HU210190B - Process for drawing-apart of erytromycine from fermentation-liquid - Google Patents
Process for drawing-apart of erytromycine from fermentation-liquid Download PDFInfo
- Publication number
- HU210190B HU210190B HU314191A HU314191A HU210190B HU 210190 B HU210190 B HU 210190B HU 314191 A HU314191 A HU 314191A HU 314191 A HU314191 A HU 314191A HU 210190 B HU210190 B HU 210190B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- erythromycin
- extraction
- aqueous
- phase
- water
- Prior art date
Links
Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
Description
A találmány tárgya eritromicin tartalmú fermentlé tisztítása és a hatóanyag eritromicin-tiocianát-laktát-, vagy bázis formájában történő' kinyerése a fermentlé vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel történő extrakciójával.The present invention relates to the purification of an erythromycin-containing fermentation broth and to the recovery of the active ingredient in the form of erythromycin thiocyanate lactate or base by extraction of the fermentation broth with a water immiscible organic solvent.
Az eritromicin, amely számos Gram-pozitív és néhány Gram-negatív baktériumra hatásos antibiotikum, elsőként az US 2 653 899 (R. L. Bunch et. al. Eli Lilly) sz. amerikai szabadalmi leírásban írták le.Erythromycin, which is an antibiotic for many Gram-positive and some Gram-negative bacteria, was first disclosed in U.S. Patent No. 2,653,899 to R. L. Bunch et al., Eli Lilly. U.S. Pat.
Ezen gyűjtőnévvel jellemzett vegyületcsoport négy különféle szerkezeti képlettel jellemezhető vegyületből áll, melyeket eritromicin A, B, C és D-nek neveznek. Ezek közül a legnagyobb jelentőségű az eritromicin A. melynek legnagyobb az antibakteriális aktivitása.This group of compound names is composed of four compounds with different structural formulas, known as erythromycin A, B, C and D. The most important of these is erythromycin A. which has the highest antibacterial activity.
Ezen vegyületek előállítása fermentációs úton történik. A fermentáció során az előbb említett eritromicin származékok mellett, egyéb eritromicinhez hasonló komponensek is keletkeznek.These compounds are prepared by fermentation. During the fermentation, besides the aforementioned erythromycin derivatives, other components similar to erythromycin are formed.
Ilyenek a teljesség igénye nélkül az eritromicin enoléterek és a spiroketalok (anhidroeritromicin).These include, but are not limited to, erythromycin enol ethers and spiroketals (anhydroerythromycin).
Ugyancsak jellegzetessége a fermentációs eljárásnak, hogy olyan szín és szag komponensek is keletkeznek, amelyek a feldolgozás során hajlamosak az eritromicin vegyületekkel a különféle fázisok között együtt mozogni.It is also a characteristic of the fermentation process that color and odor components are formed which tend to move together with the erythromycin compounds during the various phases during processing.
A feldolgozó eljárások alapvetően arra irányulnak, hogy a szennyező forrásoktól megszabadulva minél tisytább szín- és szagmentes eritromicin A terméket állítsanak elő. A termék kinyerésének külön nehézsége, hogy a legértékesebb komponens, az eritromicin A hajlamos a körülményektől függő mértékben inaktiválódni andhidroeritromicinné.The processing methods are basically aimed at getting the purest colorless and odorless erythromycin A product out of the sources of contamination. A particular difficulty in obtaining the product is that the most valuable component, erythromycin A, tends to be inactivated to andhydroerythromycin, depending on the circumstances.
Ezért a kinyerési eljárást megelőzően olyan módszereket is alkalmazhatnak, melyek az eritromicin A stabilitását növelik. Ilyen a SU 306 666 sz. szovjet szabadalmi leírásban ismertetett megoldás, amely szerint a fermentlevet szűrés után 15-16 °C-ra hűtik és 2 t%-nyi nátriumbikarbonátot adagolnak hozzá. Áttérve a tisztítási technológiákra, megállapítható, hogy ezek közül egyesek - pl. preparatív HPLC módszerrel történő tisztítás - nagyipari módszerrel történő gyógyszeralapanyag előállítására alkalmatlanok [I. 0. Kibwage et. al Journal of Chromatography 346 (1985) 309—319].Therefore, prior to the recovery process, methods that increase the stability of erythromycin A may be employed. Such is the case with SU 306 666. A solution disclosed in U.S. Pat. Moving on to cleaning technologies, some of them - for example, purification by preparative HPLC - unsuitable for the preparation of a bulk pharmaceutical product [I. 0. Kibwage et. al Journal of Chromatography 346: 309-319 (1985)].
Az ipari szempontból csekély jelentőségű módszerekhez sorolható a félig áteresztő poli- 1, 3, 4-oxadiazol hártya segítségével történő tisztítás is.Industrially unimportant methods include semi-permeable poly-1,3,4-oxadiazole purification.
[I. J. Ustyuzhanina et. al, Antibiotiki 21(3)1976, 818-822] ASU 306 669. sz. szovjet szabadalmi leírás szerint a szűrt fermentlé pH-ját pufferrel beállítják, szerves oldószer jelenlétében kálium-szulfáttal az eritromicin-szulfát csapadékot kicsapják. Szerves oldószeres kezelés után vizes oldatot készítenek, ezt pl. petrol-éterrel mossák, majd vizes ammónia oldattal, pH állítással az eritromicin bázist leválasztják. Az így kapott eritromicin tisztasága azonban nem kielégítő, gyógyszeripari felhasználáshoz további tisztítás szükséges.[I. J. Ustyuzhanina et. al., Antibiotiki 21 (3) 1976, 818-822] ASU 306 669. According to U.S. Patent No. 4,600,600, the pH of the filtered fermentation broth is adjusted with a buffer and the precipitate of erythromycin sulfate is precipitated in an organic solvent in the presence of potassium sulfate. After treatment with an organic solvent, an aqueous solution is prepared, e.g. It is washed with petroleum ether and the erythromycin base is removed by adjusting the pH with an aqueous ammonia solution. However, the purity of the erythromycin thus obtained is unsatisfactory and further purification is required for pharmaceutical use.
