FR3137836A1 - Fraction bioactive isolée de roses de la variété Evanrat pour une utilisation cosmétique apaisante de la peau et/ou des lèvres - Google Patents
Fraction bioactive isolée de roses de la variété Evanrat pour une utilisation cosmétique apaisante de la peau et/ou des lèvres Download PDFInfo
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Abstract
La présente invention concerne l’utilisation cosmétique d’un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, en tant qu’agent apaisant de la peau et/ou les lèvres.
Description
La présente invention concerne l’utilisation d’un extrait de roses de la variété Evanrat, aussi appelées roses ‘Jardin de Granville®’, sous la forme d’une fraction bioactive isolée. L’invention porte en outre sur l’utilisation d’une composition comprenant ledit extrait de roses de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’, sous la forme d’une fraction bioactive isolée. Selon la présente invention, cet extrait est utilisé à des fins cosmétiques, en tant qu’agent apaisant, et en particulier pour prévenir et/ou diminuer les phénomènes d’irritation, ainsi que les phénomènes de micro-inflammation.
La peau est la première barrière de protection de l'organisme vis-à-vis de l'environnement.
Elle renferme un système nerveux dense, essentiellement constitué de terminaisons nerveuses libres pénétrant jusqu’aux couches les plus externes de la peau. Ces prolongements de neurones sensitifs ou fibres nerveuses jouent un rôle majeur dans notre perception de l’environnement et permettent de mieux s’y adapter.
De par ce contact direct avec notre environnement, la peau est continuellement soumise à des stress d’origine exogène ou endogène susceptibles d’induire des réactions cutanées non pathologiques. Un stress exogène peut être d'origine biologique ou chimique, par exemple xénobiotiques, antigènes, allergènes, produits cosmétiques, composés susceptibles de provoquer une irritation de la peau, peelings ; ou d'origine environnementale (température, climat, rayonnement UV, pollution atmosphérique, notamment métaux lourds, ozones, fumée de cigarette...) ou encore d'origine mécanique (frottements, rasages, nettoyage...).
Tous ces facteurs agissent sur la peau et son système nerveux. En perturbant son équilibre, ils peuvent engendrer des phénomènes d’irritation et/ou de micro-inflammation, et concouririn fineà l’apparition de rougeurs, et/ou de démangeaisons ; des réactions cutanées inesthétiques pouvant aussi procurer un sentiment d’inconfort.
Pour se protéger de ces agressions quotidiennes, il existe un besoin constant de trouver de nouveaux agents capables de prévenir et/ou diminuer les réactions cutanées dues à des stress exogènes et/ou endogènes et capables d’apaiser la peau.
Dans ce contexte, la Demanderesse a mis en évidencein vitroles effets apaisants d’un extrait de roses de la variété Evanrat, sous la forme d’une « fraction sérique bioactive ». De manière inattendue, la Demanderesse a pu montrer que cet extrait agit comme un agent neuroprotecteur cutané.
En particulier, cet extrait est capable de favoriser la survie et/ou la pousse neuritique des neurones sensitifs humains situés au niveau de la peau. Cet extrait permet également d’augmenter le nombre des récepteurs TRPV1 impliqués de la transmission de la douleur et des sensations de démangeaisons. Il permet en outre de réduire la libération de neuropeptides CGRP et des cytokines pro-inflammatoires, induite par un stress irritant.
L’ensemble de ces effets permet d’envisager l’utilisation de cet extrait comme agent apaisant de la peau et/ou des lèvres, notamment pour prévenir et/ou diminuer les phénomènes d’irritation, ainsi que les phénomènes de micro-inflammation.
Un premier objet de l’invention porte sur l’utilisation cosmétique d’un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, en tant qu’agent apaisant de la peau et/ou les lèvres.
De préférence, ledit extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, est utilisé en tant qu’agent destiné à prévenir et/ou diminuer les phénomènes d’irritation de la peau et/ou des lèvres.
De préférence, lesdits phénomènes d’irritation sont notamment induits par au moins une condition choisie parmi la pollution atmosphérique, le stress, les molécules irritantes, les chocs thermiques, et/ou les frottements.
De préférence, ledit extrait est présent dans une composition cosmétique en une teneur allant de 0,001% à 50%, en particulier de 0,01% à 20%, de préférence de 0,01% à 10% et de préférence encore de 0,011% à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de ladite composition cosmétique.
De préférence, ladite composition cosmétique comprend en outre au moins un adjuvant cosmétique choisi parmi les antioxydants, les parfums, les vitamines, les agents épaississants, les agents émollients, les agents hydratants, les agents anti-âge, les agents liftants, les agents tenseurs, les agents repulpants, les agents apaisants, les agents antipollution, les agents éclaircissants ou dépigmentants, les charges, les nacres et leurs mélanges.
De préférence, ladite composition cosmétique est sous la forme d’une crème, émulsion huile-dans-eau, ou eau-dans-huile ou émulsion multiple, solution, suspension, gel, lait, lotion, ou sérum notamment pour la peau, d’un baume, d’un gloss ou d’un stick notamment pour les lèvres.
De préférence, ledit extrait ou ladite composition cosmétique est destinée à une application chez des sujets présentant une peau et/ou des lèvres irritée(s) et/ou stressée(s).
De préférence, ledit extrait ou ladite composition cosmétique est destinée à une application topique sur la peau et/ou les lèvres et en particulier sur la peau du visage et/ou du cou.
De préférence, ledit extrait est obtenu par un procédé comprenant les étapes :
a) nettoyage du matériel végétal, macération, pressage puis séparation mécanique du matériel végétal pour obtenir une dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) et un matériau enrichi en fibres (fraction A) ;
b) déstabilisation du DCI avec des ondes électromagnétiques puis séparation mécanique de la dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) pour obtenir le surnageant A et une Fraction Membranaire (fraction B) ;
c) ajustement du niveau de pH dans le surnageant A jusqu'à obtenir un pH supérieur à 6, de préférence un pH allant de 6 à 7, puis séparation mécanique du surnageant A pour obtenir le surnageant B et la fraction C (fraction cytoplasmique) ;
d)ajustement du niveau de pH dans le surnageant B jusqu’à obtenir un pH inférieur à 4,5 puis séparation mécanique du surnageant B pour donner une « Fraction sérique bioactive » et une fraction D (précipité) ; et
e) Optionnellement, mélange de la « fraction sérique bioactive » avec au moins un conservateur et/ou stabilisant.
Par « fraction bioactive » ou « fraction sérique bioactive » ou « fraction de sérum » ou « fraction bioactive isolée de roses », on entend un extrait de roses de la variété Evanrat, ou rose ‘Jardin de Granville®’, comprenant les enzymes, protéines, sucres, ions et autres molécules actives présentes dans le cytosol des cellules composant les différents tissus végétaux des roses. L’extrait selon l’invention est distinct d’un cryoextrait de pétales roses tel que décrit dans la demande FR3066388.
Les définitions qui suivent sont en lien avec les étapes du procédé de préparation de l’extrait selon l’invention.
Par « nettoyage » on entend l'élimination des débris des roses de Granville® fraîches, et de préférence des pétales frais, avant un traitement ultérieur, d'une manière qui évite de blesser la plante, ou l'élimination de composants précieux. Par exemple, il peut être effectué par rinçage à basse pression avec de l'eau potable dans des conditions où le lavage à l'eau de ruissellement ne contiendrait pas sensiblement de pigments végétaux. L'excès d'eau de lavage est ensuite éliminé des plantes lavées.
Par « macération » on entend le fait de transformer les roses de Granville® fraîches, et de préférence les pétales frais, en particules plus petites pour rompre leur intégrité et faciliter par la suite l'expulsion de la dispersion colloïdale intracellulaire (ICD) liquide. Des exemples d'instruments de macération appropriés comprennent, sans s'y limiter, des dispositifs tels qu'un concasseur, une meule ou un broyeur (par exemple, un broyeur à couteaux, un broyeur à marteaux, etc.). Pour éviter une dégradation du matériel végétal induite par la température, l'étape de macération peut inclure une surveillance de la température et la sélection des paramètres de macération garantissant qu'il n'y a pas d'augmentation significative de la température du matériel végétal au cours de cette étape.
Par « pressage » on entend la séparation de la matière liquide des roses de Granville® fraîches, et de préférence des pétales frais, par application d'une force mécanique. Cela inclut, mais sans s'y limiter, des techniques telles que le drainage par gravité ambiante, le pressage par un objet lourd, la force centrifuge d'un expulseur rotatif, la pression du piston d'une presse hydraulique, ou des rouleaux ou une vis de type approprié pour une presse.
Par « matériau enrichi en fibres » ou « MEF » ou « FEM » (Fibre Enriched Material), on entend une fraction solide et/ou semi-solide enrichie en fibres de roses de Granville® fraîches, de préférence de pétales frais, dont la dispersion colloïdale intracellulaire liquide (ICD) a été éliminée par pressage.
Par « dispersion colloïdale intracellulaire » ou « DCI » ou « ICD » (Intracellular Colloidal Dispersion) on entend la matière liquide expulsée par pressage de roses de Granville® fraîches, de préférence des pétales frais. Le liquide résultant contient des particules solides et/ou semi-solides dispersées et, potentiellement, des gouttelettes de liquides non miscibles à l'eau de diverses tailles (collectivement appelées particules), dans un milieu aqueux contigu. Les particules sont principalement constituées d'organites de cellules végétales, de fragments d'organites et de matières résiduelles enrichies en fibres. Le milieu aqueux est principalement constitué de cytosols et de vacuoles.
Par « ajustement », il est fait référence à la modification des activités des ions hydroxyde et hydronium dans le milieu aqueux de la DCI ou des fractions aqueuses produites par un traitement ultérieur de la DCI, l'activité de l'ion hydronium restant dans la plage trouvée dans les cellules végétales viables (par exemple, entre pH 3 et pH 9). Cette altération peut être accomplie, par exemple, par un procédé de séparation tel que la filtration S/L, la centrifugation, la filtration membranaire (avec des membranes bipolaires, ultrafiltration et microfiltration, osmose inverse), et/ou par addition d'un acide faible ou d'un alcali/base faible et par précipitation. Les paramètres d'ajustement sont sélectionnés pour être suffisants pour un changement particulier des paramètres physico-chimiques, tels que le pH, ou le potentiel de surface à l'interface électrolyte-air. De tels réglages facilitent les étapes de déstabilisation et/ou de séparation suivantes ; ou créer les conditions d'une bonne conservation et de stabilisation.
