FR3051466A1 - Composition pour induire un effet biologique sur une cible vegetale - Google Patents

Abstract

La composition, selon la présente invention, comporte un support répartissable sur une cible végétale ; le support renferme des microorganismes et leur agent nutritif. Le support comporte un liquide dans lequel est soluble l'agent nutritif. La composition renferme un agent filmogène, dont la distribution sur la cible y assure le maintien des microorganismes. Les microorganismes restent à l'état stabilisé de conservation tant qu'ils n'ont pas été répartis sur la cible par le support pour induire la réponse biologique attendue.

Description

La présente invention concerne une composition pour induire un effet systémique, stimulateur et/ou protecteur ou, plus généralement, biologique, sur une plante et/ou sur des graines ou semences de plante. Pour la suite de cette demande de brevet, on désignera par le vocable « cible végétale à traiter » aussi bien les plantes (et notamment leurs parties aériennes) que leurs graines ou semences.

Dans le brevet français publié sous le n° 2990943, on a déjà proposé des agrogranulats, dont la formulation leur confère la capacité d’absorber puis de relarguer une quantité importante d’eau ou de solutions aqueuses. On a ainsi décrit un granulat susceptible de mettre en réserve un liquide que l’on veut utiliser pour la plante ; chaque granulat est un réservoir de produits utiles pour la plante notamment un agent d’ensemencement renfermant des microorganismes, ce réservoir pouvant, suivant les besoins, se charger ou se décharger en produits utiles à la plante. En fait, les granulats sont ensuite répartis sur les zones de la plante à traiter. L’apport biologique, qui est dans le granulat, est amené à la plante à la fois par la matière solide de l’agrogranulat et par le liquide d’épandage associé au granulat, l’ensemble formant un support, qui est répartissable sur la partie de plante à traiter.

Dans le brevet français n°3008696, on a repris les agrogranulats tels que décrits dans le brevet n°2990943 pour les utiliser en tant que support solide de multiplication de microorganismes de sorte que l’ensemble constitue un minifermenteur. Le minifermenteur ainsi obtenue trouve son application dans la fertilisation d’un sol de culture.

La présente invention dérive de la technique décrite dans les brevets français 2990943 et 30086696 précités pour améliorer l’effet induit sur les plantes. Selon l’invention, on a en effet trouvé que l’apport biologique pouvait être amené sur les parties de plante à traiter par un support ayant à la fois les deux fonctions du support décrit dans les brevets français précités, à savoir : d’une part, une fonction pour assurer la répartition et le maintien des microorganismes sur les parties de plante à traiter et, d’autre part, une fonction assurant la multiplication des microorganismes mis en place sur la plante. L’invention réside, de façon inattendue, dans le fait que l’on sépare les moyens requis pour l’exécution des deux fonctions en prévoyant une composition en deux fractions séparées que l’on fait agir conjointement pour atteindre l’objectif, une fraction amenant les microorganismes in situ et l’autre assurant leur multiplication.

La présente invention a, en conséquence, pour objet une composition apte à induire un effet biologique sur au moins une partie d’une cible végétale à traiter, qui est susceptible de se développer après traitement, ladite composition comportant un support répartissable sur la cible à traiter, ledit support renfermant des microorganismes et un agent nutritif hydrosoluble consommable par lesdits microorganismes pour permettre leur multiplication, caractérisée en ce que le support comporte, d’une part, un liquide aqueux, dans lequel est soluble l’agent nutritif du support, ledit support renfermant, d’autre part, un agent filmogène, dont la distribution sur la cible assure un maintien des microorganismes par placage sur ladite cible, les microorganismes restant, au moins partiellement, à l’état stabilisé de conservation tant qu’ils n’ont pas été répartis sur la cible par le support et se multipliant ensuite sur ladite cible pour induire la réponse biologique attendue.

Dans un mode préféré de réalisation, la composition selon l’invention est caractérisée en ce qu’elle est conditionnée en deux fractions, d’une part, une fraction solide en forme de poudre sèche, qui contient, en premier lieu, au moins une partie des microorganismes à l’état stabilisé de conservation et, en second lieu, le support particulaire stérile chargé de l’agent nutritif, et d’autre part, une fraction liquide, l’utilisation de la composition impliquant la mise en œuvre des deux fractions pour l’obtention de l’effet biologique.

Dans un mode de réalisation de la composition définie au précédent paragraphe, la fraction solide de la composition comporte, en outre, l’agent filmogène à l’état sec, la fraction liquide comportant alors le liquide approprié pour la dissolution de l’agent filmogène. Dans cette même variante de réalisation, la fraction liquide de la composition peut contenir une partie des microorganismes de ladite composition.

