FR2946886A1 - Extrait de vegetal pour la fabrication de composition de controle de la melanogenese,composition de controle obtenue et procede de controle mettant en oeuvre une telle composition - Google Patents

Abstract

L'invention concerne un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arabidaea, la famille des Balanitaceae, la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre calophyllum pour son utilisation comme agent de contrôle actif sur la mélanogénèse pour la fabrication de composition de contrôle de la mélanogénèse.

Description

La présente invention concerne un extrait de végétal pour la fabrication de composition de contrôle de la mélanogénèse, la composition de contrôle obtenue et le procédé de contrôle mettant en oeuvre une telle composition.

L'implication des interactions entre mélanocytes et kératinocytes dans la régulation de la mélanogénèse est aujourd'hui bien connue et très étudiée. Même si ces interactions ne sont pas encore toutes totalement élucidées, elles sont largement exploitées en cosmétique pour le développement de produits dépigmentants.

D'autres types d'interactions, avec des cellules mésenchymateuses par exemple, existent aussi. Largement moins étudiées, elles sont pourtant à l'origine de la "blancheur" des régions palmo-plantaires.

Ainsi, Yamaguchi & coll. (Yamaguchi Y, Itami S, Watabe H, Yasumoto K, Abdel-Malek ZA, Kubo T, Rouzaud F, Tanemura A, Yoshikawa K, Hearing VJ Mesenchymal-epithelial interactions in the skin : increased expression of dickkopf' by palmoplantar fibroblasts inhibits melanocyte growth and differentiation J.Cell Biol. 165(2), 275-285 (2004)), ont démontré qu'un messager soluble produit par les fibroblastes des régions palmo-plantaires, était capable de modifier le programme de différenciation des mélanocytes de ces régions pour conduire à une très faible production de mélanine. Ce messager a été identifié par l'équipe de Yamaguchi comme étant une protéine appelée Dikkopf-1 (DKK-1).

De manière tout à fait intéressante, les voies de signalisation empruntées par le DKK-1 pour produire ses effets, sont aujourd'hui très bien connues. Au travers de son action antagoniste sur le récepteur au Wnt, le DKK-1 est en effet capable de "shunter" les voies de signalisation intracellulaire activées par la 13-caténine, normalement responsables de la régulation de gènes impliqués dans la mélanogénèse.

Enfin, Yamaguchi & coll. ont aussi démontré que le DKK-3, molécule voisine de DKK-1 mais sans effet sur le récepteur au Wnt, pouvait jouer un rôle régulateur sur l'effet du DKK-1. En effet, plus les quantités de DKK-3 au voisinage de ce récepteur au Wnt seront importantes, plus les interactions entre le DKK-1 et ce même récepteur seront faibles. Les effets inhibiteurs du DKK-1 sur la mélanogénèse seront alors réduits.

Les travaux de Yamaguchi et coll. suggèrent que l'identification d'agents ayant une influence sur le rapport DKK1 / DKK3 dans des cultures de fibroblastes io dermiques humains normaux d'origine non palmo-plantaire permettrait de contrôler la production de mélanine de mélanocytes humains normaux non palmo-plantaires.

Un but de la présente invention est donc de proposer des compositions 15 contenant de tels agents.

A cet effet, l'invention a pour objet un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea, la famille des Balanitaceae, la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des 20 Clusiaceae genre Calophyllum pour son utilisation comme agent de contrôle actif sur la mélanogénèse pour la fabrication de composition de contrôle de la mélanogénèse.

L'invention a encore pour objet une composition de contrôle de la 25 mélanogénèse, caractérisée en ce qu'elle contient comme agent de contrôle actif sur la mélanogénèse au moins un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea, la famille des Balanitaceae, la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre Calophyllum. 30 De préférence, ledit agent de contrôle étant un agent actif sur le rapport DKK1/DKK3, ladite composition contient au moins un extrait de végétal choisi soit dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea et la famille des Balanitaceae comme agent de contrôle actif dans le sens d'une augmentation dudit rapport pour inhiber la mélanogénèse en particulier à des fins de dépigmentation, soit dans le groupe formé par la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre Calophyllum comme agent de contrôle actif dans le sens d'une diminution dudit rapport pour lever l'inhibition en particulier à des fins de repigmentation.

Dans un premier mode de réalisation de l'invention, ladite composition est une composition pharmaceutique, en particulier dermatologique, qui contient au io moins un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea et la famille des Balanitaceae comme agent actif en une quantité efficace pour traiter ou prévenir les désordres en particulier les désordres hyperpigmentaires liés à la mélanogénèse tels que les taches de rousseurs, les hyperpigmentations post inflammatoires dues à une 15 abrasion, une brûlure une cicatrice, une dermatose, une allergie de contact, les nevi, le chloasma, les taches de vieillesses ou les hyperpigmentations atypiques.

Dans un deuxième mode de réalisation de l'invention, ladite composition est 20 une composition pharmaceutique, en particulier dermatologique, qui contient au moins un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre Calophyllum comme agent actif en une quantité efficace pour traiter ou prévenir les désordres hypopigmentaires, tels que les vitiligos, les vergitures ou les 25 cicatrices blanches.

Dans un troisième mode de réalisation de l'invention, ladite composition est une composition cosmétique en particulier dépigmentante qui contient comme agent actif de dépigmentation au moins un extrait de végétal choisi dans le 30 groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea et la famille des Balanitaceae.

