FR2958546A1 - Utilisation de glycopeptides riches en hydroxyproline de soja pour lutter contre l'apparition des rides - Google Patents
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Abstract
L'objet de l'invention est un principe actif cosmétique comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja, et les compositions cosmétiques anti-rides l'incluant. L'invention se rapporte également à l'utilisation cosmétique de HRGPs de fibres de soja ou d'un principe actif en contenant, pour lutter contre l'apparition des rides.
Description
UTILISATION DE GLYCOPEPTIDES RICHES EN HYDROXYPROLINE DE SOJA POUR LUTTER CONTRE L'APPARITION DES RIDES
La présente invention se rapporte à l'utilisation de molécules spécifiques issues de fibres de soja, ainsi qu'à un principe actif particulier contenant de telles molécules, pour combler et lutter efficacement contre l'apparition des rides. L'invention concerne également un procédé d'obtention de ce principe actif, les compositions l'incluant, et un procédé de traitement cosmétique anti-rides. La recherche du bien être et la quête de la jeunesse restent des préoccupations majeures dans nos sociétés. Beaucoup de personnes veulent pouvoir paraître jeunes le plus longtemps possible et cherchent à retarder et limiter l'apparition des signes extérieurs du vieillissement cutané : peau plus fine, sèche, ridée et qui perd son élasticité. Pour lutter contre les effets du temps sur la peau, il existe aujourd'hui de nombreux produits cosmétiques. Parmi ces produits, on peut citer notamment le palmitoyl-pentapeptide-3 ou le rétinol, qui présentent une efficacité anti-rides tout à fait satisfaisante.
Toutefois, ces produits sont obtenus par synthèse chimique. Ils ne correspondent donc pas forcément aux exigences actuelles pour des produits d'origine naturelle. Des soins anti-âge d'origine naturelle ont donc été développés en parallèle, en particulier des extraits de plantes, mais leur efficacité n'est pas toujours satisfaisante, et les consommateurs attendent un résultat anti-rides plus performant.
Il subsiste donc un besoin pour une solution cosmétique d'origine naturelle qui, appliquée sur la peau, procure un effet anti-rides au moins aussi performant que celui obtenu avec des produits de synthèse. Pour y répondre, la présente invention propose d'utiliser des molécules 5 spécifiques obtenues à partir de fibres de soja. On connaît déjà des principes actifs issus de soja pour des applications cosmétiques anti-âge. A titre d'exemple, on peut citer les demandes JP-2009084169, JP2008056664, JP-2008024703, JP2006213649 qui décrivent des compositions comprenant des hydrolysats de protéines de soja et 10 leur utilisation cosmétique pour lutter contre les signes du vieillissement cutané. Toutefois, l'objectif de la présente invention est de proposer un principe actif cosmétique spécifique différent, avec des molécules particulières, qui présente des performances anti-rides beaucoup plus importantes que celles jamais atteintes avec les actifs issus de soja de l'art antérieur, et ce même à plus faible 15 concentration. A cet effet, l'invention vise l'utilisation de glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja, ou d'un actif issu de fibres de soja contenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs), en tant que principe actif cosmétique anti-rides. 20 Par « glycopeptide » on entend un peptide portant un groupement de polysaccharides, et une chaîne peptidique. Cette chaîne peptidique est constituée de moins de 100 acides aminés. Par « glycopeptides riches en hydroxyproline » ou « HRGPs » on entend des glycopeptides dont la chaîne peptidique contient de l'hydroxyproline parmi les 25 acides aminés qui la constitue. La chaîne est fortement ramifiée sur l'hydroxyproline par des substituts carbohydrate o-glycosylés de longueur variable. Outre l'hydroxyproline, la chaîne peptidique contient aussi les acides aminés sérine, thréonine, alanine, lysine, tyrosine, valine et histidine, qui peuvent apparaître en courtes séquences répétitives. L'invention vise également un principe actif cosmétique comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja.
Avantageusement, il s'agit d'un principe actif qui présente une efficacité antirides jusqu'alors jamais constatée avec des produits d'origine naturelle. Il ne s'agit pas d'une simple concentration de produits existants, mais bien d'un principe actif à part, susceptible d'être obtenu par la mise en oeuvre d'un procédé spécifique.
La présente invention concerne donc également un procédé d'obtention d'un principe actif anti-rides efficace, comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs), à partir de fibres de soja. Avantageusement le procédé d'obtention selon l'invention est simple à mettre en oeuvre.
