保存し
た場合、何らの状態変化をも認めなかった。さらに上記
実使用試験において、本発明の実施例使用群では、皮膚
刺激性反応や皮膚感作性反応を認めたパネラーは存在せ
ず、使用時に痛みや温感，ヒリヒリ感，チクチク感とい
った刺激感又は不快感を訴えたパネラーも存在しなかっ
た。

【００５７】

【発明の効果】以上述べたように本発明により、有効な
作用を有するヒアルロン酸産生促進剤、カタラーゼ産生
促進剤及び線維芽細胞賦活剤を得ることができ、抗酸化
作用，線維芽細胞賦活作用等、複数の作用により、有効
な皮膚の老化症状の防止及び改善作用を発揮し、品質的
にも安定な皮膚外用剤を提供することができた。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続きＦターム(参考） 4C083 AA082 AA111 AA112 AB032 AB232 AB242 AB432 AC012 AC022 AC072 AC102 AC122 AC182 AC242 AC352 AC402 AC422 AC442 AC482 AC582 AC782 AD042 AD092 AD282 AD512 AD662 BB51 CC02 CC03 CC05 CC12 DD22 DD23 DD31 DD32 DD33 DD41 DD45 EE12 FF01 4C088 AB12 BA10 CA03 MA63 NA05 NA14 ZA89 ZB22 ZC19

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】アマニンの極性溶媒による抽出物を含有
して成るヒアルロン酸産生促進剤。
【請求項２】アマニンの極性溶媒による抽出物を含有
して成るカタラーゼ産生促進剤。
【請求項３】アマニンの極性溶媒による抽出物を含有
して成る線維芽細胞賦活剤。
【請求項４】アマニンの極性溶媒による抽出物を含有
して成る皮膚外用剤。