GR20170100034A - Η πρωτεϊνη c9jv37 ως δεικτης για την προγνωση και διαγνωση της προεκλαμψιας κατα την διαρκεια της κυησης - Google Patents
Η πρωτεϊνη c9jv37 ως δεικτης για την προγνωση και διαγνωση της προεκλαμψιας κατα την διαρκεια της κυησης Download PDFInfo
- Publication number
- GR20170100034A GR20170100034A GR20170100034A GR20170100034A GR20170100034A GR 20170100034 A GR20170100034 A GR 20170100034A GR 20170100034 A GR20170100034 A GR 20170100034A GR 20170100034 A GR20170100034 A GR 20170100034A GR 20170100034 A GR20170100034 A GR 20170100034A
- Authority
- GR
- Greece
- Prior art keywords
- c9jv37
- protein
- eclampsia
- pregnancy
- human
- Prior art date
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 102
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 99
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 title claims abstract description 61
- 201000011461 pre-eclampsia Diseases 0.000 title claims abstract description 40
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims description 12
- 239000003550 marker Substances 0.000 title abstract description 4
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 title description 3
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 claims abstract description 31
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims abstract description 15
- 208000002296 eclampsia Diseases 0.000 claims abstract description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 23
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 22
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 17
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 6
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 claims description 6
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 claims description 5
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 claims description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 claims 4
- 238000001262 western blot Methods 0.000 claims 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims 2
- 238000002101 electrospray ionisation tandem mass spectrometry Methods 0.000 claims 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims 2
- 238000005040 ion trap Methods 0.000 claims 2
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 claims 2
- 238000005497 microtitration Methods 0.000 claims 2
- 238000010844 nanoflow liquid chromatography Methods 0.000 claims 2
- 238000002170 nanoflow liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 claims 2
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 claims 2
- 238000000672 surface-enhanced laser desorption--ionisation Methods 0.000 claims 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 claims 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 25
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 19
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 19
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 17
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 7
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 7
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 7
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 6
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 6
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010047139 Vasoconstriction Diseases 0.000 description 4
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 4
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 4
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 4
- VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N dithioerythritol Chemical compound SC[C@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N 0.000 description 4
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 4
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 4
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000539 two dimensional gel electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 230000036266 weeks of gestation Effects 0.000 description 4
- 206010001580 Albuminuria Diseases 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000037849 arterial hypertension Diseases 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 3
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 3
- 230000008347 uteroplacental blood flow Effects 0.000 description 3
- 230000025033 vasoconstriction Effects 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]propane-1-sulfonate Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 0.000 description 2
- 206010000087 Abdominal pain upper Diseases 0.000 description 2
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 2
- 206010008111 Cerebral haemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 206010055690 Foetal death Diseases 0.000 description 2
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 2
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004005 Prostaglandin-endoperoxide synthases Human genes 0.000 description 2
- 108090000459 Prostaglandin-endoperoxide synthases Proteins 0.000 description 2
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 2
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 2
- 229940072645 coumadin Drugs 0.000 description 2
- 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 2
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 2
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 2
- 231100001046 intrauterine death Toxicity 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000000575 proteomic method Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 description 2
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 2
- DSNBHJFQCNUKMA-SCKDECHMSA-N thromboxane A2 Chemical compound OC(=O)CCC\C=C/C[C@@H]1[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)O[C@@H]2O[C@H]1C2 DSNBHJFQCNUKMA-SCKDECHMSA-N 0.000 description 2
- 210000002993 trophoblast Anatomy 0.000 description 2
- 230000001573 trophoblastic effect Effects 0.000 description 2
- PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N warfarin Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=CC=C1 PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CUKWUWBLQQDQAC-VEQWQPCFSA-N (3s)-3-amino-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s,3s)-1-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[(1s)-1-carboxyethyl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-3-(1h-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-ox Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 CUKWUWBLQQDQAC-VEQWQPCFSA-N 0.000 description 1
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- 102100026802 72 kDa type IV collagenase Human genes 0.000 description 1
- 101710151806 72 kDa type IV collagenase Proteins 0.000 description 1
- 208000009206 Abruptio Placentae Diseases 0.000 description 1
- 102000005862 Angiotensin II Human genes 0.000 description 1
- 101800000733 Angiotensin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000004881 Angiotensinogen Human genes 0.000 description 1
- 108090001067 Angiotensinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000015427 Angiotensins Human genes 0.000 description 1
- 108010064733 Angiotensins Proteins 0.000 description 1
- 208000003343 Antiphospholipid Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000005666 Apolipoprotein A-I Human genes 0.000 description 1
- 108010059886 Apolipoprotein A-I Proteins 0.000 description 1
- 238000009010 Bradford assay Methods 0.000 description 1
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 1
- 102000003780 Clusterin Human genes 0.000 description 1
- 108090000197 Clusterin Proteins 0.000 description 1
- 206010061452 Complication of pregnancy Diseases 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- 208000034423 Delivery Diseases 0.000 description 1
- 206010048554 Endothelial dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 102100040510 Galectin-3-binding protein Human genes 0.000 description 1
- 101710197901 Galectin-3-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 208000036818 High risk pregnancy Diseases 0.000 description 1
- 208000003623 Hypoalbuminemia Diseases 0.000 description 1
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 208000005107 Premature Birth Diseases 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010026552 Proteome Proteins 0.000 description 1
- 208000032023 Signs and Symptoms Diseases 0.000 description 1
- 206010041277 Sodium retention Diseases 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 206010047141 Vasodilatation Diseases 0.000 description 1
- 206010047571 Visual impairment Diseases 0.000 description 1
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000003926 acrylamides Chemical class 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000003277 amino acid sequence analysis Methods 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 229950006323 angiotensin ii Drugs 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 208000009190 disseminated intravascular coagulation Diseases 0.000 description 1
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 1
- 230000008694 endothelial dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 208000013088 frontal headache Diseases 0.000 description 1
- 230000024924 glomerular filtration Effects 0.000 description 1
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- -1 lipid peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000002055 nanoplate Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 235000011837 pasties Nutrition 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003836 peripheral circulation Effects 0.000 description 1
- 230000036513 peripheral conductance Effects 0.000 description 1
- 230000036581 peripheral resistance Effects 0.000 description 1
- 201000008532 placental abruption Diseases 0.000 description 1
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 1
- 210000005059 placental tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 108010064377 prostacyclin synthetase Proteins 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000036454 renin-angiotensin system Effects 0.000 description 1
- 201000005608 severe pre-eclampsia Diseases 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 229940124549 vasodilator Drugs 0.000 description 1
- 239000003071 vasodilator agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/36—Gynecology or obstetrics
- G01N2800/368—Pregnancy complicated by disease or abnormalities of pregnancy, e.g. preeclampsia, preterm labour
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/50—Determining the risk of developing a disease
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Κατά την διάρκεια των πρώτων μηνών της κύησης στο περιφερικό αίμα εγκύων γυναικών που αργότερα εμφάνισαν προεκλαμψία ή/και υπερτασική νόσο ή/και εκλαμψία, διαπιστώθηκε ότι η πρωτεΐνη C9JV37 (C9JV37_HUMAN) εμφανίζει ποσοτικές ή/και ποιοτικές διαφορές σε σχέση με το περιφερικό αίμα γυναικών που είχαν φυσιολογική κύηση. Η πρωτεΐνη αυτή μπορεί να αποτελέσει στόχο και να χρησιμοποιηθεί ως προγνωστικός ή/και διαγνωστικός δείκτης για την πρόβλεψη της εμφάνισης προεκλαμψίας ή/και υπερτασικής νόσου ή/και εκλαμψίας κατά τη διάρκεια της κύησης.
Description
ΠΕΡΙΓΡΑΦΗ ΚΑΙ ΣΧΕΔΙΑ (ΕΙΚΟΝΕΣ)
Α. ΤΙΤΛΟΣ ΤΗΣ ΕΦΕΥΡΕΣΗΣ
Η πρωτεΐνη C9JV37 ως δείκτης για την πρόγνωση και διάγνωση της προεκλαμψίας κατά τη διάρκεια της κύησης.