Selon un autre aspect, l'invention vise aussi des compositions cosmétiques incluant entre 0,01 et 20% d'un principe actif cosmétique comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja. Ces compositions peuvent se présenter sous toutes formes permettant l'application par voie topique.
Enfin, l'invention a également pour objet un procédé cosmétique de soin de la peau, destiné à lutter contre l'apparition des rides, en particulier à lisser le microrelief de la peau et à combler les rides, comprenant l'application topique d'une composition renfermant des HRGPs de soja ou un principe actif issu de soja contenant des HRGPs.
La présente invention est maintenant décrite en détail. UTILISATION Selon un premier aspect, l'invention vise l'utilisation de glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja, ou d'un actif issu de fibres de soja contenant des glycopeptides riches en hydroxyproline, en tant que principe actif cosmétique anti-rides. Selon l'invention des glycopeptides riches en hydroxyproline issus de fibres de soja, ou un actif obtenu à partir de fibres de soja contenant des glycopeptides riches en hydroxyproline, peuvent être utilisés comme agent cosmétique pour lutter contre l'apparition des rides, en particulier pour lisser le microrelief cutané et combler les rides. De façon avantageuse, l'utilisation sur la peau de glycopeptides de soja riches en hydroxyproline, acide aminé rare des protéines, ou d'un principe actif issu de soja contenant des glycopeptides riches en hydroxyproline, assure une efficacité performante sur le collagène I, marqueur universellement reconnu pour son importance dans les soins anti-vieillissement. Le collagène I est une structure hélicoïdale constituée de trois chaînes polypeptidiques riches en glycine, proline et hydroxyproline. Le collagène est caractérisé par une séquence en acides aminés spécifiques (Gly-X-Y)n où la glycine est présente tous les 3 résidus, où X correspond à la proline et Y est fréquemment de l'hydroxyproline. Ce dernier acide aminé est particulièrement important car il permet l'arrangement des chaînes de collagène en triple-hélice et il est également essentiel à la stabilité de celle-ci.
Avec l'âge ou au cours du vieillissement prématuré, le réseau tridimensionnel de collagène subit de profondes altérations caractérisées par une diminution de la synthèse de collagène d'une part et par sa dégradation excessive d'autre part. Ces changements se traduisent à la surface cutanée par un relâchement, une perte de fermeté et l'apparition de rides.
Selon l'invention, l'utilisation sur la peau de glycopeptides de soja riches en hydroxyproline, acide aminé rare dans les protéines, ou d'un principe actif issu de fibres de soja contenant des HRGPs, permet d'agir fortement sur la synthèse de collagène I.
En boostant fortement la synthèse naturelle de collagène I, biomarqueur essentiel et incontournable pour la lutte contre le vieillissement cutané, l'utilisation d'HRGPs de fibres de soja ou d'un principe actif issu de fibres de soja contenant des HRGPs, renforce l'armature de la peau et sa densité pour un effet anti-rides. Le matelas dermique est consolidé et les rides défroissées. L'effet obtenu est supérieur à celui des principes actifs d'origine naturelle existants, et comparable à celui des actifs de synthèse de référence, la vitamine C, le rétinol et le palmitoyl-pentapeptide-3. Grâce à l'efficacité ciblée et puissante de l'invention les rides sont visiblement atténuées.
Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, l'invention vise l'utilisation d'un principe actif issu de fibres soja contenant des HRGPs, tel que décrit en suivant. PRINCIPE ACTIF L'invention concerne également un principe actif cosmétique particulier obtenu à 15 partir de fibres de soja comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs). Le principe actif selon l'invention peut également comprendre d'autres molécules, en particulier des protéines et des carbohydrates sous forme libre. Préférentiellement, le principe actif comprend : 20 - une teneur en sucres totaux supérieure à 37% en poids de matière sèche, - une teneur en protéines totales comprise entre 5 et 7% en poids de matière sèche. Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, la teneur en sucres totaux du principe actif selon l'invention est supérieure à 50% du poids total de la 25 matière sèche, en particulier elle est comprise entre 50 et 70%.
