HU206380B - Process for fractionation of branched-chained beta-cyclodextrins according to chain length - Google Patents
Process for fractionation of branched-chained beta-cyclodextrins according to chain length Download PDFInfo
- Publication number
- HU206380B HU206380B HU894198A HU419889A HU206380B HU 206380 B HU206380 B HU 206380B HU 894198 A HU894198 A HU 894198A HU 419889 A HU419889 A HU 419889A HU 206380 B HU206380 B HU 206380B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- branched
- cyclodextrins
- matrix
- cyclodextrin
- compound
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
- C08B37/0012—Cyclodextrin [CD], e.g. cycle with 6 units (alpha), with 7 units (beta) and with 8 units (gamma), large-ring cyclodextrin or cycloamylose with 9 units or more; Derivatives thereof
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
A találmány ciklodextrinek, közelebbről elágazó láncú β-ciklodextrinek lánchosszúság szerinti frakcionálására alkalmas kromatográfiás eljárásra vonatkozik. A jelen találmányban alkalmazott kromatográfiás anyag egy olyan mátrix, amelyhez zárvány vegyület kapcsolódik.
A ciklodextrinek, amelyeket Schardinger-dextrineknek is neveznek, a cikloamilázok, ciklomaltózok és cikloglukánok anhidrogliikózból álló oligoszacharidok, amelyekben az anhidroglükóz részek a-l,4-kötéssel kapcsolódnak egymáshoz gyűrűs vegyületet képezve. A hatos gyűrűt α-ciklodextrinnek, a hetes gyűrűt β-ciklodextrinnek és a nyolcas gyűrűt γ-ciklodextrinnek nevezik.
Ciklodextrinek előállításához anhidroglükóz forrásként általában keményítőt alkalmaznak.
A keményítő a természetben számos növényben, így a kukoricában, burgonyában, cirokban és rizsben is előfordul, és a növényi részekből általában őrlési művelettel vonják ki, amely a keményítőt a növénytől elválasztja. Fizikailag a keményítő szemcsés formájú, és általában amilózból és amilopektinból áll.
Az amilóz egyenes láncú polimer, láncát egymáshoz ct-l,4-kötéssel kapcsolódó anhidroglükóz részek alkotják, míg az amilopektin olyan polimer, amelyben az a-l,4-anhidroglükóz-egységekből álló egyenes lánchoz a-l,4-andhidroglükóz polimer oldalláncok kapcsolódnak. Az amilopektinben az egyenes lánc és oldallánc között a-l,6-kötés van. A keményítő szemcsében az amilóz és amilopektin mennyisége a keményítő eredetétől függ. Például, a nagy amilóztartalmú kukoricakeményítőben az amilopektin és amilóz aránya 50:50, míg a gyantás kukoricakeményítőben 99:1.
Az elágazó láncú ciklodextrineket French és munkatársai (Archives of Biochem. and Biophys,, III, kötet,
1965., 153-160) már 1965-ben leírták, de mind ez ideig alig tanulmányozták. Az elágazó ciklodexöinekben, mint nevük is mutatja, egy vagy több anhidroglükóz rész oly módon kapcsolódik a gyűrűs szerkezethez, hogy abból oldallánc formájában nyúlik ki.
A ciklodextrineket általában úgy állítják elő, hogy keményítő zagyot enzimmel vagy savval kezelve Ιό DE (dextrózekvivalens) értékkel jellemezhető gélesített és elfolyósított zagyot kapnak. A gélesített és elfolyósított keményítő zagyot aztán ciklodextrin glikoziltranszferáz (CGT) enzimmel, a kiválasztott enzimnek megfelelő pH-η, hőmérsékleten és ideig kezelik. A CGT enzimet például Bacillus macerans, B. magaterium, B. circulans, B. stearolkermophilus és alkalofil, valamint más bacillus fajtákhoz tartozó mikroorganizmusokból kapják. A gélesített és elfolyósított keményítő zagy a CGT-vel való kezelés után aciklusos dextrineket és ciklusos dextrineket, így például elágazó láncú ciklodextrineket és el nem ágazó ciklodextrineket tartalmaz. Elágazó láncú ciklodextrinek előállításához előnyösen amilopektinben gazdag keményítőt, így gyantás keményítőt használnak kiindulási anyagként.
Két, elágazó láncú ciklodextrinek előállítására alkalmas eljárás ismerhető meg a 4668626 számú (1987.
május 26.) amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásból, amely enzimatikus módszerre vonatkozik, és a 4904307 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásból (1990. februás 27.) amely elágazó láncú ciklodextrinek ciklodextrinekből pirolízissel való előállítását írja le.
