JP2000086653A

JP2000086653A - 二糖加水分解酵素阻害剤

Info

Publication number: JP2000086653A
Application number: JP10260539A
Authority: JP
Inventors: Masayuki Yoshikawa; 雅之吉川; Toshiyuki Murakami; 敏之村上; Kenichi Yashiro; 謙一社; Hisashi Matsuda; 久司松田
Original assignee: RANKA AAYURUBEEDICK HAABU YAKU; RANKA AAYURUBEEDICK HAABU YAKUHIN KK
Current assignee: RANKA AAYURUBEEDICK HAABU YAKU; RANKA AAYURUBEEDICK HAABU YAKUHIN KK
Priority date: 1998-09-14
Filing date: 1998-09-14
Publication date: 2000-03-28

Abstract

(57)【要約】【課題】二糖加水分解酵素阻害剤として有用な新規化
合物および二糖加水分解酵素阻害剤を提供する。【解決手段】本発明は、下記式〔１〕【化１】で示される化合物およびこの化合物を有効成分とする二
糖加水分解酵素阻害剤である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、二糖加水分解酵素
阻害剤、特にコタラノールを有効成分とする二糖加水分
解酵素阻害剤などとして有用な新規化合物および二糖加
水分解酵素阻害剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、我が国において糖尿病患者数は、
急激に増加しており、潜在的患者数を含めると、約６０
０万人と推定されている。糖尿病治療の基本は、食事療
法と運動療法であるが、これらの療法では期待通りの効
果をあげることが難しい。また、糖尿病患者の大部分
は、インスリン非依存性糖尿病である。この糖尿病の初
期には、空腹時の血糖値はそれほど高くないが、食後の
血糖値が高く持続されることによって、膵インスリンの
分泌能の障害やインスリン感受性の低下を引き起こすと
考えられている。その結果、食後の高血糖がさらに促進
され、空腹時の血糖値も上昇し、糖尿病は、悪化する。
従って、食後の高血糖を改善することは、糖尿病の進行
を止め、改善をもたらす。

【０００３】食事中の炭水化物は、小腸上部でブドウ糖
などの単糖まで消化分解された後、速やかに吸収され
る。従って、この炭水化物の加水分解を阻害すれば、糖
質の吸収が遅れ、食後の高血糖を抑制できる。このよう
な炭水化物の加水分解を阻害して食後の高血糖を抑制す
る薬剤として、アカルボースなどの薬剤が開発されてい
る。しかし、これらの薬剤は、下痢、腹部膨満感、肝障
害などの副作用があるという問題がある。

【０００４】一方、本発明者らは、インド伝統医学でア
ーユル・ヴェーダ生薬として、数千年もの間、糖尿病の
予防や治療に用いられてきたコタラヒンブツ（Kotala
himbutu) （Salacia reticulataの根）中から、二糖加
水分解酵素阻害活性を有するサラシノール（salacinol
）を単離した〔Yoshikawa M. et al., Tetrahedron Le
tt., 38, 8367(1997) 〕が、さらに強力、且つ安全な二
糖加水分解酵素阻害剤の開発を目指している。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】従って本発明の目的
は、二糖加水分解酵素阻害剤として有用な新規化合物を
提供することである。本発明の他の目的は、二糖加水分
解酵素阻害剤を提供することである。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意研究を重ねてきたところ、コタラ
ヒンブツ中にサラシノールとは異なる新規な二糖加水
分解酵素阻害活性を有する化合物（以下、コタラノール
という）を発見し、しかもコタラノールがサラシノール
より強力な二糖加水分解酵素阻害能を有することを見い
出して本発明を完成した。

【０００７】すなわち、本発明は以下の通りである。下記式〔１〕

【０００８】

【化３】

【０００９】で示される化合物。下記式〔１〕

【００１０】

【化４】

【００１１】で示される化合物を有効成分とする二糖加
水分解酵素阻害剤。

【００１２】

【発明の実施の形態】コタラノールは、例えばサラシア
レティキュラータ（Salacia reticulata）の根および
樹などに含まれているので、当該植物から単離・精製す
ることによって取得することができる。

【００１３】コタラノールの抽出方法は特に制限され
ず、例えば、Salacia reticulataの根および樹の粗切あ
るいは細切に、有機溶剤または水を加えて浸漬し、２〜
４時間浸出させた後に、残渣を除去して得る。抽出は、
１回でもよく、複数回（例えば３、４回）行ってもよ
い。抽出は、７５〜８５℃で行うのが通常である。Sala
cia reticulataと溶剤の混合割合は、通常１：３〜１：
１５程度である。