Préférentiellement le principe actif selon l'invention comprend entre 8 et 30% de glycopeptides en poids de matière sèche. De façon préférée, le principe actif selon l'invention présente une teneur en hydroxyproline d'au moins 18mg/g de protéines, encore plus préférentiellement 5 environ égale à 30mg/g de protéines. De même, les glycopeptides présentent une masse molaire comprise entre 1440Da et 60000Da, préférentiellement une masse moléculaire moyenne de 13600 Da environ. La partie glycosylée des glycopeptides est de façon préférée composée au moins 10 de galactose, d'acide galacturonique et de mannose. Le principe actif selon l'invention est un hydrolysat de fibres de soja. Il se présente préférentiellement sous forme de liquide limpide de couleur ambrée. Il peut être défini par au moins une des caractéristiques exposées ci-après, préférentiellement toutes. 15 Matières sèches : Le taux de matières sèches d'un principe actif selon l'invention (mesuré par passage à l'étuve à 105°C en présence de sable d'un échantillon de poids ini ial donné jusqu'à obtention d'un poids constant) peut être compris entre 22 et 32 g/I. 20 Mesure du pH : Le pH (mesuré par la méthode potentiométrique à température ambiante) peut être compris entre 5,0 et 6,0. Détermination de la teneur en azote : La teneur en azote total (déterminée par la méthode de KJELDHAL - 25 Official method of analysis of the A.O.C. 1975, 12th ed. W Horwitz, E.D., New-York, p. 15-60), est préférentiellement comprise entre 1,3 et 2,2g/l, soit 5 à 7% en poids par rapport à la matière sèche.
Détermination de la teneur en hydroxyproline : Le dosage de l'hydroxyproline est réalisé selon la méthode de Stegemann et Stalder (Stegemann H., et Stalder K, (1967), Clinica Chimica Acta, 18, 260). Après action de la chloramine T, l'hydroxyproline oxydée réagit avec le paradiméthylaminobenzaldéhyde pour donner une coloration jaune-orangée, détectable au spectrophotomètre à 550 nm. La teneur en hydroxyproline est préférentiellement supérieure à 18mg/g de protéines, encore plus préférentiellement environ égale à 30mg/g de protéines.
Carbohydrates: Dosage de la teneur en sucres totaux : Le dosage de la teneur en sucres totaux peut être réalisé par la méthode de DUBOIS (DUBOIS M. et al., (1956), Analytical chemistry, 28, n°3 p. 350-356). En présence d'acide sulfurique concentré et de phénol, les sucres réducteurs donnent un composé jaune orangé. A partir d'une gamme étalon, on peut déterminer le taux de sucres totaux d'un échantillon. Le taux de sucres totaux d'un principe actif issu de fibres de soja selon l'invention est préférentiellement compris entre 12 et 22g/l. La teneur en sucres totaux peut aussi être exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche. Elle est préférentiellement supérieure à 37%, encore plus préférentiellement comprise entre 50% et 70%. Caractérisation des carbohydrates Les masses moléculaires des carbohydrates présents dans le principe actif selon l'invention sont déterminées grâce à la chromatographie en phase liquide haute performance (CLHP). La composition en sucres simples est déterminée par chromatographie liquide ionique.
La fraction glucidique du principe actif selon l'invention est composée de polysaccharides constitués majoritairement de galactose, mannose et acide galacturonique. Les carbohydrates sont soit sous forme libre et soit ils constituent la partie glycosylée de glycopeptides. Caractérisation des Glycopeptides : Une électrophorèse en conditions dénaturantes du principe actif selon l'invention a été réalisée en utilisant un gel de polyacrylamide 15%. La coloration du gel a été faite à l'aide du kit « Glycoprotein betection Kit » (Sigma), qui permet la coloration sélective des glycopeptides en rose. Une coloration rose apparaît pour le principe actif selon l'invention, ce qui montre la présence de glycopeptides. La teneur en glycopeptides est comprise entre 8 et 30% en poids par rapport à la matière sèche. En outre, le dosage de l'hydroxyproline, réalisé par spectrophotométrie, montre la présence d'hydroxyproline. Le principe actif selon l'invention comprend donc bien des glycopeptides riches en hydroxyproline. Teneur en cendres brutes : La teneur en cendres brutes est déterminée par la pesée des résidus issus de l'incinération à 550°C dans un four à moufle électrique (VULCANTM 3.550-NDI). Le poids du résidu est calculé en déduisant la tare. La teneur en minéraux est exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche.
