IT202000009610A1 - Superfood per aumentare la longevita’ di un individuo - Google Patents

Description

SUPERFOOD PER AUMENTARE LA LONGEVITA? DI UN INDIVIDUO.

Campo dell?invenzione

La presente invenzione riguarda una composizione nutrizionale per aumentare la longevit? di un individuo.

La presente invenzione origina nei settori nutraceutico e nutrizionale.

In particolare la presente invenzione riguarda una composizione nutrizionale a base di miscele di selezionati alimenti vegetali che mantengono i processi cellulari alla base della longevit? di un individuo.

Stato della tecnica

La ricerca in ambito nutrizionale pi? attuale ? orientata ad individuare strategie per la modulazione dell?alimentazione al fine di ridurre il rischio di sviluppare malattie croniche e aumentare l?aspettativa di vita, la longevit? degli individui.

Sono cos? stati avviati da ricercatori, nutrizionisti e medici numerosi progetti di ricerca sui fattori protettivi della salute dell?uomo e nuovi approcci nutrizionali volti a prevenire le condizioni che possono favorire lo sviluppo di malattie. Una ampia fetta di questi approcci nutrizionali si fonda sul rispetto di regimi dietetici la cui osservanza riduce il rischio di sviluppare malattie croniche che possono compromettere la salute di un individuo e ridurre le aspettative di vita.

Una ampia fetta della comunit? scientifica internazionale ? incline a ritenere che alcune delle principali cause di morte, quali le patologie cardiovascolari o respiratorie il diabete e lo sviluppo di alcuni tumori sia il risultato di un processo che origina dall'infanzia e che ? influenzato dal regime dietetico osservato.

Si ? inoltre osservato che attuando cambiamenti comportamentali orientati verso un regolare esercizio fisico, una idonea gestione dello stress e uno stile alimentare equilibrato che preveda anche l?integrazione di integratori nutrizionali, ? possibile ritardare o in alcuni casi evitare l'insorgenza di numerose malattie la cui comparsa riduce l?aspettativa di vita e quindi la longevit? dell?individuo.

Attualmente vengono applicate anche tecnologie sofisticate per intervenire sulla longevity e volti a rallentare e migliorare il fenomeno biologico dell'invecchiamento dell?organismo e ad intervenire sulla longevity. Queste tecnologie sofisticate prevedono gli studi genetici volti a determinare precocemente i principali fattori di rischio individuale, il ricorso a biotecnologie volte a fornire i mezzi per intervenire su alcuni problemi, grazie al ricorso a cellule staminali, DNA ricombinante, terapie geniche. Tuttavia, queste tecnologie sofisticate presentano l?inconveniente di comportare degli elevati costi e di essere quindi rivolte solo ad una ristrettissima fascia della popolazione.

Viceversa, si sente attualmente l?esigenza di disporre di nuove metodiche e prodotti facilmente accessibili ad un?ampia fetta della popolazione il cui utilizzo possa intervenire in maniera positiva sulla longevity e/o aumentare le aspettative di vita degli individui.

Uno degli scopi dell?invenzione consiste quindi nel fornire una composizione nutrizionale a base di sostanze alimentari di origine vegetale la cui assunzione influisca positivamente sulla longevit? di un individuo umano.

Un altro scopo dell?invenzione consiste nel fornire una composizione nutrizionale a base di una miscela di selezionati vegetali commestibili e/o frutti la cui assunzione o integrazione in un regime dietetico contribuisca a rallentare l?invecchiamento dell?organismo umano.

Un ulteriore scopo consiste nel fornire un metodo per prolungare il mantenimento di condizioni fisiologiche in un organismo di un essere umano.

Sommario dell?invenzione

Nell?ambito del settore tecnico dell?invenzione, la Richiedente ha trovato che combinando una miscela base di componenti nutrizionali di origine vegetali con alcune selezionati ulteriori componenti vegetali si ottengono delle composizioni nutrizionali che agiscono su certi meccanismi biologici dell?organismo umano che favoriscono la longevit? di un individuo.

In particolare, gli inventori hanno sperimentalmente riscontrato che combinando in specifici rapporti una miscela di moringa, melograno e noci con uno o pi? vegetali e/o frutti scelti tra mela, avocado, cavolo verza, datteri, broccoli e loro miscele, si ottengono composizioni nutrizionali che aumentano la longevit? di un individuo e/o contribuiscono a mantenere lo stato di salute o condizioni fisiologiche di un individuo.

In vista degli scopi precedentemente esposti, la presente invenzione concerne una composizione nutrizionale comprendente componenti vegetali di Melograno, Noce e Moringa in combinazione con almeno una selezionata componente nutrizionale vegetale scelta tra avocado, cavolo, broccoli, mela e dattero in cui, vantaggiosamente, le componenti vegetali sono in un rapporto 3:3:2:2. La combinazione delle selezionate componenti vegetali determina un?attivazione sinergica di sirtuine, in particolare SIRT-1, SIRT-3, e AMPK-1 che promuovono la longevity di un individuo.

In accordo ad un aspetto generale l?invenzione riguarda una composizione nutrizionale come definita nella acclusa rivendicazione 1 e suoi usi come definiti nelle rivendicazioni 10-12.

In accordo a certe forme di realizzazione preferite le composizioni nutrizionali sono cinque, ognuna contenente 4 principali componenti di origine vegetale:

Composizione 1: comprendente una miscela di Melograno, Noce e Moringa combinata con mela, in cui i quattro componenti sono in un rapporto 3:3:2:2.

Composizione 2: comprendente una miscela di Melograno, Noce e Moringa combinata con cavolo, in cui i quattro componenti sono in un rapporto 3:3:2:2

Composizione 3: comprendente una miscela di Melograno, Noce e Moringa combinata con broccoli, in cui i quattro componenti sono in un rapporto 3:3:2:2

Composizione 4: comprendente una miscela di Melograno, Noce e Moringa combinata con avocado, in cui i quattro componenti sono in un rapporto 3:3:2:2

Composizione 5: comprendente Melograno, Noce e Moringa combinata con dattero, in cui i quattro componenti sono in un rapporto 3:3:2:2.

Vantaggiosamente, le composizioni dell?invenzione contengono le componenti vegetali e/o i frutti in forma sminuzzata.

In accordo ad un altro aspetto dell?invenzione viene fornita una composizione nutrizionale come definita nella rivendicazione 13 e suo uso per promuovere, aumentare la longevity di un individuo come qui descritto.

In accordo ad un aspetto viene fornito un kit per promuovere, aumentare la longevity di un individuo comprendente una miscela di base di componenti vegetali di Melograno, Noce e Moringa ed opzionalmente almeno una ulteriore componente vegetale selezionata tra avocado, cavolo, broccoli, mela e dattero.

In un aspetto l?invenzione fornisce un metodo per aumentare la longevity di un individuo comprendente la miscelazione di componenti vegetali/frutti di Melograno, Noce e Moringa con almeno una ulteriore componente vegetale selezionata tra avocado, cavolo, broccoli, mela e dattero, vantaggiosamente nelle proporzioni 3:3:2:2.

Le componenti vegetali utilizzate nell?ambito dell?invenzione sono porzioni di selezionate piante o selezionati frutti di piante.

Secondo alcuni aspetti la composizione dell?invenzione trova indicazione nel prevenire e/o nel trattare l?invecchiamento precoce di un individuo e/o nel promuovere la longevit? di un individuo.

Le matrici di frutta e verdura utilizzate nella presente invenzione hanno caratteristiche che, se combinate determinano un potenziamento delle attivit? delle singole componenti vegetali.

Gli autori della presente invenzione hanno individuato specifiche componenti vegetali qui descritte la cui combinazione determina propriet? salutistiche superiori a quelle ottenibili con singoli componenti/ingredienti vegetali.

