FR2786696A1 - Active agent for controlling melanin synthesis in skin cells, especially for preventing liverspots, is prepared by preparing and treating an aqueous wheatgerm solution - Google Patents
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Abstract
Description
PRINCIPE ACTIF A POTENTIEL DEPIGMENTANT, COMPOSITIONACTIVE INGREDIENT WITH DEPIGMENTING POTENTIAL, COMPOSITION
COSMETIQUE UTILISANT CE PRINCIPE ACTIF ET PROCEDE DE CONTROLE COSMETICS USING THIS ACTIVE INGREDIENT AND CONTROL METHOD
DE LA MELANOGENESEMELANOGENESIS
La présente invention concerne un principe actif permettant d'éclaircir la peau en évitant d'altérer et de détruire l'équipement mélanocytaire. L'invention couvre aussi la composition utilisant ce principe actif et le procédé de contrôle The present invention relates to an active principle which makes it possible to lighten the skin while avoiding altering and destroying the melanocytic equipment. The invention also covers the composition using this active principle and the control method
de la réaction de la mélanogénèse. of the melanogenesis reaction.
On sait que, dès l'âge de 30 à 35 ans, les personnes présentent sur la peau des taches de couleur un peu plus foncé, taches qui, au fur et à mesure du temps, foncent et gagnent en surface pour provoquer une pigmentation importante. De telles taches ont des zones de prédilection que sont le visage, le cou, les bras et plus particulièrement les mains car ce sont des zones We know that, from the age of 30 to 35, people have slightly darker spots on the skin, spots that, over time, darken and gain in surface area to cause significant pigmentation. . Such spots have predilection areas such as the face, neck, arms and more particularly the hands because they are areas
exposées en permanence aux rayons ultraviolets. permanently exposed to ultraviolet rays.
On comprend que, lorsque ces taches sont en grand nombre et de couleur foncée, elles soient disgracieuses et renforcent les signes et les It is understood that, when these spots are in large number and dark in color, they are unsightly and reinforce the signs and the
marques de l'âge.age marks.
Ce phénomène est bien connu et résulte de cellules très spécifiques présentes dans la peau, les yeux et les cheveux, les mélanocytes, qui This phenomenon is well known and results from very specific cells present in the skin, eyes and hair, the melanocytes, which
synthétisent des pigments clairs, marrons ou noirs. synthesize clear, brown or black pigments.
On sait que le nombre de ces mélanocytes diminue mais de façon non homogène. En effet, les mélanocytes qui se trouvent dans les zones du corps les plus exposées et qui sont de ce fait particulièrement stimulés, ont une tendance à se regrouper en amas et produisent une forte quantité de mélanine qui se traduit par des taches foncées. Les taches les plus foncées sont de I'eumélanine et elles correspondent à une importante protection vis à vis des rayonnements UV tandis que les taches claires sont de la phaeomélanine ou de l'oxymélanine qui présentent une faible protection vis à vis des rayonnements UV. Aussi, une solution simple pour lutter contre la formation de telles taches est de contrôler la synthèse de la mélanine afin de prévenir au mieux la formation de nouvelles taches et au moins de diminuer l'intensité de la couleur We know that the number of these melanocytes decreases but in a non-homogeneous way. In fact, the melanocytes which are found in the most exposed areas of the body and which are therefore particularly stimulated, have a tendency to cluster in clusters and produce a large amount of melanin which results in dark spots. The darkest spots are eumelanin and they correspond to an important protection against UV radiation while the light spots are phaeomelanin or oxymelanine which present a weak protection against UV radiation. Also, a simple solution to combat the formation of such spots is to control the synthesis of melanin in order to best prevent the formation of new spots and at least reduce the intensity of the color.
et les surfaces de celles déjà formées. and the surfaces of those already formed.
Pendant très longtemps, on pensait qu'une enzyme, la tyrosinase, était For a very long time, it was thought that an enzyme, tyrosinase, was
la seule à contrôler la mélanogénèse. the only one to control melanogenesis.
