FR2830860A1 - New process for preparing (Z)-3,5,4'-trimethoxystilbene from (E)-3,5,4'-trimethoxystilbene, and its use against cancer, malaria, cystic fibrosis and other disorders - Google Patents
New process for preparing (Z)-3,5,4'-trimethoxystilbene from (E)-3,5,4'-trimethoxystilbene, and its use against cancer, malaria, cystic fibrosis and other disorders Download PDFInfo
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Abstract
Description
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DESCRIPTION
La présente invention concerne le domaine de la chimie organique et plus particulièrement celui lié à la synthèse de nouvelles molécules susceptibles de présenter des propriétés biologiques, en particulier thérapeutiques et plus particulièrement des propriétés dans le domaine de la prévention ou du traitement de certaines maladies telles que notamment les maladies du type cancers . DESCRIPTION
The present invention relates to the field of organic chemistry and more particularly that related to the synthesis of new molecules likely to have biological properties, in particular therapeutic and more particularly properties in the field of the prevention or treatment of certain diseases such as especially diseases of the cancer type.
Elle a pour objet un nouveau procédé de synthèse chimique du (Z)-3, 5,4'-triméthoxystilbène (ci-après désigné comme composé R3), le composé R3 susceptible d'être obtenu par ledit procédé, l'utilisation du composé synthétisé comme médicament, en particulier comme anticancéreux de synthèse à faible prix de revient, ainsi qu'un médicament présentant ledit composé R3 en tant que principe actif. It relates to a novel chemical synthesis process of (Z) -3,5,4'-trimethoxystilbene (hereinafter referred to as compound R3), the compound R3 obtainable by said process, the use of the compound synthesized as a medicament, in particular as a low-cost synthetic anticancer drug, as well as a medicament having said compound R3 as active principle.
Le composé R3 est un dérivé du resvératrol, polyphénol naturel présent dans le monde végétal. The compound R3 is a derivative of resveratrol, a natural polyphenol present in the plant world.
Les effets anticancérogènes des polyphénols présents dans l'alimentation ont fait l'objet de nombreuses études. Ces dernières ont conduit à l'étude des effets du resvératrol (3,5, 4'-trihydroxy-trans-stilbène ou isomère (E)), constituant naturel de nombreuses plantes, de la vigne et du raisin. Le resvératrol qui a des propriétés fongicides est produit par la vigne pour lutter contre le développement du champignon Botritis cinerea. The anticarcinogenic effects of polyphenols present in food have been the subject of many studies. The latter led to the study of the effects of resveratrol (3,5, 4'-trihydroxy-trans-stilbene or isomer (E)), a natural constituent of many plants, vines and grapes. Resveratrol, which has fungicidal properties, is produced by the vine to control the development of the fungus Botritis cinerea.
Des recherches ont permis de montrer que ce composé possède, aussi bien in vitro, sur les cellules cancéreuses humaines, qu'in vivo, chez la souris cancéreuse, des propriétés anti-cancéreuses intéressantes (F. Raul et al. Research has shown that this compound has, both in vitro, on human cancer cells, and in vivo, in cancer mice, anti-cancerous properties of interest (F. Raul et al.
Anti-proliferative effect of resveratrol, a natural component of grapes and wine, on human colonie cancer cells , Cancer Lett. 158, 85-91,2000 et Resveratrol inhibits intestinal tumorigenesis and modulates host-defense related gene expression in an animal model of human familial adenomatous polyposis , Nutrition and Cancer, 39,102-107, 2001). Anti-proliferative effect of resveratrol, a natural component of grapes and wine, on human colony cancer cells, Cancer Lett. 158, 85-91,2000 and Resveratrol intestinal inhibitors tumorigenesis and modulates host-defense related gene expression in an animal model of human familial adenomatous polyposis, Nutrition and Cancer, 39,102-107, 2001).
Cependant, ledit composé naturel est, sous sa forme trans , instable et rapidement transformé par la cellule. However, said natural compound is, in its trans form, unstable and rapidly transformed by the cell.
Ainsi, le problème posé à la présente invention est celui de la mise à la disposition du public d'une nouvelle molécule anticancéreuse qui soit à la fois efficace et d'un faible prix de revient. Thus, the problem with the present invention is that of making available to the public a new anticancer molecule that is both effective and low cost.
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A cette fin la présente invention propose une nouvelle synthèse d'une molécule dérivée du resvératrol, à savoir, le (Z)-3, 5, 4'triméthoxystilbène, de formule 1 :
ci-après désigné comme composé R3, correspondant en fait au dérivé tri-méthoxylé du resvératrol. To this end, the present invention provides a novel synthesis of a molecule derived from resveratrol, namely, (Z) -3,5,4'trimethoxystilbene, of formula 1:
hereinafter referred to as compound R3, corresponding in fact to the tri-methoxylated derivative of resveratrol.
Le composé R3 a été testé pour ses propriétés anticancérogènes éventuelles. Des études biologiques ont démontré de façon inattendue et surprenante que le composé R3 présente une grande stabilité et une remarquable action anticancéreuse qui se révèle bien supérieure (de l'ordre de 100 fois plus importante) à celle du resvératrol. The compound R3 has been tested for its possible anticarcinogenic properties. Biological studies have unexpectedly and surprisingly demonstrated that the compound R3 has a high stability and a remarkable anticancer action which is much higher (on the order of 100 times greater) than that of resveratrol.
En étudiant les mécanismes cellulaires et moléculaires de son action, il a été mis en évidence qu'il possédait des propriétés biologiques, en particulier anticancéreuses, similaires voire supérieures à celles qui sont décrites pour le Taxotereo (docétaxel, Aventis, France) utilisé en chimio-et radio-thérapies anticancéreuses. By studying the cellular and molecular mechanisms of its action, it has been demonstrated that it possesses biological properties, in particular anti-cancer, similar or even superior to those described for Taxotereo (docetaxel, Aventis, France) used in chemotherapy. and anti-cancer radio therapies.
La présente invention a pour objet un procédé de synthèse du composé selon l'invention, caractérisé en ce qu'il consiste essentiellement à exposer un échantillon d'isomère (E)-3, 5,4'-triméthoxystilbène mis en solution dans un solvant adapté à une lumière ultraviolette de longueur d'onde culminante comprise entre 200 nm et 400 nm, ce pendant une durée d'exposition comprise entre une heure et deux heures pour une quantité d'isomère (E) de 10-2 mole et, le cas échéant, à évaporer ledit solvant afin de recueillir l'isomère (Z) recherché. The subject of the present invention is a process for the synthesis of the compound according to the invention, characterized in that it essentially consists in exposing a sample of (E) -3,5,4'-trimethoxystilbene isomer dissolved in a solvent. suitable for ultraviolet light having a peak wavelength between 200 nm and 400 nm, for an exposure time of between one hour and two hours for an amount of isomer (E) of 10 -2 mol and, where appropriate, evaporating said solvent to recover the desired (Z) isomer.
La présente invention a encore pour objet le composé R3 susceptible d'être obtenu par le procédé précité, l'utilisation dudit composé R3 selon l'invention comme médicament, en particulier pour la préparation d'un médicament pour le traitement ou la prévention d'une maladie impliquant une prolifération ou croissance cellulaire anormale, telle que le cancer. The subject of the present invention is also the compound R3 obtainable by the aforementioned method, the use of said compound R3 according to the invention as a medicament, in particular for the preparation of a medicament for the treatment or prevention of a disease involving abnormal cell growth or growth, such as cancer.
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Elle a encore pour objet l'utilisation du composé selon l'invention comme agent de dépolymérisation du réseau microtubulaire de cellules humaines ou animales vivantes, comme agent d'inhibition de la synthèse polyaminique de cellules cancéreuses humaines ou animales vivantes, comme agent de blocage du cycle cellulaire, en particulier du cycle cellulaire de cellules cancéreuses humaines ou animales vivantes, et comme agent de traitement ou de prévention de pathologies hyperprolifératives, en particulier d'états inflammatoires. It also relates to the use of the compound according to the invention as a depolymerization agent of the microtubule network of living human or animal cells, as an agent for inhibiting the polyaminic synthesis of living human or animal cancer cells, as a blocking agent of the cell cycle, in particular of the cell cycle of living human or animal cancer cells, and as a treatment or prevention agent for hyperproliferative pathologies, in particular inflammatory conditions.
Enfin, la présente invention concerne, en outre, un médicament caractérisé en ce qu'il comprend à titre de principe actif au moins le composé R3 selon l'invention. Finally, the present invention further relates to a medicament characterized in that it comprises as active ingredient at least the compound R3 according to the invention.
