ES2924138T3 - Nueva composición farmacéutica que comprende partículas que comprenden un complejo de un polirribonucleótido de doble cadena y una polialquilenimina - Google Patents
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Abstract
La presente invención se refiere a composiciones que comprenden complejos formados por ácido poliinosínico-policitidílico con una polialquilenimina, como la polietilenimina, que presentan características estructurales y funcionales uniformes, así como a procesos para la preparación de dichas composiciones que cumplen con los requisitos reglamentarios. La presente invención se refiere además al uso de dichas composiciones como medicamentos (en particular para el tratamiento del cáncer), solos o en combinación con otros agentes terapéuticos y/o en métodos médicos específicos. Además, la administración de estas composiciones está asociada a cambios en la expresión de genes específicos, en las respuestas celulares y/o en la composición de las poblaciones de células inmunes que pueden usarse como biomarcadores específicos y/o como diana adicional para el tratamiento médico. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)
Description
DESCRIPCIÓN
Nueva composición farmacéutica que comprende partículas que comprenden un complejo de un polirribonucleótido de doble cadena y una polialquilenimina
CAMPO DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere a composiciones que comprenden partículas formadas por polirribonucleótidos y polímeros para su uso como medicamento para el tratamiento del cáncer.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
En los últimos años se ha explorado el uso de análogos sintéticos de ARN de doble cadena (ARNd) que imitan el ARNd viral para activar específicamente el sistema inmunitario contra los tumores con el efecto de inhibir el crecimiento de las células cancerosas e inducir su apoptosis. En particular, el ácido polinosínico-policidílico de doble cadena (conocido como poli(I:C) o pIC) se ha caracterizado como un tipo de ARNds con diversos efectos de interés terapéutico contra diversos tipos de cánceres (tales como el melanoma, el hepatoma, el carcinoma de colon, gástrico y oral, el cáncer de cuello de útero, el cáncer de mama, el cáncer de ovario, los tumores del tracto urinario, el cáncer de pulmón y de próstata) y sus metástasis, de maneras que pueden ser dependientes o independientes de la activación del sistema inmunitario, de las actividades mediadas por las células asesinas naturales y/o dendríticas, y/o de los cambios en la expresión génica del tumor y el microambiente (Hafner A et al., 2013).
Lamentablemente, estos informes preclínicos iniciales están poco o nada confirmados en los estudios clínicos con moléculas de poli(I:C) desnudas, que han demostrado su baja estabilidad, escasa homogeneidad, farmacocinética impredecible y efectos antitumorales limitados debido a diversos mecanismos, tales como la escasa captación celular o la degradación por las RNasas citosólicas (Hafner A et al., 2013). De hecho, para lograr un efecto terapéutico o profiláctico eficaz, las moléculas de poli(I:C) pueden necesitar ser redisueltas inmediatamente antes o poco antes de su uso, pueden estar disponibles en formulaciones a bajas concentraciones, y/o deben ser administradas frecuentemente (por ejemplo, cada 2 horas).
Durante los últimos años, ha habido un progreso significativo en la formulación de moléculas de poli(I:C) con propiedades inmunomoduladoras y/o terapéuticas. Se han divulgado diversos procedimientos de preparación y formulación de moléculas de poli(I:C) en forma de polvo y/o integradas en micropartículas con base en polímeros con o sin fracción de orientación y enlazadores químicos adicionales (documento CN103599071; documento CN102988303; documento WO2004045491; documento WO2008057696; documento WO2013164380; documento WO2015067632, documento WO2014057432; documento WO2014165296; Schaffert D et al., 2011; documento WO2015173824, Kabilova T et al., 2014; Kübler K et al., 2011; Palchetti S et al., 2013; Saheki A et al., 2011). Las moléculas de poli(I:C) se han formulado con polímeros portadores y en formatos compatibles con la administración nasal (WO2013164380), estabilizadas con polilisina y carboximetilcelulosa (documento WO2005102278), encapsulados dentro de nanopartículas de fosfato de calcio recubiertas de lípidos catiónicos, liposomas u otras estructuras vesiculares (Chen L et al., 2013; documento US2009117306; documento US2011003883), o junto con ARN monocatenario y con péptidos catiónicos como la protamina (documento WO2013087083). Alternativamente, las moléculas de poli(I:C) también se han inmovilizado en partículas sólidas y portadoras tales como las nanopartículas de óxido de hierro, con o sin agentes que ayudarían a dirigir las moléculas de poli(I:C) a células o tejidos específicos (McBain S et al., 2007; Cobaleda-Siles M et al., 2014).
Algunas publicaciones divulgan además diversos complejos ternarios o cuaternarios en el intervalo submicrométrico que están formados por polímeros, moléculas de poli(I:C) y/o ADN de doble cadena, con o sin otros componentes y específicos de los genes (Kurosaki T et al., 2009; Wo 2013040552 ; documento WO2013063019; Tutin-Moeavin I y et al., 2015). Sin embargo, estos enfoques tienen el objetivo de proporcionar agentes que esencialmente administran ADN a las células, manteniendo su viabilidad, y no la eliminación selectiva de las células cancerosas.
Los escollos que limitan el desarrollo clínico de las moléculas de poli(I:C) como fármaco y su cumplimiento de los exigentes requisitos normativos podrían superarse produciendo complejos anticancerígenos estructuralmente complejos que comprendan moléculas de poli(I:C) junto con sistemas de administración de fármacos para la terapia del cáncer que suelen estar basados en polímeros catiónicos tales como el quitosano, la polietilenimina (PEI), la poli-L-lisina, los polimetacrilatos, los polímeros que contienen imidazol o ciclodextrina, los poli(betaaminoésteres) y los dendrímeros relacionados. Estos sistemas poliméricos (también llamados Polyplex) son estructural y funcionalmente distintos de los sistemas con base en lípidos (también llamados Lipoplex) y de los sistemas híbridos (también llamados Lipopolyplex) que se utilizan de forma similar para la entrega local o sistémica de ácidos nucleicos (Bilensoy E, 2010; Germershaus O y Nultsch K, 2015). Entre los Polyplex, el PEI es una polialquilenimina siendo un polímero catiónico de particular interés que puede ser modificado a nivel de estructura y tamaño lineal/ramificado, enlace químico, degradabilidad y generación de derivados (Islam M et al., 2014) y que, a diferencia de la internalización del lipoplex por las células, es internalizado tanto por endocitosis mediada por clatrina como por caveolae (Shabani M et al., 2010).
Este enfoque terapéutico que implica la preparación y la administración de moléculas de poli(I:C) asociadas a PEI ha
sido ejemplificado en la literatura por el agente denominado BO-110 (Pozuelo-Rubio M et al., 2014; Tormo D et al., 2009; documento WO2011003883). Este complejo, también identificado como [pIC]PEI, no sólo provoca una doble inducción de la autofagia y la apoptosis en varias líneas celulares de melanoma y de otros tipos de tumores (tal como los gliomas o los carcinomas), sino que también tiene un efecto nulo o limitado sobre la viabilidad de las células normales, tales como los melanocitos. BO-110 inhibe el crecimiento del melanoma en modelos animales para demostrar su actividad antitumoral y antimetastásica in vivo, incluso en ratones gravemente inmunodeprimidos. Además, un agente similar con base en[pIC]PEI estimula la apoptosis en las células de adenocarcinoma ductal pancreático sin afectar a las células epiteliales pancreáticas normales y la administración in vivo de [pIC]PE inhibió el crecimiento tumoral en modelos animales tumorales (Bhoopathi P et al., 2014). Otro efecto de la administración de BO-110 se caracteriza en un modelo de endometriosis, en el que dicho agente reduce la angiogénesis y la proliferación celular y aumenta la apoptosis (García-Pascual C y Gómez R, 2013). Así pues, el BO-110 y otros agentes similares [pIC]PEI que comprenden polirribonucleótidos de doble cadena representan una novedosa estrategia anticancerosa con un amplio espectro de acción, debido a la activación combinada de la autofagia y la apoptosis, de forma autónoma y selectiva en las células tumorales, mientras se mantiene la viabilidad de las células normales de diferentes linajes. Sin embargo, el BO-110, al igual que otros agentes basados en polirribonucleótidos de doble cadena que han demostrado su eficacia en diversos modelos preclínicos cuando se asocian a portadores, aún debe proporcionarse en formulaciones que sean estables en diferentes condiciones de almacenamiento, de fabricación y tamaño uniformes, y que se adapten más fácilmente a los usos médicos (en particular los dirigidos al cáncer) con respecto a las combinaciones, regímenes, dosificaciones y seguimiento clínico más eficaces cuando se utilizan otros fármacos y terapias.
