FR2926464A1 - Composes utilisables pour le traitement de douleurs neuropathiques - Google Patents

Abstract

La présente invention se rapporte à l'utilisation d'un agoniste de récepteur béta adrénergique comme principe actif pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement de la douleur neuropathique, notamment de la douleur neuropathique chronique, et de manière plus générale pour la fabrication de médicaments destinés à soulager la douleur. Le principal domaine d'application de la présente invention est biomédical et plus précisément thérapeutique. La présente invention vise notamment à fournir un médicament qui peut se substituer aux antidépresseurs actuellement utilisés pour traiter la douleur. Elle trouve une application en clinique humaine et vétérinaire.

Description

COMPOSES UTILISABLES POUR LE TRAITEMENT DE DOULEURS NEUROPATHIQUES

Description

Domaine technique de l'invention [001] La présente invention se rapporte à l'utilisation comme principes actifs de composés qui sont des agonistes de récepteurs béta adrénergiques pour la fabrication de médicaments destinés au traitement des douleurs neuropathiques, notamment la douleur neuropathique chronique, et de manière plus générale pour la fabrication de médicaments destinés à soulager la douleur. [002] Le principal domaine d'application de la présente invention est biomédical et plus précisément thérapeutique. Elle trouve une application en clinique humaine et vétérinaire. [003] La présente invention vise notamment à fournir des médicaments qui peuvent se substituer aux traitements actuellement utilisés pour traiter la douleur. [004] Dans la description qui suit, les références entre parenthèse (x) renvoient à la liste des références située à la fin des exemples. Art antérieur [5] D'après une étude clinique récente (Bouhassira et coll., Pain, 2007 (1)), les douleurs chroniques à composante neuropathique ont en France une prévalence de 6,9 % dans la population générale, ce qui touche en France environ 4 millions de personnes. [6] Les douleurs neuropathiques sont des maladies en général chroniques liées à un dysfonctionnement ou à une lésion du système nerveux comme décrit dans Merksey et Bogduk (1994) (2). Elles impliquent des modifications moléculaires durables. Les traitements efficaces à long terme passent également par une plasticité du système nerveux : ils sont inefficaces les premiers jours, puis soulagent la douleur. [7] Le traitement des douleurs neuropathiques chroniques est difficile à prendre en charge cliniquement car la plupart des traitements antalgiques classiques sont inefficaces sur la durée. C'est notamment le cas des opiacés pour lesquels une tolérance aux effets se développe. [8] Le traitement pharmacologique des douleurs neuropathiques persistantes utilise actuellement principalement soit des anticonvulsivants, par exemple de la prégabaline ou de la gabapentine ; soit des antidépresseurs de type tricyclique, par exemple de l'amitriptyline, de la nortriptyline, de la clomipramine, de l'imipramine, de la désipramine, ou des antidépresseurs de type inhibiteur mixte de la recapture de la sérotonine et de la noradrénaline, par exemple de la duloxétine, de la venlafaxine. Actuellement, anticonvulsivants et antidépresseurs sont les 2 options de prescription recommandées dans divers pays comme première ligne de traitement pour lutter contre les douleurs neuropathiques (McQuay et coll., 1996, Pain 68:217-227 (3) ; Hempenstall et coll. PLoS Med, 2005, 2:e164 (4) ; Gilron et coll., CMAJ, 2006, 175:265-275 (5) ; Attal et coll., European Journal of Neurology, 2006, 13:1153-1169 (6) ; Moulin et coll., Pain Research Management, 2007, 12:13-21 (7) ; Dworkin et coll., Pain, 2007, 132:237-251 (8)). [9] Comme pour la plupart des maladies chroniques touchant le système nerveux, aucun médicament disponible n'est à la fois efficace et supporté chez l'ensemble les patients. [010] Par exemple, si les antidépresseurs sont efficaces, leur utilisation pose en effet certains problèmes : 1) Des effets psychologiques : certains patients douloureux acceptent mal la prescription d'un "antidépresseur" connu pour soigner des troubles psychiatriques alors qu'ils ne sont pas dépressifs ; 2) Des effets secondaires qui peuvent être mal supportés et qui affectent environ 30% des patients (McQuay et coll., 1996 (3)) : par exemple une somnolence ou une sédation, des troubles de la vision, une constipation, une rétention urinaire ou une dysurie, une bouche sèche, une hypersudation, une prise de poids, une tachycardie ou une arythmie cardiaque, une hypotension orthostatique, de l'impuissance, des tremblements, des crises convulsives, de la confusion mentale, une augmentation de l'agressivité, de la paranoïa et des comportements suicidaires, une augmentation du volume mammaire, une galactorrhée, des réactions allergiques cutanées, une dysarthrie, une éosinophilie, une leucopénie, une agranulocytose, une thrombopénie, des syncopes; 3) Un manque de spécificité d'action : L'antidépresseur en augmentant les taux extracellulaires de monoamines, (comme adrénaline, noradrénaline et sérotonine) agit sur l'ensemble des adrénorécepteurs ainsi que sur les récepteurs sérotonergiques, que ces différents récepteurs aient ou non une influence sur la douleur neuropathique ; 4) Une variabilité de l'action entre les patients : les antidépresseurs ne sont efficaces que sur une fraction des patients (entre 30 et 50% des patients) (McQuay, 1996 (3) ; Attal et coll., 2006 (6)). 15 [11] II est essentiel pour le clinicien de disposer d'une palette plus diversifiée de médicaments que celle actuellement connue de façon à proposer au patient celui qui est le mieux adapté à son cas. [12] Il existe donc un réel besoin de nouvelles molécules utilisables pour le 20 traitement de la douleur, plus efficaces, mieux tolérées, mieux acceptées et ayant une action plus ciblée. [13] D'autres traitements de la douleur neuropathique sont utilisés actuellement, par exemple les techniques de neurostimulation, les techniques de chirurgie, les techniques d'acupuncture et la psychanalyse. Mais ces techniques 25 nécessitent l'intervention répétée du/des praticiens et éventuellement une hospitalisation, elles sont difficiles à mettre en oeuvre, longues et/ou pas toujours satisfaisantes.