Az US 3 629 233 sz. szabadalmi leírás szerzői a tisztításra kation cserélő gyantát ajánlanak. Vizes mosás után az eritromicint vizes-ammóniás alkohol oldattal eluálják az oszlopról. Ezen eljárás hátránya a további tisztítási lépcsők szükségessége, valamint a nehézkes kivitelezhetőség ipari méretekben.U.S. Patent No. 3,629,233. The authors of U.S. Pat. After washing with water, erythromycin is eluted from the column with aqueous ammonia alcohol. The disadvantage of this process is the need for further purification steps and the difficult feasibility on an industrial scale.
A PL 97 829 sz. lengyel szabadalmi leírásban leírtak szerint úgy különíthetjük el az eritromicin A-t a többi komponenstől, hogy szerves oldószerben, célszerűen acetonban C2-C24 szénatomszámú zsírsavakkal reagáltatják a nyers, tisztítandó eritromicint, a kapott sót kristályosítják, majd feloldás és kicsapásos lépések után 63-83%-os hozammal nyerik a terméket.PL 97 829 as described in Polish patent specification may be isolated by the other components of erythromycin A with the organic solvent, preferably acetone, C 2 -C reacting the crude purified erythromycin 24-carbon fatty acids, the salt crystallized, and after dissolution and precipitation steps 63-83% yields the product.
A DD 72 351 sz. német szabadalmi leírás szerint úgy járnak le a tisztítás során, hogy a szűrt fermentlevet 3-6 között pH értékre állítják be, ismert módon extrahálják és egy több bázisú savval, előnyösen oxálsavval só formájában kicsapják, ezt izolálják, majd lúgosítással jutnak a szabad bázishoz.DD 72 351 According to the German patent, purification is carried out by adjusting the filtered fermentation broth to a pH of 3 to 6, extracting it in a known manner and precipitating it in the form of a salt with a polybasic acid, preferably oxalic acid, isolating it and then basifying it to the free base.
Ezen eljárás után is további tisztítás szükséges, tekintettel a 80-85%-os tisztaságra.Even after this procedure, further purification is required given the purity of 80-85%.
A nagyipari gyakorlatban alkalmazott feldolgozási eljárások jelentős része, szűrtléből kiindulva a US 2 653 899 sz. amerikai szabadalmi leírás szerinti módszereket alkalmazza. A fermentlevet szűrés után 9,ΟΙ 0,0 pH értéke amilacetáttal vagy más vízzel nem elegyedő oldószerrel extrahálják, majd 5,0-6,5 pH értéken vízzel extrakciót hajtanak végre. A vizes fázisból a nyersterméket oldószermentesítés és hígítás után kristályosítják. A másik lehetséges módszer, melyet a CS 99 897 sz. csehszlovák szabadalomban írtak le, az oldószeres extraktumot viszonylag kis térfogatra bepárolják és az antibiotikum nyersterméket az oldószeres fázisból az oldószerrel elegyedő olyan másik oldószerrel csapják ki, melyben a hatóanyag rosszul oldódik.Most of the processing methods used in large-scale industrial practice, starting with filtration, are described in U.S. Patent No. 2,653,899. U.S. Pat. After filtration, the fermentation broth is extracted with amyl acetate or other water-immiscible solvents at pH 9.0 and pH 5.0-6.5 with water. The crude product is crystallized from the aqueous phase after solvent removal and dilution. Another possible method, which is described in CS 99 897. In a Czechoslovakian patent, the solvent extract is evaporated to a relatively small volume and the crude antibiotic product is precipitated from the solvent phase by another solvent miscible with the solvent in which the active ingredient is poorly soluble.
Mindkét eljárással csak nyerstermék minőséghez jutnak melyből többszöri átkristályosítással nyerhető gyógyszerkönyvi minőségű termék.Both processes yield only crude product quality, of which the product can be obtained by multiple recrystallization pharmacopoeial quality.
További hátránya az eljárásnak, hogy a fermentlé szűrésekor mintegy 10% szűrési veszteséggel kell számolni.A further disadvantage of the process is that a filtration loss of about 10% is expected when the fermentation broth is filtered.
A GB 1 238 836 sz. brit szabadalmi leírás szerzői az oldószeres extrakciót szűrés nélkül, közvetlen a fermentléből végzik.GB 1 238 836. The authors of U. S. Patent No. 4,197,198, teach solvent extraction directly from fermentation broth without filtration.
Az extrakció elvégzése előtt a fermentléhez enzimet adnak a jelentős mértékű emulzióképződés megakadályozása érdekében. Az oldószeres extraktumból az eritromicint reextrakcióval vizes fázisba viszik, melyből bepárlás után kicsapással nyerik a nyerstermék minőségű eritromicin bázist, melyet átkristályosítással tisztítanak.Before the extraction, an enzyme is added to the fermentation broth to prevent significant emulsion formation. From the solvent extract, the erythromycin is re-extracted into the aqueous phase, which upon evaporation yields the crude product-grade erythromycin base, which is purified by recrystallization.
Ugyancsak direkt extrakciót alkalmaz a 2 881 162 sz. amerikai szabadalom is. A direkt extrakciót követő vizes reextrakció után az antibiotikumot kisózással acetonos fázisba viszik, melyből víz hozzáadása utáni kristályosítással nyerik ki a „viszonylagosan veszteségmentes” terméket. Az eddig ismertetett és ismert eljárások közös hátránya, hogy megfelelő késztermék minőséget csak több oldószer alkalmazásával, újrakristályosítási eljárások segítségével nyernek. Találmányunk kidolgozása során célunk az volt, hogy közvetlenül fermentléből történő extrakcióval, a szűrési veszteség megszüntetésével, olyan tisztítási eljárást dolgozzunk ki, amely célszerűen egy szerves oldószer felhasználá2It also uses direct extraction as described in U.S. Patent No. 2,881,162. also a US patent. Following direct extraction with aqueous reextraction, the antibiotic is salted into an acetone phase to obtain a "relatively lossless" product by crystallization after addition of water. A common drawback of the processes described and known so far is that they are obtained by recrystallization processes using only a number of solvents using appropriate solvents. The aim of the present invention was to provide a purification process which is conveniently carried out using an organic solvent by extraction directly from the fermentation broth, eliminating the loss of filtration.
