HUT73810A - 3-substituted-2-oxindoles as inhibitors of viral replication - Google Patents

Description

VÍRUSREPLIKÁCIÓT GÁTLÓ 3-SZUBSZTITUÁLT-2-OXINDOLOK3-SUBSTITUTED-2-OXINDOLS INFLUENCING VIRAL REPLACEMENT

A találmány tárgyát az (I) általános képletű 3-szubsztituált-2-oxindol-1-karboxamid származékok és gyógyászatilag elfogadható bázikus sóik - a képletbenThe present invention relates to 3-substituted-2-oxindole-1-carboxamide derivatives of the formula I and their pharmaceutically acceptable basic salts having the following formula:

X jelentése hidrogén-, klór- vagy fluoratom;X is hydrogen, chlorine or fluorine;

Y jelentése hidrogénatom vagy klóratom; ésY is hydrogen or chlorine; and

R jelentése benzil- vagy tienilcsoport, melyek adott esetben klór- vagy fluoratommal szubsztituáltak alkalmazása vírus replikáció gátlására, továbbá a vegyületek vírussal fertőzött emlősök kezelésére vagy fertőzésének megelőzésére szolgáló kezelésben való alkalmazása.R is benzyl or thienyl, optionally substituted with chlorine or fluorine to inhibit viral replication, and for use in treating or preventing infection of a virus-infected mammal.

A 4 569 942 számú USA-beli szabadalmi leírás olyan (II) általános képletű 2-oxindol-1-karboxamidot ismertet, melyekben többek között X jelentése hidrogén-, fluor-, klór-, brómatom, C,.₄ alkil-, C3.7 cikloalkil-, C₁₄ alkoxi-, C_}_₄ alkiltio-, trifluor-metil-, C^.4 alkil-szulfinil-, C_y.₄ alkil-szulfonil-, nitro-, fenil-, C₂.4 alkanoil-, benzoil-, teonil-, C^.4 alkán-amido-, benzamidovagy N,N-di(C₁₃ alkil)-szulfamoil-csoport;U.S. Patent 4,569,942 discloses 2-oxindole-1-carboxamide of formula II wherein X is, inter alia, hydrogen, fluorine, chlorine, bromine, C,. ₄ alkyl, C 3-7 cycloalkyl, C ₁₄ alkoxy, _C} _ ₄ alkylthio, trifluoromethyl, C ^ .4 alkyl sulfinyl, C _{y. 4} alkylsulfonyl, nitro, phenyl, C ₂ .4 alkanoyl, benzoyl, teonil-, C ^ .4 alkane amido, benzamidovagy N, N-di _(C13 alkyl) sulfamoyl group;

Y jelentése hidrogén-, fluor-, klór-, brómatom, C₁₄ alkil-,Y is hydrogen, fluorine, chlorine, bromine, C ₁₄ alkyl,

C3.7 cikloalkil-, (^.4 alkoxi-, C_V4 alkil-tio- vagy trifl uormetilcso port;C 3-7 cycloalkyl, (^ .4 alkoxy, C _V4 alkylthio or trifluoromethyl uormetilcso port;

R¹ jelentése C_V6 alkil-, C₃.₇ cikloalkil-, C₄.₇ cikloalkenil-,R ¹ is C _V 6 alkyl, C _{3rd 7} cycloalkyl, C ₄ . ₇ cycloalkenyl,

82289-4185A TF/SM fenil-, szubsztituált fenil-, fenil-C^ alkil-, (szubsztituált fenilj-C^ alkil-, (szubsztituált fenoxi)-C_v3 alkoxi-, (tiofenoxij-C^ alkoxi-, naftil-, biciklo[2.2.1 ]heptán-2-il-, biciklo[2.2.1]hept-5-én-2-il vagy -(CH₂)_n-Q-R csoport;82289-4185A TF / SM phenyl, substituted phenyl, phenyl-C 1-4 alkyl, (substituted phenyl-C 1-4 alkyl), (substituted phenoxy) -C _3-3 alkoxy, (thiophenoxy-C 1-4 alkoxy, naphthyl, bicyclo [2.2.1] heptan-2-yl, bicyclo [2.2.1] hept-5-en-2-yl or - (CH ₂ ) _n -R R;

n jelentése 0, 1 vagy 2;n is 0, 1 or 2;

Q jelentése kétértékű gyök, mely származhat a következő vegyületekből: furán, tiofén, pírról, pirazol, imidazol, tiazol, izotiazol, oxazol, izoxazol, 1,2,3-tiadiazol, 1,3,4-tiadiazol, 1,2,5- tiadiazol, tetrahidrofurán, tetrahidrotiofén, tetrahidropirán, tetrahidrotiopirán, piridin, pirimidin, pirazin, benzo[b]furán és benzo[b]-tiofén;Q is a divalent radical derived from furan, thiophene, pyridine, pyrazole, imidazole, thiazole, isothiazole, oxazole, isoxazole, 1,2,3-thiadiazole, 1,3,4-thiadiazole, 1,2,5 thiadiazole, tetrahydrofuran, tetrahydrothiophene, tetrahydropyran, tetrahydrothiopyran, pyridine, pyrimidine, pyrazine, benzo [b] furan and benzo [b] thiophene;

R jelentése hidrogénatom vagy alkilcsoport; ésR is hydrogen or alkyl; and

R² jelentése Οτ.θ alkil-, C3.7 cikloalkil-, benzil-, furil-, tienil-, piridil vagy (1) általános képletű csoport, ahol R³ és R⁴ jelentése egymástól függetlenül hidrogén-, fluor-, klóratom, C^.4 alkil-, C4.₄ alkoxi- vagy trifluormetilcsoport. Ebben a szabadalmi leírásban ismertetik továbbá, hogy a fenti 2-oxindol-1-karboxamidok ciklooxigenáz és lipoxigenáz inhibitorai, melyek analgetikus aktivitást fejtenek ki emlősökben, ennélfogva alkalmazhatók fájdalom kezelésében és krónikus betegségek, mint pl. gyulladások és fájdalommal járó reumatoid artritisz és orteoartritisz szimptómáinak enyhítésében.R ² is selected from the group consisting of C 1-7 alkyl, C 3-7 cycloalkyl, benzyl, furyl, thienyl, pyridyl and R ³ and R ⁴ independently of one another hydrogen, fluoro, chloro, C 1-4 alkyl, C 4. ₄ alkoxy or trifluoromethyl groups. This patent further discloses that the above 2-oxindole-1-carboxamides inhibitors of cyclooxygenase and lipoxygenase, which exhibit analgesic activity in mammals, are therefore useful in the treatment of pain and chronic diseases such as. alleviating the symptoms of inflammation and painful rheumatoid arthritis and orthoarthritis.

A 4 556 672 számú USA-beli szabadalmi leírás ismerteti a (Ili) általános képletű 3-acil-szubsztituált-2-oxindol-1-karboxamidokat, ahol X, Y és R¹ jelentése megegyezik a fenti 4 569 942 számú USA-beli szabadalmi leírásban megadottakkal.U.S. Patent 4,556,672 discloses 3-acyl-substituted-2-oxindole-1-carboxamides of Formula III wherein X, Y and R ¹ are as defined above in U.S. Patent 4,569,942. .

A 4 556 672 számú szabadalmi leírás vegyületei ugyanolyan aktivitással bírnak, mint a fentiekben tárgyalt 4 569 942 számú szabadalmi leírás vegyületei.The compounds of 4,556,672 have the same activity as the compounds of 4,565,942 discussed above.

A 4 861 794 számú USA-beli szabadalmi leírás ismerteti az (I) általános képletű vegyületek vagy gyógyászatilag elfogadható bázikus sóik - a képletben X jelentése hidrogén, klór- vagy fluoratom, Y jelentése hidrogén- vagy klóratom és R jelentése benzil- vagy tienilcsoport - alkalmazását interleukin-1 (IL-1) bioszintézis inhibitorként, továbbá IL-1 médiáit rendellenességek és diszfunkciók kezelésére.U.S. Patent 4,861,794 discloses the use of compounds of formula I or pharmaceutically acceptable basic salts thereof, wherein X is hydrogen, chlorine or fluorine, Y is hydrogen or chlorine, and R is benzyl or thienyl. interleukin-1 (IL-1) as an inhibitor of biosynthesis; and for the treatment of IL-1 mediated disorders and dysfunctions.

