FR2724812A1 - Container for in-vitro cultivation of plants - Google Patents

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Abstract

The container comprises a lower plastics container (2) of relatively small height forming a volume defined by the flat horizontal bottom (5) and by its side wall (6). The side wall has a continuous upper edge (7). A closing plastics cover (3) has a bottom (8) and a side wall (9) ended by a lower edge (10) which fits on the upper edge of the container to establish a sealed connection. The cover has a height greater than that of the container. The cover is provided with a membrane (11) which is permeable to gas. The membrane is sealed in the bottom of the cover during manufacture.

Description

CONTENEUR POUR CULTURES DE PLANTES IN VITRO.CONTAINER FOR IN VITRO PLANT CROPS.

La présente invention est relative à un conteneur, de préférence à usage unique, plus particulièrement prévu pour la réalisation de cultures in vitro et notamment de cultures de plantes, à partir de l'ensemencement d'un substrat nutritif, disposé dans le fond de ce conteneur. The present invention relates to a container, preferably for single use, more particularly intended for carrying out in vitro cultures and in particular plant cultures, from the seeding of a nutritive substrate, disposed at the bottom of this container. container.

On sait que la culture in vitro d'éléments divers tels que cellules, tissus, fragments d'organes ou plants d'espèces végétales, à l'abri de produits contaminants extérieurs, exige des conditions de mise en oeuvre et en particulier un confinement matériel isolant la culture de l'atmosphère extérieure. It is known that the in vitro culture of various elements such as cells, tissues, fragments of organs or plants of plant species, away from external contaminating products, requires implementation conditions and in particular material confinement. isolating the culture from the outside atmosphere.

Toutefois, dans le cas particulier de plantes végétales, le conteneur à l'intérieur duquel s'effectue cette culture ne doit pas empêcher l'action de photosynthèse de la lumière et surtout doit autoriser un échange gazeux avec l'extérieur, à la fois pour maintenir un degré d'humidité approprié à l'intérieur du conteneur dans lequel se développe la plante et pour permettre aux différents gaz produits par le métabolisme de celleci de s'évacuer, tandis que l'oxygène de l'air doit au contraire pouvoir y pénétrer, en autorisant une véritable respiration de la plante à travers les parois du conteneur. However, in the particular case of plant plants, the container inside which this culture is carried out must not prevent the photosynthetic action of light and above all must allow a gas exchange with the outside, both for maintain an appropriate humidity level inside the container in which the plant grows and to allow the various gases produced by its metabolism to escape, while the oxygen in the air must instead be able to penetrate, allowing a true respiration of the plant through the walls of the container.

On a déjà réalisé des conteneurs visant plus spécialement à satisfaire ces objectifs, en facilitant leur utilisation pratique et en assurant une meilleure régulation des échanges gazeux et également du degré d'humidité dans l'environnement de la plante contenue dans un tel conteneur. Containers have already been produced which aim more specifically to satisfy these objectives, by facilitating their practical use and by ensuring better regulation of gas exchanges and also of the degree of humidity in the environment of the plant contained in such a container.

Ainsi, on connaît dans la technique des récipients ou conteneurs en matière plastique transparente, qui sont soit à usage unique ce qui évite les lavages et décontaminations indispensables entre plusieurs utilisations successives mais entraîne des coûts non négligeables, soit réutilisables, ces conteneurs comportant en règle générale des moyens propres à favoriser les transferts gazeux à partir de et vers l'intérieur du conteneur, consistant à jouer sur l'étanchéité relative d'un couvercle de fermeture et d'un fond creux sur lequel s'applique ce couvercle, ou encore en disposant dans ce couvercle au moins un évent ou une membrane perméable appropriée. Thus, it is known in the art of containers or containers made of transparent plastic, which are either disposable which avoids washing and decontamination essential between several successive uses but involves significant costs, or reusable, these containers generally comprising means suitable for promoting gas transfers from and towards the interior of the container, consisting in acting on the relative tightness of a closure cover and of a hollow bottom to which this cover is applied, or even in having in this cover at least one vent or a suitable permeable membrane.

Un perfectionnement apporté à la structure générale d'un conteneur de ce genre consiste, comme décrit dans la demande PCT WO/87 05885, à constituer le couvercle du conteneur au moyen de deux membranes accolées de perméabilités différentes aux gaz, dont l'une est pelable, c'est-à-dire détachable de la première, en vue d'ajuster l'importance des échanges gazeux nécessaires selon que le conteneur comporte dans son couvercle les deux membranes ou l'une seulement de cellesci.  An improvement made to the general structure of a container of this kind consists, as described in PCT application WO / 87 05885, in constituting the cover of the container by means of two attached membranes of different gas permeabilities, one of which is peelable, that is to say detachable from the first, in order to adjust the amount of gas exchange required depending on whether the container has in its cover the two membranes or only one of these.

Mais ces conteneurs tels que décrits dans ce document, présentent des inconvénients. Tout particulièrement, la mise en place des membraaes sur la partie supérieure du fond, pour constituer le couvercle de celuici, nécessite que les bords de ces membranes soient scellés latéralement à chaud, après rabattement contre la surface externe du conteneur, cette opération étant réalisée lorsque le substrat de culture ensemencé est déjà en place dans le récipient, ce qui peut gravement nuire au développement ultérieur du milieu du fait de cette opération de scellement réalisée à température relativement élevée, laquelle peut en outre conduire à enfermer des gaz nocifs dans le conteneur sous la membrane. However, these containers as described in this document have drawbacks. In particular, the installation of the membranes on the upper part of the bottom, to constitute the cover thereof, requires that the edges of these membranes be heat sealed laterally, after folding against the external surface of the container, this operation being carried out when the seeded culture substrate is already in place in the container, which can seriously harm the further development of the medium due to this sealing operation carried out at relatively high temperature, which can also lead to enclosing harmful gases in the container under the membrane.