Ulteriori vantaggi della presente invenzione sono: (i) la possibilit? di impiegare varie matrici naturali di frutta e verdura, relativamente a basso costo, che compensano il consumo di fonti ricche di nutrienti per aderire alla raccomandazione principale di una dieta mediterranea sana; (ii) il contenuto insolito, acidi grassi insaturi, minerali e fibre rispetto alla maggior parte dei prodotti disponibili sul mercato; (iii) la possibilit? di estendere il consumo di tali preparati alle popolazioni di tutto il Mondo, in particolare per quelle persone che hanno carenze nutrizionali dovute alle abitudini alimentari quotidiane; e (iv) il consumo di preparati a base di frutta e verdura con attivit? anti-invecchiamento inaspettatamente elevate.

La composizione dell?invenzione pu? essere somministrata per via orale o in alternativa per applicazione topica. In quest?ultimo caso, la composizione dell?invenzione qui descritta trova applicazione cosmetica o in ambito estetico nel prevenire un invecchiamento precoce della pelle e/o nel trattare i danni della pelle causati dall?azione degli agenti esterni in particolare la prolungata esposizione ai raggi UV.

Breve descrizione delle figure

Le caratteristiche e vantaggi della presente invenzione risulteranno pi? evidenti dalle accluse tavole di disegno in cui:

La Figura 1 illustra il ruolo svolto dalle Sirtuine in molteplici processi biologici dell?organismo umano (Serravallo et al. 2013).

Le Figure 2 a, b, c, illustrano grafici a barre relativi a espressione genica di SIRT-1 nei cheratinociti umani NCTC2544 determinata in RT-PCR. Le cellule NCTC2544 sono state trattate a 37 ? C per 24 ore, 5% di CO2, con: terreno basale al 2,5% di FBS (veicolo); Melograno; Noce; Moringa; coppie e mix di tutti e tre le componenti. La combinazione di tre componenti viene rispettivamente testata a 10?g / mL (a), 100 ?g / mL (b) e 500?g / mL (c) e anche le componenti vegetali attive sono state testate alla concentrazione che riflette quella nella combinazione finale. I valori sono la media di 2 esperimenti in duplicato.

Le Figure 3 a), b), c) illustrano grafici a barre che illustrano l?espressione genica di SIRT-1 nei cheratinociti umani NCTC2544 determinata in RT-PCR. Le cellule NCTC2544 sono state trattate a 37 ? C per 24 ore, 5% di CO2, con: terreno basale al 2,5% di FBS (veicolo); Melograno; Noce; Moringa; Combinazione combo 1; Combinazione combo 2; Combinazione combo 3; Combinazione combo 4; Combinazione combo 5; Avocado; Cavolo verde; Mela, broccoli e datero. Le composizioni di combinazione sono rispettivamente testate a 10?g / mL (a), 100 ?g / mL (b) e 500?g / mL (c) e sono stati testati anche singoli componenti attivi alla concentrazione che riflette quella nella combinazione finale. I valori sono la media di 2 esperimenti in duplicato.

Le Figure 4 a), b), c) illustrano grafici a barre che illustrano l?espressione genica di SIRT-3 nei cheratinociti umani NCTC2544 determinata in RT-PCR. Le cellule NCTC2544 sono state trattate a 37 ? C per 24 ore, 5% di CO2, con: terreno basale al 2,5% di FBS (veicolo); Melograno; Noce; Moringa; coppie e mix di tutti e tre le componenti vegetali nutrizionali. La combinazione di tre componenti viene rispettivamente testata a 10?g / mL (a), 100 ?g / mL (b) e 500?g / mL (c) e anche i componenti vegetali attivi sono stati testati alla concentrazione che riflette quella nella combinazione finale. I valori sono la media di 2 esperimenti in duplicato.

Le Figure 5 a), b), c) illustrano grafici a barre che illustrano l?espressione genica di SIRT-3 nei cheratinociti umani NCTC2544 determinata in RT-PCR. Le cellule NCTC2544 sono state trattate a 37 ? C per 24 ore, 5% di CO2, con: terreno basale al 2,5% di FBS (veicolo); Melograno; Noce; Moringa; combo 1; combo 2; combo 3; combo 4; combo 5; Avocado; Cavolo verde; Mela, broccoli e dattero. La combinazione di componenti ? testata rispettivamente a 10?g / mL (a), 100 ?g / mL (b) e 500?g / mL (c) e sono stati testati anche le singole componenti attive alla concentrazione che riflette quella nella combinazione finale. I valori sono la media di 2 esperimenti in duplicato.

Le Figure 6 a), b), c) mostrano grafici a barre che illustrano l?espressione genica di AMPK-1 nei cheratinociti umani NCTC2544 determinata in RT-PCR. Le cellule NCTC2544 sono state trattate a 37 ? C per 24 ore, 5% di CO2, con: terreno basale al 2,5% di FBS (veicolo); Melograno; Noce; Moringa; coppie e mix di tutti e tre le componenti nutrizionali. La combinazione di tre componenti vegetali viene rispettivamente testata a 10?g / mL (a), 100 ?g / mL (b) e 500?g / mL (c) e anche le componenti attivi sono state testati alla concentrazione che riflette quella nella combinazione finale. I valori sono la media di 2 esperimenti in duplicato.

Le Figure 7 a), b), c) illustrano grafici a barre che mostrano l?espressione genica di AMPK-1 nei cheratinociti umani NCTC2544 determinata in RT-PCR. Le cellule NCTC2544 sono state trattate a 37 ? C per 24 ore, 5% di CO2, con: terreno basale al 2,5% di FBS (veicolo); Melograno; Noce; Moringa; combo 1; combo 2; combo 3; combo 4; combo 5; Avocado; Cavolo verde; Mela, broccoli e dattero. La combinazione di componenti nutrizionali vegetali ? rispettivamente testata a 10?g / mL (a), 100 ?g / mL (b) e 500?g / mL (c) e sono stati testati anche singoli componenti vegetali attivi alla concentrazione che riflette quella nella combinazione finale. I valori sono la media di 2 esperimenti in duplicato.

La Figura 8 illustra cinque possibili combinazioni di componenti nutrizionali di origine vegetale in forma sminuzzata secondo forme di realizzazione dell?invenzione.

Descrizione dettagliata dell?invenzione

La presente invenzione origina dall?aver trovato che combinando in specifici rapporti una componente nutrizionale vegetale di base comprendente Melograno, Noce e Moringa con almeno una componente nutrizionale vegetale selezionata scelta tra avocado, cavolo, broccoli, mela e dattero, si ottiene un?attivazione sinergica di sirtuine in particolare su SIRT-1, SIRT-3 e AMPK-1.

Questo effetto ? superiore a quello riscontrabile utilizzando le stesse componenti vegetali separatamente o accoppiate a due a due, come ad esempio evidenziato dai dati illustrati nelle accluse Figura 2, Figura 4, Figura 6.

L?azione sinergica sulle sirtuine delle miscele di componenti vegetali nutrizionali, nelle specifiche proporzioni individuate dagli inventori, consente di rallentare i processi biochimici fisiologici di invecchiamento del corpo umano aumentando la longevit? dell?individuo.

In accordo ad un primo aspetto dell?invenzione viene quindi fornito una composizione in accordo alla acclusa rivendicazione 1.

Le composizioni dell?invenzione comprendono tre componenti nutrizionali di base di origine vegetale che sono miscelate tra di loro vantaggiosamente in rapporti predefiniti.

