FR2944185A1 - INFUSION CHAMBER FOR CORNEA - Google Patents

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Abstract

Chambre de perfusion pour cornée comprenant une enceinte étanche (1, 2, 3, 6) apte à recevoir une cornée, caractérisée en ce qu'elle comprend des moyens aptes à maintenir la forme de la cornée lorsque l'enceinte est disposée de telle sorte que la surface interne de la cornée soit verticale.Corneal infusion chamber comprising a sealed enclosure (1, 2, 3, 6) adapted to receive a cornea, characterized in that it comprises means adapted to maintain the shape of the cornea when the chamber is arranged in such a way that the inner surface of the cornea is vertical.

Description

i CHAMBRE DE PERFUSION POUR CORNEE i INFUSION CHAMBER FOR CORNEA

La présente invention est relative à une chambre de perfusion pour cornée comprenant une enceinte étanche apte à recevoir une cornée. The present invention relates to an infusion chamber for cornea comprising a sealed chamber adapted to receive a cornea.

II est nécessaire, lors du processus de validation de nombreux produits, de déterminer la toxicité de ces produits pour l'oeil humain. Jusqu'à présent, de nombreux tests ont été effectués sur des animaux vivants, dans le but de chercher à prévoir l'impact de tels produits sur un oeil humain. Néanmoins, de tels tests sont de moins en moins acceptables et il io est nécessaire de les éviter au maximum. Diverses tentatives ont été faites pour effectuer différents types de tests sur des cornées prélevées sur des animaux. Isabelle Brunette, Leif R. Nelson et William M. Bourne dans A system for long-term corneal perfusion 1989, Investigative ophthalmology and 15 visual science, Vol. 30, Na 8, présentent l'utilisation d'une chambre de perfusion stérile de cornées humaines dans un but de conservation et de préservation de la cornée. La cornée ne peut pas être positionnée verticalement et aucune circulation de fluide lacrymal sur la surface externe de la cornée n'est prévue ce 20 qui ne permet pas de prendre en compte la dynamique lacrymale. II n'y a pas non plus d'application toxicologique ou de mesure de l'irritation oculaire ou de la réversibilité des atteintes cornéennes. MA Thiel, N Morlet, D Shultz, HF Edelhauser, JK Dart, DJ Coster et KA Williams dans A simple corneal perfusion chamber for drug penetration 25 and toxicity studies 2001, British Journal of Ophthalmology, 85:450-453, présentent un dispositif similaire utilisant un système clos de perfusion ne permettant pas une utilisation du système à la verticale. Il y a une application toxicologique mais sans aucune observation clinique et aucune circulation de fluide lacrymal sur la surface externe de la 30 cornée n'est prévue ce qui ne permet pas de prendre en compte la dynamique lacrymale. On peut noter également que la perfusion n'est réalisée que sur la face interne de la cornée. Van den Berghe C, Guillet MC et Compan D dans Performance of 35 porcine corneal opacity and permeability assay to predict eye irritation for watersoluble cosmetic ingredients 2005, Toxicology ln Vitro 19:823-830, présentent un travail utilisant un système clos de perfusion ne maintenant pas la cornée dans sa forme naturelle. Le support est vertical uniquement lors de la lecture et non pendant la phase d'application du produit. On peut remarquer que le dispositif ne permet pas l'observation directe de la cornée par une méthode clinique ainsi que l'observation de la réversibilité des effets toxicologiques. Par ailleurs le système n'est pas stérile et ne permet pas de prendre en compte la dynamique lacrymale. Frentz M, Goss M, Reim M, Schrage NF. 2008. Repeated exposure to BAK in the Ex Vivo Irritation Test (EVEIT): Observation of isolated corneal lo damage and healing. ATLA, 36, 25-32. Ce système utilise une chambre de perfusion pour réaliser une irrigation sur la face interne de la cornée en maintenant le modèle horizontal. La cinétique lacrymale n'est pas reproduite. Une approche ophtalmologique est utilisée pour visualiser l'atteinte toxique mais de manière qualitative. 15 Aucun système à ce jour ne permet d'effectuer des tests, la cornée étant dans un état et une position proche des conditions réelles. En particulier, les cornées sont toujours déposées horizontalement sur leur support. Dans un tel cas la cornée se déforme sous son propre poids et il est de plus impossible de la redresser pour la placer dans une situation proche de la réalité. 20 En effet lorsqu'un individu reçoit malencontreusement des projections du liquide à tester, il est rarement couché mais le plus souvent debout. De plus une projection de produit sur la cornée va provoquer une réaction lacrymale qu'il convient de prendre en compte lors des tests. Il est donc nécessaire de concevoir un dispositif permettant de placer la cornée dans 25 un nombre varié de position, tout en préservant au maximum sa forme, le dispositif permettant également de simuler un écoulement lacrymal. Le dispositif selon l'invention a notamment pour but de répondre aux besoins mentionnés ci-dessus. Selon l'invention une chambre de perfusion pour cornée comprenant 30 une enceinte étanche apte à recevoir une cornée, est caractérisée en ce qu'elle comprend des moyens aptes à maintenir la forme de la cornée lorsque l'enceinte est disposée de telle sorte que la surface interne de la cornée soit verticale. Avantageusement, la chambre de perfusion comprend des moyens 35 d'injection d'un gel dans la cornée. Les moyens d'injection peuvent comprendre un orifice d'injection. La chambre de perfusion peut comprendre des moyens d'injection de fluide sur la cornée. Le fluide injecté peut avoir des propriétés irritantes ou être un fluide lacrymal. Les moyens d'injection de fluide peuvent comprendre au moins un 5 orifice. La chambre de perfusion peut comprendre un support conique permettant de faire reposer la cornée. La chambre de perfusion peut comporter une paroi latérale cylindrique, l'orifice étant disposé tangentiellement à la paroi latérale io cylindrique. La chambre de perfusion peut comporter une paroi transparente ou une vitre apte à permettre l'observation de la cornée. L'invention concerne également un support de chambre de perfusion, apte à permettre le positionnement d'une chambre de perfusion 15 selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 sur un microscope Le procédé peut comporter une étape au cours de laquelle on ajoute à la cornée des cellules conjonctivales. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront dans la description qui suit d'un mode de réalisation préféré avec référence aux 20 dessins annexés mais qui n'a aucun caractère limitatif. Sur ces dessins : Fig. 1 est une vue en perspective d'une chambre de perfusion selon invention, Fig. 2 est une vue similaire à Fig. 1 suivant un point de vue différent. Fig. 3 est une vue en coupe transversale illustrant la structure 25 intérieure de la chambre de Fig. 1 et 2. Fig. 4 est une vue de la partie avant de la chambre de Fig. 1 et 2. Fig. 5 est une vue en perspective de l'avant de la partie intermédiaire de la chambre de Fig. 1 et 2. Fig. 6 est une vue en perspective de l'arrière de la partie 30 intermédiaire de la chambre de Fig. 1 et 2. Fig. 7 est une vue en perspective de l'avant de la partie arrière de la chambre de Fig. 1 et 2 illustrant le système où sera déposée la cornée. Fig. 8 est une vue en perspective de l'arrière de la partie arrière de la chambre de Fig. 1 et 2 illustrant le point d'injection ou de coulage du gel servant 35 à maintenir la cornée, et Fig. 9 est une vue en perspective d'un support d'adaptation de la chambre de Fig. 1 et 2 sur un bio-microscope. It is necessary, during the process of validation of many products, to determine the toxicity of these products for the human eye. So far, many tests have been carried out on live animals, in order to seek to predict the impact of such products on a human eye. Nevertheless, such tests are less and less acceptable and it is necessary to avoid them as much as possible. Various attempts have been made to perform different types of tests on corneas taken from animals. Isabelle Brunette, Leif R. Nelson and William M. Bourne in A system for long-term corneal infusion 1989, Investigative ophthalmology and visual science, Vol. 30, Na 8, disclose the use of a sterile perfusion chamber of human corneas for preservation and preservation of the cornea. The cornea can not be positioned vertically and no circulation of tear fluid on the outer surface of the cornea is expected which does not allow for tear dynamics. Nor is there toxicological application or measurement of ocular irritation or reversibility of corneal damage. MA Thiel, N Morlet, D Shultz, HF Edelhauser, JK Dart, DJ Coster and KA Williams in A Simple Corneal Perfusion Chamber for Drug Penetration 25 and Toxicity Studies 2001, British Journal of Ophthalmology, 85: 450-453, present a similar device using a closed infusion system that does not allow the system to be used vertically. There is a toxicological application but without any clinical observation and no circulation of tear fluid on the outer surface of the cornea is provided which does not allow to take into account the lacrimal dynamics. It may also be noted that perfusion is performed only on the inner face of the cornea. Van den Berghe C, Guillet ™ and Compan D in Performance of 35 porcine corneal opacity and permeability assay to predict eye irritation for watersoluble cosmetic ingredients 2005, Toxicology ln Vitro 19: 823-830, present a work using a closed infusion system now not the cornea in its natural form. The media is vertical only during playback and not during the application phase of the product. It may be noted that the device does not allow the direct observation of the cornea by a clinical method as well as the observation of the reversibility of the toxicological effects. Moreover, the system is not sterile and does not take into account the lacrimal dynamics. Frentz M, Goss M, Reim M, Schrage NF. 2008. Repeated exposure to BAK in the Ex Vivo Irritation Test (EVEIT): ATLA, 36, 25-32. This system uses an infusion chamber to perform irrigation on the inner side of the cornea by maintaining the horizontal model. The lacrimal kinetics are not reproduced. An ophthalmological approach is used to visualize the toxic attack but in a qualitative way. No system to date allows testing, the cornea being in a state and position close to the actual conditions. In particular, the corneas are always deposited horizontally on their support. In such a case the cornea is deformed under its own weight and it is moreover impossible to straighten it to put it in a situation close to reality. Indeed, when an individual inadvertently receives projections of the liquid to be tested, it is rarely lying but most often standing. In addition a projection of product on the cornea will cause a tear reaction that should be taken into account during testing. It is therefore necessary to design a device for placing the cornea in a varied number of positions, while preserving its shape as much as possible, the device also making it possible to simulate a lacrimal flow. The device according to the invention is intended in particular to meet the needs mentioned above. According to the invention, a cornea perfusion chamber comprising a sealed enclosure adapted to receive a cornea, is characterized in that it comprises means capable of maintaining the shape of the cornea when the chamber is arranged so that the inner surface of the cornea is vertical. Advantageously, the infusion chamber comprises means for injecting a gel into the cornea. The injection means may comprise an injection orifice. The perfusion chamber may comprise means for injecting fluid onto the cornea. The injected fluid may have irritating properties or be a lacrimal fluid. The fluid injection means may comprise at least one orifice. The perfusion chamber may include a conical support for resting the cornea. The perfusion chamber may comprise a cylindrical side wall, the orifice being disposed tangentially to the cylindrical side wall. The perfusion chamber may comprise a transparent wall or a window capable of allowing observation of the cornea. The invention also relates to an infusion chamber support, adapted to allow the positioning of an infusion chamber 15 according to any one of claims 1 to 8 on a microscope. The method may comprise a step in which it is added to the cornea conjunctival cells. Other features and advantages of the invention will become apparent from the following description of a preferred embodiment with reference to the accompanying drawings but which is in no way limiting. In these drawings: 1 is a perspective view of an infusion chamber according to the invention, FIG. 2 is a view similar to FIG. 1 from a different point of view. Fig. 3 is a cross-sectional view illustrating the interior structure of the chamber of FIG. 1 and 2. Fig. 4 is a view of the front portion of the chamber of FIG. 1 and 2. Fig. 5 is a perspective view of the front of the intermediate portion of the chamber of FIG. 1 and 2. Fig. 6 is a perspective view of the rear of the intermediate portion of the chamber of FIG. 1 and 2. Fig. 7 is a perspective view of the front of the rear portion of the chamber of FIG. 1 and 2 illustrating the system where the cornea will be deposited. Fig. 8 is a perspective view of the rear of the rear portion of the chamber of FIG. 1 and 2 illustrating the point of injection or casting of the gel serving to maintain the cornea, and FIG. 9 is a perspective view of an adaptation support of the chamber of FIG. 1 and 2 on a bio-microscope.