Az elágazó láncú ciklodextrinek elválasztására és tisztítására szolgáló eljárást ismertet a 4840679 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (1989. június 20.) Ebben többlépéses, folyadék fázisban végzett elválasztási/tisztítási módszert alkalmaznak.
Felismertük, hogy ha az elágazó láncú β-ciklodextrint tartalmazó vizes oldatot olyan mátrixon engedjük keresztül, amelyhez zárvány vegyület kapcsolódik, az elágazó β-ciklodextrinek lánchosszúság szerint frakcionálhatók.
Általánosan fogalmazva a jelen találmány szerinti eljárás elágazó β-ciklodextrinek vizes oldatának egy mátrixon való átengedéséből áll, amelyhez zárvány vegyület kötődik, valamint a mátrixról az elágazó láncú β-ciklodextrinek frakcionált elúcióját foglalja magában.
Az 1. ábra az oldalláncban lévő glükózegységek számának és a 2. és 3. példában eluált oldatok frakcióinak összefüggését mutatja be, benzoát alakú DOWEX 1x2 gyantán.
A fenti célra előnyösen alkalmazhatók azok a kromatográfiás anyagok, amelyekről a 4808232 (1989. február 28.) számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás ad kitanítást, egy másik eljárással kapcsolatban.
E szerint a leírás szerint a kormatográfiás anyag olyan mátrix, amelyhez zárvány vegyület kötődik. Magának a mátrixnak vízoldhatatlannak kell lennie és stabil részecske formában kell léteznie, hogy képes legyen a dinamikus áramlási körülményeknek ellenállni. Emellett, a mátrixnak nagyon tisztának és sterilezhetőnek kell lennie. Ezeknek a tisztasági és sterilezési jellemzőknek különösen akkor kell fennállniuk, amikor élelmiszeripari, kozmetikai és gyógyyszeripari felhasználásra alkalmas ciklodextrinek elkülönítéséről van szó. A mátrixnak még módosíthatónak is kell lennie olyan vonatkozásban, hogy lehetőség legyen zárvány vegyület hozzákapcsolására.
A fenti szabadalmi leírásban példaként említett mátrixok többek között a kovasavak, cellulózok, poliakrilamid gélek, sztirol-divinil-benzol gyöngypolimerek, poliakrilát gyöngypolimerek, polisztirol gyöngypolimerek és ezek származékai, amelyek a korábban említett tulajdonságokkal rendelkeznek. A kerelkedelemben kapható ilyen mátrixok például a DOWEX 1 és INDION A3 (Phoenix Chemicals Ltd., AEA). A jelen találmány megvalósításakor jó eredményeket kaptunk a DOWEX 1x2 mátrixszal, amelynek szemcsemérete 100-400 mesh (149-37 μ) közötti.
A 4808 232 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban azt írják, hogy a zárványképző vegyületek olyan vegyületek, amelyek és a ciklodextrinek vizes oldata között „házigazda” - „vendég” (hostguest) viszony jön létre. Ismert, hogy különböző Vegyületek a ciklodextrinekkel szemben eltérő affinitást
HU 206 380 Β mutatnak, amikor host/guest kapcsolatba kerülnek. A zárványképző vegyület és a ciklodextrin közötti affinitásnak nem szabad akkorának lennie, hogy a ciklodextrinnek a mátrixról való eluálását megakadályozza. A zárványképző vegyületek közös jellemzője, hogy úgy illenek a ciklodextrin üregébe, mint kéz a kesztyűbe. Az üreg mérete α-ciklodextrin esetében kb. 56xl(T10 m, β-ciklodextrin esetében kb. 7-8xlO10 m és γ-ciklodextrin esetében kb. 9-lOxKl·10.
A jelen találmánynak megfelelően az előnyös zárványképző vegyület valamilyen benzoát, β-naftol vagy fenolftalein. Jó eredményeket kaptunk a találmány szerinti eljárás alkalmazásakor, amikor nátrium-benzoátból származó benzoátot használtunk zárványképző (a továbbiakban zárvány) vegyületként
A már idézett 4808 232 számú szabadalmi leírásban azt írják, hogy a zárvány vegyület előnyösen a mátrix valódi felületétől bizonyos távolságra helyezkedik el, és ez a távolság előnyösen körülbelül 4 és körülbelül 12 közötti olyan szén-szén egyes kötéshossznak felel meg, amely a telített alifás szénvegyületek láncában lévő kötésre jellemző. Ez a kötéshossz lehetővé teszi, hogy a zárvány vegyület a funkciójának megfeleljen anélkül, hogy a mátrix ebben gátolná. Ez a távolság mértékegységben kifejezve körülbelül óxlO-10 m, 6 angström és körülbelül 18xl0~10 m, 18 angström között van, a legjobb eredményeket körülbelül 9 angström esetén kapták. A nagyobb távolságok nem vezetnek különösebb előnyökhöz, és hátrányuk, hogy a lánc önmagára visszahajlik.