Dans ce mode de réalisation, de préférence, ledit ou au moins l'un des agent(s) actif(s) de dépigmentation est un extrait de feuilles de végétal de la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea de préférence espèce chica présent dans ladite composition à une concentration exprimée en pourcentage en poids rapporté au poids total de la composition comprise entre 0,0001% et 2%, de préférence voisine de 0,1% ou un extrait de graines de végétal de la famille des Balanitaceae de préférence genre Balanites espèce aegyptiaca présent dans ladite composition à une concentration exprimée en pourcentages en poids rapporté au poids total de la composition comprise entre 0,00005% et 1%, de io préférence voisine de 0,01%.

Dans un quatrième mode de réalisation de l'invention, ladite composition est une composition cosmétique en particulier repigmentante qui contient comme agent actif de repigmentation un extrait de végétal choisi dans le groupe formé 15 par la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre Calophyllum.

Dans ce mode de réalisation, de préférence, ledit ou au moins l'un des agent(s) actif(s) de repigmentation est un extrait de graines de végétal de la famille des 20 Annonaceae genre Monodora, de préférence espèce myristica, présent dans ladite composition à une concentration exprimée en pourcentage en poids rapporté au poids total de la composition comprise entre 0,0005% et 0,1%, de préférence voisine de 0,01% ou un extrait de graines de végétal de la famille des Clusiaceae genre Calophyllum, de préférence espèce inophyllum, présent 25 dans ladite composition à une concentration exprimée en pourcentage en poids rapporté au poids total de la composition comprise entre 0,0005% et 2%, de préférence voisine de 0,1%.

Dans le domaine de la cosmétique, les compositions qui augmentent le rapport 30 DKK-1/DKK-3 trouvent une application en particulier dans la protection contre les effets néfastes du soleil qui stimule l'hyperpigmentation du Chloasma, des taches de vieillesses, les hyperpigmentations atypiques. Les compositions qui lèvent l'inhibition palmo-plantaire et qui diminuent le rapport DKK-1/DKK-3 contribuent à recouvrer la protection endogène (le bronzage), et, indirectement, contribuent à protéger le tissu cutané des agressions du soleil.

Quel que soit le mode de réalisation, la composition contient à chaque fois au s moins un agent actif formé d'un extrait de végétal, tel que mentionné ci-dessus, incorporé dans un véhicule pharmaceutiquement ou cosmétiquement acceptable compatible avec une application topique sur la peau. La composition peut comprendre en outre tout composé usuellement utilisé dans le domaine cosmétique ou pharmaceutique, tel que des séquestrants, des antioxydants, des filtres solaires, des conservateurs, des charges, des électrolytes, des humectants, des colorants, des bases ou des acides usuels, minéraux ou organiques, des parfums, des huiles essentielles, des actifs cosmétiques, des hydratants, des vitamines, des acides gras essentiels, des sphingolipides, des composés auto-bronzants, des agents apaisants et protecteurs de la peau, tels 15 que l'allantoïne. Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir ce ou ces éventuels composés complémentaires et/ou leur quantité de manière telle que les propriétés avantageuses de la composition selon l'invention ne soient pas ou substantiellement pas altérées. Ces composés peuvent être présents dans la composition à raison de 0,01% à 99,999% en poids par rapport au poids total 20 de la composition.

La composition de contrôle est applicable par voie topique et se présente sous forme de lotion, ou de gel, ou d'émulsion huile dans eau ou eau dans huile, ou de crème. 25 L'invention a encore pour objet un procédé de contrôle à des fins cosmétiques de la mélanogénèse chez un mammifère comprenant au moins une étape d'administration d'une quantité efficace d'un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea, la famille des 30 Balanitaceae, la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre Calophyllum.

Dans un premier mode de mise en oeuvre particulier du procédé, le procédé de contrôle à des fins cosmétiques de la mélanogénèse, en particulier de soin cosmétique destiné à atténuer ou supprimer les taches pigmentaires de la peau et/ou à éclaircir le teint est caractérisé en ce qu'il comprend l'application sur au moins une zone concernée de la peau d'une composition cosmétique dépigmentante du type précité.

Dans un autre mode de mise en oeuvre particulier du procédé, le procédé de contrôle à des fins cosmétiques de la mélanogénèse, en particulier de soin io cosmétique destiné à atténuer ou supprimer les taches blanches de la peau et/ou à homogénéiser le teint type fond de teint et/ou à préparer au soleil est caractérisé en ce qu'il comprend l'application sur au moins une zone concernée de la peau d'une composition cosmétique repigmentante du type précité.

15 L'invention a encore pour objet l'utilisation d'un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea, la famille des Balanitaceae, la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre Calophyllum pour la fabrication de composition pharmaceutique ou cosmétique employée pour prévenir et/ou traiter les 20 désordres hyperpigmentaires ou hypopigmentaires ou pour prévenir et/ou lutter contre les disgrâces esthétiques résultant du trouble de la mélanogénèse, en particulier contre le vieillissement photo-induit ou chronologique de la peau et des phanères.

25 Des exemples de formulation ci-dessous permettent d'illustrer les compositions selon l'invention sans toutefois en limiter la portée. Des exemples illustrant l'activité des différentes compositions selon l'invention sont également décrits.