Dans toute la description qui suit d'un mode de réalisation d'une chambre de perfusion pour cornée selon l'invention, les termes relatifs tels que supérieur , inférieur , avant , arrière , horizontal et vertical sont à interpréter, sauf indication contraire, lorsque la chambre de perfusion s pour cornée est dressée verticalement, l'axe du trou 18 étant horizontal, la surface interne de la cornée étant verticale. On appelle surface externe de la cornée, la surface faisant face au milieu extérieur et surface interne de la cornée, la surface orientée vers le corps de l'organisme porteur de la cornée avant son prélèvement. io Fig. 1 et 2 montrent une chambre de perfusion pour cornée selon l'invention élaborée à partir de polypropylène et composée de trois parties, une partie avant 1, une partie intermédiaire 2 et une partie arrière 3, lesquelles sont de forme cylindrique avec un méplat M. La partie avant comporte une ouverture fermée par une vitre 6.Throughout the following description of an embodiment of a cornea perfusion chamber according to the invention, the relative terms such as upper, lower, front, back, horizontal and vertical are to be interpreted, unless otherwise indicated, when the perfusion chamber s for cornea is upright, the axis of the hole 18 being horizontal, the inner surface of the cornea being vertical. The outer surface of the cornea is called the outer surface and inner surface of the cornea, the surface facing the body of the corneal bearing organism before it is removed. Fig. 1 and 2 show a cornea infusion chamber according to the invention made from polypropylene and composed of three parts, a front part 1, an intermediate part 2 and a rear part 3, which are cylindrical with a flat M. The front part has an opening closed by a window 6.