Β. ΤΕΧΝΙΚΟ ΠΕΔΙΟ ΣΤΟ ΟΠΟΙΟ ΑΝΑΦΕΡΕΤΑΙ Η ΕΦΕΥΡΕΣΗ
Η παρούσα εφεύρεση αναφέρεται στην πρωτεΐνη C9JV37 (C9JV37_Human) η οποία, μπορεί να αποτελέσει στόχο και να χρησιμοποιηθεί ως προγνωστικός ή και διαγνωστικός δείκτης για την πρόβλεψη της εμφάνισης προεκλαμψίας ή/και υπερτασικής νόσου ή/ και εκλαμψίας κατά τη διάρκεια της κύησης. Ειδικότερα, κατά την διάρκεια των πρώτων μηνών της κύησης στο περιφερικό αίμα εγκύων γυναικών που αργότερα εμφάνισαν προεκλαμψία ή/και υπερτασική νόσο ή/και εκλαμψία, διαπιστώθηκε ότι η πρωτεΐνη C9JV37 (C9JV37_ΗUMAN) εμφανίζει ποσοτικές ή/και ποιοτικές διαφορές σε σχέση με το περιφερικό αίμα γυναικών που είχαν φυσιολογική κύηση.
Γ. ΣΤΑΘΜΗ ΤΗΣ ΠΡΟΗΓΟΥΜΕΝΗΣ ΤΕΧΝΙΚΗΣ
Η κύηση είναι δυνατόν να συνυπάρχει με μία ποικιλία παθήσεων των διαφόρων συστημάτων, η εξέλιξη των οποίων συνήθως επιδεινώνεται ή τουλάχιστον επηρεάζεται. Επιπλέον, μπορεί να εμφανισθούν προβλήματα υγείας, μείζονα ή ελάσσονα, τα οποία δεν προϋπήρχαν και εμφανίζονται για πρώτη φορά στην κύηση.
Η υπερτασική νόσος της κύησης και η προεκλαμψία (ΠΕ) και είναι παθολογικές καταστάσεις που εμφανίζονται αποκλειστικά κατά την διάρκεια της κύησης και κυρίως κατά τα τελευταία στάδια της και χαρακτηρίζονται από υψηλή αρτηριακή υπέρταση (επίπεδα αρτηριακής πίεσης > 140 / 90 mmHg), λευκωματουρία και οίδημα. Η προεκλαμψία συγκεκριμένα πρόκειται για επιπλοκή της κύησης, η οποία στις βαρύτερες μορφές της προκαλεί σημαντική αύξηση της νοσηρότητας και θνησιμότητας τόσο του εμβρύου όσο και της μητέρας. Κυήσεις που εμφανίζουν υπερτασική νόσο υπολογίζονται στο 10%-15% του συνόλου των κυήσεων ενώ οι κυήσεις που καταλήγουν σε προεκλαμψία υπολογίζονται στο 5%-7% του συνόλου των κυήσεων και χαρακτηρίζονται ώς κυήσεις υψηλού κινδύνου. Η υπερτασική νόσος της κύησης πρέπει να διαχωρίζεται από την χρόνια υπέρταση. Η χρόνια υπέρταση προϋπάρχει της κύησης ή εκδηλώνεται πριν από την 20ή εβδομάδα. Σε ένα ποσοστό 15%-20% η χρόνια υπέρταση μπορεί να εξελιχθεί σε προεκλαμψία. Στην περίπτωση αυτή παρατηρείται αύξηση της υπέρτασης κατά 20 mmHg με ταυτόχρονη εμφάνιση λευκωματουρίας και οιδημάτων. Ορισμένες φορές είναι δύσκολο να διευκρινισθεί εάν μία γυναίκα, που εμφάνισε προεκλαμψία, έπασχε ήδη από χρόνια υπέρταση. Η υπερτασική νόσος της κύησης, εάν δεν αντιμετωπισθεί, είναι δυνατόν να καταλήξει στην πλέον σοβαρή μορφή της, την εκλαμψία, η οποία χαρακτηρίζεται από διέγερση του κεντρικού νευρικού συστήματος και σπασμούς και συνοδεύεται από ιδιαίτερα υψηλά ποσοστά εμβρυϊκής και μητρικής θνησιμότητας.
Η ακριβής φύση της παθογένειας της υπερτασικής νόσου της κύησης παραμένει άγνωστη. Σύμφωνα με τις πρόσφατες υποθέσεις η προεκλαμψία θεωρείται νόσος του πλακούντα, η οποία δευτεροπαθώς προκαλεί μεταβολές στην ομαλή λειτουργία άλλων οργάνων και συστημάτων. Στις έγκυες με υπερτασική νόσο παρατηρείται δυσλειτουργία του ενδοθηλίου, που έχει ως αποτέλεσμα την παθολογική αντίδραση του ανοσολογικού συστήματος, ώστε να προκαλείται ανώμαλη διείσδυση της τροφοβλάστης στις ελικοειδείς αρτηρίες της μήτρας, απόφραξη πολλών αγγείων και αυξημένη παραγωγή ελευθέρων ριζών οξυγόνου.
Οι ελεύθερες ρίζες οξυγόνου μαζί με υπεροξείδια λιπιδίων προκαλούν περαιτέρω δυσλειτουργία του ενδοθηλίου, καθώς αδρανοποιούν τον παράγοντα χάλασης του ενδοθηλίου, ενεργοποιούν την κυκλοοξυγενάση, αναστέλλοντας έτσι την δράση της ενδοθηλιακής συνθετάσης της προστακυκλίνης και τέλος ευνοούν την παραγωγή θρομβοξάνης Α2 από τα αιμοπετάλια. Το αποτέλεσμα όλων αυτών είναι η αύξηση της σεροτονίνης του πλάσματος και τελικά της αγγειοτενσίνης II, η οποία βελτιώνει την μητροπλακουντιακή λειτουργία με αύξηση της πίεσης διήθησης. Ο μηχανισμός αυτός εμφανίζεται σε ήπιες μορφές προεκλαμψίας και έχει ως μοναδικό αποτέλεσμα την εμφάνιση αρτηριακής υπέρτασης στην μητέρα.
Αντίθετα, σε περιπτώσεις βαριάς προεκλαμψίας παρατηρείται σημαντική βλάβη του ενδοθηλίου και αδυναμία δράσης των αυξημένων επιπέδων της σεροτονίνης. Το γεγονός αυτό προκαλεί αδυναμία βελτίωσης της μητροπλακουντιακής λειτουργίας, που έχει ως αποτέλεσμα την προοδευτική αγγειοσυστολή και την περαιτέρω συσσώρευση αιμοπεταλίων. Τελικά, εγκαθίσταται η υπέρταση με ταυτόχρονη ελάττωση της μητροπλακουντιακής ροής του αίματος.
Παθοφυσιολογία της νόσου
Η προεκλαμψία αποτελεί μία πολυσυστηματική νόσο, στην οποία η αρχική βλάβη εντοπίζεται στον πλακούντα. Οι βλάβες στον πλακούντα έχουν ως αποτέλεσμα την τοπική ισχαιμία και την απελευθέρωση ενός ειδικού παράγοντα από την συγκυτιοτροφοβλάστη, που προκαλεί περιφερική αγγειοσύσπαση και κυτταρική δυσλειτουργία. Οι διαταραχές αυτές προκαλούν αρχικά μεταβολές στην νεφρική λειτουργία και στον όγκο του αίματος και στην συνέχεια την εκδήλωση συμπτωμάτων από όλα σχεδόν τα συστήματα της εγκύου.