Az 5 118 703 számú USA-beli szabadalmi leírás ismerteti a (IV) általános képletű nem szteroid gyulladásgátló vegyületeket a képletben X és Y jelentése egymástól függetlenül hidrogén-, fluor- vagy klóratom; R¹ jelentése 2-tienil- vagy benzilcsoport; és R jelentése alkanoil- vagy cikloalkil-karbonil-, fenil-alkanoil-, benzoil- vagy bizonyos szubsztituált benzoilcsoportok, teonil-, omega-alkoxi-karbonil-alkanoil-, alkoxi-karbonil-, fenoxi-karbonil-, 1-alkoxi-karbonil-oxi-, alkil-szulfonil-, metil-fenil-szulfonil- vagy dialkil-foszfonát-csoport.U.S. Patent No. 5,118,703 discloses non-steroidal anti-inflammatory compounds of formula (IV) wherein X and Y are independently hydrogen, fluorine or chlorine; R ¹ is 2-thienyl or benzyl; and R is alkanoyl or cycloalkylcarbonyl, phenylalkanoyl, benzoyl or certain substituted benzoyl groups, theonyl, omega-alkoxycarbonylalkanoyl, alkoxycarbonyl, phenoxycarbonyl, 1-alkoxycarbonyl oxy, alkylsulfonyl, methylphenylsulfonyl or dialkylphosphonate.

Az 5 290 802 számú USA-beli szabadalmi leírás ismerteti az (V) általános képletű vegyületeket és azok gyógyászatilag elfogadható sóit - a képletbenU.S. Patent No. 5,290,802 discloses compounds of Formula V and pharmaceutically acceptable salts thereof, wherein

X jelentése hidrogén-, fluor-, klór-vagy brómatom, C,.₆ alkil-, C₃.₈ cikloalkil-, NO₂, CF₃, CN, SH, S(O)_mR³, OR⁴, COR⁴ vagy CONHR⁴R⁵;X is hydrogen, fluorine, chlorine or bromine; ₆ alkyl, C ₃ . ₈ cycloalkyl, NO ₂ , CF ₃ , CN, SH, S (O) _m R ³ , OR ⁴ , COR ⁴ or CONHR ⁴ R ⁵ ;

Y jelentése hidrogén-, fluor-, klór- vagy brómatom, C_v6 alkil-, C₃.₈ cikloalkil-, NO₂, CF₃, CN, SH, S(O)_qR¹⁷, OR¹⁸ vagy CONR¹⁸R¹⁹ képletű csoport;Y is hydrogen, fluorine, chlorine or bromine, C _v6 alkyl, C _{3rd 8} cycloalkyl, NO ₂ , CF ₃ , CN, SH, S (O) _q R ¹⁷ , OR ¹⁸ or CONR ¹⁸ R ¹⁹ ;

R¹ jelentése hidrogénatom, C₂.₁₀ alkanoil-, C₅.₇ cikloalkilkarbonil-, C₇.₁₀ fenil-alkanoil-, klór-benzoil-, metoxi-benzoil-, teonil-, omega-alkoxi-karbonil-alkanoil-csoport, ahol a fenti alkoxicsoport 1-3 szénatomos és a fenti alkanoilcsoport 3-5 szénatommal rendelkezik, C₂_₁₀ alkoxi-karbonil-, fenoxi-karbonil-, 1-(acil-oxi)-alkil-csoport, ahol az acilcsoport 1-4 szénatomos és a fenti alkilcsoport 2-4 szénatomos, 1-(alkoxi-karbonil-oxi)-alkilcsoport, ahol a fenti alkoxicsoport 2-5 szénatomos és a fenti alkilcsoport 1-4 szénatomos, alkilcsoport, C_V3 alkil-szulfonil-, metil-fenil-szulfonil- vagy dialkil-foszfonát-csoport, ahol a fenti alkilcsoportok mindegyike 1-3 szénatomos;R ¹ is hydrogen, C ₂ . ₁₀ alkanoyl, C ₅ . ₇ cycloalkylcarbonyl, C ₇ . _{10-phenyl-alkanoyl,} chlorobenzoyl, methoxybenzoyl, teonil-, omega-alkoxycarbonyl alkanoyl, wherein said alkoxy group and the above C1-3 alkanoyl group has 3-5 carbon atoms, C ₂ _ ₁₀ alkoxycarbonyl, phenoxycarbonyl, 1- (acyloxy) alkyl wherein the acyl group is C 1 -C 4 and the above alkyl group is C 2 -C 4, 1- (alkoxycarbonyloxy) alkyl in which the above alkoxy group of 2-5 carbon atoms and the above alkyl C 1-4, alkyl, C _V3, alkylsulfonyl, methylphenyl-sulfonyl or dialkylphosphonate group, wherein said alkyl is 1-3 carbon atoms;

R² jelentése COR⁶, CONR⁷R⁸, C^g alkil-, C₃.₈ cikloalkil-, fenil- vagy mono- vagy diszubsztituált fenilcsoport, ahol a szubsztituens(ek) jelentése klór-, fluor-, brómatom, C^g alkil-, C_v6 alkoxi- vagy CF₃-csoport;R ² is COR ⁶ , CONR ⁷ R ⁸ , C 1-8 alkyl, C ₃ . ₈ cycloalkyl, phenyl or mono- or disubstituted phenyl wherein the substituent (s) is chloro, fluoro, bromo, C ^ g alkyl, C _v6 alkoxy or CF ₃ group;

Q jelentése /^A Q is / ^A

Q¹x vagy Q²-A¹ csoport, aholQ ¹ x or Q ² -A ¹ , wherein

BB

A jelentése hidrogén-, fluor-, klór-, bróm-, jódatom, CF₃, OR⁹, S(O)pR¹⁰, COOR¹¹, CONR⁹R¹¹, CN, NO2, COR¹⁰, CH₂OR¹¹’A is hydrogen, fluorine, chlorine, bromine, iodine, CF ₃ , OR ⁹ , S (O) p R ¹⁰ , COOR ¹¹ , CONR ⁹ R ¹¹ , CN, NO 2, COR ¹⁰ , CH ₂ OR ¹¹ '

OCOR^10, NR⁹R¹¹' N(R⁹)COR¹¹, SO₂NR⁹R¹¹-csoport, (2)-(9) általános képletű csoport;OCOR ^10, NR ⁹ R ¹¹ 'N (R ⁹ ) COR ¹¹ , SO ₂ NR ⁹ R ^11, groups (2) to (9);

B jelentése hidrogén-, fluor-, klór-, bróm-, jódatom, CF₃, OR¹³, S(O)tR¹⁴, COOR¹⁵, CONR¹³R¹⁵, CN, NO2, COR¹⁴, CH2OR¹⁵' OCOR¹⁴, NR¹³R¹⁵, N(R¹³)COR¹⁵, SO2NR¹³R¹⁵-csoport, (2)-(9) általános képletű csoport;B is hydrogen, fluorine, chlorine, bromine, iodine, CF ₃ , OR ¹³ , S (O) t R ¹⁴ , COOR ¹⁵ , CONR ¹³ R ¹⁵ , CN, NO 2, COR ¹⁴ , CH ² OR ¹⁵ 'OCOR ¹⁴ , NR ¹³ R ^15, N (R ¹³⁾ COR ^15, SO2NR ¹³ R ¹⁵ group, (2) - (9) a group of formula;

azzal a kikötéssel, hogy A és B nem jelenthet egyszerre hidrogénatomot; vagywith the proviso that A and B cannot be hydrogen at the same time; obsession