Le tre componenti nutrizionali vegetali di base sono Melograno, Noce e Moringa. Queste componenti sono presenti o miscelate nella composizione in rapporti quantitativi di 2,7-3,3 : 2,7-3,3 : 1,7-2,3 oppure 2,8-3,2 : 2,8-3,2 : 1,8-2,2, oppure 2,9-3,1 : 2,9-3,1 : 1,9-2,1, preferibilmente 3:3:2.

Tipicamente i rapporti tra le componenti sono rapporti in peso tra le varie componenti oppure in peso e volume, come qui descritto.

Le componenti nutrizionali di base Melograno, Noce e Moringa presenti nei rapporti sopra menzionati sono combinate con almeno una ulteriore componente nutrizionale vegetale/frutta selezionata scelta tra avocado, cavolo, broccoli, mela e dattero.

La ulteriore componente vegetale/frutto ? presente in un rapporto che va da 1,7 a 2,3 oppure da 1,8 a 2,2 oppure da 1,9 a 2,1 in particolare pari a 2, rispetto alle componenti base.

Vantaggiosamente, nella composizione le componenti nutrizionali vegetali e/o frutti sono in forma sminuzzata, frullata o di poltiglia vegetale.

Come evidenziato in Figura 8, le proporzioni preferite tra le quattro componenti (tre base pi? una selezionata) della composizione ? di 3:3:2:2.

La combinazione delle miscele di selezionati componenti nutrizionali nei selezionati rapporti quantitativi qui descritti determina un inaspettato effetto sinergico di attivazione su SIRT-1, SIRT-3 e AMPK-1 che ? alla base dell?aumento della longevit? nelle cellule trattate.

Questo trovato ? stato sperimentalmente dimostrato dagli inventori attraverso alcune prove in cui le tre componenti nutrizionale base dell?invenzione di Melograno, Noce e Moringa sono stati testati come componenti singoli, in coppie e in miscela specificatamente in un rapporto di 3: 3: 2, rispettivamente, come riportato in Figura 2, Figura 4, Figura 6.

In particolare, le combinazioni delle componenti nutrizionali base in rapporto 3: 3: 2 hanno dimostrato, quando testate ad una concentrazione di 10-100 e 500?g / mL che l?effetto riscontrato ? superiore alle componenti testate separatamente o accoppiate, come evidenziato dai dati raffigurati in Figura 2, Figura 4, Figura 6. L'effetto pi? marcato ? alle dosi a 10 e 100 ?g / mL.

Secondo certi aspetti, l?invenzione fornisce la composizione come qui descritta per l?uso nell?incrementare la longevit? di un individuo.

L?individuo pu? essere un mammifero e specificatamente un essere umano.

Forme di realizzazione degli usi in ambito nutrizionale della composizione dell?invenzione sono definiti nelle quivi accluse rivendicazioni dipendenti 2-8.

Le componenti biologicamente attive presenti nella composizione sono per l?uso nutraceutico, nutrizionale, cosmetico o di medicina estetica.

Secondo alcuni aspetti dell?invenzione ? possibile trattare una popolazione di soggetti per mantenere i principali parametri biochimici a livello fisiologico o per aumentare le aspettative di vita.

Secondo altri aspetti l?invenzione fornisce una composizione come qui descritta per ridurre i rischi e/o prevenire lo sviluppo di malattie che possano ridurre l?aspettativa di vita di un individuo o per mantenere i principali parametri biologici di un essere umano entro i limiti fisiologici.

In accordo ad altri aspetti, la composizione dell?invenzione trova applicazione nell?uso topico.

Secondo questi aspetti, l?invenzione riguarda l?uso topico, non terapeutico, di una composizione come qui descritta contenente la combinazione di componenti quivi descritta nel trattamento di danni estetici della pelle o di invecchiamento della pelle causati da agenti esterni in particolare da esposizione alla radiazione ultravioletta. In accordo a questi aspetti, la composizione dell?invenzione trova applicazione nel trattamento cosmetico dei segni dell?invecchiamento cutaneo conseguenti all?esposizione alla radiazione ultravioletta, tipicamente raggi solari.

Tipicamente la composizione dell?invenzione viene utilizzata nella prevenzione o trattamento non terapeutico del photo-aging o dell?invecchiamento della pelle. Inoltre, la composizione dell?invenzione pu? essere utilizzata nel prevenire o trattare quei segni dell?invecchiamento cutaneo che sono riferibili ad una esposizione ripetuta nel tempo alle radiazioni ultraviolette quali ad esempio corrugazioni della pelle, rugosit?, inspessimento della pelle, disidratazione e raggrinzimento della pelle del corpo ed in particolare del viso.

Le componenti vegetali e/o frutti della composizione dell?invenzione e utilizzate nel metodo qui descritto sono fonti ricche di composti biogenici e presentano caratteristiche molto specifiche e complementari.

Queste componenti ed altri aspetti della composizione dell?invenzione sono descritti in dettaglio nel seguito.

Il melograno (Punica granutum L.) ? un frutto con un'attivit? antiossidante considerevolmente elevata a causa del contenuto rilevante di antociani, derivati dell'acido ellagico e tannini idrolizzabili. Il succo di melograno ha un'attivit? antiossidante tre volte superiore a quella del vino rosso e del t? verde. Sia gli studi in vivo che quelli in vitro hanno stabilito le sue attivit? antibatteriche, antinfiammatorie, antivirali e anticarcinogene.

Le mele sono una delle fonti pi? importanti di composti polifenolici nella dieta occidentale. I polifenoli delle mele hanno mostrato un'elevata capacit? antiossidante in vitro e sono in grado di diminuire i livelli di glucosio cellulare e l'assorbimento dei lipidi. Una variet? di mela particolarmente idonea per gli usi dell?invenzione ? la Mela delicious.

L'avocado (Persea americana Mill), un frutto nativo americano, ? molto ricco di polifenoli, carotenoidi, tocoferoli e fitosteroli, che gli conferiscono attivit? biologiche antimicrobiche, antinfiammatorie, antitumorali, antidiabetiche e antiipertensive. Il cavolo (Brassica oleracea) ha dimostrato di essere benefico per la salute umana in numerosi studi epidemiologici e clinici. L'elevata assunzione di cavoli riduce il rischio di malattie degenerative, malattie croniche legate all'et? (Kris-Etherton et al., 2002.) e diversi tipi di tumore. La presenza di vitamine, provitamine, come gli acidi folici e un'ampia variet? di sostanze fenoliche e composti organosulfuri sono considerati fattori che contribuiscono alla sua attivit?. In una forma di realizzazione viene utilizzato pianta di cavolo, Brassica oleracea, variet? sabauda, nota anche come cavolo verza.

I datteri, i frutti di Phoenix dactylifera L., sono fonti ricche di potassio, flavonoidi e polifenoli, che contribuiscono all'elevata attivit? antiossidante. L'alto valore nutrizionale dei datteri ? anche associato all'alto contenuto di fibre, che oltre ad accelerare la motilit? intestinale e quindi prevenire la costipazione, influisce anche sulla riduzione dei livelli di colesterolo totale e LDL nel sangue e riduce ulteriormente il livello di zucchero (Kritchevsky ,1988.).

Le noci (Juglans regia L) sono note per le loro propriet? nutritive da un lungo periodo di tempo. Tradizionalmente, le noci sono note per il loro profilo lipidico che ? stato collegato ad una vasta gamma di propriet? biologiche ed effetti di promozione della salute. Oltre agli acidi grassi essenziali, le noci contengono una variet? di altri composti bioattivi come vitamina E e i polifenoli. Le noci possiedono una bioattivit? antiossidante e antinfiammatoria ben nota e numerosi studi hanno valutato il ruolo potenziale delle noci contro l'inizio e la progressione della malattia, tra cui il cancro, le malattie cardiovascolari e neurodegenerative. In una forma di realizzazione viene utilizzata la variante californiana della Juglans nigra.