Exposé de l'invention 30 [014] La présente invention répond précisément à ce besoin et résout les inconvénients de l'art antérieur. [015] Depuis plus de 30 ans que les antidépresseurs sont utilisés en clinique pour soulager les douleurs neuropathiques, il n'avait encore jamais été envisagé 10 que des agonistes des récepteurs béta- adrénergiques puissent avoir le même effet et puissent se substituer aux antidépresseurs pour soulager durablement la douleur neuropathique. Cette situation résulte sans doute de la méconnaissance du mécanisme d'action précis des antidépresseurs sur la douleur que l'on supposait relié aux alpha2-adrénorécepteurs. En effet, en prise aiguë, les agonistes des alpha2-adrénorécepteurs peuvent faciliter l'analgésie et sont utilisés en routine comme thérapie associée lors de la prise en charge de la douleur en péri-opératoire (Crassous et coll., 2007, Current Topics in Medicinal Chemistry 7:187-194 (9)). Il semblait donc simple et naturel d'imaginer qu'ils étaient aussi responsables de l'effet des antidépresseurs, bien que cela n'ait jamais été prouvé. Nous avons démontré que ce n'était pas le cas et qu'en réalité les adrénorécepteurs cruciaux pour l'effet thérapeutique des antidépresseurs sur la douleur neuropathique sont les béta2-adrénorécepteurs. [16] Les inventeurs de la présente ont identifié les adrénorécepteurs responsables de l'effet thérapeutique des antidépresseurs contre la douleur neuropathique chronique. II s'agit des adrénorécepteurs de la famille béta, et notamment ceux du sous-type béta2. Dans un modèle murin de douleur neuropathique, ils ont en effet fait disparaître l'action thérapeutique des antidépresseurs en bloquant les adrénorécepteurs béta ou béta2. De plus, la seule administration de divers agonistes béta2-adrénergiques ou bétaadrénergiques suffit à soulager l'allodynie neuropathique dans ce modèle. L'allodynie, qui est une sensation douloureuse en réponse à un stimulus qui ne devrait pas être douloureux, est un symptôme important des douleurs neuropathiques. Les agonistes béta2-adrénergiques, et de façon plus large les agonistes béta-adrénergiques, peuvent donc permettre de traiter les douleurs neuropathiques et offrent une alternative plus ciblée à l'utilisation actuelle des antidépresseurs. [17] Aussi, la présente invention se rapporte à l'utilisation d'un agoniste béta adrénergique comme principe actif pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement de douleurs neuropathiques. Selon l'invention, ces douleurs peuvent être chroniques. [18] Par douleur neuropathique on entend les douleurs liées à un dysfonctionnement et/ou à une lésion de l'un quelconque des éléments constitutifs des voies nociceptives comme décrit dans Merksey et Bogduk (1994) (2). Cela comprend, par exemple, les douleurs consécutives aux lésions ou irritations des nerfs périphériques (qu'il y ait une atteinte axonale et/ou myélinique), de la moelle épinière, des structures supraspinales. La lésion ou le dysfonctionnement peut être par exemple d'origine mécanique, par exemple post-traumatique ; post-chirurgical ; par exemple lié à lésion nerveuse sous une cicatrice, comme c'est le cas dans un syndrome post-thoracotomie ; à une algohallucinose dans une amputation de membre ; à une compression de nerfs dans les syndromes canalaires ; à une compression radiculaire dans une radiculopathie par hernie discale, situation qui peut être accompagnée d'une composante inflammatoire ; à une section ou un traumatisme de la moelle donnant les douleurs des paraplégies ; par exemple d'origine métabolique, par exemple neuropathie de l'alcoolisme, du diabète, des dysthyroïdies ; neuropathies carentielles ; par exemple d'origine ischémique, par exemple lié à une ischémie artérielle périphérique, une ischémie spinale, un accident vasculaire cérébral ; par exemple d'origine toxique, par exemple liée à des médicaments, par exemple les chimiothérapies anticancéreuses à base de dérivés de la pervenche, de sels de platine ; à l'amiodarone ; à des toxiques industrielles, par exemple l'acrylamide, les colles, etc. ; par exemple d'origine infectieurse, par exemple HIV, herpès, varicelle, zona ; par exemple d'origine immuno-allergique, par exemple les neuropathies paranéoplasiques, le syndrome de Guillain-Barré ; par exemple d'origine héréditaire, par exemple les neuropathies à fibres fines. [19] Selon l'invention, l'agoniste béta adrénergique est de préférence un agoniste béta2 adrénergique ou une molécule moins spécifique possédant entre autres une action agoniste béta2 adrénergique. [20] Selon l'invention, l'agoniste béta adrénergique peut être choisi par exemple dans le groupe comprenant bambutérol, bitolterol mésylate, clenbutérol, fénotérol, formotérol, isoprotérénol (ou isoprénaline), levalbutérol, métaprotérénol, pirbutérol, procatérol, réprotérol, ritodrine, salbutamol (ou albutérol), salmétérol, terbutaline, ou tulobutérol. Par agoniste, on entend également dans la présente, les sels pharmaceutiquement acceptables des agonistes précités et/ou des mélanges de ces agonistes et/ou de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. [21] Des sels pharmaceutiquement acceptables au sens de la présente invention sont par exemple des chlorhydrates, des sulfates, des bromures, des hydrates de bromures, des hydrates (par exemple dihydrates, trihydrates, tétrahydrates et autres), des sodiums, des fumarates, des tartrates, des mésylates, des nitrates, des dinitrates, des maléates, des acétates, des citrates, des propionates, des xinafoates ou hydroxynafoates. [22] Selon l'invention, le médicament peut être à usage humain ou vétérinaire. [23] Selon l'invention, le médicament peut être sous toute forme appropriée pour pouvoir être administré à un patient ou à un animal. L'administration peut être réalisée directement, c'est-à-dire à partir de l'agoniste pur ou sensiblement pur ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable de l'agoniste pur ou sensiblement pur, ou en mélange avec un support pharmaceutiquement acceptable ou dans un milieu pharmaceutiquement acceptable. Le médicament peut donc être l'agoniste, ou un sel de celui-ci, sous forme pure ou sensiblement pure, ou l'agoniste dans un solvant approprié ou encore sous une forme galénique appropriée à son administration à un patient ou un animal et à son absorption par un patient ou un animal. [24] Le médicament peut être par exemple sous une forme choisie dans le groupe comprenant une forme injectable (par exemple, VENTOLINE (marque déposée)), un sirop (par exemple, ATARA) marque déposée)), une solution buvable (par exemple, EFFERALGAN (marque déposée) 3%), un comprimé (par exemple, ASPIRINE DU RHONE (marque déposée)), un comprimé sécable (par exemple, CLARADOL (marque déposée)), un comprimé pelliculé (par exemple, APRANA) marque déposée)), un comprimé pelliculé sécable (par exemple, ZYRTECSET (marque déposée)), un comprimé gastrorésistant (par exemple, ASPIRINE (marque déposée) PH 8 500 mg cp gastrorésis), un comprimé enrobé (par exemple FERVEX (marque déposée)), un comprimé dispersable (par exemple, SPASMOCALM (marque déposée)), un comprimé à croquer (par exemple, RENNIE (marque déposée)), une plaquette thermoformée (par exemple VENTODISKS (marque déposée)), une gélule (par exemple, POLYPRINE (marque déposée) gél), un effervescent (par exemple, EFFERALGAN (marque déposée)), un comprimé effervescent sécable (par exemple, PREDNISOLONE ARROW (marque déposée)), une poudre pour solution buvable (par exemple, DOLIPRANE (marque déposée)), des granules pour suspension buvable (par exemple, APRANA) marque déposée)), une suspension pour inhalation (par exemple, AIROMIR AUTOHALER (marque déposée)), une poudre pour inhalation (par exemple, ASMELOR NOVALIZER (marque déposée)), une solution pour inhalation par nébuliseur (par exemple, SALBUTAMOL ARROW (marque déposée)), une poudre pour inhalation en gélule, (par exemple, FORADIL (marque déposée)), un suppositoire (par exemple, DOLIPRANE (marque déposée)), un collyre (par exemple, RIFAMYCINE CHIBRET (marque déposée)), une crème (par exemple, FUCIDINE (marque déposée) 2%), une pommade (par exemple, MUPIDERM (marque déposée)), un gel (par exemple, FINACEA (marque déposée)), un spray (par exemple, NASONEX (marque déposée)), un dispositif transdermique ou patch (par exemple, DUROGESIC (marque déposée)), une pastille (par exemple, STREPSILS (marque déposée)), une solution pour perfusion intraveineuse (par exemple SALBUTAMOL MERCK (marque déposée)), pour administration péridurale ou intra- ou péri-articulaire ou périphérique ou régionale ou paravertébrale (par exemple LIDOCAINE ADRENALINE AGUETANT (marque déposée) 2% SOLUTION INJECTABLE), ou administration intrathécale (par exemple BUPIFORAN (marque déposée) 0,25% SOLUTION INJECTABLE), ou infiltration locale (par exemple BUPIVACAINE AGUETTANT (marque déposée) 0,25% SOLUTION INJECTABLE). Dans ces exemples, l'agoniste peut être ajouté ou remplacer les principes actifs des médicaments cités. Les compositions de chacun de ces médicaments peuvent être trouvées par exemple dans le Dictionnaire VIDAL, Edition 2007. [025] Le support pharmaceutiquement acceptable peut être par exemple tout support pharmaceutiquement acceptable connu utilisé pour l'administration des agonistes précités à un humain ou à un animal, suivant l'usage du médicament. Par exemple, le support peut être choisi dans le groupe comprenant la povidone, la silice colloïdale, le talc, la cellulose microcristalline, le lactose monohydraté, la gélatine, la lécithine, l'amidon, la crospovidone, le glycérol, la paraffine, la butylhydroxyanisole, la vaseline, la lanoline, la gomme arabique. [026] Le milieu pharmaceutiquement acceptable peut être tout milieu connu qui convient à l'administration d'un agoniste tel que défini dans la présente à un humain ou à un animal. Ce milieu peut être par exemple de l'éthanol, du saccharose, du glycérol, du propylèneglycol, de la saccharine sodique, de l'acétate de sodium, de l'acide acétique, de l'eau, une solution physiologique, de la paraffine liquide, de la butylhydroxyanisole, de la vaseline, de la lanoline, de la gomme arabique. [27] Selon l'invention, de préférence, l'administration est chronique. Par administration chronique ou traitement chronique , on entend dans la présente une prise répétée ou maintenue sur au moins plusieurs jours. Par exemple, une administration chronique peut consister en plusieurs prises ou administration du médicament sous l'une quelconque de ses formes décrites ci-dessus ; ou en une prise unique ou répétée du médicament sous une forme à durée d'action longue ou maintenue dans le temps (comme par exemple une perfusion ou un dispositif transdermique). [28] Selon l'invention, le médicament peut comprendre toute dose d'agoniste pharmaceutiquement acceptable et efficace dans la mise en oeuvre de la présente invention. Par exemple, le médicament peut comprendre une dose permettant une administration par exemple chez l'homme allant de 0,01 à 72mg/jour. Cela peut par exemple comprendre des doses de 10 à 20 mg/jour pour le bambutérol, ou de 0,02 à 0,2mg/jour pour le clenbutérol, ou de 0,05 à 0,8mg/jour pour le fénotérol, ou de 0,01 à 0,05mg/jour pour le formotérol, ou de 0,2 à 10mg/jour pour l'isoprotérénol (ou isoprénaline), ou de 0,2 à 3mg/jour pour le pirbutérol, ou de 0,05 à 72mg/kg pour la ritodrine, ou de 0,1 à 36mg/jour pour le salbutamol, ou de 0,025 à 0,1 mg/jour pour le salmétérol, de 0,5 à 13,5mg/jour pour la terbutaline. Il s'agit bien entendu d'exemples, les doses pourront être adaptées notamment en fonction de la sensibilité des patients à ce traitement. [29] La présente invention se rapporte également à un procédé de traitement de la douleur, en particulier de la douleur neuropathique, ce procédé comprenant l'administration à un patient d'un agoniste tel que défini ci-dessus. Le patient peut être humain ou animal. Des agonistes utilisables et des formulations sont donnés en exemple ci-dessus. [30] L'administration peut être réalisée par tout moyen connu de l'homme du métier, en particulier par tout moyen connu pour l'administration des agonistes précités. Des exemples de modes d'administration sont décrits ci-dessus. [31] Par exemple, l'administration peut être réalisée par injection directe de l'agoniste, ou par perfusion, par prise orale sous forme notamment de sirop, de solution buvable, de comprimé, de comprimé effervescent, ou, pelliculé, ou sécable, ou enrobé, ou gastrorésistant, ou dispersable, ou à croquer, de tablette thermoformée, de gélule, de pastille, de poudre ou de granules pour solution buvable, par utilisation d'une suspension ou d'une poudre pour inhalation, d'une poudre pour inhalation en gélule, d'une solution pour inhalation par nébuliseur, par une prise de suppositoire, par utilisation de collyre, par utilisation de crème, de pomade ou de gel, par utilisation de spray, par utilisation de dispositifs transdermiques, par administration ou infiltration ou perfusion péridurale ou intraou péri-articulaire ou régionale ou périphérique ou intrathécale ou paravertébrale ou locale. Des exemples de compositions utilisables pour ces différentes voies d'administration sont décrits ci-dessus. [32] L'administration peut être définie de manière à permettre une délivrance pharmaceutiquement acceptable et efficace pour traiter la douleur, en particulier la douleur neuropathique. Par exemple, l'administration peut comprendre une dose par exemple chez l'homme allant de 0,01 à 72mg/jour. Cela peut par exemple comprendre des doses de 10 à 20 mg/jour pour le bambutérol, ou de 0,02 à 0,2mg/jour pour le clenbutérol, ou de 0,05 à 0,8mg/jour pour le fénotérol, ou de 0,01 à 0,05mg/jour pour le formotérol, ou de 0,2 à 10mg/jour pour l'isoprotérénol (ou isoprénaline), ou de 0,2 à 3mg/jour pour le pirbutérol, ou de 0,05 à 72mg/kg pour la ritodrine, ou de 0,1 à 36mg/jour pour le salbutamol, ou de 0,025 à 0,1 mg/jour pour le salmétérol, de 0,5 à 13,5mg/jour pour la terbutaline. Il s'agit bien entendu d'exemples, les doses pourront être adaptées, notamment en fonction de la sensibilité des patients à ce traitement. [33] L'administration peut être réalisée en une seule fois ou en plusieurs fois. [34] L'action des agonistes béta ou béta2-adrénergiques dans l'utilisation conforme à la présente invention est plus précise au niveau moléculaire que celle des antidépresseurs pour traiter la douleur car ces agonistes peuvent agir directement sur le récepteur responsable de l'effet thérapeutique sans affecter les autres récepteurs adrénergiques. Cette action plus ciblée réduit certainement les effets secondaires indésirables. [35] La présente invention concerne l'utilisation d'agonistes bétaadrénergiques pour le traitement de douleurs neuropathiques, en particulier, et sans s'y limiter, de longue durée. En effet, les données expérimentales obtenues par les inventeurs à partir de leur modèle animal de douleur neuropathique extrêmement proche de la clinique humaine montrent clairement une amélioration importante des symptômes douloureux après traitement avec de telles molécules. [36] De plus, ces molécules sont déjà utilisées en clinique humaine pour traiter d'autres affections ce qui facilite et surtout rend plus rapides les premiers essais thérapeutiques sur les douleurs neuropathiques. Les perspectives thérapeutiques sont donc immédiates. De nombreuses molécules agonistes béta ou béta2-adrenergiques ont déjà obtenu une autorisation de mise sur le marché et sont couramment utilisées dans le cadre d'autres pathologies, essentiellement les crises d'asthme ou les maladies pulmonaires obstructives chroniques, ou pour inhiber les contractions utérines. Mais ces molécules n'ont encore jamais été testées contre les douleurs neuropathiques. L'existence de ces autorisations fait que les tests cliniques sur les effets secondaires ont déjà été réalisés et devrait potentiellement favoriser/accélérer à moindre coût le passage aux essais et à l'utilisation clinique dans le cadre des douleurs neuropathiques. [37] Par ailleurs, l'efficacité d'un traitement chronique est fortement dépendante de l'acceptation et du suivi du traitement chronique par le patient. Psychologiquement, il peut être plus facile d'accepter d'être traité par une molécule connue pour être prescrite contre l'asthme que par une molécule à visée psychiatrique connue pour être prescrite contre la dépression. [038] D'autres avantages pourront apparaître à l'homme du métier à la lecture des exemples qui suivent, donnés bien entendu à titre illustratif et non-limitatif en référence aux figures annexées.

