FR3103386A1 - Nouvelle utilisation cosmétique d’un extrait glycoprotéique de Prunus dulcis - Google Patents

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Louis Danoux
Sabrina LEOTY-OKOMBI
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Abstract

Nouvelle utilisation cosmétique d’un extrait glycoprotéique de Prunus dulcis L’invention est relative à l’utilisation cosmétique d’un extrait glycoprotéique de Prunus dulcis pour maintenir et / ou augmenter l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses. L’extrait permet de prévenir l’apparition et / ou diminuer les manifestations inesthétiques et / ou inconfortables de la peau et / ou des muqueuses induites par un déséquilibre et / ou une diminution de la flore bactérienne commensale cutanée et / ou mucosale, et / ou induites par la pollution. Un autre objet concerne un procédé de soin cosmétique comprenant l’application topique de l’extrait glycoprotéique de P. dulcis ou d’une composition cosmétique le comprenant. Un autre objet concerne encore un extrait glycoprotéique de P. dulcis pour prévenir l’apparition et / ou diminuer l’acné et / ou l’eczéma et / ou la dermatite atopique.

Description

Nouvelle utilisation cosmétique d’un extrait glycoprotéique dePrunusdulcis
La présente invention se rapporte à l’utilisation cosmétique d’un extrait glycoprotéique de la plantePrunus dulcispour maintenir et / ou augmenter l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses et / ou l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux.
La pollution environnementale fait partie des facteurs extrinsèques, outre les ultra-violets et des conditions climatiques défavorables, ayant un impact majeur sur la peau humaine, ses annexes, notamment les cheveux et les muqueuses. Cette pollution entraine le dépôt de particules fines et de molécules néfastes voir toxiques, responsables d’une diminution de l’éclat et / ou de l’homogénéité du teint de la peau, mais aussi de la brillance et / ou éclat des cheveux. La pollution se traduit ainsi par exemple par une peau terne et un teint de peau inhomogène, des cheveux et des muqueuses ternes.
En outre, les facteurs extrinsèques ci-dessus vont potentiellement perturber la flore microbienne présente à la surface de la peau et du cuir chevelu. Les conséquences au niveau de la peau peuvent se manifester notamment par l’apparition de rougeurs, de comédons, voire un excès de sébum et induire un aspect gras ou luisant de la peau. Le teint de la peau perd ainsi son homogénéité.
Il existe ainsi un besoin dans les domaines de la cosmétique et de la dermatologie d’ingrédients actifs naturels alternatifs, capables de maintenir et / ou augmenter et / ou l’éclat et l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses mais aussi l’éclat des annexes cutanées, notamment les cheveux, en particulier lorsque la peau, les muqueuses et / ou les annexes sont exposées à la pollution et / ou que leur flore microbienne est déséquilibrée, notamment sous l’effet de la pollution.
La demanderesse a découvert de façon surprenante et inattendue qu’un extrait glycoprotéique de la planteP. dulcisa la propriété de maintenir et / ou d’augmenter l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux, et / ou l’éclat et / ou de l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses.
La demanderesse a par ailleurs découvert qu’un extrait glycoprotéique de la planteP. dulcisprévient l’apparition et / ou diminue les manifestations inesthétiques et / ou inconfortables des peaux et / ou des annexes cutanées induites par un déséquilibre et / ou une diminution de la flore bactérienne commensale cutanée et / ou mucosale et / ou induites par la pollution, telles que les rougeurs de la peau et / ou des muqueuses, et / ou les comédons, et / ou un excès de sébum, et / ou un aspect luisant de la peau et / ou des annexes cutanées.
Prunus dulcis, plus connue sous le nom d’amande douce ou encoreP. amygdalus var. dulcis, est un arbre fruitier de la famille des Rosaceae du genreAmygdalus L.
Prunus dulciscontient des graines connues pour leur richesse en acides gras, notamment en acide oléique et linoléique. Elles sont aussi riches en protéines. L’huile des graines deP. dulcisest ainsi connue depuis l’antiquité pour ses propriétés adoucissantes, hydratantes et tonifiantes.
La demande GB240578 décrit une composition cosmétique comprenant de l’huile d’amande douce pour améliorer la radiance de la peau. La demande FR3012963 décrit aussi une composition comprenant de l’huile d’amande douce pour éclaircir le teint.
La demande CN103027859 divulgue par ailleurs une composition cosmétique comprenant de l’huile d’amande douce comprenant des glycopeptides deGanoderma capense, pour améliorer la sécheresse cutanée, pour éclaircir la peau et pour un effet anti-ride.
La demande CN106350320 décrit une composition cosmétique permettant d’améliorer la radiance et de diminuer les tâches brunes, comprenant de l’huile d’amande douce.
Par ailleurs, un extrait glycoprotéique d’amande douce a été décrit pour ses propriétés sur la lipolyse dans la demande FR2879099.
Enfin, un extrait glycoprotéique deP. dulcisest déjà commercialisé sous la dénomination de Dulcemine™ par la demanderesse en tant qu’ingrédient actif hydratant et réparateur de la peau et des cheveux.
Toutefois, il n’a jamais été divulgué ni suggéré qu’un extrait glycoprotéique deP. dulcis, a des propriétés d’amélioration de l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux, ni de l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses. Il n’a non plus été divulgué ni suggéré qu’un extrait glycoprotéine queP. dulcisa des propriétés de diminution des rougeurs de la peau et / ou des muqueuses, ni de diminution des comédons ou de l’aspect luisant de la peau et / ou des annexes cutanées.
L’extrait selon l’invention présente l’avantage d’être un ingrédient actif topiquement acceptable qui n’irrite pas la peau ni les annexes cutanées et qui présente une grande stabilité sur le plan chimique. Il ne provoque pas d’allergie. Outre ses propriétés sur l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et l’éclat des cheveux, cet extrait présente l’avantage de réguler la flore bactérienne commensale cutanée. Il présente l’avantage en outre de lutter contre les effets néfastes de la pollution.
Cet extrait peut être produit à l’échelle industrielle.
Un premier objet de l’invention concerne ainsi l’utilisation cosmétique, non thérapeutique, d’un extrait glycoprotéique de la planteP. dulcispour maintenir et / ou augmenter l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses, et / ou l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux.
Un autre objet concerne l’utilisation cosmétique non thérapeutique dudit extrait dans une composition cosmétique comprenant au moins un excipient cosmétiquement acceptable.
Un 3ème objet est relatif à un procédé de soin cosmétique comprenant l’administration par voie topique ou orale de l’extrait selon l’invention ou d’une composition cosmétique le comprenant.
Un dernier objet concerne un extrait glycoprotéique deP. dulcispour son utilisation pharmaceutique, avantageusement dermatologique, pour prévenir l’apparition et / ou diminuer l’acné et / ou l’eczéma et / ou la dermatite atopique.
Description détaillée
Un premier objet de l’invention concerne donc l’utilisation cosmétique, non thérapeutique, d’un extrait glycoprotéique de la planteP. dulcispour maintenir et / ou augmenter l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux.
On entend par « utilisation cosmétique » une utilisation non thérapeutique, c’est-à-dire une utilisation non pharmaceutique ou non dermatologique, c’est-à-dire une utilisation destinée à tout ou partie de peau et / ou de muqueuse et / ou d’annexe cutanée saine.
