FR3008618A1 - USE OF COMPOUNDS TO RESTORE THE RESPONSE IN THE LIGHT OF CELLS OF THE RETINA - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne des produits constitués d'inhibiteurs de phosphodiestérases et/ou d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase pour une utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs.The present invention provides products consisting of phosphodiesterase inhibitors and / or adenylate cyclase and / or guanylate cyclase enhancers for use in the rehabilitation of vision therapy in a blind or legally blind person. blindness being related to the degeneration and / or dysfunction of photoreceptors.

Description

UTILISATION DE COMPOSES POUR RESTAURER LA REPONSE A LA LUMIERE DES CELLULES DE LA RETINE La présente invention concerne l'utilisation de composés pour restaurer la réponse à la lumière des cellules de la rétine. Bien que le nombre d'aveugles sur la planète ne soit pas connu avec précision, une étude de l'organisation Mondiale de la Santé a évalué la population mondiale d'aveugles à 38 millions de personnes, en 2002. De plus, 110 millions souffrent de déficience visuelle et courent un grand risque de perdre la vue. Les causes principales de cécité et de basse vision sont la cataracte, le trachome, le glaucome, l'onchocercose et la xérophtalmie. Cependant, d'autres pathologies comme la rétinopathie diabétique et la dégénérescence maculaire liée à l'âge peuvent également être à l'origine de la cécité. La définition actuelle ne fait pas la différence entre les personnes qui n'ont pas de perception lumineuse (cécité "totale") et celles qui ont une perception lumineuse mais qui ont une vision inférieure à 1/20 du meilleur oeil. La rétine constitue l'organe sensible de la vision. La rétine est une structure complexe organisée en deux parties : la neurorétine et l'épithélium pigmentaire. La neurorétine est essentiellement « photosensible » c'est-à-dire qu'elle est capable de convertir les photons lumineux en influx visuels transmis jusqu'aux différentes aires visuelles pour aboutir à la vision. De manière schématique et en dehors de la fovéola, la neurorétine est stratifiée en trois étages. Les photorécepteurs (cônes et les bâtonnets) forment le premier étage rétinien ou rétine externe. Ils font synapse à la couche plexiforme externe avec des interneurones, les cellules horizontales et les cellules bipolaires qui constituent avec les cellules amacrines le deuxième étage rétinien jusqu'à la couche plexiforme interne. Cette dernière est essentiellement divisée en deux sous couches, la sous couche-a, superficielle et la sous couche-b, plus profonde. Le troisième étage neuronal correspond à la couche des cellules ganglionnaires constituées de cellules ganglionnaires et de cellules amacrines déplacées. Ces dernières font synapses entre elles et avec les cellules bipolaires et amacrines dans la couche plexiforme interne.The present invention relates to the use of compounds for restoring the light response of retinal cells. BACKGROUND OF THE INVENTION The present invention relates to the use of compounds for restoring the light response of retinal cells. Although the number of blind people on the planet is not known precisely, a study by the World Health Organization estimated the global population of blind people at 38 million people in 2002. In addition, 110 million suffer visually impaired and run a high risk of losing their sight. The main causes of blindness and low vision are cataracts, trachoma, glaucoma, onchocerciasis and xerophthalmia. However, other conditions such as diabetic retinopathy and age-related macular degeneration may also be the cause of blindness. The current definition does not distinguish between people who have no light perception ("total" blindness) and those who have a bright perception but have a vision less than 1/20 of the best eye. The retina is the sensitive organ of vision. The retina is a complex structure organized into two parts: neuroretin and pigment epithelium. Neuroretin is essentially "photosensitive" that is to say it is able to convert light photons into visual impulses transmitted to the different visual areas to achieve vision. Schematically, and apart from fovéola, neuroretin is stratified in three stages. Photoreceptors (cones and rods) form the first retinal floor or outer retina. They synapse at the outer plexiform layer with interneurons, horizontal cells and bipolar cells that together with amacrine cells form the second retinal stage up to the inner plexiform layer. The latter is essentially divided into two sub-layers, the sub-layer-a, superficial and the sub-layer-b, deeper. The third neuronal stage corresponds to the layer of ganglion cells consisting of ganglion cells and displaced amacrine cells. The latter are synapses with each other and with the bipolar and amacrine cells in the inner plexiform layer.

Les cellules ganglionnaires de la rétine qui reçoivent des entrées synaptiques dans la sous couche-a de la couche plexiforme interne, avec des cellules bipolaires de type OFF sont dites cellules ganglionnaires OFF ; de même, les cellules ganglionnaires qui reçoivent leurs entrées synaptiques dans la sous couche-b avec des cellules bipolaires sont dites cellules ganglionnaires ON. En l'absence de stimulation lumineuse, les cellules ganglionnaires émettent spontanément des potentiels d'action dont les fréquences temporelles sont fonction de leur type cellulaire ON ou OFF. Les cellules ganglionnaires rétiniennes dites ON produisent une augmentation de leur fréquence temporelle de décharge des potentiels d'action par rapport à leur rythme de base (ou réponse « ON »), lorsque la rétine est illuminée dans la région centrale du champ récepteur de ces cellules. Inversement, les cellules ganglionnaires OFF répondent par une diminution de la fréquence temporelle de leurs potentiels d'action par rapport à leur rythme de base (ou réponse « OFF »), lorsque la rétine est illuminée dans la partie centrale de leur champ récepteur. Des cellules sont dites ON-OFF lorsqu'elles produisent des réponses transitoires aux changements de luminosité, ces dernières ont des prolongements dendritiques dans les deux sous couches de la plexiforme interne. Les axones des cellules ganglionnaires se myélinisent à partir de la lame criblée de la papille, pour former les fibres des nerfs optiques qui transfèrent l'information visuelle au cerveau. Les dystrophies rétiniennes constituent une cause non négligeable de cécité. Ce sont des affections dégénératives atteignant de façon diffuse ou localisée, et de manière primaire ou secondaire, les cellules photoréceptrices de la rétine que sont les cônes et les bâtonnets. Ces cellules appartiennent à la couche la plus externe de la rétine et convertissent l'énergie électromagnétique du photon lumineux en un influx nerveux qui est transmis au cerveau par l'intermédiaire du nerf optique. Les dystrophies rétiniennes sont constituées par les rétinites pigmentaires, le syndrome d'Usher, la maladie de Stargardt (10 %), l'amaurose congénitale de Leber, les dystrophies des cônes et la cécité nocturne congénitale stationnaire. Les photorécepteurs dégénèrent également dans des pathologies plus complexes comme la dégénérescence maculaire liée à l'âge. La dégénérescence des cellules photoréceptrices et/ou l'incapacité de ces cellules à répondre à la lumière conduisent progressivement à la perte de la fonction visuelle. Afin de remédier à ce déficit, plusieurs traitements thérapeutiques sont actuellement en cours de développement. Il s'agit notamment de la thérapie génique dont l'objectif est de corriger des mutations spécifiques ou d'introduire une protéine optogénétique pour resensibiliser le circuit à la lumière (thérapie optogénétique), de la thérapie cellulaire permettant de remplacer des photorécepteurs disparus, des dispositifs neuro-prothétiques qui font appel à la stimulation électrique du nerf optique, de la rétine et du cortex ou bien encore de traitements pharmacologiques à base de petites molécules ou de facteurs trophiques. Le fonctionnement des photorécepteurs ne repose pas sur la genèse de potentiels d'action mais sur des potentiels gradués avec dépolarisation-repolarisation de la cellule.The ganglion cells of the retina which receive synaptic inputs into the inner plexiform layer sub-layer, with OFF-type bipolar cells are called OFF ganglion cells; similarly, the ganglion cells that receive their synaptic inputs into the b-sublayer with bipolar cells are called ON ganglion cells. In the absence of light stimulation, the ganglion cells spontaneously emit action potentials whose temporal frequencies depend on their ON or OFF cell type. The so-called ON retinal ganglion cells produce an increase in their temporal rate of discharge of action potentials relative to their basal rate (or "ON" response), when the retina is illuminated in the central region of the receptor field of these cells. . Conversely, OFF ganglion cells respond by decreasing the temporal frequency of their action potentials relative to their base rhythm (or "OFF" response), when the retina is illuminated in the central part of their receptor field. Cells are said to be ON-OFF when they produce transient responses to changes in luminosity, the latter have dendritic extensions in the two sublayers of the internal plexiform. The axons of ganglion cells are myelinated from the riddled blade of the papilla, to form the fibers of the optic nerves that transfer visual information to the brain. Retinal dystrophies are a significant cause of blindness. These are degenerative diseases that reach diffuse or localized, and primary or secondary, retinal photoreceptor cells that are cones and rods. These cells belong to the outermost layer of the retina and convert the electromagnetic energy of the light photon into a nerve impulse that is transmitted to the brain via the optic nerve. Retinal dystrophies include retinitis pigmentosa, Usher syndrome, Stargardt disease (10%), Leber congenital amaurosis, cone dystrophy and congenital nocturnal blindness. Photoreceptors also degenerate into more complex pathologies such as age-related macular degeneration. The degeneration of photoreceptor cells and / or the inability of these cells to respond to light progressively leads to the loss of visual function. To remedy this deficit, several therapeutic treatments are currently under development. These include gene therapy that aims to correct specific mutations or introduce an optogenetic protein to resensitize the circuit to light (optogenetic therapy), cell therapy to replace missing photoreceptors, Neuroprosthetic devices that use electrical stimulation of the optic nerve, the retina and the cortex or pharmacological treatments based on small molecules or trophic factors. The functioning of photoreceptors does not rely on the genesis of action potentials but on graded potentials with depolarization-repolarization of the cell.

A l'obscurité, les photorécepteurs sont à l'état dépolarisés, et libèrent à leur base un neuromédiateur, le glutamate, qui diffuse dans la fente synaptique vers les cellules bipolaires ON qu'il inhibe en se fixant sur des récepteurs métabotropiques au glutamate de type mGluR6, et vers les cellules bipolaires OFF, qu'il active en se fixant sur des récepteurs ionotropiques. Il s'ensuit que seules les cellules ganglionnaire OFF ainsi activées par les cellules bipolaires OFF auront une augmentation de la fréquence de leurs potentiels d'action au sein du nerf optique. En présence de lumière, l'absorption des photons au niveau des segments externes des photorécepteurs se solde par une hyperpolarisation cellulaire et corrélativement par une diminution de l'excrétion de glutamate. Il en résulte une activation des cellules bipolaires ON et donc des cellules ganglionnaires ON associées, et inversement, une inhibition des cellules bipolaires OFF. Cette activité neuronale résulte de la cascade de phototransduction dans les segments externes des photorécepteurs. L'illumination de la rétine provoque l'activation d'une protéine membranaire: la rhodopsine. Cette rhodopsine activée va pouvoir activer plusieurs molécules de transducine. L'activation de la transducine conduit à la fixation d'une molécule de GTP et à la dissociation d'une sous-unité de cette protéine qui va pourvoir se lier transitoirement à une sous-unité inhibitrice d'une enzyme jusqu'alors inactive: la phosphodiestérase. La dissociation de cette sous-unité inhibitrice permet l'activation de la phosphodiestérase qui peut hydrolyser de nombreuses molécules de GMP cyclique (GMPc) en GMP. Or, ce GMPc est l'agoniste du canal induisant le courant d'obscurité à l'origine de la dépolarisation des photorécepteurs à l'obscurité. Par conséquent, la diminution de la concentration en GMPc entraîne une fermeture des canaux cationiques et une hyperpolarisation des photorécepteurs. Cette repolarisation qui se propage du segment externe à l'ensemble du photorécepteur se traduit au niveau des terminaisons synaptiques par une réduction de la libération de glutamate dans la fente synaptique. Les phosphodiesterases (PDEs) comprennent une famille de protéines apparentées qui peuvent être subdivisés en 11 familles en fonction de leurs séquences d'acides aminés, de la sensibilité à différents activateurs ou inhibiteurs, et, de leur capacité à hydrolyser préférentiellement l'AMPc ou le GMPc, ou les deux. Au sein de ces enzymes, la phosphodiestérase de type 6 (PDE6) constitue une famille PDE hydrolysant spécifiquement le GMPc. L'expression tissulaire de la PDE6 se situe principalement dans les cellules photoréceptrices de la rétine des mammifères. La PDE6 est constituée de deux sous-unités catalytiques PDE6a et PDEfl codées par les gènes PDE6A et PDE6B ainsi que deux sous-unités identiques inhibitrices PDE6y, codées par le gène PDE6G. Plus le nombre de sites catalytiques PDE6 activés augmente en réponse à un stimulus lumineux, plus le temps d'intégration des signaux lumineux est raccourci, accélérant ainsi la réponse visuelle. La PDE6 a été largement étudiée dans le contexte de dysfonctions visuelles. Cependant, d'autres phosphodiestérases se retrouvent au niveau du tissu rétinien tant dans les cellules endothéliales pour la PDE5 que dans les neurones (PDE1 et PDE9 : cellules bipolaires (Dhingra et al., 2008, J. Comp. Neurol., 510: 484-496); PDE4 : cellules bipolaires, horizontales, amacrines, ganglionnaires (Whitaker et Cooper, 2009, Neuroscience 163 : 1277-91); PDE5 : cellules bipolaires et ganglionnaires (Foresta et al., 2008, Eye (Lond), 22 : 144-149). Le sildénafil est un inhibiteur de la phosphodiestérase (PDE) de type 5 largement utilisé pour le traitement de la dysfonction érectile, sous la forme de Viagra® (citrate de sildénafil). Bien qu'ayant une spécificité optimale pour la PDE5, le sildénafil inhibe également, mais dans une moindre mesure, la PDE6 (Cote, 2004, J Impotence Res. 16 Suppl. 1 : S28-33) et les autres PDEs (Ke, 2004, J Impotence Res. 16 Suppl. 1 : S24-27). Des études cliniques ont signalé des déficits visuels transitoires chez les patients après une utilisation unique de sildénafil. En particulier, une altération transitoire des couleurs a été observée chez des patients placés sous sildénafil. Cependant, l'effet du sildénafil concernant les propriétés de réponse de la rétine la lumière n'est pas entièrement compris.In the dark, the photoreceptors are in the depolarized state, and release at their base a neuromediator, glutamate, which diffuses into the synaptic cleft to the ON bipolar cells that it inhibits by binding to metabotropic glutamate receptors. mGluR6 type, and towards OFF bipolar cells, which it activates by binding to ionotropic receptors. It follows that only the OFF ganglion cells thus activated by the OFF bipolar cells will have an increase in the frequency of their action potentials within the optic nerve. In the presence of light, the absorption of the photons at the outer segments of the photoreceptors results in a cellular hyperpolarization and correlatively in a decrease in the excretion of glutamate. This results in activation of ON bipolar cells and thus associated ON ganglion cells, and conversely, inhibition of OFF bipolar cells. This neuronal activity results from the phototransduction cascade in the outer segments of the photoreceptors. The illumination of the retina causes the activation of a membrane protein: rhodopsin. This activated rhodopsin will be able to activate several transducin molecules. The activation of transducin leads to the fixation of a GTP molecule and the dissociation of a subunit of this protein which will be able to bind transiently to an inhibitory subunit of a previously inactive enzyme: phosphodiesterase. Dissociation of this inhibitory subunit allows activation of phosphodiesterase which can hydrolyze many cyclic GMP molecules (cGMP) to GMP. However, this cGMP is the agonist of the dark current inducing channel at the origin of the depolarization of photoreceptors in the dark. Therefore, the decrease in cGMP concentration results in cation channel closure and photoreceptor hyperpolarization. This repolarization that propagates from the outer segment to the entire photoreceptor results in synaptic terminations by a reduction in glutamate release in the synaptic cleft. Phosphodiesterases (PDEs) include a family of related proteins that can be subdivided into 11 families based on their amino acid sequences, sensitivity to different activators or inhibitors, and their ability to preferentially hydrolyze cAMP or CGMP, or both. Within these enzymes, phosphodiesterase type 6 (PDE6) is a PDE family specifically hydrolyzing cGMP. The tissue expression of PDE6 is mainly in the photoreceptor cells of the mammalian retina. PDE6 consists of two catalytic subunits PDE6a and PDEfl encoded by the PDE6A and PDE6B genes as well as two identical PDE6γ inhibitory subunits, encoded by the PDE6G gene. The more the number of activated PDE6 catalytic sites increases in response to a light stimulus, the shorter the integration time of the light signals, thus accelerating the visual response. PDE6 has been widely studied in the context of visual dysfunction. However, other phosphodiesterases are found in retinal tissue both in endothelial cells for PDE5 and in neurons (PDE1 and PDE9: bipolar cells (Dhingra et al., 2008, J. Comp.Neurol., 510: 484). PDE4: bipolar, horizontal, amacrine, ganglionic cells (Whitaker and Cooper, 2009, Neuroscience 163: 1277-91), PDE5: bipolar and ganglion cells (Foresta et al., 2008, Eye (Lond), 22: 144-149) Sildenafil is a type 5 phosphodiesterase (PDE) inhibitor widely used for the treatment of erectile dysfunction in the form of Viagra® (sildenafil citrate). PDE5, sildenafil also, but to a lesser extent, inhibits PDE6 (Cote, 2004, J Impotence Res 16 Suppl 1: S28-33) and other PDEs (Ke, 2004, J Impotence Res 16 Suppl 1 : S24-27) Clinical studies have reported transient visual deficits in patients after with a single use of sildenafil. In particular, transient color changes have been observed in patients treated with sildenafil. However, the effect of sildenafil on the retinal response properties of light is not fully understood.

