JP2000028598A - Full automatic refining, analyzing device, method for continuously refining, and analyzing sample - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To simplify the mechanical structure for a device, to facilitate system control and maintenance, thereby to enhance process performance, and in particular, to allow refinement and analysis for polychrolinated-dibenzo-p-dioxins and PCB. SOLUTION: An isocratic pump 1, an autosampler 2, a gradient pump 3, two solid adsorbent columns 4, 5, three hexa-directional flow passage-selector valves 8, 9, 10 and the like are connected by piping, to switch flow passages hereinafter, i.e., a flow passage for recovering components by flowing through the first column 4 with a fair current, a flow passage for recovering components by flowing through the first and second columns 4, 5 with a fair current in this order, a flow passage for recovering components by flowing through the column 5 with a reverse current, and a flow passage for recovering components by flowing through the second and first columns 5, 4 with a reverse current in this order, and proper conveying solvents are successively fed from the isocratic pump 1 and the gradient pump 3.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、全自動試料連続精
製・分析装置及び精製・分析方法に関し、更に詳しく
は、ガスクロマトグラフ、質量分析計、抗体反応法等に
よってダイオキシン類及びコプラナＰＣＢなどを分析す
る際、分析対象物を精製・分取等する全自動試料連続精
製・分析装置及び精製・分析方法に関する。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a fully automatic continuous sample purifying / analyzing apparatus and a method for purifying / analyzing a sample. The present invention relates to a fully automatic sample continuous purification / analysis apparatus and a purification / analysis method for purifying / fractionating an object to be analyzed.

【０００２】[0002]

【従来の技術】ダイオキシン類及びコプラナＰＣＢなど
の精製・分取にはクロマトグラフの技術が用いられてい
る。近年、全自動で分析処理を行う液体クロマトグラフ
装置が、精製精度の向上及び省力化の観点から注目され
ている（Chemosphere,Vol.27,No.7,PP1211-1219,199
3）。液体クロマトグラフ分析装置は、従来、図８に示
すように所定のポンプ２１，２３、吸着カラム２４，２
５、流路切替えバルブ２６，２７，２８，２９，３０な
どをステンレス製の配管で連結した構造になっている。
流路切り替えバルブ２６〜３０は５個あり、それぞれ６
つ又は７つの流出入口を開口した流出入口部材と、その
流出入口を適宜選択的に連通させる連通切替え部材とか
らなっている。流路切替えバルブ２６〜３０の切替えポ
ジションを図９に示す。流路切替えバルブ２６〜３０
は、定められたタイミングで所定の流路間を切り替え
る。連通路の位置名称を図１０に示す。2. Description of the Related Art Chromatographic techniques are used for purification and fractionation of dioxins and coplanar PCBs. In recent years, liquid chromatographs that perform fully automatic analysis have attracted attention from the viewpoint of improving purification accuracy and saving labor (Chemosphere, Vol. 27, No. 7, PP1211-1219, 199).
3). Conventionally, a liquid chromatograph analyzer is provided with predetermined pumps 21 and 23 and adsorption columns 24 and 2 as shown in FIG.
5. The structure is such that the flow path switching valves 26, 27, 28, 29, 30 and the like are connected by stainless steel piping.
There are five flow path switching valves 26 to 30, each having 6
It comprises an outflow / inlet member having one or seven outflow / inflow ports, and a communication switching member for selectively selectively communicating the outflow / inflow port. The switching positions of the flow path switching valves 26 to 30 are shown in FIG. Flow path switching valves 26-30
Switches between predetermined flow paths at a predetermined timing. FIG. 10 shows the position names of the communication passages.

【０００３】[0003]

【発明が解決しようとする課題】従来の液体クロマトグ
ラフ分析装置は、図８で示すように精製物を回収する分
取口が５箇所３２，３３，３４，３５，３６に分散して
いる。そのため、システムを監視する検出器が少なくと
も複数必要で、それぞれを監視しなければならないとい
う煩わしさがあった。また、分取口３２〜３６から回収
した分取液の管理にフラクションコレクタを使用しよう
とすれば、これも複数必要で、装置の大型化、複雑化、
高コスト化という問題があった。従来の装置では、使用
準備にも多くの時間がかかる。例えば分析試料中にはカ
ラムの寿命を縮めるような夾雑物を含んでいることがあ
り、この夾雑物を取り除いてカラム２４，２５の寿命を
長くするため、検査対象試料をシリカゲルカラムで前処
理する必要がある。また、前処理にはそのために、シリ
カゲルを５００℃で２４時間加熱して活性化し、その上
で１０％程度の水を加えて不活性化するという事前調整
が必要で、準備に長い時間を費やした。結局、システム
全体の処理に時間がかかり過ぎるという問題点があっ
た。また、微量成分の精密な分析には精度に不十分な点
があった。In a conventional liquid chromatograph analyzer, as shown in FIG. 8, fractionation ports for collecting a purified product are dispersed at five locations 32, 33, 34, 35, and 36. Therefore, at least a plurality of detectors for monitoring the system are required, and each has to be monitored. In addition, if a fraction collector is to be used for managing the fractions collected from the fractionation ports 32 to 36, a plurality of fraction collectors are required, and the apparatus becomes large and complicated.
There was a problem of high cost. In the conventional apparatus, preparation for use also takes much time. For example, an analytical sample may contain impurities that shorten the life of the column. In order to remove the impurities and extend the life of the columns 24 and 25, the sample to be tested is pretreated with a silica gel column. There is a need. In addition, for the pre-treatment, it is necessary to heat the silica gel at 500 ° C. for 24 hours to activate the silica gel, and then inactivate the silica gel by adding about 10% of water, which requires a long time for preparation. Was. As a result, there is a problem that it takes too much time to process the entire system. In addition, precise analysis of trace components has insufficient accuracy.

【０００４】連続精製分析では、通常、複数の極性溶媒
の組合せを用いる。そのため、連続精製・分析装置は使
用後、洗浄作業が避けられない。しかし従来の装置では
配管の構造上、洗浄液が及んでいない部分があり、完全
な洗浄はできないという問題もあった。加えて、洗浄し
ても洗浄効果あるいは装置の平衡化を判断する手段がな
く、その意味でも分析精度が不明確であるという問題が
あった。従来から液体クロマトグラフは環境中の微量有
機化合物の測定に用いられてきた。ダイオキシンや、あ
るいはオルト位に塩素原子を持たないコプラナＰＣＢな
どを定量分析するには、目標となる成分を精製する精製
装置を必要とする。液体クロマトグラフはその際の精製
装置としても使われてきた。しかし、精製試料を定量分
析する前に行う質量分析に手間がかかり、定量分析の迅
速化、効率化を妨げるという問題点もあった。[0004] In continuous purification analysis, a combination of a plurality of polar solvents is usually used. Therefore, a washing operation is inevitable after the continuous purification / analysis device is used. However, in the conventional apparatus, there is a portion where the cleaning liquid does not reach due to the structure of the piping, and there is also a problem that the cleaning cannot be completed completely. In addition, there is no means for judging the washing effect or the equilibrium of the apparatus even after washing, and there is a problem that the analysis accuracy is unclear in that sense. Conventionally, liquid chromatography has been used to measure trace organic compounds in the environment. In order to quantitatively analyze dioxin, or coplanar PCB having no chlorine atom at the ortho position, a purification device for purifying a target component is required. Liquid chromatography has also been used as a purification device in such a case. However, there is also a problem that mass analysis performed before quantitative analysis of the purified sample is troublesome, which hinders rapid and efficient quantitative analysis.

【０００５】本発明は、上記の問題点を解決するため、
装置の機械的構造を簡素化し、それによってシステム制
御とメンテナンスを容易化し、処理性能の向上化を図る
とともに、とりわけダイオキシン類とＰＣＢ等を含んだ
試料を精製・分析できる装置及びその方法を提供するこ
とを課題とする。The present invention has been made to solve the above problems,
Provided are an apparatus and a method capable of simplifying the mechanical structure of the apparatus, thereby facilitating system control and maintenance, improving the processing performance, and purifying / analyzing a sample containing dioxins and PCBs, among others. That is the task.

【０００６】[0006]

【課題を解決するための手段】上記課題は以下の構成か
らなる本発明により解決された。 （１）少なくとも、アイソクラテイックポンプと、オー
トサンプラと、グラジェントポンプと、第１のカラム
と、第２のカラムと、紫外検出器と、フラクションコレ
クタと、これらの接続を介しかつ接続流路を適宜変化さ
せることができる３つの六方流路切替えバルブとを有
し、該六方流路切替えバルブの６つの溶媒流出入口を１
２時の位置から時計周りにそれぞれ第１位〜第６位と
し、第１のバルブの第１位流出入口がアイソクラテイッ
クポンプおよびオートサンプラ側に、第４位流出入口が
第２のカラムの一端に、第６位流出入口が第１のカラム
の一端にそれぞれ接続され、第２のバルブの第２位流出
入口が第２のカラムの他の一端に、第６位流出入口が第
１のカラムの他の一端にそれぞれ接続され、第３のバル
ブの第１位流出入口がグラジェントポンプ側に、第４位
流出入口が紫外検出器およびフラクションコレクタ側に
それぞれ接続され、第１のバルブの第３位流出入口と第
３のバルブの第６位流出入口、第１のバルブの第５位流
出入口と第２のバルブの第５位流出入口、第２のバルブ
の第１位流出入口と第３のバルブの第５位流出入口、第
２のバルブの第３位流出入口と第３のバルブの第２位流
出入口、第２のバルブの第４位流出入口と第３のバルブ
の第３位流出入口がそれぞれ接続されたことを特徴とす
る液体クロマトグラフの全自動試料連続精製・分析装
置。The above object has been attained by the present invention having the following constitution. (1) At least an isocratic pump, an autosampler, a gradient pump, a first column, a second column, an ultraviolet detector, a fraction collector, and a connection flow path through these connections And three six-way flow switching valves capable of appropriately changing the flow rate.
Clockwise from the 2 o'clock position to the first to sixth positions, the first outlet and inlet of the first valve are on the isocratic pump and autosampler side, and the fourth outlet is on the second column. At one end, the sixth outlet is connected to one end of the first column, respectively, the second outlet of the second valve is connected to the other end of the second column, and the sixth outlet is connected to the first column. The first outlet and the inlet of the third valve are connected to the gradient pump side, and the fourth outlet and the inlet of the third valve are connected to the ultraviolet detector and the fraction collector, respectively. A third outlet and a sixth outlet of the third valve, a fifth outlet of the first valve, a fifth outlet of the second valve, a first outlet of the second valve; Fifth outflow inlet of third valve, third position of second valve A fully automatic liquid chromatograph, characterized in that an inlet / outlet and a second outlet / inlet of the third valve, a fourth outlet / inlet of the second valve and a third outlet / inlet of the third valve are respectively connected. Sample continuous purification and analysis equipment.