Brève description des figures [039] La figure 1 est un graphe montrant l'effet d'une solution saline ( Sal ) ou de Nortriptyline ( Nor ) sur des souris témoins ( Sham ) sans manchon ou neuropathiques avec manchon ( Cuff ) décrites dans les exemples 1 et 2. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en jours à compter de l'opération chirurgicale exposée dans l'exemple 1. [040] La figure 2 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet d'un co- traitement par une solution saline ( Sal ) ou de Nortriptyline ( Nor ) et par l'antagoniste alpha2-adrénergique yohimbine ou l'antagoniste béta-adrénergique propranolol, décrit dans l'exemple 3. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en jours à compter de l'opération chirurgicale exposée dans l'exemple 1. [041] La figure 3 comprend 2 graphes. Le premier montre chez des animaux neuropathiques l'effet d'un co-traitement de Nortriptyline et de l'antagoniste bétaladrénergique métoprolol, de l'antagoniste béta2-adrénergique ICI 118,551 ou de l'antagoniste béta3-adrénergique SR59230A, décrit dans les exemples 4, 5 et 6. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g). Le second graphe détaille l'effet d'un co-traitement de Nortriptyline et de l'antagoniste béta2-adrénergique ICI 118,551, décrit dans l'exemple 5. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en jours à compter de l'opération chirurgicale exposée dans l'exemple 1. [42] La figure 4 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet d'un traitement au clenbutérol ( Clen ) décrit dans l'exemple 7. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en jours à compter de l'opération chirurgicale exposée dans l'exemple 1. [43] La figure 5 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet d'un co-traitement de clenbutérol et de l'antagoniste béta2-adrénergique ICI 118,551 décrit dans l'exemple 8. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en jours à compter de l'opération chirurgicale exposée dans l'exemple 1. [44] La figure 6 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet d'un traitement au bambutérol décrit dans l'exemple 9. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en jours à compter de l'opération chirurgicale exposée dans l'exemple 1. [45] La figure 7 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet d'un traitement au fénotérol, décrit dans l'exemple 10. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en jours à compter de l'opération chirurgicale exposée dans l'exemple 1. [46] La figure 8 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet d'un traitement au formotérol décrit dans l'exemple 11. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en jours à compter de l'opération chirurgicale exposée dans l'exemple 1. [47] La figure 9 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet d'un traitement au salbutamol décrit dans l'exemple 12. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en jours à compter de l'opération chirurgicale exposée dans l'exemple 1. [48] La figure 10 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet d'un traitement au salmétérol décrit dans l'exemple 13. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en jours à compter de l'opération chirurgicale exposée dans l'exemple 1. [49] La figure 11 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet d'un traitement à la terbutaline décrit dans l'exemple 14. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en jours à compter de l'opération chirurgicale exposée dans l'exemple 1. [50] La figure 12 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet de la première injection ( injection aiguë ) de fénotérol, de salbutamol, de salmétérol, et de terbutaline décrit dans l'exemple 15. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g) et sur l'axe des abscisses, le temps en minutes après l'injection. [51] La figure 13 est un graphe récapitulant chez des animaux neuropathiques ( Cuff ) l'effet comparé d'un traitement chronique à la solution contrôle (saline), à la nortriptyline, au bambutérol, au clenbutérol, au fénotérol, au formotérol, au salbutamol, au salmétérol et à la terbutaline décrit dans l'exemple 16. Sur l'axe des ordonnées, la récupération des animaux est indiquée en pourcentage de leur sensibilité avant chirurgie. [052] La figure 14 est un graphe récapitulant chez des animaux témoins ( Sham ) l'effet comparé d'un traitement chronique à la solution contrôle (saline), à la nortriptyline, au bambutérol, au clenbutérol, au fénotérol, au formotérol, au salbutamol, au salmétérol et à la terbutaline décrit dans l'exemple 17. Sur l'axe des ordonnées est indiqué le seuil nociceptif des animaux en pourcentage de leur sensibilité avant chirurgie. [053] La figure 15 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet d'un co-traitement de bambutérol, ou de fénotérol, ou de formotérol, ou de salmétérol, et de l'antagoniste béta2-adrénergique ICI 118,551 décrit dans l'exemple 18. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g). [054] La figure 16 est un graphe montrant chez des animaux témoins ( Sham ) ou neuropathiques ( Cuff ) l'effet d'un co-traitement de salbutamol et de l'antagoniste béta2-adrénergique ICI 118,551 injecté soit intrapéritonéalement soit en intrathécal, décrit dans l'exemple 19. Sur l'axe des ordonnées, la pression exercée en grammes (g).