Par « déstabilisation » il est fait référence au traitement de la DCI ajusté utilisant des ondes électromagnétiques pour modifier de manière transitoire des propriétés physiques (telles que ε′0 qui est la composante réelle de la constante diélectrique basse fréquence). Il a été trouvé de manière inattendue que des modifications particulières dégradent la stabilité de la DCI en provoquant l'agglomération et/ou l'agrégation de particules en assemblages qui sont suffisamment grands et stables pour permettre et/ou améliorer après la séparation en fractions, avec certaines propriétés souhaitables.
Par « séparation » on entend la séparation de particules solides et/ou semi-solides, et de gouttelettes de liquide non aqueux à partir d'un liquide aqueux en exploitant la densité et/ou la taille des particules. Cela inclut, mais sans s'y limiter, des techniques telles que l’égouttage, la filtration (y compris la filtration utilisant un gradient de pression), l'écumage, la sédimentation par gravité ambiante, la décantation, la centrifugation ou une combinaison de ce qui précède. De préférence, on utilisera la séparation mécanique en flux continu, mais cela n'exclut pas le traitement par lots. « Séparation 1 » et « Séparation 2 » se réfèrent aux étapes respectives du procédé, effectuées avec des paramètres respectifs.
Par « surnageant », il est fait référence à un matériau aqueux à partir duquel des particules ont été séparées. « Surnageant A » et « Surnageant B » désignent les surnageants résultant des étapes de séparation respectives du procédé.
Par « précipité », il est fait référence aux particules à partir desquelles un matériau aqueux a été séparé. « Fraction B » et « Fraction C » désignent les précipités résultant des étapes de séparation respectives du procédé.
Les termes « fraction de sérum de roses de Granville® fraîches » et « fraction de sérum de pétales frais de roses de Granville® » désignent des compositions produites par le procédé tel que représenté ci-dessus et dans la sans conservateurs et/ou stabilisants ajoutés pour protéger la composition de l'ingrédient contre les facteurs environnementaux tels que la température, l'atmosphère (par exemple, l'oxygène), la lumière et les micro-organismes.
Par « conservateurs et/ou stabilisants » on entend des substances qui, lorsqu'elles sont ajoutées à une « fraction de sérum de roses de Granville® fraîches », de préférence une « fraction de sérum de pétales frais de roses de Granville® », la protègent contre les facteurs environnementaux tels que la température, l'atmosphère (par exemple l'oxygène), la lumière et les micro-organismes. Des substances appropriées particulières peuvent comprendre, sans limitation, un conservateur, un stabilisant et/ou un mélange de ceux-ci.
Le terme « sérum de roses de Granville® » ou « extrait de roses de Granville® fraîches » tel qu'utilisé ici signifie une combinaison d'une fraction de sérum de roses de Granville® fraîches et de conservateurs et/ou de stabilisants.
Le terme « sérum de pétales de roses de Granville® » ou « extrait de pétales frais de roses de Granville® » tel qu'utilisé ici signifie une combinaison d'une fraction de sérum de pétales frais de roses de Granville® et de conservateurs et/ou de stabilisants.
Extrait de rose : Fraction bioactive isolée de roses et procédé de préparation
La présente invention porte sur l’utilisation cosmétique d’un extrait de rose obtenu par un procédé particulier, mettant notamment en œuvre une étape de déstabilisation par ondes électromagnétiques. L’extrait obtenu à l’issu de ce procédé possède une activité supérieure comparativement aux extraits aqueux de roses, déjà connus.
Cet extrait est également appelé « Sérum Rose De Granville® »
Dans le contexte de la présente invention, on utilisera comme matériel végétal des roses de la variété Evanrat, aussi appelées roses ‘Jardin de Granville®’, et de préférence encore des pétales de roses de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’.
Le rosier ou rose ‘Jardin de Granville®’est une variété hybride proposée exclusivement par « Roses anciennes André Eve S.A.S » et protégée par Certificat d’Obtention Végétale sous le N°20110345 avec pour espèce la dénominationRosa L.et pour la variété la dénomination EVANRAT. Ce rosier buisson appartient au groupe des hybrides modernes, qui, de mai à octobre, se couvre de roses en permanence, montrant ainsi un excellent caractère remontant.
L’extrait utilisé dans la présente invention est donc un extrait de roses, plus particulièrement un extrait de roses de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’.
L’invention utilise de préférence des roses sélectionnées, dont les propriétés sont préservées par un environnement et un mode d’agriculture biologique.
L’extrait de roses utilisé dans la présente invention peut être préparé à partir de roses fraiches, congelées, lyophilisées, ou d’un mélange quelconque de celles-ci. Dans le contexte de l’invention, on utilise de préférence des roses fraiches.
Les plantes fraiches, c’est-à-dire vivantes, ont une activité métabolique maximale représentant donc une source optimale pour capturer tout le spectre des complexes et composés naturels et en conserver les propriétés. On privilégiera donc l’utilisation de roses fraiches. On pourra notamment vérifier la viabilité des plantes par leur activité photosynthétique. En particulier, la mesure de la fluorescence de la chlorophylle.
Ainsi, l’extrait de roses utilisé dans la présente invention est un extrait de roses de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’, sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches.
On distingue deux types de roses selon le moment de l’année où elles sont récoltées :
- Les roses d’hiver, généralement récoltées entre les mois de novembre et d’avril,
- Les roses d’été, généralement récoltées entre les mois de mai et d’octobre.
Selon un mode particulier, l’invention utilise des roses d’été, en particulier des pétales de roses d’été. Selon un autre mode, on utilisera de préférence, des roses d’hiver, en particulier des pétales de roses d’hiver.
L’extrait utilisé selon l’invention peut être préparé à partir des différentes parties de la plante, il peut donc s’agir d’un extrait de feuilles, un extrait de bourgeons, un extrait de fleurs (pétales), un extrait de sépales, un extrait de bois (tiges), un extrait de racines ou leurs mélanges.
Avantageusement, l’extrait utilisé selon l’invention est un extrait de pétales.
Selon un mode de réalisation préféré, l’extrait utilisé est un extrait de pétales frais, et plus particulièrement un extrait de pétales frais de roses de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’.
Il est particulièrement avantageux d’utiliser les pétales des roses de la variété Evanrat car ils sont riches en sucres monosaccharides (fructose, glucose, saccharose), des acides organiques (acide citrique, acide malique), des polyphénols (catéchine), de la vitamine C, des acides aminés (majoritairement acide aspartique, acide glutamique, asparagine et glutamine), des minéraux (cendres, potassium, calcium), et des caroténoïdes.
Par riche en sucres monosaccharides, on entend un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, dans lequel ledit extrait comprend au moins 500 µg/µL d’au moins un sucre monosaccharide choisi parmi le fructose, glucose et le saccharose.
Par riche en minéraux, on entend un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, dans lequel ledit extrait comprend au moins 500 mg/Kg d’au moins un minéral choisi parmi le potassium, le calcium et le sodium.
Avantageusement, le calcium améliore la différenciation épidermique et renforce la structure de la peau, tandis que le potassium amplifie l’hydratation cutanée et booste l’assimilation de l’énergie. Les phyto-sucres (fructose, glucose, saccharose) permettent de gorger les cellules cutanées d’énergie.
L’extrait de roses de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’, de préférence, l’extrait de pétales de roses de la variété Evanrat ou roses ‘Jardin de Granville®’, utilisé dans le contexte de la présente invention est sous la forme d’une fraction bioactive isolée et plus particulièrement sous la forme d’une fraction sérique bioactive. Comparativement aux extraits aqueux connus de l’art antérieur (ex : cryoextrait aqueux de fleurs (pétales) de rose de la demande FR3066388), cet extrait est plus concentré en composés naturels, notamment, en sucres, tels que le fructose ou le glucose, mais aussi en polyphénols ou encore en minéraux. Ainsi, de par le procédé particulier mis en œuvre pour obtenir cet extrait, l’extrait de rose utilisé dans le contexte de l’invention est distinct d’une eau de rose.
L’extrait de roses fraiches de la variété Evanrat ou roses ‘Jardin de Granville®’ utilisé dans le contexte de la présente invention, également appelé « Sérum Rose De Granville » est avantageusement obtenu par la mise en œuvre du procédé d’extraction décrit ci-après ainsi qu’à la .
De préférence on utilise comme matériel végétal des roses fraiches de la variété Evanrat ou roses ‘Jardin de Granville®’. Selon un mode préféré, il s’agit des pétales frais de roses de la variété Evanrat ou roses ‘Jardin de Granville®’.
Avantageusement, ledit procédé ne requiert l’ajout d’aucun solvant ou liquide exogène.
Le procédé mise en œuvre pour obtenir l’extrait utilisé selon l’invention comprend les étapes principales de :
a) nettoyage du matériel végétal, macération, pressage puis séparation mécanique du matériel végétal pour obtenir une dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) et un matériau enrichi en fibres (fraction A) ;
b) « Traitement A » puis séparation mécanique de la Dispersion Colloïdale Intracellulaire (DCI) pour obtenir le Surnageant A et une Fraction Membranaire (Fraction B) ;
c) « Traitement B » puis séparation mécanique du Surnageant A pour obtenir le Surnageant B et la Fraction C (Fraction Cytoplasmique) ;
d) « Traitement C » puis séparation mécanique du Surnageant B pour donner une « Fraction sérique bioactive » et une Fraction D (Précipité) ; et
e) Optionnellement, mélange de la « fraction sérique bioactive » avec au moins un conservateur et/ou stabilisant.
L’extrait de roses fraiches, de préférence de pétales de roses frais, de la variété Evanrat ou rose ‘Jardin de Granville®’ obtenu à l’issu de ce procédé, est une « fraction sérique bioactive » ou « fraction bioactive ». Il s’agit de l’extrait utilisé dans le contexte de la présente invention.
