FI61517C - FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV 6- (D - (-) - ALPHA-AMINO-ALPHA- (P-HYDROXIFENYLACETAMIDO)) PENICILLAN SYRIC - Google Patents

Description

ISBr^l ΓΒ1 m,KUULUTUSJULKAISU ,ιςΐηISBr ^ l ΓΒ1 m, ADVERTISEMENT, ιςΐη

Wa l“J vv utlAggninosskript 0 I ο Ί / (45) Patent nicdd-'lat ^ ^ (51) KY.ik.3/int.a.3 C 12 P 37/00 SUOMI—FINLAND ¢1) Pwenttlhekemui — PttMtaMeknlnx 801593 <Ώ) 16.05.80 V / (23) AlkupUv·—Glklgh«od«c 30.05.75 (41) Tullut Julkltulcal — Bllvlt offumHg l6.05 · 80 P»tantti. j. r*kl,frih.llltu. Ni«***—i,. ku^ulk^ ^- 30.0U.82Wa l “J vv utlAggninosskript 0 I ο Ί / (45) Patent nicdd-'lat ^ ^ (51) KY.ik.3 / int.a.3 C 12 P 37/00 FINLAND — FINLAND ¢ 1) Pwenttlhekemui - PttMtaMeknlnx 801593 <Ώ) 16.05.80 V / (23) AlkupUv · —Glklgh «od« c 30.05.75 (41) Tullut Julkltulcal - Bllvlt offumHg l6.05 · 80 P »tantti. j. r * kl, frih.llltu. Ni «*** - i ,. ku ^ ulk ^ ^ - 30.0U.82

Patant- och ragictantyralMi) ' ' AmMcm uttafd och utl.tkrtftun pubNcaradPatant- och ragictantyralMi) '' AmMcm uttafd och utl.tkrtftun pubNcarad

(32)(33)(31) W*r ttuotkuu*—B^inl prtorhut 05.06. ?U(32) (33) (31) W * r ttuotkuu * —B ^ inl prtorhut 05.06. ? U

i9.ll.7U, 19.03.75 Englanti-England(GB) 2U8U8/7U, 50016/7U, Complete Spec.i9.ll.7U, 19.03.75 England-England (GB) 2U8U8 / 7U, 50016 / 7U, Complete Spec.

(71) Bristol-Myers Company, 3U5 Park Avenue, New York, N.Y. 10022, USA(US) (72) Daniel Bouzard, Franconville, Abraham Weber, Paris, Ranska-Frankrike(FR) (7U) Oy Kolster Ab (5U) Menetelmä 6-/D-(-)-0£-amino-OC-(p-hydroksifenyyliasetamido7peni-sillaanihapon valmistamiseksi - Forfarande för framställning av 6-/D- (-) - C*-amino- 0(,- (p-hydroxifenylacetamido)7penicillansyra (62) Jakamalla erotettu hakemuksesta 751596 (patentti 59U13) -Avdelad fr&n ansökan 751596 (patent 59U13) Tämän keksinnön kohteena on uusi menetelmä 6-D-(-)-c<-amino-<Λ-(p-hydroksifenyyliasetamido)penisillaanihapon, sen hydraatin tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi.(71) Bristol-Myers Company, 3U5 Park Avenue, New York, N.Y. 10022, USA (72) Daniel Bouzard, Franconville, Abraham Weber, Paris, France-France (FR) (7U) Oy Kolster Ab (5U) Method 6- / D - (-) - 0 £ -amino-OC - (for the preparation of p-hydroxyphenylacetamido7-penicillanic acid - Forfarande för framställning av 6- / D- (-) - C * -amino-0 (, - (p-hydroxyphenylacetamido) 7penicillansyra (62) The present invention relates to a new process for the preparation of 6-D - (-) - c <-amino- <β- (p-hydroxyphenylacetamido) penicillanic acid, its hydrate or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että 6-D- (-) - c*.-amino- cX- (p-asetoksifenyyliasetamido)penisillaanihapon vesiliuosta käsitellään esteraasilla, nimittäin sitrusesteraasilla, vehnäleseillä tai vehnänalkioilla, pH-arvossa noin 5,0-7,5, mahdollisesti puskurin läsnäollessa, jolloin esteraasi- vast, leseväkevyys on noin 5-10 mg/ml liuoksen kokonaismäärästä, ja tuote eristetään sinänsä tunnetuilla menetelmillä, jonka jälkeen mikäli halutaan, vapaan hapon tai hydraatin muodossa olevat tuotteet muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäviksi suoloiksi.The process according to the invention is characterized in that an aqueous solution of 6-D- (-) - c * -amino-cX- (p-acetoxyphenylacetamido) penicillanic acid is treated with an esterase, namely citrus esterase, wheat bran or wheat germ, at a pH of about 5.0-7, 5, optionally in the presence of a buffer, wherein the esterase concentration is about 5-10 mg / ml of the total solution, and the product is isolated by methods known per se, after which, if desired, the products in free acid or hydrate form are converted into pharmaceutically acceptable salts.