En efecto, el estado de la técnica no proporciona una enseñanza adecuada para resolver las cuestiones relacionadas con la combinación más eficaz de criterios estructurales y biofísicos que permiten la producción de composiciones que contienen poli(I:C) para el tratamiento del cáncer. Las agencias reguladoras también exigen que se cumplan estrictamente las especificaciones de reproducibilidad, almacenamiento y uniformidad del tamaño y la concentración de las partículas que contienen poli(I:C) que se incluyen en las composiciones para uso en humanos. Las características generales de las formulaciones con base en polirribonucleótidos de doble cadena (tal como las moléculas de poli(I:C)) y agentes relacionados, las composiciones (identificadas colectivamente como productos BO-11X), y los procedimientos relacionados que proporcionan moléculas de polirribonucleótidos de doble cadena, a concentraciones más altas, y bien controladas, se describieron en la solicitud PCT PCT/EP2016/078078. Sin embargo, la caracterización preclínica y clínica de los productos BO-11X sigue siendo necesaria para permitir su uso médico eficaz como fármaco (en particular contra el cáncer) en relación con indicaciones específicas, tratamientos en curso y/o regímenes, al tiempo que se mejoran los medios para la evaluación y el uso clínico junto con el cumplimiento por parte de los pacientes, y se reduce la frecuencia de dosificación de moléculas de polirribonucleótidos de doble cadena con un margen de seguridad y efectos terapéuticos bien definidos.
SUMARIO DE LA INVENCIÓN
La invención está definida por las reivindicaciones adjuntas. Cualquier materia que quede fuera del ámbito de las reivindicaciones se proporciona únicamente a título informativo.
La presente invención se refiere a una composición acuosa para su uso como medicamento para el tratamiento del cáncer, en la que dicha composición se administra a un sujeto de acuerdo con un régimen de administración que comprende:
(i) al menos una primera inyección intratumoral; y
(ii) al menos una segunda inyección subcutánea o intramuscular,
en la que dicha al menos una inyección intratumoral se administra antes de dicha al menos una inyección subcutánea o intramuscular, o de acuerdo con un régimen de administración que comprende:
(i) obtener células del sujeto, en el que dichas células se aíslan de la sangre, de un tejido o de un tumor;
(ii) poner en contacto dichas células con dicha composición ex vivo; y
(iii) administrar dichas células al sujeto;
y en el que dicha composición comprende partículas en las que:
(i) cada una de dichas partículas comprende un complejo de
(a) ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C), o una sal o un solvato del mismo, en el que al menos 40 % de las moléculas de poli(I:C) comprendidas en dichas partículas tienen al menos 850 pares de bases, y al menos 50 % de las moléculas de poli(I:C) comprendidas en dichas partículas tienen entre 400 y 5.000 pares de bases; y
(b) la homo-polialquilenimina o la hetero-polialquilenimina lineales, solubles en agua, o una sal y/o un solvato de las mismas, en las que el peso molecular promedio de dicha polialquilenimina lineal está comprendido entre 17 y 23 kDa;
(ii) al menos 90 % de dichas partículas tiene una distribución de diámetro monomodal inferior a 300 nm;
(iii) dichas partículas tienen un diámetro medio z inferior o igual a 200 nm, medido de acuerdo con la norma ISO 22412:2017, con un índice de polidispersidad de dicho diámetro de partícula inferior a 1,5;
(iv) dicha composición contiene ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] en una concentración de al menos 0,5 mg/ml;
(v) dicha composición tiene: un pH entre 2 y 4 y una osmolalidad entre 200 y 600 mOsm/kg; y
(vi) dicha composición tiene un potencial zeta entre 35 y 50 mV, de acuerdo con la norma ISO 13099-2:2012.
Se proporciona además en esta divulgación una composición acuosa que comprende partículas como las divulgadas en el presente documento, en la que:
(i) cada una de dichas partículas está formada por un complejo de al menos un polirribonucleótido de doble cadena, o una sal o un solvato del mismo, y al menos una polialquilenimina lineal, o una sal y/o un solvato del mismo, en el que dicho polirribonucleótido de doble cadena es ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] y el peso molecular promedio de dicha polialquilenimina lineal está entre 17 y 23 kDa;
(ii) al menos 90 % de dichas partículas tiene un diámetro monomodal inferior a 300 nm;
(iii) dichas partículas tienen un diámetro promedio z inferior o igual a 200 nm, medido de acuerdo con la norma ISO 22412:2017; y
(iv) dicha composición tiene un potencial zeta igual o superior a 30 mV, preferentemente entre 35 y 50 mV, de acuerdo con la norma ISO 13099-2:2012;
en el que dichas partículas se forman con una relación entre el número de moles de nitrógeno de dicha polialquilenimina y el número de moles de fósforo de dicho polirribonucleótido de doble cadena en dicha composición que es igual o superior a 2,5.
La presente divulgación también se refiere a una composición obtenible por liofilización de la composición acuosa tal como se divulga en el presente documento.
Estas composiciones divulgadas pueden definirse además sobre la base de las características asociadas a los siguientes criterios: un pH comprendido entre 2 y 4 y una concentración de un polirribonucleótido de doble cadena igual o superior a 0,5 mg por ml del volumen total de dicha composición.
Estas composiciones divulgadas pueden definirse además sobre la base de la cantidad y el tamaño de los polirribonucleótidos de doble cadena, en particular:
(i) al menos 40 % de los polirribonucleótidos de doble cadena comprendidos en dichas partículas tienen al menos 850 pares de bases, y al menos 50 % de los polirribonucleótidos de doble cadena comprendidos en dichas partículas tienen entre 400 y 5000 pares de bases; y/o
(ii) entre 5 % y 60 % de los polirribonucleótidos de doble cadena que tengan menos de 400 pares de bases, entre 15 % y 30 % de los polirribonucleótidos de doble cadena que tengan entre 400 y 850 bases, entre 10 % y 70 % de los polirribonucleótidos de doble cadena que tengan entre 850 y
5000 pares de bases, y entre 0 % y 10 % de polirribonucleótidos de doble cadena con más de 5000 pares de bases.