15 Fig. 3 présente une vue en coupe longitudinale de la une chambre de perfusion illustrant l'assemblage des trois parties 1, 2, 3 avec deux joints de silicone circulaire 7, 8, la vitre 6 et six trous débouchants 9. Les trois parties 1, 2 et 3 sont maintenues solidairement entre elles à l'aide de six vis 4 et 5. Les trois vis 4 fixent et serrent la partie avant 1 (fig. 4) 20 sur la partie intermédiaire 2 (fig. 5 et 6). Le positionnement en rotation des parties les unes par rapport aux autres est facilité par le méplat M. Les trois vis 4 maintiennent également l'étanchéité en appuyant sur la vitre 6 et le joint 7, élaboré en silicone et interposé entre la vitre 6 et la partie intermédiaire 2, lesquels sont placés entre la partie avant 1 et la partie intermédiaire 2, Fig. 3.Fig. 3 shows a longitudinal sectional view of the perfusion chamber illustrating the assembly of the three parts 1, 2, 3 with two circular silicone seals 7, 8, the window 6 and six through holes 9. The three parts 1, 2 and 3 are integrally held together by means of six screws 4 and 5. The three screws 4 fix and clamp the front portion 1 (Fig. 4) on the intermediate portion 2 (Figs 5 and 6). The positioning in rotation of the parts relative to each other is facilitated by the flattened M. The three screws 4 also maintain the seal by pressing the window 6 and the seal 7, made of silicone and interposed between the glass 6 and the intermediate part 2, which are placed between the front part 1 and the intermediate part 2, FIG. 3.

25 Les trois vis 5 présentent des têtes de vis noyées dans la partie avant 1 et servent à maintenir la partie intermédiaire 2 avec la partie arrière 3. Les têtes des vis servent également de guide pour adapter la partie avant 1 (fig. 4) sur la partie intermédiaire 2 (fig. 5 et 6). On peut voir Fig. 4 les six trous de vis 4 et 5 ainsi qu'un évidement 30 chanfreiné central 10 permettant d'améliorer l'observation et l'accès à la cornée. Cette partie avant 1 permet le serrage de la vitre 6, laquelle vient appuyer sur le joint en silicone 7 pour garantir l'étanchéité de l'espace circulaire évidé de la pièce intermédiaire 2. L'étanchéité de l'espace interne du dispositif permet de travailler 35 dans des conditions stériles et contribue à la conservation de la viabilité de la cornée sur le long terme. Dans des conditions non stériles, il est difficile d'étudier la cornée plus de quelques heures, c'est-à-dire en général 4 ou 5 heures. Grâce à l'étanchéité du dispositif et à un travail dans des conditions stériles, il est possible de garder en vie la cornée pendant plusieurs jours. L'utilisation du dispositif selon l'invention peut permettre d'atteindre une durée de vie d'une semaine. Une durée de vie de la cornée de 21 jours ne semble pas un objectif irréalisable. On peut voir Fig. 5 et 6 les trois trous taraudés des vis 4 permettant le serrage de la partie avant 1 sur la partie intermédiaire 2 et les trois trous débouchant non taraudés des vis 5 permettant le serrage des trois parties 1, 2, 3 ensemble. io On peut voir également un évidement circulaire central dans la partie intermédiaire 2 comprenant un premier lamage 11 sur lequel repose le joint élaboré en silicone 8 et la vitre circulaire transparente 6 et un second lamage 12 plus large permettant de déposer différents types cellulaires et sur le bord duquel les six trous traversants 9 débouchent.The three screws 5 have screw heads embedded in the front part 1 and serve to hold the intermediate part 2 with the rear part 3. The screw heads also serve as a guide for adapting the front part 1 (FIG. the intermediate part 2 (Figures 5 and 6). We can see Fig. 4 the six screw holes 4 and 5 and a central chamfered recess 10 for improving observation and access to the cornea. This front part 1 makes it possible to tighten the window 6, which presses against the silicone seal 7 to guarantee the tightness of the hollow circular space of the intermediate part 2. The tightness of the internal space of the device makes it possible to work under sterile conditions and contributes to the long-term preservation of corneal viability. Under non-sterile conditions, it is difficult to study the cornea for more than a few hours, i.e., usually 4 or 5 hours. Thanks to the tightness of the device and work in sterile conditions, it is possible to keep the cornea alive for several days. The use of the device according to the invention can achieve a life of one week. A 21-day corneal life does not seem an unrealistic goal. We can see Fig. 5 and 6 the three threaded holes of the screws 4 for clamping the front portion 1 on the intermediate portion 2 and three holes unthreaded tapped screws 5 for clamping the three parts 1, 2, 3 together. We can also see a central circular recess in the intermediate part 2 comprising a first countersink 11 on which rests the elaborated silicone seal 8 and the transparent circular pane 6 and a second wider counterbore 12 for depositing different types of cells and on the edge of which the six through holes 9 open.