On entend par « peau ou muqueuse ou annexe cutanée saine » une peau ou muqueuse ou annexe cutanés qui ne nécessite pas de traitement thérapeutique, qui ne présente pas d’infection, de cicatrice, de maladie, d’inflammation ou d’affection cutanée telle que candidose, impétigo, psoriasis, eczéma, acné ou dermatite, ou de plaie, blessure et / ou autre dermatose.
On entend par « peau » toute partie du corps et / ou du visage, y inclut le cuir chevelu.
On entend par « annexes » les ongles, les poils, les cheveux, les cils, les sourcils, avantageusement les cheveux.
On entend par « muqueuse » la muqueuse nasale et / ou buccale et / ou gingivale et / ou labiale et / ou vaginale et / ou anale, préférentiellement la muqueuse labiale.
L’extrait selon l’invention peut être administré par voie orale ou topique. Préférentiellement, il est appliqué par voie topique. L’extrait selon l’invention est un extrait topiquement acceptable.
Le terme « topiquement acceptable » s’entend ici d’un extrait non irritant pour la peau ou les annexes cutanées, non toxique et n’induisant pas de réaction allergique.
On entend par « application par voie topique » l’application directe de l’extrait ou d’une composition cosmétique le comprenant au niveau de la peau et / ou des annexes cutanées, ou sa vaporisation à la surface de la peau et / ou des muqueuses et / ou des annexes cutanées, préférentiellement des cheveux.
Dans un mode de réalisation de l’invention, l’utilisation cosmétique de l’extrait selon l’invention comprend son application par voie topique ou celle d’une composition cosmétique le comprenant sur tout ou partie du corps et / ou du visage choisie parmi les jambes, les pieds, les aisselles, les mains, les cuisses, le ventre, le décolleté, le cou, les bras, le torse, le dos, la muqueuse labiale, le visage, avantageusement le visage, et / ou les annexes cutanées, avantageusement les cheveux.
Ainsi, dans un premier mode de réalisation, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisselon l’invention permet de maintenir et / ou augmenter l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses et / ou l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux.
Dans un mode de réalisation avantageux de l’invention, l’extrait maintient et / ou augmente l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses et / ou l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux, en maintenant et / ou en augmentant la flore commensale cutanée et / ou mucosale.
On entend ici par « maintenir et / ou augmenter la flore commensale cutanée et / ou mucosale » maintenir et / ou augmenter la quantité de souches bactériennes commensales bénéfiques au niveau de la peau et / ou des muqueuses.
On entend par « éclat des annexes cutanées » la brillance desdites annexes. Avantageusement, il s’agit de la brillance des cheveux.
On entend par « maintenir et / ou améliorer l’éclat du teint », prévenir la perte de et / ou augmenter la radiance et / ou la brillance du teint et / ou prévenir et / ou diminuer le teint terne, notamment due à une balance microbienne déséquilibrée, notamment une diminution du nombre de souche bactérienne commensale bénéfique et / ou un excès de sébum et / ou due à la pollution, en particulier due aux particules fines polluantes et / ou aux UVA.
De manière avantageuse, le maintien et / ou l’amélioration de l’éclat du teint est ainsi obtenu en maintenant et / ou en augmentant la flore commensale cutanée et / ou mucosale, notamment lorsque cette flore commensale cutanée et / ou mucosale est diminuée.
La mesure de l’éclat du teint et de l’homogénéité du teint de la peau peut par exemple être effectuéein vivo, notamment par chromamétrie ou par analyse d’image. Cette dernière méthode de mesurein vivoconsiste à prendre des photographies haute résolution en configuration polarisée croisées du visage de volontaires prises à 45° avant et après application du produit testé. Sur la base de ces photographies numériques, une analyse d'image permet d'extraire et de quantifier des paramètres spécifiques (par exemple: L*, a*, b*, C, h°) reliés à la couleur, l'éclat, l'homogénéité, et la texture de la peau.
On entend par « maintenir et / ou améliorer l’homogénéité du teint » prévenir et / ou diminuer les imperfections et / ou irrégularités de la couleur du teint tels que les rougeurs, les comédons et / ou les pores visibles, l’aspect luisant de la peau et / ou des annexes cutanées et / ou un excès de sébum.
On entend par « souche bactérienne commensale bénéfique » une souche bactérienne qui n’induit pas de pathologie et / ou d’infection et / ou d’inflammation et / ou d’affection cutanée telle que candidose, impétigo, psoriasis, eczéma, acné ou dermatite, ou de plaie, blessure et / ou autre dermatose.
De manière préférentielle, la souche bactérienne commensale bénéfique est choisie parmiS. hominis , S. warneri , S. capitis , Acinetobacter lwolffiiou leurs combinaisons, avantageusementS. epidermidiset / ouS. hominis.
On entend par « flore bactérienne commensale bénéfique », une population de souches bactériennes commensales bénéfiques.
Une augmentation de la quantité de souches bactériennes commensales bénéfiques peut contribuer à prévenir et / ou diminuer l’apparition et / ou la quantité de souches bactériennes néfastes telles que Propionibacterium acnes, et / ou pathogènes, notammentStaphylococcus aureus. On parle de balance microbienne équilibrée.
Ainsi, maintenir et / ou augmenter la quantité d’au moins une souche bactérienne commensale bénéfiques choisie parmiS. hominis,S. warneri,S. capitis , Acinetobacter lwolffiiou leurs combinaisons, avantageusementS. epidermidis et / ou S. hominis, permet de prévenir l’apparition et / ou diminuer les manifestations inesthétiques et / ou inconfortables de la peau et / ou des muqueuses et / ou des annexes cutanées induites par ce déséquilibre de la balance microbienne, notamment les rougeurs de la peau et / ou des muqueuses, les comédons, l’aspect luisant de la peau et / ou des annexes cutanées et / ou un excès de sébum.
Dans un mode particulièrement avantageux de réalisation de l’invention, l’extrait n’est pas utilisé pour le traitement des peaux dites sensibles. On entend ici par « peaux sensibles » des peaux notamment déshydratées et / ou fragilisées, sans qu’elles soient considérées comme pathologiques. Très avantageusement, l’utilisation cosmétique de l’extrait glycoprotéique deP. dulcisest destinée aux peaux normales.
La présente invention convient particulièrement au soin et / ou traitement cosmétique des peaux normales et / ou des peaux présentant un déséquilibre de la balance microbienne, en particulier une diminution du nombre de souches bactériennes commensales bénéfiques.
Dans un mode de réalisation avantageux, l’extrait selon l’invention est en quantité efficace pour maintenir et / ou augmenter la quantité deS. epidermidis, lorsque cette quantité est augmentée d’au moins 2%, avantageusement d’au moins 7%, encore avantageusement d’au moins 11% en présence de l’extrait selon l’invention, en comparaison de la quantité mesuré en l’absence de l’extrait, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 2.
Dans un mode de réalisation avantageux, la mesure de la quantité deS. epidermidisest effectuée par mesure de la densité optique à 600 nm après une période de 24 heures d’incubation de ladite souche dans un milieu de culture approprié en présence de l’extrait selon l’invention à une concentration en poids de 0,4% par rapport au volume final du milieu de culture. Avantageusement, l’extrait est l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcistel que préparé selon l’exemple 1a). Encore avantageusement, la souche deS. epidermidisest la souche ATCC12228.