【０００７】（２）前記２つのカラムの温度制御を行う
カラムオーブンを有することを特徴とする上記（１）記
載の全自動試料連続精製・分析装置。(2) The fully automatic sample continuous purification / analysis apparatus according to the above (1), further comprising a column oven for controlling the temperature of the two columns.

【０００８】（３）上記（１）記載の装置を用いて液体
クロマトグラフの試料を精製・分析する方法において、 １）第１〜第３の全てのバルブを、第１位流出入口と第
６位流出入口とが連通するポジションＡの状態に設定
し、オートサンプラに試料を導入し、オートサンプラか
ら第１のバルブの第１位流出入口、同第６位流出入口、
第１のカラム、第２のバルブの第６位流出入口、同第１
位流出入口、第３のバルブの第５位流出入口、同第４位
流出入口、紫外検出器の順を経て、フラクションコレク
タでフラクションＩを分取し、 ２）第２のバルブを、第１位流出入口と第２位流出入口
とが連通するポジションＢの状態に切替え、アイソクラ
テイックポンプから第１のバルブの第１位流出入口、同
第６位流出入口、第１のカラム、第２のバルブの第６位
流出入口、同第５位流出入口、第１のバルブの第５位出
入口、同第４位出入口、第２のカラム、第２のバルブの
第２位流出入口、同第１位流出入口、第３のバルブの第
５位流出入口、同第４位流出入口、紫外検出器の順を経
て、フラクションコレクタでフラクションIIを分取し、 ３）第１のバルブを前記ポジションＢの状態に切替え、
グラジェントポンプから第３のバルブの第１位流出入
口、同第６位流出入口、第１のバルブの第３位流出入
口、同第４位流出入口、第２のカラム、第２のバルブの
第２位流出入口、同第１位流出入口、第３のバルブの第
５位流出入口、同第４位流出入口、紫外検出器の順を経
て、フラクションコレクタでフラクションIII を分取
し、 ４）第１のバルブと第２のバルブを前記ポジションＡの
状態に、第３のバルブを前記ポジションＢの状態にそれ
ぞれ切替え、グラジェントポンプから第３のバルブの第
１位流出入口、同第２位流出入口、第２のバルブの第３
位流出入口、同第２位流出入口、第２のカラムのバック
フラッシュ、第１のバルブの第４位流出入口、同第５位
流出入口、第２のバルブの第５位流出入口、同第４位流
出入口、第３のバルブの第３位流出入口、同第４位流出
入口、紫外検出器の順を経て、フラクションコレクタで
フラクションIVを分取し、 ５）第１のバルブを前記ポジションＢの状態に切替え、
グラジェントポンプから第３のバルブの第１位流出入
口、同第２位流出入口、第２のバルブの第３位流出入
口、同第２位流出入口、第２のカラムのバックフラッシ
ュ、第１のバルブの第４位流出入口、同第３位流出入
口、第３のバルブの第６位流出入口、同第５位流出入
口、第２のバルブの第１位流出入口、同第６位流出入
口、第１のカラムのバックフラッシュ、第１のバルブの
第６位流出入口、同第５位流出入口、第２のバルブの第
５位流出入口、同第４位流出入口、第３のバルブの第３
位流出入口、同第４位流出入口、紫外検出器の順を経
て、フラクションコレクタでフラクションＶを分取し、
そのまま連続してシステム全体を洗浄・平衡化する段階
から成ることを特徴とする精製・分析方法。(3) A method for purifying and analyzing a liquid chromatograph sample using the apparatus according to the above (1), wherein: 1) all of the first to third valves are connected to the first outlet and the sixth outlet; The sample is introduced into the autosampler in the state of position A where the outlet and the inlet communicate with each other, and the first and second outlets and the sixth and the sixth outlet of the first valve are introduced from the autosampler.
1st column, 6th outlet and inlet of 2nd valve, 1st
The fraction I is collected by the fraction collector through the outlet of the third valve, the outlet of the fifth valve of the third valve, the outlet of the fourth valve, the UV detector, and the UV detector. 2) The second valve is connected to the first valve. The state is switched to the position B in which the second outlet and the second outlet communicate with each other, and the first outlet, the sixth outlet, the first column, the second outlet of the first valve of the first valve are switched from the isocratic pump. No. 6 outflow port, No. 5 outflow port of the valve, No. 5 port, No. 4 port of the first valve, Second column, No. 2 outflow port of the second valve, No. The fraction II is collected by the fraction collector through the first outlet, the fifth outlet of the third valve, the fourth outlet, the fourth outlet, and the ultraviolet detector in this order. 3) The first valve is positioned at the above position. Switch to the state of B,
From the gradient pump, the first outlet and the sixth outlet of the third valve, the sixth outlet and the third outlet of the first valve, the fourth outlet of the same valve, the second column and the second valve After passing through the second outflow port, the first outflow port, the fifth outflow port of the third valve, the fourth outflow port, and the ultraviolet detector, fraction III is collected by the fraction collector. The first valve and the second valve are switched to the state of the position A, and the third valve is switched to the state of the position B, respectively. Outlet, third valve of second valve
Outflow inlet, second outflow inlet, second column backflush, first valve fourth outflow inlet, fifth valve outflow inlet, fifth valve outflow inlet, second valve outflow inlet The fraction IV is collected by the fraction collector through the 4th outlet, the 3rd outlet of the 3rd valve, the 4th outlet, the 4th outlet, and the ultraviolet detector in this order. 5) The first valve is placed in the above position. Switch to the state of B,
From the gradient pump, the first outlet and the third outlet of the third valve, the second outlet and the third outlet of the second valve, the second outlet and the back flush of the second column, the first flush No. 4 outflow inlet, No. 3 outflow inlet, No. 6 outflow inlet, No. 5 outflow inlet of the third valve, No. 1 outflow inlet of the second valve, No. 6 outflow of the second valve Inlet, backflush of the first column, 6th outlet of the first valve, 5th outlet, 5th outlet of the second valve, 4th outlet of the third valve, 3rd valve The third
After passing through the outflow inlet, the 4th outflow inlet, and the ultraviolet detector, fraction V is collected by the fraction collector,
A purification and analysis method comprising a step of continuously washing and equilibrating the entire system as it is.

【０００９】（４）試料を固相抽出器カートリッジで前
処理してからオートサンプラに導入することを特徴とす
る上記（３）記載の精製・分析方法。(4) The purification / analysis method according to (3), wherein the sample is pretreated with a solid phase extractor cartridge and then introduced into an autosampler.

【００１０】本発明は上記のような構成をとったことか
ら、次のように作用する。分取口をひとつにまとめたこ
とによって、１つの紫外検出器でシステムを監視するこ
とが可能になった。Since the present invention has the above-described configuration, it operates as follows. The unification of the ports made it possible to monitor the system with a single UV detector.

【００１１】また、分取口を１つにまとめたことによ
り、１つのフラクションコレクタのみによる使用が可能
になった。ダイオキシン類及びコプラナＰＣＢを精製・
分析する場合、管理はフラクションコレクタを設けた一
箇所で行えば足り、手間を削減できるようになった。ま
た、配管を変更し、流路切替えバルブの数を減らしたの
でメンテナンスが容易になった。バルブを適宜に切り替
えれば、すべての配管に溶媒を一様に通液する一筆書き
の配管流路に容易に形成できる。洗浄液は一様に簡単に
通液させることができるから、システム内すべての箇所
の洗浄が可能になり、システム全体の平衡化も可能にな
った。In addition, the use of only one fraction collector has been made possible by integrating the fractionating openings into one. Refine dioxins and coplanar PCB
In the case of analysis, it is only necessary to perform management at one place where a fraction collector is provided, and it has become possible to reduce labor. In addition, maintenance has been facilitated by changing the piping and reducing the number of flow path switching valves. By appropriately switching the valves, it is possible to easily form a one-stroke pipe flow path through which the solvent uniformly flows through all the pipes. Since the cleaning liquid can be uniformly and easily passed, all parts in the system can be cleaned, and the entire system can be equilibrated.

【００１２】さらに、フラクションコレクタの前段に紫
外検出器を設けた。これにより、洗浄状態を知る監視活
動あるいは溶媒によるシステムの平衡化を知る監視活動
が可能になった。従来は配管内に常に洗浄不能な箇所が
残り、また洗浄状態も監視されていなかったので、シス
テム全体の平衡化が不可能であり、また平衡化を監視す
る手段もなかった。そのため、システムの信頼性が非常
に低く、サンプルを注入するタイミングも全く制御でき
なかった。従来の装置では、実際の分析を行う際には安
全マージンをとる必要があり、洗浄から平衡化まで長時
間がかかった。しかし、本発明の装置では洗浄の最適化
及び平衡化の監視が行われたため、大幅な時間短縮が可
能になった。バルブから検出器までを必要があればパソ
コン等によりオンラインで制御することも可能となり、
装置を制御しやすくなった。結果として誤操作を容易に
回避できるようになった。Further, an ultraviolet detector is provided in a stage preceding the fraction collector. As a result, a monitoring activity for knowing the cleaning state or a monitoring activity for knowing the equilibration of the system by the solvent has become possible. Conventionally, unwashable portions always remain in the pipes, and the state of washing has not been monitored, so that the entire system cannot be balanced, and there is no means for monitoring the balancing. Therefore, the reliability of the system was very low, and the timing for injecting the sample could not be controlled at all. In the conventional apparatus, it is necessary to take a safety margin when performing an actual analysis, and it takes a long time from washing to equilibration. However, in the apparatus of the present invention, the cleaning was optimized and the equilibration was monitored, so that the time was significantly reduced. If necessary, it is possible to control from the valve to the detector online using a personal computer, etc.
The device is easier to control. As a result, erroneous operation can be easily avoided.

【００１３】液体クロマトグラフで定量分析のための事
前精製操作を行う場合、定量分析に先だって精製後に通
常、分析試料の濃度調節を行わなければならない。希釈
・濃縮という濃度調節作業を行おうとしても、従来はク
ロマトグラフからは濃度情報が得られなかった。そのた
め、改めて質量分析計を使い、事前に大体の濃度を把握
する必要があった。本発明の装置では紫外検出器によっ
てダイオキシン類及びコプラナＰＣＢのおおよその濃度
を把握できる。改めて濃度把握操作をする必要はない。
結果として質量分析の作業負担を減らすことが可能にな
り、全体としての処理時間が大幅に短縮した。When performing a pre-purification operation for quantitative analysis in a liquid chromatograph, it is usually necessary to adjust the concentration of the analysis sample after purification prior to the quantitative analysis. Conventionally, concentration information could not be obtained from a chromatograph even if an attempt was made to perform a concentration adjustment operation of dilution and concentration. Therefore, it was necessary to use a mass spectrometer again to grasp the approximate concentration in advance. In the apparatus of the present invention, the approximate concentrations of dioxins and coplanar PCB can be grasped by an ultraviolet detector. There is no need to perform the concentration grasp operation again.
As a result, the work load of mass spectrometry can be reduced, and the overall processing time has been significantly reduced.