Par ailleurs, une fois la membrane scellée, l'accès à la culture n'est plus possible, sauf à détruire cette membrane. En outre, aucun des systèmes de ventilation connus ne couvre l'ensemble de la surface du couvercle, ni n'offre une possibilité d'utiliser une gamme différente de membranes avec des couvercles interchangeables, selon le type de la plante et la phase de la culture (multiplication, allongement, enracinement....). Furthermore, once the membrane is sealed, access to the culture is no longer possible, except to destroy this membrane. Furthermore, none of the known ventilation systems covers the entire surface of the cover, nor does it offer the possibility of using a different range of membranes with interchangeable covers, depending on the type of plant and the phase of the culture (multiplication, lengthening, rooting, etc.).

La présente invention est relative à un conteneur pour culture de plantes in vitro qui évite ces inconvénients, grâce à diverses adaptations et perfectionnements permettant notamment de mieux contrôler le développement de la culture pendant toutes les phases successives de cette dernière, en particulier en pouvant modifier à volonté les performances des membranes d'échange gazeux de manière à réguler ces échanges en fonction des besoins de la plante au cours de sa croissance, et enfin d'accéder facilement au milieu de culture à la demande sans léser l'intégrité de la membrane elle-même. The present invention relates to a container for growing plants in vitro which avoids these drawbacks, thanks to various adaptations and improvements making it possible in particular to better control the development of the culture during all the successive phases of the latter, in particular by being able to modify will the performance of the gas exchange membranes so as to regulate these exchanges according to the needs of the plant during its growth, and finally to easily access the culture medium on demand without damaging the integrity of the membrane it -even.

A cet effet, le conteneur considéré, comportant un récipient inférieur de relativement faible hauteur, délimitant un volume de réception d'un milieu de culture donné, ce volume étant défini par le fond disposé horizontalement de ce récipient et par sa paroi latérale qui s'étend à partir de ce fond et présente un bord périphérique continu prévu à son extrémité supérieure, et un couvercle de fermeture, constitué également d'un fond parallèle à celui du récipient et d'une paroi latérale terminée à son extrémité opposée à ce fond par un bord périphérique inférieur apte à s'adapter sur le bord supérieur du récipient pour fermer totalement le conteneur, ce couvercle étant muni d'une membrane perméable aux gaz, se caractérise en ce que la membrane est scellée dans le fond du couvercle lors de sa fabrication et en ce que ce couvercle présente une dimension en hauteur notablement plus importante que celle du récipient, les bords du couvercle et du récipient comportant des moyens réalisant leur emboîtement mutuel de manière à établir entre eux une liaison relativement étanche. To this end, the container considered, comprising a lower container of relatively small height, delimiting a volume for receiving a given culture medium, this volume being defined by the bottom disposed horizontally of this container and by its side wall which s extends from this bottom and has a continuous peripheral edge provided at its upper end, and a closure cover, also consisting of a bottom parallel to that of the container and of a side wall terminated at its end opposite this bottom by a lower peripheral edge adapted to fit on the upper edge of the container to completely close the container, this cover being provided with a gas-permeable membrane, is characterized in that the membrane is sealed in the bottom of the cover when it is manufacturing and in that this lid has a dimension significantly greater in height than that of the container, the edges of the lid and of the r container comprising means making them fit together so as to establish a relatively sealed connection between them.

De préférence, le couvercle et le récipient sont réalisés dans une même matière plastique, à des fins notamment de recyclage, cette matière plastique étant transparente et relativement rigide, de manière à permettre leur emboîtement précis par leurs bords respectivement inférieur et supérieur en tolérant le cas échéant, certaines déformations locales de l'un ou de l'autre. Preferably, the lid and the container are made of the same plastic material, in particular for recycling purposes, this plastic material being transparent and relatively rigid, so as to allow their precise nesting by their lower and upper edges respectively, tolerating the case. if necessary, certain local deformations of one or the other.

Notamment, le couvercle et le récipient sont réalisés en polyéthylène, polypropylène, chlorure de polyvinyle ou autre matériau analogue, transparent à la lumière et susceptible de subir sans dommage une stérilisation éventuelle en autoclave ou par effet d'un rayonnement gamma ou ultraviolet. In particular, the cover and the container are made of polyethylene, polypropylene, polyvinyl chloride or other similar material, transparent to light and capable of undergoing without damage possible sterilization in an autoclave or by the effect of gamma or ultraviolet radiation.

Selon une caractéristique particulière du conteneur considéré, la membrane autorisant les échanges gazeux entre l'intérieur et l'extérieur du conteneur, prévue dans le fond du couvercle, en elle-même bien connue dans la technique, est avantageusement réalisée en une matière plastique du genre film de polyester, acétate de cellulose ou autre, permettant dans des conditions prédéterminées selon la composition et l'épaisseur de cette membrane, d'autoriser sa traversée par des fluides gazeux tels que la vapeur d'eau,
I'oxygène, I'anhydride carbonique, I'éthylène, I'éthane etc...
According to a particular characteristic of the container considered, the membrane allowing gas exchanges between the interior and the exterior of the container, provided in the bottom of the cover, in itself well known in the art, is advantageously made of a plastic material of the such as polyester film, cellulose acetate or the like, allowing under predetermined conditions according to the composition and thickness of this membrane, to allow its passage through gaseous fluids such as water vapor,
Oxygen, carbon dioxide, ethylene, ethane etc ...

