FI56751C - Foerfarande foer bestaemning av kalciumhalten i blod - Google Patents

Foerfarande foer bestaemning av kalciumhalten i blod Download PDF

Info

Publication number
FI56751C
FI56751C FI781483A FI781483A FI56751C FI 56751 C FI56751 C FI 56751C FI 781483 A FI781483 A FI 781483A FI 781483 A FI781483 A FI 781483A FI 56751 C FI56751 C FI 56751C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
calcium
blood
sample
process according
ethylenediamine tetraacetate
Prior art date
Application number
FI781483A
Other languages
English (en)
Other versions
FI56751B (fi
Inventor
Markus Sandholm
Original Assignee
Orion Yhtymae Oy
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Orion Yhtymae Oy filed Critical Orion Yhtymae Oy
Priority to FI781483A priority Critical patent/FI56751C/fi
Priority to SE7903631A priority patent/SE7903631L/
Priority to AU46833/79A priority patent/AU4683379A/en
Priority to DE19792918335 priority patent/DE2918335A1/de
Priority to NO791570A priority patent/NO791570L/no
Priority to FR7911857A priority patent/FR2425642A1/fr
Priority to DK193179A priority patent/DK193179A/da
Publication of FI56751B publication Critical patent/FI56751B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI56751C publication Critical patent/FI56751C/fi

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/84Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving inorganic compounds or pH

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)