Azokat a vegyületeket, amelyek a zárvány vegyület és a mátrix távolságát hivatottak biztosítani, hídvegyületeknek nevezik. A 4 808 232 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás szerint a hídvegyület lehet bármilyen szerves vegyület, amely képes a mátrixhoz és a zárvány vegyülethez is kötődni. Általában az ilyen hídvegyületek bifunkciós alifás vagy aromás vegyületek Ezek közé sorolhatók például a glícidoxipropil-trimetoxi-szilán, glicidoxi-propil-dimetil-klórszilán, glicidoxi-propil-trietoxi-szilán, butil-dietil-amino-etil, butil-trietil-amin és 3-fenil-propil-dimetil-klórszilán. A jelen találmány megvalósításához azok az előnyös alifás és aromás vegyületek, amelyek bifunkciósak és mind a mátrixszal, mind a zárvány vegyületekkel kovalens kötést képeznek. A zárvány vegyület mátrixhoz való kapcsolásának kémiája jól ismert, és a választott mátrixtól, a hídvegyülettől és a zárvány vegyülettől függően változik.
Ahhoz, hogy az elágazó β-ciklodextrint tartalmazó oldatot a mátrixon átengedjük, előnyös a mátrixot olyan tartályba helyezni, amely rögzíti a mátrixot és ugyanakkor lehetővé teszi a ciklodextrin tartalmú oldatnak a mátrixon való átbocsátását. Erre a célra előnyösen egy oszlopot alkalmazunk. Más megfelelő eljárások például a fix ágyas, mozgó ágyas vagy szimulált mozgó ágyas eljárások. Jó eredményeket kaptunk 7090 cm hosszú és 2,5-7,5 cm belső átmérőjű oszlopokkal. Az egyes komponensek elválasztására a mélyebb ágy az előnyös.
A keményítő CGT-vel való kezelése után kapott elegy nemcsak elágazó β-ciklodextrineket, hanem más ciklodextrineket, reagálatlan keményítő szemcséket, dextrineket, redukáló cukrokat és más anyagokat is tartalmaz.
Ha az elágazó láncú β-ciklodextrin oldata reagálatlan keményítő szemcséket és oldatlan dextrineket is tartalmaz, ezeket a részecskéket előnyösen kiszűrjük az oldatból. Előnyösen tehát úgy járunk el, hogy a mintát szénnel derítjük és ioncserélő gyantával kezel10 jük a szokásos gyakorlatnak megfelelően, hogy így az oszlopon a színező anyag megkötődését és a zárvány vegyületben bekövetkező veszteséget megakadályozzuk.
Amennyiben az elágazó láncú β-ciklodextrinekét tartalmazó oldatban el nem ágazó láncú β-ciklodextrinek is vannak, előnyös, ha a mátrixra vitel előtt ezen utóbbi vegyületeket az oldatból eltávolítjuk. Általában az el nem ágazó β-ciklodextrineket kicsapással távolítjuk el. Az el nem ágazó láncú β-ciklodextrinek oldat20 ból való kicsapása az irodalomból jól ismert.
A találmány szerinti eljárást környezeti hőmérsékleten és nyomáson végezzük, az oldat pH-ja előnyösen a semleges tartományban van. A pH nem lehet 3-nál alacsonyabb.
A szilárd anyag és a töltet mennyisége változhat. A szilárd anyag mennyisége körülbelül 5 és 40 tömeg% között változik. Jó eredményeket kaptunk 20 és körülbelül 40% közötti szilárd anyag mennyiség esetében.
Ionmentes víz eluálószerként való alkalmazása szin30 tén jó eredményhez vezetett Alkohol és víz elegye is használható az elúció meggyorsítására.
A jelen találmány fenti és további vonatkozásai a következő példákból jobban megismerhetők.