2 615172,61517

Erityistä kaupallista mielenkiintoa on 6-D-(-)-Of-amino- 01-(p-hydroksifenyyliasetamido)penisillaanihapon, hydraatin tai farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistusmenetelmällä, jossa 6-D-(-)-OC-amino-CV -<p-asetoksifenyyliasetamido)penisillaanihapon vesiliuosta käsitellään kauppatavarana saatavalla esteraa-silla, nimittäin karkeilla vehnänleseillä, joko pH-arvossa 5,5 - 6,0 tai puskurin läsnäollessa pH arvossa 7,0, vehnäleseiden pitoisuuden ollessa 10 mg/ml liuoksen kokonaistilavuudesta, ja tuote erotetaan sinänsä tunnetuilla menetelmillä, sekä mikäli halutaan, vapaan hapon tai hydraatin muodossa oleva tuote muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolakseen.Of particular commercial interest is a process for the preparation of 6-D - (-) - Of-amino-O- (p-hydroxyphenylacetamido) penicillanic acid, hydrate or a pharmaceutically acceptable salt, wherein 6-D - (-) - OC-amino-CV - <p- acetoxyphenylacetamido) an aqueous solution of penicillanic acid is treated with a commercially available esterase, namely coarse wheat bran, either at pH 5.5 to 6.0 or in the presence of buffer at pH 7.0, with a concentration of wheat bran of 10 mg / ml of total solution volume, and the product separated by methods, and if desired, the product in the form of the free acid or hydrate is converted into a pharmaceutically acceptable salt.

Lähtöaineen valmistus on kuvattu kantahakemuksessa 751596.The preparation of the starting material is described in parent application 751596.

6-D-(-)-Of-amino- Of-(p-hydroksifenyyliasetamido)penisillaa-nihappo (amoksilliini), joka on valmistettu kyseisellä menetelmällä, on tunnetusti tehokas antibakteerinen aine ja käyttökelpoinen hoidettaessa gram-negatiivisten tai -positiivisten bakteerien aiheuttamia tartuntatauteja eläimissä, siipikarjassa ja myös ihmisissä.6-D - (-) - Of-amino-Of- (p-hydroxyphenylacetamido) penicillanic acid (amoxicillin) prepared by this method is known to be an effective antibacterial agent and useful in the treatment of infectious diseases caused by gram-negative or positive bacteria in animals , in poultry and also in humans.

Seuraavat esimerkit valaisevat keksinnön mukaista menetelmää.The following examples illustrate the method of the invention.

Esimerkki 1Example 1

Valmistettiin seuraavat liuokset: 0,5 mg/ml 6-D- (-)-Of -amino-O- (p-asetoksifenyyliasetamido) -penisillaanihappoa (p-asetoksiampisilliiniä) normaalisuolaliuok-sessa.The following solutions were prepared: 0.5 mg / ml of 6-D- (-) - Of-amino-O- (p-acetoxyphenylacetamido) -penicillanic acid (p-acetoxyampicillin) in normal saline.

0,5 mg/ml p-asetoksiampisilliiniä sitrusesteraasiliuoksessa (esteraasiväkevyys sama kuin vehnälese-esteraasiliuoksen väkevyys, 10 mg/ml), joka oli laimennettu kymmenkertaisesti 0,1-m kaliumfos- faattipuskurilla pH:n säätämiseksi arvoon 7,0, sekä 0,5 mg/ml p-asetoksiampisilliiniä liuoksessa, joka sisälsi 10 mg/ml raakaa vehnälesettä (Shiloh Farms, Inc., Sulphur Springs, Arkansas, USA) 0,1-m kaliumfosfaattipuskurissa.0.5 mg / ml p-acetoxyampicillin in citrus esterase solution (esterase concentration equal to the concentration of wheat bran esterase solution, 10 mg / ml) diluted 10-fold with 0.1 M potassium phosphate buffer to adjust the pH to 7.0, and 0.5 mg / ml p-acetoxyampicillin in a solution containing 10 mg / ml crude wheat bran (Shiloh Farms, Inc., Sulfur Springs, Arkansas, USA) in 0.1 M potassium phosphate buffer.