Description

F55F1 [B] (11)KUULUTUSjULKAISU
Ma l j i ; utlAggningsskrift bb /b 1 C Patentti ftyörjr..· tty 10 -3 1933
Patent meddelat / (51) Kv.lk.Vlnt.CI.· 6 01 I 33/16 SUOMI —FINLAND (21) P»t*nttlh«k*mu$ — P»t«ntmn*öknlnj 7Ö1U83 (22) Htktmitpllvi — Aiueknlngadaf 11.05*78 (23) Alkupllvft —Glltifhattdif 11.05-78 (41) Tullut julkltaksl — Bllvlt offuntllg 12.11.79
Patentti· Ja raklstarlhailitu. (44) NlhtivlkllpMien ,t kuuLJullutoun pvm.-
Patent· och reglsterstyrelaan ' Antektn utiagd och utUkrWwn publkarad 30.11.79 (32)(33)(31) Pyydttty etuoikeus--Begird prlorltet (71) Orion-Yhtymä Oy, Nilsiänkatu 10-lU, 00510 Helsinki 51, Suomi-Finland(Fl) (72) Markus Sandholm, Helsinki, Suomi-Finland(Fl) (7k) Fermion Oy, Patenttiosasto (5I+) Menetelmä verenkalsiumtason määrittämiseksi - Förfarande för bestämning av kalciumhalten i blod
Keksinnön tarkoituksena on esittää uusi pikamenetelmä veren kalsium-tason määrittämiseksi.
On olemassa ihmisten ja eläinten sairauksia, joissa oireiden syynä on veren epänormaali kalsiumpitoisuus. Oikean hoitotavan määräämiseksi on kalsiumtaso pystyttävä määrittämään nopeasti ja luotettavasti. Erityisesti kun on kysymys eläimistä, on taudin määrityksen tapahduttava mieluimmin paikan päällä. Keksinnön mukainen menetelmä on - kehitetty nimenomaan tätä silmälläpitäen.
Mayer, G. P. et ai. (3. Am. Vet. Med. Ass. 146/8, 839-842) ovat kuvanneet määritysmenetelmän, joka perustuu etyleenidiamiinin tetra-asetaatin (EDTA) kykyyn kelatoida kalsium ja siihen, että veren hyytymismekanismi riippuu vapaista Ca^+-ioneista. Koe suoritetaan siten, että joukko koeputkia, joissa on nouseva määrä EDTA:ta, täytetään verellä. Koska koaguloituminen tapahtuu vain niissä koeputkissa joissa on ylimäärä kalsiumia, voidaan veren kalsiumpitoisuus määrittää. Koe on kuitenkin hankala suorittaa ja on vaikea määrittää milloin hyytyminen on koeputkisarjassa loppunut ja mikä koeputkista .vastaa 2 56761 oikeaa kalsiumpitoisuutta, koska ekvivalenttipiste on epäselvä, mikä ilmeisesti johtuu siitä, että veren proteiiniin sitoutunut kalsium vapautuu suhteellisen hitaasti.
Tämä keksintö kuvaa uuden pikamenetelmän, jossa lyhyessä ajassa saadaan selvä ekvivalenttipiste ja jonka avulla voidaan päätellä onko veren kalsiumpitoisuus yli tai alle määrätyn raja-arvon.
Keksinnön mukaisessa menetelmässä verinäytteen kalsium sidotaan ylimäärällä EDTA:ta. Tämä seos lisätään määrättyyn määrään ka 1 siumion eja tai tähän seokseen lisätään määrätty määrä ka Isiumion eja. Se määrä EDTA:ta, joka ei kulunut veren kalsiumin kelatoimiseen reagoi nyt kal-siumionien kanssa. Jos kaikki Ca^+-ionit sitoutuvat EDTA:n kanssa, ei tapahdu koaguloitumista, jos taas Ca^+-ioneja jää sitoutumatta, " tapahtuu hyytyminen.
Koe suoritetaan yhdessä koeputkessa, jossa on ylimäärä EDTA:ta.
Tähän voidaan käyttää erilaisia EDTA:n suoloja, mutta edullisemmaksi on nopean liukenevaisuutensa takia osoittautunut kaliumsuola. Koeputki on varustettu asteikolla, mikä vastaa veren eri kalsiumpitoisuuksia. Kokonaisverta tai plasmaa lisätään koeputkeen raja-arvon asteikkoa vastaava määrä. Sekoitetaan hyvin ja seos lisätään määrättyyn määrään kalsiumioneja tai seokseen lisätään määrätty määrä kalsiumioneja, esim. kalsiumkloridia, ja jotain hyytymistä nopeuttavaa ainetta, esim. tromboplastiinia (valmistettu naudan aivoista].
Viidessä minuutissa on ekvivalenttipiste saavutettu. Jos käytetty EDTA-määrä pystyy sitomaan kaiken kalsiumin, sekä veressä olleen että lisätyn, ei näyte koaguloidu ja se jää juoksevaksi, mikä tarkoittaa sitä, että veren kalsiumtaso on alhaisempi kuin valittu raja-arvo. Jos sensijaan näyte sisältää vapaita kalsiumioneja, käynnistyy koaguloitumismekanismi ja näyte hyytyy tai siinä esiintyy hyytymiä eli veren kalsiumtaso on korkeampi kuin valittu raja-arvo.
Vaihtelemalla EDTA- ja verinäytemäärää sekä lisättävien kalsium-ionien määrää voidaan valita eri kalsiumpitoisuuksia vastaavia raja-arvoja. Yksinkertaisimmaksi on osoittautunut verinäytemäärän vaihtelu. Se voidaan helposti tehdä varustamalla koeputki täyttömerkein, jotka vastaavat tiettyjä veren kalsiumpitoisuuksia. On luonnollisesti 3 56761 edullisinta valita sellaiset vertailuarvot, jotka ovat lähinnä kriittisiä veren kalsiumpitoisuuksia: 9 mg/100 ml seerumia (2.25 mmol/lit.) ja 8 mg/100 ml seerumia (2.00 mmol/lit.).
Mikäli raja-arvoksi valitaan naudan plasman kalsiumpitoisuus 8 mg/100 ml ja näytteenä käytetään 10 ml:aa kokoverta, jonka hyytyminen estetään 10.1 mg:11a K^EDTA^h^O (25.0 μΜ), voidaan naudan keskimääräisen hema-tokriitin mukaan (33.5 %) laskea tarvittava kalsiumlisäys, joksi saadaan 11.7 juM Ca, mikä vastaa 1.72 mg CaCl2· 2(^0.
" Arvioitaessa tarvittavia reagenssimääriä on lähdetty verisolujen tila- vuusarvosta 33,5 tilavuusprosenttia ja siitä, että seerumin kalsium-pitoisuuden ollessa 6 mg/100 ml sisältää 1 ml kokonaisverta 40 /jg ^ kalsiumia, mikä vastaa 1 jjmol/ml:n pitoisuutta. 0os tähän lisätään 1 ml 0,001 N EDTA-liuosta, saavutetaan ekvivalenttipiste eli kaikki kalsium kelatoituu.
Jos verinäytteen ja EDTArn seos lisätään kalsiumiin, tarvitaan kokeen suorittamiseen kaksi koeputkea. Jos taas lisäys tapahtuu päinvastoin, voidaan pipetoinnin välttämiseksi suorittaa lisäys kiinteässä muodossa, kuten pulverina tai pillerinä.
Raja-arvon valinta riippuu siitä mitä diagnostoidaan. Esimerkiksi haluttaessa varmistua lehmän veren alhaisesta kalsiumtasosta valitaan raja-arvoksi 9 mg%. Jos taas halutaan määrittää veren kalsiumtaso muiden sairauksien takia,(esimerkiksi lihasrappeutumassa tai septi-w sessä kolimastiitissa pienikin ylimäärä kalsiumia voi olla hengen vaarallinen), valitaan raja-arvoksi 8 mg%.
Esimerkki 1
Naudan hypo kalsemian osoittaminen
Koeputki A, jossa on EDTAjta, täytetään verellä, suoraan suonesta, valittuun raja-arvoon asti (8 tai 9 mg%). Putkea käännellään 20 kertaa, ei saa ravistaa, sillä vaahto estää testin tulkintaa. Lasi-ampulliin B, jossa on kalsiumkloridia ja tromboplastiinia, lisätään noin 10 tippaa tislattua vettä ja ravistetaan. Veri-EOTA-seos kaadetaan koeputkesta A lasiampu11iin B. Ampulli suljetaan ja sekoitetaan