L'étude de Stockman et al. montre que l'absorption de Viagra® provoque une dégradation des performances visuelles au niveau de la rétine, et provoque notamment un retard dans la réponse à la lumière des cônes (Stockman et al., 2007, J Of Vision, 7(8) :4, 1-15). Dans le document WO 01/10406, le sildenafil est utilisé pour accroitre le flux sanguin dans différents tissus qui composent l'oeil, permettant ainsi de modifier l'évolution de certaines pathologies visuelles. Cette observation a été confirmée par Paris et al. qui montre une augmentation de l'afflux sanguin dans le tissu choroïde de l'oeil (Paris et al., 2001, International Ophtalmology, 23 : 355-358.) Cet effet sur le flux sanguin pourrait avoir un impact important pour des pathologies rétiniennes d'origine vasculaire comme le glaucome ou les conséquences rétiniennes du diabète dénommées rétinopathie diabétique. Dans de nombreuses dystrophies rétiniennes, les patients perdent leur photorécepteurs de type bâtonnet puis les photorécepteurs de type cônes. Les patients deviennent donc aveugles. Différentes stratégies sont à l'étude pour réactiver ce tissu. Il s'agit de prothèses rétiniennes ou de thérapie optogénétique. Au cours de ces études, il a été montré que certains patients conservent un nombre important de photorécepteurs mais que ces derniers ne procurent plus d'information visuelle au circuit ce qui explique la cécité des patients (Busskamp et al., 2010, Science 329 : 413-417) . Compte tenu de la difficulté liée à la mise en place d'une thérapie génique ou cellulaire au niveau de l'oeil, il existe par conséquent un réel besoin d'identifier des produits susceptibles de participer à la réactivation des photorécepteurs et/ou du tissu rétinien. De manière surprenante, les inventeurs ont mis en évidence un effet bénéfique de l'utilisation d'inhibiteurs de phosphodiestérase et/ou d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou guanylate cyclase sur le métabolisme des cellules rétiniennes ce qui permet de restaurer une réponse à la lumière sur ces cellules. Cette démonstration a été faite sur un tissu in vitro, c'est-à-dire dépourvu de toute perfusion sanguine et donc d'effet vasculaire, ce qui implique que l'effet observé est produit par un effet sur les cellules rétiniennes neuronales et non sur le système vasculaire.The study by Stockman et al. shows that the absorption of Viagra® causes a degradation of the visual performances at the level of the retina, and notably causes a delay in the response to the light of the cones (Stockman et al., 2007, J Of Vision, 7 (8): 4, 1-15). In the document WO 01/10406, sildenafil is used to increase blood flow in various tissues that make up the eye, thus making it possible to modify the evolution of certain visual pathologies. This observation was confirmed by Paris et al. which shows an increase in blood flow in the choroidal tissue of the eye (Paris et al., 2001, International Ophthalmology, 23: 355-358.) This effect on blood flow could have a significant impact for retinal pathologies of vascular origin such as glaucoma or the retinal consequences of diabetes called diabetic retinopathy. In many retinal dystrophies, patients lose their rod-type photoreceptors and cone-like photoreceptors. Patients become blind. Different strategies are under study to reactivate this tissue. These are retinal prostheses or optogenetic therapy. During these studies, it has been shown that some patients retain a large number of photoreceptors but that they no longer provide visual information to the circuit which explains the blindness of patients (Busskamp et al., 2010, Science 329: 413-417). Given the difficulty related to the establishment of a gene or cell therapy in the eye, there is therefore a real need to identify products that may participate in the reactivation of photoreceptors and / or tissue retinal. Surprisingly, the inventors have demonstrated a beneficial effect of the use of phosphodiesterase inhibitors and / or activators of adenylate cyclase and / or guanylate cyclase on the metabolism of retinal cells, which makes it possible to restore a response. in light on these cells. This demonstration was made on tissue in vitro, that is to say devoid of any blood perfusion and thus of vascular effect, which implies that the observed effect is produced by an effect on neuronal and non-neuronal retinal cells. on the vascular system.

Le but de la présente invention est de proposer une méthode de restauration d'une réponse à la lumière des cellules de la rétine qui présentent une dégénérescence ou un dysfonctionnement. Un autre but de la présente invention est de permettre la réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs. Le traitement pourra également s'appliquer pour des personnes ayant un large scotome (zone aveugle) résultant de la dégénérescence ou de l'inactivation des photorécepteurs. Encore un autre but de la présente invention est de fournir des compositions pharmaceutiques comprenant des principes actifs permettant la réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs. La présente invention concerne des produits constitués d'inhibiteurs de phosphodiestérase et/ou d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs. De manière surprenante, les inventeurs ont mis en évidence que l'utilisation d'inhibiteurs de phosphodiestérase sur des rétines aveugles permettait de restaurer la réponse à la lumière. Par « inhibiteurs de phosphodiestérase », on désigne les composés capables d'interagir avec le site actif des enzymes de type phosphodiestérase (PDE) et ainsi d'en perturber l'activité catalytique. Ceci a pour conséquence que le GMPc et/ou l'AMPc, les substrats naturels des PDEs, ne peuvent plus être hydrolysés en GMP ou AMP, entraînant ainsi une augmentation intracellulaire du taux de GMPc et ou de AMPc. Les inhibiteurs de PDE envisagés selon la présente invention peuvent être non-sélectifs des différents types de PDEs, notamment la caféine, la théophylline ou le 3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX), ou au contraire spécifiques des différents types de PDEs, en particulier des PDE-1, PDE-2, PDE-3, PDE-4, PDE-5, PDE-6 ou PDE-9. Par « activateurs d' adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase», on désigne les composés capables d'activer l'adénylate cyclase ou la guanylate cyclase, familles d'enzymes qui catalysent la conversion d'ATP en AMPc ou de GTP en GMPc. Les expressions adénylate cyclase et adénylyl cyclase sont équivalentes et pourront être employées indifféremment l'une à la place de l'autre. De la même manière, les expressions guanylate cyclase et guanylyl cyclase sont équivalentes et pourront être employées indifféremment l'une à la place de l'autre. Par « réhabilitation de la vision », on désigne la restauration d'une perception visuelle dans une zone considéré comme aveugle. Cette restauration visuelle peut être démontrée par la mesure d'une activité fonctionnelle induite par la lumière au niveau de la population des cellules ganglionnaires rétiniennes non photosensibles. Par « personne aveugle ou atteinte de cécité légale », on désigne les patients dont la capacité visuelle ne permet pas une autonomie dans leur déplacement et leurs tâches quotidiennes. En France, la cécité légale est définie par une acuité visuelle inférieure à 1/20 pour le meilleur oeil après correction. Cette définition correspond à celle établie par l'OMS qui définit la cécité comme une acuité visuelle inférieure à 3/60, ou une perte du champ visuel correspondant à moins de 10 degrés dans le meilleur oeil avec la meilleure correction possible (Classification Internationale statistique des Maladies, traumatismes et causes de décès, 10ème révision (CIM-10) catégories de déficience visuelle 3, 4 et 5). Par « photorécepteurs », on désigne les cônes et les bâtonnets de la rétine. Les photorécepteurs, également appelés cellules photoréceptrices, possèdent des pigments capables d'absorber des photons de la lumière. Ces cellules sont à l'origine du message nerveux sensoriel qui est propagé par les fibres du nerf optique sous forme de signaux électriques jusqu'au cerveau. Les bâtonnets sont les cellules photoréceptrices fonctionnelles en faible éclairement et sont impliqués dans la vision nocturne alors que les cônes fonctionnent lorsque la lumière est intense, dans la vision diurne. Il y a trois types de cônes (de types S, M, ou L) dans la rétine humaine ; chacun présente un maximum de sensibilité pour une plage de longueurs d'ondes données. Ils participent à la vision des couleurs mais sont beaucoup moins sensibles à la lumière que les bâtonnets. Par «dégénérescence et/ou dysfonctionnement », on désigne l'incapacité des photorécepteurs à recevoir un signal lumineux et à le convertir en message nerveux transmissible aux autres cellules de la rétine. Cette incapacité peut notamment résulter de la perte des pigments au niveau des cônes et/ou des bâtonnets ou encore d'un défaut de transduction du signal au sein de ces cellules. L'incapacité peut aussi porter sur le défaut de transmission de l'information visuelle. Toutefois, les cellules photoréceptrices résiduelles restent connectées aux autres cellules de la rétine qui traitent l'information et l'amènent au cerveau. Dans le cadre de la présente invention, la dégénérescence concerne en premier lieu les cellules photoréceptrices, une atteinte des cellules nerveuses pouvant intervenir suite à la perte de photorécepteurs. Cependant, ces cellules nerveuses sont fonctionnelles comme l'indique les essais cliniques sur les prothèses rétiniennes qui ont permis d'obtenir une restauration fonctionnelle. La fonctionnalité de ce tissu résiduel peut d'ailleurs être attestée par l'induction de percepts lumineux par stimulation électrique transcornéenne (Naycheva et al., (2012) IOVS 53 : 7440-7448). La présente invention concerne des produits constitués d'inhibiteurs de phosphodiestérase et/ou d'activateurs d' adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs et les cellules nerveuses de la rétine étant fonctionnelles.The object of the present invention is to provide a method for restoring a light response of retinal cells that exhibit degeneration or dysfunction. Another object of the present invention is to allow the rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, the blindness being related to the degeneration and / or dysfunction of photoreceptors. The treatment may also be applicable for persons with a large scotoma (blind zone) resulting from the degeneration or inactivation of photoreceptors. Yet another object of the present invention is to provide pharmaceutical compositions comprising active principles for the rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, the blindness being related to the degeneration and / or dysfunction of the photoreceptors. The present invention relates to products consisting of phosphodiesterase inhibitors and / or activators of adenylate cyclase and / or guanylate cyclase for use in the treatment of rehabilitation of vision in a person who is blind or legally blind; blindness being related to the degeneration and / or dysfunction of photoreceptors. Surprisingly, the inventors have demonstrated that the use of phosphodiesterase inhibitors on blind retinas made it possible to restore the response to light. The term "phosphodiesterase inhibitors" denotes compounds capable of interacting with the active site of phosphodiesterase type (PDE) enzymes and thus of disrupting their catalytic activity. This has the consequence that cGMP and / or cAMP, the natural substrates of PDEs, can no longer be hydrolysed into GMP or AMP, thus causing an intracellular increase in the level of cGMP and cAMP. The PDE inhibitors envisaged according to the present invention may be non-selective of the different types of PDEs, in particular caffeine, theophylline or 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX), or on the contrary specific for the different types of PDEs, in particular particularly PDE-1, PDE-2, PDE-3, PDE-4, PDE-5, PDE-6 or PDE-9. By "adenylate cyclase and / or guanylate cyclase activators" is meant compounds capable of activating adenylate cyclase or guanylate cyclase, families of enzymes that catalyze the conversion of ATP to cAMP or GTP to cGMP. . The terms adenylate cyclase and adenylyl cyclase are equivalent and may be used interchangeably in the place of the other. In the same way, the terms guanylate cyclase and guanylyl cyclase are equivalent and may be used interchangeably in the place of the other. By "rehabilitation of vision" is meant the restoration of a visual perception in an area considered blind. This visual restoration can be demonstrated by measuring light-induced functional activity at the non-photosensitive retinal ganglion cell population. "Blind or legally blind person" refers to patients whose visual ability does not allow autonomy in their movement and daily tasks. In France, legal blindness is defined by visual acuity less than 1/20 for the best eye after correction. This definition corresponds to that established by WHO, which defines blindness as visual acuity less than 3/60, or a loss of visual field corresponding to less than 10 degrees in the best eye with the best possible correction (International Statistical Classification of Diseases, Injuries and Causes of Death, 10th Revision (ICD-10) Categories of Visual Impairment 3, 4 and 5). By "photoreceptors" is meant the cones and rods of the retina. Photoreceptors, also called photoreceptor cells, have pigments capable of absorbing photons from light. These cells are at the origin of the sensory nerve message that is propagated by the fibers of the optic nerve in the form of electrical signals to the brain. The rods are the functional photoreceptor cells in low light and are involved in night vision whereas the cones work when the light is intense, in the daytime vision. There are three types of cones (S, M, or L types) in the human retina; each has a maximum sensitivity for a given wavelength range. They participate in the vision of colors but are much less sensitive to light than sticks. By "degeneration and / or dysfunction" is meant the inability of photoreceptors to receive a light signal and to convert it into a nerve message transmissible to the other cells of the retina. This inability can result in particular from the loss of pigments at the cones and / or rods or from a defect of signal transduction within these cells. Disability can also relate to the lack of transmission of visual information. However, residual photoreceptor cells remain connected to other cells in the retina that process the information and bring it to the brain. In the context of the present invention, degeneration primarily concerns photoreceptor cells, nerve cell damage that can occur following the loss of photoreceptors. However, these nerve cells are functional as indicated by clinical trials on retinal prostheses that have resulted in functional restoration. The functionality of this residual tissue can also be attested by the induction of light percepts by transcorneal electrical stimulation (Naycheva et al., (2012) IOVS 53: 7440-7448). The present invention provides products consisting of phosphodiesterase inhibitors and / or adenylate cyclase and / or guanylate cyclase enhancers for use in vision rehabilitation therapy in a blind or legally blind person. blindness being related to the degeneration and / or dysfunction of photoreceptors and nerve cells of the retina being functional.

Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne des produits constitués d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs. Selon un mode de réalisation plus particulier, les activateurs d'adénylate cyclase et ou de guanylate cyclase des produits de l'invention pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, sont choisis parmi les composés suivants : BAY 60-2770, BAY 41-8543, BAY 60-4552; BAY 41-2272; Cinaciguat (BAY 58-2667); 3-(5'-Hydroxymethy1-2'-fury1)-1- benzyl indazole (YC-1) ou la forskoline. Selon un autre mode de réalisation particulier, la présente invention concerne des produits constitués d'inhibiteurs de phosphodiestérase pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs. Plus particulièrement, les inhibiteurs de phosphodiestérase des produits de l'invention pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, ont pour cible la phosphodiestérase 5 et/ou la phosphodiestérase 6. Par « phosphodiestérase 5 », on désigne la phosphodiestérase exprimée majoritairement par les cellules musculaires lisses et les cellules bipolaires ou ganglionnaires de la rétine. Par « phosphodiestérase 6 », on désigne la phosphodiestérase exprimée majoritairement par les cellules photoréceptrices, en particulier les cônes et les bâtonnets. Selon un mode de réalisation plus particulier, les inhibiteurs de phosphodiestérase des produits de l'invention pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, ont pour cible la phosphodiestérase 1 et/ou la phosphodiestérase 9.According to one particular embodiment, the present invention relates to products consisting of activators of adenylate cyclase and / or guanylate cyclase for their use in the treatment of rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, blindness. being related to degeneration and / or dysfunction of photoreceptors. According to a more particular embodiment, the activators of adenylate cyclase and / or guanylate cyclase of the products of the invention for use in the treatment of rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, are chosen from the following compounds: BAY 60-2770, BAY 41-8543, BAY 60-4552; BAY 41-2272; Cinaciguat (BAY 58-2667); 3- (5'-Hydroxymethyl-2'-fury1) -1-benzylindazole (YC-1) or forskolin. According to another particular embodiment, the present invention relates to products consisting of phosphodiesterase inhibitors for their use in the treatment of rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, the blindness being linked to degeneration and / or or dysfunction of photoreceptors. More particularly, the phosphodiesterase inhibitors of the products of the invention for use in the treatment of rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, are targeted phosphodiesterase 5 and / or phosphodiesterase 6. By "phosphodiesterase 5 "is the phosphodiesterase expressed predominantly by smooth muscle cells and bipolar cells or ganglion cells of the retina. By "phosphodiesterase 6" is meant phosphodiesterase, mainly expressed by photoreceptor cells, in particular cones and rods. According to a more particular embodiment, the phosphodiesterase inhibitors of the products of the invention for use in the treatment of rehabilitation of vision in a person who is blind or who has legal blindness, are targeted at phosphodiesterase 1 and / or phosphodiesterase. 9.

Par « « phosphodiestérase 1 », on désigne la phosphodiestérase exprimée majoritairement par les cellules bipolaires de la rétine.By "phosphodiesterase 1" is meant the phosphodiesterase expressed mainly by the bipolar cells of the retina.

Par « phosphodiestérase 4 », on désigne la phosphodiestérase exprimée majoritairement par les cellules bipolaires, amacrines, horizontales ou ganglionnaires de la rétine. Par « phosphodiestérase 9 », on désigne la phosphodiestérase exprimée majoritairement par les cellules bipolaires de la rétine. Selon un autre mode de réalisation plus particulier, les inhibiteurs de phosphodiestérase des produits de l'invention pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, sont choisis parmi: l'acetildenafil, l'aidenafil, l'avanafil, l'icariin, le lodenafil, le mirodenafil, le nitrosoprodenafil, le sildenafil, le sulfoaildenafil, le tadalafil, le thiomethisosildenafil, le vardenafil, l'udenafil, le zaprinast, la vimpocetine, le 2-EHNA, le cilostamide, le rolipram, YM976, le dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. Selon encore un autre mode de réalisation plus particulier, lesdits produits de l'invention sont constitués d'inhibiteurs de phosphodiestérase, notamment de la phosphodiestérase 5 et/ou la phosphodiestérase 6, notamment choisis parmi l'acetildenafil, l'aidenafil, l'avanafil, l'icariin, le lodenafil, le mirodenafil, le nitrosoprodenafil, le sildenafil, le sulfoaildenafil, le tadalafil, le thiomethisosildenafil, le vardenafil, l'udenafil, le zaprinast, la vimpocetine, le 2-EHNA, le cilostamide, le rolipram, YM976, le dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021.By "phosphodiesterase 4" is meant the phosphodiesterase expressed mainly by the bipolar, amacrine, horizontal or ganglion cells of the retina. By "phosphodiesterase 9" is meant the phosphodiesterase mainly expressed by the bipolar cells of the retina. According to another more particular embodiment, the phosphodiesterase inhibitors of the products of the invention for use in the treatment of rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, are selected from: acetildenafil, avenafil, icariin, lodenafil, mirodenafil, nitrosoprodenafil, sildenafil, sulfoaildenafil, tadalafil, thiomethisosildenafil, vardenafil, udenafil, zaprinast, vimpocetine, 2-EHNA, cilostamide, rolipram, YM976, dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. According to yet another more particular embodiment, said products of the invention consist of phosphodiesterase inhibitors, in particular phosphodiesterase 5 and / or phosphodiesterase 6, chosen in particular from acetildenafil, aidenafil and avanafil. icariin, lodenafil, mirodenafil, nitrosoprodenafil, sildenafil, sulfoaildenafil, tadalafil, thiomethisosildenafil, vardenafil, udenafil, zaprinast, vimpocetine, 2-EHNA, cilostamide, rolipram, YM976, dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021.

Selon un autre mode de réalisation encore plus particulier, l'inhibiteur de phosphodiestérase des produits de l'invention pour une utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale est le sildenafil. Par « sildénafil », on désigne le composé dont la dénomination IUPAC est 1-[4- éthoxy-3-(6,7-dihydro-l-méthy1-7-oxo-3-propyl-1H >-pyrazolo [4,3 -d]pyrimidin-5-y1) (phénylsulfonyl]-4-méthylpipérazine. La forme citrate du sildénafil est préférée mais ne doit en aucun cas restreindre la portée de la présente invention qui peut également s'étendre aux bases et aux sels de sildénafil. Selon un mode de réalisation particulier, dans les produits constitués d'inhibiteurs de phosphodiestérase pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, ledit inhibiteur est susceptible d'être utilisé à une dose unitaire comprise de 2 mg à 200 mg, notamment de 2 mg à 50 mg, de 50 mg à 100 mg, de 100 mg à 150 mg, de 150 mg à 200 mg.According to another even more particular embodiment, the phosphodiesterase inhibitor of the products of the invention for use in the rehabilitation of vision therapy in a blind or legally blind person is sildenafil. "Sildenafil" means the compound whose IUPAC name is 1- [4-ethoxy-3- (6,7-dihydro-1-methyl-7-oxo-3-propyl-1H) -pyrazolo [4.3 The citrate form of sildenafil is preferred but should in no way restrict the scope of the present invention which may also extend to sildenafil bases and salts. According to one particular embodiment, in products consisting of phosphodiesterase inhibitors for use in the treatment of rehabilitation of vision in a person who is blind or has legal blindness, said inhibitor may be used at a unit dose. from 2 mg to 200 mg, especially from 2 mg to 50 mg, from 50 mg to 100 mg, from 100 mg to 150 mg, from 150 mg to 200 mg.

Selon un mode de réalisation encore plus particulier, les doses unitaires sont en particulier de 50 mg pour le sildenafil, le mirodenafil, de 2 mg à 20 mg, en particulier 10 mg pour le tadalafil, le vardenafil, de 40 mg à 80 mg, en particulier 80 mg pour le lodenafil, de 50 mg à 200 mg, en particulier 100 mg pour l'udenafil ou l'avanafil.According to a still more particular embodiment, the unit doses are in particular 50 mg for sildenafil, mirodenafil, from 2 mg to 20 mg, in particular 10 mg for tadalafil, vardenafil, from 40 mg to 80 mg, in particular 80 mg for lodenafil, 50 mg to 200 mg, in particular 100 mg for udenafil or avanafil.

Par « dose unitaire », on désigne la quantité spécifique d'inhibiteurs de phosphodiestérase ingérée par le patient en une prise. La dose unitaire est la présentation appropriée d'une quantité déterminée d'inhibiteurs de phosphodiestérase dans un récipient unidose, destinée à l'administration au patient. Le nombre de doses unitaires administrables par jour au patient peut varier de 1 à 3 en fonction de la gravité de l'état à soulager et est déterminé par le praticien. La composition pharmaceutique peut être administrée en une seule fois, ou peut être divisée en un certain nombre de plus petites doses pour être administrées à des intervalles de temps. Il est entendu que le dosage précis et la durée du traitement est fonction de la maladie à traiter et peuvent être déterminées de façon empirique en utilisant des protocoles de test connus, ou par extrapolation à partir des données de tests réalisés in vivo ou in vitro. Il doit en outre être entendu que, pour un patient particulier, les schémas posologiques spécifiques doivent être ajustés au fil du temps selon les besoins individuels et le jugement professionnel de la personne administrant ou supervisant l'administration des produits de l'invention.By "unit dose" is meant the specific amount of phosphodiesterase inhibitors ingested by the patient in one dose. The unit dose is the appropriate presentation of a specific amount of phosphodiesterase inhibitors in a single dose container for administration to the patient. The number of unit doses administered per day to the patient can vary from 1 to 3 depending on the severity of the condition to be relieved and is determined by the practitioner. The pharmaceutical composition may be administered at one time, or may be divided into a number of smaller doses for administration at intervals of time. It is understood that the precise dosage and duration of treatment is a function of the disease to be treated and can be determined empirically using known test protocols, or extrapolated from in vivo or in vitro test data. It should further be understood that for a particular patient, the specific dosage regimens must be adjusted over time according to the individual needs and professional judgment of the person administering or supervising the administration of the products of the invention.

Les produits impliqués dans la présente invention peuvent être formulés avantageusement pour une application locale, sous forme de gouttes ou d'implants intraou péri-oculaires. La présente invention concerne également une composition ophtalmique comprenant au moins un inhibiteur de phosphodiestérase et/ou d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase, tels que définis précédemment, et éventuellement un chélateur de calcium, en particulier 1'EDTA. Par « composition ophtalmique », on désigne tous types de composition permettant une administration directe ou locale dans l'oeil du patient. La composition peut être administrée de manière topique à la surface de l'oeil ou peut être injectée dans l'oeil (i.e. par injection intra-vitréenne, par injection sous-conjonctivale, par injection sous- rétinienne, par injection sous-ténonienne, injection rétrobulbaire).The products involved in the present invention can be formulated advantageously for local application, in the form of drops or intraocular or periocular implants. The present invention also relates to an ophthalmic composition comprising at least one inhibitor of phosphodiesterase and / or activators of adenylate cyclase and / or guanylate cyclase, as defined above, and optionally a calcium chelator, in particular EDTA. By "ophthalmic composition" is meant any type of composition for direct or local administration into the patient's eye. The composition can be administered topically to the surface of the eye or can be injected into the eye (ie by intravitreous injection, subconjunctival injection, sub-retinal injection, sub-Tenon injection, injection retrobulbar).

La composition ophtalmique peut être fournie sous une forme qui permet l'administration locale ou directe de celle-ci dans l'oeil, y compris mais non limité à, une solution, des gouttes, une pulvérisation, une pommade, une lotion, une crème ou un gel. Selon un mode de réalisation plus particulier, dans la composition ophtalmique selon la présente invention la concentration de l'inhibiteur de phosphodiestérase et/ou d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase de ladite composition ophtalmologique varie de 0,00001% à 95%. La concentration de l'inhibiteur de phosphodiestérase et/ou d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase peuvent être présents dans la composition ophtalmique à toute concentration qui permet à la composition ophtalmique de fonctionner conformément à la présente invention, par exemple, mais non à titre limitatif, l'inhibiteur de phosphodiestérase et/ou d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase peuvent être présents dans une gamme ayant un niveau inférieur choisi parmi 0,0001% 0,005%, 0,001%, 0,005%, 0,01%, 0,05%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1,0%, 1,1%, 1,2%, 1,3%, 1,4% , 1,5%, 1,6%, 1,7%, 1,8%, 1,9% et 2,0%, et un niveau supérieur choisi parmi 3%, 3,5%, 4%, 4,5%, 5%, 5,5%, 6%, 6,5%, 7 %, 7,5%, 8%, 8,5%, 9%, 9,5%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% et 95% en poids de la composition.The ophthalmic composition may be provided in a form that allows for local or direct administration thereof into the eye, including but not limited to, solution, drops, spray, ointment, lotion, cream or a gel. According to a more particular embodiment, in the ophthalmic composition according to the present invention the concentration of the phosphodiesterase inhibitor and / or adenylate cyclase and / or guanylate cyclase activators of said ophthalmological composition varies from 0.00001% at 95%. The concentration of the phosphodiesterase inhibitor and / or adenylate cyclase and / or guanylate cyclase activators may be present in the ophthalmic composition at any concentration which allows the ophthalmic composition to function according to the present invention, for example , but not limited to, the inhibitor of phosphodiesterase and / or adenylate cyclase and / or guanylate cyclase activators may be present in a range having a lower level selected from 0.0001% 0.005%, 0.001%, 0.005%, 0.01%, 0.05%, 0.1%, 0.2%, 0.3%, 0.4%, 0.5%, 0.6%, 0.7%, 0, 8%, 0.9%, 1.0%, 1.1%, 1.2%, 1.3%, 1.4%, 1.5%, 1.6%, 1.7%, 1, 8%, 1.9% and 2.0%, and a higher level selected from 3%, 3.5%, 4%, 4.5%, 5%, 5.5%, 6%, 6.5% , 7%, 7.5%, 8%, 8.5%, 9%, 9.5%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18% %, 19%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% and 95% by weight of the composition.

Selon un mode de réalisation plus particulier, la composition ophtalmique selon la présente invention comprend au moins un inhibiteur de phosphodiestérase tel que définis précédemment, et éventuellement un chélateur de calcium, en particulier l'EDTA, dans laquelle la concentration de l'inhibiteur de phosphodiestérase de ladite composition ophtalmologique varie de 0,00001% à 95%.According to a more particular embodiment, the ophthalmic composition according to the present invention comprises at least one phosphodiesterase inhibitor as defined above, and optionally a calcium chelator, in particular EDTA, in which the concentration of the phosphodiesterase inhibitor of said ophthalmological composition ranges from 0.00001% to 95%.