【００１４】コプラナＰＣＢあるいはダイオキシン類を
分析する場合、多環芳香族化合物（ＰＡＨ）が混合共存
していればこれらと成分分離する。流路を切り替えれ
ば、ＰＡＨが吸着したカラムを逆流方向に流れていって
一筆書きされる流路を容易に形成できるようにしたこと
で、ＰＡＨの分取と、システムの洗浄、平衡化を一つの
流路で行うことが可能になった。分取とシステムの洗浄
を別々の流路で行っていた従来法と比べ、システム制御
が容易になり、使用する溶媒量を減らすこともできるよ
うになった。全体の処理時間も短縮された。従来は配管
が最適化されていなかったため、これらの操作は別個に
行う必要があり、処理時間を長くしていた。汚れが最も
付着すると思われる１本目のカラムは、流量の多いグラ
ジェントポンプで洗浄できるようになった。従来の装置
では低流量ポンプのみで洗浄するため、複雑なマトリク
スの洗浄が困難であった。本発明では、高い洗浄効果を
得ることができる。When coplanar PCB or dioxins are analyzed, if polycyclic aromatic compounds (PAH) coexist, they are separated from them. By switching the flow path, it is possible to easily form a flow path in which the PAH is adsorbed and flow in the reverse direction through the column where the PAH is adsorbed, so that PAH separation, system cleaning, and equilibration can be achieved. It is now possible to perform in two flow paths. Compared with the conventional method, in which the separation and the washing of the system are performed in separate flow paths, the system control becomes easier, and the amount of solvent used can be reduced. Overall processing time has also been reduced. Conventionally, the pipes have not been optimized, so that these operations have to be performed separately, which increases the processing time. The first column, to which dirt was most likely to adhere, could be washed with a high flow gradient pump. In the conventional apparatus, since cleaning is performed only by a low flow rate pump, it is difficult to clean a complicated matrix. According to the present invention, a high cleaning effect can be obtained.

【００１５】液体クロマトグラフは、検査対象試料を固
体吸着媒に吸着させ、次いで脱離溶出させ、その後その
固体吸着媒を洗浄する。精度の高い精製や分析を行うに
は、吸着操作は低温で、脱離及び洗浄には高温が好まし
い。カラムオーブンを設ければ、きめ細かな温度管理が
可能になる。シリカゲルカラムによる前処理に固相抽出
カートリッジを使用することが可能になった。これによ
り、実質の処理時間を大幅に短縮することができるよう
になった。分析に伴う使用溶媒量及び固相廃棄物量を大
幅に減らすこともできるようになった。In a liquid chromatograph, a sample to be inspected is adsorbed on a solid adsorbent, then desorbed and eluted, and then the solid adsorbent is washed. For high-precision purification and analysis, the adsorption operation is preferably performed at a low temperature, and the desorption and washing is preferably performed at a high temperature. If a column oven is provided, fine temperature control becomes possible. It has become possible to use a solid phase extraction cartridge for pretreatment with a silica gel column. As a result, the substantial processing time can be greatly reduced. It has also become possible to significantly reduce the amount of solvent used and the amount of solid phase waste associated with the analysis.

【００１６】[0016]

【発明の実施の形態】以下、発明の実施の形態を図に従
って説明するが、本発明はこれに限定されない。図１は
本発明の全自動試料連続精製・分析装置の一例を示す概
要図である。この装置は、アイソクラテイックポンプ
（Isocratic pump）１と、オートサンプラ（Auto sampl
er）２と、グラジェントポンプ（Gradient pump）３
と、第１の固体吸着媒カラム４と、第２の固体吸着媒カ
ラム５と、紫外検出器６と、フラクションコレクタ（Fr
action Collector）７と、第１から第３までの３つの六
方流路切替えバルブ（以下、「バルブ」と略称すること
がある）８，９，１０とを、ステンレス製の配管で連通
してなる。第１の固体吸着媒カラム（第１のカラム）４
と第２の固体吸着媒カラム（第２のカラム）５とは、温
度制御可能なカラムオーブン１１に納めてある。第１か
ら第３までのバルブ８〜１０は、流出入口部材と連通路
切替え部材とを有し、その内、流出入口部材は平たん面
を有し正六角形を描くように６つの流出入口を開口して
いる。連通路切替え部材は、流出入口部材の平たん面と
摺動回転自在であって、６０度回動するごとに図２で示
すようにポジションＡとポジションＢとが入れ替わる。
流出入口部材上の流出入口を、隣接する右又は左側にひ
とつおきに連通する連通管を有し、ポジションＡ，Ｂの
入替えごとに流出入口相互間の連通相手を交代させる。DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Hereinafter, embodiments of the present invention will be described with reference to the drawings, but the present invention is not limited thereto. FIG. 1 is a schematic diagram showing an example of the fully automatic sample continuous purification / analysis device of the present invention. This apparatus includes an isocratic pump 1 and an auto sampler (Auto sampl).
er) 2 and Gradient pump 3
, A first solid adsorbent column 4, a second solid adsorbent column 5, an ultraviolet detector 6, and a fraction collector (Fr
Action Collector) 7 and three first to third six-way flow switching valves (hereinafter sometimes abbreviated as “valves”) 8, 9, and 10 are connected by stainless steel piping. . First solid adsorbent column (first column) 4
And the second solid adsorbent column (second column) 5 are housed in a column oven 11 whose temperature can be controlled. Each of the first to third valves 8 to 10 has an outflow / inlet member and a communication path switching member, among which the outflow / inlet member has six outflow and inlet ports so as to have a flat surface and draw a regular hexagon. It is open. The communication path switching member is slidable and rotatable with the flat surface of the outflow / inlet member, and the position A and the position B are switched as shown in FIG.
The outflow port on the outflow port member is provided with a communication pipe that communicates with every other adjacent right or left side, and a communication partner between the outflow ports is changed every time the positions A and B are switched.

【００１７】第１から第３までのバルブ８〜１０それぞ
れの流出入口部材に開口した６つの流出入口の内の１つ
を仮に時計の１２時の位置とし、そこから時計回りに第
１位の流出入口（以下、「第１位」）、第２位の流出入
口（以下、「第２位」）、以下、第６位の流出入口（以
下、「第６位」）まで命名する。全自動試料連続精製・
分析装置は次のように配管されている。It is assumed that one of the six outlets opened to the outlet member of each of the first to third valves 8 to 10 is temporarily set to the 12 o'clock position of the clock, and from there, the clockwise first position is set. The outflow inlet (hereinafter, “first place”), the second outflow inlet (hereinafter, “second place”), and the sixth outflow inlet (hereinafter, “sixth place”) are named. Fully automatic sample continuous purification
The analyzer is plumbed as follows.

【００１８】図１に示すように、アイソクラテイックポ
ンプ１が、図示外の二又路切替え手段の迂（う）回側を
介し、オートサンプラ２を経由して第１のバルブ８につ
ながっている。また、二又路切替え手段の直結側を介し
て第１のバルブ８に直結している。その第１のバルブ８
の第６位が第１のカラム４の一端側すなわち流入口につ
ながり、第１のカラム４の他の一端側すなわち吐出口が
第２のバルブ９の第６位に連通している。第２のバルブ
９の第１位は第３のバルブ１０の第５位に連通し、第３
のバルブ１０の第４位が紫外検出器６の流入口に連通
し、紫外検出器６の分取口はフラクションコレクタ７に
通じている。第２のバルブ９の第５位は、第１のバルブ
８の第５位に連通し、第１のバルブ８の第４位は第２の
カラム５の一端側すなわち流入口、次いで他の一端側す
なわち吐出口を通って第２のバルブ９の第２位に連通し
ている。グラジェントポンプ３の吐出口は第３のバルブ
１０の第１位に連通し、第３のバルブ１０の第６位は、
第１のバルブの第３位に連通している。第２のバルブの
第４位は、第３のバルブ１０の第３位に連通している。As shown in FIG. 1, an isocratic pump 1 is connected to a first valve 8 via an autosampler 2 via a bypass side of a bifurcated path switching means (not shown). I have. Further, it is directly connected to the first valve 8 via a direct connection side of the forked road switching means. Its first valve 8
Is connected to one end of the first column 4, that is, the inflow port, and the other end of the first column 4, that is, the discharge port, is connected to the sixth position of the second valve 9. The first position of the second valve 9 communicates with the fifth position of the third valve 10,
The fourth position of the valve 10 communicates with the inlet of the ultraviolet detector 6, and the fractionation port of the ultraviolet detector 6 communicates with the fraction collector 7. The fifth position of the second valve 9 communicates with the fifth position of the first valve 8, and the fourth position of the first valve 8 is connected to one end of the second column 5, that is, the inlet, and then to the other end. It communicates with the second position of the second valve 9 through the side, that is, the discharge port. The discharge port of the gradient pump 3 communicates with the first position of the third valve 10, and the sixth position of the third valve 10
It communicates with the third position of the first valve. The fourth position of the second valve communicates with the third position of the third valve 10.

【００１９】上記の全自動試料連続精製・分析装置は、
最小限の切り換えバルブを使用する。これによって、吸
着能の選択性が異なる２種の固体吸着媒カラムを、適宜
な切換え使用あるいは連続使用により、試料成分を分画
する。その際、搬送溶媒の流れ方向について順流、逆流
を選択的に組合せ、あるいは搬送溶媒の種類、濃度、混
合比率を切り替える。これにより、各種の成分が混在す
る検査対象試料を、第１の固体吸着媒、第２の固体吸着
媒それぞれに対する吸着度、溶出度、脱離性の違いで成
分ごとに分画し、成分相互間を分離する。使用する固体
吸着媒の例としては、第１のカラムでは、シリカゲル基
材にアミノプロピル基を結合させたもの、ポリマー基材
にフェニル基を導入したものなどが、第２のカラムで
は、高純度炭素を基材としたグラファイトカーボン、ジ
ルコニア基材にグラファイトカーボンをコーティングし
たものなどを挙げることができる。これらは分析目標と
なる物質の種類に応じて使い分けるとよい。例えば、シ
リカゲル基材にアミノプロピル基を結合させたものはＰ
ＡＨに選択的吸着性を有する。ＰＡＨの１例であるベン
ツピレンの化学構造を以下に示す。The above-described fully automatic sample continuous purification / analysis device comprises:
Use minimal switching valves. As a result, the sample components are fractionated by appropriately switching or continuously using two types of solid adsorbent columns having different selectivity of the adsorption ability. At this time, forward flow and reverse flow are selectively combined in the flow direction of the carrier solvent, or the type, concentration, and mixing ratio of the carrier solvent are switched. As a result, the sample to be inspected, in which various components are mixed, is fractionated for each component according to the difference in the degree of adsorption, elution, and desorption with respect to the first solid adsorbent and the second solid adsorbent. Separate between. Examples of the solid adsorbent to be used include, in the first column, those in which an aminopropyl group is bonded to a silica gel substrate, those in which a phenyl group is introduced into a polymer substrate, and those in the second column which have high purity. Examples thereof include graphite carbon based on carbon, and zirconia base coated with graphite carbon. These may be properly used depending on the type of the substance to be analyzed. For example, silica gel substrates with aminopropyl groups bonded
AH has a selective adsorption property. The chemical structure of benzpyrene, one example of PAH, is shown below.