L'invention sera mieux comprise, grâce à la description ciaprès, qui se rapporte à un mode de réalisation préféré, donné à titre d'exemple non limitatif, et expliqué avec référence aux dessins schématiques annexés, dans lesquels : la figure 1 représente un exemple de schéma de synthèse du procédé selon l'invention, la figure 2 représente la courbe de croissance de cellules CaCo- 2 en fonction de la concentration en composé R3 ajouté (figure 2a) ainsi que la courbe de croissance de cellules IEC-6 en fonction de la concentration en composé R3 ajouté (figure 2b), la figure 3 illustre le double marquage de cellules CaCo-2 par l'Annexine-FITC (figure 3a) et l'iodure de propidium (figure 3b) après un traitement avec le composé R3, la figure 4 représente une analyse d'un cycle cellulaire par cytométrie en flux de cellules cancéreuses traitées par le composé R3 (figure 4a), la figure 4b représente l'analyse du cycle de la figure 4a en l'absence de traitement par le composé R3, la figure 5 représente l'activité de l'ODC en fonction de la durée du traitement avec le composé R3 (figure 5a) et l'activité de l'AdometDC (SAMDC) en fonction de la durée du traitement avec le composé R3 (figure 5b), et la figure 6 représente des clichés du réseau microtubulaire de cellules de CaCo-2 sous l'influence du composé R3 et de deux composés connus. The invention will be better understood, thanks to the following description, which relates to a preferred embodiment, given by way of non-limiting example, and explained with reference to the accompanying diagrammatic drawings, in which: FIG. 1 represents an example 2 shows the growth curve of CaCO-2 cells as a function of the concentration of compound R3 added (FIG. 2a) as well as the growth curve of IEC-6 cells in function of the synthesis scheme of the process according to the invention. of the added R3 compound concentration (FIG. 2b), FIG. 3 illustrates the double labeling of CaCo-2 cells by Annexin-FITC (FIG. 3a) and propidium iodide (FIG. 3b) after treatment with the compound R3, FIG. 4 represents a cell cycle analysis by flow cytometry of cancer cells treated with compound R3 (FIG. 4a), FIG. 4b represents the cycle analysis of FIG. 4a in the absence of treatment by Compound R3, FIG. 5 represents the activity of the ODC as a function of the duration of the treatment with the compound R3 (FIG. 5a) and the activity of the AdometDC (SAMDC) as a function of the duration of the treatment with compound R3 (FIG. 5b), and FIG. 6 represents snapshots of the microtubular network of CaCo-2 cells under the influence of compound R3 and of two known compounds.
Selon une première caractéristique, le procédé de synthèse du composé selon l'invention est caractérisé en ce qu'il consiste According to a first feature, the process for synthesizing the compound according to the invention is characterized in that it consists
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essentiellement à exposer un échantillon d'isomère (E)-3, 5,4'triméthoxystilbène 5 mis en solution dans un solvant adapté à une lumière ultraviolette de longueur d'onde culminante comprise entre 200 nm et 400 nm, ce pendant une durée d'exposition comprise entre une heure et deux heures pour une quantité d'isomère (E) de 10-2 mole et, le cas échéant, à évaporer ledit solvant afin de recueillir l'isomère (Z) recherché. essentially to expose a sample of isomer (E) -3,5,4'trimethoxystilbène 5 dissolved in a solvent adapted to ultraviolet light of peak wavelength between 200 nm and 400 nm, for a period of exposure between one hour and two hours for an amount of isomer (E) of 10-2 mol and, if appropriate, to evaporate said solvent to recover the desired isomer (Z).
De façon avantageuse, le procédé selon l'invention est caractérisé en ce que la longueur d'onde culminante de la lumière ultraviolette choisie est préférentiellement de 254 nm. Advantageously, the method according to the invention is characterized in that the culminating wavelength of the ultraviolet light chosen is preferably 254 nm.
Selon une autre caractéristique, la durée d'irradiation est préférentiellement d'une heure pour 10-2 mole d'isomère (E). According to another characteristic, the irradiation time is preferably one hour for 10-2 mol of isomer (E).
De manière avantageuse, le solvant utilisé est préférentiellement l'éthanol. Advantageously, the solvent used is preferably ethanol.
Selon un mode de réalisation préféré, l'isomère (E) est obtenu par préparation d'un halogénure de 4-méthoxybenzyle, transformation dudit halogénure en phosphonate, parallèlement, l'acide 3, 5-dihydroxybenzoïque est transformé en 3,5-diméthoxybenzoate de méthyle 2, puis en alcool 3,5diméthoxybenzylique 3, oxydation dudit alcool en aldéhyde correspondant et enfin transformation du 3,5-diméthoxybenzaldéhyde 4 en isomère (E)- 3,5, 4'-triméthoxystilbène 5 par réaction avec ledit phosphonate. According to a preferred embodiment, the (E) isomer is obtained by preparing a 4-methoxybenzyl halide, converting said halide to phosphonate, in parallel, the 3,5-dihydroxybenzoic acid is converted into 3,5-dimethoxybenzoate methyl 2, then 3,5-dimethoxybenzyl alcohol 3, oxidation of said alcohol to the corresponding aldehyde and finally conversion of 3,5-dimethoxybenzaldehyde 4 to the isomer (E) - 3,5,4'-trimethoxystilbene 5 by reaction with said phosphonate.
De manière avantageuse, l'halogénure de 4-méthoxybenzyle est préférentiellement le bromure de 4-méthoxybenzyle 1. Advantageously, the 4-methoxybenzyl halide is preferably 4-methoxybenzyl bromide 1.
Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux, le 3,5-diméthoxybenzaldéhyde 4 est obtenu par adjonction, selon la méthode de Corey, de dichromate de pyridinium à l'alcool 3,5-diméthoxybenzylique 3. According to a particularly advantageous embodiment, 3,5-dimethoxybenzaldehyde 4 is obtained by adding, according to the Corey method, pyridinium dichromate to 3,5-dimethoxybenzyl alcohol 3.
La présente invention a également pour objet le composé susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention, caractérisé en ce qu'il s'agit du (Z)-3, 5, 4'-triméthoxystilbène. The subject of the present invention is also the compound obtainable by the process according to the invention, characterized in that it is (Z) -3,5,4'-trimethoxystilbene.
Ci-après, on décrira plus en détail un exemple préféré, non limitatif, de synthèse du composé R3 selon l'invention. Hereinafter, a preferred, nonlimiting, synthetic example of the compound R3 according to the invention will be described in more detail.
A) Exemple de procédé de synthèse chimique préféré du (Z)- 3,5, 4'-triméthoxystilbène ou composé R3 :
Dans ce qui suit, tous les points de fusion ont été mesurés, sans correction, à l'aide de tubes capillaires et d'un appareil type B-510 n A) Example of a preferred chemical synthesis process of (Z) -3.5, 4'-trimethoxystilbene or compound R3:
In the following, all the melting points were measured, without correction, using capillary tubes and a type B-510 apparatus.
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533640 commercialisé par la société Büchi. Les spectres de résonance magnétique nucléaire du IH et du 13C ont été enregistrés avec un spectromètre de type Bruker AC à 200 MHz. Les spectres de masse proviennent d'une installation AutoSpec E Micromass, fonctionnant à 70 eV d'énergie et munie d'un dispositif d'introduction directe de l'échantillon à analyser. 533640 marketed by the company Buchi. The nuclear magnetic resonance spectra of IH and 13C were recorded with a 200 MHz Bruker AC spectrometer. The mass spectra come from an AutoSpec E Micromass installation, operating at 70 eV of energy and provided with a device for direct introduction of the sample to be analyzed.
Les résultats de mesure sont consignés dans le tableau suivant : The measurement results are recorded in the following table:
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<tb>
<tb> N <SEP> du <SEP> Nom <SEP> formule <SEP> brute <SEP> Point <SEP> de <SEP> Masse <SEP> RMN <SEP> 1H <SEP> ou <SEP> 13C, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP> (enppm) <SEP> ;
<tb> fusion <SEP> molaire <SEP> Spectroscopie <SEP> de <SEP> masse
<tb> g/mol
<tb> 2 <SEP> 3,5 <SEP> diméthoxybenzoate <SEP> C10H12O4 <SEP> 42 C <SEP> 196,12 <SEP> 1H, <SEP> CDCl3, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP> : <SEP> 7,15 <SEP> (2H, <SEP> d, <SEP> J <SEP> =
<tb> de <SEP> méthyle <SEP> 2,3Hz, <SEP> H2,6) <SEP> ; <SEP> 6,61 <SEP> (1H, <SEP> t, <SEP> J=2,3 <SEP> Hz, <SEP> H4) <SEP> ;
<tb> 3,87 <SEP> (3H, <SEP> s, <SEP> C02Me) <SEP> ; <SEP> 3, <SEP> 80 <SEP> (6H, <SEP> s, <SEP> 2 <SEP> x
<tb> OMe).
<tb> <Tb>
<tb> N <SEP> of <SEP> Form <SEP> Formula <SEP> Gross <SEP> Point <SEP> of <SEP> Mass <SEP> NMR <SEP> 1H <SEP> or <SEP> 13C, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP> (enppm) <SEP>;
<tb> fusion <SEP> molar <SEP> Spectroscopy <SEP> of <SEP> mass
<tb> g / mol
<tb> 2 <SEP> 3,5 <SEP> dimethoxybenzoate <SEP> C10H12O4 <SEP> 42 C <SEP> 196,12 <SEP> 1H, <SEP> CDCl3, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP> : <SEP> 7.15 <SEP> (2H, <SEP> d, <SEP> J <SEP> =
<tb><SEP> methyl <SEP> 2.3Hz, <SEP> H2.6) <SEP>;<SEP> 6.61 <SEP> (1H, <SEP> t, <SEP> J = 2.3 <SEP> Hz, <SEP> H4) <SEP>;
<tb> 3.87 <SEP> (3H, <SEP> s, <SEP> C02Me) <SEP>;<SEP> 3, <SEP> 80 <SEP> (6H, <SEP> s, <SEP> 2 <SEP> x
<tb> OMe).