Dans un autre mode de réalisation avantageux, l’extrait selon l’invention est en quantité efficace pour « prévenir l’apparition et / ou diminuer les rougeurs de la peau et / ou des muqueuses, et / ou un excès de sébum, et / ou un aspect luisant de la peau et / ou des annexes cutanées, et / ou les comédons » lorsqu’il maintient et / ou augmente la quantité deS. hominisd’au moins 4%, avantageusement d’au moins 7%, encore avantageusement d’au moins 11%, en comparaison de la quantité mesuré en l’absence de l’extrait, dans les conditions décrites dans l’exemple 2.
Préférentiellement, la mesure de la quantité de S. hominisest effectuée par mesure de la densité optique à 600 nm après une période de 24 heures d’incubation de ladite souche dans un milieu de culture approprié en présence de l’extrait selon l’invention à une concentration en poids de 0,1% par rapport au volume final du milieu de culture. Avantageusement, l’extrait est l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcistel que préparé selon l’exemple 1a). Encore avantageusement, la souche deS. hominisest la souche ATCC27844.
Dans encore un autre mode de réalisation avantageux, l’extrait selon l’invention est en quantité efficace pour « prévenir l’apparition et / ou diminuer les comédons » lorsqu’il diminue la quantité de Propionibacterium acnes à la surface de la peau, d’au moins 1,5%, préférentiellement d’au moins 2%, encore préférentiellement d’au moins 4% en présence de l’extrait selon l’invention, en comparaison de la quantité de P. acnes mesuré sans ledit extrait.
De manière préférentielle selon l’invention, la mesure de la quantité deP. acnesest effectuée par mesure de la densité optique à 600 nm après une période de 24 heures d’incubation de ladite souche dans un milieu de culture approprié en présence de l’extrait selon l’invention à une concentration finale en poids de 0,4% par rapport au volume final du milieu de culture. Avantageusement, la diminution de la quantité deP. acnesest mesurée au niveau du visage. Encore avantageusement, l’extrait selon l’invention est l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcistel que préparé selon l’exemple 1a).
L’extrait selon l’invention est donc utile pour prévenir l’apparition et / ou diminuer les rougeurs de la peau et / ou des muqueuses, et / ou un excès de sébum, et / ou un aspect luisant de la peau et / ou des annexes cutanées, et / ou les comédons.
Dans un autre mode de réalisation avantageux de l’invention, l’extrait maintient et / ou augmente l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses, et / ou l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux, en diminuant le pourcentage d’adhésion de particules fines polluantes à la surface de la peau et / ou des muqueuses et / ou des annexes cutanées, et / ou en augmentant la synthèse d’ATP mesuré après exposition aux UVA et / ou aux particules fines polluantes, et / ou en diminuant la cytotoxicité cellulaire avantageusement induite par des particules fines polluantes et / ou les UVA.
Selon un mode de réalisation avantageux, l’extrait selon l’invention diminue le pourcentage d’adhésion de particules fines polluantes d’au moins 11%, mesuré au niveau de la peau après dépôt desdites particules fines, en présence d’une crème comprenant l’extrait selon l’invention, en comparaison du pourcentage d’adhésion desdites particules polluantes mesuré sans ladite crème.
De manière préférentielle, cette mesure du pourcentage d’adhésion est effectuée après dépôt de microparticules d’oxide de fer modélisant les particules fines de diamètre égal à 2,5µm, au niveau de la face antéro-interne de l’avant-bras d’une population de 21 femmes d’origine caucasienne âgées de 19 ans à 45 ans, encore avantageusement après application d’une crème comprenant une concentration finale en poids de l’extrait selon l’invention de 0,25% par rapport au poids total de la crème. Préférentiellement, l’extrait utilisé compris dans la crème est l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcistel que préparé dans les conditions décrites dans l’exemple 1a).
Alternativement, la mesure du pourcentage d’adhésion des microparticules d’oxide de fer est effectuée après lavage à l’eau au niveau de la face antéro-interne de l’avant-bras d’une population de 21 femmes d’origine caucasienne âgées de 19 ans à 45 ans, encore avantageusement après application d’une crème comprenant une concentration finale en poids de l’extrait selon l’invention de 0,25% par rapport au poids total de la crème. Préférentiellement, l’extrait utilisé compris dans la crème est l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcistel que préparé dans les conditions décrites dans l’exemple 1a).
Encore préférentiellement, l'adhésion et le nettoyage des microparticules sont évaluées par acquisition et analyse d'images après le dépôt des microparticules et après rinçage à l'eau. Les zones étudiées sont visualisées à l'aide d'un vidéomicroscope équipé d'un objectif mobile à fibre optique x20, couplé à un système informatique d'acquisition d'images. La surface couverte par les particules fines est mesurée par analyse d'images, dans les conditions décrites dans l’exemple 5 (Tableau 5).
Dans un autre mode de réalisation avantageux, l’extrait selon l’invention diminue la cytotoxicité cellulaire, avantageusement induite par des particules fines polluantes et les UVA en augmentant la viabilité cellulaire mesurée dans des cellules humaines d’au moins 20% en comparaison du niveau de viabilité cellulaire mesuré lorsque lesdites cellules sont soumises à une combinaison d’UVA et de particules fines polluantes et sans extrait.
Préférentiellement, la mesure de la viabilité cellulaire est effectuée dans des kératinocytes humains, encore avantageusement en présence de l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcistel que préparé selon l’exemple 1a), tel que décrit dans les conditions de l’exemple 3.
Dans encore un autre mode de réalisation avantageux de l’invention, l’extrait selon l’invention augmente la synthèse d’ATP mesuré après exposition des cellules sous combinaison d’UVA et de particules fines polluantes, d’au moins 8%, encore avantageusement d’au moins 20%, très avantageusement d’au moins 30% en comparaison du niveau de synthèse d’ATP mesuré dans des conditions identiques mais sans extrait. Préférentiellement, la synthèse d’ATP est mesurée dans des kératinocytes humains, préférentiellement de la lignée HaCaT. Avantageusement, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisest l’extrait glycoprotéique de graines tel que préparé dans les conditions décrites dans l’exemple 1a). De manière encore avantageuse, la mesure de la synthèse d’ATP est effectuée par bioluminescence, dans les conditions décrites dans l’exemple 4.
Ainsi, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisaugmente la synthèse d’ATP et / ou diminue la cytotoxicité cellulaire, notamment celle induite par les UVA et / ou les particules fines polluantes, avantageusement induite par la combinaison des UVA et des particules fines polluantes.
L’extrait glycoprotéique deP. dulcisselon l’invention est un extrait de tout ou partie de la planteP. dulcischoisi parmi les feuilles, les tiges, les fleurs, les fruits, les branches, les racines et / ou les graines. Avantageusement, il s’agit d’un extrait de graines. On entend ici par « extrait de graines » un extrait de toute partie de la plante comprenant des graines, de façon particulière toute partie du fruit en comprenant, et avantageusement, il s’agit d’un extrait ne contenant que des graines.
L’extrait deP. dulcisest un extrait glycoprotéique. On entend par « extrait glycoprotéique » un extrait protéique de la planteP. dulcisobtenu à partir de la farine séchée des graines deP. dulciset comprenant des protéines glycosylées. Cette farine a été délipidée. Avantageusement, elle contient moins de 10% en poids de lipide par rapport au poids total de la matière sèche, très avantageusement, elle ne contient pas de lipide. Ainsi, l’extrait glycoprotéique selon l’invention n’est pas un extrait d’huile deP. dulcis, particulièrement pas un extrait d’huile des graines. Avantageusement, l’extrait glycoprotéique comprend au moins:
- des protéines glycosylées de poids moléculaire compris entre 250kDa et 330kDa, avantageusement entre 260kDa et 320kDa, plus avantageusement entre 270kDa et 310kDa, encore avantageusement entre 280kDa et 300kDa, très avantageusement de 290kDa. Préférentiellement, ces protéines glycosylées sont qualifiées d’amandoglobulines. Avantageusement, ces protéines sont liées par liaison covalente à des oligosaccharides, avantageusement encore du saccharose.