【００２０】[0020]

【化１】 Embedded image

【００２１】＜第１のカラムの駆動(Sample loading on
the 1th Colum)＞図３は、第１のカラムを駆動する通
液路を示す。第１のカラム４に第１の固体吸着媒、第２
のカラム５に第２の固体吸着媒を充填する。次いで、図
３に示すように、第１のバルブ８はポジションＡにし、
第１位とそれに隣接する第６位とを連通する。第２のバ
ルブ９もポジションＡにし、第１位とそれに隣接する第
６位とを連通する。第３のバルブ１０もポジションＡに
し、第５位と第４位とを連通する。オートサンプラ２に
複数の成分が混在する検査対象試料を挿入し、アイソク
ラテイックポンプ１により搬送溶媒液を送液する。検査
対象試料は、固相抽出カートリッジを用いて事前に前処
理を行うことが好ましい。<Drive of the first column (Sample loading on
FIG. 3 shows a liquid passage for driving the first column. A first solid adsorbent, a second
Column 5 is filled with the second solid adsorbent. Next, as shown in FIG. 3, the first valve 8 is set to the position A,
The first place communicates with the sixth place adjacent thereto. The second valve 9 is also in the position A, and communicates the first position with the sixth position adjacent thereto. The third valve 10 is also in the position A, and communicates the fifth and fourth positions. An inspection sample containing a plurality of components is inserted into the autosampler 2, and the carrier solvent liquid is sent by the isocratic pump 1. It is preferable that the sample to be tested is pretreated in advance using a solid phase extraction cartridge.

【００２２】検査対象試料は、図３に太線で示す順路に
従い、第１のカラム４を流入側から吐出側に順流方向で
流れ、その際、第１の固体吸着媒に対して吸着性を有す
る特定成分が選択的に吸着する。吸着しない成分は速や
かに通過する。吸着する成分も、吸着エネルギーが弱い
成分については引き続き流れてくる搬送溶媒で溶出し、
遅れてカラムを通過する。すなわち、物理化学的性質の
違いが移動速度の違いに現れる。紫外検出器６で化合物
を検知し、通過してきた試料成分をフラクションコレク
タ７に回収する（フラクションＩ）。The sample to be inspected flows in the first column 4 in the forward direction from the inflow side to the discharge side according to the forward path shown by the bold line in FIG. 3, and at this time, it has adsorbability to the first solid adsorbent. Specific components are selectively adsorbed. Non-adsorbed components pass quickly. The components to be adsorbed are also eluted with the carrier solvent that flows continuously for components with low adsorption energy,
Passing through the column with a delay. That is, differences in physicochemical properties appear in differences in moving speed. The compound is detected by the ultraviolet detector 6, and the sample component that has passed is collected in the fraction collector 7 (fraction I).

【００２３】＜第２のカラムの駆動(Sample loading on
the 2th Colum)＞第１の固体吸着媒では移動速度に相
違が出現しなかった成分群は、第２のカラムに展開させ
る。図４は第２のカラムを駆動する通液路を示す。図４
に示すように、オートサンプラー２への迂（う）回路を
外し、アイソクラテイックポンプ１と第１のバルブ８と
を流路で直結する。第１のバルブ８はポジションＡに
し、第１位とそれに隣接する第６位とを連通し、第５位
と第４位とを連通する。第２のバルブ９はポジションＢ
にし、第６位とそれに隣接する第５位とを連通し、第２
位と第１位を連通する。第３のバルブ１０はポジション
Ａにして第５位と第４位とを連通する。第１のカラム４
を順流方向で通過した成分群は、太線で示す順路で第２
のバルブ９と第１のバルブ８を通過し、第２のカラム５
に至る。第２のカラム５で搬送溶媒は流入側から吐出側
に順流方向で送液される。その間、検査対象試料の中で
第２カラム５中を通過していく成分と、吸着される成分
群とに分かれる。紫外検出器６で第２のカラム５を通過
してきた化合物を検知し、フラクションコレクタ７で回
収する（フラクションII）。<Driving of the second column (Sample loading on
the 2th Colum)> The component group in which no difference appears in the moving speed in the first solid adsorbent is developed in the second column. FIG. 4 shows a liquid passage for driving the second column. FIG.
As shown in (1), the bypass circuit to the autosampler 2 is removed, and the isocratic pump 1 and the first valve 8 are directly connected by a flow path. The first valve 8 is in the position A, communicates the first position with the sixth position adjacent thereto, and communicates the fifth position with the fourth position. Second valve 9 is in position B
And communicates the sixth place with the fifth place adjacent to it,
Communicate with the first place. The third valve 10 is in position A and communicates the fifth and fourth positions. First column 4
Are passed in the forward flow direction, and the component group
Through the valve 9 and the first valve 8 and the second column 5
Leads to. In the second column 5, the transport solvent is sent in a forward flow direction from the inflow side to the discharge side. During this time, the sample is divided into components passing through the second column 5 in the sample to be inspected and a component group to be adsorbed. The compound that has passed through the second column 5 is detected by the ultraviolet detector 6 and collected by the fraction collector 7 (fraction II).

【００２４】＜試料洗浄(Sample Clean-up) ＞第２の固
体吸着媒に吸着した成分群は、搬送溶媒の成分を変更す
ることで洗浄される成分と、なお吸着しつづける成分群
とに物理化学的性質の違いで分けることができる。図５
は、試料洗浄の通液路を示す。図５に示すように、第１
のバルブ８はポジションＢにして第３位とそれに隣接す
る第４位とを連通する。第２のバルブ９もポジションＢ
にして第２位とそれに隣接する第１位とを連通する。第
３のバルブ１０はポジションＡにして第１位と第６位と
を連通し、第５位と第４位とを連通する。アイソクラテ
イックポンプ１を停止し、新たな搬送溶媒をグラジェン
トポンプ３から、第３のバルブ１０に送り込む。新たな
搬送溶媒は、第１のバルブ８を通過して第２のカラム５
に進入し、順流方向に流れながら吸着していた一部の成
分を洗い流す。洗い流される成分群を紫外検出器６で検
知し、これをフラクションコレクタ７で回収する（フラ
クションIII）。<Sample Clean-up> The components adsorbed on the second solid adsorbent are physically separated into components that are cleaned by changing the components of the carrier solvent and components that are still adsorbed. They can be classified according to their chemical properties. FIG.
Indicates a liquid passage for sample washing. As shown in FIG.
The valve 8 in position B is in position B and communicates the third position with the fourth position adjacent thereto. Second valve 9 also in position B
To communicate the second place with the first place adjacent thereto. The third valve 10 is in position A, connects the first and sixth positions, and connects the fifth and fourth positions. The isocratic pump 1 is stopped, and a new transport solvent is sent from the gradient pump 3 to the third valve 10. The new carrier solvent passes through the first valve 8 and passes through the second column 5
, And wash away some of the adsorbed components while flowing in the forward flow direction. The component group to be washed away is detected by the ultraviolet detector 6 and collected by the fraction collector 7 (fraction III).

【００２５】＜溶出(Elution)＞図６は第２の固体吸着
媒に吸着した成分を溶出する通液路を示す。図６に示す
ように、第１のバルブ８はポジションＡにして第４位と
それに隣接する第５位とを連通する。第２のバルブ９も
ポジションＡにし、第３位とそれに隣接する第２位とを
連通し、第５位と第４位とを連通する。第３のバルブ１
０はポジションＢにして第１位と第２位とを連通し、第
３位と第４位とを連通する。グラジェントポンプ３から
新たな搬送溶媒を通液すると、新たな搬送溶媒は、第３
のバルブ１０と第２のバルブ９とを通過し、第２のカラ
ム５内を吐出側から流入側に逆流方向で流れる（バック
フラッシュ）。これによって第２のカラム５の流入口付
近に集中して高濃度に吸着している成分を溶出して押し
戻し、第１のバルブ８、第２のバルブ９、第３のバルブ
１０を循環させ、目標となる成分をフラクションコレク
タ７に流し込む（フラクションIV）。<Elution> FIG. 6 shows a liquid passage for eluting the component adsorbed on the second solid adsorbent. As shown in FIG. 6, the first valve 8 is in the position A, and communicates the fourth position with the fifth position adjacent thereto. The second valve 9 is also in the position A, communicating the third position with the second position adjacent thereto, and communicating the fifth position with the fourth position. Third valve 1
0 is the position B, which communicates the first and second places, and communicates the third and fourth places. When a new carrier solvent is passed from the gradient pump 3, the new carrier solvent becomes the third carrier solvent.
And flows in the second column 5 in the reverse flow direction from the discharge side to the inflow side (backflushing). As a result, components adsorbed at a high concentration in the vicinity of the inflow port of the second column 5 are eluted and pushed back, and the first valve 8, the second valve 9, and the third valve 10 are circulated. The target component is poured into the fraction collector 7 (fraction IV).