Κατά την κύηση, ιδιαίτερα κατά το 2ο τρίμηνο, παρατηρείται σημαντική αύξηση του όγκου του αίματος και του όγκου παλμού της εγκύου. Αντίθετα, παρατηρείται ελάττωση της αρτηριακής πίεσης και περιφερική αγγειοδιαστολή λόγω ελάττωσης των περιφερικών αντιστάσεων. Στην υπερτασική νόσο πολλοί από τους παράγοντες, που ρυθμίζουν τις περιφερικές αγγειακές αντιστάσεις, όπως οι προσταγλανδίνες ή το σύστημα ρενίνης-αγγειοτενσίνης, μεταβάλλονται σημαντικά κατά την διάρκεια της κύησης με αποτέλεσμα την διαταραχή της ισορροπίας αγγειοσυσπαστικών-αγγειοδιασταλτικών ουσιών, την αύξηση των αντιστάσεων και τελικά την εμφάνιση υπέρτασης.
Η ισχαιμία που προκαλείται λόγω της αγγειοσυστολής στην μητροπλακουντιακή κυκλοφορία συντελεί στην καταστροφή του πλακουντιακού ιστού και στην απελευθέρωση τροφοβλαστικών στοιχείων στην περιφερική κυκλοφορία. Τα τροφοβλαστικά αυτά στοιχεία είναι πλούσια στον ειδικό παράγοντα που επισπεύδει την διάχυτη ενδοαγγειακή πήξη και προκαλεί την εμφάνιση βλαβών στους νεφρούς, στο ήπαρ και στον πλακούντα. Η νεφρική βλάβη, σε συνδυασμό με την ελάττωση της αιματικής ροής, προκαλεί την ελάττωση του ρυθμού της σπειραματικής διήθησης με αποτέλεσμα την κατακράτηση Na+, ύδατος και ελάττωσης του ενδοαγγειακού όγκου σε σχέση με τον εξωκυττάριο. Η αύξηση του εξωκυτταρίου όγκου προκαλεί την εμφάνιση οιδήματος, το οποίο στην πλειοψηφία των περιπτώσεων αποτελεί το πρώτο κλινικό σημείο της προεκλαμψίας. Ταυτόχρονα, η αυξημένη κατακράτηση Na+ αυξάνει την δραστηριότητα της αγγειοτενσίνης Π, συντελώντας έτσι σε περαιτέρω αγγειοσυστολή και ιστική βλάβη.
Σε ορισμένες περιπτώσεις, κατά την φυσιολογική κύηση, είναι δυνατόν να εμφανισθούν πλακουντιακά έμφρακτα, στην περίπτωση όμως της προεκλαμψίας συναντιόνται σε αυξημένη συχνότητα. Το γεγονός αυτό προκαλεί την ελάττωση της μητροπλακουντιακής ροής του αίματος, με αποτέλεσμα την ενδομήτρια υπολειπόμενη ανάπτυξη του εμβρύου, που μερικές φορές μπορεί να οδηγήσει και στον ενδομήτριο θάνατο του.
Στην υπερτασική νόσο η λειτουργία του ήπατος επηρεάζεται σημαντικά, με αύξηση των τιμών την ηπατικών ενζύμων, ιδιαίτερα στην αρχή της νόσου, ενώ σε βαριές καταστάσεις μπορεί να εκδηλωθεί και ίκτερος.
Σε σοβαρές μορφές προεκλαμψίας η ταυτόχρονη παρουσία αιμόλυσης, αύξησης των τιμών των ηπατικών ενζύμων και θρομβοπενίας δημιουργεί το σύνδρομο H.E.L.L.P. Ο μηχανισμός του συνδρόμου συνίσταται στην απόφραξη πολλών αγγείων, που έχει ως αποτέλεσμα την συγκόλληση και περαιτέρω κατανάλωση των αιμοπεταλίων. Η θρομβοπενία τις περισσότερες φορές είναι σοβαρή και μπορεί να οδηγήσει σε εγκεφαλική αιμορραγία της μητέρας.
Συμπτώματα - Διάγνωση
Τα χαρακτηριστικά συμπτώματα και σημεία της προεκλαμψίας είναι η αρτηριακή υπέρταση, η λευκωματουρία και το οίδημα. Παρ' ότι μπορεί στην αρχή να είναι ασυμπτωματική, υπάρχουν συμπτώματα τα οποία δεν θα πρέπει να παρερμηνευθούν, μια και συχνά αποτελούν την αρχική εκδήλωση της νόσου, αλλά και είναι ιδιαίτερα δυσοίωνα. Αυτά τα συμπτώματα είναι η μετωπιαία κεφαλαλγία, οι διαταραχές της όρασης και το άλγος του επιγαστρίου.
Η αρτηριακή υπέρταση αποτελεί το κυριότερο σημείο και κριτήριο για την διάγνωση της προεκλαμψίας. Πολλές πρωτοτόκες γυναίκες εμφανίζουν μία μικρή αύξηση της αρτηριακής πίεσης κατά το 2ο τρίμηνο της κύησης. Αύξηση όμως της διαστολικής πίεσης κατά 15 mmHg ή της συστολικής κατά 30 mmHg συνδέεται με την εμφάνιση της νόσου.
Η εμφάνιση του οιδήματος, αν και είναι φυσιολογικό εύρημα στις περισσότερες γυναίκες κατά την κύση, αποτελεί πολλές φορές σημαντικό προγνωστικό σημείο της νόσου. Το οίδημα συνήθως γενικεύεται ταχύτατα και είναι ιδιαίτερα εμφανές στο πρόσωπο, στα άνω και στα κάτω άκρα. Το οίδημα οφείλεται στην υπολευκωματιναιμία, είναι ζυμώδες και αφήνει εντύπωμα κατά την εφαρμογή πίεσης. Η απότομη αύξηση του σωματικού βάρους σε διάστημα 1-2 ημερών αυξάνει τις υποψίες για την εμφάνιση της νόσου.
Η πρωτεϊνουρία εμφανίζεται αργότερα από την υπέρταση και συνήθως μετά την ανάπτυξη του οιδήματος, όταν πλέον η νόσος έχει εγκατασταθεί.
Η εμφάνιση της κεφαλαλγίας αποτελεί συχνό σύμπτωμα της βαριάς μορφής της νόσου. Έχει συνήθως μετωπιαία εντόπιση και δεν υποχωρεί με την λήψη απλών αναλγητικών. Η εμφάνιση επιγαστρικού άλγους ή, συνηθέστερα, άλγους στο δεξιό υποχόνδριο είναι συχνό σύμπτωμα, ιδιαίτερα σε σοβαρές μορφές της νόσου και χαρακτηριστικά σε περιπτώσεις συνδρόμου H.E.L.L.P. Οφείλεται συνήθως σε ισχαιμία του ήπατος ή σε διόγκωση της ηπατικής κάψας, λόγω του οιδήματος και της αιμορραγίας
Επιπλοκές
Η υπερτασική νόσος της κύησης συνδέεται με την εμφάνιση επιπλοκών τόσο από την μητέρα όσο και από το έμβρυο. Οι επιπλοκές εμφανίζονται συνήθως σε σοβαρές μορφές της νόσου.
Οι μητρικές επιπλοκές, που μπορούν να εμφανισθούν, συνίστανται κυρίως στην εμφάνιση αποκόλλησης του πλακούντα, αιμόλυσης, εγκεφαλικής αιμορραγίας, ηπατικών και νεφρικών βλαβών. Όσον αφορά στο έμβρυο, η ελάττωση της αιματικής ροής συνδέεται με αυξημένη συχνότητα προώρου τοκετού, υπολειπόμενης ανάπτυξης ή ακόμη και με ενδομήτριο θάνατο.
Πρόληψη της νόσου
Μια και οι περισσότερες έγκυες γυναίκες είναι ασυμπτωματικές στα αρχικά στάδια της νόσου, καθίσταται απαραίτητος ο τακτικός έλεγχος, ιδιαίτερα σε εκείνες οι οποίες εμφανίζουν προδιάθεση για την εμφάνιση της νόσου.
Η αιφνίδια αύξηση του σωματικού βάρους ή της διαστολικής αρτηριακής πίεσης, ιδιαίτερα κατά το δεύτερο ήμισυ της κύησης, αποτελεί ένδειξη εμφάνισης της νόσου. Κάθε έγκυος γυναίκα θα πρέπει να εξετάζεται τουλάχιστον μία φορά τον μήνα και τακτικότερα μετά την 32η εβδομάδα της κύησης με έλεγχο του σωματικού βάρους, της αρτηριακής πίεσης και με τον απαραίτητο εργαστηριακό έλεγχο.