Dans un mode de réalisation préféré, l’extrait utilisé selon l’invention est obtenu par la mise en œuvre du procédé d’extraction divulgué dans les brevets EP2919757, JP 6130924, CN ZL201380057567.6, EP2491939B1, CN1929851B, les brevets américains n° 8 734 861 et n° 7 473 435 ; la demande de brevet US n° 16/078925.
Avantageusement, ce procédé d’extraction ne fait pas intervenir de solvants organiques, comme l'hexane qui pourrait entrainer de nombreux problèmes de sécurité des installations et des personnels, de santé humaine et de préservation de l'environnement. Cette technologie permet ainsi de réduire les émissions de composés organiques volatiles (COV). Il s’agit ainsi d’un procédé propre permettant d'extraire sans ajout de solvant sous forme d’extrait aqueux des protéines, sucres et autres co-produits de hautes qualités et directement utilisables en cosmétique.
De préférence, les fleurs de roses (Roses de Granville®) et 4 à 5 cm de tige sont récoltés de manière à éviter le hachage ou l’écrasement de la biomasse collectée pour éviter la perturbation de la structure cellulaire des fleurs. La viabilité des plantes collectées peut être testée à l’aide d’un fluoromètre à chlorophylle multimode OS5p (Opti-Sciences Inc, Hudson, NH, États-Unis).
Selon un mode de réalisation particulier les fleurs fraîches vivantes, y compris les pétales, le pistil et l’étamine, ont été retirées de la tige, y compris le sépale et le réceptacle, et emballées dans des sacs de stockage et sont placé(e)s immédiatement à des températures négatives comprises entre -20°C et -80°C, comme par exemple -20°C, -40°C ou -60°C. Les fleurs peuvent ainsi être stockées sur de longues périodes, comme par exemple plusieurs mois, ou plusieurs années, avant d’être utilisées aux fins du procédé d’extraction.
Selon un mode de réalisation préféré, les fleurs fraîches vivantes, y compris les pétales, le pistil et l’étamine, sont retirées de la tige, y compris le sépale et le réceptacle, et emballées dans des sacs de stockage et placées dans un stockage à une température comprise entre 0°C et 20°C et de préférence à une température comprise entre 2°C et 6°C jusqu’à ce que la récolte soit terminée.
Une fois la récolte terminée, les roses, de préférence les pétales de roses, sont immédiatement rincés par pulvérisation avec de l'eau de 10°C à 15°C pendant 0,1 à 0,3 minutes avec un débit de 5 à 6 litres par minute. L'excès d'eau est de préférence éliminé des fleurs rincées en les laissant égoutter pendant au moins 1 minute. Les fleurs rincées peuvent alors subir une macération, un pressage et une séparation par pressage mécanique, à rouleaux, hydrauliques, ou extracteur à jus pour extraire le contenu de la dispersion colloïdale intercellulaire liquide (DCI) du matériau enrichi en fibres (« Fraction A »).
A l’issue de ces étapes, le rendement de la fraction A est compris entre 30% et 65%, de préférence entre 35% et 60% et de manière encore préférée entre 40 % et 55 % (poids/poids).
Le DCI comprend typiquement de 2% à 20% de matière sèche, de préférence de 4% à 16% de matière sèche, et de manière encore préférée de 6 % à 12 % de matière sèche.
A cette étape, le DCI peut être congelé pour stockage. Typiquement, il est congelé à -20°C.
Lorsque le DCI a été congelé pour stockage, il doit préalablement être décongelé doucement. Typiquement, il est placé à décongeler à 4°C ou dans de la glace.
Le « traitement A » est réalisé par un traitement de déstabilisation du DCI avec des ondes électromagnétiques produites à partir de magnétrons fonctionnant à une fréquence comprise entre 2,45 et 5,8 GHz. Les paramètres du traitement de déstabilisation sont fixés pour obtenir la diminution de la valeur de la composante réelle de la constante diélectrique basse fréquence (ε'o) d'environ 20 Farads par mètre (F/m) par rapport à sa valeur avant le traitement. Ce traitement dégrade la stabilité du DCI en provoquant l'agglomération et/ou l'agrégation de particules (c'est-à-dire des organites, fragments d'organites, matière fibreuse résiduelle) en assemblages suffisamment grands et stables pour permettre et/ou améliorer la séparation mécanique.
En effet, on considère la suspension colloïdale intracellulaire obtenue comme une dispersion colloïdale relativement stable composée d'une phase continue (cytoplasme et contenu de vacuoles) et d'une phase dispersée (organites suspendus et leurs fragments). Selon la théorie de Derjaguin-Laundau-Verwey-Overbeek (DLVO), cette stabilité est maintenue par la somme des forces attractives de van der Waals et des forces répulsives des doubles couches électriques. La barrière énergétique résultant de la force répulsive empêche les particules de la phase dispersée de s'approcher à moins qu'elles n'aient suffisamment d'énergie pour surmonter cette barrière, auquel cas la force d'attraction les mettra en contact (elles adhéreront alors de manière irréversible). La théorie DLVO décrit l'interaction et l'énergie potentielle des particules en fonction de leurs paramètres, de leur distance les unes des autres et des caractéristiques de la phase continue. La modification des valeurs des variables affectant la force répulsive affecte la stabilité de la dispersion. Dans des conditions normales de stabilité colloïdale, une augmentation de l'énergie potentielle à mesure que les particules s'approchent les unes des autres constitue une barrière énergétique potentielle qu'il est impossible de surmonter sans apport énergétique externe. Cette barrière énergétique maintient les particules séparées et la dispersion stable. Les conditions modifiées lors du traitement A, permettent à la force de répulsion de la double couche de diminuer au point qu’il n'existe plus de barrière énergétique potentielle et que les particules peuvent s'approcher et s'agglomérer librement.
Le rétablissement des conditions initiales ne rend pas la stabilité, car les particules se sont irréversiblement agglomérées. Elles sont ainsi facilement éliminables par des moyens mécaniques (Koganov et coll., sofw journal 2017).
De préférence, à l’issue du « traitement A », on réalise l’étape de séparation mécanique du DCI par centrifugation afin de produire le « Surnageant A » et la « Fraction B ».
Typiquement, le "surnageant A" a une turbidité inférieure à environ 100 NTU.
La « fraction B » comprend typiquement de 10% à 30% de matière sèche, de préférence de 13% à 27% de matière sèche, et de manière encore préférée environ 15,0 % à 25,0 % de matière sèche.
Le « traitement B » est réalisé par ajustement du niveau de pH dans le « surnageant A » par titrage avec, par exemple, un alcali jusqu'à obtenir un pH supérieur à 6, de préférence un pH allant de 6,5 à 7,5. Typiquement, on utilisera comme alkali préféré le carbonate de potassium.
A l’issue du « traitement B », on réalise de préférence l’étape de séparation mécanique du « Surnageant A » par centrifugation afin de produire le « Surnageant B » et la « Fraction C ».
La « fraction C » comprend typiquement de 5% à 25% de matière sèche, de préférence de 8% à 22% de matière sèche, et de manière encore préférée environ 10,0% à 20,0% de matière sèche.
Le « traitement C » est réalisé par ajustement du niveau de pH dans le « surnageant B », notamment par titrage avec, par exemple, de l'acide jusqu’à obtenir un pH inférieur à 4,5. Typiquement, on utilisera comme acide préféré une solution d’acide citrique.
A l’issue du « traitement C », on réalise de préférence l’étape de séparation mécanique du « Surnageant B » par centrifugation afin de produire la « fraction de sérum de roses de Granville® fraîches », de préférence la « fraction de sérum de pétales frais de roses de Granville® » (Extrait Non Conservé) et la « Fraction D ».
La « fraction de sérum de pétales frais de roses de Granville® » comprend typiquement de 2% à 20% de matière sèche, de préférence de 4% à 16% de matière sèche, et de manière encore préférée de de 6,0% à 10,0% de matière sèche.
Selon certains modes de réalisation, la fraction de sérum obtenue à l’issue de l’étape d) est mélangée avec au moins un conservateur ou au moins un stabilisant pour donner un ingrédient fini, ou avec une combinaison de ceux-ci pour donner l'extrait de roses de Granville® fraîche ou « Sérum Rose De Granville® », de préférence l'extrait de pétales frais de roses de Granville® ou « Sérum de pétales de Roses De Granville® ».
Des agents stabilisants particulièrement appropriés peuvent comprendre, sans limitation, un conservateur, un stabilisant et/ou des mélanges de ceux-ci. Les conservateurs et stabilisants appropriés à utiliser dans la présente invention comprennent, sans s'y limiter, le sorbate de potassium, le benzoate de sodium, le métabisulfite de sodium, la glycérine, le propylène glycol, le dipropylène glycol, le butylène glycol, le pentylène glycol, l'hexylène glycol et le caprylyl glycol. Dans un mode de réalisation particulier, les agents stabilisants peuvent comprendre au moins un conservateur, au moins un stabilisant, au moins un antioxydant ou leurs mélanges.
Ainsi, selon un mode préféré de réalisation, le procédé mise en œuvre pour obtenir l’extrait utilisé selon l’invention comprend les étapes de :
a) nettoyage du matériel végétal, macération, pressage puis séparation mécanique du matériel végétal pour obtenir une dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) et un matériau enrichi en fibres (fraction A) ;
b) déstabilisation du DCI avec des ondes électromagnétiques puis séparation mécanique de la dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) pour obtenir le surnageant A et une Fraction Membranaire (fraction B) ;
c) ajustement du niveau de pH dans le surnageant A jusqu'à obtenir un pH supérieur à 6, de préférence un pH allant de 6 à 7, puis séparation mécanique du surnageant A pour obtenir le surnageant B et la fraction C (fraction cytoplasmique) ;
d) ajustement du niveau de pH dans le surnageant B jusqu’à obtenir un pH inférieur à 4,5 puis séparation mécanique du surnageant B pour donner une « Fraction sérique bioactive » et une fraction D (précipité) ; et
e) Optionnellement, mélange de la « fraction sérique bioactive » avec au moins un conservateur et/ou stabilisant.