En fait, les composés thiols et le glutathion sont des molécules pivots capables de détourner la voie de la mélanogénèse. La glutathion réductase est une enzyme particulièrement intéressante. En effet, cette enzyme permet de stimuler la régénération du glutathion sous sa forme réduite. Elle a été reconnue comme fortement impliquée dans la génèse des messages biochimiques soufrés extra-cellulaires, déclenchés lors de la synthèse de la phaeomélanine. Simultanément au problème des taches, il se pose le problème des radicaux libres comme le radical oxygène dont on sait qu'il est très actif vis à vis des cellules. Il faut donc aussi prévoir dans le cadre de la composition non seulement l'effet dépigmentant mais la protection de la peau vis à vis des In fact, the thiol compounds and glutathione are pivotal molecules capable of diverting the path of melanogenesis. Glutathione reductase is a particularly interesting enzyme. In fact, this enzyme stimulates the regeneration of glutathione in its reduced form. It has been recognized as strongly involved in the genesis of extra-cellular sulfur biochemical messages, triggered during the synthesis of phaeomelanin. Simultaneously with the problem of spots, there is the problem of free radicals such as the oxygen radical which we know is very active with respect to cells. It is therefore also necessary to provide, in the context of the composition, not only the depigmenting effect but the protection of the skin against
radicaux libres.free radicals.
La présente invention concerne un principe actif obtenu à partir de plantes dont on sait qu'il contient de la glutathion réductase et du gluthation sous sa forme réduite qui permet de conduire à la formation de pigments clairs The present invention relates to an active ingredient obtained from plants which it is known to contain glutathione reductase and gluthation in its reduced form which makes it possible to lead to the formation of clear pigments.
et d'éviter la formation de taches brunes disgracieuses. and avoid the formation of unsightly brown spots.
L'invention couvre aussi la composition cosmétique intégrant ce principe actif qui procure les effets induits par ce principe actif, tout en assurant The invention also covers the cosmetic composition incorporating this active principle which provides the effects induced by this active principle, while ensuring
simultanément une protection vis à vis des radicaux libres. simultaneously protection against free radicals.
L'invention propose aussi un procédé de traitement à l'aide de cette composition. A cet effet, selon l'invention, le procédé d'extraction d'un principe actif en vue d'un contrôle de la réaction de mélanogénèse des cellules de la peau, notamment pour lutter contre l'apparition des taches, se caractérise en ce qu'il comprend les étapes suivantes: - solubilisation aqueuse de germe de blé avec une solubilisation supérieure à 50 g/l, première filtration pour le retrait des particules végétales et pour clarifier la solution, - éventuelle deuxième filtration pour éliminer les molécules, - éventuellement concentration et/ou déshydratation, avec ajustement du pH pour des applications cosmétiques et/ou The invention also provides a method of treatment using this composition. To this end, according to the invention, the process for extracting an active principle with a view to controlling the melanogenesis reaction of the skin cells, in particular for combating the appearance of spots, is characterized in that that it comprises the following stages: - aqueous solubilization of wheat germ with a solubilization greater than 50 g / l, first filtration for the removal of plant particles and to clarify the solution, - possible second filtration to remove the molecules, - possibly concentration and / or dehydration, with pH adjustment for cosmetic applications and / or
- filtration stérilisante sur membrane afin de limiter la présence de micro- - sterilizing filtration on a membrane to limit the presence of micro-
organismes, de flore mésophile totale, de levures, et de moisissures. organisms, total mesophilic flora, yeasts, and molds.
Ce principe actif obtenu a la composition suivante: - taux de matières sèches supérieur à 50 g/I et plus particulièrement This active ingredient obtained has the following composition: - dry matter content greater than 50 g / I and more particularly
compris entre 90 et 150 g/I.between 90 and 150 g / I.
- pH compris entre 3,0 et 10,0, plus particulièrement entre 6,0 et 7,0, concentration en Glutathion supérieure à 1 50 pg/ml, - pH between 3.0 and 10.0, more particularly between 6.0 and 7.0, Glutathione concentration greater than 1 50 pg / ml,
- concentration en Glutathion réductase supérieure à 1 50 mU/ml. - Glutathione reductase concentration greater than 1 50 mU / ml.
L'invention couvre aussi la composition cosmétique pour contrôler la réaction de mélanogénèse des cellules de la peau, notamment pour lutter contre l'apparition des taches ainsi que le procédé de contrôle de la réaction de mélanogénèse des cellules de la peau, notamment pour lutter contre The invention also covers the cosmetic composition for controlling the melanogenesis reaction of skin cells, in particular for combating the appearance of spots, as well as the method for controlling the melanogenesis reaction of skin cells, in particular for combating
l'apparition des taches.the appearance of spots.
L'invention est décrite ci-après en détail suivant un mode de réalisation préféré, non limitatif, en accord avec la figure unique qui représente la courbe The invention is described below in detail according to a preferred embodiment, without limitation, in accordance with the single figure which represents the curve.
d'étalonnage de la différence d'absorbance en fonction de la concentration. calibration of the difference in absorbance as a function of the concentration.