Estas composiciones divulgadas han sido optimizadas con éxito para la fabricación farmacéutica y el uso clínico, en particular identificando las combinaciones óptimas y más reproducibles de componentes, criterios físicos y/o químicos, e intervalos numéricos relacionados (aplicables a las partículas o a las composiciones) para los usos y procedimientos deseados. Así, otra composición preferida es una composición acuosa que comprende partículas en las que:
(i) cada una de dichas partículas comprende un complejo de
(a) ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)], o una sal o un solvato del mismo, en el que al menos 40 % de las moléculas de poli(I:C) comprendidas en dichas partículas tienen al menos 850 pares de bases, y al menos 50 % de las moléculas de poli(I:C) comprendidas en dichas partículas tienen entre 400 y 5000 pares de bases, y
(b) una homo-polialquilenimina o hetero-polialquilenimina lineal soluble en agua, o una sal y/o un solvato de la misma, en la que el peso molecular promedio de dicha polialquilenimina lineal está comprendido entre 17 y 23 kDa
(ii) al menos 90 % de dichas partículas tiene una distribución de diámetro monomodal inferior a 300 nm (y preferentemente inferior a 250 nm);
(iii) dichas partículas tienen un diámetro promedio z de entre 60 nm y 130 nm de diámetro (y más preferentemente de 80 /- 20 nm), medido de acuerdo con la norma ISO 22412:2017, con un índice de polidispersidad de dicho diámetro de partícula inferior a 1,5;
(iv) dicha composición contiene poli(I:C) en una concentración de al menos 0,5 mg/ml;
(v) dicha composición tiene: un pH entre 2 y 4 y una osmolalidad entre 200 y 600 mOsm/kg; y
(vi) dicha composición tiene un potencial zeta entre 35 mV y 50 mV, de acuerdo con la norma ISO 13099-2:2012.
Estos intervalos identificados en la composición acuosa y las partículas definidas anteriormente pueden definirse y/o limitarse aún más:
(i) partículas que comprenden al menos 10 % de moléculas de poli(I:C) que tienen menos de 400 pares de bases, al menos 40 % de moléculas de poli(I:C) que tienen al menos 850 pares de bases, al menos 70 % de moléculas de poli(I:C) que tienen entre 400 y 5000 pares de bases, y entre 20 % y 45 % de moléculas de poli(I:C) que tienen entre 400 y 850 pares de bases
(ii) partículas que comprenden entre 5 % y 60 % de moléculas de poli(I:C) que tienen menos de 400 pares de bases, entre 15 % y 30 % de moléculas de poli(I:C) que tienen entre 400 y 850 bases, entre 10 % y 70 % de moléculas de poli(I:C) que tienen entre 850 y 5000 pares de bases, y entre 0 % y 10 % de moléculas de poli(I:C) que tienen más de 5000 pares de bases.
(iii) dichas partículas tienen un diámetro medio (D50 %) de entre 75 nm y 150 nm (y preferentemente tienen al menos un diámetro medio de 85 /- 20 nm);
(v) la homo-polialquilenimina o hetero-polialquilenimina lineal soluble en agua es una polietilenimina lineal; (vi) el índice de polidispersidad de dicho diámetro de partícula está comprendido entre 0,2 y 0,3;
(vii) la composición tiene un pH de 3,0 /- 0,2 y una osmolalidad de entre 300 y 310 mOsm/kg.
Además, la presente divulgación se refiere a una composición, es decir, formulaciones o composiciones de BO-11X como se divulga en el presente documento, para su uso como medicamento, solo en combinación con otros agentes terapéuticos. Estas composiciones pueden comprender además al menos un portador farmacéuticamente aceptable, un disolvente orgánico, un excipiente y/o un adyuvante, incluidos en las propias partículas o añadidos en la composición acuosa, por ejemplo, glucosa añadida en una concentración de entre 1 y 10 % (peso/volumen). Además, la composición puede comprender además al menos un compuesto, y en particular un compuesto terapéutico, seleccionado entre un compuesto orgánico, un compuesto inorgánico, un ácido nucleico (por ejemplo, ARN no codificante o ARN que codifica proteínas), un aptámero, un péptido o una proteína, ya sea incluido en las propias partículas o añadido en la composición acuosa.
Además, esta composición divulgada puede administrarse para usos médicos utilizando regímenes que combinan diferentes vías de administración (por ejemplo, una o más inyecciones intratumorales que son seguidas por una o más inyecciones subcutáneas o intramusculares durante un período de 1 o más semanas) y/o la exposición ex vivo de células humanas a la composición, antes de volver a administrar las células al paciente. En este último caso, dicho régimen implica la inducción de actividades específicas dentro de las células del paciente que están expuestas a la composición, por ejemplo, la inducción de la producción de interferón por dichas células in vitro. Por otra parte, los estudios in vitro y/o ex vivo con respecto a la respuesta inmunitaria a dicha composición muestran que las composiciones BO-11X desencadenan otros mecanismos biológicos (independientes del interferón y/o dirigidos a las células inmunitarias, por ejemplo) que pueden aprovecharse para promover acontecimientos terapéuticamente relevantes tales como la muerte de las células tumorales, la mejora de la respuesta inmunitaria de las células T local y/o sistémica, ya sea directamente (dentro de los tumores inyectados) o en los tumores distantes, y otros mecanismos que pueden ser útiles para tratar los cánceres recurrentes, que no responden o son refractarios a otras terapias.
La dosis de la composición divulgada, en particular con respecto al contenido de polirribonucleótidos de doble cadena, puede adaptarse en consecuencia a cada tipo de administración, régimen (por ejemplo, la más alta para la inyección intratumoral, la más baja para la inyección subcutánea o intramuscular, e incluso la más baja para el tratamiento de células ex vivo), y/o otros fármacos (cuando se administran en terapias combinadas).
La presente divulgación también se refiere a una composición, como se divulga en el presente documento, para su uso en el tratamiento o la prevención de un trastorno del crecimiento celular caracterizado por el crecimiento anormal de células humanas o animales, preferentemente cáncer, y más preferentemente cánceres sólidos o linfomas. Además, esta composición puede administrarse para apoyar vacunas, citocinas, antígenos, anticuerpos, compuestos químicos y otros compuestos que tengan actividades inmunomoduladoras para tratar o prevenir cánceres (sólidos o no) o infecciones, por ejemplo como adyuvante y/o para rescatar a pacientes que respondan mal o sean resistentes a un fármaco, incluyendo agentes para la inmunoterapia del cáncer, para alterar el metabolismo y/o las funciones celulares (preferentemente, en las células inmunitarias y/o cancerosas), para modular la expresión, replicación y/o reparación del ADN (incluyendo fármacos dirigidos a los mecanismos epigenéticos), o para terapias estándar (tales como la quimio o la radioterapia, o las terapias con base en vacunas que implican antígenos cancerosos o virales).
Otros objetos están relacionados con la composición para su uso en procedimientos, tales como los divulgados en el presente documento, para evaluar la eficacia, el régimen más apropiado, la combinación terapéutica más apropiada con otro fármaco anticanceroso o protocolo de atención estándar, y/o los sujetos que presentan la mejor respuesta al tratamiento con un tratamiento BO-11X. Estos procedimientos implican la medición de la regulación al alza y a la baja de la expresión de paneles de genes en tipos celulares seleccionados (tales como las células inmunitarias y las células cancerosas) tras la exposición a una composición de BO-11X y, en consecuencia, la aplicación de medios adecuados para mejorar la eficacia terapéutica (por ejemplo, para estratificar o seleccionar a los pacientes para tratamientos
adicionales, administrar o no fármacos dirigidos a objetivos biológicos específicos, y/o reducir o aumentar la dosificación de BO-11X y/u otras composiciones).