La figure 1 représente la production de DKK-1 dans un modèle de fibroblastes 30 dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "Eg MM EtOH".

La figure 2 représente la production de DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "Eg MM EtOH".

La figure 3 représente le ratio DKK-1 / DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "Eg MM EtOH".

La figure 4 représente la production de DKK-1 dans un modèle de fibroblastes io dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "Eg Cl EtOH".

La figure 5 illustre la production de DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en 15 présence de l'actif "Eg Cl EtOH".

La figure 6 illustre le ratio DKK-1 / DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "Eg Cl EtOH". La figure 7 illustre la production de DKK-1 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "EDD CULX EtOH".

25 La figure 8 illustre la production de DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "EDD CULX EtOH".

La figure 9 illustre le ratio DKK-1 / DKK-3 dans un modèle de fibroblastes 30 dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "EDD CULX EtOH". 20 La figure 10 illustre la production de DKK-1 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "EFCRAJ EtOH".

La figure 11 illustre la production de DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "EFCRAJ EtOH".

La figure 12 illustre le ratio DKK-1 / DKK-3 dans un modèle de fibroblastes io dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "EFCRAJ EtOH".

La figure 13 illustre la production de DKK-1 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en 15 présence du "Mélange" d'actifs.

La figure 14 illustre la production de DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence du "Mélange" d'actifs. La figure 15 illustre le ratio DKK-1 / DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence du "Mélange" d'actifs.

25 La figure 16 illustre la production de DKK-1 et de DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de dexaméthasone à 100 nM.

Dans les compositions ci-après, les proportions des différents constituants sont 30 exprimées en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition. 20 Exemple 1 : Un exemple de composition cosmétique dépigmentante se présentant sous forme de crème et contenant un extrait de Balanites, en particulier de Balanites aeqyptiaca va être décrit.

L'extrait végétal utilisé est issu de graines de Balanites. Ces graines sont traitées, en particulier décoquées afin de séparer la coque de l'amande. L'amande est ensuite pressée mécaniquement à froid afin d'en extraire l'huile vierge. Le résidu appelé tourteau subit une extraction hydroalcoolique, l'extrait obtenu est déshydraté et séché sous vide afin d'obtenir un extrait sec qui peut être utilisé dans la composition. Cet extrait sec est intégré dans la composition à une concentration comprise dans la plage 0,00005% à 1% en poids. La composition peut présenter une formulation telle que suit : Ingrédients % en poids Eau QSP Gomme de Xanthane 0,7 Stéarate de glycéryle 4,3 Alcool cetearylique et glucoside 2 cetearylique Beurre de karité 5 Huile de tournesol 6 Huile de coco 3 Huile de jojoba 1 Glycérine 3 Acide sorbique 0,35 Benzoate de sodium 0,5 Vitamine E 0,2 Parfum 0,5 Extrait de Balanites aeqyptiaca 0,01 Exemple 2 : Un exemple de composition cosmétique dépigmentante se présentant sous forme d'émulsion crème type huile dans eau et contenant un extrait végétal de Arrabidaea, en particulier de Arrabidaea chica va à présent être décrit. L'extrait végétal utilisé est issu de feuilles d'Arrabidaea. Les feuilles sont séchées puis broyées mécaniquement avant d'être déshydratées pour obtenir un extrait sec. Cet extrait sec est intégré dans la io composition à une concentration comprise dans la plage de 0,0001 % à 2% en poids. La composition peut présenter une formulation telle que suit : Ingrédients % en poids Eau QSP Bentonite intercalée 7 Oléïne de karité 10 Huile de tournesol 10 Huile d'Andiroba 3 Oléat de Protium he•ta•h Ilum 1 Glycérine 3 Acide sorbique 0,35 Benzoate de sodium 0,5 Vitamine E 0,2 Parfum 0,5 Extrait d'Arrabidaea chica 0,1 Comme l'illustrent les résultats d'activité ci-après, les compositions contenant des extraits de Balanites aeqyptiaca (famille Balanitaceae) et d'Arrabideae chica (famille Bignoniaceae) sont des compositions qui induisent une io augmentation de DKK1 et plus généralement une augmentation du ratio DKKI/DKK3. Les utilisations de ces compositions sont diverses et variées. Elles peuvent être utilisées dans les produits éclaircissants la peau sous forme de lotion, de gel, d'émulsion Huile dans Eau ou Eau dans Huile, de savon, de préparations galéniques exfoliantes, dans les produits anti-taches brunes sous 15 forme de lotion, de gel, d'émulsion Huile dans Eau ou Eau dans Huile, dans les produits de maquillage destinés à éclaircir la peau. Pour être efficaces et compte tenu de la rémanence de leur activité, les produits cosmétiques non rincés comprenant ces actifs sont à utiliser au minimum deux fois par semaine en cure de trois mois. 20 Les produits cosmétiques rincés comprenant ces actifs sont quant à eux à utiliser deux fois par jour en cure de trois mois. Ces produits cosmétiques peuvent être également utilisés chaque jour. Pour agir uniquement sur les taches, les produits cosmétiques comprenant ces actifs doivent être appliqués en topique spécifiquement sur la zone à traiter. 25 2946886 Il Exemple 3 : Un exemple de composition cosmétique, dite repigmentante, se présentant sous forme d'émulsion crème type huile dans eau et contenant un extrait de Monodora, en particulier myristica (Annonaceae) va à présent être décrit. s L'extrait végétal utilisé est issu de graines de Monodora. L'amande des graines est décortiquée, c'est-à-dire séparée de la coque des graines, puis broyée mécaniquement. La poudre d'amande obtenue est séchée et forme l'extrait sec de Monodora. Cet extrait sec est intégré dans la composition à une concentration comprise dans la plage de 0,0005% à 0,1% io en poids. La composition peut présenter une formulation telle que suit : Ingrédients % en poids Eau QSP Bentonite intercalée 7 Huile de Balanites ae. •tiaca 10 Huile de Tournesol 10 Huile de Luffa 2 Oléat de Roucou 2 Extrait de l'hibiscus esculentus 3 Acide sorbique 0,35 Benzoate de sodium 0,5 Vitamine E 0,2 Parfum 0,5 Extrait de Monodora myristica 0,01 Exemple 4 : 15 Un exemple de composition cosmétique, dite repigmentante, se présentant sous forme d'émulsion crème type huile dans eau et contenant un extrait de Calophyllum, de préférence inophyllum (Clusiaceae) va être décrit. L'extrait végétal utilisé est issu de graines de Calophyllum. Ces graines sont traitées, en particulier décoquées afin de séparer la coque de 20 l'amande. L'amande est ensuite pressée mécaniquement à froid afin d'en extraire l'huile vierge. Le résidu appelé tourteau subit une extraction hydroalcoolique, l'extrait obtenu est déshydraté et séché sous vide afin d'obtenir un extrait sec qui peut être utilisé dans la composition. Cet extrait sec est intégré dans la composition à une concentration comprise 25 dans la plage de 0,0005% à 2% en poids.