15 Les trous 9 permettent d'injecter du liquide de rinçage et/ou de survie au niveau de la cornée. Ceci permet de recréer une dynamique lacrymale en simulant un écoulement lacrymal sur la cornée. Cette possibilité permet de se rapprocher des conditions réelles dans laquelle se trouve une cornée.The holes 9 make it possible to inject rinsing and / or survival liquid at the level of the cornea. This recreates a tear dynamic by simulating a tear flow on the cornea. This possibility allows to get closer to the real conditions in which is a cornea.

20 Le trou 9 situé à l'altitude la plus élevée lorsque la cornée est verticale peut être utilisé pour injecter des produits dont on souhaite caractériser les effets sur la cornée. II est possible d'injecter simultanément les produits à tester et le fluide lacrymal de manière à reproduire la distribution d'un produit entrant en 25 contact avec la cornée. On rappelle ici que le contact avec la cornée d'un produit agressif provoque généralement un écoulement lacrymal abondant qui influe sur la dispersion du produit agressif à la surface de la cornée. On comprend qu'il est donc important de pouvoir récréer cette dynamique dans le dispositif selon l'invention.Hole 9 located at the highest altitude when the cornea is vertical can be used to inject products whose effects on the cornea are to be characterized. It is possible to inject the test products and the lacrimal fluid simultaneously to reproduce the distribution of a product coming into contact with the cornea. It is recalled here that the contact with the cornea of an aggressive product generally causes an abundant tear flow which influences the dispersion of the aggressive product on the surface of the cornea. It is understood that it is therefore important to recreate this dynamic in the device according to the invention.