De préférence encore, le procédé mis en œuvre pour obtenir l’extrait utilisé selon l’invention comprend les étapes de :
a) nettoyage des roses fraiches de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’, macération, pressage puis séparation mécanique des roses pour obtenir une dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) et un matériau enrichi en fibres (fraction A) ;
b) déstabilisation du DCI avec des ondes électromagnétiques puis séparation mécanique de la dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) pour obtenir le surnageant A et une Fraction Membranaire (fraction B) ;
c) ajustement du niveau de pH dans le surnageant A jusqu'à obtenir un pH supérieur à 6, de préférence un pH allant de 6 à 7, puis séparation mécanique du surnageant A pour obtenir le surnageant B et la fraction C (fraction cytoplasmique) ;
d) ajustement du niveau de pH dans le surnageant B jusqu’à obtenir un pH inférieur à 4,5 puis séparation mécanique du surnageant B pour donner une « fraction de sérum de roses de Granville® fraîches » et une fraction D (précipité) ; et
e) Optionnellement, mélange de la « fraction de sérum de roses de Granville® fraîches » avec au moins un conservateur et/ou stabilisant.
De préférence encore, le procédé mis en œuvre pour obtenir l’extrait utilisé selon l’invention comprend les étapes de :
a) nettoyage des pétales frais de roses de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’, macération, pressage puis séparation mécanique des roses pour obtenir une dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) et un matériau enrichi en fibres (fraction A) ;
b) déstabilisation du DCI avec des ondes électromagnétiques puis séparation mécanique de la dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) pour obtenir le surnageant A et une Fraction Membranaire (fraction B) ;
c) ajustement du niveau de pH dans le surnageant A jusqu'à obtenir un pH supérieur à 6, de préférence un pH allant de 6 à 7, puis séparation mécanique du surnageant A pour obtenir le surnageant B et la fraction C (fraction cytoplasmique) ;
d) ajustement du niveau de pH dans le surnageant B jusqu’à obtenir un pH inférieur à 4,5 puis séparation mécanique du surnageant B pour donner une « fraction de sérum de pétales frais de roses de Granville® » et une fraction D (précipité) ; et
e) Optionnellement, mélange de la « fraction de sérum de pétales frais de roses de Granville® » avec au moins un conservateur et/ou stabilisant.
De préférence, l’invention porte sur l’utilisation d’un extrait sous la forme d’une fraction bioactive isolée de roses fraiches de la variété Evanrat ou roses ‘Jardin de Granville®’, caractérisé en ce qu’il est obtenu par un procédé comprenant les étapes :
a) nettoyage du matériel végétal, macération, pressage puis séparation mécanique du matériel végétal pour obtenir une dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) et un matériau enrichi en fibres (fraction A) ;
b) déstabilisation du DCI avec des ondes électromagnétiques puis séparation mécanique de la dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) pour obtenir le surnageant A et une Fraction Membranaire (fraction B) ;
c) ajustement du niveau de pH dans le surnageant A jusqu'à obtenir un pH supérieur à 6, de préférence un pH allant de 6 à 7, puis séparation mécanique du surnageant A pour obtenir le surnageant B et la fraction C (fraction cytoplasmique) ;
d) ajustement du niveau de pH dans le surnageant B jusqu’à obtenir un pH inférieur à 4,5 puis séparation mécanique du surnageant B pour donner une « Fraction sérique bioactive » et une fraction D (précipité) ; et
e) Optionnellement, mélange de la « fraction sérique bioactive » avec au moins un conservateur et/ou stabilisant.
De préférence, l’invention porte sur l’utilisation d’un extrait sous la forme d’une fraction bioactive isolée de roses fraiches de la variété Evanrat ou roses ‘Jardin de Granville®’, caractérisé en ce qu’il est obtenu par un procédé comprenant les étapes :
a) nettoyage des roses fraiches de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’, macération, pressage puis séparation mécanique des roses pour obtenir une dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) et un matériau enrichi en fibres (fraction A) ;
b) déstabilisation du DCI avec des ondes électromagnétiques puis séparation mécanique de la dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) pour obtenir le surnageant A et une Fraction Membranaire (fraction B) ;
c) ajustement du niveau de pH dans le surnageant A jusqu'à obtenir un pH supérieur à 6, de préférence un pH allant de 6 à 7, puis séparation mécanique du surnageant A pour obtenir le surnageant B et la fraction C (fraction cytoplasmique) ;
d) ajustement du niveau de pH dans le surnageant B jusqu’à obtenir un pH inférieur à 4,5 puis séparation mécanique du surnageant B pour donner une « fraction de sérum de roses de Granville® fraîches » et une fraction D (précipité) ; et
e) Optionnellement, mélange de la « fraction de sérum de roses de Granville® fraîches » avec au moins un conservateur et/ou stabilisant.
De préférence encore, l’invention porte sur l’utilisation d’un extrait sous la forme d’une fraction bioactive isolée de roses fraiches de la variété Evanrat ou roses ‘Jardin de Granville®’, caractérisé en ce qu’il est obtenu par un procédé comprenant les étapes :
a) nettoyage des pétales frais de roses de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’, macération, pressage puis séparation mécanique des roses pour obtenir une dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) et un matériau enrichi en fibres (fraction A) ;
b) déstabilisation du DCI avec des ondes électromagnétiques puis séparation mécanique de la dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) pour obtenir le surnageant A et une Fraction Membranaire (fraction B) ;
c) ajustement du niveau de pH dans le surnageant A jusqu'à obtenir un pH supérieur à 6, de préférence un pH allant de 6 à 7, puis séparation mécanique du surnageant A pour obtenir le surnageant B et la fraction C (fraction cytoplasmique) ;
d) ajustement du niveau de pH dans le surnageant B jusqu’à obtenir un pH inférieur à 4,5 puis séparation mécanique du surnageant B pour donner une « fraction de sérum de pétales de roses frais de Granville® » et une fraction D (précipité) ; et
e) Optionnellement, mélange de la « fraction de sérum de pétales frais de roses de Granville® » avec au moins un conservateur et/ou stabilisant.
Selon un mode particulier, l’extrait de roses, de préférence de pétales de roses, utilisé selon l’invention comprend de l’eau en une teneur allant de 90 à 94%, une teneur en extrait sec allant de 6 à 10%. Cet extrait de roses, de préférence de pétales de roses, sous forme d’une fraction bioactive isolée, utilisé selon l’invention, est dénommé en nom INCI : « Rosa Hybrid Flower Extract ».
Selon un autre mode particulier, l’extrait de roses, de préférence de pétales de roses, utilisé selon l’invention, comprend de l’eau en une teneur allant de 89 à 93%, une teneur en extrait sec allant de 6 à 10% et des conservateurs et/ou stabilisants en une teneur allant de 0.3 à 1% en poids par rapport au poids total de l’extrait.
L’extrait de roses de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’, en particulier de pétales de roses de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’, utilisé selon l’invention, comprend notamment des acides aminés (acide aspartique, tyrosine, arginine) des sucres totaux (glucose, fructose), des minéraux et d’autres co-produits, qui lorsqu’on les applique sur une matière kératinique, en particulier la peau, procure un bénéfice ou une amélioration de l’aspect de la matière kératinique, tel que favoriser et/ou améliorer la nutrition cutanée, favoriser et/ou améliorer la fonction barrière cutanée, favoriser et/ou améliorer le processus rythmique des cellules cutanées, prévenir et/ou ralentir le vieillissement de la peau.
En outre, la Demanderesse a pu montrer que l’extrait utilisé selon l’invention agit comme un agent neuro protecteur cutané. En particulier il permet d’apaiser la peau et/ou des lèvres, notamment en prévenant et/ou diminuant les phénomènes d’irritation, ainsi que les phénomènes de micro-inflammation.
La présente invention porte également sur l’utilisation d’une composition comprenant au moins un extrait sous la forme d’une fraction bioactive isolée de roses fraiches de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’ selon l’invention, tel que défini ci-dessus.
De préférence, ladite composition comprend au moins un extrait sous la forme d’une fraction bioactive isolée de pétales frais de roses de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’, tel que défini ci-dessus.
La composition utilisée dans la présente invention est de préférence une composition cosmétique.
Par « composition cosmétique » on entend toute composition à visée cosmétique, c’est à dire esthétique, pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain et plus particulièrement avec les matières kératiniques, en particulier la peau et/ou les lèvres, en particulier la peau du visage et/ou du cou.
Par « matière kératinique » on entend la peau et/ou ses phanères, et les lèvres, en particulier la peau du visage et/ou du corps et les lèvres.
La présente invention porte donc sur l’utilisation d’une composition cosmétique comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable, une quantité efficace d’au moins un extrait sous la forme d’une fraction bioactive isolée de roses fraiches de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’ tel que défini ci-dessus.
Par « milieu physiologiquement acceptable » on entend tout excipient convenant à une utilisation topique, en contact avec les matières kératiniques, sans risque de toxicité, d'incompatibilité, d'instabilité et/ou de réponse allergique.
Par « quantité efficace » on désigne la quantité minimum d’extrait de roses « Jardin de Granville® » selon l’invention qui est nécessaire pour obtenir l’effet bénéfique selon l’invention, à savoir un effet bénéfique consistant apaiser la peau et/ou des lèvres, notamment prévenir et/ou diminuer les phénomènes d’irritation, et/ou prévenir et/ou diminuer les phénomènes de micro-inflammation.
La composition cosmétique selon l’invention est une composition de soin des matières kératiniques, en particulier de la peau et/ou des lèvres et notamment de la peau du visage et/ou du cou.
Selon une variante avantageuse, l’extrait sous la forme d’une fraction bioactive isolée de roses fraiches de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’ est présent dans la composition cosmétique, utilisée selon l’invention, en une teneur allant de 0.001 à 50%, en particulier de 0,01 à 20%, de préférence de 0,01 à 10% et de préférence encore de 0,011 à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de ladite composition.
Le milieu physiologiquement acceptable représente généralement de 1 à 99% en poids, par rapport au poids total de ladite composition.