HU 210 190 Β sával közvetlenül megfelelő minőségű készterméket eredményez, jó kihozatali mutatók és technológiai szempontból könnyű kivitelezhetőség mellett, gyakorlatilag egyféle típusú vegyipari művelet és berendezés alkalmazásával. Különleges igényként jelentkezett, hogy az eritromicin bázis humán felhasználású készterméknek garantáltan eritromicin-bázis-dihidrát formátummal kellett rendelkeznie. Kísérleteink során meglepő módon úgy találtuk, hogy ez a célkitűzés megvalósítható többszöri folyadék-folyadék extrakcióval, kihasználva a hatóanyag és a szennyeződések, különösen a szín és szaganyagok eltérő megoszlási hányadosát, valamint pH-tól függő eltérő stabilitását az egyes fázisokban. Ezek az extrakciós lépések lehetővé teszik egyúttal egy olyan optimális koncentráció beállítását, amelyből megfelelően kidolgozott kicsapási és mosási eljárásokkal közvetlenül megfelelő minőségű termékek érthetők el.EN 210 190 közvetlenül directly produces a finished product of appropriate quality, with good yields and technology ease of use, using virtually one type of chemical process and equipment. There was a particular need that the finished erythromycin base for human use should be guaranteed to be in the form of erythromycin base dihydrate. Surprisingly, our experiments have found that this objective can be achieved by multiple liquid-liquid extraction, utilizing different partition coefficients of the active ingredient and impurities, in particular color and odor, and different pH-dependent stability in each phase. These extraction steps also make it possible to set an optimum concentration from which well-developed products can be obtained directly by well-designed precipitation and washing processes.
Találmányunk szerint az eritromicin tartalmú fermentlé tisztítását és a hatóanyag kinyerését a fermentlé vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel történő extrakciójával végezzük oly módon, hogy a fermentlevetAccording to the invention, the purification of the fermentation broth containing the erythromycin and the recovery of the active ingredient is carried out by extraction of the fermentation broth with a water-immiscible organic solvent so that the fermentation broth
5-25 °C közötti hőmérsékleten 8-12 közötti pH értéken - kívánt esetben emulzióbontó jelenlétében - legalább két lépcsőben extraháljuk vízzel nem elegyedő, de az eritromicin bázist oldó szerves oldószerrel előnyösen i-butil-acetáttal - majd - kívánt esetben az így nyert szerves fázisból ismert módon - célszerűen szeparátor vagy szűrő segítségével - a kivált anyagokat eltávolítjuk -, a szerves fázist legalább két lépcsőben 5-25 °C közötti hőmérsékleten vízzel extraháljuk, miközben a vizes fázis pH-ját sav beadagolással 4-8 érték között tartjuk, az így kapott vizes fázist legalább két lépcsőben extraháljuk, az így kapott vizes fázist legalább két lépcsőben extraháljuk 5-30 °C közötti hőmérsékleten, 8-12 közötti pH értéken vízzel nem elegyedő, de az eritromicin bázist oldó szerves oldószerrel, - kívánt esetben az így nyert szerves fázisból a kivált anyagokat ismert módon eltávolítjuk - majd a szerves fázistAt a temperature of 5 to 25 ° C, at pH 8 to 12, optionally in the presence of an emulsion disintegrator, in at least two stages, with an organic solvent immiscible with water, but preferably with i-butyl acetate and then optionally from the organic phase so obtained in known manner, preferably by means of a separator or a filter, the precipitated materials are removed, the organic phase is extracted with water at least in two steps at a temperature between 5 and 25 ° C, while maintaining the pH of the aqueous phase between 4 and 8. extracting the aqueous phase in at least two steps, extracting the aqueous phase obtained in at least two steps with an organic solvent immiscible with water but not soluble in the erythromycin base at a temperature of 5 to 30 ° C, pH 8 to 12; the precipitates are removed in a known manner - then the organic phase
- 15-35 ’C közötti hőmérsékleten a hatóanyagtartalmára számított 1/6—1/8-ad tömegrésznyi kálium-tiocianát vizes vagy vizes ecetsavas oldatával elegyítjük, kívánt esetben 5-40 t%-os vizes ecetsav oldattal a pH-t 6,0-7,5 értékre állítjuk és a kivált eritromicin-tiocianátot ismert módon kinyerjük, vagy- at a temperature of 15 to 35 ° C, with 1/6 to 1/8 parts by weight of potassium thiocyanate, based on the active ingredient, in an aqueous or aqueous acetic acid solution, optionally with 5 to 40% aqueous acetic acid solution to pH 6.0 Is adjusted to -7.5 and the precipitated erythromycin thiocyanate is recovered in a known manner, or
- 15-35 °C hőmérsékleten tejsav oldattal kezeljük pH = 4,5-5,5 eléréséig és a kivált eritromicinlaktátot ismert módon kinyerjük, vagy- treating at 15-35 ° C with a lactic acid solution until a pH of 4.5-5.5 is obtained and recovering the erythromycin lactate precipitated in a known manner, or
- legalább két lépcsőben extraháljuk vízzel 525 ’C közötti hőmérsékleten úgy, hogy a vizes fázis pH értékét 4-8 között tartjuk sav beadagolással, majd az így nyert vizes fázisból kívánt esetben a fémsó szennyeződéseket (célszerűen komplexképzővel) eltávolítjuk, majd az oldatból az eritromicin bázist ismert módon kinyerjük.- extracting with water at 525 ° C in at least two steps, maintaining the pH of the aqueous phase between 4 and 8 by addition of acid, removing metal salt contaminants (preferably with a complexing agent) from the aqueous phase, if desired, and then removing the erythromycin base from the solution. in known manner.