Claims (4)

4 S6751 ylös-alas kääntäen 20 kertaa. Ampullin annetaan seistä paikallaan 5 minuuttia, jonka jälkeen tarkastetaan hyytyminen kääntämällä ampulli vaakasuoraan. Jos näyte on hyytynyt, niin näytteen kalsiumarvo ylittää valitun raja-arvon, jos taas näyte on juoksevaa, sen kalsium-arvo alittaa valitun raja-arvon ja naudalla on hypokalsemia. Kenttäkokeissa (yht. 159 koetta) on koe osoittautunut poikimahalvauksen määrittämisessä yksinkertaiseksi ja luotettavaksi. Kun vastaavat seerumit analysoitiin atomiabsorptiospektro-fotometrillä todettiin, että 100 % varmuus saavutetaan, mikäli sallitaan - 0.5 mg/100 ml toleranssi. Kahdella menetelmällä saatujen ka 1 siumarvojen ero johtuu pääasiassa hematokriitin vaihteluista. Keksinnön mukaisessa menetelmässä mitataan veren tai plasman kalsium-tasoa, kun taas klassiset menetelmät mittaavat seerumin tai plasman kalsiumpitoisuutta.
1. Veren tai plasman kalsiumtason määrittämismenetelmä, joka perustuu etyleenidiamiinitetra-asetaatin kykyyn kelatoida kalsium ja siihen, että veren hyytymismekanismi riippuu vapaista kalsiumioneista, tunnettu siitä, että veren kalsium sidotaan ylimäärällä etyleenidiamiinitetra-asetaattia ja tämä seos tai tähän seokseen lisätään määrätty määrä kalsiumioneja ja koaguloitumista kiihdyttävää ainetta.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että etyleenidiamiinitetra-asetaattina käytetään natrium- tai kalium suolaa.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kalsiumina käytetään kalsiumkloridia.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että koaguloinnin kiihdyttäjänä käytetään tromboplastiinia.
FI781483A 1978-05-11 1978-05-11 Foerfarande foer bestaemning av kalciumhalten i blod FI56751C (fi)

Priority Applications (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI781483A FI56751C (fi) 1978-05-11 1978-05-11 Foerfarande foer bestaemning av kalciumhalten i blod
SE7903631A SE7903631L (sv) 1978-05-11 1979-04-25 Forfarande for bestemning av kalciumnivan i blod
AU46833/79A AU4683379A (en) 1978-05-11 1979-05-07 Determination of the calcium level in blood
DE19792918335 DE2918335A1 (de) 1978-05-11 1979-05-07 Verfahren zur bestimmung des calciumspiegels im blut
NO791570A NO791570L (no) 1978-05-11 1979-05-10 Metode for bestemmelse av kalsiumnivaaet i blod
FR7911857A FR2425642A1 (fr) 1978-05-11 1979-05-10 Methode de dosage du taux de calcium dans le sang
DK193179A DK193179A (da) 1978-05-11 1979-05-10 Fremgangsmaade til bestemmelse af kalciumniveauet i blod