La composition cosmétique utilisée selon l’invention comprend généralement, outre l’extrait de roses Jardin de Granville® » et le milieu physiologiquement acceptable, un ou plusieurs excipients cosmétiques acceptables parmi ceux connus de l’homme du métier en vue d’obtenir une composition pour l’application topique par exemple sous forme d’une crème, émulsion huile-dans-eau, ou eau-dans-huile ou émulsion multiple, solution, suspension, gel, lait, lotion, sérum, de baume, de stick, ou encore de poudre.
Selon un mode particulier, la composition cosmétique utilisée selon l’invention est sous la forme d’une crème, émulsion huile-dans-eau, ou eau-dans-huile ou émulsion multiple, solution, suspension, gel, lait, lotion, ou sérum notamment pour la peau.
Dans un mode de réalisation préféré, ladite composition utilisée selon l’invention est sous la forme d’une crème ou d’un sérum notamment pour la peau.
Dans un autre mode de réalisation préféré, ladite composition utilisée selon l’invention est sous la forme d’un baume, d’un gloss ou d’un stick notamment pour les lèvres.
La composition cosmétique utilisée selon l’invention peut se présenter sous toute forme galénique adaptée à une application topique sur la peau et/ou les lèvres et notamment de la peau du visage et/ou du cou comprenant l’extrait de roses « jardin de Granville® », de préférence, l’extrait de pétales de roses « jardin de Granville® » et au moins un adjuvant cosmétique choisi parmi les antioxydants, les parfums, les vitamines, les agents épaississants, les agents émollients, les agents hydratants, les agents anti-âge, les agents liftants, les agents tenseurs, les agents repulpants, les agents apaisants, les agents antipollution, les agents éclaircissants ou dépigmentants, les charges, les nacres et leurs mélanges.
Aussi, selon un mode particulier de l’invention, la composition cosmétique selon l’invention peut comprendre en outre au moins un adjuvant cosmétique choisi dans le groupe constitué par : des agents antioxydants, des agents émollients, des agents hydratants, des agents anti-âges, des parfums, et leurs mélanges.
Selon la nature de la composition, on sélectionnera un ou plusieurs excipients cosmétiquement acceptables parmi des émulsionnants, des polymères, des agents tensioactifs, des agents de rhéologie, des électrolytes, des ajusteurs de pH, des agents anti-oxydants, des conservateurs, des colorants, et leurs mélanges.
À titre d’exemple particulier, la composition cosmétique selon l’invention peut comprendre des gélifiants, des antioxydants, des conservateurs et leurs mélanges.
La composition cosmétique selon l’invention peut comprendre en outre une phase grasse (corps gras solides) ou huileuse.
On entend par « phase huileuse » une huile ou un mélange d'huiles miscibles entre elles, ou non. Par « huile », on entend, au sens de l'invention, un corps gras, non soluble dans l'eau, liquide à 25°C et pression atmosphérique. Ces huiles peuvent être volatiles ou non volatiles, végétale, minérale ou synthétique.
Une phase huileuse selon l’invention peut comprendre des huiles naturelles, hydrocarbonées, siliconées, et leurs mélanges.
La teneur en phase grasse ou huileuse dans la composition cosmétique de l’invention ira généralement de 0,2 % à 45 %, de préférence de 0,5 % à 30 %, et de préférence encore de 2 % à 25 % en poids par rapport au poids total de ladite composition.
Dans le contexte de l’invention, l’extrait décrit ci-dessus et les compositions cosmétiques qui en comprennent n’ont pas vocation à être utilisés à des fins thérapeutiques pour des sujets malades. Notamment, ils n’ont pas vocation à être utilisés pour la prévention ou le traitement de phénomènes et /ou de symptômes qui seraient nature pathologique et nécessiteraient la mise en place d’un traitement médical pour des sujets malades.
La présente invention porte sur l’utilisation cosmétique d’un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, en tant qu’agent apaisant de la peau et/ou des lèvres.
Par « agent apaisant » on entend un agent capable de prévenir et/ou diminuer des réactions cutanées induites par un stress d’origine exogène et/ou endogène, notamment en protégeant la peau vis-à-vis des effets d’un stress irritant. Parmi les stress irritants au sens de l‘invention, on entend notamment les rayonnements UV, la pollution atmosphérique, le stress, les molécules allergènes ou irritantes, les chocs thermiques, et/ou les frottements, et de préférence la pollution atmosphérique, le stress, les molécules irritantes, les chocs thermiques, et/ou les frottements.
La Demanderesse a en effet montré que l’extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat et utilisé selon l’invention avait un effet neuroprotecteur cutané.
Par « agent à effet neuroprotecteur cutané » ou « agent neuroprotecteur cutané » on entend un agent capable de prévenir et/ou diminuer des réactions cutanées induites par un stress d’origine exogène et/ou endogène, notamment en protégeant les neurones sensitifs cutanés humains vis-à-vis des effets d’un stress irritant. Parmi les stress irritants au sens de l‘invention, on entend notamment les rayonnements UV, la pollution atmosphérique, le stress, les molécules allergènes ou irritantes, les chocs thermiques, et/ou les frottements, et de préférence la pollution atmosphérique, le stress, les molécules irritantes, les chocs thermiques, et/ou les frottements.
En particulier, par « agent neuroprotecteur cutané » on entend que l’extrait utilisé permet de favoriser la survie et/ou la pousse neuritique des neurones sensitifs humains de la peau. On parlera aussi d’« agent neuro-apaisant cutané ».
Selon un aspect particulier, l’invention porte également sur l’utilisation cosmétique d’un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, en tant qu’agent destiné à prévenir et/ou diminuer les phénomènes d’irritation de la peau et/ou des lèvres.
Par « irritation » on entend selon la présente invention que les matières kératiniques présentent une sensibilité accrue aux stimuli externes tels que le vent ou des températures extrêmes avec une sensation d’inconfort. Les matières kératiniques irritées peuvent avoir un aspect rougeâtre, elles peuvent aussi être légèrement craquelées et donner une sensation de démangeaison.
Selon la présente invention, le terme « phénomènes d’irritation » désigne des phénomènes d’intensité modérée et dont la portée est limitée au champ de la cosmétologie. En particulier, les phénomènes d’irritation auxquels il est fait référence ne sont pas de nature pathologique et ne requièrent pas la mise en place d’un traitement médical.
En particulier, par « agent destiné à prévenir et/ou diminuer les phénomènes d’irritation » ou « agent neuroprotecteur cutané destiné à prévenir et/ou diminuer les phénomènes d’irritation » on entend que l’extrait utilisé réduit le nombre des récepteurs TRPV1 responsables de la transmission de la douleur et des sensations de démangeaisons. Il permet également de réduire la libération de neuropeptides CGRP induite par un stress irritant.
Un autre aspect particulier de l’invention concerne l’utilisation cosmétique d’un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, en tant qu’agent destiné à prévenir et/ou diminuer les phénomènes de micro-inflammation de la peau et/ou des lèvres.
Par « micro-inflammation » ou « micro-inflammation chronique de la peau » on entend selon l’invention des processus inflammatoires invisibles (silencieux) se mettant en place de façon localisée au niveau de la peau. Avec le temps, ces événements micro-inflammatoires à répétition contribuent au vieillissement cutané.
Selon la présente invention, le terme « phénomènes de micro-inflammation » désigne des phénomènes d’intensité modérée et dont la portée est limitée champ de la cosmétologie. En particulier, les phénomènes de micro-inflammation auxquels il est fait référence ne sont pas de nature pathologique et ne requièrent pas la mise en place d’un traitement médical.
En particulier, par « agent neuroprotecteur cutané destiné à prévenir et/ou diminuer les phénomènes de micro-inflammation » on entend que l’extrait utilisé réduit la libération de cytokines pro-inflammatoires induite par un stress irritant sur la peau et/ou les lèvres.
Ainsi, les « matières kératiniques » selon l’invention sont des matières kératiniques saines (sujets « sains »), c’est-à-dire ne présentant pas de troubles ou de désordres qui relèveraient d’un état pathologique (sujets « non sains », atteints d’une pathologie). On parlera indifféremment de peaux et/ou lèvres saines ou de peaux et/ou lèvres dans le reste de la description.
Dans le contexte de l’invention, lesdits phénomènes d’irritation et/ou lesdits phénomènes de micro-inflammation peuvent notamment induits par au moins une condition choisie parmi les rayonnements UV, la pollution atmosphérique, le stress, les molécules allergènes ou irritantes, les chocs thermiques, et les frottements. Ils sont de préférence induits par au moins une condition choisie parmi la pollution atmosphérique, le stress, les molécules irritantes, les chocs thermiques, et les frottements.
Ainsi, dans le contexte de l’invention, ledit extrait est destinée à une application chez des sujets présentant une peau et/ou des lèvres irritée(s) et/ou stressée(s).
En particulier, ledit extrait est destinée à une application topique sur la peau et/ou les lèvres et en particulier sur la peau du visage et/ou du cou.
Les extraits de roses fraiches de la variété Evanrat, ou roses ‘Jardin de Granville®’, sous la forme d’une fraction bioactive isolée, utilisés pour la mise en œuvre de ces procédés et utilisations selon l’invention sont tels que décrits précédemment dans la présente demande. Dans un mode de réalisation particulier et préférentiel, les extraits de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée sont des extraits sous la forme d’une fraction bioactive isolée de pétales de roses, notamment de roses de la variété Evanrat, en particulier de roses de rosiers Jardin de Granville®.
D’autres aspects particuliers de l’invention portent sur :
Un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, pour son utilisation comme agent neuroprotecteur cutané destiné à apaiser la peau et/ou les lèvres.
Un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, pour son utilisation comme agent neuroprotecteur cutané destiné à prévenir et/ou diminuer les phénomènes d’irritation de la peau et/ou des lèvres.
Un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, pour son utilisation pour prévenir et/ou diminuer les phénomènes d’irritation de la peau et/ou des lèvres.
Un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, pour son utilisation comme agent neuroprotecteur cutané destiné à prévenir et/ou diminuer les phénomènes de micro-inflammation de la peau et/ou des lèvres.
Un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, pour son utilisation pour prévenir et/ou diminuer les phénomènes de micro-inflammation de la peau et/ou des lèvres.
