FR2622195A1 - NOVEL ISOPOLYPEPTIDES, PROCESS FOR THEIR PREPARATION AND MEDICAMENTS CONTAINING SAME - Google Patents

Abstract

L'invention concerne de nouveaux isopolypeptides de formule générale I : (CF DESSIN DANS BOPI) ainsi que leurs sels, leurs antipodes et leurs isomères optiques. De plus, l'invention se rapporte à un procédé pour préparer ces composés. Les composés de formule générale I exercent un effet anti-tumeur et un effet antiviral.The invention relates to novel isopolypeptides of general formula I: (CF DRAWING IN BOPI) as well as their salts, their antipodes and their optical isomers. In addition, the invention relates to a process for preparing these compounds. The compounds of general formula I exert an anti-tumor effect and an antiviral effect.

Description

La présente invention est relative à de nouveaux isopolypeptides d'acidesThe present invention relates to novel acid isopolypeptides

diamino-monocarboxyliques, a leurs sels, leurs isomères optiques et leurs racémates. De plus, l'invention  diamino-monocarboxylic acids, their salts, their optical isomers and their racemates. In addition, the invention

concerne un procédé pour préparer ces composés.  relates to a process for preparing these compounds.

Plus particulièrement, l'invention concerne de nouveaux isopolypeptides d'acides diamino-monocarboxyliques représentés par la formule générale (1) :  More particularly, the invention relates to novel diamino-monocarboxylic acid isopolypeptides represented by the general formula (1):

R R6 R /RR R6 R / R

H HIN-C C C C CO OHH HIN-C C C CO CO OH

I t1\ I I,, R15' R t / 14H; RN/n R dans laquelle R4, R5, R7, F, R, et R10 représentent indépendamment les uns des autres, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en Cl1_4 (par la suite alkyle inférieur), r est une valeur moyenne entre 10 et 400, à est un entier de O à 10, et  I, R15, R, 14H; Wherein R4, R5, R7, F, R, and R10 independently of one another are hydrogen or C1-4alkyl (hereinafter lower alkyl), r is a mean value between 10 and 400, at is an integer of 0 to 10, and

n est un entier de 0 à 10.n is an integer from 0 to 10.

La signification des substituants correspondants dans  The meaning of the corresponding substituents in

les membres individuels peut être identique ou différente.  individual members may be the same or different.

On sait que les isopolypeptides d'acides diamino-  It is known that isopolypeptides of diamino

monocarboxyliques apparaissent rarement dans la nature: dans certains antibiotiques peptidiques, dans la paroi cellulaire des bactérles, dans la réticulation de plusieurs protéines et dans les clavicépamines. Certains d'entre eux présentent un effet biologique et peuvent être produits par des méthodes microbiologiques également. Selon des recherches japonaises, un polymère de L-lysine consistant en 25 à 30 unités monomeères associées les unes aux autres par des liaisons isopeptides est produit par  Monocarboxylic compounds rarely appear in nature: in certain peptide antibiotics, in the bacterial cell wall, in the crosslinking of several proteins and in clavicepamines. Some of them have a biological effect and can be produced by microbiological methods as well. According to Japanese research, an L-lysine polymer consisting of 25 to 30 monomeeric units associated with each other via isopeptide bonds is produced by

2622 1 9 52622 1 9 5

Streptomyces albulus [Shima et Sakai: Rgric. Biol. Che". 45, 2503 (1981)]. Cette poly-e-L-lysine inactive divers bactériophages [Shima et col.: Rgric. Biol. Che. i46, 1917 (1982)] et un moyen biosynthétique a été appliqué pour sa production [Sima et coll.: Nippon Nogekagaku Kaishi 57, 221-226 (1983)]. Les clavicépamines sont des protéines de base riches en lysine isolées à partir de la culture saprophyte de l'ergot (Claviceps purpurea) et ayant une importance pharmocologique humaine. Ces protéines pouvaient être fractionnées en composés de PM 2.000-17.000 D avec une forte teneur en lysine comprise entre 30 et 95%. Des études biologiques ont montré qu'elles ont un effet retardateur sur la prolifération cellulaire, si bien que ces produits inhibent la croissance de tumeurs animales, pratiquement  Streptomyces albulus [Shima and Sakai: Reg. Biol. Chem., 45, 2503 (1981)] This poly-L-lysine inactivates various bacteriophages [Shima et al .: Biol., Chem., 46, 1917 (1982)] and a biosynthetic means has been applied for its production. Sima et al .: Nippon Nogekagaku Kaishi 57, 221-226 (1983).) Clavicepamines are lysine-rich base proteins isolated from the saprophytic ergot (Claviceps purpurea) culture and of human pharmocological significance. These proteins could be fractionated into compounds of MW 2,000-17,000 D with a high lysine content between 30 and 95%, and biological studies have shown that they have a retarding effect on cell proliferation, so that these products inhibit growth of animal tumors, practically

sans effets secondaires toxiques (Tyihak: Dissertation, 1978).  without toxic side effects (Tyihak: Dissertation, 1978).

R partir des déterminations de structure, il a été démontré que des (poly) peptides de e-lysine sont les unités structurelles fondamentales des clavicépamines [Szokan, Kelemen et T6rôk: J. Chromatogr. 366, 283 (1986)]. On ne connait pas encore le rôle des unités structurelles de polylsolysine dans l'effet  From structural determinations, it has been demonstrated that e-lysine (poly) peptides are the basic structural units of clavicepamines [Szokan, Kelemen and T6rôk: J. Chromatogr. 366, 283 (1986)]. The role of structural units of polylsolysin in the effect is not yet known

biologique prometteur des clavicépamines.  biological promise of clavicepamines.

L'activité antivirale des poly-L-isolysines de synthèse, de leurs dérivés acylés avec des aminoacides, et de l'acide poly-p-L--x,pdiaminopropionique a été mesurée par des chercheurs indiens. On a trouvé que l'activité antivirale de ces polypeptides est associée à leur aptitude à induire des facteurs antiviraux ressemblant à l'interféron dans des cultures CRA [Indian  The antiviral activity of synthetic poly-L-isolysines, their acylated derivatives with amino acids, and poly-p-L-x, pdiaminopropionic acid was measured by Indian researchers. The antiviral activity of these polypeptides has been found to be associated with their ability to induce interferon-like antiviral factors in CRA cultures [Indian

J. Exper. Biology 20, 227 (1982); Indian J. Chem 218, 483 (1982)].  J. Exper. Biology 20, 227 (1982); Indian J. Chem 218, 483 (1982)].

Pour étudier la relation entre la structure chimique et l'effet biologique, l'invention a eu pour but de produire des isopeptides d'acides L-diamino-monocarboxyliques, ayant des PM donnés et une faible polydispersion, consistant en 10 à 400 unités, à l'échelle industrielle également. On a aussi besoin que les produits créés aient une pureté élevée, une faible polydispersion  In order to study the relationship between the chemical structure and the biological effect, the object of the invention was to produce L-diamino-monocarboxylic acid isopeptides having given PM and low polydispersion, consisting of 10 to 400 units, on an industrial scale too. It is also necessary that the products created have a high purity, a low polydispersion

et une grande pureté stéréochimique.  and a high stereochemical purity.

Il est bien connu que l'effet des biopolymères est  It is well known that the effect of biopolymers is

2622 1 9 52622 1 9 5

fortement influencé par la distribution de leur poids moléculaire.  strongly influenced by the distribution of their molecular weight.

La configuration des aminoacides est très importante parce que les différents isomères optiques peuvent avoir des effets biologiques opposés et tout-à-fait autres; par exemple, la croissance d'une tumeur animale est inhibée par la D-arginine, -et elle stimulée par la L-arginine [Szende et Tyihak: Lancet 7546, 624 (1968); Szende: Dissertation, 1974]. Des mélanges racémiques ou des polymères racémisés ne présentent pas les intéressants effets biologiques d'origine. Ces polypeptides devaient présenter ô la fois une haute pureté et une faible polydispersion. La méthode synthétique a été choisie pour résoudre ce problème. On a polymérisé un ester actif de lysine -Z-protégée (OPcp) selon la méthode de Hull [Biopolymgers 17, 2427 (1978)] et un ester pentachlorophénylique de lysine o.-BOC-protégée selon le procède de Gangopadhyay et Mathur  The configuration of amino acids is very important because the different optical isomers can have opposite biological effects and quite other; for example, growth of an animal tumor is inhibited by D-arginine, and stimulated by L-arginine [Szende and Tyihak: Lancet 7546, 624 (1968); Szende: Dissertation, 1974]. Racemic mixtures or racemized polymers do not have the interesting biological effects of origin. These polypeptides had to have both high purity and low polydispersion. The synthetic method has been chosen to solve this problem. An active lysine -Z-protected ester (OPcp) was polymerized according to the method of Hull [Biopolymers 17, 2427 (1978)] and an o-BOC-protected lysine pentachlorophenyl ester according to the procedure of Gangopadhyay and Mathur.

[Indian J. Chem. 218, 483 (1982). Selon la méthode de Nishi [Int.  [Indian J. Chem. 218, 483 (1982). According to the method of Nishi [Int.

J. Biol. Macromol. 2, 53 (1980)], I'c-Z-Lys-OH a été polymérisé par le diphénylphosphorylazide (DPPA). Les auteurs des articles précédents n'ont publié aucune donnée concernant le PM, la distribution de PM et la pureté optique de leurs produits. Les expériences de la Demanderesse ont montré qu'on n'obtenait que des produits de faible PM (maximum de 2500) et de haute polydispersion avec des rendements bas, sans effet biologique. Les méthodes synthétiques de Kushawa et coll. [Biopolymers 19, 219 (1980)] et de Mathur et col. [Int. J. Peptide Prot. Res. 17, 189 (1981)] semblaient les plus aptes à fournir des produits de faible dispersion. Ils ont synthétisé une c-poly-lysine et. une &-poly-ornithine. Le principe de la méthode était le mème pour les deux composants: on faisait réagir l'ester méthylique d'un aminoacide protégé avec un ester actif protégé ou un azide, pour obtenir d'abord un ester méthylique de tripeptide. Après hydrolyse alcaline, le tripeptide-acide était activé en une forme ester  J. Biol. Macromol. 2, 53 (1980)], α-Z-Lys-OH was polymerized by diphenylphosphorylazide (DPPA). Authors of previous articles have not published any data on PM, PM distribution and optical purity of their products. The Applicant's experiments have shown that only low (maximum 2500) and high polydispersion products were obtained with low yields, without any biological effect. The synthetic methods of Kushawa et al. [Biopolymers 19, 219 (1980)] and Mathur et al. [Int. J. Peptide Prot. Res. 17, 189 (1981)] seemed best able to provide low dispersion products. They synthesized a c-poly-lysine and. a-poly-ornithine. The principle of the method was the same for both components: the methyl ester of a protected amino acid was reacted with a protected active ester or an azide to first obtain a tripeptide methyl ester. After alkaline hydrolysis, the tripeptide-acid was activated into an ester form

active (il était transformé en son ester pentachlorophénylique).  active (it was converted to its pentachlorophenyl ester).

Rprès déprotection du groupe w-amino terminal, le tripeptide était prêt et actif pour une polycondensation. Enfin, les groupes -amino  After deprotection of the w-terminal amino group, the tripeptide was ready and active for polycondensation. Finally, the -amino groups

2622 1 9 52622 1 9 5

protecteurs étaient éliminés et l'isopeptide isolé. Dans ces procédures, on utilisait des groupes amino protecteurs BOC en position a et Z en position w. Leur élimination était effectuée par traitement avec un acide fort et par hydrogénation catalytique respectivement. Dans les publications ci-dessus, les polymères ne sont pas caractérisés par un PM, une distribution de PM ou des  protectors were removed and the isopeptide isolated. In these procedures, protective amino groups BOC at position a and Z at position w were used. Their removal was carried out by treatment with a strong acid and by catalytic hydrogenation respectively. In the above publications, the polymers are not characterized by PM, PM distribution or

données de pureté optique.optical purity data.

On a utilisé les abréviations recommandées par la  The abbreviations recommended by the

Commission IUPRC-IUB sur la Nomenclature Biochimique, J. Biol.  IUPRC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature, J. Biol.

l1 Chem. 247, 977 (1972), ainsi que quelques autres noms, dont certains sont indiqués ci-après: Z benzyloxycarbonyle BOC t-butoxycarbonyle -ONp pnitrophényle -OSn N-nitro-succinimidyle -OPcp pentachlorophényle -OPfp pentafluorophényle -OBt N-hydroxy-benzotriazolyle BuOCO isobutyloxycarbonyle EtOCO éthyloxycarbonyle N3 azido EEDQ Néthoxycarbonyl-2-éthoxy-1,2-dihydroisoquinoléine EtORc acétate d'éthyle IIDQ N-isobutoxycarbonygi-2-isobutoxy-1,2-dihydroisoquinoléine THF tétrahydrofuranne DMF diméthylformamide HPLC chromatographie liquide haute performance OPTLC chromatographle sur couche mince ô surpression IEF électrofocalisation SM spectrométrie de masse RMN spectroscopie de résonance magnétique nucléaire ZC02 groupe Z mesuré à partir du C02 libéré PM poids moléculaire TLC chromatographie sur couche mince  Chem. 247, 977 (1972), as well as a few other names, some of which are given below: Z benzyloxycarbonyl BOC t-butoxycarbonyl-N-pnitrophenyl-O-N-nitrosuccinimidyl-OPcp pentachlorophenyl-OPfp pentafluorophenyl-O-B-N-hydroxy-benzotriazolyl BuOCO isobutyloxycarbonyl EtCOO ethyloxycarbonyl N3 azido EEDQ Nethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydroisoquinoline EtORc ethyl acetate IIDQ N-isobutoxycarbonyl-2-isobutoxy-1,2-dihydroisoquinoline THF tetrahydrofuran DMF dimethylformamide HPLC high performance liquid chromatography OPTLC layer chromatograph Thin δ overpressure IEF electrofocusing MS mass spectrometry NMR nuclear magnetic resonance spectroscopy ZCO2 Z group measured from CO 2 released PM TLC molecular weight thin layer chromatography

2622 1 952622 1 95

DuOH butanolButanol DuOH

RcOH acide acétique.RcOH acetic acid.

On a observé et expérimenté plusieurs inconvénients en reproduisant ces procédés: - pour préparer des oligomères, on protégeait toujours leurs groupes carboxy par un ester méthylique, si bien que I'oligomère obtenu n'était pas directement utilisable pour une polycondensation. Pour obtenir un intermédiaire actif, il fallait libérer le groupe carboxy en soumettant l'ester méthylique correspondant à une hydrolyse alcaline. Cette étape aboutit à une racémisation et à d'autres réactions secondaires, ce qui diminue le rendement. Malheureusement, les polymères synthétisés présentaient aussi un polydispersion élevée. De plus, l'application d'un groupe protecteur benzyloxycarbonyle pour une fonction w-amino était désavantageuse en raison de son élimination par hydrogénation catalytique. Malheureusement, les polymères ainsi préparés étaient  Several disadvantages have been observed and experienced in reproducing these processes: to prepare oligomers, their carboxy groups were always protected by a methyl ester, so that the oligomer obtained was not directly usable for polycondensation. To obtain an active intermediate, the carboxy group had to be liberated by subjecting the corresponding methyl ester to alkaline hydrolysis. This step results in racemization and other side reactions, which decreases the yield. Unfortunately, the synthesized polymers also exhibited high polydispersion. In addition, the application of a benzyloxycarbonyl protecting group for a β-amino function was disadvantageous because of its elimination by catalytic hydrogenation. Unfortunately, the polymers thus prepared were

inefficaces dans les tests biologiques de la Demanderesse.  ineffective in the biological tests of the Applicant.

