ES2936218A1 - Composición fungicida para la prevención y lucha contra las enfermedades de la madera de la vid - Google Patents
Composición fungicida para la prevención y lucha contra las enfermedades de la madera de la vid Download PDFInfo
- Publication number
- ES2936218A1 ES2936218A1 ES202130856A ES202130856A ES2936218A1 ES 2936218 A1 ES2936218 A1 ES 2936218A1 ES 202130856 A ES202130856 A ES 202130856A ES 202130856 A ES202130856 A ES 202130856A ES 2936218 A1 ES2936218 A1 ES 2936218A1
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- extract
- combat
- composition according
- disease
- fungi
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title claims abstract description 58
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title claims abstract description 58
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 53
- 239000002023 wood Substances 0.000 title claims abstract description 50
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 title claims abstract description 39
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title abstract description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 91
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims abstract description 58
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 33
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 claims abstract description 24
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 claims abstract description 24
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000011514 vinification Methods 0.000 claims abstract description 13
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims abstract description 11
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 claims abstract description 9
- 230000008030 elimination Effects 0.000 claims abstract 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 claims abstract 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 43
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 claims description 14
- 241000047853 Phaeomoniella chlamydospora Species 0.000 claims description 12
- 229930002877 anthocyanin Natural products 0.000 claims description 12
- 235000010208 anthocyanin Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 claims description 12
- 150000004636 anthocyanins Chemical class 0.000 claims description 12
- HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N flavonol Chemical class O1C2=CC=CC=C2C(=O)C(O)=C1C1=CC=CC=C1 HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 241001593968 Vitis palmata Species 0.000 claims description 11
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 9
- 241000378865 Eutypa lata Species 0.000 claims description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 8
- 150000002216 flavonol derivatives Chemical class 0.000 claims description 8
- 235000011957 flavonols Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 8
- 241000263269 Phaeoacremonium minimum Species 0.000 claims description 7
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims description 7
- 208000014770 Foot disease Diseases 0.000 claims description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 6
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 229930005346 hydroxycinnamic acid Natural products 0.000 claims description 6
- DEDGUGJNLNLJSR-UHFFFAOYSA-N hydroxycinnamic acid group Chemical class OC(C(=O)O)=CC1=CC=CC=C1 DEDGUGJNLNLJSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000010359 hydroxycinnamic acids Nutrition 0.000 claims description 6
- 150000001559 benzoic acids Chemical class 0.000 claims description 5
- 241000803621 Ilyonectria liriodendri Species 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 2
- 229940038487 grape extract Drugs 0.000 claims description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 2
- 241000748457 Melampodium Species 0.000 claims 5
- 235000002532 grape seed extract Nutrition 0.000 claims 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 abstract description 20
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 abstract description 16
- 241000219094 Vitaceae Species 0.000 abstract description 10
- 235000021021 grapes Nutrition 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 15
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 13
- 238000013138 pruning Methods 0.000 description 13
- 241000894007 species Species 0.000 description 12
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 11
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 11
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 11
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 description 10
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 description 10
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 10
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 9
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000011161 development Methods 0.000 description 7
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 7
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000803611 Ilyonectria Species 0.000 description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 235000014101 wine Nutrition 0.000 description 6
- 244000217433 Melampodium divaricatum Species 0.000 description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 description 5
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 5
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 5
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 5
- 230000034994 death Effects 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 5
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 5
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- YCCILVSKPBXVIP-UHFFFAOYSA-N 2-(4-hydroxyphenyl)ethanol Chemical compound OCCC1=CC=C(O)C=C1 YCCILVSKPBXVIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- JUUBCHWRXWPFFH-UHFFFAOYSA-N Hydroxytyrosol Chemical compound OCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 JUUBCHWRXWPFFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000002206 flavan-3-ols Chemical class 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 4
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 235000021286 stilbenes Nutrition 0.000 description 4
- WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N GCG Natural products C=1C(O)=C(O)C(O)=CC=1C1OC2=CC(O)=CC(O)=C2CC1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001221840 Neofusicoccum parvum Species 0.000 description 3
- GLEVLJDDWXEYCO-UHFFFAOYSA-N Trolox Chemical compound O1C(C)(C(O)=O)CCC2=C1C(C)=C(C)C(O)=C2C GLEVLJDDWXEYCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 3
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N isoflavone Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC(OC)=C1C1=COC2=C(C=CC(C)(C)O3)C3=C(OC)C=C2C1=O CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002515 isoflavone derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 235000008696 isoflavones Nutrition 0.000 description 3
- 235000009048 phenolic acids Nutrition 0.000 description 3
- 150000007965 phenolic acids Chemical class 0.000 description 3
- -1 phenolic alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 150000001629 stilbenes Chemical class 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 3
- NGSWKAQJJWESNS-UHFFFAOYSA-N 4-coumaric acid Chemical compound OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C=C1 NGSWKAQJJWESNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 2
- 241000235349 Ascomycota Species 0.000 description 2
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 description 2
- 241000190148 Botryosphaeriaceae Species 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 208000005156 Dehydration Diseases 0.000 description 2
- 240000006497 Dianthus caryophyllus Species 0.000 description 2
- 235000009355 Dianthus caryophyllus Nutrition 0.000 description 2
- CITFYDYEWQIEPX-UHFFFAOYSA-N Flavanol Natural products O1C2=CC(OCC=C(C)C)=CC(O)=C2C(=O)C(O)C1C1=CC=C(O)C=C1 CITFYDYEWQIEPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 2
- DBLDQZASZZMNSL-QMMMGPOBSA-N L-tyrosinol Natural products OC[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 DBLDQZASZZMNSL-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000123055 Stereum hirsutum Species 0.000 description 2
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 150000001765 catechin Chemical class 0.000 description 2
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 2
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- XMOCLSLCDHWDHP-IUODEOHRSA-N epi-Gallocatechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@H]2O)=CC(O)=C(O)C(O)=C1 XMOCLSLCDHWDHP-IUODEOHRSA-N 0.000 description 2
- 229940030275 epigallocatechin gallate Drugs 0.000 description 2
- 229930182497 flavan-3-ol Natural products 0.000 description 2
- 235000011987 flavanols Nutrition 0.000 description 2
- 229930003949 flavanone Natural products 0.000 description 2
- 235000011981 flavanones Nutrition 0.000 description 2
- 150000002208 flavanones Chemical class 0.000 description 2
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 2
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 2
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 235000003248 hydroxytyrosol Nutrition 0.000 description 2
- 229940095066 hydroxytyrosol Drugs 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229930013686 lignan Natural products 0.000 description 2
- 235000009408 lignans Nutrition 0.000 description 2
- 150000005692 lignans Chemical class 0.000 description 2
- KZMACGJDUUWFCH-UHFFFAOYSA-O malvidin Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC(C=2C(=CC=3C(O)=CC(O)=CC=3[O+]=2)O)=C1 KZMACGJDUUWFCH-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000012543 microbiological analysis Methods 0.000 description 2
- 208000013435 necrotic lesion Diseases 0.000 description 2
- 239000003592 new natural product Substances 0.000 description 2
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 2
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 230000014639 sexual reproduction Effects 0.000 description 2
- PTLRDCMBXHILCL-UHFFFAOYSA-M sodium arsenite Chemical compound [Na+].[O-][As]=O PTLRDCMBXHILCL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 description 2
- 235000004330 tyrosol Nutrition 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 1
- PFTAWBLQPZVEMU-ZFWWWQNUSA-N (+)-epicatechin Natural products C1([C@@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 1
- WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N (-)-Epigallocatechin-3-o-gallate Chemical compound O([C@@H]1CC2=C(O)C=C(C=C2O[C@@H]1C=1C=C(O)C(O)=C(O)C=1)O)C(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N 0.000 description 1