【００２６】＜装置洗浄(System Washing)＞図７は装置
洗浄の通液路を示す。図７に示すように、第１のバルブ
８はポジションＡにして第４位とそれに隣接する第３位
とを連通し、第６位と第５位とを連通する。第２のバル
ブ９もポジションＡにし、第３位とそれに隣接する第２
位とを連通し、第１位と第６位とを連通し、第５位と第
４位とを連通する。第３のバルブ１０はポジションＢに
して第１位と第２位とを連通し、第６位と第５位とを連
通し、第３位と第４位とを連通する。グラジェントポン
プ３から搬送溶媒を引き続き通液すると、搬送溶媒は、
第３のバルブ１０と第２のバルブ９とを通過し、第２の
カラム５内を逆流方向に流れる（バックフラッシュ）。
さらに第１のバルブ８、第３のバルブ１０、第２のバル
ブ９を通過して、第１のカラム４内を吐出側から流入側
に逆流方向で流れる（バックフラッシュ）。これによっ
て第１のカラム４内に吸着している成分を洗い流す。洗
い流した成分を第１のバルブ８、第２のバルブ９、第３
のバルブ１０と循環させ、循環路内の残留成分とともに
紫外検出器６で成分を検知し、フラクションコレクタ７
に流し込む（フラクションＶ）。<System Washing> FIG. 7 shows a liquid passage for apparatus washing. As shown in FIG. 7, the first valve 8 is in position A, connects the fourth position with the third position adjacent thereto, and connects the sixth position with the fifth position. The second valve 9 is also in the position A, and the third valve and the second
And the first and sixth places, and the fifth and fourth places. The third valve 10 is in the position B, connects the first and second positions, connects the sixth and fifth positions, and connects the third and fourth positions. When the carrier solvent is continuously passed from the gradient pump 3, the carrier solvent is
It passes through the third valve 10 and the second valve 9 and flows in the second column 5 in the reverse flow direction (backflushing).
Further, the gas passes through the first valve 8, the third valve 10, and the second valve 9, and flows in the first column 4 from the discharge side to the inflow side in a reverse flow direction (backflushing). Thus, the components adsorbed in the first column 4 are washed away. The washed components are supplied to the first valve 8, the second valve 9, the third valve
And a component is detected by an ultraviolet detector 6 together with a residual component in the circulation path.
(Fraction V).

【００２７】このような方法によると、例えば、試料中
のマトリクス（共存成分）として脂肪族化合物、単環状
芳香族化合物、ＰＡＨ、ＰＣＢ類などが混在するコプラ
ナＰＣＢ、ダイオキシン類をそのマトリクス分と分離
し、精密に、連続的に精製・分析できる。第１のカラム
に充填する固体吸着媒としてはシリカゲル基材にアミノ
プロピル基を結合させたもの、第２のカラムに充填する
固体吸着媒としては高純度炭素を基材としたグラファイ
トカーボンがよい。搬送溶媒としては、ｎ−ヘキサン、
ジクロロメタン、メタノール、トルエン、ＴＨＦを組み
合わせるとよい。 ＜アミノプロピルカラム駆動(Sample loading on Amino
proyl Column)＞搬送溶媒としてｎ−ヘキサンを用い、
多成分混在試料をオートサンプラーからアミノプロピル
カラム（第１のカラム）に順流方向に送り込むと、ベン
ゼンと２−メチル−ヘプタンなどが最も速やかに通過す
る。ＰＡＨなどは特異的に吸着する。最も速やかに通過
する成分は紫外検出器で検知してフラクションコレクタ
ーなどで回収する(Aliphatic Compounds & monoaromati
c washing)。According to such a method, for example, coplanar PCB and dioxins containing aliphatic compounds, monocyclic aromatic compounds, PAHs, PCBs, etc. as a matrix (coexisting component) in a sample are separated from the matrix component. And can be purified and analyzed precisely and continuously. As the solid adsorbent to be filled in the first column, one obtained by bonding an aminopropyl group to a silica gel base material, and as the solid adsorbent to be filled in the second column, graphite carbon based on high-purity carbon is preferable. N-hexane,
It is preferable to combine dichloromethane, methanol, toluene, and THF. <Aminopropyl column drive (Sample loading on Amino
proyl Column)> Using n-hexane as the carrier solvent,
When a multi-component mixed sample is sent from an autosampler to an aminopropyl column (first column) in a forward flow direction, benzene, 2-methyl-heptane and the like pass most quickly. PAH and the like are specifically adsorbed. The components that pass most quickly are detected by an ultraviolet detector and collected by a fraction collector (Aliphatic Compounds & monoaromati
c washing).

【００２８】＜グラファイトカーボンカラム駆動(Sampl
e loading on Carbongraphite Column)＞アミノプロピ
ルカラムを遅れて通過する成分は、流路を切り替えてグ
ラファイトカーボンカラム（第２のカラム）に順流方向
に送り込む。流路を切替えの時期は、ナフタレンなどが
アミノプロピルカラムを溶出する時間をあらかじめ確認
しておいて確定する。縮合２環状芳香族化合物（ナフタ
レン）、及び、オルト位置に２つ以上の塩素が結合した
ＰＣＢ化合物（なお本明細書中で便宜上、-2-ortho-PCB
とも記す）はグラファイトカーボンカラムを通過する。
オルト位に１つの塩素が結合したＰＣＢ化合物（なお本
明細書中で便宜上、-1-ortho-PCBとも記す）、オルト位
に塩素結合のないＰＣＢ化合物（なお本明細書中で便宜
上、non-ortho-PCBとも記す）、ダイオキシン類など
は、カラム中のグラファイトカーボンに吸着する。通過
してきた成分は紫外検出器で検知してフラクションコレ
クターなどで回収する(diaromatic and -2-ortho PCBs
washing)。<Graphite carbon column drive (Sampl
e loading on Carbongraphite Column)> The components that pass through the aminopropyl column with a delay are switched in the flow path and sent to the graphite carbon column (second column) in the forward flow direction. The timing of switching the flow path is determined by confirming in advance the time for naphthalene or the like to elute the aminopropyl column. A condensed bicyclic aromatic compound (naphthalene) and a PCB compound in which two or more chlorines are bonded to the ortho position (for the sake of convenience in this specification, -2-ortho-PCB
Also passes through a graphite carbon column.
A PCB compound having one chlorine bonded to the ortho position (hereinafter also referred to as -1-ortho-PCB for convenience), a PCB compound having no chlorine bond at the ortho position (for the sake of convenience herein, non-ortho-PCB) ortho-PCB), dioxins, etc. adsorb to the graphite carbon in the column. The components that have passed are detected by an ultraviolet detector and collected by a fraction collector (diaromatic and -2-ortho PCBs
washing).

【００２９】＜試料洗浄(Sample Clean-up)＞グラジェ
ントポンプで、搬送溶媒としてジクロロメタンをｎ−ヘ
キサンに追加していき、濃度比を１：１にまで上げる。
次いで搬送溶媒としてメタノールを加えていってジクロ
ロメタンとメタノールとの濃度比を１：１にまで上げて
いく。このようにすると、グラファイトカーボンに吸着
していた化合物の内、オルト位置に１つの塩素が結合し
た（-1-ortho-）ＰＣＢ化合物が洗浄される。洗浄成分
は紫外検出器で検知してフラクションコレクタで回収す
る(-1-ortho PCBs washing)。<Sample Clean-up> Using a gradient pump, dichloromethane is added to n-hexane as a carrier solvent, and the concentration ratio is increased to 1: 1.
Next, methanol is added as a carrier solvent to increase the concentration ratio of dichloromethane to methanol to 1: 1. In this way, of the compounds adsorbed on the graphite carbon, the (-1-ortho-) PCB compound having one chlorine bonded to the ortho position is washed. The washing components are detected by an ultraviolet detector and collected by a fraction collector (-1-ortho PCBs washing).

【００３０】＜溶出(Elution)＞搬送溶媒としてトルエ
ンを使い、グラジェントポンプでグラファイトカーボン
カラム中に逆流（バックフラッシュ）させる。オルト位
置に塩素結合のないコプラナＰＣＢとダイオキシン類な
どが溶出し、押し戻される。押し戻された成分は紫外検
出器などで検知してフラクションコレクタで回収する(D
ioxins／non-ortho PCBs washing)<Elution> Toluene is back-flushed into a graphite carbon column by a gradient pump using toluene as a carrier solvent. Coplanar PCB having no chlorine bond at the ortho position and dioxins are eluted and pushed back. The pushed back component is detected by an ultraviolet detector etc. and collected by the fraction collector (D
ioxins / non-ortho PCBs washing)

【００３１】＜装置洗浄(System Washing)＞アミノプロ
ピルカラムに吸着しているＰＡＨなどは、高圧のグラジ
ェントポンプを使用し、トルエンを搬送溶媒としてアミ
ノプロピルカラム中を逆流（バックフラッシュ）させる
と溶出される。溶出された成分は紫外検出器などで検知
して回収する(PAHs washing)。<System Washing> PAH and the like adsorbed on the aminopropyl column are eluted by backflow in the aminopropyl column using toluene as a carrier solvent with a high-pressure gradient pump. Is done. The eluted components are detected and collected by an ultraviolet detector or the like (PAHs washing).

【００３２】[0032]

【実施例】以下実施例を説明するが、本発明はこれに限
定されない。 〔実施例１〕図１に示す全自動試料連続精製・分析装置
を組み立て、脂肪族化合物と単環状芳香族化合物とＰＣ
Ｂ類とダイオキシン類などが混在する試料を次のように
精製・分析した。バルブから検出器まではパソコン上で
制御できるようにした。ＰＣＢ類とダイオキシン類は標
準品と飛灰抽出物とを使用し、標準品について実験を行
い、更に飛灰抽出物ついて実験を行った。EXAMPLES Examples will be described below, but the present invention is not limited to these examples. Example 1 A fully automatic sample continuous purification / analysis apparatus shown in FIG. 1 was assembled, and an aliphatic compound, a monocyclic aromatic compound, and a PC were assembled.
A sample containing B and dioxins was purified and analyzed as follows. The control from the valve to the detector can be controlled on a personal computer. For the PCBs and dioxins, a standard product and a fly ash extract were used, and an experiment was performed on the standard product, and further an experiment was performed on the fly ash extract.

【００３３】＜試料事前処理＞単環状芳香族化合物とＰ
ＣＢ類とダイオキシン類などが混在する試料をシリカゲ
ルで前処理した。具体的には、市販のミニカラムに通水
して、吸着剤表面を親水性にし、次いでメタノール、ア
セトン、ｎ−ヘキサンを順に流して余分な水を除去する
ことでコンディショニングを行った。<Sample pretreatment> Monocyclic aromatic compound and P
A sample in which CBs and dioxins were mixed was pretreated with silica gel. Specifically, conditioning was performed by passing water through a commercially available minicolumn to make the surface of the adsorbent hydrophilic, and then flowing methanol, acetone and n-hexane in that order to remove excess water.

【００３４】＜装置調整＞ 《固体吸着媒装着》第１のカラム４にシリカゲル基材に
アミノプロピル基を結合させたものを充填し、充填した
カラムをアミノプロピルカラムとし、第２のカラムにグ
ラファイトカーボンを充填してそのカラムをグラファイ
トカーボンカラムとした。アイソクラテイックポンプ貯
液槽にはｎ−ヘキサンを充填した。 《平衡化》アイソクラテイックポンプからｎ−ヘキサン
３０ｍｌを流し、システムを平衡化した。平衡化完了時
のタイミングは紫外検出器のシグナルで判断した。<Apparatus Adjustment><< Equipment with Solid Adsorbent >> A first column 4 is filled with a silica gel substrate having an aminopropyl group bonded thereto, the filled column is used as an aminopropyl column, and a second column is made of graphite. The column was filled with carbon to form a graphite carbon column. The isocratic pump storage tank was filled with n-hexane. << Equilibration >> 30 ml of n-hexane was supplied from an isocratic pump to equilibrate the system. The timing at the time of completion of equilibration was determined by the signal of the ultraviolet detector.