La Moringa (Moringa oleifera Lam.), originaria dell'India, ? ampiamente usata nella fitomedicina tradizionale come ricca fonte di nutrienti essenziali e composti biogenici. Numerosi studi scientifici forniscono approfondimenti su attivit? terapeutiche come attivit? anti-biocide, antitumorali, antiossidanti, antinfiammatorie, cardio-protettive, epato-protettive, neuro-protettive, protettive dei tessuti e di altro tipo con grado di sicurezza. I vari tessuti vegetali hanno una variet? importante di alcaloidi e steroli, polifenoli e acidi fenolici, acidi grassi, flavanoidi e glicosidi flavanolo, glucosinolato e isotiocianato, terpene e antocianine ritenuti responsabili degli effetti pragmatici.

Sono qui descritti metodi per preparare le composizioni dell?invenzione.

Tutti i componenti di origine vegetale quali il melograno, la mela, l'avocado, il cavolo, i datteri, i broccoli, la noce sono stati ottenuti freschi, mentre la moringa pu? essere fornita in forma di polvere.

In accordo ad alcune forme di realizzazione per realizzare la composizione nutrizionale qui descritta sono utilizzate le seguenti parti/porzioni di vegetale / frutti: - Melograno, parte usata semi;

- Noci, parte usata: gherigli;

- Moringa, parte utilizzata: estratto foglie, ottenuto con tecniche di estrazione tradizionali;

- Mela, parte usata: polpa e buccia;

- Datteri, parte utilizzata: polpa;

- Avocado, parte usata polpa;

- Cavolo, parte usata foglie;

- Broccolo, parte usata capolino.

Una forma di realizzazione del metodo per la preparazione della composizione nutrizionale ? stata standardizzata come qui descritto. Tutte le matrici fresche sono state lavate, pulite e tagliate in piccoli pezzi. Le noci sono state e separate dalla parte non commestibile. Il nocciolo dei datteri ? stato rimosso e i semi di melograno furono separati dalla buccia. Tutti gli ingredienti sono stati miscelati da un robot da cucina verticale (mod R8 Robot Coupe, Bologna, Italia). Dopo la miscelazione, il succo residuo di melograno ? stato filtrato utilizzando un comune setaccio. La polvere di Moringa ? stata sciolta con acqua preferibilmente acqua distillata p/v 1: 9, e miscelata manualmente. In via preliminare, sono state preparate diverse combinazioni usando diversi ingredienti, combinando un numero diverso di ingredienti e variando il rapporto tra gli ingredienti.

Le 5 combinazioni preparate esibivano tre ingredienti/componenti comuni: melograno, noci, moringa e un quarto componente/ingrediente variabile: mela, cavolo verza, broccoli, avocado, datteri.

I preparati finali comprendevano ingredienti e rapporti come segue:

Preparazione 1: Melograno, noci, moringa, mela (v / p / v / w 3: 3: 2: 2) Preparazione 2: melograno, noci, moringa, cavolo verza (v / p / v / p 3: 3: 2: 2) Preparazione 3: melograno, noci, moringa, broccoli (v / p / v / p 3: 3: 2: 2) Preparazione 4: melograno, noci, moringa, avocado (v / p / v / p 3: 3: 2: 2) Preparazione 5: Melograno, noci, moringa, datteri (v / p / v / p 3: 3: 2: 2), in cui v significa volume e p peso.

La composizione dell?invenzione pu? essere un integratore dietetico o nutrizionale, un farmaco.

In accordo a certe forme di realizzazione la composizione dell?invenzione comprende ulteriormente una o pi? sostanze attive come vitamine, minerali, micronutrienti ed altre sostanze attive ed opzionalmente un veicolo commestibile. Nell?ambito dell?invenzione, con il termine di ?commestibile o edibile? si intende una sostanza fisiologicamente accettabile che pu? essere assunta da un essere umano e che rientra in un regime alimentare o dietetico convenzionale.

In accordo ad alcune forme di realizzazione la composizione per la somministrazione orale ? un alimento funzionale, una composizione nutraceutica, un prodotto dietetico, un alimento funzionale, un complemento o prodotto nutrizionale.

Alimento funzionale significa un qualsiasi alimento o ingrediente alimentare modificato che pu? fornire un beneficio o protezione contro un inconveniente o una affezione fisiologica, oltre ai nutrienti tradizionali che esso contiene.

Prodotto nutraceutico significa un prodotto isolato o purificato da sostanze commestibili. Un nutraceutico ? tale quando si dimostra che possiede un beneficio fisiologico o che fornisce protezione contro un inconveniente o disordine fisiologico. Integratore dietetico o alimentare significa un prodotto che contiene una vitamina, minerale, estratto vegetale, aminoacido, metabolita, estratto, concentrato o miscele di questi ingredienti.

Il quantitativo somministrato e la frequenza della somministrazione della composizione dipenderanno dalla natura e gravit? della affezione da trattare.

In alcune forme di realizzazione la composizione dell?invenzione comprende un veicolo, diluente o eccipiente fisiologicamente e/o farmaceuticamente accettabile. Tipicamente, il veicolo fisiologicamente accettabile della composizione dell?invenzione ? un eccipiente, veicolo o diluente idoneo per l?applicazione topica e/ o per la somministrazione orale.

Nell?ambito della presente il termine ?veicolo? si riferisce ad un eccipiente, veicolo, diluente o coadiuvante che pu? o possono essere presenti nella composizione dell?invenzione. Qualsiasi veicolo e/o eccipiente idoneo per la forma di preparazione desiderata per la somministrazione viene contemplata negli utilizzi dell?estratto vegetale o principi attivi in esso presente quivi descritti.

In certe forme di realizzazione, la composizione dell?invenzione contiene ulteriori componenti di origine vegetale che sono biologicamente attive e sostanzialmente prive di effetti collaterali, quando somministrate per via orale o locale.

Il veicolo, diluente o eccipiente fisiologicamente o farmaceuticamente e/o fisiologicamente accettabile pu? essere scelto in base alla via di somministrazione per cui ? intesa la risultante composizione.

Vantaggiosamente la composizione principalmente ? in forma per la somministrazione orale.

Le composizioni per la somministrazione orale possono essere in forma solida ad esempio in forma di polvere o compressa.

Preferibilmente la composizione ? in forma liofilizzata o pastorizzata.

La composizione dell?invenzione pu? essere liofilizzata mediante una tecnologia di liofilizzazione tradizionale.

Ad esempio, la liofilizzazione della composizione comprende il trattamento delle componenti vegetali nutrizionali attraverso le seguenti fasi e condizioni:

Congelamento 50?C, 2 h

Liofilizzazione principale: -40?C per 1 h, -30?C per 1 h, -20?C per 1 h, -10?C per 3 h, 0?C over night, 10?C per 1 h;

Liofilizzazione finale: 20?C per 4 h

Temperatura di congelamento campione: -30?C

Pressione lavoro main drying: 0,128 mbar

P lavoro final drying: 23.4 mbar

P sicurezza: 0,380 mbar

Vantaggiosamente la composizione qui descritta pu? essere pastorizzata adottando metodi tradizionali.

Ad esempio, la pastorizzazione prevede che i cinque componenti siano frullati a formare smoothies per poi essere trasferiti in un contenitori ad esempio boccette di vetro e immersi in acqua bollente, tipicamente in un bagno termostatico regolato a 100? C. Quando la temperatura all'interno dei frullati ha raggiunto gli 80? C, viene mantenuta questa temperatura per 5 minuti prima di rimuovere le composizioni/campioni pastorizzati.