De préférence et grâce à la faculté offerte par le conteneur selon l'invention, d'associer à un récipient donné différents couvercles comportant chacun un bord inférieur identique, apte à s'emboîter avec le bord supérieur du récipient, on peut aisément prévoir de différencier ces couvercles de l'un à l'autre, par une couleur, un repère écrit ou dessiné, ou tout autre signe, chaque couvercle comportant une membrane perméable de caractéristiques différentes d'un couvercle à l'autre. Ceci permet notamment d'ajuster les échanges gazeux à travers ces membranes au fur et à mesure du développement de la culture réalisée dans un récipient, à travers les phases successives mises en oeuvre et notamment d'ensemencement, de micro-propagation, de multiplication, puis de développement, de pré-acclimatation, d'enracinement et enfin de croissance de la plante. Preferably and thanks to the option offered by the container according to the invention, to associate with a given container different lids each having an identical lower edge, capable of fitting together with the upper edge of the container, it is easy to make provision for differentiating these covers from one to the other, by a color, a written or drawn mark, or any other sign, each cover comprising a permeable membrane with different characteristics from one cover to another. This makes it possible in particular to adjust the gas exchanges through these membranes as and when the culture carried out in a container develops, through the successive phases implemented and in particular of seeding, micro-propagation, multiplication, then development, pre-acclimatization, rooting and finally plant growth.

Selon une autre caractéristique, le couvercle se présente sous la forme d'une toque, de hauteur pouvant varier d'un couvercle à l'autre, pour accommoder le développement et la croissance de la plante. According to another characteristic, the cover is in the form of a toque, of height which can vary from one cover to another, to accommodate the development and growth of the plant.

Selon diverses variantes non limitatives, le couvercle et le récipient présentent une section droite par un plan horizontal ronde, carrée, rectangulaire ou autre, cette section étant en elle-même indifférente à la mise en oeuvre des caractéristiques de l'invention. De préférence cependant, la section du conteneur présente un profil carré, à coins arrondis. According to various nonlimiting variants, the lid and the container have a cross section through a horizontal round, square, rectangular or other plane, this section being in itself indifferent to the implementation of the characteristics of the invention. Preferably, however, the section of the container has a square profile, with rounded corners.

Avantageusement également, les parois latérales du récipient et du couvercle comportent un profil légèrement évasé, à section par un plan passant par l'axe du conteneur de forme générale trapézoïdale, avec une pente inversée pour le récipient et le couvercle, de manière à permettre de les gerber séparément avec d'autres récipients ou couvercles analogues, en vue de leur transport ou de leur stockage. Advantageously also, the side walls of the container and of the cover have a slightly flared profile, in section through a plane passing through the axis of the container of generally trapezoidal shape, with an inverted slope for the container and the cover, so as to allow stack them separately with other receptacles or similar lids, for transport or storage.

Selon encore une autre caractéristique du conteneur considéré et dans un mode de réalisation préféré de celuiì, le bord supérieur du récipient et le bord inférieur du couvercle comportent, l'un une section droite en U inversé, formée par deux éléments de paroi parallèles réunis par un fond délimitant une rainure ouverte dans laquelle s'engage l'autre bord, lequel comporte un élément de paroi unique, prolongé par un retour plat de dimension latérale sensiblement égale à la largeur de la rainure et adapté à venir s'appliquer contre le fond de celleci, lorsque le couvercle ferme le récipient. According to yet another characteristic of the container in question and in a preferred embodiment of this, the upper edge of the container and the lower edge of the lid have, one a cross section in inverted U, formed by two parallel wall elements joined by a bottom defining an open groove in which the other edge engages, which comprises a single wall element, extended by a flat return of lateral dimension substantially equal to the width of the groove and adapted to come to be applied against the bottom when the lid closes the container.

Selon une caractéristique complémentaire du même mode de réalisation préféré, un des éléments de paroi d'un des deux bords comporte une nervure en saillie vers l'intérieur de la rainure, formant butée d'arrêt pour le retour plat de l'autre bord, en bloquant celui contre le fond de cette rainure, après emboîtement du couvercle sur le récipient. According to an additional characteristic of the same preferred embodiment, one of the wall elements of one of the two edges has a rib projecting towards the inside of the groove, forming a stop for the flat return of the other edge, by blocking the one against the bottom of this groove, after fitting the cover on the container.

Enfin et dans le même mode de réalisation, le fond du couvercle comporte avantageusement un croisillon de support de la membrane perméable, pour améliorer sa rigidification selon l'étendue de sa surface. Finally and in the same embodiment, the bottom of the cover advantageously comprises a support crosspiece of the permeable membrane, to improve its stiffening according to the extent of its surface.

D'autres caractéristiques d'un conteneur pour culture de plantes in vitro, établi conformément à l'invention, apparaîtront encore à travers la description qui suit d'un exemple de réalisation, donné à titre indicatif et non limitatif, en référence aux dessins annexés sur lesquels:
- la Figure 1 est une vue en perspective du conteneur considéré, le récipient et le couvercle étant représentés en position séparée l'un de l'autre, avant emboîtement mutuel de leurs bords d'extrémité respectifs.
Other characteristics of a container for culture of plants in vitro, established in accordance with the invention, will become more apparent from the following description of an exemplary embodiment, given by way of non-limiting example, with reference to the appended drawings on which ones:
- Figure 1 is a perspective view of the container considered, the container and the cover being shown in a position separated from each other, before mutual interlocking of their respective end edges.

- La Figure 2 est une vue en élévation et en coupe du conteneur, avec le récipient et le couvercle emboîtés l'un sur l'autre. - Figure 2 is an elevational and sectional view of the container, with the container and the cover fitted one on the other.

- La Figure 3 est une vue de dessus du couvercle du conteneur selon la
Figure 2.
- Figure 3 is a top view of the container lid according to the
Figure 2.

- La Figure 4 est une vue de détail en coupe transversale à plus grande échelle des moyens qui assurent l'emboîtement des bords du récipient et du couvercle en réalisant leur immobilisation et l'étanchéité relative de leur assemblage. - Figure 4 is a detail view in cross section on a larger scale of the means which ensure the interlocking of the edges of the container and the cover by achieving their immobilization and the relative tightness of their assembly.