1. példa
Az elágazó láncú β-ciklodextrineket oldószeres kicsapással és az aciklusos anyag eltávolítása céljából a csapadék azonos térfogatú vízzel való mosásával különítettük el. Ezt az anyagot 35 tömeg%-os oldat formá40 jában 2,5x90 cm-es kromatográfiás oszlopra vittük fel, amely benzoát formában lévő DOWEX 1 (Dow Chemical Company, AEA’) erősen bázikus, 2%-ban térhálósított, 200-400 mesh (75-37 μ) szemcseméretű ioncserélő gyantát tartalmazott. Az eluáláshoz ionmentes vizet használtunk, amelyet egy körülbelül 4 láb magas hidrosztatikus feltétből bocsátottunk az oszlopra, és az átfolyási sebesség 3-4 ml/perc volt. Az első frakció térfogata körülbelül 450 ml, a továbbiaké körülbelül 350 ml volt. Ezeket gőzfürdőn bepároltuk és 110 °C-on szekrényben szárítottuk. Minden mintát ezután nagynyomású folyadékromatográfiás eljárással analizáltunk β-naftollal helyettesített hordozón. A vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálatokat is LK6D lemezeken végeztük, a kifejlesztéshez n-propanol, víz, etil-acetát és ammónia 6:3:1:1 térfogatarányú elegyét használtuk. A lemezeket három egymást követő alkalommal, vagy egy éjszakán át futtattuk; általában 1%-os oldatból 10 mikrolitert vittünk fel a lemezre. A foltokat metanolos kénsavval tettük láthatóvá.
Az első, 450 ml-es frakció tartalmazta majdnem az
HU 206 380 Β összes aciklusos szacharidot. A következő frakciók növekvő eluátumtérfogatban tartalmazták a csökkenő molekulaméretű elágazó láncú β-ciklodextrineket. A nem elágazó β-ciklodextrinek utolsóként eluálódtak 34 liter eluátumtérfogat után.
A megfelelő frakciókat hétszeri vékonyréteg-kromatografálás eredménye alapján nyolc frakcióba egyesítettük. Az első ilyen egyesített frakció főként aciklusos anyagot, és az utolsó, nyolcadik frakció főként β-ciklodextrineket tartalmazott. Ezeket elöntöttük. A közbenső hat frakcióban 27,2 g anyag, és ezen belül 24,4 g elágazó láncú ciklodextrin (88,7%) volt. A 2. és 3. frakciók tömege összesen 9,98 g volt, ebből 8,33 g (83,5%) a 7-nél több glükózegységet tartalmazó oldalláncú elágazó láncú ciklodextrin, benne a G5cG7 és G6cG7 csak nyomokban volt jelen. így az elkülönített elágazó láncú β-ciklodextrinek 34,3 %-át hosszú oldalláncú származékok alkották.
2. példa
Körülbelül 17%-os vizes oldatban 81,6 g, aciklusos anyagokat, elágazó láncú β-ciklodextrint és ciklodextrint tartalmazó szilárd anyagot, amely 55,5 g (körülbelül 68%) elágazó láncú β-ciklodextrint tartalmazott, vittünk fel a találmány szerinti oszlopra. Az oszlop 7,6x69 cm méretű volt és 2,5 kg DOWEX 1x2, 2005 400 (75-37 μ) mesh közötti szemcseméretű gyantát tartalmazott, amelyhez körülbelül 332 g benzoátion kapcsolódott.
A mintát környezeti hőmérsékleten, 24 ml/perc sebességgel eluáltuk. 33 liter eluátum összegyűjtése után a felvitt anyag 94,7%-át visszanyertük. A β-ciklodextrinnek megfelelő csúcs 26 liternél jelentkezett. Az első 5 liter eluátum után 1 literes frakciókat gyűjtöttünk. A 6-22. számú 1 literes frakciók analízisének eredménye az I. táblázatban látható. Az egyes frakci15 ókban lévő elágazó láncú β-ciklodextrin móltömegét meghatároztuk és ezeket az értékeket is az I. táblázat tartalmazza. A számításokat a HPLC analízis alapján végeztük, szükség esetén a vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálatok eredményét is figyelembe vettük.
Az 1. ábrán az oldallánc egy β-ciklodextrin-magra vonatkoztatott glükóz-egységeinek számát ábrázoltuk.