Selon un mode de réalisation plus particulier, l'inhibiteur de phosphodiesterase de la composition ophtalmique selon la présente invention est le sildénafil. Selon un mode de réalisation plus particulier, la composition ophtalmique selon la présente invention est formulée pour être délivrée dans l'oeil sous forme de goutte. Selon un mode de réalisation particulier, la composition ophtalmique est fournie sous la forme d'un collyre. Selon un mode de réalisation encore plus particulier, la composition ophtalmique selon la présente invention contient également un agent facilitant la délivrance de ladite solution dans la rétine.According to a more particular embodiment, the phosphodiesterase inhibitor of the ophthalmic composition according to the present invention is sildenafil. According to a more particular embodiment, the ophthalmic composition according to the present invention is formulated to be delivered into the eye in the form of a drop. According to a particular embodiment, the ophthalmic composition is provided in the form of an eye drop. According to a still more particular embodiment, the ophthalmic composition according to the present invention also contains an agent facilitating the delivery of said solution into the retina.

Par « agent facilitant la délivrance », on désigne un composé qui aide à la pénétration d'une surface de l'oeil, notamment la cornée et /ou de la rétine de l'oeil, pour atteindre le tissu à traité. En outre, le taux de pénétration des compositions ophtalmiques de l'invention devra être suffisant pour délivrer une dose efficace. Selon encore un autre mode de réalisation, la composition ophtalmique selon la présente invention contient au moins un additif, ledit additif pouvant être un agent de mouillage ou un lubrifiant. L'agent de mouillage vise à hydrater ou encore à limiter l'assèchement de l'oeil. Les agents de mouillage sont généralement des polymères hydrophiles ou à base de cellulose. L'agent lubrifiant à une texture proche de celle des larmes naturelles et aide à leur formation. Les agents lubrifiants peuvent être de nature phospholipidique ou non-phospholipidique. A titre illustratif, et sans que cela restreigne la portée de la présente invention, les lubrifiants oculaires peuvent être choisis parmi : le propylène glycol, l'éthylène glycol, le polyéthylène glycol, l'hydroxypropylméthylcellulose, la carboxyméthylcellulose, l'hydroxypropylcellulose; les dextranes, des protéines solubles dans l'eau (i.e. la gélatine), les polymères vinyliques (i.e. l'alcool polyvinylique, la polyvinylpyrrolidone, la povidone), la vaseline, une huile minérale, des carbomères (i.e. les carbomère 934P, le carbomère 941, le carbomère 940, le carbomère 974P). De tels agents de mouillage ou lubrifiants sont bien connus de l'Homme du métier. Les compositions ophtalmiques selon la présente invention peuvent également contenir d'autres excipients, c'est-à-dire d'autres composés pharmaceutiquement acceptables, choisis selon la formulation et le mode d'administration des compositions ophtalmiques de l'invention.By "delivery aiding agent" is meant a compound which assists in the penetration of a surface of the eye, including the cornea and / or the retina of the eye, to reach the treated tissue. In addition, the penetration rate of the ophthalmic compositions of the invention should be sufficient to deliver an effective dose. According to yet another embodiment, the ophthalmic composition according to the present invention contains at least one additive, said additive may be a wetting agent or a lubricant. The wetting agent aims to moisturize or to limit the drying of the eye. The wetting agents are generally hydrophilic or cellulose-based polymers. The lubricant has a texture close to that of natural tears and helps with their formation. The lubricating agents may be of a phospholipidic or non-phospholipidic nature. As an illustration, and without limiting the scope of the present invention, the ocular lubricants may be chosen from: propylene glycol, ethylene glycol, polyethylene glycol, hydroxypropyl methylcellulose, carboxymethylcellulose, hydroxypropylcellulose; dextrans, water-soluble proteins (ie gelatin), vinyl polymers (ie polyvinyl alcohol, polyvinylpyrrolidone, povidone), petrolatum, mineral oil, carbomers (ie carbomer 934P, carbomer 941, carbomer 940, carbomer 974P). Such wetting agents or lubricants are well known to those skilled in the art. The ophthalmic compositions according to the present invention may also contain other excipients, that is to say other pharmaceutically acceptable compounds, chosen according to the formulation and the mode of administration of the ophthalmic compositions of the invention.

La présente invention concerne également un implant intra- ou péri-oculaire comprenant au moins un inhibiteur de phosphodiestérase et/ou un activateur d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase, tels que définis précédemment, et éventuellement un chélateur de calcium, en particulier 1'EDTA. Selon un mode de réalisation plus particulier, dans l'implant intra- ou péri- oculaire selon la présente invention la concentration de l'inhibiteur de phosphodiestérase et/ou d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase varie de 0,00001% à 95%.The present invention also relates to an intra- or peri-ocular implant comprising at least one phosphodiesterase inhibitor and / or an adenylate cyclase and / or guanylate cyclase activator, as defined above, and optionally a calcium chelator, in particular 1'EDTA. According to a more particular embodiment, in the intra- or peri-ocular implant according to the present invention the concentration of the phosphodiesterase inhibitor and / or of adenylate cyclase and / or guanylate cyclase activators varies from 0, 00001% to 95%.

La concentration de l'inhibiteur de phosphodiestérase et/ou d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase peuvent être présents dans l'implant intraou péri-oculaire à toute concentration qui permet à l'implant intra- ou péri-oculaire de fonctionner conformément à la présente invention, par exemple, mais non à titre limitatif, l'inhibiteur de phosphodiestérase et/ou d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase peuvent être présents dans une gamme ayant un niveau inférieur choisi parmi 0,0001% 0,005%, 0,001%, 0,005%, 0,01%, 0,05%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1,0%, 1,1%, 1,2%, 1,3%, 1,4% , 1,5%, 1,6%, 1,7%, 1,8%, 1,9% et 2,0%, et un niveau supérieur choisi parmi 3%, 3,5%, 4%, 4,5%, 5%, 5,5%, 6%, 6,5%, 7 %, 7,5%, 8%, 8,5%, 9%, 9,5%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% et 95% en poids de la composition. Selon un mode de réalisation encore plus particulier, l'implant intra- ou péri-oculaire selon la présente invention comprend au moins un inhibiteur de phosphodiestérase tels que définis dans l'une des revendications 3 ou 4, et éventuellement un chélateur de calcium, en particulier l'EDTA, dans lequel la concentration de l'inhibiteur de phosphodiestérase varie de 0,00001% à 95%. Selon un mode de réalisation encore plus particulier, dans l'implant intra- ou péri-oculaire selon la présente invention, l'inhibiteur de phosphodiestérase est le sildénafil.The concentration of the phosphodiesterase inhibitor and / or adenylate cyclase and / or guanylate cyclase enhancers may be present in the intra or periocular implant at any concentration that allows the intra- or peri-ocular implant according to the present invention, for example, but not limited to, the inhibitor of phosphodiesterase and / or adenylate cyclase and / or guanylate cyclase activators may be present in a range having a lower level selected from 0.0001% 0.005%, 0.001%, 0.005%, 0.01%, 0.05%, 0.1%, 0.2%, 0.3%, 0.4%, 0.5%, 0, 6%, 0.7%, 0.8%, 0.9%, 1.0%, 1.1%, 1.2%, 1.3%, 1.4%, 1.5%, 1, 6%, 1.7%, 1.8%, 1.9% and 2.0%, and a higher level selected from 3%, 3.5%, 4%, 4.5%, 5%, 5, 5%, 6%, 6.5%, 7%, 7.5%, 8%, 8.5%, 9%, 9.5%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75 , 80%, 85%, 90% and 95% by weight of the composition. According to an even more particular embodiment, the intra- or peri-ocular implant according to the present invention comprises at least one phosphodiesterase inhibitor as defined in one of claims 3 or 4, and optionally a calcium chelator, in particularly EDTA, wherein the concentration of the phosphodiesterase inhibitor ranges from 0.00001% to 95%. According to a still more particular embodiment, in the intra- or peri-ocular implant according to the present invention, the phosphodiesterase inhibitor is sildenafil.

Selon un autre mode de réalisation, les produits constitués d'inhibiteurs de phosphodiestérase pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale peuvent être utilisés en combinaison avec un chélateur de calcium. Par « chélateur de calcium », on désigne les composés qui ont la capacité de fixer des cations métalliques, et en particulier le calcium sous sa forme Ca2+, en constituant un complexe stable. La chélation de ces cations perturbe l'activité d'enzymes qui utilisent des métaux lors de la catalyse des substrats. Un chélateur de calcium constitue par conséquent un inhibiteur d'enzyme Ca2+ dépendante, notamment des phosphodiestérases dont l'activité enzymatique nécessite la présence de ce cation divalent. Le calcium est un bloqueur du canal cGMP dépendant des photorecepteurs. Le Ca2+ est également un bloqueur des canaux dépendants du cGMP, sa chélation permet d'augmenter la dépolarisation des photorécepteurs.In another embodiment, phosphodiesterase inhibitor products for use in vision rehabilitation therapy in a blind or legally blind person may be used in combination with a calcium chelator. By "calcium chelator" is meant those compounds which have the ability to bind metal cations, and in particular calcium in its Ca 2+ form, constituting a stable complex. Chelation of these cations disrupts the activity of enzymes that use metals during catalysis of substrates. A calcium chelator is therefore a Ca2 + dependent enzyme inhibitor, including phosphodiesterases whose enzymatic activity requires the presence of this divalent cation. Calcium is a blocker of the cGMP channel dependent on photoreceptors. Ca2 + is also a blocker of the cGMP-dependent channels, its chelation can increase the depolarization of photoreceptors.

Selon un autre mode de réalisation plus particulier, le chélateur de calcium utilisé en combinaison avec les inhibiteurs de phosphodiestérase dans les produits de l'invention pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, est l'EDTA.According to another particular embodiment, the calcium chelator used in combination with the phosphodiesterase inhibitors in the products of the invention for use in the treatment of rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, is EDTA.

Par « EDTA », on désigne le composé dont la dénomination IUPAC est l'acide 2,2',2",2"'-(éthane-1,2-diyldinitrilo)tétraacétique. L'EDTA est un chélateur du Ca2+, par conséquent, en solution, il module les concentrations ioniques et notamment la concentration de Ca2+ libre et donc biologiquement disponible. Selon un autre mode de réalisation plus particulier, le chélateur de calcium utilisé en combinaison avec les inhibiteurs de phosphodiestérase dans les produits de l'invention pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, est l'EGTA. Par « EGTA », on désigne le composé dont la dénomination IUPAC est l'acide N,N,N',N'-bis(2-aminoéthyléther) éthylène glycol tétraacétique. L'EGTA est un chélateur du Ca2+, par conséquent, en solution, il module les concentrations ioniques et notamment la concentration de Ca2+ libre et donc biologiquement disponible. Selon encore un autre mode de réalisation, les produits constitués d'inhibiteurs de phosphodiestérase pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale peuvent être utilisés en association avec un procédé de restauration de la vision choisi parmi la transplantation de cellules souches, les implants (prothèses rétiniennes), la thérapie optogénétique ou la thérapie génique classique. Par « implant ou prothèse rétinienne », on désigne les dispositifs électroniques permettant de stimuler électriquement les cellules rétiniennes. Le dispositif contient des électrodes qui délivrent des courants au contact ou dans le tissu rétinien résiduel pour modifier l'activité électrique des neurones et ainsi induire une perception visuelle. Par « thérapie optogénétique », on désigne la modification génétique des cellules rétiniennes résiduelles pour les rendre réactives à la lumière. L'illumination de ces cellules ainsi modifiées permet alors soit de les activer soit de bloquer leur activité. Dans le cadre de la présente invention, des photorécepteurs devenus inactifs peuvent recevoir un gène hexogène codant pour un pigment, notamment une rhodopsine ou opsine d'origine humaine ou bactérienne. En particulier, l'opsine choisie pourra être une opsine contrôlant l'ouverture d'un canal ionique comme la channerhodopsine-2 ou une pompe ionique comme l'halorhodopsine (pompe à ions chlorure). Dans le cas de l'halorhodopsine, l'illumination des photorécepteurs ou autres neurones exprimant cette pompe à ions chlorure va induire son activation et l'hyperpolarisation des cellules voire une dépolarisation pour les cellules bipolaires ON. La modification du potentiel de membranes des cellules exprimant la protéine modifie la libération du neuromédiateur par le neurone ou le photorécepteur, signal qui se propage, au travers du nerf optique, vers le cerveau. La présente invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant comme principe actif au moins un inhibiteur de phosphophodiestérase et/ou d'activateur d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase et un chélateur de calcium, en particulier 1'EDTA, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. La présente invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant comme principe actif au moins un inhibiteur de phosphophodiestérase et/ou d'activateur d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase et un chélateur de calcium, en particulier 1'EGTA, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. Par « véhicule pharmaceutiquement acceptable », on désigne les composés entrant la formulation des compositions pharmaceutique de l'invention et qui n'interfère pas avec l'activité ou la biodisponibilité des principes actifs. Ces composés peuvent notamment être des agents de charge, des conservateurs, des lubrifiants mais ne doivent pas être restreints à cette classe de composés. Selon un mode de réalisation particulier, la composition pharmaceutique selon l'invention, comprend comme principe actif un inhibiteur de phosphodiestérase et un chélateur de calcium, en particulier 1'EDTA, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable.By "EDTA" is meant the compound whose IUPAC name is 2,2 ', 2 ", 2"' - (ethane-1,2-diyldinitrilo) tetraacetic acid. EDTA is a chelator of Ca2 +, therefore, in solution, it modulates the ionic concentrations and in particular the concentration of free Ca2 + and thus biologically available. According to another particular embodiment, the calcium chelator used in combination with the phosphodiesterase inhibitors in the products of the invention for use in the treatment of rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, is EGTA. "EGTA" denotes the compound whose IUPAC name is N, N, N ', N'-bis (2-aminoethylether) ethylene glycol tetraacetic acid. EGTA is a chelator of Ca2 +, therefore, in solution, it modulates the ionic concentrations and in particular the concentration of free Ca2 + and therefore biologically available. According to yet another embodiment, the products consisting of phosphodiesterase inhibitors for use in the treatment of rehabilitation of vision in a blind person or with legal blindness can be used in combination with a method of restoring the chosen vision. among stem cell transplantation, implants (retinal prostheses), optogenetic therapy or conventional gene therapy. By "implant or retinal prosthesis" is meant electronic devices for electrically stimulating retinal cells. The device contains electrodes that deliver currents to contact or residual retinal tissue to modify the electrical activity of the neurons and thereby induce visual perception. By "optogenetic therapy" is meant the genetic modification of residual retinal cells to render them reactive to light. The illumination of these cells thus modified then makes it possible either to activate them or to block their activity. In the context of the present invention, photoreceptors which have become inactive can receive a hexogen gene coding for a pigment, in particular a rhodopsin or opsin of human or bacterial origin. In particular, the opsin chosen may be an opsin controlling the opening of an ion channel such as channerhodopsin-2 or an ion pump such as halorhodopsin (chloride ion pump). In the case of halorhodopsin, the illumination of the photoreceptors or other neurons expressing this chloride ion pump will induce its activation and the hyperpolarization of the cells or even a depolarization for bipolar ON cells. Modification of the membrane potential of the cells expressing the protein modifies the release of the neuromediator by the neuron or the photoreceptor, a signal that propagates through the optic nerve to the brain. The present invention also relates to a pharmaceutical composition comprising as active ingredient at least one phosphophodiesterase inhibitor and / or activator of adenylate cyclase and / or guanylate cyclase and a calcium chelator, in particular EDTA, in combination with a pharmaceutically acceptable vehicle. The present invention also relates to a pharmaceutical composition comprising as active ingredient at least one phosphophodiesterase inhibitor and / or adenylate cyclase activator and / or guanylate cyclase and a calcium chelator, in particular EGTA, in combination with a pharmaceutically acceptable vehicle. By "pharmaceutically acceptable carrier" is meant compounds entering the formulation of the pharmaceutical compositions of the invention and which does not interfere with the activity or bioavailability of the active ingredients. These compounds may especially be bulking agents, preservatives, lubricants but must not be restricted to this class of compounds. According to a particular embodiment, the pharmaceutical composition according to the invention comprises, as active ingredient, a phosphodiesterase inhibitor and a calcium chelator, in particular EDTA, in combination with a pharmaceutically acceptable vehicle.