Une méthode pour apaiser la peau et/ou les lèvres comprenant l’administration d’une quantité efficace d’un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, tel que décrit ci-dessus, ou d’une composition cosmétique en comprenant.
Une méthode pour prévenir et/ou diminuer les phénomènes d’irritation de la peau et/ou des lèvres comprenant l’administration d’une quantité efficace d’un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, tel que décrit ci-dessus, ou d’une composition cosmétique en comprenant.
Une méthode pour prévenir et/ou diminuer les phénomènes de micro-inflammation de la peau et/ou des lèvres comprenant l’administration d’une quantité efficace d’un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, tel que décrit ci-dessus, ou d’une composition cosmétique en comprenant.
L’invention va désormais être illustrée dans les exemples non limitatifs suivants. Sauf indication contraire, les % sont exprimés en poids par rapport au poids total de la composition.
Zeta-fraction
de rose de Granville
®
selon l’invention
On utilise comme matériel végétal des pétales frais de roses de la variété Evanrat ou rose « Jardin de Granville® ».
La Zeta-fraction de rose de Granville® selon l’invention est une fraction bioactive de pétales de rose, notamment obtenue selon le protocole suivant :
a1) nettoyage des pétales frais de roses par pulvérisation avec de l'eau d’une température d’environ 12°C, pendant 0,1 à 0,3 minutes à un débit de 5 à 6 litres par minute,
a2) macération, pressage puis séparation mécanique des roses à l'aide d'une presse à vis mécanique (modèle CP-6 Vincent Corporation, FL) pour extraire le contenu de la dispersion colloïdale intercellulaire liquide (DCI) du matériau enrichi en fibres (« Fraction A ») ;
b1) déstabilisation du DCI avec des ondes électromagnétiques produites à partir de magnétrons fonctionnant à une fréquence comprise entre 2,45 et 5,8 GHz,
b2) centrifugation de la dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) pour obtenir le surnageant A et une Fraction Membranaire (fraction B) ;
c1) ajustement du niveau de pH dans le surnageant A par un alkali (i.e., le carbonate de potassium), afin d’obtenir un pH allant de 6 à 7,
c2) séparation mécanique du surnageant A pour obtenir le surnageant B et la fraction C (fraction cytoplasmique) ;
d1) ajustement du niveau de pH dans le surnageant B par de l’acide citrique afin d’obtenir un pH inférieur à 4,5,
d2) séparation mécanique du surnageant B pour donner une « fraction de sérum de pétales frais de roses de Granville® » et une fraction D (précipité) ; et
e) mélange de la « fraction de sérum de pétales frais de roses de Granville® » avec du sorbate de potassium et du benzoate de sodium.
Le sérum de pétales de roses de Granville® (aussi appelé « Zeta-fraction », ou « Zf-fraction » dans les exemples suivants) contient 8% matière sèche (matière active), 91,5% en poids d’eau, 0,15% en poids de sorbate de potassium et 0,3% en poids de benzoate de sodium. Ces teneurs s’entendent en en poids par rapport au poids total de l’extrait. Le nom INCI de cet extrait est Rosa Hybrid Flower Extract, Potassium Sorbate, and Sodium Benzoate.
L’ocytocine (Sigma) a été utilisée comme contrôle positif.
L’ocytocine est une hormone neuropeptidique connue pour réduire le stress, réguler les émotions fortes. Son rôle au niveau des cellules cutanées a été mis en évidence par l’inactivation du gène : l’ocytocine possède un rôle protecteur, principalement anti oxydant et anti inflammatoire. Elle prévient la senescence cellulaire en réduisant la libération de médiateurs pro-inflammatoires par les cellules sénescentes (fibroblastes dermiques de donneurs d’âges différents) qui sont néfastes pour les cellules voisines, via l’activation d’une voie de signalisation de défense lié à son récepteur OXTR.
L’effet des actifs a été testé aux concentrations suivantes :
- Sérum Zeta-fraction: concentrations 0.1%, 0.03% et 0.01%.
- Ocytocine : concentrations 0.2mg/mL 0.06 mg/mL, 0.02 mg/mL.
E
xemple
1
:
Effet protecteur de la Zeta-fraction de rose de Granville
®
sur le système nerveux cutané
L’effet neuroprotecteur cutané des actifs a été évalué, notamment en étudiant la libération de neuropeptides CGRP (calcitonin gene related peptide), la libération de cytokines pro-inflammatoires et la physiologie des neurones sensitifs humains en coculture avec un épiderme innervé. Ces études ont été menées en absence ou en présence d’un stress à la capsaïcine.
Le modèle cellulaire utilisé dans les exemples ci-dessous a été mis en place de la manière suivante :
Les neurones sensitifs sont dérivés de cellules hiPS (human induced Pluripotent Stem cells) elles-mêmes obtenues à partir de fibroblastes humains. Les hiPS ont été ensemencés dans un milieu de différenciation pour neurones sensitifs (M1) en plaques 6 puits pré-recouvertes par une fine couche de Matrigel® (Dutscher). Les cellules ont été maintenues 6 jours en culture à 37°C et 5% de CO2. Le milieu de culture a été changé tous les 2 jours.
Dans ces conditions, les hiPS se différencient en neurones sensitifs humains. Ils expriment notamment les récepteurs de la capsaïcine (TRPV1), du NGF (TrkA) et des opiacés (MOPr). Ils synthétisent également dans leurs cytoplasmes de la Substance P et du CGRP.
A ce stade, les cellules ont été dissociées puis ensemencées en plaques 96 puits recouverte d’une fine couche de Matrigel® à raison de 20 000 cellules par puit en milieu de différenciation.
Après 9 jours de culture, les neurones sensitifs ont été dissociés à l’aide d’accutase et ensemencés en plaques 24 puits recouverts d’une fine couche de Matrigel® à raison de 120 000 cellules par puits, en milieu de différenciation. Après 24 heures, des épidermes reconstruits (StratiCell) (stade de maturation de 10 jours) ont été déposés par-dessus les neurones.
Après 3 jours de co-culture, les actifs à 3 concentrations différentes. La β-endorphine (Bachem) a été utilisée comme contrôle positif. En effet, la β-endorphine est un peptide produit naturellement par le corps agissant comme un neuromédiateur sur les récepteurs opiacés. La β-endorphine a une capacité analgésique, notamment en rendant les neurones plus sensibles au opioïdes.
Les conditions d’incubation étaient les suivantes :
- Milieu témoin ;
- Milieu témoin + Ocytocine à 0.2mg/ml, 0.06mg/ml ou 0.02mg/ml ;
- Milieu témoin + Sérum Zeta-fraction à 0.1%, 0.03% ou 0.01% ;
- Milieu témoin + β-endorphine à 1 µM.
Ce traitement a été renouvelé après 5 jours et 8 jours de culture.
Après 8 jours total d’incubation, les cellules ont été stimulées, ou non, pendant 30 minutes par de la capsaïcine (Sigma) à la concentration 10µM. La capsaïcine aussi dénommée 8-méthyl-N-vanillyl-6-nonénamide, fait partie de de la famille des vanilloïdes. Cette molécule irritante et est un composant actif du piment (Capsicum). La capsaïcine se fixe aux récepteurs TRPV1 (Transient Receptor Potential Vanilloid 1) au niveau des neurones sensitifs où elle génère une sensation d’inconfort. Les récepteurs TRPV1 sont notamment activés par une stimulation thermique, mécanique ou chimique. Leur seuil de réponse est plus bas chez les personnes ayant une peau sensible.
Chaque condition de culture a été évaluée en tripliquât.
A la fin de la stimulation par la capsaïcine, les surnageants ont été récupérés et stockés à -80°C pour le dosage du CGRP.
Les cocultures (neurones et épidermes) ont alors été réincubées en présence des actifs (ocytocine ou Zeta-fraction) ou de la β-endorphine pendant 6 heures puis 24 heures supplémentaires. Après 6 heures et 24 heures, 50 µL de surnageant ont été prélevés pour le dosage des cytokines Il-1β, IL-6 et IL-8.
Le CGRP a été dosé avec le kit ELISA anti CGRP (Anticorps-en-ligne) et les quantités de CGRP libérées en présence des actifs ont été comparées au milieu témoin.
Les cytokines Il-1β, IL-6 et IL-8 (BD Bioscience) ont été dosées par cytométrie de flux et les quantités libérées en présence des actifs ont été comparées au milieu témoin.
Les neurones ont été marqués en présence d’un anticorps anti β-tubuline (Abcam), notamment pour marquer les prolongements neuronaux, d’un anticorps anti TRPV1 (Sigma) et d’un anticorps anti récepteur Ocytocine (Sigma) 12 heures à 4°C. Ces anticorps ont été révélés par des anticorps secondaires couplés à des fluorochromes différents (Fisher Scientific) pendant 1 heure à température ambiante et à l’abri de la lumière. Les noyaux ont été identifiés grâce au marqueur fluorescent Hoechst (Sigma).
Par puits de culture, 2 fois 20 photographies ont été prises avec le microscope automatique (In Cell 2200 ; GE Healthcare) au grossissement x20. Un dénombrement des neurones sensitifs, une mesure de la longueur des prolongements des neurones, de l’expression des récepteurs TRPV1 et des récepteurs à l’Ocytocine ont été effectués et les résultats ont été comparés à la condition contrôle.
Au terme de la culture (soit après 9 jours de traitement), les épidermes ont été analysés morphologiquement. La structuration et l’épaisseur de chaque épiderme ont été comparés à celles de la condition témoin (traitée par du milieu contrôle).
Dans l’ensemble des résultats présentés ci-dessous, les tests statistiques ont été réalisés à l’aide d’un test One Way ANOVA. Les valeurs de significativités sont représentées de la manière suivante : * p<0.05 ; **p<0.01 ; *** p<0.001 ;****p<0.0001
Effet de la Zeta-fraction de rose de Granville
®
sur
la l
ibération de
s
neuropeptides CGRP
Le neuropeptide CGRP (calcitonin gene related peptide) est le premier relais de la transmission des informations nociceptives. Neuromédiateur pro-inflammatoire, il s’agit d’un médiateur de la douleur.
Les CGPR ont été dosés après 8 jours de traitement par les actifs + 30 minutes de traitement à la capsaïcine. Les valeurs sont normalisées par rapport au nombre de neurones sensitifs.