Για την πρόληψη της νόσου, ιδιαίτερα στις γυναίκες με προδιάθεση, έχει χρησιμοποιηθεί η ασπιρίνη σε ορισμένες περιπτώσεις, όπως π.χ. όταν υπάρχει αντιφωσφολιπιδικό σύνδρομο. Η ασπιρίνη δρα ως αναστολέας της δραστηριότητας της κυκλο-οξυγενάσης και της συνάθροισης των αιμοπεταλίων. Η χαμηλή δόση της ασπιρίνης αναστέλλει την σύνθεση της θρομβοξάνης Α2. Έτσι, συστήνεται σε γυναίκες με οικογενειακό ή ατομικό ιστορικό προεκλαμψίας ή εκλαμψίας η λήψη ασπιρίνης σε δόση 60 mg/ημέρα από την 16η εβδομάδα της κύησης μέχρι τον τοκετό.
Δ. ΠΑΡΟΥΣΙΑΣΗ ΤΗΣ ΕΦΕΥΡΕΣΗΣ ΕΤΣΙ ΟΠΩΣ ΑΥΤΗ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΖΕΤΑΙ ΑΠΟ ΤΙΣ ΑΞΙΩΣΕΙΣ
Με μεθόδους πρωτεωμικής όπως αναλυτικά περιγράφονται ακολούθως, μελετήθηκε ορός περιφερικού αίματος τεσσάρων γυναικών που ελήφθη κατά την 11-12 εβδομάδα κύησης και στη συνέχεια εμφάνισαν προεκλαμψία κατά το τελευταίο τρίμηνο της κύησής τους και ορός από έξι γυναίκες με πλήρως φυσιολογική κύηση που ελήφθη κατά την 11-12 εβδομάδα κύησης.
Μεθοδολογία
Η Πρωτεωμική ανάλυση περιλαμβάνει τον διαχωρισμό των πρωτεϊνών σε πήκτωμα ακρυλαμίδης με ηλεκροφόρηση δύο διαστάσεων και τη ταυτοποίηση των πρωτεϊνών με φασματογραφία μάζας. Η διαδικασία της ταυτοποίησης των πρωτεϊνών, εκτός από τις αναλυτικές αυτές τεχνικές, περιλαμβάνει και εξαιρετικά εξειδικευμένα υπολογιστικά προγράμματα (softwares) για την ταυτοποίηση τους, την ανάλυση της εικόνας της γέλης, τη σύγκριση, την ποσοτικοποίηση και την αποθήκευση των αποτελεσμάτων σε βάσεις δεδομένων.
Διαχωρισμός Πρωτεϊνών με ηλεκροφόρηση πηκτώματος δύο διαστάσεων
Η τεχνική βασίζεται στο ταυτόχρονο διαχωρισμό των πρωτεϊνών με βάση το ηλεκτρικό φορτίο και το μοριακό βάρος με αποτέλεσμα την εμφάνιση εκατοντάδων πρωτεϊνών που καμία άλλη από τις υπάρχουσες μεθόδους δεν μπορεί να επιτύχει. Η μελέτη περιλαμβάνει σε πρώτη φάση την ισοηλεκτρική εστίαση των πρωτεϊνών (isoelectric focucing, IHE) δηλαδή τον διαχωρισμό τους με βάση το ηλεκτρικό τους φορτίο και σε δεύτερη φάση τον διαχωρισμό τους με βάση το μοριακό τους βάρος.
Η ΙΗΕ είναι ουσιαστικά μία διαδικασία εξισορόπησης κατά τη διάρκεια της οποίας με την επίδραση ενός ηλεκτρικού πεδίου υψηλού δυναμικού οι πρωτεΐνες κινούνται κατά μήκος ταινίας (strip) σε πήκτωμα παραγώγων ακρυλαμίδης (immobilines) διαφορικού pH (IPG strip). Έτσι, οι πρωτεΐνες κατά τη διάρκεια της κίνησης τους κατά μήκος του πηκτώματος ακινητοποιούνται και εστιάζονται στα σημεία του πηκτώματος στα οποία εξουδετερώνεται το φορτίο τους. Οι ταινίες IPG είναι διαθέσιμες σε αρκετά μεγάλο εύρος pH (pH 3-10 και μήκος 7- 24 cm) και φθάνει έως και συγκεκριμένα διαφορικά pH (π.χ. 4.5-5.5). Ένα από τα πλεονεκτήματα των ταινιών αυτών είναι η σχετικά μεγάλη ποσότητα δείγματος πρωτεϊνών που μπορεί να αναλυθεί. Οι συνθήκες της ΙΗΕ εξαρτώνται από τη ποσότητα του προς ανάλυση δείγματος, τη μέθοδο της εφαρμογής του δείγματος στην ταινία, το ηλεκτρικό δυναμικό και τον χρόνο εστίασης.
Ο διαχωρισμός των πρωτεϊνών κατά τη δεύτερη διάσταση, με βάση το μοριακό βάρος, γίνεται σε πήκτωμα πολυακριλαμίδης τόσο σταθερής περιεκτικότητας όσο και διαφορικής ανάλογα με το κατ’ εκτίμηση μέγεθος των προς διαχωρισμό πρωτεϊνών. Τα πλέον χρησιμοποιούμενα πηκτώματα είναι το σταθερής περιεκτικότητας σε ακριλαμίδη 12% και το γραμμικά διαφορικό πήκτωμα ακριλαμίδης 9-16% για διαχωρισμό πρωτεϊνών μεγέθους 5-200kDa.
Μετά το διαχωρισμό γίνεται χρώση των πρωτεϊνών με ευαίσθητες χρωστικές η επιλογή των οποίων εξαρτάται από τη μέθοδο ταυτοποίησης που ακολουθεί. Συνήθως χρησιμοποιείται το κυανούν της κουμασίνης που επιλέγεται κατά κύριο λόγο όταν η ταυτοποίηση των πρωτεϊνών πρόκειται να γίνει με φασματογραφία μάζας.
Δεδομένης της ετερογένειας των πρωτεϊνών, στα πηκτώματα δύο διαστάσεων οι πρωτεΐνες αντιπροσωπεύονται συνήθως με περισσότερες από μία κηλίδες με αποτέλεσμα ο αριθμός των εκφραζόμενων προϊόντων να είναι μεγαλύτερος από τον αριθμό των γονιδίων που τις κωδικοποιούν. Στους ευκαριωτικούς οργανισμούς έχει παρατηρηθεί ότι 5-20 διαφορετικές πρωτεΐνες είναι δυνατό να κωδικοποιούνται από το ίδιο γονίδιο.
Φασματομετρία μάζας
Η μαζική και ταχεία ταυτοποίηση των πρωτεϊνών που διαχωρίζονται στα πηκτώματα δύο διαστάσεων γίνεται με φασματομετρία μάζας τύπου: 1) MALDI-TOF/MS (matrix-assisted laser desorption-ionization time of flight- MALDI-ToF-MS) και 2) εναιωρήματος ίοντων (ion spray).