EXEMPLES

[055] Dans les exemples qui suivent, les protocoles et résultats expérimentaux illustrent les données scientifiques des inventeurs qui conduisent à proposer les agonistes béta-adrénergiques pour traiter la douleur neuropathique. Les inventeurs démontrent expérimentalement notamment : 1. Qu'un blocage répété des récepteurs alpha2-adrénergiques (par exemple par de la yohimbine) est inefficace à bloquer l'effet antalgique des antidépresseurs : cet effet ne passe donc pas par les alpha2 adrénorécepteurs ; 2. Qu'un blocage répété des récepteurs béta-adrénergiques (par exemple par le propranolol) bloque l'effet thérapeutique des antidépresseurs : les béta-adrénorécepteurs sont donc responsables de l'effet thérapeutique des antidépresseurs sur la douleur neuropathique. Cet effet est spécifique puisque le propranolol n'affecte pas la réponse des animaux témoins, traités ou non par exemple par la nortriptyline. [056] Les inventeurs testent également des molécules spécifiques des 3 sous-types de béta-adrénorécepteurs : le métoprolol contre les bétal; l'ICI118,551 contre les béta2 et le SR59230A contre les béta3, et montrent que seul l'antagoniste des béta2-adrénorécepteurs bloque l'effet des antidépresseurs. Cela démontre que l'effet thérapeutique des antidépresseurs contre la douleur neuropathique nécessite les béta2-adrénorécepteurs. Cet effet est spécifique puisque l'ICI118,551 n'affecte pas la réponse des animaux témoins, traités ou non par la nortriptyline. [57] Les inventeurs démontrent ensuite qu'un traitement chronique par divers agonistes spécifiques des béta2-adrénorécepteurs fait totalement disparaître la douleur neuropathique et peut donc se substituer à l'utilisation des antidépresseurs. Cette démonstration a été faite par exemple avec le clenbutérol, le fenotérol, le formotérol, le salbutamol, le salmétérol et la terbutaline. La même démonstration a été faite avec par exemple le bambutérol, un agoniste général béta-adrénergique. Les agonistes béta2-adrénergiques, et plus généralement les agonistes béta-adrénergiques, peuvent donc permettre de traiter les douleurs neuropathiques. [58] Les inventeurs démontrent que cet effet des agonistes des béta2-adrénorécepteurs sur la douleur neuropathique ne s'observe pas de façon aiguë après la première injection de l'agoniste considéré. Cela a été démontré par exemple avec le fénotérol, le salbutamol, le salmétérol et la terbutaline. Un traitement chronique est donc nécessaire. [59] Les inventeurs montrent que le traitement chronique par divers agonistes spécifiques des béta2-adrénorécepteurs n'affecte pas de façon aspécifique la sensibilité des animaux témoins. Cette démonstration a été faite par exemple avec le clenbutérol, le fenotérol, le formotérol, le salbutamol, le salmétérol et la terbutaline. La même démonstration a été faite par exemple avec le bambutérol, un agoniste général béta-adrénergique. Aux doses thérapeutiques, les agonistes béta2-adrénergiques, et plus généralement les agonistes béta- adrénergiques, n'ont donc pas à long terme d'effet aspécifique sur la sensibilité nociceptive. [060] Les inventeurs démontrent que l'antagoniste des béta2-adrénorécepteurs IC1118,551 bloque l'effet thérapeutique d'un traitement chronique par les agonistes des récepteurs béta-adrénergiques sur la douleur neuropathique. Cette démonstration a été faite par exemple avec le bambutérol, le clenbutérol, le fénotérol, le formotérol, le salbutamol et le salmétérol. L'effet du traitement par ces agonistes sur la douleur neuropathique passe donc bien par leur action sur les béta2-adrénorécepteurs. [061] Les inventeurs démontrent que l'antagoniste des béta2-adrénorécepteurs ICI118,551 délivré par voie intrathécale bloque l'effet thérapeutique d'un traitement chronique par un agoniste des récepteurs bétaadrénergiques. Cette démonstration a été faite par exemple avec le salbutamol. Ces résultats montrent que la moelle épinière et/ou les ganglions rachidiens sont impliqués dans l'effet thérapeutique des agonistes béta2-adrénergiques. [062] Le détail des protocoles opératoires et résultats obtenus est présenté dans les exemples ci-dessous.