La proportion de chélateur de calcium, en particulier 1'EDTA ou 1'EGTA, dans la composition pharmaceutique peut varier de 0,0010% à 0,050% en poids de la composition. En particulier, la proportion de chélateur de calcium, en particulier 1'EDTA ou 1'EGTA, dans la composition pharmaceutique peut varier dans une gamme ayant un niveau inférieur choisi parmi 0,0010%, 0,0015%, 0,0020%, 0,0025%, 0,0030%, 0,0035%, 0,0040%, 0,0045%, 0,0050%, 0,0055%, 0,0060%, 0,0065%, 0,0070%, 0,0075%, 0,0080%, 0,0085%, 0,0090%, 0,0095%, et un niveau supérieur choisi parmi 0,01%, 0,015%, 0,020%, 0,025%, 0,030%, 0,035%, 0,040%, 0,045% et 0,050% en poids de la composition.The proportion of calcium chelator, particularly EDTA or EGTA, in the pharmaceutical composition can range from 0.0010% to 0.050% by weight of the composition. In particular, the proportion of calcium chelator, particularly EDTA or EGTA, in the pharmaceutical composition may vary within a range having a lower level selected from 0.0010%, 0.0015%, 0.0020%, 0.0025%, 0.0030%, 0.0035%, 0.0040%, 0.0045%, 0.0050%, 0.0055%, 0.0060%, 0.0065%, 0.0070%, 0.0075%, 0.0080%, 0.0085%, 0.0090%, 0.0095%, and a higher level selected from 0.01%, 0.015%, 0.020%, 0.025%, 0.030%, 0.035% , 0.040%, 0.045% and 0.050% by weight of the composition.

Dans la composition pharmaceutique selon la présente invention, la proportion en poids dudit inhibiteur de phosphophodiestérase est comprise de 0,0001% et 95%, en particulier de 0,01% à 10%. 10 90% et 95% en poids de la composition. Plus particulièrement, dans la composition pharmaceutique selon la présente invention, ledit inhibiteur de phosphophodiestérase est choisi parmi : l'acetildenafil, l'aidenafil, l'avanafil, l'icariin, le lodenafil, le mirodenafil, le nitrosoprodenafil, le 15 sildenafil, le sulfoaildenafil, le tadalafil, le thiomethisosildenafil, le vardenafil, l'udenafil, le zaprinast, la vimpocetine, le 2-EHNA, le cilostamide, le rolipram, YM976, le dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. Encore plus particulièrement, la composition pharmaceutique selon la présente invention comprend comme principe actif au moins un inhibiteur de phosphodiestérase et 20 un chélateur de calcium, en particulier 1'EDTA, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable, dans laquelle la proportion en poids dudit inhibiteur de phosphodiestérase est comprise de 0,0001% à 95%, en particulier de 0,01% à 10%, et dans laquelle ledit inhibiteur de phosphodiestérase est choisi parmi : l'acetildenafil, l'aidenafil, l'avanafil, l'icariin, le lodenafil, le mirodenafil, le nitrosoprodenafil, le 25 sildenafil, le sulfoaildenafil, le tadalafil, le thiomethisosildenafil, le vardenafil, l'udenafil, le zaprinast, la vimpocetine, le 2-EHNA, le cilostamide, le rolipram, YM976, le dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. Encore plus particulièrement, dans la composition pharmaceutique selon la présente invention, ledit inhibiteur de phosphophodiestérase est le sildenafil. 30 Selon un mode de réalisation particulier, la composition pharmaceutique selon l'invention, comprend comme principe actif un activateur d'adénylate cyclase et un chélateur de calcium, en particulier 1'EDTA, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. La proportion de l'inhibiteur de phosphodiestérase dans la composition pharmaceutique peut varier dans une gamme ayant un niveau inférieur choisi parmi 0,0001%, 0,005%, 0,001%, 0,005%, 0,01%, 0,05%, 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1,0%, 1,1%, 1,2%, 1,3%, 1,4% , 1,5%, 1,6%, 1,7%, 1,8%, 1,9% et 2,0%, et un niveau supérieur choisi parmi 3%, 3,5%, 4%, 4,5%, 5%, 5,5%, 6%, 6,5%, 7 %, 7,5%, 8%, 8,5%, 9%, 9,5%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, Dans la composition pharmaceutique selon la présente invention, l'activateur d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase est choisi parmi les composés suivants : la forskoline, BAY 60-2770, BAY 41-8543, BAY 60-4552; BAY 41-2272; Cinaciguat (BAY 58-2667); 3-(5'-Hydroxymethy1-2`-fury1)-1-benzyl indazole (YC-1), en particulier la forskoline. Il est également envisageable de combiner les produits de l'invention avec d'autres modes de traitement thérapeutique des cellules photoréceptrices. Ces associations visent à potentialiser les effets bénéfiques de chacune des thérapies afin de donner aux patients un plus grand confort de vision susceptible de l'aider dans ses tâches au quotidien. La présente invention concerne également une association thérapeutique comprenant au moins un inhibiteur de phosphophodiestérase et/ou un activateur d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase tel que défini précédemment et : - un chélateur de calcium, en particulier l'EDTA, ou - des cellules souches non embryonnaires, ou - des implants (prothèses rétiniennes), ou - des gènes pour la mise en oeuvre d'une thérapie optogénétique ou d'une thérapie génique classique, en tant que combinaison pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps pour le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs. Par « cellules souches non embryonnaires », on désigne les cellules pluripotentes, totipotentes ou encore les cellules engagées dans un protocole de dédifférenciation cellulaire et qui se distinguent des cellules ES d'origine embryonnaire. Ces cellules peuvent également être appelées cellules progénitrices. Leur origine tissulaire peut être variée. Il est également envisageable d'utiliser des cellules souches embryonnaires autologues, hétérologues ou allogéniques. Par « thérapie génique classique », on désigne l'opération qui consiste à remplacer 30 un gène humain défectueux ou absent dans une cellule par un gène fonctionnel humain ou non humain comme les gènes de protéines optogénétiques. On désigne également l'opération qui consiste à invalider l'expression d'un gène délétère d'une cellule, notamment par l'utilisation de siRNA ou toute autre technique équivalente bien connue de l'homme du métier. Selon un mode de réalisation particulier, les associations thérapeutiques selon la présente invention comprennent au moins un inhibiteur de phosphophodiestérase et - un chélateur de calcium, en particulier l'EDTA, ou - des cellules souches non embryonnaires, ou - des implants (prothèses rétiniennes), ou - des gènes pour la mise en oeuvre d'une thérapie optogénétique ou d'une thérapie génique classique, en tant que combinaison pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps pour le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs. Selon un mode de réalisation plus particulier, l'association thérapeutique selon la présente invention comprend au moins un inhibiteur de phosphodiestérase tel que défini précédemment et : - un chélateur de calcium, en particulier l'EDTA, ou - des cellules souches non embryonnaires, ou - des implants (prothèses rétiniennes), ou - des gènes pour la mise en oeuvre d'une thérapie optogénétique ou d'une thérapie génique classique. en tant que produit de combinaison pour son utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs, dans laquelle ledit inhibiteur de phosphophodiestérase est choisi parmi : l'acetildenafil, l'aidenafil, l'avanafil, l'icariin, le lodenafil, le mirodenafil, le nitrosoprodenafil, le sildenafil, le sulfoaildenafil, le tadalafil, le thiomethisosildenafil, le vardenafil, l'udenafil, le zaprinast, la vimpocetine, le 2-EHNA, le cilostamide, le rolipram, YM976, le dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021.In the pharmaceutical composition according to the present invention, the weight proportion of said phosphophodiesterase inhibitor is from 0.0001% to 95%, in particular from 0.01% to 10%. 90% and 95% by weight of the composition. More particularly, in the pharmaceutical composition according to the present invention, said phosphophodiesterase inhibitor is chosen from: acetildenafil, aidenafil, avanafil, icariin, lodenafil, mirodenafil, nitrosoprodenafil, sildenafil, sulfoaildenafil, tadalafil, thiomethisosildenafil, vardenafil, udenafil, zaprinast, vimpocetine, 2-EHNA, cilostamide, rolipram, YM976, dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. Even more particularly, the pharmaceutical composition according to the present invention comprises as active ingredient at least one phosphodiesterase inhibitor and a calcium chelator, in particular EDTA, in combination with a pharmaceutically acceptable carrier, in which the proportion by weight of said inhibitor phosphodiesterase is from 0.0001% to 95%, in particular from 0.01% to 10%, and wherein said phosphodiesterase inhibitor is selected from: acetildenafil, aidenafil, avanafil, icariin lodenafil, mirodenafil, nitrosoprodenafil, sildenafil, sulfoaildenafil, tadalafil, thiomethisosildenafil, vardenafil, udenafil, zaprinast, vimpocetin, 2-EHNA, cilostamide, rolipram, YM976, dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. Even more particularly, in the pharmaceutical composition according to the present invention, said phosphophodiesterase inhibitor is sildenafil. According to one particular embodiment, the pharmaceutical composition according to the invention comprises, as active ingredient, an adenylate cyclase activator and a calcium chelator, in particular EDTA, in combination with a pharmaceutically acceptable vehicle. The proportion of the phosphodiesterase inhibitor in the pharmaceutical composition may vary within a range having a lower level selected from 0.0001%, 0.005%, 0.001%, 0.005%, 0.01%, 0.05%, 0.1. %, 0.2%, 0.3%, 0.4%, 0.5%, 0.6%, 0.7%, 0.8%, 0.9%, 1.0%, 1.1 %, 1.2%, 1.3%, 1.4%, 1.5%, 1.6%, 1.7%, 1.8%, 1.9% and 2.0%, and a level superior selected from 3%, 3.5%, 4%, 4.5%, 5%, 5.5%, 6%, 6.5%, 7%, 7.5%, 8%, 8.5% , 9%, 9.5%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 25%, 30%, 35% , 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, In the pharmaceutical composition according to the present invention, the adenylate cyclase activator and / or guanylate cyclase is selected from the following compounds: forskolin, BAY 60-2770, BAY 41-8543, BAY 60-4552; BAY 41-2272; Cinaciguat (BAY 58-2667); 3- (5'-Hydroxymethyl-2`-fury1) -1-benzylindazole (YC-1), in particular forskolin. It is also conceivable to combine the products of the invention with other modes of therapeutic treatment of photoreceptor cells. These associations aim to potentiate the beneficial effects of each of the therapies in order to give the patients a greater comfort of vision likely to help him in his daily tasks. The present invention also relates to a therapeutic combination comprising at least one phosphophodiesterase inhibitor and / or an adenylate cyclase and / or guanylate cyclase activator as defined above and: a calcium chelator, in particular EDTA, or non-embryonic stem cells, or - implants (retinal prostheses), or - genes for carrying out optogenetic therapy or conventional gene therapy, as a combination for its simultaneous, separate or spread use in the time for vision rehabilitation treatment in a person who is blind or legally blind, blindness being related to the degeneration and / or dysfunction of the photoreceptors. By "non-embryonic stem cells" is meant pluripotent or totipotent cells or cells engaged in a cell dedifferentiation protocol and which are distinguished from ES cells of embryonic origin. These cells can also be called progenitor cells. Their tissue origin can be varied. It is also conceivable to use autologous, heterologous or allogeneic embryonic stem cells. By "conventional gene therapy" is meant the operation of replacing a defective or missing human gene in a cell with a human or non-human functional gene such as optogenetic protein genes. It also refers to the operation of invalidating the expression of a deleterious gene of a cell, in particular by the use of siRNA or any other equivalent technique well known to those skilled in the art. According to a particular embodiment, the therapeutic combinations according to the present invention comprise at least one phosphophodiesterase inhibitor and - a calcium chelator, in particular EDTA, or - non-embryonic stem cells, or - implants (retinal prostheses) , or - genes for performing optogenetic therapy or conventional gene therapy, as a combination for simultaneous, separate or time-delayed use for vision rehabilitation treatment in a blind person or legal blindness, blindness being related to the degeneration and / or dysfunction of photoreceptors. According to a more particular embodiment, the therapeutic combination according to the present invention comprises at least one phosphodiesterase inhibitor as defined above and: a calcium chelator, in particular EDTA, or non-embryonic stem cells, or implants (retinal prostheses), or genes for the implementation of optogenetic therapy or conventional gene therapy. as a combination product for use in the treatment of rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, the blindness being related to the degeneration and / or dysfunction of photoreceptors, wherein said phosphophodiesterase inhibitor is selected among: acetildenafil, aidenafil, avanafil, icariin, lodenafil, mirodenafil, nitrosoprodenafil, sildenafil, sulfoaildenafil, tadalafil, thiomethisosildenafil, vardenafil, udenafil, zaprinast, vimpocetin, 2-EHNA, cilostamide, rolipram, YM976, dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021.

