FI80259C - FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV TERAPEUTISKT ANVAENDBARA ISOTIURONIUM-SALTER. - Google Patents
FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV TERAPEUTISKT ANVAENDBARA ISOTIURONIUM-SALTER. Download PDFInfo
- Publication number
- FI80259C FI80259C FI854790A FI854790A FI80259C FI 80259 C FI80259 C FI 80259C FI 854790 A FI854790 A FI 854790A FI 854790 A FI854790 A FI 854790A FI 80259 C FI80259 C FI 80259C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- general formula
- compounds
- aminoiminomethyl
- allyl
- isothiuronium
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D303/00—Compounds containing three-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D303/02—Compounds containing oxirane rings
- C07D303/48—Compounds containing oxirane rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms, e.g. ester or nitrile radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/16—Otologicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Anesthesiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
8025980259
Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten isotiuronium-suolojen valmistamiseksi Tämän keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten isotiuronium-suolojen valmistamiseksi. Mainitut isotiuronium-suolat ovat uusia yhdisteitä. Näillä yhdisteillä on käyttökelpoinen antituumori-, antiparasiittinen ja immu-nostimulanttinen vaikutus ja niitä voidaan käyttää ihmisten ja eläinten terapiassa.The present invention relates to a process for the preparation of therapeutically useful isothiuronium salts. Said isothiuronium salts are novel compounds. These compounds have useful antitumor, antiparasitic and immunostimulatory activity and can be used in human and animal therapy.
Yleisen kaavan IGeneral formula I
H2N-C-NH-C=N-R2·HX (I)H2N-C-NH-C = N-R2 · HX (I)
Uh Ui mukaiset yhdisteet, joissa R1 merkitsee metyyliä, etyyliä tai bentsyyliä ja R2 merkitsee vetyä, ovat tunnettuja (FR-patenttijulkaisu 788,429 ja DOS 2,426,683). Näissä julkaisuissa nämä yhdisteet on kuitenkin mainittu vain välituotteina ja julkaisuissa ei puhuta mitään niiden biologisesta aktiivisuudesta eikä näiden yhdisteiden käytöstä terapiassa.Compounds according to Uh Ui, in which R1 represents methyl, ethyl or benzyl and R2 represents hydrogen, are known (FR patent publication 788,429 and DOS 2,426,683). However, in these publications these compounds are mentioned only as intermediates and the publications do not mention anything about their biological activity or the use of these compounds in therapy.
Simons ja Davis (Int. J. Rad. Biol., Voi. 10, nro 4, 343 -352) ovat tutkineet edellä mainituista patenttijulkaisuista tunnetun S-etyyliguanyylitiourean vetybromidisuolan biologista aktiivisuutta. He päätyivät kuitenkin siihen tulokseen, että se ei ole merkittävä, "not significant".Simons and Davis (Int. J. Rad. Biol., Vol. 10, No. 4, 343-352) have studied the biological activity of the hydrobromide salt of S-ethyl guanylthiourea known from the above-mentioned patents. However, they came to the conclusion that it is not significant.
US-patenttijulkaisusta 3,960,949 tunnetaan edelleen sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen käyttö 1,2-biguanidien valmistuksen lähtöaineena, jossa R1 merkitsee metyyliä ja R2 merkitsee etyyliä. Tässäkään julkaisussa ei kuitenkaan mainita mitään tämän yhdisteen terapeuttisista ominaisuuksista.U.S. Pat. No. 3,960,949 further discloses the use of a compound of formula I as a starting material for the preparation of 1,2-biguanides wherein R 1 is methyl and R 2 is ethyl. However, even in this publication no mention is made of the therapeutic properties of this compound.
Tämän keksinnön mukaisesti saadaan siten aikaan terapeuttisesti käyttökelpoisia uusia yleisen kaavan IAccording to the present invention there are thus provided novel therapeutically useful novel compounds of general formula I.
H2N-C-NH-C=N-R2·HX (I) 11 li NH S-R1 2 80259 mukaisia yhdisteitä (jossa kaavassa R1 on Ci_g-alkyyli, C2-6-al^enyyli/ C2_6"alkynyyli tai bentsyyli, jolloin mainitut alkyyliryhmät on valinnanvaraisesti substituoitu yhdellä tai useammalla hyd-roksilla, merkaptolla ja/tai halogeenilla, R2 merkitsee vetyä, Ci-g-alkyyliä, C2-6-alkenyyliä tai C3_g-sykloalkyyliä ja X merkitsee halogeeni-ionia, edellyttäen, että jos R2 merkitsee vetyä, R1 on muu kuin metyyli, etyyli tai bentsyyli ja mikäli R2 on etyyli, R1 on muu kuin metyyli).H2N-C-NH-C = N-R2 · HX (I) 11 li NH5-R1 2 80259 (wherein R1 is C1-8 alkyl, C2-6 alkenyl / C2-6 "alkynyl or benzyl, wherein said alkyl groups being optionally substituted by one or more hydroxy, mercapto and / or halogen, R 2 represents hydrogen, C 1-6 alkyl, C 2-6 alkenyl or C 3-8 cycloalkyl and X represents a halogen ion, provided that if R 2 represents hydrogen, R 1 is other than methyl, ethyl or benzyl and if R 2 is ethyl, R 1 is other than methyl).
Käsite "Ci-g-alkyyli" merkitsee suoraketjuisia tai haarautuneita tyydyttyneitä alifaattisia hiilivetyryhmiä (esim. metyyli, etyyli, n-propyyli, isopropyyli, n-butyyli, isobutyy-li jne.) Käsite "C2-6-alkenyyli" tarkoittaa suoraketjuisia tai haarauneita olefiinisiä tyydyttymättömiä ryhmiä (esim. vinyyli, allyyli, metallyyli jne.). Käsite "C2-6“al^ynyyli" merkitsee suoraketjuisia tai haarautuneita alifaattisia ryhmiä, joissa on vähintään yksi kolmoissidos (esim. propargyy-li jne.). Käsite "C3_0-sykloalkyyli" merkitsee syklisiä tyydyttyneitä alifaattisia hiilivetyryhmiä (esim. syklobutyyli, syklopentyyli, sykloheksyyli jne.). Käsite "halogeeni" merkitsee fluori-, kloori-, bromi- ja jodiatomeja.The term "C 1-6 alkyl" denotes straight-chain or branched saturated aliphatic hydrocarbon groups (e.g., methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, etc.). The term "C 2-6 alkenyl" means straight-chain or branched olefinic unsaturated groups (e.g. vinyl, allyl, methallyl, etc.). The term "C 2-6 alkynyl" denotes straight-chain or branched aliphatic groups having at least one triple bond (e.g. propargyl, etc.). The term "C 3-10 cycloalkyl" denotes cyclic saturated aliphatic hydrocarbon groups (e.g., cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, etc.). The term "halogen" means fluorine, chlorine, bromine and iodine atoms.
Esimerkkeinä mainituista substituoiduista alkyyliryhmistä voidaan mainita seuraavat ryhmät: 2-kloorietyyli, 3-bromi-propyyli, 2-hydroksietyyli, 3-kloori-2-hydroksipropyyli jne.Examples of said substituted alkyl groups include 2-chloroethyl, 3-bromopropyl, 2-hydroxyethyl, 3-chloro-2-hydroxypropyl, and the like.
Yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden eräänä edullisena ryhmänä ovat ne johdannaiset, joissa R1 on allyyli.A preferred group of compounds of general formula I are those derivatives wherein R 1 is allyl.
Eräänä toisena yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden edullisena ryhmänä ovat ne johdannaiset, joissa R1 on 2-halogeeni-etyyli.Another preferred group of compounds of general formula I are those derivatives in which R 1 is 2-haloethyl.
R2 merkitsee sopivimmin vetyä, metyyliä, etyyliä, n-propyy-liä, isopropyyliä, n-butyyliä, allyliä tai sykloheksyyliä.R 2 preferably represents hydrogen, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, allyl or cyclohexyl.
il 3 80259 X merkitsee sopivimmin etenkin kloridia, bromidia tai jodi-dia.il 3 80259 X preferably represents in particular chloride, bromide or iodide.
Etenkin etusijalla olevia yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden edustajia ovat seuraavien johdannaisten farmaseuttisesti sopivat suolat: N-aminoiminometyyli-S-propyyli-isotiuronium-suolat, N-aminoiminometyyli-S-allyyli-isotiuronium-suolat, N-aminoiminometyyli-S-(2-kloorietyyli)-isotiuronium-suolat, N-aminoiminometyyli-S-(l-kloori-2-hydroksipropyyli-isoti-uronium-suolat, N-aminoiminometyyli-S-(3-klooripropyyli)-isotiuronium-suolat ja N-aminoiminometyyli-S-(2-hydroksietyyli)-isotiuronium-suolat.Particularly preferred representatives of the compounds of general formula I are the pharmaceutically acceptable salts of the following derivatives: N-aminoiminomethyl-S-propyl-isothiuronium salts, N-aminoiminomethyl-S-allyl-isothiuronium salts, N-aminoiminomethyl-S- (2-chloroethyl) ) -isothiuronium salts, N-aminoiminomethyl-S- (1-chloro-2-hydroxypropyl-isothiuronium salts, N-aminoiminomethyl-S- (3-chloropropyl) -isothiuronium salts and N-aminoiminomethyl-S- ( 2-hydroxyethyl) -isotiuronium salts.
Edelleen etusijalla olevia yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat N-aminoiminometyyli-N'-alkyyli-S-allyyli-isoti-uronium-suolat, etenkin vastaavat N'-metyyli-, N'-etyyli-, N'-n-propyyli- ja N'-isopropyyli-yhdisteet.Further preferred compounds of general formula I are N-aminoiminomethyl-N'-alkyl-S-allyl-isothiuronium salts, in particular the corresponding N'-methyl, N'-ethyl, N'-n-propyl and N'-isopropyl compounds.
Esillä olevan keksinnön mukaisesti saadaan aikaan menetelmä yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, jonka menetelmän mukaanAccording to the present invention there is provided a process for the preparation of compounds of general formula I, according to which process
yleisen kaavan IIof general formula II
HoN-C-NH-C-NH-R2 (II)HoN-C-NH-C-NH-R2 (II)
Z II II NH SZ II II NH S
mukainen yhdiste (jossa kaavassa R2 merkitsee samaa kuin yllä) tai sen sopiva suola saatetaan reagoimaan alkylointi-aineen kanssa, joka pystyy liittämään R1-ryhmän, mieluummin yleisen kaavan r!-Y mukaisen alkylointiaineen kanssa (jossa kaavassa R1 merkitsee samaa kuin yllä ja Y merkitsee poistuvaa ryhmää, mieluummin halogeenia) ja tarvittaessa muunnetaan näin saatu tuote suolaksi saattamalla se reagoimaan yleisen kaavan HX mukaisen hapon kanssa (jossa kaavassa X merkitsee halogeeni-ionia).(wherein R 2 is as defined above) or a suitable salt thereof is reacted with an alkylating agent capable of attaching an R 1 group, preferably with an alkylating agent of the general formula R 1 -Y (wherein R 1 is as defined above and Y is leaving group, preferably halogen) and, if necessary, converting the product thus obtained into a salt by reacting it with an acid of general formula HX (in which X represents a halogen ion).
4 802594 80259
Mainitussa reaktiossa muodostuu isotiuronium-suoloja. Reaktiota seuraa yleensä N-alkyloitujen sivutuotteiden muodostuminen .In said reaction, isothiuronium salts are formed. The reaction is generally followed by the formation of N-alkylated by-products.
Menetelmän erään edullisen toteutusmuodon mukaisesti yleisen kaavan II mukaisia lähtöaineita ei käytetä vapaassa emäsmuo-dossa, vaan sopivan suolan, etenkin karbonaatin muodossa. Näin N-alkyloitujen johdannaisten muodostuminen estyy, mikä luultavasti johtuu siitä seikasta, että kehittynyt hiilidioksidi vähentää vahvasti emäksisen väliaineen pH-arvoa.According to a preferred embodiment of the process, the starting materials of the general formula II are not used in the free base form, but in the form of a suitable salt, in particular a carbonate. In this way, the formation of N-alkylated derivatives is prevented, which is probably due to the fact that the carbon dioxide evolved strongly lowers the pH of the basic medium.
Alkylointiaineena voidaan käyttää mieluummin vastaavia alkyylihalideja tai dialkyylisulfaatteja, mutta yhtä hyvin voidaan käyttää muita alkylointiaineita.Corresponding alkyl halides or dialkyl sulfates can be preferably used as the alkylating agent, but other alkylating agents can be used as well.
Reaktantteja voidaan käyttää ekvimolaarisina määrinä tai alkylointiainetta voidaan lisätä ylimääränä. Reaktioväli-aineena voidaan käyttää inerttejä orgaanisia liuottimia, sopivimmin alkoholia, alifaattista ketonia, alifaattlsta nitriiliä tai eetteriä.The reactants may be used in equimolar amounts or the alkylating agent may be added in excess. As the reaction medium, inert organic solvents can be used, preferably an alcohol, an aliphatic ketone, an aliphatic nitrile or an ether.
Reaktio voidaan suorittaa atmosfäärisessä paineessa ja 20...80°C:n lämpötilassa.The reaction can be carried out at atmospheric pressure and at a temperature of 20 to 80 ° C.
Menetelmän erään edullisen toteutusmuodon mukaisesti yleisen kaavan II mukaiset lähtöaineet ja alkylointiaine saatetaan reagoimaan 1:1...1:1,8 moolisuhteessa vedettömässä etanolissa, asetonitriilissä, dimetyyliformamidissa, asetonissa tai eetterissä 20...30*C:n lämpötilassa.According to a preferred embodiment of the process, the starting materials of the general formula II and the alkylating agent are reacted in a molar ratio of 1: 1 to 1: 1.8 in anhydrous ethanol, acetonitrile, dimethylformamide, acetone or ether at a temperature of 20 to 30 ° C.
Yleisen kaavan II mukaiset lähtöaineet ovat tunnettuja tai ne voidaan valmistaa sinänsä tunnettujen menetelmien mukaisesti. Niinpä N-aminoiminometyyli-tiourea voidaan valmistaa helposti saattamalla disyaanidiamidi reagoimaan vety-sulfidin kanssa (Houben-Weyl VIII., 214). Yleisen kaavan II mukaiset N-aminoiminometyyli-N'-alkyylitiourea-johdannaiset voidaan valmistaa saattamalla guanidiiniemäs reagoimaan vastaavan alkyyli-isotiosyanaatin kanssa (US-patenttijulkaisu 4,009,163).The starting materials of the general formula II are known or can be prepared according to methods known per se. Thus, N-aminoiminomethylthiourea can be readily prepared by reacting dicyandiamide with hydrogen sulfide (Houben-Weyl VIII., 214). N-Aminoiminomethyl-N'-alkylthiourea derivatives of general formula II can be prepared by reacting a guanidine base with the corresponding alkyl isothiocyanate (U.S. Patent 4,009,163).
(( 5 80259((5 80259
Voidaan myös ajatella edellä esitetystä menetelmästä poikkeavia ratkaisuja yleiskaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi. Niinpä yleiskaavan IVIt is also conceivable to deviate from the method described above for the preparation of the compounds of the general formula I. Thus, the general formula IV
H2N-C-NH=C=NH (IV)H2N-C-NH = C = NH (IV)
Il I .Il I.