L'invention a pour but d'éliminer les inconvénients mentionnés plus haut par la mise au point d'un nouveau procédé, qui n'a jamais été appliqué dans la production d'isopeptides d'acides diamino-monocarboxyliques. L'invention repose sur la constation selon laquelle le but ci-dessus peut être atteint si des oligomères actifs directement applicables pour une polycondensation sont d'abord préparés dans un procédé, dans lequel les groupes carboxy sont protégés par des groupes esters actifs et le couplage des peptides est effectué à une vitesse beaucoup grande que l'aminolyse du groupe ester actif protecteur. Cette méthode de couplage fournit un  The object of the invention is to eliminate the disadvantages mentioned above by the development of a new process, which has never been applied in the production of diamino-monocarboxylic acid isopeptides. The invention is based on the finding that the above object can be achieved if directly applicable active oligomers for polycondensation are first prepared in a process, wherein the carboxy groups are protected by active ester groups and coupling peptides is carried out at a much greater rate than the aminolysis of the protective active ester group. This coupling method provides a

degré d'activation supérieur à celui de la méthode à l'ester actif.  degree of activation greater than that of the active ester method.

On a constaté que la méthode d'activation par 'dégagement' est bien applicable pour préparer des isopeptides et des sels consistant en acides diaminocarboxyliques. Il convient d'utiliser un ester p-nitrophénylique pour la protection temporaire et l'activation simultanée des groupes COOH, et la méthode à l'anhydride mixte pour  It has been found that the "release" activation method is well applicable for preparing isopeptides and diaminocarboxylic acid salts. A p-nitrophenyl ester should be used for the temporary protection and simultaneous activation of COOH groups, and the mixed anhydride method for

2622 1 9 52622 1 9 5

le couplage des peptides, avec une protection par BOC pour les groupes amino dans les dernières liaisons amide et avec un groupe Z pour des groupes aoino ne prenant pas part à la réaction. On a établi que de cette fa9on, on peut synthétiser des homo-isopeptides ou des isopeptides en séquence d'un quelconque acide diamino-carboxylique. De plus, on a trouvé que des isopeptides de faible dispersion peuvent être obtenus de fa9on reproductible avec des Pi entre de larges limites. Les produits intermédiaires et finaux sont des substances bien cristallisables de haute pureté et  peptide coupling, with BOC protection for amino groups in the last amide linkages and with a Z group for aoino groups not taking part in the reaction. It has been established that in this way, homo-isopeptides or isopeptides can be synthesized in sequence of any diamino carboxylic acid. In addition, it has been found that low dispersion isopeptides can be obtained reproducibly with P1 within wide limits. Intermediate and final products are well crystallizable substances of high purity and

ils peuvent être facilement isolés.  they can be easily isolated.

De plus, I'invention repose sur la constatation selon laquelle les esters p-nitrophényliques sont les groupes les plus favorables pour une protection temporaire et une activation simultanée des groupes carboxy dans le cas des acides diaminocarboxyliques, la méthode à l'anhydride mixte est optimale ici pour le couplage peptidique, et des groupes Z et BOC peuvent  In addition, the invention is based on the finding that p-nitrophenyl esters are the most favorable groups for temporary protection and simultaneous activation of carboxy groups in the case of diaminocarboxylic acids, the mixed anhydride method is optimal. here for peptide coupling, and Z and BOC groups can

être choisis pour la protection des autres.  to be chosen for the protection of others.

Enfin, l'invention repose sur la constatation selon laquelle les homoisopeptides ou les isopeptides en séquence d'un quelconque acide diaminomonocarboxylique peuvent être synthétisés par le procédé ci-dessus sans racémisation, c'est-à-dire avec  Finally, the invention is based on the finding that the homoisopeptides or isopeptides in sequence of any diaminomonocarboxylic acid can be synthesized by the above method without racemization, i.e. with

conservation de leur configuration.conservation of their configuration.

A partir de ce qui précède, I'invention concerne des isopolypeptides, leurs sels, leurs isomères optiques et leurs racémates ayant la formule générale (1), dans laquelle les  From the above, the invention relates to isopolypeptides, their salts, their optical isomers and their racemates having the general formula (1), in which the

substituants sont tels que définis plus haut.  substituents are as defined above.

Selon la présente invention, les composés de formule générale (1) et leurs sels, sont préparés par couplage d'un monomère ou d'un oligomère de formule générale (1)  According to the present invention, the compounds of general formula (1) and their salts are prepared by coupling of a monomer or an oligomer of general formula (1)

4 6 14 6 1

R5 R7ln NRR n (zR5 R7n NRR n (z

7 97 9

L - 21HR qL - 21HR q

2622 1 9 52622 1 9 5

- dans laquelle q = 1 à 9, R1 est un groupe amino protecteur (dans des oligomères, tous les R1 sont les mêmes), R3 est un groupe ester actif pour des groupes carboxy convenable pour la protection et l'activation simultanée, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, a et n sont tels que définis plus haut - avec un monomeère de formule générale (111) R4 /R \i R/R8\ R2 1(1_ C m- A,7Ox - dans laquelle R2 est un groupe amino protecteur différent de R1, qui peut être éliminé sélectivement par rapport à R1, X est un groupe activant la fonction carboxy à condition que le groupe -COX soit plus actif que le groupe COOR3, R1, R4, R5, R6, R7, RI, R9,  in which q = 1 to 9, R 1 is an amino protecting group (in oligomers, all R 1 are the same), R 3 is an active ester group for carboxy groups suitable for protection and simultaneous activation, R 4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, a and n are as defined above - with a monomeer of the general formula (III) R4 / R1 R / R8 \ R2 1 (1-C m-A, 7Ox in which R2 is an amino protecting group different from R1, which can be selectively removed from R1, X is a carboxy activating group provided that the -COX group is more active than the COOR3 group, R1, R4, R5, R6, R7, R1, R9,

R10iO met n sont tels que définis plus haut.  R10iO met n are as defined above.

Le groupe protecteur R2 est enlevé a partir du composé de formule générale (Iv) ainsi obtenu  The protecting group R2 is removed from the compound of general formula (IV) thus obtained

R4R R /RR4R R / R

2 1 1 10 1R.2 1 1 10 1R.

R, HN.. - CO ORR, HN .. - CO OR

R 15V7 1 V1OR (IV)R 15V7 1 V1OR (IV)

77

R R 1NHR RR R 1NHR R

- dans laquelle les substituants sont tels que définis plus haut et s est un entier de 2 à 10 - puis, si s i 9, le composé résultant  in which the substituents are as defined above and s is an integer of 2 to 10 and then, if s, the resulting compound

2 6 2 2 1 9 52 6 2 2 1 9 5

est traité avec un composé de formule générale (111) ou il est polycondensé de façon connue. Les groupes protecteurs R1 sont ensuite enlevés des produits. Si le composé obtenu de formule générale (1) est sous la forme de base libre, il peut être transformé en un sel acceptable du point de vue pharmaceutique, ou s'il est un sel, il peut être transformé en une base libre ou en un  is treated with a compound of the general formula (III) or is polycondensed in a known manner. The protecting groups R 1 are then removed from the products. If the obtained compound of general formula (1) is in the free base form, it can be converted into a pharmaceutically acceptable salt, or if it is a salt, it can be converted into a free base or a

autre sel.other salt.

On peut préparer des isomères optiques en utilisant les isomères correspondants comme substances de départ. Si des polymères racémiques doivent être préparés, les racémates des  Optical isomers can be prepared using the corresponding isomers as starting materials. If racemic polymers are to be prepared, the racemates of the

monomères doivent être utilisés comme matières de départ.  monomers must be used as starting materials.

Dans le procédé de l'invention, R1 et R2 sont des groupes protecteurs pouvant être éliminés de façon sélective, bien connus dans la chimie des peptides. R1 est de préférence un groupe benzyloxycarbonyle (Z) et R2 est de préférence un groupe t-butyloxycarbonyle (BOC). Le groupe -OR3 est un groupe ester actif servant à la fois à la protection et à l'activation, par exemple -ONp, -OSn, -OPcp, -OPfp, -0Bt; X peut être BuiOCO-, EtOCO-, N3, -OSn, -OPcp, -OPfp, en fonction des conditions de réaction et de la  In the process of the invention, R 1 and R 2 are selectively removable protecting groups well known in peptide chemistry. R 1 is preferably benzyloxycarbonyl (Z) and R 2 is preferably t-butyloxycarbonyl (BOC). The group -OR3 is an active ester group for both protection and activation, for example -ONp, -OSn, -OPcp, -OPfp, -0Bt; X can be BuiOCO-, EtOCO-, N3, -OSn, -OPcp, -OPfp, depending on the reaction conditions and the

signification de R3, par exemple il est un groupe BuiOCO-, EtOCO.  meaning of R3, for example it is a group BuiOCO-, EtOCO.

Selon le mode de réalisation le plus avantageux de la présente invention, dans le monomère de formule générale (11) utilisé comme matière de départ, R1 est Z, R2 est BOC et R3 est -ONp. Le groupe BOC est éliminé par acidolyse, puis l'acide diaminocarboxylique protégé (R1 = Z, R2 = BOC) est couplé selon la méthode à l'anhydride mixte. Après élimination du groupe protecteur BOC, le dipeptide ainsi obtenu est polycondensé ou il est couplé à nouveau avec l'aminoacide protégé suivant tel que ci-dessus, les  According to the most advantageous embodiment of the present invention, in the monomer of general formula (11) used as starting material, R1 is Z, R2 is BOC and R3 is -ONp. The BOC group is removed by acidolysis, and then the protected diaminocarboxylic acid (R1 = Z, R2 = BOC) is coupled according to the mixed anhydride method. After removal of the BOC protecting group, the dipeptide thus obtained is polycondensed or it is coupled again with the protected amino acid according to the above, the

étapes étant répétées jusqu'à obtention d'un décapeptide.  steps being repeated until a decapeptide is obtained.

La meilleure méthode consiste à répéter les couplages jusqu'au tripeptide et à transformer l'oligomère obtenu directement convenable pour la polycondensation, en isopolypeptide ayant le nombre de résidus aminoacides prévu. L'élimination du groupe protecteur Z (c'est-à-dire la déprotection) est de préférence réalisée par HBr dans l'acide acétique, et le produit final est  The best method is to repeat the couplings up to the tripeptide and transform the resulting oligomer directly suitable for polycondensation into an isopolypeptide having the expected number of amino acid residues. Removal of the protecting group Z (i.e. deprotection) is preferably carried out by HBr in acetic acid, and the final product is

2622 1 9 52622 1 9 5

isolé Les conditions de la procédure la plus avantageuse de la méthode de couplage à l'anhydride mixte sont les suivantes: a) solvant: acétonitrile, THF, DMF, dichiorométhane; b) réactif formant l'anhydride: chloroformate d'éthyle, chloroformate d'isobutyle, EEDQ, IIDQ; base tertiaire: triéthylamine, diisopropyl-éthylamine, N-méthyl-morpholine; c) temps d'activation et température: 10 à 30 minutes, entre -10 C et -20 C; d) neutralisation du sel du composant amino:  The conditions of the most advantageous procedure of the mixed anhydride coupling method are as follows: a) solvent: acetonitrile, THF, DMF, dichioromethane; b) anhydride-forming reagent: ethyl chloroformate, isobutyl chloroformate, EEDQ, IIDQ; tertiary base: triethylamine, diisopropyl-ethylamine, N-methyl-morpholine; c) activation time and temperature: 10 to 30 minutes, between -10 C and -20 C; d) neutralization of the salt of the amino component:

avec la triéthylamine ou la diisopropyl-  with triethylamine or diisopropyl-

éthylamine dans le mélange réactionnel.  ethylamine in the reaction mixture.

Rendement en produits finaux purs: 60 à 0%X.  Yield in pure end products: 60 to 0% X.

R la fois les homo-isopolypeptides et des isopeptides  Both homo-isopolypeptides and isopeptides

en séquence peuvent être préparés par le procédé de l'invention.  in sequence can be prepared by the process of the invention.

On a utilisé des techniques de séparation actuelles, comme HPLP, OPTLC, IEF et des méthodes de détermination de structure comme IR, SM, RMN, pour analyser les isopeptides préparés. Les produits étudiés et les témoins ont mis les  Current separation techniques, such as HPLP, OPTLC, IEF and structure determination methods such as IR, MS, NMR, have been used to analyze prepared isopeptides. The products studied and the witnesses put the

structures en évidence.structures in evidence.

Les substances purifiées de la façon décrite dans les  Substances purified as described in

exemples ont été utilisées pour l'étude des activités biologiques.  examples were used for the study of biological activities.

La purification a été effectuée par précipitation, chromatographie  Purification was carried out by precipitation, chromatography

sur colonne et sur gel.on column and on gel.

R partir des études biologiques, on a trouvé que parmi les poly-Lisolysines (degré de polymérisation (dip.) de 10-400) préparées par le procédé de l'invention, les polymères ayant un d.p. de 40 à 200 (Pl 5.500 - 20.300 D) présentent un effet retardateur sur la prolifération cellulaire, c'est-à-dire une activité anti-tumeur in vitro et in vivo, et ils inhibent la formation des métastases tumorales. Les produits ayant un PM de 10.200 à 15.400 D (d.p. de 80 à 120) ont la plus forte acivité. On a trouvé que les autres substances préparées jusqu'à maintenent étaient inefficaces, principalement en raison d'une forte  From the biological studies, it has been found that among the poly-Lisolysins (degree of polymerization (dip) of 10-400) prepared by the process of the invention, the polymers having a d.p. from 40 to 200 (Pl 5,500 - 20,300 D) have a retarding effect on cell proliferation, i.e. anti-tumor activity in vitro and in vivo, and they inhibit the formation of tumor metastases. Products with a MW of 10.200 to 15.400 D (from 80 to 120) have the highest activity. Other substances prepared until now were found to be ineffective, mainly because of a strong

2622 1 9 52622 1 9 5

1O polydispersion des produits finaux et d'une racémisation pendant la  Polydispersion of the final products and racemization during the

production dans les méthodes de Kushawa ou de Mathur.  production in the Kushawa or Mathur methods.

On a constaté que les poly-L-lysines ayant un d.p. de à 120 produites par la méthode de Kushawa ou de Hull, ne présentent pas d'activité antivirale. Les principaux avantages de la synthèse de la présente invention par rapport aux procédures connues, sont les suivants: - Des produits ayant un effet biologique prometteur peuvent être  It has been found that poly-L-lysines having a d.p. from to 120 produced by the Kushawa or Hull method, do not exhibit antiviral activity. The main advantages of the synthesis of the present invention over the known procedures are the following: - Products having a promising biological effect can be

obtenus avec une forte reproductibilité.  obtained with high reproducibility.

- Des oligomères directement applicables pour la polycondensation peuvent être obtenus, si bien que l'étape d'hydrolyse mentionnée plus haut est éliminée et que la racémisation qui est très  - Applicable oligomers for the polycondensation can be obtained, so that the hydrolysis step mentioned above is eliminated and the racemization which is very

dangereuse du point de vue de l'effet biologique, peut être évitée.  dangerous from the point of view of the biological effect, can be avoided.

- Des produits ayant une distribution de PM favorable (c'est-a-dire une faible polydispersion) peuvent être obtenus entre de larges limites de PM, ce qui est aussi avantageux pour avoir l'effet biologique désiré (par exemple dans le cas du polymère SZTP-14 PM: 12.700 200; polydispersion: 3,7). Les rendements sont supérieurs,  Products with a favorable PM distribution (i.e., low polydispersion) can be obtained between wide MW limits, which is also advantageous for having the desired biological effect (eg in the case of SZTP-14 PM polymer: 12,700,200; polydispersion: 3.7). The yields are higher,

la pureté des produits intermédiaires et finaux est plus grande.  the purity of intermediate and final products is greater.