【００３５】＜分画処理＞ 《アミノプロピルカラム駆動》前処理を終えた検査対象
試料をオートサンプラーに収納した。アイソクラテイッ
クポンプ１を駆動し、検査対象試料をアミノプロピルカ
ラム４中、順流方向に通過させ、紫外検出器のシグナル
を監視しつつ、第２のカラム５を通過させることなくベ
ンゼンと２−メチル−ヘプタンとをフラクションコレク
タに回収し、分画した（フラクションＩ）。 《グラファイトカーボンカラム駆動》アミノプロピルカ
ラム４の吐出口をベンゼンが通過し始める時期を見計ら
い、直前に試料の流路を切り替え、検査対象試料をグラ
ファイトカーボンカラム５中、順流方向に通過させた。
紫外検出器のシグナルを監視し、オルト位置に２つ以上
の塩素が結合する（-2-ortho）ＰＣＢと、縮合２環状芳
香族化合物とが通過しているのを確認、これをフラクシ
ョンコレクタ７に回収し、分画した（フラクションI
I）。 《試料洗浄(Sample Clean-up)》オルト位置に２つ以上
の塩素が結合する（-2-ortho-）ＰＣＢと、縮合２環状
芳香族化合物との分画が終結した時点でアイソクラテイ
ックポンプ１を停止し、グラジェントポンプ３を操作し
た。搬送溶媒の組成がｎ−ヘキサンとジクロロメタンと
の比で１：１になるよう移行し、その後ジクロロメタン
とメタノールが混合比で１：１になるようにし、グラフ
ァイトカーボンカラム５中を順流方向に通過させた。オ
ルト位置に１個の塩素が結合している（-1-ortho-）Ｐ
ＣＢ化合物を紫外検出器６で検知し、フラクションコレ
クタ７に回収して分画した（フラクションIII）。 《溶出(Elution)》ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）を混
ぜたトルエンをグラジェントポンプ３から第３のバルブ
１０に搬送溶媒として通液し、グラファイトカーボンカ
ラム５の逆流方向に流路を切り替え、アミノプロピルカ
ラム４を通過させることなくオルト位に塩素の結合して
いない（non-ortho-）コプラナＰＣＢ化合物とダイオキ
シン類とを分画した。紫外検出器６で検知し、フラクシ
ョンコレクタ７に分画した（フラクションIV）。 《ＰＡＨ類洗浄(PAHs Washing)》グラファイトカーボン
カラム５の逆流方向下流にアミノプロピルカラム４を逆
流方向に流れる流路を設定し、ＴＨＦを混ぜたトルエン
をグラジェントポンプ３から搬送溶媒として通液した。
紫外検出器を流れるＰＡＨを検知し、これをフラクショ
ンコレクタに回収し、これを分画した（フラクション
Ｖ）。 《装置洗浄》ＰＡＨ類洗浄を行った経路を使用し、グラ
ジェントポンプ３で無極性・中極性・極性溶媒を順次流
して流路を洗浄した。無極性洗浄液としては、脂肪族化
合物具体的にはｎ−ヘキサン、次いで芳香族化合物具体
的にはトルエンを使用した。中極性洗浄液としてはジク
ロロメタン、極性溶媒としてはメタノールを使用した。
洗浄効果は紫外検出器６で監視した。洗浄後、再びｎ−
ヘキサンを通液させてシステムを平衡化した。<Fractionation><< Aminopropyl Column Driving >> The sample to be inspected after the pretreatment was stored in an autosampler. By driving the isocratic pump 1, the sample to be inspected is passed in the forward direction through the aminopropyl column 4, and while monitoring the signal of the ultraviolet detector, benzene and 2-methyl are passed without passing through the second column 5. -Heptane was collected in a fraction collector and fractionated (Fraction I). << Driving of Graphite Carbon Column >> At the timing when benzene starts to pass through the discharge port of the aminopropyl column 4, the flow path of the sample was switched immediately before, and the sample to be inspected was passed through the graphite carbon column 5 in the forward flow direction.
By monitoring the signal of the ultraviolet detector, it was confirmed that PCB (2-ortho) to which two or more chlorines are bound at the ortho position and the condensed bicyclic aromatic compound were passed, and this was collected by the fraction collector 7. And fractionated (fraction I
I). << Sample Clean-up >> Isocratic pump when fractionation of condensed bicyclic aromatic compound with PCB (-2-ortho-) in which two or more chlorines bind to ortho position is completed 1 was stopped, and the gradient pump 3 was operated. The composition of the carrier solvent was shifted so that the ratio of n-hexane and dichloromethane became 1: 1. Thereafter, the mixture ratio of dichloromethane and methanol was adjusted to 1: 1 and passed through the graphite carbon column 5 in the forward flow direction. Was. (-1-ortho-) P with one chlorine bonded to the ortho position
The CB compound was detected by the ultraviolet detector 6, collected in the fraction collector 7, and fractionated (fraction III). << Elution >> Toluene mixed with THF (tetrahydrofuran) is passed from the gradient pump 3 to the third valve 10 as a carrier solvent, and the flow path is switched in the reverse flow direction of the graphite carbon column 5 to change the aminopropyl column 4. The dioxins were fractionated with a non-ortho-coplanar PCB compound having no chlorine bonded to the ortho position without passing through. It was detected by an ultraviolet detector 6 and fractionated into a fraction collector 7 (fraction IV). << PAHs Washing >> A flow path was set downstream of the graphite carbon column 5 in the reverse flow direction through the aminopropyl column 4 in the reverse flow direction, and toluene mixed with THF was passed from the gradient pump 3 as a carrier solvent. .
PAH flowing through the ultraviolet detector was detected, collected in a fraction collector, and fractionated (fraction V). << Device Cleaning >> A non-polar / medium-polar / polar solvent was sequentially flown by the gradient pump 3 using the path subjected to PAHs cleaning to wash the flow path. As the nonpolar washing liquid, an aliphatic compound, specifically, n-hexane, and then an aromatic compound, specifically, toluene were used. Dichloromethane was used as the medium-polarity washing solution, and methanol was used as the polar solvent.
The cleaning effect was monitored by the UV detector 6. After washing, n-
The system was equilibrated by passing hexane through.

【００３６】結果は以下の通りである。 ダイオキシン類（標準品）の回収率：使用量＝５０pg、
回収率＝５０〜１００％ ダイオキシン類（飛灰抽出物）の回収率：使用量＝１０
〜１０００pg、回収率＝６０〜１００％ コプラナＰＣＢ（標準品）の回収率：使用量＝１００p
g、回収率＝７０〜９０％コプラナＰＣＢ（飛灰抽出
物）の回収率： 使用量＝１０００pg、回収率＝７０〜９０％試料事前処
理では固相抽出カラムを使用したことで、前処理段階で
必要なｎ−ヘキサンの使用量は３０ml以上を要しなかっ
た。従来は約１５０mlも必要だったことに比べ、大幅に
減少することが分かった。従来法ではシリカゲルを２４
時間加熱して活性化する活性化処理が必要であったが、
これが不要になることが分かった。搬送溶媒をトルエン
とし、これにＴＨＦを加えると紫外検出器のピーク形状
はシャープになる反面、不純物の溶出も増加すが、精
製、分析の目的に応じて調整するとよいことが分かっ
た。The results are as follows. Dioxin (standard) recovery rate: usage = 50 pg,
Recovery rate = 50 to 100% Recovery rate of dioxins (fly ash extract): used amount = 10
-1000 pg, recovery rate = 60-100% Recovery rate of coplanar PCB (standard product): usage = 100 p
g, recovery rate = 70-90% recovery rate of coplanar PCB (fly ash extract): usage = 1000 pg, recovery rate = 70-90% In sample pretreatment, a solid phase extraction column was used, and the pretreatment stage was reduced. Did not require more than 30 ml of n-hexane. It was found that the amount was significantly reduced as compared with the case where about 150 ml was conventionally required. In the conventional method, 24
Activation treatment to activate by heating for a time was necessary,
This turned out to be unnecessary. When THF was added to the carrier solvent and THF was added thereto, the peak shape of the ultraviolet detector became sharper, but the elution of impurities also increased. However, it was found that the peak should be adjusted according to the purpose of purification and analysis.

【００３７】上記の装置は質量分析計の前処理装置とし
ても利用可能であることが分かった。質量分析計の前処
理装置として利用する場合は、紫外検出器の後段に２方
向の流路切替えバルブ例えばソレノイドバルブを装着す
る。システムに流れる溶媒量が多い時間は、フラクショ
ンコレクタに流す。ダイオキシン類を分析するときは質
量分析計が処理可能な流量まで搬送溶媒の量を落とし、
分画したダイオキシン類とコプラナＰＣＢを、バルブを
切り替えて質量分析計に導入すればよい。シリカゲルカ
ラムによる前処理に固相抽出カートリッジを使用するこ
とにより、実質の処理時間を大幅に短縮することができ
た。また、分析にともなう使用溶媒量及び固相廃棄物量
を大幅に減らすことができた。バルブから検出器までを
共通のパソコンで制御したことで誤操作を回避できるこ
とが分かった。システムの動作状況はパソコン上で確認
できるので、システム管理が容易になった。従来は個別
に確認する必要があり、またバルブの数も５個と多かっ
たので、システム管理が難しかった。It has been found that the above device can be used as a pretreatment device for a mass spectrometer. When used as a pretreatment device for a mass spectrometer, a two-way flow switching valve, for example, a solenoid valve, is mounted downstream of the ultraviolet detector. During times when the amount of solvent flowing through the system is high, flow to the fraction collector. When analyzing dioxins, reduce the amount of carrier solvent to a flow rate that the mass spectrometer can process,
The fractionated dioxins and coplanar PCB may be introduced into the mass spectrometer by switching valves. By using a solid phase extraction cartridge for pretreatment with a silica gel column, the substantial processing time could be significantly reduced. In addition, the amount of solvent used and the amount of solid phase waste associated with the analysis were significantly reduced. It was found that erroneous operation could be avoided by controlling the valve to the detector with a common personal computer. The operating status of the system can be checked on a personal computer, making system management easier. In the past, it was necessary to check individually and the number of valves was as large as five, so that system management was difficult.