NH S-R1NH S-R1
mukaiset yhdisteet (jotka muodostavat yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden rajoitetumman alaryhmän, R2 on vety) voidaan valmistaa saattamalla kaavan IIIcompounds (which form a more limited subgroup of compounds of general formula I, R 2 is hydrogen) can be prepared by reacting compounds of formula III
H2N-C-NH-C=N (III)H2N-C-NH-C = N (III)
NHNH
mukainen yhdiste reagoimaan yleisen kaavan R1-SH mukaisen tioalkoholin kanssa (kaavassa R1 merkitsee samaa kuin yllä). Reaktantteja voidaan käyttää ekvimolaarisinä määrinä tai voidaan käyttää yleisen kaavan Ri-SH mukaisen tioalkoholin ylimäärää. Reaktioväliaineena voidaan käyttää alkoholia, etenkin metanolia. Reaktio voidaan suorittaa tarvittaessa paineessa. Sopivimmin työskennellään 1...5 bar:n paineessa ja 20...100#C:n lämpötilassa. Kaavan III mukaiset lähtöaineet voidaan valmistaa sinänsä tunnetuilla menetelmillä.to react with a thioalcohol of general formula R1-SH (in formula R1 is as defined above). The reactants may be used in equimolar amounts or an excess of thioalcohol of general formula Ri-SH may be used. Alcohol, especially methanol, can be used as the reaction medium. The reaction can be carried out under pressure, if necessary. It is best to work at a pressure of 1 ... 5 bar and a temperature of 20 ... 100 # C. The starting materials of the formula III can be prepared by methods known per se.
Näin saatu tuote voidaan muuntaa farmaseuttisesti sopivaksi suolaksi, joka on muodostettu halogeenivetyhapon kanssa. Suolanmuodostusta varten voidaan käyttää mieluummin kloori-vetyhappoa tai bromivetyhappoa.The product thus obtained can be converted into a pharmaceutically acceptable salt formed with hydrohalic acid. For salt formation, it is preferable to use hydrochloric acid or hydrobromic acid.
Yleisen kaavan I mukaisilla yhdisteillä on antituumori- (eli kasvaimia estäviä) ja antiparasiittisiä immunostimulanttisia ominaisuuksia. Aktiivisuuden voimakkuus ja suunta ja toksisuus riippuvat molekyylin substituenteista.The compounds of general formula I have antitumor (i.e. antitumor) and antiparasitic immunostimulatory properties. The intensity and direction of activity and toxicity depend on the substituents of the molecule.
On tunnettua, että gutimiinia, joka on rakenteellisesti läheinen yleisen kaavan I mukaisille yhdisteille, on kokeiltu antihypoksiaalisena aineena [C.A. 66, 452,929 (1972);It is known that gutimine, which is structurally close to the compounds of general formula I, has been tested as an antihypoxic agent [C.A. 66, 452,929 (1972);
Pathol. Phys. Exp. Ther. 10, (6)] ja farmakologisissa ja kliinisissä testeissä aineena, joka saa aikaan mikroveren- 6 80259 kiertohäiriöitä (Gematol. Transfusiol. (1984), 29 (1), 49-52).Pathol. Phys. Exp. Ther. 10, (6)] and in pharmacological and clinical tests as an agent that causes microcirculatory disorders (Gematol. Transfusiol. (1984), 29 (1), 49-52).
On todettu, että yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet pystyvät palauttamaan organismin vähentyneen luonnollisen imuuni-järjestelmän normaaliin arvoon tai lisäämään sitä yli normaalin tason.It has been found that the compounds of general formula I are able to restore the body's reduced natural immune system to normal values or to increase it above normal levels.
Näin eläinten ja ihmisten organismilla on immuunijärjestelmä (esim. tuumoria eliminoiva järjestelmä). Kun mainitun järjestelmän aktiivisuus on vähentynyt tai se lakkaa toimimasta, erilaisia tauteja ja tuumoreita ilmeää. Yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet aktivoivat luonnollisia immuunijärjestelmiä ja siten niitä voidaan käyttää kaikissa tapauksissa, joissa on toivottavaa lisätä immuunijärjestelmän vähentynyttä aktiivisuutta ja nostaa edelleen sen normaalia aktiivisuutta.Thus, the animal and human body has an immune system (e.g., a tumor-eliminating system). When the activity of said system is reduced or ceases to function, various diseases and tumors appear. The compounds of the general formula I activate the natural immune systems and can therefore be used in all cases in which it is desirable to increase the reduced activity of the immune system and to further increase its normal activity.
Yleisen kaavan I mukaisilla yhdisteillä on muita käyttökelpoisia biologisia vaikutuksia, esim. ne parantavat mikrove-renkiertohäiriöitä, sitovat terveydelle haitallisia radikaaleja, parantavat happivajettä kärsivien solujen toimintaa ja pidentävät niiden kestoikää.The compounds of general formula I have other useful biological effects, e.g. they improve microvessel circulatory disorders, bind harmful radicals, improve the function of oxygen deficient cells and prolong their lifespan.
Yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden biologinen aktiivisuus esitetään seuraavien testien avulla. Todettakoon kuitenkin, että kaikkia erittäin aktiivisten yhdisteiden vaikutuksia ei ole esitetty.The biological activity of the compounds of general formula I is demonstrated by the following tests. It should be noted, however, that not all effects of highly active compounds have been reported.
Vaikutusten testauksesta Immunologiset testit:On effects testing Immunological tests:
Lymfosyytit. Lymfosyytit eristettiin Ficoll-Uromiro- (Böyum 1968) gradientilia terveiden luovuttajien ja sellaisten potilaiden laskimoverestä, jotka sairastivat pahanlaatuista imukudoskasvainta ja vastaavasti etäispesäkkeitä muodostavia kiinteitä kasvaimia. Kun valittiin viimeksi mainittuun ryhmään kuuluvia potilaita, otettiin huomioon vähentyntyt ADCC- il 7 80259 ja NK-aktiivisuus. Fagosyytit poistettiin käsittelemällä rautajauheella ja magneetilla.The lymphocytes. Lymphocytes were isolated from the Ficoll-Uromiro (Böyum 1968) gradient from the venous blood of healthy donors and patients with malignant lymphoid tumors and metastatic solid tumors, respectively. Decreased ADCC 7 80259 and NK activity were taken into account when selecting patients from the latter group. Phagocytes were removed by treatment with iron powder and magnet.
ADCC. ADCC määritettiin Perlamannin & Perlamannin menetelmän (1970) mukaisesti pienin muunnelmin (Läng et ai, 1981). Kananpoikien erytrosyyttejä, jotka oli merkitty 105 51Cr:lla ja päällystetty antikananpoikaerytrosyytti-kaniiniseeru-milla, inkuboitiin lymfosyyttien kanssa 4 tunnin ajan 37eC:ssa. Kun reaktio oli pysähtynyt, sentrifugoitujen solujen emäliuoksen aktiivisuus määritettiin gamma-laskimella. Kromin vapautumisnopeus ilmaistiin sytotoksisuus-indeksillä (CI %). Tämä arvo laskettiin yhdessä aikaisemmista julkaisuistamme määritellyllä tavalla (Läng et ai, 1980) - (ks. taulukko I).ADCC. ADCC was determined according to the method of Perlamann & Perlamann (1970) with minor variations (Läng et al., 1981). Chicken erythrocytes labeled with 105 51 Cr and coated with anti-chicken erythrocyte rabbit serum were incubated with lymphocytes for 4 hours at 37 ° C. When the reaction was stopped, the activity of the mother liquor of the centrifuged cells was determined with a gamma counter. The rate of chromium release was expressed by the cytotoxicity index (CI%). This value was calculated as defined in one of our previous publications (Läng et al., 1980) - (see Table I).
NK: NK-aktiivisuus määritettiin Jondalin ja Prossin menetelmällä (1975) käyttämällä pienehköjä muutoksia (Läng et ai, 1981). K-562-kasvainsoluja, jotka oli merkitty 51Cr:lla, inkuboitiin efektorisolujen kanssa TC 199 nestemäisessä ravin-toväliaineessa, joka sisälsi 10 % dekomplementoitua vasikan seerumia. Kun reaktio oli päättynyt, sentrifugoitujen solujen emäliuoksen radioaktiivisuus (kromin vapautuminen) laskettiin gamma-laskimella. Aiottujen solujen kuoleminen (sytotoksisuus-indeksi %) ilmaistiin kokeessa tapahtuneen vapautumisen ja spontaanin vapautumisen erona.NK: NK activity was determined by the method of Jondal and Pross (1975) using minor changes (Läng et al., 1981). K-562 tumor cells labeled with 51 Cr were incubated with effector cells in TC 199 liquid nutrient medium containing 10% decomplemented calf serum. When the reaction was complete, the radioactivity (chromium release) of the mother liquor of the centrifuged cells was calculated with a gamma counter. Intended cell death (cytotoxicity index%) was expressed as the difference between experimental release and spontaneous release.
Tilastolliset laskelmat suoritettiin mononäytetestin avulla. Useilla yleisen kaavan I mukaisilla yhdisteillä on erinomainen immunostimulanttinen vaikutus (esim. esimerkkien 10, 11 ja 15 mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä). Mainitut yhdisteet pystyvät lisäämään normaalia ja voimakkaasti Vähentynyttä NK- ja K-soluaktiivisuutta, jopa yli normaalin tason. Mainittu vaikutus voi olla niin voimakas, että syto-toksinen aktiivisuus, joka on vähentynyt kymmenesosaan alkuperäisestä arvosta, voidaan palauttaa alkuperäiselle tasolle (taulukko II).Statistical calculations were performed using a monosample test. Several compounds of general formula I have excellent immunostimulatory activity (e.g. compounds prepared according to Examples 10, 11 and 15). Said compounds are able to increase normal and strongly reduced NK and K cell activity, even above normal levels. Said effect may be so strong that cytotoxic activity reduced to one tenth of the original value can be restored to the original level (Table II).
Annosalueella, joka vastaa odotettua ihmisen plasmakonsent-raatiota, yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet lisäävät ih- 8 80259 misten lymfosyyttien NK- ja K-soluaktiivisuutta ja parantavat vastaavasti NCMC- ja ADCC-reaktiota annoksesta riippuvaisella nopeudella. Muiden immunologisten testien alustavien tulosten mukaisesti yhdisteet lisäävät blastos-transformaatiota ja -migraatiota.At a dose range corresponding to the expected human plasma concentration, the compounds of general formula I increase the NK and K cell activity of human lymphocytes and improve the NCMC and ADCC response at a dose-dependent rate, respectively. According to preliminary results from other immunological tests, the compounds increase blast transformation and migration.
Suoritettaessa substituutio typpiatomeissa molaarinen suhteellinen immunostimulanttinen vaikutus vähenee yleensä suhteessa toksisuuteen.When performing a substitution on nitrogen atoms, the molar relative immunostimulatory effect is generally reduced relative to toxicity.
Koska kasvaimia sairastavien potilaiden sytotoksinen aktiivisuus vähenee verrannollisesti sairauden tilan suhteen ja lisäksi se vähenee edelleen tavanomaisten sytostaattisten hoitojen ansiosta, on erittäin tärkeää, että yleisen kaavan 1 mukaisilla yhdisteillä on vahva immunostimulanttinen vaikutus eivätkä ne ole immunodepressoreita. Tämä voi olla erittäin tärkeää toipumisen kannalta.Since the cytotoxic activity of tumor patients decreases in proportion to the disease state and further decreases due to conventional cytostatic therapies, it is very important that the compounds of general formula 1 have a strong immunostimulatory effect and are not immunodepressants. This can be very important for recovery.
Leukosyyttien migraatio:Leukocyte migration:
Leukosyyttien spontaani (satunnainen) migraatio mitattiin agaroosimikropisaroilla McCoy et ai:in menetelmän mukaisesti (1977) suorittamalla muutamia pienehköjä muunnelmia (Kalmär ja Gergely, 1982).Spontaneous (random) migration of leukocytes was measured with agarose microdroplets according to the method of McCoy et al (1977) by performing a few minor variations (Kalmär and Gergely, 1982).
2 ml agaroosipisaroita (0,2 %) sijoitettiin migraatiolevyille (Greiner, Saksan Liittotasavalta). TC 199 nestemäistä ravin-toväliainetta lisättiin ja levyt suljettiin ilmatiiviisti.2 ml of agarose droplets (0.2%) were placed on migration plates (Greiner, Federal Republic of Germany). TC 199 liquid nutrient medium was added and the plates were sealed.
24 tunnin kuluttua migraatioalue mitattiin stereomikroskoo-pilla. Migraatioalue ilmaistiin mm^:nä.After 24 hours, the migration area was measured by stereomicroscopy. The migration range was expressed as mm ^.
Leukosyyttien migraatio:Leukocyte migration:
Terveiden luovuttajien polymorfiytimisten solujen suoraa (satunnaista) migraatiota lisättiin esimerkkien 10, 11 ja 13 mukaisilla yhdisteillä. Optimiannos oli 1,0 ug/ml. Korkeammassa annoksessa (10 ug/ml) vaikutus oli vähemmän selvä (taulukko III).Direct (random) migration of polymorphonuclear cells from healthy donors was increased with the compounds of Examples 10, 11 and 13. The optimal dose was 1.0 ug / ml. At the higher dose (10 μg / ml), the effect was less pronounced (Table III).
Il 9 80259Il 9 80259
Mitogeeni-indusoitu blastos-transformaatio:Mitogen-induced blastos transformation:
Lymfosyyttejä viljeltiin TC 199 nestemäisessä ravintoväliai-neessa, jota oli täydennetty 10 %:lla dekomplementoitua vasikan seerumia, antibiooteilla ja 25 mH HEPES:illä (Serva).Lymphocytes were cultured in TC 199 liquid medium supplemented with 10% decomplemented calf serum, antibiotics and 25 mH HEPES (Serva).
200 ui solususpensiota, joka sisälsi 2·ιο5 lymfosyyttejä, sijoitettiin mikrolevylle (valmistaja Sterilin, Iso-Britan-nia); viisi rinnakkaisvertailua suoritettiin.200 μl of cell suspension containing 2 · ιο5 lymphocytes was placed on a microplate (manufactured by Sterilin, UK); five parallel comparisons were performed.
2 ja vastaavasti 10 ug/ml Phytohaemagglutinineraa (Leucoag-glutinine; valmistaja Pharmacia, Ruotsi) ja 25 ug/ml Conca-navalini A:ta (Carbiochem) lisättiin viljelyihin; yllä olevat arvot on ilmoitettu suhteessa lopulliseen konsentraati-oon. Viljelmiä viljeltiin 37eC:sSa 72 tunnin ajan. Kahdeksan tuntia ennen viljelyjakson päättymistä näytteisiin lisättiin 0,5 uCi 3H-tymidiiniä (Chemapol. Tsekkoslovakia). Inkubaa-tio pysäytettiin jäädyttämällä viljelmät. Sulamisen jälkeen näytteet suodatettiin automaattisessa korjuulaitteessa (Dynatech). Näytteiden radioaktiivisuus mitattiin tuikeaine-laskimella. Aktiivisuus ilmaistiin cpm:nä (taulukot IV ja V).2 and 10 μg / ml Phytohaemagglutininera (Leucoag-glutinine; manufactured by Pharmacia, Sweden) and 25 μg / ml Conca-navalini A (Carbiochem), respectively, were added to the cultures; the above values are given relative to the final concentration. Cultures were cultured at 37 ° C for 72 hours. Eight hours before the end of the culture period, 0.5 μCi of 3 H-thymidine (Chemapol. Czechoslovakia) was added to the samples. The incubation was stopped by freezing the cultures. After thawing, the samples were filtered in an automatic harvester (Dynatech). The radioactivity of the samples was measured with a scintillation counter. Activity was expressed as cpm (Tables IV and V).
Tilastollinen analyysiStatistical analysis
Merkittävyys määritettiin mononäyte-2T2-testin avulla. Esimerkin 10 mukaisella tuotteella saadut tulokset on esitetty taulukoissa I, II ja III.Significance was determined using the monosample-2T2 test. The results obtained with the product of Example 10 are shown in Tables I, II and III.