Dans les compositions qui viennent d’être définies, la charge de l’agent nutritif sur le support peut être réalisée à forte concentration ; dans ce cas, dans l’agent nutritif chargé sur le support particulaire, chacun des nutriments est présent en une quantité supérieure à la quantité nécessaire pour la croissance de microorganisme, dont on veut assurer le développement.

Dans un mode de réalisation, l’agent nutritif chargé sur le support particulaire représente de 0,1 à 50% en poids du support particulaire chargé ; l’agent nutritif peut comprendre, en outre, des oligoéléments connus de l’homme de métier.

Selon un mode de réalisation de la composition selon l’invention, dans l’agent nutritif chargé sur le support particulaire, chacun des nutriments est présent en une quantité suffisante pour la croissance de microorganisme, dont on veut assurer le développement ; mais on peut aussi prévoir que, dans ledit agent nutritif, un des nutriments soit présent en une quantité supérieure à la quantité nécessaire pour la croissance de microorganisme, dont on veut assurer le développement.

Dans la composition selon l’invention, le support particulaire chargé d’agent nutritif peut être choisi parmi les supports biodégradables ou non, synthétiques ou naturels, d’origine végétale ou minérale. On peut notamment prévoir que le support particulaire : - lorsqu’il est naturel et biodégradable, soit choisi dans le groupe formé par les particules lignocellulosiques d’origine végétale, en particulier les rafles de maïs, les pépins de raisin, le liège, les tourteaux d’extraction de produits végétaux, les copeaux et brisures de bois ; - lorsqu’il est synthétique, soit choisi dans le groupe formé par les particules obtenues à partir des polymères biodégradables de la famille des polyesters, de l’acide polylactique, des polymères acryliques ou leurs dérivés, ou à partir des polymères non biodégradables comme des polyéthylènes, des polyamides, des polyuréthanes, des polyméthylsilsesquioxanes, du chlorure de polyvinyle, ayant un caractère absorbant ; - et lorsqu’il est minéral, soit choisi dans le groupe formé par des argiles de préférence lamellaires, les zéolithes, les silices poreuses, les silicates tels que les kaolinites, le talc, les sépiolites, la pouzzolane.

Dans un mode de réalisation de la composition selon l’invention, l’agent filmogène est choisi dans le groupe formé par le polyéthylène-glycol, les dérivés de la cellulose tels que la carboxyméthylcellulose de sodium, l’hydroxyéthyl-cellulose, l’hydroxypropyl-cellulose, des polysaccharides tels que la gomme de xanthane, l’agar-agar, la gomme d’acacia, la gomme de guar, les polyosides tels que le galactomannane, le xanthagalactomannane, la polyvinylpyrrolidone, les polyvinylacétates, les poly (alcool vinylique), les polyacrylates, les alginates, le sucre alimentaire, l’amidon, les protéines telles que la gélatine, les caséinates, ou le collagène, et leurs mélanges.

Lorsque la composition selon l’invention est destinée au traitement des organes aériens d’une plante, on peut prévoir que sa fraction solide constitue de 1 à 30 % en poids par rapport au poids total de la composition, ladite fraction contenant de 1 à 99 % en poids de support particulaire stérile chargé d’agent nutritif, la fraction liquide contenant de 0,01 % à 20 % en poids d’agent filmogène.

Lorsque la composition selon l’invention est destinée au traitement de graines, on peut prévoir que sa fraction solide constitue de 1 à 60 % en poids par rapport au poids total de la composition, et contient de 1 à 99 % en poids de support particulaire stérile chargé renfermant de 0,1 à 50 % en poids d’agent nutritif.

Dans un mode de réalisation, la composition selon l’invention, comporte une fraction solide, qui contient un support particulaire hydrorétenteur régulateur d’humidité ; ce support peut être de même nature que celui qui est chargé en agent nutritif.

Dans un mode de réalisation, la composition selon l’invention contient, dans sa fraction liquide, des microorganismes en suspension à l’état stabilisé de conservation, ladite fraction liquide étant ajoutée à la fraction solide juste avant la distribution de la composition sur la cible.

La présente invention concerne également l’utilisation d’une composition telle que ci-dessus définie.

Selon une première utilisation, après avoir mélangé les deux fractions de la composition, on pulvérise le mélange liquide sur des graines et/ou sur les parties aériennes d’une plante.

Selon une autre variante d’utilisation, destinée au traitement de graines, on applique la fraction liquide pour former une pellicule pour les graines à traiter et on applique la fraction solide sur les graines ainsi pelliculées, un court séchage étant, si nécessaire, effectué sur les graines avant leur conditionnement.

Selon un autre mode d’utilisation, pour le traitement de graines, on applique la fraction liquide pour former une pellicule sur les graines, on applique ensuite la fraction solide sur les graines pelliculées et on laisse l’excès d’humidité s’absorber sans séchage sur un support particulaire hydrorétenteur avant le conditionnement.