Kaikkia näitä liuoksia sekoitettiin 37°C:ssa, ja otettiin näytteitä kromatografiaa varten 0, 2, 4, 8 ja 24 tunnin välein.All these solutions were stirred at 37 ° C, and sampled for chromatography at 0, 2, 4, 8, and 24 hours.

5 μΐ :n näytteet pipetoitiin Whatman n:o 1 paperiliuskoille, joiden leveys oli 12,7 mm, nämä kuivattiin ja kehitettiin liuotinseok- 3 61517 sessa, joka sisälsi 80 osaa butyyliasetaattia, 15 osaa n-buta-nolia, 40 osaa etikkahappoa ja 24 osaa vettä. Näytteet bioauto-grafoitiin tämän jälkeen levyillä, joihin oli siirrostettu Bacillus subtilista pH-arvossa 6,0.5 μΐ samples were pipetted onto Whatman No. 1 paper strips 12.7 mm wide, dried and developed in a solvent mixture containing 80 parts of butyl acetate, 15 parts of n-butanol, 40 parts of acetic acid and 24 parts of part of the water. The samples were then bioautographed on plates inoculated with Bacillus subtilis at pH 6.0.

Nämä biokromatogrammit osoittivat, että p-asetoksiampisil-liini on pysyvä normaalisuolaliuoksessa, mutta hydrolysoituu nopeasti p-hydroksimuotoon sekä sitrusesteraasin että lese-este-raasin vaikutuksesta.These biochromatograms showed that p-acetoxyampicillin is stable in normal saline, but is rapidly hydrolyzed to the p-hydroxy form by both citrus esterase and bran esterase.

Esimerkki 2Example 2

Valmistettiin seuraavat reaktioseokset; sekoitettiin niitä 28°C:ssa ja otettiin näytteitä 0, 1,5, 1, 2, 3, 4, ja 6 tunnin välein, kuten esimerkissä 1 on esitetty.The following reaction mixtures were prepared; they were mixed at 28 ° C and sampled at 0, 1.5, 1, 2, 3, 4, and 6 hours as shown in Example 1.

1. 25 mg rasvatonta lesettä (vehnälesettä, joka oli saatu Shiloh'ista, käsitelty asetonilla ja kuivattu), 4,5 ml 0,1-m kaliumfosfaattipuskuria, pH 6,0 sekä 0,5 ml liuosta, joka sisälsi 5 mg/ml 6-D-(-)-Q£-amino-Qi-j(p-asetoksifenyyliasetamido)peni-sillaanihappoa (p-asetoksiampisilliini) samassa puskurissa.1. 25 mg of non-fat bran (wheat bran obtained from Shiloh, treated with acetone and dried), 4.5 ml of 0.1 M potassium phosphate buffer, pH 6.0 and 0.5 ml of a solution containing 5 mg / ml 6-D - (-) - Q? -Amino-Qi-j (p-acetoxyphenylacetamido) penicillanic acid (p-acetoxyampicillin) in the same buffer.

2. 25 mg rasvatonta lesettä, 4,5 ml 0,1-m kaliumfosfaattipuskuria, pH 7,0, sekä 0,5 ml liuosta, joka sisälsi 5 mg/ml p-asetoksiampisilliiniä samassa puskurissa.2. 25 mg of non-fat bran, 4.5 ml of 0.1 M potassium phosphate buffer, pH 7.0, and 0.5 ml of a solution containing 5 mg / ml p-acetoxyampicillin in the same buffer.

3. 25 mg rasvatonta lesettä, 4,5 ml 0,1-m kaliumfosfaattipuskuria, pH 7,5, sekä 0,5 ml liuosta, joka sisälsi 5 mg/ml p-asetoksiampisilliinia samassa puskurissa.3. 25 mg of non-fat bran, 4.5 ml of 0.1 M potassium phosphate buffer, pH 7.5, and 0.5 ml of a solution containing 5 mg / ml p-acetoxyampicillin in the same buffer.