Οι κηλίδες των πρωτεϊνών αποκόπτονται από το πήκτωμα της ακρυλαμίδης και ακολουθεί αποχρωματισμός τους, επώαση με τρυψίνη και εκχύλιση των παραγόμενων πεπτιδίων από το πήκτωμα. Τα πεπτίδια αυτά αναλύονται με φασματογραφία μάζας και ο προσδιορισμός της μάζας πεπτιδίων γίνεται με βάση το χρόνο πτήσεώς τους. Περαιτέρω, ανάλυση με τους φασματογράφους μάζας περιλαμβάνει την ανάλυση της αλληλουχίας των πεπτιδίων αυτών. Με εξειδικευμένο λογισμικό συγκρίνεται η μάζα των ανιχνευθέντων πεπτιδίων με τη θεωρητική μάζα πεπτιδίων όλων των διαθέσιμων πρωτεϊνών όλων των ειδών και ακολουθεί η πλήρης ταυτοποίηση της πρωτεΐνης με την χρήση υπολογιστικών προγραμμάτων και τη διερεύνηση πρωτεϊνικών βάσεων δεδομένων. Η ταυτοποίηση της πρωτεΐνης βασίζεται συνήθως σε περισσότερα από πέντε πεπτίδια (έως και είκοσι σε ορισμένες περιπτώσεις πρωτεϊνών μεγάλης μάζας) ενώ η πιθανότητα λάθους της ανίχνευσης είναι μικρότερη από 10<"6>. Ασφαλέστερα αποτελέσματα λαμβάνονται επιπλέον μέσω της ανάλυσης της αλληλουχίας των αμινοξέων, των παραγόμενων από μία πρωτεΐνη πεπτιδίων, μέσω της τεχνικής του εναιωρήματος ιόντων (ion spray). Στην περίπτωση αυτή η ταυτοποίηση της πρωτεΐνης γίνεται μέσω της αμινοοξίκης αλληλουχίας των πεπτιδίων και η πιθανότητα λάθους στην ανίχνευση είναι μικρότερη από 10<-10>ανάλογα από τον αριθμό των πεπτιδίων που χρησιμοποιήθηκαν για την ταυτοποίηση της πρωτεΐνης. Το μεγάλο πλεονέκτημα της τεχνικής MALDI-TOF-MS είναι η δυνατότητά της για γρήγορη ανάλυση εκατοντάδων πρωτεϊνικών κηλίδων σε μικρό χρονικό διάστημα ενώ της τεχνικής του αναιωρήματος ιόντων (ion spray) της ασφαλούς ταυτοποίησης των πρωτεϊνών. Οι δύο αυτές τεχνικές χρησιμοποιούνται ταυτόχρονα και συμπληρωματικά στην πρωτεωμική κυρίως για την ταυτοποίηση διαφορών στο πρωτέωμα που σχετίζονται με παθολογικές καταστάσεις και την ταυτοποίηση των πρωτεϊνών αυτών που μπορούν να χρησιμοποιηθούν περαιτέρω σαν «δείκτες» ή «θεραπευτικοί στόχοι» .
Με τη χρήση των παραπάνω μεθοδολογιών της πρωτεωμικής μελετήθηκε ορός περιφερικού αίματος δώδεκα γυναικών, που ελήφθη κατά την 11<η>-12<η>εβδομάδα κύησης και στη συνέχεια εμφάνισαν προεκλαμψία κατά το τελευταίο τρίμηνο της κύησής τους και ορός από δώδεκα γυναίκες με πλήρως φυσιολογική κύηση που ελήφθη τις ίδιες εβδομάδες κύησης. Η ανάλυση περιέλαβε τον διαχωρισμό των πρωτεϊνών με πήκτωμα δύο διαστάσεων και στην συνέχεια την ταυτοποίηση των διαφορικά εκφραζόμενων πρωτεϊνών με φασματομετρία μάζας (βλ. ΕΙΚΟΝΑ 1). Από την σύγκριση των πηκτωμάτων μεταξύ των ορών των γυναικών που εμφάνισαν προεκλαμψία σε σχέση με τους ορούς των γυναικών που είχαν φυσιολογική κύηση, διαπιστώθηκε ποσοτική διαφορά σε μία κηλίδα που από την αναλύση της με φασματομετρία μάζας ταυτοποιήθηκε ως την πρωτεΐνη με κωδικό C9JV37 (C9JV37_ΗUMAN) (βλ. ΕΙΚΟΝΑ 2). Συγκεκριμένα, στον ορό περιφερικού αίματος των γυναικών που εμφάνισαν προεκλαμψία κατά το τρίτο τρίμηνο της κύησης η πρωτεΐνη με κωδικό C9JV37 (C9JV37 HUMAN) ήταν αυξημένη σε σχέση με την ποσότητά της στον ορό των γυναικών που είχαν φυσιολογικό τοκετό.
Η πρωτεΐνη C9JV37 (C9JV37_HUMAN) έχει μέγεθος 324 αμινοξέων, MB: 35.937, p / 4,74 και φαίνεται ότι είναι τμήμα της πρωτεΐνης Ρ00734 (THRB_HUMAN, προθρομβίνη) η οποία έχει μέγεθος 622 αμινοξέων, MB: 70.037, ρ / 5,23. Στα πειράματα που πραγματοποιπηθηκαν η πρωτεΐνη C9JV37 (C9JV37_HUMAN) ταυτοποιήθηκε από επτά πεπτίδια στη περιοχή Μοριακού Βάρους 37kD και ρί περίπου 4,8 (βλ. ΕΙΚΟΝΑ 1 και 2) ενώ η πρωτεΐνη Ρ00734 (THRB_HUMAN, προθρομβίνη) ταυτοποιήθηκε από ένδεκα πεπτίδια στην περιοχή Μοριακού Βάρους περίπου 70kD και pl 5,3 (βλ. ΕΙΚΟΝΑ 1 και ΕΙΚΟΝΑ 3). Συγκεκριμένα τα πεπτίδια από το αμινοξύ 149 -167, από το 189-207 και από το 189-214 ταυτοποιήθηκαν μόνο στην πρωτεΐνη C9JV37 και όχι στην πρωτεΐνη Ρ00734 ενώ τα πεπτίδια από το αμινοξύ 100-117, από το 315-327, από το 328-344, από το 354-363, από το 470-486, από το 518-537 και από το 600-608 ταυτοποιήθηκαν μόνο στην πρωτεΐνη Ρ00734 και όχι στην πρωτεΐνη C9JV37. Η πρωτεΐνη C9JV37 (C9JV37_HUMAN) αποτελεί ανεξάρτητη και αυτοτελή πρωτεΐνη όπως δηλώνεται και από τον δικό της ξεχωριστό αριθμό καταχώρησης στις βάσεις δεδομένων, (βλ. ΕΙΚΟΝΑ 4).
Από τα αποτελέσματα που ελήφθησαν και παρουσιάσθησαν παραπάνω, φαίνεται ότι η πρωτεΐνη C9JV37 (C9JV37_HUMAN) μπορεί να αποτελέσει δείκτη και να χρησιμοποιηθεί για την πρόγνωση ή/και διάγνωση ή/και εκτίμηση της πιθανότητας μία έγκυος να εμφανίσει προεκλαμψία ή/και εκλαμψία ή/και υπερτασική νόσο κατά τη διάρκεια της κύησης της.
Ε. ΠΛΕΟΝΕΚΤΗΜΑΤΑ ΤΗΣ ΕΦΕΥΡΕΣΗΣ ΚΑΙ ΣΥΝΔΕΣΗ ΤΟΥΣ MΕ ΤΗΝ ΑΡΣΗ ΤΩΝ ΜΕΙΟΝΕΚΤΗΜΑΤΩΝ ΤΗΣ ΣΤΑΘΜΗΣ ΤΗΣ ΠΡΟΗΓΟΥΜΕΝΗΣ ΤΕΧΝΙΚΗΣ
Από διεθνείς στατιστικές φαίνεται ότι η προεκλαμψία εμφανίζεται στο 5% περίπου των κυήσεων σαν αποτέλεσμα της αυξημένης αρτηριακής πίεσης κατά τη διάρκεια της κύησης. Οι παράγοντες για να θεωρηθεί μία κύηση ως υψηλού κινδύνου για εμφάνιση προεκλαμψίας και εκλαμψίας είναι η εμφάνιση υπερτασικής νόσου, το μεταβολικό σύνδρομο κ.ά. Ως δείκτες για την πρόγνωση της εμφάνισης προεκλαμψίας έχουν κατά καιρούς προταθεί μεταλλάξεις σε διάφορα γονίδια, αύξηση πρωτεϊνών σε βιολογικά υγρά (π.χ. της ΜΜΡ-2 στα ούρα), μεταβολής σε ανοσολογικές πρωτεΐνες (C-reactive protein (CRP), IL-1 β, IL-6, IL-10, και TNF-α), μεταβολικές πρωτεΐνες (Apolipoprotein ΑΙ και All) και πρωτεΐνες όπως η clusterin, το fibrinogen, η fibronectin, το angiotensinogen και η galectin 3-binding protein.