Alustava nopea testi antituumori- ja immunostimulanttisen vaikutuksen määrittämiseksi Tämä menetelmä suoritettiin laboratorioissamme suuren näyte-määrän testaamiseksi nopeasti. Koiraspuolisia CFLP-hiiriä (keskimääräinen paino 30 g) inokuloitiin i.p. neljällä mil-j oonalla askiiteslymfoomasoluilla.Preliminary rapid test to determine antitumor and immunostimulatory effect This method was performed in our laboratories to test a large number of samples rapidly. Male CFLP mice (mean weight 30 g) were inoculated i.p. with four mil-j Oona ascites lymphoma cells.
Testissä käytettiin niitä eläimiä, joissa oli kehittynyt neljäntenä päivänä helposti näkyvä kasvain - s.o. askiites. Vähintään 10 eläintä käytettiin jokaisessa ryhmässä ja hiiret käsiteltiin oraalisesti LDso-arvon kymmensosalla.The test used those animals that had developed a tumor that was easily visible on the fourth day - i.e. ascites. At least 10 animals were used in each group and mice were treated orally with one-tenth of the LD50 value.
10 80259 24 tuntia oraalisen käsittelyn jälkeen tulokset arvioitiin Giemsa-värjätyllä askiites-voiteluaineella sytologisen analyysin perusteella. Kontrolliryhmässä käytettiin sama määrä eläimiä kuin käsitellyssä ryhmässä.10 80259 24 hours after oral treatment, the results were evaluated with Giemsa-stained ascites lubricant based on cytological analysis. The same number of animals was used in the control group as in the treated group.
Arvioitiin kasvainsolujen vauriot, organismin aktivointi ja mahdolliset toksiset vaikutukset.Tumor cell damage, organism activation, and potential toxic effects were assessed.
Arvioitaessa antituumorivaikutusta kuolleiden ja ehjien kasvainsolujen prosenttlsuhde arvioitiin. Tulokset ilmaistiin seuraavan asteikon mukaisesti:To evaluate the antitumor effect, the percentage of dead and intact tumor cells was estimated. The results were expressed according to the following scale:
Kasvainsolujen kuolemisnopeus vaikutus 0...30 ei vaikutusta 30.. .70 % keskivahva vaikutus 70.. .100 % vahva vaikutus (esto)Tumor cell death rate effect 0 ... 30 no effect 30 .. .70% medium strong effect 70 .. .100% strong effect (inhibition)
Organismin immuunijärjestelmän kasvu arvioitiin neutrofii-listen granulosyyttien, lymfosyyttien ja makrofagien määrän ja aktiivisuuden perusteella, joita esiintyi askiites-tuumo-risoluissa ja jotka olivat mukana immuunijärjestelmässä. Immuunijärjestelmän aktiivisuus ilmeni nopeudella, jolla yllä mainitut askiitesissä olevat solut muodostavat plasmasilta-sidoksen kasvainsolujen kanssa. Tämän arvioinnin mukaisesti, jos ei ole mitään eroa mainittujen solujen määrässä eikä aktiivisuudessa, ei voida todeta mitään kasvua kontrolliin verrattuna. Keskivahva vaikutus havaittiin, jos solumäärän ja aktiivisuuden kasvu kontrollin suhteen oli 20 %. Vaikutus oli vahva, jos immuunijärjestelmän solumäärän ja aktiivisuuden kasvu oli yli 20 % korkeampi kuin kontrollin (taulukko VII).The growth of the body's immune system was assessed by the number and activity of neutrophilic granulocytes, lymphocytes and macrophages present in ascites tumor cells and involved in the immune system. Immune system activity was manifested at the rate at which the above-mentioned cells in the ascites form a plasma bridge bond with tumor cells. According to this evaluation, if there is no difference in the number or activity of said cells, no increase can be observed compared to the control. A moderate effect was observed if the increase in cell number and activity relative to the control was 20%. The effect was strong if the increase in cell number and activity of the immune system was more than 20% higher than that of the control (Table VII).
Toksisuus määritettiin arvioimalla neutrofiilisten granulosyyttien ja lymfosyyttien morfologiset muutokset, plasman verisuonitus, tuman fragmentoituminen, polysegmenttien muodostus ja toksinen granuloituminen. Toksisuus ilmaistiin seuraavan asteikon mukaisesti: il 11 80259Toxicity was determined by assessing morphological changes in neutrophilic granulocytes and lymphocytes, plasma vasculature, nuclear fragmentation, polysegment formation, and toxic granulation. Toxicity was expressed according to the following scale: il 11 80259
Havaitut tulokset toksisuus ei yllä mainittuja muutoksia omissa soluissa ei toksisuutta 20 %:n muutoksia keskisuuri toksisuus yli 20 %:n muutoksia korkea toksisuusObserved results toxicity no above mentioned changes in own cells no toxicity 20% changes medium toxicity more than 20% changes high toxicity
Antituumorivaikutuksen testaus 1. In vitro: K-562 ihmisen erytroleukemia-solujen ja P-388 hiiren lymfoomasoluviljelyjä käsiteltiin 1 - 100 ug/ml:lla testi-ainetta: 2. In vivo: a) NK-ly-askiites-lymfooma 1 miljoona N6meth-Kellner-askiites-lymfooma-soluja siirrettiin i.p. 20 koiraspuoliseen CFLP-hiireen (keskimääräinen paino 30 g). [Uutta hiiren askiites-tuumoria käytettiin seu-lontavälineenä. Neoplasma 8, 337 (1961)]. Puolet eläimistä toimivat kontrollina ja loput käsiteltiin LD5Q-arvon kymmenesosalla erilaisia yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä p.o. ja i.p. yhtenä ja vastaavasti viitenä seuraavana päivänä. (Jos LD5Q-arvon kymmenesosa oli tehokas, käytettiin pienempää annosta). Käsitteltävässä ryhmässä suoritettiin askiites-voiteluaineen sytomorfologinen määritys 24 tunnin kuluttua ja vaurioituneiden ja vastaavasti kuolleiden solujen suhde arvioitiin. 5 päivän ajan käsitellyissä eläimissä määritettiin eloonjääntimäärä.Antitumor Activity Testing 1. In vitro: Cultures of K-562 human erythroleukemia cells and P-388 mouse lymphoma cells were treated with 1 to 100 μg / ml of test substance: 2. In vivo: a) NK-ly ascites lymphoma 1 million N6meth -Kellner-ascites lymphoma cells were transplanted ip 20 male CFLP mice (average weight 30 g). [A new mouse ascites tumor was used as a screening tool. Neoplasma 8, 337 (1961)]. Half of the animals served as controls and the rest were treated with one-tenth of the LD5Q for various compounds of general formula I p.o. and i.p. one and the following five days, respectively. (If one-tenth of the LD5Q was effective, a lower dose was used). In the treatment group, a cytomorphological assay of the ascites lubricant was performed after 24 hours, and the ratio of damaged to dead cells was evaluated. Survival was determined in animals treated for 5 days.
b) L1210-kasvain 106 L1210-kasvainsoluja siirrettiin i.p. 20 naaraspuoliseen BDFi-hiireen (paino 20 g). Käsittely aloitettiin 24 tuntia kasvaimen siirron jälkeen ja sitä jatkettiin 8 päivän ajan. Jokainen ryhmä koostui 5 eläimestä; annos: 5, 50 ja 500 12 80259 mg/kg p.o. päivittäin. Kontrolliryhmässä oli samoin 5 eläintä. Eloonjääntimäärää tarkkailtiin.b) L1210 tumor 106 L1210 tumor cells were transplanted i.p. 20 female BDFi mice (weight 20 g). Treatment was started 24 hours after tumor transplantation and continued for 8 days. Each group consisted of 5 animals; dose: 5, 50 and 500 12 80259 mg / kg p.o. daily. The control group also had 5 animals. Survival rates were monitored.
c) Lewis-pitkäaikaiskasvainc) Lewis long-term tumor
Jokaisessa ryhmässä käytettiin 6 eläintä. Annos: 5 ja 50 mg/kg. Kontrolliryhmässä oli samoin 6 eläintä. Testissä käytettiin naaraspuolisia Cs7Bl-hiiriä (paino 20 g).6 animals were used in each group. Dose: 5 and 50 mg / kg. The control group also had 6 animals. Female Cs7B1 mice (weight 20 g) were used in the test.
Kasvain siirrettiin s.c. oikean jalan lihakseen. 10 päivän kuluttua jalka amputoitiin, oraalinen käsittely käynnistettiin ja sitä jatkettiin 9 päivän ajan. Eläimet tapettiin ja etäispesäkkeet laskettiin stereomikroskoopilla.The tumor was transferred s.c. the muscle of the right leg. After 10 days, the leg was amputated, oral treatment was initiated and continued for 9 days. Animals were sacrificed and metastases were counted under a stereomicroscope.
d) Erilajisia koiria, joilla oli spontaani rintasyöpä (ductus cc.), käsiteltiin 4 viikon ajan 1...10 mg/kg:n oraalisilla testiaineiden annoksilla. Testileikkaus suoritettiin ja kudosnäytteet kerättiin histologista analyysiä varten.d) Different species of dogs with spontaneous breast cancer (ductus cc.) were treated for 4 weeks with oral doses of 1 to 10 mg / kg of test substances. Test surgery was performed and tissue samples were collected for histological analysis.
Esimerkkien 10, 12, 13, 14, 22, 23, 29, 30, 31, 33 mukaisilla yhdisteillä on erinomainen antituumorivaikutus. Näin esimerkin 10 mukainen yhdiste estää ihmisen K-562 erytroleuke-mia-solut kudosviljelyissä 4 ug/ml:n konsentraatiossa. Toisaalta tämä yhdiste estää P-388-solujen uudiskasvua ainoastaan 40 ug/ml:n konsentraatiossa ja korotettaessa konsent-raatio 400 ug:aan/ml, aktiivisuudesta ei tule vahvempaa. Suuren aktiivisuuden omaavilla yhdisteillä on annoksesta riippuvainen vaikutus 0,5...5 ug/ml:n konsentraatiossa, kun taas alhaisen aktiivisuuden omaavat yhdisteet eivät ole annoksesta riippuvaisia. In vivo-testien mukaisesti tämän yhdisteryhmän jäsenet eivät ole joko ollenkaan aktiivisia L^io-kasvainta vastaan tai vain hyvin pienessä määrin.The compounds of Examples 10, 12, 13, 14, 22, 23, 29, 30, 31, 33 have excellent antitumor activity. Thus, the compound of Example 10 inhibits human K-562 erythroleukemia cells in tissue cultures at a concentration of 4 μg / ml. On the other hand, this compound inhibits the proliferation of P-388 cells only at a concentration of 40 μg / ml, and when the concentration is increased to 400 μg / ml, the activity does not become stronger. Compounds with high activity have a dose-dependent effect at a concentration of 0.5 to 5 ug / ml, while compounds with low activity are not dose-dependent. According to in vivo tests, the members of this group of compounds are either not active at all against the L-tumor or only to a very small extent.
Yhdisteet vähentävät merkittävästi Lewis-pitkäaikaiskasvai-men keuhkoetäispesäkkeiden määrää. Yhdisteet 10, 12, 13, 14, 22, 23, 39 ovat tehokkaita annoksessa, joka on alhaisempi kuin LD5Q-arvon kymmenesosa. Esimerkin 13 mukainen yhdiste vähentää 50 %:lla keuhkometastaasien määrää jo 5 mg/kg:n annoksessa ja tämä tulos on erittäin merkittävä sen seikan johdosta, että LD50 = 2380 mg/kg.The compounds significantly reduce the number of Lewis long-term tumor lung metastases. Compounds 10, 12, 13, 14, 22, 23, 39 are effective at a dose lower than one tenth of the LD50 value. The compound of Example 13 reduces the number of lung metastases by 50% even at a dose of 5 mg / kg and this result is very significant due to the fact that LD50 = 2380 mg / kg.
Il 13 80259Il 13 80259
On todettu, että vaikutusta voidaan vahvistaa suuremmassa määrin toistamalla hoito kuin lisäämällä annosta.It has been found that the effect can be enhanced to a greater extent by repeating the treatment than by increasing the dose.
Esimerkkien 10, 12, 13, 17, 22, 39 mukaiset yhdisteet osoittautuivat aktiivisiksi Nk-ly-askiites-kasvaimen suhteen konsentraatiossa, joka oli alle kymmenesosan LDsQ-arvosta. Viimeksi mainitut yhdisteet lisäävät eloonjääntiä ja elinikää annoksen mukaan. Näillä yhdisteillä on immunostimulant-tinen vaikutus pienissä annoksissa, kun taas korkeammissa annoksissa suora antituumorivaikutus ilmenee samoin. Näin esimerkin 10 mukaisilla yhdisteillä on immunostimulanttinen vaikutus 25 mg/kg:n annoksissa. Esimerkin 10 mukainen yhdiste on sytotoksinen 250...500 mg/kg:n annnosalueella. Yleisen kaavan I mukaiset S-allyyli-, S-l-kloori-2-hydroksipropyyli-tai S-l-bromi-2-hydroksi-propyyli-substituoidut yhdisteet ovat erittäin aktiivisia koirien spontaaneja rintakasvaimia vastaan. 3...4 viikkoa kestävän käsittelyn jälkeen elävästä kudoksesta otetussa näytteessä todettiin tunkeutuvan luonteen omaavaa lymfosyyttien ja neutrofiilisten granulosyyt-tien, makrofagien ja silloin tällöin eosinofiilisten granu-losyyttien soluinfiltraatiota kasvaimissa (ductus cc.). Kasvainsoluissa havaittiin rappeutumista osoittavia muutoksia ja voimakasta hajoamista.The compounds of Examples 10, 12, 13, 17, 22, 39 proved to be active against Nk-ly ascites tumor at a concentration less than one tenth of the LD50 value. The latter compounds increase survival and longevity in a dose-dependent manner. These compounds have an immunostimulatory effect at low doses, while at higher doses a direct antitumor effect is similar. Thus, the compounds of Example 10 have an immunostimulatory effect at doses of 25 mg / kg. The compound of Example 10 is cytotoxic over the dose range of 250-500 mg / kg. The S-allyl-, S-1-chloro-2-hydroxypropyl- or S-1-bromo-2-hydroxy-propyl-substituted compounds of the general formula I are highly active against spontaneous canine breast tumors. After 3 to 4 weeks of treatment, a sample of living tissue was found to infiltrate cellular infiltration of lymphocytes and neutrophilic granulocytes, macrophages, and occasionally eosinophilic granulocytes in tumors (ductus cc.). Degenerative changes and strong degradation were observed in the tumor cells.
NK-solut muodostavat plasmasiltasidoksia kasvainsolujen kanssa ja tämä saa aikaan kasvainsolujen plasman solurakku-lan rappeutumista ja tuman DNS-rakenteen suurta ohenemista. Tuma-plasma-suhde muuttuu, tumat paisuvat voimakkaasti ja plasman basofiilisyys eli emäshakuisuus pienenee.NK cells form plasma bridges with tumor cells, and this results in the degradation of the plasma cell cell of the tumor cells and a large thinning of the nuclear DNA structure. The nuclear-to-plasma ratio changes, the nuclei swell strongly, and the plasma basophilicity, or alkalinity, decreases.
Noin neljäsosassa tapauksista leukosyyttien tunkeutuminen kasvaimeen on mitättömän pieni; toisaalta kasvainsolut ovat paisuneet ja lasimaisesti rappeutuneita. Solujen väliseen rakenteeseen saostuu hyvin suuri määrä lasimaisesti värjäytynyttä materiaalia.In about a quarter of cases, leukocyte infiltration into the tumor is negligible; on the other hand, tumor cells are swollen and vitreous degenerated. A very large amount of vitreous stained material precipitates in the intercellular structure.