I. táblázat
| Frakció1 | Összegtömeg (g) | BR-B-CD (g) | Az oldallánc glükóz egységeinek mért átlagos száma per BCD” mag | A Br-B-Cdx átlagos molekulatömege | Az oldallánc glükóz egységei számának tartománya2 |
| 6 | 2,0 | 1,96 | 17,93 | 4035 | - |
| 7 | 2,6 | 2,59 | 15,04 | 3565 | - |
| 8 | 3,2 | 3,19 | 12,54 | 3160 | - |
| 9 | 3,6 | 3,59 | 10,04 | 2755 | 6-145 |
| 10 | 4,6 | 4,60 | 7,70 | 2383 | 4—ll5 |
| 11 | 5,1 | 5,07 | 5,51 | 2027 | 2-9 |
| 12 | 5,0 | 4,99 | 4,37 | 1843 | 2-7 |
| 13 | 5,0 | 4,97 | 3,45 | 1694 | 2-6 |
| 14 | 4,5 | 4,44 | 2,83 | 1594 | 1-5 |
| 15 | 3,9 | 3,87 | 2,38 | 1521 | 1-4 |
| 16 | 3,1 | 3,08 | 2,12 | 1479 | 1-4 |
| 17 | 2,4 | 2,40 | 1,92 | 1 | 1-4 |
| 18 | 2,2 | 2,16 | 1,53 | 1383 | 1-3 |
| 19 | 2,0 | 2,00 | 1,33 | 1351 | 1-3 |
| 20-22 | 3,3 | 2,78 | 1,14 | 1320 | 1-2 |
x elágazó láncú β-ciklodextrinek (branched β-cyclodextrins) xx β-ciklodextrinek (β-cyclodextrins) minden frakció 1 liter térfogatú 4 csak a 4 tömeg%-nál nagyobb mennyiségű elágazó láncú β-ciklodextrint tartalmazó frakciókban adjuk meg az oldallánc hosszát a pullulanáz (oldallánc lehasító) enzimmel való kezelés után 5 kapott glükóz egységek és β-ciklodextrinek mólarányából számítva az 1. ábrából becsléssel meghatározva (enzimes kezeléssel kapott, elágazó láncú β-ciklodextrineket tartalmazó konverzióelegy) a felső határ bizonytalan
HU 206 380 Β
3. példa
Kristályos, 98%-os tisztaságú Pciklodextrint 180— 221 °C-oti melegítettünk a 4904307 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban leírt módon, elágazó láncú β-ciklodextrinek előállítására. A dextrinált β-ciklodextrin egy részletét annyi vízben oldottuk, hogy körülbelül 10 vegyes%-os oldatot kaptunk. Az oldathoz toluolt adtunk, majd 20 órán át kevertük, aztán a β-ciklodextrineket szűréssel eltávolítottuk. A kapott szűrletet 75 °C-on aktív szénnel kezeltük 20 percig, majd a szenet kiszűrtük. A szénnel kezelt szűrletet
1,5 cmx40 cm-es Amberlite MB-3 ioncserélő ágyon engedtük keresztül. 231,7 g szilárd anyagot tartalmazó 20,7%-os oldatot kaptunk. Ezt az oldatot a 2. példában leírt oszlopra vittük egy szivattyúval. Az átfolyási sebesség 14 ml/perc volt, amely azután, hogy a minta az oszlopot megtöltötte, 10 ml/perc-re csökkent. Egy literes frakciókat gyűjtöttünk, és az elágazó láncú β-ciklodextrinek 5 liter után jelentek meg és a 24. literig eluálódtak. Minden frakcióra megállapítottuk az átlagos molekulatömeget, ezek az értékek a II. táblázatban láthatók, és a molekulánkénti, oldalláncbeli glükóz egységek átlagos számában vannak kifejezve. Ezeket az 1. ábrán tüntettük fel. Az analízist nagynyomású folyadékkromatográfiás és vékonyréteg-kromatográfiás módszerrel végeztük.
II. táblázat
| Frakció1 | Összegtömeg (g) | BR-B-CD* (g) | Az oldallánc glükóz egységeinek mért, átlagos száma per BCD“mag2 | A BR-BCD’ átlagos molekulatömege2 |
| 6 | 11,4 | 11,26 | 11,81 | 3047 |
| 7 | 10,1 | 10,00 | 9,77 | 2718 |
| 8 | 8,7 | 8,60 | 8,91 | 2578 |
| 9 | 8,1 | 8,02 | 7,77 | 2393 |
| 10 | 6,7 | 6,65 | 6,51 | 2190 |
| 11 | 5,4 | 5,09 | 6,38 | 2168 |
| 12 | 4,6 | 4,44 | 5,68 | 2055 |
| 13 | 3,7 | 3,54 | 5,36 | 2003 |
| Frakció1 | Összegtőmeg (g) | BR-B-CD’ (g) | Az oldallánc glükóz egységeinek mért, átlagos száma per BCDXX mag2 | A BR-BCD* átlagos molekulatömege2 |
| 14 | 3,3 | 3,10 | 4,21 | , 1817 |
| 15 | 2,9 | 2,81 | 3,33 | 1675 |
| 16 | 2,5 | 2,43 | 2,73 | 1578 |
| 17 | 2,5 | 2,42 | 2,33 | 1513 |
| 18 | 2,2 | 2,15 | 2,14 | 1482 |
| 19 | 1,9 | 1,80 | 1,93 | 1448 |
| 20 | 1,6 | 1,51 | 2,05 | 1467 |
| 21-24 | 4,4 | 3,15 | 1,78 | 1424 |
’ elágazó láncú β-ciklodextrinek (branched - cyclodextrins) xx β-ciklodextrinek (β cyclodextrins) minden frakció 1 liter térfogatú a becslés azon a feltételezésen alapult, hogy a kromatográfiás csúcsok azonosak a BR-B-CD’ konerzióelegy kromatográfiás csúcsaival.