Exemple 1 : modèle murin de douleur neuropathique [063] Les expérimentations ont été conduites sur des souris mâles adultes. Les expérimentations pharmacologiques ont été conduites en utilisant des souris C57BI/6J (âgées de 6 semaines à leur arrivée, Charles River, L'Arbresle, France). [64] Toutes les expérimentations ont débuté avec des souris âgées de 8 à 9 semaines. Elles ont été réunies par quatre à cinq par cage et maintenues sous une alternance jour/nuit de 12 heures (lumière à 6h00 du matin) avec de la nourriture et de l'eau ad libitum. Les procédures ont été conduites suivant la Directive 86/6609/CEE. [65] Le modèle est obtenu par pose d'un manchon de polyéthylène autour de la branche principale du nerf sciatique droit de chaque souris. Avant toute intervention chirurgicale, les souris ont été assignées aux différents groupes expérimentaux de façon à ce que le seuil de la nociception mécanique de base et le poids étaient équivalents entre les différents groupes. L'intervention chirurgicale a été réalisée sous anesthésie kétamine-xylazine (kétamine : 17 mg/mL, xylazine 2,5 mg/mL, injection intrapéritonéale à raison de 4mUkg) (Centravet Société Anonyme, Taden, France). La branche commune du nerf sciatique a été exposée et une section de 2 mm de long d'un tube creux de polyéthylène PE-20 ( Harvard Apparatus , Les Ulis, France) a été placée autour de celle-ci (groupe Cuff ).

Ce protocole a été précédemment publié (Benbouzid, M. et al. Biological Psychiatry doi:10.1016/j.biopsych.2007.06.016 (2007) (10) et Benbouzid, M. et al. European Journal of Pain doi:10.1016/ j.ejpain.2007.10.002 (2007) (11)). Des souris témoins ont été opérées suivant la même procédure, mais sans mettre en place le manchon (groupe Sham ). Dans toutes les expériences les groupes expérimentaux sont constitués d'au moins 4 souris pour chaque groupe témoin ( Sham ) et d'au moins 5 souris pour chaque groupe neuropathique ( Cuff ). [66] La pose du manchon de polyéthylène (groupe Manchon ou "cuff') autour de la branche principale du nerf sciatique entraîne une allodynie mécanique, c'est-à-dire une réponse à une stimulation normalement non douloureuse, par rapport aux animaux contrôles (groupe Témoins ou "sham"). Cela signifie que le seuil de pression entraînant une réponse de retrait de la patte de la souris diminue fortement, comme l'indique le graphe de la figure 1. [67] Pour les tests, dans les exemples qui suivent, la pression est exercée sur la patte des souris au moyen de filaments de von Frey (Bioseb, Chaville, France) (Benbouzid, M. et al. Biological Psychiatry doi:10.1016/j.biopsych.2007.06.016 (2007) (10) et Benbouzid, M. et al. European Journal of Pain doi:10.1016/ j.ejpain.2007.10.002 (2007) (11)). Les souris sont placées dans des boites de Plexiglas (marque déposée) transparent (7 cm x 9 cm x 7 cm) posées sur une grille surélevée. Avant le test, les souris sont habituées 15 minutes à ce dispositif. Lors du test, les filaments de von Frey sont appliqués sur la surface plantaire de chaque patte arrière selon des forces ascendantes (de 0,16 g jusqu'à une réponse de retrait de la patte, ou jusqu'à 10 g au maximum). Chaque filament est testé 5 fois par patte et le seuil est défini par la présence de 3 retraits ou plus observés sur les 5 essais. Avant la chirurgie telle que décrite ci- dessus, les animaux ont été pré-testés pour établir leur réponse nociceptive de base. Lors des expériences de traitement chronique et celles d'injection répétées d'antagonistes, les tests sont effectués les matins avant la première injection de la journée. Lors des expériences d'injection aiguë d'agoniste, les tests sont effectués après la première injection en suivant le décours temporel tel que présenté sur les graphes. [68] La chirurgie pour la mise en place du manchon correspond au jour 0. L'allodynie mécanique obtenue sur ces souris dure plus de 2 mois ainsi que précédemment publié (Benbouzid, M. et al. Biological Psychiatry doi:10.1016/j.biopsych.2007.06.016 (2007) (10) et Benbouzid, M. et al. European Journal of Pain doi:10.1016/ j.ejpain.2007.10.002 (2007) (11)). [69] Ce modèle de souris neuropathique est sensible au traitement chronique avec un antidépresseur tricyclique (nortriptyline ou amitriptyline) tel que précédemment publié (Benbouzid, M. "et al. Biological Psychiatry:10.1016/j.biopsych.2007.06.016 (2007) (10)).

Exemple 2 : Effet thérapeutique d'un antidépresseur tricyclique [70] Sur des modèles de souris obtenus de la manière décrite dans l'exemple 1, lorsque l'allodynie était bien en place, au jour 15 après l'opération de mise en place du manchon, a été commencé un traitement thérapeutique par l'antidépresseur nortriptyline ou Nor , à raison de 5 mg/kg (Nortriptyline hydrochioride ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma-Aldrich numéro de catalogue N7261 ; diluée dans une solution saline à 0,9% de NaCI), 2 fois par jour (matin et soir). Ce traitement reproduit ce qui est observé en clinique : le traitement est inefficace les premiers jours mais fait ensuite totalement disparaître l'allodynie. [71] Un groupe placébo de souris a été soumis à une injection de solution saline uniquement (solution 0,9% de NaCI), sans antidépresseur, (sur le graphique Sal pour : injection de solution saline à 0,9 %). Ce groupe Sal reste allodynique pendant toute l'expérience. [72] Les résultats de cet exemple sont montrés sur la figure 1 annexée. [73] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par le traitement par la nortriptyline : leur seuil nociceptif reste stable au long de l'expérience.