Dans le cas où l’on veut traiter des graines, on peut aussi prévoir qu’on applique successivement à la surface des graines une fraction liquide puis une fraction solide de la composition pour obtenir des graines pelliculées et qu’ensuite, on soumet les graines ainsi prétraitées à une nouvelle application de la fraction liquide de la composition pour plaquer sur les graines les particules de support particulaire, qui y sont déjà mises en place par pelliculage, les graines étant alors, si nécessaire, soumises à un séchage avant leur conditionnement.

Dans ce type de traitement, on peut mettre en place, après les microorganismes, plusieurs pelliculages successifs avec des fractions de composition ayant des formulations différentes de sorte que la pellicule recouvrant une graine peut atteindre une épaisseur conséquente, ce qui permet d’obtenir ainsi des semences enrobées, l’étape de séchage pouvant, en outre, n’avoir plus d’intérêt.

Dans les compositions selon l’invention, l’homme de métier peut ajouter des agents de formulation connus ; dans la fraction liquide on peut, par exemple, ajouter des agents thixotropes, des colorants, des épaississants, ou des dispersants.

Les microorganismes de la composition selon l’invention sont commercialisés dans des conditionnements sous forme de suspension dans un liquide ou sous forme de poudre lyophilisée. Dans les deux cas, les microorganismes sont à l’état stabilisé de conservation, c’est-à-dire qu’ils sont viables mais ne se multiplient pas dans leur conditionnement de stockage. Comme il ressort des caractéristiques ci-dessus définies, chacune des deux fractions, solide et liquide, de la composition selon l’invention est susceptible de contenir des microorganismes ; lorsqu’ils sont sous forme de suspension liquide, on les ajoute, de préférence, au dernier moment avant l’application de la composition sur la cible. D’une manière générale, la composition selon l’invention permet de traiter, de manière efficace à longue durée, une cible végétale par l’utilisation de microorganismes, qui induisent un effet positif protecteur et/ou effecteur. Ladite cible subit les aléas des conditions climatiques, notamment des lessivages successifs dus à la pluie, ou plus généralement à l’humidité ambiante, conditions qui ont pour effet d’évacuer de la cible à la fois les microorganismes et l’agent nutritif, ce qui a pour conséquence de réduire ou d’annuler les effets bénéfiques du traitement après chaque épisode pluvieux. Au contraire, la composition selon l’invention permet de plaquer les microorganismes ainsi que le support particulaire sur la cible ; le lessivage du support d’agent nutritif permet d’apporter les nutriments nécessaires au redémarrage et à la croissance des microorganismes d’intérêt.

Il est d’ailleurs connu que certains microorganismes sont inhibés par une trop forte concentration d’agent nutritif.

On va donner ci-après plusieurs exemples de mise en œuvre de l’invention. Dans les exemples, le terme « agent nutritif » est utilisé généralement pour désigner un mélange de plusieurs nutriments.

Exemple 1 : Essais comparatifs de lessivage d’une fraction solide de composition selon l’invention pour la croissance de mycorhizes du genre Glomus intraradices Cet exemple sert à vérifier que l’agent nutritif incorporé dans le réservoir de support particulaire est libéré progressivement par les effets du lessivage au bénéfice des mycorhizes aux alentours. 1. Elaboration d’une solution aqueuse d’agent nutritif adapté pour les mycorhizes du genre Glomus intraradices

Dans un erlenmeyer équipé d’un agitateur à barreau magnétique, on verse 67,17 g d’eau ; l’erlenmeyer est placé dans un bain-marie chauffé à 40°C et l’agitation s’effectue à 250 tours/mn. On introduit dans Perlenmeyer 18,15 g d’extrait de malt (vendu sous la dénomination commerciale « malt foncé 57 EBC » par la société « Brewferm ») et on maintient l’agitation pendant 5 minutes. On introduit ensuite dans l’erlenmeyer 7,34 g de dextrose (dextrose monohydrate pur vendu par la société « Louis François »), l’agitation étant maintenue pendant 5 minutes ; on ajoute enfin dans l’erlenmeyer 7,34 g d’extrait de levures (granulés vendus par la société « Merck ») et l’on maintient l’agitation pendant 5 minutes ; on laisse ensuite refroidir la solution d’agent nutritif à la température ambiante. Pour la réalisation de tous les exemples donnés dans cette description, une même matière première a toujours été choisie comme définie par la même référence commerciale, sauf indication contraire explicite. 2. Elaboration d’une fraction solide destinée à une composition selon l’invention :

Dans un réacteur en verre d’un litre, préchauffé à 65°C, on introduit 70 g de particules de rafles de maïs de 250 μτη vendues par la société « Eurocob » sous la dénomination « Eu-Grits* 100 » ; le réacteur est équipé d’un agitateur à barreau aimanté que l’on fait tourner à 250 tours/mn ; après 10 minutes d’agitation, on introduit, dans le réacteur, la solution préparée au point 1 ci-dessus, qui constitue l’agent nutritif ; cette introduction est effectuée en 20 minutes. On ajoute ensuite, goutte à goutte, 5 g d’huile de coprah préalablement liquéfiée et, après 10 minutes d’agitation, on arrête le préchauffage du réacteur et on le laisse refroidir à température ambiante, le coprah servant à retarder le relargage de l’agent nutritif dans l’eau.