In alcune forme di realizzazione la composizione ? in una forma per uso topico e viene applicata sulla cute.

In alcune forme di realizzazione la via di somministrazione della composizione dell?invenzione ? quindi quella topica

In questi casi la composizione dell?invenzione pu? essere in forma di emulsione, crema, pomata, unguento, lozione, maschera, patch.

Nelle applicazioni in ambito cosmetico/estetico ad esempio nel prevenire o trattare il photo-aging ? possibile applicare un quantitativo cosmeticamente attivo di composizione dell?invenzione sulla zona della pelle interessata una o pi? volte al giorno, convenientemente per un periodo di almeno 2-3 mesi.

Secondo un altro aspetto dell?invenzione viene fornito un metodo di trattamento cosmetico che comprende l?applicazione sulla pelle di un quantitativo efficace di una composizione del tipo precedentemente descritta.

La composizione per applicazione topica pu? essere in forma solida, semisolida o fluida. Idonee formulazioni in forma solida includono paste, creme, geli, pomate, unguenti, maschere, fanghi.

In alcune forme di realizzazione le composizioni dell?invenzione possono comprendere eccipienti comunemente utilizzati nella formulazione di preparazioni cosmetiche o farmaceutiche, ad uso locale, quali conservanti, agenti battericidi, stabilizzanti, emulsionanti, tamponi, umettanti, coloranti ed altri eccipienti comunemente utilizzati nelle tecniche di preparazione cosmetiche / farmaceutiche. La presente invenzione verr? ora descritta facendo riferimento ai seguenti esempi che vengono forniti a meri fini illustrativi e non devono essere intesi in senso limitativo della presente invenzione.

ESEMPIO 1

Analisi in vitro su formulazione

1. SCOPI DELL?ANALISI

Scopo del test ? di investigare se alcuni selezionati vegetali / frutti agiscono sui markers della longevit? quali le sirtuine. Queste sono proteine coinvolte in molte pathways e sono riconosciute come ??longevity proteins?? che possono estendere ed aumentare la vita umana (Grabowska et al., 2017).

2. MATERIALI

2.1 Componenti nutrizionali testate

Con il termine combinazione 1, 2, 3, 4, 5 si intendono composizioni 1, 2, 3, 4, 5 (o composizioni combinate 1, 2, 3, 4, 5) contenenti le combinazioni di componenti vegetali secondo l?invenzione, ad esempio come illustrato in Figura 8.

Melograno, Noce e Moringa sono stati testati anche in combinazione (miscelati) e in un mix di tutti e tre. Nella coppia sono stati testati alla concentrazione corrispondente alla quantit? nel mix finale.

Di seguito ? riportata la rappresentazione grafica del diverso rapporto del composto testato.

2.2 Reagenti e strumentazione usati

2.3 Strumenti

2.4 Modello Biologico

Sistema di test: cheratinociti umani NCTC2544

La linea cellulare di cheratinociti umani NCTC 2544 ? stata ottenuta dall'Istituto Nazionale per la Ricerca sul Cancro di Genova, Italia. Le cellule sono state coltivate in terreno RPMI supplementato con siero bovino fetale al 10% (FBS), 2 mM di L-glutammina, 1% di penicillina (10.000 U / mL) / streptomicina (10.000 ?g / mL) e mantenute in fiasche di coltura di 25 cm2 a 37 ? C, 5% CO2. Ogni due giorni le colture confluenti venivano divise 1: 3?1: 6, dopo il lavaggio con soluzione salina tamponata con fosfato (PBS) (senza Ca<2 >e Mg<2 >), usando tripsina / EDTA e seminate con una densit? di 1 ? 10<6 >cellule per pozzetto in 12 -piastre per qRT-PCR.

Controlli

Controllo Negativo: cellule non trattate in mezzo RPMI sotto le stesse condizioni di cultura del campione

METODI SAGGIO DI LONGEVIT?

24 ore dopo la semina su piastre da 12 pozzetti, le cellule confluenti all'80% NCTC2544 sono state esposte a 10-500?g / mL di composti (o componenti) vegetali singoli o abbainati tra loro. L'RNA per l'analisi qRT-PCR ? stato estratto 24 ore dopo il trattamento.

Tramite il Tri Reagent descritto da Chomczynski e Mackey (Chomczynski P, Mackey K. 1995) e il cDNA ? stato quindi sintetizzato da 2?g di templato di RNA in un volume di reazione di 20?l, usando il kit PrimeScript RT-PCR (Takara, Giappone). Il cDNA ? stato amplificato e rilevato dal sistema Stratagene Mx3000P in Real Time PCR (Agilent Technologies Italia S.p.A., Milano, Italia). L'amplificazione del cDNA da cellule NCTC2544 ? stata condotta utilizzando le seguenti sonde Taqman: HS00234508_M1 (mTOR), HS00272166_M1 (AMPK-?1), HS00953477_M1 (SIRT-3), HS01_001) Hs999999 m1 (gliceraldeide-3-fosfato deidrogenasi umana, GAPDH). GAPDH ? stato usato come gene housekeeping. Le amplificazioni PCR sono state eseguite in un volume totale di 20 ?l. La miscela di reazione conteneva 10 ?l di 2X Premix Ex Taq , 1 ?l di 20 ? TaqMan gene expression assay, 0,4 ?l di RoX Reference Dye II

4,6 ?l di acqua e 4 ?l di DNA. Le condizioni di PCR erano le seguenti: 95 ? C per 30 secondi seguiti da 40 cicli di 95 ? C per 5 secondi, 60 ? C per 20 secondi. Le reazioni PCR sono state eseguite in duplicato utilizzando una macchina PCR MX3000p (Stratagene, La Jolla, CA). Il ?Ct della soglia del ciclo

? stato utilizzato per il calcolo dell'abbondanza relativa nell'espressione di ciascun gene.

RISULTATI

Premessa

Le sirtuine sono proteine coinvolte in molti percorsi umani e stanno guadagnando l'attenzione nazionale a causa del loro ruolo di "proteine della longevit?" che possono estendere e migliorare la vita umana (Grabowska, 2017).

La figura 1 evidenzia il ruolo delle sirtuine in alcuni dei principali processi biologici/metabolici umani (Serravallo et al., 2013).

Una volta attivati, sono anche in grado di interagire con altri importanti target molecolari di longevit? come ad esempio AMPK (proteina chinasi attivata da AMP (Grabowska, 2017). L'attivazione di AMPK porta alla regolazione di numerosi percorsi di segnalazione coinvolti nella senescenza e nell'invecchiamento come quelli coinvolgenti p53, mTOR e NF?B (Salminen et al., 2012). Allo stesso tempo, l'attivazione di AMPK aumenta il livello di NAD (tra l'altro attraverso l'aumento del livello e dell'attivit? di NAMPT) aumentando cos? l'attivit? SIRT1 (Canto et al., 2009). Le sirtuine, in particolare SIRT-1, regolano anche la segnalazione canonica TGF-? (Zerr et al., 2016).

Descrizione

La formulazione di diverse combinazioni di frutta / verdura come fonti di composti antiossidanti sono state testate per la loro attivit? in vitro come stimolatore della longevit? mediante qRT-PCR. Vengono studiati i principali geni coinvolti nell'invecchiamento: SIRT-1, SIRT-3 e AMPK-1.

Al fine di valutare l'attivit? sinergica di frutta e verdura miscelate con rapporto diverso, anche la frutta e la verdura sono state analizzate come singolo composto o in combinazione diversa.

La composizione delle combinazioni 1-5 di interesse sono illustrate in Figura 8. Il termine Combo, ove menzionato, ? da intendersi come combinazione o composizione di combinazione, secondo l?invenzione. Il termine accoppiati significa combinati.