Además, la presente divulgación se refiere a un procedimiento de fabricación de una composición, es decir, formulaciones o composiciones BO-11X como se divulga en el presente documento, que comprende:
(i) preparar una solución acuosa de al menos un polirribonucleótido bicatenario, o una sal o un solvato del mismo, y una solución acuosa de al menos una polialquilenimina, o una sal o un solvato del mismo, en el que una o ambas soluciones comprenden opcionalmente un portador, un disolvente orgánico, un excipiente y/o un adyuvante farmacéuticamente aceptables;
(ii) filtrar independientemente cada solución a través de un filtro con un diámetro de poro inferior o igual a 500 nm para formar soluciones esterilizadas;
(iii) mezclar las soluciones esterilizadas resultantes en una cámara de mezcla para formar una composición acuosa mediante la adición de una de dichas soluciones a la otra solución en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a una velocidad mayor o igual a 1 ml/min, o mediante la adición simultánea de cada una de dichas soluciones en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a una tasa mayor o igual a 1 ml/min; y opcionalmente
(iv) filtrar la composición acuosa resultante a través de un filtro que tiene un diámetro de poro inferior o igual a 600 nm para formar un filtrado, o centrifugar la composición acuosa resultante a una velocidad superior o igual a 22480 m/s2 para formar un sobrenadante.
La presente divulgación también se refiere a la composición acuosa obtenible por dicho procedimiento (incluidas las composiciones que pueden definirse como suspensiones ligeras), así como a las composiciones que pueden obtenerse opcionalmente liofilizando la composición acuosa, el filtrado o el sobrenadante resultante y que luego se suministran y/o utilizan por separado (o en kits) con otros compuestos o dispositivos médicos (tales como tampones, diluyentes, catéteres, agujas, filtros o dispositivos adaptados para la administración intratumoral).
Se prefiere una composición de la presente divulgación que comprende partículas en las que:
(i) cada una de dichas partículas comprende un complejo de al menos un polirribonucleótido de doble cadena, o una sal o un solvato del mismo, y al menos una polialquilenimina, o una sal y/o un solvato del mismo, en el que
(a) dicho polirribonucleótido bicatenario es ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] o ácido poliadenílicopoliuridílico [poli(A:U)], en el que al menos 10 % de los polirribonucleótidos de doble cadena tienen menos de 400 pares de bases, al menos 40 % de dichos polirribonucleótidos de doble cadena tienen al menos 850 pares de bases, al menos 70 % de dichos polirribonucleótidos de doble cadena tienen entre 400 y 5000 pares de bases, y entre 20 % y 45 % de dichos polirribonucleótidos de doble cadena tienen entre 400 y 850 pares de bases; y
(b) dicha polialquilenimina comprende al menos 95 % de polietileniminas, en las que el peso molecular promedio en peso de dicha polialquilenimina está entre 17 y 23 kDa y el índice de polidispersidad es < 1,5, y en las que la relación entre el número de moles de nitrógeno de dicha polialquilenimina y el número de moles de fósforo de dicho polirribonucleótido de doble cadena en dicha composición está entre 2,5 y 5,5;
(ii) al menos 99 % de dichas partículas tiene un diámetro inferior o igual a 600 nm; y
(iii) dichas partículas tienen un diámetro promedio z de entre 30 nm y 150 nm.
Aún más preferida es una composición acuosa que comprende partículas en las que:
(i) cada una de dichas partículas comprende un complejo de al menos un polirribonucleótido de doble cadena, o una sal o un solvato del mismo, y al menos una polialquilenimina, o una sal y/o un solvato del mismo, en el que
(a) dicho polirribonucleótido de doble cadena es ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)], en el que al menos 10 % de los polirribonucleótidos de doble cadena tienen menos de 400 pares de bases, al menos 40 % de dicho poli(I:C) tiene al menos 850 pares de bases, al menos 70 % de dicho poli(I:C) tiene entre 400 y 5000 pares de bases, y entre 20 % y 45 % de dicho poli(I:C) tiene entre 400 y 850 pares de bases; y
(b) dicha polialquilenimina es polietilenimina (PEI), en la que el peso molecular promedio en peso de dicha PEI está entre 17,5 y 22,6 kDa y el índice de polidispersidad es < 1,5, y en la que la relación entre el número de moles de nitrógeno de dicha polialquilenimina y el número de moles de fósforo de dicho polirribonucleótido de doble cadena en dicha composición está entre 2,5 y 4,5;
(ii) al menos 99 % de dichas partículas tiene un diámetro inferior o igual a 500 nm;
(iii) dichas partículas tienen un diámetro promedio z de entre 60 nm y 130 nm; y
(iv) dichas partículas tienen un diámetro medio (D50 %) de entre 75 nm y 150 nm.
Cualquiera de las composiciones definidas anteriormente puede definirse además con respecto a las características del procedimiento de fabricación, incluyendo las composiciones obtenibles por liofilización de la composición acuosa
definida anteriormente. Por ejemplo, las partículas se forman con una relación entre el número de moles de nitrógeno de dicha homo-polialquilenimina o hetero-polialquilenimina lineal soluble en agua y el número de moles de fósforo de las moléculas de poli(I:C) entre 2,5 y 4,5. Preferentemente, las partículas se forman inyectando por separado la solución que contiene dichas moléculas de poli(I:C) y la solución que contiene dicha homo-polialquilenimina o heteropolialquilenimina lineal soluble en agua en una cámara de mezcla. Las composiciones acuosas pueden formarse añadiendo glucosa en una concentración de entre 1 y 10 % (peso/volumen total de dicha composición), preferentemente añadiendo glucosa a la solución que contiene poli(I:C). Además, la solución que contiene dichas moléculas de poli(I:C) y la solución que contiene dicha homo-polialquilenimina o hetero-polialquilenimina lineal y soluble en agua se inyectan por separado, y la velocidad de flujo para inyectar cualquiera de las dos soluciones está entre 1 ml/min y 50 ml/min, y/o se mezclan a una velocidad entre 50 rpm y 600 rpm.
Los intervalos más preferidos que se identifican arriba dentro de (i)-(vii) con respecto a los tamaños de las moléculas de poli(I:C) contenidas en las partículas, la distribución del diámetro monomodal de las partículas siendo polietilenimina la polialquilenimina lineal, el índice de polidispersidad del diámetro de las partículas, la osmolalidad de la composición, y/o el pH de la composición (así como la presencia de un portador farmacéuticamente aceptable, un disolvente orgánico, un excipiente y/o un adyuvante, o la presencia de al menos un compuesto, y en particular un compuesto terapéutico) también se aplican a las composiciones acuosas que comprenden partículas que se forman como se ha indicado anteriormente.