Sur la Figure 1, la référence 1 désigne dans son ensemble le conteneur considéré, lequel comporte essentiellement un récipient inférieur 2 et un couvercle supérieur 3, illustrés séparés l'un de l'autre avant leur emboîtement mutuel, pour délimiter à l'intérieur du conteneur un volume fermé approprié. In FIG. 1, the reference 1 designates as a whole the container considered, which essentially comprises a lower container 2 and an upper cover 3, illustrated separated from one another before their mutual nesting, to delimit inside the container an appropriate closed volume.

Dans cet exemple, le conteneur présente une fois le récipient et le couvercle assemblés une hauteur d'environ 120 mm, une largeur naaaraale au droit de la jonction entre le récipient et le couvercle d'environ 90 mm, le récipient 2 ayant une profondeur de l'ordre de 40 mm. Bien entendu, ces dimensions ne sont données qu'à titre indicatif, toute autre hauteur ou largeur pouvant être envisagées. In this example, the container has, once the container and the lid assembled, a height of approximately 120 mm, a naaaraale width at the junction between the container and the lid of approximately 90 mm, the container 2 having a depth of around 40 mm. Of course, these dimensions are given for information only, any other height or width that can be considered.

Comme représenté, le récipient 2 comme le couvercle 3 comportent un profil de forme sensiblement carrée en section droite, avec des coins arrondis 4. As shown, the container 2 like the cover 3 has a profile of substantially square shape in cross section, with rounded corners 4.

Le récipient 2 présente un fond plat 5, normalement horizontal, en particulier lorsque le conteneur repose sur un support quelconque (non représenté) et une paroi latérale 6, qui s'étend vers le haut à partir de ce fond, cette paroi présentant de préférence vue dans un plan de coupe passant par l'axe du conteneur, un profil légèrement évasé depuis le fond vers le bord périphérique supérieur 7 du récipient, avec une section dans ce plan en forme générale de trapèze, cette disposition permettant de gerber ou enfiler mutuellement l'un dans l'autre une pluralité de tels récipients pour leur transport ou leur stockage, en limitant leur encombrement.The container 2 has a flat bottom 5, normally horizontal, in particular when the container rests on any support (not shown) and a side wall 6, which extends upwards from this bottom, this wall preferably having seen in a cutting plane passing through the axis of the container, a profile slightly flared from the bottom towards the upper peripheral edge 7 of the container, with a section in this plane generally in the shape of a trapezoid, this arrangement making it possible to stack or thread each other one in the other a plurality of such containers for their transport or storage, limiting their size.

Le couvercle 3 présente la même géométrie d'ensemble que le récipient 2 avec un fond horizontal 8, opposé au fond 5 de ce récipient, une paroi latérale 9 s'évasant légèrement à partir du fond 8 et un bord périphérique 10 à son extrémité inférieure, ce couvercle présentant le même profil que le récipient 2, mais inversé par rapport à celuici, les bords respectivement 7 et 10 du récipient et du couvercle étant conçus de manière à permettre leur emboîtement mutuel comme décrit ci-après, en réalisant une étanchéité relative du conteneur 1 au droit de cet emboîtement. The cover 3 has the same overall geometry as the container 2 with a horizontal bottom 8, opposite the bottom 5 of this container, a side wall 9 widening slightly from the bottom 8 and a peripheral edge 10 at its lower end. , this cover having the same profile as the container 2, but inverted with respect to this, the edges 7 and 10 respectively of the container and the cover being designed so as to allow their mutual interlocking as described below, by providing a relative seal from container 1 to the right of this interlocking.

Dans ces conditions, le couvercle 3 peut, comme le récipient 2, être gerbé avec d'autres couvercles similaires lors de leur stockage ou de leur transport. Under these conditions, the cover 3 can, like the container 2, be stacked with other similar covers during their storage or transport.

Par ailleurs, la forme de la section carrée à coins arrondis du récipient comme du couvercle, ainsi que les dimensions préférées du conteneur, procurent une ergonomie de celuici bien adaptée à la main de l'utilisateur, en particulier à une main féminine donc au personnel majoritairement utilisé dans les laboratoires où sont réalisées de telles cultures in vitro, en vue de permettre une précession commode aussi bien du couvercle que du récipient.Furthermore, the shape of the square section with rounded corners of the container as of the lid, as well as the preferred dimensions of the container, provide an ergonomics of this well adapted to the hand of the user, in particular to a female hand therefore to the staff. mainly used in laboratories where such in vitro cultures are carried out, in order to allow convenient precession of both the lid and the container.

Comme le montre clairement les Figures 1 et 2, la hauteur du récipient 2 est de préférence notablement inférieure à celle du couvercle 3 qui forme, audessus du récipient, une toque de fermeture. Bien entendu et conformément à l'invention, les hauteurs relatives du récipient 2 et du couvercle 3 n'importent pas directement en elles-mêmes et notamment sont sans incidence à l'égard des caractéristiques de l'invention proprement dite, un même récipient 2 pouvant être associé à divers couvercles 3 de hauteurs différentes, voire dont la structure, en particulier dans leur fond 8 opposé au récipient n'est pas identique d'un couvercle à l'autre pour les raisons précisées ci-après. As clearly shown in Figures 1 and 2, the height of the container 2 is preferably significantly less than that of the cover 3 which forms, above the container, a closing cap. Of course and in accordance with the invention, the relative heights of the container 2 and of the cover 3 do not matter directly in themselves and in particular are of no consequence with regard to the characteristics of the invention itself, the same container 2 can be associated with various covers 3 of different heights, or even whose structure, in particular in their bottom 8 opposite the container is not identical from one cover to another for the reasons specified below.