- PFTAWBLQPZVEMU-UKRRQHHQSA-N (-)-epicatechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-UKRRQHHQSA-N 0.000 description 1
- MJYQFWSXKFLTAY-OVEQLNGDSA-N (2r,3r)-2,3-bis[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]butane-1,4-diol;(2r,3r,4s,5s,6r)-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O.C1=C(O)C(OC)=CC(C[C@@H](CO)[C@H](CO)CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 MJYQFWSXKFLTAY-OVEQLNGDSA-N 0.000 description 1
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M (E)-Ferulic acid Natural products COC1=CC(\C=C\C([O-])=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- NGSWKAQJJWESNS-ZZXKWVIFSA-M 4-Hydroxycinnamate Natural products OC1=CC=C(\C=C\C([O-])=O)C=C1 NGSWKAQJJWESNS-ZZXKWVIFSA-M 0.000 description 1
- DFYRUELUNQRZTB-UHFFFAOYSA-N Acetovanillone Natural products COC1=CC(C(C)=O)=CC=C1O DFYRUELUNQRZTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000618742 Anthostoma decipiens Species 0.000 description 1
- 240000007087 Apium graveolens Species 0.000 description 1
- 235000015849 Apium graveolens Dulce Group Nutrition 0.000 description 1
- 235000010591 Appio Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 241000190146 Botryosphaeria Species 0.000 description 1
- 241000167854 Bourreria succulenta Species 0.000 description 1
- 241000316715 Cadophora luteo-olivacea Species 0.000 description 1
- 241000965190 Campylocarpon Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- 241001023577 Cryptovalsa ampelina Species 0.000 description 1
- 241000723247 Cylindrocarpon Species 0.000 description 1
- 241000975661 Cylindrocladiella Species 0.000 description 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- 241000487504 Dactylonectria Species 0.000 description 1
- 241000143435 Diatrypaceae Species 0.000 description 1
- 241001307140 Diplodia seriata Species 0.000 description 1
- AFSDNFLWKVMVRB-UHFFFAOYSA-N Ellagic acid Chemical compound OC1=C(O)C(OC2=O)=C3C4=C2C=C(O)C(O)=C4OC(=O)C3=C1 AFSDNFLWKVMVRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ATJXMQHAMYVHRX-CPCISQLKSA-N Ellagic acid Natural products OC1=C(O)[C@H]2OC(=O)c3cc(O)c(O)c4OC(=O)C(=C1)[C@H]2c34 ATJXMQHAMYVHRX-CPCISQLKSA-N 0.000 description 1
- 229920002079 Ellagic acid Polymers 0.000 description 1
- 241000378864 Eutypa Species 0.000 description 1
- 241001380000 Eutypella citricola Species 0.000 description 1
- 241001379995 Eutypella microtheca Species 0.000 description 1
- 241000414044 Fomitiporia Species 0.000 description 1
- 241001240951 Fomitiporia mediterranea Species 0.000 description 1
- 241001108371 Fomitiporia sp. Species 0.000 description 1
- 108020000949 Fungal DNA Proteins 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 241000294754 Macroptilium atropurpureum Species 0.000 description 1
- 235000006679 Mentha X verticillata Nutrition 0.000 description 1
- 235000002899 Mentha suaveolens Nutrition 0.000 description 1
- 235000001636 Mentha x rotundifolia Nutrition 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 241001553014 Myrsine salicina Species 0.000 description 1
- 102000002508 Peptide Elongation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010068204 Peptide Elongation Factors Proteins 0.000 description 1
- 240000009164 Petroselinum crispum Species 0.000 description 1
- 241000920636 Phaeoacremonium Species 0.000 description 1
- 241000088433 Phaeoacremonium sp. Species 0.000 description 1
- 244000018633 Prunus armeniaca Species 0.000 description 1
- 235000009827 Prunus armeniaca Nutrition 0.000 description 1
- 241000131360 Pythium oligandrum Species 0.000 description 1
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N Resveratrol Natural products OC1=CC=CC(C=CC=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N Stilbene Natural products C=1C=CC=CC=1/C=C/C1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N Trans-resveratrol Chemical group C1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 description 1
- 241001460073 Trichoderma asperellum Species 0.000 description 1
- 241000894120 Trichoderma atroviride Species 0.000 description 1
- 241000944293 Trichoderma gamsii Species 0.000 description 1
- UBRRADOHVAKOIR-UHFFFAOYSA-N [C].C1(=CC=CC=C1)C(C)(C)C1=CC=CC=C1 Chemical group [C].C1(=CC=CC=C1)C(C)(C)C1=CC=CC=C1 UBRRADOHVAKOIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 229930014669 anthocyanidin Natural products 0.000 description 1
- 150000001452 anthocyanidin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008758 anthocyanidins Nutrition 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 1
- 239000012681 biocontrol agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019693 cherries Nutrition 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 229920002770 condensed tannin Polymers 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000010244 detection of fungus Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000004132 ellagic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002852 ellagic acid Drugs 0.000 description 1
- LPTRNLNOHUVQMS-UHFFFAOYSA-N epicatechin Natural products Cc1cc(O)cc2OC(C(O)Cc12)c1ccc(O)c(O)c1 LPTRNLNOHUVQMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012734 epicatechin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 235000001785 ferulic acid Nutrition 0.000 description 1
- KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N ferulic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N ferulic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N 0.000 description 1
- 229940114124 ferulic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000004426 flaxseed Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 1
- LVJJFMLUMNSUFN-UHFFFAOYSA-N gallocatechin gallate Natural products C1=C(O)C=C2OC(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)C(O)CC2=C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LVJJFMLUMNSUFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 235000006486 human diet Nutrition 0.000 description 1
- 208000006278 hypochromic anemia Diseases 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009584 malvidin Nutrition 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAARLWTXUUQFSN-UHFFFAOYSA-N methylellagic acid Natural products O1C(=O)C2=CC(O)=C(O)C3=C2C2=C1C(OC)=C(O)C=C2C(=O)O3 FAARLWTXUUQFSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 238000000399 optical microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006025 oxidative dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 238000010422 painting Methods 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 235000011197 perejil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000447 pesticide residue Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 239000003075 phytoestrogen Substances 0.000 description 1
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052573 porcelain Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- ODLMAHJVESYWTB-UHFFFAOYSA-N propylbenzene Chemical group CCCC1=CC=CC=C1 ODLMAHJVESYWTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004080 punching Methods 0.000 description 1
- 125000004309 pyranyl group Chemical group O1C(C=CC=C1)* 0.000 description 1
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 description 1
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 description 1
- 235000020095 red wine Nutrition 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 235000021283 resveratrol Nutrition 0.000 description 1
- 229940016667 resveratrol Drugs 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N stilbene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C=CC1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N trans-isoferulic acid Natural products COC1=CC=C(C=CC(O)=O)C=C1O QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000008511 vegetative development Effects 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 238000009369 viticulture Methods 0.000 description 1
- 235000020097 white wine Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N61/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing substances of unknown or undetermined composition, e.g. substances characterised only by the mode of action
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
La invención se refiere a una composición fungicida para la prevención y lucha contra las enfermedades de la madera de la vid, que contiene como componente activo un extracto de uva o de un subproducto del proceso de vinificación rico en polifenoles. La invención contempla también el uso de la composición para la eliminación o inhibición de hongos causantes de enfermedades de la madera de la vid y su método de aplicación.
Description
DESCRIPCIÓN
Composición fungicida para la prevención y lucha contra las enfermedades de la madera de la vid
CAMPO DE LA INVENCIÓN
La presente invención se engloba dentro del campo de la viticultura y más concretamente en el ámbito de la prevención y lucha contra las enfermedades de la madera de la vid (EMV).
OBJETO DE LA INVENCIÓN
La presente invención se centra en resolver una de las mayores problemáticas existentes en la actualidad en el viñedo: las enfermedades de la madera de la vid (EMV) que anualmente provocan grandes pérdidas en la producción y afectan negativamente a la calidad de los vinos.
Más específicamente la presente invención tiene como objetivo el desarrollo de un nuevo producto natural que permita solucionar los problemas de las EMV ocasionadas por hongos. Al tratarse de un producto natural se pretende obtener una uva y vino sin residuos de pesticidas y disminuir así el uso de materias activas de origen químico en el cultivo.
La invención se refiere específicamente a un compuesto fungicida que contiene como componente activo un extracto de uva o de un subproducto del proceso de vinificación.
También es objeto de la presente invención el desarrollo de una composición que comprenda el producto natural activo y que permita el control de las EMV mediante aplicación aérea y el procedimiento para el uso del mismo.
ESTADO DE LA TÉCNICA CONOCIDO
Las enfermedades de la madera se encuentran entre los problemas fitosanitarios más perjudiciales que afectan al cultivo de la vid, tanto en planta joven como adulta. Diversos factores como la intensificación del cultivo, el uso de material vegetal de propagación de baja calidad sanitaria, la prohibición en el uso del arsenito sódico, la realización de podas
cada vez menos esmeradas, y la escasa protección de las heridas de poda, entre otros, han contribuido a un aumento considerable de la incidencia de las enfermedades de la madera de la vid en todo el mundo en las últimas dos décadas. Actualmente se estima que afectan a un 10 a 15% del viñedo.