La composition peut présenter une formulation telle que suit : Ingrédients % en poids Eau QSP Bentonite intercalée 7 Oléïne de karité 10 Huile de tournesol 10 Huile d'Andiroba 3 Oléat de Protium heptaphyllum 1 Glycérine 3 Acide sol-bique 0,35 Benzoate de sodium 0,5 Vitamine E 0,2 Parfum 0,5 Extrait de Calophyllum inophyllum 0,1 Comme l'illustrent les résultats d'activité ci-après, les compositions contenant des extraits de Monodora myristica (Annonaceae) et de Calophyllum inophyllum (Meliaceae) sont des compositions qui induisent une diminution de DKK1 et plus généralement une diminution du ratio DDK1/DKK3. Les utilisations de ces compositions sont diverses et variées. Elles peuvent être utilisées dans les produits anti-taches blanches sous forme de lotion, de gel, d'émulsion Huile dans Eau ou Eau dans Huile, dans les produits dermocosmétiques contre les vitiligos, dans les produits de maquillage destinés à homogénéiser le teint type fond de teint, comme co-actif dans les produits visant à stimuler le bronzage, et les préparateurs solaires. Pour être efficaces, et compte-tenu de la rémanence de leur activité, les 15 produits cosmétiques non rincés comprenant ces actifs sont à utiliser au minimum deux fois par semaine en cure de trois mois. Les compositions cosmétiques rincées comprenant ces actifs sont à utiliser au minimum deux fois par jour, en cure de trois mois. Les produits cosmétiques comprenant ces actifs peuvent être utilisés chaque 20 jour. Pour agir uniquement sur les taches, les compositions cosmétiques comprenant ces actifs doivent être appliquées en topique spécifiquement sur la zone à traiter. L'activité des extraits entrant dans les compositions décrites ci-dessus va à 25 présent être illustrée.

Les extraits retenus pour la démonstration sont des extraits alcooliques préparés à partir d'extraits secs du type de ceux décrits dans les exemples 1 à 4. Ainsi, l'extrait éthanolique de tourteau délipidé de Balanites aegyptiaca 5 présente une composition telle que suit : poudre de tourteau délipidé 27,78 % éthanol 96° 48,15 eau 24,07 % la composition étant exprimée en pourcentage en poids par rapport au poids 10 total de ladite composition. Cet extrait est laissé à l'obscurité à température ambiante pendant 24 heures puis filtré. Le filtrat est récupéré. Cet extrait sera appelé dans ce qui suit "EDDCULX EtOH". L'extrait éthanolique de feuille d'Arrabidaea chica présente une composition 15 telle que suit (en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition) : poudre de feuilles séchées 27,78 % éthanol 96° 48,15 % eau 24,07 % 20 A nouveau, cet extrait est laissé à l'obscurité à température ambiante pendant 24 heures puis filtré. Le filtrat est récupéré. L'extrait sera appelé dans ce qui suit : EFCRAJ EtOH.

L'extrait éthanolique de Monodora myristica présente une composition telle que 25 suit (en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition) : poudre de graines (amandes) 27,78 % éthanol 96° 48,15 % eau 24,07 % A nouveau, cet extrait est laissé à température ambiante pendant 24 heures 30 puis filtré. Le filtrat est récupéré. L'extrait éthanolique de Monodora myristica est dans ce qui suit appelé EgMM EtOH.