Melograno, Noce e Moringa sono stati testati come composto singolo, accoppiati e miscelati in un rapporto di 3: 3: 2, rispettivamente per la loro attivit?, come riportato in Figura 2, Figura 4, Figura 6 rispettivamente.

Le combinazioni 3: 3: 2 hanno mostrato un effetto sinergico su SIRT-1, SIRT-3 e AMPK-1 quando testati a una concentrazione finale di 10-100 e 500?g / mL, rispettivamente e questo effetto era superiore ai composti testati separatamente o combinati (Figura 2, Figura 4, Figura 6). L'effetto era pi? evidente a 10 e 100 ?g / mL.

Inoltre, la miscela di melograno, la noce e la moringa in rapporto 3.3: 2 ? stata testata in combinazione con altri frutti e verdure in rapporto di 2: avocado, cavolo verza, broccoli, mela e dattero. Anche in questo caso frutta e verdura sono state testate come singolo componente tenendo conto della loro quantit? nella combinazione finale.

La Figura 3 mostra l'effetto delle combinazioni (Combo 1, 2, 3, 4 e 5) su SIRT-1. Tutte e cinque le combinazioni hanno mostrato un effetto sinergico sull'attivazione di SIRT-1 quando testato a 10?g / mL e il loro effetto ? superiore ai singoli composti. Questo vale anche per la combinazione 1, 2, 3 e 4 a 100?g / mL. Nessun effetto sinergico ? stato riportato a 500?g /mL.

Come riportato in Figura 5 e Figura 7, tutte e cinque le combinazioni hanno mostrato anche un effetto sinergico sull'attivazione di SIRT-3 quando testato a 10?g /mL e il loro effetto ? superiore ai singoli composti. Nessun effetto sinergico ? stato riportato a 100 e 500?g / mL per SIRT-3 (Figura 3).

Per quanto riguarda l'AMPK-1, ? stato riportato anche un effetto sinergico di tutte e cinque le combinazioni a 100?g / mL e 500?g / mL, ma solo per la combinazione 2 (Figura 7).

ESEMPIO 2

Composizione solubile in liquido conservata in bustina Sostanza.................................................................. mg/dose

Combinazione 1 o Combinazione 2

o Combinazione 3 o Combinazione 4

o Combinazione 5 .................................................... 850

Maltodestrine ............................................................ 450

Eritritol (E968) .......................................................... 100

Acido Citrico (E330) ................................................. 100

ESEMPIO 3

Composizione in forma di COMPRESSE Sostanza.................................................................. mg per cpr Combinazione 1 o Combinazione 2 o

Combinazione 3 o Combinazione 4 o

Combinazione 5 ....................................................... 150 Acerola e.s. .............................................................. 50 Barbabietola e.s. ...................................................... 50 Astragalo e.s. ........................................................... 30 Quercetina ................................................................ 30 Vitamina E (Tocoferoli, Tocotrienoli) ........................ 6 Licopene ................................................................... 10 Vitamina B3 (Nicotinammide) ................................... 16 Microcrystalline Cellulose ......................................... 30 Calcium phosphate dibasic dihydrate ....................... 30

ESEMPIO 4

COMPRESSE

Sostanza.................................................................. mg per cpr Combinazione 1 o Combinazione 2 o

Combinazione 3 o Combinazione 4 o

Combinazione 5 ....................................................... 150 Whitamnia somnifera ................................................ 50 Carnitina ................................................................... 50 Carnosina ................................................................. 50 Lattoferrina ............................................................... 50 Microcrystalline Cellulose ......................................... 30 Calcium phosphate dibasic dihydrate ....................... 30

ESEMPIO 5

Composizione per applicazione topica

Composto/INCI ....................................................... % AQUA ....................................................................... 74,05 HYDROXYACETOPHENONE .................................. 0,30 ACRYLATES C10-30 ALKYL

ACRYLATES CROSSPOLYMER ............................. 0,25 CARBOMER ............................................................. 0,20 GLYCERIN ............................................................... 3,00 DISODIUM EDTA ..................................................... 0,10 CAPRYLIC/CAPRIC TRIGLYCERIDE ..................... 10,00 DICAPRYLYL CARBONATE .................................... 5,00 Combinazione 1 o Combinazione 2

o Combinazione 3 o Combinazione 4

o Combinazione 5 .................................................... 5,00 LECITHIN ................................................................. 0,25 AQUA, SODIUM HYDROXIDE ................................. 0,35 1,2-HEXANEDIOL .................................................... 1,50 ESEMPIO 6

Composizione per l?applicazione topica

Composto/INCI ....................................................... %

AQUA ....................................................................... 69,05 HYDROXYACETOPHENONE .................................. 0,30

ACRYLATES C10-30 ALKYL

ACRYLATES CROSSPOLYMER ............................. 0,25

CARBOMER ............................................................. 0,20

GLYCERIN ............................................................... 3,00

DISODIUM EDTA ..................................................... 0,10 CAPRYLIC/CAPRIC TRIGLYCERIDE ..................... 10,00

DICAPRYLYL CARBONATE .................................... 5,00

Combinazione 1 o Combinazione 2

o Combinazione 3 o Combinazione 4

o Combinazione 5 .................................................... 10,00

LECITHIN ................................................................. 0,25

AQUA, SODIUM HYDROXIDE ................................. 0,35

1,2-HEXANEDIOL .................................................... 1,50

ESEMPIO 7

Analisi nutrizionale di composizioni dell?invenzione

Acidi grassi e analisi nutrizionali

Le analisi nutrizionali sono state eseguite come descritto di seguito:

Umidit?: I campioni sono stati essiccati in forno ad aria a 103 ? C per 4-6 ore. Dopo l'essiccazione, i campioni sono stati pesati fino a raggiungere un peso costante (Baldini et al., 1996).

Cenere: La determinazione del contenuto di ceneri ? stata effettuata secondo la metodologia di incenerimento a secco proposta da Park and Bell (Park and Bell, 2004).

Acidi grassi: I grassi totali sono stati estratti per idrolisi acida come descritto nel metodo A riportato da Baldini et al. (Baldini et al., 1996). La composizione di acidi grassi ? stata determinata mediante gascromatografia secondo il metodo proposto da Kinik et al., 2005).

Carboidrati e zuccheri: Il contenuto totale di carboidrati e zuccheri ? stato determinato mediante cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC) come proposto da Baldini et al. (Baldini et al., 1996).

Fibra alimentare: Il contenuto totale di fibra alimentare ? stato determinato con un metodo enzimatico - gravimetrico proposto da Baldini et al. (Baldini et al., 1996) Proteine: Il contenuto totale di azoto ? stato determinato con un metodo Kjeldahl come descritto da Baker e Thompson (1992).

Sale: Il contenuto di sodio ? stato determinato mediante spettrofotometria ad assorbimento atomico secondo il metodo proposto da Baldini et al. (1996).