La poudre obtenue est homogène, bien sèche, sans grumeaux et de bonne coulabilité. On la stérilise à 120°C pendant 20 minutes en autoclave et, après refroidissement, on la place dans un container que l’on ferme hermétiquement.

Le produit ainsi obtenu constitue le support particulaire chargé d’agent nutritif de la fraction solide de la composition selon l’invention, ledit agent nutritif étant destiné à la croissance des mycorhizes. 3. Simulation de lessivage par extraction forcée dans Veau de Vagent nutritif incorporé dans la fraction solide :

On prélève 5 g de la poudre obtenue au point 2 ci-dessus ; on introduit la poudre dans une fiole jaugée de 100 ml et on complète avec de l’eau purifiée. On soumet le contenu de la fiole à une agitation à 250 tours/mn (agitateur magnétique) pendant 4 heures à température ambiante; on centrifuge à 4000 tours/mn la suspension n° 1 obtenue ; on récupère le surnageant et on y dose la quantité d’agent nutritif par réfractométrie laser.

On récupère le culot constitué par la poudre de rafles et on le soumet une nouvelle fois à une extraction dans l’eau dans les mêmes conditions ; on centrifuge la suspension n° 2 obtenue ; on récupère le surnageant et on dose la quantité d’agent nutritif comme pour la première extraction. Pour la première extraction, le taux d’agent nutritif restant dans les particules de rafles de maïs est de 50%, alors que pour la deuxième extraction, il est de 28%. 4. Test de croissance des mycorhizes en utilisant les surnageants obtenus au point 3 du présent exemple :

On introduit 1,2 g d’Agar-agar dans une bouteille stérilisable en autoclave ; on y ajoute 0,2 g d’un carbonate de calcium de fine granulométrie commercialisé sous la dénomination « Durcal 40* » par la société « Comyatel » ; on y ajoute 98,6 g d’eau stérilisée ; on stérilise la bouteille en l’autoclavant à 120°C pendant 20 minutes. On coule la gélose obtenue, sous flamme, dans des boîtes de Pétri.

Dans un erlenmeyer, on réalise une suspension de mycorhizes à l’état stabilisé de conservation (800 spores/L) en poudre lyophilisée en suspension dans chacun des surnageants n°l et 2 obtenus au point 3 ci-dessus ; à titre de contrôle, on réalise aussi une suspension de mycorhizes à 800 spores/L dans de l’eau stérile. On inocule les boîtes de Pétri avec 2 ml de chacune des trois suspensions ; on les place dans un incubateur à 30°C et on laisse croître les microorganismes pendant 72 heures avant lecture.

Sur la figure 1, on a présenté les boîtes de Pétri obtenues comme indiqué ci-dessus. La photographie (a) montre le contrôle sans agent nutritif ; les photographies (b) et (c) montrent respectivement les croissances obtenues avec les surnageants n° 1 et 2. 5. Utilisation de la composition selon l'invention :

Si Ton réalise une composition selon l’invention comportant une fraction solide correspondant à celle obtenue comme indiqué au point 2 du présent exemple, on constate, en apportant ladite composition sur des semences, une croissance des mycorhizes des plantes de la culture malgré les effets du lessivage induit par la pluie ou l’humidité ambiante. En effet, comme le montrent les photographies de la figure 1, le support particulaire permet de protéger partiellement l’agent nutritif des effets du lessivage et la quantité d’agent nutritif libéré à chacun de ces lessivages est suffisante pour permettre un redémarrage de croissance des mycorhizes. Ceci établit l’efficacité surprenante d’une telle composition lorsqu’elle est mise en place, par exemple, pour des graines de soja enrobées à raison de 75 Kg/hectare ; les mycorhizes du genre Glomus intraradices apportent un effet bénéfique à la croissance des plants de soja.

Exemple 2 : Influence du support particulaire chargé d’agent nutritif sur la croissance des mycorhizes du genre Glomus intraradices 1. Préparation des suspensions liquides nécessaires pour le test :

Dans un erlenmeyer, on introduit 5 g de la poudre de rafles de maïs chargé d’agent nutritif, obtenu au point 2 de l’exemple 1. Dans cet erlenmeyer, on introduit un inoculum de mycorhizes stabilisé sous forme de poudre lyophilisée pour obtenir une suspension à hauteur de 800 spores/L et on complète avec 94 g d’eau stérilisée de manière à obtenir 100 g de suspension.