30 Les trous 9 permettent également le prélèvement du liquide circulant dans le dispositif afin notamment de doser des marqueurs biologiques dans ce liquide. Enfin, un évidement circulaire 13 dans la partie intermédiaire 2 permet à la cornée de déboucher directement dans l'évidement interne de la 35 partie 2. Sur la face extérieure de la partie intermédiaire 2 sont présents deux trous 14 (fig. 5) débouchant dans l'évidement de la partie intermédiaire 2 au niveau du lamage 12 qui permettent de drainer l'excédant de liquide qui s'accumulera dans l'évidement interne de la partie intermédiaire 2. On peut voir Fig. 7 un épaulement 15 d'étendant à partir de la partie arrière 3 de l'invention. Trois trous taraudés pour les vis 5 sont également visibles. Un second épaulement au centre de la partie arrière 3 comprend un support conique 16 permettant de faire reposer l'anneau scléral de la cornée et de maintenir celle-ci dans une courbure anatomique naturelle. Au centre de la partie arrière de la chambre de perfusion (Fig. 8) un évidement circulaire débouchant et chanfreiné 17 de la partie arrière de io l'invention permet l'écoulement rétrograde du gel de structure de la cornée lors de son coulage ou de son injection à l'aide du trou taraudé et débouchant 18. Cet évidement permet également le prélèvement d'échantillons de gel de manière à étudier l'évolution de sa composition pour réaliser des études de la perméabilité cornéenne. En effet une perméabilité de la cornée va 15 provoquer le passage d'éléments présents dans le liquide circulant dans le dispositif à travers la cornée vers le gel de structure. Une analyse de ce gel permet donc de détecter et de quantifier cette perméabilité. Le trou 18 comprend un lamage 19, ce qui permet d'introduire et de fixer une vis afin de maintenir la stérilité de l'ensemble et de pouvoir accéder à 20 la face interne de la cornée. La chambre de perfusion permet donc l'injection d'un gel pour rigidifier la cornée et permet également le positionnement vertical de la cornée. Il est également possible d'ajouter à la cornée des cellules conjonctivales afin d'avoir une oeil "complet" cornée et conjonctive, de façon à 25 améliorer la pertinence analyses de toxicité. Fig. 9 illustre un support de maintien 20 élaboré en polypropylène et servant à positionner la chambre de perfusion directement sur un biomicroscope afin d'étudier cliniquement la cornée. Le support 20 est constitué d'une seule partie comportant un plateau 30 inférieur formant socle et un plateau supérieur formant plateforme 23 destinée à accueillir la chambre de perfusion, réunies par une cloison verticale. Le socle est muni de deux trous débouchants non taraudés 21 permettant d'introduire deux pions 22 pour maintenir le support sur le biomicroscope. La plate-forme 23 comprend deux bordures encadrant une partie 35 centrale rainurée. L'une des bordures est équipée d'une vis 24 permettant le serrage et le maintien de l'invention. II faut noter que la présence de la vitre 6 permet un accès à la cornée pour réaliser des observations et/ou des examens ophtalmologiques. La position verticale de la cornée revêt ici une grande importance et permet de placer une cornée vivante dans le dispositif rendu stérile en face d'un dispositif classique d'observation ophtalmologique, d'un microscope ou d'une lampe à fente. Il est notamment possible d'évaluer le comportement de particules de cosmétiques et d'observer l'action d'agglomérats formés par des particules de cosmétiques. De tels agglomérats peuvent rayer la cornée. On notera que le dispositif permet également l'étude de lentilles de io contact et en particulier leur résistance aux cosmétiques et aux agglomérats formés par ceux-ci. 20 30 The holes 9 also allow the removal of the circulating liquid in the device in particular to dose biological markers in this liquid. Finally, a circular recess 13 in the intermediate part 2 allows the cornea to open directly into the internal recess of the part 2. On the outer face of the intermediate part 2 there are two holes 14 (FIG. the recess of the intermediate portion 2 at the countersink 12 which drain the excess liquid which will accumulate in the internal recess of the intermediate portion 2. It can be seen FIG. 7 a shoulder 15 extending from the rear portion 3 of the invention. Three threaded holes for the screws 5 are also visible. A second shoulder in the center of the rear portion 3 comprises a conical support 16 for resting the scleral ring of the cornea and maintain it in a natural anatomical curvature. In the center of the rear part of the infusion chamber (Fig. 8) an opening and chamfered circular recess 17 of the rear part of the invention allows the retrograde flow of the structural gel of the cornea during its casting or its injection with the tapped hole and opening 18. This recess also allows the collection of gel samples so as to study the evolution of its composition to perform studies of corneal permeability. Indeed a permeability of the cornea will cause the passage of elements present in the liquid flowing in the device through the cornea to the gel structure. An analysis of this gel thus makes it possible to detect and quantify this permeability. The hole 18 includes a countersink 19, which makes it possible to introduce and fix a screw in order to maintain the sterility of the assembly and to be able to access the internal face of the cornea. The perfusion chamber therefore allows the injection of a gel to stiffen the cornea and also allows the vertical positioning of the cornea. It is also possible to add conjunctival cells to the cornea in order to have a "complete" corneal and conjunctive eye, so as to improve the relevance of toxicity analyzes. Fig. 9 illustrates a support support 20 made of polypropylene and used to position the perfusion chamber directly on a biomicroscope to study clinically the cornea. The support 20 consists of a single part comprising a lower plate 30 forming a base and an upper plate 23 forming platform to accommodate the perfusion chamber, joined by a vertical partition. The base is provided with two unthreaded through holes 21 for introducing two pins 22 to hold the support on the biomicroscope. The platform 23 comprises two borders framing a grooved central portion. One of the borders is equipped with a screw 24 for clamping and maintaining the invention. It should be noted that the presence of the window 6 allows access to the cornea to perform observations and / or ophthalmological examinations. The vertical position of the cornea is of great importance here and makes it possible to place a living cornea in the sterile device in front of a conventional ophthalmological observation device, a microscope or a slit lamp. In particular, it is possible to evaluate the behavior of cosmetic particles and to observe the action of agglomerates formed by particles of cosmetics. Such agglomerates can scratch the cornea. Note that the device also allows the study of contact lenses and in particular their resistance to cosmetics and agglomerates formed by them. 20 30