Teneur en composés phénoliques La teneur en polyphénols totaux est mesurée selon le principe suivant. Les polyphénols forment en présence de ferricyanure de potassium des composés colorés, l'intensité de cette coloration étant proportionnelle à la quantité de polyphénols. En se rapportant à une gamme étalon d'acide gallique, en l'occurrence de 40 à 120 mg/I, on peut déduire la quantité de polyphénols présents dans l'extrait. Dosage des acides uroniques La teneur en acides uroniques est déterminée par le principe suivant : le produit de la réaction de l'acide galacturonique avec le tétraborate de sodium, donne en présence du méta-hydroxydiphényl, une coloration rose permettant le dosage au spectrophotomètre à 520 nm. L'intensité de coloration est proportionnelle à la quantité d'acides uroniques. En se rapportant à une gamme étalon d'acide galacturonique, en l'occurrence de 10 à 100 mg/I, on peut déduire la quantité d'acides uroniques présents dans le principe actif. Identification de la fraction active Afin de déterminer la fraction majoritairement active du principe actif selon l'invention, une étude a été réalisée. Cette étude consiste à réaliser la précipitation à l'éthanol du principe actif, et à fractionner par chromatographie le culot récupéré afin de séparer les différentes espèces moléculaires présentes.
Sur la base des relations structure-fonction, la structure de la fraction active du principe actif selon l'invention a ensuite été identifiée puis caractérisée. Elle correspond à des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs), en particulier des HRGPs comprenant des chaînes glycosylées majoritairement composées de galactose, acide galacturonique et mannose.
PROCEDE D'OBTENTION Le principe actif selon l'invention peut être obtenu préférentiellement par un procédé comprenant une hydrolyse enzymatique avec une carbohydrase, et une hydrolyse enzymatique avec une protéase.
Un procédé particulièrement adapté comprend au moins la succession des étapes suivantes - solubilisation de fibres de soja dans l'eau, - deux hydrolyses enzymatiques successives ou simultanées, l'une en présence d'une carbohydrase et l'autre en présence d'une protéase, - séparation des phases soluble et insoluble par décantation, - inactivation par traitement thermique, et - ultrafiltration entre 5000 Da et 18000 Da et récupération du rétentat. Cette dernière étape permet de retenir les molécules et de les sélectionner en 15 fonction de leur taille, mais également en fonction de leur configuration dans l'espace. Préférentiellement, le procédé comprend les étapes suivantes : - solubilisation de fibres de soja dans l'eau, - deux hydrolyses enzymatiques successives ou simultanées, l'une en 20 présence d'une carbohydrase et l'autre en présence d'une protéase, - séparation des phases soluble et insoluble par décantation, - inactivation par traitement thermique, - ajustement du pH, - filtration presse,et 25 - ultrafiltration entre 5000 Da et 18000 Da et récupération du rétentat.
Des étapes de décoloration et de désodorisation de la phase soluble, peuvent être envisagées sans modifier la partie active des principes actifs. Les différentes étapes sont usuelles dans le domaine des extractions d'actifs à partir de plantes, et l'homme du métier est à même d'en ajuster les paramètres réactionnels sur la base de ses connaissances générales, afin d'obtenir des extraits contenant au moins des glycopeptides riches en hydroxyproline. COMPOSITIONS COSMETIQUES ET PROCEDE COSMETIQUE DE SOIN DE LA PEAU La présente invention couvre aussi les compositions cosmétiques incluant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) de fibres de soja ou au moins un principe actif issu de fibres de soja comprenant des HRGPs, dans différentes formes galéniques, adaptées à l'administration par voie topique cutanée. Ces compositions peuvent se présenter notamment sous forme d'émulsions huiledans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersions, gels aqueux ou poudres. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse, ou sous forme solide. Ces compositions sont préférentiellement des compositions contenant entre 0,01 et 20%, en poids de principe(s) actif(s) issu(s) de fibres de soja comprenant des HRGPs selon la présente invention, préférentiellement entre 0,1% et 2%. Ces compositions comprennent, outre l'actif, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d'inconfort inacceptables pour l'utilisateur tels que des rougeurs, tiraillements ou picotements. Ce milieu contient généralement de l'eau. Les compositions selon l'invention peuvent contenir comme adjuvant au moins un composé choisi parmi - les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles ; - les cires, telles que l'ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d'abeille ou la cire de carnauba ; - les élastomères de silicone, - les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu'ils soient non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères ; - les co-tensioactifs, tels que les alcools gras linéaires ; - les épaississants et/ou gélifiants, - les humectants, tels que les polyols comme la glycérine ; - les filtres organiques, - les filtres inorganiques, - les colorants, les conservateurs, les charges, - les tenseurs, - les séquestrants, - les parfums, - et leurs mélanges, sans que cette liste soit limitative. Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook publié par le Personal Gare Product Council). Ces compositions sont notamment destinées à la lutte contre l'apparition des rides. L'invention vise à cet effet un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à lutter contre l'apparition des rides, en particulier à lisser le microrelief de la peau et/ou à combler les rides, comprenant l'application topique d'une composition renfermant des HRGPs issus de fibres de soja ou un principe actif en contenant, en particulier d'une composition renfermant entre 0,01 et 20% en poids de principe(s) actif(s) issu(s) de Soja selon la présente invention. Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et/ou leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l'adjonction envisagée. EXEMPLES Un exemple non limitatif de procédé d'obtention, de principe actif obtenu à partir de fibres de Soja comprenant des HRGPs, est présenté en suivant, ainsi 10 que des exemples de composition incluant un tel principe actif. Exemple 1 : procédé d'obtention du principe actif selon l'invention Un exemple de procédé d'obtention d'un principe actif selon l'invention, comprend la mise en oeuvre des étapes suivantes : - solubilisation de poudre de fibres de soja dans l'eau à raison de 50g/l, 15 - deux hydrolyses enzymatiques successives, en présence d'une carbohydrase et d'une protéase, - séparation des phases soluble et insoluble par décantation, - inactivation par traitement thermique, - ajustement du pH, 20 - filtration, et - ultrafiltration entre 5000 Da et 18000 Da, et récupération du rétentat. Le principe actif obtenu présente les caractéristiques suivantes : - une teneur en matières sèches de 26,9 g/I, - un pH de 5,8 25 - une teneur en sucres totaux de 58,3% en poids par rapport à la matière sèche, - une teneur en protéines totales de 6,2% en poids par rapport à la matière sèche, dont la teneur en hydroxyproline est de 31mg/g de protéines, - une fraction glycopeptides contenant 0,64g/l de protéines et 4,8g/l de sucres, soit 20% de glycopeptides en poids de matière sèche ; la masse molaire moyenne des glycopeptides riches en hydroxyproline est de 13600 Da, - une teneur en cendres de 9,5% en poids par rapport à la matière sèche, - une teneur en polyphénols de 0,15% en poids par rapport à la matière sèche, et - une teneur en acides uroniques de 28,85% en poids par rapport à la matière sèche.
Exemple 2 : utilisation d'un principe actif de l'invention dans un fluide jour anti- rides Phase A . Eau QSP 100% Carbopol Ultrez 20 (Noveon) 0,3% Glycérine 4% Phase B. RitaBate 20 (Cornelius) 4,5% DUB PTCC (Stéarinerie Dubois) 6% Montane 481 (Seppic) 3,2% Phase C. Beurre de karité (Sictia) 0,7% Conservateur Principe actif selon l'invention (exemple 1 ) Phase D. NaOH QSP pH 5,2 Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Cette émulsion fluide présente un pH de 5,2. Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - Mélanger A, bien disperser le gel à 50°C sous agitation mécanique, - Mélanger B, chauffer A et B à 80°C, sous agitation mécanique, - Emulsionner B dans A sous émulseur rotor stator, - A 50°C, ajouter C, - A 30°C, ajuster le pH avec D, puis laisser sous émulseur jusqu'à ce que l'émulsion soit uniforme.
Exemple 3 : utilisation d'un principe actif de l'invention dans une crème de nuit Phase A. Eau QSP 100 % Satiaxane CX930 (Degussa) 0,5 % Phase B. Pelemol 2014 (Cornelius) 2 °/G Ritabate 20 (Cornelius) 2 °/G Ritabate 165 (Cornelius) 4 °/G PhytoWax Olive 10L40 (Sophim) 3 % DC 73100 (Dow Corning) 1 % DUB PTCC (Stéarinerie Dubois) 1 °/G DUB BA (Stéarinerie Dubois) 2% Phase C. Conservateur 0,7 % Principe actif selon l'invention (exemple 1) 2% Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Cette émulsion présente un pH de 6,2. Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - Mélanger A, bien disperser le gel à 50°C sous agitation mécanique, - Mélanger B, chauffer A et B à 80°C, sous agitation mécanique, - Emulsionner B dans A sous émulseur rotor stator, - A 40°C, additionner C, dans l'ordre - Laisser sous agitation, jusqu'à complète homogénéisation.