Annettaessa esimerkin 10 mukaista yhdistettä oraalisesti 30 ...120 mg:n päivittäisenä annoksena (0,5 - 2 mg/kg) 6...12 11 80259 kuukauden ajan havaittiin merkittävä parannus tai vastaavasti toipuminen rintasyövän, munasarjasyövän ja haimasyövän aiheuttamien ihmisen luumetastaaseissa.When the compound of Example 10 was administered orally at a daily dose of 30 to 120 mg (0.5 to 2 mg / kg) for 6 to 12 11 80259 months, a significant improvement or recovery in human bone metastases from breast, ovarian and pancreatic cancer was observed, respectively.
Antituumorivaikutuksen testauksesta yhdistelmissä 1) Yhdistelmät tunnettujen sytostaattisten aineiden kanssa:Testing of antitumor activity in combinations 1) Combinations with known cytostatic agents:
Erilaisia sytostaattisia eli solun kasvua ehkäiseviä aineita, joilla oli biologinen alkylointivaikutus, annettiin yhdessä yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden kanssa CFLP-hiirille, joilla oli NK-ly-askiites-kasvain. Sytostaattiset aineet annettiin oraalisesti, intraperitoneaalisesti tai intravenöösisesti annoksena, joka vastasi viidesosaa tai kymmenesosaa LDsQ-arvosta tai tekniikan tasolla tehokkaimmaksi esitettynä annostuksena. Yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet annettiin oraalisesti annoksena, joka vastasi kymmenesosaa tai kahdeskymmenesosaa LDsQ-arvosta, yhtenä annoksena tai useina kertoina 48 tunnin kuluttua sytostaattisella aineella suoritetun käsittelyn jälkeen. Näin annettiin syk-lofosfamidin, karnomustiinin, degranolin, dibromidulsitolin ja dibromimannitolin yhdistelmiä toisaalta ja toisaalta esimerkkien 10, 12, 13, 14, 15, 22, 23, 39 mukaisia yhdisteitä. Verrattuna ainoastaan tunnetuilla sytostaattisilla aineilla käsiteltyyn kontrolliryhmään antituumorivaikutus vahvistui ja immunodepressio väheni.Various cytostatic or cell growth inhibitory agents having a biological alkylating effect were co-administered with compounds of general formula I to CFLP mice with NK-ly ascites tumor. Cytostatic agents were administered orally, intraperitoneally, or intravenously at a dose corresponding to one-fifth or one-tenth of the LD50 value, or the dose most effective in the art. The compounds of general formula I were administered orally in a dose corresponding to one tenth or one twentieth of the LD50 value, in a single dose or several times 48 hours after treatment with a cytostatic agent. Thus, combinations of cyclophosphamide, carnomustine, degranol, dibromodulsitol and dibromomannitol on the one hand and the compounds of Examples 10, 12, 13, 14, 15, 22, 23, 39 on the other hand were administered. Compared with the control group treated with known cytostatic agents alone, the antitumor effect was enhanced and immunodepression was reduced.
2) Yhdistelmä tunnettujen vitamiinien kanssa:2) Combination with known vitamins:
Yleisen kaavan I mukaisia isotiuronium-suoloja voidaan tehokkaasti yhdistellä vitamiinien A ja D3 keskisuurien annosten ja vitamiinin C suurien annosten kanssa. Hyviä tuloksia saatiin sekä farmakologissa testeissä että ihmisten kliinisissä tapauksissa.The isothuronium salts of the general formula I can be effectively combined with medium doses of vitamins A and D3 and high doses of vitamin C. Good results were obtained both in pharmacological tests and in human clinical cases.
3) Yhdistelmä tunnettujen hormonien kanssa: Käsiteltäessä hormoni-riippuvaisia kasvaimia yhdistelmä osoittautui käyttökelpoiseksi sekä farmakologisissa testeissä että ihmisten kliinisissä tapauksissa.3) Combination with known hormones: In the treatment of hormone-dependent tumors, the combination proved to be useful both in pharmacological tests and in human clinical cases.
tl 15 80259 4) Käyttö kirurgiassa:teaspoon 15 80259 4) Use in surgery:
Yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä käytettiin onnistuneesti farmakologisissa testeissä kiinteiden kasvaimien tapauksessa kirurgiseen esi- ja jälkihoitoon (NK-ly kiinteä, Yosida). Voidaan todeta farmakologisten testien perusteella, että yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet ovat luultavasti sopivia myös käytettäviksi ihmisten kirurgiassa esi- ja jälkihoidossa.The compounds of general formula I were successfully used in pharmacological tests in the case of solid tumors for surgical pre- and post-treatment (NK-ly solid, Yosida). It can be stated from pharmacological tests that the compounds of general formula I are probably also suitable for use in human surgery for pre- and post-treatment.
Antiparasiittivaikutuksen testaus:Antiparasitic testing:
Yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä annettiin oraalisesti koirille, jotka oli infektoitu punkeilla (Ixodes ricinus) kolmen päivän ajan. Näin N-aminoiminometyyli-S-allyyli-iso-tiureniumhydrokloridia annettiin oraalisesti 1-2 mg/kg ja punkkien kuolinmäärä rekisteröitiin. 6-8 tuntia yleisen kaavan I mukaisen aktiivisen aineen antamisen jälkeen kaikki punkit olivat kuolleet koirissa.The compounds of general formula I were administered orally to dogs infected with ticks (Ixodes ricinus) for three days. Thus, N-aminoiminomethyl-S-allyl-iso-thiurenium hydrochloride was administered orally at 1-2 mg / kg and the number of mite deaths was recorded. 6-8 hours after administration of the active ingredient of general formula I, all ticks had died in dogs.
Vapaiden radikaalien sitominen:Binding of free radicals:
Esimerkkien 9, 10, 15 ja 24 mukaiset yhdisteet vähentävät merkittävästi vetyperoksidin, orgaanisten peroksidien ja biologisten alkylointi- (vapaan radikaalin muodostavien) aineiden toksisuutta (LD50). Perustuen yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden edullisiin toksisuusarvoihin ne ovat sopivampia vapaiden radikaalien sitomiseen ja suojaavat paremmin säteilyltä kuin tunnetut isotiurenium-johdannaiset, jotka saadaan vastaavasta tioureasta.The compounds of Examples 9, 10, 15 and 24 significantly reduce the toxicity (LD50) of hydrogen peroxide, organic peroxides and biological alkylating (free radical generating) agents. Based on the preferred toxicity values of the compounds of the general formula I, they are more suitable for free radical scavenging and provide better radiation protection than the known isothiurenium derivatives obtained from the corresponding thiourea.
Kardioprotektiivinen vaikutus isoprenaliini-nekroosissa: 5 mg/kg isoproterenolia annettiin i.p. koiraspuolisille CFY-rotille (paino 250-300 g). Jokaisessa ryhmässä oli 10 eläintä. Osa eläimistä toimi kontrollina ja loput käsiteltiin 1... 5 mg:llä/kg i.p. tai 10...50 mg:llä/kg p.o yhdistettä n:o 13. Kahden viikon kuluttua sydämet tutkittiin histologises-ti. Sydänlihaksen kuolioituneiden ja terveiden alueiden 16 80259 suhde määritettiin. Todettiin, että kaikki käsittelyt yleisen kaavan I mukaisella N-aminoiminometyyli-S-allyyli-iso-tiurenium-hydrokloridilla tuottivat kuolion eli nekroosin merkittävän vähenemisen.Cardioprotective effect in isoprenaline necrosis: 5 mg / kg isoproterenol was administered i.p. for male CFY rats (weight 250-300 g). There were 10 animals in each group. Some animals served as controls and the rest were treated with 1 to 5 mg / kg i.p. or 10 to 50 mg / kg p.o. of Compound No. 13. After two weeks, the hearts were examined histologically. The ratio of necrosis and healthy areas of the myocardium to 16 80259 was determined. It was found that all treatments with N-aminoiminomethyl-S-allyl-iso-thiurenium hydrochloride of general formula I produced a significant reduction in necrosis, i.e. necrosis.
Vaurioituneella alueella testiyhdiste saa oletettavasti aikaan vaikutuksensa sitomalla neutrofiilisten granulosyyt-tien tuottaman vetyperoksidin. Tässä mallissa muilla vapaita radikaaleja sitovilla ja antioksidanttimolekyyleillä on samanlainen vaikutus.In the damaged area, the test compound is expected to exert its effect by binding hydrogen peroxide produced by neutrophilic granulocytes. In this model, other free radical scavengers and antioxidant molecules have a similar effect.
Vaikutus verenkiertoon ja hengitykseen:Effects on blood circulation and respiration:
Esimerkin 10 mukainen yhdiste i.v. 10 mg/kg-annoksena annettuna ei vaikuta huomattavasti sellaisten kissojen hemodynaa-misiin parametreihin ja hengitystoimintaan, joilla oli avattu ja suljettu rinta. Seuraavat parametrit testattiin: kammio- ja ääreispaine, sydämen lyöntitiheys (toiminta) EKG, tilavuus/minuutti, supistuvuus, hengitystilavuus, hengitys-nopeus ja vastus. Yli 10 mg/kg:n intravenöösisessä annoksessa vasen kammiopaine ja lyöntitiheys vähenivät. 50 mg/kg:n annoksessa vaikutukset olivat merkittäviä ja pitkään kestäviä. 100 mg/kg:n i.v.-annoksessa havaittiin voimakkaita he-modynaamisia muutoksia, mutta kissat eivät menehtyneet.The compound of Example 10 i.v. At a dose of 10 mg / kg, the hemodynamic parameters and respiratory function of cats with open and closed breasts were not significantly affected. The following parameters were tested: ventricular and peripheral pressure, heart rate (function) ECG, volume / minute, contractility, tidal volume, tidal rate, and resistance. At intravenous doses above 10 mg / kg, left ventricular pressure and heart rate decreased. At a dose of 50 mg / kg, the effects were significant and long-lasting. At a dose of 100 mg / kg i.v., strong hemodynamic changes were observed, but cats did not die.
N-(aminoiminometyyli)-S-allyyli-isotiuronium-suoloj en (halogenidien) vaikutukset (yhdiste A).Effects of N- (aminoiminomethyl) -S-allyl-isothiuronium salts (halides) (Compound A).
it 80259 td rlit 80259 td rl
PP
c 3c 3
PP
=x cd= x cd
.M.M
•rH• rH
cd •H ________cd • H ________
PP
cc
•H•B
OO
-O-O
33
J* COJ * CO., LTD
C I X XC I X X
m o cd n a« :--¾¾ __ ,-t ·Η * • >> rH LT» CM CM ΠΓ iH Ή X O +1 Ό +1 Λm o cd n a «: - ¾¾ __, -t · Η * • >> rH LT» CM CM ΠΓ iH Ή X O +1 Ό +1 Λ
.. <1> r-N O CM OJ CM.. <1> r-N O CM OJ CM
LPi -P C— C-— E " + * P ·> CO O +LPi -P C— C-— E "+ * P ·> CO O +
Il *H -a· \0 VO rHIl * H -a · \ 0 VO rH
. co CT» /—x Φ xd th m. t3 i< x: ··-- 3 o. co CT »/ —x Φ xd th m. t3 i <x: ·· - 3 o
•H co C• H co C
to *Hto * H
^ c cd ct»^ c cd ct »
QJ <D Οι IQJ <D Οι I
Ό -r-3 *H O Cd CO CT» C 3 rH I—I ·Η “ “ H ·Η ιΗ O rH LA rH en COO O X O CM -H C--Ό -r-3 * H O Cd CO CT »C 3 rH I — I · Η“ “H · Η ιΗ O rH LA rH en COO O X O CM -H C--
O3co S O +1 LT» r— rHO3co S O +1 LT »r— rH
^SCOC “ + e +^ SCOC “+ e +
D ·Η 0) Ό VOD · Η 0) Ό VO
h3 co ·<~3 0^3--- < OP _h3 co · <~ 3 0 ^ 3 --- <OP _
E-ι p p OE-ι p p O
O O C ^ ^O O C ^ ^ ^
>» cd dj 2 <M> »Cd dj 2 <M
n m -*-* 'oino-Mvon m - * - * 'oino-Mvo
. * W. “ x g +. n en CM. * W. “x g +. n en CM
e- m H e in n rHe- m H e in n rH
Se 2 « 4.Se 2 «4.
C S +. £ ^ ° +C S +. £ ^ ° +
·· •'-J·· • '-J
Q 3 ··__ Q rH eQ 3 ·· __ Q rH e
< O ·Η -H<O · Η -H
CO O rH C3 COCO O rH C3 CO
CO -rl Xd rHCO -rl Xd rH
- - 3 ti xd O in q -p ° ε O +, +| ^- - 3 ti xd O in q -p ° ε O +, + | ^
3 P ή p O CO3 P ή p O CO
Ä Csi ϋ C ^ ^ °Ä Csi ϋ C ^ ^ °
•H <u CO O CM CM _T• H <u CO O CM CM _T
CÖ 'm Φ ii <r °CÖ 'm Φ ii <r °
:- > td ^ 'X: -> td ^ 'X
_______Oi O ""_______Oi O ""
OO
|P-V O O *£u o o < > Q :cd| P-V O O * £ u o o <> Q: cd
C <C p -PC <C p -P
>»> »
CO •Hr-' e ‘HCO • Hr- 'e ’H
3 -H O >, o ·* xd cd cd th ,ρ *h p E a cd ^ e w o .e cd ε <u ε >> -p *- ,c CC -—- O xd 2: > x ie 802593 -H O>, o · * xd cd cd th, ρ * h p E a cd ^ e w o .e cd ε <u ε >> -p * -, c CC -—- O xd 2:> x ie 80259
•H•B
Ρ c - 5 x 3«Ρ c - 5 x 3 «
** CO -T J< (M** CO -T J <(M
I ^ n J O “J <-* in n ^ 2 C Ή +1 +1 25 c ^ X g + +I ^ n J O “J <- * in n ^ 2 C Ή +1 +1 25 c ^ X g ++
2 ® t^. O vO CM2 ® t ^. O vO CM
3 .2 a- t- <\J3 .2 a- t- <\ J
£ ^ ON Ό <r CO£ ^ ON Ό <r CO
•rt O ^___ ° ° ~ o ON >- CM i*• rt O ^ ___ ° ° ~ o ON> - CM i *
3 I ti A3 I ti A
·* -π o 2 cm cm n oo *- *7 m i-t 'H n vo M da d +· +» 2 .h x 2 + + • +» Jj O ri ^ +2 o e- e - - ” ‘m Ο Λ ro in· * -Π o 2 cm cm n oo * - * 7 m it 'H n vo M da d + · + »2 .hx 2 + + • +» Jj O ri ^ +2 o e- e - - ”' m Ο Λ ro in
Ο vO »χ CMΟ vO »χ CM
in χύ Σ II . - - - ------ - w <u o v cn < —I o C I se ·* Ϊ* 2 +* 5 2 3 °i « n „ cp « x 8 " " +1 ^ ΦΟ £ S+I + NO +in Σ Σ II. - - - ------ - w <uov cn <—I o CI se · * Ϊ * 2 + * 5 2 3 ° i «n„ cp «x 8" "+1 ^ ΦΟ £ S + I + NO +
·<-» > 2 t- B· <- »> 2 t- B
3 u r; ή p3 u r; ή p
Η ίί O <T CMΗ ίί O <T CM
Ο -H ---- M IQ ϋΟ -H ---- M IQ ϋ
M COM CO
C <u in -x •. O · 0) « ·ΗC <u in -x •. O · 0) «· Η
C ---1 ,Η CM C\JC --- 1, Η CM C \ J
5»S Φ 3 fH5 »S Φ 3 fH
O <U P ^ O +1+1 vJ P p 3 3 0 11—' p ON '—< «S 3 -H C ' ^O <U P ^ O + 1 + 1 vJ P p 3 3 0 11— 'p ON' - <«S 3 -H C '^
Ehcoco-h o cm in LnEhcoco-h o cm in Ln
•h co uz cn r-i '-I• h co to cn r-i '-I
> rt .* o •η ·ο <υ c.> rt. * o • η · ο <υ c.