Concretamente en España, las enfermedades más importantes detectadas en la actualidad (“enfermedades de la madera de la vid” , C. Agustí-Brisach et al.,2017) son:
En nuevas plantaciones:
• La enfermedad de Petri: La enfermedad de Petri es característica de vides jóvenes, apareciendo sus síntomas pocos años después de la plantación. Los síntomas asociados a esta enfermedad consisten en un retraso del desarrollo y escasa vitalidad de las plantas mostrando brotación reducida o retrasada, brotes con entrenudos cortos, hojas de menor tamaño y cloróticas y, finalmente, la muerte de las plantas (García-Jiménez et al., 2010).
La enfermedad afecta a la parte basal del patrón, colonizando los tejidos xilemáticos, de modo que al realizar cortes transversales y longitudinales de la madera se observan pequeñas punteaduras o estrías necróticas, respectivamente, correspondientes a los vasos afectados por la enfermedad, observándose en ocasiones exudaciones gomosas. La obstrucción de los vasos xilemáticos provoca una insuficiencia hídrica y la escasez de suministro de nutrientes a las partes vegetativas de la planta provocando el decaimiento general de la planta (García-Jiménez et al., 2010).
Los agentes causales son Phaeoacreomonium spp., Phaeomoniella chlamydospora y Ca. luteo-olivacea (Gramaje y Armengol, 2011). Además, estos hongos están asociados a la yesca en planta adulta, ya que actuarían previamente en la degradación de la madera, favoreciendo la colonización posterior de ésta por F. mediterranea y S. hirsutum (García-Jiménez et al., 2010).
Los hongos causantes de la enfermedad de Petri se consideran hongos de suelo pudiendo infectar a las plantas a través de las heridas provocadas en el sistema radicular o en la parte basal del patrón en contacto con el suelo. Estos hongos pueden sobrevivir en los viñedos en hospedantes alternativos como las malas hierbas (Agustí-Brisach et al., 2011). Además, también pueden infectar de forma aérea a través de la infección de las heridas de poda (Agustí-Brisach et al., 2015).
• La enfermedad del pie negro: Esta enfermedad se caracteriza por afectar al sistema radical y a la base del patrón de plantas jóvenes, provocando lesiones necróticas que resultan en una reducción de la masa radicular.
En la madera del portainjerto puede observarse una necrosis generalizada que se inicia desde la base del mismo y se extiende hacia arriba. En cortes transversales, estas lesiones necróticas pueden ir desde la médula hasta la corteza. Como consecuencia, las plantas infectadas presentan una reducción del desarrollo y menor vigor, ausencia o retraso de la brotación, acortamiento de entrenudos, clorosis en hojas y/o marchitez, y un decaimiento general que puede acabar con la muerte de la planta.
Los agentes causales de esta enfermedad pertenecen a los géneros Campylocarpon, Cylindrocarpon, Cylindrocladiella, Dactylonectria e Ilyonectria. Estos hongos infectan las plantas a través de heridas en las raíces o en la parte basal del patrón que está en contacto con el suelo (Agustí-Brisach y Armengol, 2013).
Cabe destacar, que estos patógenos son frecuentes en vivero donde pueden aislarse de las raíces y de la base del patrón tanto de plantas madre, como de planta injertada, por lo que el material de propagación de vid podría estar ya infectado al establecer una nueva plantación (Agustí-Brisach et al., 2013b).
Algunos de estos hongos producen estructuras de resistencia (clamidosporas) que les permiten sobrevivir durante largo tiempo en ausencia de su hospedante, siendo el suelo una importante fuente de inóculo (Agustí-Brisach et al., 2014). Las malas hierbas también son hospedantes alternativos de estos patógenos que les permitirán sobrevivir en los viñedos durante largos periodos de tiempo (Agustí-Brisach et al., 2011)
En viñedos productivos:
• El decaim iento por Botryosphaeria: El síntoma típico de esta enfermedad es la necrosis sectorial de la madera de los brazos o del tronco principal de las plantas, observándose el decaimiento progresivo de brazos o la muerte de plantas (Úrbez-Torres, 2011).
Esta enfermedad está causada por un gran número de especies fúngicas de la familia Botryosphaeriaceae, siendo las más frecuentes en España Diplodia seriata y Neofusicoccum parvum (García-Jiménez et al., 2010). Estos hongos se caracterizan por producir picnidios en la madera afectada cuando las condiciones
de humedad y temperatura son adecuadas para su desarrollo. Las esporas (picnidiosporas) son dispersadas por el viento y por el impacto de las gotas de agua durante las lluvias.
Estos hongos también tienen una fase de reproducción sexual en invierno durante la cual forman peritecios en los restos de madera muerta (en vides afectadas o restos de poda) en los que se forman ascas y ascosporas que también pueden servir de fuente de inóculo para infecciones tempranas, al inicio del ciclo productivo de la planta.
La infección de estos hongos se produce principalmente cuando las esporas se depositan sobre las heridas de poda, y germinan penetrando en el interior de los tejidos vegetales (García-Jiménez et al., 2010; Agustí-Brisach et al., 2015)..
La eutipiosis: Los síntomas típicos son presencia de brotes raquíticos con entrenudos cortos y pequeños en las plantas afectadas, y hojas con clororis y/o necrosis marginal e internervial con tejido muerto. En el tronco y brazos se observa una necrosis sectorial de color marrón oscuro, en forma de cuña, que provoca la muerte de brazos, y progresivamente la muerte total de la planta. En España, esta enfermedad está causada principalmente por el hongo ascomiceto Eutypa lata y, en menor medida, por otras especies pertenecientes a la familia Diatrypaceae, de las cuales se han referenciado hasta cuatro de ellas en madera afectada por esta enfermedad: Anthostoma decipiens, Cryptovalsa ampelina, Eutypella citricola y Eutypella microtheca (Luque et al., 2012).
Eutypa lata produce estromas en la madera afectada formando peritecios (estructuras de reproducción sexual). Las ascosporas se liberan a lo largo del año diseminándose por el viento, y los conidios se diseminan principalmente por el impacto de las gotas de lluvia, penetrando en la planta a través de las heridas de poda realizadas durante el invierno o inicios de primavera, infectando y colonizando la madera (Bertsch et al., 2013).
La yesca: es la enfermedad más conocida. Las hojas de las plantas afectadas adquieren un color verde claro volviéndose cloróticas progresivamente, desarrollándose puntos irregulares entre las venas o en los márgenes de las hojas, que se extienden hacia el exterior de las partes distales de los brotes evolucionando posteriormente a necrosis. El síntoma más común es una podredumbre seca de la madera, característicamente blanda, interna, y de color crema o amarillento. La podredumbre comienza normalmente a partir de una herida de poda y aparece
separada por una línea negra de otra zona más exterior, de consistencia dura, en la que se pueden apreciar puntos o estrías necróticas.
Esta enfermedad está causada por los hongos basidiomicetos Fomitiporia mediterránea y, con mucha menor frecuencia, Stereum hirsutum. De la línea negra y puntos y estrías necróticas se aíslan mayoritariamente ascomicetos asociados a la enfermedad de Petri, como son Phaeoacremonium spp, Phaeomoniella chlamydospora y Cadophora luteo-olivacea. Cualquier tipo de herida en la planta favorece la infección de estos hongos (Mugnai et al., 1999; García-Jiménez et al., 2010).
La lucha contra las enfermedades de la madera es un problema de gran importancia. Actualmente, no existen estrategias de manejo que permitan un control óptimo de las enfermedades de la madera de la vid. Desde la prohibición del uso del arsenito sódico, y la sustitución de esta materia activa por fungicidas menos efectivos, se ha venido observando un aumento progresivo de las enfermedades de la madera de la vid en todo el mundo. Debido a la poca eficacia de los tratamientos fungicidas, la mayoría de estudios realizados en los últimos años para el control de estas enfermedades han sido enfocados desde el punto de vista de la prevención y del uso de adecuadas prácticas culturales.
La prevención de las enfermedades de la madera de la vid tiene que llevarse a cabo desde el momento en el que se adquiere el material vegetal para establecer una nueva plantación.
El uso de agentes de biocontrol, como Pythium oligandrum y Trichoderma atroviride, ha resultado efectivo para reducir la infección de estos hongos en vivero. Son conocidos en el Estado de la técnica productos como VINTEC® que emplea Trichoderma Atro SC (que compiten con los hongos EMV) o BLINDAR® que emplea Trichoderma asperellumy gamsii
Recientemente, cepas bacterianas aisladas de la madera de la vid y del hollejo de la uva han resultado ser antagonistas de las especies N. parvum y P. chlamydospora (Gramaje, 2017).