- des protéines glycosylées de poids moléculaire compris entre 130kDa et 170kDa, avantageusement entre 140kDa et 160kDa, encore avantageusement de 150kDa. Préférentiellement, ces protéines glycosylées sont qualifiées d’amandoalbumines. Avantageusement, ces protéines sont liées par liaison covalente à des oligosaccharides, avantageusement encore du saccharose.
- Et un complexe enzymatique de type émulsine possédant des activité phosphatase et beta-glucosidase.
Dans le cadre de l’invention, le poids moléculaire des protéines est déterminé par chromatographie liquide haute performance.
Préférentiellement, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisselon l’invention ne contient essentiellement que des protéines glycosylées de poids moléculaire compris entre 280kDa et 300kDa, avantageusement de 290kDa, et des protéines glycosylées de poids moléculaire compris entre 140kDa et 160kDa, avantageusement de 150kDa, et le complexe enzymatique de type émulsine possédant des activités phosphatase et β-glucosidase.
Très préférentiellement, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisselon l’invention est constitué seulement des protéines glycosylées de poids moléculaire compris entre 280kDa et 300kDa, avantageusement de 290kDa, et des protéines glycosylées de poids moléculaire compris entre 140kDa et 160kDa, avantageusement de 150kDa, et le complexe enzymatique de type émulsine possédant des activités phosphatase et β-glucosidase.
L’extrait selon l’invention peut être obtenu par différentes méthodes d’extraction connues de l’homme du métier, choisies parmi la macération, la décoction à chaud, par broyage dont le broyage aux ultrasons, à l’aide d’un mixeur, ou encore l’extrait peut être obtenu par extraction dans l’eau en conditions subcritiques ou supercritiques (dioxyde de carbone). Préférentiellement, l’extraction est réalisée par macération.
L’extraction protéique est conduite à partir de farine délipidée, donc de matière sèche, en quantité de 1% à 30 % en poids, avantageusement de 5 % à 20%, très avantageusement de 5 % à 15 %, encore avantageusement de 10%, en poids par rapport au poids total de la farine délipidée et du solvant d’extraction.
L’extraction protéique est conduite durant une période de 30 minutes à 24 heures, préférentiellement de 30 minutes à 12 heures, encore préférentiellement durant une période de 1 heure à 5 heures, et encore avantageusement durant une période de 1 heure à 2 heures. Très avantageusement, l’extraction protéique est conduite durant une période de 1 heure.
L’extrait glycoprotéique selon l’invention est obtenu par extraction des protéines dans un solvant ou mélange de solvant de préférence un solvant polaire protique, et avantageusement dans l’eau, un alcool, un glycol, un polyol, un mélange eau/alcool, eau/glycol ou eau/polyol (tels que l’eau en mélange avec éthanol, glycérol et / ou butylène glycol et / ou autres glycols tel que xylitol et / ou propanediol, etc.) de 99/1 à 1/99 (poids /poids), avantageusement dans l’eau comme unique solvant.
De façon particulière, l’extrait est obtenu par extraction aqueuse. Au sens de la présente invention, on entend par « extrait obtenu par extraction aqueuse » tout extrait obtenu par extraction avec une solution aqueuse contenant plus de 60% en poids, avantageusement au moins 70% en poids, en particulier au moins 80% en poids, plus particulièrement au moins 90% en poids, de façon particulière au moins 95% en poids, d’eau par rapport au poids total de la solution aqueuse, encore plus avantageusement ne contenant pas de glycol et de façon particulière ne contenant pas d’alcool, plus particulièrement ne contenant que de l’eau.
Avantageusement, le solvant peut comprendre du chlorure de sodium, préférentiellement à une concentration finale en poids comprise entre 0,5% et 1,5%, encore préférentiellement à une concentration en poids de 0,9% par rapport au poids total du solvant comprenant le chlorure de sodium.
L’extraction est conduite à une température comprise entre 4°C et 90°C, avantageusement entre 50°C et 80°C, encore avantageusement entre 65°C et 75°C, très avantageusement à 72°C.
L’extraction protéique est conduite à un pH compris entre 5,0 et 7,0, avantageusement entre 5,5 et 6,5, encore avantageusement elle est conduite à un pH de 6,1.
Dans un premier mode avantageux de réalisation de l’invention, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisest préparé à partir de 10% en poids de farine séchée de graines. L’extrait glycoprotéique est ensuite obtenu par extraction aqueuse des protéines à pH 6,1, à une température de 72°C, durant une période de 1 heure, dans de l’eau comme unique solvant comprenant du chlorure de sodium à une concentration finale en poids de 0,9% par rapport au poids total du solvant comprenant le chlorure de sodium. L’extrait liquide obtenu est ensuite séparé par centrifugation, filtré puis une étape de clarification est mise en œuvre. L’extrait ainsi clarifié est ensuite concentré, filtré puis atomisé dans les conditions telles que décrites dans l’exemple 1a).
Dans un second mode de réalisation de l’invention, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisest préparé à partir de 10% en poids de farine séchée de graines. L’extrait glycoprotéique est ensuite obtenu par extraction aqueuse des protéines à pH 6,5, à une température de 65°C, durant une période de 2 heure, dans de l’eau comme unique solvant comprenant du chlorure de sodium à une concentration finale en poids de 1 ,2% par rapport au poids total du solvant comprenant le chlorure de sodium. L’extrait liquide obtenu est ensuite séparé par centrifugation, filtré puis une étape de clarification est mise en œuvre. L’extrait ainsi clarifié est ensuite concentré, filtré puis atomisé en présence de maltodextrines à une concentration en poids de 80% par rapport au poids total de l’extrait atomisé, dans les conditions décrites dans l’exemple 1b).
Dans un 3ème mode de réalisation, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisest préparé à partir de 15% en poids de farine séchée de graines. L’extrait glycoprotéique est ensuite obtenu par extraction aqueuse des protéines à pH 6,5, à une température de 65°C, durant une période de 2 heure, dans de l’eau comme unique solvant comprenant du chlorure de sodium à une concentration finale en poids de 1 ,2% par rapport au poids total du solvant comprenant le chlorure de sodium. L’extrait liquide obtenu est ensuite séparé par centrifugation, filtré puis une étape de clarification est mise en œuvre. L’extrait ainsi clarifié est ensuite concentré puis filtré dans les conditions décrites dans l’exemple 1c).
L’extrait selon l’invention est utilisé seul ou dans une composition cosmétique ou dermatologique.
Lorsqu’il est utilisé seul sous forme d’ingrédient cosmétique, il est préférentiellement solubilisé dans une solution aqueuse contenant de la glycérine, avantageusement présente à une concentration de 60% à 90%, encore avantageusement de 70% à 85%, très avantageusement à une concentration de 80% en poids par rapport au poids total de la solution aqueuse comprenant l’extrait.