4. 50 mg rasvatonta lesettä, 4,5 ml 0,1-m kaliumfosfaattipuskuria, pH 6,0 sekä 0,5 ml liuosta, joka sisälsi p-asetoksi-ampisilliiniä samassa puskurissa.4. 50 mg of non-fat bran, 4.5 ml of 0.1 M potassium phosphate buffer, pH 6.0 and 0.5 ml of a solution containing p-acetoxy-ampicillin in the same buffer.

5. 50 mg rasvatonta lesettä, 4,5 ml 0,1-m kaliumfosfaattipuskuria, pH 7,0 sekä 0,5 ml liuosta, joka sisälsi 5 mg/ml asetok-siampisilliiniä samassa puskurissa.5. 50 mg of non-fat bran, 4.5 ml of 0.1 M potassium phosphate buffer, pH 7.0 and 0.5 ml of a solution containing 5 mg / ml acetoxyampicillin in the same buffer.

6. 50 mg rasvatonta, lesettä, 4,5 ml 0,1-m kaliumfosfaattipuskuria, pH 7,5 sekä 0,5 ml liuosta, joka sisälsi 5 mg/ml p-asetoksiampisilliiniä samassa puskurissa.6. 50 mg non-fat, bran, 4.5 ml 0.1 M potassium phosphate buffer, pH 7.5 and 0.5 ml solution containing 5 mg / ml p-acetoxyampicillin in the same buffer.

Biokromatogrammien tulokset on annettu taulukossa IV.The results of the biochromatograms are given in Table IV.

4 6151 74 6151 7

Taulukko IVTable IV

%-konversio p-hydroksiampisilliiniksi% conversion to p-hydroxyampicillin

Reaktioaika (tuntia)Reaction time (hours)

Reaktio n; o 0_1/2 1 2 3/ 4_6 1 12 23 32 64 100 91 95 % 2 11 34 45 68 120 75 77 % 3 11 32 39 45 68 75 98 % 4 9 32 55 59 80 80 77 % 5 14 34 64 109 131 104 104 % 6 16 66 66 91 98 116 86 %Reaction n; o 0_1 / 2 1 2 3 / 4_6 1 12 23 32 64 100 91 95% 2 11 34 45 68 120 75 77% 3 11 32 39 45 68 75 98% 4 9 32 55 59 80 80 77% 5 14 34 64 109 131 104 104% 6 16 66 66 91 98 116 86%

Optimaaliset tulokset saadaan täten käyttämällä reaktio-seosta n:o 5; tällöin kokonaiskonversio p-hydroksiampisilliiniksi on täydellinen 2 tunnissa lesepitoisuuden ollessa 10 mg/ml ja pH-arvon ollessa 7,0.Optimal results are thus obtained using reaction mixture No. 5; then the total conversion to p-hydroxyampicillin is complete in 2 hours at a bran concentration of 10 mg / ml and a pH of 7.0.

Esimerkki 3Example 3

Valmistettiin seuraava reaktioseos, joka sisälsi 50 mg rasvatonta lesettä (Shiloh), 2,5 mg 6-D-(-)-(/.-amino-cA-(p-asetoksi-fenyyliasetamido)penisillaanihappoa (p-asetoksiampisilliiniä) sekä 5,0 ml vettä. Seosta sekoitettiin noin 28°C:ssa ja tutkittiin kromatografisesta 1, 2 ja 3 tunnin välein.The following reaction mixture was prepared containing 50 mg of nonfat bran (Shiloh), 2.5 mg of 6-D - (-) - (β-amino-cA- (p-acetoxyphenylacetamido) penicillanic acid (p-acetoxyampicillin) and 5, 0 ml of water The mixture was stirred at about 28 [deg.] C. and chromatographed every 1, 2 and 3 hours.

Biokromatogrammien tulokset osoittivat, että 100 % konversio p-asetoksiampisilliinistä p-hydroksiampisilliiniksi tapahtui 3 tunnissa. Reaktioseoksen pH-arvo pysyi vakiona (noin 5,7) huolimatta puskurin puuttumisesta.The results of the biochromatograms showed that 100% conversion from p-acetoxyampicillin to p-hydroxyampicillin occurred in 3 hours. The pH of the reaction mixture remained constant (about 5.7) despite the absence of buffer.