Le récipient 2, recouvert de son couvercle 3, est plus particulièrement adapté, selon l'invention, à la culture de plantes in vitro. The container 2, covered with its cover 3, is more particularly suitable, according to the invention, for the cultivation of plants in vitro.

A cet effet, les deux parties du conteneur sont réalisées en un matériau transparent à la lumière pour ne pas entraver le phénomène de photosynthèse nécessaire au développement de ces plantes. De préférence, ce matériau est constitué par du polyéthylène, du polypropylène, du chlorure de polyvinyle ou tout autre matériau plastique équivalent, présentant une rigidité suffisante, avec néanmoins une faculté d'adaptation convenable pour permettre l'emboîtement des bords du récipient et du couvercle en accommodant les éventuelles déformations locales qu'ils peuvent présenter au droit de ces bords. To this end, the two parts of the container are made of a material transparent to light so as not to hinder the photosynthesis phenomenon necessary for the development of these plants. Preferably, this material consists of polyethylene, polypropylene, polyvinyl chloride or any other equivalent plastic material, having sufficient rigidity, with nevertheless a suitable adaptability to allow the nesting of the edges of the container and of the lid. by accommodating any local deformations that they may present at the right of these edges.

Le récipient 2 et le couvercle 3 peuvent être réalisés par moulage ou par soufflageextrusion, ou encore selon tout autre procédé en lui-même bien connu dans la technique. The container 2 and the cover 3 can be produced by molding or by extrusion blow molding, or alternatively by any other process in itself well known in the art.

Dans le volume interne au conteneur 1, en particulier dans la partie de celuici délimitée à l'intérieur du récipient 2, entre son fond 5 et sa paroi latérale 6, peut ainsi être placé un milieu de culture approprié, qui, après ensemencement, va permettre le développement de la culture à réaliser, selon les diverses phases depuis l'ensemencement et la multiplication des germes, jusqu'à l'enracinement des explantats, ceuxci pouvant ensuite librement croître à l'intérieur du conteneur en s'élevant à l'intérieur du couvercle 3, dont la hauteur est déterminée préalablement ou peut être ajustée à la demande par substitution d'un couvercle à un autre au fur et à mesure de la croissance de la plante. In the volume internal to the container 1, in particular in the part of this delimited inside the container 2, between its bottom 5 and its side wall 6, can thus be placed an appropriate culture medium, which, after sowing, will allow the development of the culture to be carried out, according to the various phases from the sowing and multiplication of the germs, until the rooting of the explantates, which can then freely grow inside the container while rising to the inside of the cover 3, the height of which is determined beforehand or can be adjusted on demand by replacing one cover with another as the plant grows.

Par ailleurs et pour autoriser ce développement de la culture, le volume interne du conteneur doit être mis en situation d'échange gazeux avec l'atmosphère externe dans des conditions précisément déterminées, qui peuvent d' ailleurs varier au cours des diverses phases de croissance de la plante, notamment pour permettre d'amener à l'intérieur du conteneur l'oxygène de l'air ou tout autre gaz nécessaires à cette croissance, et en même temps autoriser, soit le maintien, soit l'élimination hors du conteneur des gaz produits par le métabolisme de la plante, notamment l'anhydride carbonique, éventuellement l'éthylène et l'éthane, dégagés par la culture en développement, tout en assurant en permanence une protection satisfaisante de celle vis-à-vis des éléments contaminants présents dans l'atmosphère extérieure. Furthermore, to allow this development of culture, the internal volume of the container must be placed in a gas exchange situation with the external atmosphere under precisely determined conditions, which can moreover vary during the various phases of growth of the plant, in particular to allow to bring inside the container the oxygen of the air or any other gas necessary for this growth, and at the same time authorize, either the maintenance, or the elimination outside the container of the gases produced by the metabolism of the plant, in particular carbon dioxide, possibly ethylene and ethane, released by the developing crop, while permanently ensuring satisfactory protection of that vis-à-vis the contaminating elements present in the outside atmosphere.

A cet effet, le fond 8 du couvercle 3 est avantageusement muni d'une membrane perméable 1 1 (voir Figure 3), d'un type en lui-même connu dans la technique, réalisée avec un film de polyester, d'acétate de cellulose ou de tout autre matériau analogue, d'épaisseur convenable, les caractéristiques propres de cette membrane pouvant bien entendu varier selon la nature et l'importance de l'échange gazeux à réaliser. To this end, the bottom 8 of the cover 3 is advantageously provided with a permeable membrane 11 (see FIG. 3), of a type in itself known in the art, produced with a film of polyester, acetate of cellulose or any other similar material, of suitable thickness, the specific characteristics of this membrane can of course vary according to the nature and extent of the gas exchange to be carried out.

Cette membrane 1 1 est avantageusement scellée à travers une ouverture prévue dans le fond 8 du couvercle 3, les dimensions de la membrane étant adaptées à celles du couvercle et pouvant d'ailleurs être différentes d'un exemple de réalisation à l'autre. Le cas échéant, cette membrane, dont l'épaisseur est généralement très faible, peut être soutenue ou rigidifiée par un croisillon 1 la monté dans le fond 8. This membrane 1 1 is advantageously sealed through an opening provided in the bottom 8 of the cover 3, the dimensions of the membrane being adapted to those of the cover and may also be different from one embodiment to another. Where appropriate, this membrane, the thickness of which is generally very small, can be supported or stiffened by a cross member 1 mounted in the bottom 8.

