FI57953C - PROCEDURE FOR FRAMSTATION OF AV 7-AMINOCEFALOSPORANSYRADERIVAT MED ANTIBIOTISK VERKAN - Google Patents

Description

r_, .... KUULUTUSJULKAISUr_, .... ANNOUNCEMENT

jÄfifc ^ (11) utläggningsskiuft 5 7 9 5 3 c Patentti isyör.nc Ity iO 11 1900jÄfifc ^ (11) utläggningsskiuft 5 7 9 5 3 c Patent isyör.nc Ity iO 11 1900

Patent mei-Jelafc V<“"v ^ (51) K».ik?/int.a3 C 07 D 501/57* 501/0*1· SUO M I — Fl N LAN D (21) P«*int*lh«kiimi· — P*t«ncweimln* 772^27 (22) H*kwnltpUvi — AMOkitlngriag 12.08.77 (23) AlkupUvi—GiMghvtsdaf 15.06.71 (41) Tullut lutklMlul — Blhrlt offentllg 12.08 77 PMinttI· J« rekisteri hallitus NShttvSksi^ |. kmL|<illulfun pvm.-Patent Mei-Jelafc V <“" v ^ (51) K ».ik? /Int.a3 C 07 D 501/57 * 501/0 * 1 · SUO MI - Fl N LAN D (21) P« * int * lh «kiimi · - P * t« ncweimln * 772 ^ 27 (22) H * kwnltpUvi - AMOkitlngriag 12.08.77 (23) Starting point — GiMghvtsdaf 15.06.71 (41) Becoming lutklMlul - Blhrlt offentllg 12.08 77 PMinttI · J «register NShttvSksi ^ |. KmL | <illulfun pvm.-

Patent· och ragistarstyralsan ' Anastan mJtfd och utukrtfuo public·»* 31.07.80 " (32)(33)(31) hnri««jr «tuoHc·»»—Beglr* priority 16.06.70 09-07.70, 30.09.70, 10.12.70, 27.01.71, 27.01.71, 27.01.71, 08.02.71, 11.02.71, 11.02.71, 26.02.71, 30.011.71, 30.0U.71, 30.0U.71, 30.0U.71, 30.0U.71, " 30.0U.71. 30.0U.71, 30.0U.71, 30.0U.71, 30.0U.71, 30.0U.71 Englanti-England(GB) 29158/70, 33U15/70, U6556/70, 58731/70, 3296/71, 3297/71, 3298/71, U179/71, UU79/71, UU80/71, 5588/71, 29158/70, 33U15/70, U6556/70, 58731/70, 3296/71, 3297/71, 3298/71, U179/71, UU79/71, UU80/71, 5588/71 (71) Merck & Co., Inc., Rahway, New Jersey, USA(US) (72) Burton Grant Christensen, Scotch Plains, New Jersey, Meyer Sletzinger,Patent and octagistyralsan 'Anastan mJtfd och utukrtfuo public · »* 31.07.80" (32) (33) (31) hnri «« jr «TuoHc ·» »- Beglr * priority 16.06.70 09-07.70, 30.09.70, 10.12.70, 27.01.71, 27.01.71, 27.01.71, 08.02.71, 11.02.71, 11.02.71, 26.02.71, 30.011.71, 30.0U.71, 30.0U.71, 30.0U.71 , 30.0U.71, "30.0U.71. 30.0U.71, 30.0U.71, 30.0U.71, 30.0U.71, 30.0U.71 England-England (GB) 29158/70, 33U15 / 70, U6556 / 70, 58731/70, 3296/71, 3297/71, 3298/71, U179 / 71, UU79 / 71, UU80 / 71, 5588/71, 29158/70, 33U15 / 70, U6556 / 70, 58731/70, 3296/71, 3297/71, 3298 / 71, U179 / 71, UU79 / 71, UU80 / 71, 5588/71 (71) Merck & Co., Inc., Rahway, New Jersey, USA (72) Burton Grant Christensen, Scotch Plains, New Jersey, Meyer Sletzinger,

North Plainfield, New Jersey, Sandor ICarady, Elizabeth, New Jersey,North Plainfield, New Jersey, Sandor ICarady, Elizabeth, New Jersey,

Lovji Dadi Cama, Edison, New Jersey, USA(US) (7U) Oy Kolster Ab (5U) Menetelmä 7-aminokefalosporaanihappojohdannaisten valmistamiseksi, joilla on antibioottinen vaikutus - Förfarande för framställning av 7-aminocefalosporan-syraderivat med antibiotisk verkan (62) Jakamalla erotettu hakemuksesta 1675/71 (patentti 56686) -' Avdelad frän ansökan 1675/71 (patent 56686) Tämä keksintö koskee menetelmää uusien antibioottien 7-ami-nokefalosporaanihappojohdannaisten valmistamiseksi, joissa on substituentti 7-asemassa.Lovji Dadi Cama, Edison, New Jersey, USA (7U) Oy Kolster Ab (5U) Method for the preparation of 7-aminocephalosporanic acid derivatives having antibiotic activity - Förfarande för framställning av 7-aminocephalosporan-syraderivat med antibiotisk verkan (62) This invention relates to a process for the preparation of 7-aminocephalosporanic acid derivatives of the novel antibiotics having a substituent in the 7-position.

Penisilliinin keksiminen, jonka todettiin olevan tärkeän ja tehokkaan antibiootin, kiihdytti suurta kiinnostusta tällä alalla.The invention of penicillin, which was found to be an important and effective antibiotic, sparked great interest in this field.

Sen jälkeen löydettiin erilaisia muita antibiootteja, kuten streptomysiini, tetrasykliinit, novobiosiini ja sen kaltaiset, jotka suuresti lisäsivät lääkäreiden lääkintämahdollisuuksia erilaisten patogeenien aiheuttamien infektioiden hoitamista varten. Onnettomuudeksi näiden antibioottien käyttö on aikaansaanut patogeenien kantoja, jotka kestävät näitä tunnettuja antibiootteja. Lisäksi tunnetuilla antibiooteilla on se haitta, että ne ovat tehokkaita ainoastaan mikro-organismien tiettyjä lajeja vastaan ja eivät ole tehokkaita patogeenien laajaa aluetta vastaan. Näin ollen muiden antibioottien etsiminen on jatkunut.Subsequently, various other antibiotics were found, such as streptomycin, tetracyclines, novobiocin, and the like, which greatly increased the medical options available to physicians to treat infections caused by various pathogens. Unfortunately, the use of these antibiotics has resulted in strains of pathogens that are resistant to these known antibiotics. In addition, known antibiotics have the disadvantage that they are effective only against certain species of microorganisms and are not effective against a wide range of pathogens. Thus, the search for other antibiotics has continued.

2 579532 57953

Keksinnön mukaisesti valmistetut uudet kefalosporiinit ovat yhdisteitä, joissa on Δ -kefami-runko, nimittäin dehydrotiatsuni-rengas yhteenliittyneenä ^}-laktaamin kanssa, joka sisältää substitu-entin 7-asemassa. Näillä uusilla kefalosporiineilla, joita voidaan esittää rakennekaavalla: 9CH3 R'-NH —-f^SNSj (I)The novel cephalosporins prepared according to the invention are compounds having a Δ-cepham backbone, namely a dehydrothiazine ring fused to a β-lactam containing a substituent in the 7-position. With these new cephalosporins, which can be represented by the structural formula: 9CH 3 R'-NH-f ^ SNSj (I)

^-KyJ—CH2A^ -KyJ-CH2A

COOR8 jossa R' on 2-tienyyliasetyyli, 2-furyyliasetyyli, fenyyliasetyyli, cX-atsidofenyyliasetyyli tai fenyylitioasetyyli, A on vety tai karbamoyylioksi ja R on vety tai natrium tai kalium, on arvokkaita antibioottisia ominaisuuksia.COOR 8 where R 'is 2-thienylacetyl, 2-furylacetyl, phenylacetyl, cX-azidophenylacetyl or phenylthioacetyl, A is hydrogen or carbamoyloxy and R is hydrogen or sodium or potassium have valuable antibiotic properties.

Kefalosporiini-yhdisteiden nimistön mukaisesti yhdistettä, joka saadaan hydrolysoimalla kefalosporiini C, jota voidaan esittää rakennekaavallaAccording to the nomenclature of cephalosporin compounds, a compound obtained by hydrolyzing cephalosporin C, which can be represented by the structural formula

Vn- -\J-CH2OCOCH3Vn- - J-CH2OCOCH3

COOHCOOH

kutsutaan 7-aminokefalosporaanihapoksi tai 7-ACA.called 7-aminocephalosporanic acid or 7-ACA.

Tässä käytetty sanonta "dekefalosporaanihappo" kuvaa tiettyjä tuotteita, jotka edustavat emäksistä heterosykldstä runkoa, jolla on rakennekaavaAs used herein, the phrase "decephalosporanic acid" describes certain products that represent a basic heterocyclic backbone having the structural formula

rYMRYM

COOHCOOH

3 57953 .3 57953.

Siten yhdistettä, jolla on kaavaThus a compound of formula

h2n—-/ 'Nh2n —- / 'N

o^*-N\^CH3o ^ * - n \ ^ CH 3

COOHCOOH

kutsutaan 3-metyyli-7aminodekefalosporaanihapoksi käytettäessä tätä - nimistön järjestelmää.is called 3-methyl-7-aminodecephalosporanic acid when using this system of nomenclature.

Keksinnön mukaisia kefalosporiiniyhdisteitä nimitetään myös sopivasti "kefaami"-yhdisteiksi, jotka sisältävät emäksisen yhteenliit-„ tyneen rengas ^-laktaami-tiatsiini-rakenteenThe cephalosporin compounds of the invention are also conveniently referred to as "cepham" compounds containing a basic fused ring β-lactam-thiazine structure.

>—>kJ> -> kJ

o joka on tunnettu nimellä kefamiini. Siten kefalosporiiniyhdisteitä kutsutaan nimellä "kefeemi" viitaten perusrakenteeseen, jossa on yksinkertainen olefiini-sidos. Esim. tässä nimistöjärjestelmässä kefalosporiinia C, jolla on rakennekaava / S H .s CH(CH„ )«-C-N —-f ^o which is known as cefamine. Thus, cephalosporin compounds are referred to as "cephem" with reference to a basic structure having a simple olefin bond. For example, in this nomenclature system, cephalosporin C having the structural formula / S H .s CH (CH „)« - C-N —-f ^

\ 2 3 I\ 2 3 I

NH2 y-N CH2OCOCH3 0NH2 y-N CH2OCOCH3 0

COOHCOOH

kutsutaan 7-(5'-aminoadipamido)-3-asetoksimetyyli-3-kefeemi-4-karbonihapoksi.called 7- (5'-aminoadipamido) -3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylic acid.

Keksinnön mukaisia uusia kefalosporiineja voidaan käyttää vapaana happona, suolana, kuten alkalimetalli-, maa-alkalimetalli- tai ammoniumsuoloina, esim. natrium-, kalsium-, trietyyliammonium-, prokaiini- ja senkaltaisena suoloina.The novel cephalosporins of the invention can be used as the free acid, a salt such as alkali metal, alkaline earth metal or ammonium salts, e.g. sodium, calcium, triethylammonium, procaine and the like.

Kaavan I mukaiset uudet kefalosporiinit ovat arvokkaita antibiootteja erilaisia gram-posi iivisia ja gram-negatiivisia bekteereja 57953 4 vastaan. Vaikkakin yleensä niiden biologiset spektrit ovat samankaltaisia kuin tunnetut kefalosporiini-spektrit, on näillä uusilla kefalosporiineilla tiettyjä uusia ja odottamattomia ominaisuuksia. Siten ne yleensä ovat tehokkaita useita mikro-organismeja vastaan, jotka ovat vastustuskykyisiä tunnettuja kefalosporiineja kuten kefaloridiinia ja kefalotiinia vastaan ja jotka ovat vastustuskykyisiä ^9-laktamaasia vastaan, jonka muodostaa kefalosporiinin suhteen vastustuskykyiset patogeenisi, kuten E. coli ja A. cloacae, kliiniset eristeet. Myös ne ovat yleensä tehokkaampia Proteus-kantoja kuten mirabilis vastaan ja ne ovat tehokkaita sellaisia Proteus morganii kantoja vastaan, jotka ovat vastustuskykyisiä substituoimattomia kefalosporiineja vastaan. Ne ovat myös käyttökelpoisia erotettaessa mikro-organismeja jälelle jääneistä mahdollisista mikro-organismeista farmaseuttisista, lääkinnällisistä ja hammaslääkinnällisistä välineistä ja ne ovat käyttökelpoisia bakteereja tappavina aineina teollisuuskäytöissä, esim vesipohjaisissa maaleissa ja paperitehtaiden 0-vedes-sä haitallisten bakteerien kasvun estämiseksi.The novel cephalosporins of formula I are valuable antibiotics against various gram-positive and gram-negative bacteria 57953 4. Although in general their biological spectra are similar to those of the known cephalosporin spectra, these new cephalosporins have certain new and unexpected properties. Thus, they are generally effective against a number of microorganisms which are resistant to known cephalosporins such as cephaloridine and cephalothin and which are resistant to β-lactamase formed by clinical isolates of your cephalosporin-resistant pathogens such as E. coli and A. cloacae. They are also generally more effective against Proteus strains such as mirabilis and are effective against Proteus morganii strains that are resistant to unsubstituted cephalosporins. They are also useful in separating microorganisms from any remaining microorganisms from pharmaceutical, medical and dental devices and are useful as bactericidal agents in industrial applications, e.g., water-based paints and 0-water control of paper mills.

Siten 7-metoksikefalosporiinit, jotka on valmistettu keksinnön mukaisesti, ovat yleensä tehokkaampia kuin 7-(D-5'-amino-5'-karboksi= valeramido)-7-metoksi-kefalosporiinit erilaisia gram-negatiivisia organismeja vastaan ja niillä on suurempi vaikutus gram-positiivisia organismeja vastaan. Esim. nämä 7-metoksikefalosporiinit ovat tehokkaita sellaisia gram-positiivisia patogeenejä kuin Staphylococcus aureus vastaan sellaisella pienimmillä estoväkevyydellä (MIC), joka on niin pieni kuin noin 1,5 mcg/ml, Streptococcus pyogenes vastaan estoväkevyydellä noin 0,7 mcg/ml ja Diplococcus pneumoniae vastaan estoväkevyydellä noin 0,7 mcg/ml; ja gram negatiivisia organismeja kuten Aerobacter aerogenes vastaan estoväkevyydellä noin 3 mcg/ml, Proteus vulgaris vastaan estoväkevyydellä noin 1,5 mcg/ml ja Proteus morganii vastaan estoväkevyydellä noin 6 mcg/ml. Edellä kuvatuissa esimerkeissä mainittujen spesifisten tuotteiden aktiviteeteista voidaan mainita seuraavat: 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-7-fenyyli= asetamido-3-kefeemi-4-karbonihappo, S. pyogenes MIC 1,56 mcg/ml ja P. vulgaris MIC 1,56 mcg/ml; 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-7-(2-tienyyliasetamido)-3-kefeemi-4-karbonihappo, S. pyogenes MIC 0,78 mcg/ml ja P. morganii MIC 12,5 mcg/ml; 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-7-(2-furyyliasetamido)-3-kefeemi-4-karbonihappo, S. aureus MIC 6,25 mcg/ml ja P. vulgaris MIC 1,56 mcg/ml.Thus, the 7-methoxycephalosporins prepared according to the invention are generally more effective than 7- (D-5'-amino-5'-carboxy = valeramido) -7-methoxy-cephalosporins against various gram-negative organisms and have a greater effect on gram-negative organisms. -positive organisms. For example, these 7-methoxycephalosporins are effective against gram-positive pathogens such as Staphylococcus aureus at a minimum inhibitory concentration (MIC) of less than about 1.5 mcg / ml, Streptococcus pyogenes at an inhibitory concentration of about 0.7 mcg / ml, and Diplococcus pneumoniae at an inhibitory concentration of about 0.7 mcg / ml; and grams against negative organisms such as Aerobacter aerogenes at an inhibitory concentration of about 3 mcg / ml, Proteus vulgaris at an inhibitory concentration of about 1.5 mcg / ml, and Proteus morganii at an inhibitory concentration of about 6 mcg / ml. Among the activities of the specific products mentioned in the examples described above, the following can be mentioned: 3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7-phenyl = acetamido-3-cephem-4-carboxylic acid, S. pyogenes MIC 1.56 mcg / ml and P. vulgaris MIC 1, 56 mcg / ml; 3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7- (2-thienylacetamido) -3-cephem-4-carboxylic acid, S. pyogenes MIC 0.78 mcg / ml and P. morganii MIC 12.5 mcg / ml; 3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7- (2-furylacetamido) -3-cephem-4-carboxylic acid, S. aureus MIC 6.25 mcg / ml and P. vulgaris MIC 1.56 mcg / ml.

5 579535 57953

Seuraavassa taulukossa I on esitetty muutamien keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden entsymaattinen hajoaminen verrattuna 3 tunnettuun yhdisteeseen kefamysiiniin C (SF patentti 45990) , kefalotiiniin ja kafaloridiiniin. Taulukossa IX on esitetty näiden samojen yhdisteiden in vivo aktiviteetti.The following Table I shows the enzymatic degradation of some of the compounds prepared according to the invention compared to 3 known compounds cefamycin C (SF patent 45990), cephalothin and kafalalidin. Table IX shows the in vivo activity of these same compounds.

Tutkitut yhdisteet r1 R ' -N --S ^Test compounds r1 R '-N --S ^

/-Nv^-CH2-A/ -Nv ^ -CH2-A

o Io I

C00HC00H

Yhdiste R 1 R1 Λ 1 2-tienyyliasetyyli 0CH3 karbamoyylioksi 2 2-furyylia8etyyli 0CH3 karbamoyylioksi 3 fenyyliasetyyli 0CH3 karbamoyylioksiCompound R 1 R 1 Λ 1 2-thienylacetyl OCH 3 carbamoyloxy 2 2-furyl] ethyl OCH 3 carbamoyloxy 3 phenylacetyl OCH 3 carbamoyloxy

Kefamysiini C aminoadipoyyli 0CH3 karbamoyylioksiCefamycin C aminoadipoyl OCH 3 carbamoyloxy

Kefalotiini tienyyliasetyyli H asetyylioksiCephalothin thienylacetyl H acetyloxy

Kefaloridiini tienyyliasetyyli H pyridinium 57953 6Cephaloridine thienylacetyl H pyridinium 57953 6

Taulukko ITable I

Kefalosporiini-analogien entsymaattinen hajoaminenEnzymatic degradation of cephalosporin analogs

Inaktivoitumis-% *Inactivation% *

Yhdiste Escherichia coli Aerobacter cloacae entsyymi entsyymi 1 0 o 2 16 16 3 20 56Compound Escherichia coli Aerobacter cloacae enzyme enzyme 1 0 o 2 16 16 3 20 56

Kefamysiini C 0 71Cefamycin C 0 71

Kefalotiini >95 74Cephalothin> 95 74

Kefaloridiini >95 >95 xCephaloridine> 95> 95 x

Liuosta 250 ^lg/ml pidetty 37 C:ssa 3 tuntia.The solution was kept at 37 ug / ml at 37 ° C for 3 hours.

Kuten taulukon I arvoista ilmenee ovat keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet 1, 2, 3 huomattavasti vastustuskykyisempiä entsymaattista hajoamista vastaan kuin vertailuna käytetyt tunnetut yhdisteet.As can be seen from the values in Table I, the compounds 1, 2, 3 prepared according to the invention are considerably more resistant to enzymatic degradation than the known compounds used for comparison.