L'extrait éthanolique du tourteau délipidé de Calophyllum inophyllum présente une composition telle que suit (en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition) poudre de tourteau délipidé 27,78 éthanol 96° 48,15 % eau 24,07 % Cet extrait sera appelé dans ce qui suit Eg Cl EtOH. Les résultats ci-après illustrent l'effet dose des actifs Eg MM EtOH, Eg Cl EtOH, EDD CULX et EFCRAJ EtOH pour leur capacité à moduler la production de DKK-1 et/ou de DKK-3 de fibroblastes humains normaux adultes cultivés en monocouches. L'effet d'un mélange de ces quatre actifs a aussi été évalué. Des monocouches confluentes de fibroblastes dermiques humains normaux ont été obtenues en cultivant des cellules issues d'une plastie abdominale réalisée chez une femme de 47 ans. Les fibroblastes ont été incubés 48 heures à 37°C, sous atmosphère humide et 5 % de CO2, en absence (milieu de culture seul), ou en présence de dexaméthasone à 100 nM (produit de référence), ou de concentrations croissantes des actifs à l'essai. Ces concentrations (VN) sont exprimées en volume de l'actif par rapport au volume total du milieu d'incubation dans lequel l'actif est solubilisé. - "Eg MM EtOH" -* 0,001 ; 0,005 ; 0,01 ; 0,05 et 0,1 %, v/v. - "Eg Cl EtOH" -* 0,001 ; 0,005 ; 0,01 ; 0,05 et 0,1 %, v/v. - "EDD CULX" - 0,0001 ; 0,0005 ; 0,001 ; 0,005 et 0,01 %, v/v. - "EFCRAJ EtOH" - 0,001 ; 0,005 ; 0,01 ; 0,05 et 0,1 %, v/v. - mélange des 4 actifs ci-dessus X0,001 ; 0,005 ; 0,01 ; 0,05 et 0,1 %, v/v.

Chacun des actifs a été solubilisé directement dans le milieu d'incubation. La concentration 0,1 % du mélange correspond à un mélange de l'actif "Eg MM EtOH" à 0,1 % + actif "Eg Cl EtOH" à 0,1 % + actif "EDD CULX" à 0,01 % + actif "EFCRAJ EtOH" à 0,1 %. La concentration 0,05 % du mélange correspond à un mélange de l'actif "Eg 30 MM EtOH" à 0,05 % + actif "Eg Cl EtOH" à 0,05 % + actif "EDD CULX" à 0,005 % + actif "EFCRAJ EtOH" à 0,05 %.

La concentration 0,01 % du mélange correspond à un mélange de l'actif "Eg MM EtOH" à 0,01 % + actif "Eg Cl EtOH" à 0,01 % + actif "EDD CULX" à 0,001 % + actif "EFCRAJ EtOH" à 0,01 %. La concentration 0,005 % du mélange correspond à un mélange de l'actif "Eg s MM EtOH" à 0,005 % + actif "Eg Cl EtOH" à 0,005% + actif "EDD CULX" à 0,0005 % + actif "EFCRAJ EtOH" à 0,005 %. La concentration 0,001 % du mélange correspond à un mélange de l'actif "Eg MM EtOH" à 0,001 % + actif "Eg Cl EtOH" à 0,001 % + actif "EDD CULX" à 0,0001 % + actif "EFCRAJ EtOH" à 0,001 %. 10 A la fin de la période d'incubation, le DKK-1 et le DKK-3 contenus dans les milieux de culture ont été quantifiés à l'aide de kits E.L.I.S.A. sensibles et spécifiques. A la fin de cette période d'incubation, les protéines contenues dans les lysats cellulaires ont été quantifiées par une méthode spectrocolorimétrique (méthode 15 de Bradford). Les résultats sont donnés sous forme de pg de DKK par pg de protéines totales du tapis cellulaire (moyennes +1- la déviation standard, S.D.). La significativité statistique des différences observées entre les conditions "témoin" et "produit de référence" a été évaluée par un test de Student (Student t-test ; ** : p<0,01). La significativité statistique des différences observées entre 20 les conditions "Témoin" et "produits à l'essai" a été évaluée produit par produit, par une analyse de la variance à un facteur (One Way ANOVA), suivie, lorsque cela était nécessaire, d'un test de Holm-Sidak (* : p<0,05). Les résultats présentés dans les figures 1 à 3 concernent l'actif "Eg MM EtOH" et montrent que dans les conditions expérimentales retenues, après 48 heures 25 d'incubation, l'actif "Eg MM EtOH" induit une diminution significative de la production de DKK-1. Ainsi, "Eg MM EtOH" à 0,005 % induit une diminution de 31,0 % (p<0,05) de DKK-1 (voir la figure 1 qui illustre la production de DKK-1 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures 30 d'incubation, en présence de l'actif "Eg MM EtOH").

L'actif "Eg MM EtOH" n'induit aucune modification significative de la production de DKK-3. (voir la figure 2 qui illustre la production de DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "Eg MM EtOH").

L'actif "Eg MM EtOH" induit une diminution du ratio DKK-1 / DKK-3 entre 0,005% et 0,05%. (voir la figure 3 qui illustre le ratio DKK-1 / DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "Eg MM EtOH"). 10 Les résultats fournis ci-après qui concernent l'actif "Eg Cl EtOH" sont présentés dans les figures 4 à 6. Ces résultats montrent que, dans les conditions expérimentales retenues, après 48 heures d'incubation, l'actif "Eg Cl EtOH" induit une diminution 15 significative de la production de DKK-1 : - "Eg Cl EtOH" à 0,001 % - - 39,3 % (p<0,05) - "Eg Cl EtOH" à 0,005 % - - 42,3 % (p<0,05) (voir la figure 4 qui illustre la production de DKK-1 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures 20 d'incubation, en présence de l'actif "Eg Cl EtOH").