Dans un autre erlenmeyer, on met en place 0,23 g d’extrait de malt, 0,09 g de dextrose et 0,09 g d’extrait de levure (granulés fournis par la société « Merck ») ; on ajoute 99,59 g d’eau stérilisée et on introduit le même inoculum de mycorhizes que dans le premier erlenmeyer, de manière à obtenir également une suspension à 800 spores/L.

On a ainsi obtenu deux suspensions contenant chacune la même quantité de microorganismes et d’agent nutritif. Dans la première suspension (n° 1), l’agent nutritif est incorporé dans le support particulaire, alors que dans la deuxième suspension (n° 2), il est en solution aqueuse dans le milieu. 2. Essais de croissance des mycorhizes dans les suspensions obtenues au point 1 du présent exemple :

On prépare des boîtes de Pétri contenant de la gélose comme il a été indiqué au premier alinéa du point 4 de l’exemple 1. On inocule ces boîtes avec 2 ml des suspensions n° 1 et n° 2 obtenues au point 1 du présent exemple ; comme dans l’exemple 1, à titre de contrôle, on inocule certaines boites de Pétri avec une suspension de mycorhizes à 800 spores/L dans de l’eau stérile. On place les boîtes inoculées dans un incubateur chauffé à 30°C et on laisse croître les mycorhizes pendant 72 heures. 3. Test de lessivage des boîtes de Pétri :

Les lessivages des cultures dans les boîtes de Pétri sont effectués, sous flamme, à l’aide d’une micropipette, en versant 10 ml d’eau stérile sur la gélose avant de replacer les boîtes dans l’incubateur pour un lessivage ultérieur.

Les résultats obtenus sont présentés sur la figure 2. Sur cette figure, les deux boîtes de Pétri de la ligne a n’ont pas été lessivées à l’eau stérile, alors que les boîtes de Pétri des lignes b et ç, ont été lessivées, pour la première, une fois et, pour la deuxième, deux fois. Les boîtes de Pétri de la ligne b sont celles qui ont été incubées avec la suspension n° 1 définie au point 2 du présent exemple et celle de la ligne c sont celles qui ont été incubées avec la suspension n° 2.

En se référant à la figure 2, on voit que les lavages successifs ont pour conséquence de lessiver les mycorhizes et l’agent nutritif quand celui-ci n’est pas incorporé dans les rafles de maïs et que les particules de rafles ont tendance à fixer les mycorhizes et, par conséquent, à limiter leur lessivage. On voit également que, grâce aux rafles chargées d’agent nutritif, la croissance des microorganismes continue même après les lessivages.

Si l’on réalise une composition selon l’invention comportant une fraction solide correspondant à celle obtenue comme indiqué au point 2 du présent exemple, on constate, en apportant la composition dans le sol cultivé, une croissance des mycorhizes des plantes de la culture malgré les effets du lessivage induit par la pluie ou l’humidité ambiante. Le présent exemple montre que le support particulaire a tendance à fixer les mycorhizes et que la croissance des microorganismes continue malgré les lessivages.

Exemple 3 : Test de croissance de mycorhizes du genre Glomus intraradices sur feuilles de lierre 1. Préparation des feuilles de lierre :

On prélève des feuilles de lierre directement sur plants ; on les nettoie avec de l’eau savonneuse imbibée sur du papier d’essuyage ; on plonge les feuilles nettoyées dans un bain d’eau de javel pendant 5 mn ; on rince les feuilles à l’eau tiède et on les laisse sécher pendant 1 heure sous flux d’air stérile.

Dans une bouteille en verre pouvant être stérilisée par autoclave, on introduit 1,2 g d’Agar-agar. On stérilise le milieu par un passage à l’autoclave à 120°C pendant 20 mn et on coule les géloses obtenues, sous flamme, au sein des boîtes de Pétri. Après refroidissement et prise de la gélose, on plaque une feuille de lierre dans chacune des boîtes de Pétri. 2. Préparation des compositions à tester :

Dans un erlenmeyer, on introduit 5 g de la poudre de particules de rafles de maïs chargée d’agent nutritif obtenue au point 2 de l’exemple 1. On introduit dans l’erlenmeyer un inoculum de mycorhizes stabilisé, en poudre lyophilisée, de façon à obtenir une suspension à 800 spores/L. On introduit dans l’erlenmeyer 0,15 g d’un agent filmogène (galactomanane vendu sous le nom commercial « Deuteron VT » et commercialisé par la société « Dow ») ; on complète avec 94,85 g d’eau stérilisée de manière à obtenir 100 g de suspension n° 4.

Dans un deuxième erlenmeyer, on ajoute 0,23 g d’extrait de malt, 0,09 g de dextrose et 0,09 g d’extrait de levure dans 99,59 g d’eau stérilisée. On introduit le même inoculum de mycorhizes de manière à obtenir une suspension n° 5 à 800 spores/L.