Ces deux substances sont bien cristallisables et elles peuvent être facilement isolées, La reproduction des étapes ne pose pas de difficultés. - Les étapes de couplage des peptides requièrent de durées de  These two substances are well crystallizable and they can be easily isolated. The reproduction of the steps does not pose any difficulties. - The peptide coupling steps require durations of

réaction plus courtes.shorter reaction.

- La déprotection par hydrogénation catalytique peut être éliminée  - The deprotection by catalytic hydrogenation can be eliminated

par la combinaison selon l'invention des groupes aminoprotecteurs.  by the combination according to the invention aminoprotective groups.

Ceci implique d'autres avantages dans la production à l'échelle industrielle. - Le plus grand avantage du procédé de l'invention est la  This implies other advantages in the production on an industrial scale. The greatest advantage of the process of the invention is the

réalisation des étapes de réaction sans racémisation.  performing the reaction steps without racemization.

Comme cela a été mentionné plus haut, les produits obtenus jusqu'à maintenant sesont révélés inefficaces dans les tests effectués par la Demanderesse. D'un autre côté, des polymères synthétisés par le procédé de l'invention présentent des activités  As mentioned above, the products obtained until now have proved ineffective in the tests performed by the Applicant. On the other hand, polymers synthesized by the process of the invention have

biologiques très prometteuses.very promising biological

2622 1 9 52622 1 9 5

1 1 Parmi les composés de formule générale (I) préparés selon le procédé de l'invention, les composés suivants dans lesquels les substituants sont tels que définis ci-après, sont nouveaux: R4, R5, R6, R7 et R10 représentent indépendamment les uns des autres, un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, éthyle, propyle ou butyle, R8 et R9 sont chacun un atome d'hydrogène, r est un entier de 10 à 400, a est 0, 1, 2 ou 3, et n est O. Dans un groupe de composés avantageux: R4, R5, R6, R7 et R10 représentent indépendamment les uns des autres, un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, éthyle, propyle ou butyle, R8 et R9 sont chacun un atome d'hydrogène, r est un entier de 40 à 200, à est 3, et n est O. Dans un autre groupe de composés avantageux: R4, R5, R6, R7 et R10 représentent chacun un atome d'hydrogène, R8 et R9 sont chacun un atome d'hydrogène, r est un entier de 80 à 120, a est 3, et n est O. Dans un autre groupe de composés avantageux: R4, R5, R6, R7 et RO10 représentent indépendamment les uns des autres, un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, éthyle, propyle ou butyle, R8 et R9 sont chacun un atome d'hydrogène, r est un entier de 10 à 120,  Among the compounds of general formula (I) prepared according to the process of the invention, the following compounds in which the substituents are as defined below are new: R4, R5, R6, R7 and R10 represent independently the each other, a hydrogen atom or a methyl, ethyl, propyl or butyl group, R8 and R9 are each a hydrogen atom, r is an integer of 10 to 400, a is 0, 1, 2 or 3, and n is 0. In a group of preferred compounds: R4, R5, R6, R7 and R10 independently of one another are hydrogen, methyl, ethyl, propyl or butyl, R8 and R9 are each a hydrogen atom, r is an integer of 40 to 200, is 3, and n is 0. In another group of advantageous compounds: R4, R5, R6, R7 and R10 each represent a hydrogen atom, R8 and R9 are each a hydrogen atom, r is an integer of 80 to 120, a is 3, and n is 0. In another group of advantageous compounds: R4, R5, R6, R7 and t RO10 represent independently of each other a hydrogen atom or a methyl, ethyl, propyl or butyl group, R8 and R9 are each a hydrogen atom, r is an integer of 10 to 120,

262 2 1 95262 2 1 95

à est 2, et n est O. Dans un autre groupe de composés avantageux: R4, R5, R6, R7 et R10 représentent indépendamment les uns des autres, un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, éthyle, propyle ou butyle, R8 et R9 sont chacun un atome d'hydrogène, r est un entier de 10 à 400, à est 1, et  to 2, and n is 0. In another group of preferred compounds: R 4, R 5, R 6, R 7 and R 10 independently of one another are hydrogen, methyl, ethyl, propyl or butyl, R 8 and R9 are each a hydrogen atom, r is an integer of 10 to 400, is 1, and

n est 0.n is 0.

Dans un groupe d'autres composés avantageux: R4, R5, et R10 représentent indépendamment les uns des autres, un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, éthyle, propyle ou butyle, R6, R7, R8 et R9 sont chacun un atome d'hydrogène, r est un entier de 10 à 400,  In a group of other advantageous compounds: R4, R5, and R10 independently of one another, a hydrogen atom or a methyl, ethyl, propyl or butyl group, R6, R7, R8 and R9 are each an atom of hydrogen, r is an integer of 10 to 400,

m et n ont la valeur 0.m and n are 0.

Les stéréoisomères L des isopolypeptides de formule générale (1) et leurs sels se sont révélés très efficaces contre  The L stereoisomers of the isopolypeptides of general formula (1) and their salts have proved very effective against

des tumeurs et des infections virales.  tumors and viral infections.

L'activité biologique des polyisolysines préparées par le procédé de l'invention a été étudiée in vitro et in vivo. Les activités prometteuses sont mises en évidence dans la partie suivante. L'activité anti-tumeur a été mesurée sur des souches tumorales animales et l'activité antivirale a été étudiée contre  The biological activity of the polyisolysins prepared by the method of the invention has been studied in vitro and in vivo. Promising activities are highlighted in the next section. Anti-tumor activity was measured on animal tumor strains and antiviral activity was studied against

des virus de végétaux.plant viruses.

On a constaté que dans les expériences effectuées, les isopoly-L-lysines ayant un Pl de 5.500 à 25.600 avaient une activité surprenante, parmi lesquelles les composés ayant un Pl de  It was found that in the experiments carried out, the isopoly-L-lysines having a P1 of 5,500 to 25,600 had a surprising activity, among which the compounds having a P1 of

10.200 à 15.400 étaient les meilleurs.  10,200 to 15,400 were the best.

La substance SZTP-14 était la plus efficace dans les  SZTP-14 was the most effective substance in

deux mesures.two measures.

2622 1 9 52622 1 9 5

Elle a été caractérisée de la façon suivante: )?sp Uiscosité du polymère Z-protégé: = 31,92 cw3/g ZCO02: 16,8% (calc.), 16,3% (trouvée).  It was characterized as follows: ## EQU1 ## The viscosity of the Z-protected polymer: = 31.92 cw / g ZCOO 2: 16.8% (calc.), 16.3% (found).

Le polymère libre était disponible en tant que bromhydrate (HBr).  The free polymer was available as hydrobromide (HBr).

Teneur en Br: 37,7% (calcI.), 36,8% (trouvée).  Br content: 37.7% (calcI), 36.8% (found).

R254 = 0 (c'est-à-dire pas d'absorption UV).  R254 = 0 (i.e., no UV absorption).

Elle a été purifiée par précipitation dans l'alcool avec de  It was purified by precipitation in alcohol with

l'éther.ether.

[f]20D = +32,4 (c = 2;' eau)[f] 20D = +32.4 (c = 2; water)

Pl = 12.700 D 200.Pl = 12,700 D 200.

Etude de l'activité anti-tumeur L'effet des composés qui peuvent influencer la prolifération des cellules est généralement étudié in vitro avec des cultures cellulaires, et in vivo avec des tumeurs animales transplantables. Rinsi, les composés selon l'invention ont été testés sur une lignée de cellules d'érythroleucémie humaine (K-562, Karolinska Institut, Stockholm) et sur quatre tumeurs de souris transplantables (leucémie lymphoide L1210, tumeur dérivée du  Study of anti-tumor activity The effect of compounds that can influence cell proliferation is generally studied in vitro with cell cultures, and in vivo with transplantable animal tumors. Thus, the compounds according to the invention were tested on a human erythroleukemia cell line (K-562, Karolinska Institute, Stockholm) and on four transplantable mouse tumors (lymphoid leukemia L1210, tumor derived from

macrophage P380, carcinome d'Ehrlich, tumeur du poumon de Lewis).  macrophage P380, Ehrlich carcinoma, Lewis lung tumor).

Dans le cas des tumeurs L1210 et P380 et du carcinome d'Ehrlich, la survie des animaux a été utilisée comme indicateur de l'effet. Dans le cas de la LLT, le nombre et la dimension des métastases ont été déterminés dans le poumon ou le foie de souris traitées et non-traitées. Les expériences ont été effectuées avec la solution d'injection suivante: 50 mg du composé dissous dans 10 mi de  In the case of L1210 and P380 tumors and Ehrlich carcinoma, animal survival was used as an indicator of the effect. In the case of LLT, the number and size of metastases were determined in the lung or liver of treated and untreated mice. The experiments were carried out with the following injection solution: 50 mg of the compound dissolved in 10 ml of

solution saline physiologique.physiological saline solution.

Les composés étudiés ont été désignés comme suit: SZTP: polyiso-L-lysines produites par le procédé de l'invention SZTP-14: bromhydrate de polyiso-Llysine, Pl calculé sur des bases libres: 12.700 200, polydispersion: 3, 7 (moyenne en nombre/moyenne en poids) SZTP-15: bromhydrate de polyiso-Llysine, P' calculé sur des bases  The compounds studied were designated as follows: SZTP: polyiso-L-lysines produced by the process of the invention SZTP-14: polyiso-Lysine hydrobromide, P1 calculated on free bases: 12.700 200, polydispersion: 3.7 ( number average / weight average) SZTP-15: polyiso-Lysine hydrobromide, P 'calculated on bases

26 2 2 1 9 526 2 2 1 9 5

libres: 11.600 200.free: 11,600,200.

SZTP-16: bromhydrate de polyiso-L-lysine, PM calculé sur des bases  SZTP-16: polyiso-L-lysine hydrobromide, PM calculated on bases

libres: 13.400 200.free: 13,400,200.

SZTP-17: bromhydrate de polyiso-L-lysine, PM calculé sur des bases libres: 14.500 200. SZTD: polyiso-L-ornithine produite par le procédé selon l'invention SZTD-18: bromhydrate de polyiso-L-ornithine, PM calculé sur des  SZTP-17: polyiso-L-lysine hydrobromide, PM calculated on free bases: 14,500 200. SZTD: polyiso-L-ornithine produced by the process according to the invention SZTD-18: polyiso-L-ornithine hydrobromide, PM calculated on

bases libres: 8.900 200.free bases: 8,900,200.

H-17: polyisolysine produite selon Hull et coil.  H-17: polyisolysin produced according to Hull et al.

K-17: polyisolysine produite selon Kushawa et coi.  K-17: polyisolysin produced according to Kushawa et al.

A-3: c-polylysine.A-3: c-polylysine.

Résumé des expériences sur la prolifération des cellules tumorales Les composés produits selon l'invention réduisaient in vitro en fonction de la dose, le nombre de cellules tumorales par rapport à celui du témoin. Cet effet se traduisait par une stagnation du nombre de cellules dans le cas des faibles doses, des doses élevées provoquant la mort des cellules. H-17 et K-17 étaient inefficaces et l'm-polylysine (R-3) ne provoquait qu'une stagnation  Summary of Experiments on the Proliferation of Tumor Cells The compounds produced according to the invention reduced in vitro, depending on the dose, the number of tumor cells relative to that of the control. This effect resulted in a stagnation of the number of cells in the case of low doses, high doses causing cell death. H-17 and K-17 were ineffective and m-polylysine (R-3) only caused stagnation

du nombre de cellules.the number of cells.

Selon les expériences in vivo de la Demanderesse, le traitement par SZTP se traduisait par la survie accrue des animaux traités. Dans le cas de la tumeur d'Ehrlich, le traitement a provoqué une très longue période sans tumeur et la croissance de la  According to our in vivo experiments, treatment with SZTP resulted in increased survival of the treated animals. In the case of the Ehrlich tumor, the treatment caused a very long tumor-free period and the growth of

tumeur n'a été observée qu'après l'arrêt du traitement.  tumor was observed only after stopping treatment.

Le traitement par SZTP a empêché complétement la formation de métastases dans le foie lorsque la tumeur a été inoculée dans la rate et a diminué le nombre et la dimension des métastases du poumon lorsque la tumeur était inoculée dans le muscle. En conséquence, les polyisolysines et les polyisoornithines produites selon l'invention se sont révélées être des inhibiteurs de la prolifération des cellules tumorales. Parmi ces composés, des poly-isolysines ont présenté un effet inhibiteur étonnamment fort. Cet effet peut être facilement comparé à l'effet produit par les meilleurs médicaments cytostatiques connus en ce qui concerne la survie des animaux. L'effet antimétastatique étonnamment bon des composés de l'invention est évident. Les composés de l'invention ont un avantage supplémentaire en ce qu'ils présentent une faible toxicité, qui est bien inférieure à celle des  Treatment with SZTP completely prevented the formation of metastases in the liver when the tumor was inoculated into the spleen and decreased the number and size of lung metastases when the tumor was inoculated into the muscle. As a result, the polyisolysins and polyisoornithines produced according to the invention have been found to be inhibitors of tumor cell proliferation. Among these compounds, poly-isolysines exhibited a surprisingly strong inhibitory effect. This effect can be easily compared to the effect produced by the best known cytostatic drugs with respect to animal survival. The surprisingly good antimetastatic effect of the compounds of the invention is obvious. The compounds of the invention have the additional advantage that they exhibit low toxicity, which is much lower than that of

médicaments cytostatiques appliqués jusqu'à maintenant.  cytostatic drugs applied until now.

Les études biologiques de la Demanderesse ont montré dose tolérable maximale par exemple que l'indice thérapeutique dose efficace minimale a une valeur supérieure à 10, alors que cette valeur est généralement bien en dessous de 10 dans le cas de la plupart des  Biological studies of the Applicant have shown maximum tolerable dose for example that the minimum effective dose therapeutic index has a value greater than 10, while this value is generally well below 10 in the case of most

médicaments cytostatiques connus.known cytostatic drugs.

On n'a observé aucune différence entre la réponse biologique des mâles et des femelles à ce propos, ce qui est aussi  There was no difference between the biological response of males and females in this respect, which is also

un avantage.an advantage.

Les données suivantes illustrent l'effet anti-tumeur.  The following data illustrate the anti-tumor effect.

Expériences in vitro Les Tableaux la à lc montrent l'effet des polyisolysines produites par divers procédés, des polyisoornithines produites par le procédé de l'invention et de l'-polylysine sur la  In Vitro Experiments Tables 1a to 1c show the effect of the polyisolysins produced by various processes, polyisoornithines produced by the process of the invention and polylysine on the

prolifération des cellules K-562.proliferation of K-562 cells.

Les paramètres expérimentaux étaient les suivants: Cellules: la lignée de cellules d'érythroleucémie humaine K-562  The experimental parameters were as follows: Cells: human erythroleukemia cell line K-562

(Karolinska Institute, Stockholm) a été utilisée.  (Karolinska Institute, Stockholm) was used.

Nombre de cellules: 5x104/ml, dans des tubes à essais en verre  Number of cells: 5x104 / ml, in glass test tubes

contenant 5-6 mI de milieu.containing 5-6 mI of medium.

Hombre de sondes: 3 tubes à essais par dose.  Hombre of probes: 3 test tubes per dose.

nilieu: Parkers n-199 complété avec 10%X de sérum bovin foetal (Flow  nilieu: Parkers n-199 supplemented with 10% X fetal bovine serum (Flow

Laboratories, Irvine, Scotland).Laboratories, Irvine, Scotland).

Température, atmosphère: 37 C, 5% de C02 + 95% d'air.  Temperature, atmosphere: 37 C, 5% C02 + 95% air.

2622 1 952622 1 95

Dose: 1-10-100 pg/ml.Dose: 1-10-100 μg / ml.

Evaluation: comptage de cellules 24, 40, 72 et 96 heures après la  Evaluation: cell count 24, 40, 72 and 96 hours after

dilution des cultures, avec une chambre de Buerker.  dilution of cultures, with a Buerker chamber.

Nombre d'expériences: 2/composé.Number of experiments: 2 / compound.

Le Tableau la montre que des traitements par SZTP-14, SZTP-15, SZTP-16, SZTP-17 et SZTP-18, mais surtout SZTP-14, ont abouti à une notable inhibition dépendant de la dose, de la prolifération des cellules. Il est remarquable que même un traitement par 1 pg/ml a provoqué un effet antiprolifération bien défini. Le Tableau lb cependant montre qu'au contraire, H-17 et K-17 n'avaient pas d'influence sur la prolifération des cellules  The Table shows that treatments with SZTP-14, SZTP-15, SZTP-16, SZTP-17 and SZTP-18, but especially SZTP-14, resulted in a significant dose-dependent inhibition of cell proliferation. . It is remarkable that even treatment with 1 μg / ml caused a well-defined antiproliferation effect. Table lb, however, shows that, on the contrary, H-17 and K-17 had no influence on cell proliferation.

K-562.K-562.

Le Tableau lc montre que l'-polylysine a provoqué la stagnation du nombre des cellules par rapport à ce qui est observé dans le témoin, mais qu'elle ne provoque pas de diminution du  Table 1c shows that polylysine caused the stagnation of the number of cells compared to that observed in the control, but does not cause a decrease in the number of cells.

nombre de cellules même à une dose élevée (100 pg/ml).  number of cells even at a high dose (100 μg / ml).

Les valeurs montrées dans les Tableaux indiquent le nombre de cellules évalué à des moments donnés dans le temps. Les cellules ont été comptées dans 3 tubes à essais pour chacune des doses et dans 3 tubes à essais à titre de témoin, à chaque moment  The values shown in the Tables indicate the number of cells evaluated at given moments in time. The cells were counted in 3 test tubes for each of the doses and in 3 test tubes as a control at each moment

dans le temps.in time.

Tableau la Il montre l'effet des composés préparés selon l'invention (SZTP-14-15-16-17-18) sur la lignée cellulaire K-562,  Table II shows the effect of the compounds prepared according to the invention (SZTP-14-15-16-17-18) on the K-562 cell line,

in vitro. Traitement: 1-10-100 pg/mg, 24 heures après la dilution de la culture.in vitro. Treatment: 1-10-100 μg / mg, 24 hours after dilution of the culture.

Tabl eau la Nombre de cellules x 103/mel de liquide nutritif SZTP-14 48h 72h 96h 100 /ug/ml 0 0 0 /ug/ml 90 90 150  Tabl water Number of cells x 103 / nutrient liquid mel SZTP-14 48h 72h 96h 100 / ug / ml 0 0 0 / ug / ml 90 90 150

80 12080 120

80 14080 140

1 /ug/ml 80 170 1801 / ug / ml 80 170 180

180 190180 190

120 150120 150

Témoin 130 220 260Witness 130 220 260

230 230230 230

110 220 230110 220 230

SZTP-15SZTP-15

/ug/ml 40 10 10/ ug / ml 40 10 10

20 1020 10

10 2010 20

10 /ug/ml 80 100 16010 / ug / ml 80 100 160

120 110120 110

100 140100 140

1 /ug/mî 120 150 2001 / ug / ml 120 150 200

140 190140,190

120 120 210120 120 210

Témoin 140 210 270Witness 140 210 270

190 250190,250

190 280190,280

Tableau la (suite) 48h 72h 96hTable la (continued) 48h 72h 96h

SZTP-16SZTP-16

/ug/ml 100 160 160/ ug / ml 100 160 160

120 120 140120 120 140

140 140140 140

/ug/ml 120 160 220/ ug / ml 120 160 220

160 240160,240

180 240180,240

1 /ug/ml 140 180 2601 / ug / ml 140 180 260

210 280210,280

240 250240 250

Témoin 140 220 280Witness 140 220 280

200 260200,260

140 200 270140,200 270

SZTP-17SZTP-17

/ug/Ml 110 180 200/ ug / Ml 110 180 200

190 210190,210

200 200200,200

10 /ug/ml 120 200 26010 / μg / ml 120 200 260

200 260200,260

190 280190,280

Témoin 150 260 280Witness 150 260 280

210 280210,280

130 210 260130 210 260

Control 140 250 280Control 140 250 280

220 280220 280

220 260220,260

Tableau la (fin) 48h 72h 96hTable the (end) 48h 72h 96h

SZTP-18SZTP-18

/ug/ml 100 160 180/ ug / ml 100 160 180

130 180130 180

130 160130,160

10 /ug/ml 120 180 22010 / ug / ml 120 180 220

160 230160,230

190 230190,230

1 1 1ug/Ml 140 200 2801 1 1ug / Ml 140 200 280

210 260210,260

220 280220 280

Témoin- 140 220 280 TémoinWitness - 140 220 280 Witness

230 280230 280

*230 270* 230 270

Tableau lbTable lb

Il montre l'effet d'un traitement par H-17 et K-17 sur  It shows the effect of treatment with H-17 and K-17 on

la prolifération des cellules K-562 in vitro.  proliferation of K-562 cells in vitro.

Traitement: 1-10-100 pg/ml, 24 heures après la dilution de la culture. Tabl eau lb Nombre de cellules x 103/ml de liquide nutritif 48h 72h 96h  Treatment: 1-10-100 μg / ml, 24 hours after dilution of the culture. Tabl water lb Number of cells x 103 / ml of nutrient liquid 48h 72h 96h

H-17H-17

/ug/m1 125 230 280/ ug / m1 125 230 280

210 270210,270

210 280210,280

/ug/ml 120 220 290/ ug / ml 120 220 290

240 280240,280

210 220210,220

1 /ug/mî 130 240 2901 / ug / ml 130 240 290

240 290240,290

220 270220,270

K-17 100 /ug/ml 120 220 280K-17 100 / ug / ml 120 220 280

210 290210,290

220 270220,270

/ug/ml 125 240 290/ ug / ml 125 240 290

240 290240,290

210 270210,270

1 /ug/ml 140 240 2901 / ug / ml 140 240 290

220 280220 280

230 280230 280

Témoin 120 210 290Witness 120 210 290

200 280200,280

120 220 285120,220,285

Tableau lcTable lc

Il montre l'effet d'un traitement par R-3 sur la  It shows the effect of R-3 treatment on the

lignée cellulaire K-562, in vitro.K-562 cell line, in vitro.

Traitement: 1-10-100 pg/mg, 24 heures après la dilution de la culture.  Treatment: 1-10-100 μg / mg, 24 hours after dilution of the culture.

Tableau 1lTable 11

Nombre de cellules x 103/ml de liquide nutritif 48h 72h 96h /ug/ml 110 110 100  Number of cells x 103 / ml of nutrient liquid 48h 72h 96h / ug / ml 110 110 100

120 110 100120 110 100

120 110120 110

/ug/ml 130 120 120/ ug / ml 130 120 120

110 110110 110

120 120 110120 120 110

1 /ug/ml 110 110 1001 / ug / ml 110 110 100

110 110110 110

120 110120 110

Témoin 120 250 300Witness 120 250 300

240 290240,290

125 240 290125,240,290

Etudes in vivo a) Tumeur L1210, étude de SZTP-14  In vivo studies a) Tumor L1210, study of SZTP-14

Origine de la tumeur: Chester Beatty Institute, Londres.  Origin of the tumor: Chester Beatty Institute, London.

Souche animale: DBR/2 consanguine, élevage personnel.  Animal strain: DBR / 2 consanguine, personal breeding.

Poids et sexe des animaux: 20-23 g, femelles, 5 animaux par groupe. Nombre de cellules tumorales: 105 par animal, par voie intrapéritonéale. Traitement: 50 mg/kg, par voie intrapéritonéale, 24 heures après l'inoculation de la tumeur, une fois par jour pendant  Weight and sex of animals: 20-23 g, females, 5 animals per group. Number of tumor cells: 105 per animal, intraperitoneally. Treatment: 50 mg / kg, intraperitoneally, 24 hours after inoculation of the tumor, once daily during

8 jours.8 days.

Groupe témoin: solution saline physiologique, 0,2 ml, par voie intrapéritonéale.  Control group: physiological saline solution, 0.2 ml, intraperitoneally.

Evaluation: survie des animaux.Evaluation: survival of animals.

Résultats: comme le montre le Tableau 2, la survie des animaux traités dépassait celle des témoins. Dix jours après l'inoculation de la tumeur, aucune souris du groupe témoin n'était en vie. En même temps, tous les animaux traités étaient en vie. Le premier animal traité mourait 13 jours et le dernier 15 jours après  Results: As shown in Table 2, the survival of the treated animals exceeded that of the controls. Ten days after inoculation of the tumor, no mice in the control group were alive. At the same time, all the treated animals were alive. The first treated animal died 13 days and the last 15 days after

I'inoculation de la tumeur.Inoculation of the tumor.

Tableau 2Table 2

Effet d'un traitement quotidien à raison de 50 mg/kg sur la survie de souris DBR/2 inoculées avec une tumeur L1210 Jours après inoculation Témoins vivants Souris traitées vivantes  Effect of daily treatment at 50 mg / kg on survival of DBR / 2 mice inoculated with L1210 tumor Days after inoculation Live controls Live treated mice

9 3 59 3 5

- 5- 5

11 - 511 - 5

12 - 512 - 5

13 - 413 - 4

14 - - 314 - - 3

--

2622 1 952622 1 95

b) Tumeur ascitique P-366, traitement avec SZTP-14  b) Ascitic tumor P-366, treatment with SZTP-14

Souche animale: hybride BDF/1, élevage personnel.  Animal strain: hybrid BDF / 1, personal breeding.

Poids et sexe des animaux: 20-23 g, mâles, 5 souris par groupe.  Weight and sex of animals: 20-23 g, males, 5 mice per group.

Nombre de cellules tumorales: 2,8xl06 par animal, par voie intrapéritonéale. Traitement: 10 mg/kg, par voie intrapéritonéale, il a commencé 24 heures après l'inoculation de la tumeur, une fois par jour. Groupe témoin: 0,2 mi de solution saline physiologique, une fois  Number of tumor cells: 2.8 × 10 6 per animal, intraperitoneally. Treatment: 10 mg / kg, intraperitoneally, it started 24 hours after tumor inoculation, once a day. Control group: 0.2 mi of physiological saline, once

par jour, par voie intrapéritonéale.  per day, intraperitoneally.

Evaluation: survie des animaux.Evaluation: survival of animals.

Résultats: le Tableau 3 montre le nombre d'animaux survivants.  Results: Table 3 shows the number of surviving animals.

Toutes les souris traitées ont survéçu aux animaux du  All the treated mice survived the animals of the

groupe témoin.a group of witnesses.

Tableau 3Table 3

Effet d'un traitement quotidien avec 10 mg/kg de SZTP-14 sur la survie des souris BDF/1 inoculées avec une tumeur ascitique P-388 Jours après inoculation Témoins vivants Souris traitées vivantes  Effect of daily treatment with 10 mg / kg SZTP-14 on the survival of BDF / 1 mice inoculated with ascitic tumor P-388 Days after inoculation Live controls Live treated mice

9 4 59 4 5

10 - 510 - 5

ll - 5ll - 5

12 - 512 - 5

13 - 513 - 5

14 - 514 - 5

15 -15 -

16 - 216 - 2

17 - 117 - 1

2622 1 9 52622 1 9 5

c) Tumeur ascitique d'Ehrlich, traitement avec SZTP-14  c) Ehrlich ascitic tumor, treatment with SZTP-14

Souche animale: suisse, non consanguine, élevage personnel.  Animal strain: Swiss, not consanguineous, animal husbandry.

Poids et sexe des animaux: 20 9, 5 mâles et 5 femelles par groupe. Nombre de cellules tumorales: 106 par animal. Traitement: 50 mg/kg et 75 mg/kg, par voie intrapéritonéale, il a commencé 24 heures après l'inoculation de la tumeur,  Weight and sex of animals: 20 9, 5 males and 5 females per group. Number of tumor cells: 106 per animal. Treatment: 50 mg / kg and 75 mg / kg, intraperitoneally, it started 24 hours after inoculation of the tumor,

une fois par jour pendant 20 jours.once a day for 20 days.

Groupe témoin: 0,2 ai de solution saline physiologique,  Control group: 0.2 ai physiological saline,

par voie intrapéritonéale.intraperitoneally.

Evaluation: mesure du poids corporel, tous les jours de survie. Les animaux vivants 55 après l'inoculation de la tumeur ont été tués, autopsiés, la quantité d'ascites a été mesurée et la formation d'une tumeur solide dans  Assessment: measurement of body weight, every day of survival. Live animals after tumor inoculation were killed, autopsied, the amount of ascites was measured and the formation of a solid tumor in

la cavité péritonéale a été enregistrée.  the peritoneal cavity has been recorded.

Résultats: Le Tableau 4 montre le poids corporel des souris à partir du 16ème jour suivant l'inoculation de la tumeur. Les animaux du groupe témoin mouraient entre le 17ème et le 22ème jour. L'excès de poids indique la formation d'ascites tumorales. Dans chaque groupe traité, les animaux étaient vivants (à l'exception d'un par groupe) 55 jours après l'inoculation de la tumeur, Les animaux ont été tués ensuite. Le Tableau 5 montre la quantité d'ascites et la présence de tumeur solide dans la cavité péritonéale. Ceci signifie qu'on n'a trouvé aucun animal dépourvu de tumeur, mais sur souris traitées, 16 étaient vivantes 33 jours après  Results: Table 4 shows the body weight of the mice from the 16th day following the inoculation of the tumor. The animals in the control group died between the 17th and the 22nd day. Excess weight indicates the formation of tumor ascites. In each treated group, the animals were alive (except for one group) 55 days after inoculation of the tumor. The animals were subsequently killed. Table 5 shows the amount of ascites and the presence of solid tumor in the peritoneal cavity. This means that no tumor-free animals were found, but on treated mice, 16 were alive 33 days later.

la mort de la dernière souris du groupe témoin.  the death of the last mouse of the control group.

2622 1 952622 1 95

Tableau 4Table 4

Effet d'un traitement intrapéritonéal par 50 mg/kg et 75 mg/kg de SZTP-14 (pendant 20 jours) sur le poids corporel et la survie de souris suisses males et femelles inoculées avec une tumeur ascitique d'Ehrlich. Poids corporel avant l'inoculation de la  Effect of intraperitoneal treatment with 50 mg / kg and 75 mg / kg SZTP-14 (for 20 days) on body weight and survival of male and female Swiss mice inoculated with an Ehrlich ascitic tumor. Body weight before inoculation of the

tumeur: 20 g.tumor: 20 g.

0 = mort en raison de la tumeur; + = mort pour d'autres raisons.  0 = death due to the tumor; + = dead for other reasons.

Jour après inoculation Témoin Témoin o 75 mg/kg  Day after inoculation Witness Control o 75 mg / kg

de tumeur 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5.  of tumor 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5.

16. 43 37 41 46 40 40 34 40 35 41 17 22 24 21 22  16. 43 37 41 46 40 40 34 40 35 41 17 22 24 21 22

17. 44 39 42 46 41 40 35 0 35 42 17 23 24 25 22  17. 44 39 42 46 41 40 35 0 35 42 17 23 24 25 22

18. 45 42 43 47 49 42 35 0 35 43 18 23 24 21 24  18. 45 42 43 47 49 42 35 0 35 43 18 23 24 21 24

19. 0 43 43 50 0 0 36 0 0 44 19 23 24 21 24  19. 0 43 43 50 0 0 36 0 0 44 19 23 24 21 24

20. 0 46 0 42 0 0 42 0 0 46 16 21 23 20 21  20. 0 46 0 42 0 0 42 0 0 46 16 21 23 20 21

21. 0 46 0 43 0 47 0 047 18 23 25 25 22  21. 0 46 0 43 0 47 0 047 18 23 25 25 22

22. 0 0 0 0 0 0 000 0 51 19 25 26 25 24  22. 0 0 0 0 0 0 000 0 51 19 25 26 25 24

24. 0 0 0 00 0 0 0 0 0 192426242524. 0 0 0 00 0 0 0 0 0 1924262425

25. 20 24 26 24 2625. 20 24 26 24 26

26. 20 24 27 24 25.526. 20 24 27 24 25.5

27. 21 25 28 25 2627. 21 25 28 25 26

28. 21 25 28 25 2628. 21 25 28 25 26

29. 21 25 28 25 2629. 21 25 28 25 26

33. 22 25 28 25 2633. 22 25 28 25 26

34. 22 25 28 25 2634. 22 25 28 25 26

42. 23 26 27 25 2842. 23 26 27 25 28

50. 24 27 27 25 2850. 24 27 27 25 28

55. 26 29 0 27 3255. 26 29 0 27 32

Tableau 4 (fin) Jour après inoculation 75 mg/kg c? 50 mg/kg 50 mg/kg o  Table 4 (end) Day after inoculation 75 mg / kg c? 50 mg / kg 50 mg / kg o

de tumeur 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5.  of tumor 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5.

16. 28 23 28 25 29 18 19 22 23 + 29 30 31 26 27  16. 28 23 28 25 29 18 19 22 23 + 29 30 31 26 27

17. 28 23 28 24 28 18 19 22 23 + 28 30 31 26 28  17. 28 23 28 24 28 18 19 22 23 + 28 30 31 26 28

18. 29 24 27 25 30 19 20 23 23 + 29 30 32 27 29  18. 29 24 27 25 30 19 20 23 23 + 29 30 32 27 29

19. 29 24 28 26 30 20 20 23 23 + 29 30 32 28 29  19. 29 24 28 26 30 20 20 23 23 + 29 30 32 28 29

20. 27 22 25 24 27 17 18 21 21 + 27 28 30 24 27  20. 27 22 25 24 27 17 18 21 21 + 27 28 30 24 27

21. 29 23 27 27 29 18 18 22 22 + 27 30 29 25 27  21. 29 23 27 27 29 18 18 22 22 + 27 30 29 25 27

22. 29 24 28 27 30 20 20 24 22 + 29 30 32 25 29  22. 29 24 28 27 30 20 20 24 22 + 29 30 32 25 29

24. 29 25 29 28 31 2020 24 23 + 29 30 32 26 30  24. 29 25 29 28 31 2020 24 23 + 29 30 32 26 30

25. 30 26 30 29 31 21 21 24 24 + 30 30 32 26 31  25. 30 26 30 29 31 21 21 24 24 + 30 30 32 26 31

26. 30 25 30 29 31 22 22 24 25 + 30 31 32 26 31  26. 30 25 30 29 31 22 22 24 25 + 30 31 32 26 31

27. 30.526 31 30 31 22 22 25 25 + 30 31 32 25 32  27. 30.526 31 30 31 22 22 25 25 + 30 31 32 25 32

28. 31 26 31 30 31 22 22 25 25 + 30 31 31 25 32  28. 31 26 31 30 31 22 22 25 25 + 30 31 31 25 32

29. 31 26 31 30 31 22 22 25 25 + 30 31 32 26 32  29. 31 26 31 30 31 22 22 25 25 + 30 31 32 26 32

33. 30 27 32 31 32 23 22 27 26 + 28 32 30 24 33  33. 30 27 32 31 32 23 22 27 26 + 28 32 30 24 33

34. 30 27 32 31 32 23 22 30 26 + 28 32 30 24 33  34. 30 27 32 31 32 23 22 30 26 + 28 32 30 24 33

42. 32 29 33 34 28 24 25 30 31 + 27 33 30 26 35  42. 32 29 33 34 28 24 25 30 31 + 27 33 30 26 35

50. 34 30 35 37 24 24 26 30 36 0 34 30 26 36  50. 34 30 35 37 24 24 26 30 36 0 34 30 26 36

55. 33 32 38 0 37 26 28 32 43 + 0 36 31 27 38  55. 33 32 38 0 37 26 28 32 43 + 0 36 31 27 38

2622 1 9 52622 1 9 5

Tableau 5Table 5

Rscites et tumeur solide dans la cavité péritonéale de souris suisses inoculées avec une tumeur ascitique d'Ehrlich, traitées avec 50 mg/kg et 75 mg/kg de SZTP-14 et tuées 55 jours après lI'inoculation de la tumeur. Traitement mg/kg 75 mg/kg 50 mg/kg 50 mg/kg  Rscites and solid tumor in the peritoneal cavity of Swiss mice inoculated with an Ehrlich ascitic tumor, treated with 50 mg / kg and 75 mg / kg of SZTP-14 and killed 55 days after tumor inoculation. Treatment mg / kg 75 mg / kg 50 mg / kg 50 mg / kg

Q 09 0Q 09 0

Rscites mli - - 0 - 4 1 6 - O- - 5 2 4 0 - 1 -4 0 Tumeur solide dans la cavité + + 0 + + +++ 0 + + + + O. + 0 abdominale O: l'animal mourait plus tôt  Rscites mli - - 0 - 4 1 6 - O- - 5 2 4 0 - 1 -4 0 Solid tumor in the cavity + + 0 + + +++ 0 + + + + O. + 0 abdominal O: the animal was dying earlier

+: tumeur solide dans la cavité abdominale.  +: solid tumor in the abdominal cavity.

Inhibition des métastases tumorales avec SZTP-14 a) Tumeur du poumon de Lewis (LLT), inoculation dans la rate  Inhibition of tumor metastasis with SZTP-14 a) Lewis lung tumor (LLT), inoculation in the spleen

Souche animale: C57B1 consanguine, LRTI, Gôdôllo, Hongrie.  Animal strain: Inbred C57B1, LRTI, Gôdôllo, Hungary.

Poids et sexe des animaux: 20 à 23 g, femelles (6 témoins et 4  Weight and sex of the animals: 20 to 23 g, females (6 witnesses and 4

traitées).treated).

Nombre de cellules tumorales: 5x106 cellules LLT inoculées dans la rate. Traitement: 75 mg/kg, pendant 8 jours, il a commencé 24 heures  Number of tumor cells: 5x106 LLT cells inoculated into the spleen. Treatment: 75 mg / kg, for 8 days, it started 24 hours

après l'inoculation de la tumeur.after inoculation of the tumor.

Evaluation: Les animaux ont été tués et les métastases du foie ont été dénombrées 9 jours après l'inoculation de la tumeur. Résultats: Le Tableau 6 montre le nombre de métastases. On n'a trouvé aucune métastase dans le foie après le  Assessment: Animals were killed and liver metastases were counted 9 days after tumor inoculation. Results: Table 6 shows the number of metastases. No metastases were found in the liver after

traitement par SZTP-14.treatment with SZTP-14.

2622 1 9 52622 1 9 5

Tableau 6Table 6

Effet d'un traitement par SZTP-14 (75 mg/kg par voie intrapéritonéale pendant 8 jours) sur le nombre de métastases du foie chez des souris C57B1 inoculées avec LLT dans la rate Nombre de métastases du foie Témoin 31 20 63 36 38 56 (x = U0,66; s = 16,02; n = 6) SZTP-14 0 0 0 0 (n = 4) b) Tumeur du poumon de Lewis (LLT), inoculation dans le muscle de la cuisse droite  Effect of treatment with SZTP-14 (75 mg / kg intraperitoneally for 8 days) on the number of liver metastases in C57B1 mice inoculated with LLT in the spleen Number of liver metastases Control 31 20 63 36 38 56 (x = U0.66, s = 16.02, n = 6) SZTP-14 0 0 0 0 (n = 4) b) Lewis lung tumor (LLT), inoculation in the muscle of the right thigh

Souche animale: C57B1 consanguine, LRTI, G6dôllo, Hongrie.  Animal strain: Inbred C57B1, LRTI, G6dollo, Hungary.

Poids et sexe des animaux: 20 à 22 g, femelles.  Weight and sex of animals: 20 to 22 g, females.

Nombre d'animaux: 5 par groupe.Number of animals: 5 per group.

Nombre de cellules tumorales: 5x105 cellules/animal par voie intramusculaire dans les muscles de la cuisse du membre inférieur droit. Dix jours après l'inoculation de la  Number of tumor cells: 5x105 cells / animal intramuscularly in the muscles of the thigh of the right lower limb. Ten days after the inoculation of the

tumeur, l'extrémité affectée de tumeurs a été enlevée.  tumor, the affected end of tumors was removed.

Rprès l'opération, entre le 11ème et le 17ème jour suivant l'inoculation de la tumeur, on a administré le traitement suivant: tous les jours 50 mg/kg de SZTP-14 par voie intrapéritonéale. Des témoins ont reçu 0,2 ml de solution saline physiologique tous les jours par voie intrapéritonéale, Evaluation: Les animaux ont été tués le 18ème jour suivant l'inoculation de la tumeur. Les nombre et volume moyens des métastases du poumon ont été déterminés au stéréomicroscope. Résultats: Le Tableau 7 montre les nombre et volume moyens des métastases du poumon. Le traitement par SZTP- 14 a réduit notablement les nombre et volume moyens des métastases du  After the operation, between the 11th and 17th days following the inoculation of the tumor, the following treatment was administered: 50 mg / kg of SZTP-14 per day intraperitoneally. Controls were administered 0.2 ml of physiological saline daily intraperitoneally. Evaluation: The animals were killed on the 18th day after inoculation of the tumor. The average number and volume of lung metastases were determined by stereomicroscope. Results: Table 7 shows the average number and volume of lung metastases. Treatment with SZTP-14 significantly reduced the mean number and volume of metastases

poumon.lung.

2622 19 52622 19 5

Tableau 7Table 7

Effet d'un traitement par SZTP-14 (50 mg/kg chaque jour, par voie intrapéritonéale entre les 11ème et 17ème jours après l'inoculation de la tumeur) sur les nombre et volume moyens de métastases du poumon chez des souris C7B1 inoculées par voie intramusculaire  Effect of treatment with SZTP-14 (50 mg / kg daily, intraperitoneally between days 11 and 17 after tumor inoculation) on the mean number and volume of lung metastases in C7B1 mice inoculated with intramuscular

avec une tumeur du poumon de Lewis.with a Lewis lung tumor.

Traitement Nombre de métastases Uolume des métastases en moyenne (mm3) en moyenne Témoin 63,13 + 27,53 49,45 29,07  Treatment Number of metastases Average number of metastases (mm3) on average 63.13 + 27.53 49.45 29.07

SZTP-14 26,29 + 18,87 20,10 35,38SZTP-14 26.29 + 18.87 20.10 35.38

Démontration de l'effet antiviral Réduction dans la synthèse du virus de la mosaîque du tabac  Demonstration of the antiviral effect Reduction in the synthesis of the tobacco mosaic virus

Des plants de tabac intacts (Nicotiana tabacum cv.  Intact tobacco plants (Nicotiana tabacum cv.

Samsun), sensibles à I'infection par le virus de la mosaïque du tabac (TMU), ont été inoculés de façon mécanique. De la poudre de carborundum (dimension particulaire: 500 mesh) a été utilisée comme abrasif. L'inoculum contenait 200 pig de virus de la mosaïque du tabac purifié TMi (souche TMilU U1) dans du tampon au phosphate de Sôrensen 0,1 M (pH 7,2). Des feuilles intactes ont été traitées avec une solution de SZTP-14 en pulvérisation foliaire 3 jours après l'inoculation. Les traitements ont été répétés trois jours consécutifs. La gravité des symptômes a été évaluée deux semaines après l'inoculation. Des échantillons de feuilles ont été aussi prélevés Il jours après l'inoculation à partir de toutes les séquences de feuilles des plants inoculés, c'est-à-dire de feuilles  Samsun), susceptible to infection by tobacco mosaic virus (TMU), were mechanically inoculated. Carborundum powder (particle size: 500 mesh) was used as an abrasive. The inoculum contained 200 pig of purified tobacco mosaic virus TMi (strain TMilU U1) in 0.1 M Sørensen phosphate buffer (pH 7.2). Intact leaves were treated with a solution of SZTP-14 as a foliar spray 3 days after inoculation. The treatments were repeated for three consecutive days. The severity of symptoms was assessed two weeks after inoculation. Leaf samples were also taken 11 days after inoculation from all the leaf sequences of inoculated plants, ie leaves.

de différentes hauteurs et d'âge varié.  different heights and ages.

La concentration en virus a été mesurée à partir d'un gramme des échantillons congelés. Des échantillons de feuilles ont été homogénéisés dans 4 mi de tampon au phosphate (pH 7,2), puis centrifugés dans une centrifugeuse Eppendorf (environ 10.000 tpm  The virus concentration was measured from one gram of the frozen samples. Leaf samples were homogenized in 4 ml phosphate buffer (pH 7.2) and centrifuged in an Eppendorf centrifuge (approximately 10,000 rpm).

2622 1 9 52622 1 9 5

pendant 5 minutes). On a utilisé 15 pl de surnageant pour des mesures quantitatives. Une immunoélectrophorèse à fusées a été employée pour l'estimation de la teneur en virus avec des sérums anti-TlU (U1) spécifiques (1 pl d'immunoglobuline/1 cm). Du tampon au barbiturate de sodium (0,2 M, pH 6,6) a été utilisé comme tampon courant, La teneur en virus a été calculée à partir de la hauteur des pics de précipitation, avec une courbe d'étalonnage standard.  for 5 minutes). Fifteen ul of supernatant was used for quantitative measurements. Rocket immunoelectrophoresis was used to estimate the virus content with specific anti-TlU (U1) sera (1 μl immunoglobulin / 1 cm). Sodium barbiturate buffer (0.2 M, pH 6.6) was used as the current buffer. The virus content was calculated from the height of the precipitation peaks, with a standard calibration curve.

Tableau 8Table 8

Exemple pour l'estimation de l'effet antiviral Traitement par SZTP-14 Teneur en virus mg/I 11 mg/ml 20 mg/I 24,6 mg/ml 2 mg/1 29,3 mg/ml Témoin 51,3 mg/ml Les isopolypeptides selon l'invention sous la forme de la base libre et des sels non-toxiques, peuvent être utilisés dans  Example for the estimation of the antiviral effect Treatment with SZTP-14 Virus content mg / I 11 mg / ml 20 mg / I 24.6 mg / ml 2 mg / 1 29.3 mg / ml Control 51.3 mg The isopolypeptides according to the invention in the form of the free base and the non-toxic salts can be used in

des préparations pharmaceutiques en tant que substances efficaces.  pharmaceutical preparations as effective substances.

R ce propos, ils sont mélangés à des supports et des agents auxiliaires couramment utilisés dans l'industrie pharmaceutique et ils sont donc transformés en produits pharmaceutiques. De plus, les composés selon l'invention peuvent être mis en oeuvre à la fois sous la forme de base libre et de sel pour augmenter la résistance des plantes à l'infection virale, après mélange avec des agents  In this regard, they are mixed with carriers and auxiliary agents commonly used in the pharmaceutical industry and are thus transformed into pharmaceuticals. In addition, the compounds according to the invention can be used both in the form of free base and salt to increase the resistance of plants to viral infection, after mixing with agents.

auxiliaires couramment utilisés dans la protection des végétaux.  auxiliaries commonly used in plant protection.

Les sels qui sont acceptables en pharmacie, sont par exemple des sels d'addition acides comme un chlorhydrate, un bromhydrate, un iodhydrate, un sulfate, un phosphate, un nitrate, un oxalate, un fumarate, un gluconate, un tartrate, un maléate, un acétate, un citrate, un benzoate, un ascorbate, un lactate, un alginate, etc. Les produits pharmaceutiques contenant les composés selon l'invention comme agents actifs, peuvent être des solutions injectables, des comprimés, des dragées, des suppositoires, des suspensions, des solutions à boire, des mélanges pulvérulents, etc. La quantité efficace du point de vue pharmaceutique des composés selon l'invention dépend du mode d'application et de l'état du malade. En général, une dose quotidienne de 0,02-20 mg/kg de poids corporel est administrée en doses réparties en 2 à 4 prises par jour. Les doses sont supérieures dans le cas d'une  The salts which are pharmaceutically acceptable are, for example, acid addition salts such as a hydrochloride, a hydrobromide, a hydroiodide, a sulfate, a phosphate, a nitrate, an oxalate, a fumarate, a gluconate, a tartrate or a maleate. , an acetate, a citrate, a benzoate, an ascorbate, a lactate, an alginate, etc. The pharmaceutical products containing the compounds according to the invention as active agents may be injectable solutions, tablets, dragees, suppositories, suspensions, drinking solutions, powder mixtures, etc. The pharmaceutically effective amount of the compounds according to the invention depends on the mode of application and the condition of the patient. In general, a daily dose of 0.02-20 mg / kg body weight is administered in divided doses in 2 to 4 doses per day. The doses are higher in the case of a

administration orale.oral administration.

Des formes avantageuses de médicament sont les solutions à injecter qui peuvent être administrées par voie intraveineuse, sous-cutanée ou intramusculaire. Pour préparer des solutions injectables, on utilise une solution de NaCI isotonique, éventuellement avec un tampon au phosphate, un stabilisant à I'acide ascorbique, etc. Les substances actives peuvent être adminitrées sous forme de préparations médicamenteuses solides et liquides. Dans le cas de formes liquides, on peut ajouter des agents édulcorants  Advantageous forms of drug are injection solutions that can be administered intravenously, subcutaneously or intramuscularly. To prepare injectable solutions, an isotonic NaCl solution is used, optionally with a phosphate buffer, an ascorbic acid stabilizer, etc. The active substances can be administered in the form of solid and liquid drug preparations. In the case of liquid forms, sweetening agents may be added

et/ou des parfums.and / or perfumes.

Des unités solides avantageuses à administrer par voie  Advantageous solid units to be administered by

orale sont par exemple des comprimés, des dragées et des capsules.  oral tablets are for example tablets, dragees and capsules.

Pour préparer ces produits, on mélange l'agent actif avec des supports pharmaceutiques et on presse le mélange en comprimés, on le transforme en dragées ou on l'introduit dans des capsules. Les additifs et agents de remplissage classiques sont utilisés comme supports, par exemple le lactose, le stéarate de magnésium, le saccharose, le talc, I'acide stéarique, la gélatine, I'agar-agar, la pectine, la gomme adragante, le gel de silice colloïdal, I'amidon de mais, I'acide algénique, etc. Le beurre de cacao est  To prepare these products, the active agent is mixed with pharmaceutical carriers and the mixture is compressed into tablets, converted into dragees or introduced into capsules. The conventional additives and fillers are used as carriers, for example lactose, magnesium stearate, sucrose, talc, stearic acid, gelatin, agar-agar, pectin, gum tragacanth, colloidal silica gel, corn starch, alkenic acid, etc. The cocoa butter is

avantageusement employé pour préparer des suppositoires.  advantageously used to prepare suppositories.

Le traitement des plantes est commodément effectué par transformation des composés selon l'invention avec des agents auxiliaires usuels, comme des matières humidifiantes et des supports solides, de préférence le kaolin, en préparations solides ou liquides, de préférence en association avec d'autres substances  The treatment of the plants is conveniently carried out by conversion of the compounds according to the invention with usual auxiliary agents, such as moistening substances and solid supports, preferably kaolin, in solid or liquid preparations, preferably in combination with other substances.

2622 1 9 52622 1 9 5

actives. On prépare une solution ou une suspension contenant le composé selon l'invention à une concentration de 1 à 50 ppm à partir de la préparation ainsi obtenue, et on l'applique de façon  active. A solution or a suspension containing the compound according to the invention at a concentration of 1 to 50 ppm is prepared from the preparation thus obtained, and it is applied in a

connue à des plantes, de préférence à raison de 0,5 à 5 g/ha.  known to plants, preferably at 0.5 to 5 g / ha.

L'invention est davantage illustrée en référence aux  The invention is further illustrated with reference to

exemples non-limitatifs suivants.following non-limiting examples.

EXEMPLE 1EXAMPLE 1

Bromhydrate de poly-L-lysine a) Chlorhydrate de l'ester p-nitrophénylique de  Poly-L-Lysine Hydrobromide a) P-Nitrophenyl Ester Hydrochloride

N-a -benzyloxycarbonyl-L-lysine.N-α-benzyloxycarbonyl-L-lysine.

On a dissous 10 g d'ester p-nitrophénylique de N-a-  10 g of N-α-p-nitrophenyl ester were dissolved

benzyloxycarbonyl -(N-E-ter-butyloxycarbonyl) -L-lysine dans 40 ml d'acide trifluoroacétique et ajouté une quantité équivalente de HCI 2N dans EtOAc. Rprès un repos d'une heure à la température ambiante, la solution a été évaporée sous vide à un volume moitié,  benzyloxycarbonyl - (N-E-tert-butyloxycarbonyl) -L-lysine in 40 ml of trifluoroacetic acid and added an equivalent amount of 2N HCl in EtOAc. After standing for one hour at room temperature, the solution was evaporated under vacuum to half volume,

puis de l'éther a été ajouté et la solution a été cristallisée.  then ether was added and the solution was crystallized.

Rendement: 8,3 g (96,06X); p.f. 83-86 6C; TLC Rf = 0,68  Yield: 8.3 g (96.06 ×); m.p. 83-86 6C; TLC Rf = 0.68

(n-butanol-acide acétique-eau 4:1:1).  (n-butanol-acetic acid-water 4: 1: 1).

b) Ester p-nitrophénilique de N-a-benzyloxycarbonyl-N-ú-  b) N-α-benzyloxycarbonyl-N-ú- p-nitrophenyl ester

(N'-a-benzyloxycarbonyl-N'-s-ter-butyloxycarbonyl -L-  (N'-N-benzyloxycarbonyl-N'-s-tert-butyloxycarbonyl -L-

lysil)-L-lysinelysil) -L-lysine

On a dissous 7,69 g (20 moles) de N-a- benzyloxycarbonyl-  7.69 g (20 moles) of N-α-benzyloxycarbonyl were dissolved.

(N-e-ter- butyloxycarbonyl) -L- lysine dans de I'acétonitrile absolu. On a ajouté goutte-a-goutte 2,8 mi (20 mmoles) de triéthylamine et ensuite 2, 8 ml de chloroformate d'isobutyle, sous agitation vigoureuse. Après 20 minutes d'activation, on a ajouté 9 g du sel de l'étape a), puis goutte-àgoutte une solution froide de 2,8 mli de triéthylamine dans 5 ml d'acétonitrile. L'agitation a été poursuivie pendant 2 heures à -10 C. Le mélange a été dilué avec 300 si de HCI 0,5 M. Le produit solide a été collecté, séché et recristallisé à partir d'un mélange 1:1 d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole. Rendement:  (N-e-tert-butyloxycarbonyl) -L-lysine in absolute acetonitrile. 2.8 ml (20 mmol) of triethylamine and then 2.8 ml of isobutyl chloroformate were added dropwise with vigorous stirring. After 20 minutes of activation, 9 g of the salt from step a) were added and then a cold solution of 2.8 ml of triethylamine in 5 ml of acetonitrile was added dropwise. Stirring was continued for 2 hours at -10 ° C. The mixture was diluted with 300 μl of 0.5 M HCl. The solid product was collected, dried and recrystallized from a 1: 1 mixture of ethyl acetate and petroleum ether. yield:

12,9 g (89,02X); p.f,:128-131 C. Rnalyse: teneur en -ONp: 99,8X.  12.9 g (89.02X); mp: 128-131 C. Analysis: content of -ONp: 99.8X.

TLC Rf = 0,64 (EtOAc-cyclohexane 3:1). Rf = 0,91 (n-butanol-acide  TLC Rf = 0.64 (EtOAc-cyclohexane 3: 1). Rf = 0.91 (n-butanol-acid

2622 1 9 52622 1 9 5

acétique-eau 4:1-1); HPLC tr. = 8,8 min. (k' = 2,2); colonne: ODSHypersil-6 (125x4 ms); éluant: neOH-CH3CN-tampon de NaORc 0,02 M (pH 4) 40:30:30 en v/v; débit: 1 ml/minute; détection: UU 254 nm. 0c) Chlorhydrate d'ester p-nitrophénylique de h-  acetic acid-water 4: 1-1); HPLC tr. = 8.8 min. (k '= 2.2); column: ODSHypersil-6 (125x4 ms); eluent: neOH-CH3CN-0.02M NaORc buffer (pH 4) 40:30:30 v / v; flow rate: 1 ml / minute; detection: UU 254 nm. 0c) p-nitrophenyl ester hydrochloride of h-

c-benzyloxycarbonyl-N-ú- (N '-ac-benzylocarbonyl-L-lysine) -  c-benzyloxycarbonyl-N- (N '-ac-benzylcarbonyl-L-lysine)

L-lysine On a préparé 10,25 g du sel à partir de 10,5 g d'ester  L-lysine 10.25 g of the salt were prepared from 10.5 g of ester

p-n i trophényl ique de N-a-benzylocarbonyl-N-s- (N'-t- benzyloxy-  N-α-Benzylocarbonyl-N-s- (N'-t-benzyloxy)

carbonyl-N' -c-ter-butyloxycarbonyl-L-lysil)-L-lysine selon la procédure de l'étape a). P.f.: 109-113 C. TLC Rf = 0,70  carbonyl-N '-c-tert-butyloxycarbonyl-L-lysine) -L-lysine according to the procedure of step a). M.p .: 109-113 C. TLC Rf = 0.70

(n-BuOH-RcOH-eau 4:1:1).(n-BuOH-RcOH-water 4: 1: 1).

d) Ester p-nitrophényl ique de N-e-ter-butyloxy-  d) N-e-tert-butyloxy-p-nitrophenyl ester

carbony I -t r i-N-c-benzyloxycarbonyl-L-lysine)  carbonyl-N-α-benzyloxycarbonyl-L-lysine)

On a transformé 5,71 g (15 &moles) de N-a-benzyloxy-  5.71 g (15%) of N-α-benzyloxy-

carbonyl -( -s-ter-butyloxycarbonyl)-L-lysine en anhydrile mixte selon la procédure de l'étape b), avec de la triéthylamine, du chloroformate d'isobutyle dans de l'acétonitrile. On a ajouté 10,5  carbonyl - (-s-tert-butyloxycarbonyl) -L-lysine mixed anhydride according to the procedure of step b), with triethylamine, isobutyl chloroformate in acetonitrile. We added 10.5

g de chlorhydrate de I 'ester p-nitrophénylique de N-a-  N-α-p-nitrophenyl ester hydrochloride

benzyloxycarbonyl-N-E- (N'-a-benzylocarbonyl- L-lysil) -L- I ysine en présence de triéthylamine. On a préparé 13,9 g de produit (85,4%X) selon la procédure de l'étape b). Il a été cristallisé à partir d'acétonitrile et d'éther. P.f.: 145-150 C. Analyse: teneur en ONp 99,6%; TLC Rf = 0,98 (n-BuOH-RcOH-eau 4:1:1); HPLC tr. = 18,2 min. (k' = 8,1); colonne: ODSHypersil-6 (125x4 mm); éluant: MeOH-CH3CN-tampon de NaORc 0,02 M (pH 4) 40:30:30 en v/v; débit: 1  benzyloxycarbonyl-N-E- (N'-α-benzylcarbonyl-L-lysil) -L-lysine in the presence of triethylamine. 13.9 g of product (85.4% X) were prepared according to the procedure of step b). It was crystallized from acetonitrile and ether. M.p .: 145-150 C. Analysis: 99.6% ONp content; TLC Rf = 0.98 (n-BuOH-RcOH-water 4: 1: 1); HPLC tr. = 18.2 min. (k '= 8.1); column: ODSHypersil-6 (125x4 mm); eluent: MeOH-CH3CN-0.02M NaORc buffer (pH 4) 40:30:30 v / v; flow: 1

ml/minute; détection: UU 254 nm.ml / minute; detection: UU 254 nm.

e) Chlorhydrate d'ester p-nitrophénylique de tri-(N-  e) Tri-N-p-nitrophenyl ester hydrochloride

a-benzyloxycarbonyl-L-lysine) On a traité 12,2 g d'ester préparé dans l'étape d) selon la procédure de l'étape a). On a ainsi obtenu 12,1 g (95, 4X)  a-benzyloxycarbonyl-L-lysine) 12.2 g of ester prepared in step d) were treated according to the procedure of step a). 12.1 g (95.4X) were thus obtained.

du sel; p.f.: 108-125 C. TLC Rf = 0,71 (n-BuOH-RcOH-eau 4:1:1).  salt; m.p .: 108-125C. TLC Rf = 0.71 (n-BuOH-RcOH-water 4: 1: 1).

f) Pol y--N-- benzyloxycarbonyl-L-lysine On a condensé 23 g (24 muoles) de chlorhydrate d'ester P-nitrophénylique de tri-(N-a-benzyloxycarbonyl-Llysine) dans 60 ml  f) Poly-N-benzyloxycarbonyl-L-lysine 23 g (24 moles) of tri- (N-α-benzyloxycarbonyl-Lysine) p-nitrophenyl ester hydrochloride were condensed in 60 ml.

26 2 2 1 9526 2 2 1 95

de diméthylsulfoxyde, en présence de 4,5 ml de triéthylamine jusqu'à formation d'un gel. On a isolé le polymère en le versant dans une solution aqueuse de Ha2CO3 à 5%. Rendement: 16,8 g (89,6%). Rnalyse: ZC02: 16,8% (calc.), 16,3% (trouvée); [qsp]/ = 31,92 cm3/g (c = 4,95 g/l, acide dichloroacétique). g) Brothydrate de poly-c-L-lysine On a dissous 16 g du polymère protégé de l'étape f) dans 100 al d'acide trifluoroacétique et ajouté 100 al de HBr  of dimethylsulfoxide in the presence of 4.5 ml of triethylamine until a gel is formed. The polymer was isolated by pouring it into an aqueous solution of 5% H 2 CO 3. Yield: 16.8 g (89.6%). Analysis: ZCO 2: 16.8% (calc.), 16.3% (found); [qsp] / = 31.92 cm3 / g (c = 4.95 g / l, dichloroacetic acid). g) Poly-c-L-lysine brothydrate 16 g of the protected polymer of step f) were dissolved in 100 μl of trifluoroacetic acid and 100 μl of HBr were added

4N/RcOH. Le produit final a été précipité dans de l'éther.  4N / RCOH. The final product was precipitated in ether.

Rendement: 14,7 g (91,6%). Analyse: Br: 37,7% (calc.), 36,8% (trouvée); R251 ne = O. Chromatographie sur papier: W1 23x62, éluant: n-BuOH-AcOHPyr.-eau 30:6:24:20. Rendement en résumé: 36,82% (à partir du monomère protégé); 18,85% (à partir de la  Yield: 14.7 g (91.6%). Analysis: Br: 37.7% (calc.), 36.8% (found); R251 = 0. Paper chromatography: W1 23x62, eluent: n-BuOH-AcOHPyr.-water 30: 6: 24: 20. Yield in summary: 36.82% (from the protected monomer); 18.85% (from the

lysine libre). PM = 5.500 - 20.300 3.  free lysine). PM = 5.500 - 20.300 3.

h) Purification du produit final brut On a dissous 250 g du polymère obtenu dans l'étape g) dans de l'eau et on l'a ensuite chromatographié sur une colonne Sephadex G-50 (fine). Eluant: eau distillée, solution de NaCi à 0,9% ou solution de HCI 0,1 N. Détection pour does fractions (1 ml)  h) Purification of the crude end product 250 g of the polymer obtained in step g) was dissolved in water and then chromatographed on a Sephadex G-50 (fine) column. Eluent: distilled water, 0.9% NaCl solution or 0.1 N HCI solution. Detection for fractions (1 ml)

à UV 220 nm.at 220 nm UV.

i) Purification du produit final brut On a dissous 2 g du bromhydrate de poly-e-L-lysine préparé dans l'étape g) dans 2 mi d'eau, puis ajouté 20 al d'éthanol. Le polymère a été précipité par 80 mI d'éther diéthylique. Après 24 heures de repos à 5 C, il a été filtré, lavé et séché. Rendement: 1,26 g (83%) (57,7% lorsqu'il est calculé  i) Purification of the crude end product 2 g of the poly-e-L-lysine hydrobromide prepared in step g) was dissolved in 2 ml of water and then 20 ml of ethanol was added. The polymer was precipitated with 80 ml of diethyl ether. After 24 hours of rest at 5 C, it was filtered, washed and dried. Yield: 1.26 g (83%) (57.7% when calculated

pour le tripeptide protégé de départ).  for the protected tripeptide of departure).

La substance ainsi obtenue est dénommée SZTP-14; PM =  The substance thus obtained is called SZTP-14; PM =

12.700; [t]200 = +32,4 (c = 2; eau); polydispersion = 3,7.  12.700; [t] 200 = +32.4 (c = 2, water); polydispersion = 3.7.

Les substances suivantes ont été préparées de façon analogue:  The following substances have been prepared in a similar way:

SZTP-15 PM = 11.600 200 []20D = +31,9   SZTP-15 PM = 11.600 200 [] 20D = +31.9

SZTP-16 PM = 13.400 200 [x]20o = +32,6   SZTP-16 MW = 13.400 200 [x] 20o = +32.6

SZTP-17 PM = 14.500 200 [1]20 = +32,1   SZTP-17 MW = 14,500 200 [1] 20 = +32.1

EXEMPLE 2EXAMPLE 2

Chlorhydrate de poly-c-L-lysine Une solution de 1 g du polymère préparé selon la procédure de l'exemple 1 dans 40 mi d'une solution de NaCI 2M, a été dialysée contre une solution de NaCI 2M, puis de l'eau. Après  Poly-c-L-Lysine Hydrochloride A solution of 1 g of the polymer prepared according to the procedure of Example 1 in 40 ml of a 2M NaCl solution was dialyzed against a 2M NaCl solution and then water. After

* lyophilisation, on a recueilli 0,85 g du polymère.Freeze-drying, 0.85 g of the polymer was collected.

EXEMPLE 3EXAMPLE 3

Poly-c-L-lysine (base libre) Une colonne d'échange d'ion (40 al) a été préparée à partir d'une résine échangeuse d'anion Dowex 1-OH. La solution dans mI d'eau, de 1 g du polymère préparé selon la procédure de l'exemple 1, a été chromatographiée à un débit de 1 cm3/min. Les fractions ont été analysées, collectées et lyophilisées. On a isolé  Poly-c-L-lysine (free base) An ion exchange column (40 μl) was prepared from a Dowex 1-OH anion exchange resin. The solution in 1 ml of water, of 1 g of the polymer prepared according to the procedure of Example 1, was chromatographed at a flow rate of 1 cm3 / min. The fractions were analyzed, collected and lyophilized. We isolated

0,65 9 de polymère.0.65% of polymer.

EXEMPLE 4EXAMPLE 4

Bromhydrate de poly-e-D-lysine On a répété la procédure de l'exemple 1 à partir de  Poly-e-D-lysine hydrobromide The procedure of Example 1 was repeated from

10 g de l'ester p-nitrophénylique de N-a-benzyloxycarbonyl-  10 g of the p-nitrophenyl ester of N-α-benzyloxycarbonyl-

(N-s--ter-butyloxycarbonyl)-D-lysine. On a obtenu 1,3 g du polymère.  (N-s - tert-butyloxycarbonyl) -D-lysine. 1.3 g of the polymer was obtained.

PM = 86.900; [0]25D = -47,08 (c = 0,92; eau).  MW = 86,900; [0] 25D = -47.08 (c = 0.92, water).

EXEMPLE 5EXAMPLE 5

Poly-6-L-ornithine On a répété la procédure de l'exemple I ô partir de 10  Poly-6-L-Ornithine The procedure of Example I was repeated from 10

g de Il'ester p-nitrophény i que de N-a-benzyloxycarbonyl-  p-nitrophenyl ester of N-α-benzyloxycarbonyl

(N-6-ter-butyloxycarbonyl)-L- ornithine et obtenu 7,9 g de  (N-6-tert-butyloxycarbonyl) -L-ornithine and obtained 7.9 g of

chlorhydrate d'ester p-nitrophénylique de N-a-benzyloxycarbonyl-  N-α-benzyloxycarbonyl p-nitrophenyl ester hydrochloride

L-ornithine. P.f.: 87-90 C. Ce sel a été couplé de la façon  L-ornithine. P .: 87-90 C. This salt has been coupled in the way

décrite dans l'étape lb) avec la N-a-benzyloxycarbonyl-  described in step 1b) with N-α-benzyloxycarbonyl-

(N-6-ter-butyloxycarbonyl)-L-ornithine et a donné un dipeptide,  (N-6-tert-butyloxycarbonyl) -L-ornithine and gave a dipeptide,

l'ester p-nitrcphénylique de N-a-Z-N-6-(N'-a-Z-N'-6-ter-butyloxy-  N-α-Z-N-6- (N'-α-Z-N'-6-tert-butyloxy) p-nitrophenyl ester

carbonyl-L-ornithyl)-L-ornithine (12,1 g); p.f.:133-136 C. En répétant l'étape la) à partir du dipeptide, on a préparé le  carbonyl-L-ornithyl) -L-ornithine (12.1 g); m.p.:133-136 C. By repeating step a1 from the dipeptide, the

2622 1 9 52622 1 9 5

chl orhydrate de l'ester p-nitophénylique de N-a-Z-N-6-(N'-a-ZN'-6-  N-α-Z-N-6- (N'-a-ZN'-6-) p-Nitophenyl ester hydrochloride

L-ornithyl)-L-ornithine (11,99 g; p.f.:115-119 C), à partir duque I l'ester p-nitrophénilique de N-6-Boe-tri(N-c-Z-L-ornithine) (14,8 g; p.f. : 150-153 C) a été obtenu par couplage selon la méthode de l'étape lb). Le sel p-nitrophénylique de tri(f.-a-Z-L-ornithine) a été préparé selon la méthode de l'étape le), p.f.: 115-130 C. On a polycondensé 22 g de ce produit selon la procédure de l'étape lf), ce qui a fourni 15,4 g de 8poly-lf--a-benzyloxycarbonyl-L-ornithine (87,6%). On a isolé à partir de ce produit, 13,1 g (93X) de bromhydrate de  L-ornithyl) -L-ornithine (11.99 g, mp 115-119 ° C), from which the p-nitrophenilic ester of N-6-Boe-tri (NcZL-ornithine) (14.8 g mp: 150-153 ° C) was obtained by coupling according to the method of step 1b). The p-nitrophenyl salt of tri (β-aZL-ornithine) was prepared according to the method of step 1c), mp: 115-130 ° C. 22 g of this product were polycondensed according to the procedure of step lf), which afforded 15.4 g of poly-1H-α-benzyloxycarbonyl-L-ornithine (87.6%). 13.1 g (93%) of hydrobromide was isolated from this product.

poly-6-l-ornithine selon la méthode de l'étape lg).  poly-6-l-ornithine according to the method of step lg).

EXEMPLE 6EXAMPLE 6

Broehydrate de poly-6-D-ornithine On a répété la procédure de l'exemple 5 à partir de  Poly-6-D-Ornithine Hydrochloride The procedure of Example 5 was repeated from

1 g de l'ester p-nitrophénylique de NLa-benzyloxycarbonyl-  1 g of p-nitrophenyl ester of NLa-benzyloxycarbonyl-

(N-6-ter-butyloxycarbonyl)-D-ornithine. On a obtenu 1,2 g (689%) de  (N-6-tert-butyloxycarbonyl) -D-ornithine. 1.2 g (689%) of

bromhydrate de poly-6-D-ornithine.poly-6-D-ornithine hydrobromide.

EXEMPLE 7EXAMPLE 7

Rcide poly-y-L-(c,y-diami nobutyrique) On a répété la procédure de l'exemple 1 pour obtenir 6,9 g de chlorhydrate d'ester p-nitrophénylique d'acide f -ca-benzyloxycarbonyl-L--a,y-diaminobutyrique à part ir de 9,8 g  Poly-β- (c, y-diaminobutyric acid) The procedure of Example 1 was repeated to obtain 6.9 g of p-nitrophenyl ester hydrochloride of α-benzyloxycarbonyl-L-α-acid. , y-diaminobutyric except for 9.8 g

d'ester p-nitrophénylique d'acide N-a -benzyloxycarbonyl-  p-nitrophenyl ester of N-α-benzyloxycarbonyl acid

H-y-ter-butyloxycarbonyl-L-a,y-diaminobutyrique, p.f.: 67-70 C. Ce  H-γ-tert-butyloxycarbonyl-L-α, γ-diaminobutyric, m.p. 67-70 ° C.

sel a été couplé avec l'acide N-a-benzyloxycarbonyl-N-y-ter-  salt was coupled with N-α-benzyloxycarbonyl-N-y-ter-

butyloxycarbonyl-L-x,y-diaminobutyrique par la méthode de l'étape  butyloxycarbonyl-L-x, y-diaminobutyric by the method of the step

lb) en un dipeptide, l'ester p-nitrophénylique d'acide N-ct-Z-N-  1b) to a dipeptide, the p-nitrophenyl ester of N-α-Z-N-acid

/-(N'-a--Z - N'-y- ter-butyloxycarbonyl-c,y-diaminobutyrylI)-c,y-di-  / - (N'-a-Z-N'-tert-butyloxycarbonyl-c, y-diaminobutyryl) -c, y-di-

aminobutyrique (10,8 9, p.f.:125-127 C). En répétant la procédure de l'exemple la), on a synthétisé 10,35 g de chlorhydrate d'ester  aminobutyric (10.89, m.p .: 125-127 ° C). Repeating the procedure of Example 1a), 10.35 g of ester hydrochloride were synthesized.

p-nitrophénglique a'acide N-a-Z-N-Y-(N'- a - Z-L-c,y-diaminobutyryl)-  p-nitrophenyl acid N-α-Z-N-Y- (N'-α-Z-L-c, γ-diaminobutyryl) -

L-u,y-diaminobutyrique à partir du dipeptide, p.f.:108-112 C. R partir de ce sel, on a obtenu 13,7 g d'ester p-nitrophénylique d'acide N-y-BOC-tri(N-a-Z-L-acy-dianminobutyrique) en effectuant un couplage selon la procédure de l'étape lb), p.f.:143-145C. On a préparé à partir de ce produit, 10,5 g d'ester p-nitrophénylique d'acide tri-(N-a-Z-L-x,ydiaminobutyrique) selon la méthode de l'étape le), p.f.: 105-110 C. Ce produit a été polycondensé dans du diméthylsulfoxyde selon la procédure de l'étape lif) pour donner  Lu, γ-diaminobutyric acid from the dipeptide, mp: 108-112 ° C. From this salt, 13.7 g of p-nitrophenyl ester of Ny-BOC-tri (NaZL-acy-dianminobutyric acid was obtained. ) by coupling according to the procedure of step 1b), mp 143-145C. 10.5 g of p-nitrophenyl ester of tri- (NaZLx, ydiaminobutyric acid) were prepared from this product according to the method of step 1c), mp 105-110 ° C. This product was polycondensed in dimethylsulfoxide according to the procedure of the step lif) to give

7,8 g (86,5%) d'acide poly-Y-N-a-benzyloxycarbonyI-L--,y-diamino-  7.8 g (86.5%) of poly-Y-N-α-benzyloxycarbonyl-L-, γ-diamino-

butyrique. Le polymère protégé a été traité selon la méthode décrite dans l'étape lg) pour donner 6,2 g (90,5%) de bromhydrate  butyric. The protected polymer was treated according to the method described in step lg) to give 6.2 g (90.5%) of hydrobromide

d'acide poly-y-L-(c,y-diaminobutyrique).  poly-y-L- (c, y-diaminobutyric acid).

EXEMPLE 8EXAMPLE 8

Rcide poly-p-L-(ccp-diamtinopropionique) On a répété la procédure de l'exemple 1 à partir de  Poly-p-L- (ccp-diaminopropionic) Ride The procedure of Example 1 was repeated from

9,6 g d'ester p-nitrophénylique d'acide N-a-benzyloxycarbonyl-N-8-  9.6 g of p-nitrophenyl ester of N-α-benzyloxycarbonyl-N-8-

ter-butyloxycarbonyI-L-op-diaminopropionique, pour obtenir 7,1 9g de chlorhydrate d'ester p-nitrophényl ique d'acide N-a -benzy loxycarbonyl-L-, p-diaminopropionique p.f.: 65-67 0C. Ce sel  tert-butyloxycarbonyl-L-op-diaminopropionic acid, to obtain 7.1 g of p-nitrophenyl ester hydrochloride of N-α-benzyloxycarbonyl-L-, p-diaminopropionic acid m.p .: 65-67 ° C. This salt

a été couplé avec l'acide N-a-benzyloxycarbonyl-N-B- ter-butyloxy-  was coupled with N-α-benzyloxycarbonyl-N-B-tert-butyloxy acid

carbonyl-L-%p4-diaminopropionique par la méthode de l'étape lb) et  carbonyl-L-p-diaminopropionic acid by the method of step 1b) and

a donné 11,0 g de dipeptide, l'ester p-nitrophénylique d'acide N-  gave 11.0 g of dipeptide, the p-nitrophenyl ester of N-acid

a-Z-N-'-(N'-a-Z-N'-S-ter-butyloxycarbonyl -, p-d i ai noprop i ongl)-c, jp-  α-Z-N- (N, N'-N, N'-S-butyloxycarbonyl);

diaminopropionique, p.f.:11l9-122 C). En répétant la procédure de l'exemple la), on a synthétisé 10,85 g de chlorhydrate d'ester  diaminopropionic, mp: 11: 9-122 ° C). Repeating the procedure of Example 1a), 10.85 g of ester hydrochloride were synthesized.

p-nitrophénylique d'acide N-a-Z-N-e- (N' -a-Z-L-a, e-diaminopropionyl) -  p-nitrophenyl acid N-α-Z-N-e- (N '-α-Z-L-α, e-diaminopropionyl) -

L-cp-diaminopropionique à partir du dipeptide; rendement: 10,85 g, p.f.:102-105 C. R partir de ce sel, on a obtenu 12,6 g d'ester  L-α-diaminopropionic from the dipeptide; yield: 10.85 g, mp: 10 2 -105 ° C. From this salt, 12.6 g of ester were obtained.

p-nitrophénylique d'acide N-a-BOC-tri-( N- a - Z-L-xP3-diamino-  N-α-BOC-tri- (N-α-Z-L-xβ-diamino) p-nitrophenyl acid

propionique) en effectuant un couplage selon la procédure de l'étape lb), p.f.:138-140 C. On a préparé a partir de ce produit,  propionic) by coupling according to the procedure of step 1b), mp: 138.degree.-140.degree. C. Prepared from this product,

12,4 -9 d'ester p-nitrophénylique d'acide tri-(N-ca -Z-L-c,p-diamino-  12.4-9 p-nitrophenyl ester of tri- (N-ca-Z-L-c, p-diamino)

propionique) selon la méthode de l'étape le), p.f.: 102-106 C. Ce produit a été polycondensé dans du diméthylsulfoxyde selon la  propionic) according to the method of step 1a), mp: 102-106 ° C. This product was polycondensed in dimethylsulfoxide according to

procédure de l'étape lf) pour donner 8,7? g (90,2%) d'acide poly-p-  procedure of step lf) to give 8.7? g (90.2%) of poly-p-acid

e-a-benzyloxycarbonyl-L-a,Ii-diaminopropionique. Le polymère protégé  e-a-benzyloxycarbonyl-L-a, Ii-diaminopropionic. The protected polymer

2622 1 952622 1 95

a été traité selon la méthode décrite dans l'étape lg) pour donner ,6 g (88,7%) de broahydrate d'acide poly-p-L--o,p-diamino- propionique.  was treated according to the method described in step lg) to give 6 g (88.7%) of poly-p-L-o, p-diaminopropionic acid broahydrate.

EXEMPLE 9EXAMPLE 9

Solution d'injection 500 mg de poly-L-lysine,HBr sont dissous dans 10 mi de solution de NaCI physiologique. Cette solution d'injection est filtrée pour être stérilisée. La dose s'élève à 1-100 mg/kg/jour,  Injection solution 500 mg of poly-L-lysine, HBr are dissolved in 10 ml of physiological NaCl solution. This injection solution is filtered to be sterilized. The dose is 1-100 mg / kg / day,

en fonction de l'état du malade.depending on the condition of the patient.

EXEMPLE 10EXAMPLE 10

Préparation de comprimés Des comprimés sont préparés à partir des composants suivants: g poly-L-lysine,HCI g lactose 16 g saccharose g amidon de mais 2 g stéarate de magnésium 2 g acide alginique Ces matières sont homogénéisés et 100 comprimés sont  Preparation of tablets Tablets are prepared from the following components: poly-L-lysine, HCl lactose 16 g sucrose corn starch 2 g magnesium stearate 2 g alginic acid These materials are homogenized and 100 tablets are

pressés à partir du mélange.pressed from the mixture.

EXEMPLE 11EXAMPLE 11

Procédé pour augmenter la résistance des plantes à une  Method for increasing the resistance of plants to a

infection virale.viral infection.

On prépare une solution aqueuse à partir de 5 g de polyiso-L-lysine avec 100 I d'eau. Le pH de la solution est fixé à 7,0-7,2 avec une solution de NaOH, puis I ml de Tween 20 est ajouté. Cette solution est appliquée sur une surface de 1 ha, sur  An aqueous solution is prepared from 5 g of polyiso-L-lysine with 100 l of water. The pH of the solution is set at 7.0-7.2 with a solution of NaOH, and then 1 ml of Tween 20 is added. This solution is applied on a surface of 1 ha, on

des plantes à protéger alors qu'elles sont en post-émergence.  plants to protect while they are in post-emergence.

REUENDICRTIOhS 1.Composé ayant la formule générale (1)  REUENDICRTIOHS 1.Composition having the general formula (1)

6 1 86 1 8

R R R RR R R R

H HN-C! C C CO OHH HN-C! C C CO OH

17 I I9 M117 I I9 M1

R R/m NH \R/n r - dans laquelle R4, R5, R6, R7 et - RiO représentent indépendamment les uns des autres, un atome d'hydrogène ou un groupe méthyj-Ie,  Wherein R4, R5, R6, R7 and R10 independently of one another represent a hydrogen atom or a methyl group,

alcoyle en C1_4.C1-4 alkyl.

RB et R9 sont chacun un atome d'hydrogène, r est un entier de 10 à 400, a est 0, 1, 2 ou 3, et  RB and R9 are each hydrogen, r is an integer of 10 to 400, a is 0, 1, 2 or 3, and

n est 0 -n is 0 -

leurs sels, leurs racémates et leurs isomères optiques.  their salts, their racemates and their optical isomers.

2. Composés ayant la formule générale (1) - dans laquelle R4, R5, R6, R7 et R10 représentent un atome d'hydrogène, r aune valeur de 10 à 400, m est 0, 1, 2 ou 3 et nest 0 - et leurs  2. Compounds having the general formula (1) - wherein R4, R5, R6, R7 and R10 represent a hydrogen atom, r is a value of 10 to 400, m is 0, 1, 2 or 3 and is 0 - and their

sels, leurs racémates et leurs isomères optiques.  salts, their racemates and their optical isomers.

3. Polyisolysine ayant un poids moléculaire moyen de  3. Polyisolysin having an average molecular weight of

5.500 à 25.600.5.500 to 25.600.

4. PoyiYsoornithine ayant un poids moléculaire moyen  4. PoyiYsoornithine having an average molecular weight

de 4.400 à 13.500.from 4,400 to 13,500.

5. Préparations pharmaceutiques ayant un effet anti-tumeur et un effet antiviral, comprenant comme agent actif un composé de formule générale (1) dans laquelle R4, R5, R6, R7, R3, R9 et R10 représentent un atome d'hydrogène, r a une valeur de 40 à , a est 0, 1, 2 ou 3 et n est 0 et les groupes amino ont une configuration L, en mélange avec des supports et/ou des additifs  5. Pharmaceutical preparations having an antitumor effect and an antiviral effect, comprising as active agent a compound of general formula (1) in which R4, R5, R6, R7, R3, R9 and R10 represent a hydrogen atom, r a value of 40 to, a is 0, 1, 2 or 3 and n is 0 and the amino groups have an L configuration, mixed with carriers and / or additives

couramment utilisés dans l'industrie pharmaceutique.  commonly used in the pharmaceutical industry.

2622 1 9 52622 1 9 5

6 Préparations pharmaceutiques suivant la revendication 5, dans lesquelles l'agent actif est une  Pharmaceutical preparations according to claim 5, wherein the active agent is a

polyisolysine ayant un PM moyen de 5.500 à 22.500.  polyisolysin having an average MW of 5,500 to 22,500.

7. Procédé pour préparer des acides polgisodlaminocarboxyliques ayant la formule générale (1) - dans laquelle R4, R5, R6, R7, R8, R9 et R10 sont identiques ou différents et peuvent représenter un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en CI_4, r est un entier de 10 et 400, * est un entier de 0 à 10, et  A process for preparing polysiloxynocarboxylic acids having the general formula (1) - wherein R4, R5, R6, R7, R8, R9 and R10 are the same or different and may be hydrogen or C1-4alkyl, r is an integer of 10 and 400, * is an integer of 0 to 10, and

n est un entier de 0 à 10 -n is an integer from 0 to 10 -

leurs sels, racémates et isomères optiques, par couplage des monomeères correspondants et polycondensation des oligomères obtenus de cette fa9on, caractérisé en ce qu'un monomère ou un oligomère de formule générale (11),  their salts, racemates and optical isomers, by coupling the corresponding monomeers and polycondensation oligomers obtained in this manner, characterized in that a monomer or an oligomer of general formula (11),

4 6H [0 04 6H [0 0

R R \ RR R

[ I|I _ 1[I | I _ 1

H Hi'I-C C- Cc CO OR)H Hi'I-C C- Cc CO OR)

7 1, 1 9 (II)7 1, 1 9 (II)

R5YR7 ' NHR\R Rq - dans laquelle q est un entier de 1 à 9, R1 est un groupe amino protecteur et tous les R1 sont les mêmes dans des oligomères, R3 est un groupe ester actif protecteur pour des groupes carboxy, convenable pour la protection et l'activation simultanée, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, a et n sont tels que définis plus haut, et dans le cas des oligomères, les substituants peuvent être Identiques ou différents - est couplé avec un monomère de formule générale (111)  ## STR2 ## wherein q is an integer of 1 to 9, R 1 is an amino protecting group and all R 1 are the same in oligomers, R 3 is an active ester group protecting for carboxy groups, suitable for protection and simultaneous activation, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, a and n are as defined above, and in the case of oligomers, the substituents may be identical or different - is coupled with a monomer of general formula (111)

2622 1 952622 1 95

R2 Hll C- - C C OR2 H11 C- - C C O

RLHN CO/\RLHN CO / \

1 5 17 I1 5 17 I

R PR NHR PR NH

C C- - dans laquelle R2 est un groupe amino protecteur différent de R1, qui peut être éliminé sélectivement par rapport à R1, X est un groupe activant la fonction carboxy à condition que le groupe -COX soit plus actif que le groupe COOR3, R1, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, à et n sont tels que définis plus haut - et ô partir du composé de formule générale (IVU) ainsi obtenu  Wherein R2 is an amino protecting group other than R1, which may be selectively removed from R1, X is a carboxy activating group provided that the -COX group is more active than the COOR3 group, R1 , R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, and n are as defined above - and from the compound of general formula (IVU) thus obtained

4- 6 0 /4-6 0 /

2 HN -C C C C - OR32 HN -C C C C - OR3

R HN-C HLi R CO OR R R - dans laquelle les substituants sont tels que définis plus haut et s est un entier de 2 à 10 - le groupe protecteur R2 est éliminé, puis, si s < 9, le composé obtenu est traité avec un monomère de formule générale (111) ou il est polycondensé de façon connue et si cela est désiré, lorsque le composé obtenu de formule générale (1) est sous la forme d'une base libre, il est transformé en un sel, ou s'il est un sel, il est transformé en une base libre ou en un autre sel. 8. Procédé suivant la revendication 7 pour produire  Wherein the substituents are as defined above and s is an integer of 2 to 10 - the protecting group R2 is removed, then, if s <9, the resulting compound is treated with a monomer of the general formula (III) or it is polycondensed in a known manner and if desired, when the obtained compound of the general formula (1) is in the form of a free base, it is converted into a salt, or it is a salt, it is transformed into a free base or another salt. 8. The process of claim 7 for producing

des acides polyisodiaminocarboxyliques de formule générale (1) -  polyisodiaminocarboxylic acids of general formula (1) -

dans laquelle R4, R5, R6, R7, R10 et r sont tels que définis dans  wherein R4, R5, R6, R7, R10 and r are as defined in

2622 1 952622 1 95

la revendication 1, a est 3 et n est O - et leurs sels, caractérisé  Claim 1, a is 3 and n is O - and their salts, characterized

en ce qu'un monomère ou un oligomère de formule générale (11), -  in that a monomer or an oligomer of the general formula (11),

dans laquelle R1, RI, R5, R6, R7, R10 et q sont tels que définis dans la revendication 1, et a et n sont tels que définis plus haut - est traité avec un monomère de formule générale (111) - dans laquelle R1, R2, R4, R5, R6, R7, R10 et X sont tels que définis  wherein R1, R1, R5, R6, R7, R10 and q are as defined in claim 1, and a and n are as defined above - is treated with a monomer of general formula (111) - in which R1 , R2, R4, R5, R6, R7, R10 and X are as defined

dans la revendication 1 et à et n sont tels que définis plus haut -  in claim 1 and at and n are as defined above -

et à partir du composé de formule générale (IU) ainsi obtenu - dans laquelle les substituants sont tels que définis plus haut et s est tel que défini dans la revendication 1 - le groupe protecteur R2 est éliminé, puis, si cela est désiré, lorsque s 9, le composé obtenu est traité avec un monomère de formule générale (111) ou il  and from the compound of general formula (IU) thus obtained - wherein the substituents are as defined above and is as defined in claim 1 - the protecting group R2 is removed, and then, if desired, when 9, the compound obtained is treated with a monomer of general formula (III) or

est polycondensé de façon connue.is polycondensed in a known manner.

9. Procédé suivant la revendication 7 pour produire  9. The process of claim 7 for producing

des acides polyisodiaminocarboxyliques de formule générale (1) -  polyisodiaminocarboxylic acids of general formula (1) -

dans laquelle R1, R3, Ri4, R5, R6, R7, R10 et q sont tels que définis dans la revendication 1, a et n sont tels que définis plus haut - et leurs sels, caractérisé en ce qu'un monomère ou un oligomère de formule générale (11) - dans laquelle R1, R3, R4, R5, R6, R7, R10 et q sont tels que définis dans la revendication 1, et m et n sont tels que définis plus haut - est traité avec un monomère de formule générale (111) - dans laquelle R1, R2, R4, R5, R6, R7, R10 et X sont tels que définis dans la revendication 1 et à et n sont tels que définis plus haut - puis à partir du composé de formule générale (1U) ainsi obtenu - dans laquelle les substituants sont tels que définis plus haut et s est tel que défini dans la revendication 1 - le groupe protecteur R2 est éliminé et, si cela est désiré, lorsque s i 9, le composé obtenu est traité avec un composé de formule générale (111) ou il est polycondensé de façon  in which R1, R3, R14, R5, R6, R7, R10 and q are as defined in claim 1, a and n are as defined above - and their salts, characterized in that a monomer or oligomer of general formula (11) - wherein R 1, R 3, R 4, R 5, R 6, R 7, R 10 and q are as defined in claim 1, and m and n are as defined above - is treated with a monomer of general formula (111) - wherein R1, R2, R4, R5, R6, R7, R10 and X are as defined in claim 1 and at and n are as defined above - and then from the compound of the general formula (1U) thus obtained - wherein the substituents are as defined above and is as defined in claim 1 - the protecting group R2 is removed and, if desired, when if 9, the compound obtained is treated with a compound of general formula (111) where it is polycondensed

connue.known.

10. Procédé suivant la revendication 7 pour préparer des polyiso-Llysines et leurs sels, caractérisé en ce que le chlorhydrate d'ester pnitrophénylique de N-a-Z-L-Lysine et la N-a -Z-N-e -BOC-L-lysine, transformés en anhydride mixte avec le  10. Process according to claim 7 for preparing polyiso-llysines and their salts, characterized in that N-α-Z-L-Lysine pnitrophenyl ester hydrochloride and N-α-Z-N-e-BOC-L-lysine, converted into mixed anhydride with the

chloroformate d'isobutyle, sont utilisés comte matières de départ.  isobutyl chloroformate, are used as starting materials.

2622 1 952622 1 95

11. Procédé suivant la revendication 7 pour préparer des polyiso-Lornithines et leurs sels, caractérisé en ce que le chlorhydrate d'ester pnitrophénilique de N--Z-L-ornithine et la N-a -Z-N--BOC-L-ornithine, transformés en anhydride mixte avec le chloroformate d'isobutyle, sont utilisés comme matières de départ. 12. Procédé suivant la revendication 7 pour préparer des polyiso-D-lysines et leurs sels, caractérisé en ce que le  11. Process according to Claim 7 for preparing polyiso-Lornithines and their salts, characterized in that Nitrophenilic acid ester hydrochloride of N-ZL-ornithine and Na-ZN-BOC-L-ornithine, converted into anhydride. mixed with isobutyl chloroformate, are used as starting materials. 12. Process according to Claim 7 for preparing polyiso-D-lysines and their salts, characterized in that the

chlorhydrate d'ester p-nitrophénylique de N-a-z-D-lys1vine et la N-c-  p-nitrophenyl ester hydrochloride of N-a-z-D-lysine and N-c-

-Z-N-t -BDOC-D-lysine, transformés en anhydride mixte avec le  -Z-N-t -BDOC-D-lysine, converted into mixed anhydride with the

chloroformate d'isobutyle, sont utilisés comme matières de départ.  isobutyl chloroformate, are used as starting materials.

13. Procédé suivant la revendication 7 pour préparer des polyiso-Dornithines et leurs sels, caractérisé en ce que le chlorhydrate d'ester pnitrophénylique de N-a-Z-D-ornithine et la N-a-Z-N-B-BOC-D-ornithine, transformes en anhydride mixte avec le  13. A process according to claim 7 for preparing polyiso-Dornithines and their salts, characterized in that N-a-Z-D-ornithine pnitrophenyl ester hydrochloride and N-α-Z-N-B-BOC-D-ornithine, converted into mixed anhydride with

chloroformate d'isobutyle, sont utilisés comme matières de départ.  isobutyl chloroformate, are used as starting materials.