A és B együttes jelentése egy oxocsoport, vagy amennyiben A jelentése hidrogénatomtól eltérő, akkor B jelentése a fentieken kívül lehet még ^.4 alkilcsoport is;A and B together represent an oxo group or, if A is other than hydrogen, then B may also be a (1-4C) alkyl group;

A¹ jelentése fluor-, klór-, bróm-, jódatom, CF₃, OR⁹, S(O)pR¹⁰, COOR¹¹, CONR⁹R¹¹, CN, NO2, COR¹⁰, CH₂OR¹¹’ OCOR^10, NR⁹R^11, N(R⁹)COR¹¹ vagy SO₂NR⁹R¹¹-csoport;A ¹ is fluorine, chlorine, bromine, iodine, CF ₃ , OR ⁹ , S (O) p R ¹⁰ , COOR ¹¹ , CONR ⁹ R ¹¹ , CN, NO 2, COR ¹⁰ , CH ₂ OR ¹¹ 'OCOR ^10, NR ⁹ R ^11, N (R ⁹ ) COR ¹¹ or SO ₂ NR ⁹ R ¹¹ ;

Q¹ jelentése (10) - (23) általános képletű csoport;Q ¹ is a group of formulas (10) to (23);

Q² jelentése (24) - (28) általános képletű csoport;Q ² is a group of formula (24) to (28);

m, n, p, q és t jelentése egymástól függetlenül 0, 1 vagy 2;m, n, p, q and t are each independently 0, 1 or 2;

W és Z jelentése oxigén- vagy kénatom, vagy NR¹¹ általános képletű csoport;W and Z are O, S, or NR ¹¹ ;

W¹ és W² jelentése egymástól függetlenül oxigén- vagy kénatom vagy NR¹⁰ általános képletű csoport, azzal a kikötéssel, hogy amikor W¹ és W² jelentése oxigén- vagy kénatom vagy NR¹⁰ csoport, akkor a másik jelentése oxigén- vagy kénatom;W ¹ and W ² are each independently oxygen or sulfur or NR ¹⁰ with the proviso that when W ¹ and W ² are oxygen or sulfur or NR ¹⁰ , the other is oxygen or sulfur;

R³, R⁶, R¹⁰, R¹⁴ és R¹⁷ egymástól függetlenül C^e alkil- vagy fenilcsoport,R ³ , R ⁶ , R ¹⁰ , R ¹⁴ and R ¹⁷ are each independently C 1-6 alkyl or phenyl,

R⁵, R⁸, R¹¹, R¹⁵ és R¹⁹ jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, C,.₆ alkil- vagy fenilcsoport;R ⁵ , R ⁸ , R ¹¹ , R ¹⁵ and R ¹⁹ are each independently hydrogen, C 1. ₆ alkyl or phenyl;

R⁴, R⁷, R⁹, R¹³ és R¹⁸ jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy C/.g alkilcsoport ésR ⁴ , R ⁷ , R ⁹ , R ¹³ and R ¹⁸ are each independently hydrogen or C 1-8 alkyl;

R¹² jelentése egymástól függetlenül hidrogén-, fluor-, klór-, brómatom, CF₃ vagy szénatomos alkilcsoport.R ¹² is independently H, F, Cl, Br, CF ₃ or alkyl.

A 4 569 942, 4 556 672, 4 861 794 és 5 290 802 számú USA-beli leírásokra referenciaként hivatkozunk jelen leírásunkban.U.S. Patent Nos. 4,569,942, 4,556,672, 4,861,794, and 5,290,802 are incorporated herein by reference.

Breen és társai a J. Immunoi. 144:480, 1990 irodalmi helyen kitanítást adnak arra nézve, hogy HIV-fertőzött egyének plazmájában az IL-6 szintje megnövekedett és az ilyen egyének monocita kultúráiban fokozott IL-6 termelés figyelhető meg.Breen et al., J. Immunol. 144: 480, 1990 teaches that plasma levels of IL-6 are increased in HIV-infected individuals and that IL-6 production is increased in monocyte cultures of such individuals.

Littmann és társai az Arch. Rheum. 36:5112, 1993 cikkben ismertetik, hogy tenidap [5-klór-3-(2-tenoil)-2-oxindol-1karboxamid] hatóanyaggal kezelt artritiszben szenvedő betegek plazmájában az IL-6 szint csökkent.Littmann et al., Arch. Rheum. 36: 5112, 1993 discloses that IL-6 levels are reduced in patients with arthritis treated with tenidap [5-chloro-3- (2-tenoyl) -2-oxindole-1-carboxamide].

A jelen találmány tárgya eljárás vírusfertőzésben szenvedő emlősök kezelésére, melynek során az érintett emlősnek az (I) általános képletű vegyület vagy annak gyógyászatilag alkalmazható sójának vírusreplikációt gátló mennyiségét adagoljuk. X jelentése H vagy Cl és R jelentése benzil vagy tienil, mindegyik lehet klórral vagy fluorral szubsztituált.The present invention relates to a method of treating a mammal suffering from a viral infection, comprising administering to said mammal a viral replication inhibiting amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. X is H or Cl and R is benzyl or thienyl, each of which may be substituted with chlorine or fluorine.

Más szempontból jelen találmány tárgya eljárás vírusreplikáció gátlására az illető vírussal fertőzött emlősben, az (I) általános képletű vegyület vírusreplikációt gátló mennyiségének az érintett szervezetbe való juttatásával.In another aspect, the present invention provides a method of inhibiting viral replication in a mammal infected with said virus by administering to said organism an amount of a compound of formula (I) that inhibits viral replication.

Jelen találmány tárgya továbbá eljárás AIDS-es emlősök kezelésére, melynek során az illető emlősnek az (I) általános kép letű vegyület vagy gyógyászatilag alkalmazható sójának a humán immundeficiencia vírus-1 (HIV-1) replikációját gátló mennyiségét adagoljuk - a képletben X jelentése hidrogén-, klór- vagy fluoratom, Y jelentése hidrogén- vagy klóratom és R jelentése benzilvagy tienilcsoport, mely utóbbi csoportok adott esetben klór vagy fluoratommal szubsztituáltak.The present invention further provides a method of treating AIDS mammals comprising administering to said mammal an amount of a compound of formula (I), or a pharmaceutically acceptable salt thereof, that inhibits human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) replication, wherein X is hydrogen. , chlorine or fluorine, Y is hydrogen or chlorine and R is benzyl or thienyl, the latter of which is optionally substituted with chlorine or fluorine.

További szempont szerint jelen találmány tárgya eljárás a HIV-1 replikáció gátlására HIV-1-gyel fertőzött emlősben azáltal, hogy az illető emlősnek az (I) általános képletű vegyület HIV-1 replikációt gátló mennyiségét adagoljuk.In a further aspect, the present invention provides a method of inhibiting HIV-1 replication in an HIV-1 infected mammal by administering to said mammal an amount of a compound of formula (I) that inhibits HIV-1 replication.

A jelen találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek és ezek gyógyászatilag alkalmazható bázikus sóikat - a képletben X jelentése hidrogén-, klór- vagy fluoratom, Y jelentése hidrogénvagy klóratom; és R jelentése benzil- vagy tienilcsoport, mely utóbbi csoportok adott esetben klór- vagy fluoratommal szubsztituáltak - és előállításukat a 4 556 672 és 5 290 802 számű USA-beli szabadalmi leírások ismertetik, amelyekre itt referenciaként hivatkozunk. Jelen találmány ezen vegyületek újfajta felhasználásával kapcsolatos, azaz eljárást nyújt vírusok replikációjának meggátlására és ilyen vírusokkal - beleértve a HIV-1 vírust is - fertőzött emlősök kezelésére. A jelen találmány vegyületei nem befolyásolják a Rous-szarkónma vírus aktivitását. Anélkül, hogy a hatásmechanizmus részleteibe merülnénk, ez arra utal, hogy a jelen találmány szerinti vegyületek specifikus módon hatnak, és nem fejtenek ki általános életképességet csökkentő hatást.Compounds of formula (I) of the present invention and pharmaceutically acceptable base salts thereof, wherein X is hydrogen, chlorine or fluorine, Y is hydrogen or chlorine; and R is a benzyl or thienyl group optionally substituted with chlorine or fluorine, and their preparation is described in U.S. Patent Nos. 4,556,672 and 5,290,802, which are incorporated herein by reference. The present invention relates to a novel use of these compounds, i.e., to a method of inhibiting viral replication and treating mammals infected with such viruses, including HIV-1 virus. The compounds of the present invention do not affect the activity of the Rous sarcoma virus. Without going into the details of the mechanism of action, this indicates that the compounds of the present invention act in a specific manner and do not exert an overall viability reduction effect.