【００３８】操作時間は１時間に短縮された。従来は洗
浄及び平衡化が全く監視できなかったため、安全マージ
ンをとって操作し、操作に約４時間かかっていた。本装
置では洗浄及び平衡化の最適化が図られ、短時間で終わ
ることが分かった。従来は濃度情報が全く得られなかっ
たため、定量分析のための精製後の希釈・濃縮による温
度調節を行うために、質量分析計で事前に大体の濃度を
把握する必要があった。本発明の装置では検出器によっ
てダイオキシン類及びコプラナＰＣＢのおおよその濃度
が把握できるので、その必要がなくなった。結果として
質量分析の回数を減らすことが可能になり、全体として
の処理時間が向上した。The operating time has been reduced to one hour. Conventionally, since washing and equilibration could not be monitored at all, the operation was performed with a safety margin, and the operation took about 4 hours. In this apparatus, optimization of washing and equilibration was achieved, and it was found that it was completed in a short time. Conventionally, no concentration information was obtained, so that it was necessary to grasp the approximate concentration in advance with a mass spectrometer in order to perform temperature control by dilution and concentration after purification for quantitative analysis. In the apparatus of the present invention, since the approximate concentration of dioxins and coplanar PCB can be ascertained by the detector, the necessity is eliminated. As a result, the number of times of mass spectrometry can be reduced, and the processing time as a whole is improved.

【００３９】〔比較例〕アイソクラテイックポンプ２
１、マニュアルインジェクタ２２、グラジェントポンプ
２３、アミノプロピルカラム（２５０mm×１０mm）２
４、グラファイトカーボンカラム（１００mm×４．７m
m）２５、多方流路切替えバルブ２６〜３０、カラムオ
ーブン３１などを組み合わせ、図８に示す従来の全自動
連続精製・分析装置を設けた。これにより、上記の実施
例に準じて脂肪族化合物と単独環状芳香族化合物とＰＣ
Ｂ類とダイオキシン類などが混在する試料を精製・分析
した。Comparative Example Isocratic Pump 2
1. Manual injector 22, Gradient pump 23, Aminopropyl column (250mm × 10mm) 2
4. Graphite carbon column (100mm × 4.7m
m) 25, a multi-way flow switching valve 26 to 30, a column oven 31 and the like were combined to provide a conventional fully automatic continuous purification / analysis apparatus shown in FIG. As a result, the aliphatic compound, the single cyclic aromatic compound and the PC
A sample containing B and dioxins was purified and analyzed.

【００４０】《脂肪属炭化水素／単独環状芳香族化合物
の分取》図１１は第１の分取口３２から所定成分を分取
する通液路を示す図である。搬送溶媒にはｎ−ヘキサン
３０mlを使用した。アイソクラテイックポンプ２１の加
圧力により、図１１の太線で示す流路に従いアミノプロ
ピルカラム２４中を順流方向に試料を通液させ、２−メ
チル−ヘプタンとベンゼンとを第１の分取口３２から分
取した。 《縮合２環状芳香族化合物と-2-ortho-ＰＣＢ化合物の
分取》図１２は、第２の分取口３３から所定成分を分取
する通液路を示す図である。搬送溶媒にはｎ−ヘキサン
を１０ml追加した。図１２に示す流路でアミノプロピル
カラム２４中とグラファイトカーボンカラム２５中を、
順流方向に、試料を続けて通液させた。オルト位に２つ
以上の塩素を有する（-2-ortho-）ＰＣＢを第２の分取
口３３から分取した。<< Separation of Aliphatic Hydrocarbon / Single Cyclic Aromatic Compound >> FIG. 11 is a view showing a liquid passage for separating a predetermined component from the first fractionation port 32. 30 ml of n-hexane was used as a carrier solvent. The sample is allowed to flow in the aminopropyl column 24 in the forward flow direction according to the flow path shown by the bold line in FIG. 11 by the pressure of the isocratic pump 21, and 2-methyl-heptane and benzene are separated into the first fractionation port 32. Was taken from. << Separation of condensed bicyclic aromatic compound and -2-ortho-PCB compound >> FIG. 12 is a view showing a liquid passage for separating a predetermined component from the second separation port 33. 10 ml of n-hexane was added to the carrier solvent. In the flow path shown in FIG. 12, the inside of the aminopropyl column 24 and the inside of the graphite carbon column 25 are
The sample was continuously passed in the forward flow direction. A (-2-ortho-) PCB having two or more chlorine atoms in the ortho position was fractionated from the second fractionation port 33.

【００４１】《ＰＡＨ化合物の分取》図１３は、第３の
分取口３４から所定成分を分取する通液路を示す図であ
る。ｎ−ヘキサンを更に１０ml追加し、アミノプロピル
カラム２４を逆流（バックフラッシュ）させる図１３に
示す流路を使用し、ＰＡＨを第３の分取口３４から分取
した。 《-1-ortho-ＰＣＢの分取／グラファイトカーボンカラ
ムの洗浄》図１４は、第４の分取口３５から所定成分を
分取する通液路を示す図である。ポンプをグラジェント
ポンプ２３に切り替え、流路を図１４に太線で示す経路
とした。ｎ−ヘキサンとの濃度比が１：１になるまで徐
々にジクロロメタンの濃度を増加していって混合溶媒を
１５ml注入し、グラファイトカーボンカラム２５中を順
流方向に流した。グラファイトカーボンに吸着していた
成分すなわちオルト位に塩素を有するＰＣＢを溶出し、
これを第４の分取口３５から分取した。次いで、グラジ
ェントポンプで比率が１：１のジクロロメタン−メタノ
ール混合液２０mlを送り込み、装置内を洗浄した。<< Sampling of PAH Compound >> FIG. 13 is a view showing a liquid passage for sampling a predetermined component from the third sorting port 34. Further, 10 ml of n-hexane was added, and PAH was fractionated from the third fractionation port 34 using the flow path shown in FIG. 13 in which the aminopropyl column 24 was back-flushed. << Preparation of -1-ortho-PCB / Washing of Graphite Carbon Column >> FIG. 14 is a view showing a liquid passage for collecting a predetermined component from the fourth sorting port 35. The pump was switched to the gradient pump 23, and the flow path was a path shown by a thick line in FIG. The concentration of dichloromethane was gradually increased until the concentration ratio with n-hexane became 1: 1, 15 ml of the mixed solvent was injected, and the mixture was allowed to flow in the graphite carbon column 25 in the forward flow direction. The component adsorbed on the graphite carbon, that is, the PCB having chlorine at the ortho position is eluted,
This was fractionated from the fourth fractionation port 35. Next, 20 ml of a dichloromethane-methanol mixed solution having a ratio of 1: 1 was fed by a gradient pump to wash the inside of the apparatus.

【００４２】《ダイオキシン／コプラナＰＣＢ化合物の
分取》図１５は、第５の分取口３６から所定成分を分取
する通液路を示す図である。流路を図１５に太線で示す
経路とし、グラファイトカーボンカラム２５中、搬送溶
媒を逆流（バックフラッシュ）させ、グラファイトカー
ボンに吸着していたダイオキシンとコプラナＰＣＢ化合
物を第５の分取口３６から分取した。図１６は、洗浄範
囲を示す図である。その結果、図中、太線で示す範囲は
洗浄され、破線で示す経路は洗浄が限定され、細線円形
で示す範囲は全く洗浄されないことが分かった。図１７
に実施例で分画した成分、比較例で分取した成分を示
す。<< Distillation of Dioxin / Coplanar PCB Compound >> FIG. 15 is a view showing a liquid passage for dispensing a predetermined component from the fifth fractionation port 36. The flow path is a path shown by a thick line in FIG. 15, and the carrier solvent is caused to flow backward (backflush) in the graphite carbon column 25 to separate dioxin and the coplanar PCB compound adsorbed on the graphite carbon from the fifth sorting port 36. I took it. FIG. 16 is a diagram illustrating a cleaning range. As a result, it was found that in the figure, the area shown by the thick line was washed, the path shown by the broken line was limited to washing, and the area shown by the thin circle was not washed at all. FIG.
Shows the components fractionated in the examples and the components fractioned in the comparative examples.

【００４３】[0043]

【発明の効果】本発明は、上記のような構成を採ったこ
とから、装置の機械的構造を簡素化し、それによってシ
ステム制御とメンテナンスを容易化し、処理性能の向上
化を図れるとともに、とりわけダイオキシン類とＰＣＢ
等を精製・分析することができる。According to the present invention, since the above-mentioned structure is adopted, the mechanical structure of the apparatus can be simplified, thereby facilitating system control and maintenance, improving the processing performance, and especially improving dioxin. Kinds and PCB
Etc. can be purified and analyzed.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図１】本発明の全自動試料連続精製・分析装置の一例
を示す概要図。FIG. 1 is a schematic diagram showing an example of a fully automatic sample continuous purification / analysis device of the present invention.

【図２】六方流路切替えバルブの切替えポジションを示
す図。FIG. 2 is a diagram showing a switching position of a six-way flow switching valve.

【図３】第１のカラムを駆動する通液路を示す図。FIG. 3 is a view showing a liquid passage for driving a first column.

【図４】第２のカラムを駆動する通液路を示す図。FIG. 4 is a view showing a liquid passage for driving a second column.

【図５】試料洗浄の通液路を示す図。FIG. 5 is a diagram showing a liquid passage for sample washing.

【図６】第２のカラムの溶出通液路を示す図。FIG. 6 is a diagram showing an elution passage of a second column.

【図７】洗浄通液路を示す図。FIG. 7 is a diagram showing a washing liquid passage.

【図８】従来の装置の一例を示す概要図。FIG. 8 is a schematic diagram showing an example of a conventional device.

【図９】従来の装置の流路切り替えバルブポジションを
示す図。FIG. 9 is a diagram showing a flow path switching valve position of a conventional device.

【図１０】従来の装置の連通路の位置名称を示す図。FIG. 10 is a diagram showing position names of communication paths of a conventional device.

【図１１】第１の分取口から所定成分を分取する通液路
を示す図。FIG. 11 is a view showing a liquid passage for collecting a predetermined component from a first sorting port.

【図１２】第２の分取口から所定成分を分取する通液路
を示す図。FIG. 12 is a view showing a liquid passage for collecting a predetermined component from a second sampling port.

【図１３】第３の分取口から所定成分を分取する通液路
を示す図。FIG. 13 is a diagram showing a liquid passage for dispensing a predetermined component from a third dispensing port.

【図１４】第４の分取口から所定成分を分取する通液路
を示す図。FIG. 14 is a view showing a liquid passage for collecting a predetermined component from a fourth sorting port.

【図１５】第５の分取口から所定成分を分取する通液路
を示す図。FIG. 15 is a diagram showing a liquid passage for dispensing a predetermined component from a fifth dispensing port.