Claims (13)

REVENDICATIONS1. Chambre de perfusion pour une cornée comprenant une enceinte étanche (1, 2, 3, 6) apte à recevoir une cornée, caractérisée en ce qu'elle comprend des moyens (16, 18) aptes à maintenir la forme de la cornée lorsque l'enceinte est disposée de telle sorte que la surface interne de la cornée soit verticale. REVENDICATIONS1. Infusion chamber for a cornea comprising a sealed enclosure (1, 2, 3, 6) adapted to receive a cornea, characterized in that it comprises means (16, 18) able to maintain the shape of the cornea when the enclosure is arranged so that the inner surface of the cornea is vertical. 2. Chambre de perfusion suivant la revendication 1, caractérisée en ce io qu'elle comprend des moyens d'injection d'un gel dans la cornée. 2. Perfusion chamber according to claim 1, characterized in that it comprises means for injecting a gel into the cornea. 3. Chambre de perfusion suivant la revendication 2, caractérisée en ce que les moyens d'injection comprennent un orifice d'injection (18). 15 3. Infusion chamber according to claim 2, characterized in that the injection means comprises an injection port (18). 15 4. Chambre de perfusion suivant les revendications 1 à 3, caractérisée en ce qu'elle comprend des moyens d'injection de fluide (9) sur la cornée. 4. Perfusion chamber according to claims 1 to 3, characterized in that it comprises fluid injection means (9) on the cornea. 5. Chambre de perfusion suivant la revendication 4, caractérisée en ce que le fluide a des propriétés irritantes. 5. Perfusion chamber according to claim 4, characterized in that the fluid has irritating properties. 6. Chambre de perfusion suivant la revendication 4, caractérisée en ce que le fluide est un fluide lacrymal. Infusion chamber according to claim 4, characterized in that the fluid is a lacrimal fluid. 7. Chambre de perfusion suivant la revendication 4, caractérisée en ce que 25 les moyens d'injection de fluide comprennent au moins un orifice (9). 7. Perfusion chamber according to claim 4, characterized in that the fluid injection means comprise at least one orifice (9). 8. Chambre de perfusion suivant l'une quelconques des revendications 1 à 7, caractérisée en ce qu'une comprend un support conique (16) permettant de faire reposer la cornée. 8. Perfusion chamber according to any one of claims 1 to 7, characterized in that one comprises a conical support (16) for resting the cornea. 9. Chambre de perfusion suivant les revendications 4 et 7, caractérisée en ce qu'elle comporte une paroi latérale cylindrique, l'orifice (9) étant disposé tangentiellement à la paroi latérale cylindrique. 35 9. Perfusion chamber according to claims 4 and 7, characterized in that it comprises a cylindrical side wall, the orifice (9) being arranged tangentially to the cylindrical side wall. 35 10. Chambre de perfusion suivant l'une quelconques des revendications 1 à 9, caractérisée en ce qu'elle comprend une paroi transparente apte à permettre l'observation de la cornée. 5 10. Perfusion chamber according to any one of claims 1 to 9, characterized in that it comprises a transparent wall adapted to allow observation of the cornea. 5 11. Chambre de perfusion suivant l'une quelconques des revendications 1 à 10, caractérisée en ce qu'elle est mise en place sur un support de chambre de perfusion. 11. Perfusion chamber according to any one of claims 1 to 10, characterized in that it is placed on an infusion chamber support. 12. Procédé de préparation d'une cornée, caractérisé en ce que la cornée est disposée dans une chambre de perfusion suivant l'une quelconque des revendications 1 à 10, un gel étant injecté dans la cornée. l0 12. A method of preparing a cornea, characterized in that the cornea is disposed in an infusion chamber according to any one of claims 1 to 10, a gel being injected into the cornea. l0 13. Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que l'on ajoute à la cornée des cellules conjonctivales. 13. The method of claim 12, characterized in that conjunctival cells are added to the cornea.
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