•Η Ό Ο.• Η Ό Ο.
Ρ C C--/7Ρ C C - / 7
Jsi <ϋ ·Η f ’5 2 « a» « 2 3 ς- * 2 > s o co 2 ^ 3 w ·Η C >, Ρ CO ·Η CO C ·Η C ·ΗJsi <ϋ · Η f ’5 2« a »« 2 3 ς- * 2> s o co 2 ^ 3 w · Η C>, Ρ CO · Η CO C · Η C · Η
ΐί°° 3 (Ö CO ^ N- Uΐί °° 3 (Ö CO ^ N- U
3νο aöca g w c w dj ·πω2 6 a f o e d t sz ca ^ z: g ω en >1 p o λ p> ui en (Τ'— x 11 19 802593νο aöca g w c w dj · πω2 6 a f o e d t sz ca ^ z: g ω en> 1 p o λ p> ui en (Τ'— x 11 19 80259
CMCM
cncn
vOvO
·*.· *.
O +1 •sO +1 • s
O <TO <T
r-t CMr-t CM
·« r-l· «R-l
CMCM
1-4 CO1-4 CO
a m c ^a m c ^
¢) bQ O I—I¢) bQ O I — I
•H · 3.• H · 3.
4_> ___ <H +14_> ___ <H +1
P OJP OJ
>> E to 10 >> E o ™ o 5 cv cd ^ ^ 3 3>> E to 10 >> E o ™ o 5 cv cd ^ ^ 3 3
<U rH<U rH
H Cd ~ “ oH Cd ~ “o
C *HC * H
0) P ,0) P,
P «5 CMP «5 CM
CO CO · ™ •H C S ^ ε m · , •η ·η ω p s · ^+, •H · ^ ° ‘ s § +· · s o O ·· 0 M 6 -H P 2 M >5 P O ^ • . I—I r—I c0 S»CO CO · ™ • H C S ^ ε m ·, • η · η ω p s · ^ +, • H · ^ ° 's § + · · s o O ·· 0 M 6 -H P 2 M> 5 P O ^ •. I — I r — I c0 S »
0 CO C0 CO C
o a c co ___o a c co ___
« bO -H«BO -H
S*5 C -H ÄS * 5 C -H Ä
3) ω £ CO3) ω £ CO
J CO CUJ CO CU
35 -H r-, X35 -H r-, X
< EC<EC
E-ι C cu cE-ι C cu c
•H 0) *H• H 0) * H
CO r-l ·Η tn CO *H i—I r-l \nCO r-l · Η tn CO * H i — I r-l \ n
3 cd O rH3 cd O rH
P C C O _hP C C O _h
3 C P C3 C P C
λ: 3 c p +iλ: 3 c p + i
H P O CH P O C
m Λ il O C\Jm Λ il O C \ J
- - > co m O- -> co m O
1 v_, c O 0) o U C Q5 r-| p cd > ^ 'Z'1 v_, c O 0) o U C Q5 r- | p cd> ^ 'Z'
•H cd U £ JQ• H cd U £ JQ
: : > u <u o o OP " "::> u <u o o OP ""
C 3 O OC 3 O O
M ω ^ xd a a > w w red p xd xd «e p > > >j ·η xd rcoM ω ^ xd a a> w w red p xd xd «e p>>> j · η xd rco
rH ω Jsi p PrH ω Jsi p P
CU ” U P PCU ”U P P
p t; a) -H -Hp t; a) -H -H
p ” E Xp ”E X
•H CC• H CC
CO ^ -H <U CUCO 2 -H <U CU
red e (U E Ered e (U E E
r-l CM m 20 80259 Ο Π (M Ό O O 00 (M CM O c\j lt» rtr-l CM m 20 80259 Ο Π (M Ό O O 00 (M CM O c \ j lt »rt
O +1 +1 -MO +1 +1 -M
PP
. <r O GO. <r O GO
O σ\ n -r c-- o .. in o c— " cm en p c c <u Ή · * ^ 'P _---O σ \ n -r c-- o .. in o c— "cm en p c c <u Ή · * ^ 'P _---
P -HP -H
·—I .· —I.
>i f-H — W n ®> i f-H - W n ®
O ¥ ^ c- CO CMO ¥ ^ c- CO CM
ft y) n n o et: 3 C— Ό Όft y) n n o et: 3 C— Ό Ό
>s O ^ „ CM n CM> s O ^ „CM n CM
^ ·* - +. +. +.^ · * - +. +. +.
S ^ ” 1-1 Ό Ό CT» ω S 2 tn cm cdS ^ ”1-1 Ό Ό CT» ω S 2 tn cm cd
•h ^ £ p co O• h ^ £ p co O
e 2 S rt en -a· £ g < im rt he 2 S rt en -a · £ g <im rt h
•H O• H O
e e <u Φ-- •<~3 Ό 3 3 P 3e e <u Φ-- • <~ 3 Ό 3 3 P 3
•H CO CO C— <T• H CO CO C— <T
o ·η co m o co > ό tn e— 3 -h en en eno · η co m o co> ό tn e— 3 -h en en en
Ό -HΌ -H
CP + · +1 +1 •H jsj p ί> cd - en σχ «tCP + · +1 +1 • H jsj p ί> cd - en σχ «t
M cd cu O en Ό vOM cd cu O en Ό vO
i—i f-ι cm σ' ini — i f-ι cm σ 'in
O P CM O' OO P CM O 'O
^ ·· C CM CM —l^ ·· C CM CM —l
« < -H«<-H
35 P35 P
»-J e cd-- 33 O cd»-J e cd-- 33 O cd
< O E<O E
E·· ί-ι cd O «T p <r z e—· in p S ·ρ r— O -j- cd * · p en «r enE ·· ί-ι cd O «T p <r z e— · in p S · ρ r— O -j- cd * · p en« r en
rH C W PrH C W P
p O O +1 Ή Ή : ·· o co e <c ·η p ό σχ m re p -m C ό m cu cd o ή σχ m cd i*s p σχ op O O +1 Ή Ή: ·· o co e <c · η p ό σχ m re p -m C ό m cu cd o ή σχ m cd i * s p σχ o
co E E CM CM Pco E E CM CM P
3 f-, · P o o.3 f-, · P o o.
3 5-1 ^ CO u ω •H C ~ cd Cd C h f 5ΐ 3 1 2 M Λ g = ^ 3 P O E Ϊ. == ^ 3 •H p P C ^ SO \ > W v -P «3 m ω c 3 e P α> Φ -o - M -° ·*“ SO CM P «a:3 5-1 ^ CO u ω • H C ~ cd Cd C h f 5ΐ 3 1 2 M Λ g = ^ 3 P O E Ϊ. == ^ 3 • H p P C ^ SO \> W v -P «3 m ω c 3 e P α> Φ -o - M - ° · *“ SO CM P «a:
OO
P «s e e >» X X oP «s e e>» X X o
s: CU a. CJs: CU a. CJ
IIII
21 80259 £ 0> Ή Ο; 09 νΟ νΟ •h o r\j νθ η Ρ ίβ /* ^ ^ ρ .ρ ο >5 ·Η -Η +1 +' + · ^ CQ _ m r-ι Ό °0 <?21 80259 £ 0> Ή Ο; 09 νΟ νΟ • h o r \ j νθ η Ρ ίβ / * ^ ^ ρ .ρ ο> 5 · Η -Η +1 + '+ · ^ CQ _ m r-ι Ό ° 0 <?
Ο ·Η -Ή Ρ OJΟ · Η -Ή Ρ OJ
ς_, ,ρ Γ— θ' Ος_,, ρ Γ— θ 'Ο
gO ~Τ Ό <—IgO ~ Τ Ό <—I
>> Ο.>> Ο.
(—I(-I
Cd------------- C ·Η φ > W et! __ H Cd ^ ^ <-* ^ ε ε , m ό o £ Ο Ή rH Ή Π Η Ξ <-* Ή e \ Ο e φ to - +1 +1 +1 φ Ό 3^ ^ •Γ-, 3 w <r n m 3 3 <Γ CM η -Ρ m m n rn σ' •Η ·Η Ο <Τ \0 Ο > eCd ------------- C · Η φ> W et! __ H Cd ^ ^ <- * ^ ε ε, m ό o £ Ο Ή rH Ή Π Η Ξ <- * Ή e \ Ο e φ to - +1 +1 +1 φ Ό 3 ^ ^ • Γ-, 3 w <rnm 3 3 <Γ CM η -Ρ mmn rn σ '• Η · Η Ο <Τ \ 0 Ο> e
rH ·Η CrH · Η C
3 ·Η < ε -ρ •Η ϋ-- Ρ cd η φ Sh > <α Ο Η Φ <Γ ο <Γ 2 „ m CO LH in * < c σχ n 3 e ρ Ί +· +· +· < u « £ o S; ^ M 5 O =0 o *" 5? t\i in h •r-a p> · __ cd · · · tH e VO W rH O 1 · ·· O K 00 < ·Η X P C -H n cm Ρ- cd ·Η σχ σχ >-3 · Η <ε -ρ • Η ϋ-- Ρ cd η φ Sh> <α Ο Η Φ <Γ ο <Γ 2 „m CO LH in * <c σχ n 3 e ρ Ί + · + · + · < u «£ o S; ^ M 5 O = 0 o * "5? T \ i in h • ra p> · __ cd · · · tH e VO W rH O 1 · ·· OK 00 <· Η XPC -H n cm Ρ- cd · Η σχ σχ> -
cd · rH cm n Ocd · rH cm n O
φ £ ·*- H rH rH rH Oφ £ · * - H rH rH rH O
3 tr ~ · O3 tr ~ · O
P O Cd Q. tr -M +1 +1 3 ti J · p 3siwcoo C <r r— <r •H e o noo cd cd cd C Ui o cm co > tr ·<-ϊ ·η n in I P tr o i ή ad tr M tr adPO Cd Q. tr -M +1 +1 3 ti J · p 3siwcoo C <rr— <r • H eo noo cd cd cd C Ui o cm co> tr · <-ϊ · η n in IP tr oi ή ad tr M tr ad
ρ O O E •HP ε -Hρ O O E • HP ε -H
> M 3 ϋ -H> M 3 ϋ -H
cd 3 co = C rH Ρ Φ <0 -H ^ C rH = t0 *H S ^ 3 Λ \ bo \ r- tO 3 C m 3 \ S\cd 3 co = C rH Ρ Φ <0 -H ^ C rH = t0 * H S ^ 3 Λ \ bo \ r- tO 3 C m 3 \ S \
® ^ >. <M® ^>. <M
C m ° C -H ™ Φ ”2 «a: <a: e Φ r- x = o bO x a. o O P >1C m ° C -H ™ Φ ”2« a: <a: e Φ r- x = o bO x a. O O P> 1
S rHS rH
Taulukko VITable VI
22 8025922 80259
Yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden 24 tunnin akuutti toksisuus24-hour acute toxicity of compounds of general formula I.
Esim. R2 r! ΙΌ50 mg/kg i.p.Eg R2 r! ΙΌ50 mg / kg i.p.
n:o p.o.n: o p.o.
9 H propyyli 28001260 20 H butyyli 27001310 19 H i-propyyli 22601210 21 H i-amyyli 22601241 12 H 2-kloorietyyli 11201140 22 H 2-bromietyyli 10501280 13 H l-kloori-2-OH-pro- pyyli 12401160 14 H 3-klooripropyyli 12101180 23 H 3-bromipropyyli 9801640 15 H 2-hydroksietyyli 32801460 16801210 24 H 1-oksipropyyli 28601180 10 H allyyli 23801320 320130 38 H metallyyli 16401210 17 metyyli allyyli 600154 7516,3 29 etyyli allyyli 780162 8417,6 18 isopropyyli allyyli 280126 3214 39 allyyli allyyli 380141 36149 H propyl 28001260 20 H butyl 27001310 19 H i-propyl 22601210 21 H i-amyl 22601241 12 H 2-chloroethyl 11201140 22 H 2-bromoethyl 10501280 13 H 1-chloro-2-OH-propyl 12401160 14 H 3- chloropropyl 12101180 23 H 3-bromopropyl 9801640 15 H 2-hydroxyethyl 32801460 16801210 24 H 1-oxypropyl 28601180 10 H allyl 23801320 320130 38 H methallyl 16401210 17 methyl allyl 600154 7516.3 29 ethyl allyl 780162 8417 ethyl allyl 780162 8417 allyl allyl 380141 3614
Taulukko VIITable VII
23 8025923 80259
Testiyhdiste antituumori- immunostimu- toksinen esim. n:o vaikutus lanttinen vaik. vaikutus 9 keskisuuri keskisuuri 0 20 keskisuuri keskisuuri 0 19 keskisuuri keskisuuri 0 21 keskisuuri keskisuuri 0 12 vahva heikko 0 22 vahva heikko 0 13 vahva heikko 0 14 vahva heikko 0 23 vahva heikko 0 15 keskisuuri vahva 0 24 keskisuuri keskisuuri 0 10 vahva vahva 0 38 keskisuuri keskisuuri 0 17 vahva heikko 0 29 keskisuuri keskisuuri 0 18 vahva heikko 0 39 vahva heikko 0 24 80259Test compound antitumor immunostimulatory e.g. no effect lantern res. Impact 9 Medium Medium 0 20 Medium Medium 0 19 Medium Medium 0 21 Medium Medium 0 12 Strong Weak 0 22 Strong Weak 0 13 Strong Weak 0 14 Strong Weak 0 23 Strong Weak 0 15 Medium Strong 0 24 Medium Medium 0 10 Strong Strong 0 38 medium medium 0 17 strong weak 0 29 medium medium 0 18 strong weak 0 39 strong weak 0 24 80259
Farmaseuttiset koostumukset voidaan valmistaa sinänsä farmaseuttisessa teollisuudessa tunnetuilla menetelmillä. Yleisen kaavan I mukaiset aktiiviset aineosat voidaan viimeistellä kapselien muodossa, joihin on sekoitettu tavanomaisia yleisesti käytettyjä apuaineita (liukuaineita jne.); kapselit voidaan valmistaa käyttämällä automaattisia kapselointiko-neita. Farmaseuttiset valmisteet voidaan valmistaa myös jau-heampullien muodossa, injektioita ja infuusioita varten pa-renteraalisina koostumuksina; nämä koostumukset voidaan valmistaa myös sinänsä tunnetuilla menetelmillä. Liuottimena voidaan käyttää tislattua vettä tai fysiologista suolaliuosta.The pharmaceutical compositions may be prepared by methods known per se in the pharmaceutical industry. The active ingredients of the general formula I can be finished in the form of capsules mixed with customary excipients commonly used (lubricants, etc.); capsules can be prepared using automatic encapsulation machines. The pharmaceutical preparations can also be prepared in the form of powder ampoules, parenteral compositions for injections and infusions; these compositions may also be prepared by methods known per se. Distilled water or physiological saline can be used as a solvent.
Yleisen kaavan I mukaiset aktiiviset aineosat voidaan viimeistellä myös voiteen muodossa, etenkin lyofiilisinä voiteina. Yleisen kavan I mukaiset aktiiviset aineosat, jotka tuoksuvat voimakkaasti, voidaan viimeistellä mieluummin mik-rokapseloinnin avulla, esim. muodostamalla syklodekstriiniin sisällytettyjä komplekseja.The active ingredients of the general formula I can also be finished in the form of an ointment, in particular as lyophilic ointments. The highly fragrant active ingredients of the general formula I can preferably be finished by microencapsulation, e.g. by forming complexes incorporated in the cyclodextrin.
Farmaseuttiset koostumukset voivat sisältää myös yleisen kaavan I mukaisen yhdisteen lisäksi yhtä tai useampaa tunnettua biologisesti aktiivista ainetta aktiivisena aineosana.The pharmaceutical compositions may also contain, in addition to the compound of general formula I, one or more known biologically active substances as active ingredient.
Farmaseuttisia koostumuksia voidaan käyttää sekä ihmisten että eläinten terapiassa. Käytettäessä immunostimulanttina oraalinen tai rektaalinen annos voi olla mieluummin noin 0,5 - 25 mg/kg. Paikalliseen käsittelyyn käytetään mieluummin suurempia annoksia.The pharmaceutical compositions can be used in both human and animal therapy. When used as an immunostimulant, the oral or rectal dose may preferably be about 0.5 to 25 mg / kg. Higher doses are preferred for topical treatment.
Teollinen soveltuvuus:Industrial suitability:
Keksinnön koskee etupäässä uusia yhdisteitä, joilla on antituumori- ja immunostimulanttinen vaikutus.The invention relates primarily to novel compounds having antitumor and immunostimulatory activity.
Tämän keksinnön muita yksityiskohtia on esitetty seuraavissa esimerkeissä rajoittamatta suojan piiriä esimerkkeihin.Other details of the present invention are set forth in the following examples without limiting the scope of the protection to the examples.
11 25 80259 Lähtöaineet Esimerkki 1 N-aminoiminometyylitiourea-karbonaatti 84,0 g (1,0 moolia) disyaanidlamldla ja 300 ml vettä laitetaan autoklaaviin. Suljettuun autoklaaviin johdetaan 34,0 g (1 moolia) kaasumaista vetysulfidia seuraavalla tavalla: 20eC:n lämpötilassa johdetaan niin paljon vetysulfidikaasua, että paine autoklaavissa on 1,5 baaria. Kaasun johtaminen lopetetaan ja autoklaavi lämmitetään hitaasti 80*C:seen. Tällä välin kaasumaista vetysulfidia johdetaan sellaisella nopeudella, että autoklaavissa tulisi olla vakiosuuruinen 1,5 baarin paine. Sen jälkeen kun koko vetysulfidikaasumäärä on johdettu autoklaaviin, autoklaavi pidetään 80*C:ssa, kunnes paine laskee 0,3...0,4 baariin. Reaktioseos jäähdytetään 20eC:seen, huuhdellaan typellä ja suodatetaan. Kirkas suodos jäähdytetään 0eC:seen ja hiilidioksidikaasua lasketaan sisään. Saostunut valkoinen kiteinen N-(aminoiminometyyli)-tiourea-karbonaatti suodatetaan pois, pestään vedellä ja kuivataan 60-80°C:ssa. Näin saadaan 100 g haluttua yhdistettä, saanto 67 %, sp. 127...129aC.11 25 80259 Starting materials Example 1 N-aminoiminomethylthiourea carbonate 84.0 g (1.0 mol) of dicyanidyldl and 300 ml of water are placed in an autoclave. 34.0 g (1 mole) of gaseous hydrogen sulphide are introduced into the closed autoclave as follows: At a temperature of 20 ° C, enough hydrogen sulphide gas is introduced so that the pressure in the autoclave is 1,5 bar. The gas conduction is stopped and the autoclave is slowly heated to 80 ° C. Meanwhile, gaseous hydrogen sulfide is passed at such a rate that the autoclave should have a constant pressure of 1.5 bar. After the entire amount of hydrogen sulphide gas has been introduced into the autoclave, the autoclave is kept at 80 ° C until the pressure drops to 0.3 ... 0.4 bar. The reaction mixture is cooled to 20 ° C, purged with nitrogen and filtered. The clear filtrate is cooled to 0 ° C and carbon dioxide gas is introduced. The precipitated white crystalline N- (aminoiminomethyl) thiourea carbonate is filtered off, washed with water and dried at 60-80 ° C. Thus 100 g of the desired compound are obtained, yield 67%, m.p. 127 ... 129aC.
Näin saadun tuotteen IR-spektriä verrataan yhdisteen vakio-näytteen iR-spektriin.The IR spectrum of the product thus obtained is compared with the iR spectrum of a standard sample of the compound.
Esimerkki 2 N-aminoiminometyyli-N'-metyylitiourea-karbonaattiExample 2 N-aminoiminomethyl N'-methylthiourea carbonate
Liuokseen, jossa on 5,9 g (0,1 moolia) guanidiiniemästä ja 30 ml asetonia, lisätään liuos, jossa on 7,3 g (0,1 moolia) metyyli-isotiosyanaattia 10 ml:ssa asetonia. Isotiosyanaat-ti-liuos lisätään sellaisella nopeudella guanidiini-liuok-seen, että seoksen lämpötila ei pääse nousemaan yli 40*C. Reaktioseoksen annetaan seistä 40°C:ssa 4 tunnin ajan, minkä jälkeen liuotin poistetaan tyhjössä. Jäljelle jäävä vaaleankeltainen öljy suspendoidaan veteen, jolloin saadaan opaakki liuos. Hiilidioksidikaasua johdetaan näin saatuun liuokseen ja haluttu yhdiste saostuu valkoisten kiteiden muodossa. Saanto: 12,0 g (73,5 %). Sp.: 132...134*C.To a solution of 5.9 g (0.1 mol) of guanidine base and 30 ml of acetone is added a solution of 7.3 g (0.1 mol) of methyl isothiocyanate in 10 ml of acetone. The isothiocyanate solution is added to the guanidine solution at such a rate that the temperature of the mixture does not rise above 40 ° C. The reaction mixture is allowed to stand at 40 ° C for 4 hours, after which the solvent is removed in vacuo. The remaining pale yellow oil is suspended in water to give an opaque solution. Carbon dioxide gas is introduced into the solution thus obtained and the desired compound precipitates in the form of white crystals. Yield: 12.0 g (73.5%). M.p .: 132 ... 134 ° C.
Esimerkit 3-8 26 80259Examples 3-8 26 80259
Vastaavalla tavalla kuin esimerkissä 2 voidaan valmistaa seuraavat yhdisteet: 3. N-aminoiminometyyli-N'-etyylitiourea-karbonaatti, 4. N-aminoiminometyyli-N'-n-propyylitiourea-karbonaatti, 5. N-aminoiminometyyli-N'-isopropyylitiourea-karbonaatti, 6. N-aminoiminometyyli-N'-n-butyylitiourea-karbonaatti, 7. N-aminoiminometyyli-N'-allyylitiourea-karbonaatti, 8. N-aminoiminometyyli-N'-sykloheksyylitiourea-karbonaatti.In a manner similar to Example 2, the following compounds can be prepared: 3. N-aminoiminomethyl-N'-ethylthiourea carbonate, 4. N-aminoiminomethyl-N'-n-propylthiourea carbonate, 5. N-aminoiminomethyl-N'-isopropylthiourea carbonate , 6. N-aminoiminomethyl-N'-n-butylthiourea carbonate, 7. N-aminoiminomethyl-N'-allylthiourea carbonate, 8. N-aminoiminomethyl-N'-cyclohexylthiourea carbonate.
Seuraavissa esimerkeissä selitetään yleisen kaavan I mukaisten lopputuotteiden valmistusta.The following examples explain the preparation of the final products of general formula I.
Esimerkki 9 N-aminoiminometyyli-S-n-propyyli-isotiuronium-bromidi 14.9 g (0,05 moolia) N-aminoiminometyylitiourea-karbonaattia suspendoidaan 50 ml:aan vedetöntä etanolia. Suspensioon lisätään 14,8 g (0,12 moolia) n-propyyli-bromidia. Reaktioseos kuumennetaan hitaasti kiehumaan sekoittaen samalla, jolloin kehittyy hiilidioksidia. Reaktioseos kuumennetaan kiehumaan 45 minuutin kuluessa ja jäähdytetään huoneenlämpötilaan.Example 9 N-Aminoiminomethyl-S-n-propylisothiuronium bromide 14.9 g (0.05 mol) of N-aminoiminomethylthiourea carbonate are suspended in 50 ml of anhydrous ethanol. 14.8 g (0.12 mol) of n-propyl bromide are added to the suspension. The reaction mixture is slowly heated to boiling with stirring while evolving carbon dioxide. The reaction mixture is heated to reflux for 45 minutes and cooled to room temperature.
Seos suodatetaan mahdollisesti saostuneen aineen poistamiseksi. Kirkas suodos haihdutetaan tyhjössä ja öljyinen jäännös kiteytetään etyyliasetaatista. Valkoiset kiteet suodatetaan ja kuivataan 40...50eC:ssa. Näin saadaan 19,5 g haluttua yhdistettä, saanto 81 %, sp.: 122...124*C.The mixture is filtered to remove any precipitated material. The clear filtrate is evaporated in vacuo and the oily residue is crystallized from ethyl acetate. The white crystals are filtered off and dried at 40-50 ° C. 19.5 g of the desired compound are thus obtained, yield 81%, m.p .: 122-124 ° C.
Esimerkki 10 N-aminoiminometyyli-S-allyyli-isotiuronium-bromidi 14.9 g (0,05 moolia) N-aminoiminometyylitiourea-karbonaat-tia lisätään 50 ml:aan vedetöntä etanolia. Näin saatuun suspensioon lisätään 14,5 g (0,12 moolia) allyylibromidia. Reaktioseos kuumennetaan kiehumaan sekoittaen samalla voimakkaasti. Reaktioseosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 30 minuutin ajan ja jäähdytetään huoneenlämpötilaan. Seos suodatetaan mahdollisesti saostuneen aineen poistamiseksi. Suo- ti 27 80259 dos haihdutetaan tyhjössä ja öljyinen jäännös kiteytetään etyyliasetaatista. Saostuneet kiteet suodatetaan ja kuivataan 40...50°C:ssa. Näin saadaan 19,6 g haluttua yhdistettä, saanto 82 %, sp.: 123...125°C.Example 10 N-Aminoiminomethyl-S-allyl-isothiuronium bromide 14.9 g (0.05 mol) of N-aminoiminomethylthiourea carbonate are added to 50 ml of anhydrous ethanol. To the suspension thus obtained is added 14.5 g (0.12 mol) of allyl bromide. The reaction mixture is heated to boiling while stirring vigorously. The reaction mixture is heated to reflux for 30 minutes and cooled to room temperature. The mixture is filtered to remove any precipitated material. Filter 27 80259 dos are evaporated in vacuo and the oily residue is crystallized from ethyl acetate. The precipitated crystals are filtered off and dried at 40-50 ° C. 19.6 g of the desired compound are thus obtained, yield 82%, m.p .: 123-125 ° C.
Esimerkki 11 N-aminoiminometyyli-S-allyyli-isotiuronium-kloridi 14.9 g (0,05 moolia) N-aminoiminometyylitiourea-karbonaattia lisätään 50 ml:aan vedetöntä etanolia. Näin saatuun suspensioon lisätään 9,18 g (0,12 moolia) allyylikloridia ja reaktioseos kuumennetaan hitaasti kiehumaan sekoittaen samalla voimakkaasti. Reaktioseosta kuumennetaan palautusjääh-dyttäen tunnin ajan ja jäähdytetään huoneenlämpötilaan. Seos suodatetaan mahdollisesti saostuneen aineen poistamiseksi. Suodos haihdutetaan tyhjössä. Öljyinen jäännös kiteytetään etyyliasetaatista. Saostuneet kiteet suodatetaan ja kuivataan 40...50°C:ssa. Näin saadaan 15,7 g haluttua yhdistettä, saanto 81 %, sp.: 125...127eC.Example 11 N-Aminoiminomethyl-S-allyl-isothiuronium chloride 14.9 g (0.05 mol) of N-aminoiminomethylthiourea carbonate are added to 50 ml of anhydrous ethanol. To the suspension thus obtained, 9.18 g (0.12 mol) of allyl chloride are added and the reaction mixture is slowly heated to boiling while stirring vigorously. The reaction mixture is heated to reflux for one hour and cooled to room temperature. The mixture is filtered to remove any precipitated material. The filtrate is evaporated in vacuo. The oily residue is crystallized from ethyl acetate. The precipitated crystals are filtered off and dried at 40-50 ° C. 15.7 g of the desired compound are thus obtained, yield 81%, m.p .: 125-127 ° C.
2929
Esimerkki 12 N-aminoiminometyyli-S-(2-kloorietyyli)isotiuronium-bromidi 14.9 g (0,05 moolia) N-aminoiminometyylitiourea-karbonaattia lisätään 50 ml:aan vedetöntä etanolia. Näin saatuun suspensioon lisätään 17,2 g (0,12 moolia) l-bromi-2-kloorietaania ja reaktioseos kuumennetaan kiehumaan sekoittaen samalla voimakkaasti. Reaktioseosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen ja jäähdytetään huoneenlämpötilaan. Seos suodatetaan mahdollisesti saostuneen aineen poistamiseksi. Kirkas suodos haihdutetaan tyhjössä. Öljyinen jäännös kiteytetään etyyliasetaatista. Saostuneet valkoiset kiteet suodatetaan ja kuivataan 40...50*C:ssa. Näin saadaan 17,2 g haluttua yhdistettä, saanto 66 %, sp.: 142...143°C.Example 12 N-Aminoiminomethyl-S- (2-chloroethyl) isothiuronium bromide 14.9 g (0.05 mol) of N-aminoiminomethylthiourea carbonate are added to 50 ml of anhydrous ethanol. To the suspension thus obtained, 17.2 g (0.12 mol) of 1-bromo-2-chloroethane are added and the reaction mixture is heated to boiling while stirring vigorously. The reaction mixture is heated to reflux and cooled to room temperature. The mixture is filtered to remove any precipitated material. The clear filtrate is evaporated in vacuo. The oily residue is crystallized from ethyl acetate. The precipitated white crystals are filtered off and dried at 40-50 ° C. 17.2 g of the desired compound are thus obtained, yield 66%, m.p .: 142-143 ° C.
28 8025928 80259
Esimerkki 13 N-aminoiminometyyli-S-(l-kloori-2-hydroksipropyyli)iso-tluronium-bromidi 14.9 g (0,05 moolia) N-aminoiminometyylitiourea-karbonaattia lisätään 50 ml:aan vedetöntä etanolia. Näin saatuun suspensioon lisätään 20,8 g (0,12 moolia) l-bromi-2-hydroksi-3-klooripropaania. Reaktioseos kuumennetaan hitaasti kiehumaan sekoittaen samalla voimakkaasti. Reaktioseosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 90 minuutin ajan ja jäähdytetään huoneenlämpötilaan. Seos suodatetaan mahdollisesti saostuneen aineen poistamiseksi. Kirkas suodos haihdutetaan tyhjössä. Öljyinen jäännös kiteytetään etyyliasetaatista. Saostuneet hieman kermanväriset kiteet suodatetaan ja kuivataan 40... 50eC:ssa. Näin saadaan 17,8 g haluttua yhdistettä, saanto 61 %, Sp.: 118...119®C.Example 13 N-Aminoiminomethyl-S- (1-chloro-2-hydroxypropyl) iso-fluoronium bromide 14.9 g (0.05 mol) of N-aminoiminomethylthiourea carbonate are added to 50 ml of anhydrous ethanol. To the suspension thus obtained is added 20.8 g (0.12 mol) of 1-bromo-2-hydroxy-3-chloropropane. The reaction mixture is slowly heated to boiling while stirring vigorously. The reaction mixture is heated to reflux for 90 minutes and cooled to room temperature. The mixture is filtered to remove any precipitated material. The clear filtrate is evaporated in vacuo. The oily residue is crystallized from ethyl acetate. The precipitated slightly cream-colored crystals are filtered off and dried at 40-50 ° C. 17.8 g of the desired compound are thus obtained, yield 61%, m.p .: 118-119 ° C.
Esimerkki 14 N-aminoiminometyyli-S-(3-klooripropyyli)isotiuronium-bromidi 14.9 g (0,05 moolia) N-aminoiminometyylitlourea-karbonaattia lisätään 80 ml:aan asetonitriiliä. Näin saatuun suspensioon lisätään 18,9 g (0,12 moolia) l-bromi-3-kloori-propaania ja reaktioseos kuumennetaan hitaasti kiehumaan sekoittaen samalla voimakkaasti. Reaktioseosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 90 minuutin ajan, kiinteä aine poistetaan suodattamalla kuuma reaktioseos ja suodoksen annetaan jäähtyä huoneenlämpötilaan. Saostuneet valkoiset kiteet suodatetaan ja kuivataan 40...50*C:ssa. Näin saadaan 17,3 g haluttua yhdistettä, saanto 65 %, sp.: 129...131eC.Example 14 N-Aminoiminomethyl-S- (3-chloropropyl) isothiuronium bromide 14.9 g (0.05 mol) of N-aminoiminomethyllourea carbonate are added to 80 ml of acetonitrile. To the suspension thus obtained, 18.9 g (0.12 mol) of 1-bromo-3-chloropropane are added and the reaction mixture is slowly heated to boiling while stirring vigorously. The reaction mixture is heated to reflux for 90 minutes, the solid is removed by filtration of the hot reaction mixture and the filtrate is allowed to cool to room temperature. The precipitated white crystals are filtered off and dried at 40-50 ° C. 17.3 g of the desired compound are thus obtained, yield 65%, m.p .: 129-131 ° C.
Esimerkki 15 N-aminoiminometyyli-S-(2-hydroksietyyli)isotiuronium-kloridi 14.9 g (0,05 moolia) N-aminoiminometyylitiourea-karbonaattia lisätään 50 ml:aan vedetöntä etanolia. Näin saatuun suspensioon lisätään 9,7 g (0,12 moolia) etyleenikloorihydriiniä ja reaktioseos kuumennetaan hitaasti kiehumaan sekoittaen samalla voimakkaasti. Reaktioseosta kuumennetaan palautus- 11 29 802 59 jäähdyttäen 90 minuutin ajan ja jäähdytetään huoneenlämpö-tilaan. Seos suodatetaan mahdollisesti saostuneen aineen poistamiseksi ja kirkas suodos haihdutetaan tyhjössä. Öljyinen jäännös kiteytetään etyyliasetaatista. Kiteet suodatetaan ja kuivataan 40...50*C:ssa. Näin saadaan 13,5 g haluttua yhdistettä, saanto 68 %, sp.: 134...136eC.Example 15 N-Aminoiminomethyl S- (2-hydroxyethyl) isothiuronium chloride 14.9 g (0.05 mol) of N-aminoiminomethylthiourea carbonate are added to 50 ml of anhydrous ethanol. To the suspension thus obtained is added 9.7 g (0.12 mol) of ethylene chlorohydrin and the reaction mixture is slowly heated to boiling while stirring vigorously. The reaction mixture is heated to reflux for 90 minutes and cooled to room temperature. The mixture is filtered to remove any precipitate and the clear filtrate is evaporated in vacuo. The oily residue is crystallized from ethyl acetate. The crystals are filtered off and dried at 40-50 ° C. 13.5 g of the desired compound are thus obtained, yield 68%, m.p .: 134-136 ° C.
Esimerkki 16Example 16
Esimerkkien 9-15 mukaisesti valmistetut isotiuronium-suo-lat voidaan haluttaessa kiteyttää uudelleen seuraavalla tavalla. Menetelmää selostetaan käyttämällä N-aminoiminome-tyyli-S-allyyli-isotiuronium-kloridia.If desired, the isothuronium salts prepared according to Examples 9-15 can be recrystallized as follows. The method is described using N-aminoiminomethyl-S-allyl-isothiuronium chloride.
10 g N-aminoiminometyyli-S-allyyli-isotiuronium-kloridia lisätään 60 ml:aan etanolin ja metanolin 5:l-seosta. Pieni määrä liukenemattomia kiteitä poistetaan suodattamalla kuuma seos. Suodos selkeytetään tarvittaessa aktivoidulla hiilellä. Kirkkaan suodoksen annetaan jäähtyä huoneenlämpötilaan, jolloin saostuu valkoisia kiteitä. Seos jäähdytetään 0...5*C:seen, sen annetaan seistä tässä lämpötilassa tunnin ajan ja suodatetaan. Kiteet pestään jääkylmällä etanolilla ja kuivataan 40...50eC:ssa. Näin saadaan 8,1 g haluttua yhdistettä, saanto 81 %.10 g of N-aminoiminomethyl-S-allyl-isothiuronium chloride are added to 60 ml of a 5: 1 mixture of ethanol and methanol. A small amount of insoluble crystals are removed by filtration of the hot mixture. If necessary, the filtrate is clarified with activated carbon. The clear filtrate is allowed to cool to room temperature, whereupon white crystals precipitate. The mixture is cooled to 0-5 ° C, allowed to stand at this temperature for one hour and filtered. The crystals are washed with ice-cold ethanol and dried at 40-50 ° C. 8.1 g of the desired compound are thus obtained, yield 81%.
Esimerkki 17 N-aminoiminometyyli-N’-metyyli-S-allyyli-isotiuronium-kloridi 16,3 g (0,05 moolia) esimerkin 2 mukaisesti valmistettua N-aminoiminometyyli-N'-metyylitiourea-karbonaattia lisätään 50 ml:aan vedetöntä etanolia. Näin saatuun suspensioon lisätään 9,18 g (0,12 moolia) allyylikloridia ja reaktioseos kuumennetaan kiehumaan sekoittaen samalla voimakkaasti. Reaktioseosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen tunnin ajan ja jäähdytetään huoneenlämpötilaan. Seos suodatetaan mahdollisesti saostuneen aineen poistamiseksi. Kirkas suodos haihdutetaan tyhjössä. Öljyinen jäännös kiteytetään etyyliasetaatista. Valkoiset kiteet suodatetaan ja kuivataanExample 17 N-Aminoiminomethyl-N'-methyl-S-allyl-isothiuronium chloride 16.3 g (0.05 mol) of N-aminoiminomethyl-N'-methylthiourea carbonate prepared according to Example 2 are added to 50 ml of anhydrous ethanol. To the suspension thus obtained, 9.18 g (0.12 mol) of allyl chloride are added and the reaction mixture is heated to boiling while stirring vigorously. The reaction mixture is heated to reflux for one hour and cooled to room temperature. The mixture is filtered to remove any precipitated material. The clear filtrate is evaporated in vacuo. The oily residue is crystallized from ethyl acetate. The white crystals are filtered off and dried
Jo 80259 40...50"C:ssa. Näin saadaan 13,6 g haluttua yhdistettä, saanto 61 %, sp.: 137...139eC.Already 80259 at 40-50 ° C. 13.6 g of the desired compound are obtained, yield 61%, m.p .: 137-139 ° C.
Esimerkki 18 N-aminoiminometyyli-N'-isopropyyli-S-allyyli-isotiuronium-kloridi 19,1 g (0,05 moolia) N-aminoiminometyyli-N'-isopropyyli-tiourea-karbonaattia (valmistettu esimerkin 5 mukaisesti) lisätään 50 ml:aan vedetöntä etanolia. Näin saatuun suspensioon lisätään 9,18 g (0,12 moolia) allyylikloridia ja reak-tioseos kuumennetaan kiehumaan sekoittaen samalla voimakkaasti. Reaktioseosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen tunnin ajan ja jäähdytetään huoneenlämpötilaan. Seos suodatetaan mahdollisesti saostuneen aineen poistamiseksi. Kirkas suodos haihdutetaan tyhjössä ja öljyinen jäännös kiteytetään etyyliasetaatista. Saostuneet valkoiset kiteet suodatetaan ja kuivataan 40...50eC:ssa. Näin saadaan 13,3 g haluttua yhdistettä, saanto 56 %, sp.: 134...135°C.Example 18 N-Aminoiminomethyl-N'-isopropyl-S-allyl-isothiuronium chloride 19.1 g (0.05 mol) of N-aminoiminomethyl-N'-isopropyl-thiourea carbonate (prepared according to Example 5) are added in 50 ml: anhydrous ethanol. To the suspension thus obtained, 9.18 g (0.12 mol) of allyl chloride are added and the reaction mixture is heated to boiling while stirring vigorously. The reaction mixture is heated to reflux for one hour and cooled to room temperature. The mixture is filtered to remove any precipitated material. The clear filtrate is evaporated in vacuo and the oily residue is crystallized from ethyl acetate. The precipitated white crystals are filtered off and dried at 40-50 ° C. 13.3 g of the desired compound are thus obtained, yield 56%, m.p .: 134-135 ° C.
Esimerkit 19 - 26Examples 19 to 26
Vastaavalla tavalla kuin esimerkissä 11 valmistetaan seuraa-vat yleisen kaavan I mukaiset isotiuronium-yhdisteet: 19. N-aminoiminometyyli-S-isopropyyli-isotiuronium-bromidi, sp.: 120...122eC; 20. N-aminoiminometyyli-S-n-butyyli-isotiuronium-bromidi, sp.: 116...118 eC; 21. N-aminoiminometyyli-S-isoamyyli-isotiuronium-bromidi, sp.: 111. . .H3eC; 22. N-aminoiminometyyli-S-(2-bromietyyli)isotiuronium-bromidi, sp.: 129...131°C; 23. N-aminoiminometyyli-S-(3-bromipropyyli)isotiuronium-bromidi, sp.: 127...129*C; 24. N-aminoiminometyyli-S-(3-hydroksipropyyli)isotiuronium-bromidi, sp.: 132...135eC; 25. N-aminoiminometyyli-S-(3-merkaptopropyyli)isotiuronium-bromidi, sp.: 141...142*C;In a manner analogous to Example 11, the following isothiuronium compounds of general formula I are prepared: 19. N-aminoiminomethyl-5-isopropyl-isothiuronium bromide, m.p .: 120-122 ° C; 20. N-aminoiminomethyl-S-n-butylisothiuronium bromide, m.p .: 116-118 ° C; 21. N-aminoiminomethyl-S-isoamyl-isothiuronium bromide, m.p .: 111.. .H3eC; 22. N-aminoiminomethyl-S- (2-bromoethyl) isothiuronium bromide, m.p .: 129-131 ° C; 23. N-aminoiminomethyl-S- (3-bromopropyl) isothiuronium bromide, m.p .: 127-129 ° C; 24. N-aminoiminomethyl-S- (3-hydroxypropyl) isothiuronium bromide, m.p .: 132-135 ° C; 25. N-aminoiminomethyl-S- (3-mercaptopropyl) isothiuronium bromide, m.p .: 141-142 ° C;
IIII
3i 80259 26. N-aminoiminometyyli-S-propargyyli-isotiuronium-bromidi, sp.: 131...133 *C.3i 80259 26. N-aminoiminomethyl-S-propargyl-isothiuronium bromide, m.p .: 131-133 ° C.
Esimerkit 27 - 34Examples 27 to 34
Vastaavalla tavalla kuin esimerkissä 18 valmistetaan seuraa-vat yhdisteet: 27. N-aminoiminometyyli-N'-metyyli-S-(2-hydroksietyyli)iso-tiuronium-bromidi, sp.: 147...148*C; 28. N-aminoiminometyyli-N'-etyyli-S-(2-kloorietyyli)iso-tiuronium-bromidi, sp.: 143...144*C; 29. N-aminoiminometyyli-N'-etyyli-S-allyyli-isotiuronium-kloridi, sp.: 138...139eC; 30. N-aminoiminometyyli-N'-isopropyyli-S-(3-klooripropyyli)-isotiuronium-bromidi, sp.: 140...142*C; 31. N-aminoiminometyyli-N'-isopropyyli-S-metallyyli-iso-tiuronium-kloridi, sp.: 138...139*C; 32. N-aminoiminometyyli-N'-sykloheksyyli-S-n-propyyli-iso-tiuronium-bromidi, sp.: 133...135*C; 33. N-aminoiminometyyli-N'-sykloheksyyli-S-metallyyli-iso-tiuronium-kloridi, sp.: 130...132*C; 34. N-aminoiminometyyli-N'-sykloheksyyli-S-bentsyyli-iso-tiuronium-kloridi, sp.: 147...149eC.In a manner similar to Example 18, the following compounds are prepared: 27. N-aminoiminomethyl-N'-methyl-S- (2-hydroxyethyl) iso-thiuronium bromide, m.p .: 147-148 ° C; 28. N-aminoiminomethyl-N'-ethyl-S- (2-chloroethyl) iso-thiuronium bromide, m.p .: 143-144 ° C; 29. N-aminoiminomethyl-N'-ethyl-S-allyl-isothiuronium chloride, m.p .: 138-139 ° C; 30. N-aminoiminomethyl-N'-isopropyl-S- (3-chloropropyl) -isothiuronium bromide, m.p .: 140-142 ° C; 31. N-aminoiminomethyl-N'-isopropyl-S-methallyl-iso-thiuronium chloride, m.p .: 138-139 ° C; 32. N-aminoiminomethyl-N'-cyclohexyl-S-n-propyl-iso-thiuronium bromide, m.p .: 133-135 ° C; 33. N-aminoiminomethyl-N'-cyclohexyl-S-methallyl-iso-thiuronium chloride, m.p .: 130-132 ° C; 34. N-aminoiminomethyl-N'-cyclohexyl-S-benzyl-iso-thiuronium chloride, m.p .: 147-149 ° C.
Yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden sulamispisteet ja IR-spektrit on esitetty seuraavassa taulukossa VIII.The melting points and IR spectra of the compounds of general formula I are shown in Table VIII below.
Taulukko VIIITable VIII
32 80259 R2 R1 X Sp./"C luonteenomaiset IR- spektrin piikit H n-propyyli Br 122-124 3300, 3120, 2925, 2850, 1685, 1570, 730 H allyyli Br tai Cl 123-125 3290, 3260, 3160, 3105, 1640, 1605, 1550, 1375, 1090, 980, 910, 705, 650 H 2-kloorietyyli Br 142-143 3300, 3110, 2925, 1640, 920, 720 H l-kloori-2-hydr- Br 118-119 3300, 3110, 3000, oksipropyyli 2850, 1685, 1610, 720 H 3-klooripropyyli Br 129-131 3300, 3275, 3165, 3105, 2900, 2825, 1680, 695 H 2-hydroksietyyli Cl 134-136 3310, 3280, 3110, 3000, 2990, 1675, 1610 H isopropyyli Br 120-122 3300, 3120, 1680, 1380, 1365 H n-butyyli Br 116-118 3315, 3300, 3210, 3180, 2850, 1690, 1450 H isoamyyli Br 111-113 3305, 3300, 3205, 3175, 2960, 2845, 1695, 147032 80259 R2 R1 X Sp./"C characteristic IR spectral peaks H n-propyl Br 122-124 3300, 3120, 2925, 2850, 1685, 1570, 730 H allyl Br or Cl 123-125 3290, 3260, 3160, 3105, 1640, 1605, 1550, 1375, 1090, 980, 910, 705, 650 H 2-chloroethyl Br 142-143 3300, 3110, 2925, 1640, 920, 720 H 1-chloro-2-hydr-Br 118- 119 3300, 3110, 3000, oxypropyl 2850, 1685, 1610, 720 H 3-chloropropyl Br 129-131 3300, 3275, 3165, 3105, 2900, 2825, 1680, 695 H 2-hydroxyethyl Cl 134-136 3310, 3280, 3110, 3000, 2990, 1675, 1610 H isopropyl Br 120-122 3300, 3120, 1680, 1380, 1365 H n-butyl Br 116-118 3315, 3300, 3210, 3180, 2850, 1690, 1450 H isoamyl Br 111- 113 3305, 3300, 3205, 3175, 2960, 2845, 1695, 1470
IIII
Taulukko VIII jatkuu 33 80259 R2 R1 X Sp./eC luonteenomaiset IR- spektrin piikit H isopropyyli Br 120-122 3300, 3120, 1680, 1380, 1365 H n-butyyli Br 116-118 3315, 3300, 3210, 3180, 2850, 1690, 1450 H isoamyyli Br 111-113 3305, 3300, 3205, 3175, 2960, 2845, 1695, 1470 H 2-bromietyyli Br 129-131 3300, 3205, 2910, 1670, 1090, 715 H 3-bromipropyyli Br 127-129 3305, 3215, 2920, 1665 H 3-hydroksipro- Br 132-135 3590, 3300, 3220, pyyli 2925, 1680 H 3-merkaptopro- Br 141-142 3320, 3305, 3210, pyyli 3180, 2920, 2570, 1690 H propargyyli Br 131-133 3310, 3300, 3200, 2180, 1680 metyyli allyyli Cl 137-139 3305, 3290, 2960, 2690, 1640 metyyli 2-hydroksietyyli Br 147-148 3583, 3300, 3285, 1680, 1375, 1360 etyyli 2-kloorietyyli Br 143-144 3305, 3285, 2965, 1660, 765 etyyli allyyli Cl 138-139 3310, 3300, 3210, 3180, 1650, 990, 905Table VIII continued 33 80259 R2 R1 X Sp./eC characteristic IR spectral peaks H isopropyl Br 120-122 3300, 3120, 1680, 1380, 1365 H n-butyl Br 116-118 3315, 3300, 3210, 3180, 2850, 1690, 1450 H isoamyl Br 111-113 3305, 3300, 3205, 3175, 2960, 2845, 1695, 1470 H 2-bromoethyl Br 129-131 3300, 3205, 2910, 1670, 1090, 715 H 3-bromopropyl Br 127- 129 3305, 3215, 2920, 1665 H 3-hydroxypropro Br 132-135 3590, 3300, 3220, pill 2925, 1680 H 3-mercaptopro Br 141-142 3320, 3305, 3210, fill 3180, 2920, 2570, 1690 H propargyl Br 131-133 3310, 3300, 3200, 2180, 1680 methyl allyl Cl 137-139 3305, 3290, 2960, 2690, 1640 methyl 2-hydroxyethyl Br 147-148 3583, 3300, 3285, 1680, 1375, 1360 ethyl 2-chloroethyl Br 143-144 3305, 3285, 2965, 1660, 765 ethyl allyl Cl 138-139 3310, 3300, 3210, 3180, 1650, 990, 905
Taulukko VIII jatkuu 34 8 0 2 5 9 R2 R1 X Sp./eC luonteenomaiset IR- spektrin piikit isopro- allyyli Cl 134-135 3305, 3295, 3200, pyyli 3170, 1655, 985, 895 isopro- metallyyli Cl 138-139 3305, 3295, 3200, pyyli 3175, 1650, 890 isopro- 3-klooripropyyli Br 140-142 3320, 3300, 3195, pyyli 3160, 1690, 775 syklohek- n-propyyli Br 133-135 3320, 3300, 3210, syyli 3175, 2925 syklohek- metallyyli Cl 130-132 3315, 3300, 3215, syyli 3180, 885 syklohek- bentsyyli Cl 147-149 3300, 3275, 3120, syyli 3000, 1675, 1590, 750 I! 35 80259Table VIII continued 34 8 0 2 5 9 R2 R1 X Sp./eC characteristic IR spectral peaks isopropallyl Cl 134-135 3305, 3295, 3200, peak 3170, 1655, 985, 895 isopropomethyl Cl 138-139 3305 , 3295, 3200, ethyl 3175, 1650, 890 isoprop-3-chloropropyl Br 140-142 3320, 3300, 3195, ethyl 3160, 1690, 775 cyclohexn-propyl Br 133-135 3320, 3300, 3210, wil 3175, 2925 cyclohexamethyl Cl 130-132 3315, 3300, 3215, wedge 3180, 885 cyclohexbenzyl Cl 147-149 3300, 3275, 3120, wart 3000, 1675, 1590, 750 I! 35 80259
Esimerkki 35Example 35
Tablettien ja rakeiden valmistusManufacture of tablets and granules
Tabletit ja rakeet valmistetaan puristuskoneella, joka on varustettu automaattisella syöttölaitteella. Aktiivinen aineosa on edellä granuloitu sopivien apuaineiden kanssa kuiva- tai märkämenetelmän avulla. Jos valmistetaan märkiä rakeita, rakeet kuivataan mieluummin tyhjössä. Tablettien ja raeydinten valmistukseen käytetyt raket puristetaan sopivan metallivapaan seulan läpi. Rakeiden valmistamiseksi voidaan käyttää etenkin Pharmacopiean mukaista granule simplex-koostumusta tai jotain muuta sopivaa koostumusta. Valmistetaan tabletteja ja raeytimiä, jotka sisältävät 30 mg aktiivista aineosaa, johon on lisätty 70 mg apuainetta (esim. granulatum simplex).Tablets and granules are made on a compression machine equipped with an automatic feeder. The active ingredient is granulated above with suitable excipients by the dry or wet method. If wet granules are prepared, the granules are preferably dried under vacuum. The granules used to make tablets and granules are pressed through a suitable metal-free screen. In particular, a granule simplex composition according to the Pharmacopoeia or another suitable composition can be used to prepare the granules. Tablets and granules are prepared containing 30 mg of active ingredient to which 70 mg of excipient (e.g. granulatum simplex) has been added.
Esimerkki 36 Kapseleiden valmistusExample 36 Preparation of capsules
Mieluummin käytetään automaattisia täyttökoneita. Aktiivinen aineosa granuloidaan sopivien apuaineiden (esim. granulatum simplex) tai jonkin muun inertin lisäaineen kanssa. Rakeet saatetaan sopivaan hiukkaskokoon, seulotaan ja täytetään kapseleihin. Kapseleiden aktiivisen aineosan pitoisuus on 30 mg.I prefer to use automatic filling machines. The active ingredient is granulated with suitable excipients (e.g. granulatum simplex) or other inert excipient. The granules are brought to a suitable particle size, screened and filled into capsules. The active ingredient content of the capsules is 30 mg.
Esimerkki 37Example 37
Jauheampullien valmistusManufacture of powder ampoules
Mitään erillisiä apuaineita ei käytetä jauheampullien valmistuksessa. Jauheampullien aktiivisen aineosan pitoisuus on 10 ja vast. 20 mg. Liuosampullit sisältävät 1 tai 2 ml tislattua vettä tai vast, fysiologista suolaliuosta. On edullista laimentaa vähintään 100 ml:11a infuusioliuosta ja käyttää ampullien sisällöt suoraan liuottamisen jälkeen.No separate excipients are used in the manufacture of powder ampoules. The active ingredient content of the powder ampoules is 10 and 20 mg. Ampoules for solution contain 1 or 2 ml of distilled water or physiological saline. It is preferred to dilute at least 100 ml of solution for infusion and use the contents of the ampoules immediately after reconstitution.
36 8025936 80259
Esimerkki 38 N-(aminoiminometyyli)-S-metallyyli-isotiuronium-bromidi 14,9 g N-aminoiminometyyli-tiourea-karbonaattia suspendoi-daan 50 ml:aan abs. etanolia. Lisätään 16,1 g metallyyli-bromidia ja reaktioseosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 30 minuutin ajan. Suodattamisen jälkeen liuotin tislataan pois tyhjössä. Saadaan 21 g hunajamaista tuotetta, joka kiteytyy seistessään.Example 38 N- (Aminoiminomethyl) -5-methallyl-isothiuronium bromide 14.9 g of N-aminoiminomethyl-thiourea carbonate are suspended in 50 ml of abs. ethanol. 16.1 g of methallyl bromide are added and the reaction mixture is heated to reflux for 30 minutes. After filtration, the solvent is distilled off in vacuo. 21 g of a honey-like product are obtained, which crystallizes on standing.
Esimerkki 39 N-(aminoiminometyyli)-N'-allyyli-S-allyyli-isotiuronium-bromidi 17,6 g N-(aminoiminometyyli)-N'-allyyli-tiourea-karbonaattia suspendoidaan 50 ml:aan vedetöntä etanolia. Lisätään 14,5 g allyyli-bromidia ja reaktioseosta kuumennetaan palautusjääh-dyttäen sekoittaen samalla voimakkaasti tunnin ajan, minkä jälkeen seos suodatetaan ja liuotin tislataan pois tyhjössä. Saadaan 23 g öljyistä viskoosia tuotetta.Example 39 N- (Aminoiminomethyl) -N'-allyl-S-allyl-isothiuronium bromide 17.6 g of N- (aminoiminomethyl) -N'-allyl-thiourea carbonate are suspended in 50 ml of anhydrous ethanol. 14.5 g of allyl bromide are added and the reaction mixture is heated under reflux with vigorous stirring for 1 hour, after which the mixture is filtered and the solvent is distilled off in vacuo. 23 g of oily viscous product are obtained.
Esimerkki 40 N-aminoiminometyyli-S-allyyli-isotiuronium-kloridiExample 40 N-Aminoiminomethyl-S-allyl-isothiuronium chloride
Seos, jossa on 4,2 g disyaanidiamidia, 20 ml etanolia, joka on kyllästetty kloorivetyhapolla, ja 3,7 g allyylimerkaptaa-nia, kuumennetaan hitaasti kiehumaan sekoittaen samalla voimakkaasti. Reaktioseosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 3 tunnin ajan ja jäähdytetään 0eC:seen. Saostuneet kiteet suodatetaan pois ja pestään etanolilla. Näin saadaan 7 g haluttua yhdistettä. Sp.: 125-127eC.A mixture of 4.2 g of dicyandiamide, 20 ml of ethanol saturated with hydrochloric acid and 3.7 g of allyl mercaptan is slowly heated to boiling with vigorous stirring. The reaction mixture is heated to reflux for 3 hours and cooled to 0 ° C. The precipitated crystals are filtered off and washed with ethanol. This gives 7 g of the desired compound. M.p .: 125-127 ° C.
IlIl
Claims (4)
Applications Claiming Priority (6)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
HU841324A HU196745B (en) | 1984-04-03 | 1984-04-03 | Process for producing n-/amino-imino-methyl/-isothiuronium derivatives with immunostimulant and cytostatic effect |
HU132484 | 1984-04-03 | ||
HU132485 | 1985-03-19 | ||
HU132485 | 1985-03-19 | ||
HU8500022 | 1985-04-02 | ||
PCT/HU1985/000022 WO1985004399A1 (en) | 1984-04-03 | 1985-04-02 | Isothiuronium salts |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI854790A0 FI854790A0 (en) | 1985-12-03 |
FI854790A FI854790A (en) | 1985-12-03 |
FI80259B FI80259B (en) | 1990-01-31 |
FI80259C true FI80259C (en) | 1990-05-10 |
Family
ID=26317358
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI854790A FI80259C (en) | 1984-04-03 | 1985-12-03 | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV TERAPEUTISKT ANVAENDBARA ISOTIURONIUM-SALTER. |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0825992B2 (en) |
CN (1) | CN1008093B (en) |
DE (1) | DE3590133T1 (en) |
FI (1) | FI80259C (en) |
GB (1) | GB2167750B (en) |
IL (1) | IL74743A (en) |
NZ (1) | NZ211639A (en) |
PL (1) | PL145636B1 (en) |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR788429A (en) * | 1934-12-14 | 1935-10-10 | Ig Farbenindustrie Ag | Production of combinations of guanyl and biguanyl |
DE2426683A1 (en) * | 1974-06-01 | 1975-12-18 | Boehringer Mannheim Gmbh | BIGUANID AND METHOD FOR MANUFACTURING THEREOF |
-
1985
- 1985-03-27 IL IL74743A patent/IL74743A/en not_active IP Right Cessation
- 1985-03-29 NZ NZ211639A patent/NZ211639A/en unknown
- 1985-04-02 GB GB08529529A patent/GB2167750B/en not_active Expired
- 1985-04-02 JP JP60501619A patent/JPH0825992B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-04-02 DE DE19853590133 patent/DE3590133T1/en not_active Withdrawn
- 1985-04-03 PL PL1985252744A patent/PL145636B1/en unknown
- 1985-04-24 CN CN85103160A patent/CN1008093B/en not_active Expired
- 1985-12-03 FI FI854790A patent/FI80259C/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS61501849A (en) | 1986-08-28 |
DE3590133T1 (en) | 1986-06-26 |
FI854790A0 (en) | 1985-12-03 |
GB8529529D0 (en) | 1986-01-08 |
CN1008093B (en) | 1990-05-23 |
PL252744A1 (en) | 1986-08-12 |
GB2167750B (en) | 1988-04-27 |
CN85103160A (en) | 1986-09-17 |
NZ211639A (en) | 1989-03-29 |
IL74743A0 (en) | 1985-06-30 |
FI854790A (en) | 1985-12-03 |
JPH0825992B2 (en) | 1996-03-13 |
IL74743A (en) | 1992-09-06 |
FI80259B (en) | 1990-01-31 |
PL145636B1 (en) | 1988-10-31 |
GB2167750A (en) | 1986-06-04 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2673136B2 (en) | Antitumor, antiviral, antiretroviral, antipsoriatic and insecticidal spermine derivatives | |
FI68820B (en) | ADJUSTMENT OF THERAPEUTIC HEATING AMNOTIAZOLER | |
KR20080004475A (en) | Facially amphiphilic polymers and oligomers, compositions thereof, and use thereof in methods of treating cancer | |
EP0094149B1 (en) | Pharmaceutical compositions containing a complex of iron with n-substituted 3-hydroxypyrid-2-one or -4-one derivatives | |
AU621431B2 (en) | Castanospermine esters in the inhibition of tumor metastasis | |
EP0318330A2 (en) | Glutathione esters for treating ventricular arrhythmia | |
FI80259C (en) | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV TERAPEUTISKT ANVAENDBARA ISOTIURONIUM-SALTER. | |
US4246409A (en) | Triazinones | |
HU183749B (en) | Process for preparing new guanidine derivatives | |
KR101191733B1 (en) | New compounds for inhibiting differentiation of osteoclast and pharmaceutical composition comprising thereof | |
US4710578A (en) | Isothiuronium salts | |
CA2264101A1 (en) | Preventives/remedies for muscle tissue degenerations | |
US7732485B2 (en) | Treatment of cancer | |
US5091410A (en) | Thioxanthenone antitumor agents | |
SU1384200A3 (en) | Method of producing bicyclic compounds or additive salts of hydrochloric acid thereof | |
CN113748119B (en) | Crystal of SMAC mimics used as IAP inhibitor and preparation method thereof | |
US4510147A (en) | Compositions for and medical use of water-soluble derivatives of 6,6-methylene-bis-(2,2,4-trimethyl-1,2-dihydroquinoline) | |
US4225315A (en) | Triazinones from amidinoureas | |
RU2108100C1 (en) | Immunomodulating agent | |
WO1994006781A1 (en) | New compounds for use in the treatment of cancer | |
SU1001855A3 (en) | Process for preparing 2-substituted-1h-phenanthro(9,10-d)imidazo or their salts | |
US4452980A (en) | Triazinones | |
FI69630C (en) | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV KVATERNAERA SALTER AV N, N3-DI (BETA-BROMPROPIONYL) -N1-DISPIROTRIPIPERAZINUM WOLF SALTER AER ANVAENDBARA CEILING MODEL MOT LEUKOS OCH TUMOERER | |
EP0127389A2 (en) | N,N-diethyl-5-methyl-2H-1-benzothiopyrano-(4,3,2-cd)-indazole-2-ethanamine, compositions comprising the same and uses therefor | |
JPS645597B2 (en) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC | Transfer of assignment of patent |
Owner name: THYREOS CORPORATION |
|
MM | Patent lapsed | ||
MM | Patent lapsed |
Owner name: THYREOS CORPORATION |