Selon un mode de réalisation encore plus particulier, dans les associations thérapeutiques selon la présente invention, ledit inhibiteur de phosphophodiestérase est choisi parmi : l'acetildenafil, l'aidenafil, l'avanafil, l'icariin, le lodenafil, le mirodenafil, le nitrosoprodenafil, le sildenafil, le sulfoaildenafil, le tadalafil, le thiomethisosildenafil, le vardenafil, l'udenafil, le zaprinast, la vimpocetine, le 2-EHNA, le cilostamide, le rolipram, YM976, le dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. Selon un autre mode de réalisation encore plus particulier, dans les associations thérapeutiques selon la présente invention, ledit inhibiteur de phosphophodiestérase est le sildenafil. La présente invention concerne également une association thérapeutique comprenant au moins un activateur d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase et : - un chélateur de calcium, en particulier l'EDTA, ou - des cellules souches non embryonnaires, ou - des implants (prothèses rétiniennes), ou - des gènes pour la mise en oeuvre d'une thérapie optogénétique ou d'une thérapie génique classique, en tant que combinaison pour son utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps pour le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs. Selon un autre mode de réalisation plus particulier, dans les produits selon la présente invention, ledit activateur d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase est choisi parmi : la forskoline, BAY 60-2770, BAY 41-8543, BAY 60-4552; BAY 41-2272; Cinaciguat (BAY 58-2667); 3-(5'-Hydroxymethyl-2'-furyl)-1-benzyl indazole (YC-1), en particulier la forskoline. Les figures et les exemples suivants servent à illustrer la présente invention mais ne doivent en aucun cas servir à en restreindre la portée.According to a still more particular embodiment, in the therapeutic combinations according to the present invention, said phosphophodiesterase inhibitor is chosen from: acetildenafil, aidenafil, avanafil, icariin, lodenafil, mirodenafil, nitrosoprodenafil , sildenafil, sulfoaildenafil, tadalafil, thiomethisosildenafil, vardenafil, udenafil, zaprinast, vimpocetine, 2-EHNA, cilostamide, rolipram, YM976, dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. According to another even more particular embodiment, in the therapeutic combinations according to the present invention, said phosphophodiesterase inhibitor is sildenafil. The present invention also relates to a therapeutic combination comprising at least one adenylate cyclase and / or guanylate cyclase activator and: - a calcium chelator, in particular EDTA, or - non-embryonic stem cells, or - implants ( retinal prostheses), or - genes for the implementation of optogenetic therapy or conventional gene therapy, as a combination for its simultaneous, separate or time-scale use for vision rehabilitation treatment in a person who is blind or legally blind, blindness being related to the degeneration and / or dysfunction of the photoreceptors. According to another more particular embodiment, in the products according to the present invention, said activator for adenylate cyclase and / or guanylate cyclase is chosen from: forskolin, BAY 60-2770, BAY 41-8543, BAY 60-4552 ; BAY 41-2272; Cinaciguat (BAY 58-2667); 3- (5'-Hydroxymethyl-2'-furyl) -1-benzylindazole (YC-1), in particular forskolin. The following figures and examples serve to illustrate the present invention but should in no way serve to restrict its scope.

Légendes des figures Figure 1 : Réponse à la lumière enregistrée par une électrode extracellulaire en présence ou absence de sildénafil sur un explant rétinien cultivé pendant 7 jours. Figure 1-A : Mesure d'un électrorétinogramme en condition basale lors de la stimulation lumineuse. - abscisse : temps écoulé après la stimulation (en seconde, s), - ordonnée : amplitude du signal (en Volt, V).Legends of the Figures Figure 1: Response to light recorded by an extracellular electrode in the presence or absence of sildenafil on a retinal explant cultured for 7 days. Figure 1-A: Measurement of an electroretinogram under basal conditions during light stimulation. - abscissa: time elapsed after the stimulation (in seconds, s), - ordinate: amplitude of the signal (in Volt, V).

Figure 1-B : Mesure de l'activité d'une cellule ganglionnaire de la rétine en condition basale. L'activité de la cellule est mesurée par la fréquence des potentiels d'action produits sous l'effet d'une stimulation lumineuse indiquée sur le graphe par la zone en gris. - abscisse : Temps (en seconde), - ordonnée : nombre de potentiels d'action par intervalle de 50 ms. Figure 1-C : Mesure de l'électrorétinogramme en condition sildénafil 10 iuM. La réponse à la lumière présente une modification importante de l'électrorétinogramme en présence de sildénafil par rapport à la réponse basale (cf. Fig.1A). - abscisse : temps écoulé après la stimulation (en seconde, s), - ordonnée : amplitude du signal (en Volt, V). Figure 1-D : Mesure de l'activité de la même cellule ganglionnaire de la rétine en condition sildénafil 10 iuM. La réponse à la lumière est indiquée par l'augmentation importante de la fréquence de décharge des potentiels d'action pendant la période d'illumination (zone en gris). - abscisse : Temps (en seconde), - ordonnée : nombre de potentiels d'action sur une durée de 50 ms. Figure 1-E : Spectre des réponses à la lumière enregistrées sur les cellules ganglionnaires d'un explant rétinien cultivé in vitro pendant 1 jour. Les explants rétiniens sont stimulés à la lumière à différentes longueurs d'ondes, sur une gamme s'étendant de 400 nm à 650 nm en présence de Sildenafil - abscisse : longueur d'onde de la lumière (en nanomètre, nm), - ordonnée : cadence des fréquences (en Hertz, Hz). Figure 1-F : Spectre des réponses à la lumière sur les cellules ganglionnaires d'un explant rétinien cultivé in vitro pendant 7 jours. Les explants rétiniens sont stimulés à la lumière à différentes longueurs d'ondes, sur une gamme s'étendant de 400 nm à 650 nm. - abscisse : longueur d'onde de la lumière (en nanomètre, nm), - ordonnée : cadence des fréquences (en Hertz, Hz).Figure 1-B: Measurement of the activity of a retinal ganglion cell under basal conditions. The activity of the cell is measured by the frequency of the action potentials produced under the effect of a light stimulation indicated on the graph by the gray zone. - abscissa: Time (in seconds), - ordinate: number of action potentials per interval of 50 ms. Figure 1-C: Measurement of the electroretinogram under sildenafil condition 10 iuM. The response to light shows a significant modification of the electroretinogram in the presence of sildenafil compared with the basal response (see Fig.1A). - abscissa: time elapsed after the stimulation (in seconds, s), - ordinate: amplitude of the signal (in Volt, V). Figure 1-D: Measurement of activity of the same retinal ganglion cell in 10 μM sildenafil condition. The response to light is indicated by the significant increase in the discharge frequency of the action potentials during the illumination period (gray area). - abscissa: Time (in seconds), - ordinate: number of action potentials over a period of 50 ms. Figure 1-E: Spectrum of light responses recorded on ganglion cells of a retinal explant cultured in vitro for 1 day. The retinal explants are stimulated with light at different wavelengths, over a range extending from 400 nm to 650 nm in the presence of Sildenafil - abscissa: wavelength of light (in nm, nm), - ordinate : Frequency rate (in Hertz, Hz). Figure 1-F: Spectrum of light responses on ganglion cells of a retinal explant cultured in vitro for 7 days. The retinal explants are stimulated with light at different wavelengths, over a range extending from 400 nm to 650 nm. - abscissa: wavelength of the light (in nanometer, nm), - ordinate: rate of the frequencies (in Hertz, Hz).

Figure 2 : Quantification des réponses à la lumière de cellules ganglionnaires de la rétine en présence ou absence de sildenafil. La réponse à la lumière est normalisée par rapport à l'activité cellulaire avant la stimulation. Pour ce rapport, la fréquence des potentiels d'action est mesurée sur une seconde avant et après le début de la stimulation lumineuse. En condition basale (C), l'activité des cellules ganglionnaires pendant la stimulation lumineuse est identique à celle avant la stimulation alors que l'application de sildenafil (S) produit une augmentation de l'activité pendant la stimulation lumineuse. L'application conjointe de sildenafil et de L-AP4 (S+L) supprime l'effet du sildenafil seul. - abscisse : conditions expérimentales à l'état basal (C), en présence de Sildénafil 10 1.1M (S), en présence de Sildénafil 10 1.1M + L-AP4 50 1.1M (S + L), - ordonnée : rapport [réponse à la lumière des cellules sous stimulation/ réponse des cellules à l'état basal]. Figure 3 : Quantification des réponses à la lumière de cellules ganglionnaires de la rétine en présence ou absence de sildenafil et d'EDTA. La réponse à la lumière est normalisée par rapport à l'activité cellulaire avant la stimulation. Pour ce rapport, la fréquence des potentiels d'action est mesurée sur une seconde avant et après le début de la stimulation lumineuse. En condition basale (C), l'activité des cellules ganglionnaires pendant la stimulation lumineuse est identique à celle avant la stimulation. Dans ce cas, l'application de sildenafil seul n'augmente pas l'activité des cellules ganglionnaires rétiniennes par contre l'application de sildenafil et EDTA (S+E) produit une augmentation de l'activité pendant la stimulation lumineuse. - abscisse : conditions expérimentales à l'état basal (C), sous Sildénafil 10 1.1M (S), sous Sildénafil 101.1M + EDTA 0,77 mM (S + E), - ordonnée : rapport [réponse à la lumière des cellules sous stimulation/ réponse des cellules à l'état basal].Figure 2: Quantification of responses to ganglion cell light of the retina in the presence or absence of sildenafil. The response to light is normalized to cell activity prior to stimulation. For this report, the frequency of the action potentials is measured on a second before and after the start of the light stimulation. Under basal conditions (C), the activity of ganglion cells during light stimulation is identical to that before stimulation while the application of sildenafil (S) produces an increase in activity during light stimulation. The combined application of sildenafil and L-AP4 (S + L) suppresses the effect of sildenafil alone. abscissa: experimental conditions in the basal state (C), in the presence of Sildenafil 1.1M (S), in the presence of Sildenafil 1.1M + L-AP4 50 1.1M (S + L), - ordinate: ratio [ light response of cells under basal stimulation / response of cells]. Figure 3: Quantification of retinal ganglion cell responses in the presence or absence of sildenafil and EDTA. The response to light is normalized to cell activity prior to stimulation. For this report, the frequency of the action potentials is measured on a second before and after the start of the light stimulation. Under basal conditions (C), ganglion cell activity during light stimulation is identical to that prior to stimulation. In this case, the application of sildenafil alone does not increase the activity of retinal ganglion cells, whereas the application of sildenafil and EDTA (S + E) produces an increase in activity during light stimulation. abscissa: experimental conditions in the basal state (C), under Sildenafil 1.1M (S), under Sildenafil 101.1M + EDTA 0.77 mM (S + E), - ordinate: ratio [response to the light of the cells under stimulation / response of cells to the basal state].

Exemples 1 - Matériels et méthodes 1.1 - Animaux Les yeux de singes cynomolgus (Macaca fascicularis) sont issus d'expériences réalisées en partenariat avec le laboratoire MIRCEN-CEA (Fontenay aux roses, France).Examples 1 - Materials and methods 1.1 - Animals The eyes of cynomolgus monkeys (Macaca fascicularis) come from experiments carried out in partnership with the MIRCEN-CEA laboratory (Fontenay aux roses, France).

Les expériences sont menées en conformité avec les recommandations sur l'utilisation éthique des animaux de la directive du Conseil de la Communauté Européenne (86/609/CEE). 1.2 - Préparation des cultures d'explant Des singes (Macaca fascicularis) sont sacrifiés en utilisant une dose mortelle d'anesthésique (isoflurane). Dans des conditions stériles, les yeux sont prélevés, désinfectés et nettoyés de tout tissu conjonctival. La sclère est perforée avec une aiguille puis découpée juste sous l'anneau limbique. La cornée, le cristallin et le corps vitré sont ensuite délicatement retirés de l'oeil à l'aide de pinces courbes. La coupe oculaire est ensuite placée dans un milieu CO2 indépendant pour son transport jusqu'à la salle de culture cellulaire. Les flacons contenant les yeux sont nettoyés et ouverts sous une hotte de culture. La neurorétine est séparée de l'ora serrata puis décollée de l'épithélium pigmentaire rétinien jusqu'à ce qu'elle ne soit retenue que par le nerf optique. Le nerf optique est coupé et la neurorétine est placée dans une boîte de Pétri contenant du milieu CO2 indépendant. Les explants rétiniens sont préparés à partir de fragments de rétine (25 mm2) déposés sur une membrane de polycarbonate (plaque 6 puits avec inserts perméables) avec les cellules ganglionnaires de la rétine orientées sur la face supérieure. Les explants rétiniens sont ensuite cultivés dans un milieu de culture NBA et placés dans une étuve à 37 °C et 5% de CO2. 1.3 - Enregistrements sur matrice d'électrodes (Multi-Electrode Array, MEA) Pour les enregistrements sur MEA, la membrane de polycarbonate est étroitement coupée autour des explants cultivés et placée sur une MEA. Une grille de platine en forme de U est ajoutée sur le dessus pour stabiliser la rétine au cours de l'expérimentation. Les enregistrements sont effectués dans le milieu Ames. Les enregistrements extracellulaires sont réalisés sur des MEA ou puces électroniques contenant 256 électrodes (MultiChannel System, Allemagne,). Les morceaux carrés de la rétine sont orientés avec la couche de cellules ganglionnaires au contact des puces MEA (électrode 30 iam de diamètre, avec 200 iam d'espacement inter-électrodes, selon un schéma de grille 16 x 16).The experiments are carried out in accordance with the recommendations on the ethical use of animals of the Council of the European Community Directive (86/609 / EEC). 1.2 - Preparation of explant cultures Monkeys (Macaca fascicularis) are sacrificed using a lethal dose of anesthetic (isoflurane). In sterile conditions, the eyes are removed, disinfected and cleaned of any conjunctival tissue. The sclera is perforated with a needle and then cut just below the limbic ring. The cornea, lens and vitreous are then gently removed from the eye with curved forceps. The ocular section is then placed in an independent CO2 medium for transport to the cell culture room. The vials containing the eyes are cleaned and opened under a culture hood. The neuroretin is separated from the ora serrata and then peeled off the retinal pigment epithelium until it is retained only by the optic nerve. The optic nerve is cut and the neuroretin is placed in a Petri dish containing independent CO2 medium. The retinal explants are prepared from retinal fragments (25 mm 2) deposited on a polycarbonate membrane (6-well plate with permeable inserts) with the retinal ganglion cells oriented on the upper side. The retinal explants are then cultured in an NBA culture medium and placed in an oven at 37 ° C and 5% CO2. 1.3 - Electrode Matrix (MEA) Recordings For MEA recordings, the polycarbonate membrane is closely cut around cultured explants and placed on an MEA. A U-shaped platinum grid is added on top to stabilize the retina during the experiment. The recordings are made in Ames medium. Extracellular recordings are made on MEA or electronic chips containing 256 electrodes (MultiChannel System, Germany,). The square pieces of the retina are oriented with the ganglion cell layer in contact with the MEA chips (30 μm diameter electrode, with 200 μm inter-electrode spacing, in a 16 × 16 grid pattern).