Exemple 3 : Absence d'effet d'un blocage des alpha2-adrénorécepteurs sur l'action de l'antidépresseur et présence d'effet d'un blocage des bétaadrénorécepteurs sur l'action de l'antidépresseur [74] Le graphe de gauche de la figure 2 montre que chez des animaux neuropathiques ( Manchon ) qui ont été traités pendant 3 semaines par la nortriptyline tel que décrit dans l'exemple 2 (et donc soulagés de leur allodynie), un co-traitement par la nortriptyline et l'antagoniste (bloqueur) des alpha2-adrénorécepteurs (la yohimbine, 2 mg/kg, intrapéritonéal) (yohimbine hydrochloride ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma- Aldrich numéro de catalogue Y3125 ; diluée dans une solution saline à 0,9% de NaCl) n'a aucune influence sur le bénéfice thérapeutique. L'effet thérapeutique de la nortriptyline ne passe donc pas par un recrutement des alpha2-adrénorécepteurs. [75] Un blocage des béta-adrénorécepteurs supprime l'effet thérapeutique de l'antidépresseur. [76] Le graphe de droite de la figure 2 montre que chez des animaux neuropathiques traités pendant 3 semaines par la nortriptyline, un co-traitement par la nortriptyline tel que décrit dans l'exemple 2 et l'antagoniste des bétaadrénorécepteurs (le propranolol, 5 mg/kg, intrapéritonéal) ((+/-)-propranolol hydrochloride ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma-Aldrich numéro de catalogue P0884 ; dilué dans une solution saline à 0,9% de NaCl) fait réapparaître l'allodynie en quelques jours. L'effet thérapeutique de l'antidépresseur passe donc par les béta-ad rénorécepteurs. [77] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections de yohimbine ou de propranolol : leur seuil nociceptif reste stable au long de l'expérience.

Exemple 4 : Absence d'effet d'un blocage des bétal-adrénorécepteurs sur l'action de l'antidépresseur [078] Le graphe de gauche de la figure 3 montre que chez des animaux neuropathiques traités pendant 3 semaines par la nortriptyline tel que décrit dans l'exemple 2, un co-traitement de 6 jours par la nortriptyline et l'antagoniste des bétal-adrénorécepteurs (le métoprolol, 2 mg/kg, intrapéritonéal) ((+/-)-metoprolol (+)-tartrate ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma-Aldrich numéro de catalogue M5391 ; dilué dans une solution saline à 0,9% de NaCl) n'a aucune influence sur le bénéfice thérapeutique.

Exemple 5 : Présence d'effet d'un blocage des béta2-adrénorécepteurs sur l'action de l'antidépresseur [079] Le graphe de gauche de la figure 3 montre que chez des animaux neuropathiques traités pendant 3 semaines par la nortriptyline tel que décrit dans l'exemple 2, un co-traitement de 6 jours par la nortriptyline et l'antagoniste des béta2-adrénorécepteurs (l'ICI 118,551, 2 mg/kg, intrapéritonéal) (ICI 118,551 hydrochioride ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma- Aldrich numéro de catalogue 1127 ; dilué dans une solution saline à 0,9% de NaCl) entraîne une réapparition de l'allodynie neuropathique. [80] Un blocage des béta2-adrénorécepteurs supprime l'effet thérapeutique de l'antidépresseur. [81] Le graphe de droite de la figure 3 détaille le décours temporel de la réapparition de la douleur neuropathique chez les souris portant le manchon ( Cuff ) lorsque l'ICI 118,551 est co-administré avec la nortriptyline ( Nor ), tel que décrit ci-dessus. Il montre que l'allodynie réapparaît dans les 48 heures suivant le début du co-traitement. [82] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections d'ICI 118,551.

Exemple 6 : Absence d'effet d'un blocage des béta3-adrénorécepteurs sur l'action de l'antidépresseur [83] Le graphe de gauche la figure 3 montre que chez des animaux neuropathiques traités pendant 3 semaines par la nortriptyline, un co-traitement de 6 jours par la nortriptyline et l'antagoniste des béta3-adrénorécepteurs (le SR59230A, 2,5 mg/kg, intrapéritonéal) (SR 59230A ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma-Aldrich numéro de catalogue S8688 ; dilué dans une solution saline à 0,9% de NaCl) n'a aucune influence sur le bénéfice thérapeutique.

Exemple 7 : THERAPIE : L'agoniste des béta2-adrénorécepteurs clenbuterol soulage l'allodynie neuropathique [84] Le graphe de la figure 4 montre qu'un traitement par l'agoniste béta2 adrénergique clenbuterol ( Clen , 0,3 mg/kg, intrapéritonéal, 2 fois par jour (matin et soir)) (clenbutérol hydrochloride ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma-Aldrich numéro de catalogue C5423 ; dilué dans une solution saline à 0,9% de NaCl) supprime totalement l'allodynie mécanique chez les souris neuropathiques ( Cuff ) après traitement chronique. [85] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections de clenbutérol. [86] Ces données montrent pour la première fois que l'administration de clenbutérol peut soulager la douleur neuropathique.

Exemple 8 : Effet d'un blocage des béta2-adrénorécepteurs sur l'action du clenbutérol [87] Le graphe de la figure 5 montre qu'après 3 semaines de traitement par le clenbutérol tel que décrit dans l'exemple 7, si on co-administre le clenbutérol et l'antagoniste des béta2-adrénorécepteurs ICI 118,551 ( ICI , 2 mg/kg, intrapéritonéal, tel que décrit dans l'exemple 5), cela fait réapparaître l'allodynie chez les animaux neuropathiques ( Cuff ) en quelques jours. L'effet thérapeutique du clenbutérol passe donc bien par son action sur les béta2-adrénorécepteurs. [88] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections d'ICI 118,551.

Exemple 9 : THERAPIE : L'agoniste des béta-adrénorécepteurs bambutérol soulage l'allodynie neuropathique [89] Le graphe de la figure 6 montre qu'un traitement par l'agoniste béta adrénergique bambutérol (0,5 mg/kg, 2 fois par jour (matin et soir)) (bambutérol hydrochloride ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma- Aldrich numéro de catalogue B8684 ; dilué dans une solution saline à 0,9% de NaCl) supprime totalement l'allodynie mécanique chez les souris neuropathiques ( Cuff ) après traitement chronique. [90] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections de bambutérol. [91] Ces données montrent pour la première fois que l'administration de bambutérol peut soulager la douleur neuropathique.

Exemple 10 : THERAPIE : L'agoniste des béta2-adrénorécepteurs fénotérol soulage l'allodynie neuropathique [92] Le graphe de la figure 7 montre qu'un traitement par l'agoniste béta2 adrénergique fénotérol (0,7 mg/kg, 2 fois par jour (matin et soir)) (fénotérol hydrobromide ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma-Aldrich numéro de catalogue F1016 ; dilué dans une solution saline à 0,9% de NaCl) supprime totalement l'allodynie mécanique chez les souris neuropathiques ( Cuff ) après traitement chronique. [93] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections de fénotérol. [94] Ces données montrent pour la première fois que l'administration de fénotérol peut soulager la douleur neuropathique.

Exemple 11 : THERAPIE : L'agoniste des béta2-adrénorécepteurs formotérol soulage l'allodynie neuropathique [95] Le graphe de la figure 8 montre qu'un traitement par l'agoniste béta2 adrénergique formotérol (0,5 mg/kg, 2 fois par jour (matin et soir)) (formotérol fumarate dihydrate ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma-Aldrich numéro de catalogue F9552 ; dilué dans une solution saline à 0,9% de NaCl) supprime totalement l'allodynie mécanique chez les souris neuropathiques ( Cuff ) après traitement chronique. [096] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections de formotérol. [097] Ces données montrent pour la première fois que l'administration de formotérol peut soulager la douleur neuropathique.