Dans un mode de réalisation alternatif de réalisation de l’invention, l’extrait est solubilisé et / ou dilué dans un solvant notamment polaire, tel que l’eau, un alcool, un polyol, un glycol, tel que le pentylène glycol et / ou le butylène glycol et / ou l’hexylène glycol et / ou le caprylyl glycol, ou un de leurs mélanges, préférentiellement un mélange hydroglycolique, encore préférentiellement contenant un glycol choisi parmi l’hexylène glycol, le caprylyl glycol et leurs mélanges. Avantageusement l'extrait obtenu est dilué et / ou soluble dans une solution aqueuse contenant de l’hexylène glycol, en particulier contenant entre 0,1 et 10 % en poids de l’hexylène glycol, préférentiellement entre 0,5 et 5 % en poids d’hexylène glycol, par rapport au poids total de l’ingrédient cosmétique. Avantageusement, l'extrait obtenu est dilué et / ou soluble dans une solution aqueuse contenant du caprylyl glycol, en particulier contenant entre 0,01 et 5 % en poids de caprylyl glycol, préférentiellement entre 0,1 et 1 % en poids de caprylyl glycol, par rapport au poids total de la solution aqueuse comprenant l’extrait.
De façon particulière, la solution aqueuse dans laquelle est solubilisée l’extrait glycoprotéique deP. dulcisselon l'invention comprend de la gomme xanthane, en particulier entre 0,01 et 5 % en poids de gomme xanthane par rapport au poids total la solution aqueuse, plus particulièrement entre 0,1 et 1 % en poids de gomme xanthane par rapport au poids total de la solution aqueuse comprenant l’extrait.
De façon avantageuse, la solution dans laquelle est solubilisé l’extrait glycoprotéique deP. dulcisselon l'invention comprend de l’hexylène glycol, du caprylyl glycol et de la gomme de xanthane.
Dans un autre mode de réalisation alternatif, l’extrait liquide obtenu selon l’invention est atomisé en présence de maltodextrine, en concentration de 70% en poids à 90% en poids par rapport au poids total de la maltodextrine et de l’extrait, avantageusement de 75% à 85%, et encore avantageusement à une concentration de 80% en poids de maltodextrine par rapport au poids total de la maltodextrine et de l’extrait. L’extrait se présente sous forme de poudre.
Un autre objet concerne l’utilisation d’un extrait glycoprotéique deP. dulcisdans une composition cosmétique comprenant au moins un excipient cosmétiquement acceptable pour maintenir et / ou augmenter l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses, et / ou l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux.
La composition cosmétique selon l’invention est utile pour prévenir l’apparition et / ou diminuer les manifestations inesthétiques et / ou inconfortables de la peau et / ou des muqueuses et / ou des annexes cutanées induites par un déséquilibre et / ou une diminution de la flore bactérienne commensale cutanée et / ou mucosale, avantageusement les rougeurs de la peau et / ou des muqueuses, et / ou un excès de sébum, et / ou les comédons, et / ou un aspect luisant de la peau. La composition cosmétique comprenant l’extrait selon l’invention est aussi utile pour lutter contre les effets néfastes de la pollution.
Ainsi, la composition cosmétique permet de maintenir et / ou augmenter l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses et / ou l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux.
Dans un mode de réalisation de l’invention, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisest utilisé dans la composition sous forme d’une solution, aqueuse ou huileuse, se rinçant ou non, une crème ou un gel aqueux ou un gel huileux, notamment un gel douche, un lait, une émulsion, une microémulsion ou une nanoémulsion, notamment huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple ou siliconée, un masque, un sérum, une lotion, un savon liquide, un pain dermatologique, une pommade, une mousse, un patch, un produit anhydre, de préférence liquide, pâteux ou solide, une lotion de soin capillaire, un shampoing, un après-shampooing.
Ladite composition peut être appliquée par voie topique ou administrée par voie orale. Avantageusement, elle sera appliquée par voie topique. Dans un mode de réalisation préférentiel, la composition cosmétique comprend au moins un excipient cosmétiquement acceptable.
Ainsi avantageusement, l’extrait selon l’invention est présent dans la composition, avantageusement cosmétique, à une concentration de 1x10-4% à 10 %, préférentiellement de 1x10-3% à 5 %, et encore préférentiellement de 1x10-2% à 3 % en poids, par rapport au poids total de la composition.
Le ou les excipients utilisés dans la composition cosmétique sont choisis parmi des agents tensioactifs et / ou émulsifiants, des conservateurs, des agents tampons, des agents chélatants, des dénaturants, des agents opacifiants, des ajusteurs de pH, des agents réducteurs, des agents stabilisants, des épaississants, des gélifiants, des polymères filmogènes, des charges, des agents matifiants, des agents de brillance, des pigments, des colorants, des parfums, et leurs mélanges. Le CTFA (Cosmetic Ingrédient Handbook, Second Edition (1992)) décrit différents excipients cosmétiques adaptés à une utilisation dans la présente invention.
Avantageusement, le ou les excipients sont choisis dans le groupe comprenant les polyglycérols, les esters, les polymères et dérivés de cellulose, les dérivés de lanoline, les phospholipides, les lactoferrines, les lactoperoxidases, les stabilisants à base de sucrose, la vitamine E et ses dérivés, les gommes de xanthane, les cires naturelles et synthétiques, les huiles végétales, les triglycérides, les insaponifiables, les phytostérols, les silicones, les hydrolysats de protéines, les bétaïnes, les aminoxides, les extraits de plantes, les esters de saccharose, les dioxydes de titane, les glycines, et les parabènes, et encore de préférence parmi le groupe consistant en le stéareth-2, le stéareth-21, le glycol-15 stéaryle éther, le cétéaryl alcool, le phénoxyéthanol, le méthylparabéne, l'éthylparabène, le propylparabène, le butylparabène, le butylène glycol, le caprylyl glycol, les tocophérols naturels, la glycérine, le dihydroxycetyl sodium phosphate, l'isopropyl hydroxycétyl éther, le glycol stéarate, la triisononanoine, l'octyl cocoate, le polyacrylamide, l'isoparaffine, le laureth-7, un carbomer, le propylène glycol, l'hexylène glycol, le glycérol, le bisabolol, une diméthicone, l'hydroxyde de sodium, le PEG 30-dipolyhydroxystérate, les triglycérides caprique/caprylique, le cétéaryl octanoate, le dibutyl adipate, l'huile de pépins de raisin, l'huile de jojoba, le sulfate de magnésium, l'EDTA, une cyclométhicone, la gomme de xanthane, l'acide citrique, le lauryl sulfate de sodium, les cires et les huiles minérales, l'isostéaryl isostéarate, le dipélargonate de propylène glycol, l'isostéarate de propylène glycol, le PEG 8, la cire d'abeille, les glycérides d'huile de coeur de palme hydrogénée, l'huile de lanoline, l'huile de sésame, le cétyl lactate, le lanoline alcool, l'huile de ricin, le dioxyde de titane, le lactose, le saccharose, le polyéthylène basse densité, une solution isotonique salée, et leurs mélanges.