Una vez establecida la plantación, se recomienda realizar un manejo adecuado del cultivo, particularmente en lo relativo a la poda, y el uso de las buenas prácticas culturales. Evitar las situaciones de estrés hídrico sin dar riegos excesivos y realizar una fertilización adecuada sin forzar la producción serán prácticas esenciales que deberán llevarse a cabo durante los primeros años de la plantación.
La protección de las heridas de poda mediante el pintado con soluciones fungicidas evitará en gran medida la infección de las plantas por parte de los hongos de dispersión aérea. Los restos de poda son una importante fuente de inóculo de estos patógenos, por lo que se recomienda su destrucción tras la poda retirando del campo todos los restos de material vegetal podado (Agustí-Brisach et al., 2013).
Actualmente, en el mercado existen algunos productos fungicidas empleados para prevenir las enfermedades de la madera con efecto de inhibición parcial. Todos ellos se aplican (con brocha o pistola) sobre los cortes de poda, protegiendo de la infección causada por la germinación de esporas o el desarrollo de micelio de los hongos que atacan la madera expuesta. Entre los productos existentes en el mercado, podemos señalar los siguientes:
A diferencia de los productos químicos empleados actualmente, la presente invención tiene como objetivo el desarrollo de un nuevo producto natural que permita solucionar los problemas de las EMV ocasionadas por hongos. Al tratarse de un producto natural se pretende obtener una uva y vino sin residuos de fungicidas químicos y disminuir así el uso de materias activas de origen químico en el cultivo.
La tendencia reciente es el uso de productos naturales para controlar a dichos hongos, lo cual requiere la exploración de fuentes alternativas de principios activos naturales, seguros, eficaces y aceptables. Las plantas o sus extractos estandarizados altamente concentrados pueden proporcionar oportunidades ilimitadas para el control del crecimiento microbiano, debido a su diversidad química.
Es conocido que algunos extractos de plantas poseen actividad antifúngica, y en concreto los extractos naturales ricos en polifenoles. Si bien existen ciertos indicios en el estado del arte de que los compuestos polifenólicos pueden presentar propiedades antifúngicas, no es conocido actualmente la efectividad de los polifenoles en la lucha contra las
enfermedades de la madera (EMV) ni tampoco cuál es la composición óptima a tales efectos.
Los polifenoles son compuestos químicos o sustancias que se encuentran en una gran cantidad de alimentos derivados de plantas. El término abarca una amplia variedad de moléculas con una estructura común, caracterizada por tener varios grupos hidroxilo unidos a anillos aromáticos. Sin embargo, los polifenoles también incluyen moléculas con un anillo de fenol, como en el caso de los ácidos fenólicos o los alcoholes fenólicos.
Los polifenoles se clasifican en función del número de anillos de fenol que contienen, así como de los elementos estructurales que unen estos anillos. Como tal, los principales grupos de polifenoles son:
Flavonoides: los cuales presentan un esqueleto de carbono de difenilpropano y dos anillos de benceno unidos juntos por una cadena lineal de 3 átomos de carbono. Hasta la fecha, se han identificado más de 6.000 flavonoides en las plantas, y la lista continúa creciendo. Los flavonoides se pueden dividir en 6 subclases, en función del estado de oxidación del anillo de pirano central. Los flavonoides se pueden dividir en Flavonoles, Flavonas, Flavanonas, Isoflavonas, Antocianinas y Flavanoles.
• Flavonoles: que tienen un doble enlace entre los carbonos 2 y 3, con un grupo hidroxilo en C3. Son los flavonoides más ubicuos en los alimentos, y la quercetina es la más representativa.
• Flavonas: Presentan un doble enlace entre los carbonos 2 y 3, y son los flavonoides menos comunes. Se encuentran en el perejil y en el apio.
• Flavanonas: Se caracterizan por tener una cadena saturada de 3 átomos de carbono y un átomo de oxígeno en el carbono 4. Se encuentran solo en altas concentraciones en los cítricos, aunque también están presentes en los tomates y en algunas plantas aromáticas como la menta.
• Isoflavonas: que son estructuralmente similares a los estrógenos, y en los pies se pueden unir a sus receptores, por lo que también se conocen como fitoestrógenos. La soja y sus derivados son las principales fuentes de isoflavonas.
• Antocianinas: que son los pigmentos responsables de la coloración roja, azul y púrpura de frutas, flores y otros tejidos y productos vegetales
• Flavanoles: que tienen una cadena saturada de 3 carbonos, con un grupo hidroxilo en C3. Existen tanto como monómeros como polímeros, conocidos como catequinas y proantocianidinas, respectivamente.
Los principales flavonoides en la fruta son la catequina y la epicatequina, mientras que la galocatequina, la epi-galocatequina y el galato de epigalocatequina se encuentran esencialmente en el té. Las catequinas se encuentran en frutas como los albaricoques y las cerezas y en otros productos como el té, el chocolate y el vino blanco.
Ácidos fenólicos: que se dividen en dos grupos, los derivados del ácido benzoico y los derivados del ácido cinámico.
• Ácidos hidrobenzoicos: que se encuentran en muy pocas plantas consumidas por humanos, y por lo tanto no se consideran de particular interés para la nutrición. Entre ellos, destacan el ácido gálico o ácido elágico.
• Ácidos hidroxicinámicos: que están representados principalmente por ácido cumárico, ácido cafeíco y ácido ferúlico.
Alcoholes fenólicos: tirosol e hidroxitirosol son los principales tipos. Se encuentran principalmente en el aceite de oliva. El tirosol también se encuentra en el vino, tanto blanco como tinto, y en la cerveza; el hidroxitirosol, por otro lado se encuentra en el vino tinto. Estilbenos: el principal estilbeno presente en la dieta de los humanos es el resveratrol, aunque la cantidad de estos compuestos ingeridos en la dieta es pequeña. Los estilbenos son producidos por las plantas como respuesta a patógenos o a ciertas condiciones de estrés. Se han detectado en más de 70 especies de plantas, como uvas, bayas y cacahuetes.
Lignanos: los lignanos se producen por la dimerización oxidativa de dos unidades de fenilpropano. La principal fuente de estos compuestos es la semilla de lino.
Una fuente importante de polifenoles para su empleo industrial (Ej: como suplemento alimenticio, o en cosmética) es el orujo de uva. El orujo de uva es un subproducto de la bodega compuesto básicamente por semillas de uva, piel y tallos. Es rico en fibra dietética y polifenoles, incluidas las antocianinas (en tinto), flavan-3-oles, flavonoles, ácidos fenólicos y estilbenos, que proporcionan una amplia variedad de posibles actividades biológicas.
El producto fungicida objeto de la presente invención es una composición cuyo componente activo es un extracto natural obtenido a partir de uva o de un orujo de uva sometido a un procedimiento de extracción según se describe en la patente ES2319032.
DESARROLLO DE LA FASE EXPERIMENTAL
1. CARACTERIZACIÓN DE LAS ENFERMEDADES DE MADERA
Resumen de las actuaciones realizadas.
En primer lugar la presente investigación se centró en analizar un total de 12 muestras de madera de vid para la detección de hongos causantes de Enfermedades de la Madera de la Vid (EMV). Las muestras fueron tomadas en campo en diferentes viñedos.
En plantas adultas se empleó una barrena que permite extraer una porción de madera de la zona central del tronco. En otros casos, se recogieron plantas enteras que no habían tenido desarrollo vegetativo en el año anterior. Las muestras fueron enviadas al laboratorio de análisis en condiciones de refrigeración. Todas las muestras provenían de plantas con síntomas de EMV, observadas en campo por un equipo técnico durante el ciclo vegetativo de 2019.
Material y métodos.
Para alcanzar el objetivo se realizó un análisis de tipo microbiológico. Este análisis consiste en un aislamiento de hongos a partir de madera, en medio de cultivo y su posterior identificación como especies causantes de las EMV.
1. Valoración de síntomas. En primer lugar, se evaluaron y anotaron los síntomas internos observados en la madera en el momento de la recepción. Para ello se estableció la siguiente valoración:
• N: tejido necrosado de coloración marrón oscura o negruzca, con consistencia dura y quebradiza.
• S: tejido aparentemente sano de coloración y textura normal.
• E: madera blanca o amarillenta de consistencia blanda y esponjosa.
• P: tejido con punteaduras de coloración negra dispuestas alrededor de la médula, características de la Enfermedad de Petri.
• SC: Madera seca, en la cual no es posible valorar síntomas propios y específicos de EMV.