Dans un troisième erlenmeyer, on réitère les opérations faites dans le deuxième erlenmeyer mais on ajoute 0,15 g de l’agent filmogène « Deuteron VT » pour obtenir une suspension n° 6, l’eau stérilisée étant en quantité suffisante pour 100 g.

On obtient ainsi trois suspensions contenant chacune la même quantité de spores et d’agent nutritif. La suspension n° 4 contient l’agent nutritif incorporé dans les rafles et un agent filmogène ; la suspension n° 5 contient l’agent nutritif en solution dans le milieu ; et la suspension n° 6 contient les mêmes éléments que la suspension n° 5 ainsi que l’agent filmogène. 3. Inoculation des mycorhizes sur feuille :

On inocule 2 ml de chaque suspension en surface d’une feuille de lierre mise en place dans sa boîte de Pétri. Les boîtes de Pétri sont ensuite placées dans un incubateur chauffé à 30°C pendant 72 heures. Les feuilles sur milieu gélose sont ensuite rincées à la micropipette avec 10 ml d’eau stérile et les milieux sont replacés dans l’incubateur pour 72 heures supplémentaires à 30°C. Les résultats sont fournis sur la figure 3. Sur cette figure, la ligne (a) représente les boîtes de Pétri inoculées par les suspensions 4, 5 et 6 ayant subies 72 heures de croissance à 30°C ; et la ligne (b) représente les boîtes de la ligne (a) après qu’elles aient subi un lavage à l’eau stérile et une deuxième incubation à 30°C. L’examen de la figure 3 permet de conclure que les mycorhizes et leur agent nutritif ne sont retenus sur la feuille qu’en présence de l’agent filmogène et des particules de rafles chargées d’agent nutritif. En outre, après lessivage, il n’y a plus ou très peu de mycorhizes sur la feuille sauf dans le cas de la suspension n° 4 contenant l’agent filmogène et des particules de rafles chargés d’agent nutritif. Enfin les colonies fixées sur la feuille et qui ont résisté au lessivage continuent de croître.

On constate donc qu’une composition selon l’invention, qui comporte, dans sa fraction solide, un support particulaire chargé d’agent nutritif et, dans sa fraction liquide, un agent filmogène hydrosoluble, réduit les inconvénients du lessivage dû aux eaux de pluie ou à l’humidité ambiante, car l’agent nutritif, qui reste après des lessivages successifs, permet d’assurer une croissance des mycorhizes. Les exemples fournis dans la présente demande, établissent que la composition présente une efficacité surprenante lorsqu’elle est mise en place dans une culture.

Exemple 4 : Formulation d’une bouillie à base de Streptommyces pour le traitement antifongique de feuilles 1. Elaboration d’une solution aqueuse d’agent nutritif:

On procède comme au point 1 de l’exemple 1. 2. Préparation d’une fraction solide chargée d’agents nutritifs pour la croissance de Streptomyces Dans un réacteur en verre de 1 litre préchauffé à 65 °C au bain d’huile, on introduit 70 g de particules de rafles de maïs identiques à celles utilisées dans l’exemple 1. On met en action un agitateur à barreau magnétique à 250 tours/mn pendant 10 minutes et on introduit, dans le réacteur, 25 g de la solution d’agent nutritif préparée au point 1 du présent exemple ; on ajoute ensuite goutte à goutte 5 g d’huile de Coprah préalablement liquéfiée et, après 10 minutes d’agitation, on sort le réacteur de son bain d’huile et on le laisse refroidir à la température ambiante.

La poudre chargée d’agent nutritif ainsi obtenue est homogène, bien sèche, sans grumeaux et de bonne coulabilité. Pour sa conservation, on stérilise la poudre chargée à 120°C pendant 20 minutes par autoclavage et on la place, après refroidissement, dans un container que l’on ferme hermétiquement. 3. Formulation de la fraction solide d’une composition selon l’invention :

Dans un réacteur en verre de 1 litre, on introduit 100 g d’inoculum de bactéries du genre type Streptomyces (commercialisé par l’Institut Pasteur), à l’état stabilisé, en poudre lyophilisée. On ajoute ensuite 500 g de poudre chargée d’agent nutritif telle qu’obtenue au point 2 du présent exemple. On ajoute ensuite 50 g d’un agent filmogène (hydroxyl méthyl cellulose) commercialisé sous la dénomination « Methocel 311 » par la société « Dow ». On met en marche l’agitation magnétique du réacteur pendant 20 minutes pour obtenir un mélange de poudre homogène.

Pour la mise en œuvre de la composition, on disperse dans l’eau la poudre ainsi préparée et on l’applique ensuite par pulvérisation sur les parties aériennes des plants à traiter pour un traitement antifongique.