Les résultats du dosage sont résumés aux tableaux 1 à 3.
| Traitement | Variation / Témoin non traité |
| Béta-endorphine 1 µM | -4% |
| Zeta-fraction 0.1% | -8% |
| Zeta-fraction 0.03% | -4% |
| Zeta-fraction 0.01% | +9% |
| Ocytocine 0.2 mg/mL | -16% |
| Ocytocine 0.06 mg/mL | +2% |
| Ocytocine 0.02 mg/mL | +7% |
A l’état basal (en l’absence de stress) aucun effet significatif sur libération de neuropeptide CGRP n’est observé.
| Traitement | Variation / Témoin non traité |
| Témoin capsaïcine 10µM | +56%* |
| Traitement : actifs +CAPSAICINE 10 µM | Variation / Témoin capsaïcine |
| Capsaïcine + Beta-endorphine 1 µM | -49%** |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.1% | -74%**** |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.03% | -61%*** |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.01% | -69%*** |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.2 mg/mL | -39%* |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.06 mg/mL | -8% |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.02 mg/mL | -9% |
On constate que le traitement à la capsaïcine entraine une augmentation significative (+56%*) de la libération de neuropeptide CGRP rapportée au nombre de neurones sensitifs.
Le traitement de la coculture pendant 8 jours par la béta-endorphine à 1µM avant les 30 minutes de stress capsaïcine entraine une diminution significative de la libération de neuropeptide CGRP rapportée au nombre de neurones par rapport au témoin capsaïcine.
Le traitement de la coculture pendant 8 jours par l’actif Zeta-fraction aux concentrations 0.1%, 0.03% ou 0.01% avant le stress capsaïcine entraine une diminution significative de la libération de neuropeptide CGRP rapportée au nombre de neurones par rapport au témoin capsaïcine. S’agissant du témoin positif ocytocine, on observe une diminution significative uniquement à la concentration la plus élevée.
Ainsi, le sérum Zeta-fraction de rose de Granville® inhibe la libération du neuro peptide pro inflammatoire CGRP de manière plus efficace que l’ocytocine.
Effet de la Zeta-fraction de rose de Granville
®
sur le
nombre de récepteurs TRPV1
Les récepteurs TRPV1 (transient receptor potential vanilloide 1) font partie de la famille des TRP, une famille de récepteurs sensibles aux stimuli mécaniques, thermiques et à certaines substances chimiques. Plus particulièrement, les neurones possédant des récepteurs TRPV1 sont responsables de la transmission de la douleur et des sensations de démangeaisons quand ils sont stimulés par de la capsaïcine.
Le nombre de récepteurs TRPV1, normalisé par le nombre de neurones sensitifs, a été évalué après 8 jours de traitement par les actifs + 30 minutes de traitement à la capsaïcine, et à nouveau 24 heures de traitement par les actifs.
Les résultats sont résumés aux tableaux 4 à 6.
| Traitement | Variation / Témoin non traité |
| Beta-endorphine 1 µM | +3% |
| Zeta-fraction 0.1% | -10% |
| Zeta-fraction 0.03% | -11%* |
| Zeta-fraction 0.01% | = |
| Ocytocine 0.2 mg/mL | +7%* |
| Ocytocine 0.06 mg/mL | +8%** |
| Ocytocine 0.02 mg/mL | +6% |
En conditions basales, on observe une augmentation de la quantité de récepteurs TRPV1 lors du traitement avec les actifs contrôles béta-endorphine et ocytocine. A l’inverse, la tendance est la diminution de la quantité de récepteur lors du traitement avec la Zeta-fraction. Les données sont significatives pour la concentration intermédiaire.
| Traitement | Variation / Témoin non traité |
| Témoin capsaïcine 10µM | +2% |
| Traitement : actifs +CAPSAICINE 10 µM | Variation / Témoin capsaïcine |
| Capsaïcine + Beta-endorphine 1 µM | -7% |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.1% | -11%* |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.03% | -4% |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.01% | +2% |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.2 mg/mL | -9% |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.06 mg/mL | -5% |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.02 mg/mL | = |
Les résultats montrent que le stress à la capsaïcine n’influence pas le nombre de récepteurs TRPV1.
Dans ces conditions de stress, on observe pour les différentes conditions évaluées, une tendance à la réduction du nombre de récepteurs TRPV1. Seul le traitement avec l’actif Zeta-fraction à la concentration la plus élevée entraine une diminution significative du nombre de ces récepteurs.
Effet de la Zeta-fraction de rose de Granville
®
sur
la l
ibération de cytokines
Plusieurs cytokines pro-inflammatoires ont été dosées après 8 jours de traitement par les actifs + 30 minutes de traitement à la capsaïcine, puis à nouveau 6h ou 24h de traitement par les actifs. Les valeurs sont normalisées par rapport au nombre de neurones sensitifs.
Les résultats du dosage sont résumés aux tableaux 7 à 9.
| IL-1b | IL-6 | IL-8 | ||||
| 6h | 24h | 6h | 24h | 6h | 24h | |
| Traitement | Variation / Témoin non traité | |||||
| Beta-endorphine 1 µM | -39% | -61%* | -52%* | -14% | +7% | -21% |
| Zeta-fraction 0.1% | -58% | -76%** | -70%** | -57%* | -44% | -61%* |
| Zeta-fraction 0.03% | -63% | -82%** | -72%** | -70%** | -47% | -68%** |
| Zeta-fraction 0.01% | -30% | -44% | -49%* | -39% | +7% | -8% |
| Ocytocine 0.2 mg/mL | -32% | -50% | -42% | -11% | -18% | -37% |
| Ocytocine 0.06 mg/mL | -23% | -38% | -40% | -20% | -16% | -30% |
| Ocytocine 0.02 mg/mL | -10% | +19% | -8% | +18% | -6% | -20% |
A l’état basal (en l’absence de stress), on observe que les traitements à la beta-endorphine ou à l’ocytocine entrainent des variations, généralement des diminutions, peu ou pas significatives, de la libération des différentes cytokines recherchées. A l’inverse, l’actif Zeta-fraction aux concentrations les plus élevées (0.1% et 0.03%) entraine une diminution significative de la libération des différentes cytokines IL-1b ; IL-6 et IL-8, notamment après 24 heures de traitement supplémentaires.
| IL-1b | IL-6 | IL-8 | ||||
| 6h | 24h | 6h | 24h | 6h | 24h | |
| Traitement | Variation / Témoin non traité | |||||
| Capsaïcine 10 µM | +122%* | +354%**** | +82%** | +178% | +236%*** | +100% |
| IL-1b | IL-6 | IL-8 | ||||
| 6h | 24h | 6h | 24h | 6h | 24h | |
| Traitement : actifs +CAPSAICINE 10 µM |
Variation / Témoin capsaïcine | |||||
| Beta-endorphine 1 µM | -38% | -69%**** | -58%*** | -21% | -46%* | -3% |
| Zeta-fraction 0.1% | -88%** | -90%**** | -88%**** | -68% | -86%**** | -72% |
| Zeta-fraction 0.03% | -82%*** | -93%**** | -89%**** | -91%* | -78%*** | -73% |
| Zeta-fraction 0.01% | -56%* | -82%**** | -75%**** | -75%* | -60%** | -41% |
| Ocytocine 0.2 mg/mL | -2% | -66% | -36% | -27% | -41% | -36% |
| Ocytocine 0.06 mg/mL | -19% | -33% | -25% | +1% | -10% | +31% |
| Ocytocine 0.02 mg/mL | +38% | -4% | = | +23% | +4% | +65% |
On constate que le traitement à la capsaïcine entraine une augmentation forte, bien que pas toujours significative, de la libération des différentes cytokines étudiées.
Le contrôle beta-endorphine induit, souvent de manière significative, une réduction de la libération des interleukines IL-1b, IL-6 et IL-8. Concernant l’ocytocine, les résultats observés sont globalement non significatifs.
Pour sa part, le traitement par l’actif Zeta-fraction a pour effet de réduire fortement et significativement la libération des interleukines aux deux temps testés.
Le sérum Zeta-fraction de rose de Granville® inhibe la libération des cytokines pro-inflammatoires de manière plus efficace que l’ocytocine.
Effet de la Zeta-fraction de rose de Granville
®
sur
la s
urvie des neurones sensitifs
La survie des neurones sensitifs a été évaluée après 8 jours de traitement par les actifs + 30 minutes de traitement à la capsaïcine, et à nouveau 24 heures de traitement par les actifs.
Les résultats sont résumés aux tableaux 10 à 12.
| Traitement | Variation / Témoin non traité |
| Beta-endorphine 1 µM | +16% |
| Zeta-fraction 0.1% | +112%*** |
| Zeta-fraction 0.03% | +161%**** |
| Zeta-fraction 0.01% | +66% |
| Ocytocine 0.2 mg/mL | +63% |
| Ocytocine 0.06 mg/mL | +48% |
| Ocytocine 0.02 mg/mL | +13% |
On observe, en condition basale, une augmentation forte et significative de la survie des neurones sensitifs avec l’actif Zeta-fraction, principalement aux deux concentrations les plus fortes.
| Traitement | Variation / Témoin non traité |
| Témoin capsaïcine 10µM | -66%* |
| Traitement : actifs +CAPSAICINE 10 µM | Variation / Témoin capsaïcine |
| Capsaïcine + Beta-endorphine 1 µM | +79% |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.1% | +466%**** |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.03% | +478%**** |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.01% | +231%** |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.2 mg/mL | +65 |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.06 mg/mL | = |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.02 mg/mL | -1% |
De manière attendue on observe une augmentation de la mort cellulaire en présence de capsaïcine.
Dans ces conditions de stress, le traitement par l’actif Zeta-fraction favorise fortement la survie des neurones sensitifs. On observe une tendance vers une augmentation de la survie cellulaire avec la beta-endorphine et l’ocytocine à la concentration la plus élevée.
-> Le sérum (Zeta-fraction) de rose de Granville® favorise la survie des neurones sensitifs de manière plus efficace que l’ocytocine.