2. Análisis microbiológico. Se realizó un aislamiento de especies fúngicas causantes de EMV. Para ello se ha seguido la metodología descrita en Martín y Martín (2013). La metodología consiste en el cultivo en medio extracto de malta -MEA-(Laboratorios Conda S.A., Madrid) suplementado con cloranfenicol (0,25 mg/mL) de 12 fragmentos de madera (3 x 3 x 3 mm) por muestra. La madera fue previamente desinfectada superficialmente por inmersión y sucesivos lavados en NaClO comercial (30%) diluido en agua destilada estéril 1:1 durante 3 minutos, seguido de tres lavados sucesivos en agua estéril de 5 minutos. Todo este proceso se realizó en una cabina de flujo laminar, bajo condiciones asépticas. Las placas se incubaron a 25°C en oscuridad durante 10-20 días. T ranscurrido ese tiempo, las colonias fúngicas crecidas a partir de la madera fueron transferidas a placas individuales de medio MEA o PDA (dextrosa-patata-agar) (Merck, Darmstadt, Alemania) suplementado con cloranfenicol.
Las colonias aisladas fueron identificadas por caracteres morfológicos macro y microscópicos, de acuerdo con diferentes trabajos descriptivos que se citan a continuación.
La tabla siguiente muestra los resultados obtenidos a partir de las 12 muestras analizadas:
Muestra Síntomas en Infección Aislados fúngicos
madera
Los síntomas internos observados en la madera de las muestras recibidas se corresponden con EMV. De especial relevancia fue la presencia de secciones madera necrosada, con coloración negra y textura quebradiza (N), en la mayoría de las muestras de las parcelas denominadas Badén, Espadaña y Solanas. Se observó además en algunas muestras la presencia de madera esponjosa (E) correspondiente al máximo nivel de degradación de la madera asociado con la enfermedad de yesca.
En todas las muestras se han aislado hongos causantes de las EMV, como son: la especie Phaeomoniella chlamydospora, el género Phaeoacremonium sp., especies de la familia Botryosphaeriaceae y basidiomicetos del tipo Fomitiporia sp. Estos resultados confirman la infección por hongos causantes de EMV.
3. Identificación molecular. Se aislaron unas 27 cepas de hongos y se determinó la especie con microscopía óptica. Se amplificaron las regiones ITS, p-tubulina y factor de elongación. Para la extracción de ADN fúngico se liofilizó el micelio directamente de la placa de Petri y se deshidrató por liofilización. Se trituró el micelio con arena de mar en mortero estéril de porcelana y se utilizaron unos 100 mg del triturado para la extracción del ADN utilizando el kit NuKex Pure RNA/DNA de Gerbion®, siguiendo las instrucciones del fabricante.
La amplificación se realizó utilizando la Taq polimerasa Master Mix de Promega Go Taq®, con una concentración final de ambos primers de 0,5pM. Para comprobar la pureza de la zona amplificada, las muestras se corrieron en gel de agarosa a 1,5%.
Las muestras PCR se trataron con ExoSap de (Thermo Fisher) previo a su secuenciación, que se realizó en un laboratorio externo. Una vez recibidas las secuencias se utilizó el Algoritmo BLAST, para comprobar homologías de ADN y determinar su identidad.
Una vez identificados los hongos mediante esta técnica, se seleccionaron 8 de las cepas con buena identificación para determinar la capacidad de los extractos a ensayar para inhibir su crecimiento. Se resumen en la siguiente tabla las cepas de hongos sobre los que se han realizados los ensayos para medir la capacidad antifúngica de los diferentes extractos:
Tabla: Hongos identificados.
BV-287 Phaeomoniella chlamydospora
PCH 32 Phaeomoniella chlamydospora
BV-050 Phaeoacremonium minimum
PM 77 Phaeoacremonium minimum
BV-057 Eutypa Iata
CYL 28 Ilyonectria liriodendri
CYL 30 Ilyonectria liriodendri
BV-056 Neofusicoccum parvum
2. PREPARACIÓN DE EXTRACTOS Y VALIDACIÓN PRIMARIA IN VITRO
Resumen de las actuaciones realizadas.
Se utilizaron los hongos aislados y secuenciados en la actividad anterior para determinar la actividad fungicida de tres extractos obtenidos a partir de residuos del proceso de vinificación: M1, M2, M3.
Los tres extractos (M1 - M3) se obtuvieron como ya se ha expuesto por el procedimiento de extracción descrito en la patente ES2319032 a partir de residuos del proceso de vinificación. Los extractos de orujo ensayados eran sólidos, ya que después de la extracción fueron sometidos a un secado en spray.
Material y métodos.
1. Obtención y caracterización de extractos.
Se incorporaron al ensayo tres extractos procedentes de orujo de uva tinta (M1-M3) diferentes de los lotes de Bodega Matarromera S.L.: M1 L-4324CECO, M2 L-52892 y M3 L-4333C. Cada uno de los lotes procedente de un depósito en el que se elaboraba uva de una parcela concreta y con un protocolo de vinificación específico.
Los tres extractos (M1 - M3) fueron obtenidos a partir de los hollejos de uva tinta variedad tempranillo después de sufrir un proceso de fermentación alcohólica.
Los extractos obtenidos se identifican como M1 lote L-4324CECO de uva tempranillo subvariedad Tinta de Toro, proveniente de uvas de viñedo ecológico de la D.O. Toro. Los extractos identificados como M2 lote L-52892 y M3 lote L-4333C de uva tempranillo, proveniente de uvas de viñedo convencional de la D.O. Ribera del Duero.
El objetivo a la hora de seleccionar dichos lotes fue obtener unos extractos con diferentes composiciones fenólicas para así poder realizar un estudio comparativo. Obviamente, al igual que ocurre con los vinos, las propiedades de cada extracto dependen fundamentalmente del tipo de uva, el tipo de suelo, las condiciones climáticas y el proceso de vinificación. Por tanto, aunque el procedimiento de extracción a partir de los residuos del proceso de vinificación es común, las características de cada extracto son claramente diferentes según se observa en la tabla resumen que se aporta más abajo.
Una vez realizada la extracción y el posterior secado en Spray, se procedió a la caracterización del perfil de Polifenoles, índice de Polifenoles totales (IPT) y Capacidad antioxidante. La Capacidad antioxidante viene expresada en pmoles equivalentes de Trolox/g (Huang D et al, 2005). El índice de Polifenoles Totales se realiza en dilución en agua destilada 1:500 y absorbancia UV a 280 nm de longitud de onda, conforme Ribéreau-Gayon, P, 1974.
Tabla: Codificación de los extractos aportados al proyecto.
En la tabla siguiente se muestra la composición de los extractos en relación a su Indice Polifenólico Total (IPT) y su capacidad antioxidante expresada como (mmol eq. de Trolox/g)
A modo de resumen, en la siguiente tabla se muestra su composición:
Como puede observarse, el Indice Polifenólico Total (IPT) y su capacidad antioxidante expresada como (mmol eq. de Trolox/g) fueron bastante similares para los tres extractos.
En la siguiente tabla, se especifican los detalles de la composición fenólica de los diferentes extractos ensayados:
2. Validación primaria in vitro.
Para la validación primaria se realizaron ensayos de inhibición de crecimiento de micelio (placas 12 pocillos): Los hongos se mantienen en placas Petri con medio PDA y el ensayo se realiza en placas de 12 pocillos con el mismo medio. Se hace un pase de cada especie a ensayar 2-3 días antes para utilizar hongos que estén recientemente cultivados
Las soluciones stock de muestras se prepararon en EtOH, a la concentración final a ensayar (del 2,5% al 10% p/v concentración final en pocillo). En el caso del control se utilizó EtOH en lugar de la muestra.
Ensayos:
« S e realizaron 10 repeticiones (pocillos) por cada concentración y 10 para el control.
• El medio esterilizado (PDA) se mantiene caliente en un baño a 40° C para evitar que se solidifique, y se le añaden los volúmenes de muestra o etanol, justo en el momento previo a la distribución en placa.
• Se distribuyó en volúmenes de 1 ml/pocillo (placa 12 pocillos) previamente preparados en los tubos de ensayo y dejar que solidifique.
• Posteriormente se realizaron las siembras del hongo en cada placa distribuidas uniformemente y se incubaron en oscuridad a una temperatura de 25° C o temperatura ambiente, dependiendo de la especie de hongo, durante 5-7 días. La siembra se realizó por sacabocados para las dos especies de hongos.
• Transcurrido el tiempo de incubación, se midió el diámetro del hongo.
El cálculo del porcentaje de inhibición de cada concentración se realiza con la siguiente fórmula, utilizando el valor medio de las colonias sembradas:
%I = C- T/C x100
C: control; T: tratamiento.
Disolución del extracto: Se evaluó el extracto (concentraciones finales en placa desde 0 % p/v a 10 % p/v). Todos los extractos se filtraron con filtro de 0,25gm para asegurar la esterilidad de los mismos.