A találmányunk szerinti eljárás előnyei a következők:Advantages of the process according to the invention are:
- a kapott termék fehér, idegen szagtól mentes, vékonyréteg-kromatográfiával vizsgálva alig tartalmaz szennyezést, mind a humán, mind az állatgyógyászati követelménynek megfelel,- the product obtained is white, free of any foreign odor, and is considered to be low in impurities by thin-layer chromatography, satisfying both human and veterinary requirements,
- a kitermelés a fermentlé eritromicin A tartalmára vonatkoztatva tiocianát és laktát származék esetén 75-80%, eritromicin bázis esetén 65-70%Yields 75-80% for erythromycin A in the fermentation broth and 65-70% for erythromycin base in the case of thiocyanate and lactate derivatives
- a kapott tennék hatóanyagtartalma eritromicintiocianát vagy laktát esetén 750-800 μηι/mg, eritromicin-bázis esetében 900-970 μηι/mg- the content of the product obtained is 750-800 μηι / mg for erythromycin thiocyanate or lactate and 900-970 μηι / mg for erythromycin base
- a direkt extrakció alkalmazása miatt nincs szűrési veszteség a fermentlé feldolgozásánál- there is no loss of filtration in the fermentation broth due to the use of direct extraction
- ha minden extrakciós lépéshez ugyanazon szerves oldószert használjuk, akkor ennek visszanyerése, regenerálása egyszerű,- if the same organic solvent is used for each extraction step, recovery and regeneration is simple,
- technológiai szempontból egyszerű kivitelezhetőség, mivel a folyamatok nagy része folyadékfolyadék extrakció.- Technically simple feasibility, since most processes are liquid-liquid extraction.
A találmányunk szerint megoldást a következő példákkal mutatjuk be anélkül, hogy oltalmi igényünket ezekre korlátoznánk.The invention is illustrated by the following non-limiting examples.
1. példaExample 1
Eritromicin-tiocianát előállítása dm3 eritromicin tartalmú fermentlevet, melynek eritromicin A tartalma 6,65 mg/g 5 ’C-ra hűtünk és 5 t%-os nátrium-hidroxid vizes oldatával pH-ját 8,0-ra állítjuk, majd kétfokozatú ellenáramú extrakciónak vetjük alá. Az extrakciót i-butil-acetáttal végezzük, 1:1 térfogatarányban, 0,1 tf% Armogard D emulzióbontó (polialkoxilált vegyületeket tartalmazó készítmény, gyártó: Akzo chemie, GB) alkalmazása mellett. Az eritromicint tartalmazó szerves oldószeres fázist 5 ’Con 3 órán át állni hagyjuk, majd szeparátor segítségével leválasztjuk a kivált anyagokat, az ily módon tisztított szerves fázist kétfokozatú ellenáramú vizes extrakcióval tisztítjuk úgy, hogy a vizes fázis pH-ja 4,8 legyen. Ezt a vizes fázisba adagolt 5 t%-os kénsavval biztosítjuk. A szerves fázis:víz térfogataránya 5:1. Ezzel az extrakciós lépéssel távoznak a színanyagok, továbbá az idegen szagot okozó szennyezők és az eritromicin-enoléter tekintélyes hányada. A hatóanyagtartalmú vizes fázist, melynek térfogata 16 dm3, két fokozatban i-butil-acetáttal 5 ’C-on extraháljuk 1:1 térfogatarány mellett.Preparation of Erythromycin Thiocyanate A fermentation broth of dm 3 erythromycin containing 6,65 mg / g erythromycin A was cooled to 5 ° C and adjusted to pH 8,0 with 5% aqueous sodium hydroxide solution. extraction. Extraction was performed with i-butyl acetate (1: 1 by volume) using 0.1% (v / v) Armogard D emulsion disintegrator (formulation containing polyalkoxylated compounds, manufactured by Akzo chemie, GB). The organic solvent phase containing erythromycin was allowed to stand at 5 'C for 3 hours, and the precipitated materials were separated by a separator, and the organic phase thus purified was purified by two-step countercurrent aqueous extraction to pH 4.8. This is provided by adding 5% sulfuric acid to the aqueous phase. The volume ratio of organic phase: water is 5: 1. This extraction step removes a significant proportion of the dyes, foreign impurities and erythromycin enol ether. The drug-containing aqueous phase, having a volume of 16 dm 3 , was extracted in two steps with i-butyl acetate at 5 ° C and 1: 1 by volume.
Az így nyert szerves fázist 2 óra elteltével szűrjük és a szűrletet eritromicin-tiocianát előállítása céljából az alábbi módon dolgozzuk fel.After 2 hours, the organic phase was filtered and the filtrate was worked up as follows to obtain erythromycin thiocyanate.
A szerves fázis hatóanyagtartalmát fotometriás úton meghatározva a tartalom 460 g. Ennek hatodrészének megfelelő .tömegű kálium-tiocianátot, azaz 76 g-ot ugyanannyi tömegű vízben oldunk. Ezen oldatot a 20 ’Cos szerves fázishoz adagoljuk, kevertetés közben, majd 20 t%-os vizes ecetsav oldattal a pH-t 6,0-ra állítjuk. A kicsapott eritromicin-tiocianátot, melynek tömege 17000 g, szűrjük, majd háromszoros tömegű i-butil-acetáttal kétszer mossuk. Ezt követően ugyanekkora menynyiségű vízzel ismét mossuk, és a kapott anyagot vákuumban 40 ’C-on szárítjuk. A kinyert fehér, szagtalan termék tömege 565 g. Hatóanyagtartalma (vízmentes anyagra számolva) 763 μιτ^/π^. A fermentlé eritromicin A tartalmára vonatkoztatva a kihozatal 77%.The content of the organic phase, determined by photometry, was 460 g. One-sixth of this potassium thiocyanate, 76 grams, is dissolved in an equal volume of water. This solution was added to the organic phase 20 'Cos with stirring and then adjusted to pH 6.0 with 20% aqueous acetic acid. The precipitated erythromycin thiocyanate (17000 g) is filtered and washed twice with 3 times i-butyl acetate. It is then washed again with an equal volume of water and the resulting material is dried under vacuum at 40 ° C. The white, odorless product obtained weighs 565 g. Active ingredient content (calculated on the anhydrous basis) 763 μιτ ^ / π ^. The yield of the fermentation broth is 77% based on the erythromycin A content.