Taulukko XITable XI

Kefalosporiini-analogien in vivo aktiviteetti ED50 (/ug x 2 , s.c.)In vivo activity of cephalosporin analogs ED50 (μg x 2, s.c.)

Yhdiste Staph, aureus E. coli Proteus morganii 1 250 530 151 2 151 414 414 3 111 1,000 604Compound Staph, aureus E. coli Proteus morganii 1,250,530,151 2,151,414,414 3,111 1,000 604

Kefamysiini C 15,500 164 151Cefamycin C 15,500 164,151

Kefalotiini 14.0 1,210 >20,000Cephalothin 14.0 1,210> 20,000

Kefaloridiini 0.2 133 5,300 5 7 9 5 3Cephaloridine 0.2 133 5,300 5 7 9 5 3

Taulukosta II ilmenee että yhdisteiden aktiviteetti erikoisesti mikro-organismia Proteus morganii vastaan on selvästi parempi kuin vertailuyhdisteiden aktiviteetti.Table II shows that the activity of the compounds, in particular against the microorganism Proteus morganii, is clearly better than the activity of the reference compounds.

Keksinnön mukaisia tuotteita voidaan käyttää aktiivisena ainesosana yksinään tai yhdistelmänä erilaisissa farmaseuttisissa valmisteissa. Näitä antibiootteja ja niiden vastaavia suoloja voidaan käyttää kapseleissa tai tableteissa, jauheina tai liuoksina tai suspensioina tai eliksiireinä. Niitä voidaan annostella suun kautta, laskimonsisäisesti tai lihaksensisäisesti. Sopivia kantoaineita, joita voidaan käyttää mainituissa kokoomuksissa, ovat esim. mannitoli, sakkaroosi, glukoosi tai steriilit nesteet kuten vesi, suolaliuos, glykolit ja mineraali-, eläin-, kasvis- tai synteettistä alkuperää olevat öljyt, kuten esim. maapähkinäöljy, mineraaliöljy tai seesam-^ öljy. Myös kantoaineiden lisäksi voidaan kokoomuksissa käyttää mui ta ainesosia, kuten stabiloimis-, side-, hapettumisenestoaineita, säilöntäaineita, liukkaaksi tekeviä aineita, suspensoimisaineita, viskositeettiaineita tai makuaineita tai senkaltaisia. Lisäksi kokoomuksissa voi olla muita aktiivisia ainesosia antibioottisen vaikutuksen laajemman spektrin aikaansaamiseksi.The products according to the invention can be used as active ingredient alone or in combination in various pharmaceutical preparations. These antibiotics and their corresponding salts can be used in capsules or tablets, powders or solutions or suspensions or elixirs. They can be administered orally, intravenously or intramuscularly. Suitable carriers which can be used in said compositions include, for example, mannitol, sucrose, glucose or sterile liquids such as water, saline, glycols and oils of mineral, animal, vegetable or synthetic origin, such as peanut oil, mineral oil or sesame. ^ oil. In addition to carriers, other ingredients such as stabilizers, binders, antioxidants, preservatives, lubricants, suspending agents, viscosities or flavors or the like may also be used in the compositions. In addition, the compositions may contain other active ingredients to provide a broader spectrum of antibiotic activity.

Annettava annos riippuu suuressa määrin käsiteltävän kohteen tilasta ja potilaan painosta, jolloin parenteraalinen annostus on edullinen yleisiä infektioita varten ja suun kautta tapahtuva annostelu vatsainfektiota varten. Yleinen päivittäinen annos käsittää noin 15-600 mg aktiivista ainesosaa kg kohti ruumiinpainoa yhtenä tai useampana eränä päivässä. Yleensä päivittäinen annos on alueella noin 80 - 120 mg aktiivista ainesosaa kg kohti ruumiinpainoa.The dose to be administered depends to a large extent on the condition of the subject to be treated and the weight of the patient, with parenteral administration being preferred for common infections and oral administration for gastric infection. The general daily dose comprises about 15 to 600 mg of active ingredient per kg of body weight in one or more portions per day. Generally, the daily dose will be in the range of about 80 to 120 mg of active ingredient per kg of body weight.

Tuotteita voidaan annostella yksikköannosmuodoissa, esim. kiinteässä tai nestemäisessä muodossa suun kautta annettavassa annosmuo-dossa. Yksikköannos nestemäisenä tai kiinteänä sisältää yleensä noin "· 15 - 1500 mg aktiivista ainesosaa laskettuna valmisteen kokonaispai nosta; kuitenkin on yleensä edullista käyttää annospitoisuutta noin 250-1000 mg. Parenteraalista annostelua varten sisältää yksikköannos tavallisesti puhdasta yhdistettä lievästi happameksi tehdyssä steriilissä vesiliuoksessa tai liukoisena jauheena, joka on tarkoitettu liuotettavaksi.The products may be administered in unit dosage forms, e.g. in solid or liquid form for oral dosage. A unit dose in liquid or solid form generally contains about 15 to 1500 mg of active ingredient based on the total weight of the preparation; however, it is generally preferred to use a dosage level of about 250 to 1000 mg. For parenteral administration, a unit dose will usually contain the pure compound in a slightly acidified sterile aqueous solution or soluble powder. is intended to be dissolved.

Uudet 7-aminokefalosporaanihappojohdannaiset valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että 57953 käsitellään yhdistettä, jolla on kaava: OCH3The novel 7-aminocephalosporanic acid derivatives are prepared according to the invention by treating 57953 with a compound of the formula: OCH3

NHR2 0 SNHR2 0 S

H-C-(CH2)3-C-NH--( COOR3 * ΔH-C- (CH2) 3-C-NH- (COOR3 * Δ

-γ-CH2A-γ-CH2A

COOR8 OI g - jossa A merkitsee samaa kuin edellä, R merkitsee samaa kuin R tai esteritäh- ? 3COOR8 OI g - where A is the same as above, R is the same as R or an ester star? 3

dettä, P on alkoksikarbonyyliryhmä, joka mahdollisesti on halocrenoitu, ja RP is an alkoxycarbonyl group optionally halocrenalized, and R

on esteritähde, kaavan R'-X mukaisella asyylihalogenidilla, jossa R' merkitsee samaa kuin edellä ja X on halogeeni, bis-(tri-metyylisilyyli)-trifluoriasetamidin, N-trimetyylisilyyli-trifluori-asetamidin, N-trimetyylisilyyli-ftalimidin, etyyli-N-trimetyylisilyyli-karbamaatin tai N-trimetyylisilyylibentseenisulfonamidin läsnäollesssa, minkä jälkeen 5-alkoksikarbonyyliamino-5-karboksivaleryyliryhmä yhdisteessä, jolla on kaava: NHR2 0 OCH, q I M 3 a \ H-C-(CH2)3-C-N__S \ COOR3 R’ lis an ester residue, with an acyl halide of formula R'-X, wherein R 'is as defined above and X is halogen, bis- (trimethylsilyl) trifluoroacetamide, N-trimethylsilyl trifluoroacetamide, N-trimethylsilyl phthalimide, ethyl N in the presence of trimethylsilylcarbamate or N-trimethylsilylbenzenesulfonamide, followed by a 5-alkoxycarbonylamino-5-carboxyvaleryl group in a compound of formula: NHR20 OCH, q IM3a \ HC- (CH2) 3-C-N__S \ COOR3 R '1

-NN^-CH2A-NN ^ -CH2A

COOR8 o q gf jossa R', R , R , R ja A merkitsevät samaa kuin edellä, lohkaistaan, ja että mikäli saatu kaavan (I) mukainen tuote on esteri se lohkaistaan vastaavaksi vapaaksi hapoksi tai suolaksi ja haluttaessa suola muutetaan vastaavaksi hapoksi tai vapaa happo muutetaan vastaavaksi suolaksi.COOR8 oq gf wherein R ', R, R, R and A are as defined above are cleaved and that if the product of formula (I) obtained is an ester it is cleaved to the corresponding free acid or salt and if desired the salt is converted to the corresponding acid or free acid is converted to to the corresponding salt.

9 579539 57953

Keksinnön edullisen suoritusmuodon mukaan käsitellään yhdistettä, jolla on kaava: OCfL·According to a preferred embodiment of the invention, there is provided a compound of formula: OCfL ·

0 J0 J

HOOC-CH-(CH,), -CNH--/SN n ' 2 2 ° J-N A-ch2ocnh2 ° I 8HOOC-CH- (CH,), -CNH - / SN n '2 2 ° J-N A-ch2ocnh2 ° I 8

COORCOOR

2 8 jossa F ja R merkitsevät samaa kuin edellä, tai sen esteröityä johdannaista 2-tienyyli- tai 2-furyyliasetyylihalogenidilla ja bis-trimetyyli-silyylitrifluoriasetamidilla, minkä jälkeen saatu välituote lohkaistaan yhdisteen saamiseksi, jolla on kaava:28 wherein F and R are as defined above, or an esterified derivative thereof with 2-thienyl or 2-furylacetyl halide and bis-trimethylsilyltrifluoroacetamide, followed by cleavage of the resulting intermediate to give a compound of formula:

OCHOCH

° S° S

29 " R -C-NH-:-ζ N 0 -N Λ—CH.OCNH.29 "R -C-NH -: - ζ N O -N Λ-CH.OCNH.

o 1 COOR8 29 ....o 1 COOR8 29 ....

jossa R on 2-tienyylimetyyli tai 2-furyylimetyyli.wherein R is 2-thienylmethyl or 2-furylmethyl.

Keksinnön mukaisesti saadaan uusia tuotteita uudella menetelmällä, jossa 7-asyyliamidokefalosporiini-yhdisteen asyyliryhmä korvataan erilaisilla asyylisubstituenteilla. Tämän uuden menetelmän mukaisesti 7-asyyliamido-kefalosporiini-yhdisteen annetaan reagoida asyloimisaineen kanssa välituotteen 7-diasyyliamidokefa-losporiinin saamiseksi, joka sisältää kaksi erilaista asyylisubsti-tuenttia, ja sen jälkeen alkuperäinen asyyliryhmä lohkaistaan pois uuden 7-asyyliamidokefalosporiiniyhdisteen saamiseksi.According to the invention, new products are obtained by a new process in which the acyl group of the 7-acylamidocephalosporin compound is replaced by various acyl substituents. According to this new method, the 7-acylamido-cephalosporin compound is reacted with an acylating agent to give the intermediate 7-diacylamidocephalosporin, which contains two different acyl substituents, and then the original acyl group is cleaved off to form a new 7-acylamidocephalosporin compound.

in 57953in 57953

Edellä kuvatut reaktiot voidaan suorittaa käyttäen vapaata happoa, vaikkakin on yleensä todettu edulliseksi suojata karboksiryhmä muodostamalla sopiva esteri, joka voidaan helposti poistaa prosessin päätyttyä.The reactions described above can be performed using the free acid, although it has generally been found advantageous to protect the carboxy group by formation of a suitable ester which can be easily removed at the end of the process.

mämän menetelmän ensirrmäinen vaihe käsittää kefalosporiiniyhdisteen tai sen johdannaisen, jossa karboksyyliryhmä on suojattu, reaktion asyloimisaineen, edullisesti asyylihaiogenidin kanssa silyyliyhdisteen läsnäollessa 7-diasyyliamido-yhdisteen saamiseksi. Tämän tuotteen annetaan sitten reagoida alkuperäisen asyyli-substituentin poistamiseksi ja kefalosporiiniyhdisteen saamiseksi, jossa on uusi 7-asyyliamido-suhstituentti.The first step of this process comprises the reaction of a cephalosporin compound or a derivative thereof having a protected carboxyl group with an acylating agent, preferably an acyl halide, in the presence of a silyl compound to give a 7-diacylamido compound. This product is then reacted to remove the original acyl substituent to give a cephalosporin compound with a novel 7-acylamido substituent.

Ensirrmäinen vaihe diasyloidun tuotteen valmistamiseksi suoritetaan parhaiten saattamalla kefalosporiiniyhdiste hyvään kosketukseen asy loimisaineen kanssa sopivassa liuottimessa negatiivisesti substituoidur. amidin trisubstituoidun silyylijohdannaisen läsnäollessa. Reaktiolämpötila ei ole erikoisesti kriitillinen ja yleensä lämpötilat noin -20 - +1^0 °c ovat tyydyttäviä, vaikkakin on edullista suorittaa reaktio lämpötilassa noin 25 - 40 °C. Erilaisia liuottimia, jotka eivät sisällä aktiivista vetyä, kuten kloroformia, asetonitriiliä, metyleenikloridia, dioksaania, bertseeniä, halogeenibentseeniä, hiilitetrakloridia ja dietyy1ieette-riä käytetään reaktiossa kalkkein sopiviimtin.The first step for preparing the diacylated product is best performed by contacting the cephalosporin compound well with the acylating agent in a suitable solvent with a negative substituent. in the presence of a trisubstituted silyl derivative of an amide. The reaction temperature is not particularly critical and, in general, temperatures of about -20 to + 1 ° C are satisfactory, although it is preferable to carry out the reaction at a temperature of about 25 to 40 ° C. Various solvents which do not contain active hydrogen, such as chloroform, acetonitrile, methylene chloride, dioxane, bercene, halobenzene, carbon tetrachloride and diethyl ether, are used in the reaction with lime.

Yleensä on edullista suorittaa edellä esitetyt reaktiot käyttäen kefa-losporiiniyhdistettä, jossa karboksiryhmä on suojattu, koska sellaisilla johdannaisilla saadaan halutun tuotteen suurinnat saaliit. Tätä tarkoitusta varten karbok-sisubstituentti suojataan muodostamalla sopiva esteri, kuten bentsyyli-, bents-hydrvyli-, p-nitrofenyyli-, trimetyylisilyyli-, trikloorietoksi-, p-metoksibentsyy-li-, ftalimidcmetyyli- tai sukkinimidcmetyyliesteri, jotka voidaan helposti poistaa tunnetuilla menetelmillä. Lisäksi on yleensä edullista suojata mikä tahansa aminoryhmä, joka on läsnä kefalosporiinilähtöyhdisteestä, koska sellaisilla johdan^ naisilla saadaan haluttujen tuotteiden suurlimat saaliit. Tätä tarkoitusta varten suojataan ryhmät edullisesti substituenteilla, jotka ovat helposti poistettavissa. Sellaiset ryhmät ovat hyvin tunnettuja tällä alalla. Esim. aminoryhmä suojataan sopivimmin sellaisella ryhmällä kuin trikloorietoksikarbonyyli, t-butoksikarbonyyli, bentsoyylimetoksikarbonyyli, trimetyylisilyyli, p~metoksibentsyylioksi, o-nitro-fenyylitio ja senkaltainen.In general, it is preferable to carry out the above reactions using a cephalosporin compound in which the carboxy group is protected, since such derivatives give the highest yields of the desired product. For this purpose, the carboxy substituent is protected by the formation of a suitable ester such as benzyl, benzhydryl, p-nitrophenyl, trimethylsilyl, trichloroethoxy, p-methoxybenzyl, phthalimide methyl or succinimide methyl ester, which can be easily removed by known methods. In addition, it is generally preferred to protect any amino group present from the cephalosporin starting compound, as such derivatives provide high yields of the desired products. For this purpose, the groups are preferably protected by substituents which can be easily removed. Such groups are well known in the art. For example, the amino group is preferably protected with a group such as trichloroethoxycarbonyl, t-butoxycarbonyl, benzoylmethoxycarbonyl, trimethylsilyl, p-methoxybenzyloxy, o-nitrophenylthio and the like.

1111

Alkuperäisen asyyliryhmän lohkaisemisvaihe voidaan suorittaa usealla tavalla, nimittäin pidentämällä reaktioaikaa, lisäämällä alkoholia kuten alempaa alkanolia tai alempaa alkyylitiolia, tai hydrolysoimalla vesiliuoksessa, joka sisältää pienen määrän happoa tai emästä. Siten eräissä tapauksissa lohkaiseminen suoritetaan lisäämällä alempaa alkanolia tai alempaa alkyylitiolia, joka sisältää 1-5 hiiliatomia, aralkanolia kuten bentsyylialkoholia tai vastaavaa tiolia. Lohkaisemalla saadaan haluttu monoasyloitu kefalosporiiniyhdiste tai voidaan saada monoasvloituyhdisteiden seos. Viimeksimainitussa tapauksessa haluttu monoasyloitu kefalosporiiniyhdiste otetaan talteen erottamalla, kuten krcmatografoimalla.The cleavage step of the initial acyl group can be performed in several ways, namely, by extending the reaction time, by adding an alcohol such as a lower alkanol or a lower alkylthiol, or by hydrolysis in an aqueous solution containing a small amount of acid or base. Thus, in some cases, the cleavage is performed by the addition of a lower alkanol or a lower alkyl thiol containing 1 to 5 carbon atoms, an aralkanol such as benzyl alcohol or a similar thiol. Cleavage gives the desired monoacylated cephalosporin compound or a mixture of monoacylated compounds can be obtained. In the latter case, the desired monoacylated cephalosporin compound is recovered by separation, such as chromatography.

Kun aminoadipoyy1i-osan amino-substituentin suojaryhmä, kuten trikloori-etoksikarbonyyli tai t-butoksikarbonyyli poistetaan sopivalla tavalla tapahtuu amino-adipoyy 1 iryhmän valikoiva lohkeaminen. Aminoryhmän suojaryhmän tämä poistaminen johtaa ilmeisesti aminoadipoyy 1 iryhmän sisäiseen syklisoitumiseen, josta tuloksena on alfa-karboksyyliesterin lohkeaminen, jolla on kaava ROOT-/= 0When the protecting group of the amino substituent of the aminoadipoyl moiety, such as trichloroethoxycarbonyl or t-butoxycarbonyl, is suitably removed, selective cleavage of the aminoadipoyl group occurs. This removal of the amino protecting group apparently results in intracyclization of the aminoadipoyl group 1, resulting in cleavage of the alpha-carboxylic ester of formula ROOT - / = 0

NOF

Vaikkakin lohkeamisen mekaniikka on edellä esitetty, niin ei kuitenkaan haluta sitoutua tähän lohkeamisen selitykseen, koska myöhenmät tutkimukset voivat osoittaa, että tuote lohkeaa ja poistuu jollakin muulla tavalla. Tämä lohkeamisen _ selostus on esitetty yksinomaan keksinnön parempaa ymmärtämistä, varten.Although the mechanics of cleavage have been outlined above, there is no desire to be bound by this explanation of cleavage, as later studies may indicate that the product cleaves and is removed in some other way. This description of cleavage is provided solely for a better understanding of the invention.

12 5795312 57953

Amino- ja karboksi-funktioilla olevien suojaryhmien lohkaiseminen suoritetaan sinänsä tunnetulla tavalla. Siten esim. trikloorietoksikarbonyyliryhmä poistetaan antamalla reagoida sinkin ja etikkahapon kanssa ja t-butoksikarbonyyli-ja bentshydryyli-ryhmän poistetaan antamalla reagoida trifluorietikkahapon kanssa.Cleavage of the protecting groups on the amino and carboxy functions is carried out in a manner known per se. Thus, for example, the trichloroethoxycarbonyl group is removed by reacting with zinc and acetic acid and the t-butoxycarbonyl and benzhydryl group is removed by reacting with trifluoroacetic acid.