A fent ismertetett eljárások során azon vegyületek alkalmazása előnyös, amelyeknél a fenti képletben X jelentése klóratom, Y jelentése hidrogénatom és R jelentése tienilcsoport; valamint ahol X jelentése fluoratom: Y jelentése klóratom és R jelentése tienil- vagy 4-klór-tién-2-il-csoport; továbbá ahol X jelentése fluoratom, Y jelentése klóratom és R jelentése 2-tienil-csoport; és ahol X jelentése hidrogénatom, Y jelentése klóratom és R jelentése benzilcsoport. Különösen előnyösek azok az eljárások, ahol X jelentése klóratom, Y jelentése hidrogénatom és R jelentése 2-tienil-csoport.In the methods described above, the use of compounds wherein X is chlorine, Y is hydrogen and R is thienyl is preferred; and wherein X is fluorine: Y is chlorine and R is thienyl or 4-chlorothien-2-yl; and wherein X is fluoro, Y is chloro and R is 2-thienyl; and wherein X is hydrogen, Y is chlorine and R is benzyl. Particularly preferred are processes wherein X is chlorine, Y is hydrogen and R is 2-thienyl.

Amint azt a 4 556 672 és 5 290 802 számú USA-beli szabadalmi leírások ismertetik, a fentiekben leírt jelen találmány szerinti vegyületek savas jellegűek és bázikus sókat képeznek. Minden ilyen bázikus só beletartozik a találmány tárgykörébe és a szabadalmi leírásban ismertetetteknek megfelelően képződhet. A találmány tárgykörén belüli ilyen sók közé tartoznak mind a szerves, mind a szervetlen típusok, valamint - nem kizárólagosan felölelik az ammóniával, szerves aminokkal, alkálifém-hidroxidokkal, alkálifém-karbonátokkal, alkálifém-hidrogén-karbonátokkal, alkálifém-hidridekkel, alkálifém-alkoxidokkal, alkáliföldfém-hidroxidokkal, alkáliföldfém-karbonátokkal, alkáliföldfém-hidridekkel és alkáli földfém-alkoxidokkal alkotott sók.As described in U.S. Patent Nos. 4,556,672 and 5,290,802, the compounds of the present invention described above are acidic and form basic salts. All such basic salts are within the scope of the invention and may be formed as described in the patent. Such salts within the scope of the invention include both organic and inorganic types and include, but are not limited to, ammonia, organic amines, alkali metal hydroxides, alkali metal carbonates, alkali metal hydrocarbons, alkali metal hydrides, alkali metal alkoxides, salts with alkaline earth metal hydroxides, alkaline earth metal carbonates, alkaline earth metal hydrides and alkaline earth metal alkoxides.

Ilyen bázikus sókat képező bázisokra reprezentatív példa az ammónia, primer aminok, mint pl. n-propil-amin, n-butil-amin, anilin, ciklohexil-amin, benzil-amin, p-toluidin, etanol-amin és glukamin; szekunder aminok, mint pl. dietil-amin, dietanol-amin, N-metil-glukamin, N-metil-anilin, morfolin, pirrolidin és piperidin;A representative example of such bases which form a basic salt is ammonia, primary amines such as, e.g. n-propylamine, n-butylamine, aniline, cyclohexylamine, benzylamine, p-toluidine, ethanolamine and glucamine; secondary amines, e.g. diethylamine, diethanolamine, N-methylglucamine, N-methylaniline, morpholine, pyrrolidine and piperidine;

a tercier aminok, mint pl. trietil-amin, trietanol-amin, N,N-dimetil-anilin, N-etil-piperidin és N-metil-morfolin; a hidroxidok, mint pl. nátrium-hidroxid; az alkoxidok, mint pl. nátrium-etoxid és kálium-metoxid; a hidridek, mint pl. kalcium-hidrid és nátrium-hidrid; és a karbonátok, mint pl. kálium-karbonát és nátrium-karbonát. Előnyösen a sóképzők a nátrium, kálium, ammónium, etanolamin, dietanol-amin és trietanolamin. Különösen előnyösek a nátriumsók.tertiary amines, e.g. triethylamine, triethanolamine, N, N-dimethylaniline, N-ethylpiperidine and N-methylmorpholine; hydroxides, e.g. sodium hydroxide; alkoxides such as sodium ethoxide and potassium methoxide; hydrides such as calcium hydride and sodium hydride; and carbonates, e.g. potassium carbonate and sodium carbonate. Preferably, the salt formers are sodium, potassium, ammonium, ethanolamine, diethanolamine and triethanolamine. Sodium salts are particularly preferred.

A találmány tárgykörébe tartoznak továbbá olyan szolvátok, mint pl. a fentiekben ismertetett vegyületek hemihidrátjai és monohidrátjai.The present invention also includes solvates such as, for example, solvates. hemihydrates and monohydrates of the compounds described above.

A jelen találmány szerinti eljárások közé tartozik a találmány vegyületeinek és azok gyógyászatilag alkalmazható bázikus sóinak adagolása emlősnek. Ezek a vegyületek és sóik alkalmazhatók az érintett emlős esetén egyedül, vagy előnyösebben gyógyászatilag alkalmazható vivőanyagokkal vagy oldószerekkel kombinálva gyógyászati készítményben, amely a szokásos gyógyászati gyakorlatnak megfelel. Az adagolás lehet orális vagy parenterális. Parenterális adagoláshoz tartozik - de nem korlátozva az itt említettekre - az intravénás, intramuszkuláris, intraperitoneális, szubkután, transzdermális és helyi, beleértve a szájöblögetést (de nem kizárólag azt), alkalmazás. Általánosságban azonban ajánlatosabb ezen vegyületek és sóik orális alkalmazása.The methods of the present invention include administering to the mammal the compounds of the invention and their pharmaceutically acceptable basic salts. These compounds and their salts may be used alone or, more preferably, in combination with pharmaceutically acceptable carriers or diluents, in a pharmaceutical composition that is in accordance with standard medical practice. The administration may be oral or parenteral. Parenteral administration includes, but is not limited to, intravenous, intramuscular, intraperitoneal, subcutaneous, transdermal, and topical application, including but not limited to rinsing. In general, however, oral administration of these compounds and their salts is more desirable.