Preparación del medio de cultivo: Se colocó 1 mL de cada dilución del extracto y se añadieron 9 mL de Agar PDA a 45°C, homogeneizando el conjunto. Se dejó el agar solidificar a temperatura ambiente. A continuación, se removió para facilitar su homogeneización y en la cabina de flujo laminar se repartió el medio de cultivo con la esencia correspondiente en la concentración adecuada, sobre las placas de Petri.
Preparación del hongo: Partiendo de muestras del hongo crecido en medio PDA a 22°C en estufa, se procedió a realizar cortes circulares de 0,5 cm de diámetro con un sacabocados estéril y traspasar estos cortes con unas pinzas y en condiciones de esterilidad dentro de una campana de flujo laminar horizontal a placas de Petri donde habíamos depositado anteriormente el medio de cultivo con las distintas concentraciones del extracto. A continuación, los cultivos realizados se pasaron a una estufa de cultivo donde permanecieron en condiciones de oscuridad y 22°C de temperatura durante 5 días.
Observación y toma de datos: Se estableció un protocolo de observación y toma de datos durante 5 días, mientras los cultivos crecían en la estufa. La toma de datos consiste en medir el diámetro del halo de crecimiento del hongo en milímetros, en la placa control para así posteriormente referenciar y calcular el porcentaje de inhibición del extracto en estudio, en cada placa con respecto al control.
Cálculo del porcentaje de inhibición:
% de crecimiento = (Diámetro hongo con extracto x 100) / Diámetro control negativo
% Inhibición = 100 - % crecimiento
3. Composición fungicida.
Para lograr una adecuada aplicación del extracto fungicida sobre los viñedos es necesario elaborar una composición fungicida que contenga como componente activo dicho extracto de uva o de un subproducto del proceso de vinificación y además un vehículo aceptable agrícolamente.
Lo primero que se verificó durante la fase experimental fue la solubilidad de los tres extractos en agua. La conclusión alcanzada fue que los tres extractos son parcialmente solubles y dispersables en agua, pudiendo considerar a los tres extractos como muy solubles o totalmente solubles. Por tanto, en un primer modo de realización preferente, la composición fungicida es una composición acuosa.
Para lograr una composición fungicida de aplicación directa por pulverización, a la solución acuosa de los extractos se añadieron los siguientes co-formulantes:
• Coadyuvantes de formulación que permitan homogenizar totalmente los extractos en agua, evitando precipitados y fases (emulgentes, estabilizantes...)
• Emulgentes que faciliten la aplicación del producto mediante pulverización (dispersantes, adherentes...)
• Co-formulantes a base de nutrientes para proporcionar una matriz orgánica al ingrediente activo
La presente invención contempla por tanto una composición fungicida que es una composición acuosa pulverizable.
La invención contempla también un método de aplicación de la composición fungicida, tal que la composición se aplica justo después de poda de forma localizada en la zona de los cortes, pero sin ser pintado, sino aplicado por pulverización en toda la zona planta donde
haya cortes. El producto se aplica desde unas cubas de tratamiento mediante medios conocidos de pulverización.
3. RESULTADOS EXPERIMENTALES EN RELACIÓN CON LA CAPACIDAD ANTIFUNGICA DE LOS EXTRACTOS ESTUDIADOS
Resumen de las actuaciones realizadas.
Debido al crecimiento muy lento de algunas cepas de los hongos probados, no se pudo determinar la capacidad fungicida en alguno de los ensayos, representado en las tablas correspondientes como (nd), bien porque perdía viabilidad en el agar que se utilizó, o bien porque proliferaba microflora acompañante, en principio muy minoritaria, pero que era capaz de colonizar la placa con más rapidez.
En otras ocasiones no se podía evitar la deshidratación de los agares en periodos de incubación muy largos (más de dos semanas) debido al crecimiento lento de ciertas cepas.
No obstante, como se aprecia en los ensayos, se utilizaron en casi todas las ocasiones dos cepas de la misma especie, y se analizaron los datos en su conjunto, por lo que los resultados permiten estimar las capacidades fungicidas de los extractos estudiados.
Datos obtenidos para los diferentes hongos y extractos.
En las siguientes tablas se resumen los datos obtenidos para los diferentes hongos y extractos
Tabla: Determinación de la capacidad fungicida de M1.
% P/V DEL BV-057 CYL28 CYL30 BV050 BV287 PCH 32 PM77 BV056 EXTRACT
%
O in h ib ic ió n
10 100 68,3 62,5 100 100 nd 5 81,66 38,3 47,22 95 0 nd
% P/V DEL BV-057 CYL28 CYL30 BV050 BV287 PCH 32 PM77 BV056 EXTRACT
%
O in h ib ic ió n
10 100 1,2 100 90 100 100 nd 5 100 5,12 72,22 86,66 100 100 nd
Tabla: Determinación de la capacidad fungicida de M3.
% P/V DEL BV-057 CYL28 CYL30 BV050 BV287 PCH 32 PM77 BV056 EXTRACT
Resultados y discusión
Los ensayos se realizaron in vitro según se ha especificado más arriba. Los ensayos se realizaron en placa para evaluar la actividad antifúngica específica contra los hongos responsables de Enfermedades de madera: Eutipiosis (Eutypa lata), Pie Negro de la vid (Ilyonectria Iriodendri), Enfermedad de Petri y Yesca (Phaeomoniella chlamydospora, Phaeoacremonium mínimum).
Prevención y lucha contra la Eutipiosis
Los resultados muestran que los tres extractos tienen capacidad de inhibir totalmente el crecimiento de la cepa analizada (BV-057) de Eutypa lata responsable de la Eutipiosis a la concentración máxima analizada del 10% p/v. El extracto M3 no presenta capacidad alguna de inhibición del crecimiento del micelio del hongo a las concentraciones menores testadas. El hongo Eutypa lata muestra mayor sensibilidad al extracto M2, con una inhibición del crecimiento del 81,6% a una concentración del 2,5% p/v del extracto.
Prevención y lucha contra la enfermedad de Pie Negro de la vid
El extracto M3 no tiene actividad antifúngica alguna sobre el crecimiento del micelio de las dos cepas (CYL28 y CL30) del hongo Ilyonectria Iriodendri cuando es analizado a las tres concentraciones estudiadas. Los extractos M1 y M2 muestran capacidad antifúngica para ambas cepas. La cepa CYL28 es más sensible a la actividad del extracto M1 y la cepa CYL30 al extracto M2. El hongo Ilyonectria Iriodendri responsable de la enfermedad de Pie Negro de la Vid muestra mayor sensibilidad al extracto M2 con inhibición del 100% del crecimiento de la cepa CYL30.
Prevención y lucha contra la enfermedad de Petri
Los extractos M2 y M3 muestran actividad inhibitoria del crecimiento del micelio de alguna de las dos cepas (BV050 y PM77) analizadas del hongo Phaeomoniella chlamydospora responsable de la Enfermedad de Petri. El extracto M1 no presenta actividad antifúngica alguna sobre el crecimiento del micelio de las dos cepas. El extracto M3 muestra mayor espectro de actividad de inhibición sobre la especie, siendo el único que tiene capacidad inhibitoria de la cepa PM77, sin embargo, la cepa BV50 del hongo muestra mayor sensibilidad a bajas concentraciones al extracto M2, con una inhibición del 90% del crecimiento a la concentración del 2,5% p/v.
Prevención y lucha contra la Yesca
Los tres extractos tienen una gran capacidad de inhibir el crecimiento del micelio del hongo Phaeoacremonium mínimum responsable de la Yesca, en alguna de las dos cepas estudiadas (BV27 y PCH32). Los tres extractos tienen capacidad de inhibir en un 100% el crecimiento de la cepa PCH32 en la máxima concentración testada correspondiente al 10% p/v. Ambas cepas del hongo muestran la mayor sensibilidad a la actividad del extracto M2, cuya acción inhibe en su totalidad el crecimiento del micelio de las cepas del hongo a una concentración del 5% p/v.
Los tres extractos muestran actividad inhibitoria sobre el crecimiento del micelio del alguno de los hongos estudiados.
El extracto M3 es el que presenta menor actividad antifúngica tanto por el espectro de cepas sobre el que tiene capacidad de inhibir el desarrollo del micelio del hongo, así como por la sensibilidad demostrada por la totalidad de las cepas a baja concentración con la única e interesante excepción de la actividad inhibitoria sobre la cepa PM77 correspondiente al hongo Phaeomoniella chlamydospora responsable de la Enfermedad
de Petri, siendo el único extracto que presenta actividad alguna sobre esta cepa en particular.