HU 210 190 ΒHU 210 190 Β
2. példaExample 2
Eritromicin tiocianát előállításaPreparation of erythromycin thiocyanate
20,0 m3 eritromicin tartalmú fermentlevet, melynek hatóanyagtartalma 4,2 mg/g (eritromicin A-ra nézve), 25 °C-on, pH - 12 érték eléréséig 5 t%-os nárium-hidroxiddal elegyítjük. A lúgos folyadékot etil-acetáttal kétfokozatban extraháljuk, fermentlé:etil-acetát = 5:l térfogatarányban. Az extrakció során 1 tf% Nadar 100 emulzióbontót (kvaterner ammónium-sókat tartalmazó készítmény, gyártó: Nadar Chemie, IT) alkalmazunk, a szerves oldószeres fázist 16 °C-on 6 órán át állni hagyjuk, majd a kivált szennyezőket szűró'vásznon, táskás nyomószűrővel kiszűrjük. A szú'rletet kétfokozatú ellenáramú vizes extrakciónak vetjük alá, oly módon, hogy a vizes fázis pH-ját 8-as értékre állítjuk 5 t%-os foszforsav adagolásával. A szerves fázis:víz térfogataránya 5:1. Ekkor távoznak a nemkívánatos szín- és szaganyagok, továbbá az eritromicin-enoléter nagy része. Az így nyert 0,95 m3 térfogatú vizes fázist ugyanekkora térfogatú etil-acetáttal két fokozatban 25 °C-os hőmérsékleten extraháljuk.20.0 m 3 of erythromycin broth containing 4.2 mg / g of erythromycin A (in terms of erythromycin A) was mixed with 5% sodium hydroxide at 25 ° C to pH 12. The alkaline liquid was extracted with ethyl acetate in two steps, fermentation broth: ethyl acetate = 5: 1 by volume. The extraction was performed using 1% v / v Nadar 100 emulsion disintegrator (formulation containing quaternary ammonium salts, manufactured by Nadar Chemie, IT), the organic solvent phase was allowed to stand at 16 ° C for 6 hours, and the precipitated precipitate was filtered through a filter through a pressure filter. The filtrate was subjected to two-stage countercurrent aqueous extraction by adjusting the pH of the aqueous phase to 8 by adding 5% phosphoric acid. The volume ratio of organic phase: water is 5: 1. At this time, undesirable dyes and odors and most of the erythromycin enol ether are removed. The resulting aqueous phase (0.95 m 3 ) was extracted with two equal portions of ethyl acetate at 25 ° C.
Az extrakció kezdetén a vizes fázis pH-ját 5 t%-os káliumkarbonát oldat adagolásával pH = 11 értékre állítjuk be. A szerves hatóanyagtartalmú fázist eritromicin tiocianát előállítása céljából a következőképpen dolgozzuk fel.At the beginning of the extraction, the pH of the aqueous phase was adjusted to pH 11 by addition of 5% potassium carbonate solution. The organic phase is prepared as follows to prepare erythromycin thiocyanate.
A folyadékot, melynek hatóanyagtartalmaA liquid with an active ingredient content
79,3 g/dm3, térfogata 0,9 m3, felmelegítjük 30 °C-ra. 1 tömegrész vízből és 1 tömegrész kálium-tiocianátból valamint 0,3 tömegrész 961% ecetsavból oldatot készítünk. Az így nyert oldattal a szerves oldószeres fázisból az eritromicin-tiocinatátot kicsapjuk, úgy hogy az oldat pH-ja 6,0 legyen.79.3 g / dm 3 , volume 0.9 m 3 , heated to 30 ° C. A solution of 1 part by weight of water and 1 part by weight of potassium thiocyanate and 0.3 parts by weight of 961% acetic acid is prepared. The resulting solution precipitates the erythromycin thiocinate from the organic solvent phase to a pH of 6.0.
A terméket Schenk ZHF típusú tálcás nyomószűrővel szűrjük, majd hússzoros tömegrésznyi etilacetáttal mossuk. A mosást szintén hússzoros mennyiségű vízzel folytatjuk, majd a kapott vákuumban 60 °C-on szárítjuk.The product was filtered through a Schenk ZHF tray pressure filter and washed with 20 parts by weight of ethyl acetate. The washing was also continued with 20 volumes of water and dried under vacuum at 60 ° C.
A fehér, szagtalan termék tömege 88,9 kg (Víztartalma 5%).The white, odorless product weighs 88.9 kg (Water content 5%).
Hatóanyagtartalma (vízmentes anyagra számítva) = 796 pg/mg.Active ingredient content (calculated on the anhydrous basis) = 796 pg / mg.
A fermentlé eritromicin A tartalmára vonatkoztatva a kihozatal 80%.The yield of the fermentation broth is 80% based on the erythromycin A content.
3. példaExample 3
Eritromicin tiocianát előállításaPreparation of erythromycin thiocyanate
Mindenben a 2. példában leírtak szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy a 0,9 m3 térfogatú, 79,3 g/dm3 hatóanyagtartalmú, 30 °C-os szerves oldószeres fázisból a tiocianát származék kicsapását a következő módon végezzük. 1 tömegrész vízből, 1 tömegrész kálium-tiocianátból, valamint 0,7 tömegrész 96 t%-os ecetsavból oldatot készítünk, és ezen oldattal végezzük a szerves fázisból a kicsapást pH - 7 eléréséig.All of the procedures described in Example 2 were followed except that the thiocyanate derivative from a 0.9 m 3 volume of 79.3 g / dm 3 of organic solvent at 30 ° C was precipitated as follows. A solution of 1 part by weight of water, 1 part by weight of potassium thiocyanate and 0.7 parts by weight of 96% acetic acid is prepared and the solution is precipitated from the organic phase to pH 7.