<Tb>
13C, <SEP> CDCl3, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP> : <SEP> 167 <SEP> (CO2CH3) <SEP> ;
<tb> 160,6 <SEP> (C3, <SEP> Cs) <SEP> ; <SEP> 132 <SEP> (Ci) <SEP> ; <SEP> 107,1 <SEP> (C2, <SEP> C6) <SEP> ;
<tb> 105,8 <SEP> (C4) <SEP> ; <SEP> 55,6 <SEP> (2 <SEP> x <SEP> OCH3) <SEP> ; <SEP> 52,3
<tb> (C02CH3)
<tb> 3 <SEP> 3,5
<tb> diméthoxybenzylique <SEP> CgH1203 <SEP> 47-50 <SEP> C <SEP> 168, <SEP> 18 <SEP> 1H, <SEP> CDCl3, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP> : <SEP> 6,54 <SEP> (2H, <SEP> d, <SEP> J <SEP> = <SEP> 2,2
<tb> Hz, <SEP> H2, <SEP> 6) <SEP> ; <SEP> 6,40 <SEP> (1H, <SEP> t, <SEP> J <SEP> = <SEP> 2,2 <SEP> Hz, <SEP> H4) <SEP> ; <SEP> 4,65
<tb> (2H, <SEP> s, <SEP> CH2OH) <SEP> ; <SEP> 3,81 <SEP> (6H, <SEP> s, <SEP> 2 <SEP> x <SEP> OMe)
<tb> C, <SEP> CECI3, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP> : <SEP> 161 <SEP> (C3, <SEP> C5) <SEP> ; <SEP> 143,4
<tb> (CI) <SEP> ; <SEP> 104,6 <SEP> (C2, <SEP> C6) <SEP> ; <SEP> 99,7 <SEP> (C4) <SEP> ; <SEP> 65,3
<tb> (CH2OH) <SEP> ; <SEP> 55, <SEP> 4 <SEP> (2 <SEP> x <SEP> OMe)
<tb> 13C, <SEP> CDCl3, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP>: <SEP> 167 <SEP> (CO2CH3) <SEP>;
<tb> 160.6 <SEP> (C3, <SEP> Cs) <SEP>;<SEP> 132 <SEP> (Ci) <SEP>;<SEP> 107.1 <SEP> (C2, <SEQ> C6) <SEP>;
<tb> 105.8 <SEP> (C4) <SEP>;<SEP> 55.6 <SEP> (2 <SEP> x <SEP> OCH3) <SEP>;<SEP> 52.3
<tb> (C02CH3)
<tb> 3 <SEP> 3,5
<tb> dimethoxybenzyl alcohol <SEP> CgH1203 <SEP> 47-50 <SEP> C <SEP> 168, <SEP> 18 <SEP> 1H, <SEP> CDCl3, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP>: <MS> 6.54 <SEP> (2H, <SEP> d, <SEP> J <SEP> = <SEP> 2.2
<tb> Hz, <SEP> H2, <SEP> 6) <SEP>;<SEP> 6.40 <SEP> (1H, <SEP> t, <SEP> J <SEP> = <SEP> 2.2 <SEP> Hz, <SEP> H4) <SEP>;<SEP> 4.65
<tb> (2H, <SEP> s, <SEP> CH2OH) <SEP>;<SEP> 3.81 <SEP> (6H, <SEP> s, <SEP> 2 <SEP> x <SEP> OMe)
<tb> C, <SEP> CE3, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP>: <SEP> 161 <SEP> (C3, <SEP> C5) <SEP>;<SEP> 143.4
<tb> (CI) <SEP>;<SEP> 104.6 <SEP> (C2, <SEQ> C6) <SEP>;<SEP> 99.7 <SEP> (C4) <SEP>;<SEP> 65.3
<tb> (CH2OH) <SEP>;<SEP> 55, <SEP> 4 <SEP> (2 <SEP> x <SEP> OMe)
<Tb>
<Desc/Clms Page number 7> <Desc / Clms Page number 7>
<tb>
<tb> 4 <SEP> 3, <SEP> 5- <SEP> C9HI003 <SEP> 45-48 C <SEP> 166, <SEP> 16 <SEP> IH, <SEP> CDCh, <SEP> 200MHz <SEP> : <SEP> 9,88 <SEP> (1H, <SEP> s, <SEP> CHO) <SEP> ;
<tb> diméthoxybenzaldéhyde <SEP> 6,98 <SEP> (2H, <SEP> d, <SEP> J <SEP> = <SEP> 2,3 <SEP> Hz, <SEP> H2, <SEP> 6) <SEP> ; <SEP> 6,68 <SEP> (1H, <SEP> t, <SEP> J
<tb> = <SEP> 2,3 <SEP> Hz, <SEP> H4) <SEP> ; <SEP> 3,82 <SEP> (6H, <SEP> s, <SEP> 2 <SEP> x <SEP> OMe)
<tb> C, <SEP> Cd13, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP> : <SEP> 192 <SEP> (CHO) <SEP> ; <SEP> 161,3
<tb> (C3, <SEP> Cs) <SEP> ; <SEP> 138,5 <SEP> (CI) <SEP> ; <SEP> 107,2 <SEP> (C2, <SEP> C6) <SEP> ; <SEP> 55, <SEP> 7
<tb> (2 <SEP> x <SEP> OMe)
<tb> 5 <SEP> (E)-3, <SEP> 5, <SEP> 4' <SEP> C17H18O3 <SEP> 56 <SEP> - <SEP> 57 C <SEP> 270, <SEP> 33 <SEP> 1H, <SEP> CDCl3, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP> : <SEP> 3,85 <SEP> (9H, <SEP> s, <SEP> 3 <SEP> x
<tb> triméthoxystilbène <SEP> OMe) <SEP> ; <SEP> 6,40 <SEP> (1H, <SEP> t, <SEP> J <SEP> = <SEP> 2,5 <SEP> Hz, <SEP> H4) <SEP> ; <SEP> 6,68
<tb> (2H, <SEP> d, <SEP> J <SEP> = <SEP> 2,5 <SEP> Hz, <SEP> H2,6) <SEP> ; <SEP> 6,93 <SEP> (2H, <SEP> d, <SEP> J <SEP> = <SEP> 9
<tb> Hz, <SEP> H3',5') <SEP> ; <SEP> 7,00 <SEP> (2H, <SEP> d, <SEP> J <SEP> = <SEP> 16,5 <SEP> Hz,
<tb> vinylique) <SEP> ; <SEP> 7,48 <SEP> (2H, <SEP> d, <SEP> J <SEP> = <SEP> 9 <SEP> Hz, <SEP> H2', <SEP> 6')
<tb> C, <SEP> CD13, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP> : <SEP> 161 <SEP> (C3) <SEP> ; <SEP> 159,5
<tb> (Cs) <SEP> ; <SEP> 159,3 <SEP> (C4,) <SEP> ; <SEP> 139,7 <SEP> (Ci) <SEP> ; <SEP> 130 <SEP> (C1') <SEP> ;
<tb> 128, <SEP> 7 <SEP> (C) <SEP> ; <SEP> 127,8 <SEP> (C2', <SEP> 6') <SEP> ; <SEP> 126,6 <SEP> (C) <SEP> ; <SEP> 114, <SEP> 2
<tb> (C3.) <SEP> ; <SEP> 113,8 <SEP> (C5') <SEP> ; <SEP> 104,4 <SEP> (C2, <SEP> 6) <SEP> ; <SEP> 99,7 <SEP> (C4) <SEP> ;
<tb> 55,4 <SEP> (OCH3 <SEP> x <SEP> 3)
<tb> Mass. <SEP> m/z <SEP> = <SEP> 270 <SEP> (M+, <SEP> 100 <SEP> %) <SEP> ; <SEP> 258,0 <SEP> ; <SEP> 239,0
<tb> ; <SEP> 228, <SEP> 1 <SEP> ; <SEP> 197,1 <SEP> ; <SEP> 150, <SEP> 1 <SEP> ; <SEP> 137,0 <SEP> ; <SEP> 121, <SEP> 1 <SEP> ; <SEP> 109,1
<tb> Données <SEP> physico-chimiques <SEP> relatives <SEP> aux <SEP> composés <SEP> mis <SEP> en <SEP> oeuvre.