4. példa
51,2 g (5,8%) elágazó β-ciklodextrint tartalmazó
882,8 g-os mintát, miután azt hagyományos módon aktív szénnel és ioncserélővel kezeltük, a 2. példában leírt oszlopra vittük.
Az elágazó láncú β-ciklodextrineket a 7 literes és literes elúciós térfogat között kaptuk. A 7-10 literes frakció 5,4 g elágazó láncú β-ciklodextrint, a 10-25 literes frakciók 31,75 g β-ciklodextrint tartalmazott. Összesen 37,15 g elágazó láncú β-ciklodextrint izoláltunk, ami szennyezett, kis elágazó láncú β-ciklodextrin tartalmú elegyek esetében is mutatja az eljárás hatékonyságát. Egy igen nagymértékben terhelt oszlopon 72,6%-os hozammal 84,9%-os tisztaságú anyagot különítettünk el.
Természetes, hogy a jelen találmány előnyös foganatosítási módjai, amelyeket a találmány bemutatására választottunk, magukba foglalják a jelen találmány előnyös foganatosítási módjainak mindazon változtatásait és módosításait, amelyek a jelen találmány szellemétől és körétől nem távolodnak el.
5. példa
III. táblázat
| Mátrix | Hídvcgyület (csoport) | Kötés | Zárványvcgyülel (csoport) |
| 1. polisztirol | -CH2N®(CH3)3 | ionos | (CH3)3CCH2COO - |
| 2. keresztkötéses dextrin | ©XC2H5 -O(CH2)2N-CH2CH(OH)CH3 xc2h5 | ionos | <^^-(CH2)2COOö- |
HU 206 380 Β
| Mátrix | Hídvegyülct (csoport) | Kötés | Zárvány vegyület (csoport) |
| 3. keresztkötéses dextrin | mint a 2. | ionos | (C H 3) 3 CC 0 Οθ- |
| 4. keresztkötéses dextrin | mint a 2. | ionos | coo°— |
| 5. cellulóz | mint a 2. | ionos | mint a 3. |
| 6. cellulóz | mint a 2. | ionos | mint a 4. |
| 7. cellulóz | -CHrNH(CH2)3CO- | kovalens | |
| 8. cellulóz | mint a 7. | kovalens | <^>-ch2conh (CH2)2 NH |
| 9. Sepharose® CL4B | aktivált epoxi | kovalens | DL-triptofán |
| 10. Biogel® p-6 | etilén-diamin | kovalens | benzoil-klorid |
| 11. Biogel® p-6 | etilén-diamin | kovalens | adamantil-1-karbonsav |
| 12. Biogel® p-6 | etilén-diamin | kovalens | 2-hidroxi-3-naftilsav-anhidrid |
| 13. agaróz | cianogén bromid | kovalens | 4-fenil-butil-amin |
| 14. agaróz | cianogén bromid | kovalens | 4-fenoxi-fenil-amin |
ÍV. táblázat
| Példa | Zárvány vegyüld | Külső méret í!0'inm) |
| 1-4. | benzoát ion | 4-6 |
| 5. | (CH3)3CCH2COO - | 3-5.5 |
| 5. | ( —(CH2)2COO — | 5-6 |
| 5, | (ch3)3CH^OV- co°- | 3-5.5 |
HU 206 380 Β
| Példa | Zárvány vegyület | Külső méret (10 10m) |
| 5. | ch2 COO —- | 5,5-6,5 |
| 5. | mint a 3. | 3-5,5 |
| 5. | mint a 4. | 3-5,5 |
| 5. | (CH3)3c-^oy-NH- | 3-5,5 |
| 5. | —ch2conh (CH2)2 NH 1 | 5,5-6,5 |
| 5. | DL-triptofán | 5,5-7 |
| 5. | benzoil-klorid | 4-6 |
| 5. | adamantil-1 -karbonsav | 5-6 |
| 5. | 2-hidroxi-3-naftilsav-anhidrid | 6-7 |
| 5. | 4-fenil-butíl-amin | 4-6 |
| 5. | 4-fenoxi-fen il-amin | 4-6 |
SZABADALMI IGÉNYPONTOK
Claims (6)
1. Eljárás elágazó láncú β-ciklodextrinek lánchosszú- 35 ság alapján egy mátrixon való frakcionálására, azzal jellemezve, hogy különböző lánchosszúságú elágazó láncú β-ciklodextrineket tartalmazó oldatot a mátrixon bocsátunk keresztül, amelyhez egy hídvegyületen keresztül - ionos vagy kovalens kötéssel - egy zárvány 40 vegyületet kapcsoltunk, amely az elágazó láncú β-ciklodextrin üregébe beilleszkedik és külső mérete 3-7xlO~10 m és a fenti elágazó láncú β-ciklodextrineket a lánchosszúság szerinti frakciókban eluáljuk.
2, Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, 45 hogy a zárvány vegyületet - a hídvegyület megfelelő megválasztásával - a mátrix felületétől 6-18xl0_lt) m távolságra rögzítjük.
3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy zárvány vegyületként előnyösen egy benzoátot, β-naftolt vagy fenolftaleint alkalmazunk.
4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hídvegyületként bifunkciós alifás vagy aromás vegyületeket alkalmazunk, amelyek kovalens kötést képeznek mind a mátrixszal, mind a zárvány vegyülettel.
5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a mátrixon való átbocsátás előtt az elágazó láncú β-ciklodextrineket tartalmazó oldatot melegítjük.
6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a mátrixot melegítjük, és melegített állapotban tartjuk, mialatt az elágazó láncú β-ciklodextrint tartalmazó oldatot átengedjük.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/232,307 US5007967A (en) | 1988-08-15 | 1988-08-15 | Separation and purification of branched beta cyclodextrins |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUT51301A HUT51301A (en) | 1990-04-28 |
| HU206380B true HU206380B (en) | 1992-10-28 |
Family
ID=22872608
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU894198A HU206380B (en) | 1988-08-15 | 1989-08-15 | Process for fractionation of branched-chained beta-cyclodextrins according to chain length |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5007967A (hu) |
| EP (1) | EP0382836B1 (hu) |
| JP (1) | JPH02218702A (hu) |
| DE (1) | DE68921191T2 (hu) |
| HU (1) | HU206380B (hu) |
| WO (1) | WO1990001565A1 (hu) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5227372A (en) * | 1990-03-07 | 1993-07-13 | Children's Medical Center Corporation | Method for retaining ophthalmological agents in ocular tissues |
| US5194094A (en) * | 1991-06-12 | 1993-03-16 | American Maize-Products Company | Fractionating starch hydrolysates |
| US5928745A (en) * | 1994-06-23 | 1999-07-27 | Cellresin Technologies, Llc | Thermoplastic fuel tank having reduced fuel vapor emissions |
| US5776842A (en) * | 1994-06-23 | 1998-07-07 | Cellresin Technologies, Llc | Cellulosic web with a contaminant barrier or trap |
| US5985772A (en) * | 1994-06-23 | 1999-11-16 | Cellresin Technologies, Llc | Packaging system comprising cellulosic web with a permeant barrier or contaminant trap |
| US5492947A (en) * | 1994-06-23 | 1996-02-20 | Aspen Research Corporation | Barrier material comprising a thermoplastic and a compatible cyclodextrin derivative |
| US5658390A (en) * | 1994-06-29 | 1997-08-19 | American Maize-Products Company | Purification of beta cyclodextrin |
| US5696245A (en) * | 1995-06-07 | 1997-12-09 | The University Of Montana | Fructofuranosyl substituted polymers and methods for their production |
| US5882565A (en) * | 1995-12-11 | 1999-03-16 | Cellresin Technologies, Llc | Barrier material comprising a thermoplastic and a compatible cyclodextrin derivative |
| US7635773B2 (en) | 2008-04-28 | 2009-12-22 | Cydex Pharmaceuticals, Inc. | Sulfoalkyl ether cyclodextrin compositions |
| HUE058834T2 (hu) | 2012-02-15 | 2022-09-28 | Cydex Pharmaceuticals Inc | Elõállítási eljárás ciklodextrin-származékokhoz |
| WO2014066274A1 (en) | 2012-10-22 | 2014-05-01 | Cydex Pharmaceuticals, Inc. | Alkylated cyclodextrin compositions and processes for preparing and using the same |
| FI3183295T3 (fi) | 2014-08-22 | 2023-09-25 | Cydex Pharmaceuticals Inc | Fraktioidut alkyloidut syklodekstriinikoostumukset ja menetelmät niiden valmistamiseksi ja käyttämiseksi |
| CN112646059B (zh) * | 2020-12-23 | 2021-12-28 | 江南大学 | 一种高速逆流色谱分离纯化麦芽糖基环糊精的方法 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US808232A (en) * | 1904-06-22 | 1905-12-26 | Gen Electric | Electrolytic meter. |
| JPS6192592A (ja) * | 1984-10-12 | 1986-05-10 | Norin Suisansyo Shokuhin Sogo Kenkyusho | 分岐サイクロデキストリンの製造方法 |