El extracto M1, obtenido de hollejos de uvas de viñedo ecológico de DO Toro, presenta un espectro de actuación amplio y una actividad a baja concentración eficiente sin embargo no muestra actividad alguna sobre el hongo Ilyonectria Iriodendri responsable de la Enfermedad del pie negro.
El extracto M2, obtenido de hollejos de uvas de viñedo convencional de DO Ribera del Duero, es el que presenta mayor espectro de actividad ya que muestra capacidad de inhibir el crecimiento en su totalidad de alguna de las cepas de tres de los hongos estudiados: Eutypa lata, Ilyonectria Iriodendri y Phaeoacremonium mínimum y en un 90% el de la cepa BV50 del hongo Phaeomoniella chlamydospora a la concentración de 10% p/v. Así mismo, de modo general, los hongos analizados muestran mayor sensibilidad a los componentes del extracto M2, observándose una inhibición superior al 80% en alguna de las cepas de los hongos Eutypa Lata, Phaeomoniella chlamydospora y Phaeoacremonium mínimum a la concentración menor testada correspondiente al 2,5% p/v.
Por tanto, concluimos que, por espectro de actividad y sensibilidad de los hongos analizados, el extracto M2 es el que presenta mayor actividad antifúngica sobre el crecimiento del micelio de los hongos responsables de enfermedades de la madera de la vid.
El análisis del índice de polifenoles totales de los tres extractos analizados es muy similar, siendo de 33,87 para M1, 34,30 para M2 y 32,46 para M3. Así mismo la capacidad Antioxidante Media se mueve en rangos similares que oscilan entre el más alto de 520,71 para M3 a 479,95 para M2.
Hay que buscar la actividad del extracto M2 en el perfil de Polifenoles. La concentración de ácidos benzoicos y sus derivados es similar en los tres extractos. El perfil de Polifenoles Flavonoides analizados (Flavonoles, Flavan-3-ols) y No Flavonoides (ácidos hidroxicinámicos y derivados) es muy similar en los extractos M1 y M3, a excepción de las Antocianinas, que en el caso de varios de los derivados de antocianidina glicosilados (Malvidina y Pentunidina) es del orden de cinco veces superior en M1.
El extracto M3 es de los tres extractos, el que menor actividad inhibitoria presenta, y podría atribuirse a la baja concentración de Antocianinas comparado al M1, la falta de actividad.
Según Galeotti et al, (Flavonoids from carnation (Dianthus caryophyllus) and their antifungal activity, Phytochemistry Letters, 2008, 1(1):44-48.) los Flavonoides glicosilados como las Antocianinas, parecen presentar alguna actividad antifúngica. Sin embargo, el extracto M2 sorprendentemente presenta una muy baja concentración de antocianinas (prácticamente nula), no detectándose para la mayoría de los compuestos analizados, su presencia en el extracto. En consecuencia, no se puede atribuir la actividad del extracto M2 a la presencia de antocianinas.
De los tres extractos analizados, el extracto M2 es el único que presenta en su composición el fenol no flavonoide ácido cumárico. El ácido cumárico se encuentra generalmente en poca cantidad bajo forma libre, tanto en uva como en vino. La forma más común se encuentra esterificado con ácido tartárico. Parece claro por los resultados obtenidos que el ácido p-cumárico tiene capacidad de restringir marcadamente el crecimiento de los hongos fitopatógenos estudiados.
La riqueza en ácido cumárico que presenta el extracto M2 de mayor actividad de inhibición del crecimiento del micelio de los hongos analizados y supone una evidencia de la actividad y especificidad de este polifenol en su actividad antifúngica contra hongos causantes de enferemedades de la madera de vid (EMV).
Claims (27)
1. Composición fungicida que contiene como componente activo un extracto de uva o de un subproducto del proceso de vinificación, caracterizado porque es un extracto sólido y comprende
entre 0,16 y 1,7 mg/g de ácidos benzoicos
entre 0 y 2,5 mg/g de ácidos hidroxicinámicos.
entre 0 y 2,9 mg/g de flavon-3-oles
entre 1,05 y 3,7 mg/g de flavonoles; y
entre 0 y 87,8 mg/g de antocianos,
2. Composición fungicida de acuerdo a la reivindicación 1, donde el extracto procede de uva tinta o de un subproducto del proceso de vinificación de dicha uva tinta, y comprende entre 0,16 y 0,65 mg/g de ácidos benzoicos
0 mg/g de ácidos hidroxicinámicos.
entre 1,5 y 2,8 mg/g de flavon-3-oles
entre 1,9 y 3,7 mg/g de flavonoles; y
entre 73,2 y 87,8 mg/g de antocianos,
3. Composición fungicida de acuerdo a la reivindicación 1, donde el extracto procede de uva tinta o de un subproducto del proceso de vinificación de dicha uva tinta, y comprende entre 0,52 y 1,16 mg/g de ácidos benzoicos,
entre 1,0 y 2,5 mg/g de ácidos hidroxicinámicos,
0 mg/g de flavon-3-oles,
entre 1,15 y 1,90 mg/g de flavonoles; y
entre 0 y 0,08 mg/g de antocianos.
4. Composición fungicida de acuerdo a la reivindicación 1, donde el extracto procede de uva tinta o de un subproducto del proceso de vinificación de dicha uva tinta, y comprende entre 0,6 y 1,7 mg/g de ácidos benzoicos,
0 mg/g de ácidos hidroxicinámicos,
entre 1,9 y 2,9 mg/g de flavon-3-oles,
entre 1,05 y 3,70 mg/g de flavonoles; y
entre 12,2 y 18,0 mg/g de antocianos.
5. Composición fungicida de acuerdo a la reivindicación 1 o 3, donde el extracto procede de uva tinta o de un subproducto del proceso de vinificación de dicha uva tinta, y comprende entre 1,0 y 2,5 mg/g de ácido cumárico en estado libre no conjugado.
6. Composición fungicida de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, que comprende además un vehículo aceptable agrícolamente.
7. Composición fungicida de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la composición está formulada como una solución acuosa de los extractos que incorpora uno o más coadyuvantes de formulación, uno o más emulgentes y uno o más co formulantes a base de nutrientes para proporcionar una matriz orgánica al ingrediente activo.
8. Composición fungicida según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores que es una composición acuosa pulverizable.
9. Composición fungicida de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el extracto es obtenido a partir de hollejos de uva tinta Tempranillo.
10. Uso de la composición fungicida según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes donde el componente activo inhibe el crecimiento del micelio del hongo.
11. Uso de la composición fungicida según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes para la eliminación o inhibición de hongos causantes de enfermedades de la madera de la vid (vitis vinífera).
12. Uso de la composición fungicida según la reivindicación 11, donde los hongos se seleccionan entre el grupo que consiste en Eutypa lata; Ilyonectria liriodendri; Phaeomoniella chlamydospora y Phaeoacremonium mínimum.
13. Uso de la composición fungicida según la reivindicación 2 para combatir una cualquiera de las siguientes enfermedades de la madera de la vid: la Eutipiosis, la enfermedad de Petri y la Yesca.
14. Uso de una composición fungicida según la reivindicación 13, donde la composición se aplica con las siguientes dosis del extracto que actúa como componente activo:
- 10% p/v para combatir la Eutipiosis
- 10% p/v para combatir la enfermedad de Petri
- 10% p/v para combatir la Yesca
15. Uso de la composición fungicida según la reivindicación 3 o 5 para combatir una cualquiera de las siguientes enfermedades de la madera de la vid: la Eutipiosis, la enfermedad del pie negro, la enfermedad de Petri y la Yesca.
16. Uso de una composición fungicida según la reivindicación 15, donde la composición se aplica con las siguientes dosis del extracto que actúa como componente activo:
- 5 % p/v para combatir la Eutipiosis
- 10 % p/v para combatir la enfermedad del pie negro
- 5 % p/v para combatir la enfermedad de Petri
- 5 % p/v para combatir la Yesca
17. Uso de la composición fungicida según la reivindicación 4 para combatir una cualquiera de las siguientes enfermedades de la madera de la vid: la Eutipiosis, la enfermedad de Petri y la Yesca.
18. Uso de una composición fungicida según la reivindicación 17, donde la composición se aplica con las siguientes dosis del extracto que actúa como componente activo:
- 10% p/v para combatir la Eutipiosis
- 10% p/v para combatir la enfermedad de Petri
- 10% p/v para combatir la Yesca
19. Método para combatir la Eutipiosis que comprende tratar los hongos, su hábitat o las plantas, suelos y/o materiales que han de liberarse de los mismos con una cantidad efectiva de al menos el compuesto activo de las reivindicaciones 1 -5
20. Método para combatir la Eutipiosis según la reivindicación 19, donde la composición fúngica se aplica por pulverización.