Le conteneur 1 selon l'invention peut associer à un même récipient 2, une pluralité de couvercles 3 dont chacun est muni d'une membrane perméable 11 dont les performances ne sont pas identiques d'un couvercle au suivant, ceuxci pouvant être éventuellement changés au fur et à mesure du développement de la culture dans le conteneur, en particulier lors des phases successives respectivement d'ensemencement, de multiplication, d'enracinement, d'acclimatation et de croissance. Avantageusement, chacun des couvercles successifs avec la membrane perméable correspondante, peut être distingué des autres par une couleur ou un signe approprié, facilitant pour l'utilisateur le meilleur choix en fonction du stade de développement de la culture. The container 1 according to the invention can associate with the same container 2, a plurality of lids 3 each of which is provided with a permeable membrane 11 whose performance is not identical from one cover to the next, these being able to be possibly changed at as the culture develops in the container, in particular during the successive phases of seeding, multiplication, rooting, acclimatization and growth respectively. Advantageously, each of the successive covers with the corresponding permeable membrane can be distinguished from the others by an appropriate color or sign, facilitating for the user the best choice according to the stage of development of the culture.

Réciproquement, un récipient 2 peut être échangé avec un autre, contenant un milieu nutritif différent pour les besoins de la culture considérée, avec un repiquage des plants mais en réemboîtant ensuite le même couvercle sur le nouveau récipient. Conversely, a container 2 can be exchanged with another, containing a different nutrient medium for the needs of the crop in question, with a transplanting of the plants but then re-fitting the same cover on the new container.

Lors de l'assemblage des bords périphériques, respectivement supérieur 7 du récipient 2 et inférieur 10 du couvercle 3, est réalisée une étanchéité relative du conteneur, de manière à isoler le milieu de culture contenu dans ce récipient et la plante qui se développe à partir de celuici vers le fond opposé du couvercle.  During the assembly of the peripheral edges, respectively upper 7 of container 2 and lower 10 of cover 3, a relative sealing of the container is carried out, so as to isolate the culture medium contained in this container and the plant which develops from from this to the opposite bottom of the cover.

Pour réaliser cette étanchéité relative et selon l'invention, les bords 7 et 10 sont notamment aménagés de la manière illustrée sur la Figure 4. To achieve this relative tightness and according to the invention, the edges 7 and 10 are in particular arranged in the manner illustrated in FIG. 4.

Sur cette Figure, on voit que le bord inférieur 10 du couvercle 3 comporte une section en forme de U renversé, délimité par deux éléments de paroi parallèles, respectivement 12 et 13, et par un fond plat 14, délimitant ensemble une rainure ouverte 15. Dans celleci s'engage l'extrémité du bord supérieur 7 du récipient 2, lequel comporte un élément de paroi unique 16, terminé par un rebord plat 17, lequel pénètre dans la rainure 15 en venant en fin de course d'emboîtement s'appuyer contre le fond 14 de celleci.  In this figure, it can be seen that the lower edge 10 of the cover 3 has a section in the shape of an inverted U, delimited by two parallel wall elements, respectively 12 and 13, and by a flat bottom 14, together delimiting an open groove 15. In this engages the end of the upper edge 7 of the container 2, which comprises a single wall element 16, terminated by a flat rim 17, which penetrates into the groove 15 by coming at the end of the interlocking stroke to rest. against the bottom 14 thereof.

Avantageusement, l'un des éléments de paroi formant le bord inférieur 10 du couvercle 3 comporte, en saillie vers l'intérieur, une nervure en relief 18, constituant une butée d'arrêt pour le rebord plat 17, en maintenant celuici appliqué contre le fond 14, ce rebord franchissant la nervure 18 à force, à la manière d'un clip, du fait de la souplesse relative du matériau plastique qui constitue le récipient et le couvercle, lors de l'engagement de l'élément 16 dans cette rainure. Advantageously, one of the wall elements forming the lower edge 10 of the cover 3 comprises, projecting inwards, a raised rib 18, constituting a stop for the flat rim 17, while maintaining this applied against the bottom 14, this rim crossing the rib 18 by force, in the manner of a clip, due to the relative flexibility of the plastic material which constitutes the container and the cover, when the element 16 is engaged in this groove .

On réalise ainsi un conteneur de conception très simple, prêt à l'emploi, qui présente des avantages particulièrement appréciables vis-à-vis des solutions connues dans la technique, en permettant d'assurer facilement un ajustement de l'échange gazeux entre l'intérieur et l'extérieur en fonction du processus de développement de la plante, tout en permettant autant que nécessaire d'accéder à celleci et au milieu de culture logé dans le conteneur. This produces a container of very simple design, ready to use, which has particularly appreciable advantages vis-à-vis the solutions known in the art, allowing to easily ensure an adjustment of the gas exchange between the indoor and outdoor depending on the development process of the plant, while allowing as much access as necessary and to the growing medium housed in the container.

La membrane montée dans le couvercle réalise une étanchéité efficace du conteneur vis-à-vis des contaminants et de la pollution extérieurs. Elle assure également une étanchéité relative en contrôlant les échanges gazeux à travers elle. The membrane mounted in the cover provides an effective seal for the container against external contaminants and pollution. It also provides a relative seal by controlling the gas exchanges through it.

Dans tous les cas, la membrane prévue dans le couvercle est déterminée de manière à contrôler la teneur en vapeur d'eau à l'intérieur du conteneur et à limiter les phénomènes d'hyper-hydratation des tissus pouvant entraîner un processus de vitrification nuisible à la multiplication des plants. En revanche, l'usage de la membrane permet d'établir in vitro une pré-acclimatation de ces plants avant leur extraction du conteneur, en facilitant ainsi leur passage en atmosphère non confinée et en améliorant les pourcentages de reprise, donc la rentabilité de l'opération. In all cases, the membrane provided in the cover is determined so as to control the water vapor content inside the container and to limit the phenomena of hyper-hydration of the tissues which can lead to a vitrification process harmful to the multiplication of plants. On the other hand, the use of the membrane makes it possible to establish a pre-acclimatization of these plants in vitro before their extraction from the container, thereby facilitating their passage in an unconfined atmosphere and improving the recovery percentages, therefore the profitability of the 'surgery.