Keksinnön mukaisen menetelmien täydellistä ymmärtämistä varten esitetään seuraavat suoritusmuodot. Siten 7-(D-5'-amino-5'-karboksivaleramido)-3-karbamoyyli-oksimetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-4-karbonihappo muutetaan vastaavaksi 7-(2-tienyyliasetamido)-yhdisteeksi seuraavien reaktioiden avulla:For a full understanding of the methods of the invention, the following embodiments are presented. Thus, 7- (D-5'-amino-5'-carboxivaleramido) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-4-carboxylic acid is converted to the corresponding 7- (2-thienylacetamido) compound by the following reactions:

NIL· 0 JINIL · 0 JI

' ' " ' OCIL· s.'' "'OCIL · s.

H-C--(CH2)3C-N- \ COOll _N Λ -CH^OCONIL· .'fH-C - (CH2) 3C-N- \ COO11 _N Λ -CH ^ OCONIL · .'f

COOIICOOII

0 ti C0CII2CC130 ti C0CII2CC13

NH O HNH O H

1 " 1 OCIL· S1 "1 OCIL · S

H-C-(CH )3C-N-_I—/ NH-C- (CH) 3 C-N-_I- / N

COOH _N ✓ -CHo0C0mL· S Y 2 2COOH _N ✓ -CHo0C0mL · S Y 2 2

COOHCOOH

t O \ /t O \ /

IIII

C-0CH2CC13C 0CH2CC13

NH O IINH O II

’ " ’ OCIL· S'' 'OCIL · S

H-c-(ch2)3c-n-_rL·/ \ COOCH0„ _N x -CH-OCONIL· 2 // VX 2 2H-c- (ch2) 3c-n-_rL · / \ COOCH0 „_N x -CH-OCONIL · 2 // VX 2 2

0 T0 T

COOCH02 13 5795 3COOCH02 13 5795 3

I II I

C.-UO"2C.CT3 CM ,3> 1511 0 ' 2 OCH ' ' ' " c-o 3 Sv ^ H-C--(CH2)3C-N·----^ \ COOCH0„ N A -CM„OCONII„C.-UO "2C.CT3 CM, 3> 1511 0 '2 OCH' ''" "c-o 3 Sv ^ H-C - (CH2) 3C-N · ---- ^ \ COOCH0„ N A -CM „OCONII„

!— T! - T

COOCII02COOCII02

VV

,- 0 II, - 0 II

II " ' OCH. Sv _N Λ -ClIo0C0NIIo // Y 2 2 COOCH02 ]/ - 0 11 ΠΓΗ II "' 3 /\ -N / -CH-OCOHII- o'' \II "'OCH. Sv _N Λ -ClIo0C0NIIo // Y 2 2 COOCH02] / - 0 11 ΠΓΗ II"' 3 / \ -N / -CH-OCOHII- o '' \

COOHCOOH

14 5795314 57953

Kuvatussa prosessissa lähtöyhdiste asyloidaan antamalla reagoida trikloorietoksikarbonyylikloridin kanssa N-trikloorietoksi-karbonyyli-johdannaisen saamiseksi, joka alkyloidaan difenyylidi-atsometaanilla, jolloin saadaan dibentshydryyliesteri. Annettaessa saadun kefalosporiiniyhdisteen reagoida trimetyylisilyylitrifluori-asetamidin ja 2-tienyyliasetyylikloridin kanssa saadaan 7-^(0-5^ trikloorietoksikarbonyyliamino-5’-karboksivaleryyli)-(2-tienyyli-asetyyliamino^-yhdiste. Tämä aminoadipoyyliryhmä lohkaistaan sitten antamalla reagoida sinkin kanssa hapon läsnäollessa, jolloin saadaan 3-karbamoyylioksimetyyli-7-(2-tienyyliasetamidodekefalospo-raanihapon bentshydryyliesteri, josta poistetaan suojaryhmä bentshyd-ryyliryhmä ja muodostetaan vapaa happo. Tämä tuote voidaan muuttaa suolaksi sinänsä tunnetulla tavalla.In the process described, the starting compound is acylated by reacting with trichloroethoxycarbonyl chloride to give an N-trichloroethoxycarbonyl derivative which is alkylated with diphenyldiisomethane to give the dibenzhydryl ester. Reaction of the resulting cephalosporin compound with trimethylsilyl trifluoroacetamide and 2-thienylacetyl chloride gives 7- (0-5 ^ trichloroethoxycarbonylamino-5'-carboxyvaleryl) - (2-thienylacetylamino) in the presence of an acid, then reacting the amino group with this aminoadipoyl. to give the benzhydryl ester of 3-carbamoyloxymethyl-7- (2-thienylacetamidodecephalosporanic acid), from which the benzhydryl group is deprotected and the free acid is formed.This product can be converted into a salt in a manner known per se.

Asyloimisaineita, jotka on määritelty R':n yhteydessä, voidaan käyttää 2-tienyyliasetyylikloridin asemesta edellä kuvatussa reaktiokaaviossa vastaavien 7-asyyliamidokefeemiyhdisteiden muodostamiseksi. Käytettäessä sellaisia asyloimisaineita on vältettävä asyloimisaineiden käyttö, jotka sisältävät substituentteja, jotka vaikuttavat reaktion aikana. Tämä trans-asyloimismenetelmä on arvokas edistys tällä alalla, koska sillä aikaansaadaan keino valmistaa kefalosporiineja, jotka sisältävät erilaisia 7-syyliamido-suhstituentteja aminoadipqyyliamido-ryhrnän asemesta ja tällöin vältetään tarve muuttaa ensinnä tunnetut kefalosporiinit vastaavaksi 7-amino-kefalosporaanihappo-yhdisteeksi ja sen jälkeen asyloida tämä tuote.The acylating agents defined in connection with R 'can be used in place of 2-thienylacetyl chloride in the reaction scheme described above to form the corresponding 7-acylamidocephem compounds. When using such acylating agents, the use of acylating agents containing substituents which act during the reaction must be avoided. This method of trans-acylation is a valuable advance in this field because it provides a means of preparing cephalosporins containing various 7-cylamido substituents instead of an aminoadipylamido group, thus avoiding the need to convert the first known cephalosporins to the corresponding 7-amino-cephalospora product.

Seuraavat esimerkit kuvaavat keksintö.The following examples illustrate the invention.

15 5 7 9 5 315 5 7 9 5 3

Esimerkki 1 3-k arb funoy y 1 i ok s i juo ty y 1 i - 7-me t ok s i - f e ny y 1 i as e t tun i do - 3-k e f e emi - - karbonihappoExample 1 3-k arb funoy y 1 i ok s i juo ty y 1 i - 7-me t ok s i - f e ny y 1 i as e t tun i do - 3-k e f e emi - - carboxylic acid

Vaihe A: 7/2>-(D~5'-trikloorietoksikarbonyyliamino-5'-karboksivaleramido)-3_ karbanoyylioksiaetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-l*-karbonihappo 7 ^&-(D-5-enino-5-knrboksivaIeraraido)-3-karbaTioyylioksiinetyyli-7 "Vietoksi ~3~ kefeem?.-l«-karbonihapon mono-natriumsuola (20,5 g) liuotetaan seokseen, jossa on 80 ml asetonia ja 2^0 ml 10 2:sta dinaliumvetyfosfaattia. Tähän liuokseen lisätään pisaroittain 25 g (118 mnoolia) trikloorietoksikarbonyylikloridia 80 ml:ssa asetonia. Lisäyksen aikana liuoksen pH pidetään arvossa 9>1 lisäämällä 2,U N natrium-hydroksidiliuosta. 30 minuutin kuluttua seos uutetaan etyyliasetaatilla, etyyli-asetaattikerros poistetaan ja vesikerros tehiään happameksi pH-arvoon 2,5 väkevällä kloorivetyhapolla, Saostunut tuote uutetaan etyyliasetaatilla. Sen jälkeen kun on kuivattu natriumsuifaati11a ja liuotin poistettu tyhjössä, saadaan otsikoitu yhdiste öljynä. UV: (CI^OH) Amaks. 262,5 £=5^50Step A: 7/2> - (D-5'-Trichloro-ethoxycarbonylamino-5'-carboxy-valeramido) -3-carbanoyloxy-ethyl-7-methoxy-3-cephem-1 * -carboxylic acid N - (- D-5-enino-5- The monosodium salt of 3-carboxythioyloxyethyl-7 "-ethoxy-3-cephem-1'-carboxylic acid (20.5 g) is dissolved in a mixture of 80 ml of acetone and 2 x 10 ml of 10 2 dinium hydrogen phosphate. 25 g (118 mol) of trichloroethoxycarbonyl chloride in 80 ml of acetone are added dropwise to the solution, the pH of the solution being maintained at 9> 1 by the addition of 2N sodium hydroxide solution, after 30 minutes the mixture is extracted with ethyl acetate, the ethyl acetate layer is removed and the aqueous layer is 2.5 with concentrated hydrochloric acid, The precipitated product is extracted with ethyl acetate, dried over sodium sulphate and the solvent removed in vacuo to give the title compound as an oil UV: (CI / OH) Ammax 262.5 £ = 5 ^ 50

NMR: (liuotin - DMS0, dg) ^=3,^3 (0-C1L·, s), U,73 (2-Η„, osaksi näkyvä), h Ai CC1TNMR: (solvent - DMSO, dg) δ = 3. ^ 3 (O-ClL ·, s), U, 73 (2-δ „, partially visible), h Al CCl 3

* (CH2-0, s), 5,12 (6-11, s),^,7U (10-H2, osaksi näkyvä).* (CH 2 -O, s), 5.12 (6-11, s), β, 7U (10-H 2, partially visible).

Vaihe B: 7^^-(D-5,-trikloorietoksikarbonyylianino-5'-karboksivaleramido)- 3-karbaraoyylioksimetyyli-7~metoksi-3-kefeemi-li-karbonihapon dibentshydryylieoteri.Step B: N, N- (D-5'-Trichloro-ethoxycarbonyl-amino-5'-carboxy-valeramido) -3-carbaraoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-1-carboxylic acid dibenzhydryl ether.

Liuokseen, jossa on edellä saatua 7^>-(D-5 '-trikloorietoksikarbonyyliamino-5,-karboksivaleramido)-3-karbaInoyylioksiπletyyli-7-lnetoksi-3-kc;feerni-l4-karbonihappoa 500 nl:ssa etyyliasetaattia, lisätään 17 g difenyylidiatsometaania 200 ml:ssa eetteriä. Sen jälkeen kun on sekoitettu yli yön uutetaan peräkkäin natriumbikarbonaatilla ja natriumkloridi liuoksella. Liuotin haihdutetaan kuivatusta liuoksesta, jolloin saadaan raakatuote, joka puhdistetaan kromatografoimalla silikageelillä. Eluoimista varten käytetään kloroformin etyyliasetaatin seosta 2:1. Tällä aineella on yksinkertainen täplä TLC-kromatografiassa. UV: (Cii^Oll) ^maks. 2Ö50yum £7000 NMR: (liuotin - CDC13) (0-CHj, s), 3,35 (2-H2, osaksi näkyvä, 14,69 (Sfi^o, s), 5,03 (6-11, s), ^14,88 (lO-llg, osaksi näkyvä).To a solution of the 7- (D-5'-trichloroethoxycarbonylamino-5, -carboxivaleramido) -3-carbamoyloxylethyl-7-methoxy-3-carboxy-14-carboxylic acid obtained above in 500 nl of ethyl acetate is added 17 g of diphenyldiazomethane in 200 ml of ether. After stirring overnight, it is extracted successively with sodium bicarbonate and sodium chloride solution. The solvent is evaporated from the dried solution to give a crude product which is purified by chromatography on silica gel. A 2: 1 mixture of chloroform and ethyl acetate is used for elution. This material has a simple spot on TLC chromatography. UV: (Cii ^ Oll) ^ max. 205 μm δ 7000 NMR: (solvent - CDCl 3) (O-CH 2, s), 3.35 (2-H 2, partially visible, 14.69 (SfiO 0, s), 5.03 (6-11, s)) , ^ 14.88 (10-1lg, partially visible).

5795 35795 3

Vaihe C: '^/^-/Jd-5 ’--trikloorietoksikarbonyyliamino-5 1-karboksivalcryyli) fenasetyyliaining7“3_karl)amoyyliokr.inetyyli-T-:netokGi-3-kefeemi-U-karbonihapon dibentshydryyliesteriStep C: (N, N-5'-Trichloroethoxycarbonylamino-5'-carboxyvalcryl) phenacetylamino] (3-carbyl) amoylochromethyl-T-: netoxyl-3-cephem-U-carboxylic acid dibenzhydryl ester

Seoksen, jossa on 1,1 e (1,18 millimoolia) 7//^*(D“5’-ti’ikloorietoksikarbo-nyyliamino-5 ’ -karboksivaleranido)-3"karbamoyylioksimotyyli-7-raetoksi-3-kefecmi-l<-karbonihapon dibcnt.shydryyliesteri, 5 ml asetonitriili ä ja 3 ml bis-trimetyyli-silyyli-trifluoriar.etamidia annetaan olla huoneenlämpötilassa 6 tuntia. Tämän jälkeen haihtuvat tuotteet poistetaan suurtyhjössä ja jäännös liuotetaan 3 ml:aan metyleenikloridia. Tähän liuokseen lisätään 0,23 ml (1,79 millimoolia) fenyyliase-tyylikloridia ja seoksen annetaan seistä huoneen lämpötilassa 65 tuntia. Sen jälkeen liuos haihdutetaan ja jäännös liuotetaan 5 ml:aan tetrahydrofuraania ja 0,7 ml:aan 2,5 N kloorivetyhappoa. 20 minuutin reaktioajan jälkeen liuotin haihdutetaan ja jäännös jaetaan metyleenikloridin ja natriumbikarbonaattiliuoksen kesken. Orgaaninen kerros pestään natriumkloridiliuoksella, kuivataan ja haihdutetaan kuiviin. Siten saatu raakatuote puhdistetaan kromatocrafoimalla silik.'geelilla käyttäen kloroformi/etyyliasetaattia 95:5 eluanttina. Otsikoitu yhdiste on homogeeninen ohutkerros kronatografiassa. UV: (ClI^OH) ^jnoks. 26ä0^um 6650 NMR: (liuotin - CDC13) (.=3,50 (0-CII3, s), 3,31 (2-Hg, osaksi näkyvä), CC1 !»,67 (CH^-O, s), 5»0ä (6-H, s), l<,96 (10-Hg, osaksi näkyvä), 3,95 (13-Η?, s).A mixture of 1.1 e (1.18 mmol) of 7H-* (D'5'-thichloroethoxycarbonylamino-5'-carboxivaleranido) -3 "carbamoyloxymotyl-7-methoxy-3-cephec-1 Dibecrylhydryl ester of carboxylic acid, 5 ml of acetonitrile and 3 ml of bis-trimethylsilyl-trifluoroacetamide are allowed to stand at room temperature for 6 hours, then the volatiles are removed under high vacuum and the residue is dissolved in 3 ml of methylene chloride. ml (1.79 mmol) of phenylacetyl chloride and the mixture is allowed to stand at room temperature for 65 hours, then the solution is evaporated and the residue is dissolved in 5 ml of tetrahydrofuran and 0.7 ml of 2.5 N hydrochloric acid. and the residue is partitioned between methylene chloride and sodium bicarbonate solution The organic layer is washed with brine, dried and evaporated to dryness, and the crude product thus obtained is purified by chromatography on silica gel using chloroform / ethyl acetate. a 95: 5 as eluent. The title compound is a homogeneous thin layer in chronography. UV: (ClI ^ OH) ^ jnoks. 26 DEG C. 666 NMR: (solvent - CDCl3) (. = 3.50 (O-Cl3, s), 3.31 (2-Hg, partially visible), CCl @ 1.67 (CH2-O, s)). , 5 »0 (6-H, s), 1 <, 96 (10-Hg, partially visible), 3.95 (13-Η ?, s).

Vaihe D: 3-kar,bamoyylioksimetyyli-7metoksi-7/^-i‘enyyliasetamido-3-kefeemi-t|-karbonihapon bentshydryyliesteriStep D: 3-Carbamoylamoxymethyl-7-methoxy-7H-phenylacetamido-3-cephem-β-carboxylic acid benzhydryl ester

Liuokseen, jossa on lOU mg '^/^i-£(D-5 '-trikloorietoksikarbonyylianino-S'-karboksivaleryyli )fenasetyyliamino/-3-karbamoyylioksinetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-U-karbonihapon dibentshydryyliesteriä 1 ml:ssa 90 3:sta etikkahappo/vettä, sekoitetaan 100 mg:n kanssa sinkkipölyä 5 tuntia. Sen jälkeen liuos suodatetaan ja liuotin poistetaan tyhjössä. Jäännös jaetaan metyleenikloridin ja veden kesken ja metyleeni-kloridikerros uutetaan natriumbikarbonaatilla ja natriumkloridiliuoksella. Kuivaamisen ja haihduttamisen jälkeen saadaan raakatuote, joka puhdistetaan ohutkerroskro-matografialla käyttäen silikalevyä ja kloroformin ja etyyliasetaatin seosta 3:2. Tuotteelle on tunnusomaista IR- ja NMR-spektrit. IR: (CHC13) 1700, 1730 ja 1680 cm-1 UV: (CJ^OH) maks. 261»0^u m 5870 MMR: (liuotin - CDC13) ¢/=3,^0 (0-CH3, s), 3,33 (2-Hg, osaksi nflkyvä), 5,01 (6-il, s), U,83 (lO-Hg, osaksi näkyvä), 3,60 (13-Hg, s).To a solution of LOU mg of N, N - ((D-5'-trichloroethoxycarbonylamino-S'-carboxivaleryl) phenacetylamino) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-U-carboxylic acid dibenzhydryl ester in 1 ml of 90 3 acetic acid / water, mixed with 100 mg of zinc dust for 5 hours. The solution is then filtered and the solvent is removed in vacuo. The residue is partitioned between methylene chloride and water and the methylene chloride layer is extracted with sodium bicarbonate and brine. After drying and evaporation, the crude product is obtained, which is purified by thin-layer chromatography using a silica plate and a 3: 2 mixture of chloroform and ethyl acetate. The product is characterized by IR and NMR spectra. IR: (CHCl 3) 1700, 1730 and 1680 cm -1 UV: (CH 2 Cl 2) max 261 → 0 μm 5870 MMR: (solvent - CDCl 3) ¢ / = 3.0 (0-CH 3, s), 3.33 (2-Hg, partially visible), 5.01 (6-yl, s), U, 83 (10-Hg, partially visible), 3.60 (13-Hg, s).