【図１６】従来の装置で洗浄範囲を示す図。FIG. 16 is a diagram showing a cleaning range in a conventional apparatus.

【図１７】実施例で分画した成分、比較例で分取した成
分を示す図。FIG. 17 is a diagram showing components fractionated in Examples and components fractioned in Comparative Examples.

【符号の説明】[Explanation of symbols]

１ アイソクラテイックポンプ ２ オートサンプラ ３ グラジェントポンプ ４ 第１のカラム ５ 第２のカラム ６ 紫外検出器 ７ フラクションコレクタ ８，９，１０ 六方流路切替えバルブ １１ カラムオーブン ２１ アイソクラテイックポンプ ２２ マニュアルインジェクタ ２３ グラジェントポンプ ２４ アミノプロピルカラム ２５ グラファイトカーボンカラム ２６，２７，２８，２９，３０ 多方流路切替えバルブ ３１ カラムオーブン ３２，３３，３４，３５，３６ 分取口 REFERENCE SIGNS LIST 1 isocratic pump 2 autosampler 3 gradient pump 4 first column 5 second column 6 ultraviolet detector 7 fraction collector 8, 9, 10 hexagonal flow switching valve 11 column oven 21 isocratic pump 22 manual injector 23 Gradient pump 24 Aminopropyl column 25 Graphite carbon column 26, 27, 28, 29, 30 Multiway flow switching valve 31 Column oven 32, 33, 34, 35, 36 Dispensing port

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｇ０１Ｎ 30/88 Ｇ０１Ｎ 30/88 Ｃ Continued on the front page (51) Int.Cl. ⁷ Identification symbol FI Theme coat II (reference) G01N 30/88 G01N 30/88 C

Claims (4)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 少なくとも、アイソクラテイックポンプ
と、オートサンプラと、グラジェントポンプと、第１の
カラムと、第２のカラムと、紫外検出器と、フラクショ
ンコレクタと、これらの接続を介しかつ接続流路を適宜
変化させることができる３つの六方流路切替えバルブと
を有し、 該六方流路切替えバルブの６つの溶媒流出入口を１２時
の位置から時計周りにそれぞれ第１位〜第６位とし、 第１のバルブの第１位流出入口がアイソクラテイックポ
ンプおよびオートサンプラ側に、第４位流出入口が第２
のカラムの一端に、第６位流出入口が第１のカラムの一
端にそれぞれ接続され、 第２のバルブの第２位流出入口が第２のカラムの他の一
端に、第６位流出入口が第１のカラムの他の一端にそれ
ぞれ接続され、 第３のバルブの第１位流出入口がグラジェントポンプ側
に、第４位流出入口が紫外検出器およびフラクションコ
レクタ側にそれぞれ接続され、 第１のバルブの第３位流出入口と第３のバルブの第６位
流出入口、 第１のバルブの第５位流出入口と第２のバルブの第５位
流出入口、 第２のバルブの第１位流出入口と第３のバルブの第５位
流出入口、 第２のバルブの第３位流出入口と第３のバルブの第２位
流出入口、 第２のバルブの第４位流出入口と第３のバルブの第３位
流出入口がそれぞれ接続されたことを特徴とする液体ク
ロマトグラフの全自動試料連続精製・分析装置。At least an isocratic pump, an autosampler, a gradient pump, a first column, a second column, an ultraviolet detector, a fraction collector, and connections through these connections. And three six-way flow switching valves capable of appropriately changing the flow path. The six solvent outflow / inlet ports of the six-way flow switching valve are first to sixth positions clockwise from the 12 o'clock position, respectively. The first outflow port of the first valve is on the isocratic pump and autosampler side, and the fourth outflow port is the second
At one end of the column, the sixth outlet is connected to one end of the first column, respectively. The second outlet of the second valve is connected to the other end of the second column, and the sixth outlet is connected to the other end of the second column. A first outlet of the third valve is connected to the gradient pump side, and a fourth outlet of the third valve is connected to the ultraviolet detector and the fraction collector, respectively. The third inflow / outlet of the third valve and the sixth inflow / outlet of the third valve, the fifth inflow / outlet of the first valve and the fifth inflow / outlet of the second valve, the first position of the second valve The outlet and the fifth outlet of the third valve, the third outlet of the second valve and the second outlet of the third valve, the fourth outlet of the second valve and the third outlet; Liquid chromatog, characterized in that the third outlet and inlet of the valve are connected respectively. Fully automatic sample continuous purification and analysis system for roughs. 【請求項２】 前記２つのカラムの温度制御を行うカラ
ムオーブンを有することを特徴とする請求項１記載の全
自動試料連続精製・分析装置。2. The continuous automatic sample purification / analysis apparatus according to claim 1, further comprising a column oven for controlling the temperature of the two columns. 【請求項３】 請求項１記載の装置を用いて液体クロマ
トグラフの試料を精製・分析する方法において、 １）第１〜第３の全てのバルブを、第１位流出入口と第
６位流出入口とが連通するポジションＡの状態に設定
し、 オートサンプラに試料を導入し、オートサンプラから第
１のバルブの第１位流出入口、同第６位流出入口、第１
のカラム、第２のバルブの第６位流出入口、同第１位流
出入口、第３のバルブの第５位流出入口、同第４位流出
入口、紫外検出器の順を経て、フラクションコレクタで
フラクションＩを分取し、 ２）第２のバルブを、第１
位流出入口と第２位流出入口とが連通するポジションＢ
の状態に切替え、アイソクラテイックポンプから第１の
バルブの第１位流出入口、同第６位流出入口、第１のカ
ラム、第２のバルブの第６位流出入口、同第５位流出入
口、第１のバルブの第５位出入口、同第４位出入口、第
２のカラム、第２のバルブの第２位流出入口、同第１位
流出入口、第３のバルブの第５位流出入口、同第４位流
出入口、紫外検出器の順を経て、フラクションコレクタ
でフラクションIIを分取し、 ３）第１のバルブを前記ポジションＢの状態に切替え、
グラジェントポンプから第３のバルブの第１位流出入
口、同第６位流出入口、第１のバルブの第３位流出入
口、同第４位流出入口、第２のカラム、第２のバルブの
第２位流出入口、同第１位流出入口、第３のバルブの第
５位流出入口、同第４位流出入口、紫外検出器の順を経
て、フラクションコレクタでフラクションIII を分取
し、 ４）第１のバルブと第２のバルブを前記ポジションＡの
状態に、第３のバルブを前記ポジションＢの状態にそれ
ぞれ切替え、グラジェントポンプから第３のバルブの第
１位流出入口、同第２位流出入口、第２のバルブの第３
位流出入口、同第２位流出入口、第２のカラムのバック
フラッシュ、第１のバルブの第４位流出入口、同第５位
流出入口、第２のバルブの第５位流出入口、同第４位流
出入口、第３のバルブの第３位流出入口、同第４位流出
入口、紫外検出器の順を経て、フラクションコレクタで
フラクションIVを分取し、 ５）第１のバルブを前記ポジションＢの状態に切替え、
グラジェントポンプから第３のバルブの第１位流出入
口、同第２位流出入口、第２のバルブの第３位流出入
口、同第２位流出入口、第２のカラムのバックフラッシ
ュ、第１のバルブの第４位流出入口、同第３位流出入
口、第３のバルブの第６位流出入口、同第５位流出入
口、第２のバルブの第１位流出入口、同第６位流出入
口、第１のカラムのバックフラッシュ、第１のバルブの
第６位流出入口、同第５位流出入口、第２のバルブの第
５位流出入口、同第４位流出入口、第３のバルブの第３
位流出入口、同第４位流出入口、紫外検出器の順を経
て、フラクションコレクタでフラクションＶを分取し、
そのまま連続してシステム全体を洗浄・平衡化する段階
から成ることを特徴とする精製・分析方法。3. A method for purifying and analyzing a liquid chromatograph sample using the apparatus according to claim 1, wherein: 1) all the first to third valves are connected to a first outlet and a sixth outlet; The sample is introduced into the autosampler by setting the state of the position A in communication with the inlet, and the first outlet, the sixth outlet, and the first outlet of the first valve of the first valve are introduced from the autosampler.
Through the column, the sixth inlet / outlet of the second valve, the first outlet / inlet, the fifth outlet / inlet of the third valve, the fourth outlet / inlet, and the ultraviolet detector in that order, and then the fraction collector. Fraction I was collected and 2) the second valve
B where the second outlet and the second outlet communicate with each other
, And from the isocratic pump to the first outflow / inlet of the first valve, the sixth outflow / inlet of the first valve, the first column, the sixth outflow / inlet of the second valve, and the fifth outflow / inlet of the second valve The fifth position of the first valve, the fourth position of the fourth valve, the second column, the second position of the second valve, the first position of the second valve, the fifth position of the third valve. The fraction II is collected by the fraction collector after passing through the fourth outlet and the ultraviolet detector in the same order, and 3) the first valve is switched to the position B,
From the gradient pump, the first outlet and the sixth outlet of the third valve, the sixth outlet and the third outlet of the first valve, the fourth outlet of the same valve, the second column and the second valve After passing through the second outflow port, the first outflow port, the fifth outflow port of the third valve, the fourth outflow port, and the ultraviolet detector, fraction III is collected by the fraction collector. The first valve and the second valve are switched to the state of the position A, and the third valve is switched to the state of the position B, respectively. Outlet, third valve of second valve
Outflow inlet, second outflow inlet, second column backflush, first valve fourth outflow inlet, fifth valve outflow inlet, fifth valve outflow inlet, second valve outflow inlet The fraction IV is collected by the fraction collector through the 4th outlet, the 3rd outlet of the 3rd valve, the 4th outlet, the 4th outlet, and the ultraviolet detector in this order. 5) The first valve is placed in the above position. Switch to the state of B,
From the gradient pump, the first outlet and the third outlet of the third valve, the second outlet and the third outlet of the second valve, the second outlet and the back flush of the second column, the first flush No. 4 outflow inlet, No. 3 outflow inlet, No. 6 outflow inlet, No. 5 outflow inlet of the third valve, No. 1 outflow inlet of the second valve, No. 6 outflow of the second valve Inlet, backflush of the first column, 6th outlet of the first valve, 5th outlet, 5th outlet of the second valve, 4th outlet of the second valve, 3rd valve The third
After passing through the outflow inlet, the 4th outflow inlet, and the ultraviolet detector, fraction V is collected by the fraction collector,
A purification and analysis method comprising a step of continuously washing and equilibrating the entire system as it is. 【請求項４】 試料を固相抽出器カートリッジで前処理
してからオートサンプラに導入することを特徴とする請
求項３記載の精製・分析方法。4. The purification / analysis method according to claim 3, wherein the sample is pretreated with a solid phase extractor cartridge and then introduced into an autosampler.