En particulier, on peut aisément accéder au milieu de culture d'un récipient, procéder sur celuici ou les plantes qui lui sont associées à diverses interventions, puis remettre en place le couvercle initial ou un autre muni d'une membrane présentant des caractéristiques différentes.  In particular, one can easily access the culture medium of a container, proceed on it or the plants associated with it for various interventions, then replace the initial cover or another provided with a membrane having different characteristics.

Le conteneur est formé de deux parties qui peuvent être aisément stérilisées et stockées en quantités notables avant utilisation, sans pour autant présenter un encombrement excessif, les récipients et les couvercles pouvant être gerbés mutuellement grâce à la forme particulière de leurs profils. The container is made up of two parts which can be easily sterilized and stored in significant quantities before use, without however presenting an excessive bulk, the containers and the lids being able to be stacked mutually thanks to the particular shape of their profiles.

Ce conteneur est de préférence conçu pour un usage unique; néanmoins, il peut être réutilisé consécutivement à une opération de décontamination classique appropriée, en autoclave, par action d'un rayonnement gamma ou ultraviolet, pour autant qu'un tel traitement ne modifie pas de façon notable les caractéristiques de perméabilité de la membrane prévue dans le couvercle. This container is preferably designed for single use; nevertheless, it can be reused following an appropriate conventional decontamination operation, in an autoclave, by the action of gamma or ultraviolet radiation, provided that such treatment does not significantly modify the permeability characteristics of the membrane provided in lid.

Bien entendu, il va de soi que l'invention ne se limite pas à l'exemple plus spécialement décrit et représenté en référence aux dessins annexés; elle en embrasse au contraire toutes les variantes. En particulier, on peut prévoir de réaliser un couvercle intermédiaire plat sans monter dans le fond de celuici de membrane perméable, notamment pour fermer complètement le conteneur et assurer une conservation en l'état du milieu nutritif avant que ne débute son ensemencement, en l'absence de tout échange gazeux du fait de l'étanchéité réalisée entre le récipient et le couvercle une fois ceuxci assemblés. De même, on peut prévoir indifféremment que le profil en U d'un des bords périphériques qui reçoit la paroi d'extrémité de l'autre bord, soit ménagé sur le couvercle ou sur le récipient. Of course, it goes without saying that the invention is not limited to the example more particularly described and shown with reference to the accompanying drawings; on the contrary, it embraces all its variants. In particular, it is possible to provide for a flat intermediate cover without mounting in the bottom of the permeable membrane, in particular for completely closing the container and ensuring preservation in the state of the nutrient medium before its sowing begins, by absence of any gas exchange due to the seal produced between the container and the cover once these have been assembled. Likewise, it is equally possible to provide that the U-shaped profile of one of the peripheral edges which receives the end wall of the other edge, is formed on the cover or on the container.

Enfin, il doit être compris que le conteneur selon l'invention peut trouver des applications particulièrement intéressantes, en dehors de la culture de plantes in vitro, notamment pour le développement ou la conservation de tout organisme vivant du règne végétal et/ou animal, nécessitant le maintien d'une certaine atmosphère gazeuse dans son environnement, différente de celle qui règne à l'extérieur et en particulier un taux minimum en vapeur d'eau, ou encore un appauvrissement ou en enrichissement en certains gaz en fonction de leur caractère bénéfique ou nocif. Finally, it should be understood that the container according to the invention can find particularly advantageous applications, apart from the cultivation of plants in vitro, in particular for the development or conservation of any living organism of the plant and / or animal kingdom, requiring the maintenance of a certain gaseous atmosphere in its environment, different from that which prevails outside and in particular a minimum rate of water vapor, or even a depletion or enrichment in certain gases according to their beneficial character or harmful.

A titre purement indicatif, on peut ainsi citer la réalisation de mini-serres d'élevage pour petits animaux ou insectes, des conteneurs pour la culture de propagules ou d'inoculum de champignons, ou encore d'enceintes pour réaliser l'association de végétaux supérieurs et/ou inférieurs, chlorophylliens ou non, tels que des plantes, des champignons, des algues ou des bactéries, ou encore pour réaliser des associations vivantes d'individus ou de colonies du règne végétal et du règne animal.  For purely indicative purposes, we can cite the production of mini-greenhouses for small animals or insects, containers for the cultivation of propagules or inoculum of mushrooms, or even enclosures to achieve the association of plants higher and / or lower, chlorophyllian or not, such as plants, fungi, algae or bacteria, or even to make living associations of individuals or colonies of the plant kingdom and the animal kingdom.

Claims (12)