Pendant les séances d'enregistrement, les tissus rétiniens sont constamment baignés avec du milieu Ames maintenu à une température de 32-34°C (perfusion de 1 à 2 ml/min, pH 7,4 équilibré avec 95% d'02 et 5% de CO2). Pour obtenir des enregistrements stables, les séances d'enregistrement débutent une heure après que les tissus rétiniens aient été placés dans la chambre d'enregistrement MEA. Les composés chimiques sont ajoutés directement au milieu de culture à l'aide d'un système de perfusion actif. Leurs effets sont généralement suivis pendant 5 à 40 minutes. Les signaux neuronaux extracellulaires sont recueillis à 25 kHz, et stockées pour une analyse hors-ligne. L'activité basale des cellules ganglionnaires de la rétine (CGR) est surveillée pendant les sessions expérimentales en utilisant les logiciels MC Rack (MCS) ou BioMEA (Bio-Logic). Tous les enregistrements sont ensuite soumis à un tri des pics hors-ligne en utilisant les logiciels Spike2 (DEC Co. UK) ou Sorter (Plexon Inc, USA) et l'analyse standard est effectuée à l'aide des logiciels Neuroexplorer (Nex Technologies, MA, USA) ou Spike2. La fréquence des décharges de potentiels d'action (potentiels d'action par seconde) est estimées pour chaque CGR en comptant le nombre de potentiels d'action dans une fenêtre mobile de 1 seconde et en divisant ce nombre par la largeur du bac. 1.4 - Stimulation des rétines isolées par la lumière Une source de lumière monochromatique (15 nm de bande passante, TILL Photonics Polychrome V, Agilent Technologies) est utilisée pour provoquer des flashs périodiques de lumière à des longueurs d'ondes définies. Une série de 10 flashs uniformes (2 sec) est appliquée pour chaque bande passante à travers le spectre visible de 400 à 650 nm (gamme d'intensité 1016 photons.cm-2.s-1 à 1018 photons.cm-2 s-1), avec des incréments de 10 nm mais des applications dans un ordre aléatoire. Les intensités lumineuses sont mesurées à l'aide d'un spectromètre (USB 4000, Ocean Optics) calibré avec une source radiométrique de référence (LS1-Cal, Ocean Optics). Le stimulus est généré par un logiciel adapté (Matlab, la société MathWorks et LabVIEW, National Instruments). 1.5 - Analyse statistique Les réponses à la lumière mesurées dans cette étude sont normalisées par rapport à la fréquence de décharge témoin obtenue pour une même cellule avant l'application des composés chimiques. L'analyse statistique est réalisée avec Prism 5 (GraphPad, La Jolla, CA, USA) en utilisant une analyse unidirectionnelle de variance (ANOVA) suivie par un test de comparaison multiple de Dunnett. Les valeurs P inférieures à 0,05 sont considérées comme significatives. 2 - Résultats 2.1 - Restauration d'une réponse à la lumière dans la rétine des primates. Lorsque les explants rétiniens de singe ont été enregistrés sur une matrice d'électrodes (MEA), une activité spontanée est observable sur plusieurs électrodes. Bien qu'une activité induite par la lumière semble présente dans le tissu et donc dans les photorécepteurs comme le suggère l'enregistrement de l'électrorétinogramme (A), aucune réponse à la lumière ne peut être détectée dans les cellules ganglionnaires de la rétine (B) en conditions contrôle. En effet, les fréquences de décharge des potentiels d'action au cours des stimulations lumineuses ne sont pas différentes de celle de l'activité spontanée mesurée avant la stimulation à l'état basal. Cependant, quand un inhibiteur de la phosphodiestérase, le citrate de sildénafil (10 1.1M, Sigma, France) est appliqué dans le bain, une augmentation de la fréquence de décharge est observée dans les cellules ganglionnaires de la rétine peu après la stimulation par la lumière (Figure 1D). Suite à l'application de sildénafil (10 1.1M) (figures 1-C et 1-D), l'électrorétinogramme montre également une plus grande onde positive (figure 1-C), suggérant une transmission des informations visuelles aux cellules postsynaptiques aux photorécepteurs. L'onde négative visible en conditions contrôle n'est pas modifiée suggérant que le signal des photorécepteurs n'a pas été modifié par le sildenafil (figure 1-C).During the recording sessions, the retinal tissues are constantly bathed with Ames medium maintained at a temperature of 32-34 ° C (infusion of 1 to 2 ml / min, pH 7.4 equilibrated with 95% of O 2 and 5 % of CO2). To obtain stable recordings, the recording sessions begin one hour after the retinal tissues have been placed in the MEA recording chamber. The chemical compounds are added directly to the culture medium using an active infusion system. Their effects are usually followed for 5 to 40 minutes. Extracellular neuronal signals are collected at 25 kHz, and stored for off-line analysis. The basal ganglion cell activity of the retina (RGC) is monitored during the experimental sessions using MC Rack (MCS) or BioMEA (Bio-Logic) software. All records are then sorted off-line using Spike2 software (DEC Co. UK) or Sorter (Plexon Inc, USA) and standard analysis is performed using Neuroexplorer software (Nex Technologies , MA, USA) or Spike2. The frequency of action potential discharges (action potentials per second) is estimated for each RGC by counting the number of action potentials in a moving window by 1 second and dividing this number by the width of the bin. 1.4 - Stimulation of light-insulated retinas A monochromatic light source (15 nm bandwidth, TILL Photonics Polychrome V, Agilent Technologies) is used to cause periodic flashes of light at defined wavelengths. A series of 10 uniform flashes (2 sec) is applied for each bandwidth across the visible spectrum from 400 to 650 nm (intensity range 1016 photons.cm-2.s-1 to 1018 photons.cm-2 s- 1), with increments of 10 nm but applications in a random order. The light intensities are measured using a spectrometer (USB 4000, Ocean Optics) calibrated with a reference radiometric source (LS1-Cal, Ocean Optics). The stimulus is generated by appropriate software (Matlab, MathWorks and LabVIEW, National Instruments). 1.5 - Statistical analysis The light responses measured in this study are normalized with respect to the control discharge frequency obtained for the same cell before the application of the chemical compounds. Statistical analysis is performed with Prism 5 (GraphPad, La Jolla, CA, USA) using a one-way analysis of variance (ANOVA) followed by a Dunnett multiple comparison test. P values less than 0.05 are considered significant. 2 - Results 2.1 - Restoration of a response to light in the retina of primates. When retinal monkey explants were recorded on an electrode array (MEA), spontaneous activity is observable on multiple electrodes. Although light-induced activity appears to be present in the tissue and thus in the photoreceptors as suggested by the electroretinogram recording (A), no response to light can be detected in retinal ganglion cells ( B) under control conditions. Indeed, the discharge frequencies of the action potentials during the light stimulations are not different from that of the spontaneous activity measured before the basal state stimulation. However, when a phosphodiesterase inhibitor, sildenafil citrate (10 μM, Sigma, France) is applied in the bath, an increase in the discharge frequency is observed in retinal ganglion cells shortly after stimulation by the light (Figure 1D). Following the application of sildenafil (10 1.1M) (Figures 1-C and 1-D), the electroretinogram also shows a larger positive wave (Figure 1-C), suggesting a transmission of visual information to postsynaptic cells at photoreceptors. The visible negative wave under control conditions is not modified suggesting that the photoreceptor signal has not been modified by sildenafil (Figure 1-C).

Le spectre des réponses induites par la lumière en présence de sildenafil varie en fonction du temps de culture in vitro des explants rétiniens. Lors de l'application de stimulations à la lumière à différentes longueurs d'onde (figures 1-E et 1-F), les réponses à la lumière sont détectables en présence de sildénafil dans des explants rétiniens gardés soit un jour en culture (figure 1-E) soit 7 jours en culture (figure 1-F). Après une journée de culture, le spectre des réponses à la lumière couvre l'ensemble du spectre de la lumière visible recouvrant ainsi les différentes sensibilités des trois photorécepteurs de type cônes alors que, après 7 jours de culture, le spectre des réponses à la lumière est limité à la sensibilité de la lumière bleue. 2.2 - Restauration bloc des réponses à la lumière par un bloqueur synaptique. Pour s'assurer que ces réponses à la lumière en présence de sildenafil sont issues des photorécepteurs, un bloqueur de la transmission synaptique a été appliqué dans le milieu de perfusion de la rétine. Comme ces réponses à la lumière étaient principalement des réponses dites de type ON à savoir une augmentation des décharges des potentiels d'action des cellules ganglionnaires de la rétine au début de l'illumination, nous avons appliqué un bloqueur sélectif de cette voie le L-AP4 (50 1.1M), un agoniste sélectif des récepteurs métabotropiques du glutamate de type III (Figure 2). Le récepteur mGluR6 est en effet exprimée dans les voies « ON » au niveau des dendrites des cellules bipolaires et est activé par cet agoniste. Lorsque cet agoniste est ajouté à la solution contenant le sildenafil, les réponses à la lumière des cellules ganglionnaires sont supprimées. La quantification des réponses confirme cette observation. Pour cette quantification, la fréquence de décharge des potentiels d'action dans les cellules ganglionnaires de la rétine est mesurée pendant une seconde après le début de l'illumination et rapportée à l'activité spontanée de ces cellules avant l'application de la stimulation lumineuse. Ce rapport redevient proche de 100% comme dans les conditions contrôles alors que l'application de sildénafil avait augmenté ce ratio de manière statistiquement significative. L'application de l'inhibiteur L-AP4 a non seulement supprimé cette augmentation de l'activité des cellules ganglionnaires de la rétine mais semble également révéler une faible composante OFF induite par le sildenafil comme le suggère le ratio légèrement inférieur à 100%. Par ailleurs, lors de l'enregistrement des réponses de l'électrorétinogramme, une petite réponse négative a pu être observée dans les conditions à l'état basal (figure 1-A) alors que l'utilisation du sildenafil induit une forte réponse positive (figure 1-C), suggérant ainsi que le sildénafil augmente l'amplitude de la réponse des cellules bipolaires. L'enregistrement de l'électrorétinogramme confirme que l'utilisation d'inhibiteurs de PDE comme le sildénafil restaure une réponse à la lumière dans une rétine insensible à la lumière. 2.3 - Restauration d'une réponse à la lumière par un chélateur de Ca2+. Lorsqu'aucune réponse à la lumière n'était détectable, même en présence de sildénafil dans le milieu de culture des explants rétiniens, un chélateur de Ca2+, l'EDTA (0,77 mM, instituant une concentration finale de Ca2+ de 0,1 mM dans le milieu), a été rajouté dans la chambre d'enregistrement avec le sildénafil. L'amplitude de la réponse à la lumière des cellules ganglionnaires de la rétine est rapportée à l'activité spontanée de ces cellules avant la stimulation lumineuse. Ce rapport reste proche de 100% dans des conditions contrôles indiquant l'absence de réponse à la lumière. Dans certaines expériences, le sildénafil n'a pas augmenté ce ratio au-delà de 100%. L'ajout d'EDTA en combinaison avec le sildénafil restaure par contre une réponse à la lumière des cellules ganglionnaires de la rétine portant ainsi le ratio à une valeur supérieure et statistiquement significative des 100%. Ces résultats montrent que les réponses à la lumière ont été récupérées dans de nombreuses cellules ganglionnaires de la rétine (figure 3). L'ensemble des résultats présentés suggère que l'inhibition de l'hydrolyse du GMPc ou de l'AMPc respectivement en GMP ou AMP par des inhibiteurs de PDE comme le sildénafil, et/ou la chélation du Ca2+ avec des composés tels que l'EDTA permettent d'augmenter ou de restaurer une réponse à la lumière dans la rétine des primates. Cette stratégie pourrait être appliquée chez les patients ayant perdu leurs réponses à la lumière tels que des patients atteints de rétinite pigmentaire ou de dégénérescence maculaire liée à l'âge. Cette stratégie pourrait également être appliquée pour accroitre les réponses à la lumière restaurées par des approches de type optogénétique ou par l'implantation de prothèses rétiniennes. Pour démontrer l'intérêt des activateurs de la guanylate ou l'adenylate cyclase ou d'autres inhibiteurs de phosphodiesterase, les expériences décrites ci-dessus pour le sildenafil sont reproduites avec ces différentes molécules. Pour valider ces traitements pharmacologiques pour des rétines en état de dégénérescence, les mesures décrites ci- dessus sur une rétine primates en culture sont également réitérées sur des rétines isolées d'animaux aveugles ou très mal-voyants (souris rdl, rat P23H). L'enregistrement des rétines est réalisé sur une matrice d'électrodes et la réponse des cellules ganglionnaires est mesurée en absence puis en présence des molécules dans le milieu d'enregistrement. La pertinence du traitement est mesurée par l'induction d'une réponse à la lumière dans des cellules ganglionnaires. Pour vérifier si le traitement peut effectivement être appliqué in vivo et permettre de restaurer une certaine fonction visuelle, des animaux aveugles ou très mal-voyants (rat P23H ou souris rdl) sont soumis à des tests de fonction visuelle comme le test optomoteur ou la mesure de l'électrorétinogramme. Ces tests sont réalisés en l'absence de tout traitement puis après application du traitement à base d'inhibiteurs de phosphodiesterase ou d'activateurs de guanylate ou adenylate cyclase. Pour le test in vivo, l'augmentation des performances visuelles est indiquée par une augmentation du suivi de la rotation du tambour ou une augmentation de l'acuité visuelle. Dans le cas de l'électrorétinogramme, l'augmentation des performances visuelles est indiquée par l'augmentation des amplitudes de ce signal électrophysiologique. Ces différents tests sont réalisés sur des animaux sans traitement ou sur des animaux dont la rétine a reçu l'injection d'un vecteur viral de thérapie optogénétique pour restaurer une certaine fonction visuelle. 2.3.1 - Electrorétinogramme L'animal est anesthésié avec un mélange Kétamine 500 (Virbac France) (100 mg/kg) et Rompun 2% (bayer) (Xylazine 10 mg/kg). Ses yeux sont dilatés avec une goutte de mydriaticum 0.5% (Théa) (tropicamide) puis également anesthésiés avec un goutte du Chlorhydrate d'oxybuprocaïne (Théa) (1.6mg/0.4m1). Une fois anesthésié, l'animal est préparé pour l'enregistrement. Une électrode d'or annulaire, Lubrital (Vetxx), est positionnée sur la cornée puis des aiguilles sous-cutanées sont placées pour les références et la terre. L'animal est ensuite inséré dans un Ganzfeld ou exposé devant un écran de LEDs (e.g. SIEM Médical, Nimes, France). Des flashs lumineux sont ensuite délivrés dans une gamme d'intensité de 3.10-5 à 10 cd.s.m2. Les enregistrements sont réalisés dans une bande passante de 0.3 à 300Hz. Les flashs sont espacés de 30 secondes. Les amplitudes et les temps de culminations sont mesurés sur les pics de l'onde a et de l'onde b. Pour les potentiels oscillatoires (OPs) l'intensité du flash est de 3 cd.s/m2 filtrés de 100 à 300Hz. En conditions photopiques, 10 flashs de 10 cd.s/m2 sont appliqués après 10 minutes d'adaptation à 25 cd.s/m2. Pour les pseudo-oscillations (flickers), les enregistrements sont faits à 10 et 20 Hz à une intensité de 3 cd.s/m2. 2.3.2 - Test optomoteur L'animal est placé sur la plateforme du système optomoteur tel que celui de Cerebral Mechanics INC (Canada). Un programme adapté permet de projeter sur 4 écrans des bandes verticales blanches et noires dont la taille est ajustée en fonction de la distance de l'animal à l'écran lui faisant face. Pour cet ajustement, une croix rouge est positionnée sur la tête de l'animal. La perception du déplacement ou rotation des barres induit chez l'animal un mouvement de poursuite du regard. Elle s'accompagne par conséquent d'un mouvement ou rotation de la tête à la vitesse angulaire du déplacement des barres. Suivant la taille des barres, une mesure d'acuité visuelle peut être estimée.The spectrum of light-induced responses in the presence of sildenafil varies with the in vitro culture time of the retinal explants. When light stimulations are applied at different wavelengths (FIGS. 1-E and 1-F), the responses to light are detectable in the presence of sildenafil in retinal explants kept one day in culture (FIG. 1-E) or 7 days in culture (Figure 1-F). After a day of cultivation, the spectrum of light responses covers the entire spectrum of visible light, thus covering the different sensitivities of the three cone-type photoreceptors, whereas, after 7 days of culture, the spectrum of responses to light is limited to the sensitivity of blue light. 2.2 - Block restoration of responses to light by a synaptic blocker. To ensure that these responses to light in the presence of sildenafil are derived from photoreceptors, a synaptic transmission blocker has been applied in the retinal perfusion medium. Since these responses to light were primarily so-called ON-type responses, ie an increase in the discharge of action potentials of retinal ganglion cells at the beginning of illumination, we applied a selective blocker of this pathway. AP4 (50 1.1M), a selective agonist of metabotropic glutamate receptors type III (Figure 2). The mGluR6 receptor is indeed expressed in the "ON" pathways in the dendrites of bipolar cells and is activated by this agonist. When this agonist is added to the solution containing sildenafil, the responses to ganglion cell light are suppressed. The quantification of the answers confirms this observation. For this quantification, the discharge frequency of the action potentials in the ganglion cells of the retina is measured for one second after the start of illumination and is related to the spontaneous activity of these cells before the application of the light stimulation. . This ratio becomes close to 100% as in the control conditions whereas the application of sildenafil increased this ratio in a statistically significant way. The application of the L-AP4 inhibitor not only suppressed this increase in retinal ganglion cell activity but also appears to reveal a weak sildenafil-induced OFF component as suggested by the ratio of slightly less than 100%. Moreover, when recording the responses of the electroretinogram, a small negative response could be observed under basal conditions (Figure 1-A) while the use of sildenafil induces a strong positive response ( Figure 1-C), suggesting that sildenafil increases the response amplitude of bipolar cells. The recording of the electroretinogram confirms that the use of PDE inhibitors such as sildenafil restores a response to light in a light-insensitive retina. 2.3 - Restoration of a response to light by a Ca2 + chelator. When no response to light was detectable, even in the presence of sildenafil in the culture medium of retinal explants, a Ca2 + chelator, EDTA (0.77 mM, establishing a final concentration of Ca2 + 0.1 mM in the middle), was added to the recording chamber with sildenafil. The amplitude of the response to light of ganglion cells of the retina is related to the spontaneous activity of these cells before light stimulation. This ratio remains close to 100% under control conditions indicating the absence of response to light. In some experiments, sildenafil did not increase this ratio beyond 100%. The addition of EDTA in combination with sildenafil restores, on the other hand, a response to the light of ganglion cells of the retina, thus bringing the ratio to a higher and statistically significant value of 100%. These results show that responses to light have been recovered in many retinal ganglion cells (Figure 3). All the results presented suggest that the inhibition of the hydrolysis of cGMP or cAMP respectively into GMP or AMP by PDE inhibitors such as sildenafil, and / or the chelation of Ca2 + with compounds such as EDTA can increase or restore a response to light in the retina of primates. This strategy could be applied to patients who have lost their light responses, such as patients with retinitis pigmentosa or age-related macular degeneration. This strategy could also be applied to increase responses to light restored by optogenetic-type approaches or the implantation of retinal prostheses. To demonstrate the interest of the activators of guanylate or adenylate cyclase or other phosphodiesterase inhibitors, the experiments described above for sildenafil are reproduced with these different molecules. To validate these pharmacological treatments for retinas in a state of degeneration, the measures described above on a primate retina in culture are also repeated on retinas isolated from animals that are blind or very visually impaired (mouse rd1, rat P23H). The recording of the retinas is performed on an electrode matrix and the response of the ganglion cells is measured in the absence and then in the presence of the molecules in the recording medium. The relevance of the treatment is measured by the induction of a response to light in ganglion cells. To check whether the treatment can actually be applied in vivo and to restore some visual function, blind or very partially sighted animals (rat P23H or mouse rdl) are subjected to visual function tests such as the optomotor test or measurement. electroretinogram. These tests are carried out in the absence of any treatment and after application of the treatment based on phosphodiesterase inhibitors or activators of guanylate or adenylate cyclase. For the in vivo test, the increase in visual performance is indicated by increased monitoring of drum rotation or increased visual acuity. In the case of the electroretinogram, the increase in visual performance is indicated by the increase of the amplitudes of this electrophysiological signal. These different tests are performed on animals without treatment or on animals whose retina has been injected with an optogenetic viral vector to restore a certain visual function. 2.3.1 - Electroretinogram The animal is anesthetized with a mixture Ketamine 500 (Virbac France) (100 mg / kg) and Rompun 2% (Bayer) (Xylazine 10 mg / kg). His eyes are dilated with a drop of 0.5% mydriaticum (Théa) (tropicamide) and then anesthetized with a drop of oxybuprocaine hydrochloride (Théa) (1.6mg / 0.4m1). Once anesthetized, the animal is prepared for registration. An annular gold electrode, Lubrital (Vetxx), is positioned on the cornea and then subcutaneous needles are placed for references and the ground. The animal is then inserted in a Ganzfeld or exposed in front of a LED screen (e.g. SIEM Medical, Nimes, France). Luminous flashes are then delivered in an intensity range of 3.10-5 to 10 cds.s.m2. The recordings are made in a bandwidth of 0.3 to 300Hz. The flashes are spaced 30 seconds apart. The amplitudes and culmination times are measured on the peaks of the wave a and the wave b. For oscillatory potentials (OPs) the flash intensity is 3 cd.s / m2 filtered from 100 to 300Hz. In photopic conditions, 10 flashes of 10 cd.s / m2 are applied after 10 minutes of adaptation to 25 cd.s / m2. For pseudo-flickers, recordings are made at 10 and 20 Hz at an intensity of 3 cd.s / m2. 2.3.2 - Optomotor test The animal is placed on the platform of the optomotor system such as that of Cerebral Mechanics INC (Canada). An adapted program allows to project on 4 screens vertical white and black bands whose size is adjusted according to the distance of the animal to the screen facing it. For this adjustment, a red cross is positioned on the head of the animal. The perception of the displacement or rotation of the bars induces in the animal a movement of pursuit of the gaze. It is therefore accompanied by a movement or rotation of the head at the angular speed of the movement of the bars. Depending on the size of the bars, a measure of visual acuity can be estimated.