En la Descripción Detallada y en los Ejemplos que se presentan a continuación, se proporcionan otras divulgaciones relacionadas con la preparación de dichas composiciones en forma de formulaciones de BO-11X, sus características, su análisis y sus usos (solos o en combinación con otros agentes, así como en regímenes específicos), en particular para obtener respuestas terapéuticas mejoradas u optimizadas para indicaciones específicas y/o en combinación con otros fármacos y terapias (tal como la quimioterapia, la radioterapia, los agentes dirigidos a las moléculas de punto de control inmunitario, las respuestas mediadas por células T, la reparación y/o replicación del ADN, o los inhibidores de quinasas y otras enzimas que modulan las actividades en las células inmunitarias y/o las células cancerosas, incluyendo las actividades metabólicas). Las formulaciones de BO-11X pueden utilizarse para tratar un trastorno del crecimiento celular caracterizado por un crecimiento anormal de las células humanas o animales (y, en particular, del cáncer) en combinación con un segundo agente terapéutico seleccionado de entre los anti-CTLA4, los anti-PD1, los anti-PDL1, las células T CAR, las vacunas contra el antígeno del cáncer o los agentes dirigidos a las células T reguladoras, las enzimas metabólicas, la reparación y/o replicación del ADN o una proteína expresada por cualquiera de los genes de la Tabla I (véase el Ejemplo 4). Más particularmente, las formulaciones de BO-11X pueden utilizarse para obtener un efecto terapéutico sinérgico cuando se administran con este segundo agente terapéutico, incluyendo la posibilidad de reducir la dosificación regular y/o la frecuencia de administración de dicho segundo agente terapéutico (reduciendo así potencialmente las intervenciones médicas, la resistencia a los fármacos, y/o el malestar del paciente). Además, las formulaciones de BO-11X, cuando se administran con este segundo agente terapéutico, pueden permitir tratar a los pacientes que son resistentes, insensibles o que responden mal (o no responden) a dicho segundo agente terapéutico, superando cualquier mecanismo específico de resistencia o de escape del tumor (incluyendo las mutaciones que alteran los genes específicos, las vías y/o la respuesta a los fármacos o a los compuestos endógenos, tales como las citoquinas). Así, las formulaciones de BO-11X pueden utilizarse en forma de tratamiento combinado de rescate de fármacos o de sensibilización a los fármacos, en particular para el tratamiento del cáncer.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS (las composiciones y formas de administración que no se corresponden con las reivindicadas no son acordes con la invención)
Figura 1: Fabricación GMP y análisis estructural de las composiciones acuosas de BO-11X, como el ejemplo de BO-112. (A) Diagrama de flujo que resume los principales pasos para la fabricación de los compuestos BO-112 como una preparación farmacéutica que cumple con las GMP y que comprende moléculas de poli(I:C), preparaciones comerciales de JetPEI y glucosa. Este enfoque puede aplicarse también utilizando otros tipos de polirribonucleótidos que forman moléculas de doble cadena formadas por poli (A), poli (U), poli (C) y/o poli (G) de acuerdo con sus respectivas propiedades de emparejamiento. De lo contrario, este enfoque puede implicar la adición de otro compuesto (que sea un adyuvante o compuesto terapéutico relacionado con el sistema inmunitario, tal como CD40L, IL12, antígenos virales o tumorales, ARNmi, ARNm u otros fármacos con base en ARN/ácidos nucleicos (no codificantes), o un fármaco anticanceroso tal como inhibidores de quinasas u otras enzimas que afecten a la replicación celular, el metabolismo o las funciones biológicas) junto con (o como alternativa a) la glucosa u otro excipiente en la etapa 1. (B) La distribución del tamaño de los complejos BO-112 se compara con la de tres productos comerciales que contienen poli(I:C) (Poly-ICLC, LyoVec-HMW y LyoVec-LMW); el tamaño de las partículas se define considerando el diámetro de las mismas en nanómetros (d.nm) mediante dispersión de luz dinámica (tecnología zeta sizer nano ZS). Estos preparados comerciales también presentan cambios sustanciales en la distribución de tamaños tras el almacenamiento a -20 °C, que los preparados de BO-112 no presentan.
Figura 2: Efecto de diferentes formulaciones de poli(I:C) sobre la viabilidad celular en distintos modelos celulares de cáncer. (A) El BO-112 se compara con las células no tratadas y con las células tratadas con Poly-ICLC, LyoVec-LMW o LyoVec-HMW, probándose cada formulación a las concentraciones indicadas que se determinaron de acuerdo con el peso del complejo, pero con un contenido similar de moléculas de poli(I:C) en un modelo celular de melanoma (SK-MEL-103) o de cáncer de páncreas (PANC 02.03). Los datos de viabilidad celular se generaron
mediante el procedimiento de ensayo del violeta de cristal después de 24 horas. Este ensayo de citotoxicidad in vitro se realizó en otros modelos de ratón (cáncer de mama 4T1, cáncer de colon MC38 y B16-F10-OVA) y humanos (línea celular de cáncer de páncreas PAN02.03) incubando las células con 0,25-1,0 pg/ml de BO-1l2 durante 24 o 48 horas, confirmando el efecto citotóxico directo sobre dichas líneas celulares. (B) El efecto de las diferentes formulaciones de poli(I:C) sobre las moléculas de señalización de interés terapéutico, tal como la expresión del interferón-beta (IFN-beta), se evaluó mediante el procedimiento RT-qPCR en las células SK-MEL-103 que fueron expuestas a BO-112, Poly-ICLC (o sin tratar, NT) durante 8, 16 y 24 horas. Se utilizaron las formulaciones de BO-112 y Poly-ICLC a una concentración que proporcionaba un contenido similar de moléculas de poli(I:C).
Figura 3: Efecto del PEI lineal solo, del poli(I:C) y de dos formulaciones diferentes de PEI/poli(I:C) (BO-110 y BO-112) sobre la viabilidad de melanocitos primarios normales (preparaciones #1 y #2) y de cuatro líneas celulares de cáncer, demostrando la citotoxicidad específica de dichas formulaciones de PEI/poli(I:C) contra las líneas celulares de cáncer. El contenido de Poly(I:C) utilizado en la preparación de los tratamientos de Poly(I:C) solamente, BO-110 y BO-112 administrados es idéntico (1 pg/ml por 4o horas de tratamiento).
Figura 4: Efecto de diferentes formulaciones de BO-112 de poli(I:C) en células de melanoma derivadas de pacientes (línea celular SK-Mel 103). BO-112 se compara ex vivo con células no tratadas (NT) y con células tratadas con Poly-ICLC, LyoVec-LMW, o LyoVec-HMW, probándose cada formulación a las concentraciones que se determinaron de acuerdo con el peso del complejo, pero con un contenido similar de moléculas de poli(I:C). (A) Los datos de viabilidad celular se generaron utilizando el procedimiento de ensayo del violeta de cristal tras un tratamiento de 48 horas con cada formulación de poli(I:C) a una concentración de 0,35 pg/ml. (B) La expresión de interferón-alfa/beta (IFNa/b, en unidades arbitrarias) se evaluó a las 16 y 24 horas después del tratamiento con cada formulación de poli(I:C) a una concentración de 0,5 pg/ml.
Figura 5: Efecto del BO-112, de los lipopolisacáridos (LPS) y de la preparación de poli(I:C) para producir el BO-112 sobre diferentes tipos de muerte celular y la expresión de marcadores relacionados. B16-F10-OVA (células 105 células/pocillo) se cultivaron solas (control) o con moléculas de LPS, BO-112 o poli(I:C) solos (con la misma distribución de tamaños de los incorporados en las formulaciones de BO-112), a las concentraciones indicadas durante 48 horas, midiendo por citometría de flujo el porcentaje de células que seguían siendo viables o que presentaban combinaciones de marcadores relacionados con la apoptosis temprana/tardía, o la necrosis (tinción con anexina V y 7ADD; A), o que expresaban marcadores específicos de muerte celular inmunógena tales como MHC-I, CD95 o Calreticulina, (B).
Figura 6: Efecto del BO-112 en la activación de la enzima poli ADP ribosa polimerasa (PARP). Se cultivaron células de cáncer de mama 4T1 o de colon MC38 (3*106) con BO-112 (0,5 pg/ml). La activación de la PARP, una enzima que interviene en la reparación del ADN, la estabilidad genómica y la muerte celular programada, se evaluó a las 0, 16 y 24 horas después de la estimulación con BO-112 mediante análisis de transferencia Western. Se analizó la presencia en los lisados celulares de la proteína PARP completa de 116 kDa y del producto de escisión inducido por la apoptosis de 85 kDa; se incluyó la tubulina como control para cargar cantidades iguales de proteínas. Los resultados muestran que la formulación de BO-112 promueve la activación de la enzima PARP tanto en las células cancerosas MC38 como en las 4T1, proporcionando evidencia para el uso de la composición de BO-112 en combinación con el inhibidor de PARP en pacientes en los que este último tipo de fármacos es poco o nada efectivo y puede requerir ser sensibilizado (véase también Fig. 14B y 15B).