La composition cosmétique peut comprendre par ailleurs d’autres ingrédients possédant les mêmes propriétés et induisant un effet synergique ou non avec l’extrait selon l’invention, ou des agents ingrédients à effets complémentaires. L’extrait peut être combiné à tout extrait de plante possédant des propriétés similaires de prévention de l’apparition et / ou de diminution des imperfections du teint de la peau et / ou d’augmentation de l’éclat du teint, notamment un extrait du champignonInonotus obliquuscommercialisé par la demanderesse, un extrait d’huile d’Argania spinosacommercialisé sous le nom d’Arganyl™, un extrait de graines deMoringa oleiferacommercialisé sous le nom de Purisoft™ par la demanderesse, une combinaison d’un extrait deSalvia miltiorrhizaet de niacinamide commercialisée sous le nom de CollRepair™ par la demanderesse, un extrait d’Achillea millefoliumcommercialisé sous le nom de Neurobiox™ par la demanderesse, un extrait de feuilles deCassia alatacommercialisé sous le nom de DN-Age™ et / ou un extrait de litchi commercialisé sous le nom de Litchiderm™ en tant qu’actifs anti-oxydants, , d’un extrait de chicorée commercialisé sous le nom de Lox-Age™, un extrait dePolygonum bistortacommercialisé sous le nom de Perlaura™, un extrait de galanga commercialisé sous le nom de Hyalufix™, d’un extrait de maïs commercialisé sous le nom de Deliner™ ou un extrait deVoandzeia subterraneacommercialisé sous le nom d’Epigenist™ par la demanderesse ou encore des actifs favorisant la fermeté de la peau tels qu’un tétrapeptide synthétique commercialisé sous le nom de Dermican™, un extrait d’Hibiscus abelmoschuscommercialisé sous le nom de Linefactor™, un extrait purifié de pois commercialisé sous le nom de Proteasyl™, un extrait deManilkara multinerviscommercialisé sous le nom d’Elestan™ par la demanderesse. Un extrait de la planteOriganum majoranacommercialisé sous le nom de Dermagenist™ et / ou un extrait deKhaya senegalensiscommercialisé sous le nom de Collalift®18 et / ou un extrait d’Eperua falcatacommercialisé sous le nom de d’Eperuline™ ou encore un extrait comprenant des phytostérols, notamment du β-sitostérol et / ou du campestérol et / ou du brassicastérol provenant d’huile de colza et commercialisé par la demanderesse sous le nom de Phytosoothe™, pourront aussi être ajoutés dans la composition cosmétique.
D’autres ingrédients actifs notamment sur l’hydratation de la peau et / ou des muqueuses pourront être combinés avec l’extrait glycoprotéique selon l’invention. Ainsi, parmi les ingrédients actifs hydratants et / ou actifs sur la fonction barrière et / ou qui augmentent la teneur en eau de la peau et / ou des muqueuses et / ou stimulent la synthèse d’aquaporine pour améliorer la circulation de l’eau dans les cellules, on citera la sérine, l’urée et ses dérivés, les produits tels que des microsphères de collagène marin et de sulfate de chondroitine en tant que glycosaminoglycane, une formulation comprenant un sel d’acide hyaluronique, de l’urée, du tréhalose, du triacétate de glycérol et du polyquaternium respectivement commercialisés sous les noms de Marine Filling sphères™ et Advanced moisturizing complex™, des microsphères d’acide hyaluronique commercialisées sous le nom de Hyaluronic Filling Spheres™, un extrait d’algue rouge ou un mélange de polysaccharide d’acacia, d’alginate et de sérine respectivement commercialisés sous les noms de Osmogelline™ et Micropatch™ Serine, ou encore une combinaison de pullulan, d’acide hyaluronique ou un de sels ou un de ses dérivés et de l’acide alginique, un de sels ou un de ses dérivés, commercialisée sous le nom de PatcH20™.
Un autre objet de l’invention concerne encore un procédé de soin cosmétique comprenant l’administration par voie topique ou orale, avantageusement l’application par voie topique, d’un extrait glycoprotéique deP. dulcisou d’une composition cosmétique le comprenant, pour maintenir et / ou augmenter l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses, et / ou l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux, avantageusement en prévenant l’apparition et / ou en diminuant les manifestations inesthétiques et / ou inconfortables de la peau et / ou des muqueuses et / ou des annexes cutanées induites par un déséquilibre et / ou une diminution d’au moins une souche bactérienne commensale bénéfique cutanée et / ou mucosale, avantageusement choisie parmiS. hominis , S. warneri , S. capitis , Acinetobacter lwolffiiou leurs combinaisons, avantageusementS. epidermidiset / ouS. hominis. Avantageusement, ces manifestations sont les rougeurs de la peau et / ou des muqueuses, et / ou un excès de sébum, et / ou les comédons, et / ou un aspect luisant de la peau.
Dans un mode de réalisation, le procédé de soin cosmétique comprend l’application de l’extrait glycoprotéique deP. dulcisou d’une composition cosmétique le comprenant, par voie topique, sur tout ou partie du corps et / ou du visage choisie parmi les jambes, les pieds, les aisselles, les mains, les cuisses, le ventre, le décolleté, le cou, les bras, le torse, le dos, le visage, avantageusement le visage, et / ou les muqueuses, avantageusement la muqueuse labiale, et / ou les annexes cutanées, avantageusement les cheveux.
Un dernier objet concerne un extrait glycoprotéique deP. dulcispour son utilisation pharmaceutique, avantageusement dermatologique, pour prévenir l’apparition et / ou diminuer l’acné et / ou l’eczéma et / ou la dermatite atopique.
Dans un mode de réalisation de l’invention, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisest compris dans une composition pharmaceutique, avantageusement dermatologique, laquelle comprend au moins un excipient dermatologiquement acceptable.
Avantageusement, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisest compris dans la composition pharmaceutique, avantageusement dermatologique, à une concentration en poids de 1x10-4% à 10 %, préférentiellement de 1x10-3% à 5 %, et encore préférentiellement de 1x10-2% à 3 % en poids, par rapport au poids total de la composition pharmaceutique, avantageusement dermatologique.
Des exemples font référence à la description de l’invention et sont présentés ci-après. Ces exemples sont donnés à titre d’illustration et ne limitent pas la portée de l’invention. Les exemples font partie intégrante de la présente invention et toute caractéristique apparaissant nouvelle par rapport à un état de la technique antérieure quelconque à partir de la description prise dans son ensemble, y compris les exemples, fait partie intégrante de l'invention.
Dans les exemples et sauf indication contraire, la température est exprimée en degré Celsius.
Exemples
Exemple 1 : Modes de préparation de l’extrait de P. dulcis selon l’invention
Exemple 1a): l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcisest préparé à partir de 10% en poids de farine séchée de graines. L’extrait glycoprotéique est ensuite obtenu par extraction aqueuse des protéines à pH de 6,1, à une température de 72°C, durant une période de 1 heure, dans de l’eau comme unique solvant comprenant du chlorure de sodium à une concentration finale en poids de 0,9% par rapport au poids total du solvant comprenant le chlorure de sodium. L’extrait liquide obtenu est ensuite séparé par centrifugation, filtré puis une étape de clarification est mise en œuvre. L’extrait ainsi clarifié est ensuite concentré, filtré puis atomisé.
Exemple 1b): l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcisest préparé à partir de 10% en poids de farine séchée de graines. L’extrait glycoprotéique est ensuite obtenu par extraction aqueuse des protéines à pH de 6,5, à une température de 65°C, durant une période de 2 heures, dans de l’eau comme unique solvant comprenant du chlorure de sodium à une concentration finale en poids de 1,2% par rapport au poids total du solvant comprenant le chlorure de sodium. L’extrait liquide obtenu est ensuite séparé par centrifugation, filtré puis une étape de clarification est mise en œuvre. L’extrait ainsi clarifié est ensuite concentré, filtré puis atomisé en présence de maltodextrines (80% p/p).