Effet de la Zeta-fraction de rose de Granville
®
sur
la l
ongueur des prolongements des neurones sensitifs
La longueur des prolongements des neurones sensitifs a été évaluée après 8 jours de traitement par les actifs + 30 minutes de traitement à la capsaïcine, et à nouveau 24 heures de traitement par les actifs.
Les résultats sont résumés aux tableaux 13 à 15.
| Traitement | Variation / Témoin non traité |
| Beta-endorphine 1 µM | +80% |
| Zeta-fraction 0.1% | +177%** |
| Zeta-fraction 0.03% | +260%*** |
| Zeta-fraction 0.01% | +77% |
| Ocytocine 0.2 mg/mL | +56% |
| Ocytocine 0.06 mg/mL | +116%* |
| Ocytocine 0.02 mg/mL | +17% |
On observe, en condition basale, une augmentation forte et significative de la longueur des prolongements des neurones sensitifs avec l’actif Zeta-fraction aux concentrations les plus élevées, ainsi qu’avec l’ocytocine à la concentration intermédiaire. Concernant les autres conditions, on observe une tendance, souvent assez marquée, vers l’augmentation e la longueur des prolongements sans toutefois atteindre la significativité.
| Traitement | Variation / Témoin non traité |
| Témoin capsaïcine 10µM | -67%* |
| Traitement : actifs +CAPSAICINE 10 µM | Variation / Témoin capsaïcine |
| Capsaïcine + Beta-endorphine 1 µM | 158% |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.1% | +486%**** |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.03% | +554%**** |
| Capsaïcine + Zeta-fraction 0.01% | +195% |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.2 mg/mL | +50% |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.06 mg/mL | 73% |
| Capsaïcine + Ocytocine 0.02 mg/mL | +43% |
De manière attendue on observe, en présence de capsaïcine, une diminution de la longueur des prolongements des neurones sensitifs.
Dans ces conditions de stress, le traitement par l’actif Zeta-fraction permet d’accroitre fortement et significativement la longueur des prolongements des neurones-sensitifs. On observe une tendance similaire lors d’un traitement à la beta endorphine ou à l’ocytocine, toutefois, les valeurs relevées ne permettent pas d’atteindre la significativité.
-> L’effet de la Zeta-fraction sur l’augmentation de la longueur totale des prolongements des neurones sensitifs est encore plus manifeste en condition de stress.
Les différents actifs testés (ocytocine et Zeta-fraction de rose de Granville®), tout comme la capsaïcine et la beta-endorphine, ont tous un impact non négligeable sur la survie des neurones sensitifs. Ainsi, selon les conditions de traitement, le nombre de neurones sensitifs peut varier fortement. On observe par exemple trois fois plus de survie de neurones en condition basale (sans stress) par rapport à la condition de stress à la capsaïcine. Afin que ces variations n’impactent pas l’analyse des résultats (tels que l’expression des différents récepteurs, la quantité de CGRP libérée ou de cytokines induites) ces paramètres ont été normalisés par le nombre de neurones sensitifs observés.
La Zeta-fraction de rose de Granville® a un impact positif majeur sur la survie des neurones sensitifs que ce soit en condition basale ou en condition de stress.
A l’état basal, elle inhibe modérément l’expression des récepteurs TRPV1 mais ne module pas de la libération de CGRP. Elle induit par contre un effet anti-inflammatoire avec une diminution de la libération des cytokines pro-inflammatoires.
En conditions de stress capsaïcine, la Zeta-fraction de rose de Granville® inhibe modérément l’expression des récepteurs TRPV1. Elle permet également d’inhiber significativement la libération du neuropeptide CGRP et des cytokines pro-inflammatoires. Elle permet en outre de préserver la survie des neurones sensitifs et de protéger leurs prolongements neuronaux.
En conclusion, ces expérimentations montrent que la Zeta-fraction de rose de Granville® possède des propriétés protectrices et apaisantes aux 3 concentrations testées : 0.1%, 0.03% et 0.01%. L’effet observé est généralement plus important avec l’actif selon l’invention (Zeta-fraction de rose de Granville®) qu’avec l’ocytocine. Ainsi, la Zeta-fraction de rose de Granville® selon l’invention possède un effet neuro-protecteur cutané et/ou neuro-apaisant et peut prévenir et ou diminuer les phénomènes d’irritation et/ou de micro-inflammation de la peau et ou des lèvres.
Composition sous la forme d’un gel aqueux pour le visage
| Ingrédients cosmétiques | Teneur |
| Zeta-fraction (f raction bioactive isolée de pétales de roses selon l’invention ) * | 50.00% |
| Conservateurs | 0,50% |
| Sucre | 0,20% |
| Carbomer | 0,70% |
| Eau purifiée | Qsp 100% |
| EDTA tetrasodique poudre | 0,20% |
| Sodium hydroxide | 0,17% |
* tel que décrit ci-dessus
La fraction bioactive isolée de pétales de roses selon l’invention et les conservateurs sont mélangés et homogénéisés à température ambiante sous agitation. Les sucres sont ajoutés sous agitation, puis le carbomer, puis l’eau et l’EDTA sous agitation. Le gel aqueux est ensuite neutralisé avec l’ajout d’hydroxyde de sodium sous agitation jusqu’à l’obtention d’un gel homogène.
Appliqué sur la peau du visage, ce gel aqueux confère un effet déstressant et apaisant à la peau.
Composition sous la forme d’un gel-sérum micronutritif pour le visage
| Ingrédients cosmétiques | Teneur |
| Eau purifiée | Qsp 100.00% |
| Glycols | 13,0% |
| Conservateurs | 0,60% |
| Carbomer | 0,80% |
| Glyceryl stearate citrate | 0,70% |
| Lécithine et sodium acrylates copolymer (Lecigel PCR négatif) | 1,20% |
| Isostearate isostearyle | 9,0% |
| Bis-diglyceryl polyacyladipate-2 (Softisan 649 MB) | 1,0% |
| Silice | 2,0% |
| Nacres | 1,0% |
| Cryoextrait de rose* | 3.0% |
| Extrait de Centella asiatica | 0,5% |
| Extrait de marron d’inde | 0,1% |
| Zeta-fraction (f raction bioactive isolée de pétales de roses selon l’invention ) * | 0,3% |
| Tocopheryl acetate | 0,10% |
* tel que décrit ci-dessus
Les ingrédients de la phase aqueuse (l’eau, les glycols et le carbomer) sont mélangés à 80°C sous agitation. On ajoute ensuite les conservateurs, puis les gélifiants à 80°C sous agitation puis la température est abaissée à 75°C. Puis les tensioactifs sont émulsionnés dans la phase aqueuse sous agitation. Les charges et nacres, préalablement empâtées et homogénéisées, sont ajoutées à 40°C. Sont ensuite ajoutés à 40°C le cryoextrait, la fraction bioactive isolée de pétales de roses selon l’invention et les autres extraits, sous agitation jusqu’à 30°C.
Après application sur le visage, les signes de micro-inflammation sont réduits, la peau est apaisée.
Claims (9)
- Utilisation cosmétique d’un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, en tant qu’agent apaisant de la peau saine et/ou des lèvres saines.
- Utilisation cosmétique selon la revendication 1 d’un extrait de roses sous la forme d’une fraction bioactive isolée, obtenue à partir de roses fraiches de la variété Evanrat, en tant qu’agent destiné à prévenir et/ou diminuer les phénomènes non pathologiques d’irritation de la peau saine et/ou des lèvres saines.
- Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisée en ce que lesdits phénomènes non pathologiques d’irritation sont notamment induits par au moins une condition choisie parmi la pollution atmosphérique, le stress, les molécules irritantes, les chocs thermiques, et/ou les frottements.
- Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ledit extrait est présent dans une composition cosmétique en une teneur allant de 0,001% à 50%, en particulier de 0,01% à 20%, de préférence de 0,01% à 10% et de préférence encore de 0,011% à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de ladite composition cosmétique.
- Utilisation selon la revendication 4, caractérisée en ce que ladite composition cosmétique comprend en outre au moins un adjuvant cosmétique choisi parmi les antioxydants, les parfums, les vitamines, les agents épaississants, les agents émollients, les agents hydratants, les agents anti-âge, les agents liftants, les agents tenseurs, les agents repulpants, les agents apaisants, les agents antipollution, les agents éclaircissants ou dépigmentants, les charges, les nacres et leurs mélanges.
- Utilisation selon la revendication 4 ou la revendication 5, caractérisée en ce que ladite composition cosmétique est sous la forme d’une crème, émulsion huile-dans-eau, ou eau-dans-huile ou émulsion multiple, solution, suspension, gel, lait, lotion, ou sérum notamment pour la peau, d’un baume, d’un gloss ou d’un stick notamment pour les lèvres.
- Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications 1 à 6 caractérisée en ce que ledit extrait ou ladite composition cosmétique est destinée à une application chez des sujets présentant une peau et/ou des lèvres irritée(s) et/ou stressée(s) mais saine(s).
- Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que ledit extrait ou ladite composition cosmétique est destinée à une application topique sur la peau saine et/ou les lèvres saines et en particulier sur la peau du visage et/ou du cou.
- Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que ledit extrait est obtenu par un procédé comprenant les étapes :
a) nettoyage du matériel végétal, macération, pressage puis séparation mécanique du matériel végétal pour obtenir une dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) et un matériau enrichi en fibres (fraction A) ;
b) déstabilisation du DCI avec des ondes électromagnétiques puis séparation mécanique de la dispersion colloïdale intracellulaire (DCI) pour obtenir le surnageant A et une Fraction Membranaire (fraction B) ;
c) ajustement du niveau de pH dans le surnageant A jusqu'à obtenir un pH supérieur à 6, de préférence un pH allant de 6 à 7, puis séparation mécanique du surnageant A pour obtenir le surnageant B et la fraction C (fraction cytoplasmique) ;
d)ajustement du niveau de pH dans le surnageant B jusqu’à obtenir un pH inférieur à 4,5 puis séparation mécanique du surnageant B pour donner une « Fraction sérique bioactive » et une fraction D (précipité) ; et
e) Optionnellement, mélange de la « fraction sérique bioactive » avec au moins un conservateur et/ou stabilisant.
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