Exemple 4 : utilisation d'un principe actif de l'invention dans un sérum Phase A. Eau QSP 100% Carbopol 940 (Noveon) 2,5 % Phase B. Ritaphyl ICS (Cornelius) 6,3 % IPP 5,7 % Pelemol 2014 (Cornelius) 1 % Ritastearic (Cornelius) 2,5 % Montanov 202 (Seppic) 1,9 % Phase C. Conservateur 0,7 % Principe actif selon l'invention (exemple 1) 2% Phase D. NaOH Qsp pH 4,5 Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids. Ce sérum présente un pH de 4,5.
Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes : - Mélanger A, bien disperser le gel sous agitation mécanique, - Mélanger B, - Chauffer A et B à 80°C, - Emulsionner B dans A sous émulseur, - A 40°C ajouter C et homogénéiser, - Ajuster le pH avec D, sous forte agitation mécanique, et continuer l'homogénéisation sous émulseur jusqu'à complet refroidissement.
EVALUATION DE L'EFFET ANTI-RIDES Ces essais ont pour objet d'illustrer l'invention, en montrant l'efficacité antirides du principe actif selon l'invention, en comparaison à des substances de références, le palmitoyl pentapeptide-3 et la vitamine C, et en comparaison à d'autres principes actifs cosmétiques issus de fibres soja.
A. Etudes in Vitro : effet sur la synthèse de collagène I Le but de cette étude est d'évaluer l'effet d'un principe actif selon l'invention sur la synthèse de collagène I, composant majeur du derme, en comparaison : - à deux molécules de référence, la vitamine C et un palmitoyl pentapeptide-3, et - aux produits A et B issus de fibres de soja, présentant des propriétés différentes et obtenus par la mise en oeuvre de procédés différents. Le principe actif selon l'invention est celui de l'exemple 1. Le produit A est un principe actif issu de fibres de soja présentant les caractéristiques suivantes - taux de matière sèche : 17,6 g/I - teneur en protéines : 5,3 g/I, soit 30,1% par rapport à la matière sèche, - teneur en sucres : de 8,3g/l soit 41,2% par rapport à la matière sèche. Le produit A est obtenu par la mise en oeuvre du procédé comprenant les étapes suivantes : - solubilisation de fibres de soja dans l'eau, - hydrolyse(s) enzymatique(s) simultanées ou successives, - ajustement du pH, - séparation des phases soluble et insoluble par filtration, centrifugation, décantation, - concentration de la fraction active par filtration, ultrafiltration, osmose inverse, ou nanofiltration, et - filtration stérilisante. Le produit B est un principe actif issu de fibres de soja présentant les caractéristiques suivantes : - taux de matière sèche : 82,8g/l - teneur en protéines : 45,4g/l - pH:6,9.
Le produit B est obtenu par la mise en oeuvre du procédé comprenant les étapes suivantes : - obtention d'un produit X : - solubilisation de tourteau de soja à raison d'au moins 50 g/I en poids, dans de l'eau à pH acide, - hydrolyses enzymatiques simultanées ou successives en présence de protéases, - filtration, décantation ou centrifugation afin de séparer la phase solubilisée et les produits insolubles, et - concentrations successives de la phase active par filtration, ultrafiltration, osmose ou nanofiltration. - obtention d'un produit Y - solubilisation de fibres de soja dans de l'eau à pH basique, - au moins une hydrolyse enzymatique à l'aide d'au moins une protéase, - filtration, décantation ou centrifugation afin de séparer la phase solubilisée et les produits insolubles, et - concentrations successives - mélange de X et Y. 20 L'étude a été réalisée sur fibroblastes humains normaux par dosage ELISA et par immunocytologie. Le protocole opératoire est le suivant. A JO, les fibroblastes humains sont ensemencés dans un milieu de culture 25 adapté et les cellules sont incubées à 37°C. A J2, Le milieu de culture est éliminé et remplacé par un milieu contant un principe actif de l'exemple 1 selon l'invention à 0,01% - 0,05% - 0,10% 10 15 et 0,25% (V/V) ou la vitamine C à 0,25,ug/ml ou un palmitoyl pentapeptide-3 à 1% ou le produit A à 0,10% ou encore le produit B à 1 ou 2%. Les cellules sont ensuite incubées à 37°C. A J3, les surnageants sont récupérés et stockés à -80°C en attente du 5 dosage ELISA. Par ailleurs, un marquage immunocytologique est également réalisé. Les résultats obtenus du taux de collagène I synthétisé en pourcentage par rapport à un témoin négatif sont présentés dans le tableau ci-après Taux de collagène I / témoin (%) Témoin Vitamine C 0,25,ug/ml + 1064 Palmitoyl pentapeptide-3 1% + 157 Produit A l% +62 Produit A 2% +120 Produit B 0,10% +496 Principe actif selon l'invention Exemplel 0,01% + 