Exemple 1c): l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcisest préparé à partir de 15% en poids de farine séchée de graines. L’extrait glycoprotéique est ensuite obtenu par extraction aqueuse des protéines à pH de 6,1, à une température de 72°C, durant une période de 1 heure, dans de l’eau comme unique solvant comprenant du chlorure de sodium à une concentration finale en poids de 0,9% par rapport au poids total du solvant comprenant le chlorure de sodium. L’extrait liquide obtenu est ensuite séparé par centrifugation, filtré puis une étape de clarification est mise en œuvre. L’extrait ainsi clarifié est ensuite concentré puis filtré. Il se présente sous forme liquide.
Exemple 2 : Augmentation de la flore bactérienne commensale
Protocole: L’extrait glycoprotéique deP. dulcistel que décrit dans l’exemple 1a), a été dilué dans un milieu de culture bactérien (Trypto Caseine Soja, TSA) à une concentration finale en poids de 0,1% et 0,4% (pourS. hominisetS. epidermidisrespectivement) par rapport au volume final du milieu de culture. Les milieux comprenant les ingrédients ont ensuite été incubés durant une période de 24 heures à une température de 35°C en aérobie en présence d’un inoculum calibré de 5,4x105deS. epidermidis(ATCC 12228) et 1,75x105pourS. hominis(ATCC 27844).
La quantité de bactérie a été calculée en mesurant la densité optique à 600 nm après une période de 24 heures d’incubation (n =3). Les résultats sont exprimés par la moyenne (MOY) des 3 essais dans chaque test (ET : écart-type).
Résultats :
S. hominis MOY ET
Contrôle (pas de traitement) 0,434 0,020
Extrait glycoprotéique deP. dulcisExemple 1a) 0,1% (p/v) 0,510 0,014
S. epidermidis MOY ET
Contrôle (pas de traitement) 0,576 0,01
Extrait glycoprotéique deP. dulcisExemple 1a) 0,4% (p/v) 0,713 0,012
Conclusion: l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcisa montré sa capacité à augmenter la quantité deS. epidermidisetS. hominis, permettant de renforcer la flore bactérienne cutanée commensale. L’extrait permet de prévenir l’apparition et / ou diminuer les rougeurs et / ou les comédons et / ou l’excès de sébum et / ou l’aspect luisant de la peau et de maintenir et / ou augmenter l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux, ainsi que l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses.
Exemple 3 : Inhibition de la cytotoxicité induite par la pollution sur les kératinocytes
Protocole: Des kératinocytes humains ont été ensemencés dans un milieu de culture contenant du sérum de veau foetal, et incubés à 37°C (5% de CO2 et 95% d’humidité relative) durant une période de 3 jours afin d’obtenir un tapis cellulaire saturé. Le milieu de culture a ensuite été remplacé pour une solution saline équilibrée de Hanks comprenant des particules de pollutions (2,5µm) et l’extrait glycoprotéique deP. dulcispréparé dans les conditions décrites dans l’exemple 1a) à une concentration finale en poids de 0,2% par rapport au volume total du milieu puis incubé à 37°C durant une période de 1 jour. Les cultures ont été irradiées avec des UVA (20J/cm2). Après irradiation, le milieu de culture cellulaire a été renouvelé et les cellules ont été incubées durant une période de 2 jours à 37°C. La viabilité cellulaire a été mesurée (test de bromure de 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tétrazolium ou MTT). Après incubation des kératinocytes avec du MTT durant une période de 3 heures, le tapis cellulaire a été dissout dans du DMSO. La densité optique a été mesurée à 550 nm par spectroscopie, pour mesurer la quantité de cellules vivantes (Viabilité cellulaire). Les résultats sont exprimés en pourcentage moyen par rapport au contrôle de cellules irradiées sous UVA en l’absence de particules fines.
Le test statistique a été réalisé selon la méthode ANOVA.
Résultats :
MOY
Contrôle (UVA) 144*
Pollution (UVA + particules fines 25µg/mL) 100
Pollution (UVA + particules fines 25µg/mL) et extrait glycoprotéiqueP. dulcisExemple 1a) 0,2% (p/v) 128*
*P<0,001
Conclusion: l’extrait glycoprotéique deP. dulcisa permis de réduire la cytotoxicité induite par la combinaison des UVA et des particules fines et permet de maintenir et / ou augmenter l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux, ainsi que l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses.
Exemple 4 : Inhibition de la dégradation d’ATP en présence de l’extrait selon l’invention
Protocole: Des kératinocytes humains ont été ensemencés dans un milieu de culture contenant du sérum de veau foetal, et incubés à 37°C (5% de CO2 et 95% d’humidité relative) durant une période de 3 jours. Le milieu de culture a été remplacé pour une solution saline équilibrée de Hanks comprenant des particules de pollutions, l’extrait glycoprotéique deP. dulcisà une concentration finale en poids de 0,2% par rapport au volume total du milieu et tel que préparé dans l’exemple 1a), puis le milieu a été incubé durant une période de 1 jour à 37°C. Les cultures ont ensuite été irradiées sous UVA (20J/cm2). Après irradiation, le milieu de culture des cellules a été renouvelé et les cellules incubées durant une période de 2 jours à 37°C. L’énergie cellulaire a été mesurée par mesure enzymatique de l’ATP produit par les cellules (ATP Bioluminescence kit CLSn11699695001/ Roche diagnostic France).
Les résultats sont exprimés en pourcentage moyen +/- écart-type par rapport au contrôle (cellules irradiées sous UVA en l’absence de particules fines). Le test statistique a été réalisé selon la méthode ANOVA.
Résultats:
MOY ET
Contrôle (UVA) 119* 2
Pollution (UVA + particules fines 25µg/mL) 100 2
Pollution (UVA + particules fines 25µg/mL) et extrait glycoprotéiqueP. dulcisExemple 1a) 0,2% (p/v) 120* 10
*P<0,01
Conclusion: l’extrait glycoprotéique deP. dulcisa permis de réduire la diminution de la synthèse d’ATP induite par la combinaison des UVA et des particules fines d’au moins 8%, montrant sa capacité à maintenir et / ou augmenter l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux, ainsi que l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses.
Exemple 5 : Mesure in vivo de la diminution de l’adhésion des particules fines sur la peau en présence de l’extrait selon l’invention.
Protocole: Une crème comprenant une concentration finale en poids de l’extrait selon l’invention de 0,25% par rapport au poids total de la crème (Formulation exemple 6), ou sans ledit extrait remplacé par de l’eau, a été appliquée au niveau de la face antéro-interne de l’avant-bras d’une population de 21 femmes d’origine caucasienne âgées de 19 ans à 45 ans après dépôt de microparticules d’oxide de fer modélisant des particules fines de 2,5µm de diamètre.
L’extrait testé compris dans la crème était l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcistel que préparé dans les conditions décrites dans l’exemple 1a). L'adhésion et le nettoyage des microparticules ont été évaluées par acquisition et analyse d'images après le dépôt des microparticules et après rinçage à l'eau 24h après application de la crème. Les zones étudiées ont été visualisées à l'aide d'un vidéomicroscope équipé d'un objectif mobile à fibre optique x20, couplé à un système informatique d'acquisition d'images. La surface couverte par les particules fines a été mesurée par analyse d'images. Le tableau 5 présente le pourcentage moyen d’adhésion des microparticules au niveau de la peau de la population testée.