Στην παρούσα εφεύρεση, στον ορό του περιφερικού αίματος εγκύων γυναικών, που ελήφθη κατά την 11<η>-12<η>εβδομάδα της κύησης και εμφάνισαν προεκλαμία μετέπειτα στην κύηση, διαπιστώθηκε ότι η πρωτεΐνη C9JV37 (C9JV37 _HUMAN) εκφράζεται διαφορικά σε σχέση με τον ορό εγκύων γυναικών την ίδια εβδομάδα της κύησης που όμως είχαν φυσιολογική εγκυμοσύνη. Η πρωτεΐνη αυτή βρέθηκε να εκφράζεται διαφορικά στον ορό όλων των κυήσεων που μελετήθηκαν και εμφάνισαν προεκλαμψία, σε σχέση με τις φυσιολογικές κυήσεις. Από τα αποτελέσματα αυτά φαίνεται ότι η πρωτεΐνη αυτή ολόκληρη ή τμήματά της μπορεί να αποτελέσει δείκτη και να χρησιμοποιηθεί με ασφάλεια και αξιοπιστία για την διάγνωση και εκτίμηση της εμφάνισης προεκλαμψίας ή/και της εκλαμψίας ή και της υπερτασικής νόσου κατά τη διάρκεια της κύησης.
ΣΤ. ΠΕΡΙΓΡΑΦΗ ΤΩΝ ΑΠΕΙΚΟΝΙΣΕΩΝ ΠΟΥ ΦΑΙΝΟΝΤΑΙ ΣΤΙΣ ΕΙΚΟΝΕΣ
ΕΙΚΟΝΑ 1. Αντιπροσωπευτική παρουσίαση πηκτώματων ακρυλαμίδης δύο διατάσεων ορού περιφερικού αίματος εγκύου (11<ης>-12<ης>εβδομάδας κύησης), που έχουν παραχθεί εφαρμόζοντας την σχετική μεθοδολογία. Κάθε κηλίδα στα πηκτώματα αντιπροσωπεύει μία πρωτεΐνη. Α) Πήκτωμα ορού εγκύου που εμφάνισε προεκλαμψία, Β) Πήκτωμα ορού εγκύου που είχε φυσιολογική κύηση. Τα βέλη επισημαίνουν την πρωτεΐνη C9JV37 (C9JV37_HUMAN, entry No: C9JV37) και την πρωτεΐνη Ρ00734-προθρομβίνη (THRB_HUMAN, entry No: Ρ00734). Η κηλίδα που ταυτοποιήθηκε ως η πρωτεΐνη C9JV37 βρίσκεται στη περιοχή Μοριακού Βάρους 37kD και pl περίπου 4,8, ενώ η Ρ00734 ταυτοποιήθηκε στην περιοχή Μοριακού Βάρους περίπου 70kD και pl 5,2.
ΕΙΚΟΝΑ 2. Φύλλο ταυτοποίησης της πρωτεΐνης C9JV37. Η ταυτοποίηση έχει προέλθει από επτά πεπτίδια (επιση μαίνονται με κόκκινο χρώμα) στη βάση ταυτοποίησης πρωτεϊνών MASCOT. Το ποσοστό ταυτοποίησης της πρωτεΐνης από τα πεπτίδια είναι 24%. Τα πεπτίδια από το αμινοξύ 149 -167, από το 189-207 και από το 189-214 οδήγησαν αποκλειστικά και μόνο στην πρωτεΐνη C9JV37.
ΕΙΚΟΝΑ 3. Φύλλο ταυτοποίησης της πρωτεΐνης Ρ00734. Η ταυτοποίηση έχει προέλθει από ένδεκα πεπτίδια (επισημαίνονται με κόκκινο χρώμα) στη βάση ταυτοποίησης πρωτεϊνών MASKOT. Το ποσοστό ταυτοποίησης της πρωτεΐνης από τα πεπτίδια είναι 22%. Τα πεπτίδια από το αμινοξύ 100-117, από το 315-327, από το 328-344, από το 354-363, από το 470-486, από το 518-537 και από το 600-608 οδήγησαν αποκλειστικά και μόνο στην πρωτεΐνη Ρ00734.
ΕΙΚΟΝΑ 4. Στοίχιση των πρωτεϊνών Ρ00734 και C9JV37. Η στοίχηση έγινε με βάση το πρόγραμμα BLAST (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov). Οι κοινές περιοχές των δύο πρωτεϊνών επισημαίνονται με κίτρινο χρώμα.
ΕΙΚΟΝΑ 5. Μέτρηση της οπτικής πυκνότητας (Optical Density, OD) της πρωτεΐνης C9JV37 στον ορό του περιφερικού αίματος εγκύων που εμφάνισαν προεκλαμψία και γυναικών με φυσιολογική κύηση. Τα βέλη υποδεικνύουν την πρωτεΐνη C9JV37 στα πηκτώματα ακρυλ OD οκτώ εγκύων που εμφάνισαν π κυήσεων. Τα αποτελέσματα παρουσιάζο αμίδης. Οι τιμές είναι ο μέσος όρος της ροεκλαμψία και οκτώ φυσιολογικών νται και στο σχετικό γράφημα
Ζ. ΛΕΠΤΟΜΕΡΕΙΑΚΗ ΑΝΑΠΤΥΞΗ ΕΝΟΣ ΤΡΟΠΟΥ ΠΡΑΓΜΑΤΟΠΟΙΗΣΗΣ ΤΗΣ ΕΦΕΥΡΕΣΗΣ
Παραλαμβάνεται ορός περιφερικού αίματος εγκύων γυναικών στην 11<η>- 12<η>εβδομάδα κύησης και φυλάσεται στους -80°C μέχρι τη χρήση του. Στην συνέχεια στο δείγμα γίνεται προσδιορισμός πρωτεΐνης με την μέθοδο Bradford και μέσω νανοτριχοειδούς ηλεκτροφόρησης σε νανοπλακέτες στο Bioanalyzer 2100 (Agilent Tech).
Προετοιμασία των δειγμάτων
Ποσότητα ορού στην οποία περιέχεται 1 mg ολικής πρωτεΐνης, διαλύεται μέχρι τα 250μl, με διάλυμα ουρίας/θειουρίας [8Μ urea, 40mM Tris-HCL (pH 8.5), 2M thiourea, 4%CHAPS, 1% dithioerythritol (DTE), 0.2% IPG buffer pH 3-10 ή 4-7] στο οποίο έχουν ήδη προστεθεί 18 μl διαλύματος αναστολέων πρωτεασών μέχρι τελικού όγκου 500 μL και αναδεύεται για την πλήρη διαλυτοποίηση των πρωτεϊνικών μορίων.
Διαχωρισμός Πρωτεϊνών με ηλεκτροφόρηση δύο διαστάσεων (2-DE) Χρησιμοποιούνται ταινίες ακινητοποιημένης κλίσης pH (ταινίες IPG, Immobilized pH Gradient Strips), εύρους ισοηλεκτρικού σημείου 3-10 (pH 3-10 NonLinear, 18cm). Οι ταινίες IPG ενυδατώνονται σε ειδικό σκαφίδιο με χρήση διαλύματος ενυδάτωσης (8Μ urea, 4% CHAPS και 1% DTE) για περισσότερο από δεκαπέντε ώρες και εν συνεχεία, οι ενυδατωμένες ταινίες IPG τοποθετούνται στο σκαφίδιο ισοηλεκτρικής εστίασης και 1 mg ολικής πρωτεΐνης από το προς μελέτη δείγμα, τελικού όγκο 250μL, τοποθετείται στο βασικό και όξινο άκρο των ταινιών σε ειδικές θήκες.