Exemple 12 : THERAPIE : L'agoniste des béta2-adrénorécepteurs salbutamol soulage l'allodynie neuropathique [098] Le graphe de la figure 9 montre qu'un traitement par l'agoniste béta2 adrénergique salbutamol (2 mg/kg, 2 fois par jour (matin et soir)) (salbutamol hémisulfate ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma-Aldrich numéro de catalogue S5013 ; dilué dans une solution saline à 0,9% de NaCl) soulage l'allodynie mécanique chez les souris neuropathiques ( Cuff ) après traitement chronique. [099] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections de salbutamol. [0100] Ces données montrent pour la première fois que l'administration de salbutamol peut soulager la douleur neuropathique.

Exemple 13 : THERAPIE : L'agoniste des béta2-adrénorécepteurs salmétérol soulage l'allodynie neuropathique [0101] Le graphe de la figure 10 montre qu'un traitement par l'agoniste béta2 adrénergique salmétérol (1 mg/kg, 2 fois par jour (matin et soir)) (salmétérol xinafoate ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma-Aldrich numéro de catalogue S5068 ; dilué dans une solution saline à 0,9% de NaCl) supprime totalement l'allodynie mécanique après traitement chronique. [0102] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections de salmétérol. [0103] Ces données montrent pour la première fois que l'administration de salmétérol peut soulager la douleur neuropathique. Exemple 14 : THERAPIE : L'agoniste des béta2-adrénorécepteurs terbutaline soulage l'allodynie neuropathique [0104] Le graphe de la figure 11 montre qu'un traitement par l'agoniste béta2 adrénergique terbutaline (5 mg/kg, 2 fois par jour (matin et soir)) (terbutaline hémisulfate ; disponible auprès de fournisseurs comme par exemple Sigma- Aldrich numéro de catalogue T2528 ; dilué dans une solution saline à 0,9% de NaCl) supprime totalement l'allodynie mécanique après traitement chronique. [0105] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections de terbutaline. [0106] Ces données montrent pour la première fois que l'administration de terbutaline peut soulager la douleur neuropathique.

Exemple 15 : Absence d'effet de l'injection aiguë (première injection) des agonistes des béta2-adrénorécepteurs fénotérol, salbutamol, salmétérol et terbutaline. [0107] Le graphe de la figure 12 montre que la première injection des agonistes béta2 adrénergique fénotérol (0,7 mg/kg, intrapéritonéal), salbutamol (2 mg/kg, intrapéritonéal), salmétérol (1 mg/kg, intrapéritonéal), ou terbutaline (5 mg/kg, intrapéritonéal) tels que décrits dans les exemples précédants n'a pas d'effet sur l'allodynie mécanique des souris neuropathiques ( Cuff ) depuis 2 semaines. [0108] Les souris du groupe témoin (ou sham ) ne sont pas non plus affectées par la première administration de ces agonistes.

Exemple 16 : THERAPIE : Récapitulatif, effet des agonistes bétaadrénergiques chez les animaux neuropathiques [0109] Le graphe de la figure 13 présente la variation de seuil nociceptif en 0/0 de la sensibilité en début d'expérience. Les données sont moyennées sur l'ensemble des mesures faites lors de la troisième semaine de traitement des animaux. [0110] Les animaux neuropathiques ( Manchon ou cuff ) traités par un placébo (solution saline) maintiennent la forte baisse de leur seuil nociceptif, ce qui illustre la présence d'une allodynie (douleur). [0111] Le traitement chronique (14-21 jours) des animaux neuropathiques par les agonistes béta-adrénergiques bambutérol, clenbutérol, fénotérol, formotérol, salbutamol, salmétérol ou terbutaline, tels que décrits dans les exemples précédants, soulagent tous cette allodynie. [0112] Pour comparatif, l'effet de l'antidépresseur nortriptyline est également présenté. Les doses et modalités de traitement sont celles décrites ci-dessus dans les exemples 2, 7 et 9 à 14. Le modèle et les tests utilisés sont ceux décrits dans l'exemple 1. [0113] Les données présentées ici démontrent pour la première fois qu'un traitement chronique par des agonistes béta ou béta2 adrénergique administrés seuls permet de soulager l'allodynie neuropathique.

10 Exemple 17 : Récapitulatif, effet des agonistes béta-adrénergiques chez des animaux témoins [0114] Le graphe de la figure 14 présente la variation de seuil nociceptif en % de la sensibilité en début d'expérience. Les données sont moyennées sur l'ensemble des mesures faites lors de la troisième semaine de traitement des 15 animaux. [0115] Les animaux témoins ( Manchon ou cuff ) sont traités par un placébo (solution saline). Leur sensibilité mécanique reste stable lors de l'expérience. [0116] Le traitement chronique (14-21 jours) des animaux neuropathiques par 20 les agonistes béta-adrénergiques bambutérol, clenbutérol, fénotérol, formotérol, salbutamol, salmétérol ou terbutaline, n'affectent pas les animaux témoins. Pour comparatif, l'effet de l'antidépresseur nortriptyline est également présenté. L'antidépresseur n'altère pas non plus la sensibilité d'animaux témoins. Les doses et modalités de traitement sont celles décrites ci-dessus dans les exemples 2, 7 et 25 9 à 14. Le modèle et les tests utilisés sont ceux décrits dans l'exemple 1. [0117] Ces données montrent qu'un traitement chronique par des agonistes béta ou béta2 adrénergique administrés seuls (bambutérol, clenbutérol, fénotérol, formotérol, salbutamol, salmétérol, ou terbutaline) n'affecte pas la sensibilité d'animaux témoins. 30 Exemple 18 : Effet d'un blocage des béta2-adrénorécepteurs sur l'action du bambutérol, du fénotérol, du formotérol et du salmétérol5 [0118] Les graphes de la figure 15 montrent qu'après 3 semaines de traitement par les agonistes béta-adrénergiques bambutérol, fénotérol, formotérol ou salmétérol, si on co-administre ces agonistes et l'antagoniste des béta2-adrénorécepteurs ICI 118,551 ( ICI , 2 mg/kg, intrapéritonéal), cela fait réapparaître l'allodynie chez les souris neuropathiques ( Cuff ) en quelques jours. Les graphes montrent le seuil nociceptif des animaux après 3 semaines de traitement par les agonistes et après 3 à 6 jours de co-traitement avec l'ICI 118,551. Les doses et modalités de traitement sont celles décrites ci-dessus dans les exemples 5, 9 à 11 et 13. Le modèle et les tests utilisés sont ceux décrits dans l'exemple 1. [0119] L'effet thérapeutique de ces agonistes passe donc bien par leur action sur les béta2-adrénorécepteurs. [0120] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections d'ICI 118,551.