Exemple 5 : Composition à base de Rhizobium japonicum pour l’enrobage de semences de soja 1. Elaboration d’une solution aqueuse d’agent nutritif:

On introduit 80 g d’eau dans un erlenmeyer placé dans un bain-marie chauffé à 40°C ; on introduit ensuite 18,15 g de D-mannitol (fourni par la société « VWR ») sous agitation (agitateur à barreau magnétique à 250 tours/mn pendant 5 minutes). On introduit enfin, dans l’erlenmeyer, 1,85 g de dextrose sous la même agitation pendant 5 minutes ; après quoi, on arrête l’agitation et on laisse refroidir à température ambiante. 2. Elaboration d’une fraction solide de composition selon l’invention chargée d’un agent nutritif pour la croissance des Rhizobium :

Dans un réacteur en verre de 1 litre préchauffé à 65°C dans un bain d’huile, on introduit 70 g de particules de liège de 250 μιη. On met en fonctionnement l’agitateur à barreau magnétique du réacteur pendant 10 minutes à 250 tours/mn. On introduit ensuite 25 g de la solution d’agent nutritif préparée au point 1 du présent exemple, cette introduction s’effectuant en 20 minutes. On ajoute goutte à goutte 5 g d’huile de Coprah préalablement liquéfiée et, après 10 minutes d’agitation, on sort le réacteur de son bain d’huile et on la laisse refroidir à la température ambiante.

La poudre de liège chargée d’agent nutritif est homogène, bien sèche, sans grumeaux et de bonne coulabilité. Pour sa conservation, on la stérilise à 120°C pendant 20 minutes dans un autoclave et on la place, après refroidissement, dans un container, que l’on ferme hermétiquement 3. Formulation d'une composition selon l’invention destinée à l’enrobage des graines de soja : Dans une pralinatrice (machine BASSINA BA, 15 ribs fournie par la société « Rollermac s.r.l. »), on introduit 100 g de semence de soja PR39F58. On met en marche l’agitation des graines ainsi que la soufflerie de l’air sec. On projette alors une suspension de gélatine de porc comme agent filmogène à hauteur de 6 % massique et d’inoculum liquide de Rhizobium stabilisé à hauteur de 1 g/L dans de l’eau stérile pour constituer la fraction liquide destinée à humidifier puis à pelliculer les grandes. Cette projection de fraction liquide est effectuée sur les graines à concurrence de 7 g. On pulvérise ensuite 7 g de la poudre de liège chargée d’agent nutritif obtenue au point 2 du présent exemple, jusqu’à ce que les graines soient recouvertes et sèche. On réitère les deux opérations précédentes quatre fois jusqu’à ce que l’épaisseur de l’enrobage des graines atteigne 1 mm. Les graines sont ensuite stockées à l’air libre pendant 12 heures avant d’être conditionnées en sachet.

Claims (19)