L'actif "Eg CL EtOH" n'induit aucune modification significative de la production de DKK-3. (voir la figure 5 qui illustre la production de DKK-3 dans un modèle de 25 fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "Eg Cl EtOH").

L'actif "Eg Cl EtOH" induit une diminution significative du ratio DKK-1 / DKK-3 : - "Eg Cl EtOH" à 0,001 % ù> - 31,3 % (p<0,05) 30 - "Eg Cl EtOH" à 0,005 % -> - 28,8 % (p<0,05) (voir la figure 6 qui illustre le ratio DKK-1 / DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "Eg Cl EtOH").

Les résultats ci-après qui concernent l'actif "EDD CULX EtOH" sont présentés dans les figures 7 à 9. Ces résultats montrent que, dans les conditions expérimentales retenues, après 48 heures d'incubation, l'actif "EDD CULX EtOH" à 0,0001 % induit une diminution significative de la production de DKK-1

- "EDD CULX EtOH" à 0,0001 %ù> - 37,9 % (p<0,05) L'actif "EDD CULX EtOH" testé entre 0,001 et 0,01 % induit une augmentation significative de la production de DKK-1 : l0 - "EDD CULX EtOH" à 0,001 % -* + 26,4 % (p<0,05) - "EDD CULX EtOH" à 0,005 % -* + 37,6 % (p<0,05) - "EDD CULX EtOH" à 0,01 % - + 37,4 % (p<0,05) (voir la figure 7 qui illustre la production de DKK-1 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures 15 d'incubation, en présence de l'actif "EDD CULX EtOH").

L'actif "EDD CULX EtOH" n'induit aucune modification significative de la production de DKK-3. (voir la figure 8 qui illustre la production de DKK-3 dans un modèle de 20 fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "EDD CULX EtOH").

L'actif "EDD CULX EtOH" induit une augmentation significative du ratio DKK-1 / DKK-3 : 25 - "EDD CULX EtOH" à 0,001 % ù> + 33,7 % (ns) - "EDD CULX EtOH" à 0,005 % ù> + 79,3 % (p<0,05) - "EDD CULX EtOH" à 0,01 % - + 107,9 % (p<0,05) (voir la figure 9 qui illustre le ratio DKK-1 / DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures 30 d'incubation, en présence de l'actif "EDD CULX EtOH").

Les résultats de l'actif "EFCRAJ EtOH" sont présentés dans les figures 10 à 12. Ils montrent que, dans les conditions expérimentales retenues, après 48 heures d'incubation, l'actif "EFCRAJ EtOH" induit une augmentation significative de la production de DKK-1 : - "EFCRAJ EtOH" à 0,001 % -* + 48,3 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,01 % -+ + 16,4 % (ns) - "EFCRAJ EtOH" à 0,05 % ù> + 25,9 % (ns) - "EFCRAJ EtOH" à 0,1 % + 34,3 % (ns) (voir la figure 10 qui illustre la production de DKK-1 dans un modèle de io fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "EFCRAJ EtOH").

Il est à noter que dans tout ce qui précède, comme dans tout ce qui suit, l'expression "ns" signifie "non significatif" pour le test Anova, c'est-à-dire avec 15 une déviance de 10 à 15 % de sorte que les résultats restent exploitables. DKK-3 : --> - 37,9 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,001 % - "EFCRAJ EtOH" à 0,005 % -~ - 25,7 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,01 % - - 31,6 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,05 % - 31,9 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,1 % - 41,0 % (p<0,05) DKK-3 : + 130,9 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,001 % - "EFCRAJ EtOH" à 0,005 % -* + 9,8 % (ns) - "EFCRAJ EtOH" à 0,01 % -* + 64,9 % (p<0,05) L'actif "EFCRAJ EtOH" induit une diminution significative de la production de

20 (voir la figure 11 qui illustre la production de DKK-3 dans un modèle de 25 fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de l'actif "EFCRAJ EtOH"). L'actif "EFCRAJ EtOH" induit une augmentation significative du ratio DKK-1 / 30 - "EFCRAJ EtOH" à 0,05 % 19 + 77,0 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,1 % -5 + 122,8 % (p<0,05) (voir la figure 12 qui illustre le ratio DKK-1 / DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures 5 d'incubation, en présence de l'actif "EFCRAJ EtOH").

Les résultats du mélange des quatre actifs sont présentés dans les figures 13 à 15. Ces résultats montrent que dans les conditions expérimentales retenues, après 48 heures d'incubation, le "Mélange" dit n'induit aucune modification 10 significative de la production de DKK-1 comme l'illustre la figure 13 qui représente la production de DKK-1 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence du "Mélange" d'actifs.