66 Principe actif selon l'invention Exemplel 0,02% + 190 Principe actif selon l'invention Exemplel 0,05% + 428 Principe actif selon l'invention Exemplel 0,10% + 1062 Principe actif selon l'invention Exemplel 0,25% + 1190 10 On constate que le principe actif selon l'invention stimule la synthèse du collagène I par les fibroblastes humains normaux, même à très faible concentration. Ces résultats montrent notamment que testé à 0,25%, le principe actif selon l'invention stimule la synthèse du collagène I par les fibroblastes humains normaux de 1190%. Cet effet est dose dépendant et comparable à celui de la vitamine C testée à 0,25pg/ml. On constate enfin, que l'efficacité observée est bien supérieure à celle d'autres hydrolysats de soja, ne présentant pas les caractéristiques particulières de la présente invention, et comparable à celle obtenue avec les molécules de synthèse de référence. B. Etudes in Vivo : Etude des propriétés anti-rides L'objectif de cette étude est d'évaluer in vivo l'effet anti-rides d'un principe actif selon l'invention formulé à 2% en émulsion contre placebo au niveau de la patte d'oie par projection de franges. Cette étude a été réalisée sur deux groupes de volontaires sains, de sexe féminin, présentant des rides au niveau de la zone d'étude : l'un testant le placebo, l'autre le principe actif selon l'invention (principe actif de l'exemple 1).
En parallèle, une autre étude a été menée pour évaluer l'effet de deux molécules de référence (molécules de synthèse) dans les mêmes conditions, contre placebo : - un palmitoyl pentapeptide-3 formulé à 3% en émulsion - le rétinol formulé à 0,075% en émulsion.
L'étude des molécules de référence a été réalisée en hémi-visage. Les produits ont été randomisés sur 43 volontaires répartis de la façon suivante : - 31 hémi-visages pour l'étude du placebo, volontaires d'âge moyen 55 ± 9 ans, - 27 hémi-visages pour l'étude du palmitoyl pentapeptide-3, volontaires d'âge moyen 54 ± 10 ans, - 28 hémi-visages pour l'étude du rétinol, volontaires d'âge moyen 52 ± 9 ans.
La méthode d'analyse utilisée pour l'étude consiste à réaliser des acquisitions en 3D par projection de franges de la patte d'oie. Les acquisitions sont réalisées à l'aide d'un appareil de projection de franges dédié à la mesure 3D du relief cutané. L'effet du produit est mesuré sur une région d'intérêt de 15x15mm découpée automatiquement sur l'acquisition originale. Les paramètres les plus pertinents retenus pour cette étude sont : - des paramètres de rugosité en 3D Sq : moyenne quadratique de rugosité de surface Sa : moyenne arithmétique de rugosité de surface - Des paramètres de volume volume positif : volume supérieur à la surface de la peau volume négatif : volume inférieur à la surface de la peau Une diminution de ces différents paramètres est caractéristique d'une amélioration du relief de la surface étudiée et d'une diminution des rides. Le protocole opératoire de l'étude est décrit en suivant. Entre J-14 et JO, les volontaires appliquent une crème placebo deux fois par jour sur l'ensemble du visage. A JO, on réalise une acquisition en 3D de la patte d'oie par projection de franges. Entre JO et J55, les volontaires appliquent bi quotidiennement les produits. A J56, on réalise à nouveau une acquisition en 3D de la patte d'oie par projection de franges. Les résultats obtenus en pourcentage de variation par rapport au résultats obtenus pour le placebo, sont présentés dans les tableaux suivants : * Paramètres de rugosité 3 D : Variation / Placebo (%) Paramètre Sa Paramètre Sq Principe actif selon l'invention -9,8% -9,5% (Exemple 1) 2% Palmitoyl pentapeptide-3 3% -8,9% -8,4% Rétinol 0,075% -11,6% -10,9% * Paramètres de volume : Variation / Placebo (%) Paramètre volume Paramètre volume positif négatif Principe actif selon l'invention -27,0% -21,1% (Exemple 1) 2% Palmitoyl pentapeptide-3 3% -25,3% -19,4% Rétinol 0,075% -27,4% -25,0% On constate que le principe actif selon l'invention permet de lisser le relief cutané au niveau des pattes d'oie et de réduire les rides en diminuant le volume négatif et le volume positif. En particulier, dans les conditions de cette étude, après 56 jours d'applications biquotidiennes, le principe actif selon l'invention formulé à2%: - lisse le relief cutané au niveau des pattes d'oie : il diminue le paramètre Sa de 9,8% et le paramètre Sq de 9,5%, - réduit les rides en permettant une diminution des paramètres : de volume négatif de 21,1% et de volume positif de 27,0%.