Résultats:
Pourcentage d’adhésion des particules fines après dépôt MOY
Zone non traitée 100
Crème comprenant de l’eau, sans extrait (Contrôle négatif) 99
Crème comprenant l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcis0,25% (p/p) (Ex. 1a) 88*
Pourcentage d’adhésion des particules fines après lavage à l’eau MOY
Zone non traitée 100
Crème comprenant de l’eau, sans extrait (Contrôle) 92
Crème comprenant l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcis0,25% (p/p) (Ex. 1a) 75**
*p= 0,006 ; **p<0,001 (Test de Student)
Conclusion: l’application de la crème comprenant l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcisa permis de réduire l’adhésion des particules fines polluantes avant et après lavage de respectivement 11% et 17% par rapport à la crème contrôle.
Ces résultats montrent l’effet bénéfique de l’extrait sur le maintien et / ou l’augmentation de l’éclat des annexes cutanées, avantageusement des cheveux, ainsi que l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau et / ou des muqueuses.
Exemple 6 : Exemples de formulations cosmétiques comprenant l’extrait glycoprotéique de P. dulcis
Exemple 6a) Formulation pour le corps et / ou le visage
Un produit cosmétique sous forme d’une crème pour le visage peut présenter une composition pondérale, constituée à partir des phases aqueuses et grasses suivantes. Les pourcentages sont exprimés en poids par rapport au poids total de la composition.
Phase grasse Succinate d'Isostéaryle et de Diglycéryle 3,00
Huile de paraffine 15,00
Quaternium-18 Hectorite 0,50
Poly(PEG-22/Dodécyle Glycol) 1,00
Phase aqueuse Sulfate de magnésium 0,80
Butylène glycol 4,00
Extrait glycoprotéique deP. dulcis(selon l’ex. 1a) 1,00
Eau distillée 9,00
Methylparabène, hexamidine diisethionate, 2-Bromo-2 nitropropane-1,3-diol et propylparabène (Elestab 4112) 0,35
Parfum 0,30
Eau distillée Qsp 100,00
Exemple 6b) Formulation pour le visage (Crème)
Un produit cosmétique sous forme d’une crème pour le corps et / ou le visage pourra, par exemple, présenter une composition pondérale, constituée à partir des phases aqueuses et grasses suivantes, telle qu'indiquée ci-après.
Phase grasse Ceteareth 25 2,00
Ceteareth 6 (et) Stearyl Alcool stéarylique 1,00
Alcool cétylique 4,00
Stéarate de glycérol 4,00
Pétrolatum 5,00
Triglycérides capryliques / capriques 5,00
Phase aqueuse Glycérine 10,00
Extrait glycoprotéique deP. dulcis(préparée selon l’ex. 1a) 1,50
Eau distillée 8,50
Methylparabène, hexamidine diisethionate, 2-Bromo-2 nitropropane-1,3-diol et propylparabène (Elestab 4112) 0,40
Parfum 0,30
Eau distillée Qsp 100,00
Le procédé de préparation de la crème pour le visage consiste essentiellement à porter la phase grasse à 80° C, à porter la phase aqueuse également à 80° C et à y dissoudre l'Elestab 4112 (Methylparabène, hexamidine diisethionate, 2-Bromo-2 nitropropane-1,3-diol et propylparabène), à préparer séparément la solution mère d'extrait glycoprotéique deP. dulcis, à verser la phase grasse dans la phase aqueuse sous agitation turbine, puis, aux environs de 50° C, à y introduire la solution mère d'extrait deP. dulciset à poursuivre l'agitation jusqu'au refroidissement.

Claims (15)

  1. Utilisation cosmétique non thérapeutique d’un extrait glycoprotéique dePrunus dulcispour maintenir et /ou augmenter l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
  2. Utilisation selon la revendication 1 telle que l’extrait glycoprotéique deP. dulcisprévient l’apparition et / ou diminue les rougeurs de la peau saine et / ou des muqueuses saines , et / ou les comédons, et / ou un aspect luisant de la peau saine.
  3. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 ou 2 telle que l’extrait glycoprotéique deP. dulcisest un extrait de graines.
  4. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 3 que l’extrait glycoprotéique deP. dulciscomprend des glycoprotéines de poids moléculaire compris entre 260kDa et 320kDa, avantageusement entre 280kDa et 300kDa, encore avantageusement de 290kDa.
  5. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 4 telle que l’extrait glycoprotéique deP. dulciscomprend des glycoprotéines de poids moléculaire compris entre 130kDa et 170kDa, avantageusement entre 140kDa et 160kDa, encore avantageusement de 150kDa.
  6. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 5 telle que l’extrait glycoprotéique est obtenu à partir de farine délipidée des graines deP. dulcis.
  7. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 6 telle que l’extrait maintient et / ou augmente la quantité d’au moins une souche bactérienne commensale bénéfique, avantageusementStaphylococcus epidermidiset / ouStaphylococcus hominis.
  8. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 7 telle que l’extrait augmente la synthèse d’ATP et / ou diminue la cytotoxicité cellulaire.
  9. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 8 telle que l’extrait est compris dans une composition cosmétique comprenant au moins un excipient cosmétique acceptable, à une concentration en poids de 1x10-4% à 10 %, préférentiellement de 1x10-3% à 5 %, par rapport au poids total de la composition cosmétique.
  10. Utilisation selon la revendication 9 telle que la composition cosmétique se présente sous forme d’une solution, aqueuse ou huileuse, se rinçant ou non, une crème ou un gel aqueux ou un gel huileux, notamment un gel douche, un lait, une émulsion, une microémulsion ou une nanoémulsion, notamment huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple ou siliconée, un masque, un sérum, une lotion, un savon liquide, un pain dermatologique, une pommade, une mousse, un patch, un produit anhydre, de préférence liquide, pâteux ou solide, une lotion de soin capillaire, un shampoing, un après-shampooing.
  11. Procédé de soin cosmétique comprenant l’administration par voie topique ou orale, avantageusement l’application par voie topique, d’un extrait glycoprotéique de graines deP. dulcisou d’une composition le comprenant pour maintenir et /ou augmenter l’éclat et / ou l’homogénéité du teint de la peau saine et / ou des muqueuses saines.
  12. Procédé de soin cosmétique selon la revendication 11 dans lequel l’extrait prévient l’apparition et / ou diminue les manifestations inesthétiques et / ou inconfortables de la peau saine et / ou des muqueuses saines induites par un déséquilibre et / ou une diminution d’au moins une souche bactérienne commensale bénéfique cutanée et / ou mucosale, avantageusement les rougeurs de la peau saine et / ou des muqueuses saines, et / ou les comédons, et / ou un aspect luisant de la peau saine.
  13. Procédé de soin cosmétique selon la revendication 11 tel que l’extrait glycoprotéique de graines deP. dulcisou la composition cosmétique le comprenant est appliqué sur tout ou partie du corps et / ou du visage choisie parmi les jambes, les pieds, les aisselles, les mains, les cuisses, le ventre, le décolleté, le cou, les bras, le torse, le dos, le visage, avantageusement le visage, et / ou les muqueuses, avantageusement la muqueuse labiale.
  14. Extrait glycoprotéique deP. dulcispour son utilisation pharmaceutique, avantageusement dermatologique, pour prévenir l’apparition et / ou diminuer l’acné et / ou l’eczéma et / ou la dermatite atopique.
  15. Extrait selon la revendication 14 tel qu’il est défini dans l’une quelconque des revendications 3 à 6.
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