15 Le "Mélange" induit une diminution significative de la production de DKK-3 : - "Mélange" à 0,001 % - - 36,1 % (p<0,05) - "Mélange" à 0,005 % ù> - 43,3 % (p<0,05) - "Mélange" à 0,01 % ù> - 41,0 % (p<0,05) - "Mélange" à 0,05 % ù> - 12,3 % (ns) 20 - "Mélange" à 0,1 % ù> - 51,3 % (p<0,05) comme l'illustre la figure 14 qui représente la production de DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence du "Mélange" d'actifs. - "Mélange" à 0,001 % -* + 58,9 % (ns) - "Mélange" à 0,005 % + 76,5 % (p<0,05) - "Mélange" à 0,01 % -* + 43,9 % (ns) - "Mélange" à 0,05 % + 22,2 % (ns) - "Mélange" à 0,1 % ù> + 199,2 % (p<0,05) 25 Le "Mélange" induit une augmentation significative du ratio DKK-1 / DKK-3 : 30 comme l'illustre la figure 15 qui représente le ratio DKK-1 / DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence du "Mélange" d'actifs.

Les résultats présentés dans la figure 16 qui illustre la production de DKK-1 et de DKK-3 dans un modèle de fibroblastes dermiques humains normaux adultes, après 48 heures d'incubation, en présence de dexaméthasone à 100 nM montrent que dans les conditions expérimentales retenues, après 48 heures d'incubation, la déxaméthasone, qui constitue le produit de référence, io induit une augmentation significative de la production de DKK-1 : - déxaméthasone à 100 nM -* + 43,6 % de DKK-1 (p<0,01)

En résumé, les résultats mentionnés ci-dessus montrent que la déxaméthasone 100 nM induit une augmentation significative de la production 15 de DKK-1 après 48 heures d'incubation : + 43,6 % (p < 0,01).

Les actifs "EDD CULX EtOH" et "EFCRAJ EtOH" induisent une augmentation significative de la production de DKK-1. - "EDD CULX EtOH" à 0,001 % -* + 26,4 % (p<0,05) 20 - "EDD CULX EtOH" à 0,005 % -* + 37,6 % (p<0,05) - "EDD CULX EtOH" à 0,01 % - + 37,4 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,001 % -* + 48,3 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,01 % - + 16,4 % (ns) 25 - "EFCRAJ EtOH" à 0,05 % -* + 25,9 % (ns) - "EFCRAJ EtOH" à 0,1 % - + 34,3 % (ns) Les actifs "Eg MM EtOH" et "Eg Cl EtOH" induisent une diminution significative 30 de la production de DKK-1 : - "Eg MM EtOH" à 0,005 % ù> - 31,0 % (p<0,05) - "Eg Cl EtOH" à 0,001 % ù> - 39,3 % (p<0,05) 25 30 - "Eg Cl EtOH" à 0,005 % ù> - 42,3 % (p<0,05) En ce qui concerne les résultats relatifs au DKK-3, la déxaméthasone à 100 nM n'induit aucune modification significative de la production DKK-3, après 48 5 heures d'incubation. Les actifs "EFCRAJ EtOH" et "Mélange" induisent une diminution significative de la production de DKK-3. - "EFCRAJ EtOH" à 0,001 % - 37,9 % (p<0,05) 10 - "EFCRAJ EtOH" à 0,005 % --~ - 25,7 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,01 % - - 31,6 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,05 % -* - 31,9 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,1 % ù> - 41,0 % (p<0,05) 15 - "Mélange" à 0,001 % - - 36,1 % (p<0,05) - "Mélange" à 0,005 % - 43,3 % (p<0,05) - "Mélange" à 0,01 % - 41,0 % (p<0,05) - "Mélange" à 0,05 % ù> - 12,3 % (ns) - "Mélange" à 0,1 % ù> - 51,3 % (p<0,05) 20 Enfin, en ce qui concerne le ratio DKK-1 / DKK-3, la dexaméthasone à 100 nM induit une augmentation non significative du ratio DKK-1 / DKK-3 : + 29,7 0/0 (ns) et les actifs "EDD CULX EtOH", "EFCRAJ EtOH" et "Mélange" induisent une augmentation significative du ratio DKK-1 / DKK-3 : - "EDD CULX EtOH" à 0,005 % -* + 79,3 % (p<0,05) - "EDD CULX EtOH" à 0,01 % -* + 107,9 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,001 % -> + 130,9 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,005 % ù> + 9,8 % (ns) - "EFCRAJ EtOH" à 0,01 % - + 64,9 % (p<0,05) - "EFCRAJ EtOH" à 0,05 % - + 77,0 % (p<0,05) 22 - "EFCRAJ EtOH" à 0,1 % -+ + 122,8 % (p<0,05) - "Mélange" à 0,001 % -> + 58,9 % (ns) - "Mélange" à 0,005 0/0 + 76,5 % (p<0,05) s - "Mélange" à 0,01 % ù> + 43,9 % (ns) - "Mélange" à 0,05 % + 22,2 % (ns) - "Mélange" à 0,1 % + 199,2 % (p<0,05) L'actif "Eg Cl EtOH" induit une diminution significative du ratio DKK-1 / DKK-3 : io - "Eg Cl EtOH" à 0,001 % -* - 31,3 % (p<0,05) - "Eg Cl EtOH" à 0,005 % ù> - 28,8 % (p<0,05)

Claims (13)