22 On constate enfin, que l'efficacité observée est comparable à celle obtenue avec les molécules de synthèse de référence, sur tous les paramètres après 56 jours de traitement.
Claims (19)
- REVENDICATIONS1. Principe actif cosmétique comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja.
- 2. Principe actif cosmétique selon la revendication 1, caractérisé en ce que les glycopeptides présents dans le principe actif présentent une masse 5 moléculaire moyenne comprise entre 1500 Da et 60000 Da.
- 3. Principe actif cosmétique selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que les glycopeptides présents dans le principe actif présentent une masse moléculaire moyenne de 13600 Da.
- 4. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, 10 caractérisé en ce que la partie glycosylée des glycopeptides présents dans le principe actif est composée au moins de galactose, d'acide galacturonique et de mannose.
- 5. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la teneur en hydroxyproline est d'au moins 18mg/g de 15 protéines.
- 6. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la teneur en sucres totaux du principe actif est supérieure à 37% du poids total de la matière sèche.
- 7. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, 20 caractérisé la teneur en sucres totaux du principe actif est comprise entre 50 et 70% du poids total de la matière sèche.
- 8. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il en ce qu'il présente au moins l'une des caractéristiques suivantes, les pourcentages étant en poids par rapport à la teneur totale en 25 matière sèche : - une teneur en sucres totaux comprise entre 50 et 70%,- une teneur en protéines totales comprise entre 5 et 7%, - une teneur en glycopeptides comprise entre 8 et 30%.
- 9. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il présente un taux de matières sèches compris entre 22 et 32g/I.
- 10. Procédé d'obtention d'un principe actif selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il comprend au moins les étapes suivantes : - solubilisation de fibres de soja dans l'eau, - deux hydrolyses enzymatiques successives ou simultanées, l'une en présence d'une carbohydrase et l'autre en présence d'une protéase, - séparation des phases soluble et insoluble par décantation, - inactivation par traitement thermique, et - ultrafiltration entre 5000 Da et 18000 Da et récupération du rétentat.
- 11. Procédé d'obtention d'un principe actif selon l'une revendications 1 à 9, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : - solubilisation de fibres de soja dans l'eau, - deux hydrolyses enzymatiques successives ou simultanées, l'une en présence d'une carbohydrase et l'autre en présence d'une protéase, - séparation des phases soluble et insoluble par décantation, - inactivation par traitement thermique, - ajustement du pH, - filtration presse,et - ultrafiltration entre 5000 Da et 18000 Da et récupération du 25 rétentat.
- 12. Utilisation de glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja, ou d'un actif issu de fibres de soja contenant des glycopeptidesriches en hydroxyproline (HRGPs), en tant que principe actif cosmétique antirides.
- 13. Utilisation d'un principe actif selon l'une des revendications 1 à 9, en tant que principe actif cosmétique anti-rides.
- 14. Utilisation selon la revendication 12 ou 13, en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique destinée à lutter contre l'apparition des rides.
- 15. Utilisation selon l'une des revendications 12 à 14, en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique destinée à lisser le microrelief de la peau et/ou à combler les rides.
- 16. Utilisation selon l'une des revendications 12 à 15, en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique destinée à stimuler la synthèse de collagène I des cellules de la peau.
- 17. Composition cosmétique pour application topique, caractérisée en ce qu'elle comprend un principe actif selon l'une des revendications 1 à 9 présent entre 0,01 et 20% en poids total de la composition.
- 18. Procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à lutter contre l'apparition des rides, comprenant l'application topique d'une composition renfermant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja ou un principe actif selon l'une des revendications 1 à 9.
- 19. Procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à lisser le microrelief de la peau et/ou à combler les rides, comprenant l'application topique d'une composition renfermant glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja ou un principe actif selon l'une des revendications 1 à 9.
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