<tb> <Tb>
<tb> 4 <SEP> 3, <SEP> 5- <SEP> C9HI003 <SEP> 45-48C <SEP> 166, <SEP> 16 <SEP> IH, <SEP> CDCh, <SEP> 200MHz <SEP >: <SEP> 9.88 <SEP> (1H, <SEP> s, <SEP> CHO) <SEP>;
<tb> dimethoxybenzaldehyde <SEP> 6.98 <SEP> (2H, <SEP> d, <SEP> J <SEP> = <SEP> 2.3 <SEP> Hz, <SEP> H2, <SEP> 6) <SEP>;<SEP> 6.68 <SEP> (1H, <SEP> t, <SEP> J
<tb> = <SEP> 2,3 <SEP> Hz, <SEP> H4) <SEP>;<SEP> 3.82 <SEP> (6H, <SEP> s, <SEP> 2 <SEP> x <SEP> OMe)
<tb> C, <SEP> Cd13, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP>: <SEP> 192 <SEP> (CHO) <SEP>;<SEP> 161.3
<tb> (C3, <SEP> Cs) <SEP>;<SEP> 138.5 <SEP> (CI) <SEP>;<SEP> 107.2 <SEP> (C2, <SEQ> C6) <SEP>;<SEP> 55, <SEP> 7
<tb> (2 <SEP> x <SEP> OMe)
<tb> 5 <SEP> (E) -3, <SEP> 5, <SEP> 4 '<SEP> C17H18O3 <SEP> 56 <SEP> - <SEP> 57 C <SEP> 270, <SEP> 33 <MS> 1H, <SEP> CDCl3, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP>: <SEP> 3.85 <SEP> (9H, <SEP> s, <SEP> 3 <SEP> x
<tb> trimethoxystilbene <SEP> OMe) <SEP>;<SEP> 6.40 <SEP> (1H, <SEP> t, <SEP> J <SEP> = <SEP> 2.5 <SEP> Hz, <SEP> H4) <SEP>;<SEP> 6.68
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<tb> vinyl) <SEP>;<SEP> 7.48 <SEP> (2H, <SEP> d, <SEP> J <SEP> = <SEP> 9 <SEP> Hz, <SEP> H2 ', <SEP>6')
<tb> C, <SEP> CD13, <SEP> 200 <SEP> MHz <SEP>: <SEP> 161 <SEP> (C3) <SEP>;<SEP> 159.5
<tb> (Cs) <SEP>;<SEP> 159.3 <SEP> (C4,) <SEP>;<SEP> 139.7 <SEP> (Ci) <SEP>;<SEP> 130 <SEP> (C1 ') <SEP>;
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<tb> (C3.) <SEP>;<SEP> 113.8 <SEP> (C5 ') <SEP>;<SEP> 104.4 <SEP> (C2, <SEP> 6) <SEP>;<SEP> 99.7 <SEP> (C4) <SEP>;
<tb> 55.4 <SEP> (OCH3 <SEP> x <SEP> 3)
<tb> Mass. <SEP> m / z <SEP> = <SEP> 270 <SEP> (M +, <SEP> 100 <SEP>%) <SEP>;<SEP> 258.0 <SEP>;<SEP> 239.0
<tb>;<SEP> 228, <SEP> 1 <SEP>;<SEP> 197.1 <SEP>;<SEP> 150, <SEP> 1 <SEP>;<SEP> 137.0 <SEP>;<SEP> 121, <SEP> 1 <SEP>;<SEP> 109.1
<tb> Physical-chemical <SEP> data <SEP> relative <SEP> to <SEP> compounds <SEP> mis <SEP> in <SEP> work.
<Tb>
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Le diméthylformamide employé dans le cadre de la synthèse a été distillé sur tamis moléculaire de 0,4 nm et sous pression réduite. Le
dichlorométhane utilisé pour l'étape n 4 a été séché sur hydrure de calcium. L'alcool 4-méthoxybenzylique, l'acide 3, 5-dihydroxybenzoïque et le triéthylphosphite mis en oeuvre ci-dessous sont des produits qui se trouvent dans le commerce et qui peuvent être utilisés tels quels. The dimethylformamide used in the synthesis was distilled over a molecular sieve of 0.4 nm and under reduced pressure. The
dichloromethane used for step n 4 was dried over calcium hydride. The 4-methoxybenzyl alcohol, 3,5-dihydroxybenzoic acid and triethylphosphite used below are products which are commercially available and which can be used as such.
1. Préparation du bromure de 4-méthoxybenzyle 1
Un volume de 6 ml d'acide bromhydrique concentré à 48% a été ajouté, en une seule fois, à 7,5 g (54 mmoles) d'alcool 4méthoxybenzylique. On a ensuite vigoureusement agité le mélange pendant 30 minutes à température ambiante. Puis 100 ml d'éther diéthylique ont été rajoutés et la phase acide a été séparée. Après une deuxième extraction à l'éther, on a rassemblé les phases organiques que l'on a lavées avec, d'abord de l'hydrogénocarbonate de sodium, puis de l'eau salée, et que l'on a finalement séchées à l'aide de sulfate de magnésium. Le bromure de 4méthoxybenzyle 1 obtenu est peu stable et a donc été immédiatement utilisé dans l'étape suivante. Il se présente sous forme d'une huile incolore et il en a été obtenu 10,54 g ce qui correspond à un rendement de 97 %.
A volume of 6 ml of 48% concentrated hydrobromic acid was added in one go to 7.5 g (54 mmol) of 4-methoxybenzyl alcohol. The mixture was then vigorously stirred for 30 minutes at room temperature. Then 100 ml of diethyl ether was added and the acid phase was separated. After a second extraction with ether, the organic phases which have been washed with sodium hydrogencarbonate and then with salt water are collected and finally dried at room temperature. help with magnesium sulfate. The 4methoxybenzyl bromide 1 obtained is unstable and was therefore immediately used in the next step. It is in the form of a colorless oil and was obtained 10.54 g which corresponds to a yield of 97%.
2. Préparation du 3. 5-diméthoxybenzoate de méthyle 2 Un mélange constitué de 5 g d'acide 3, 5-dihydroxybenzoïque (32,4 mmoles), de 25 g de carbonate de potassium anhydre, de 20 ml de sulfate de diméthyle et de 100 ml d'acétone est porté à reflux pendant 4 heures. Après filtration du carbonate de potassium et évaporation de l'acétone, le mélange restant a été dilué avec 100 ml d'eau et 200 ml d'éther. Avant d'être séchée sur sulfate de magnésium, la phase éthérée a été lavée successivement, deux fois avec de l'ammoniaque concentrée, une fois avec de l'eau, deux fois avec de l'acide chlorhydrique dilué et enfin avec de l'eau salée. Le solvant évaporé, on obtient un produit brut que l'on purifie sur colonne chromatographique de silice 60 commercialisée par la société Merck en utilisant un mélange hexane : acétate d'éthyle à 4 : 1 2. Preparation of methyl 5-dimethoxybenzoate 2 A mixture of 5 g of 3,5-dihydroxybenzoic acid (32.4 mmol), 25 g of anhydrous potassium carbonate, 20 ml of dimethyl sulfate and 100 ml of acetone is refluxed for 4 hours. After filtration of the potassium carbonate and evaporation of the acetone, the remaining mixture was diluted with 100 ml of water and 200 ml of ether. Before being dried over magnesium sulphate, the ethereal phase was washed successively, twice with concentrated ammonia, once with water, twice with dilute hydrochloric acid and finally with water. salt water. The evaporated solvent gives a crude product which is purified on a silica chromatographic column 60 marketed by Merck using a hexane: ethyl acetate 4: 1 mixture.
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(rapport en volumes). On obtient ainsi des aiguilles incolores de masse 6,17 g. Ceci correspond également à un rendement de 97%. (ratio in volumes). Colorless needles with a mass of 6.17 g are thus obtained. This also corresponds to a yield of 97%.
3. Préparation de l'alcool 3. 5-diméthoxybenzylique 3
A une suspension de l'hydrure double d'aluminium et de lithium (1,02 g, soit 26,8 mmoles) dans 75 ml d'éther diéthylique, on ajoute 5 g (25,4 mmoles) de 3,5-diméthoxybenzoate de méthyle, contenus dans 25 ml d'éther diéthylique à un rythme permettant un reflux doux. Après un reflux de 2,5 heures, on refroidit, on dilue avec 50 ml d'un mélange 1 : 1 (rapport en volumes) eau-éther et finalement avec de l'acide chlorhydrique dilué. L'extrait éthéré lavé à l'eau est séché sur sulfate de magnésium. On obtient des aiguilles incolores de masse 3,86 g, ce qui correspond à un rendement de 90%. 3. Preparation of 3-dimethoxybenzyl alcohol 3
To a suspension of lithium aluminum hydride (1.02 g, 26.8 mmol) in 75 ml of diethyl ether, 5 g (25.4 mmol) of 3,5-dimethoxybenzoate are added. of methyl, contained in 25 ml of diethyl ether at a rate allowing gentle reflux. After refluxing for 2.5 hours, the mixture is cooled, diluted with 50 ml of a 1: 1 (volume ratio) water-ether mixture and finally with dilute hydrochloric acid. The ethereal extract washed with water is dried over magnesium sulphate. Colorless needles with a mass of 3.86 g are obtained, which corresponds to a yield of 90%.
4. Préparation du 3, 5-diméthoxybenzaldéhyde 4
A 3,5 g (20,8 mmoles) d'alcool 3,5-diméthoxybenzylique 3 dans 30 ml de dichlorométhane séché, on ajoute 11, 75 g (31,2 mmoles) de dichromate de pyridinium préparé selon la méthode de Corey. 4. Preparation of 3,5-dimethoxybenzaldehyde 4
To 3.5 g (20.8 mmol) of 3,5-dimethoxybenzyl alcohol 3 in 30 ml of dried dichloromethane was added 11.75 g (31.2 mmol) of pyridinium dichromate prepared according to the method of Corey.