Risultati

Contenuto di acidi grassi

Come riportato nella Tabella 1, tutte e cinque le combinazioni selezionate presentavano un contenuto basso e trascurabile di acidi grassi saturi corti (SFA) e a catena media (MFA) con lunghezza della catena acile compresa tra C4:0 e C12: 0. La maggior parte di essi ha mostrato un contenuto inferiore allo 0,010%. Tra gli acidi grassi saturi e insaturi a catena lunga e molto lunga con numero pari e dispari di carbonio, acido miristico (C14:0), acido miristoleico (C14:1), acido eptadecanoico (C17:0), acido eptadecenoico (C17:1), acido arachico (C20:0), acido eicosenoico (C20:1), acido arachidonico (C20:4), acido wasico (C22:0), acido erucico (C22:1), acido lignocerico (C24:0) nessun livello significativo. L'acido palmitico (C16:0) presentava valori compresi tra 7,34 ? 0,15 e 8,88 ? 0,18% nelle cinque combinazioni selezionate, tenendo conto del valore pi? elevato nella combinazione 4, compreso l'avocado come quarto ingrediente. La combinazione 4 ha mostrato valori pi? elevati anche di forma insatura, acido palmitoleico (C16:1), sebbene le concentrazioni fossero nettamente inferiori all'acido palmitico (C16:0) in tutte le combinazioni. Non sono stati rilevati cambiamenti sostanziali in tutte e cinque le combinazioni per quanto riguarda il contenuto di acido stearico (C18:0) compreso tra 2,53 ? 0,05 e 2,92 ? 0,06%. Il basso contenuto complessivo di acidi grassi saturi a catena corta, media, lunga e molto lunga ha stabilito la sicurezza delle cinque combinazioni perch? un elevato apporto di acidi grassi saturi, considerato malsano, non sarebbe raccomandato (Zhao et al., 2018). L'acido oleico (C18:1) ha mostrato una concentrazione compresa tra 14,08 ? 0,14 e 19,19 ? 0,19% e, ancora una volta, la combinazione 4 incluso l'avocado ha mostrato il valore pi? elevato.

Il pi? alto contenuto di acidi palmitico (C16:0) e oleico (C18:1) in combinazione 4 riflette la composizione di acidi grassi di avocado che include gli acidi palmitico e oleico come le specie pi? abbondanti. L'alto contenuto di acido oleico in tutte le combinazioni ? molto promettente poich? la sua assunzione nell'uomo promuove effetti positivi contro lo sviluppo di malattie cardiovascolari e diabete mellito di tipo 2 (Granado-Casas & Mauricio, 2019). Un contenuto significativo di acido linoleico (C18: 2) ? stato apprezzato in tutte e cinque le combinazioni i cui valori vanno da 56,11 ? 0,56 a 61,82 ? 0,62%. Contrariamente a quanto affermato sopra, la combinazione 4 mostrava il contenuto inferiore di acido linoleico mentre la combinazione 1,2,3,5 mostrava valori simili. L'acido linoleico, considerato un acido grasso essenziale e antinfiammatorio, ? stato associato a un ridotto sviluppo di malattie cardiovascolari e diabete di tipo 2 (Marangoni et al. 2019). Il suo alto contenuto nelle cinque combinazioni soddisfa ampiamente l'assunzione raccomandata proposta dall'Autorit? europea per la sicurezza alimentare (EFSA) che stabilisce un adeguato e assunzione minima di acido linoleico del 4% di energia. Parere scientifico sui valori dietetici di riferimento per i grassi, inclusi acidi grassi saturi, acidi grassi polinsaturi, acidi grassi monoinsaturi, trans acidi grassi e colesterolo.

Il contenuto di acido linolenico (C18:3) variava da 11,41 ? 0,11 a 13,34 ? 0,13% esibendo valori pi? alti e simili nelle combinazioni 1-3 e valori leggermente inferiori nella combinazione 4-5. L'acido linolenico (C18:3) ? un acido grasso polinsaturo omega-3 (?3 PUFA) e non pu? essere sintetizzato dall'uomo; rappresenta il precursore di altri importanti PUFA ?-3 riconosciuti come acido eicosapentaenoico (EPA; 20:5 ?-3) e acido docosaesaenoico (DHA; 22:6 ?3). Diversi studi hanno dimostrato che il PUFA ?-3 esercita un effetto benefico contro le malattie cardiovascolari e neurogenerative, il diabete di tipo 2 e vari tipi di cancro (Shahidi e Ambigaipalan, 2018). Secondo l'EFSA, un'adeguata assunzione di acido linolenico corrisponde allo 0,5% di energia, suggerendo che, ancora una volta, le cinque combinazioni selezionate risultano una fonte eccellente e soddisfacente di acido linolenico. Vale la pena notare che gli acidi trans grassi (TFA) inclusi gli acidi trans oleico (C18:1), trans linoleico (C18:2) e trans linolenico (C18:2) hanno mostrato livelli trascurabili in tutte le combinazioni. I TFA sono acidi grassi insaturi che hanno uno o pi? doppi legami nella configurazione trans. Diversi studi indicano che i TFA dietetici sono associati a vari disturbi di salute come diabete, malattie cardiovascolari, obesit?, cancro al seno, infertilit? del cancro prostatico e malattia coronarica (El-Aal et al., 2019). I livelli pi? bassi di TFA rendono le combinazioni selezionate come preparati sani e sicuri per il consumo umano. Il contenuto totale di acidi grassi monosaturi (MUFA) era molto simile nelle combinazioni 1,2,3 e 5, circa il 3,25%. La combinazione 4 ha mostrato il valore pi? alto di MUFA (5,44 ? 0,54%) in conformit? con i dati precedenti riportati per l'avocado. Tuttavia, il contenuto totale di acidi grassi polinsaturi ha raggiunto valori elevati in tutte e cinque le combinazioni selezionate da 15,97 ? 1,60 a 17,79 ? 1,78% confermando che combinazioni di frutta e verdura selezionate forniscono un eccellente apporto di acidi grassi sani e benefici.

Tabella 1. Composizioni di acidi grassi espresse in percentuale (%) delle cinque combinazioni

Acido miristico (C14:0) 0.03 ? 0.01 0.03 ? 0.01 0.04 ? 0.01 0.04 ? 0.00 0.04 ? 0.01 Acido < 0.010 < 0.010 < 0.010 < 0.010 < 0.010 miristotelico(C14:1)

Acido palmitico(C16:0) 7.37 ? 0.15 7.34 ? 0.15 7.36 ? 0.15 8.88 ? 0.18 7.40 ? 0.15 Acido palmitoleico(C16:1) 0.12 ? 0.01 0.12 ? 0.01 0.12 ? 0.01 1.18 ? 0.04 0.12 ? 0.01 Acidoeptadecanoico 0.07 ? 0.02 0.07 ? 0.02 0.07 ? 0.02 0.07 ? 0.02 0.07 ? 0.02 (C17:0)

Acido eptadecanoico 0.02 ? 0.01 0.02 ? 0.01 0.02 ? 0.01 0.03 ? 0.01 0.02 ? 0.01 (C17:1)

Acido stearico (C18:0) 2.92 ? 0.06 2.89 ? 0.06 2.87 ? 0.06 2.53 ? 0.05 2.81 ? 0.06 Acido oleico (C18:1) 14.12 ? 0.14 14.21 ? 0.14 14.08 ? 19.19 ? 14.33 ?

0.14 0.19 0.14 Acido trans-oleico(C18:1) 0.03 ? 0.01 0.02 ? 0.01 0.03 ? 0.01 0.03 ? 0.01 0.03 ? 0.01 Acido linoileico(C18:2) 61.55 ? 0.62 61.47 ? 0.62 61.5 ? 0.62 56.11 ? 61.82 ?

0.56 0.62 Acido 0.06 ? 0.02 0.06 ? 0.02 0.06 ? 0.02 0.05 ? 0.02 0.06 ? 0.02 translinoleico(C18:2)

Acido linolenico(C18:3) 13.2 ? 0.13 13.28 ? 0.13 13.34 ? 11.41 ? 12.82 ?