A kapott termék tisztasága, tömege és kihozatal a 2. példa szerinti.The purity, weight and yield of the product obtained were as in Example 2.
4. példaExample 4
Eritromicin laktát előállítása dm3 eritromicin fermentlevet, melynek eritromicin A tartalma 6,2 mg/g lehűtünk 15 °C-ra. A fermentlevet háromszor extraháljuk, széntetrakloriddal oly módon, hogy szerves oldószer térfogata harmadrésze a fermentlé térfogatának. A fermentlé pH = 10 értéken tartására a fermentlében valamint az egyszer és kétszer extrahált fermentlébe 5 t%-os nátrium-karbonát oldatot adagolunk.Preparation of Erythromycin Lactate A dm 3 erythromycin fermentation broth having an erythromycin A content of 6.2 mg / g was cooled to 15 ° C. The fermentation broth is extracted three times with carbon tetrachloride such that the volume of the organic solvent is one third of the volume of the fermentation broth. To keep the fermentation broth at pH 10, 5% sodium carbonate solution is added to the fermentation broth and once and twice the broth.
Az extrakció során 1 tf% Sterogenolt (cetil-piridinium-bromid alkoholos oldata, gyártó: Egyesült Vegyi Művek, HU) alkalmazunk. A szerves oldószeres fázist 15 °C-on 4 órán át hagyjuk állni, majd a kivált anyagokat vákuumszűrő nucsson kiszűrjük. A szűrletet háromszor vízzel extraháljuk, oly módon, hogy a vizes fázis pH-játDuring the extraction, 1% by volume of Sterogenol (alcoholic solution of cetylpyridinium bromide, manufactured by United Chemical Works, HU) was used. The organic solvent phase was allowed to stand at 15 ° C for 4 hours, and the precipitates were filtered off with suction. The filtrate was extracted three times with water to adjust the pH of the aqueous phase
5,8-6,2 közötti értéken tartjuk úgy, hogy az extraháló vízbe és az egyszer ill. kétszer extraháló vízbe 20 t%-os ecetsavat adagolunk. A szerves fázis:víz térfogataránya 1:2. A hatóanyagokat tartalmazó vizes fázist metil-izobutil-ketonnal háromszor extraháljuk, ötödrésznyi térfogatú szerves oldószer felhasználásával, 15 °C-on. Az extrakció során a vizes fázis pH-ját 9-10 között tartjuk. 101%os nátrium-karbonát oldat adagolásával.5.8 to 6.2 so that the extraction water and the once or 20% acetic acid is added to two extraction water. The volume ratio of organic phase: water is 1: 2. The aqueous phase containing the active compounds was extracted three times with methyl isobutyl ketone using a fifth volume of organic solvent at 15 ° C. During the extraction, the pH of the aqueous phase is maintained between 9 and 10. By adding 101% sodium carbonate solution.
A 2,1 dm3 térfogatú szerves oldószeres fázist 4 órán át -15 °C-on tartjuk, a kivált jeget hűthető vákuumszűrő nuccson kiszűrjük, majd a továbbiakban eritromicinlaktát előállítása céljából dolgozzuk fel.The organic solvent phase (2.1 dm 3 ) was maintained at -15 ° C for 4 hours, the ice precipitated was filtered off with a suction filter and then worked up to produce erythromycin lactate.
Az így nyert szerves fázishoz 87 cm3 térfogatú, 201% tejsavat tartalmazó metil-izobutil-keton oldatot adagolunk lassan, kevertetés közben. pH = 5 érték elérése után további két órán át kevertetjük az anyagot, ekkor az eritromicin-laktát kiválása befejeződik. A terméket Schenk ZHF típusú tálcás nyomószűrővel szűrjük, majd háromszoros mennyiségű metil-izobutil-ketonnal mossuk. A mosást ugyanakkora mennyiségű vízzel folytatjuk, majd a célterméket vákuumban 50 °C-on szárítjuk.The organic phase was 87 cm 3 volume of methyl isobutyl ketone containing 201% lactic acid solution was added slowly with stirring. After reaching pH 5, the mixture is stirred for an additional two hours, at which time erythromycin lactate is complete. The product was filtered through a Schenk ZHF tray pressure filter and washed three times with methyl isobutyl ketone. After washing with an equal volume of water, the target product was dried in vacuo at 50 ° C.
A termék tömege 103,7 g. (A víztartalom 5%)The product weighed 103.7 g. (Water content 5%)
Hatóanyagtartalma: 755 pg/mg (vízmentes termékre számolva).Active ingredient content: 755 pg / mg (calculated on the anhydrous product).
A fermentlé eritromicin a tartalmára vonatkoztatva a kihozatal 75%.The yield of the fermentation broth is 75% based on its content of erythromycin.
5. példaExample 5
Eritromicin-bázis előállítása m3 eritromicin tartalmú fermentlevet, melynek eritromicin A tartalma 7,3 mg/g, 15 °C-ra hűtünk és 5 t%-os nátrium-hidroxid oldattal pH = 10 értékre állítjuk be. Kétfokozatú ellenáramú extrakciót végzünk ibutil-acetáttal úgy, hogy a felhasznált oldószer térfogata harmadrésze a fermentlé térfogatának. Az extrakció során 0,5 tf% Demulso B (gyártó: Petrolite Co., GB) emulzióbontót adagolunk a folyadékelegyhez, majd a szétválasztás után a szerves fázist 10 °C-ra hűtve 4 órán át állni hagyjuk. Szeparátor segítségével a kivált anyagokat elválasztjuk, majd a 13 m3 térfogatú szerves fázist kétfokozatú ellenáramú vizes extrakciónak vetjük alá. A vizes fázis és az egyszer extrahált vizes fázis pH-ját oly módon állítjuk be 20 t%-os citromsav oldat adagolásával, hogy a kétszer extraháló (elmenő) vizes fázis pH-ja 6,5-7,5 között érték legyen. A vizes és szerves fázis közötti térfogatarány 1:2.Preparation of Erythromycin Base A fermentation broth of m 3 of erythromycin containing 7.3 mg / g of erythromycin A was cooled to 15 ° C and adjusted to pH 10 with 5% sodium hydroxide solution. Two-stage countercurrent extraction with i-butyl acetate is carried out so that the volume of the solvent used is one third of the volume of the fermentation broth. During the extraction, 0.5% v / v Demulso B (manufactured by Petrolite Co., GB) was added to the liquid mixture and after separation, the organic phase was allowed to stand at 10 ° C for 4 hours. The precipitated materials were separated using a separator and the organic phase (13 m 3 ) was subjected to two-stage countercurrent aqueous extraction. The pH of the aqueous phase and of the once extracted aqueous phase is adjusted by adding 20% citric acid solution so that the pH of the twice extracted (effluent) aqueous phase is between 6.5 and 7.5. The volume ratio between the aqueous and organic phases is 1: 2.