Le principe actif selon l'invention est obtenu à partir de germes de blé. The active principle according to the invention is obtained from wheat germs.
Les germes de blé sont solubilisés à raison d'au moins 50 g/I et de préférence 150 g/l, puis cette solution est filtrée pour retirer les impuretés et The wheat germs are dissolved at a rate of at least 50 g / l and preferably 150 g / l, then this solution is filtered to remove the impurities and
concentrée. Ces étapes sont ensuite suivies d'une filtration stérilisante. concentrated. These steps are then followed by sterilizing filtration.
Les caractéristiques de ce principe actif sont indiquées ci-après. The characteristics of this active principle are indicated below.
Le liquide est chauffé à 105 C jusqu'à obtention d'un poids constant et le taux de matière sèche est supérieur à 50 g/I et plus particulièrement compris The liquid is heated to 105 ° C. until a constant weight is obtained and the dry matter content is greater than 50 g / l and more particularly understood.
entre 90 et 150 g/I.between 90 and 150 g / I.
Le pH mesuré à température ambiante par la méthode potentiométrique est compris entre 3.0 et 10.0, plus particulièrement compris entre 6.0 et 7.0. Un des paramètres importants est la teneur en glutathion qui est The pH measured at room temperature by the potentiometric method is between 3.0 and 10.0, more particularly between 6.0 and 7.0. One of the important parameters is the glutathione content which is
supérieure à 150 pg/ml.greater than 150 pg / ml.
Pour déterminer ce taux, une solution d'acide perchlorique à 10% est mélangée au principe actif obtenu après extraction dans un rapport 40/60 To determine this rate, a 10% perchloric acid solution is mixed with the active ingredient obtained after extraction in a 40/60 ratio
solution acide/principe actif.acid solution / active ingredient.
Ce mélange est agité puis centrifugé à 5 000 tours/min pendant 20 minutes. Le surnageant est ajusté à pH neutre par une solution acqueuse de phosphate tripotassium et dilué à 1 pour 2 ce qui donne un facteur de dilution This mixture is stirred and then centrifuged at 5,000 rpm for 20 minutes. The supernatant is adjusted to neutral pH with an aqueous tripotassium phosphate solution and diluted to 1 to 2, which gives a dilution factor.
de 4.of 4.
Une réaction enzymatique permet de réduire le glutathion oxydé présent dans le surnageant, en glutathion par le phosphate dinucléotide d'adénine An enzymatic reaction makes it possible to reduce the oxidized glutathione present in the supernatant, in glutathione by the phosphate dinucleotide of adenine
nicotinamide en présence de glutathion réductase. nicotinamide in the presence of glutathione reductase.
Ainsi, pour chacun des surnageants, une mesure initiale d'absorbance est effectuée à 340 nm avant l'ajout et après l'ajout de glutathion réductase, Thus, for each of the supernatants, an initial absorbance measurement is carried out at 340 nm before the addition and after the addition of glutathione reductase,
on effectue des mesures toutes les deux minutes pendant 8 minutes. measurements are made every two minutes for 8 minutes.
Des échantillons témoins permettent de vérifier la justesse des mesures. Control samples make it possible to verify the accuracy of the measurements.
La formule de calcul est la suivante AODxVxM C- xd VXE C.: concentration en glutathion, en mg/ml A OD = ODt8 -ODto, avec OD t8 = absorbance à 340 nm après 8 min de réaction OD to = absorbance à 340 nm avant addition de glutathion réductase The calculation formula is as follows AODxVxM C- xd VXE C .: glutathione concentration, in mg / ml A OD = ODt8 -ODto, with OD t8 = absorbance at 340 nm after 8 min reaction OD to = absorbance at 340 nm before addition of glutathione reductase
V volume total de solution dans la cuve. V total volume of solution in the tank.
y: volume d'échantillon.y: sample volume.
_: coefficient d'extinction molaire du phosphate dinucléotide adenine _: molar extinction coefficient of the adenine dinucleotide phosphate
nicotinamide, égal dans ce cas à 6,22. nicotinamide, in this case equal to 6.22.
M poids moléculaire du glutathion oxydé, M = 612 g d facteur de dilution dans la première réaction d'oxydation, en M molecular weight of oxidized glutathione, M = 612 g d dilution factor in the first oxidation reaction, in
l'occurrence d = 4.the occurrence d = 4.
On peut aussi mesurer un autre paramètre important qui est l'activité de We can also measure another important parameter which is the activity of
la glutathion réductase.glutathione reductase.