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI781483A FI56751C (fi) 1978-05-11 1978-05-11 Foerfarande foer bestaemning av kalciumhalten i blod
FI781483 1978-05-11

Publications (2)

Publication Number Publication Date
FI56751B FI56751B (fi) 1979-11-30
FI56751C true FI56751C (fi) 1980-03-10

Family

ID=8511692

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI781483A FI56751C (fi) 1978-05-11 1978-05-11 Foerfarande foer bestaemning av kalciumhalten i blod

Country Status (7)

Country Link
AU (1) AU4683379A (fi)
DE (1) DE2918335A1 (fi)
DK (1) DK193179A (fi)
FI (1) FI56751C (fi)
FR (1) FR2425642A1 (fi)
NO (1) NO791570L (fi)
SE (1) SE7903631L (fi)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE53671T1 (de) * 1985-09-05 1990-06-15 Graub Ag Ernst Veterinaermedizinischer reagentiensatz fuer schnelltest zur bestimmung des blutcalciumgehaltes.
DE58902472D1 (de) * 1988-01-05 1992-11-26 Linhart Axel Verfahren und test-kit zur semiquantitativen bestimmung des kalziumgehaltes im blut.

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2147066C3 (de) * 1971-09-21 1975-02-13 Temmler-Werke, Vereinigte Chemische Fabriken, 3550 Marburg Verfahren und Schnelltest-Tablette zur orientierenden selektiven Schnellbestimmung von Calcium Im Harn

Also Published As

Publication number Publication date
NO791570L (no) 1979-11-13
FI56751B (fi) 1979-11-30
DK193179A (da) 1979-11-12
FR2425642A1 (fr) 1979-12-07
AU4683379A (en) 1979-11-15
DE2918335A1 (de) 1979-11-15
SE7903631L (sv) 1979-11-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Magos Selective atomic-absorption determination of inorganic mercury and methylmercury in undigested biological samples
Hill et al. Chlorine isotope effects in the reactions of benzyl and substituted benzyl chlorides with various nucleophiles
Palagama et al. Development and applications of solid-phase extraction and liquid chromatography-mass spectrometry methods for quantification of microcystins in urine, plasma, and serum
Ellerbe et al. Determination of serum uric acid by isotope dilution mass spectrometry as a new candidate definitive method
CN107748267A (zh) 一种测定活化部分凝血活酶时间(aptt)的试剂盒
FI56751C (fi) Foerfarande foer bestaemning av kalciumhalten i blod
Clarkson et al. The mechanism of action of mercurial diuretics in rats; the metabolism of 203hg-labelled chlormerodrin
US4141856A (en) Reference material for establishing anion concentrations in analytical chemistry tests
IE46765B1 (en) Method for determination of free hormones in biological fluids
Marchaj et al. Kinetics and thermodynamics of the interaction of cyanocobalamin (vitamin B12) with haptocorrin: Measurement of the highest protein-ligand binding constant yet reported
Staack et al. New Bühlmann ELISA for determination of amanitins in urine—Are there false positive results due to interferences with urine matrix, drugs or their metabolites
NZ209349A (en) Method of determining alkali metal concentrations in a liquid
Kozarac et al. Direct determination of nonionic and anionic detergents in effluents
Dubravčić Determination of iodine in common salt by the catalytic reduction of ceric ions
Schoenbach et al. The sulfhydryl content of normal and abnormal human sera.
FI76216B (fi) Bestaemningsfoerfarande foer antigen.
GB2032619A (en) Dry radioimmunoassay test composition containing stabilized labelled ligand/antibody mixture
Allmand et al. CXVII.—The photodecomposition of chlorine water and of aqueous hypochlorous acid solutions. Part I
Hayashi et al. Evaluation of fluorescence polarization immunoassay for determination of cyclosporin in plasma
JP2019002821A (ja) 採血管
Rosenfeld et al. Determination of sulphinpyrazone in patient plasma by gas chromatography
US5552323A (en) Method of blending an anticoagulant
EP1536236A1 (en) Reagent for measuring clotting time and method for measuring clotting time
JP4231721B2 (ja) 補体価測定用試薬及びそれを用いた補体価測定値の安定化方法
Moore The use of papain-EDTA for Rh typing withincomplete'antisera

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed

Owner name: ORION-YHTYMAE OY