Vaihe E: 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-7/i-fonyyliasetamido-3-kefeemi-U-karbonihappo 17 mg 3“karbamoyylioksimetyyli-7-mctoksi-7/?'-fenyyliasctanido-3-kefeeni-l»-karbonihapon bentcliydryyliesteriä liuotetaan 0,2 ml:aan anisolia ja käsitellään 17 57953 0,5 ml:11a trifluorietikkahappoa 5 minuuttia. Sen jälkeen seos väkevöi-dään nopeasti suurtyhjössä ja laimennetaan etyyliasetaatilla. Tuote poistetaan etyyliasetaattiliuoksesta uuttamalla natriumfosfaattipusku-rilla pH 7,5. Puskuriliuos tehdään happameksi pH-arvoon 2,5 laimealla kloorivetyhapolla ja otsikoitu yhdiste poistetaan uuttamalla etyyliasetaatilla. Liuoksen kuivaamisen ja haihduttamisen jälkeen saadaan tuote. Analyyttinen näyte saadaan kiteyttämällä uudelleen etyyliasetaatista,^. 159-161ÖC. UV: (pH 7 puskuri) ^maks. 2670yUm £8650 IR: (CH3CN) 1780, 1735 ja 1700 NMR: (liuotin - CDgCN + D20)£=3,42 (0-CHg, s), 3,35 (2-H2, osaksi näkyvä), 5,01 (6-H,s) , 4,83 (10-H2, d), 3,01 (13-H2, s).Step E: 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7H-phenylacetamido-3-cephem-β-carboxylic acid 17 mg 3'-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7H-phenylacetanido-3-cephene-1-carboxylic acid benzyl acid ester is dissolved in 0.2 ml of anisole and treated with 17 57953 0.5 ml of trifluoroacetic acid for 5 minutes. The mixture is then rapidly concentrated under high vacuum and diluted with ethyl acetate. The product is removed from the ethyl acetate solution by extraction with sodium phosphate buffer pH 7.5. The buffer solution is acidified to pH 2.5 with dilute hydrochloric acid and the title compound is removed by extraction with ethyl acetate. After drying and evaporating the solution, the product is obtained. An analytical sample is obtained by recrystallization from ethyl acetate, ^. 159-161ÖC. UV: (pH 7 buffer) ^ max. 2670 μm δ 8650 IR: (CH 3 CN) 1780, 1735 and 1700 NMR: (solvent - CD 3 CN + D 2 O) δ = 3.42 (O-CH 2, s), 3.35 (2-H 2, partially visible), 5.01 (6-H, s), 4.83 (10-H 2, d), 3.01 (13-H 2, s).

Alkuaineanalyysi yhdisteelle ci8H19°7N3S: Löydetty: C, 51,29; H, 4,54;Elemental analysis for C 18 H 19 O 7 N 3 S: Found: C, 51.29; H, 4.54;

Laskettu: C, 51,47; H, 4,73.Calculated: C, 51.47; H, 4.73.

2 g edellä mainittua happoa liuotetaan 1 pisaraan metanolia ja käsitellään liuoksella, jossa on 2 mg dibentsyylietyleenidiamiinidi-asetaattia etyyliasetaatissa. Otsikoidun yhdisteen dibentsyylietyleeni-diamiinisuola saostuu seistessä neulamaisina kiteinä, sp. 140-143°C.2 g of the above acid are dissolved in 1 drop of methanol and treated with a solution of 2 mg of dibenzylethylenediamine diacetate in ethyl acetate. The dibenzylethylenediamine salt of the title compound precipitates on standing as needle-like crystals, m.p. 140-143 ° C.

UV: (CH30H) ^maks. 263/um £8600,UV: (CH 3 OH) ν max. 263 / um £ 8600,

Esimerkki 2 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-^-fenyyliasetamido-3- kefeemi-4-karbonihappoExample 2 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-N-phenylacetamido-3-cephem-4-carboxylic acid

Vaihe A: ^-^(D-S'-trikloorietoksikarbonyyliamino-S’-karboksi-valeryyli)-fenyyliasetyyliamino^-3-karbamoyylioksime-tyy 1 i-7- m etoksi-3 -tefeemi-4-karborahapon dibentslydryyliesteri 9,3 g (10 millimoolia) ^-(D-5-trikloorietoksikarbonyyliamino- 5-karboksivaleramido)-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-4-karbonihapon di-bentshydryyliesterin liuosta, 7,8 g (40 millimoolia) M-trimetyylisilyyliftalimidiä ja 5,3 ml (40 millimoolia) fenyyliasetyy-likloridia 50 ml:ssa asetoninitriiliä kuumennetaan 40°Gssa 20 tuntia. Sen jälkeen seos jäähdytetään huoneenlämpötilaan ja suodatetaan. Suodos haihdutetaan kuiviin ja sekoitetaan heksaanin kanssa. Liukenematon tähde, joka sisältää ^-^TD-S'-trikloorietoksikarbonyyliamino-S'-karb-oksivaleryyli)fenyyliasetyyliamino/-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi- 3-kefeemi-4-karbonihapon dibentshydryyliesterin, käytetään puhdistamatta seuraavassa vaiheessa.Step A: N - [(D-S'-Trichloro-ethoxycarbonylamino-S'-carboxy-valeryl) -phenylacetylamino] -3-carbamoyloxymethyl] -7-methoxy-3-thephem-4-carboxylic acid dibenzlyltyl ester 9.3 g (10 mmol) of N- (D-5-trichloroethoxycarbonylamino-5-carboxivaleramido) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-4-carboxylic acid dibenzhydryl ester solution, 7.8 g (40 mmol) of M-trimethylsilylphthalimide 5.3 ml (40 mmol) of phenylacetyl chloride in 50 ml of acetonitrile are heated at 40 [deg.] C. for 20 hours. The mixture is then cooled to room temperature and filtered. The filtrate is evaporated to dryness and mixed with hexane. An insoluble residue containing (N- (TD-S'-trichloroethoxycarbonylamino-S'-carboxivaleryl) phenylacetylamino) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-4-carboxylic acid dibenzhydryl ester is used without purification in the next step.

Vaihe B: 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-^-fenyyliasetamido- 3-kefeemi-4-karbon ihapon bent shydryy1ie steri Vaiheesta A saatu raakatuote liuotetaan seokseen, jossa on 50 ml etyyliasetaattia, 45 ml etikkahappoa ja 5 ml vettä. Tähän liuokseen lisätään 20 g sink-kijauhetta ja seosta sekoitetaan huoieenlämpötilassa 4tuntia. Tämän jälkeen yli- m 57953 I * määrä sinkki poistetaan suodattamalla ja suodos jaetaan etyyliasetaatin ja veden kesken. Orgaaninen kerros pestään natriumbikarbonaattiliuoksclla ja vedellä, kuivataan ja liuotetaan, oitten saatu raakatuote puhdistetaan kromatografoimalla käyttäen 1 kg silikagceliä ja eluoiden kloroformi, hekr.aanin ja metanolin seoksella (l*7:ä7:6). Saadulla tuotteella on esimerkin 1, vaiheessaD kuvatut fysikaaliset ominaisuudet.Step B: 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-β-phenylacetamido-3-cephem-4-carboxylic acid Benzhydryl ester The crude product from Step A is dissolved in a mixture of 50 ml of ethyl acetate, 45 ml of acetic acid and 5 ml of water. To this solution is added 20 g of zinc powder and the mixture is stirred at room temperature for 4 hours. The excess z 57953 I * zinc is then removed by filtration and the filtrate is partitioned between ethyl acetate and water. The organic layer is washed with sodium bicarbonate solution and water, dried and dissolved, and the crude product obtained is purified by chromatography on 1 kg of silica gel, eluting with a mixture of chloroform, hexane and methanol (1 * 7: 7: 6). The product obtained has the physical properties described in Example 1, Step D.

Vaihe C: 3-karbamoyyli oks imetyyli-7~metoks i-'^’-fenyyli as et ami do-3-ke feerai -ä-karbonihappoStep C: 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-phenyl-acetyl-3-cera-α-carboxylic acid

Otsikoitu yhdiste valmistetaan esimerkin 1 vaiheessa S kuvatulla tavalla ja sillä on samat fysikaaliset ominaisuudet kuin esimerkin 1 tuotteella.The title compound is prepared as described in Example 1, Step S and has the same physical properties as the product of Example 1.

Esimerkki 3 3-karbamoyylioks imetyyli-7-metoks 2-tienyyliaset ami do)-3~ke feemi-b- karbonihappoExample 3 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-2-thienylacetamide-3-cephem-b-carboxylic acid

Vaihe A: 7/^-/10-5'-trikloorietoksikarbonyyliamino-5'-karboksivaleryyli)- 2-tienyyliasetyyliamino?-3"karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-li-karbonihapon di-bentshydryyli-esteri Seosta, jossa on 6,0 g (6,3 millimoolia) T^-(D_5,-trikloorietoksikarbo-nyyliamino-5'-karboksivaleramido)-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-ä-karbonihapon dibentsyyliesteri , ItJ g (1)0 millimoolia) H-trimetyylisilyyli-trifluo-riasetamidia, 3,1*2 ml (25 millimoolia) 2-tienyyliasetyylikloridia ja 50 ml kloroformia, lämmitetään Vf°C:ssa 16 tuntia. Sen jälkeei. kun liuotin on poistettu haihduttamalla uutetaan raaka reaktioseos heksaanilla ja puhdistetaan edelleen krona-tografoimalla käyttäen 1 kg silikageeliä ja eluoiden 10 % :11a.etyyliasetaatilla kloroformissa. UV: (CH^OH) / maks. 2Ö5^um 65310 NMR: (liuotin - CDC1 ) <f=3,53 (-0CH , s),/~ 3,1* (2-H^, d), . , CC1 0 * d * (CH^-O, s), 5,05 (6-H, s),-— 5,0 (lO-Hg, osaksi näkyvä), U,15 (15-II2, s).Step A: (N- (10-5'-Trichloro-ethoxycarbonylamino-5'-carboxy-valeryl) -2-thienyl-acetylamino] -3 "-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-1-carboxylic acid dibenzhydryl ester A mixture of 6.0 g (6.3 mmol) of N- (D_5, -trichloroethoxycarbonylamino-5'-carboxivaleramido) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-.beta.-carboxylic acid dibenzyl ester, ItJ g (1) 0 H-trimethylsilyl-trifluoroacetamide, 3.1 * 2 ml (25 millimoles) of 2-thienylacetyl chloride and 50 ml of chloroform are heated at Vf for 16 hours, after which the crude reaction mixture is extracted with hexane and the solvent is removed by evaporation. further purified by chronographic chromatography on 1 kg of silica gel eluting with 10% ethyl acetate in chloroform UV: (CH 2 OH) / max 205 65310 NMR: (solvent - CDCl 3) δ = 3.53 (-OCH, s), β-3.1 * (2-H 2, d),., CCl 0 * d * (CH 2 -O, s), 5.05 (6-H, s), (10-Hg, partially visible), U, 15 (15-II2, s).

Vaihe B: 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-7/5“(2-tienyyliasetanido)-3-kefeemi-*4-karbonihapon bentshydryyliesteri ä,2 g (3,8 millimoolia) 7/2>-£(D-51 -trikloorietoksikarbonyylicmino-5'-karheksi vale ryy li )-2-ti e nyy li asetyyli amino}-3-karbamoyyli oks ime tyyli-7-metoksi-3-ke f ee-mi-li-karbonihapon di-bentshydryyli-esteriä liuotetaan 30 ral:aan etyyliasetaattia ja lisätään 30 ml 90 i»:sta vesipitoista etikkahappoa ja 12 g sinkkipölyä. Seosta sekoitetaan voimakkaasti 5 1/2 tuntia huoneenlämpötilassa. Sen jälkeen kun sinkki on suodatettu pois poistetaan ylimäärä etikkahappoa pesemällä etyyliasetaattiliuos vedellä. Otsikoitu yhdiste eristetään esimerkin 1 vaiheessa D kuvatulla tavalla. Sille on tunnusomaista TLC:llä (7 £ ci^OH CHCl^n-heksäänissä 1:1) yksinkertaisen täplän antavana aineena. IR: (CHCl^) ΐγ1*0, 1800 cm_1; UVr/maks. 26 3^um £5300 IIMR: (liuotin - CUCJ^) j = 3j»5 (-0CH3, s), ~ 3(2-Hg, d), 5,02 (6-Π, s),^,92 .(10-11,,, osaksi näkyvä), 3,85 (13-H.,, s).Step B: 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7 ', 5' (2-thienylacetanido) -3-cephemic * 4-carboxylic acid benzhydryl ester, 2 g (3.8 mmol) 7/2> - (D-51 -trichloroethoxycarbonylminino-5'-carbhexyl-2-thienylacetylamino} -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-phenyl-carbonic acid di-benzhydryl ester is dissolved To 30 ml of ethyl acetate and add 30 ml of 90 l of aqueous acetic acid and 12 g of zinc dust. The mixture is stirred vigorously for 5 1/2 hours at room temperature. After the zinc is filtered off, the excess acetic acid is removed by washing the ethyl acetate solution with water. The title compound is isolated as described in Example 1, Step D. It is characterized by TLC (7 ° C in CHCl 3 -hexane 1: 1) as a single spot agent. IR: (CHCl 3) δγ1 * 0.100 cm -1; UVR / max. 26 3 μm £ 5300 IIMR: (solvent - CUCJ 2) j = 3j »5 (-OCH 3, s), 3 3 (2-Hg, d), 5.02 (6-Π, s), . (10-11, partially visible), 3.85 (13-H, s).

19 5 7 9 5 319 5 7 9 5 3

Vaihe C: 3"karbamoyylioksimetyyli-7“metoksi-7/3-(2-tienyyliaseta:nido)-3-kefeemi-lt-karbonihappoStep C: 3 "Carbamoyloxymethyl-7" methoxy-7β- (2-thienylacetonido) -3-cephem-1-carboxylic acid

Kylmää liuosta, jossa on 1,36 G 3-korbamoyylioksimetyy].i-7~metoksi-iy5>-(2“tienyyliaseta’nido)-3-kefeemi-l»-karbonihapon bentshydryyliesteriä 10,3Q mlrssa anisolia, sekoitetaan 5,1*1* ml:n kanssa trifluorietikkahappoa 0°C:ssa 3 tuntia. Haihtuvat aineet poistetaan suurtyhjössä ja tuote kiteytetään uudelleen etyyliasetaatista, sp. l65-l67°C.A cold solution of 1.36 g of 3-corbamoyloxymethyl] -7-methoxy-5- (2-thienylacetanido) -3-cephem-1-carboxylic acid benzhydryl ester in 10.3 ml of anisole is stirred in 5.1 ml. * 1 * ml with trifluoroacetic acid at 0 ° C for 3 hours. The volatiles are removed under high vacuum and the product is recrystallized from ethyl acetate, m.p. L65-l67 ° C.

UV: (pH γ puskuri) Amoks. 263,um föQl.O; o ( OH)=+199° 236yum £11*000 ''D U 3° ' IIMR: (liuotin - CD3CII + D20) J =3,1*8 (-0CH3, s), ^ 3,1» (2-Hg, osaksi näkyvä), 5»05 (6-H, s), U,91 (lO-Hg, d), 3,86 (13-Hg, s).UV: (pH γ buffer) Amox. 263, um föQl.O; o (OH) = + 199 ° 236 μm £ 11 * 000 '' DU 3 ° 'IIMR: (solvent - CD 3 Cl 2 + D 2 O) J = 3.1 * 8 (-OCH 3, s), ^ 3.1 »(2- Hg, partially visible), 5.05 (6-H, s), U, 91 (10-Hg, d), 3.86 (13-Hg, s).

Alkuaineanalyysi ci6fIi7N3°7S2:Elemental analysis ci6fIi7N3 ° 7S2:

Lask.: C, M,96; H, 1*,01; H, 9,83; " Löyd.: C, M,86; H, 3,99i N, 9,21; S, 15,00.Calc .: C, M, 96; H, 1 *, 01; H, 9.83; Found: C, M 86; H, 3.99; N, 9.21; S, 15.00.

Vaihe D: Natrium-3-karbajnoyylioksirnetyyli-7-metoksi-7y^-(2-tienyyliasetamid i 3-kefeemi-l+-karboksylaattiStep D: Sodium 3-carbamoyloxymethyl 7-methoxy-7β- (2-thienylacetamide 3-cephem-1 + carboxylate

Suspensiota, jossa on 1 g 3-karbanoyylioksimetyyli-7_metoksi-7/3-(2-tie-nyyliasetamido)-3_kefeemi-lt-karbonihappoa 100 ml:ssa tislattua vettä, sekoitetaan huoneenlämpötilassa samalla kun vähitellen lisätään 0,2 e natriumbikarbonaattia.A suspension of 1 g of 3-carbanoyloxymethyl-7-methoxy-7β- (2-thienylacetamido) -3-cephem-1-carboxylic acid in 100 ml of distilled water is stirred at room temperature while 0.2 e of sodium bicarbonate are gradually added.

Sen jälkeen kun on muodostunut liuos ja pH on säädetty olennaisesti neutraaliksi (pH = 6-7) annos suodatetaan lyofilisoimispulloon. Suodos lyofilisoidaan.After the solution is formed and the pH is adjusted to substantially neutral (pH = 6-7), the portion is filtered into a lyophilization flask. The filtrate is lyophilized.

Saadaan 1 c amorfista natrium-3-karbamoyylioksimetyyli-7~metoksi-7/3-(2-tienyyliasetamidi)-3~kefeeni-U-karboksylaattia, joka edustaa 99 #:i» talteenottoa. UV: (pH 7 puskuri): EfS 198 at 262 nm, 315 at 236 nm. ir (KBr): 1760 (laktaami). = 103,1° (C=l, pH 7 puskuri).1 c of amorphous sodium 3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7β- (2-thienylacetamide) -3-cefene-U-carboxylate is obtained, representing 99% recovery. UV: (pH 7 buffer): EfS 198 at 262 nm, 315 at 236 nm. and (KBr): 1760 (lactam). = 103.1 ° (C = 1, pH 7 buffer).

_ Esimerkki H_ Example H

3-karbamoyylioksimetyyli-y3 -(2-furyyliasetamido)-7-metoksi-3-kefeemi-I<-karbonihappo3-Carbamoyloxymethyl-3- (2-furylacetamido) -7-methoxy-3-cephem-1-carboxylic acid

Vaihe A: ^/3-i(lD-5,”trikloorietoksikarbonyylia,nino-5,~karboksivaleryyli)-2-furyyli as etyyli aminj?-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3~kefeemi-l*-karbonihapon di-bentshydryyliesteriStep A: β-3 (1-D, 5'-Trichloroethoxycarbonyl, Nino-5'-carboxivaleryl) -2-furylacetylamino] -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-1 * -carboxylic acid di- benzhydryl

Seosta, jossa on 9,3 g y(3-(D-5,-trikloorietoksikarbonyyliaraino-5,-karboksi-valeranido)-3-karbanoyylioksimctyyli-7-netoksi-3-kefeemi-l*-karbonihapon di-bentshydryyliesteriä, 7,0 ml bis-(trimetyylisilyyli)-trifluoriasetomidia, U,7 ml 2-furyy-liasetyylikloridia ja 50 ml dikloorimetaania, lämmitetään l»7°C:ssa l6 tuntia.A mixture of 9.3 gy (3- (D-5, -trichloroethoxycarbonylamino-5, -carboxy-valeranido) -3-carbanoyloxymethyl-7-netoxy-3-cephem-1 * -carboxylic acid di-benzhydryl ester, 7.0 ml of bis- (trimethylsilyl) trifluoroacetomide, 0.7 ml of 2-furylacetyl chloride and 50 ml of dichloromethane are heated at 1-7 ° C for 16 hours.

Liuotin poistetaan haihduttamalla, raaka real.tioseos uutetaan heksaanilla ja jäännöstä käytetään puhdistamatta seuraavassa vaiheessa. CClj H MR: (liuotin - CDCl^ /=3,1*8 (-0CII , s), 3,08 (2-H , d), 14,63 (fHg , s), 5,02 (6-11, s), ^1.,08 (10-H2, d), 3,72 (13-Hg, s). 0- 20 $7953The solvent is removed by evaporation, the crude real mixture is extracted with hexane and the residue is used without purification in the next step. CCl 1 H MR: (solvent - CDCl 3 / = 3.1 * 8 (-OCCl 2, s), 3.08 (2-H, d), 14.63 (fHg, s), 5.02 (6-11 , s), 1, 08 (10-H2, d), 3.72 (13-Hg, s) .0-20 $ 7953

Vaihe B: 7^-(2-furyyliasetamido)-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-li-karbonihapon bentshydryyliesteri Vaiheesta A saadun di-bentshydiyyliesterin annetaan reagoida sinkkipölyn ja etikkahapon kanssa esimerkin 3 vaiheessa B kuvatulla tavalla. Kiteyttäraisen jälkeen kloroformi/heksaanista on puhtaalla tuotteella seuraavat fysikaaliset ominaisuudet: Sp. l68°-171°C.Step B: N- (2-Furyl-acetamido) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-1-carboxylic acid benzhydryl ester The dibenzhydryl ester from Step A is reacted with zinc dust and acetic acid as described in Example 3, Step B. After crystallization from chloroform / hexane, the pure product has the following physical properties: Sp. l68 ° -171 ° C.

IB: (C1IC13) 1800, 1720, 1700 UV: Ainaks. 265^ f7200 UMK: (liuotin - CD CH) <T=3,^3 (-0CH.J, s), 3,39 (2-H2, osaksi näkyvä), 5,0 (6-11, s), 1» ,75 (10-H2, d), 3,6U (13-H2, s).IB: (C1IC13) 1800, 1720, 1700 UV: Ainaks. 265 ^ f7200 UMK: (solvent - CD CH) <T = 3.3, 3 (-OCH.J, s), 3.39 (2-H2, partially visible), 5.0 (6-11, s), 1, 75 (10-H2, d), 3.6U (13-H2, s).

Vaihe C: 3-karbamoyylioksinetyyli-7-nietoksi-7/2>-(2-furyyliasetamdo)-3-kefeemi-l»-karbonihappo 3-karbamoyylioksimetyyli-7~metoksi-7/^-(2-furyyliasetaraido)-3-kefeemi-l*-karbonihappo valmistetaan vaiheesta B saadusta tuotteesta esimerkin'. 3 vaiheessa C kuvatulla tavalla. Uudelleenkiteyttämisen jälkeen etyyliasetaatista t>n tuotteen sulamispiste 156-l6l°C.Step C: 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7H- (2-furylacetamido) -3-cephem-1-carboxylic acid 3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7H- (2-furylacetamide) -3- cephem-1 * carboxylic acid is prepared from the product of step B by the example '. 3 as described in step C. After recrystallization from ethyl acetate, the product has a melting point of 156-116 ° C.

UV: (pH 7 puskuri) ^maks. 265^vm £7200 IR on yhdenmukainen rakenteen kanssa.UV: (pH 7 buffer) ^ max. 265 ^ vm £ 7200 IR is consistent with structure.

NMR: (liuotin - CD^N + DgO) cie3,Ul* (-0CH3, s) ^3,38 (2-Hg, osaksi näkyvä), 5,02 (6-11, s), »4,82 (10-Hg, d), 3,66 (13-H?, s).NMR: (solvent - CD 2 N + D 6 O) c? 3, Ul * (-OCH 3, s) δ 3.38 (2-Hg, partially visible), 5.02 (6-11, s), δ 4.82 ( 10-Hg, d), 3.66 (13-H 2, s).

Esimerkki 5 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-7y£-tiofenoksiasetamido-3-kefeemi-l4- karbonihappoExample 5 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7β-thiophenoxyacetamido-3-cephem-14-carboxylic acid

Vaihe A: -£(D-5-trikloorietoksikarbonyyliamino-5~karboksivaleryyli)- t i o f e nok s i as e t ami dq7~ 3~k arb amoyy li ok s i me ty y 1 i-7 ~me t oks i - 3~ke f e emi-U-karbonihapon di-bentshydryyliesteri Esimerkin 4 vaiheessa A kuvatulla menetelmällä ja korjaamalla 2-furyyli-asetyylikloridi ekvimolaarisella määrällä fenyylitioasetyylikloridia saadaan ^Ä-£(D-5-trikloorictoksikarbonyylianino-5-karboksivaleryyli )-ticfenoUsiasetanido)- 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3_kefeemi-U-karbonihapon di-bentshydryyliesteri . NMR: (liuotin - CDC13) <f=3,33 (-0CH3, s),— 3,23 (2-H2, osaksi näkyvä), 1:,37 CC1 (Cll2? u), 5,0 (6-H, s), ΜΤ (10-II2, u), 3,60 (13-H2, s).Step A: - E (D-5-trichloroethoxycarbonylamino-5-carboxyvaleryl) -thiophenoxy as amino and amine emi-U-carboxylic acid di-benzhydryl ester By the method described in Example 4, Step A, and correcting 2-furylacetyl chloride with an equimolar amount of phenylthioacetyl chloride, (N - ((D-5-trichloro-oxycarbonyl-amino-5-carboxyveryl) -carbenoylamethyl) -phenenoacetyl) -phenenoic acetic acid methoxy-3-cephem-U-carboxylic acid di-benzhydryl ester. NMR: (solvent - CDCl 3) δ = 3.33 (-OCH 3, s), - 3.23 (2-H 2, partially visible), 1: .37 CCl (Cl 2? U), 5.0 (6- H, s), δ (10-II2, u), 3.60 (13-H2, s).

00

Vaihe B: 3-karbamoyylioksimetyyli-7“metoksi-'i^/l>-tiofenoksiaseta.’nido-3“ kefeemi-h-karbonihapon bentshydryyliesteri Esimerkin 4 vaiheessa B kuvatulla tavalla ja käyttämällä y$-/3D-5_tri-kloorietoksikarbonyyliuriino-5-karbokoivalcryyli )-tiofenoksiasetomidcJ-3-karbojno-yylioksimetyyli-7-mctekoi-3-kefeomi-l)-karbonihapon di-bentshydryyliesteriä 21 5795 3 7^-(00-51 "trikloorietoksikarbonyyli amino-5 '-karboksivaleryyli)-2-furyyliasetyyli-amincj7-3~karboinoyylioks imetyyli-7-metoksi-3-kei'cemi-Jt-karbonihnpon di-bentshydryy-liesterin asemesta saadaan kronatografoiraalla suoritetun puhdistuin!sen jälkeen olennaisesti puhdas tuote, jolla on yksinkertainen täplä ohutkerroskronatografiassa (TLC). IR on yhdenmukainen rakenteen kanssa.Step B: 3-Carbamoyloxymethyl-7'-methoxy-1H-thiophenoxyacetate, nido-3'-cephem-h-carboxylic acid benzhydryl ester As described in Example 4, Step B and using γ- [3D-5-trichloroethoxycarbonylurino-5 -Carbocoalcryl) -thiophenoxyacetomido [3-carbonoyloxymethyl-7-methyl-3-cepheol-1] -carboxylic acid di-benzhydryl ester 21 5795 37- (00-51 "trichloroethoxycarbonylamino-5'-carboxyvaleryl) -2-carboxyvaleryl) -2-carboxyvaleryl Instead of the di-benzhydryl ester of -aminyl-3-carboinoyloxymethyl-7-methoxy-3-chloro-β-carbonylphenon, a purely chronatograph is obtained to give a substantially pure product with a single spot in thin layer chromatography (TLC). with the structure.

UV: j^maks. 27li^um £11350 111-jR: (liuotin - CDCl^) ^=3,3¾ (-QCH^, s), 3,2k osaksi näkyvä, 5,0 (6-H, s), »4,88 (10-1I2, d), 3,68 (13-H2, s).UV: max. 27 μl £ 11350 111-jR: (solvent - CDCl 3) δ = 3.3¾ (-QCH 2, s), 3.2k partially visible, 5.0 (6-H, s),> 4.88 ( 10-1I2, d), 3.68 (13-H2, s).

Vaihe C: S-karbamoyylioksiiaetyyli-'f-metoksi-T^-tiofenoksiasetaraido-S” kefeemi-»4-karbonihappoStep C: S-Carbamoyloxyethyl-N-methoxy-N-thiophenoxyacetarido-S ”cephemic» 4-carboxylic acid

Otsikoitu yhdiste valmistetaan vaiheessa B saadusta tuotteesta noudattaen esimerkin 3 / vaiheessa C kuvattua menetelmää. Tuotteella on yksinkertainen täplä TLC:n mukaan. Sp.: 119-123°C.The title compound is prepared from the product obtained in Step B following the procedure described in Example 3 / Step C. The product has a simple spot according to TLC. M.p .: 119-123 ° C.

UV: (pH 7 puskuri) ^maks. 2»47^ura £ 10ä00 1JMR: (liuotin - CD^CII + DgO) =3,33 (-OCH^, s), 3,3»* (2-Hg, osaksi näkyvä), 5,0 (6-Π, s), U,82 (10-H2, s), 3,71 (13-Hg, s).UV: (pH 7 buffer) ^ max. 2 »47 ^ groove £ 10 and 100 1MM: (solvent - CD 2 C 12 + D 6 O) = 3.33 (-OCH 2, s), 3.3» * (2-Hg, partially visible), 5.0 (6- Δ, s), U, 82 (10-H 2, s), 3.71 (13-Hg, s).

Esimerkki 6 Ψ - (D ,L-o(-ats idofenyy li ase tyyli ami do) - 3-karbamoyy li oksimetyy Ιί-7-met oksi- 3-ke f e emi -1* -k arbon i h appoExample 6 Ψ - (D, L-o (-azidophenylacetyl amido) -3-carbamoyl oxymethyl Ιί-7-methoxy-3-cephem -1 * -k Arbon i h appo

Vaihe A: 7/^“(D-5~tevt.-butoksikarbonyyliamino-5-karboksivaleramido)-3“ karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-U-karbonihappo 50,0 g '^£-(D-5-air.ino-5_karboksi\'aleramido)-3-karbemoyylioksimetyyli-7*-me-toksi-3"kefeemi-»4-karbonihappoa liuotetaan seokseen, jossa on 1500 ml 5 i*:sta di-kaliumvetyfosfaattia ja 1000 ml asetonia, ja pH säädetään arvoon 9,5 käyttäen 2,5 H natriumhydroksidiliuosta. Tähän sekoitettuun liuokseen lisätään 50 ml tert.-butoksi-karbonyyliatsidia ja pii ylläpidetään arvossa 9»5 20 tunnin ajan. Sen jälkeen reak-ticseos uutetaan etyyliasetaatilla, etyyliasetaattikerros hylätään ja vesipitoinen kerros jäähdytetään 0°C:seen, sekoitetaan 1200 ml:n kanssa etyyliasetaattia ja tehdään happameksi pH-arvoon 2,5 väkevällä kloorivetyhapolla. Etyyliasetaattikerros erotetaan, kuivataan natriumsulfaatilla ja väkevöidään tyhjössä ja saatua kiinteätä ainetta käytetään puhdistamatta edelleen.Step A: 7 '- (D-5-tert-butoxycarbonylamino-5-carboxivaleramido) -3'-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-U-carboxylic acid 50.0 g of N' - (D-5- Airino-5-carboxy (aleramido) -3-carbemoyloxymethyl-7 * -methoxy-3 "cephem-4-carboxylic acid is dissolved in a mixture of 1500 ml of 5 * dipotassium hydrogen phosphate and 1000 ml of acetone, and The pH is adjusted to 9.5 using 2.5 H sodium hydroxide solution, to this stirred solution is added 50 ml of tert-butoxycarbonyl azide and the silicon is maintained at 9 to 5 for 20 hours, then the reaction mixture is extracted with ethyl acetate, the ethyl acetate layer is discarded and the aqueous layer is cooled. To 0 [deg.] C., mixed with 1200 ml of ethyl acetate and acidified to pH 2.5 with concentrated hydrochloric acid, the ethyl acetate layer is separated, dried over sodium sulfate and concentrated in vacuo and the solid obtained is used without further purification.

IR: 1790 ψ? -laktaami), 1700 UV: (pH 7 puskuri) Amaks. 2o3 £ 6320IR: 1790 ψ? -actam), 1700 UV: (pH 7 buffer) Amaks. 2o3 £ 6320

HiiR: (liuotin - DMSO, d^) <T=3»30 (-0CII3, s), 3,»*2 (2-H2, osaksi näkyvä), 5,06 (6-11, s), »4,78 (10-H, d), 1,38 (t-Bu, s).HiiR: (solvent - DMSO, d 2) <T = 3 »30 (-OCl 3, s), 3,» * 2 (2-H 2, partially visible), 5.06 (6-11, s), »4 .78 (10-H, d), 1.38 (t-Bu, s).

Vaihe H: “j/?»-(l)-5-tert .-butoksikarbonyyliamino-5-karboksivaleramido)-3- karba:noyylioksimctyyli-7-metoki-.i-3“kefecmi-l4-karbonihapon di-bent: hydryyliesteriStep H: N - (-) - (5-tert-Butoxycarbonylamino-5-carboxy-valeramido) -3-carboxyloyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-14-carboxylic acid di-Bent: hydryl ester

Liuokseen, jossa on 15,0 g 7^/2-(D~5“tcrt .-butoksikarbonyylia’nino-5-karbokoi 72 5 795 3 vajer.''r::i<lo)-3-karbamoyylioksimetyyli-7-Ketok5i-3-kefeemi-)i-karbonihappoa 500 ml :ssa etyyliasetaattia, lisätään 5,5 C difcnyylidiatsometaania ja 70 ml:ssa eetteriä. Reaklioseos lämmitetään liO°C:seen samalla sekoittaen ja 30 minuutin kuluttua käsitellään vielä 5,5 C;lla difcnyylidiatsometaania 70 ml:ssa eetteriä. 3 tunnin kuluttua liuotin poistetaan tyhjössä ja korvataan seoksella, jossa on 500 ml metanolia ja 20 ml vettä. Mctanoli-vesiliuos uutetaan neljästi heksaanilla ja sitten haihdutetaan tyhjössä. Jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin, kuivataan natriunsulfnätillä ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikoitu yhdistejota käytetään puhdistamatta seuraavassa vaiheessa.To a solution of 15.0 g of N, N-2- (D-5'-tert-butoxycarbonylamino-5-carboxylic acid) 5-carboxoyloxymethyl-7- Ketooxy-3-cephem-i-carboxylic acid in 500 ml of ethyl acetate, 5.5 ° C diphenyldiazomethane and 70 ml of ether are added. The reaction mixture is heated to 10 ° C with stirring and, after 30 minutes, treated with a further 5.5 ° C with diphenyldiazomethane in 70 ml of ether. After 3 hours, the solvent is removed in vacuo and replaced with a mixture of 500 ml of methanol and 20 ml of water. The aqueous McTanol solution is extracted four times with hexane and then evaporated in vacuo. The residue is dissolved in ethyl acetate, dried over sodium sulfate and evaporated in vacuo to give the title compound which is used without purification in the next step.

HMR: (liuotin - CDCl^) <5=3,60 (-OCH^, s), 3,1* (2-H,,, osaksi näkyvä), 5,10 (6-11, s), ,95 (10-H, osaksi näkyvä).HMR: (solvent - CDCl 3) δ = 3.60 (-OCH 2, s), 3.1 * (2-H 2, partially visible), 5.10 (6-11, s), 95 (10-H, partially visible).

Vaihe C: lp? ' -tert.-butoksikarbonyyliamino-5' -karboksivaleryyli )- D,L->*£-atsidofcnyyliasetyyli anino7“3“karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-U-karbonihapon di-bentshydryyliesteri Seosta, jossa on 10,8 g 7/^*(D-5-tert.-butoksikarbonyyliaraino-5-karboksi-valerarnido)-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3_kefeemi-U-karbonihapon di-bents-hydryyliesteriä, 100 ml kloroformia, 16,2 g bis-(trimetyylisilyyli)-tri fluoriaset-amidia ja D,L-«vi:atsido-fenyyliasetyylikloridia, lämmitetään l*5°C:ssa 16 tuntia.Step C: lp? (n-tert-butoxycarbonylamino-5'-carboxyvaleryl) -D, L -> -? - azidophenylacetylamino] -3'-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-U-carboxylic acid di-benzhydryl ester A mixture of 10.8 g 7β- (D-5-tert-butoxycarbonylarino-5-carboxy-valeramido) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-N-carboxylic acid dibenzyl hydryl ester, 100 ml of chloroform, 16.2 g of bis- (trimethylsilyl) -trifluoroacetamide and D, L-? vi: azido-phenylacetyl chloride, heated at 1 * 5 ° C for 16 hours.

Seos laimennetaan 300 ml:lla kloroformia, pestään 2 £:lla vesipitoisella bikarbo-naatilla ja natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, kuivataan natriumsulfaa-tilln ja haihdutetaan öljyksi, joka puhdistetaan saostamalla tuote kloroformi- l liuoksesta heksaanilla. Vaaleankeltaista kiinteätä ainetta käytetään seuraavassa vaiheessa puhdistamatta.The mixture is diluted with 300 ml of chloroform, washed with 2 l of aqueous bicarbonate and saturated aqueous sodium chloride solution, dried over sodium sulfate and evaporated to an oil which is purified by precipitating the product from a chloroform solution with hexane. A pale yellow solid is used in the next step without purification.

IR: 1750 (^-laktanni, 1, 1735, 2100 (-M ) NMR: (liuotin - CDCl^) ¢/=3,70 (-OCH^, s), 3»2 (, osaksi näkyvä).IR: 1750 (β-lactan, 1, 1735, 2100 (-M) NMR: (solvent - CDCl 3) δ / = 3.70 (-OCH 2, s), 3 → 2 (partially visible).

Vaihe D: 7^?-(D,L-To£:atsidofeuyyliasetyylianido)-3-karbamoyylioksimetyyli- 7-met oksi-3~ke feemi-B-karboni happoStep D: 7 - [(D, L-ToE: azidophenylacetylanido) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-β-carboxylic acid

Liuos, jossa on 13,0 g Τ^>-^Γθ-5'-tert.-butoksikarbonyyliamino-51-karboksivaleryyli )-D ,L-o<=atsidofenyyliasetyyliamin97-3-karbamoyylioksimetyyli-7-nictoksi- 3-kefeemi-ä-karbonihapon di-bentshydryyliesteriä 13 ml:ssa anisolia, kaadetaan 65 ml:aan kylmää (0°C) trifluorietikkahappoa. 5 minuutin kuluttua liuos kaadetaan 1300 ml:aan sekoitettua, kylmää (0°C) eetteriä. Saostunut aine otetaan talteen ja jaetaan dinatriumhappofosfaatin' 10 £:sen vesiliuoksen ja etyyliasetaatin kesken. Etyyliasetaattikerros hylätään ja vesipitoinen kerros peitetään tuoreella etyyliasetaatilla ja sekoitetaan pH-arvoon 2 saamiseksi kylmässä 60 3:sen vesipitoisen fosfori hapon kanssa. Ktyyliasetaattikerros otetaan talteen, pestään natriurklori-diri kyllästetyllä vesiliuoksella ja sen jälkeen kuivataan natriumsuifaati11a.A solution of 13.0 g of (N, N-5'-tert-butoxycarbonylamino-51-carboxivaleryl) -D, Lo <= azidophenylacetylamino] -3-carbamoyloxymethyl-7-nicoxy-3-cephem-α-carboxylic acid di-benzhydryl ester in 13 ml of anisole, poured into 65 ml of cold (0 ° C) trifluoroacetic acid. After 5 minutes, the solution is poured into 1300 ml of stirred cold (0 ° C) ether. The precipitate is collected and partitioned between 10% aqueous disodium phosphate and ethyl acetate. The ethyl acetate layer is discarded and the aqueous layer is covered with fresh ethyl acetate and mixed to pH 2 in the cold with 60% aqueous phosphoric acid. The alkyl acetate layer is collected, washed with saturated aqueous sodium chloride solution and then dried over sodium sulfate.

23 5 7 9 5 323 5 7 9 5 3

Haihtuvat aineet poistetaan tyhjössä, jolloin saadaan otsikoitu yhdiste.The volatiles are removed in vacuo to give the title compound.

UV: ^maks. 264 .um £7 537 , u _ . . .UV: ^ max. 264 .um £ 7 537, u _. . .

/ (pH 7 puskuri) 231 ^um £1356 IR: 1760 (^-laktaami) 1705, 2105 (-N3> NMR: (liuotin - CD3CN) ¢/=3,36 (-0CH3, s), 3,50 (-OCHg, s), 3,40 (2-H2, osaksi näkyvä), 5,06 (6-H, s), 4,86 (10-H, s), 5,15 (13-H,s)./ (pH 7 buffer) 231 μm £ 1356 IR: 1760 (β-lactam) 1705, 2105 (-N 3> NMR: (solvent - CD 3 CN) ¢ / = 3.36 (-OCH 3, s), 3.50 ( -OCH 2, s), 3.40 (2-H 2, partially visible), 5.06 (6-H, s), 4.86 (10-H, s), 5.15 (13-H, s) .

Esimerkki 7 7^tf-(D ,L-/-aminofenyyliasetyyliamido) -3-karbamoyylioksimetyyli- 7-metoksi-3-kefeemi-4-karbonihappoExample 7 N- [N- (D, L-N-aminophenylacetylamido) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-4-carboxylic acid

Liuosta, jossa on 1,0 g -(D,L-o(-atsidofenyyliasetyyliamido)- 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-4-karbonihappoa 10 ml:ssa etikkahappoa ja 90 ml:ssa vettä 0°C:ssa, sekoitetaan 5,0 g:n kanssa sinkkipölyä 10 minuuttia ja suodatetaan. Suodos huuhdotaan vetysul-^ fidillä, suodatetaan ja suodos jäähdytyskuivataan, jolloin saadaan valkoista ainetta, joka pestään eetterillä ja kuivataan tyhjössä, jolloin saadaan otsikoitu yhdiste valkoisena jauheena.A solution of 1.0 g of - (D, Lo (-azidophenylacetylamido) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-4-carboxylic acid in 10 ml of acetic acid and 90 ml of water at 0 ° C, mixed with 5.0 g of zinc dust for 10 minutes and filtered, the filtrate is rinsed with hydrogen sulfide, filtered and the filtrate is freeze-dried to give a white solid which is washed with ether and dried in vacuo to give the title compound as a white powder.

UV: (pH 7 puskuri) ^maks. 264^um ^6525 IR: 1770 (/3-laktaami) 2650 , 1550 (HN3+) NMR: (liuotin - D20 + HC03>) (/=3,78 (-0CH3,s), 3,84 (-OCHg, s), 3,90 (2-H2, osaksi näkyvä).UV: (pH 7 buffer) ^ max. 264 μm λ 6525 IR: 1770 (β-lactam) 2650, 1550 (HN 3 +) NMR: (solvent - D 2 O + HCO 3) (δ = 3.78 (-OCH 3, s), 3.84 (-OCH 3, s), 3.90 (2-H2, partially visible).

Esimerkki 8 3-metyyli-7-metoksi-/^-(2-tienyyliasetamido-3-kefeemi-4-karboni-hapon dibentsyylietyleenidiamiinisuolaExample 8 Dibenzylethylenediamine salt of 3-methyl-7-methoxy-N- (2-thienylacetamido-3-cephem-4-carboxylic acid

Vaihe A: y^-(D-5-amino-5-karboksivaleramido)-3-metyyli-7-metoksi-3-kefeemi-4-karbonihappo 10 %:sta palladiumia hiilellä suspensoidaan veteen (80 ml) ja ^ käsitellään vedyllä. Katalyytti suodatetaan ja suspensoidaan uudelleen veteen (50 ml) ja tähän seokseen (2,67 g) lisätään ^-(D-5-amino- 5-karboksivaleramido)-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-^ 4-karbonihapon natriumsuolaa (1,0 g) vedessä (10 ml). Saatua seosta ravistellaan 22 tuntia huoneen lämpötilassa. Katalyytti poistetaan suodattamalla ja pestään vedellä (50 ml). Yhdistetty pesuneste ja suodos väkevöidään kuiviin, jolloin saadaan 52,8 %:n saaliina 7/?-(D- 5-amino-5-karboksivaleramido)-3-metyyli-7-metoksi-3-kefeemi-4-karboni-happo (528 mg).Step A: N- (D-5-Amino-5-carboxivaleramido) -3-methyl-7-methoxy-3-cephem-4-carboxylic acid 10% palladium on carbon is suspended in water (80 ml) and treated with hydrogen. The catalyst is filtered off and resuspended in water (50 ml) and to this mixture (2.67 g) is added N- (D-5-amino-5-carboxivaleramido) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-4-carboxylic acid. sodium salt (1.0 g) in water (10 ml). The resulting mixture is shaken for 22 hours at room temperature. The catalyst is removed by filtration and washed with water (50 ml). The combined washings and filtrate are concentrated to dryness to give 52.8% yield of 7β- (D-5-amino-5-carboxivaleramido) -3-methyl-7-methoxy-3-cephem-4-carboxylic acid ( 528 mg).

UV: )maks. 265 .um; β = 100 /1 /1 cmUV:) max. 265 .um; β = 100/1/1 cm

Vaihe B: 7/)-(D-5-tert.-butoksikarbonyyliamino-5-karvoksivaler-amido)-7-metoksi-3-metyyli-3-kefeemi-4-karbonihapon dibentsyylietyleenidiamiinisuola 24 57953 ^tf-(D-5-amino-5-karboksvaleramido)-7-metoksi-3-metyyli-3-kefee-mi-4-karbonihapon dinatriumsuolan (11,5 g) liuos, joka saadaan vaiheessa A, liuotetaan veteen (150 ml) ja asetoniin (50 ml). pH säädetään arvoon 9-9,1 natriumhydroksidilla ja lisätään 10 ml tert.-butyyliat-sidoformaattia. Reaktioseosta sekoitetaan 16 tuntia huoneen lämpötilassa samalla kun lisätään natriumhydroksidia pH:n pitämiseksi arvossa 9-9,1. Reaktioseos uutetaan 100 ml:11a etyyliasetaattia ja orgaaninen kerros hylätään. Tuote saostetaan alentamalla pH arvoon 2,5 laimealla kloorivetyhapolla. Sakka otetaan talteen sentrifugoimalla ja muutetaan dibentsyylietyleenidiamiinisuolaksi, joka kiteytetään etyyliasetaatista. Saadaan 4,3 g ^-(D-5-tert.-butoksikarbonyyliamino-5-karboksivaleramido)-7-metoksi-3-metyyli-3-kefeemi-4-karbonihapon di-bentsyylietyleenidiamiinisuolaa, sp. 177-179°C (hajoaa).Step B: 7H) - (D-5-tert-Butoxycarbonylamino-5-carvivalovalamido) -7-methoxy-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid dibenzylethylenediamine salt 24 57953 ^ tf- (D-5- A solution of the disodium salt of amino-5-carboxvaleramido) -7-methoxy-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid (11.5 g) obtained in Step A is dissolved in water (150 ml) and acetone (50 ml). . The pH is adjusted to 9-9.1 with sodium hydroxide and 10 ml of tert-butyl azidoformate are added. The reaction mixture is stirred for 16 hours at room temperature while sodium hydroxide is added to maintain the pH at 9-9.1. The reaction mixture is extracted with 100 ml of ethyl acetate and the organic layer is discarded. The product is precipitated by lowering the pH to 2.5 with dilute hydrochloric acid. The precipitate is collected by centrifugation and converted into the dibenzylethylenediamine salt, which is crystallized from ethyl acetate. 4.3 g of N- (D-5-tert-butoxycarbonylamino-5-carboxivaleramido) -7-methoxy-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid di-benzylethylenediamine salt are obtained, m.p. 177-179 ° C (decomposes).

UV: ^ maks. 263/Um, 238 E*%Qm = 98,2, 81,1UV: λ max 263 μm, 238 E *% Qm = 98.2, 81.1

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C^gH^gNgOgS:Elemental analysis for C 9 H 8 N 2 O 9 S:

Lask.: C, 59,42* H, 6,74; N, 9,63; Löyd.: C, 60,02; H, 6,80; N, 9,79.Calculated: C, 59.42 * H, 6.74; N, 9.63; Found: C, 60.02; H, 6.80; N, 9.79.

Vaihe C: 3-metyyli-7-metoksi-^-(2-tienyyliasetamido-3-kefeemi- 4-karbonihapon dibentsyylietyleenidiamiinisuola ^(?-(D-5-tert. -butoksikarbonyyliamino-5-karboksivaleramido)-3-metyyli-7-metoksi-3-kefeemi-4-karbonihappoa käsitellään 200 ml:11a (0,1N) vesipitoista laimeata kloorivetyhappoa ja 100 ml:11a etyyliasetaattia vapaan hapon uuttamiseksi. Liuokseen, jossa on 1,33 g (2,7 millimoolia) vapaata happoa 10 ml:ssa metyleenikloridia, lisätään 2,2 ml bis-trimetyylisilyylitrifluoriasetamidia ja 0,5 ml monotrime-tyylisilyylitrifluoriasetamidia. Sen jälkeen lisätään 1,1 ml 2-tienyyliasetyylikloridia ja reaktioseosta sekoitetaan 18 tuntia typpikaasussa 43°C:ssa. Liuotin poistetaan tyhjössä ja jäännös jaetaan etyyliasetaatin ja vesipitoisen fosfaattipuskurin (pH 7,5) kesken. Vesikerros tehdään happameksi laimealla kloorivetyhapolla ja saostunut tuote uutetaan etyyliasetaatilla. Lisättäessä dibentsetyleenidiamiinia saadaan haluttu tuote kiteytymään suolana (250 mg) suhteessa 2 ekvivalenttia tuotetta ja 1 mooli dibentsyylietyleenidiamiinia. Kiteytettäessä suola uudelleen etanolista saadaan olennaisesti puhdas tuote, sp. 153-155°C (hajoaa) ennakolta tummuen.Step C: 3-Methyl-7-methoxy-N- (2-thienylacetamido-3-cephem-4-carboxylic acid dibenzylethylenediamine salt N - (- (D-5-tert-butoxycarbonylamino-5-carboxivaleramido) -3-methyl-7 -methoxy-3-cephem-4-carboxylic acid is treated with 200 ml (0.1 N) of aqueous dilute hydrochloric acid and 100 ml of ethyl acetate to extract the free acid to a solution of 1.33 g (2.7 mmol) of free acid. 2.2 ml of bis-trimethylsilyltrifluoroacetamide and 0.5 ml of monotrimethylsilyltrifluoroacetamide are added, then 1.1 ml of 2-thienylacetyl chloride are added and the reaction mixture is stirred for 18 hours under nitrogen at 43 [deg.] C. The solvent is removed in vacuo and the residue is removed in vacuo. ethyl acetate and aqueous phosphate buffer (pH 7.5) The aqueous layer is acidified with dilute hydrochloric acid and the precipitated product is extracted with ethyl acetate Addition of dibenzethylenediamine causes the desired product to crystallize as a salt (250 mg) in a ratio of 2 equivalents of product and 1 mole of dibenzylethylenediamine. Recrystallization of the salt from ethanol gives a substantially pure product, m.p. 153-155 ° C (decomposes) pre-darkening.

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C^gH^^SgNgO^Q:Elemental analysis for C 18 H 28 N 2 O 2 S 2:

Lask.: C, 56,54; H, 5,36; N, 8,60; S, 13,12; Löyd.: C, 55,75; H, 5,16; N, 8,37; S, 12,16 25 5 7 9 5 3Found: C, 56.54; H, 5.36; N, 8.60; S, 13.12; Found: C, 55.75; H, 5.16; N, 8.37; S, 12.16 25 5 7 9 5 3

Esimerkki 9 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-’^-(2-tienyyliasetamido)-3- kefeemi-9-karbonihappo A. Di(metoksimetyyli)-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-·^-(D-5-trikloorietoksikarbonyyliamino-5'-karboksivaleramido)- 3-kefeemi-4-karboksylaattiExample 9 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-N- (2-thienylacetamido) -3-cephem-9-carboxylic acid A. Di (methoxymethyl) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-N- (D-5-trichloroethoxycarbonylamino) -5'-carboxivaleramido) -3-cephem-4-carboxylate

Kylmään suspensioon, jossa on 9,85 g (disykloheksyyliemiini)-3-karbaanoyyli-oksimetyyli-7-metoksi-7 fi~ (D-5'-tr ikloorietoks Ikarbonyy1iamino-5'-karboksivalerami-, d.o) -3-kefeemi-4-karboksylaattia metyleenlkloridissä (kuivattu molekulaariseuloilla, 170 ml) 0°C:ssa, lisätään liuos, jossa on 1,69 g kloorimetyylimetyy-lieetteriä 50 ml:ssa metyleenikloridia pisaroittain 60 minuutin ai-^ kana samalla sekoittaen. Lisäyksen päätyttyä suspensiota sekoitetaan 0°C:ssa 2 tuntia. Seos suodatetaan seliittikerroksen lävitse ja kerros uutetaan metyleenikloridilla (30 ml x 3). Suodos haihdutetaan kuiviin tyhjössä 5-10°C:ssa ja jäännöstä ravistellaan 20 ml:n kanssa metyleenikloridia ja 200 ml:n kanssa jäävettä. Orgaaninen kerros eroitetaan, pestään edelleen 200 ml:11a jäävettä, 200 ml:11a kylmää 0,1 %:sta NaHCO^-liuosta, 200 ml:11a vettä ja 50 ml:11a NaCl:n vesiliuosta ja kuivataan magnesiumsulfaatilla. Suodattamisen jälkeen liuotin poistetaan tyhjössä, jolloin saadaan 6,25 g tuotetta lasimaisena aineena.To a cold suspension of 9.85 g of (dicyclohexylamine) -3-carbanoyloxymethyl-7-methoxy-7β- (D-5'-trichloroethoxycarbonylamino-5'-carboxyvaleramide, do) -3-cephem-4 carboxylate in methylene chloride (dried through molecular sieves, 170 ml) at 0 ° C, a solution of 1.69 g of chloromethyl methyl ether in 50 ml of methylene chloride is added dropwise over 60 minutes with stirring. After the addition is complete, the suspension is stirred at 0 ° C for 2 hours. The mixture is filtered through a pad of celite and the pad is extracted with methylene chloride (30 mL x 3). The filtrate is evaporated to dryness in vacuo at 5-10 ° C and the residue is shaken with 20 ml of methylene chloride and 200 ml of ice water. The organic layer is separated, washed further with 200 ml of ice water, 200 ml of cold 0.1% NaHCO 3 solution, 200 ml of water and 50 ml of aqueous NaCl solution and dried over magnesium sulfate. After filtration, the solvent is removed in vacuo to give 6.25 g of product as a glass.

26 5795 3 B. Di(metoksimetyyli)-3-karbomoyylioksimetyyli-7-metoksi-7/9 51 “trikloo- rietoksikarbonyyliamino-5'-karboksivaleryyli)-tienyyliasetyyliaminö?-3- kefeerai-U-karboksylaatti26 5795 3 B. Di (methoxymethyl) -3-carbomoyloxymethyl-7-methoxy-7 / 9,5'-trichloroethoxycarbonylamino-5'-carboxyvaleryl) thienylacetylamino? -3-cephera-U-carboxylate

Liuokseen, jossa on 10 g di(metoksiraetyyli)-3-karbainoyylioksimetyyli-7-metoksi-7//5-(D-5-trikloorietoksikarbonyyliamino-5,-karboksivaleramido)-3-kereerai-U-karboksylaattia 80 ml:ssa sculakuivattua metyleenikloridia, lisätään 13,5 nil cL~pineeniä, 12,1 ml etyyli-N-trimetyylisilyylikarbamaattia ja 7»0 ml 2-tienyyli-asetyylikloridia. Liuosta sekoitetaan 17 tuntia typpiatmosfäärissä samalla lievästi paluujäähdyttäen 50°C:ssa öljyhauteella. Sitten liuos jäähdytetään huoneen lämpötilaan, käsitellään 500 ml:11a vesiliuosta, jossa on 10 ?:sta natriumkloridia ja 2,5 #:sta natriumbikarbonaattia, lisätään 30 ml metanolia ja seosta sekoitetaan voimakkaasti 15 minuuttia ympäristön lämpötilassa. Kerrokset erotetaan, vesikerros pestään 20 ml:lla metyleenikloridia, yhdistetyt metyleenikloridikerrokset pestään 30 ml:11a natriumkloridin kyllästettyä vesiliuosta, natriumkloridiliuosta pestään takaisin 30 ml:11a metyleenikloridia ja yhdistetyt metyleenikloridiliuokset kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja kakku pestään kahdesti kakun 3-kertai-sella tilavuudella metyleenikloridia. Yhdistetyt metyleenikloridiliuos ja pesunesteet väkevöidään tyhjössä tilavuuteen 50 ml, lisätään pisaroittain samalla voimakkaasti sekoittaen 500 ml jääkylmää heksaania ja sen jälkeen kun on annettu seistä 15 minuuttia heksaanikerros dekandoidaan kumimaisesta aineesta suodattamalla seliit-tikerroksen lävitse. Kumimaincn aine ja kerros pestään 50 ml:11a heksaania, sitten seliittikerros pestään 50 ml:lla metyleenikloridia ja tätä metyleenikloridiliuosta käytetään kumimaiseen aineen liuottamiseksi. Sitten metyleenikloridiliuos pannaan heksaanin saostuksen kautta uudelleen. Saatu tuote (li,8 g) di(netoksimetyyli)- 3-karbamoyylioksiπetyyli-7"metoksi-7y^”Z(D-5,-trikloorietoksikarbonyyliamino-5'-karboksivaleryyli)-tienyyliasetyyliamino/-3-kefeemi-l*-karboksylaatti liuotetaan 230 ml:aan etyyliasetaattia ja käytetään seuraavassa vaiheessa.To a solution of 10 g of di (methoxyacetyl) -3-carbainoyloxymethyl-7-methoxy-7H-5- (D-5-trichloroethoxycarbonylamino-5, -carboxivaleramido) -3-cera-U-carboxylate in 80 ml of scula-dried methylene chloride , 13.5 nil of cL-pinene, 12.1 ml of ethyl N-trimethylsilylcarbamate and 7.0 ml of 2-thienylacetyl chloride are added. The solution is stirred for 17 hours under a nitrogen atmosphere while gently refluxing at 50 ° C in an oil bath. The solution is then cooled to room temperature, treated with 500 ml of an aqueous solution of 10 [mu] l of sodium chloride and 2.5 [mu] l of sodium bicarbonate, 30 ml of methanol are added and the mixture is stirred vigorously for 15 minutes at ambient temperature. The layers are separated, the aqueous layer is washed with 20 ml of methylene chloride, the combined methylene chloride layers are washed with 30 ml of saturated aqueous sodium chloride solution, the sodium chloride solution is washed back with 30 ml of methylene chloride and the combined methylene chloride solutions are washed twice with magnesium chloride and The combined methylene chloride solution and washings are concentrated in vacuo to a volume of 50 ml, 500 ml of ice-cold hexane are added dropwise with vigorous stirring and, after standing for 15 minutes, the hexane layer is decanted from the gum by filtration through a pad of celite. The gum and layer are washed with 50 mL of hexane, then the celite layer is washed with 50 mL of methylene chloride and this methylene chloride solution is used to dissolve the gum. The methylene chloride solution is then restarted through precipitation of hexane. Product obtained (1,8 g) di (netoxymethyl) -3-carbamoyloxyethyl 7 "methoxy-7'-Z '(D-5, -trichloroethoxycarbonylamino-5'-carboxivaleryl) thienylacetylamino] -3-cephem-1 * carboxylate is dissolved in 230 ml of ethyl acetate and used in the next step.

C. Metoksimetyyli-Vkarbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-7 /3 -(2-tienyyli-asetami do)-3_kefeemi-^-karboksylaattiC. Methoxymethyl N-carbamoyloxymethyl 7-methoxy-7β- (2-thienylacetamido) -3-cephem-4-carboxylate

Etyyliasetaattiliuos lisätään 500 ml:an, 3-kaulaiseen, pyöröpohjäiseen pulloon, joka on varustettu lämpömittarilla, mekaanisella sekoittajalla ja typpijoh-dolla. Lisätään 50,6 g sinkkipölyä ja liuosta sekoitetaan samalla kun lisätään 11,5 ml jääctikkaa. Sen jälkeen kun kaikki reagenssit on lisätty tapahtuu reaktio typpiatmosfäärissä 25°C:ssa 1 tunnin ajan. Sinkki suodatetaan pois ja pestään etyyliasetaatilla (2 x 75 ml). Suodos pestään kahdesti 150 ml:lla vettä ja kerran 150 ml:11a kylmiä 2,5 $:sta natriumbikarbonaattia ja sen jälkeen kerran 100 ml:11a 27 57953 kyllästettyä natriumkloridia. Etyyliasetaattiliuos kuivataan natriumsulfaatilla, suodatetaan ja väkevöidään, jolloin saadaan 6,U g tuotetta kumimaisena aineena.The ethyl acetate solution is added to a 500 mL, 3-necked, round bottom flask equipped with a thermometer, mechanical stirrer, and nitrogen line. 50.6 g of zinc dust are added and the solution is stirred while 11.5 ml of glacial acetic acid are added. After all the reagents have been added, the reaction takes place under a nitrogen atmosphere at 25 ° C for 1 hour. The zinc is filtered off and washed with ethyl acetate (2 x 75 mL). The filtrate is washed twice with 150 ml of water and once with 150 ml of cold $ 2.5 sodium bicarbonate and then once with 100 ml of saturated sodium chloride. The ethyl acetate solution is dried over sodium sulfate, filtered and concentrated to give 6.1 g of product as a gum.

Jäähdytettyyn (0-U°C), laipalla varustettuun kolonniin (2,5 cm sisähalkaisija pannaan tuote, jossa on 6¾ g silikageeliä (60-200 meshia) 200 mlrssa metyleeniklo-ridia. Silikageelin annetaan laskeutua ja ylimäärä metyleenikloridia juoksutetaan pois kerroksen pintaan. Siihen lisätään 6,U g jäännöstä mahdollisimman pienessä määrässä metyleenikloridia (5—10 ml), pullo ja kolonni pestään hyvin metyleeniklo-ridilla (10 ml) ja sen jälkeen kolonni eluoidaan kahdella litralla Uo #:sta etyy-liasetaatti/bentseeni-liuosta ottamalla 60 ml:n fraktioita. Sen jälkeen fraktiot _ väkevöidään kuiviin. Fraktiot 10-1Ö, jotka sisältävät tuotteet, haihdutetaan, jolloin saadaan 2,9 g (metoksimetyyli)-3-karbamoyylioksimetyyli-7-raetoksi-ir/£-(2-tienyyliasetamido)-3~kefeerai-U-karboksylaattia.Place a product with 6-g of silica gel (60-200 mesh) in 200 ml of methylene chloride on a cooled (0-U ° C) flanged column (2.5 cm internal diameter). The silica gel is allowed to settle and the excess methylene chloride is drained off to the surface of the bed. 6 g of the residue in as little methylene chloride (5-10 ml) as possible are added, the flask and column are washed well with methylene chloride (10 ml) and then the column is eluted with 2 liters of Uo # by taking 60 ml of ethyl acetate / benzene solution. The fractions 10-16 containing the products are evaporated to give 2.9 g of (methoxymethyl) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-β- (2-thienylacetamido) -. 3 ~ kefeerai-U-carboxylate.

^ Tuote (2,6U g) liuotetaan metyleenikloridiin (150 ml) ja suodatetaan. Tähän liuokseen lisätään etanolia (20 ml) ja väkevöidään huoneen lämpötilassa pyörivässä haihduttimessa tilavuuteen noin 20 ml: Tähän tilavuuteen lisätään vielä 20 ml etanolia ja väkevöidään tilavuuteen noin 30 ml. Liuos ympätään ja annetaan kiteytyä, jolloin saadaan 2,1 g puhdasta esteriä, sp. 151-153°C.The product (2.6 U g) is dissolved in methylene chloride (150 ml) and filtered. To this solution add ethanol (20 ml) and concentrate at room temperature on a rotary evaporator to a volume of about 20 ml: To this volume add another 20 ml of ethanol and concentrate to a volume of about 30 ml. The solution is seeded and allowed to crystallize to give 2.1 g of pure ester, m.p. 151-153 ° C.

D. 3-karbamoyylioksimetyyli-7_metoksi-7yi>-(2-tienyyliasetamido)-3-kefeemi-ä-karbonihappoD. 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7H- (2-thienylacetamido) -3-cephem-α-carboxylic acid

Suspensiota, jossa on 920 mg metoksimetyyliesteriä 9,2 ml:ssa metanolia (sisältäen 10 % väkevää HCl), sekoitetaan huoneen lämpötilassa 50 minuuttia.A suspension of 920 mg of methoxymethyl ester in 9.2 ml of methanol (containing 10% concentrated HCl) is stirred at room temperature for 50 minutes.

Reaktion päättyminen todetaan tlc-analyysin avulla käyttämällä etyyliasetaatti/ bentseeni 6:k järjestelmää. Lisätään varovaisesti kylmä liuos, jossa on 1,65 g NaHCO^ ^0 mlrssa vettä, ja kirkas liuos väkevöidään tilavuuteen 30-35 ml huoneen lämpötilassa tyhjössä. Vesiliuos uutetaan etyyliasetaatilla neutraalisten epäpuh-tauksien poistamiseksi ja orgaaninen kerros hylätään. Vesikerros jäähdytetään 0-5°C:seen, kaadetaan päälle etyyliasetaattia (Uo ml) ja pH säädetään arvoon 1,8 kylmällä 10 #:lla HClrllä samalla jatkuvasti sekoittaen. Kerrokset erotetaan ja etyyliasetaattikerros pestään kolmasti 3 ml:11a jäävettä. Vesikerros ja pesunesteet yhdistetään ja sen jälkeen uutetaan takaisin kahdesti 20 ml:11a etyyliasetaattia. Toinen etyyliasetaattiuute pestään kahdesti kylmällä vedellä ja yhdistetään ensimmäisen uutteen kanssa. Liuotin haihdutetaan kuiviin ja huuhdotaan 10 ml:11a bentseeni/metanolia (8:2) ja kuivataan vakiopainoon 830 mg. Kiteytettäessä raakatuote uudelleen metanoli/etyyliasetaatista saadaan 630 mg 3-karbanoyyli-oksirnetyyli-7-raetoksi-y^ -(2-tienyyliasetamido)-3-kefeemi-ä-karbonihappoa.Completion of the reaction is determined by tlc analysis using an ethyl acetate / benzene 6: k system. A cold solution of 1.65 g of NaHCO 3 in 0 ml of water is carefully added and the clear solution is concentrated to a volume of 30-35 ml at room temperature in vacuo. The aqueous solution is extracted with ethyl acetate to remove neutral impurities and the organic layer is discarded. The aqueous layer is cooled to 0-5 ° C, poured into ethyl acetate (10 mL) and the pH is adjusted to 1.8 with cold 10 HCl with constant stirring. The layers are separated and the ethyl acetate layer is washed three times with 3 ml of ice water. The aqueous layer and washings are combined and then back-extracted twice with 20 ml of ethyl acetate. The second ethyl acetate extract is washed twice with cold water and combined with the first extract. The solvent is evaporated to dryness and rinsed with 10 ml of benzene / methanol (8: 2) and dried to a constant weight of 830 mg. Recrystallization of the crude product from methanol / ethyl acetate gives 630 mg of 3-carbanoyloxymethyl-7-methoxy-N- (2-thienylacetamido) -3-cephem-α-carboxylic acid.

57953 k 2857953 k 28

Esimerkki 10 S-karbaniDyylioksimetyyli-V-metoksi-?/®-(2-tienyyliasetamido)“3-kefeemi-4- karbonihappo A. 3-karbanoyylioksiinetyyli-7-metoksi-7/^-(D-5-trikloorietoksikarbonyyli-amino-5-karboksivaleramido)-3-kefeemi-4-karbonihapon di-bentsyylioksi-metyyliesteriExample 10 S-Carbanediyloxymethyl-N-methoxy-β- (2-thienylacetamido) -3-cephem-4-carboxylic acid A. 3-Carbanoyloxyoxyethyl-7-methoxy-N- (D-5-trichloroethoxycarbonylamino) 5-Carboxyvaleramido) -3-cephem-4-carboxylic acid dibenzyloxymethyl ester

Suspensiota, jossa on 985 mg 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-7/£-(D-5-triklcorietoksikarbonyyliamino-5-karboksivaleramido)-3-kefeemi-4-karbonihapon bis-disykloheksyyliamiinisuolaa 17 mlrssa metyleenikloridia 0-l°C:ssa, käsitellään 0,294 ml:11a kloorimetyylibentsyylieetteriä 5 ml:ssa metyleenikloridia 52 minuutin aikana. 4 tunnin kuluttua reaktioseos suodatetaan ja suodosta käsitellään kahdesti 5 ml :11a kylmää kyllästettyä natriumbikarbonaattia, kahdesti 10 ml:11a jäävettä, sitten kuivataan natriumsulfaatilla ja suodatetaan. Suodos väkevöidään jäännökseksi, se lietetään 15 ml:n kanssa isopropyylieetteriä ja otsikoitu tuote saadaan kiinteänä aineena suppilossa (726 mg).A suspension of 985 mg of 3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7H- (D-5-trichloroethoxycarbonylamino-5-carboxivaleramido) -3-cephem-4-carboxylic acid bis-dicyclohexylamine salt in 17 ml of methylene chloride at 0 ° C , treated with 0.294 ml of chloromethylbenzyl ether in 5 ml of methylene chloride over 52 minutes. After 4 hours, the reaction mixture is filtered and the filtrate is treated twice with 5 ml of cold saturated sodium bicarbonate, twice with 10 ml of ice water, then dried over sodium sulfate and filtered. The filtrate is concentrated to a residue, slurried with 15 mL of isopropyl ether and the title product is obtained as a solid in a funnel (726 mg).

B. 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-7/&- φ- 5-trikloorietoksikarbonyyliami-no-5-karboksivaleryyli-(2-tienyyliasetyyli)amino?-3-kefeemi-4-karboni-hapon di-bentsyylioksimetyyliesteriB. 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7H-β-5-trichloroethoxycarbonylamino-5-carboxivaleryl- (2-thienylacetyl) amino] -3-cephem-4-carboxylic acid dibenzyloxymethyl ester

Liuosta, jossa on 0,20 g di-bentsyylioksimetyyliesteriä 1,6 ml:ssa metyleenikloridia, käsitellään 0,222 ml:11a «a(rpineeniä, 0,20 ml:11a etyyli-N-trimetyy-lisilyylikarbamaattia ja 0,115 ml:11a 2-tienyyliasetyylikloridia paluujäähdytys-lämpötilassa 23 tuntia. Reaktioseos uutetaan 2 ml:11a jääkylmää liuosta, joka sisältää 2,5 % natriumbikarbonaattia ja 10 % natriumkloridia ja metyleenikloridi-liuos pestään 2 ml:11a kyllästettyä natriumkloridiliuosta, kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja suodos lisätään 50 ml:aan kylmää heksaania otsikoidun tuotteen saamiseksi saostumana; paino 0,161 g.A solution of 0.20 g of dibenzyloxymethyl ester in 1.6 ml of methylene chloride is treated with 0.222 ml of ethylene, 0.20 ml of ethyl N-trimethylsilylcarbamate and 0.115 ml of 2-thienylacetyl chloride. The reaction mixture is extracted with 2 ml of ice-cold solution containing 2.5% sodium bicarbonate and 10% sodium chloride and the methylene chloride solution is washed with 2 ml of saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulphate, filtered and the filtrate is added to 50 ml. hexane to give the title product as a precipitate, weight 0.161 g.

C. Bentsyylioksimetyyli-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi- 7/3 -(2-tienyyliasetamido ) -3-kefeemi-4-karboksylaattiC. Benzyloxymethyl-3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7 / 3- (2-thienylacetamido) -3-cephem-4-carboxylate

Liuosta, jossa on 0,150 g kohdan B mukaan valmistettua imidiä 4,1 ml:ssa dioksaania, joka sisältää 0,20 ml etikkahappoa, käsitellään 0,86 g:11a aktivoitua sinkkiä 2 1/2 tuntia. Reaktioseos suodatetaan ja jäännös pestään suppilossa 20 ml:11a kloroformia. Yhdistetty suodos pestään kahdesti 20 ml:11a vettä, 10 ml:11a kylmää kyllästettyä natriumbikarbonaattia, 10 ml:11a kyllästettyä natriumkloridia, sitten kuivataan magnesiumsulfaatilla, suodatetaan ja väkevöidään 0,143 g:n saamiseksi jäännöstä, joka sisältää bentsyylioksimetyyliesterin.A solution of 0.150 g of the imide prepared according to B in 4.1 ml of dioxane containing 0.20 ml of acetic acid is treated with 0.86 g of activated zinc for 2 1/2 hours. The reaction mixture is filtered and the residue is washed in a funnel with 20 ml of chloroform. The combined filtrate is washed twice with 20 ml of water, 10 ml of cold saturated sodium bicarbonate, 10 ml of saturated sodium chloride, then dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated to give 0.143 g of a residue containing benzyloxymethyl ester.

29 5 7 9 5 3 D. 3-karbaiiDyylioksijnetyyli-7-inetoksi-y<i>-(2-tienyyliasetaJiu.do)-3-kefeemi-4 -karbonihappo 25,4 mg bentsyylioksimetyyliesteriä liuotetaan 0,25 ml:aan liuosta, joka on tehty 9 ml: s ta metanolia ja 1 ml:sta väkevää kloori vetyhappoa. 1 tunnin kuluttua reaktio on päättynyt ja tuote eroitetaan väkevöimällä tyhjössä, jolloin saadaan 44 %:n saalis.29 5 7 9 5 3 D. 3-Carbaldlyloxymethyl-7-ethoxy-γ- (2-thienylacetyl) -3-cephem-4-carboxylic acid 25.4 mg of benzyloxymethyl ester are dissolved in 0.25 ml of a solution. made from 9 ml of methanol and 1 ml of concentrated hydrochloric acid. After 1 hour, the reaction is complete and the product is isolated by concentration in vacuo to give a 44% yield.

Esimerkki 11 3 -karbamoyy 1 ioks ime tyyli- 7 -metoks i- 7/2> - ( 2-tienyyliasetamido )-3-kefeemi-4- karbonihapon metoks imetyy lies teri A. 7-<D-5-klooriasetajnidoadipamido)-7-metoksi-3-karbamDyylioksimetyyli-3-kefeemi-4-karbonihappo 14,2 g (63,6 %:n puhdas) l/5>-(D-5-amino-5-karboksivaleramido) -3-karbarrD-yy1ioks imetyy1i-7-metoksi-3-kefeemi-4-karbonihapon mononatriumsuolaa liuotetaan 200 ml:aan jääkyljieä vesiliuosta, jossa on 4,9 ml .85 % H^PO^ (säädetty pH-arvoon 7,0 50 % NaOH) ja joka on kylmävaippaisessa Waring-sekoittajassa. pH-elektrodi ripustetaan liuokseen ja samalla kun sekoitetaan mahdollisiirman voimakkaasti pH säädetään arvoon 11,0. 4,0 ml:n määrä juuri tislattua klooriasetyylikloridia lisätään ja pH:ta ylläpidetään arvossa 10,5-11,0 lisäämällä Na0H:ta. Samalla tavalla panostetaan lisää happokloridia (4,0 ml, sitten 2,0 ml) ja 10 minuutin voimakkaan sekoituksen jälkeen voidaan todeta juuttuminen otsikoiduksi yhdisteeksi tapahtuneen täydellisesti ohutkerroskromatografiän avulla.Example 11 3-Carbamoyl-methoxy-7-methoxy-7H- (2-thienyl-acetamido) -3-cephem-4-carboxylic acid methoxy-ethyl ester A. 7- (D-5-chloroacetanidoadipamido) -7 -Methoxy-3-carbamyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylic acid 14.2 g (63.6% pure) 1- [5- (D-5-amino-5-carboxyvaleramido) -3-carbamyl] oxymethyl The monosodium salt of -7-methoxy-3-cephem-4-carboxylic acid is dissolved in 200 ml of an ice-cold aqueous solution containing 4.9 ml of 85% H 2 PO 4 (adjusted to pH 7.0 with 50% NaOH) in a cold jacket. Waring blender. The pH electrode is suspended in the solution and, while vigorously stirring the potential transfer, the pH is adjusted to 11.0. 4.0 ml of freshly distilled chloroacetyl chloride are added and the pH is maintained at 10.5-11.0 by the addition of NaOH. In the same way, more acid chloride (4.0 ml, then 2.0 ml) is charged and, after vigorous stirring for 10 minutes, the entrapment to the title compound can be seen to be complete by thin layer chromatography.

Reaktioseosta sekoitetaan yhtä suuren tilavuuden kanssa etyyliasetaattia ja tehdään happameksi väkevällä HCl:llä pH-arvoon 1,7 saakka 0°C:ssa. Kerrokset erotetaan ja uuttaminen toistetaan käyttäen neljää uutta tilavuutta etyyliasetaattia, joka sisältää 1 ml etikkahappoa. Yhdistetyt uutteet kuivataan natriumsulfaa-tiliä, väkevöidään tyhjössä ja keltainen Öljymäinen tähde saostetaan 300 ml:sta bentseeniä. Otsikoitu raakayhdiste (5,35 g, 51 %, noin 60 % puhdasta) otetaan talteen sentrifugoimalla.The reaction mixture is stirred with an equal volume of ethyl acetate and acidified with concentrated HCl to pH 1.7 at 0 ° C. The layers are separated and the extraction is repeated using four new volumes of ethyl acetate containing 1 ml of acetic acid. The combined extracts are dried over sodium sulfate, concentrated in vacuo and a yellow oily residue is precipitated from 300 ml of benzene. The title crude compound (5.35 g, 51%, about 60% pure) is recovered by centrifugation.

B. 3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-7- (D- 5-klooriasetamidoadipamido)-3-kefeemi-4-karbonihapon di-metoksimetyyliesteri 100 mliaan seulakuivattua metyleenikloridia lisätään 1,35 ml syurkollidiinia ja 2,68 g (5,13 mmoolia) kohdan A mukaan saatua tuotetta. Vaaleankeltainen suspensio jäähdytetään 5°C:seen typpiatmosfäärissä ja lisätään 20,335 ml:n erää CICH^OCH^ samalla nopeasti sekoittaen ja pitärrällä reaktiolämpötila 5-lU°C:ssa.B. 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7- (D-5-chloro-acetamidoadipamido) -3-cephem-4-carboxylic acid dimethoxymethyl ester To 100 mL of screen-dried methylene chloride is added 1.35 mL of surcollidine and 2.68 g (5.13 mmol). ). The pale yellow suspension is cooled to 5 ° C under a nitrogen atmosphere and a 20.335 ml portion of CH 2 Cl 2 is added with rapid stirring and the reaction temperature is maintained at 5-1 ° C.

Seosta sekoitetaan 45 minuuttia ja lisätään 10 % lisää kollidiinia ja CIQ^OCH^. Kaikkiaan 1,75 tunnin kuluttua seos suodatetaan. Suodos pestään kolmasti 50 ml:n erillä jäävettä, 50 ml:11a kyllästettyä NaCl-liuosta ja kuivataan natriumsulfaa-Lilla. Suodaletut uutteet väkevöidään tyhjössä, jolloin saadaan 1,80 g raakaa dies-teriä, joka puhdistetaan krorratografoinalla käyttäen 30 g karkeata silikageeliä.The mixture is stirred for 45 minutes and 10% more collidine and Cl 2 OCH 2 are added. After a total of 1.75 hours, the mixture is filtered. The filtrate is washed three times with 50 ml portions of ice water, 50 ml of saturated NaCl solution and dried over sodium sulfate. The filtered extracts are concentrated in vacuo to give 1.80 g of crude diesel which is purified by chromatography using 30 g of coarse silica gel.

30 5 7 9 5 330 5 7 9 5 3

Eluoitaessa 400-500 ml:11a saadaan sivutuotteet ja eluoimalla 500 ml :11a etyyliasetaattia saadaan 1,22 g valkoista amorfista otsikoitua diesteriä.Elution with 400-500 ml gives by-products and elution with 500 ml of ethyl acetate gives 1.22 g of a white amorphous title diester.

C. Di (metoks imetyyli)-3-karbamoyy1ioksimetyy1i-7-metoksi-7 /i-/D-5-kloori~ asetamidoadipoyyli-(2-tienyyliasetyyli)-amino/-3-kef earii-4-karboksy laa tt i 100 mg:aan kohdan B mukaan saatua tuotetta suljetussa hypopuliossa lisätään 0,350 ml etanolista vapaata CHCl^, 0,068 ml etyyli-N-trimetyylisilyylikarba-raattia (0 ,395 mmoolia) ja 2-tienyyliasetyylikloridia (0,034 ml, 0,274 mmoolia) Homogeenista seosta kuumennetaan 4 tuntia 50°C:ssa ja sen jälkeen annetaan seistä 25 tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktioseos saostetaan 3 tilavuudesta kuivaa heksaania ja sakka otetaan talteen sentrifugoimalla, liuotetaan CH^Cl^^aan ja - liuos väkevöidään tyhjössä vaaleankeltaiseksi vaahdoksi; saalis 80 mg. Chutkerros-kronatografia ja NMR-spektri osoittaa, 'että tämä aine on olennaisesti puhdas otsikoitu yhdiste.C. Di (methoxymethyl) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7H-D-5-chloroacetamidoadipoyl- (2-thienylacetyl) amino] -3-cefar-4-carboxylate 100 0.350 ml of ethanol-free CHCl 3, 0.068 ml of ethyl N-trimethylsilylcarbate (0.395 mmol) and 2-thienylacetyl chloride (0.034 ml, 0.274 mmol) are added to 1 mg of the product obtained in B in a closed hypopoly. The homogeneous mixture is heated for 4 hours. At ° C and then allowed to stand for 25 hours at room temperature. The reaction mixture is precipitated from 3 volumes of dry hexane and the precipitate is collected by centrifugation, dissolved in CH 2 Cl 2 and the solution is concentrated in vacuo to a pale yellow foam; hall 80 mg. Chut layer chronography and NMR spectra indicate that this material is a substantially pure title compound.

D. 3 -karbamoyy lioks imetyy li- 7 -metoks i-1/2> - (2 -t ienyyliaset amido) - 3-ke feemi- 4-karöonihapon metoksimetyyliesteriD. 3-Carbamoyl solution absorbed 1-7-methoxy-1/2 - (2-phenylacetamido) -3-cephem-4-caronic acid methoxymethyl ester

Kohdan C mukaan saatu raaka imidi (20 mg) 0,250 ml:ssa absoluuttista etanolia käsitellään 5 mg:11a tioureaa 24 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Metoksimetyyliesteri todetaan olevan läsnä ohutkerroskromatografian avulla ja lähtöimidi on täydellisesti reagoinut.The crude imide obtained according to C (20 mg) in 0.250 ml of absolute ethanol is treated with 5 mg of thiourea for 24 hours at room temperature. The methoxymethyl ester is found to be present by thin layer chromatography and the starting imide is completely reacted.

Vaihtoehtoisesti raakaa imidiä (25 mg) ja sinkkipölyä (100 mg) käsitellään seoksella, jossa on 0,5 ml etyyliasetaattia ja 0,025 ml jääetikkaa. 4 tunnin kuluttua huoneenlämpötilassa otsikoidun tuotteen läsnäolo todetaan ohutkerroskro-matografian avulla.Alternatively, the crude imide (25 mg) and zinc dust (100 mg) are treated with a mixture of 0.5 ml of ethyl acetate and 0.025 ml of glacial acetic acid. After 4 hours at room temperature, the presence of the title product is determined by thin layer chromatography.

Esimerkki 12Example 12

Metoksimetyyli-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-7(2-tienyyliasetamido)- 3-kefeemi-4-karboksylaattiMethoxymethyl 3-carbamoyloxymethyl 7-methoxy-7- (2-thienylacetamido) -3-cephem-4-carboxylate

Seokseen, jossa on 6,75 ml ς/,-pieneeniä ja 12 ml dikloorietaania, lisätään 5,55 mg N-trimetyylisilyylibentseenisulfonamidia, 3,5 ml 2-tienyyliasetyylikloridia ja 500 mg metoksimetyyli- Ψ -(D-5-trikloorietoksikarbonyyliamino-5-karboksivalerami-do)-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-4-karboksylaattia. Saatua reaktio-seosta kuumennetaan paluujäähdyttäen 65°C:ssa 10 tuntia. 3,4 ml saatua liuosta 31 57953 jäähdytetään kuivalla jäällä ja sitten lämmitetään paluujäähdytyslämpötilaan. Saatu liuos sisältäen kiinteitä kiteitä laimennetaan 100 ml:ksi dikloorietannilla. Saadun liuoksen analyysi osoittaa että läsnä on l»l,8 mg otsikoitua tuotetta.To a mixture of 6.75 ml of ς / β-diene and 12 ml of dichloroethane are added 5.55 mg of N-trimethylsilylbenzenesulfonamide, 3.5 ml of 2-thienylacetyl chloride and 500 mg of methoxymethyl- (D-5-trichloroethoxycarbonylamino-5- karboksivalerami-do) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-4-carboxylate. The resulting reaction mixture is heated to reflux at 65 ° C for 10 hours. 3.4 ml of the resulting solution 31 57953 are cooled with dry ice and then heated to reflux. The solution obtained, containing solid crystals, is diluted to 100 ml with dichloroethane. Analysis of the resulting solution shows the presence of 1.8 mg of the title product.

Esimerkki 13 3-karbaraoyylioksimetyyli-7“metoksi-7/3-(2-tienyyliasetamido)-3-kefeemi-l*~ karbonihappoExample 13 3-Carbaraoyloxymethyl-7 'methoxy-7- [3- (2-thienylacetamido) -3-cephem-1 * -carboxylic acid

Lietteeseen, jossa on 200 mg '£/2»-(D-5,“t-butoksikarbonyyliamino-5,-karboksi-valeramido)-3-karbamoyylioksimetyyli-7-metoksi-3-kefeemi-U-karbonihappoa 2 ml:ssa etanolista vapaata kloroformia, lisätään U32 mg N-trimetyylisilyylitrifluoriasetami-- dia ja 0,56 mg trietyyliamiinia. Tähän seokseen lisätään 182 ^ul tienyyliasetyyli- kloridia. Liuosta kuumennetaan öljyhauteella U5°C:ssa 9 1/2 tuntia. Sitten seos jäähdytetään lisäämällä n-heksaania. Liuos sentrifugoidaan ja heksaani kaadetaan pois kumiinaisesta aineesta. Tämä käsittely toistetaan ja heksaanifraktiot hylätään. Kumimainen aine liuotetaan 10 ml:aan muurahaishappoa 30 minuutin aikana. Muurahaishappo poistetaan tyhjössä. Kiinteä aine jaetaan etyyliasetaatin (3 ml) ja veden (3 ml) kesken ja pH säädetään arvoon 2,5. Etyyliasetaattikerros väkevöidään kuiviin. Sekä TLC-analyysi että neste-kromatografia osoittaa 3-karbamoyylioksimetyyli-7~nie-toksi-7^0 -(2-tienyyliasetarnido)-3-kefeemi-l4-karbonihapon läsnäolon. Raakatuote puhdistetaan preparatiivisella TLC:llä käyttäen silikageelilevyjä ja liuotinta, jossa on bentseeniä, metanolia ja etikkahappoa suhteessa 50:10:6, jolloin saadaan 20 mg otsikoitua yhdistettä.To a slurry of 200 mg of β / 2 '- (D-5, t-butoxycarbonylamino-5'-carboxyvaleramido) -3-carbamoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephem-U-carboxylic acid in 2 ml of ethanol free chloroform, U32 mg of N-trimethylsilyltrifluoroacetamide and 0.56 mg of triethylamine are added. To this mixture is added 182 μl of thienylacetyl chloride. The solution is heated in an oil bath at U5 ° C for 9 1/2 hours. The mixture is then cooled by adding n-hexane. The solution is centrifuged and the hexane is poured out of the gum. This treatment is repeated and the hexane fractions are discarded. The gum is dissolved in 10 ml of formic acid over 30 minutes. The formic acid is removed in vacuo. The solid is partitioned between ethyl acetate (3 ml) and water (3 ml) and the pH is adjusted to 2.5. The ethyl acetate layer is concentrated to dryness. Both TLC analysis and liquid chromatography show the presence of 3-carbamoyloxymethyl-7-nitro-7-O- (2-thienylacetamido) -3-cephem-14-carboxylic acid. The crude product is purified by preparative TLC using silica gel plates and a solvent of benzene, methanol and acetic acid in a ratio of 50: 10: 6 to give 20 mg of the title compound.

Esimerkki lh 3-karbamoyylroksimetyyli-7-metoksi-7/2'*'(2-tienyyliasetamido)-3-kefeemi-li*" karbonihappoExample 1h 3-Carbamoyloxymethyl-7-methoxy-7/2 '*' (2-thienylacetamido) -3-cephem-1'-carboxylic acid

Lietteeseen, jossa on 200 mg 7/>-(D-5-araino-5-karboksivaleramido)-3-karbemo-yylioksimetyyli-7~metoksi-3-kefeerai-ä-karbonihappoa 2 ral:ssa etanolista vapaata kloroformia, lisätään 1*30 mg N-trimetyylisilyylibentseenisulfonamidia ja 0,6 mg trietyyliamiinia. Tähän seokseen lisätään 162 ^ul tienyyliasetyylikloridia. Liuosta kuumennetaan öljyhauteella l*5°C:ssa 10 tuntia. Sitten seos jäähdytetään lisäämällä n-heksaania. Liuos sentrifugoidaan ja heksaani kaadetaan pois kumimaisesta aineesta. Tämä käsittely toistetaan kahdesti ja heksaanifraktiot hylätään. Kumimainen aine jaetaan etyyliasetaatin (3 ml) ja veden (3 ml) kesken ja pH säädetään arvoon 2,5. Etyyliasetaattikerros väkevöidään kuiviin, jolloin saadaan sekä Tl.C-analyysin että neste-kromatcgrafian mukaen raaka 3~karbaraoyylioksimetyyli-7-metoksi-7y£-(2-tienyyliasetur.ido)-3-kefoewi-l»-karbonihappo. Ruokatuote puhdistetaan preparatiivisella TI.C:llä käyttäen silikageelilevyjä ja liuotinta, jossa on bentseeniä, metanolia ja etikkahappoa suhteessa 50:10:6, jolloin saadaan 25 mg otsikoitua yhdistettä.To a slurry of 200 mg of 7 - [(D-5-amino-5-carboxivaleramido) -3-carbemoyloxymethyl-7-methoxy-3-cephera-α-carboxylic acid in 2 ral of ethanol-free chloroform is added 1 * 30 mg of N-trimethylsilylbenzenesulfonamide and 0.6 mg of triethylamine. To this mixture is added 162 μl of thienylacetyl chloride. The solution is heated in an oil bath at 1 * 5 ° C for 10 hours. The mixture is then cooled by adding n-hexane. The solution is centrifuged and the hexane is poured off from the gum. This treatment is repeated twice and the hexane fractions are discarded. The gum is partitioned between ethyl acetate (3 ml) and water (3 ml) and the pH is adjusted to 2.5. The ethyl acetate layer is concentrated to dryness to give crude 3-carbaraoyloxymethyl-7-methoxy-7β- (2-thienylaceturido) -3-cefoewi-1H-carboxylic acid according to both T1C analysis and liquid chromatography. The food product is purified by preparative TI.C using silica gel plates and a solvent of benzene, methanol and acetic acid in a ratio of 50: 10: 6 to give 25 mg of the title compound.

Claims (1)

57953 32 Patenttivaatimus: Menetelmä 7-aminokefalosporaanihappojohdannaisten valmistamiseksi, joilla on antibioottinen vaikutus ja joilla on kaava: )CH3 R ' -NH--— JCH2A CD 0 ' 8 COOR0 jossa R' on 2-tienyyliasetyyli, 2-furyyliasetyyli, fenyyliasetyyli, o^-atsidofenyyliasetyyli tai fenyylitioasetyyli, A on vety tai karba- O moyylioksi, ja R on vety tai natrium tai kalium, tunnettu siitä, että käsitellään yhdistettä, jolla on kaava: 0CH3 NHR2 0 S f lt / h-c-(ch2>3-c-nh--r COOR3 l Γ„ Λ ^-CH2A COOR8 81 8 jossa h merkitsee samaa kuin edellä, R merkitsee samaa kuin R tai esteritähdettä, o 3 K cai alkoksikarbonyyliryhmä, joka mahdollisesti on halogenoitu, ja R on esteri-tähde, kaavan R'-X mukaisella asyylihaloaenidilla, jossa R’ merkitsee samaa kuin edellä ja X on halogeeni, bis-(tri-metyylisilyyli)-trifluoriasetamidin, N-trimetyylisilyyli-trifluori-asetamidin, N-trimetyylisilyyli-ftalimidin, etyyli-N-trimetyylisilyyli-karbamaatin tai N-trimetyylisilyylibentseenisulfonamidin läsnäollesssa, minkä jälkeen 5-alkoksikarbonyyliamino-5-karboksivaleryyliryhmä yhdisteessä, jolla on kaava: NHR2 0 OCH- c i n 3 ύ \ H-C-(CH-).-C-N__-—^ N COOR3 R’ 1 // —CH2A COOR8 33 57953 2 3 81 jossa R*, R , R , R ja A merkitsevät samaa kuin edellä, lohkaistaan, ja että mikäli saatu kaavan (I) mukainen tuote on esteri se lohkaistaan vastaavaksi vapaaksi hapoksi tai suolaksi ja haluttaessa suola muutetaan vastaavaksi hapoksi tai vapaa happo muutetaan vastaavaksi suolaksi. 57953 34 Förfarande för framställning av 7-aminocefalosporansyraderivat med antibiotisk aktivitet och med formeln DCH3 / SN> R'-NH--f ^ J,-Nn^L CH2A (I) () COOR8 väri R' är 2-tienylacetyl, 2-furylacetyl, fenylacetyl, c<-azidofenyl- ö acetyl eller fenyltioacetyl, A är väte eller karbamoyloxi, och R är väte eller natrium eller kalium, kännetecknat därav, att man behandlar en förening med formeln 0CH3 NHR2 0 S I II / \ h-c-(ch2)3-c-nh--r COOR3 l ru Δ S--CH2A COOR8' 81 8 väri A har ovan amivna betydelse, P betecknar detsamma san R eller betecknar en 2 3 esterrest, P.' är en a]>oxikarhonylorupp, san eventuellt är halogenerad, och R är en f esterrest, med en ecylhalogenid med formeln R'-X, väri R har ovan angivna betydelse och X är halogen, i närvaro av bis-(trimetylsilyl)-trifluoracetamid, N-trimetylsilyl-trifluoracetamid, N-trimetylsilyl-ftalimid, etyl-N-trimetylsilylkarbamat eller N-trimetylsilylbensen-sulfonamid, varefter 5-alkoxikarbonylamino~5-karboxivalerylgruppen i föreningen med formeln: NHR2 0 OCH, H-C-(CH2)3-C-N 4—Y N COOR3 R’ J>-NY*J-CV I o· COOR0A process for the preparation of 7-aminocephalosporanic acid derivatives having antibiotic activity and having the formula:) CH 3 R '-NH - - JCH 2 A CD 0' 8 COOR 0 wherein R 'is 2-thienylacetyl, 2-furylacetyl, phenylacetyl, o -azidophenylacetyl or phenylthioacetyl, A is hydrogen or carbamoyloxy, and R is hydrogen or sodium or potassium, characterized in that a compound of formula: OCH 3 NHR2 0 S f lt / hc- (ch2> 3-c- nh - r COOR3 l Γ „Λ ^ -CH2A COOR8 81 8 wherein h is as defined above, R is as defined for R or an ester residue, o is a 3 K C1a alkoxycarbonyl group optionally halogenated, and R is an ester residue of formula R An acyl haloenide according to '-X, wherein R' is as defined above and X is halogen, bis- (trimethylsilyl) trifluoroacetamide, N-trimethylsilyl trifluoroacetamide, N-trimethylsilyl phthalimide, ethyl N-trimethylsilyl carbamate or n-trimetyylisilyylibentseenisulfonam in the presence of an id, followed by a 5-alkoxycarbonylamino-5-carboxyvaleryl group in a compound of the formula: NHR 2 OCH- cin 3 ύ \ HC- (CH -) .- C-N __-— ^ N COOR 3 R '1 // —CH 2 A COOR 8 33 57953 2 3 81 wherein R *, R, R, R and A have the same meaning as above, are cleaved and that if the product of formula (I) obtained is an ester it is cleaved to the corresponding free acid or salt and, if desired, the salt is converted to the corresponding acid or free the acid is converted to the corresponding salt. 57953 34 For the preparation of 7-aminocephalosporan derivatives with antibiotic activity and with the formula DCH3 / SN> R'-NH - f ^ J, -Nn ^ L CH2A (I) () COOR8 color R 'is 2-thienylacetyl, 2- furylacetyl, phenylacetyl, c <-azidophenyl- acetyl or phenylthioacetyl, A or a carbamoyloxy, and R a sodium or potassium, a solid which can be treated with the formulation 0CH3 NHR2 0 SI II / \ hc- ) 3-c-nh - r COOR3 l ru Δ S - CH2A COOR8 '81 8 color A har ovan amivna betydelse, P betecknar detsamma san R eller betecknar en 2 3 esterrest, P.' is en]> oxycarbonyl group, optionally halogenated, and R is en esters, with ecyl halides of formula R'-X, color R is an anhydrous bethel and X is halogen, and is bis- (trimethylsilyl) -trifluoroacetamide , N-trimethylsilyl-trifluoroacetamide, N-trimethylsilyl-phthalimide, ethyl-N-trimethylsilylcarbamate or N-trimethylsilylbenzenesulfonamide, copper 5-alkoxycarbonylamino-5-carboxyvaleryl group in the form of HCl (CH2 O) 4 — YN COOR3 R 'J> -NY * J-CV I o · COOR0