Esimerkki 4Example 4

Yhdistettiin seuraavat ainekset: 20 g rasvatonta lesettä (Shiloh), 1,0 g 6-D- (-) - o(-amino- Ä-(p-asetoksifenyyliasetamido) -penisillaanihappoa (p-asetoksiampisilliini) sekä 2 1 0,01-m kalium-fosfaattipuskuriliuosta, pH 7,0, Muodostunutta seosta sekoitettiin 28°C:ssa, ja siitä otettiin näytteitä tunnin välein kuten esimerkissä A.The following ingredients were combined: 20 g of non-fat bran (Shiloh), 1.0 g of 6-D- (-) - o (-amino-? - (p-acetoxyphenylacetamido) penicillanic acid (p-acetoxyampicillin) and 2 l of 0.01- m of potassium phosphate buffer solution, pH 7.0, The resulting mixture was stirred at 28 ° C and sampled every hour as in Example A.

Biokromatogrammeista havaittiin, että 100-% konversio saavutettiin 3 tunnissa. Seos sentrifugoitiin tämän jälkeen. Sakan päällä oleva neste otettiin talteen, pH säädettiin arvoon 4,0 suolahapolla, ja lyofiloitiin, Lyofilaatti tutkittiin edelleen kuten yllä on selitetty, jolloin sen havaittiin sisältävän likimain 900 mg p-hyd-roksiampisilliiniä, 6151 7 5From the biochromatograms it was found that 100% conversion was achieved in 3 hours. The mixture was then centrifuged. The supernatant was collected, the pH was adjusted to 4.0 with hydrochloric acid, and lyophilized. The lyophilate was further examined as described above to find approximately 900 mg of p-hydroxyampicillin, 6151 7 5

Lyofilaatti, 6,0 g, sekoitettiin 20 ml jaan vettä. Muodostuneeseen seokseen lisättiin 6-n suolahappoa pH:n laskemiseksi asteittain arvoon 2,0. Sekoitusta jatkettiin vielä 15 minuuttia, mitä seurasi kiintoaineen suodatus, Suodosta käsiteltiin 1,0 g:11a väriäpoistavaa hiiltä, hiili suodatettiin erilleen, sekä kirkas suodos säädettiin pH-arvoon 4,5, Kiteytyminen käynnistettiin raaputtamalla, ja sen annettiin jatkua 4 tuntia. Kiteet kerättiin suoti-melle, pestiin vedellä sekä asetonilla, ja kuivattiin, jolloin saatiin 180 mg 6-D-(-)- öt-amino-C*-(p-hydroksifenyyliasetamido)penisil-laanihapon trihydraattia, hajoamislämpötila 201°C,The lyophilate, 6.0 g, was mixed with 20 ml of water. To the resulting mixture was added 6N hydrochloric acid to gradually lower the pH to 2.0. Stirring was continued for a further 15 minutes, followed by filtration of the solid. The filtrate was treated with 1.0 g of decolorizing carbon, the carbon was filtered off, and the clear filtrate was adjusted to pH 4.5. Crystallization was initiated by scraping and allowed to continue for 4 hours. The crystals were collected on a filter, washed with water and acetone, and dried to give 180 mg of 6-D - (-) - 5-amino-C * - (p-hydroxyphenylacetamido) penicillanic acid trihydrate, Decomposition temperature 201 ° C,

Alkuaineanalyysi C^gH^N^O^S: lie % teoreettinen % löydetty C 45,82 45,87 H 6,01 5,71 N 10,02 10,48 K.F,H20 12,89 13,68Elemental analysis for C 18 H 28 N 2 O 2 S% theoretical% found C 45.82 45.87 H 6.01 5.71 N 10.02 10.48 K.F, H 2 O 12.89 13.68

Biologiset tiedot Aktiivisuus in vivoBiological information In vivo activity

Keskimääräiset vaikuttavat annokset (CDcn) hiirillä erilaisiin 50 patogeenisiin mikro-organismeihin määritettiin 6-[D-(-)-<=f-amino-«i-(4-hydroksifenyyli)asetamidoJpenisillaanihapolle. CD50-tiedot on annettu seuraavassa arvoina mg/kg.Mean effective doses (CDcn) in mice of various 50 pathogenic microorganisms were determined for 6- [D - (-) - <= f-amino- (i- (4-hydroxyphenyl) acetamido] penicillanic acid. CD50 data are given below in mg / kg.