| JPH0626667B2 (ja) * | 1985-10-31 | 1994-04-13 | メルシャン株式会社 | サイクロデキストリン吸着材及びその用途 |
| FI87464C (fi) * | 1986-11-19 | 1993-01-11 | Alko Ab Oy | Foerfarande foer isolering och rening av cyklodextriner |
| US4808232A (en) * | 1986-12-08 | 1989-02-28 | American Maize-Products Company | Separation and purification of cyclodextrins |
| JPH068325B2 (ja) * | 1986-12-19 | 1994-02-02 | 日研化学株式会社 | マルトシル−サイクロデキストリン類の分離方法 |
| US4840679A (en) * | 1987-07-08 | 1989-06-20 | American Maize-Products Company | Purification and separation of branched beta-cyclodextrins |
-
1988
- 1988-08-15 US US07/232,307 patent/US5007967A/en not_active Expired - Fee Related
-
1989
- 1989-08-15 JP JP1210559A patent/JPH02218702A/ja active Granted
- 1989-08-15 HU HU894198A patent/HU206380B/hu not_active IP Right Cessation
- 1989-08-15 WO PCT/US1989/003483 patent/WO1990001565A1/en active IP Right Grant
- 1989-08-15 DE DE68921191T patent/DE68921191T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1989-08-15 EP EP89909465A patent/EP0382836B1/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE68921191D1 (de) | 1995-03-23 |
| JPH0587084B2 (hu) | 1993-12-15 |
| EP0382836A1 (en) | 1990-08-22 |
| EP0382836A4 (en) | 1991-01-23 |
| DE68921191T2 (de) | 1995-06-22 |
| HUT51301A (en) | 1990-04-28 |
| JPH02218702A (ja) | 1990-08-31 |
| US5007967A (en) | 1991-04-16 |
| EP0382836B1 (en) | 1995-02-15 |
| WO1990001565A1 (en) | 1990-02-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU206380B (en) | Process for fractionation of branched-chained beta-cyclodextrins according to chain length | |
| US4808232A (en) | Separation and purification of cyclodextrins | |
| Usui et al. | Enzymic synthesis of useful chito-oligosaccharides utilizing transglycosylation by chitinolytic enzymes in a buffer containing ammonium sulfate | |
| Bosso et al. | The behavior of chitin towards anhydrous hydrogen fluoride. Preparation of β-(1→ 4)-linked 2-acetamido-2-deoxy-d-glucopyranosyl oligosaccharides | |
| Pazur | Affinity chromatography of macromolecular substances on adsorbents bearing carbohydrate ligands | |
| EP0220719B1 (en) | Cyclodextrin absorbing material and its use | |
| Oates et al. | Further investigations into the structure of human gastric mucin: The structural configuration of the oligosaccharide chains | |
| Frey et al. | Affinity purification and characterization of a binding protein for a hepta-β-glucoside. Phytoalexin elicitor in soybean | |
| Misaki et al. | Glycosyl moiety of the lima bean lectin. | |
| Oshima et al. | Structural studies of plant gum from sap of the lac tree, Rhus vernicifera | |
| US20120165516A1 (en) | Filler for optical isomer separation | |
| US4904306A (en) | Separation and purification of gamma cyclodextrin | |
| US4867884A (en) | Separation of cyclodextrins by affinity chromatography | |
| US5536826A (en) | Process for preparing amino-functional cyclodextrin derivative | |
| FI87464B (fi) | Foerfarande foer isolering och rening av cyklodextriner. | |
| Shannon et al. | Starch synthesis studies in Zea mays: II. Molecular distribution of radioactivity in starch | |
| Rozie et al. | Crosslinked potato starch as an affinity adsorbent for bacterial α-amylase | |
| Larm et al. | Gaschromatographic Analysis of the Substitution Pattern of Hydroxyethyl Starch | |
| Dai et al. | Cyclodextrin-based chiral stationary phases for high-performance liquid chromatography | |
| WO1992002283A1 (en) | Chiral separation media | |
| EP0045464B1 (en) | Process for producing cyclodextrins | |
| EP0373391A1 (en) | Sorbents on cyclodextrin basis | |
| US5273820A (en) | Separation and purification of cyclodextrins | |
| JP2533748B2 (ja) | 光学異性体を分離するための組成物 | |
| JP3086076B2 (ja) | 新規ガラクトシル−分岐シクロデキストリン |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees |