FI90418C - Menetelmä lääkeaineina käyttökelpoisten perhydrotiatsepiini- ja perhydroatsepiinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

9041 8

Menetelmå lååkeaineina kåyttokelpoisten perhydrotiatsepiini- ja perhydroatsepiinijohdannaisten valmistamiseksi Forfarande for framstållning av derivat av perhydrotlazepin och 5 perhydroazepin, som år anvåndbara som låkemedel

Keksinnon kohteena on prosessi lååkeaineina kåytettåvien yhdisteiden, 10 joilla on kaava (I): .Yv R2 CQOH ( 15 I (I) a-ch-hh—s. y / i

® B-COOH

20 [misså: A tarkoittaa ryhmåå, jolla on kaava (i): 25

Hj K—Z — (i! 30 tai ryhmåå, jolla on kaava (ii): H-ll CH-W- !") ^-!CH2)n-^ 2 90418 jossa: Z tarkoittaa C^-Cg alkyleeniryhmåå; 5 W tarkoittaa Cj^-Cg alkyleeniryhmåå; ja m ja n ovat kokonaisluku 1 tai 2 kuitenkin niin, ettå summa m+n on kokonaisluku 3 tai kokonaisluku 4; 10 R2 tarkoittaa fenyyliå, tienyyliå tai furyyliå; B tarkoittaa alkyleeniryhmåå; Y tarkoittaa rikkiatomia tai metyleeniryhmåå; 15 ja niiden farmaseuttisesti hyvåksyttåvien suolojen ja alempien alkyy-liestereiden valmistamiseksi.

Esillåoleva keksinto liittyy sarjaan perhydrotiatsepiini- ja perhydro-20 atsepiinijohdannaisia, joilla on arvokas kyky alentaa verenpainetta ja siten niillå on potentiaalista kåyttdå kohonneesta verenpaineesta kårsivien ihmisten ja muiden elåinten kåsittelysså.

On olemassa melkoisesti nåyttoå siitå, ettå kohonneen verenpaineen 25 alentaminen våhentåå sairastuvuus- ja kuolleisuusriskiå. Verenpaineen kohoamista (hypertension) voi aiheuttaa joukko tekijoitå ja sen hoi-toon on saatavilla suuri joukko lååkkeitå, joiden valinnan sanelee suurelta osin verenpaineen kohoamisen syy samoinkuin sen aste ja poti-laan vastaanottokyky kåsittelylle. Erås tunnetuista verenpaineen koho-30 amisen syistå on veriplasmassa oleva angiotensiini II-niminen polypep-tidi ja angiotensiini II-tason alentamisen veriplasmassa on osoitettu alentavan verenpainetta. Ensimmåinen aste angiotensiini II:n syntymi-sesså nisåkkåån kehossa on veriptoteiinin muuttuminen entsyymireniinin vaikutuksesta "angiotensiini I"-nimiseksi polypeptidiksi. Tåmå angio-35 tensiini I muuttuu sitten angiotensiiniå muuttavan entsyymin (johon tåstå låhtien viitataan tavanomaisella lyhenteellå "ACE") vaikutuksesta angiotensiini II:ksi. Entsyymi ACE:llå on toinenkin metabolinen 3 90418 vaikutus, nimittåin osallistuminen bradykiniinin, luonnollisen veri-suonten laajentajan metabolismiin, mikå muuttaa sen ei-aktiiviseksi aineenvaihduntatuotteeksi.

5 Siitå johtuen entsyymi ACE kykenee kohottamaan verenpainetta kahta tietå: toinen on angiotensiini II:n tuottaminen, mikå sinånså suoraan kohottaa verenpainetta; toinen on verisuonia laajentavan vaikutuksensa kautta verenpainetta alentamaan pyrkivån bradykiniinin inaktivoitumi-nen. Siksi viime vuosina on esiintynyt melkoista mielenkiintoa sel-10 laisten yhdisteiden kehittåmiseen, joilla on kykyå inhibioida ACE:n aktiivisuutta.

Esimerkiksi tiettyjå perhydro-1,4-tiatsepin-5-onijohdannaisia on esi-tetty US-patenttihakemuksessa No. 721 303, haettu 9.4.1985; nåmå tiat-15 sepiinijohdannaiset eroavat esillåolevan keksinnon yhdisteistå påå- asiassa 6-asemassa olevan substituentin laadun suhteen. Myos tiettyjå perhydroatsepin-2-onijohdannaisia on esitetty US-patenttihakemuksessa No. 917 041, haettu 9.10.1986; nåmå atsepiinijohdannaiset eroavat myos esillåolevan keksinnon yhdisteistå pååasiassa 3-asemassa olevan subs-20 tituentin laadun suhteen.

Huuta esillåolevan keksinnon atsepiinijohdannaisille låheistå rele-vanttia tekniikan tasoa edustaa EP-patenttijulkaisu No. 46 291, jossa esitetåån sarja perhydroatsepin-2-oni (tai kaprolaktami) johdannaisia, 25 joissa on substituentteja 1- ja 3-asemissa ja valinnaisesti substi-tuentti myos 7-asemassa. EP-patenttijulkaisun No. 46 291 yhdisteet, toisin kuin esillåolevan keksinnon yhdisteet, ovat kuitenkin substitu-oimattomia 6-asemassa. Yllåttåen olemme havainneet, ettå esillåolevan keksinnon yhdisteillå on useita etuja EP-patenttijulkaisun No. 46 291 30 edustaman tekniikan tason yhdisteisiin nåhden, mukaanlukien korkeampi ACE-vastainen aktiivisuus ja tåmån aktiivisuuden pitkåaikaisempi såi-lyminen in vivo.

EP-patenttijulkaisussa No. 156 455 on myds maininta tietyista 1,4-35 tiatsepiinijohdannaisista, jotka ovat samantapaisia kuin esillåolevan keksinnon yhdisteet, mutta siinå esitetyt 1,4-tiatsepiinijohdannaiset eroavat esillåolevan keksinnon yhdisteistå siinå, ettå niisså on bent- 4 90418 seenirengas sulautuneena tiatsepiinirenkaaseen 2- ja 3-asemissa.

Esillåolevan keksinndn yhdisteillå on yleisesti etuna tekniikan tason yhdisteisiin verrattuna korkeampi aktiivisuus ja pitempi aktilvisuuden 5 kestoaika, joisakin tapauksissa jopa korkeampi kuin US-patenttihake-muksen No. 721 303 yhdisteillå. Sitåpaitsi niiden uskotaan olevan potentiaalisesti hybdyllisempiå suun kautta otettaessa, mikå tunnetus-ti on normaali suositeltava nauttimistapa tåmåntyyppiselle lååkkeelle. Siksi esillåolevan keksinnon kohteena on aikaansaada sarja perhydro-10 tiatsepiini- ja perhydroatsepiinijohdannaisia, joilla on poikkeuksel-linen ACE:tå inhibioiva aktiivisuus.

Keksinnon lisåkohteena on aikaansaada farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisåltåvåt sellaisia perhydrotiatsepiini- tai perhydroatsepiini-15 johdannaisia ACE:tå inhibioivana aineena.

Vielå eråånå esillåolevan keksinnon kohteena on aikaansaada menetelmiå angiotensiinin aiheuttaman verenpaineen kohoamisen (hypertension) kåsittelyå tai hoitoa vårten elåimisså (ihminen mukaanluettuna) anta-20 malla sille sellaista perhydrotiatsepiini- tai perhydroatsepiinijoh-dannaista.

Keksinnon avulla voidaan tehdå farmaseuttinen koostumus angiotensiinin aiheuttaman verenpaineen kohoamisen (hypertension) kåsittelemiseksi, 25 joka koostumus kåsittåå hypotensiivisen aineen seoksena farmaseutti-sesti hyvåksyttåvån kantimen tai laimentimen kanssa, jolloin mainittu hypotensiivinen aine on valittu ryhmåstå, joka kåsittåå kaavan (I) yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti hyvåksyttåvåt suolat ja esterit.

30 Keksinnon avulla voidaan aikaansaada edelleen menetelmå angiotensiinin aiheuttaman verenpaineen kohoamisen (hypertension) kåsittelemisen imettåvåisesså, joka voi olla ihminen tai elåin, antamalla sille teho-kas måårå hypotennsiiviståotensiivista ainetta, jolloin mainittu hypotensiivinen aine on valittu ryhmåstå, joka kåsittåå kaavan (I) yhdis-35 teet ja niiden farmaseuttisesti hyvåksyttåvåt suolat ja esterit.

Kaavan (1) yhdisteisså on kaksi vapaata karboksiryhmåå ja siten ne voivat muodostaa mono- tai diestereitå sopivien esterin muodostavien 5 90418 ryhmien kanssa. Tåsså keksinnåsså kåytettåvien esterin muodostavien ryhmien laadun suhteen ei ole mitåån kåytånnon rajoitusta, paitsi kåytånnon harkintaa sen suhteen, ettå jos tuloksena olevia yhdisteitå itseåån on tarkoitus kåyttåå ihmisten tai muiden elåinten kåsittelyyn, 5 tuloksena olevien esterelden on oltava "farmaseuttisesti hyvåksyttå-viå" ; ja tåmå kuten alaa tuntevat tietåvåt tarkoittaa sitå, ettå esterin muodostavat ryhmåt eivåt saa, ainakaan epåsuotavassa måårin, vå-hentåå aktiivisuutta ia vivo tai lisåtå yhdisteiden myrkyllisyyttå.

Kun tuloksena olevia yhdisteitå itseåån ei ole tarkoitus kåyttåå lååk-10 keinå vaan sensijaan vålituotteina muiden yhdisteiden valmistuksessa, tåmåkåån kåytånnon rajoitus ei ole voimassa ja mikå tahansa aiottuun valmistusreittiin sopiva esteri voidaan muodostaa.

Tuloksena olevia keksinnon yhdisteitå voidaan edustaa kaavalla (la): 15 coon1 r I (la) 20 A-CH-KH—k / >-* $ I 3 B—COOfr 25 (misså R2, A, B ja Y ovat kuten edellå on mååritelty ja R1 ja R3, jotka ovat samoja tai erilaisia, tarkoittavat kumpikin vetyatomia tai karboks isuojaryhmåå, edullisesti esterin muodostavaa ryhmåå).

30 RJ:n ja R3:n e dus tama karboks i suojaryhmå voi olla mikå tahansa sel- laisissa orgaanisissa synteeseisså tunnettu ryhmå, vaikka edullisesti se on esterijåånnos, erikoisesti esterijåånnos, joka kykenee helposti hydrolysoitumaan in vivo (normaalisti nisåkkåån ruumiissa, esim. veri-virrassa tai suolistosysteemisså) vapaaksi hapoksi, erikoisesti R2:n 35 tapauksessa.

R1 ja R3 ovat edullisesti samoja tai erilaisia ja kumpikin tarkoittaa 6 90418

Ci-CiQ-filkyyliryhinaa.

Esimerkkeihin sellaisista ryhmistå, joita R1 ja R3 voivat tarkoittaa, kuuluvat: 5 C1-C6 alkyyliryhmat, kuten metyyli-, etyyli-, propyyli-, isopropyy- li-, butyyli-, isobutyyli-, t-butyyli-, pentyyli- ja heksyyliryhmat;

Erlkoisesti suosittelemme sita, etta R1 ja R3 edustavat molemmat vety-atomeita, kun keksinnon yhdisteet on tarkoitettu terapeuttiseen kåyt-10 toon.

Jos keksinnon yhdisteitå on kuitenkin tarkoitus kayttaa vålituotteina muiden yhdistelden valmistuksessa, suosittelemme erikoisesti sita, etta R1 ja R3 edustaisivat orgaanisissa synteeseissa tavallisesti kåy-15 tettya karboksi-suojaryhmaa, kuten metyyli-, etyyli-, propyyli- tai t-butyyliryhmaa.

Kun keksinnon yhdisteissa R2, R* tai R5 tai erilaiset substituentit, kuten edellå on mååritelty, ovat C1-C6 alkyyliryhmia, nåma ryhmåt voi-20 vat olla suoran tai haarautuneen ketjun ryhmiå ja esimerkkeihin kuuluvat ryhmåt metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, butyyli, isobutyyli, sec-butyyli, t-butyyli, pentyyli, isopentyyli, 2-metyylibutyyli, neopentyyli, t-pentyyli, heksyyli, 4-metyylipentyyli, 3-metyylipentyy-- li,2-metyylipentyyli, 3,3-dimetyylibutyyli, 2,2-dimetyylibutyyli, 1,1- 25 dimetyylibutyyli, 1,2-dimetyylibutyyli, 1,3-dimetyylibutyyli, 2,3-dimetyylibutyyli ja isoheksyyli.

Kun A tarkoittaa mainittua kaavan (i) ryhmåå, Z voi tarkoittaa Cj-Cg alkyleeniryhmaa. Alkyleeniryhmån kaksi "vapaata" valenssia voivat olla 30 kiinnitettynå samaan hiiliatomiin (jossa tapauksessa sitå nimitetaan joskus "alkylideeni"-ryhmåksi) tai ne voivat olla kiinnittyneinå eri hiiliatomeihin. Esimerkkejå sellaisista alkyleeniryhmista, joita Z voi edustaa, ovat ryhmåt metyleeni, etyleeni, trimetyleeni, tetrametylee-ni, etylideeni, propylideeni, butylideeni, pentametyleeni, heksamety-35 leeni, heptametyleeni ja oktametyleeni, tai sellaiset ryhmåt, joissa on C^-C,, alkyylisubstituentti, edullisesti tetrametyleeni-, pentametyleeni-, heksametyleeni-, heptametyleeni- ja oktametyleeniryhmåt, ja 7 90418 kaikkein mieluimmin heptametyleeni- ja oktametyleeniryhmåt.

Kun A tarkoittaa mainittua kaavan (ii) ryhmåå, R4 vol olla kuten edel-lå on mååritelty sen tapauksen yhteydesså, jossa A tarkoittaa mainit-5 tua kaavan (i) ryhmåå. Kun W tarkoittaa C^-Cg alkyleeniryhmåå, se voi olla suoran tai haarautuneen ketjun ryhmå, kuten A:n yhteydesså on selitetty ja esimerkkeihin kuuluvat ryhmåt metyleeni-, etyleeni-, trimetyleeni-, tetraraetyleeni, etylideeni, propylideeni-, butylidee-ni-, pentametyleeni-ja heksametyleeniryhmåt, joista etyleeni- ja tet-10 rametyleeniryhmiå suositellaan.

Kun A tarkoittaa mainittua kaavan (ii) ryhmåå, kaavan (ii) ryhmåån sisåltyvå typpeå sisåltåvå heterosykli on pyrrolidinyyli- tai piperi-dyyliryhmå, ja kaikkein mieluimmin 3-pyrrolidinyyliryhmå tai 4-piperi-15 dyyliryhmå.

Ryhmålle R2 suositellaan fenyyliryhmåå.

B tarkoittaa Ci-C2 alkyleeniryhmåå, eli metyleeni- tai etyleeniryhmåå, 20 metyleeniryhmån ollessa suositeltava.

Suositeltavia esillåolevan keksinndn yhdisteiden luokkia ovat: (A) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: 25 Z tarkoittaa CA-C8 alkyleeniryhmåå; W tarkoittaa C2-C4 alkyleeniryhmåå; 30 R2 tarkoittaa fenyyliryhmåå; B tarkoittaa metyleeniryhmåå; ja ja niiden farmaseuttisesti hyvåksyttåvåt suolat.

35 (B) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: β 90418 Z tarkoittaa C7- tai C8-alkyleeniryhmåå; W tarkoittaa C3 tai C^-alkyleeniryhmåå; 5 in tarkoittaa kokonaislukua 1 tai 2; ja n tarkoittaa kokonaislukua 2; B tarkoittaa metyleeniryhmåå; ja 10 ja niiden farmaseuttisesti hyvåksyttåvåt suolat.

(C) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: 15 A tarkoittaa ryhmåå, jolla on kaava H2N-Z-, jossa Z tarkoittaa C7- tai C8-alkyleeniryhmåå; R2 tarkoittaa fenyyliryhmåå, 2-tienyyliryhmåå, 3-tienyyliryhmåå tai 2-furyyliryhmåå; 20 B tarkoittaa metyleeniryhmåå; ja niiden farmaseuttisesti hyvåksyttåvåt suolat.

25 (D) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: A tarkoittaa kaavan H2N-Z ryhmåå, jossa Z tarkoittaa C7- tai C8-alky-leeniryhmåå; 30 Rz tarkoittaa 2-tienyyliryhmåå, 3-tienyyliryhmaå tai 2-furyyliryhmaa; B tarkoittaa metyleeniryhmåå; ja Y tarkoittaa rikkiatomia; ja niiden farmaseuttisesti hyvåksyttåvåt suolat.

35 9 90418 (E) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: A tarkoittaa ryhmåå, jolla on kaava (iia): 5 — (CHjIm·—v H-,ί CH-W— (''>) i« ^—ICHjl n — j ossa: W tarkoittaa tetrametyleeniryhmåå; 15 m tarkoittaa kokonaislukua 2; ja n tarkoittaa kokonaislukua 2; 20 R2 tarkoittaa fenyyliryhmåå, 2 -tienyyliryhmåå, 3 -tienyyliryhmåå tai 2-furyyliryhmåå; B tarkoittaa metyleeniryhmåå; ja 25 Y tarkoittaa rikkiatomia tai metyleeniryhmåå; ja niiden farmaseuttisesti hyvåksyttåvåt suolat.

(F) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: 30 A tarkoittaa ryhmåå, jolla on kaava (iia): (CH2 Ifn —V.

35 f λ ... , H_w CH-W—

V J

(CHjl n —' 10 90 41 8 jossa: W tarkoittaa tetrametyleeniryhmåå; 5 m tarkoittaa kokonaislukua 2; ja n tarkoittaa kokonaislukua 2; R2 tarkoittaa 2-tienyyliryhmåå, 3-tiuenyyliryhmåå tai 2-furyyliryhmåå; 10 B tarkoittaa metyleeniryhmåå; ja Y tarkoittaa rikkiatoraia; 15 ja niiden farmaseuttisesti hyvåksyttåvåt suolat.

Kaavan (I) yhdisteet sisåltåvåt asymmetrisiå hiiliatomeja ainakin seuraavissa asemissa: hiiliatomi, johon kaavan -C00R1 ryhmå on kiin-nittynyt; hiiliatomi, johon ryhmå Rz on kiinnittynyt; ja hiiliatomi 20 perhydrotiatsepiini- tai perhydroatsepiinirenkaassa, johon kaavan A-CH(C00H)-NH ryhmå on kiinnittynyt; siinå voi olla myos asymmetrisiå hiiliatomeja muissa asemissa joissakin tapauksissa riippuen substi-tuenttien laadusta. Siten ne voivat esiintyå optisesti puhtaina dias-tereomeereinå tai diastereomeerien seoksina (esim. raseemisina seoksi-25 na). Vaikka erilaisia optisia isomeerejå on esitetty tåsså yhdellå kaavalla, esillåoleva keksinto sisåltåå sekå yksittåiset eristetyt isomeerit ettå niiden seokset.

Keksinnon yhdisteet sisåltåvåt emåksisiå typpiatomeja ja siitå johtuen 30 ne voivat muodostaa happoadditiosuoloja. Sellaisten suolojen laatu ei ole kriitillinen keksinnon kannalta, paitsi ettå kun suoloja on tar-koitus kåyttåå terapeuttisiin tarkoituksiin, niiden tåytyy olla farmaseuttisesti hyvåksyttåviå, joka merkitsee, kuten alaa tuntevat hyvin tietåvåt, ettå suoloilla ei saa olla lisååntynyttå myrkyllisyyttå (tai 35 epåsuotavasti lisååntynyttå myrkyllisyyttå) tai alentunutta aktiivi- suutta (tai epåsuotavasti alentunutta aktiivisuutta) verrattuna vapai-siin emåksiin. Sellaisten suolojen muodostamiseen voidaan kåyttåå u 90418 laajaa happovalikoimaa ja edustaviin esimerkkeihin sellaisista hapois-ta kuuluvat: mineraalihapot kuten hydrohalogeenihapot (esim. suolahap-po, bromivetyhappo ja jodivetyhappo), fosforihappo, metafosforihappo, typpihappo tai rikkthappo; ja orgaaniset karboksyylihapot kuten etik-5 kahappo, oksaalihappo, viinihappo, sitruunahappo, bentsoehappo, glyko-lihappo, glukonihappo, glukuronihappo, meripihkahappo, maleiinihappo tai fumaarihappo; ja orgaaniset sulfonihapot, kuten metaanisulfonihap-po, bentseenisulfonihappo tai p-tolueenisulfonihappo. Sellaisia happo-additiosuoloja voidaan valmistaa tavanomaisilla menetelmillå.

10

Keksinnon yhdisteet voivat sisåltåå myos 2 vapaata karboksiryhmåå ja nåmå voivat muodostaa suoloja emåsten kanssa. Esimerkkejå suoloista emåsten kanssa ovat: suolat metallien, erikoisesti alkalimetallien ja maa-alkalimetallien kanssa, kuten litium-, natrium-, kalium-, kalsium-15 ja magnesiumsuolat; ammoniumsuola; suolat orgaanisten amiinien kuten sykloheksyyliamiinin, disykloheksyyliamiinin, di-isopropyyliamiinin, trietyyliamiinin, kinkoniinin, guanidiinin tai guaniinin kanssa; ja suolat emåksisten aminohappojen, kuten lysiinin ja arginiinin kanssa. Esimerkkejå keksinndn spesifisistå yhdisteistå annetaan seuraavissa 20 kaavoissa (1-1) - (1-4), misså substituentit ovat kuten vastaavissa taulukoissa 1-4 on mååritetty [eli taulukko 1 vastaa kaavaa (1-1), taulukko 2 vastaa kaavaa (1-2) jne]. Keksinnon yhdisteet identifioi-daan tåmån jålkeen, milloin se on tarpeen, niille nåisså taulukoissa annetuilla numeroilla. Taulukoissa on kåytetty seuraavia lyhenteitå: 25

Ac asetyyli

Boc t-butoksikarbonyyli

Bu butyyli . . t-Bu t-butyyli 30 Bz bentsyyli

Bzo bentsoyyli

Cbz bentsyylioksikarbonyyli

Dox (5-metyyli-2-okso-l,3-dioksolen-4- yyli)metyyli 35 Et etyyli

Etc etoksikarbonyyli

Fur furyyli 12 90 4 1 8 cHx sykloheksyyli

Isox isoksatsolyyli

Me metyyli

Np naftyyli 5 Ph fenyyli

Phtm ftaliraido

Piv pivaloyyli cPn syklopentyyli iPr isopropyyli 10 Thi tienyyli

Thiz tiatsolyyli 13 9 0 4 1 8 /S\ R2 coor1 / y' I (1-1) HR— (CHj )r—CH—HH—l ) O I i

ICH2)S-C00RJ

R2 i"'' \ T »-*' HH—(Ctyr-CH-HH—L y1 \-* o ch2-coor3 14 9 0 4 1 8 2 / \ r COOR1 / O I!-3) -W-CH-HH—^ / f\ chj-cooh / V7

COOH r (I—M

—ICRjlj,—CH—HH

0 CH2-COOH

is 90 41 8 TAULUKKO 1

Yhd.

No. r R1 Rz s R3 5 _

1-1 3 H 2-Thi 1 H

1-2 3 Et 2-Thi 1 H

1-3 4 H 2-Thi 1 H

1-4 3 Et 2-Thi 1 H

10 1-5 5 H 2-Thi 1 H

1-6 5 Et 2-Thi 1 H

1-7 6 H 2-Thi 1 H

1-8 6 Et 2-Thi 1 H

1-9 6 Bu 2-Thi 1 H

15 1-11 7 H 2-Thi 1 H

1-12 7 Et 2-Thi 1 H

1-13 8 H 2-Thi 1 H

1-14 5 H 3-Thi 1 H

1-15 5 Et 3-Thi 1 H

20 1-16 6 H 3-Thi 1 H

1-17 6 Et 3-Thi 1 H

1-18 7 H 3-Thi 1 H

1-19 7 Et 3-Thi 1 H

1-20 5 H 2-Fur 1 H

25 1-21 5 Et 2-Fur 1 H

1-22 6 H 2-Fur 1 H

1-23 6 Et 2-Fur 1 H

1-24 7 H 2 - Fur 1 H

1-25 7 Et 2-Fur 1 H

30 1-53 6 Et 2-Thi 1 PivMe

1-54 6 Et 2-Thi 1 EtcOE

1-55 6 Et 2-Thi 1 Dox

1-57 6 Et 2-Thi 2 H

1-58 6 H 2-Thi 2 H

35 1-63 6 H Ph 1 H

1-64 6 Et Ph 1 H

16 90 41 8 TAULUKKO 1 (1 atkoa')

Yhd.

5 No. r R1 R1 s R2 1-66 4 tBu 2-Thi 1 tBu

1-69 5 H Ph 1 H

1-70 5 Et Ph 1 H

10 1-71 7 H Ph 1 H

1- 72 7 Et Ph 1 H

TAULUKKO 2 15 Yhd.

No. r R1 R1 R2

1 4 H 2-Thi H

2-2 4 Et 2-Thi H

20 2-3 5 H 2-Thi H

2-4 5 Et 2-Thi H

2-5 6 H 2-Thi H

2

2-6 6 Et 2-Thi H

2-7 7 H 2-Thi H

25 2-8 7 Et 2-Thi H

2-9 8 H 2-Thi H

2-10 8 Et 2-Thi H

2-13 4 H Ph H

2-14 4 Et Ph H

30 2-15 5 H Ph H

2-16 5 Et Ph H

2-17 6 H Ph H

2-18 6 Et Ph H

2-19 7 H Ph H

35 2-20 7 Et Ph H

2-21 8 H Ph H

2-22 8 Et Ph H

17 90 41 8 TAULUKKO 3

Yhd.

5 No. W R1 R2 X

3-1 -(CH2)A- H 2-Thi S

3-2 -(CH2V Et 2-Thi S

3-3 -(CH2)4- Bu 2-Thi S

10 3-5 -(CH2)4- H Ph S

3-6 -(CH2)4- Et Ph S

3-7 -(CH2)a- H 3-Thi S

3-8 -(CH2)^ - H 2-Fur S

3-9 -(CH2)*- H 3-Fur S

15 3-17 -(CH2),,- H 2-Thi CH2 3-18 -(CH2)4- Et 2-Thi CH2 3-19 -(0Η2)*- H 3-Thi CH2 3-20 -(0Η2),,- H Ph CH2 3-21 -(CH2)4- Et Ph CH2

20 3-24 -(CH2)3- H 2-Thi S

3-25 -(CH2)3- H Ph S

3-26 -(CH2)3- H Ph CH2

3-27 -(CH2)5- H 2-Thi S

3-28 -(CH2)5- H Ph S

25 3-29 -(CH2)5- H Ph CH2

3-30 -(CH2)2- H 2-Thi S

3-31 -(CH2)2 H Ph S

3-32 -(CH2)2- H Ph CH2 30 18 9041 8 TAULUKKO 4

Yhd.

5 No. R2 X

4-1 2-Thi S

4-2 2-Thi CH2

4-3 Ph S

10 4-4 Ph CH2

Edellå luetelluista yhdisteistå seuraavia suositellaan niiden erin-omaisen ACE:tå inhibioivan vaikutuksen kannalta: Yhdisteet No 1-3, 15 1-5, 1-7, 1-11, 1-13, 1-16, 1-18, 1-22, 1-24, 1-63, 1-71, 2-1, 2-3, 2-5, 2-7, 2-9, 2-19, 2-21, 3-1, 3-5, 3-7, 3-8, 3-17, 3-19, 3-20, 4-1, 4-2, 4-3 ja 4-4. Seuraavilla yhdisteillå, vaikka ne ovatkin tehok-kaita ACE-inhibiittoreita, on enemmån arvoa vålituotteina muiden ja arvokkaampien ACE-inhibiittorien valmistuksessa ja niitå suositellaan 20 ottaen huomioon niiden kåytto vålituotteina: Yhdisteet No. 1-8, 1-12, 1-64, 1-66, 2-8, 2-10, 2-20, 3-2, 5-1, 5-2 ja 5-3.

Seuraavat yhdisteet, ottaen huomioon niiden poikkeuksellinen ACE-inhi-bioiva aktiivisuus, ovat kaikkein suositeltavimpia: 25 1-11. a-[6-(8-Amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(2-tienyyli)-perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

1-13. a-[6-(9-Amino-l-karboksinonyyliamino)-5-okso-2-(2-tienyyli)-30 perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

1-18. a-[6-(8-Amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(3-tienyyli)- perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

35 1-24. a-[6-(8-Amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(2-furyyli)- perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

19 9041 8 1- 71. α - [6-(8-Amino-1-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-fenyyli-per-hydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

2- 7. a-[3-(8-Amino-l-karboksioktyyliamino)-2-okso-6-(2-tienyyli)- 5 perhydroatsepin-1-yyli]etikkahappo.

2-9. Q-[3-(9-Amino-l-karboksinonyyliamino)-2-okso-6-(2-tienyyli)-perhydroatsepin-1-yyli]etikkahappo.

10 2-19. a-[3-(8-Amino-1-karboksioktyyliamino)-2-okso-6-fenyyli-per- hydroatsepin-1-yyli]etikkahappo.

2- 21. a.-[3-(9-Amino-l-karboksinonyyliamino)-2-okso-6-fenyyli-per- hydroatsepin-1-yyli]etikkahappo.

15 3- 1. a-{6 -[1-Karboks i-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo.

3-5. a-{6-[l-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-fe-20 nyyliperhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

3-7. a-(6-[l-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(3-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo.

25 3-8. a-{6-[l-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(2- furyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli(etikkahappo.

3-17. o-(3-(l-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-(2-t ienyy1i)pe rhydroatsep in-1-yy1i)et ikkahappo.

30 3-19. a-{3-[l-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-(3-tienyyli)perhydroatsepin-1-yyli)etikkahappo.

3-20. a-(3-[l-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-fe-35 nyyliperhydroatsepin-l-yyli)etikkahappo.

Erikoisesti suositellaan tiettyjen yllåmainittujen kaikkein suositel- ao 90 41 8 tavimpien yhdisteiden seuraavia isomeerejå: 1- 11. α-(6(R)-[8-Amino-1(S)-karboksioktyyliamino]-5-okso-2(S)- (2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli Jetikkahappo.

5 2- 19. a-{3(S)-[8-Amino-l(£)-karboksioktyyliamino]- 2-okso-6(R)-fenyy- liperhydroatsepin-l-yyli jetikkahappo.

3- 1. a-(6(R)-[1(S)-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso- 10 2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli Jetikkahappo.

3-20. a-{3(S)-[1(S)-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-(R)-fenyyliperhydroatsepin-l-yyliJetikkahappo.

15 Esillåolevan keksinnon mukainen menetelmå yhdisteiden valmistamiseksi on tunnettu siitå, ettå se kåsittåå kaavan II yhdisteen 20 / \ y" H2H—L J mi 25 o I .

B -CQQfr (jossa R2, R3, B ja Y ovat kuten edellå on mååritelty) ja R3 tarkoittaa 30 C1-C10-alkyyliryhmåå, kondensoinnin yhdisteen kanssa, jolla on kaava (III): A-CHiCOOR1) -X' (III) 35 (misså A on kuten edellå on mååritelty; X’ tarkoittaa halogeeniatomia tai sulfonyylioksiryhmåå ja R1 tarkoittaa Cj-CjQ-alkyyliryhmåå) tai edellåmainitun kaavan (II) yhdisteen pelkiståvån kondensoinnin yhdis- 2i 9041 8 teen kanssa, jolla on kaava (IV): A-Ci-Oj-COOR1 (IV) 5 (misså R1 ja A ovat kuten edellå on mååritelty) ja valinnaisesti tuot-teen alistamisen yhteen tai useampaan seuraavaan vaiheeseen: suojauk-sen poistaminen, saippuointi, esterointi tai trans-esterointi.

Kun kaavan (III) yhdisteesså X' tarkoittaa halogeeniatomia, se on 10 edullisesti kloori-, bromi- tai jodiatomi; kun se tarkoittaa sulfonyy-lioksiryhmåå, se on edullisesti substituoitu tai substituoimaton Cj-C6 alkaanisulfonyylioksiryhmå, kuten metaanisulfonyylioksi-, etaani-sulfonyylioksi-tai trifluorometaanisulfonyylioksiryhmå, tai substituoitu tai substituoimaton aromaattinen sulfonyylioksiryhmå, kuten bent-15 seenisulfonyylioksi, p-tolueenisulfonyylioksi-, j>-nitrobentseenisul-fonyylioksi-, o-nitrobentseenisulfonyylioksi-, m-nitrobentseenisul-fonyylioksi-, 2,4- dinitrobentseenisulfonyylioksi-, 2-metyyli-5-nitro-bentseenisulfonyylioksi, 4-kloori-3-nitrobentseenisulfonyylioksi-, j>-bromobentseenisulfonyylioksi-, E'klorobentseenisulfonyylioksi- tai 20 2,5-diklorobentseenisulfonyylioksiryhmå; substituoitujen ryhmien ta- pauksessa substituentit valitaan ryhmåstå, joka kåsittåå edellå mååri-tellyt substituentit (a).

Kaavan (II) yhdisteen kondensaatio kaavan (III) yhdisteen kanssa suo-25 ritetaan edullisesti liuottimen ja emåksen låsnåollessa. Liuottimen laatu ei ole kriitillinen, edellyttåen ettå sillå ei ole haitallista vaikutusta reaktioon; sopiviin liuottimiin kuuluvat: alifaattiset ja aromaattiset hiilivedyt, kuten heksaani tai bentseeni; halogenoidut alifaattiset tai aromaattiset, edullisesti alifaattiset hiilivedyt 30 kuten metyleenikloridi, kloroformi tai 1,2-dikloorietaani; eetterit kuten tetrahydrofuraani tai dioksaani; esterit kuten etyyliasetaatti; ketonit kuten asetoni; amidit kuten dimetyyliformamidi, dimetyyli-asetamidi, N-metyyli-2-pyrrolidoni tai heksametyylifosforitriamidi; sulfoksidit kuten dimetyylisulfoksidi; ja nitriilit kuten asetonitrii-35 li. Samoin ei myoskåån kåytettåvån emåksen laatu ole kriitillinen, edellyttåen ettå sillå ei ole haitallista vaikutusta reaktioon. Sopiviin emåksiin kuuuluvat esimerkiksi: alkalimetalli-ja maa-alkalimetal- 22 90 418 likarbonaatit kuten natriumkarbonaatti, kaliumkarbonaatti tai kalsium-karbonaatti; alkalimetallibikarbonaatit kuten natriumbikarbonaatti tai kaliumbikarbonaatti; alkalimetallihydridit kuten natriumhydridi tai litiumhydridi; metalli-, erikoisesti alkalimetallifluoridit kuten 5 kaliumfluoridi tai kesiumfluoridi; ja orgaaniset emåkset kuten trie-tyyliamiini, pyridiini, pikoliini tai tetraetyyliammoniumhydroksidi. Haluttaessa reaktio voidaan suorittaa kaksifaasisessa reaktiosystee-misså kåyttåen vettå liuottimena toista faasia vårten ja veteen se-koittumatonta liuotinta (kuten metyleenikloridia tai kloroformia) 10 toista faasia vårten; tåsså tapauksessa pitåisi kåyttåå faasinsiirto-katalyyttiå (kuten tetrabutyyliammoniumbromidia tai bentsyylitrietyy-liammoniumjodidia ja emåksen pitåisi olla suhteellisen vahva emås, kuten alkalimetallihydroksidi (esimerkiksi natriumhydroksidi tai ka-liumhydroksidi).

15

Reaktio tapahtuu laajalla låmpotila-alueella ja valittu tarkka låmpo-tila ei ole kriitillinen keksinnon kannalta: yleenså olemme havainneet sopivaksi suorittaa reaktio alueella 0-120 °C olevassa låmpotilassa. Reaktioon tarvittava aika vaihtelee laajasti riippuen monista teki-20 jdistå, mutta pååasiallisesti liuottimen, emåksen ja reagenssien laa-dusta ja reaktiolåmpotilasta, mutta normaalisti riittåvå aika on 1 tunnista 3 påivåån.

Kun reaktio on suoritettu loppuun, haluttu yhdiste voidaan saada reak-25 tioseoksesta tavanomaisilla tavoilla. Esimerkiksi yksi sopiva talteen-ottotekniikka kåsittåå: orgaanisen liuottimen, kuten etyyliasetaatin lisååmisen reaktioseokseen; orgaanisen kerroksen erottamisen ja pese-misen vedellå; orgaanisen kerroksen kuivauksen; ja liuottimen tislauk-sen halutun tuotteen saamiseksi. Tarvittaessa tåtå tuotetta voidaan 30 puhdistaa edelleen erilaisilla tavanomaisilla tekniikoilla, kuten takaisinkiteytys ja/tai kromatografiatekniikat, erikoisesti pylvåskro-matografia.

Kaavan (II) yhdisteen reaktio kaavan (IV) yhdisteen kanssa tapahtuu 35 pelkiståvisså kondensointiolosuhteissa. Pelkiståvåt olosuhteet voidaan saada aikaan erilaisilla tavoilla, esimerkiksi: katalyyttisellå pel-kistyksellå kåyttåen metallia, kuten platinaa, palladiumia, Raney-nikkeliå tai rodiumia, valinnaisesti kantajalla, vedyn ollessa låsnå; 23 9 0 4 1 8 pelkistyksellå metallihydridillå, kuten litiumalumiinihydridillå, litiumborohydridillå, litiumsyanoborohydridillå, natriumsyanoborohyd-ridillå, natriumborohydridillå tai kaliumborohydridillå; pelkistyksellå aktiivisella metallilla, kuten natriumilla tai magnesiumilla, yh-5 desså alkoholin kuten metanolin tai etanolin kanssa; tai pelkistyksellå metallilla kuten rauta tai sinkki ja hapolla kuten suolahapolla tai etikkahapolla. Reaktio suoritetaan edullisesti liuottimen låsnå-ollessa, jonka laatu ei ole kriitillinen, edellyttåen ettå sillå ei ole haitallista vaikutusta reaktioon (vaikkakin se voi osallistua 10 reaktioon). Sopiviin liuottimiin kuuluvat vesi ja valikoima orgaanisia liuottimia, esimerkiksi: alkoholit kuten metanoli tai etanoli; eette-rit kuten tetrahydrofuraani, dietyylieetteri tai dioksaani; haloge-noidut hiilivedyt, erikoisesti halogenoidut alifaattiset hiilivedyt kuten metyleenikloridi tai kloroformi; esterit kuten etyyliasetaatti; 15 aromaattiset hiilivedyt kuten bentseeni tai tolueeni; amidit kuten dimetyyliformamidi tai dimetyyliasetamidi; ja orgaaniset karboksyyli-hapot kuten etikkahappo. On huomattava, ettå tietyt tåsså potentiaali-sina liuottimina mainitut yhdisteet voivat toimia myos osana edellå kuvattua pelkistyssysteemiå ja siinå tapauksessa sama yhdiste voi 20 toimia haluttaessa sekå reagenssina ettå liuottimena.

Reaktio tapahtuu laajalla låmpotila-alueella, esimerkiksi -20 °C -+100 °C, vaikka valittu tarkka låmpotila riippuu useista tekijoistå, joista tårkein on kåytetyn pelkistyssysteemin laatu. Reaktio voidaan 25 suorittaa alle ilmakehån paineessa, vaikka joissakin tapauksissa voi olla suotavaa suorittaa se yli- tai alipaineessa.

Jos halutaan valmistaa sellaista kaavan (I) yhdistettå, jossa RA ja/tai R5 tarkoittaa vetyatomia, olisi suotavaa ettå vastaava ryhmå 30 kaavan (II) yhdisteesså on suojattu, vaikka kaikissa tapauksissa ei ehkå olisi vålttåmåtontå, ettå sekå R* ettå R5 ovat suojattuja, jos A tarkoittaa kaavan -NR*R5 ryhmåå. Tåsså tapauksessa suojaava ryhmå voi olla mikå tahansa edellå kuvatuista ja se voidaan poistaa tålla alalla hyvin tunnetuilla tavanomaisilla tavoilla, esimerkiksi kåsittelemållå 35 hapolla tai alkalilla tai pelkistyksellå riippuen suojaryhmån laadus-ta.

24 9 0 4 1 8

Kaavan (I) yhdisteistå ovat lååketieteellisesti tårkeimpiå yhdisteitå dikarboksyylihapot, joissa sekå R1 ettå R3 tarkoittavat vetyatomeja, samoinkuin nåiden happojen suolat.

5 Kaavan (I) dikarboksyylihappo, jossa sekå R1 ettå R3 tarkoittavat vetyatomeja voidaan valmistaa hydrolysoimalla kaavan (I) diesteriå tai monoesteriå (jossa R1 ja R3 tarkoittavat esterijåånnoksiå tai R1 tar-koittaa esterijåånnostå ja R3 tarkoittaa vetyatomia) hapolla tai emåk-sellå; se voidaan valmistaa myos diesterin tai monoesterin esteri-10 ryhmån pelkiståvållå poistamisella, tai (kun yhdiste sisåltåå allyy-liesteriryhmån) katalyyttisesti poistamalla allyyliryhmå sopivalla katalyytillå kuten tetrakis(trifenyylifosfiini)palladium(O). Kåytetyt reaktio-olosuhteet ovat samoja kuin tåmåntyyppisille reaktioille ta-vanomaisesti kåytetyt ja ne ovat alan ammattimiehille hyvin tunnettu-15 ja.

Keksinndn yhdisteisså voi olla useita epåsymmetrisiå hiiliatomeja. Siitå johtuen erilaiset diastereomeerit ovat mahdollisia, kuten edellå on kuvattu. Tarvittaessa nåmå diastereoisomeerit voidaan erottaa kro-20 matografialla tai fraktioivalla takaisinkiteytyksellå. Vaihtoehtoises- ti yksityiset isomeerit voidaan valmistaa låhtemållå liikkeelle kaavan (II) låhtoaineen yksityisestå isomeeristå, joka itse voi olla saatu sopivilla resoluutio- tai erotustekniikoilla. Jos ainakin toinen låh-tdaineista on isomeeriseos, keksinnfin yhdiste saadaan samoin normaa-25 listi isomeeriseoksena. Haluttaessa tåmå optisten isomeerien seos voidaan erottaa tavanomaisilla resoluutiomenetelmillå, esimerkiksi muodostamalla suoloja optisesti aktiivisten emåsten kuten kinkoniinin, kiniinin tai kinidiinin kanssa tai optisesti aktiivisten orgaanisten happojen, esimerkiksi i-kamferisulfonihapon tai d-kamferisulfonihapon 30 kanssa. Optisia isomeerejå voidaan erotella myos muilla tunnetuilla tekniikoilla, mukaanlukien erilaiset kromatografiat, fraktiointikitey-tys jne.

Låhtoaineina kåytettåvåt kaavan (II) yhdisteet voidaan saada erilai- 35 silla hyvin tunnetuilla reiteillå, esimerkiksi sellaisilla, joita on kuvattu US-hakemuksessa No. 721 303 ja US-hakemuksessa No. 917 041.

25 90 4 1 8

Kuten edellå on mainittu, esillåolevan keksinnon yhdisteillå on kyky inhibioida ACE:n aktiivisuutta eli entsyymin, joka muuttaa angioten-siini I:tå angiotensiini II:ksi ja myos inaktivoi bradykiniinin. Keksinnon yhdisteiden fysiologinen aktiivisuus voidaan arvioida måårittå-5 mållå koeyhdisteen konsentraatio, joka tarvitaan inhibioimaan ACE: aktiivisuutta 50 %:lla in vitro (IC50), esimerkiksi D.W. Cushman et al:n proseduurilla [Biochemical Pharmacology, 20, 1637 (1971)]. Spesifisesti kaniinin keuhkoista uutettuja ACE-liuoksia, ja substraat-tina hippuryylihistidyylileusiinia, johon oli lisåtty koeyhdistettå 10 erilaisissa våkevyyksisså, lisåttiin natriumkloridia sisåltåvåån bo-raattipuskuriliuokseen, ja pH såådettiin arvoon 8,3. Entsymaattisen reaktion annettiin jatkua 37 °C:ssa 30 minuutin ajan, jonka jålkeen reaktio pååtettiin lisååmållå suolahapon IN vesiliuosta. Tållå reak-tiolla muodstunut hippurihappo uutettiin etyyliasetaatilla ja sitten 15 liuotin tislattiin uutteesta. Jåånnoshippurihappo liuotettiin veteen. Hippurihapon måårå tuloksena olevassa vesiliuoksessa mååritettiin ultraviolettisåteilyn absorbenssina 228 nm:så. Sitten tuloksena olevat arvot piirrettiin kåyrån muodostamiseksi, joka osoitti yhteyttå muo-dostuneen hiippurihapon måårån ja koeyhdisteen konsentraation vålillå. 20 IC50-arvo voidaan saada lukemalla tåltå kåyråltå koeyhdisteen se konsentraatio, joka våhentåå muodostuneen hippurihapon måårån puoleen siitå mååråstå, joka muodostui kun koeyhdistettå ei ollut låsnå. Tållå menettelytavalla keksinnon erilaisille yhdisteille saadut IC50-arvot on esitetty seuraavassa taulukossa 6. Koeyhdisteet olivat seuraavat: 25 A: a-(6(R)-[5-Amino-l(S)-karboksipentyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyy-li)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli}etikkahappodihydrokloridi (esimerkin 3 tuote); 30 B: a-{6(R)-[7-Amino-1(S)-karboksiheptyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyy-li)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli}etikkahappo (esimerkin 6 tuote); C: rel-a-{6(R)-[7-Amino-1(S)-karboksiheptyyliamino]-5-okso-2(R)-per- hydro-l,4-tiatsepin-4-yyli}etikkahappo (esimerkin 9 tuote); 35 D: a-{6(R)-[8-Amino-1(S)-karboksioktyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyy- li)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli}etikkahappo (esimerkin 14 tuote); 26 9 0 4 1 8 E: rel-α-{3(S)-[8-Amino-1(S)-karboksioktyyliamino]- 2-okso- 6(R)-fenyy- liperhydroatsepin-l-yyli)etikkahappo (esimerkin 17 tuote); F: a-(6(R)-[1(S)-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso- 5 2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo (esimerkin 20 tuote); G: rel-α-(3(S)-[1(S)-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-l-yyli)etikkahappo (esimerkin 23 tuote).

10

Taulukko 6

Koeyhdiste IC50 15 (mol/1) A 3,3 x 10'9 B 2,0 x 10"9 C 3,1 x 10‘9 20 D 1,6 x 10'9 E 4,1 x 10'9 F 1,6 x 10'9 G 3,7 x 10'9 25

Kuten yllfiolevassa taulukossa olevista tuloksista selvåsti voidaan nåhdå keksinndn mukaiset yhdisteet inhibioivat AGE:n aktiivisuutta hyvin alhaisissa konsentraatioissa ja siten ne ovat hyddyllisiå diag-nostisina, preventatiivisina ja terapeuttisina aineina hypertensiivi-30 siile potilaille; samoin nåiden yhdisteiden suoloilla on samanlaisia vaikutuksia.

Seuraavaksi esitetaan tietoja, joiden avulla verrataan EP 161801 jul-kaisun yhdisteiden vaikutusta esillå olevien yhdisteiden vaikutukseen. 35 Nåmå tiedot ovat peråisin esillå olevan hakemuksen esimerkkien 14 ja 20 mukaisista yhdisteistå ja EP-julkaisun 161801 esimerkin 17 mukai-sesta yhdisteestå ja yhdisteet eroavat toisistaan substituentin Aja 27 9041 8 R1 suhteen (merkitty yksinkertaisesti Arksi testiprotokollassa). Vertailutesteia 5 1. Toimenpiteet

Wistar Iraamichi -rottia, joiden paino oli 250-350 g nukutettiin nat-riumpentobarbitaalilla 30 mg/kg ip. Vasen reisivaltimo ja laskimo kanavoitiin valtimon verenpaineen mittaamiseksi ja lååkeaineen ruis-10 kuttamiseksi. Kanyylin toinen påa vietiin ulkopuolelle niskan kohdal-la.

Seuraavana påivanå kirurgisesta toimenpiteestå valtimokanyyli kytket-tiin painemuuttimeen verenpaineen mittaamiseksi tietoisessa tilassa. 15 Angiotensio I:ta (verisuonia supistavaa ainetta) annosteltiin laski -monsisaisesti annoksella 0,3 ju/kg toistamiseen, kunnes saatiin vakio painetta kohottava vastaus. Kun testiyhdiste oli annosteltu letkuruo-kinnalla annoksella 1,0 mg/kg p.o., angiotensio Irn laskimonsisåista annostelua toistettiin eri aikavålillå.

20

Painetta kohottavan vastauksen prosentuaalinen inhibointi angiotensio I:tå vastaan laskettiin seuraavalla kaavalla ^ / Painetta kohottava vastaus aineelle AI testilaakkeen jålkeen \ χ I Painetta kohottava vastaus vastaan AI ennen testilaakkeen J \ antamista / 30 2. Testivhdisteet 35 C02.r Γ Λ A “CHNH (. Η (S) '»V-'i

0 éHjCOOH

26 9 0 4 1 8

Yhdiste A R3 Huomautuksia

1 Esimerkisså 14 H2N(CHZ)7- H

5

2 Esimerkisså 20 HN^~~^(CH2)4- H

3 Esimerkisså 17 ^q^-(CH )- Et HC1 ”su°la 10 *) EP 161801 mukainen yhdiste 3. Tulos 15 Yhdiste Inhibointi

Max (%) T% (h) 1 71 > 8 2 77 > 8 20 3 95 5,6

Kuten tuloksista voidaan nåhdå, esillå olevan hakemuksen mukaisten yhdisteiden vakutusaika on pidempi kuin EP 161801 julkaisun yhdistei-25 den (tåmån osoittaa Tl/2 tiedot).

Kåytånnon terapeuttista kåyttoå vårten keksinnon yhdisteet nautitaan edullisesti yhdistelmånå farmaseuttisesti hyvåksyttåvien kantoainei-den, liuoksien tai laimentimien kanssa. Yhdisteitå voidaan nauttia 30 suun kautta tai muuta kautta (esim. ruoansulatuskanavan ulkopuolitse ruiskeena suoneen tai lihakseen) ja koostumuksen muoto mååråytyy tie-tenkin aiotun annostusmuodon mukaan. Suullista nauttimista vårten keksinnon yhdisteitå voidaan nauttia jauheina, rakeina, tabletteina, kapseleina, siirappeina tai eliksiireinå. Ruoansulatuskanavan ulkopuo-35 lista nauttimista vårten yhdisteitå voidaan nauttia sopivan ruiskutet-tavan seoksen muodossa, jossa keksinnon yhdiste on liuotettuna tai suspendoituna pyrogeenivapaassa ruiskutettavassa våliaineessa, Annos 29 9 0 41 8 vaihtelee håirion laadusta ja vakavuudesta samoinkuin potilaan iåstå, kunnosta ja ruumiinpainosta riippuen. Esimerkiksi tåysi-ikåistå ihmis-potilasta vårten kullakin kerralla nautittava annos tulisi olemaan edullisesti 0,5-1000 mg, mieluummin 1-100 mg suun kautta nautittaessa, 5 kun taas suositeltava annos kullakin kerralla suonensisåistå ruisketta vårten on 0,1-100 mg, mieluummin 0,1-10 mg. Nåitå annoksia voidaan nauttia yksi tai useampia, edullisesti 1-3 annosta påivåsså.

Keksintoå havainnollistetaan lisåå seuraavilla esimerkeillå, jotka ku-10 vaavat keksinnon erilaisten yhdisteiden valmistusta. Optisen rotaation arvot mitattiin kaikki natriumin D-viivan avulla, eli kaikki arvot ovat [a]D.

ESIMERKKI 1 15 t-Butvvli a-f6(R)-(l-t-butoksikarbonvvli-5-ftalimidopentwliamino)-5-okso-2 -(S)-(2 -tienvvli)perhvdro-l,4-tiatsepin-4-vvlilasetaatti 3 g natriumkarbonaattia lisåttiin liuokseen, jossa oli 1,35 g t-butyy-20 li q-[6(R)-amino-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4- yyli]asetaattia ja 2,23 g t-butyyli 2-bromo-6-ftalimidoheksanoaattia liuotettuna 20 ml:aan dimetyyliformamidia ja seosta sekoitettiin 60 °C:ssa 24 tuntia. Sitten reaktioseos sekoitettiin etyyliasetaatin ja veden seokseen. Etyyliasetaattikerros erotettiin, pestiin natrium-25 kloridin vesiliuoksella, kuivattiin vedettomållå magnesiumsulfaatilla ja våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa liuottimen poistamiseksi. Jåånnos pantiin pylvåskromatografiaan silikageelin låpi kåyttåen syk-loheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 5:1 olevaa seosta eluenttina.

30

Ensimmåiseksi eluoiduista jakeista saatiin 700 mg t-butyyli a-{6(R)-[1(R)-t-butoksikarbonyyli-5-ftalimidopentyyliamino]-5-okso-2-(S)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)asetaattia vaahtomaisena kiin-toaineena.

35

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) 6 ppm: 1,48 (18H, singletti); jo 9041 8 1,0 - 2,0 (6H, multipletti); 2.4 - 4,8 (12H, multipletti); 6,85 - 7,3 (3H, multipletti); 7,55 - 8,0 (4H, multipletti).

5

Seuraavaksi eluoiduista jakeista saatiin sen jålkeen 829 mg t-butyyli a-(6(R)-[1(S)-t-butoksikarbonyyli-5-ftalimidopentyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli Jasetaattia vaahtomaise-na kiintoaineena.

10 [a]23 + 30,1 (c - 1,0, dimetyyliformamidi).

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 1,48 (18H, singletti); 15 1,2 - 1,9 (6H, multipletti); 2.5 - 4,8 (12H, multipletti); 6,9 - 7,3 (3H, multipletti); 7.6 - 8,0 (4H, multipletti).

20 ESIMERKKI 2 t-Butwli q- (6(R) - f S-amino-HS) -t-butoksikarbonvvlipentwliaminol -5-okso-2(S)-(2-tienvvli)perhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvlilasetaatti 25 0,06 ml hydratsiinimonohydraattia lisattiin liuokseen, jossa oli 815 mg t-butyyli a-(6(R)-[1(S)-t-butoksikarbonyyli-5-ftalimidopentyyliami-no]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)asetaattia (valmistettu kuten esimerkisså 1 on kuvattu) liuotettuna seokseen, jossa oli 3 ml metyleenikloridia ja 3 ml etanolia, samalla jaahdyttaen 30 jailla, ja seosta sekoitettiin huoneenlampotilassa 4 påivåå. Taman ajan kuluttua reaktioseokseen ilmaantunut saostuma suodatettiin pols ja suodos våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa. Jåånnos sekoitettiin etyyliasetaattiin ja saostunut materiaali suodatettiin pois. Etyyliasetaattisuodos kuivattiin vedettomållå magnesiumsulfaatilla ja 35 våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa liuottimen poistamiseksi.

Jåånnos pantiin pylvåskromatografiaan silikageelin låpi kåytåen etyy-liasetaatin ja metanolin tilavuussuhteessa 10:1 ja 4:1 olevia seoksia 3i 9041 8 eluenttina saaden saaliiksi 302 rag otsikkoyhdistettå siirappina. Ydinraagneettiresonanssispektri (CDC13) 6 ppm: 1,48 (18H, singletti); 1.2 - 1,9 (6H, multipletti); 5 2,5-4,8 (14H, multipletti); 6,9 - 7,35 (3H, multipletti).

ESIMERKKI 3 10 α-(6(R)-f 5-Amino-IfS’) -karboksipentvvliaminol-5-okso-2(S)-(2-tienvvli)-perhvdro-1,4-tiatsepin-4-vvliletikkahappodihvdrokloridi 302 mg t-butyyli a-(6(R)-[5-amino-l(S)-t-butoksikarbonyylipentyyliami-no]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli Jasetaattia 15 (valmistettu kuten esimerkisså 2 on kuvattu) sekoitettiin 3 ml:aan suolahpon 4N dioksaaniliuosta, ja seosta sekoitettiin 16 tuntia huo-neenlåmpotilassa. Tåmån ajan kuluttua dioksaani tislattiin pois ali-paineessa ja jåånnos trituroitiin dietyylieetterilla ja suodatettiin saaden saaliiksi 278 mg otsikkoyhdistettå jauheena.

20 [a]23 + 73,3° (c = 1,0, suolahapon IN vesiliuos).

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 1.3 - 2,2 (6H, multipletti); 25 2,4-5,2 (11H, multipletti); 6,95 - 7,6 (3H, multipletti).

ESIMERKKI 4 30 t-Butvvli a-f 6(R)- (7-t-butoksikarbonvvlianiino-l-etoksikarbonvvlihep-tvvliamino)-5-okso-2(S)-(2-tienvvli)perhvdro-1,4-tiatsepin-4-vvli1 - asetaatti 1,5 g t-butyyli a-[6(R)-amino-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-35 tiatsepin-4-yyli]asetaattia ja 4,0 g etyyli 2-bromo-8-t-butoksikar- bonyyliamino-oktanoaattia liuotettiin 20 ml:aan dimetyyliformamidia ja seokseen lisåttiin 2,79 g natriumkarbonaattia. Sitten seosta sekoitet- 32 9 0 4 1 8 tiin 75 °C:ssa 18 tuntia, jonka jålkeen siihen lisåttiin etyyli-asetaattla ja vettå. Etyyliasetaattikerros erotettiin, pestiin nat-riumkloridin vesiliuoksellla ja kuivattiin vedettomållå magnesiumsul-faatilla. Sitten se våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa liuottimen 5 poistamiseksi. Jåånncjs pantiin pylvåskromatografiaan silikageelln låpi kåyttåen sykloheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 4:1 ole-vaa seosta eluenttina.

442 rag t-butyyli a-{6(R)-(7-t-butoksikarbonyyliamino-1-(R)-etoksikar-10 bonyyliheptyyliamino)- 5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)asetaattia saatiin ensimmåiseksi eluoiduista jakeista ja eris-tettiin siirappina.

[a]23 + 46,3° (c = 1,0, dimetyyliformamidi).

15

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) 6 ppm: 1.25 (3H, tripletti); 1.45 (9H, singletti); 1,48 (9H, singletti); 20 1,1-1,8 (10H, multipletti); 2,4 - 4,8 (15H, multipletti); 6.9 - 7,35 (3H, multipletti).

Senjålkeen eluoitiin 525 mg a-{6(R)-[7-t-butoksikarbonyyliamino-l(R)-25 etoksikarbonyyliheptyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)asetaattia ja eristettiin siirappina.

[a]23 + 25,9° (c = 1,0, dimetyyliformamidi).

30 Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) 6 ppm: 1.26 (3H, tripletti, J-7 Hz); 1,43 (9H, singletti); 1.46 (9H, singletti); 1,1 - 1,8 (10H, multipletti); 35 2,4 - 4,75 (15H, multipletti); 6.9 - 7,35 (3H, multipletti).

33 90 41 8 ESIMERKKI 5 α- ( 6ΠΟ - f 7-Amino-l(S) -etoksikarbonvvliheptwliaminol -5-okso-2(S) -(2-tienyvlt)perhvdro-l ^-tiatsepin^-vvliletikkahappodihvdrokloridi 5 510 mg t-butyyli a-{6(R)-[7-t-butoksikarbonyyliamino-1-etoksikarbonyy-liheptyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yylijasetaattia (valmistettu kuten esimerkisså 4 on kuvattu) liuotet-tiin 5 ml:aan suolahapon 4N dioksaaniliuosta, ja seoksen annettiin 10 seisoa 18 tuntia. Tåmån ajan kuluttua liuotin tislattiin pois ja jåån-nos trituroitiin di-isopropyylieetterilla ja suodatettiin saaden 520 mg jauhetta. Tåmå raakajauhe puhdistettiin pylvåskromatografialla Diaion HP-20:n (kauppanimi) låpi kåyttåen 20 til-% ja 40 til-% aseto-nin vesiliuosta (eli seosta, jossa oli joko 20 tai 40 % asetonia ja 15 vastaavasti 80 tai 60 % vettå) eluenttina. Eluoidun jakeen våkevointi haihduttamalla alipaineessa antoi vaahtomaista kiintoainetta, joka liuotettiin 1 ml:aan suolahapon 4N dioksaaniliuosta. Dioksaanin haih-dutus alipaineessa, jota seurasi triturointi dietyylieetterillå ja suodatus, antoi 121 mg otsikkoyhdistettå.

20 [a]23 +63,7° (c = 1,0, suolahapon IN vesiliuos).

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuteroitu dimetyylisulfoksidi) S ppm: 25 1,1-2,1 (10H, multipletti); 1,26 (3H, tripletti, J=7 Hz); 2,4 - 5,2 (13H, multipletti); 6,95 - 7,6 (3H, multipletti).

30 ESIMERKKI 6 a-(6(R)-f 7-Amino-1(S)-karboksiheptvvliaminol-5-okso-2(S)-(2-tienvvli)-perhvdro-1,4-tiatsepin-4-vvliletikkahappo 35 142 mg a-(6(R)-[7-Amino-l(S)-etoksikarbonyyliheptyyliamino]-5-okso- 2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappodihydro- kloridia (valmistettu kuten esimerkisså 5 on kuvattu) liuotettiin 1,2 34 90 41 8 ml:aan natriumhydroksidin IN vesiliuosta, ja seoksen annettiin seisoa 24 tuntia. Tåmån ajan kuluttua seoksen pH såådetiin arvoon 4,8 lisåå-mållå suolahapon IN vesiliuosta ja tuloksena olevat sakat keråttiin suodattamalla saaden 112 mg otsikkoyhdistettå.

5 [a]23 + 93,9° (c - 1, suolahapon IN vesiliuos).

Ydinmagneettiresonanssispektri (CF3C02D) S ppm: 1,3 - 2,4 (10H, multipletti); 10 3,0 - 5,2 (11H, multipletti); 7,0 - 7,15 (3H, multipletti).

ES1MERKKI 7 15 t-Butvvli rel-a-f6(R4-(7-t-butoksikarbonvvliamino-l-etoksikarbonvvli-heptvvliamino') -5-okso-2CR) -fenvvliDerhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvli1 -asetaatti

Seuraten samaa proseduuria kuin esimerkisså 4 on kuvattu suoritettiin 20 kondensointireaktio t-butyyli rel-α-(6(R)-amino-5-okso-2(R)-fenyyli-perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli]asetaatin (400 mg) ja etyyli 2-bromo-8-t-butoksikarbonyyliamino-oktanoaatin (1,08 g) vålillå natriumkarbonaa-tin (0,76 g) låsnåollessa saaden kaksi diastereoisomeeriå. Nåmå iso-meerit erotettiin pylvåskromatografialla silikageelin låpi kåyttåen 25 metyleenikloridin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 10:1 olevaa seosta eluenttina.

Ensimmåisenå eluoiduista jakeista saatiin 142 mg 1(R)-etoksikarbonyy-li-isomeeriå siirappina.

30

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDClj) S ppm: 1.25 (3H, tripletti, J-7 Hz); 1,42 (9H, singletti); 1,45 (9H, singletti); 35 1,1-1,8 (10H, multipletti); 2,35 - 4,7 (15H, multipletti); 7.26 (5H, singletti).

35 90 4 1 8

Seuraavaksi eluoiduista jakeista saatlin 144 mg 1(S)-etoksikarbonyyli-isomeeriå siirappina.

Ydirunagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 5 1,28 (3H, tripletti, J=7 Hz); 1,42 (9H, singletti); 1,45 (9H, singletti); 1.1 - 1,8 (10H, multipletti); 2.4 - 4,7 (15H, multipletti); 10 7,28 (5H, singletti).

ESIMERKKI 8 rel-a-(6(R)-f7-Amino-l(S)-etoksikarbonvvliheptvvliaminol-5-okso-2(R)-15 fenvvliperhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvli)etikkahappo

Kaikki 144 mg t-butyyli rel-α-[6(R)-(7-t-butoksikarbonyyliamino-1(S)-etoks ikarbonyy1iheptyy1iamino)-5-okso- 2(R)-fenyyliperhydro-1,4 -1iatse-pin-4-yyli]asetaatti-isomeeristå, joka oli saatu esimerkisså 7 kuva-20 tussa kromatografiassa toiseksi eluoitavasta jakeesta, liuotettiin seokseen, jossa oli 1,5 ml anisolia ja 2 ml trifluoroetikkahappoa. Sitten seosta sekoitettiin huoneenlampotilassa 4 tuntia. Seoksen våke-vointi haihduttamalla alipaineessa antoi oljymåistå jåånnostå, joka trituroitiin di-isopropyylieetterillå ja suodatettiin saaden 143 mg 25 otsikkoyhdisteen raakatuotetta. Koko tåmå yhdiste liuotettiin veteen, joka sisålsi 81 mg natriumbikarbonaattia, såådettiin pH-arvoon 5,5 li-sååmållå suolahapon 0,1N vesiliuosta ja puhdistettiin pylvåskromato-grafialla Diaion HP20:n låpi. Peråkkåinen eluointi metanolin 20 til-% ja 40 til-% vesiliuoksella antoi jakeen, joka sisålsi otsikkotuotetta, 30 joka våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa saaden 69 mg otsikkoyh-distettå jauheena.

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuteroitu dimetyylisulfoksidi) S ppm: 35 1,20 (3H, tripletti, J=7 Hz); 1.1 - 1,7 (10H, multipletti); 2.4 - 4,5 (13H, multipletti); 36 90 4 1 8 7,36 (5H, singletti).

ESIMERKKI 9 5 rel-α-(6(R)-[7-Amino-IfS)-karboksiheptvvliamlnol-5-okso-2(R)-fenvvli-perhvdro-1 .4-tiatsepin-4-wlHetikkahappo 59,0 rag rel-α-{6(R)-[7 - amino-1(S)-etoksikarbonyyliheptyyliamino]-5-okso-2(R)-fenyyliperhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli}etikkhappoa (valmistet-10 tu kuten esimerkisså 8 on kuvattu) liuotettiin 1,0 ml:aan natriumhy- droksidin 0,5N vesiliuosta, ja seosta sekoitettiin huoneenlåmpotilassa 3 tuntia. Tåmån ajan kuluttua reaktioseoksen pH såådettiin arvoon 4,5 lisååmållå suolahapon IN vesiliuosta ja sitten se våkevoitiin haihdut-tamalla alipaineessa otsikkoyhdisteen (45 mg) saostamiseksi.

15

Ydinmagneettiresonanssispektri (D20-DC1) δ ppm: 1,7 - 2,7 (10H, multipletti); 3,3 - 5,7 (11H, multipletti); 7,93 (5H, singletti).

20 ESIMERKKI 10 t-Butvvli rel-q- f 6(R) - (l-etoksikarbonvvli-5-ftaliniidopentvvlianitno) - 5-okso-2iR') -fenvvliperhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvlilasetaatti 25

Seuraamalla samaa proseduuria kuin esimerkisså 4 on kuvattu suoritet-tiin kondensointireaktio t-butyyli rel.-q-[6(R)-amino-5-okso-2(R)-fe-nyyliperhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]asetaatin (336 mg) ja etyyli 2-bromo-6-ftalimidoheksanoaatin (552 mg) vålillå natriumkarbonaatin 30 (318 mg) låsnåollessa saaden kaksi diastereoisomeeriå. Nåmå isomeerit erotettiin pylvåskromatografialla silikageelin låpi kåyttåen syklohek-saanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 5:1 olevaa seosta eluent-tina .

35 Ensimmåiseksi eluoiduista jakeista saatiin 206 mg 1(R)-etoksikarbonyy-li-isomeeriå: 37 90 41 8

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) 6 ppm: 1.25 (3H, tripletti, J-=7 Hz); 1.47 (9H, singletti); 1,1 - 1,9 (6H, multipletti); 5 2,35 - 4,55 (14H, multipletti); 7.28 (5H, singletti); 7.5 - 8,0 (4H, multipletti).

Ensimmåiseksi eluoiduista jakeista saatiin 230 mg 1(S)-etoksikarbonyy-10 li-isomeeria siirappina.

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 1.26 (3H, tripletti, J- Hz); 1.47 (9H, singletti); 15 2,4 - 4,5 (14H, multipletti); 7.28 (5H, singletti); 7.5 - 8,0 (4H, multipletti).

ES1MERKKI 11 20 rel-Q-l6('R~)-ri(,S') - Etoksikarbonvvli - 5 - f talimidopentyvliamino 1 - 5-okso-2ΠΟ -fenvvliperhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvli)etikkahappo 206 mg t-butyyli rel-α-{6(R)-[1(S)-etoksikarbonyyli-5-ftalimidopentyy-25 liamino)-5-okso-2(R)-fenyyliperhydro-1,4 -tiatsepin-4-yyli]asetaattia (valmistettu kuten esimerkisså 10 on kuvattu) liuotettiin seokseen, jossa oli 2 ml anisolia ja 2 ml trifluoroetikkahappoa. Seosta sekoi-tettiin huoneenlåmpotilassa 4 tuntia, jonka jålkeen se våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa. Tuloksena oleva kumimainen jåånnos tritu-30 roitiin di -isopropyylieetterillå ja suodatettiin saaden otsikkoyhdis-teen trifluoroetikkahapposuolaa. Tåmå suola suspensoitiin seokseen, jossa oli 4 ml vettå, joka sisalsi 0,6 g natriumbikarbonaattia ja 4 ml di-isopropyylieetteriå ja såadettiin pH-arvoon 3 lisåamållå suolahapon IN vesiliuosta, samalla sekoittaen, otsikkoyhdisteen (105 mg) saosta-35 miseksi.

38 9 0 418

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) & ppm: 1.26 (3H, tripletti, J-7 Hz); 1,0 - 2,2 (6H, multipletti); 2,6 - 4,7 (13H, multipletti); 5 7,21 (5H, singletti); 7,5 - 7,9 (4H, multipletti).

ESIMERKK1 12 10 t-Butvvli a- Γ6fR1) - (S-t-butoksikarbonyvliamlno-l-etoksikarboksyvliok-tvvliamino)-5-okso-2(S)-(2-tienvvlPperhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvli1 -asetaatti 1,3 g t-butyyli a-[6(&)-amino-5-okso-2(£)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-15 tiatsepin-4-yyli]asetaattia kåsiteltiin 1,73 g:lla etyyli 2-bromo-9-t-butoksikarbonyyliaminononanoaattia (joka oli valmistettu kuten val-mistuksessa 4 on kuvattu) samalla tavalla kuin esimerkisså 4 on kuvat-tu. Tuote pantiin sitten pylvåskromatografiaan silikageelin lapi kåyt-taen bentseenin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 5:1 olevaa seosta 20 eluenttina.

Ensimmåiseksi eluoiduista jakeista saatiin 237 mg t-butyyli a-(6(R)-[8 -1-butoks ikarbonyy1iamino-1(R)-e toks ikarbonyylioktyyliamino]- 5 -okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli Jasetaattia siirappina.

25 [a]25 +43,3° (c = 1, dimetyyliformamidi).

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) u^cm'1: 3360, 1730, 1710, 1660.

30

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 1.26 (3H,tripletti, J-7 Hz); 1,45 (9H, singletti); 1,48 (9H, singletti); 35 1,1 - 1,8 (12H, multipletti); 2,4 - 4,8 (11H, multipletti); 4,08 (2H, AB-kvartetti, Δ6-0.58 ppm, J-17 Hz); 39 9 0 4 1 8 4,16 (2H, kvartetti, J-7 Hz); 6.9 - 7,35 (3H, multipletti).

Sen jålkeen seuraavaksi eluoiduista jakeista saatiin 283 mg t-butyyli 5 q-(6(R)-[8-t-butoksikarbonyyliamino-l(S)-etoksikarbonyylioktyyliami-noJ-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyliJasetaattia siirappina.

[q]25 +28,6° (c - 1,0, dimetyyliformamidi).

10

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) «„„cm'1: 3360, 1730, 1705, 1655.

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 15 1,28 (3H, tripletti); 1,44 (9H, singletti); 1,47 (9H, singletti); 1,1 - 1,8 (12H, multipletti); 2,4 - 4,75 (11H, multipletti); 20 4,08 (2H, AB-kvartetti, A$=0,50 ppm, J-17 Hz); 4,18 (2H, kvartetti, J=7 Hz); 6.9 - 7,35 (3H, multipletti).

ESIMERKKI 13 25 a -1 6 (R) - f 8 - Amino -1 (S’) -etoksikarbonvvlioktvvliaminol -5-okso-2 (S') -(2-tienvvli)perhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvli)etikkahapDodihvdrokloridi 1,09 g t-butyyli a-{6(R)-[8-t-butoksikarbonyyliamino-l(S)-etoksikar-30 bonyylioktyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)asetaattia (valmistettu kuten esimerkisså 12 on kuvattu) kåsi-teltiin samalla tavalla kuin esimerkisså 5 on kuvattu saaden 0,78 g otsikkoyhdistettå jauheena.

35 [q]25 +61,1° (c = 1, suolahapon IN vesiliuos).

40 9 0 4 1 8

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuteroitu dimetyylisulfoksidi) S ppm: 1.1 - 2,1 (15H, multipletti); 2,5 - 5,1 (13H, multipletti); 5 6,95 - 7,55 (3H, multipletti).

ESIMERKKI 14

q-< 6(R)-[8-Amino-l(S)-karboksioktvvliaminol-5-okso-2(S)-(2-tienvvli)-10 perhvdro-14-tiatsepin-4-vvllletikkahaOPO

Samalla tavalla kuin esimerkisså 6 on kuvattu 0,30 g q-{6(R)-(8-amino-1(S)-etoksikarbonyylioktyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyliletikkahappodihydrokloridia (valmistettu kuten 15 esimerkisså 13 on kuvattu) antoi 0,13 g otsikkoyhdistettå jauheena, joka suli vårjåytyen yli 240 °C:ssa.

[q]2S +96,1° (c = 1,0, suolahapon IN vesiliuos).

Ydinmagneettiresonanssispektri (CF3C02D) S ppm: 20 1,3 - 2,4 (12H, multipletti); 3.1 - 5,3 (11H, multipletti); 6,95 - 7,4 (3H, multipletti); ESIMERKKI 15 25 t-Butwli rel-q-f 3(S1 -(8-t-butoksikarbonvvliamino-l-etoksikarbonvv-1ioktvvliaminol-2-okso-6(R)-fenvvliperhvdroatsepin-1-vvlilasetaatti 1,2 g t-butyyli rel-α-[3(S)-amino-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-30 l-yyli]asetaattia kåsiteltiin etyyli 2-bromo-9-t-butoksikarbonyyli-aminononanoaatilla (2,15 g) (valmistettu kuten valmistuksessa 4 on kuvattu) samalla tavalla kuin esimerkisså 4 on kuvattu, saaden reak-tiotuotetta, joka pantiin pylvåskromatografiaan silikageelin lapi kåyttåen sykloheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 1:1 ole-35 vaa seosta eluenttina.t-Butyyli rel-α-{3(S)-[8-t-butoksikarbonyyliami-no-l(R)-etoksikarbonyylioktyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyli-perhydroat-sepin-l-yyli)asetaatti (0,77 g) eluoitiin ensin siirappina.

4i 9 0 41 8

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) υ^^αη"1: 3350, 1735, 1730, 1710, 1655.

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 5 1,27 (3H, tripletti, J=7 Hz); 1,47 (18H, singletti); 1.0 - 2,3 (16H, multipletti); 2.4 - 4,7 (9H, multipletti); 4.08 (2H, AB-kvartetti, Δδ-0,33 ppm, J=17 Hz); 10 4,18 (2H, kvartetti, J=7 Hz); 7.0 - 7,4 (5H, multipletti).

Senjålkeen eluoitiin siirappina 0,68 g t-butyyli rel-α-(3(S)-[8-t-butoks ikarbonyyliamino -1(S)-etoks ikarbonyy1ioktyy1 iamino]- 2 -okso- 6(R)-15 fenyyliperhydroatsepin-l-yylilasetaattia.

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) uraaxcm"1; 3350, 1735, 1710, 1655.

20 Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 1,27 (3H, tripletti); 1,46 (18H, singletti); 1.1 - 2,2 (16H, multipletti); 2.8 - 4,7 (9H, multipletti); 25 4,07 (2H, AB-kvartetti, Δδ-0,33 ppm, J=17 Hz); 4,19 (2H, kvartetti, J=7 Hz,); 7.05 - 7,45 (5H, multipletti).

ESIMERKKI 16 30 rel-α-{3(S)-Γ8-Amino-l-(S)-etoksikarbonvvlioktvvliamino1-2-okso-6(R) -fenvvliperhvdroatseDin-1-vvli)etikkahappodihvdrokloridi 0,68 g t-butyyli rel-α-(3(S)-[8-t-butoksikarbonyyliamino-1(S)-etoksi-35 karbonyylioktyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-l-yyli)-asetaattia (valmistettu kuten esimerkisså 15 on kuvattu) kåsiteltiin samalla tavalla kuin simerkisså 5 on kuvattu saaden 0,45 g otsikkoyh- 42 90 41 8 distettå jauheena.

Infrapuna-absorptiospektri (Nujol) υ^αη'1: 2000-3780, 1750, 1730 (olkapåå), 1660.

5

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuteroitu dimetyylisulfoksidi) S ppm: 1,27 (3H, t, J=7Hz,) 1,1 - 2,2 (16H, multipletti); 10 2,6 - 4,7 (11H, multipletti); 7,35 (5H, leveå singletti).

ESIMERKKI 17 15 rel-a-(3(S)-[8-Amino-lfS)-karboksioktvvliaminol-2-okso-6(R)-fenvvli-perhvdroatsepin-1-vvlii etikkahappo

Samalla tavalla kuin esimerkisså 6 on kuvattu rel-α-{3(S)-[8-amino-l-(S)-etoksikarbonyylioktyyliamino]- 2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-20 l-yyli}etikkahappodihydrokloridia (0,30 g) (valmistettu kuten esimer-kisså 16 on kuvattu) antoi otsikkoyhdistettå sisåltåvåå vesiliuosta. Tåmå liuos pantiin pylvåskromatografiaan huokoisen hartsin HP-20 (Mitsubishi Kasei K. K.) låpi eluoiden ensin vedellå ja sitten vedellå, joka sisålsi 20 til-% asetonia. Vesipitoisen asetonijakeen våkevointi 25 haihduttama11a alipaineessa antoi 0,16 g otsikkoyhdistettå kiteinå, jotka sulivat vårjåytyen ja pehmentyen yli 205 °C:ssa.

Infrapuna-absorptiospektri (Nujol) u^cnf1: 3360, 1670, 1590-1615.

30

Ydinmagneettiresonanssispektri (D20 + NaOD) { ppm: 1,7 - 5,7 (multipletti); 4,50 (2H, AB-kvartetti, Δδ-0,44 ppm, J-17 Hz); 7,85 (5H, singletti).

35 43 90 41 8 ESIMERKKI 18 t-Butvvli a-(6(R)-f5-(l-t-butoksikarbonvvli-4-piperidvvli)-1-etoksi-karbonvvliDentvvliaminol-5-okso-2(S)-(2-tienwli)perhvdro-l.4-tiatse-5 pin-4-vvlilasetaatti

Liuos, jossa oli 0,50 g etyyli 6-(l-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyy-li)-2-trifluorometaanisulfonyylioksiheksanoaattia (valmistettu kuten valmistuksessa 5 on kuvattu) 5 mlrssa metyleenlkloridla, lisattiin 10 liuokseen, jossa oli 400 mg t-butyyli a-[6(R)-amino-5-okso-2(£)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli]asetaattia ja 0,2 ml trietyy-liamiinia 5 ml:ssa metyleenikloridia, ja liuoksen annettiin seisoa huoneenlåmpdtilassa yli yon. Sitten reaktioseos vakevoitiin haihdutta-malla alipaineessa ja jaånnokseen lisattiin etyyliasetaattia ja vetta. 15 Etyyliasetaattikerros erotettiin, pestiin vedellå ja kuivattiin vedet-tomållå magnesiumsulfaatilla. Liuotin poistettiin haihduttamalla alipaineessa ja jåånnos pantiin silikageelipylvaskromatografiaan kåyttåen metyleenikloridin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 10:1 olevaa seosta eluenttina.

20 216 mg t-butyyli a-{6(R)-[5-(1-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)-1(R)-etoksikarbonyylipentyyliamino]- 5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyliJasetaattia saatiin siirappimaisena aineena ensim-måiseksi eluoiduista jakeista.

25 [a]25 +27,0° (c - 1,0, dimetyyliformamidi).

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) u^cnf1: 3310, 1730, 1685, 1660.

30

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 0,9 - 1,9 (16H, multipletti); 1,48 (18H, singletti); 2,4 - 4,8 (HH, multipletti); 35 4,08 (2H, AB-kvartetti, 45=0,60 ppm, J=17 Hz); 4,17 (2H, kvartetti, J=7 Hz); 6,9 - 7,35 (3H, multipletti).

44 9 0 4 1 8

Seuraavaksi fraktioiduista jakeista saatiin 280 mg t-butyyli q-(6(R)-[5-(l-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)-1(S)-etoksikarbonyylipentyy-liamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)-asetaattia siirappimaisena aineena.

5 [a]25 +30,0° (c = 1,0, dimetyyliformamidi).

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) u^cin'1: 3300, 1730, 1685, 1660.

10

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 0,9 - 1,9 (16H, multipletti); 1,48 (18H, singletti); 2,3 - 4,8 (11H, multipletti); 15 4,08 (2H, AB-kvartetti, Δδ-0,60 ppm, J-17 Hz); 4,19 (2H, kvartetti, J-7 Hz); 6,9 - 7,35 (3H, multipletti).

ESIMERKKI 19 20 a-(6(R)-fl(S)-Etoksikarbonvvli-5-(4-pjperidvvli)-Dentvvliamino1-5-okso-2(S)-(2-tienvvlDperhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvli)etikkahaopo-dihvdrokloridi 25 2 ml suolahapon 4N dioksaaniliuosta lisflttiin 264 mg:aan t-butyyli a- {6(R)-[5-(1-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)- 1(S)-etoksikarbonyyli-pentyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yy-lijasetaattia (valmistettu kuten esimerkisså 18 on kuvattu) ja seoksen annettiin seisoa huoneenlåmpotilassa yli yon. Sitten liuotin poistet-30 tiin reaktioseoksesta haihduttamalla alipaineessa ja jåånnos pulve- risoitiin dietyylieetterisså ja keråttiin suodattamalla, saaden 208 mg otsikkoyhdistetta.

[a]25 +34,3° (c = 1,0, dimetyyliformamidi).

35

Infrapuna-absorptiospektri (Nujol - kauppanimi - mull) »„„cm'1: 2000-3700, 1730, 1660.

45 90418

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuteroitu dimetyylisulfoksidi) S ppm: 0,9 - 2,1 ja 2,4 - 5,1 (multipletteja); 7,0 - 7,2 (2H, multipletti); 5 7,52 (IH, dupletti, J-4 Hz).

ESIMERKKI 20 a-(6(R)-fl(S)-Karboksi-5-(4-piperidvvli)pentvvliamino1-5-okso-2(S)-10 (2 -tienyyli)perhydro-1.4-tiatsepin-4-vvli>etikkahappo 1,54 ml natriumhydroksidin IN vesiliuosta lisåttiin 150 mg:aan a-(6(R)-[1(S)-etoksikarbonyyli-5-(4-piperidyyli)-pentyyliamino]-5-okso-2(S)-(2 -tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli}etikkahappodihydro-15 kloridia (valmistettu kuten esimerkisså 19 on kuvattu) ja seosta se-koitettiin huoneenlåmpotilassa 17 tuntia. Tåmån ajan kuluttua reak-tioseoksen pH såådettiin arvoon 4,7 lisååmållå suolahapon IN vesiliuosta ja saostuma keråttiin suodattamalla saaden 95 mg otsikkoyhdis-tettå.

20 [a]25 +81,8° (c = 1,0, natriumhydroksidin IN vesiliuos).

Infrapuna-absorptiospektri (Nujol) «„„cm*1: 2000-3600, 1680, 1605.

25

Ydinmagneettiresonanssispektri (D20 + DC1) S ppm: 1,7 - 2,7 (12H, multipletti); 3,2 - 5,8 (14H, multipletti); 7,5 - 7,75 (2H, multipletti); 30 7,95 (IH, dupletti, J-4 Hz).

46 9 0 4 1 8 ESIMERKKT 21 t-Butvvli rel-a-l3(S)-f 5- Q-t-butoksikarbonvvli-4-Diperidvvli') - 1-etok-sikarbonvvliDentvvliaminol-2-okso-6(R)-fenvvliperhvdroatsepin-l-vv-5 li 1asetaatti 1,08 g etyyli 2-bromo-6-(l-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)-heksanoaattia, 0,85 g t-butyyli rel-α-[3(S)-amino-2-okso-6(R)-fenyyli-perhydroatsepin-l-yyli]asetaattia, 0,4 g natriurajodidia ja 1,4 g nat-10 riumkarbonaattia lisåttiin 15 ml:aan dimetyyliformamidia ja seosta sekoitettiin huoneenlåmpotilassa 3 påivåå. Sitten reaktioseokseen lisåttiin etyyliasetaattia ja vettå ja sekoituksen jålkeen etyyli-asetaattikerros erotettiin, pestiin natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettomållå magnesiumsulfaatilla. Sitten liuotin poistet-15 tiin haihduttamalla alipaineessa ja jåånnos pantiin silikageelipylvås-kromatografiaan kåyttåen sykloheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuus-suhteessa 2:1 olevaa seosta eluenttina.

Ensimmåiseksi eluoidusta jakeesta saatiin 574 mg t-butyyli rel-a-20 (3(S)-[5-(1-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)-1(R)-etoksikarbonyyli- pentyyliamino]- 2 -okso- 6 (£) -fenyy1iperhydroatsepin-1-yyli}asetaattia siirappimaisena aineena.

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) umaxcm“1: 25 3340, 1735, 1690, 1660.

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 0,9 - 2,2 (20H, multipletti); 1,47 (18H, singletti); 30 2,4 - 4,4 (9H, multipletti); 4,08 (2H, AB-kvartetti, Δδ-0,33 ppm, J=17 Hz); 4,17 (2H, kvartetti, J**7 Hz); 7,0 - 7,4 (5H, multipletti).

35 Seuraavaksi eluoidusta jakeesta saatiin 555 mg t-butyyli rel-α-1 3(S)-[5-(1-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)-1(S)-etoksikarbonyylipentyy-liamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-l-yyli Jasetaattia siirap- 47 9041 8 pimaisena aineena.

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) urnaxcm'1: 3330, 1760, 1690, 1600.

5

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 1,0 - 2,1 (20H, multipletti); 1,48 (18H, singletti); 2.4 - 4,2 (9H, multipletti); 10 4,05 (2H, AB-kvartetti, Δ5-0.36 ppm, J=17 Hz); 4,18 (2H, kvartetti, J=7 Hz); 7.05 - 7,45 (5H, multipletti).

ESIMERKKI 22 15 gel-a- ( 3(S) -ri(S)-Etoksikarbonyyli-5-(4-piperidvvlilpPn^viianiinoi.2-okso-6(R)-fenvvliperhvdroatsepin-1-vvliletikkahapDoHibydrokloridi 555 mg t-butyyli rel-a-{3(S)-[5-(1-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)-20 1(S)-etoksikarbonyylipentyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatse- pin-l-yyli)asetaattia (valmistettu kuten esimerkisså 21 on kuvattu) kasiteltiin kuten esimerkisså 19 on kuvattu, saaden 423 mg otsikkoyh-distettå jauhemaisena aineena.

25 Infrapuna-absorptiospektri (Nujol) Dicin’1: 2200 - 3200, 1750, 1715, 1660.

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuteroitu dimetyylisulfoksidi) S ppm: 30 1,0 - 2,2 ja 2,6 - 4,7 (multipletti); 7,30 (5H, leveå singletti).

48 9 0 4 1 8 ESIMERKKI 23 rel-a-(3(S)-ri(S) -Karboksi-5 - (4-DiperidvvlDpentvvliamino 1 -2-okso-6(R) -fenwliperhvdroatsepin-l-vvliletikkahappo 5

Liuosta, jossa oli 300 mg rel-α-(3(S)-[1(§)-etoksikarbonyyli-5-(4-piperidyyli)-pentyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-l-yy-liJetikkahappodihydrokloridia (valmistettu kuten esimerkisså 22 on kuvattu) 3,2 mlrssa natriumhydroksidin IN vesiliuosta, sekoitettiin 10 16 tuntia huoneenlåmpotilassa ja sitten sen pH-arvo såådettiin arvoon 4,5 lisååmållå suolahapon IN vesiliuosta. Tuloksena oleva sakka keråt-tiin suodattamalla ja liuotettiin jålleen veteen, joka sisålsi pienen måårån etikkahappoa. Tuloksena oleva liuos yhdesså suodoksen kanssa valutettiin pylvååseen, joka oli pakattu huokoisella HP-20 hartsilla 15 (Mitsubishi Kasei Kogyo Co, Ltd.) ja eluoitiin ensin vedellå ja sitten asetonin 20 til-% vesiliuoksella. Vedellå ensin eluoidut jakeet sisål-sivåt natriumkloridia ja etikkahappoa, kun taas seuraavaksi asetonin 20 til-%:11a vesiliuoksella eluoidut jakeet sisålsivåt otsikkoyhdis-tettå. Viimeksimainitut jakeet våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa 20 saaden 223 mg otsikkoyhdistettå jauhemaisena aineena.

Infrapuna-absorptiospektri (Nujol) umaxcm_1: 2000-3700, 1660, 1600-1610.

25 Ydinmagneettiresonanssispektri (D20 + DCl) S ppm: 1.7 - 3,0 (16H, multipletti); 3,2 - 4,1 (6H, multipletti); 4,4 - 5,3 (6H, multipletti); 7.7 - 8,0 (5H, multipletti).

30 VALMISTOS 1

Dietvvli q-(å-svanoheksvvlilmalonaatti 35 2,3 g natriumhydridiå (55 p-% mineraalioljydispersiona) lisåttiin våhitellen jåillå jååhdyttåen liuokseen, jossa oli 8,0 ml dietyylima-lonaattia liuotettuna 80 ml:aan dimetyyliformamidia. Seosta sekoitet- 49 90 41 8 tiin 30 minuuttia ja sitten siihen lisåttiin 10 mg 7-bromoheptaaninit-riiliå tlpoittain 30 minuutin aikana. Sitten seosta sekoitettiin huo-neenlåmpotilassa 20 tuntia typpiatmofåårisså. Tåmån ajan kuluttua lisåttiin etyyliasetaattia ja vettå seokseen, joka hapotettiin sitten 5 lisååmållå kaliumvetysulfaatin vesiliuosta, jonka jålkeen orgaaninen kerros erotettiin. Tåmå kerros kuivattiin vedettomållå magnesiumsul-faatilla ja liuotin poistettiin haihduttamalla alipaineessa. Jåånnos puhdistettiin pylvåskromatografialla silikageelin låpi (eluentti: sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seos tilavuussuhteessa 3:1) saaden 10 8,9 mg otsikkoyhdistettå nesteenå.

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 1,25 (6H, tripletti, J=7 Hz); 1,2 - 2,1 (10H, multipletti); 15 2,2-2,5 (2H, multipletti); 3,31 (IH, duplettien dupletti, J=5 & 6,5 Hz); 4,18 (4H, kvartetti, J-7 Hz).

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) umaxcm_1: 20 2460, 1750 (olkapåå) ja 1730.

VALMISTUS 2

Dietvvli a-(7 -t-butoksikarbonvvliaminoheptvvlilmalonaatti 25 8,9 g dietyyli a-(6-syanoheksyyli)malonaattia (valmistettu kuten val-mistuksessa 1 on kuvattu) liuotettiin 90 ml:aan etanolia ja liuosta sekoitettiin 50 °C:ssa 6 tuntia Raney-nikkelin låsnåollessa ja vetyat-mosfåårisså. Katalyytti poistettiin suodattamalla ja sitten suodokseen 30 lisåttiin tipoittain 5,5 ml trietyyliamiinia ja 7,6 ml di-t-butyylidi-karbonaattia, tåsså jårjestyksesså, samalla jåillå jååhdyttåen. Sitten seosta sekoitettiin huoneenlåmpotilassa 1 tunti, jonka jålkeen se våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa. Jåånnos liuotettiin etyyliasetaatin ja sykloheksaanin tilavuussuhteessa 1:1 olevaan seokseen 35 ja veteen, jonka jålkeen orgaaninen kerros erotettiin. Tåmå orgaaninen kerros pestiin, vuorotellen, kaliumvetysulfaatin vesiliuoksella ja natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettomållå mag- 50 90 41 8 nesiumsulfaatilla. Sitten liuotin poistettiin haihduttamalla alipai-neessa. Jåånnos puhdistettiin pylvåskromatografialla silikageelin låpi (eluentti: sykloheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 3:1 oleva seos) saaden 10,2 g otsikkoyhdistettå nesteenå.

5

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 1,25 (6H, tripletti, J-7 Hz); 1,44 (9H, singletti); 1,2 - 2,1 (12H, multipletti); 10 2,9 - 3,45 (3H, multipletti); 4,19 (4H, kvartetti, J=7 Hz); 4,15 (IH, leveå).

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) v^cm'1: 15 3400, 1750 (olkapåå), 1730, 1715 (olkapåå) ja 1700 (olkapåå).

VALMISTUS 3

Dietvvli a-bromo-a- (7- t-butoksikarbonvvliaminoheptvvli')inalonaatti 20 1,2 g natriumhydridiå (55 p-% mineraalioljysuspensiona) lisåttiin 5-10 °C:ssa liuokseen, jossa oli 10,2 g dietyyli-α-(7-t-butoksikar-bonyyliaminoheptyyli)malonaattia (valmistettu kuten valmistuksessa 2 on kuvattu) liuotettuna 50 ml:aan dimetyyliformamidia typpiatmosfåå-25 risså. Sitten seosta sekoitettiin 30 minuuttia, jonka jålkeen siihen lisåttiin 4,85 g N-bromosukkinimidiå 20 minuutin kuluessa. Sitten seosta sekoitettiin huoneenlåmpotilassa 15 minuuttia, jonka jålkeen siihen lisåttiin etyyliasetaattia ja vettå. Orgaaninen kerros erotet-tiin ja kuivattiin vedettbmållå magnesiumsulfaatilla. Liuotin poistet-30 tiin sitten haihduttamalla alipaineessa. Jåånnos puhdistettiin pylvåskromatograf ialla silikageelin låpi (eluentti: sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seos tilavuussuhteessa 5:1) saaden 10,3 g otsikkoyhdistettå nesteenå.

35 Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 1,28 (6H,tripletti, J=7 Hz); 1,43 (9H, singletti); 5i 9 0 41 8 1,2 - 1,6 (10H, multipletti); 2,0 - 2,4 (2H, multipletti); 2,9 - 3,3 (2H, multipletti); 4,25 (2H, kvartetti, J-7 Hz); 5 4,50 (IH, leveå) .

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) u^cni'1: 3430, 3360, 1740, 1710 ja 1700 (olkapåå).

10 VALMISTUS 4

Etvvli 2-bromo-9-t-butoksikarbonvvliaminononanoaatti 10,3 g dietyyli a-bromo-α-(7-t-butoksikarbonyyliaminoheptyyli)-15 malonaattia (valmistettu kuten valmistuksessa 3 on kuvattu) sekoitet-tiin 60 ml:aan suolahapon 8N vesiliuosta ja seosta låmmitettiin 115 °C:ssa pidetyllå oljyhauteella samalla sekoittaen. Sitten seos våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa ja vesi erotettiin bentseeni-atseotrooppinaan. Jåånnoksenå oleva keltainen oljymåinen aine 20 (7,78 g), joka sisålsi 9-amino-2-bromononanoiinihappohydrokloridia liuotettiin 100 ml:aan etanolia, ja suolahappokaasua kuplitettiin liuoksen låpi 2 tuntia samalla jååhdyttåen jåillå. Seoksen annettiin sitten seisoa huoneenlåmpotilassa 16 tuntia. Tåmån ajan kuluttua reak-tioseos våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa, ja jåånnoksesså oleva 25 suolahappojåånnos poistettiin bentseeniatseotrooppinaan saaden 8,2 g ruskeata nestettå, joka sisålsi etyyli 9-amino-2-bromononanoaattihyd-rokloridia. Tåmå neste liuotettiin 80 ml:aan metyleenikloridia. Liuok-seen lisåttiin 10 ml trietyyliamiinia ja 6,3 ml di-t-butyylidikarbo-naattia tipoittain, tåsså jårjestyksesså. Sitten seosta sekoitettiin 30 huoneenlåmpotilassa 2 tuntia, jonka jålkeen liuotin poistettiin haihduttamalla alipaineessa. Jåånnos liuotettiin etyyliasetaattiin ja veteen. Liuos pestiin vuorotellen kaliumvetysulfaatin vesiliuoksella ja natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, kuivattiin vedettomållå magne-siumsulfaatilla ja våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa liuottimen 35 poistamiseksi. Jåånnos puhdistettiin pylvåskromatografialla silikagee-lin låpi (eluentti: sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seos tilavuus-suhteessa 5:1) saaden 6,35 g otsikkoyhdistettå nesteenå.

52 9 Π 41 B

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDCl3) S ppm: 1,30 (3H, trlpletti, J-7 Hz); 1,46 (9H, singletti); 1,2 - 1,7 (10H, multipletti); 5 1,7 - 2,2 (2H, multipletti); 2,9 - 3,3 (2H, multipletti); 4,22 (2H, kvartetti, J-7 Hz); 4,1 - 4,4 (IH, multipletti); 4,55 (IH, leveå).

10

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) u^jCm'1: 3360, 1740 ja 1700.

VALMISTUS 5 15

Etvvli 6-(l-t-butoksikarbonvvli-4-piperidvvli)-2-trifluorometaanisul-fonwlioksiheksanoaatti 0,85 ml pyridiiniå ja 0,56 ml trifluorometaanisulfonihappoanhydridia, 20 tåsså jårjestyksesså, lisåttiin liuokseen, jossa oli 1,0 g etyyli 6-(1-1-butoksikarbonyyli -4 -piperidyyli)- 2-hydroksiheksanoaattia 10 ml:ssa vedetontå metyleenikloridia, samalla jaahdyttåen jååsuola-hauteella, ja sitten seosta sekoitettiin 30 minuuttia. TAmån ajan kuluttua reaktioseokseen lisåttiin 20 ml sykloheksaanin ja etyyli-25 asetaatin tilavuussuhteessa 1:1 olevaa seosta, liuos valutettiin lyhy-een kolonniin, johon oli pakattu silikageeliå, ja eluoitiin sykloheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 1:1 olevalla seoksella. Otsikkoyhdisteen sisåltåvå jae våkevoitiin haihduttamalla alipaineessa saaden 0,50 g otsikkoyhdistettå siirappimaisena aineena.

30

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 1,28 (3H, trlpletti, J-7 Hz); 1,44 (9H, singletti); 1,0 - 1,9 (13H, multipletti); 35 2,4 - 2,8 ja 3,8 - 4,2 (4H, multipletti); 4,24 (2H, kvartetti, J-7 Hz); 5,15 (IH, tripletti, J=6 Hz).

Claims (8)

53 9 0 4 1 8

1. Prosessi lååkeaineina kåytettåvien yhdisteiden, joilla on kaava (I): 5 COOH f T 10. ill Δ— C H — NH—k / / I

0 B —COOH 15 [misså: 20. tarkoittaa ryhmåa, jolla on kaava (i): h2n-z- 111 25 tai ryhmåa, jolla on kaava (ii): M ( CH-W- «.) V J (CH2)n 35 jossa: 54 9041 8 Z tarkoittaa C^-Cg alkyleeniryhmåå; W tarkoittaa C1-C6 alkyleeniryhmåå; ja 5. ja n ovat kokonaisluku 1 tai 2 kuitenkin niin, ettå summa m+n on kokonaisluku 3 tai kokonaisluku 4; R2 tarkoittaa fenyyliå, tienyyliå tai furyyliå; 10. tarkoittaa C1-C2 alkyleeniryhmåå; Y tarkoittaa rikkiatomia tai metyleeniryhmåå; ja niiden farmaseuttisesti hyvåksyttåvien suolojen ja alempien alkyy-15 liestereiden valmistamiseksi, tunnettu siitå, ettå se kåsit-tåå kaavan (II) yhdisteen:

20 I N2N—L ) III) y-\

0 I 1

25 B-C00R3 (jossa R2, B ja Y ovat kuten edellå on mååritelty ja R3 tarkoittaa C^-C10-alkyyliryhmåå) kondensoinnin yhdisteen kanssa, jolla on kaava (II-30 I): A-CHiCOOR1) -X' (III) (misså A on kuten edellå on mååritelty; X' tarkoittaa halogeeniatomia 35 tai sulfonyylioksiryhmåå; ja R' tarkoittaa Ci-C10 -alkyyliryhmåå) tai edellåmainitun kaavan (II) yhdisteen pelkiståvån kondensoinnin yhdisteen kanssa, jolla on kaava (IV): 55 9 Π 41 8 A-C(=0)-COOR1 (IV) (misså R1 ja A ovat kuten edellå on mååritelty) ja valinnaisesti tuot-teen alistamisen yhteen tai useampaan seuraavaan vaiheeseen: suojauk-5 sen poistaminen, saippuointi, esterointi tai trans-esterointi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen prosessi, tunnettu siitå, ettå A tarkoittaa kaavan (i) ryhmåå, kuten patenttivaatimuksessa 1 on mååritelty, tai kaavan (ii) ryhmåå, kuten patenttivaatimuksessa 1 on 10 mååritelty, misså: R4,R5,m,n,R2 ja Y on mååritelty kuten patenttivaatimuksessa 1; Z tarkoittaa C^-Cg alkyleeniryhmåå; 15 W tarkoittaa C2-alkyleeniryhmåå; ja B tarkoittaa metyleeniryhmåå.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen prosessi, tunnettu siitå, ettå A tarkoittaa kaavan (i) ryhmåå, kuten patenttivaatimuksessa 1 on mååritelty, tai kaavan (ii) ryhmåå, kuten patenttivaatimuksessa 1 on mååritelty, misså:

25 R4,R5,R2,B ja Y on måårielty kuten patenttivaatimuksessa 2; Z tarkoittaa C7- tai C8-alkyleeniryhmåå; W tarkoittaa C3 tai C,,-alkyleeniryhmåå; 30 jn tarkoittaa kokonaislukua 1 tai 2; ja jj tarkoittaa kokonaislukua 2;

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen kaavan (I) prosessi, t u η n e t - t u siitå, ettå A tarkoittaa ryhmåå, jolla on kaava H2N-Z-, jossa Z on mååritelty kuten patenttivaatimuksessa 3 ja B ja Y on mååritelty 56 90 41 8 kuten patenttivaatimuksessa 3; R2 tarkoittaa fenyyliryhmåfi, 2-tienyyliryhmåå, 3-tienyyliryhmåå tai 2-furyyliryhmåå; 5

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen kaavan (I) prosessi, t u η n e t -t u siitå, ettå A tarkoittaa kaavan H2N-Z ryhmåå, jossa Z tarkoittaa samaa kuin patenttivaatimuksessa 4; 10. tarkoittaa samaa kuin patenttivaatimuksessa 4; R2 tarkoittaa 2-tienyyliryhmåå, 3-tienyyliryhmåå tai 2-furyyliryhmåå; Y tarkoittaa rikkiatomia. 15

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen kaavan (I) prosessi, t u η n e t -t u siitå, ettå A tarkoittaa ryhmåå, jolla on kaava (iia): 20 ^ H-H CH-W— (iia) ^ ICHjl n — 25 jossa: W tarkoittaa tetrametyleeniryhmåå; 30 m tarkoittaa kokonaislukua 2; ja n tarkoittaa kokonaislukua 2;

35 R2 tarkoittaa fenyyliryhmåå, 2-tienyyliryhmåå, 3-tienyyliryhmåå tai 2-furyyliryhmåå; 57 9 0 4 1 8 B ja Y tarkoittavat samaa kuin patenttivaatimuksessa 3.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen kaavan (I) prosessi, t u η n e t -t u siitå, ettå A tarkoittaa ryhmåå, jolla on kaava (iia), kuten pa- 5 tenttivaatimuksessa 6 on mååritelty; jossa: W,m,n ja B tarkoittaa samaa kuin patenttivaatimuksessa 6; R2 tarkoittaa 2-tienyyliryhmåå, 3-tienyyliryhmåå tai 2-furyyliryhroåå; 10 Y tarkoittaa rikkiatomia.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen prosessi, tunnettu siitå, ettå låhtoaineet on valittu seuraavien yhdisteiden: 15 a-[6 -(8-amino -1-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(2-tienyyli)perhydro- 1.4- tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; a-[6-(9-amino-1-karboksinonyyliamino)-5-okso-2-(2-tienyyli)perhydro-20 l,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; a-[6-(8-amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(3-tienyyli)perhydro-. ‘ 1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; - 25 a-[6-(8-amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(2-furyyli)perhydro- 1.4- tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; : - a-[6-(8-amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-fenyyli-perhydro-l,4- tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; 30 a-[3-(8-amino-l-karboksioktyyliamino)-2-okso-6-(2 -tienyyli)perhydroat-sepin-1-yyli]etikkahappo; a-[3 -(9 - amino-1-karboksinonyyliamino)-2-okso-6 -(2-tienyyli)perhydroat-35 sepin-1-yyli]etikkahappo; <*-[3-(8-amino-l-karboksioktyyliamino)-2-okso-6-fenyyli-perhydroatse- pin-1-yyli]et ikkahappo; 58 9 0 4 1 8 a -[3-(9 -amino -1-karboks inonyy1iamino)-2-okso- 6 -fenyy1i-perhydroatse-p in-1-yyli]e tikkahappo; 5 a-{6-(l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(2-tienyy-1i)p e rhydro-1,4-1 i at s ep in-4-yy1i}e t ikkahappo; a-{6-[l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-fenyyli-10 perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; a-(6-[l-karboksi-5-(4 -piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(3-tienyy-li)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo; 15 a-(6-[l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(2-furyyli)-perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo; a-{3-[l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-(2-tienyy-li)perhydroatsepin-1-yyli(etikkahappo; 20 a-(3-[l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-(3-tienyy-li)perhydroatsepin-l-yyli(etikkahappo; a-{3-[l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-fenyyli-25 perhydroatsepin-1-yyli(etikkahappo; a-{6(R)-[8-amino-l(S)-karboksioktyyliamino]- 5-okso-2(S)-(2-tienyyli)-perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo; 30 a-{3(S)-[8-amino-l(S)-karboksioktyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhy-droatsepin-1-yyli)etikkahappo; a-{6(R)-[1(S)-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli(perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo; 35 a-(3(S) -[1(S)-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino)-2-okso-6-(R)-fenyyliperhydroatsepin-1-yyli(etikkahappo; 59 90 41 8 ja niiden farmaseuttisesti hyvåksyttåvien suolojen valmistamiseksi. 60 9 0 4 1 8