REVENDICATIONS 1. Conteneur pour la réalisation de cultures de plantes in vitro, comportant un récipient inférieur (2) de relativement faible hauteur, délimitant un volume de réception d'un milieu de culture donné, ce volume étant défini par le fond (5) disposé horizontalement de ce récipient et par sa paroi latérale (6) qui s'étend à partir de ce fond et présente un bord périphérique continu (7) prévu à son extrémité supérieure, et un couvercle de fermeture (3), constitué également d'un fond (8) parallèle à celui du récipient et d'une paroi latérale (9) terminée à son extrémité opposée à ce fond par un bord périphérique inférieur (10) apte à s'adapter sur le bord supérieur du récipient pour fermer totalement le conteneur, ce couvercle étant muni d'une membrane (11) perméable aux gaz, caractérisé en ce que la membrane (11) est scellée dans le fond (8) du couvercle (3) lors de sa fabrication et en ce que ce couvercle présente une dimension en hauteur notablement plus importante que celle du récipient (2), les bords (7, 10) du couvercle et du récipient comportant des moyens réalisant leur emboîtement mutuel de manière à établir entreeux une liaison relativement étanche. 1. Container for carrying out plant cultures in vitro, comprising a lower container (2) of relatively low height, delimiting a volume for receiving a given culture medium, this volume being defined by the bottom (5) disposed horizontally of this container and by its side wall (6) which extends from this bottom and has a continuous peripheral edge (7) provided at its upper end, and a closure cover (3), also consisting of a bottom (8) parallel to that of the container and of a side wall (9) terminated at its end opposite to this bottom by a lower peripheral edge (10) capable of fitting on the upper edge of the container to completely close the container, this cover being provided with a gas-permeable membrane (11), characterized in that the membrane (11) is sealed in the bottom (8) of the cover (3) during its manufacture and in that this cover has a dimension in significant height ement larger than that of the container (2), the edges (7, 10) of the cover and the container comprising means providing for their mutual nesting so as to establish between them a relatively sealed connection. 2. Conteneur selon la revendication 1, caractérisé en ce que le couvercle (3) et le récipient (2) sont réalisés dans une même matière plastique, transparente et relativement rigide. 2. Container according to claim 1, characterized in that the cover (3) and the container (2) are made of the same plastic material, transparent and relatively rigid. 3. Conteneur selon la revendication 2, caractérisé en ce que la matière plastique du couvercle (3) et du récipient (2) est du polyéthylène, polypropylène, chlorure de polyvinyle ou autre matériau analogue. 3. Container according to claim 2, characterized in that the plastic material of the cover (3) and of the container (2) is polyethylene, polypropylene, polyvinyl chloride or other similar material. 4. Conteneur selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que la membrane perméable (11) est réalisée en une matière plastique du genre film de polyester, acétate de cellulose ou autre. 4. Container according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the permeable membrane (11) is made of a plastic material such as polyester film, cellulose acetate or the like. 5. Conteneur selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'un même récipient (2) peut être associé à plusieurs couvercles successifs (3), ces couvercles étant différenciés de l'un à l'autre, par une couleur, un repère écrit ou dessiné, ou tout autre signe, chaque couvercle comportant une membrane perméable (11) de caractéristiques différentes d'un couvercle à l'autre.  5. Container according to any one of claims 1 to 4, characterized in that the same container (2) can be associated with several successive covers (3), these covers being differentiated from one to the other, by a color, a written or drawn mark, or any other sign, each cover comprising a permeable membrane (11) with different characteristics from one cover to another. 6. Conteneur selon la revendication 5, caractérisé en ce que chaque couvercle se présente sous la forme d'une toque, de hauteur pouvant varier d'un couvercle à 1 autre, pour accommoder le développement et la croissance de la plante. 6. Container according to claim 5, characterized in that each cover is in the form of a toque, of height which can vary from one cover to another, to accommodate the development and growth of the plant. 7. Conteneur selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que le couvercle (3) et le récipient (2) présentent une section droite par un plan horizontal ronde, carrée ou rectangulaire. 7. Container according to any one of claims 1 to 6, characterized in that the cover (3) and the container (2) have a cross section by a round, square or rectangular horizontal plane. 8. Conteneur selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que sa section présente un profil carré, à coins arrondis. 8. Container according to any one of claims 1 to 6, characterized in that its section has a square profile, with rounded corners. 9. Conteneur selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que les parois latérales (6, 9) du récipient (2) et du couvercle (3) comportent un profil légèrement évasé, à section par un plan passant par l'axe du conteneur de forme générale trapézoïdale, avec une pente inversée pour le récipient et le couvercle. 9. Container according to any one of claims 1 to 8, characterized in that the side walls (6, 9) of the container (2) and the cover (3) have a slightly flared profile, in section through a plane passing through the axis of the container of generally trapezoidal shape, with an inverted slope for the container and the lid. 10. Conteneur selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que le bord supérieur (7) du récipient (2) et le bord inférieur (10) du couvercle (3) comportent, l'un une section droite en U inversé, formée par deux éléments de paroi (12, 13), parallèles, réunis par un fond (14) délimitant une rainure ouverte (15) dans laquelle s'engage l'autre bord, lequel comporte un élément de paroi unique (16), prolongé par un retour plat (17) de dimension latérale sensiblement égale à la largeur de la rainure et adapté à venir s'appliquer contre le fond de celleci, lorsque le couvercle ferme le récipient. 10. Container according to any one of claims 1 to 9, characterized in that the upper edge (7) of the container (2) and the lower edge (10) of the cover (3) comprise, one a cross section in U inverted, formed by two wall elements (12, 13), parallel, joined by a bottom (14) delimiting an open groove (15) in which engages the other edge, which comprises a single wall element (16 ), extended by a flat return (17) of lateral dimension substantially equal to the width of the groove and adapted to be applied against the bottom of the latter, when the lid closes the container. 11. Conteneur selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'un des éléments de paroi d'un des deux bords comporte une nervure (18) en saillie vers l'intérieur de la rainure (15), formant butée d'arrêt pour le retour plat (17) de l'autre bord, en bloquant celuici contre le fond de cette rainure, après emboîtement du couvercle sur le récipient. 11. Container according to claim 10, characterized in that one of the wall elements of one of the two edges comprises a rib (18) projecting towards the inside of the groove (15), forming a stop for the flat return (17) on the other edge, blocking it against the bottom of this groove, after fitting the cover on the container. 12. Conteneur selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce que le fond (8) du couvercle (3) comporte un croisillon de support (lla) de la membrane perméable (11), pour améliorer sa rigidification selon l'étendue de sa surface.  12. Container according to any one of claims 1 to 11, characterized in that the bottom (8) of the cover (3) comprises a support cross (lla) of the permeable membrane (11), to improve its stiffening according to the extent of its surface.
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