0.13 0.11 0.13 Acido 0.09 ? 0.03 0.09 ? 0.03 0.09 ? 0.03 0.07 ? 0.02 0.09 ? 0.03 translinolenico(C18:3)

Adico arachico (C20:0) 0.10 ? 0.01 0.10 ? 0.01 0.10 ? 0.01 0.11 ? 0.01 0.10 ? 0.01 Acido eicosanoico 0.23 ? 0.03 0.23 ? 0.03 0.23 ? 0.03 0.22 ? 0.02 0.22 ? 0.02 (C20:1)

Acido arachidonico 0.01 ? 0.00 0.01 ? 0.00 0.01 ? 0.00 < 0.010 < 0.010 (C20:4)

Acido benico (C22:0) 0.03 ? 0.01 0.03 ? 0.01 0.03 ? 0.01 0.03 ? 0.01 0.03 ? 0.01 Acido erucico (C22:1) 0.01 ? 0.00 0.01 ? 0.00 0.01 ? 0.00 0.01 ? 0.00 0.01 ? 0.00 Acido lignocerico(C24:0) 0.01 ? 0.00 0.01 ? 0.00 0.02 ? 0.01 0.02 ? 0.01 0.01 ? 0.00 Acidi grassi monoinsatuti 3.23 ? 0.32 3.37 ? 0.34 3.08 ? 0.31 5.44 ? 0.54 3.43 ? 0.34 totali

Acidi grassi polinsaturi 16.97 ? 1.70 17.28 ? 1.73 15.97 ? 17.79 ? 17.43 ? totali 1.60 1.78 1.74 Sodio (Na) (mg/kg) 55.5 ? 11.1 59.9 ? 12.0 59.7 ? 11.9 55.5 ? 11.1 64.0 ? 12.8

Valore nutrizionale

Il contenuto di umidit? e cenere era simile in tutte e cinque le combinazioni, ad eccezione delle combinazioni 1 e 5 che mostravano, rispettivamente, una percentuale inferiore di cenere e umidit? (Tabella 2). Il contenuto totale di grassi era simile tra le cinque combinazioni che variavano dal 21,30 ? 0,64% al 23,3 ? 0,70% ad eccezione della combinazione 4 che mostrava un valore pi? elevato (26,29 ? 0,79%). Questo risultato non ? sorprendente poich? la combinazione 4 conteneva l'avocado come quarto ingrediente e il suo alto contenuto di acidi grassi mono e polinsaturi sani ? ben noto, recuperando rispettivamente il 66,2% e il 14,7% del contenuto lipidico totale (M?ndez-Z??iga et al., 2019) Al contrario, la concentrazione di acidi grassi saturi totali, considerato pericoloso per la salute umana, ? basso in tutte le combinazioni che vanno dal 2,25 ? 0,23% al 2,44 ? 0,24% ad eccezione della combinazione 4 che, ancora una volta, ha mostrato un valore leggermente superiore (3,07 ? 0,31%). Il valore energetico, espresso come Kcal o KJ /100 g, ? risultato altamente apprezzabile e comparabile in tutte e cinque le combinazioni, ad eccezione della combinazione 5 che mostrava un livello pi? elevato. Questo eccellente risultato, in termini di valore energetico, rende il super alimento un benefico preparato di frutta e verdura in grado di fornire energia ai consumatori sfruttando esclusivamente ingredienti naturali e salutari. Il contenuto totale di carboidrati e zuccheri era comparabile nelle combinazioni 1-4 mentre la combinazione 5 presentava valori almeno 3 volte superiori rispetto alle altre combinazioni. In effetti, la combinazione 5 includeva date che rappresentano una fonte stimabile di carboidrati (44-88%) come riportato in letteratura (Kuras et al., 2020).

Il contenuto della fibra alimentare totale variava da 4,2 ? 1,5% a 6,4 ? 2,2% nelle cinque combinazioni selezionate, raggiungendo il valore pi? alto nella combinazione 3 compresi i broccoli. Questo risultato ha stabilito che l'aggiunta di broccoli come quarto ingrediente ha arricchito la combinazione di fibre alimentari grazie al suo alto contenuto in questi componenti. (Kaczmarek et al.2019). Inoltre, la combinazione 3 mostrava anche un contenuto leggermente pi? elevato di proteine (8,4 ? 1,0%) rispetto alle altre combinazioni la cui gamma variava da 7,10 ? 0,85% a 8,2 ? 0,98%. Tuttavia, in tutte e cinque le combinazioni il contenuto proteico era pi? elevato rispetto ad altri preparati convenzionali, multifunzionali e fortificati (Supriyanti, FMT e Azizah, N. 2017; Kolawole et al., 2017), rivelando che le cinque preparazioni di frutta e verdura aumentano in modo soddisfacente l'assunzione di proteine. Infine, la concentrazione di sale era inferiore a 0,016 in tutte e cinque le combinazioni selezionate.

Tabella 2. Analisi nutrizionale ottenuta dalle cinque combinazioni.

Il termine ?Combo? significa Combinazione o composizione di combinazione.

Claims (13)

RIVENDICAZIONI

1. Composizione comprendente una componente nutrizionale vegetale di base comprendente Melograno, Noce e Moringa combinata con almeno una ulteriore componente nutrizionale vegetale selezionata tra avocado, cavolo, broccoli, mela e dattero, caratterizzata dal fatto che le tre componenti nutrizionali di base sono presenti in rapporti di 2,7-3,3 : 2,7-3,3 : 1,7-2,3, preferibilmente 3:3:2 e la ulteriore componente nutrizionale ? presente in un rapporto di 1,7-2,3, preferibilmente :2.

2. Composizione secondo la rivendicazione 1 comprendente Melograno, Noce e Moringa combinata con mela, in cui i componenti sono in un rapporto 3:3:2:2.

3. Composizione secondo la rivendicazione 1 comprendente Melograno, Noce e Moringa combinata con cavolo, in cui i componenti sono in un rapporto 3:3:2:2

4. Composizione secondo la rivendicazione 1 comprendente Melograno, Noce e Moringa combinata con broccoli, in cui i componenti sono in un rapporto 3:3:2:2

5. Composizione secondo la rivendicazione 1 comprendente Melograno, Noce e Moringa combinata con avocado, in cui i componenti sono in un rapporto 3:3:2:2

6. Composizione secondo la rivendicazione 1 comprendente Melograno, Noce e Moringa combinata con dattero, in cui i componenti sono in un rapporto 3:3:2:2

7. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni in cui le componenti nutrizionali vegetali e/o frutti sono in forma sminuzzata, frullata o di poltiglia vegetale.

8. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1-7 in forma liofilizzata e/o pastorizzata.

9. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1-8 in forma per la somministrazione orale in particolare di nutraceutico, integratore alimentare o per l?applicazione topica in particolare in forma di crema, pomata, maschera.

10. Composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1-9 per l?uso nel prolungare la longevit? di un individuo e/o per mantenere i parametri biochimici dell?organismo entro parametri fisiologici.

11. Uso topico di una composizione secondo una qualsiasi delle rivendicazioni 1-9 per migliorare un aspetto estetico di un individuo o i segni dell?invecchiamento della pelle come corrugazioni della pelle, rugosit?, inspessimento della pelle, disidratazione e raggrinzimento e photo-aging.

12. Uso secondo la rivendicazione 9 in cui detta composizione ? in forma per la somministrazione orale e di comprendere ulteriormente un veicolo fisiologicamente accettabile e un ulteriore ingrediente biologicamente attivo scelto tra vitamine, minerali, micronutrienti, estratti vegetali e loro miscele.

13. Composizione nutrizionale comprendente componenti nutrizionali vegetali comprendenti Melograno, Noce e Moringa in cui le componenti nutrizionali vegetali sono presenti in rapporti di 2,7-3,3 : 2,7-3,3 : 1,7-2,3, oppure 2,8-3,2 : 2,8-3,2 : 1,8-2,2, oppure 2,9-3,1 : 2,9-3,1 : 1,9-2,1, preferibilmente 3:3:2.