A hatóanyagot tartalmazó vizes fázist, melynek térfogata 26 m3, 15 °C-os hőmérsékleten két fokozatban, ellenáramban extraháljuk 5,2 m3 (azaz ötödrésznyi) ibutil-acetáttal. Az extrakció folyamán a vizes fázis ésThe aqueous phase containing the active ingredient, a volume of 26 m 3 , is extracted with 5.2 m 3 (i.e., one-fifth) of i-butyl acetate in countercurrent at 15 ° C. During the extraction, the aqueous phase and
HU 210 190 Β az egyszer extrahált vizes fázis pH-ját 5 t%-os nátriumhidroxid oldattal úgy állítjuk be, hogy a kétszer extrahált vizes fázis pH-ja 9,5-10,5 közötti legyen. Az hatóanyagot tartalmazó i-butil-acetátos oldatot továbbiakban az eritromicin bázis kinyerése céljából a következőképpen dolgozzuk fel.Adjust the pH of the once-extracted aqueous phase with 5% sodium hydroxide solution to pH 9.5-10.5 of the twice-extracted aqueous phase. The active compound-containing i-butyl acetate solution is further processed to obtain the erythromycin base as follows.
A szerves fázist kétfokozatban, ellenáramban vízzel extraháljuk 15 °C-on 4:3 fázisarány mellett. Az extrakció során a kétszer extraháló vizes fázis pH-ját 5,9-6,5 között tartjuk oly módon, hogy az extraháló vízbe, valamint az egyszer extraháló vízbe 20 t%-os ecetsav oldatot adagolunk. A hatóanyagot tartalmazó vizes fázis fémtartalmát meghatározzuk komplexmetriás módon, ez 18 g/m3.The organic phase was extracted in two steps with countercurrent water with water at 15 ° C at a 4: 3 ratio. During the extraction, the pH of the double-extracting aqueous phase is maintained between 5.9 and 6.5 by adding 20% acetic acid solution to the extraction water and once to the extracting water. The metal content of the aqueous phase containing the active ingredient is determined by complexometry and is 18 g / m 3 .
A fémsó nyomok kicsapás alatti kiválásának megakadályozására 1,0 kg etilén-diamin-tetraecetsav-dinátriumsót adagolunk a vizes fázishoz. Az így kapott 4 m3 oldathoz, melynek eritromicin A tartalma 250 kg, a hatóanyagra számított 0,5 t% aktív szénnel derítjük. A szenet keretes szűrőpréssel, K-5 típusú szűrőlapon kiszűrjük, majd steril szűrést végzünk 0,2 μπι pórusméretű Sartorius membránon. Ezen oldathoz p =10 eléréséig 5 t%-os nátrium-karbonát oldatot adagolunk, és ily módon az eritromicin bázist kicsapjuk. A kristályokat szűrjük és a terméket, melynek tömege 525 kg négyszeres tömegű vízzel mossuk.To prevent traces of metal salt from precipitating during precipitation, 1.0 kg of ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt is added to the aqueous phase. The resulting 4 m 3 solution containing 250 kg of erythromycin A was clarified with 0.5% by weight of active carbon. The carbon is filtered through a filter press on a K-5 type filter plate and sterile filtered through a 0.2 μπι pore size Sartorius membrane. To this solution is added 5% sodium carbonate solution until p = 10, and the erythromycin base is precipitated. The crystals are filtered off and the product washed with 525 kg of water four times its weight.
A terméket vákuumban 50 °C-on szárítjuk.The product was dried in vacuo at 50 ° C.
A kapott eritromicin bázis tömege 223,3 kg. (7% nedvességtartalommal).The resulting erythromycin base weighed 223.3 kg. (7% moisture content).
Hatóanyagtartalma: 970 μg/mg (vízmentes termékre).Active ingredient: 970 μg / mg (for anhydrous product).
A fermentlé eritromicin A tartalmára vonatkoztatva a kihozatal: 69%.Yield: 69% based on the erythromycin A content of the fermentation broth.
A fenti példákon bemutatott módon nyert termékek kielégítik a BP 88 gyógyszerkönyvben foglalt követelményeket.The products obtained as shown in the examples above meet the requirements of BP 88.
6. példaExample 6
Eritromicin bázis előállításaPreparation of erythromycin base
Az 5. példában leírt módon járunk el, a következő eltérésekkel:Proceed as in Example 5, with the following exceptions:
- emulzióbontóként Gemex 29 készítményt alkalmazunk 0,6 tf% mennyiségben (gyártó: British Petrol, GB)- Gemex 29 was used as an emulsion disintegrant in 0.6 vol% (British Petrol, GB)
- a fermentlé pH állításához nátrium-hidroxid oldat helyett 30 t%-os ammónium-hidroxid oldatot használunk- 30% ammonium hydroxide solution is used to adjust the pH of the fermentation broth instead of sodium hydroxide solution
- a vizes fázis pH állítását a metil-izobutil-ketonos extrakciónál nátrium-hidroxid oldat helyett 30 t%-os ammónium-hidroxid oldattal végezzükadjusting the pH of the aqueous phase with methyl isobutyl ketone extraction with 30% ammonium hydroxide instead of sodium hydroxide solution
- a szerves fázis kétfokozatú vizes extrakciója során a vizes fázis pH-ját 4-5,9 között tartjuk 20 t%-os kénsav oldattal (a 20 t%-os ecetsav oldat helyett).- in the two-stage aqueous extraction of the organic phase, the pH of the aqueous phase is maintained at 4-5.9 with 20% sulfuric acid (instead of 20% acetic acid).