Οι ταινίες IPG τοποθετούνται στην ειδική εσοχή της συσκευής Ισοηλεκτρικής εστίασης. Η ισοηλεκτρική εστίαση του ορού του περιφερικού αίματος γίνεται στα 5000 Volts για συνολικά 85.000Vhrs. Μετά το τέλος της ισοηλεκτρικής εστίασης πραγματοποιείται αναγωγή με κατάλληλο διάλυμα [6Μ urea, 50mM Tris-HCL (pH 8.8), 2% (w/v) SDS, 30% (v/v) glycerol και 0.5% (w/v) DTE] και αλκυλίωση των εστιασμένων πρωτεϊνών πάνω στις ταινίες IPG με διάλυμα τριφθοροξεικού οξέως. Ακολούθως οι εξισορροπημένες ταινίες IPG τοποθετηθούνται σε πηκτώματα SDS-πολυακρυλαμιδίου 12% σε ειδικές κασέτες και ξεκινά ο διαχωρισμός των πρωτεϊνών κατά τη 2η διάσταση. Η ηλεκτροφόρηση πραγματοποιείται με την επίδραση σταθερού ρεύματος 40 mA/πήκτωμα και διακόπτεται χειροκίνητα μόλις το μέτωπο της χρωστικής (κυανού της βρωμοφαινόλης) φθάσει σε απόσταση 1 mm από τη βάση του πηκτώματος. Ακολουθεί μονιμοποίηση των πηκτώματων, ώστε τα διαχωρισμένα πρωτεϊνικά μόρια να μονιμοποιηθούν μέσα στα πηκτώματα και να διατηρήσουν συγκεκριμένη χωροταξική θέση (50% methanol με 5% phosphoric acid). Τέλος κάθε πήκτωμα βάφεται με εμβάπτιση του για 15 ώρες σε διάλυμα κυανούν της κουμασίνης σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή (Novex Colloidal Blue staining kit). Η χρωστική προσδένεται στοιχειομετρικά στα πρωτεϊνικά μόρια διευκολύνοντας την ανίχνευση ποσοτικών διαφορών μεταξύ των διαφόρων δειγμάτων.
Μέτρηση της πρωτεΐνης C9JV37
Ακολουθεί μέτρηση της οπτικής πυκνότητας (density) της κηλίδας που αντιστοιχεί στην πρωτεΐνη C9JV37 στο προς εξέταση δείγμα και συγκρίνεται με την οπτική πυκνότητα (density) της κηλίδας της πρωτεΐνης που εμφανίζεται στη περίπτωση φυσιολογικής κύησης. Στην περίπτωση κατά την οποία η κηλίδα που αντιστοιχεί στην πρωτεΐνη C9JV37 είναι εντονότερη και κατά συνέπεια η η οπτική πυκότητα της εν λόγω κηλίδας είναι μεγαλύτερη από την αντίστοιχη κήλιδα της φυσιολογικής κύησης, εκτιμάται και ότι η εγκυμονούσα γυναίκα έχει πολύ μεγάλες πιθανότητες να εμφανίσει προεκλαμψία σε ένα επόμενο στάδιο της κύησης και τίθεται σε συνεχή παρακολούθηση (βλ. σχετικά ΕΙΚΟΝΑ 5).
Claims (13)
1. Μέθοδος εκτίμησης ή/και διάγνωσης της προεκλαμψίας ή/και εκλαμψίας ή/και υπερτασικής νόσου κατά τη διάρκεια της κύησης, περιλαμβάνουσα: α) την ποιοτική ή/και ποσοτική ανίχνευση της πρωτεΐνης C9JV37 (C9JV37_HUMAN), σε βιολογικό υγρό της εγκύου,
β) τη σύγκριση της τιμής που ελήφθη στο ανωτέρω στάδιο α) με αντίστοιχη τιμή της εν λόγω πρωτεΐνης από το ίδιο βιολογικό υγρό εγκύων γυναικών οι οποίες είχαν φυσιολογική εγκυμοσύνη.
2. Μέθοδος, σύμφωνα με την αξίωση 1, χαρακτηριζόμενη από το ότι η εν λόγω εκτίμηση ή/και διάγνωση είναι θετική αν η ποσότητα της πρωτεΐνης C9JV37 (C9JV37_HUMAN) είναι διάφορος της ποσότητάς της στις φυσιολογικές κυήσεις.
3. Μέθοδος, σύμφωνα με τις αξιώσεις 1 και 2, χαρακτηριζόμενη από το ότι η εν λόγω εκτίμηση ή/και διάγνωση είναι θετική αν η ποσότητα της πρωτεΐνης C9JV37 (C9JV37_HUMAN) είναι υψηλότερη από την αντίστοιχη εγκύων γυναικών οι οποίες είχαν φυσιολογική εγκυμοσύνη.
4. Μέθοδος, σύμφωνα με τις αξιώσεις 1 έως 3, χαρακτηριζόμενη από το ότι η εν λόγω προγεννητική εκτίμηση ή/και διάγνωση είναι θετική αν η ποσότητα της πρωτεΐνης C9JV37 (C9JV37_HUMAN) είναι διαφορετική (μεγαλύτερη ή μικρότερη) από την ποσότητα μίας πρωτεΐνης αναφοράς.
5. Μέθοδος σύμφωνα με τις αξιώσεις 1 έως 4, χαρακτηριζόμενη από το ότι το εν λόγω βιολογικό υγρό είναι περιφερικό αίμα, πλάσμα περιφερικού αίματος, ορός περιφερικού αίματος, ούρα κ.ά.
6. Μέθοδος σύμφωνα με τις αξιώσεις 1 έως 5, χαρακτηριζόμενη από το ότι η εν λόγω ποιοτική και/ή ποσοτική ανίχνευση επιτυγχάνεται με εφαρμογή μίας εκ των μεθόδων: νανοτεχνολογίας, νανοτριχοειδούς ηλεκτροφόρησης σε μικροπλακέτα, ηλεκτροφόρησης (μίας ή δύο διαστάσεων), αποτύπωσης κατά Western (Western Blot), μικροτιτλοποίησης (απλής ή και πολλαπλής ELISA), χρωματογραφίας (HPLC, LC, nanoLC, GC, κ.λ.π.), φασματογραφίας/ φασματομετρίας/ φασματοσκοπίας μάζας [αποτύπωμα μάζας πεπτιδίων (peptide mass fingerprint), επακόλουθη θραύση (post source decay), MALDI ToF ή ESI MS/MS ή LC-MS/MS ή nanoLC-MS/MS ή FTICR ή τύπου ion trap ή τετράπολου αναλυτή μαζών (quadropole), ή χρόνου πτήσης (Time of flight, ToF) ή τύπου SELDI ή τύπου υψηλής διακρητικής ικανότητας (hight resolution MS, HRMS), ή τύπου GS-MS] ή/και συνδιασμού τους.
7. Μέθοδος σύμφωνα με τις αξιώσεις 1 έως 8, χαρακτηριζόμενη από το ότι για την εν λόγω ποιοτική ή/και ποσοτική ανίχνευση χρησιμοποιούνται φθορίζουσες χρωστικές ή ισότοπα ή αντισώματα ή ολιγονουκλεοτίδια ή και συνδυασμοί τους.
8. Χρήση της πρωτεΐνης C9JV37 (C9JV37_HUMAN) ή τμημάτων της για την εκτίμηση ή/και τη διάγνωση της προεκλαμψίας ή/και εκλαμψίας ή/και υπερτασικής νόσου κατά την κύηση.
9. Χρήση της πρωτεΐνης C9JV37 (C9JV37_HUMAN) ή τροποποιημένης μορφής ως συνεπεία μετα-μεταφραστικών αλλαγών ή τμημάτων της, για την παρασκευή ενός σκευάσματος για την θεραπεία της προεκλαμψίας ή/και εκλαμψίας ή/και υπερτασικής νόσου κατά την κύηση.