Általában ezen vegyületek és sóinak leginkább kívánatos alkalmazott mennyisége kb. 40 mg és kb. 200 mg/nap határok között mozog orális adagolás esetén, és kb. 1 mg-tól kb. 200 mg/nap között parenterális adagolás esetén, de változtatások szükségesek lehetnek a kezelendő beteg súlyától függően. A megfelelő dózist, amely gátolja a vírusreplikációt és csökkenti a vírusfertőzés tüneteit emlősben a jelen találmány szerinti vegyület és sóinak alkalmazásával, véglegesen azok fogják meghatározni, akik ilyen vegyületek felírásában és/vagy adagolásában tájékozottak. Az is figyelembe veendő, hogy ebből a szempontból más variációk is előfordulhatnak a kezelendő emlős fajától és az illető gyógyszerre való egyéni válaszkészségtől függően, valamint a választott gyógyászati készítmény típusának sajátságaitól és az alkalmazott adagolási időtartamtól és intervallumtól függően. Egyes esetekben a fent ismertetett alsó határérték alatti dózismennyiség több lehet a kívánatosnál, míg más alkalmakkor nagyobb dózisokat alkalmazhatunk anélkül, hogy káros vagy ártalmas mellékhatások lépnének fel, ami úgy érhető el, hogy ezeket a nagyobb adagokat először néhány kisebbre osztjuk el, és ezeket a nap folyamán adagoljuk.In general, the most desirable amounts of these compounds and salts thereof are employed in the range of about 5 to about 10 mg. 40 mg and ca. It ranges from 200 mg / day for oral administration and approx. 1 mg to ca. 200 mg / day for parenteral administration, but adjustments may be necessary depending on the weight of the patient being treated. The appropriate dosage which will inhibit viral replication and reduce the symptoms of viral infection in a mammal using the compound of the present invention and its salts will be ultimately determined by those skilled in the art of prescribing and / or administering such compounds. It will also be appreciated that other variations in this regard may occur depending on the species of mammal being treated and the individual response to the drug in question, as well as the nature of the type of pharmaceutical composition chosen and the dosage period and interval used. In some cases, doses below the lower limit described above may be more than desirable, while at other times higher doses may be used without adverse or deleterious side effects, which may be achieved by first dividing these higher doses into a few smaller doses. dosing.

Orális adagolás céljára az adalékanyagokat - mint pl. nátrium-citrát, kalcium-karbonát és dikalcium-foszfát - tartalmazó tablettákat különböző dezintegráló szerrel alkalmazzuk, mint pl. keményítő, előnyösen burgonya- vagy tápiókakeményítő, alginsav és egyes komplex szilikátok; és ragasztószerekkel együtt, mint pl. poli(vinil-pirrolidon), szukróz, zselatin és arabmézga. Továbbá sikosítószerek, mint például, de nem kizárólag, magnézium-sztearát, nátrium-lauril-szulfát és talkum gyakran hasznosak tablettaelőállítás céljára. Hasonló típusú szilárd készítményeket alkalmazhatunk továbbá lágy elasztikus és kemény zselatinkapszulák töltőanyagaiként; ebben a vonatkozásban előnyös anyagok közé tartoznak - de nem kizárólagosan - például a laktóz vagy tejcukor, valamint a nagy molekulatömegű poli(etilén-glikolok). Amennyiben vizes szuszpenzió vagy elixir kívánatos az orális adagoláshoz, az esszenciális hatóanyagot kombinálhatjuk különféle édesítő- vagy ízesítőszerrel, színezőanyagokkal vagy festékanyagokkal, és szükség esetén emulgeáló és/vagy szuszpendálószerekkel, hígítószerrel együtt, mint pl. víz, etanol, propilénglikol, glicerin és ezek különböző kombinációi.For oral administration, additives, such as e.g. Tablets containing sodium citrate, calcium carbonate and dicalcium phosphate are used with various disintegrating agents, e.g. starch, preferably potato or tapioca starch, alginic acid and some complex silicates; and adhesives such as. polyvinylpyrrolidone, sucrose, gelatin and gum arabic. Further, lubricating agents such as, but not limited to, magnesium stearate, sodium lauryl sulfate, and talc are often useful for the preparation of tablets. Solid compositions of a similar type may also be employed as fillers in soft elastic and hard gelatin capsules; preferred materials in this regard include, but are not limited to, lactose or milk sugar, and high molecular weight polyethylene glycols. Where an aqueous suspension or elixir is desired for oral administration, the active ingredient may be combined with various sweetening or flavoring agents, coloring agents or coloring agents and, where appropriate, emulsifying and / or suspending agents, such as diluents. water, ethanol, propylene glycol, glycerol and various combinations thereof.

Noha a jelen találmány szerinti vegyületnek és azok gyógyászatilag alkalmazható sóinak előnyös adagolási módja orális, ugyancsak alkalmazhatók parenterálisan is.Although the preferred route of administration of the compound of the present invention and their pharmaceutically acceptable salts is oral, they may also be administered parenterally.

Parenterális adagolás céljára a jellemző vegyületek oldatai szezám- vagy mogyoróolajban vagy vizes propilén-glikolban alkalmazhatók, csakúgy, mint az előzőekben felsorolt megfelelő vízoldékony bázikus sók steril vizes oldatai. Ezen vizes oldatoknak szükség esetén megfelelő pufferral kell rendelkeznie, és a vizes oldószert megfelelő fiziológiás só vagy glukóz oldattal izotóniássá kell alakítani. Ezek a sajátos vizes oldatok speciálisan alkalmasak intravénás, intramuszkuláris és szubkután injekciós célokra. Ebben a vonatkozásban az alkalmazott steril vizes közegek standard technikákkal ismert módon könnyen nyerhetők az e téren járatosak számára. Például a desztillált víz szokásosan használatos oldószerként, és a végső készítményt egy megfelelő baktériumszűrőn vezetik keresztül, mint a zsugorított üvegszűrő vagy diatomaföld vagy máz nélküli porcelánszűrő. E típusok közül előnyös szűrők a Berkefeld, a Chamberland és az Asbestos Disk-Metal Seitz-szűrők, amelyeknél a folyadékot egy szívópumpa segítségével egy steril tartályba szívjuk.For parenteral administration, solutions of the representative compounds can be used in sesame or peanut oil or in aqueous propylene glycol, as well as sterile aqueous solutions of the corresponding water-soluble basic salts listed above. These aqueous solutions should be suitably buffered, if necessary, and the aqueous solvent should be rendered isotonic with a suitable physiological salt or glucose solution. These particular aqueous solutions are specifically suitable for intravenous, intramuscular and subcutaneous injection purposes. In this regard, the sterile aqueous media employed are readily obtainable by one skilled in the art by standard techniques. For example, distilled water is commonly used as a solvent and the final composition is passed through a suitable bacterial filter, such as a sintered glass filter or a diatomaceous earth or unglazed porcelain filter. Preferred filters of these types are the Berkefeld, Chamberland and Asbestos Disk-Metal Seitz filters, in which the liquid is aspirated into a sterile container using a suction pump.

Ezen injektálható oldatok előállítása során megfelelő lépéseket kell tenni annak biztosítására, hogy a végső terméket steril körülmények között tartsuk. Transzdermális adagolás céljára a jellemző vegyület alkalmazási formája lehet például oldat, lotion, kenőcs, krém, gél, kúp, felszabadulás-limitált prolongált felszabadulású készítmény és ezekhez szolgáló eszközök. Ezek az alkalmazási formák tartalmazzák a speciális vegyületet, tartalmazhatnak továbbá etanolt, vizet, penetrációt fokozó szert és inért vivőanyagokat, mint gélképzőszerek, ásványi olajok, emulgeáló szerek, benzil-alkohol és hasonlók. Specifikus bőrön keresztüli behatolást elősegítő készítményeket ismertet az 5 196 410 számú USA-beli szabadalmi leírás, amelynek megállapításai itt referenciaként szerepelnek. Helyi alkalmazás céljára a speciális vegyület adagolási formája lehet például (de nem kizárólagosan) oldat, lotion, kenőcs, krém és gél.When preparing these injectable solutions, appropriate steps must be taken to ensure that the final product is maintained under sterile conditions. For transdermal administration, the representative compound may be formulated into solutions, lotions, ointments, creams, gels, suppositories, sustained release formulations, and devices therefor. These formulations contain the special compound and may also include ethanol, water, penetration enhancers and inert carriers such as gelling agents, mineral oils, emulsifiers, benzyl alcohol and the like. Specific dermal penetration enhancers are described in U.S. Patent 5,196,410, the disclosure of which is incorporated herein by reference. For topical application, the dosage form of the special compound may include, but is not limited to, solutions, lotions, ointments, creams and gels.

Bár a fenti (I) általános képletű vegyületeket ketonként mutattuk be, kijelentjük, hogy az (I) általános képletű vegyületek magukba foglalják az enol tautomer formákat is. Minden ilyen tautomer forma a találmány tárgykörébe tartozik. Továbbá az (I) általános képletű enol formájának 3. pozíciójánál levő exociklikus kettős kötés szubsztituensei lehetnek szín, anti vagy kevert térállásúak. Minden ilyen izomert az (I) képlettel ábrázolhatónak tartunk, és azokat felölelik a csatolt szabadalmi igénypontok.Although the compounds of formula (I) above have been described as ketones, it is stated that the compounds of formula (I) include enol tautomeric forms. All such tautomeric forms are within the scope of the invention. Further, the exocyclic double bond substituents at the 3-position of the enol form of Formula I may be color, anti or mixed. All such isomers are intended to be represented by the formula (I) and are encompassed by the appended claims.

A jelen találmány szerinti vegyületek azon képességét, hogy gátolják a HIV-1 replikációját és enyhítik az AIDS tüneteit, a következő példa mutatja be.The ability of the compounds of the present invention to inhibit HIV-1 replication and alleviate the symptoms of AIDS is illustrated by the following example.

1. példaExample 1

Sejtek és vírusCells and virus

H9 és Jurkat CD4⁺-T-limfocita sejtvonalakat és U937 monocita sejtvonalat (American Type Culture Collection (ATCC), Rockville, MD) tenyésztettünk Roswell Park Memóriái Institute Culture Médium (RPMI-1640)-ben, amit az alábbiakkal egészítettünk ki: 10 % borjúszérum (BCS), 100 U/ml penicillin, 100 pg/ml streptomycin, 2 pg/ml ciproflaxacin, 600 pg/ml α-glutamin és 100 pmol/l nemesszenciális aminosav. HIV_MN termelődött a H9 sejtekben. A logaritmikus növekedési fázis alatt a sejtmentes felülúszót összegyűjtöttük, 0,22 pm-es filteren átszűrtük, és -70°C-on egyenlő részekre osztva lefagyasztottuk. A HIV_MN titert a H9 sejteken végponthígítással mértük (I. Marshall és mtsai, J. Virol. 66:5492, 1992) a szinciciumképzést tekintve végpontnak. Az 50 %-os szövetkultúra infekciós dózist (TCID₅₀) az infekciót követőH9 and Jurkat CD4 ⁺ T-lymphocyte cell lines and U937 monocyte cell line (American Type Culture Collection (ATCC), Rockville, MD) were cultured in Roswell Park Memorial Institute Culture Medium (RPMI-1640) supplemented with 10% calf serum (BCS), 100 U / ml penicillin, 100 pg / ml streptomycin, 2 pg / ml ciproflaxacin, 600 pg / ml α-glutamine and 100 pmol / l non-essential amino acid. HIV _{MN was} produced in H9 cells. During the logarithmic growth phase, the cell-free supernatant was collected, filtered through a 0.22 µm filter and frozen at -70 ° C. HIV _MN titer was measured on H9 cells by end point dilution (I. Marshall et al., J. Virol. 66: 5492, 1992) as the end point for syncytium formation. The 50% tissue culture infectious dose (TCID ₅₀ ) after infection

7. napon határoztuk meg.It was determined on day 7.

Reagensek: Az (I) általános képletű vegyületeket mindegyik kísérlethez frissen állítottuk elő foszfát puffer tartalmú fiziológiás sóoldatban (PBS) és szűréssel sterilizáltuk. Liofilizált rekombináns humán IL-6-ot (Endogén Inc., Boston, MA) állítottunk elő PBS-ben 2500 egység/ml koncentrációban, melynek aktivitása 5x10⁶ egység/mg.Reagents: For each experiment, compounds of Formula I were freshly prepared in phosphate buffered saline (PBS) and sterilized by filtration. Lyophilized recombinant human IL-6 (Endogen Inc., Boston, MA) was prepared in PBS at 2500 units / ml with 5x10 ⁶ units / mg activity.

A HIV-1 p24 mag-antigén gátlása az (I) képletű vegyületekkelInhibition of HIV-1 p24 core antigen by compounds of formula (I)

Minden sejtet HIV_MN-nel fertőztünk.All cells were infected with HIV _MN .

A fertőzést követően a sejteket háromszor mostuk át RPMI1640-ben (10 % BCS) a maradék vírusok eltávolítására, és 37 °C-on CO₂-ben inkubáltuk az (I) általános képletű vegyület különböző koncentrációjának jelenlétében. A 3. (H9), a 7. (Jurkat) vagy a 11. (U937) napon a p24 antigént mértük a sejtmentes felülúszókban p24 ELISA (DuPont NEN, Boston, MA) módszerrel, és a sejt életképességét tripankék festéssel határoztuk meg.Following infection, the cells were washed three times in RPMI1640 (10% BCS) to remove residual viruses and incubated at 37 ° C in CO ₂ in the presence of various concentrations of the compound of formula (I). On day 3 (H9), day 7 (Jurkat) or day 11 (U937), p24 antigen was measured in cell-free supernatants by p24 ELISA (DuPont NEN, Boston, MA) and cell viability was determined by tripank blue staining.

A HIV-1 gyengítése (Long terminál repeat) LTR mediálta génexpresszióAttenuation of HIV-1 (Long terminal repeat) LTR-mediated gene expression