Claims (3)

REVENDICATIONS1. Produits constitués d'inhibiteurs de phosphodiestérase et/ou d'activateurs d'adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase pour leur utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs.REVENDICATIONS1. Products consisting of inhibitors of phosphodiesterase and / or activators of adenylate cyclase and / or guanylate cyclase for use in the treatment of rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, blindness being related to the degeneration and / or dysfunction of photoreceptors. 2. Produits pour leur utilisation selon la revendication 1, lesdits produits étant constitués d'activateurs d' adénylate cyclase et/ou de guanylate cyclase, notamment choisis parmi : la forskoline, BAY 60-2770, BAY 41-8543, BAY 60-4552, BAY 41-2272, Cinaciguat (BAY 58-2667),2. Products for their use according to claim 1, said products being constituted by activators of adenylate cyclase and / or guanylate cyclase, especially chosen from: forskolin, BAY 60-2770, BAY 41-8543, BAY 60-4552 , BAY 41-2272, Cinaciguat (BAY 58-2667), 3-(5'-Hydroxymethy1-2`-furyl)-1-benzyl 3.4. 5. 6. indazole (YC-1), en particulier la forskoline. Produits pour leur utilisation selon la revendication 1, lesdits produits étant constitués d'inhibiteurs de phosphodiestérase, notamment de la phosphodiestérase 5 et/ou la phosphodiestérase 6, notamment choisis parmi l'acetildenafil, l'aidenafil, l'avanafil, l'icariin, le lodenafil, le mirodenafil, le nitrosoprodenafil, le sildenafil, le sulfoaildenafil, le tadalafil, le thiomethisosildenafil, le vardenafil, l'udenafil, le zaprinast, la vimpocetine, le 2-EHNA, le cilostamide, le rolipram, YM976, le dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. Produits pour leur utilisation selon la revendication 3, dans laquelle ledit inhibiteur de phosphodiesterase est le sildenafil. Produits pour leur utilisation selon l'une des revendications 3 ou 4, en combinaison avec un chélateur de calcium, notamment choisi parmi l'EDTA ou l'EGTA. Composition pharmaceutique comprenant comme principe actif au moins un inhibiteur de phosphodiestérase et un chélateur de calcium, en particulier l'EDTA, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable, dans laquelle la proportion en poids dudit inhibiteur de phosphodiestérase est comprise de 0,0001% 7. 8. 20 25 9. 30 10. à 95%, en particulier de 0,01% à 10%, et dans laquelle ledit inhibiteur de phosphodiestérase est choisi parmi : l'acetildenafil, l'aidenafil, l'avanafil, l'icariin, le lodenafil, le mirodenafil, le nitrosoprodenafil, le sildenafil, le sulfoaildenafil, le tadalafil, le thiomethisosildenafil, le vardenafil, l'udenafil, le zaprinast, la vimpocetine, le 2-EHNA, le cilostamide, le rolipram, YM976, le dipyridamole, T1032, T-0156, E4021. Composition pharmaceutique selon la revendication 6, dans laquelle ledit inhibiteur de phosphodiestérase est le sildenafil. Association thérapeutique comprenant au moins un inhibiteur de phosphodiestérase tel que défini dans l'une des revendications 3 ou 4 et : - un chélateur de calcium, en particulier l'EDTA, ou - des cellules souches non embryonnaires, ou - des implants (prothèses rétiniennes), ou - des gènes pour la mise en oeuvre d'une thérapie optogénétique ou d'une thérapie génique classique. en tant que produit de combinaison pour son utilisation dans le traitement de réhabilitation de la vision chez une personne aveugle ou atteinte de cécité légale, la cécité étant liée à la dégénérescence et/ou au dysfonctionnement des photorécepteurs, dans laquelle ledit inhibiteur de phosphophodiestérase est choisi parmi : l'acetildenafil, l'aidenafil, l'avanafil, l'icariin, le lodenafil, le mirodenafil, le nitrosoprodenafil, le sildenafil, le sulfoaildenafil, le tadalafil, le thiomethisosildenafil, le vardenafil, l'udenafil, le zaprinast, la vimpocetine, le 2EHNA, le cilostamide, le rolipram, YM976, le dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. Association thérapeutique selon la revendication 8, dans laquelle ledit inhibiteur de phosphodiestérase est le sildenafil. Composition ophtalmique comprenant au moins un inhibiteur de phosphodiestérase tel que définis dans l'une des revendications 3 ou 4, et éventuellement un chélateur de calcium, en particulier l'EDTA, dans laquelle la concentration de l'inhibiteur dephosphodiestérase de ladite composition ophtalmologique varie de 0,00001% à 95%. 11. Composition ophtalmique selon la revendication 10, dans laquelle l'inhibiteur de phosphodiesterase est le sildénafil. 12. Implant intra- ou péri-oculaire comprenant au moins un inhibiteur de phosphodiestérase tels que définis dans l'une des revendications 3 ou 4, et éventuellement un chélateur de calcium, en particulier 1'EDTA, dans lequel la concentration de l'inhibiteur de phosphodiestérase varie de 0,00001% à 95%. 13. Implant intra- ou péri-oculaire selon la revendication 12, dans lequel l'inhibiteur de phosphodiestérase est le sildénafil.153- (5'-Hydroxymethyl-2-furyl) -1-benzyl 3.4. 5. 6. indazole (YC-1), especially forskolin. Products for their use according to claim 1, said products consisting of inhibitors of phosphodiesterase, in particular phosphodiesterase 5 and / or phosphodiesterase 6, chosen in particular from acetildenafil, aidenafil, avanafil, icariin, lodenafil, mirodenafil, nitrosoprodenafil, sildenafil, sulfoaildenafil, tadalafil, thiomethisosildenafil, vardenafil, udenafil, zaprinast, vimpocetine, 2-EHNA, cilostamide, rolipram, YM976, dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. Products for their use according to claim 3, wherein said phosphodiesterase inhibitor is sildenafil. Products for their use according to one of claims 3 or 4, in combination with a calcium chelator, especially chosen from EDTA or EGTA. Pharmaceutical composition comprising as active ingredient at least one phosphodiesterase inhibitor and a calcium chelator, in particular EDTA, in combination with a pharmaceutically acceptable vehicle, in which the proportion by weight of said phosphodiesterase inhibitor is 0.0001% 7 In which: said phosphodiesterase inhibitor is selected from: acetildenafil, aidenafil, avanafil, icariin, lodenafil, mirodenafil, nitrosoprodenafil, sildenafil, sulfoaildenafil, tadalafil, thiomethisosildenafil, vardenafil, udenafil, zaprinast, vimpocetine, 2-EHNA, cilostamide, rolipram, YM976, dipyridamole, T1032, T-0156, E4021. The pharmaceutical composition of claim 6, wherein said phosphodiesterase inhibitor is sildenafil. Therapeutic combination comprising at least one phosphodiesterase inhibitor as defined in one of claims 3 or 4 and: - a calcium chelator, in particular EDTA, or - non-embryonic stem cells, or - implants (retinal prostheses ), or - genes for carrying out optogenetic therapy or conventional gene therapy. as a combination product for use in the treatment of rehabilitation of vision in a blind or legally blind person, the blindness being related to the degeneration and / or dysfunction of photoreceptors, wherein said phosphophodiesterase inhibitor is selected among: acetildenafil, aidenafil, avanafil, icariin, lodenafil, mirodenafil, nitrosoprodenafil, sildenafil, sulfoaildenafil, tadalafil, thiomethisosildenafil, vardenafil, udenafil, zaprinast, vimpocetin, 2EHNA, cilostamide, rolipram, YM976, dipyridamole, T-1032, T-0156, E4021. The therapeutic combination of claim 8, wherein said phosphodiesterase inhibitor is sildenafil. Ophthalmic composition comprising at least one phosphodiesterase inhibitor as defined in one of Claims 3 or 4, and optionally a calcium chelator, in particular EDTA, in which the concentration of the phosphodiesterase inhibitor of said ophthalmological composition varies from 0.00001% to 95%. An ophthalmic composition according to claim 10, wherein the phosphodiesterase inhibitor is sildenafil. 12. Intra- or peri-ocular implant comprising at least one phosphodiesterase inhibitor as defined in one of claims 3 or 4, and optionally a calcium chelator, in particular EDTA, in which the concentration of the inhibitor phosphodiesterase ranges from 0.00001% to 95%. An intra- or periocular implant according to claim 12, wherein the phosphodiesterase inhibitor is sildenafil.