21. Método para combatir la Eutipiosis según la reivindicación 19, donde la composición fúngica se aplica a una dosis de entre 5 y el 10 % p/v del extracto que actúa como componente activo.
22. Método para combatir la enfermedad del pie negro que comprende tratar los hongos, su hábitat o las plantas, suelos y/o materiales que han de liberarse de los mismos con una cantidad efectiva de al menos el compuesto activo de la reivindicación 3.
23. Método para combatir la enfermedad del pie negro según la reivindicación 22, donde la composición fúngica se aplica por pulverización.
24. Método para combatir la enfermedad del pie negro según la reivindicación 22, donde la composición fúngica se aplica a una dosis del 10 % p/v del extracto que actúa como componente activo.
25. Método para combatir la enfermedad de Petri o la Yesca que comprende tratar los hongos, su hábitat o las plantas, suelos y/o materiales que han de liberarse de los mismos con una cantidad efectiva de al menos el compuesto activo de las reivindicaciones 1-5
26. Método para combatir la enfermedad de Petri o la Yesca según la reivindicación 25, donde la composición fúngica se aplica por pulverización.
27. Método para combatir la enfermedad de Petri o la Yesca según la reivindicación 25, donde la composición fúngica se aplica a una dosis de entre 5 y el 10 % p/v del extracto que actúa como componente activo.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
ES202130856A ES2936218A1 (es) | 2021-09-15 | 2021-09-15 | Composición fungicida para la prevención y lucha contra las enfermedades de la madera de la vid |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
ES202130856A ES2936218A1 (es) | 2021-09-15 | 2021-09-15 | Composición fungicida para la prevención y lucha contra las enfermedades de la madera de la vid |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2936218A1 true ES2936218A1 (es) | 2023-03-15 |
Family
ID=85503225
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES202130856A Pending ES2936218A1 (es) | 2021-09-15 | 2021-09-15 | Composición fungicida para la prevención y lucha contra las enfermedades de la madera de la vid |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
ES (1) | ES2936218A1 (es) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2193881A1 (es) * | 2002-04-18 | 2003-11-01 | Univ Madrid Complutense | Metodo para aumentar la resistencia de la uva a la infeccion y maduracion mediante la aplicacion externa de extractos naturales obtenidos a partir de la vid. |
ES2319032A1 (es) * | 2007-03-12 | 2009-05-01 | Carlos Moro Gonzalez | Procedimiento de extraccion de polifenoles a partir de orujo de uva procedente de destilacion. |
ES2431338T3 (es) * | 2008-11-25 | 2013-11-26 | Indena S.P.A. | Extractos vegetales para su uso como fitoquímicos |
ES2779984A1 (es) * | 2019-02-20 | 2020-08-21 | Bodega Matarromera Sl | Procedimiento para identificar propiedades de un extracto de uva |
-
2021
- 2021-09-15 ES ES202130856A patent/ES2936218A1/es active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2193881A1 (es) * | 2002-04-18 | 2003-11-01 | Univ Madrid Complutense | Metodo para aumentar la resistencia de la uva a la infeccion y maduracion mediante la aplicacion externa de extractos naturales obtenidos a partir de la vid. |
ES2319032A1 (es) * | 2007-03-12 | 2009-05-01 | Carlos Moro Gonzalez | Procedimiento de extraccion de polifenoles a partir de orujo de uva procedente de destilacion. |
ES2431338T3 (es) * | 2008-11-25 | 2013-11-26 | Indena S.P.A. | Extractos vegetales para su uso como fitoquímicos |
ES2779984A1 (es) * | 2019-02-20 | 2020-08-21 | Bodega Matarromera Sl | Procedimiento para identificar propiedades de un extracto de uva |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
DEL RIO JOSE A ET AL. Phenolic compounds have a role in the defence mechanism protecting grapevine against the fungi involved in Petri disease. Phytopathologia Mediterranea April 2004. , 31/03/2004, Vol. 43, Páginas 87-94 ISSN 0031-9465 (ISSN print), página 88, columna derecha, tercer párrafo; página 89, columna izquierda, último párrafo; página 91, columna izquierda; tabla 1; resumen. * |
FLORENCE FONTAINE ET AL. Grapevine trunk diseases. A review. abril 2016, páginas 1-25.. International Organisation of vine and wine, abril 2016, Páginas 1-25 página 17, penúltimo párrafo, * |
GIOVANNA SIMONETTI ET AL. Antifungal Activity of Phenolic and Polyphenolic Compounds from Different Matrices of Vitis vinífera L. against Human Pathogens. . Molecules, 17/08/2020, Vol. 25, Páginas 1-22 (DOI: doi:10.3390/molecules25163748) página 2, primer y segundo párrafos. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Azizi et al. | Allelopathic effect of some medicinal plant substances on seed germination of Amaranthus retroflexus and Portulaca oleraceae | |
Moneruzzaman Khandaker et al. | Bioactive constituents, antioxidant and antimicrobial activities of three cultivars of wax apple (Syzygium samarangense L.) fruits | |
Charlebois | Elderberry as a medicinal plant | |
Maudu et al. | The effect of pruning on growth and chemical composition of cultivated bush tea (Athrixia phylicoides DC) | |
EP3685668A2 (en) | Composition comprising acibenzolar-s-methyl as effective ingredient for controlling bursaphelenchus xylophilus disease and method for controlling bursaphelenchus xylophilus using same | |
Ashraf et al. | Phytochemical composition and potent biological activities of ficus benjamina VAR. comosa leaves extract | |
KR101298184B1 (ko) | 어류의 세균성 병원균에 대한 항균 조성물 | |
ES2556054T3 (es) | Utilización de antifúngicos naturales para prevenir la infección de lesiones, injertos y heridas de poda en plantas leñosas por hongos fitopatógenos | |
Martín et al. | Exogenous phenol increase resistance of Ulmus minor to Dutch elm disease through formation of suberin-like compounds on xylem tissues | |
CN107427011A (zh) | 预防农作物和观赏植物中,优选葡萄种植和木本植物中的感染的方法 | |
KR20120075936A (ko) | 토양 유래 바실러스 속 pb25 균주 및 이의 용도 | |
Barabasz-Krasny et al. | The allelopathic potential of Cirsium oleraceum (L.) Scop. into the fodder meadow plants | |
Ayaiyeoba et al. | Anthelmintic activity of a root extract of Ritchiea capparoides var. longipedicellata | |
ES2936218A1 (es) | Composición fungicida para la prevención y lucha contra las enfermedades de la madera de la vid | |
KR20110096109A (ko) | 식물병 방제용 조성물 | |
Rinaldi et al. | Prospects of using garlic extracts for pest control in sustainable agriculture | |
ES2770622T3 (es) | Uso de subsalicilato de bismuto o de uno de sus derivados como agente fitofarmacéutico | |
Awurum et al. | Development of wet rot disease of Amaranthus cruentus L. caused by Choanephora cucurbitarum (Berk. and Rav.) Thax. in response to phytochemical treatments and inoculation methods | |
Pawar et al. | Allelopathic Potential of Bract Leachates of Bougainvillea spectabilis against Cosmos bipinnatus and Ipomoea marginata. J | |
Dadi et al. | Effects of Persian walnut leaf extracts on seed germination, seedling growth, and some physiological characteristics of the basil (Ocimum basilicum L.) cultivar ‘Genovese’ | |
Jagessar et al. | An investigation of the effectiveness of plant extracts from Azadirachta indica (neem) and persea Americana (pear) against rice sheath blight diseases induced by Rhozocotonia Solani | |
KR20130016176A (ko) | 어류의 세균성 병원균에 대한 항균 조성물 | |
Ekhuemelo et al. | Effect of plant extracts on the postharvest quality and management of pepper anthracnose incited by Colletotrichum capsici (Synd) Butler and Bisby on pepper (Capsicum frutescens L.) fruits | |
Barkah et al. | Effect of epiphytes extract on the peroxidase activity in the crop seedlings challenged with fungal pathogens | |
Tkachenko et al. | ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF AN ETHANOLIC EXTRACT DERIVED FROM LEAVES OF FICUS LINGUA WARB. EX DE WILD. & T. DURAND (MORACEAE) AGAINST SOME GRAM-POSITIVE AND GRAM-NEGATIVE STRAINS |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
BA2A | Patent application published |
Ref document number: 2936218 Country of ref document: ES Kind code of ref document: A1 Effective date: 20230315 |