10. Κατασκευή ή/και χρήση ενός σκευάσματος βασισμένου στην πρωτεΐνη C9JV37 (C9JV37_HUMAN) ή τροποποιημένης μορφής ως συνεπεία μετα-μεταφραστικών αλλαγών ή τμημάτων της, για την πρόληψη ή/και θεραπεία της προεκλαμψίας ή/και εκλαμψίας ή/και υπερτασικής νόσου κατά την κύησης .
11. Συσκευασία (κιτ) περιλαμβάνουσα αντιδραστήρια και μέσα για την εκτίμηση ή/και διάγνωση της προεκλαμψίας ή/και εκλαμψίας ή/και υπερτασικής νόσου της κύησης, χαρακτηριζόμενη από το ότι περιλαμβάνει παράγοντες αναγνώρισης ή/και μέτρησης ή/και δέσμευσης της πρωτεΐνης C9JV37 (C9JV37_HUMAN) ή τμήματα της πρωτείνικής της αλληλουχίας.
12. Συσκευασία (κιτ) σύμφωνα με την αξίωση 11 , στην οποία τα εν λόγω αντιδραστήρια και μέσα είναι κατάλληλα για την εφαρμογή μίας εκ των μεθόδων: νανοτεχνολογίας, νανοτριχοειδούς ηλεκτροφόρησης σε μικροπλακέτα, μικροτιτλοποίησης (απλής ή και πολλαπλής ELISA), ηλεκτροφόρησης (μίας ή δύο διαστάσεων), αποτύπωσης κατά Western (Western blot), χρωματογραφίας (HPLC, LC, nanoLC, GC, κ.λπ.), φασματογραφίας/φασματομετρίας/φασματοσκοπίας μάζας [αποτύπωμα μάζας πεπτιδίων (peptide mass fingerprint), επακόλουθη θραύση (post source decay), MALDI ToF ή ESI MS/MS ή LC-MS/MS ή nanoLC-MS/MS ή FTICR ή τύπου ion trap ή τετράπολου αναλυτή μαζών (quadropole), ή χρόνου πτήσης (Time of flight, ToF) ή τύπου SELDI ή τύπου υψηλής διακρητικής ικανότητας (hight resolution MS, HRMS), ή τύπου GS-MS] ή/και συνδιασμού τους.
13. Συσκευασία (κιτ) σύμφωνα με τις αξιώσεις 11 έως 12, περιλαμβάνουσα περαιτέρω φθορίζουσες χρωστικές ή ισότοπα ή αντισώματα ή ολιγονουκλεοτίδια ή συνδυασμούς τους.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GR20170100034A GR20170100034A (el) | 2017-01-27 | 2017-01-27 | Η πρωτεϊνη c9jv37 ως δεικτης για την προγνωση και διαγνωση της προεκλαμψιας κατα την διαρκεια της κυησης |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GR20170100034A GR20170100034A (el) | 2017-01-27 | 2017-01-27 | Η πρωτεϊνη c9jv37 ως δεικτης για την προγνωση και διαγνωση της προεκλαμψιας κατα την διαρκεια της κυησης |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| GR20170100034A true GR20170100034A (el) | 2018-10-22 |
Family
ID=59285271
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| GR20170100034A GR20170100034A (el) | 2017-01-27 | 2017-01-27 | Η πρωτεϊνη c9jv37 ως δεικτης για την προγνωση και διαγνωση της προεκλαμψιας κατα την διαρκεια της κυησης |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| GR (1) | GR20170100034A (el) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20080233583A1 (en) * | 2007-02-20 | 2008-09-25 | Regents Of The University Of California | Biomarkers for preeclampsia |
| US20130177901A1 (en) * | 2010-06-18 | 2013-07-11 | Cezanne S.A.S. | Markers for the prognosis and risk assessment of pregnancy-induced hypertension and preeclampsia |
| US20140302538A1 (en) * | 2007-06-11 | 2014-10-09 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Markers for preeclampsia |
| EP1664797B1 (en) * | 2003-09-23 | 2015-11-11 | The General Hospital Corporation | Screening for preeclampsia |
| WO2016189163A1 (en) * | 2015-05-28 | 2016-12-01 | Electrophoretics Limited | Biomolecules involved in alzheimer's disease |
-
2017
- 2017-01-27 GR GR20170100034A patent/GR20170100034A/el unknown
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1664797B1 (en) * | 2003-09-23 | 2015-11-11 | The General Hospital Corporation | Screening for preeclampsia |
| US20080233583A1 (en) * | 2007-02-20 | 2008-09-25 | Regents Of The University Of California | Biomarkers for preeclampsia |
| US20140302538A1 (en) * | 2007-06-11 | 2014-10-09 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Markers for preeclampsia |
| US20130177901A1 (en) * | 2010-06-18 | 2013-07-11 | Cezanne S.A.S. | Markers for the prognosis and risk assessment of pregnancy-induced hypertension and preeclampsia |
| WO2016189163A1 (en) * | 2015-05-28 | 2016-12-01 | Electrophoretics Limited | Biomolecules involved in alzheimer's disease |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| XP 055396664 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Song et al. | Plasma biomarkers for mild cognitive impairment and Alzheimer's disease | |
| Carty et al. | Urinary proteomics for prediction of preeclampsia | |
| Song et al. | Plasma protein profiling of mild cognitive impairment and Alzheimer’s disease using iTRAQ quantitative proteomics | |
| Auer et al. | Serum profile in preeclampsia and intra-uterine growth restriction revealed by iTRAQ technology | |
| Beer et al. | Systematic discovery of ectopic pregnancy serum biomarkers using 3-D protein profiling coupled with label-free quantitation | |
| Madian et al. | Oxidative stress induced carbonylation in human plasma | |
| Cecconi et al. | Changes in amniotic fluid and umbilical cord serum proteomic profiles of foetuses with intrauterine growth retardation | |
| JP2010509596A (ja) | 妊娠中の雌における子宮内感染の検出または早産のリスクの決定のための子宮頸部液のプロテオーム解析 | |
| Jarkovska et al. | Development of ovarian hyperstimulation syndrome: interrogation of key proteins and biological processes in human follicular fluid of women undergoing in vitro fertilization | |
| AU2011340630A1 (en) | Biomarkers and parameters for hypertensive disorders of pregnancy | |
| JP6758184B2 (ja) | 神経疾患のバイオマーカーを同定するための方法および神経疾患の診断 | |
| Pecks et al. | Multifactorial analysis of affinity-mass spectrometry data from serum protein samples: a strategy to distinguish patients with preeclampsia from matching control individuals | |
| WO2009097579A1 (en) | Gestational age dependent proteomic changes of human maternal serum for monitoring maternal and fetal health | |
| US20210263042A1 (en) | Tandem-paired column chemistry for high-throughput proteomic exosome analysis | |
| EP3472615B1 (en) | Markers and their ratio to determine the risk for early-onset preeclampsia | |
| Park et al. | Identification of proteomic biomarkers of preeclampsia in amniotic fluid using SELDI-TOF mass spectrometry | |
| Hsu et al. | Proteomic profiling reveals α1-antitrypsin, α1-microglobulin, and clusterin as preeclampsia-related serum proteins in pregnant women | |
| Kim et al. | Expression changes of proteins associated with the development of preeclampsia in maternal plasma: A case‐control study | |
| Baczyk et al. | Spatiotemporal distribution of small ubiquitin‐like modifiers during human placental development and in response to oxidative and inflammatory stress | |
| Heitner et al. | Differentiation of HELLP patients from healthy pregnant women by proteome analysis—on the way towards a clinical marker set | |
| JP2021512315A (ja) | 循環マイクロ粒子関連バイオマーカーを利用する子癇前症の早期予測および予防に関する方法 | |
| Lu et al. | Serum markers of pre‐eclampsia identified on proteomics | |
| Bramham et al. | The non-invasive biopsy—will urinary proteomics make the renal tissue biopsy redundant? | |
| GR20170100034A (el) | Η πρωτεϊνη c9jv37 ως δεικτης για την προγνωση και διαγνωση της προεκλαμψιας κατα την διαρκεια της κυησης | |
| Anagnostopoulos et al. | Proteomics advancements in fetomaternal medicine |