Cette méthode consiste à ajouter en 20 minutes 15,8 g de pyridine à 20 g de trioxyde de chrome dilué dans 20 ml d'eau distillée en veillant à ce que la température ne dépasse pas 20 C. Après 15 minutes d'agitation vigoureuse, on ajoute 80 ml d'acétone. This method consists in adding in 15 minutes 15.8 g of pyridine to 20 g of chromium trioxide diluted in 20 ml of distilled water, ensuring that the temperature does not exceed 20 ° C. After 15 minutes of vigorous stirring, 80 ml of acetone are added.
Les cristaux oranges de dichromate de pyridinium (25,5 g) sont filtrés après 12 heures de croissance à-20 C, ce qui correspond à un rendement de 68 %. The orange crystals of pyridinium dichromate (25.5 g) are filtered after 12 hours of growth at -20 C, which corresponds to a yield of 68%.
Après agitation pendant 12 heures à température ambiante, le mélange réactionnel est dilué à l'aide de 60 ml d'éther diéthylique, filtré à travers une colonne remplie de silice 60 commercialisée par la société Merck pour donner, après évaporation du solvant, 3,1 g d'un solide sous forme d'aiguilles incolores. Le rendement est de 90%. After stirring for 12 hours at room temperature, the reaction mixture is diluted with 60 ml of diethyl ether, filtered through a column filled with silica 60 sold by Merck to give, after evaporation of the solvent, 3, 1 g of a solid in the form of colorless needles. The yield is 90%.
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5. Préparation de l'isomère (E 5, 4'-triméthoxystilbène 5
On chauffe, à 120 C pendant 6 heures, un mélange constitué de 14,5 ml (84,6 mmoles) de triéthylphosphite et de 10,54 g (52,4 mmoles) de bromure de 4-méthoxybenzyle 1. Pendant la réaction, il se produit un dégagement gazeux de bromure d'éthyle. Après refroidissement à 0 C, on ajoute au mélange 75 ml de diméthylformamide, préalablement distillé, et 2,97 g (55,2 mmoles) de méthylate de sodium et on agite encore pendant une heure. On y introduit ensuite 5,8 g (35mmoles) du 3,5diméthoxybenzaldéhyde 4 précédemment synthétisé. La solution obtenue est agitée pendant une heure à température ambiante puis encore une heure à 100 C. Après refroidissement, le mélange réactionnel est agité pendant une nuit, saisi à l'eau et extrait à l'éther. Les phases organiques sont réunies, lavées à l'eau salée, contrôlées au papier-tournesol et finalement séchées sur du sulfate de magnésium. Le produit brut est purifié par chromatographie sur silice 60 avec comme éluant un mélange d'hexane et d'acétate d'éthyle (4 : 1) (rapport en volumes). On obtient 7,85 g d'un solide sous forme d'aiguilles incolores. Le rendement est de 83%. 5. Preparation of the isomer (E 5, 4'-trimethoxystilbene 5
A mixture consisting of 14.5 ml (84.6 mmol) of triethylphosphite and 10.54 g (52.4 mmol) of 4-methoxybenzyl bromide 1 is heated at 120 ° C. for 6 hours. During the reaction, a gaseous release of ethyl bromide occurs. After cooling to 0 ° C., 75 ml of dimethylformamide, previously distilled, and 2.97 g (55.2 mmol) of sodium methoxide are added to the mixture and the mixture is stirred for a further hour. 5.8 g (35 mmol) of the 3,5-dimethoxybenzaldehyde 4 previously synthesized are then introduced into it. The solution obtained is stirred for one hour at room temperature and then for another hour at 100 ° C. After cooling, the reaction mixture is stirred overnight, taken with water and extracted with ether. The organic phases are combined, washed with salt water, controlled with paper-sunflower and finally dried over magnesium sulfate. The crude product is purified by chromatography on silica 60 with a mixture of hexane and ethyl acetate (4: 1) as the eluent (volume ratio). 7.85 g of a solid are obtained in the form of colorless needles. The yield is 83%.
6. Préparation du (Z) -3, 5A'-triméthoxystilbène (composé R3)
Un échantillon constitué d'une solution de 1 ml à 10-2 mole par litre de (E)-3, 5, 4'-triméthoxystilbène 5, est exposé à une lumière ultraviolette culminante à 254 nm. La durée de l'irradiation est d'une heure. 6. Preparation of (Z) -3,5A'-trimethoxystilbene (Compound R3)
A sample consisting of a 1 ml solution at 10-2 mol per liter of (E) -3,5,4'-trimethoxystilbene 5 is exposed to a peak ultraviolet light at 254 nm. The duration of the irradiation is one hour.
Après évaporation sous pression réduite du solvant, on obtient quantitativement le stéréo-isomère Z recherché (R3). After evaporation under reduced pressure of the solvent, the desired stereoisomer Z (R3) is quantitatively obtained.
Le coût des produits chimiques nécessaires à l'obtention d'un gramme de composé R3 pur à 98 % est actuellement d'environ 8 euros (soit environ 52 FRF). The cost of the chemicals needed to obtain one gram of pure R3 compound at 98% is currently about 8 euros (about FRF 52).
Le schéma de la synthèse du composé R3 est résumé sur la figure 1. The scheme of the synthesis of compound R3 is summarized in FIG.
B) Effets Biologiques du composé R3 selon l'invention : 1) Inhibition par le composé R3 de la croissance de cellules cancéreuses et/ou transformées B) Biological Effects of the R3 Compound According to the Invention: 1) Inhibition by the R3 Compound of the Growth of Cancerous and / or Transformed Cells
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Afin de démontrer l'activité du composé R3 sur la croissance des cellules cancéreuses in vitro, les essais suivants ont été réalisés. In order to demonstrate the activity of the compound R3 on the growth of cancer cells in vitro, the following tests were performed.
Des cellules cancéreuses coliques humaines de la lignée CaCo- 2 et des cellules transformées murines de la lignée IEC-6, ont été traitées 24 h après ensemencement avec des concentrations croissantes de R3, allant
de 0, 1 uMàO, 6M. Human colonic cancer cells of the CaCO-2 line and murine transformed cells of the IEC-6 line were treated 24 h after inoculation with increasing concentrations of R3, ranging from
0.1mM, 6M.
La figure 2 représente la courbe de croissance de cellules CaCo-2 (figure 2a) en fonction de la concentration en composé R3 ajouté, alors que la figure 2b montre la courbe de croissance de cellules IEC-6 en fonction de la concentration en composé R3. Chaque point sur ces deux courbes représente la valeur moyenne (SEM) calculée à partir de 8 échantillons. La légende de la figure 2a s'applique également à la figure 2b. FIG. 2 represents the CaCo-2 cell growth curve (FIG. 2a) as a function of the added R3 compound concentration, while FIG. 2b shows the IEC-6 cell growth curve as a function of the R3 compound concentration. . Each point on these two curves represents the average value (SEM) calculated from 8 samples. The legend of Figure 2a also applies to Figure 2b.
Les résultats observés montrent que le composé R3 exerce une forte action inhibitrice (inhibition de 70%) sur la croissance des cellules cancéreuses coliques CaCo-2 pour des concentrations supérieures à 0, 2 uM, c'est-à-dire une inhibition similaire à celle obtenue avec le resvératrol mais pour des concentrations 150 fois moins élevées. The results observed show that the compound R3 exerts a strong inhibitory action (70% inhibition) on the growth of CaCo-2 colonic cancer cells for concentrations greater than 0.2 μM, that is to say a similar inhibition to that obtained with resveratrol but for concentrations 150 times lower.
Un arrêt complet de la croissance cellulaire des cellules CaCo-2 est observé pour une concentration de 0, 3 uM en composé R3. En ce qui concerne les cellules IEC-6, le composé R3 se montre encore plus actif, puisqu'une inhibition totale de la croissance cellulaire est déjà obtenue à une concentration en composé R3 de 0, 2 uM. Complete arrest of cell growth of CaCo-2 cells is observed at a concentration of 0.3 μM of compound R3. With respect to the IEC-6 cells, the compound R3 is even more active, since a total inhibition of cell growth is already obtained at a compound concentration R3 of 0.2 μM.
La lignée IEC-6 ayant un pouvoir prolifératif significativement plus élevé que les cellules de type CaCo-2, ces résultats montrent que les effets engendrés par un traitement avec la molécule R3 sont directement liés à l'état prolifératif des cellules. The IEC-6 line having a significantly higher proliferative capacity than CaCo-2 cells, these results show that the effects generated by a treatment with the R3 molecule are directly related to the proliferative state of the cells.
2. Caractérisation de l'effet antiprolifératif du composé R3
Cette étude permet de caractériser le mécanisme par lequel R3 inhibe la prolifération cellulaire cancéreuse.
This study characterizes the mechanism by which R3 inhibits cancerous cell proliferation.
Trois grands types d'inhibitions ont été décrits : - la nécrose, ou cytotoxicité directe et aspécifique des cellules, - l'apoptose, ou mort programmée de la cellule, on emploie également le terme de suicide cellulaire , et - un simple blocage du cycle cellulaire. Three main types of inhibitions have been described: - necrosis, or direct and nonsecretory cytotoxicity of cells, - apoptosis, or programmed death of the cell, the term cell suicide is also used, and - a simple blocking of the cycle cellular.