【００１４】上記抽出に用いる有機溶剤としては、例え
ば、アルコール類、アセトンなど水に可溶な有機溶媒の
ほか、芳香族炭化水素類、脂肪族炭化水素類、エーテ
ル、ケトン、エステルなどが使用できるが、抽出後の安
全性の観点から、アルコール類を使用するのが好まし
い。また、アルコール類としては、メタノール、エタノ
ール、ブタノールなどの低級アルコールが好ましい。こ
れらの低級アルコールは、単独でも使用できるが、水と
混合して用いると、さらに好ましい。低級アルコールと
水との混合比は、特に制限されないが、例えば、６０〜
９０％の低級アルコールが好ましい。

【００１５】得られた抽出液から溶剤を、例えば減圧留
去等の手段に付すことによって濃縮物を得、これをさら
に、カラムクロマトグラフィー等に付すことによりコタ
ラノールを単離することができる。上記濃縮物は、カラ
ムクロマトグラフィーに供する前に、前処理をしてもよ
い。前処理は、例えば、上記濃縮物を水に分散させた後
に、酢酸エチルなど水に不溶な有機溶媒などを加えて振
蘯し、有機溶媒に可溶な脂溶性成分を除去することなど
によって行うことができる。このように前処理をした水
可溶性分画は、減圧濃縮した後、カラムクロマトグラフ
ィーや液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）に供する。

【００１６】カラムクロマトグラフィーやＨＰＬＣに使
用できる吸着剤の種類としては、コタラノールを単離す
ることができるものであれば、特に制限されず、適宜選
択できるが、例えばシリカゲル、アルミナなどが使用さ
れる。

【００１７】カラムクロマトグラフィーやＨＰＬＣに使
用できる移動相は、吸着剤の種類、コタラノールの純度
などにより適宜選択できる。

【００１８】コタラノールは、ヒト、ウシ、ウマ等の哺
乳動物に対して二糖加水分解酵素阻害作用を有し、二糖
加水分解酵素阻害剤として有用である。二糖加水分解酵
素阻害剤は、炭水化物の加水分解を阻害して、消化管か
らの糖質の吸収を遅らせることで、食後の高血糖を抑制
し、それにより糖尿病の進行を防ぎ、糖尿病の病状を改
善することができる。コタラノールを二糖加水分解酵素
阻害剤として用いる場合、医薬上許容される添加剤（例
えば担体、賦形剤、希釈剤、結合剤、滑沢剤、可溶化
剤、安定化剤、保存剤など）などを適宜配合し、公知の
方法を用いて粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、シロップ
剤、注射剤などの投与に適した態様で製剤化し、経口的
または非経口的に投与することができる。

【００１９】上記製剤中には、コタラノールの有効量が
配合される。投与量は、投与ルート、症状、患者の体重
あるいは年齢などによって適宜選択されるが、例えば、
成人患者に経口投与する場合、コタラノールとして１回
当たり約２〜２０ｍｇを１日１〜４回に分けて投与する
のが望ましい。

【００２０】

【実施例】以下に、実施例を挙げて本発明をさらに詳細
に説明し、試験例によって本発明の効果を明らかにする
が、これらは単なる例示であり、本発明はこれらにより
何ら限定されるものではない。

【００２１】実施例１コタラノールの抽出方法スリランカ産Salacia reticulataの根および樹２０ｋｇ
に、８０％メタノール１００Ｌを加え、熱時（８０℃、
３時間）抽出を行い、濾過し、抽出液を得た。同様の操
作を全部で４回繰り返した。抽出液を合わせ、溶媒を減
圧留去し、８０％メタノール抽出物２．５ｋｇを得た。
この８０％メタノール抽出物を１０Ｌの水に分散させた
後、酢酸エチル１０Ｌを用いて脂溶性成分を抽出除去し
た。水層を減圧濃縮して、水可溶性分画２．０ｋｇを得
た。この水可溶性分画をシリカゲルクロマトグラフィー
〔クロロホルム−メタノール−水混液（６：４：１）→
（５：５：１）→（３：７：１）〕、次いでＮＨクロマ
トレックスクロマトグラフィー（富士シリシア（株）
製、ＣｈｒｏｍａｔｏｒｅｘＮＨ）〔アセトニトリル
−水混液（６：４）〕およびＨＰＬＣ〔ＹＭＣＣ
ｏ．，Ｌｔｄ製、ＹＭＣ−Ｐａｃｋｐｏｌｙａｍｉ
ｎｅＩＩ（２５０×１０ｍｍｉ．ｄ．）、アセトニ
トリル−水混液（７：３）〕で精製し、コタラノール４
０ｍｇを得た。