1. REVENDICATIONS1. Extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea, la famille des Balanitaceae, la famille des s Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre Calophyllum pour son utilisation comme agent de contrôle actif sur la mélanogénèse pour la fabrication de composition de contrôle de la mélanogénèse.
2. 2. Composition de contrôle de la mélanogénèse, caractérisée en ce qu'elle io contient comme agent de contrôle actif sur la mélanogénèse au moins un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea, la famille des Balanitaceae, la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre Calophyllum. 15
3. 3. Composition de contrôle de la mélanogénèse selon la revendication 2, caractérisée en ce que, ledit agent de contrôle étant un agent actif sur le rapport DKKI/DKK3, ladite composition contient au moins un extrait de végétal choisi soit dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea et la famille des Balanitaceae comme agent de contrôle actif dans 20 le sens d'une augmentation dudit rapport pour inhiber la mélanogénèse en particulier à des fins de dépigmentation, soit dans le groupe formé par la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre Calophyllum comme agent de contrôle actif dans le sens d'une diminution dudit rapport pour lever l'inhibition en particulier à des fins de repigmentation. 25
4. 4. Composition de contrôle selon l'une des revendications 2 et 3, caractérisée en ce que ladite composition est une composition pharmaceutique, en particulier dermatologique, qui contient au moins un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea et la 30 famille des Balanitaceae comme agent actif en une quantité efficace pour traiter ou prévenir les désordres hyperpigmentaires liés à la mélanogénèse, tels que les taches de rousseurs, les hyperpigmentations post inflammatoires dues à une abrasion, une brûlure, une cicatrice, une dermatose, une allergie de 23contact, les nevi, le chloasma, les taches de vieillesses, les hyperpigmentations atypiques.
5. 5. Composition de contrôle selon l'une des revendications 2 et 3, caractérisée en ce que ladite composition est une composition pharmaceutique en particulier dermatologique qui contient au moins un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre Calophyllum comme agent actif en une quantité efficace pour traiter ou prévenir les désordres hypopigmentaires tels que les io vitiligos, les vergitures, les cicatrices blanches.
6. 6. Composition de contrôle selon l'une des revendications 2 et 3, caractérisée en ce que ladite composition est une composition cosmétique, en particulier dépigmentante, qui contient comme agent actif de dépigmentation au moins un 15 extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea et la famille des Balanitaceae.
7. 7. Composition de contrôle selon la revendication 6, caractérisée en ce que ledit ou au moins l'un des agent(s) actif(s) de dépigmentation est un extrait de 20 feuilles de végétal de la famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea de préférence espèce chica présent dans ladite composition à une concentration exprimée en pourcentages en poids rapporté au poids total de la composition comprise entre 0,0001% et 2%, de préférence voisine de 0,1% ou un extrait de graines de végétal de la famille des Balanitaceae de préférence genre 25 Balanites espèce aegyptiaca présent dans ladite composition à une concentration exprimée en pourcentages en poids rapporté au poids total de la composition comprise entre 0,00005% et 1%, de préférence voisine de 0,01%.
8. 8. Composition de contrôle selon l'une des revendications 2 et 3, caractérisée 30 en ce que ladite composition est une composition cosmétique en particulier repigmentante qui contient comme agent actif de repigmentation un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre calophyllum.
9. 9. Composition de contrôle selon la revendication 8, caractérisée en ce que ledit ou au moins l'un des agent(s) actif(s) de repigmentation est un extrait de graines de végétal de la famille des Annonaceae genre Monodora de préférence espèce myristica présent dans ladite composition à une concentration exprimée en pourcentage en poids rapporté au poids total de la composition entre 0,0005% et 0,1%, de préférence voisine de 0,01% ou un extrait de graines de végétal de la famille des Clusiaceae genre calophyllum de préférence espèce inophyllum présent dans ladite composition à une io concentration exprimée en pourcentages en poids rapporté au poids total de la composition comprise entre 0,0005% et 2%, de préférence voisine de 0,1%.
10. 10. Composition de contrôle selon l'une des revendications 2 à 9, caractérisée en ce qu'elle est applicable par voie topique et se présente sous forme de 15 lotion, ou de gel, ou d'émulsion huile dans eau ou eau dans huile.
11. 11. Procédé de contrôle à des fins cosmétiques de la mélanogénèse chez un mammifère comprenant au moins une étape d'administration d'une quantité efficace d'au moins un extrait de végétal choisi dans le groupe formé par la 20 famille des Bignoniaceae genre Arrabidaea, la famille des Balanitaceae, la famille des Annonaceae genre Monodora et la famille des Clusiaceae genre Calophyllum.
12. 12. Procédé de contrôle à des fins cosmétiques de la mélanogénèse, en 25 particulier procédé de soin cosmétique destiné à atténuer ou supprimer les taches pigmentaires de la peau et/ou à éclaircir le teint selon la revendication 11, caractérisé en ce qu'il comprend l'application sur au moins une zone concernée de la peau d'une composition cosmétique conforme à l'une des revendications 6 et 7. 30
13. 13. Procédé de contrôle à des fins cosmétiques de la mélanogénèse, en particulier procédé de soin cosmétique destiné à atténuer ou supprimer les taches blanches de la peau et/ou à homogénéiser le teint type fond de teint et/ou à préparer au soleil caractérisée en ce qu'il comprend l'application sur au moins une zone concernée de la peau d'une composition cosmétique conforme à l'une des revendications 8 et 9.5