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a) Cytotoxicité aspécifique (nécrose cellulaire) :
La mesure de l'activité d'enzymes intracellulaires libérées dans le milieu de culture constitue un bon révélateur de la lyse cellulaire. En effet, une destruction de la membrane des cellules entraîne la libération du contenu cytoplasmique dans le surnageant, et ceci proportionellement au nombre de cellules détruites. a) Aspecific cytotoxicity (cell necrosis):
Measurement of the activity of intracellular enzymes released into the culture medium is a good indicator of cell lysis. Indeed, destruction of the cell membrane results in the release of the cytoplasmic content into the supernatant, and this in proportion to the number of cells destroyed.
La lactate déshydrogénase (LDH) est une enzyme intracytoplasmique ubiquitaire, et son apparition dans le milieu extérieur est un indicateur de choix pour évaluer la cytotoxicité d'un produit (Decker et Lohmann-Matthes 1988). Lactate dehydrogenase (LDH) is a ubiquitous intracytoplasmic enzyme, and its appearance in the external environment is an indicator of choice for assessing the cytotoxicity of a product (Decker and Lohmann-Matthes 1988).
De manière inattendue et surprenante, il a pu être constaté qu'un traitement des cellules CaCo-2 par le composé R3, entraîne une disparition complète de l'activité LDH qui ne peut plus être détectée dans le milieu extracellulaire et ceci même pour des concentrations élevées en R3 permettant de conclure que l'inhibition de croissance observée au niveau des cellules CaCo-2 n'est pas le résultat d'une cytotoxicité aspécifique du composé R3. b) apoptose
Le terme d'apoptose est utilisé pour qualifier un mode particulier de dégénérescence cellulaire qui, au final, se traduit par la mort de la cellule. C'est un processus cellulaire endogène mis en place en dernier recours lorsqu'un signal extérieur ou intérieur active une voie métabolique créant un dysfonctionnement important de la cellule. L'apoptose est caractérisée par une condensation et une dégradation de la chromatine, une réduction du volume cellulaire et une déformation membranaire. Un des marqueurs biochimiques de l'apoptose est une dégradation caractéristique de l'ADN. En effet on observe une fragmentation de l'ADN qui résulte de l'activation d'une endonucléase clivant sélectivement l'ADN sur des sites localisés à proximité des unités nucléosomiques. Des fragments mono-et oligonucléosomiques sont ainsi générés. La détection de ces fragments par électrophorèse sur gel d'agarose est une des méthodes les plus couramment utilisées pour qualifier l'apoptose. Unexpectedly and surprisingly, it has been found that a treatment of CaCo-2 cells with the compound R3, results in a complete disappearance of the LDH activity which can no longer be detected in the extracellular medium and this even for concentrations elevated to R3 to conclude that growth inhibition observed at CaCo-2 cells is not the result of aspecific cytotoxicity of the compound R3. b) apoptosis
The term apoptosis is used to describe a particular mode of cellular degeneration that ultimately results in the death of the cell. It is an endogenous cellular process put in place as a last resort when an external or internal signal activates a metabolic pathway creating a significant dysfunction of the cell. Apoptosis is characterized by condensation and degradation of chromatin, a reduction of cell volume and membrane deformation. One of the biochemical markers of apoptosis is a characteristic degradation of DNA. In fact, we observe a fragmentation of the DNA that results from the activation of an endonuclease that selectively cleaves DNA at sites located near the nucleosomal units. Mono- and oligonucleosomal fragments are thus generated. The detection of these fragments by agarose gel electrophoresis is one of the most commonly used methods to qualify apoptosis.
En utilisant cette technique il a pu être constaté que la molécule R3 ne provoquait pas un tel processus. Après séparation, une fragmentation Using this technique it has been found that the R3 molecule does not cause such a process. After separation, fragmentation
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de l'ADN similaire a été obtenue dans les cellules traitées par rapport aux cellules de contrôle. Aucune dégradation de l'ADN n'a pu être mise en évidence, et ce même pour des concentrations élevées en composé R3 ajouté. Le traitement par la molécule R3 n'induit donc pas de processus apoptotique dans les cellules CaCo-2. similar DNA was obtained in the treated cells relative to the control cells. No degradation of the DNA could be demonstrated, even for high concentrations of added R3 compound. Treatment with the R3 molecule does not induce an apoptotic process in CaCo-2 cells.
Un autre marqueur biochimique pouvant caractériser l'apoptose est la translocation de la phosphatidyl sérine de la surface cytoplasmique de la membrane vers l'extérieur de la membrane cellulaire. La détection in vitro de ce phénomène peut être visualisée à partir de l'interaction entre l'annexine V (une protéine liant spécifiquement la phosphatidyl sérine) et la phosphatidyl sérine. L'annexine V est marquée grâce à un fluorochrome spécifique et la détection est effectuée par cytométrie en flux. Another biochemical marker that can characterize apoptosis is the translocation of phosphatidyl serine from the cytoplasmic surface of the membrane to the outside of the cell membrane. In vitro detection of this phenomenon can be visualized from the interaction between annexin V (a protein specifically binding phosphatidyl serine) and phosphatidyl serine. Annexin V is labeled with a specific fluorochrome and the detection is carried out by flow cytometry.
Les cellules ont donc été traitées par 0,3 et 1 u. M de R3 pendant 24 heures, puis l'analyse de la liaison entre l'annexine V et la phosphatidyl sérine a été effectuée par cytométrie en flux (cf. figure 3a de la figure 3). The cells were therefore treated with 0.3 and 1 μl. M of R3 for 24 hours, then the analysis of the binding between annexin V and phosphatidyl serine was performed by flow cytometry (see Figure 3a of Figure 3).
On peut constater sur ladite figure 3a, que le traitement avec la molécule R3 de cellules CaCo-2 n'induit aucune variation dans le profil du marquage à l'annexine. Le pourcentage de cellule liant l'annexine ne subit aucune augmentation. It can be seen in said FIG. 3a that the treatment with the R3 molecule of CaCo-2 cells does not induce any variation in the profile of the annexin labeling. The percentage of annexin-binding cell does not increase.
La molécule R3 ne provoque donc pas la translocation de la phosphatidyl sérine. De ce fait, ce composé ne revêt une fois de plus, pas les caractéristiques d'un inducteur d'apoptose. The R3 molecule does not therefore cause the translocation of phosphatidyl serine. As a result, this compound does not once again take on the characteristics of an apoptosis inducer.
Au cours de cette expérience, il a été réalisé en parallèle un marquage à l'iodure de propidium (IP). Les résultats sont visibles sur la figure 3b de la figure 3. L'IP est un intercalant de l'ADN qui est exclusivement inclus par les cellules perméabilisées. Il est donc exclu par des cellules viables (premier pic), alors qu'il sera incorporé dans des cellules mortes (tout ce qui se trouve après le premier pic). During this experiment, a propidium iodide (PI) labeling was performed in parallel. The results are visible in Figure 3b of Figure 3. The IP is an intercalator of the DNA which is exclusively included by the permeabilized cells. It is therefore excluded by viable cells (first peak), while it will be incorporated into dead cells (everything after the first peak).
Sur la figure 3b présentée précédemment on peut s'apercevoir que des cellules incorporent cet intercalant (pic à l'extrême droite sur la figure 3b de la figure 3), aussi bien dans les contrôles (présence de quelques cellules mortes) que dans les cellules ayant subit un traitement par le composé R3. Cependant on peut constater que le R3 induit une importante mort cellulaire comme le montre la diminution du nombre de cellules formant le premier pic. Ainsi, on peut constater que plus la dose de R3 est élevée, plus le nombre de cellules mortes est élevé. In FIG. 3b presented above, it can be seen that cells incorporate this intercalant (peak on the far right in FIG. 3b of FIG. 3), both in the controls (presence of a few dead cells) and in the cells. having undergone treatment with compound R3. However, it can be seen that R3 induces a large cell death as shown by the decrease in the number of cells forming the first peak. Thus, it can be seen that the higher the dose of R3, the higher the number of dead cells.
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Ceci a amené à étudier les effets possibles du composé R3 sur le déroulement du cycle cellulaire. Les résultats de cette étude sont donnés ci-après. c) Etude par cytométrie de flux du blocage du cycle cellulaire par le composé R3
La cytométrie de flux est définie comme l'étude précise de cellules isolées entraînées par un flux liquide. Elle permet la caractérisation qualitative et quantitative des cellules en déterminant la distribution et la variation du nombre de cellules dans chaque phase du cycle cellulaire, à savoir les phases G1 (préparation à l'entrée en phase S), S (synthèse), G2 (préparation à l'entrée en phase M) et M (mitose). Cette caractérisation se base sur le fait que la cellule possède, au cours de son développement, un contenu en ADN variable. On trouvera 2n chromosomes en phase Gi, alors que pour des cellules en phase G2 le nombre de chromosomes présents sera de 4n. Les valeurs intermédiaires sont celles correspondant à la phase de synthèse d'ADN, donc à la phase S du cycle. Dans un cytomètre, les cellules canalisées assimilables à des particules, coupent le faisceau lumineux d'un laser et les signaux qu'elles émettent en retour sont analysés. This led to study the possible effects of the compound R3 on the course of the cell cycle. The results of this study are given below. c) Flow Cytometry Study of Cell Cycle Blockade by the R3 Compound
Flow cytometry is defined as the precise study of isolated cells driven by a liquid flow. It allows the qualitative and quantitative characterization of the cells by determining the distribution and the variation of the number of cells in each phase of the cell cycle, namely the phases G1 (preparation to the entry in phase S), S (synthesis), G2 ( preparation for entry into phase M) and M (mitosis). This characterization is based on the fact that the cell has, during its development, a variable DNA content. There will be 2n chromosomes in the Gi phase, whereas for G2 cells the number of chromosomes present will be 4n. The intermediate values are those corresponding to the DNA synthesis phase, therefore to the S phase of the cycle. In a cytometer, particle-like channelized cells cut off the light beam of a laser and the signals they emit back are analyzed.