1. REVENDICATIONS

   1. Composition apte à induire un effet biologique sur au moins une partie d’une cible végétale à traiter, qui est susceptible de se développer après traitement, ladite composition comportant un support répartissable sur la cible à traiter, ledit support renfermant des microoiganismes et un agent nutritif hydrosoluble consommable par lesdits microoiganismes pour permettre leur multiplication, caractérisée en ce que le support comporte, d’une part, un liquide aqueux, dans lequel est soluble l’agent nutritif du support, ledit support renfermant, d’autre part, un agent filmogène distribué sur la cible de manière à assurer un maintien des microoiganismes par placage sur ladite cible, les microoiganismes restant au moins partiellement à l’état stabilisé de conservation tant qu’ils n’ont pas été répartis sur la cible par le support et se multipliant ensuite sur ladite cible pour induire la réponse biologique attendue.
2. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu’elle est conditionnée en deux fractions, d’une part, une fraction solide en forme de poudre sèche, qui contient, en premier lieu, au moins une partie des microoiganismes à l’état stabilisé de conservation et, en second lieu, le support particulaire stérile de l’agent nutritif, et d’autre part, une fraction liquide, l’utilisation de la composition impliquant la mise en œuvre des deux fractions pour l’obtention de l’effet biologique.
3. 3. Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce que sa fraction solide comporte, en outre, l’agent filmogène, la fraction liquide comportant alors le liquide approprié pour la dissolution de l’agent filmogène.
4. 4. Composition selon l’une des revendications 2 ou 3, caractérisée en ce que la fraction liquide de la composition contient une partie des microoiganismes de la composition.
5. 5. Composition selon l’une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que la charge de l’agent nutritif sur le support est réalisée à une forte concentration.
6. 6. Composition selon l’une des revendications 2 et 5, caractérisée en ce que, dans l’agent nutritif chargé sur le support particulaire, chacun des nutriments est présent en une quantité supérieure à la quantité nécessaire pour la croissance de microoiganisme, dont on veut assurer le développement.
7. 7. Composition selon l’une des revendications 2, 3, 5 et 6, caractérisée en ce que l’agent nutritif chaigé sur le support particulaire représente de 0,1 à 50% en poids du support particulaire chaigé.
8. 8. Composition selon l’une des revendications 2, 3, 5 et 6, caractérisée en ce que le support particulaire est choisi dans le groupe formé par les particules lignocellulosiques d’origine végétale, en particulier les rafles de maïs, les pépins de raisin, le liège, les tourteaux d’extraction de produits végétaux, les copeaux et brisures de bois.
9. 9. Composition selon l’une des revendications 2, 3, 5 et 6, caractérisée en ce que le support particulaire est choisi dans le groupe formé par les particules obtenues à partir des polymères biodégradables de la famille des polyesters, de l’acide polylactique, des polymères acryliques ou leurs dérivés, ou à partir des polymères non biodégradables comme des polyéthylènes, des polyamides, des polyuréthanes, des polyméthyl-silsesquioxanes, du chlorure de polyvinyle, ayant un caractère absorbant.
10. 10. Composition selon l’une des revendications 2, 3, 5 et 6, caractérisée en ce que le support particulaire est choisi dans le groupe formé par des argiles de préférence lamellaires, les zéoüthes, les silices poreuses, les silicates tels que les kaolinites, le talc, les sépiolites, la pouzzolane.
11. 11. Composition selon l’une des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que l’agent filmogène est choisi dans le groupe formé par le polyéthylène-glycol, les dérivés de la cellulose choisi parmi la carboxyméthylcellulose de sodium, l’hydroxyethyl-cellulose, l’hydroxypropyl-cellulose, des polysaccharides choisis parmi la gomme de xanthane, l’agar-agar, la gomme d’acacia, la gomme de guar, les polyosides choisis parmi le galactomannane, le xanthagalactomannane, la polyvinylpyrrolidone, les polyvinylacétates, les poly (alcool vinylique), les polyacrylates, les alginates, le sucre alimentaire, l’amidon, les protéines choisies parmi la gélatine, les caséinates, ou le collagène, et leurs mélanges.
12. 12. Composition selon l’une des revendications 2 à 4, destinée au traitement des organes aériens d’une plante, caractérisée en ce que sa fraction solide constitue de 1 à 30 % en poids par rapport au poids total de la composition, ladite fraction contenant de 1 à 99 % en poids de support particulaire stérile chargé d’agent nutritif, la fraction liquide contenant de 0,01 % à 20 % en poids d’agent filmogène.
13. 13. Composition selon l’une des revendications 2 à 4, destinée au traitement de graines, caractérisée en ce que sa fraction solide constitue de 1 à 60 % en poids par rapport au poids total de la composition, et contient de 1 à 99 % en poids de support particulaire stérile chargé renfermant de 0,1 à 50 % en poids d’agent nutritif.
14. 14. Composition selon l’une des revendications 2 à 4, caractérisée en ce que sa fraction solide contient un support particulaire hydrorétenteur régulateur d’humidité.
15. 15. Utilisation d’une composition selon l’une des revendications 2 à 4 et 12 à 14, caractérisée en ce que sa fraction liquide contient des microorganismes en suspension à l’état stabilisé et est ajoutée à la fraction solide juste avant la distribution de la composition sur la cible.
16. 16. Utilisation d’une composition selon l’une des revendications 2 à 4 et 12 à 15, caractérisée en ce qu’après avoir mélangé les deux fractions de la composition, on pulvérise le mélange liquide sur des graines et/ou sur les parties aériennes d’une plante.
17. 17. Utilisation d’une composition selon les revendications 2 à 4 et 12 à 15 prises simultanément, caractérisée en ce qu’on applique la fraction liquide pour former une pellicule sur les graines à traiter, que l’on applique la fraction solide sur les graines ainsi pelliculées, et que, si nécessaire, on effectue un court séchage des graines avant leur conditionnement.
18. 18. Utilisation d’une composition selon la revendication 14, caractérisée en ce qu’on applique la fraction liquide pour former une pellicule sur les graines, qu’on applique ensuite la fraction solide sur les graines pelliculées et qu’on laisse l’excès d’humidité s’absorber sans séchage sur le support particulaire hydrorétenteur avant le conditionnement.
19. 19. Utilisation d’une composition selon les revendications 2 et 13 prises simultanément, caractérisée en ce qu’on applique successivement à la surface des graines une fraction liquide puis une fraction solide de la composition pour obtenir des graines pelliculées et qu’ensuite, on soumet les graines ainsi prétraitées à une nouvelle application de la fraction liquide de la composition pour plaquer sur les graines les particules de support particulaire, qui y sont déjà mises en place par pelliculage, les graines étant alors, si nécessaire, soumises à un séchage avant leur conditionnement.