Figura 7: Efecto de la administración de BO-112 en un modelo animal de melanoma humano. (A) Cronograma que muestra el programa de tratamiento. Todos los ratones fueron inyectados por vía subcutánea con células de melanoma murino B16-F10 en el día 0. Tras distribuir aleatoriamente a los ratones en cinco grupos que presentaban tumores de tamaño promedio similar (80-100 mm3) el día 7, los animales fueron tratados con la formulación de BO-112 (círculos dobles) mediante inyección directa en el tejido tumoral (tratamiento i.t.) a 3 concentraciones diferentes en los grupos 2, 3 y 4 (G2, G3, G4) o, en los dos grupos restantes (G1 y G5), sólo con vehículo. En los siguientes días de tratamiento (10, 14, 17, 21 y 24) todos los grupos, excepto el G1, recibieron la administración intraperitoneal (i.p.) de un anticuerpo murino anti-PD-L1 (150 pg/dosis) además de la administración intratumoral de la formulación de BO-112 a la misma concentración del día 7. La supervivencia se controló diariamente, y los ratones se calificaron como muertos al encontrarlos fallecidos, o cuando el volumen del tumor alcanzó el tamaño máximo permitido. El seguimiento continuó después del último tratamiento hasta el día 45, cuando murió el último ratón y se dio por terminado el experimento. (B) Curva de supervivencia comparando los grupos de control G1 y G5 con los tres grupos en los que se administró la formulación de BO-112 a las tres concentraciones indicadas. Al comparar los grupos, hubo una diferencia estadística (p < 0,0001, prueba de Mantel-Cox de rango logarítmico) entre los grupos de control y los grupos de prueba, y el G4 mostró el mayor aumento de la supervivencia en relación con el vehículo o el anti-PD-L1 solo. (C) Efecto terapéutico de BO-112 como agente único en otro modelo B16-F10 de melanoma humano; se inyectan células de melanoma B16-F10 (5 *105 células) por vía subcutánea y se administra BO-112 intratumoralmente como se describe en A (8-9 ratones/grupo; grupo de control, sólo vehículo; grupo de tratamiento, BO-112; dosis de BO-112/ratón: 2,5 mg/Kg en 100 pl). (D) El tamaño de los tumores se midió mediante un calibrador semanal y se calculó el volumen (longitud * anchura2/2) de cada animal. Los gráficos de araña muestran las curvas individuales de crecimiento tumoral para los ratones de control (vehículo) y tratados con BO-112 e indican que la formulación de BO-112 reduce el crecimiento tumoral en comparación con el vehículo.
Figura 8: Efecto abscópico de la administración de BO-112 en un modelo animal de melanoma humano. (A) Ratones en los que se inducen dos cánceres transfiriendo el melanoma B16-F10-OVA son tratados en una sola masa tumoral por administración intratumoral (para BO-112) y/o sistémica por administración
intraperitoneal (para anti-PD-LI), utilizando un régimen y dosificaciones similares a las del experimento mostrado en la Fig. 7 (n= 10 ratones/grupo). (B) Se midió el crecimiento del volumen del tumor en las masas tumorales distales tratadas y no tratadas en los cuatro grupos: control, tratamiento único o tratamiento combinado. Los tumores se midieron con un calibrador semanalmente y se calculó el volumen (longitud * anchura2/2) de cada animal de un grupo.
Figura 9: Efecto de la administración de BO-112 en un modelo animal de cáncer de mama humano. (A) Modelo y esquema de tratamiento con células de carcinoma de mama 4T1 (5 *105 células) que se inyectaron por vía subcutánea (s.c.) en el flanco derecho de ratones BALB/c hembra de 8 a 10 semanas de edad (6-7 ratones/grupo; grupo de control, sólo vehículo; grupo de tratamiento, BO-112). Los tratamientos comenzaron cuando el volumen del tumor era de 80-100 mm3 (el día 9). La administración de BO-112 y del vehículo se realizó por vía intratumoral mediante una única inyección directa en la masa tumoral del flanco derecho (dosis/ratón: 2,5 mg/Kg en 100 j l) en los días indicados. Los tumores se midieron con un calibrador semanalmente y se calculó el volumen (longitud * anchura2/2) para cada animal de un grupo, obteniéndose datos que se muestran por separado para cada uno de dichos animales (se indica el número de animales para cada grupo (B), o en consolidado para cada grupo (C), observándose una disminución estadísticamente relevante del volumen tumoral en el grupo tratado con BO-112.
Figura 10: Efecto de la administración de BO-112 en un modelo animal de cáncer colorrectal humano. (A) En un primer modelo y esquema de tratamiento, se inyectaron células de carcinoma de colon MC38 (5 *105 células) por vía s.c. en el flanco derecho de ratones C57BL/6 hembra de 8 a 10 semanas de edad (7-8 ratones/grupo; grupo de control G1, sólo vehículo; grupo de tratamiento G2). Los tratamientos comenzaron cuando el volumen del tumor era de 80-100 mm3 (el día 16).
La administración de BO-112 y del vehículo se realizó por vía intratumoral mediante una única inyección directa en la masa tumoral del flanco derecho (dosis/ratón: 2,5 mg/Kg en 100 j l) en los días indicados. (B) La supervivencia de los ratones en este primer modelo se evaluó mediante un análisis de Kaplan-Meier. También se midieron los tumores mediante un calibrador semanal y se calculó el volumen (longitud * anchura2/2) para cada animal de un grupo obteniendo datos que se muestran por separado para cada uno de dichos animales (C) o en consolidado para cada grupo (D), observándose una disminución estadísticamente relevante del volumen tumoral en el grupo tratado con BO-112.
Figura 11: Efecto de la administración de BO-112 en un segundo modelo de cáncer colorrectal humano utilizando un esquema de tratamiento diferente. (A) Se inyectaron células de carcinoma de colon MC38 (1 *106 células) por vía s.c. en el flanco derecho de ratones hembra C57BL/6 de 8 a 10 semanas de edad (4-11 ratones/grupo; grupo de control G1, sólo vehículo; grupo de tratamiento G2). Los tratamientos comenzaron cuando el volumen del tumor era de 80-100 mm3 (el día 11). La administración de BO-112 y del vehículo se realizó por vía intratumoral mediante una única inyección directa en la masa tumoral del flanco derecho (dosis/ratón: 2,5 mg/Kg en 100 j l) en el día indicado. En los ratones restantes que estaban libres de tumores tras el tratamiento con BO-112, se realizó una nueva provocación en el día 60 utilizando células MC38 (2,5 *105 células) que se inyectaron s.c. en el flanco izquierdo, siguiendo el crecimiento del tumor y la supervivencia del ratón. (B) La supervivencia de los ratones en este segundo modelo también se evaluó mediante un análisis de Kaplan-Meier, con los cuatro animales que fueron reintroducidos en el día 60 y que seguían vivos en el día 80, lo que sugiere que BO-112 puede tanto desencadenar la apoptosis de las células cancerosas como impulsar la memoria inmunitaria contra ellas.