Ces signaux sont fonction de la quantité d'ADN présent dans la cellule. These signals are a function of the amount of DNA present in the cell.
Les cellules CaCo-2 sont traitées avec 0, 3 uM de R3 sur une période de 64 heures (figures 4a et 4b). La distribution des cellules dans les différentes phases du cycle cellulaire a été analysée pour des temps de prélèvement de 16,24, 40,48 et 64 heures. CaCo-2 cells are treated with 0.3 μM R3 over a period of 64 hours (Figures 4a and 4b). The distribution of cells in the different phases of the cell cycle was analyzed for sampling times of 16.24, 40.48 and 64 hours.
Chaque courbe représente la proportion de cellules se trouvant dans la phase du cycle concernée. La légende de la figure 4a s'applique également à la figure 4b. Each curve represents the proportion of cells in the phase of the cycle concerned. The legend of Figure 4a also applies to Figure 4b.
Un blocage des cellules au niveau de la phase G2/M (duplication de l'ADN) est observable dès 16 heures après traitement et se maintient approximativement jusqu'à 40 heures. Durant cette période, on observe une accumulation de cellules bloquées en phase G2/M. Il semble qu'au-delà de 24 heures, le composé R3 ne permet plus de maintenir complètement ce blocage, cela se traduit donc par une légère inflexion de la courbe. Ce phénomène ne relève pas d'une possible réversibilité du produit, mais est probablement associé à une concentration un peu faible et qui ne permet pas d'affecter toutes les cellules de façon prononcée. Cette hypothèse se confirme par le fait que les cellules sont de nouveau bloquées Blocking of the cells at the G2 / M phase (DNA duplication) is observable as early as 16 hours after treatment and is maintained for approximately 40 hours. During this period, an accumulation of cells blocked in G2 / M phase is observed. It seems that beyond 24 hours, the compound R3 no longer allows to completely maintain this blockage, this results in a slight inflection of the curve. This phenomenon is not a possible reversibility of the product, but is probably associated with a low concentration that does not affect all cells in a pronounced manner. This hypothesis is confirmed by the fact that the cells are again blocked
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lorsqu'à 48 heures du milieu frais contenant la molécule R3 est ajouté. Ce blocage est beaucoup plus prononcé que celui observé précédemment puisque 85% des cellules se trouvent désormais bloquées au niveau de la phase G2/M du cycle cellulaire. Cela montre donc que les effets engendrés par la molécule R3 sur le cycle cellulaire sont potentialisés au cours des traitements successifs et ne sont pas réversibles. Il est intéressant de constater que les effets sur le cycle cellulaire qui sont induits par le composé R3 sont similaires à ceux qu'exerce un autre anticancéreux de synthèse utilisé en clinique, à savoir le Taxotere déjà évoqué plus haut. when at 48 hours fresh medium containing the molecule R3 is added. This blocking is much more pronounced than the one previously observed since 85% of the cells are now blocked at the level of the G2 / M phase of the cell cycle. This shows that the effects generated by the molecule R3 on the cell cycle are potentiated during successive treatments and are not reversible. It is interesting to note that the effects on the cell cycle that are induced by the compound R3 are similar to those exerted by another clinically used synthetic anticancer drug, the Taxotere already mentioned above.
3. Etude des effets du composé R3 sur la synthèse des polyamines
Les polyamines sont des composés ubiquitaires qui peuvent être considérés comme des facteurs de croissance pour la cellule tumorale. 3. Study of the effects of the compound R3 on the synthesis of polyamines
Polyamines are ubiquitous compounds that can be considered as growth factors for the tumor cell.
Le métabolisme endogène des polyamines est régulé par 2 enzymes limitantes appelées omithine décarboxylase (ODC) et Sadénosylméthionine décarboxylase (AdoMetDC ou SAMDC). L'ODC catalyse la décarboxylation de l'omithine en putrescine et l'AdoMetDC catalyse la décarboxylation de la S-adénosyl-méthionine en S-adénosylméthionine décarboxylée, donneur de groupe aminopropyle lors de la synthèse de la spermidine et de la spermine. The endogenous metabolism of polyamines is regulated by 2 limiting enzymes called omithine decarboxylase (ODC) and Sadenosylmethionine decarboxylase (AdoMetDC or SAMDC). ODC catalyzes the decarboxylation of ornithine to putrescine and AdoMetDC catalyzes the decarboxylation of S-adenosyl-methionine to the decarboxylated S-adenosylmethionine, an aminopropyl donor in the synthesis of spermidine and spermine.
Les figures 5a et 5b représentent les activités de l'ODC et de la SAMDC, exprimées en pmol/h/mg de protéines. Chaque colonne représente les valeurs moyennes (SEM) des activités de l'ODC et de l'AdoMetDC calculées à partir de 3 échantillons. La légende de la figure 5a s'applique également à la figure 5b. Figures 5a and 5b show the activities of ODC and SAMDC, expressed in pmol / h / mg protein. Each column represents the average values (SEM) of ODC and AdoMetDC activities calculated from 3 samples. The legend of Figure 5a also applies to Figure 5b.
L'activité de l'ODC au sein des cellules tumorales est en général exacerbée, ce qui en fait une cible potentielle dans la recherche de nouveaux agents anticancéreux. Dans cette optique, les effets du composé R3 ont été étudiés sur l'activité de l'ODC et de l'AdoMetDC (figures 5a et 5b de la figure 5). ODC activity within tumor cells is generally exacerbated, making it a potential target in the search for new anti-cancer agents. In this respect, the effects of the compound R3 were studied on the activity of ODC and AdoMetDC (FIGS. 5a and 5b of FIG. 5).
On peut constater qu'un traitement par le composé R3 affecte de façon significative l'activité de l'ODC, et ceci dès le premier traitement, cependant l'intensité de l'inhibition décroît après 48h de traitement. Le composé R3 mis en contact avec les cellules lors du premier traitement It can be seen that a treatment with the compound R3 significantly affects the activity of the ODC, and this from the first treatment, however the intensity of the inhibition decreases after 48 hours of treatment. The compound R3 brought into contact with the cells during the first treatment
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n'est pas en concentration suffisante pour entraîner un blocage irréversible de l'enzyme. Cela se vérifie par le fait qu'un second traitement effectué à 48h conduit à une forte inhibition de l'ODC. Ces résultats sont encore confortés par le fait que l'activité de l'AdoMetDC qui ne subissait aucune variation significative lors du premier traitement est fortement inhibée lors d'un second traitement. is not in sufficient concentration to cause irreversible blockage of the enzyme. This is confirmed by the fact that a second treatment carried out at 48h leads to a strong inhibition of the ODC. These results are further confirmed by the fact that the activity of AdoMetDC which did not undergo any significant variation during the first treatment is strongly inhibited during a second treatment.
Ainsi le composé R3 inhibe fortement la synthèse des polyamines par la cellule cancéreuse ce qui contribue à expliquer les puissants effets antiprolifératifs de cette molécule. Thus the compound R3 strongly inhibits the synthesis of polyamines by the cancer cell which helps to explain the powerful antiproliferative effects of this molecule.
4. Effets du composé R3 sur le cytosquelette
Il a pu précédemment être démontré que la molécule R3 provoquait un blocage du cycle cellulaire au niveau de la phase G2/M. Or, il est connu que le passage de cette phase est essentiel dans la division cellulaire. En effet, c'est à cette période du cycle que la cellule va pouvoir se scinder et pour cela il y a mise en jeu d'éléments clés du cytosquelette. 4. Effects of R3 on the cytoskeleton
It has previously been shown that the R3 molecule causes cell cycle blockade at the G2 / M phase. Now, it is known that the passage of this phase is essential in cell division. Indeed, it is at this period of the cycle that the cell will be able to split and for that there are involved key elements of the cytoskeleton.
Le réseau microtubulaire représente un de ces éléments. The microtubular network represents one of these elements.
Par conséquent, les répercussions que pouvait avoir la molécule R3 sur ce réseau ont également été analysées. Il a été comparé l'action de ce composé à d'autres composés ayant un effet important et reconnu sur le réseau microtubulaire, à savoir le nocodazole qui provoque une dépolymérisation des microtubules, et le taxol qui lui au contraire inhibe cette dépolymérisation.