【００２２】上記抽出方法により得られたコタラノール
は、無色微細結晶であり、その物理化学性は次の通りで
ある。 mp. 173.7 〜175.0 ℃¹ H-NMR(500MHz, pyridine-d₅) δ 4.31(2H, br s),5.
08(1H, dd-like), 5.16(1H, br s), 4.64(1H, t-like),
4.51(2H, dd-like), 4.65(1H, dd, J=3.0, 12.8Hz),4.9
3(1H, dd, J=3.1, 12.8Hz), 5.24(1H, m),5.64(1H, dd,
J=0.9, 8.5Hz), 5.12(1H, br s), 5.86(1H, dd-like),
4.88(1H, ddd-like), 4.25(1H, dd, J=5.8, 11.0Hz),4.
50(1H, dd, J=7.9, 11.0Hz). IR(KBr, CHCL₃) 3410, 1258, 1233, 1071, 994 cm^-1 ¹³ C-MNR(125MHz, pyridine-d₅) δc 50.2, 53.7, 60.
0, 65.3,67.4, 70.5, 71.3, 72.2, 72.5, 77.9, 78.1,
79.4. 〔α〕_D ²⁷+11.5 °(MeOH) HRMS Calcd for C₁₂H₂₄O₁₂S₂ SIMS (m/z) 345, 425, 447, 469.

【００２３】試験例１二糖加水分解酵素阻害効果評価試験

【００２４】酵素液の調整ウィスター系雄性ラット（体重１５０〜３００ｇ）の空
腸からKesselerらの方法〔Biochem. Biophys. Acta., 5
06, 136(1978) 〕により得た刷子縁膜を粗酵素として用
いた。刷子縁膜は、０．１Ｍマレイン酸緩衝液（ｐＨ
６．０）に分散し、速度２５〜５０ｎｍｏｌ／ｍＬ／ｍ
ｉｎで、基質を加水分解する濃度に希釈して用いた。

【００２５】酵素活性の測定基質溶液（マルトース、蔗糖：７４ｍＭ、イソマルトー
ス：７．４ｍＭ）各１００μＬに被験物質（コタラノー
ル、サラシノール、アカルボース）溶液（０．０５〜１
００μｇ／ｍＬ）５０μＬを加え、３７℃で２〜３分
間、予備加温した。粗酵素液５０μＬを加えて３０分間
反応させた後、水８００μＬを加え、９２〜９７℃の水
浴中で２分間加熱し、酵素を失活させた。別に、各基質
溶液１００μＬに、各被験物質溶液５０μＬ、酵素液５
０μＬを加えた後、直ちに水８００μＬを加え、９２〜
９７℃の水浴中で２分間加熱し、酵素を失活させたもの
を盲検とした。生成したグルコースの量をグルコースオ
キシダーゼ法（和光純薬（株）製、グルコースＣＩＩテ
ストワコー）により測定した。得られた値より、酵素活
性を５０％阻害する濃度（ＩＣ₅₀）を求めた。結果を表
１に示す。

【００２６】

【表１】

【００２７】以上の結果から、コタラノールは、サラシ
ノール、アカルボースに比べ、各基質（マルトース、蔗
糖、イソマルトース）全てに対し、優れた酵素活性阻害
を示した。

【００２８】製剤処方例１．錠剤以下の成分を混和し、得られた混合物を打錠法で形成す
ることにより、錠剤を形成する。錠剤当たりの量（ｍｇ）コタラノール５コーンスターチ２０ヒドロキシプロピルセルロース３ステアリン酸マグネシウム２乳糖適量計１５０

【００２９】

【発明の効果】新規化合物であるコタラノールは、高い
二糖加水分解酵素阻害作用を有し、炭水化物の加水分解
を阻害して、消化管からの糖質の吸収を遅らせること
で、食後の高血糖を抑制することができる。従って、コ
タラノールを有効成分とする二糖加水分解酵素阻害剤
は、糖尿病の進行を防ぎ、糖尿病を改善することができ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者松田久司京都府京都市山科区小野鐘付田町22−２イーグルコート小野408 Ｆターム(参考） 4C086 AA01 AA02 AA03 BB02 MA01 MA04 NA14 ZC20 ZC35 4C088 AB11 AC06 AC11 BA34 NA14 ZC20 ZC35

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式〔１〕【化１】で示される化合物。
【請求項２】下記式〔１〕【化２】で示される化合物を有効成分とする二糖加水分解酵素阻
害剤。