Figura 12: Efecto terapéutico del BO-112 en modelos de activación de la respuesta inmune adaptativa en cánceres humanos. (A) El modelo con base en MC38 para el carcinoma de colon humano se establece como se ha descrito anteriormente, pero integrando dos grupos más en los que también se administra un anticuerpo para agotar las células T positivas para CD4 o positivas para CD8 (esquema de tratamiento: BO112: d8, d11, d15, d18, d22, d25; anti-CD4 o anti-CD8: d7, d8, d11, d15, d22, d29,). (B). Análisis de las curvas de crecimiento tumoral de los ratones portadores de tumores MC38 tratados con BO-112, mostrando que sólo el agotamiento de las células T positivas para CD8 disminuye las propiedades terapéuticas de la formulación de BO-112 (el volumen tumoral se muestra en paralelo para los diferentes grupos, N para el número de ratones por grupo y con una línea punteada que indica el final del tratamiento con BO-112 en el d25). (C) Efecto de la terapia con BO-112 en el reclutamiento y activación de células T en el tumor, y en el cebado de células T CD8+ específicas de antígeno. La frecuencia de los diferentes marcadores celulares de los subconjuntos de células T (positivos para CD8 o positivos para CD4) y de la activación de las células T (CD137, IFN-y y PD-1) se mide en los tumores B16-F10-OVA (y en los ganglios linfáticos de drenaje para el análisis de los tetrámeros) de los ratones tratados con el vehículo o la formulación de BO-112 24 horas después de la segunda administración de BO-112 mediante citometría de flujo. Los gráficos muestran que la terapia con BO-112 aumenta significativamente las células T CD8+ y promueve la activación de las células T CD4+ y CD8+ en el infiltrado tumoral en este modelo. (D) Frecuencia de diferentes marcadores celulares para subconjuntos de células T (positivos para CD8 o positivos para CD4) para el cebado de células T (OVA y tetrámeros de Trp2), mostrando que BO-112 también aumenta significativamente la frecuencia de células T CD8+ específicas para el antígeno en el tumor (contra el OVA y los antígenos endógenos de Trp2) y en el ganglio linfático de drenaje (particularmente para el antígeno Trp2) con una significativa. Todos los datos (incluso los procedentes de diferentes experimentos) indican de forma consistente que la formulación de BO-112 activa la respuesta inmunitaria adaptativa antitumoral con el potencial de inducir una inmunidad sistémica.
Figura 13: Efecto terapéutico de BO-112 en modelos para evaluar la dependencia de la expresión de interferones en cánceres humanos. (A) La citotoxicidad de las células tumorales in vitro, independiente de los IFN, se evalúa en términos de viabilidad celular a las 24, 48 y 72h mediante el ensayo MTS. Brevemente, las células de cada línea celular: Se cultivaron B16, B16-IFN a/p (no responden al IFNy; de InvivoGen) y B16-IFNy (no responden al
IFNa/p; de InvivoGen) (5*103 células/pocillo, 96 placas de pocilio plano): solas o con BO-112 a 05 |jg/ml durante 24, 48 y 72 horas solo o alternativamente con b O-112 (0,5 jg/ml), o con un agonista de STING 2'3'cGAMP (7 jg /ml) durante 24 horas (mostrando la superioridad de BO-112 en eficacia a un agonista de STING de referencia). Se realizaron dos ensayos independientes, con al menos 8 pocillos por condición. El efecto terapéutico in vivo de BO-112 en el modelo de melanoma humano basado en IFNs resistentes se probó en las células cancerosas B16-IFN a/p (B) y B16-IFNy (C) descritas anteriormente, que se inyectaron s.c. en el flanco RIGHT (5 *105 células) de ratones C57BL/6 hembra de 8 a 10 semanas (7-10 ratones/grupo). Los tratamientos comenzaron cuando el volumen del tumor era de 80-100 mm3 (el día 8). La administración de BO-112 y del vehículo se realizó por vía intratumoral mediante una única inyección directa en la masa tumoral del flanco RIGHT (dosis de BO-112/ratón: 2,5 mg/Kg en 100 jl; 2 dosis/semana, 3 semanas). Los tumores se midieron con un calibrador semanalmente hasta su sacrificio y se calculó su volumen. Los gráficos muestran que BO-112 reduce el volumen del tumor (gráficos individuales de araña) y mejora significativamente la supervivencia (curvas de Kaplan-Meier) en los ratones tratados con BO-112 en comparación con el vehículo, lo que indica que la formulación de BO-112 tiene un potente efecto terapéutico en las células cancerosas resistentes a los IFNs.
Figura 14: Medios y regímenes alternativos para la administración del BO-11X. (A) la administración de una formulación de BO-11X como BO-112 puede comenzar con 1-4 dosis de inyecciones intratumorales (BO-11XI.T.) que se va a realizar cada semana, cada dos semanas, o cada tres semanas (0,4-2,4 mg/dosis; o con un intervalo mayor de hasta cada 6 semanas, como puede hacerse en pacientes respondedores o estables durante los estudios clínicos). Las dosis iniciales pueden ir seguidas de varias inyecciones subcutáneas o intramusculares de BO-11X (BO-11XSQ/I.M.; dosis de 0,2-2mg). Como en el caso de otros tratamientos intratumorales, este régimen puede implicar la inyección de la misma lesión (si todavía está presente) o de otra lesión si la lesión original ya no está presente o si las inyecciones intratumorales iniciales no han reducido dichas lesiones (a través de la activación inmune sistémica u otra respuesta) u otras evidencias de carga tumoral, estadio, persistencia, metástasis y/o recurrencia. (B) Alternativamente, la administración de BO-112 puede seguirse mediante inyecciones intratumorales espaciadas progresivamente (cada semana, cada dos, cuatro, seis o más semanas) durante 20 o semanas, alternando la administración de I.T. en la misma (diamantes negros) y en otras lesiones cancerosas (diamantes grises), con o sin la administración en paralelo de tratamientos como quimioterapia, radioterapia, molécula pequeña, inhibidor de puntos de control, anticuerpo (triángulos, administrados una vez cada 2 semanas o una vez cada 3 semanas como ejemplos) en otros regímenes y/o administraciones que se inician antes o después del tratamiento con BO-11X. En el primer caso, el régimen inicial de monoterapia A de BO-11X puede combinarse (por ejemplo, con pembrolizumab o ipilimumab) o el régimen de monoterapia B de BO-11X puede combinarse (por ejemplo, con nivolumab) para rescatar o apoyar el tratamiento de este segundo agente terapéutico que de otro modo sería poco (o nada) eficaz. En este último caso, el régimen A de monoterapia con BO-11X o el régimen B de monoterapia inicial con BO-11X (cada uno de los dos regímenes combinados con los anticuerpos citados anteriormente) permite sensibilizar al tumor (o al paciente) al agente terapéutico adicional (en particular, una inmunoterapia). (C) Como adyuvante para ser utilizado ex vivo en células obtenidas de pacientes (como un adyuvante de vacunas para la maduración ex vivo de células dendríticas, DCs), el tratamiento puede comenzar obteniendo una muestra de sangre de un paciente para aislar los tipos celulares relevantes mediante citaféresis, un procedimiento para separar las células mediante selección positiva y clasificación celular, como un subconjunto de células dendríticas (DCs), por ejemplo, células dendríticas derivadas de monocitos (Mo-DCs), positivo para BDCA3 y otros subconjuntos de células dendríticas que son los principales productores de interferón de tipo I en respuesta a estímulos tales como moléculas de poli(I-C), o células dendríticas derivadas de CD34+. A continuación, estas células pueden expandirse y/o madurar ex vivo durante un número determinado de días, durante los cuales las células se exponen a las formulaciones de BO-112 durante un número variable de horas (por ejemplo, 1 hora, 3 horas, 8 horas, 24 horas o más), y luego se utilizan para la carga de antígenos para completar la preparación de una vacunación con base en las DC. Dicha activación de las DC también puede seguirse y completarse (o lograrse directamente) mediante la inyección intramuscular o subcutánea de b O-112, la inducción de la muerte celular inmunogénica en los tumores mediante la inyección intratumoral de BO-112, y/o mediante la administración in vivo de antígenos tumorales.