Les cellules CaCo-2 sont traitées durant 2 heures par le composé R3 (5 u. M, 10 uM et 20 u. M), le taxol (10uM) et le nocodazole (20 uM). La structure du réseau microtubulaire est alors révélée par des méthodes immunohistochimiques. The CaCo-2 cells are treated for 2 hours with compound R3 (5 μM, 10 μM and 20 μM), taxol (10 μM) and nocodazole (20 μM). The structure of the microtubular network is then revealed by immunohistochemical methods.
Comme l'illustre le cliché correspondant (en bas et à droite de la figure 6), le taxol de par son action anti-dépolymérisante fige le réseau microtubulaire alors que le nocodazole (cliché en bas et à gauche de la figure 6) provoque une désorganisation importante de ce réseau. Il a été trouvé que le composé R3 provoque le même type d'altérations que celles qui sont observables lorsque les cellules sont traitées par du nocodazole (clichés du haut à droite et les deux clichés du milieu de la figure 6). As illustrated by the corresponding image (bottom right of Figure 6), the taxol by its anti-depolymerizing action freezes the microtubule network while the nocodazole (photo at the bottom left of Figure 6) causes a significant disruption of this network. It has been found that the compound R3 causes the same type of alterations as those which are observable when the cells are treated with nocodazole (upper right and two middle plates of Figure 6).
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Le composé R3 entre donc dans la classe des agents provoquant une dépolymérisation du réseau microtubulaire et qui conduisent à la mort des cellules. Compound R3 therefore falls into the class of agents that cause depolymerization of the microtubule network and lead to cell death.
En étudiant les effets du composé R3 sur la croissance de diverses lignées cancéreuses, il a pu être apporté des données significatives relatives au pouvoir antiprolifératif de ce composé sur les cellules cancéreuses humaines ou animales. Ainsi, il a pu être démontré que la molécule R3 possède un puissant pouvoir antiprolifératif provoquant un blocage des cellules cancéreuses au niveau de la phase G2/M du cycle cellulaire. Ce blocage est la résultante de l'effet direct de cette molécule sur le réseau microtubulaire, puisqu'il provoque une dépolymérisation de ce réseau conduisant à la mort des cellules (momification des cellules). D'autres travaux également ont permis de montrer que le composé R3 n'est aucunement toxique envers une lignée de cellules lymphocytaires normales même à forte concentration, ce qui permet d'envisager une réelle sélectivité du composé R3 selon l'invention vis-à-vis des cellules en phase active de croissance. Ce fait est remarquable et renforce l'intérêt dudit composé R3 dans la thérapie anticancéreuse puisque d'autres anticancéreux actuellement
0 utilisés en clinique, notamment le Taxotère, ne montrent pas une telle sélectivité d'action. By studying the effects of the compound R3 on the growth of various cancer lines, it has been possible to bring significant data on the antiproliferative power of this compound on human or animal cancer cells. Thus, it has been demonstrated that the R3 molecule has a powerful antiproliferative power causing a blocking of cancer cells at the G2 / M phase of the cell cycle. This blockage is the result of the direct effect of this molecule on the microtubule network, since it causes a depolymerization of this network leading to cell death (cell mummification). Other studies have also shown that the compound R3 is in no way toxic to a normal lymphocyte cell line even at high concentration, which allows to consider a real selectivity of the compound R3 according to the invention vis-à-vis screws cells in the active phase of growth. This fact is remarkable and reinforces the interest of said compound R3 in anticancer therapy since other anticancer drugs currently
0 used clinically, including Taxotere, do not show such selectivity of action.
La présente invention a donc également pour objet le composé R3 selon l'invention pour utilisation comme médicament. The present invention therefore also relates to the compound R3 according to the invention for use as a medicament.
Elle a encore pour objet l'utilisation dudit composé R3 selon l'invention pour la préparation d'un médicament destiné à traiter ou à prévenir une maladie impliquant une prolifération ou croissance cellulaire anormale, telle que le cancer, comme agent de dépolymérisation du réseau microtubulaire de cellules humaines ou animales vivantes, comme agent d'inhibition de la synthèse polyaminique de cellules cancéreuses humaines ou animales vivantes, comme agent de blocage du cycle cellulaire, en particulier du cycle cellulaire de cellules cancéreuses humaines ou animales vivantes et comme agent de traitement ou de prévention de pathologies hyperprolifératives, en particulier d'états inflammatoires. It also relates to the use of said compound R3 according to the invention for the preparation of a medicament for treating or preventing a disease involving abnormal cell proliferation or growth, such as cancer, as a depolymerization agent of the microtubular network of living human or animal cells, as an agent for inhibiting the polyamine synthesis of living human or animal cancer cells, as a cell cycle blocking agent, in particular the cell cycle of living human or animal cancer cells and as a treatment agent or prevention of hyperproliferative pathologies, in particular inflammatory conditions.
Dans l'avant-dernier cas, l'utilisation est en outre caractérisée en ce que le blocage du cycle cellulaire se fait au niveau de la phase G2/M. In the second to last case, the use is further characterized in that the cell cycle block is at the G2 / M phase.
De manière avantageuse, l'utilisation du composé R3 selon l'invention est encore caractérisée en ce que ledit blocage du cycle cellulaire est irréversible. Advantageously, the use of the compound R3 according to the invention is further characterized in that said blocking of the cell cycle is irreversible.
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Enfin, la présente invention a en outre pour objet un médicament caractérisé en ce qu'il comprend à titre de principe actif au moins le composé R3 ( (Z) -3, 5, 4'-triméthoxystilbène). Finally, the subject of the present invention is a medicinal product characterized in that it comprises, as active ingredient, at least the compound R3 ((Z) -3,5,4'-trimethoxystilbene).
Parmi les nombreux et importants avantages du composé R3 selon l'invention on peut citer : - une synthèse chimique d'accès commode, - l'accès à de nombreux analogues (dérivés alkylés) par la même voie de synthèse, - un faible coût de fabrication (8/g), - une efficacité biologique dans le traitement des cancers et de toute pathologie liée à des états hyperprolifératifs, et - une faible toxicité vis-à-vis des cellules normales (notamment des cellules immunitaires). Among the numerous and important advantages of the compound R 3 according to the invention, mention may be made of: a chemical synthesis of convenient access, access to numerous analogs (alkylated derivatives) by the same synthetic route, a low cost of manufacturing (8 / g), - a biological efficacy in the treatment of cancers and any pathology related to hyperproliferative states, and - low toxicity towards normal cells (especially immune cells).
Grâce au composé R3 de la présente invention, il devient également possible de proposer un procédé de traitement ou de prévention d'une maladie chez un mammifère, en particulier des maladies impliquant une prolifération ou croissance cellulaire anormale telle que les maladies du type"cancers"ou de pathologies hyperprolifératives, en particulier d'états inflammatoires, ledit procédé de traitement ou de prévention comprenant l'administration audit mammifère d'une quantité efficace sur le plan thérapeutique d'au moins un composé R3 de formule générale 1 ou d'un dérivé pharmaceutiquement acceptable (sel, ester...) dudit composé R3 selon la présente invention. Thanks to the compound R3 of the present invention, it is also possible to propose a method for treating or preventing a disease in a mammal, in particular diseases involving abnormal cell proliferation or growth such as "cancer" type diseases. or hyperproliferative pathologies, particularly inflammatory conditions, said method of treatment or prevention comprising administering to said mammal a therapeutically effective amount of at least one R3 compound of general formula 1 or a derivative thereof pharmaceutically acceptable (salt, ester, etc.) of said compound R3 according to the present invention.
Bien entendu, l'invention n'est pas limitée au mode de réalisation décrit. Des modifications restent possibles, notamment du point de vue de la constitution des divers éléments ou par substitution d'équivalents techniques, sans sortir pour autant du domaine de protection de l'invention. Of course, the invention is not limited to the embodiment described. Modifications are possible, particularly from the point of view of the constitution of the various elements or by substitution of technical equivalents, without departing from the scope of protection of the invention.
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Citations (1)
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Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001021165A1 (en) * | 1999-09-21 | 2001-03-29 | Rutgers, The State University | Resveratrol analogs for prevention of disease |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| B. C. TRELA ET AL: "Resveratrol: isomeric molar absorptivities and stability", JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY, vol. 44, no. 5, 1996, pages 1253 - 1257, XP002203199 * |
| G. R. PETTIT ET AL: "Antineoplastic agents. 291. Isolation and synthesis of combretastatins A-4, A-5, and A-6", JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 38, no. 10, 1995, WASHINGTON US, pages 1666 - 1672, XP002203198 * |
| M. CUSHMAN ET AL: "Synthesis and evaluation of analogues of (Z)-1-(4-methoxyphenyl)-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)ethene as potential cytotoxic and antimitotic agents", JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 35, no. 12, 1992, WASHINGTON US, pages 2293 - 2306, XP000571677 * |
| M. YASUDA ET AL: "Regiochemistry on photoamination of stilbene derivatives with ammonia via electron transfer", JOURNAL OF ORGANIC CHEMISTRY, vol. 57, no. 5, 28 February 1992 (1992-02-28), EASTON US, pages 1351 - 1354, XP002203203 * |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| ST | Notification of lapse |
Effective date: 20060630 |