Exemple 19 : Effet d'un blocage des béta2-adrénorécepteurs sur l'action du salbutamol [0121] Les graphes de la figure 16 montrent qu'après 3 semaines de traitement par l'agoniste béta2-adrénergique salbutamol, si on co-administre cet agoniste et l'antagoniste des béta2-adrénorécepteurs ICI 118,551, cela fait réapparaître l'allodynie chez les souris neuropathiques ( Cuff ) en quelques jours. Le graphe de gauche montre le seuil nociceptif des animaux après 3 semaines de traitement par le salbutamol et après 3 jours de co-traitement avec l'ICI 118,551 co-injecté par voie intrapéritonéale (2 mg/kg). Le graphe de droite montre le seuil nociceptif des animaux après au moins 3 semaines de traitement par le salbutamol et après 2 injections de co-traitement avec l'ICI 118,551 administré par voie intrathécale avant chaque injection de salbutamol (2 mg/kg, intrapéritonéal). Les doses et modalités de traitement sont celles décrites ci-dessus dans les exemples 5 et 12 pour les injections intrapéritonéales et ci- dessous pour la description de la procédure d'injection intrathécale. Le modèle et les tests utilisés sont ceux décrits dans l'exemple 1. L'effet thérapeutique du salbutamol passe donc bien par son action sur les béta2-adrénorécepteurs. [0122] Les résultats de l'injection intrathécale montrent que les béta2-adrénorécepteurs spinaux et/ou ceux des ganglions rachidiens sont importants pour l'effet thérapeutique du salbutamol. [0123] La procédure d'injection intrathécale (i.t.) de l'antagoniste des béta2- adrénorécepteurs ICI 118,551 (3 pg dans 10 pL) est réalisée sous anesthésie gazeuse à l'halothane selon le protocole décrit par (noue et coll. (Nature Medicine 2004, 10 :712-718 (12)). Ces injections i.t. sont réalisées juste avant l'injection intrapéritonéale de salbutamol (2 mg/kg, i.p.). Une aiguille d'injection de gauge 27 connectée à une seringue Hamilton de 50 pL est insérée entre les vertèbres L5 et L6 dans l'espace sous-arachnoidal. Le placement correct de l'aiguille est vérifié par la présence d'un mouvement réflexe de la queue de la souris. Les souris sont pré-testées avant cette procédure de co-traitement, puis co-traitées deux fois (un matin et le soir correspondant) avant d'être retestées le lendemain matin pour leur sensibilité nociceptive mécanique. [0124] La sensibilité nociceptive des souris du groupe témoin (ou sham ) n'est pas affectée par les injections d'ICI 118,551, que celles-ci soient intrapéritonéales ou intrathécales.

Exemple 20 : Effet d'une stimulation des béta ou béta2-adrénorécepteurs : autres tests [0125] Dans les conditions décrites dans les exemples ci-dessus, on teste les molécules suivantes : le bitoltérol (par exemple entre 0,05 et 5 mg/kg, 2 fois par jour, intrapéritonéal) ; l'isoprénaline ou isoprotérénol (par exemple entre 0, 05 et 5 mg/kg, 2 fois par jour, intrapéritonéal) ; le lévalbutérol (par exemple entre 0,05 et 5 mg/kg, 2 fois par jour, intrapéritonéal) ; le métaprotérénol (par exemple entre 0,05 et 5 mg/kg, 2 fois par jour, intrapéritonéal) ; le pirbutérol (par exemple entre 0,25 et 50 mg/kg, 2 fois par jour, intrapéritonéal) ; le procatérol (par exemple entre 0,05 et 5 mg/kg, 2 fois par jour, intrapéritonéal) ; - le réprotérol (par exemple entre 0,05 et 5 mg/kg, 2 fois par jour, intrapéritonéal) ; la ritodrine (par exemple entre 0,25 et 50 mg/kg, 2 fois par jour, intrapéritonéal) ; le tulobutérol (par exemple entre 0,05 et 5 mg/kg, 2 fois par jour, intrapéritonéal).10 Liste des références

(1) Bouhassira D, Lantéri-Minet M, Attal N, Laurent B, Touboul C. Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population. Pain doi :10.1016/j. pain.2007.08.013. (2) Merksey H, Bogduk N, éditeurs. Classification of Chronic Pain. IASP Press, Seattle 1994. (3) McQuay HJ, Tramèr M, Nye BA, Caroll D, Wiffen PJ, Moore RA. A systemic review of antidepressants in neuropathic pain. Pain 1996, 68:217-227. (4) Hempenstall K, Nurmikko TJ, Johnson RW, A'Hern RP, Rice ASC. Analgesic therapy in postherpetic neuralgia: a quantitative systematic review. PLoS Medicine 2:e164. (5) Gilron I, Watson CP, Cahill CM, Moulin DE. Neuropathic pain: a practical guide for the clinician. CMAJ 2006, 175:265-275. (6) Attal N, Cruccu G, Haanpaa M, Hansson P, Jensen TS, Nurmikko T, Sampaio C, Wiffen P, EFNS Task Force. European Journal of Neurology 2006, 13:1153-1169. (7) Moulin DE, Clark AJ, Gilron I, Ware MA, Watson CP, Sessle BJ, Coderre T, Morley-Foster PK, Stinson J, Boulanger A, Peng P, Finley GA, Taenzer P, Squire P, Dion D, Cholkan A, Gilani A, Gordon A, Henry J, Jovey R, Lynch M, Mailis-Gagnon A, Panju A, Rollman GB, Velly A, Canadian Pain Society. Pharmacological management of chronic neurotahic pain - consensus and guidelines from the Canadian pain Society. Pain Research Management 2007, 12:13-21. (8) Dworkin RH, O'Connor AB, Backonja M, Farrar JT, Finerup NB, Jensen TS, Kalso EA, Loeser JD, Miaskowski C, Nurmikko TJ, Portenoy RK, Rice ASC, Stacey BR, Treede RD, Turk DC, Wallace MS. Pharmacological management of neuropathic pain: evidence-based recommendation. Pain 2007, 132:237-251. (9) Crassous PA, Denis C, Paris H, Sénard JM. Interest of alpha2-adrenergic agonists and antagonists in clinical practice : background, facts and perspectives. Current Topics in Medicinal Chemistry 2007, 7:187-194. (10) Benbouzid M, Gavériaux-Ruff C, Yalcin I, Waltisperger E, Tessier LH, Muller A, Kieffer BL, Freund-Mercier MJ, Barrot M. Delta-opioid receptors are critical for tricyclic antidepressant treatment of neuropathic allodynia. Biological Psychiatry doi:10.1016 / j.biopsych.2007.06.016. (11) Benbouzid M, Pallage V, Rajalu M, Waltisperger E, Doridot S, Poisbeau P, Freund-Mercier MJ, Barrot M. Sciatic nerve cuffing in mice: a model of sustained neuropathic pain. European Journal of Pain doi:10.1016 / j.ejpain.2007.10.002. (12) (noue M, Rashid MH, Fujita R, Contos JJ, Chun J, Ueda H. Initiation of neuropathic pain requires lysophosphatidic acid receptor signalling. Nature Medicine 2004, 10:712-718.

Claims (7)

Revendications

1. Utilisation d'un agoniste béta adrénergique comme principe actif pour la fabrication d'un médicament destiné au traitement de la douleur neuropathique.

2. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle l'agoniste béta adrénergique est un agoniste béta2 adrénergique.

3. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle la douleur neuropathique est une douleur neuropathique chronique.

4. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle l'agoniste béta 15 adrénergique est choisi dans le groupe comprenant bambutérol, bitolterol mésylate, clenbutérol, fénotérol, formotérol, isoproterenol, levalbutérol, métaprotérénol, pirbutérol, procatérol, réprotérol, ritodrine, salbutamol, salmétérol, terbutaline, ou tulobutérol. 20

5. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle le médicament est à usage humain.

6. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle le médicament est à usage vétérinaire. 25

7. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle le médicament est sous une forme choisie dans le groupe comprenant une forme injectable, injectable, un sirop, une solution buvable, un comprimé, un comprimé sécable, un comprimé pelliculé, un comprimé pelliculé sécable, un comprimé gastrorésistant, 30 un comprimé enrobé, un comprimé dispersable, un comprimé à croquer, une plaquette thermoformée, une gélule, un effervescent, un comprimé effervescent sécable, une poudre pour solution buvable, des granules pour suspension buvable, une suspension pour inhalation, une poudre pour inhalation, une solution10pour inhalation par nébuliseur, une poudre pour inhalation en gélule, un suppositoire, un collyre, une crème, une pommade, un gel, un spray, un dispositif transdermique ou patch, une pastille, une solution pour perfusion intraveineuse pour administration péridurale ou intra- ou péri- articulaire ou périphérique ou régionale ou paravertébrale ou intrathécale ou infiltration locale.10