A további feldolgozás és a kihozatal megegyezik azFurther processing and yield are the same
5. példa adataival.Example 5.
7. példaExample 7
Eritromicin bázis előállításaPreparation of erythromycin base
Az 5. példában leírt módon járunk el, a következő eltérésekkel:Proceed as in Example 5, with the following exceptions:
- emulzióbontóként Dehiquart C készítményt alkalmazunk, 0,5 tf% mennyiségben (gyártó: Henkel DE, fő komponens: lauril-piridinium-klorid)- Dehiquart C is used as an emulsion disintegrant in 0.5% by volume (manufactured by Henkel DE, main component: laurylpyridinium chloride)
- a szerves fázis kétfokozatú vizes extrakciója során a vizes fázis pH-ját 6,5-8 között tartjuk 25 t%-os foszforsav oldattal.- in the two-stage aqueous extraction of the organic phase, the pH of the aqueous phase is maintained at 6.5-8 with 25% phosphoric acid.
A többi feldolgozási lépcső, ill. a kihozatal megegyezik az 5. példában ismertetettel.The other processing steps, respectively. the yield is the same as in Example 5.
Claims (10)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU314191A HU210190B (en) | 1991-10-02 | 1991-10-02 | Process for drawing-apart of erytromycine from fermentation-liquid |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU314191A HU210190B (en) | 1991-10-02 | 1991-10-02 | Process for drawing-apart of erytromycine from fermentation-liquid |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU913141D0 HU913141D0 (en) | 1992-01-28 |
| HUT62938A HUT62938A (en) | 1993-06-28 |
| HU210190B true HU210190B (en) | 1995-02-28 |
Family
ID=10962764
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU314191A HU210190B (en) | 1991-10-02 | 1991-10-02 | Process for drawing-apart of erytromycine from fermentation-liquid |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| HU (1) | HU210190B (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102659881A (en) * | 2012-04-28 | 2012-09-12 | 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 | Method for preparing erythromycin thiocyanate |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1054131C (en) * | 1998-04-08 | 2000-07-05 | 浙江大学 | Process for extracting ilotycin by two aqueous phase extracting process |
-
1991
- 1991-10-02 HU HU314191A patent/HU210190B/en unknown
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102659881A (en) * | 2012-04-28 | 2012-09-12 | 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 | Method for preparing erythromycin thiocyanate |
| CN102659881B (en) * | 2012-04-28 | 2014-12-17 | 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 | Method for preparing erythromycin thiocyanate |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HUT62938A (en) | 1993-06-28 |
| HU913141D0 (en) | 1992-01-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU212583B (en) | New process for producing potassium salt of clavulanic acid | |
| EP2985275B1 (en) | Beta-hydroxy-beta-methylbutyric acid purification method | |
| WO2020223717A1 (en) | Process for preparation of aldehyde scavenger and intermediates | |
| FI101965B (en) | Use of the 2-amino-2,4,4-trimethylpentane salt of clavulanic acid in the preparation of alkali or alkaline earth metal salts of clavulanic acid | |
| US4222942A (en) | Isolation of organic acids | |
| JPH05213969A (en) | Diastereomer of 1-(isopropoxycarbonyloxy)ethyl. 3-cefem-4-carboxylate | |
| EP1734042B1 (en) | Acid cefotetan totally solvent free and method for obtaining same | |
| KR100200242B1 (en) | Process for preparing clavulanic acid salt | |
| JP2004504325A (en) | Process for preparing highly pure crystalline (R, S) -cefuroxime axetil | |
| ES2527721T3 (en) | Procedure for the preparation of abacavir | |
| HU210190B (en) | Process for drawing-apart of erytromycine from fermentation-liquid | |
| US6204368B1 (en) | Process for the purification of roxithromycin | |
| JP4954421B2 (en) | Purification method of clavulanate | |
| NO342269B1 (en) | Preparation and purification of mupirocin calcium | |
| US5210288A (en) | Process for the preparation of d-(-)-4-hydroxyphenylglycine and l-(+)-4-hydroxyphenylglycine, starting from d.l.-4-hydroxyphenylglycine | |
| US5801241A (en) | Cyclohexanone extraction of 3-hydroxymethylcephalosporins | |
| HU182687B (en) | New process for the purification of ursodeoxycholic acid | |
| EP0894805B1 (en) | Ribose substituted aromatic derivatives, their preparation and use as medicaments | |
| DE69115849T2 (en) | Process for the preparation of 6- (3-dimethylaminopropionyl) forskolin | |
| JPH11515011A (en) | Method for producing crystalline salt of amoxicillin | |
| JP2001526291A (en) | Method for purifying solution of ampicillin prodrug ester | |
| IL90269A (en) | Method for recovery of antibiotics from mother liquors and novel pharmaceutically-acceptable salts thereof | |
| US3086970A (en) | Purification of water-soluble methylhesperidins containing chalcone type impurities | |
| EP0853087A1 (en) | A process for the purification of erythromycin | |
| KR20130028203A (en) | Process for preparing amorphous doripenem monohydrate |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FH91 | Appointment of a representative |
Free format text: FORMER REPRESENTATIVE(S): INNOPATENT IPARJOGVEDELMI KFT.,, HU Representative=s name: EMRI-PATENT IPARJOGVEDELMI KFT., HU |
|
| FH92 | Termination of representative |
Representative=s name: INNOPATENT IPARJOGVEDELMI KFT.,, HU |
|
| HC9A | Change of name, address |
Owner name: TEVA GYOGYSZERGYAR ZRT., HU Free format text: FORMER OWNER(S): BIOGAL GYOGYSZERGYAR RT., HU |