Akár a HIV-1 LTR-ből, akár a Rous-szarkóma vírus (RSV) LTR-ből származó génaktivitást úgy mérjük, hogy a Jurkat sejteket átmenetileg olyan megfelelő vektorok révén fertőzzük, amelyek az LTR-t kloramfenikol-acetil-transzferáz (CAT) reporter génhez kötve tartalmazzák. A HIV-1 LTR Cat vektort Dr. Gary Nabel és Dr. Dávid Baltimore állította elő, és azt Dr. Nabeltől kaptuk meg a Howard Hughes Medical Institute, University of Michigan Medical Centerből. Az RSV LTR vektort Dr. Debajit Biswastól szereztük be a Dana Farber Cancer Institute-ból. [Biswas és mtsai, J. Acquir. Immuné Defic. Syndr. 6:778, 1993.] A Jurkat sejteket (106 sejt/ml) 150 mm-es korongokon tenyésztettük 20 ml RPMJ-1640-ben, ami 10 % fötális marhaszérumot tartalmazott, °C-on, 5 % CO2 mellett, 12-18 órán át éjszaka, mielőtt megkezdtük a trnszfekció végzését. A sejteket pelletekké alakítottuk, 10 ml preekvilibrált transzfekciós közegben reszuszpendáltuk [Somapyrac és társai, Proc. Nat. Acad. Sci USA 78:7575, 1981] és korongonként 2,5 pg expressziós plazmiddal és 12,5 pg szonifikált lazacikra DNS vivőanyagokkal oltottunk be dietil-amino-etil (DEAE)-dextrán eljárással (lásd Somapyrac és mtsai, Proc. Nat. Acad, Sci USA 78.:7575, 1981). A sejteket - miután 1 órán át 37 °C-on tartottuk őket - 5 percig dimetil-szulfoxidal ráztuk össze, átmostuk, majd egy teljes közegben új tenyésztőtányérokon reszuszpendáltuk. Negyvennyolc óra múlva 5 ml friss tenyésztőfolyadékot adtunk hozzá és a sejtek további 8 órán keresztül szaporodtak. A beoltás után ötvennégy órával a sejteket 20 pg/ml forbol-12-mirisztát-13-acetáttal (PMA) stimuláltuk különböző koncentrációjú (0,3, 1,0, 3,0, 30 és 90 pg/ml) (I) általános képletű vegyület jelenlétében ill. annak hiányában, és tovább hagytuk szaporodni éjszaka 12-18 órát. A beoltás után hetvenkét órával és a szer hozzáadása után 12-18 órával a sejteket összegyűjtöttük, citoplazma kivonatot nyertünk a Dignauc és mtsai (Nucleic Acids Rés. 11:1475, 1983) kitanítása szerint. A CAT aktivitást vékonyréteg-kromatográfiával mértük Sodorski és mtsai szerint (Science 227:171, 1985), miután standardizáltuk a sejt-extraktumokat fehérjetartalom szempontjából (Bradford, Amal. Biochem. 72:248, 1976). A vékonyréteg-kromatogrammokat (Baker-Flex Silica Gél 1B, J. T. Baker Phillipsburg, NJ) röntgenfilmre exponáltuk egy éjszakán át. A [¹⁴C] kloramfenikol [(50-60 mCi/(mmol/liter)] (Du Pont NEN, Boston, MA) és acetilezett származékai reagálatlan relatív mennyiségeit a film denzitometriás scannelésével határoztuk meg egy LKB 2222-020 Ultro-Scan XL Laser Densitometer (LKB Instruments, ·· ·· · * ’··»«*· « ···· · · ·Gene activity from either the LTR of HIV-1 or the LTR of Rous sarcoma virus (RSV) is measured by transiently infecting Jurkat cells with appropriate vectors that express LTR with chloramphenicol acetyltransferase (CAT). reporter gene. The HIV-1 LTR Cat vector was produced by Dr. Gary Nabel and Dr. David Baltimore and was obtained from Dr. Nabel from the Howard Hughes Medical Institute, University of Michigan Medical Center. RSV LTR vector was obtained from Dr. Debajit Biswas of Dana Farber Cancer Institute. [Biswas et al., J. Acquir. Immune Defic. Syndr. 6: 778, 1993.] Jurkat cells (106 cells / ml) were cultured on 150 mm disks in 20 ml RPMJ-1640 containing 10% fetal bovine serum at 5 ° C, 5% CO2, 12-18 hours at night before we started transfection. Cells were transformed into pellets and resuspended in 10 ml pre-equilibrated transfection medium (Somapyrac et al., Proc. Nat. Acad. Sci USA 78: 7575, 1981] and inoculated with 2.5 pg expression plasmid and 12.5 pg sonicated salmon goat DNA carriers per diethylaminoethyl (DEAE) -dextran method (see Somapyrac et al., Proc. Nat. Acad. Sci USA 78: 7575 (1981). After 1 hour at 37 ° C, the cells were shaken for 5 minutes with dimethylsulfoxide, washed and resuspended in new media in a complete medium. After forty-eight hours, 5 ml of fresh culture medium was added and the cells multiplied for an additional 8 hours. Fifty-four hours after inoculation, cells were stimulated with 20 pg / ml phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA) at various concentrations (0.3, 1.0, 3.0, 30, and 90 pg / ml). in the presence of a compound of formula in its absence, and allowed to multiply overnight for 12-18 hours. Seventy-two hours after inoculation and 12-18 hours after drug addition, cells were harvested to obtain cytoplasmic extract as taught by Dignauc et al., Nucleic Acids Res. 11: 1475, 1983. CAT activity was measured by thin layer chromatography according to Sodorski et al. (Science 227: 171, 1985) after standardizing cell extracts for protein content (Bradford, Amal. Biochem. 72: 248, 1976). Thin layer chromatograms (Baker-Flex Silica Gel 1B, JT Baker Phillipsburg, NJ) were exposed to X-ray film overnight. Unreacted relative amounts of [ ¹⁴ C] chloramphenicol [(50-60 mCi / (mmol / liter))] (Du Pont NEN, Boston, MA) and acetylated derivatives were determined by densitometric scanning of a film using an LKB 2222-020 Ultro-Scan XL Laser Densitometer (LKB Instruments, · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

Houston, TX) készülék segítségével, majd a görbe csúcsa alatti terület integrálásávalHouston, TX) and then integrating the area under the peak of the curve

EredményekResults

Az (I) általános képletű vegyületek csökkentik a HIV-1 replikációjának mértékét dózisfüggő módon, amint azt p24-magantigén méréssel kimutattuk akutan fertőzött H9, Jurkat és U937 sejtekben. Jellemzően az 50 %-os inhibitorkoncentráció (IC₅₀) kisebb, mint 1 pg/ml a Jurkat sejtek esetében és 3-5 pg/ml a H9 és U937 sejtek esetében. Az 50 %-os letális dózis (LD₅₀) tripánkék festéssel vizsgálva 25-40 pg/ml közötti. A terápiás index, amit az (LD₅₀) és az IC₅₀ aránya határoz meg, becslés alapjánCompounds of Formula I reduce the rate of HIV-1 replication in a dose-dependent manner, as detected by p24 nuclear antigen measurement in acutely infected H9, Jurkat and U937 cells. Typically, the 50% inhibitor concentration (IC ₅₀ ) is less than 1 pg / ml for Jurkat cells and 3-5 pg / ml for H9 and U937 cells. The 50% lethal dose (LD ₅₀ ) when tested with trypan blue staining is 25-40 pg / ml. The therapeutic index, defined as the ratio of (LD ₅₀ ) to IC ₅₀ , is estimated

7-től (H9 és U937 sejtek) >25-ig (Jurkat sejtek) terjed.7 (H9 and U937 cells) to 25 (Jurkat cells).

Megjegyezzük, hogy a találmány tárgyát képezik továbbá az előzőkben ismertetett kezelési eljárásokban alkalmazható gyógyászati készítmények, melyek az (I) általános képletű 3-szubsztituált-2-oxindol-1-karboxamid-származékokat vagy gyógyászatilag elfogadható bázikus sóikat tartalmazzák hatóanyagként, illetve ezen hatóanyagok gyógyászati készítmények előállítására való alkalmazása.It is also to be noted that the present invention also provides pharmaceutical compositions for use in the above-described methods of treatment containing the 3-substituted-2-oxindole-1-carboxamide derivatives of formula (I) or their pharmaceutically acceptable basic salts as active ingredients, or pharmaceutical compositions thereof. application.

Claims (36)