Organismi Annostustapa CD50 (m9/kg) 1 1 1 '« ' —— Il m ' 1 ' «y·· n~.i Tl » " > ......... — ' —Organism Route of administration CD50 (m9 / kg) 1 1 1 '«' —— Il m '1'« y ·· n ~ .i Tl »"> ......... - '-

Staphylococcus aureus Smith lihakseen 0,2 suun kautta 0,9Staphylococcus aureus Smith intramuscularly 0.2 orally 0.9

Salmonella enteritidis lihakseen 5,4 suun kautta 3,5-4,0Salmonella enteritidis intramuscularly 5.4 orally 3.5-4.0

Klebsiella pneumoniae lihakseen 7 suun kautta 7Klebsiella pneumoniae intramuscularly 7 orally 7

Imeytyminen suun kautta Määritykset tehtiin antamalla hiirille suun kautta 6-/5-(-)-ίΛ-amino- Λ-(4-hydroksifenyyli)asetamido/penisillaanihappoa. Kokeessa annettiin neljälle hiirelle suun kautta 30 mg/kg yhdistettä. Keskimääräiset pitoisuudet veressä olivat seuraavat:Oral Absorption Assays were performed by oral administration of 6- / 5 - (-) - β-amino-β- (4-hydroxyphenyl) acetamido / penicillanic acid to mice. In the experiment, four mice were orally administered 30 mg / kg of compound. The mean blood levels were as follows:

Aika (tuntia) Pitoisuus (^ig/ml) 0,5 8,1 1.0 4,0 2.0 1,40 3,5 1,1Time (hours) Concentration (μg / ml) 0.5 8.1 1.0 4.0 2.0 2.0 1.40 3.5 1.1

Claims (2)

6 6151 76 6151 7 1. Menetelmä 6-D- (-) - <X-amino- (X- (p-hydroksif enyyliaset-amido)penisillaanihapon, sen hydraatin tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 6-D- (-) - <X-amino- (Λ- (p-asetoksifenyyliasetamido) penisillaanihapon vesiliuosta käsitellään esteraasilla, nimittäin sitrusesteraasilla, vehnäleseillä tai vehnänalkioilla, pH-arvossa noin 5,0-7,5, mahdollisesti puskurin läsnäollessa, jolloin esteraasi- vastaavasti lese-väkevyys on noin 5-10 mg/ml liuoksen kokonaismäärästä, ja tuote eristetään sinänsä tunnetuilla menetelmillä, jonka jälkeen mikäli halutaan, vapaan hapon tai hydraatin muodossa oleva tuote muutetaan farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.A process for the preparation of 6-D- (-) - <X-amino- (X- (p-hydroxyphenylacetamido) penicillanic acid, its hydrate or a pharmaceutically acceptable salt thereof, characterized in that 6-D- (-) - An aqueous solution of ε-amino- (β- (p-acetoxyphenylacetamido) penicillanic acid is treated with an esterase, namely citrus esterase, wheat bran or wheat germ, at a pH of about 5.0 to 7.5, optionally in the presence of a buffer, the esterase concentration being about 5-10 mg / ml of the total solution, and the product is isolated by methods known per se, after which, if desired, the product in the form of the free acid or hydrate is converted into a pharmaceutically acceptable salt. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että 6-D-(-)-ίλ-amino-cX-(p-asetoksifenyyliasetamido)penisillaanihapon vesiliuosta käsitellään kauppatavarana saatavalla esteraasilla, nimittäin raakavehnäleseillä, pH-arvossa 5,5-6,0 taikka vaihtoehtoisesti puskurin läsnäollessa pH-arvossa 7,0, jolloin leseväkevyys on 10 mg/ml liuoksen kokonaismäärästä, ja tuote erotetaan sinänsä tunnetuilla menetelmillä, jonka jälkeen mikäli halutaan, vapaan hapon tai hydraatin muodossa oleva tuote muutetaan vastaavaksi farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.Process according to Claim 1, characterized in that an aqueous solution of 6-D - (-) - ίλ-amino-cX- (p-acetoxyphenylacetamido) penicillanic acid is treated with a commercially available esterase, namely raw wheat bran, at a pH of 5.5 to 6.0. or alternatively in the presence of a buffer at pH 7.0, the bran concentration being 10 mg / ml of the total solution, and the product is isolated by methods known per se, after which, if desired, the product in free acid or hydrate form is converted into the corresponding pharmaceutically acceptable salt.