A cette fin, il convient d'établir une courbe d'étalonnage de cette enzyme, telle que représentée sur la figure unique qui montre la variation To this end, a calibration curve for this enzyme should be established, as shown in the single figure which shows the variation
d'absorbance en fonction de la concentration. absorbance as a function of concentration.
On fait varier la concentration de 0.01 U/ml à 0.1 U/ml pour obtenir la The concentration is varied from 0.01 U / ml to 0.1 U / ml to obtain the
courbe recherchée, figure unique.sought curve, unique figure.
On dilue le principe actif dans un tampon Dulbecco, exempt d'ions Calcium et Magnésium, au pH 7.4, contenant 2 mM d'éthyl diamine The active principle is diluted in a Dulbecco buffer, free of Calcium and Magnesium ions, at pH 7.4, containing 2 mM ethyl diamine
triacétique, cet échantillon étant maintenu à 37 C. triacetic, this sample being maintained at 37 C.
On ajoute à cette solution du glutathion oxydé (12 g/Il) et du phosphate Oxidized glutathione (12 g / l) and phosphate are added to this solution.
dinucléotide adenine nicotinamide (1,6 g/l) en solution acide 20 mM. adenine nicotinamide dinucleotide (1.6 g / l) in 20 mM acid solution.
Pour vérifier les effets obtenus par le principe actif, il a été réalisé des tests in vivo sur l'homme afin de déterminer avec précision les variations de To verify the effects obtained by the active ingredient, in vivo tests have been carried out on humans in order to determine with precision the variations in
couleur et de taille des taches de sénescence. color and size of age spots.
L'étude est menée sur le décolleté de 20 sujets répartis en deux groupes de 1 0 individus, pendant 56 jours: - groupe 1: application quotidienne d'une crème blanche contenant 5 % de principe actif selon l'invention, groupe 2: application d'une référence positive dépigmentante d'acide The study is conducted on the neckline of 20 subjects divided into two groups of 10 individuals, for 56 days: - group 1: daily application of a white cream containing 5% of active ingredient according to the invention, group 2: application a positive acid depigmenting reference
kojique formulée à 1 % dans la même crème blanche. Kojique formulated at 1% in the same white cream.
Mesure de surface: Elle est effectuée au moyen d'un videomicroscope relié à une caméra et à un logiciel de traitement susceptible de déterminer la surface de la zone colorée. L'étude porte sur cinq taches par sujet dont on détermine la surface en M2. mm2, Les résultats sont les suivants en pourcentage de variation de surface entre le 1er et le 56ème jour: on obtient -31 % avec le premier groupe et -28 % avec le second groupe Mesure colorimétrique Elle est effectuée à l'aide d'un mexamètre qui émet suivant plusieurs Surface measurement: It is carried out by means of a videomicroscope connected to a camera and to processing software capable of determining the surface of the colored area. The study covers five spots per subject, the area of which is determined in M2. mm2, The results are as follows as a percentage of surface variation between the 1st and the 56th day: we obtain -31% with the first group and -28% with the second group Colorimetric measurement It is carried out using a mexameter which emits following several
longueurs d'ondes et mesure l'index de coloration. wavelengths and measures the color index.
La longueur d'ondes de la mélanine est 568 nm, si bien que le mexamètre réglé sur cette longueur d'ondes permet de mesurer l'index mélanique. Trois mesures par tâche sont effectuées et la moyenne et le pourcentage de variation sont déterminés entre le 1er et le 56ème jour, on obtient des pourcentages de variation de, 25% pour le premier groupe et de, The melanin wavelength is 568 nm, so that the mexameter set to this wavelength allows the melanic index to be measured. Three measurements per task are carried out and the average and the percentage of variation are determined between the 1st and the 56th day, we obtain percentages of variation of, 25% for the first group and of,
41% pour le second groupe.41% for the second group.
Le principe actif selon l'invention réduit donc la couleur brune de la peau et diminue la surface des taches hyperpigmentées, ce qui contribue ainsi à The active principle according to the invention therefore reduces the brown color of the skin and reduces the surface of hyperpigmented spots, which thus contributes to
l'éclaircissement de la peau.the lightening of the skin.
La présente invention a aussi pour objet un procédé de contrôle de la réaction de mélanogénèse des cellules de la peau, notamment pour lutter contre l'apparition des taches, caractérisé en ce que l'on dispose préventivement sur la peau une composition cosmétique à raison d'au moins The present invention also relates to a process for controlling the melanogenesis reaction of skin cells, in particular for combating the appearance of spots, characterized in that a cosmetic composition is provided preventively on the skin. 'at least
-4 % de principe actif.-4% of active ingredient.
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