Szabadalmi igénypontok:Patent claims: 1. Eljárás HIV-1 replikáció gátlására emlősben, azzal jellemezve, hogy a rászoruló emlősnek az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyászatilag alkalmazható sójának HIV-1 replikációt gátló mennyiségét adagoljuk - a képletbenA method for inhibiting HIV-1 replication in a mammal, comprising administering to said mammal in need thereof an amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof, which inhibits HIV-1 replication, wherein X jelentése hidrogén-, klór- vagy fluoratom;X is hydrogen, chlorine or fluorine; Y jelentése hidrogénatom vagy klóratom; és R jelentése benzil- vagy tienilcsoport, melyek adott esetben klór- vagy fluoratommal szubsztituáltak.Y is hydrogen or chlorine; and R is benzyl or thienyl optionally substituted with chlorine or fluorine. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése klóratom; Y jelentése hidrogénatomjés R jelentése tienilcsoport.2. A process according to claim 1 wherein X is chlorine; Y is hydrogen and R is thienyl. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben R jelentése 2-tienil-csoport.3. A process according to claim 2 wherein R is 2-thienyl. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a gyógyászatilag alkalmazható bázikus sóként nátriumsót alkalmazunk.The process of claim 3 wherein the pharmaceutically acceptable basic salt is a sodium salt. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése fluoratom; Y jelentése klóratom; és R jelentése tienil- vagy 4-kiór-tién-2-iI-csoport.The process of claim 1 wherein X is fluoro; Y is chlorine; and R is thienyl or 4-chlorothien-2-yl. 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben R jelentése 4-klór-tién-2-il-csoport.6. The process of claim 5 wherein R is 4-chlorothien-2-yl. • < «« ·«··«4 • · · « 4· · • ««·» ·4«• <«« · «··« 4 • · · «4 · · •« «·» · 4 « 7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése hidrogénatom; Y jelentése klóratom; és R jelentése benzilcsoport.7. A process according to claim 1 wherein X is hydrogen; Y is chlorine; and R is benzyl. 8. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet vagy gyógyászatilag alkalmazható bázikus sóját orálisan adagoljuk.8. The method of claim 1, wherein the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered orally. 9. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet vagy gyógyászatilag alkalmazható sóját parenterálisan adagoljuk.9. The method of claim 1, wherein the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered parenterally. 10. Eljárás AIDS kezelésére vagy megelőzésére emlősben, azzal jellemezve, hogy a rászoruló emlősnek az (I) általános képletű vegyület vagy annak gyógyászatilag alkalmazható bázikus sójának hatékony mennyiségét adagoljuk - a képletben10. A method of treating or preventing AIDS in a mammal, comprising administering to the mammal in need thereof an effective amount of a compound of Formula I, or a pharmaceutically acceptable base salt thereof, wherein X jelentése hidrogén-, klór- vagy fluoratom;X is hydrogen, chlorine or fluorine; Y jelentése hidrogén- vagy klóratom; ésY is hydrogen or chlorine; and R jelentése benzil- vagy tienilcsoport, melyek adott esetben klór- vagy fluoratommal szubsztituáltak.R is benzyl or thienyl optionally substituted with chlorine or fluorine. 11. A 10. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése klóratom; Y jelentése hidrogénatom; és R jelentése tienilcsoport.11. A process according to claim 10 wherein X is chlorine; Y is hydrogen; and R is thienyl. 12. A 11. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben R jelentése 2-tienil-csoport.12. A process according to claim 11 wherein R is 2-thienyl. 13. A 12. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben a gyógyászatilag alkalmazható bázikus sóként nátriumsót alkalmazunk.13. The process of claim 12 wherein the pharmaceutically acceptable basic salt is a sodium salt. 14. A 10. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése fluoratom; Y jelentése klóratom; és R jelentése tienil- vagy 4-klór-tién-2-il-csoport.14. A process according to claim 10 wherein X is fluorine; Y is chlorine; and R is thienyl or 4-chlorothien-2-yl. 15. A 14. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben R jelentése 2-klór-tién-2-il-csoport.15. A process according to claim 14 wherein R is 2-chlorothien-2-yl. 16. A 10. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése hidrogénatom; Y jelentése klóratom és R jelentése benzilcsoport.A process according to claim 10 wherein X is hydrogen; Y is chlorine and R is benzyl. 17. A 10. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet vagy gyógyászatilag alkalmazható sóját orálisan adagoljuk.17. The method of claim 10, wherein the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered orally. 18. A 10. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet vagy gyógyászatilag alkalmazható sóját parenterálisan adagoljuk.18. The method of claim 10, wherein the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered parenterally. 19. Eljárás vírusreplikáció gátlására emlősben, azzal jellemezve, hogy a rászoruló emlősnek az (I) általános képlet szerinti vegyület vagy gyógyászatilag alkalmazható bázikus sójának vírusreplikációt gátló mennyiségét adagoljuk - ahol a képletben X jelentése hidrogén-, klór- vagy fluoratom;19. A method of inhibiting viral replication in a mammal comprising administering to said mammal in need thereof an amount of a compound of formula (I), or a pharmaceutically acceptable base salt thereof, for inhibiting viral replication wherein X is hydrogen, chlorine or fluorine; Y jelentése hidrogén- vagy klóratom; ésY is hydrogen or chlorine; and R jelentése benzil- vagy tienilcsoport, melyek adott esetben klór- vagy fluoratommal szubsztituáltak, azzal a kikötéssel, hogy a vírus nem Rous-szarkóma vírus.R is benzyl or thienyl optionally substituted with chlorine or fluorine, with the proviso that the virus is not a Rous sarcoma virus. ··· ··♦· 4» • <· • ·* ··· *«· «· a« · ···· ·· ♦ · 4 »• <· • · * ··· *« · «· a« · · 20. A 19. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése klóratom; Y jelentése hidrogénatom; és R jelentése tienilcsoport.20. A process according to claim 19 wherein X is chlorine; Y is hydrogen; and R is thienyl. 21. A 20. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben R jelentése 2-tienil-csoport.21. A process according to claim 20 wherein R is 2-thienyl. 22. A 21. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a gyógyászatilag alkalmazható bázikus sóként nátriumsót alkalmazunk.22. The process of claim 21, wherein the pharmaceutically acceptable basic salt is a sodium salt. 23. A 19. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése fluoratom; Y jelentése klóratom; és R jelentése tienil- vagy 4-klót-tién-2-il-csoport.23. The process of claim 19 wherein X is fluoro; Y is chlorine; and R is thienyl or 4-chlorothien-2-yl. 24. A 23. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben R jelentése 2-klór-tién-2-il-csoport.24. The process of claim 23 wherein R is 2-chlorothien-2-yl. 25. A 19. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése hidrogénatom; Y jelentése klóratom; és R jelentése benzilcsoport.25. A process according to claim 19 wherein X is hydrogen; Y is chlorine; and R is benzyl. 26. A 19. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet vagy gyógyászatilag alkalmazható bázikus sóját orálisan adagoljuk.26. The method of claim 19, wherein the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered orally. 27. A 19. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet vagy gyógyászatilag alkalmazható bázikus sóját parenterálisan alkalmazzuk.27. The method of claim 19, wherein the compound or a pharmaceutically acceptable base salt thereof is administered parenterally. 28. Eljárás vírusfertőzés kezelésére vagy megelőzésére emlősben, azzal jellemezve, hogy a rászoruló emlősnek az (I) ···· 4» ··· • 4« általános képletű vegyület vagy annak gyógyászatilag alkalmazható bázikus sójának hatékony mennyiségét adagoljuk - ahol a képletben28. A method of treating or preventing a viral infection in a mammal comprising administering to the mammal in need thereof an effective amount of a compound of formula (I) ···· 4 »··· • 4« or a pharmaceutically acceptable base salt thereof, wherein: X elentése hidrogén-, klór- vagy fluoratom;X is hydrogen, chlorine or fluorine; Y elentése hidrogén- vagy klóratom; ésY is hydrogen or chlorine; and R elentése benzil-vagy tienilcsoport, melyek adott esetben klór- vagy fluoratommal szubsztituáltak, azzal a kikötéssel, hogy a vírusfertőzést nem Rous- szarkóma vírus okozza.R is benzyl or thienyl optionally substituted with chlorine or fluorine, with the proviso that the viral infection is not caused by the Rous sarcoma virus. 29. A 28. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése klóratom; Y jelentése hidrogénatom; és R jelentése tienilcsoport.29. A process according to claim 28 wherein X is chlorine; Y is hydrogen; and R is thienyl. 30. A 29. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben R jelentése 2-tienil-csoport.30. The process of claim 29 wherein R is 2-thienyl. 31. A 30. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a gyógyászatilag alkalmazható bázikus sóként nátriumsót alkalmazunk.31. The method of claim 30, wherein the pharmaceutically acceptable basic salt is a sodium salt. 32. A 28. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése fluoratom; Y jelentése klóratom; és R jelentése tienil vagy 4-klór-tién-2-il-csoport.32. A process according to claim 28 wherein X is fluoro; Y is chlorine; and R is thienyl or 4-chlorothien-2-yl. 33. A 32. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben R jelentése 2-klór-tién-2-il-csoport.33. The method of claim 32 wherein R is 2-chlorothien-2-yl. 34. A 28. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melyben X jelentése hidrogénatom; Y jelentése klóratom; és R jelentése benzilcsoport.34. A process according to claim 28 wherein X is hydrogen; Y is chlorine; and R is benzyl. • ·«· · • · · * ··· ·· »· ·*·· 4* • < ·· »• · «· · • · · * ··· ··» · · * ·· 4 * • <·· » ···· 35. A 28. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet vagy gyógyászatilag alkalmazható bázikus sóját orálisan adagoljuk.35. The method of claim 28, wherein the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered orally. 36. A 28. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet vagy gyógyászatilag alkalmazható bázikus sóját parenterálisan adagoljuk.36. The method of claim 28, wherein the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof is administered parenterally.