Figura 15: Medios alternativos para evaluar y utilizar el BO-11X en los pacientes. (A) Diagrama de flujo que resume las lecturas médicamente relevantes para evaluar la administración de una formulación de BO-11X como el BO-112. El seguimiento de las condiciones médicas puede realizarse mediante, por ejemplo, un examen físico y técnicas de imagen para identificar y medir la carga tumoral, y/o monitorizar los biomarcadores específicos del cáncer en sangre para evaluar la respuesta al tratamiento, o la recurrencia. A cada uno de los tres criterios principales de evaluación (es decir, los recuadros de la parte inferior del diagrama de flujo) se pueden asociar una serie de subcriterios que implican la evaluación de parámetros específicos en el tejido tumoral obtenido mediante biopsia y/o en muestras de sangre, incluyendo la modificación de la expresión y/o la respuesta a las citocinas (tal como los interferones o las interleucinas, individualmente o en combinaciones específicas, véase el Ejemplo 4) o las células inmunitarias circulantes/infiltradas. (B) Diagrama de flujo que resume las oportunidades terapéuticas que están disponibles tras (pero posiblemente iniciadas incluso antes o simultáneamente con) la administración de una formulación de BO-11X tal como BO-112, que incluye las lecturas definidas en el diagrama de flujo anterior y lecturas adicionales (tal como las procedentes del análisis de la expresión génica, la expresión proteica, el estado de la carga mutacional o la capacidad de clonación de células T en células o tejidos específicos antes y después de la administración de BO-112). Este análisis proporciona firmas moleculares inducidas por BO-112 que pueden indicar la continuación con el mismo régimen de tratamiento con BO-11X o con otro tipo de seguimiento médico, incluyendo la posibilidad de utilizar tratamientos (por ejemplo, radioterapia, quimioterapia,
terapia anti-PD-1 u otra terapia inmunomoduladora, vacunación contra el cáncer, terapias con base en células, etc.) contra los que se identificó que el tumor del paciente respondía mal, era resistente o insensible antes de la administración de una formulación de BO-11X (es decir, los recuadros de la parte inferior del diagrama de flujo).
Figura 16: Datos clínicos generados en las lesiones metastásicas de un paciente. Una mujer de 46 años con leiomiosarcoma metastásico desarrolló una enfermedad progresiva tras recibir varias líneas de tratamiento (quimioterapia y combinación anti PD-1/anti LAG-3, en particular). Tenía una lesión de cáncer en la pared abdominal que era adecuada para la inyección y, con el consentimiento informado, recibió inyecciones intratumorales de BO-112. Después de tres dosis de 0,6 mg de BO-112, la paciente no recibió más tratamiento sistémico y sólo recibió radiación paliativa en una metástasis femoral (ósea). (A) Las flechas indican las lesiones relevantes, mostrando el aumento de los signos radiológicos de necrosis tumoral, tal y como se estableció en 4 localizaciones diferentes mediante el análisis de imágenes (columna de la izquierda) que se repitió en posiciones similares 3 meses después (columna de la derecha), mostrando una mejora tanto en las lesiones inyectadas con BO-112 como en las no inyectadas. (B) Antes y después del tratamiento con BO-112, se evaluaron las poblaciones de células inmunitarias circulantes (definidas con base en los marcadores de superficie celular específicos o combinados, tal como CD4, CD8 o CD8) en la sangre periférica de este paciente, lo que indica que (tras una reducción inicial) el tratamiento con BO-112 puede aumentar la cantidad de subpoblaciones celulares específicas en la circulación, en particular las células NK y las células positivas para CD16.
Figura 17: Datos clínicos generados en una paciente de 72 años que presenta un melanoma metastásico (estadio IV) con enfermedad progresiva. Anteriormente se sometió a múltiples cirugías, incluyendo la amputación de la falange y linfadenectomías inguinales, así como a radioterapia. El tratamiento sistémico previo incluía interferón, después de los tratamientos con pembrolizumab y fotemustina. Fue evaluada con una lesión en la región inguinal que medía 9 cm y que era adecuada para la inyección intratumoral. Con el consentimiento informado, la lesión inguinal fue inyectada bajo guía ecográfica con una dosis única de 0,6 mg de BO-112 y seguida de un análisis de formación de imágenes que se repitió en posición similar en las semanas siguientes. Una semana después de la administración de esta dosis única, el tamaño de la lesión objetivo había disminuido a 8 cm. A continuación, la paciente fue tratada con ipilimumab (anticuerpo antiCTLA4, 3mg/kg cada 3 semanas durante 4 ciclos), lo que dio lugar a una nueva mejora de las lesiones cancerosas.
DESCRIPCIÓN DETALLADA
La invención se define en las reivindicaciones adjuntas. Cualquier objeto que quede fuera del alcance de las reivindicaciones se proporciona únicamente a título informativo.
Se divulgan en el presente documento composiciones, incluyendo las definidas en las reivindicaciones de composición del documento PCT/EP2016/078078definidas en la misma como BO-11X, y ejemplificadas en los Ejemplos 1 y 2 de la misma, en los que X es un número entero. Un grupo de características de la composición de BO-11X divulgada en el documento PCT/EP2016/078078 está comprendido en una composición de BO-112. En particular, la composición de BO-112 puede definirse aún más mediante la combinación de características específicas que se aplican a las partículas que están comprendidas en la composición de BO-112 o a las características fisicoquímicas que están asociadas a la composición acuosa.
Una composición preferida de BO-112 es una composición acuosa que comprende partículas en las que:
(i) cada una de dichas partículas comprende un complejo de
(a) ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)], o una sal o un solvato del mismo, en el que al menos 40 % de las moléculas de poli(I:C) comprendidas en dichas partículas tienen al menos 850 pares de bases, y al menos 50 % de las moléculas de poli(I:C) comprendidas en dichas partículas tienen entre 400 y 5000 pares de bases; y
(b) la homo-polialquilenimina o la hetero-polialquilenimina lineales, solubles en agua, o una sal y/o un solvato de las mismas, en las que el peso molecular promedio de dicha polialquilenimina lineal está comprendido entre 17 y 23 kDa;
(ii) al menos 90 % de dichas partículas tiene una distribución de diámetro monomodal inferior a 300 nm;
(iii) dichas partículas tienen un diámetro promedio z inferior o igual a 200 nm, medido de acuerdo con la norma ISO 22412:2017, con un índice de polidispersidad de dicho diámetro de partícula inferior a 1,5;
(iv) dicha composición contiene ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] en una concentración de al menos 0,5 mg/ml;
(v) dicha composición tiene: un pH entre 2 y 4; y
(vi) dicha composición tiene un potencial zeta entre 35 mV y 50 mV, de acuerdo con la norma ISO 13099-2:2012.
En una realización preferida, una composición de BO-112 es una composición de acuerdo con lo anterior, en la que al menos 90 % de dichas partículas tienen una distribución de diámetro monomodal entre 30 nm y 150 nm.
En una realización aún más preferida, una composición de BO-112 es una composición de acuerdo con lo anterior, en la que dicha composición tiene un potencial zeta comprendido entre 38 y 45 mV.
En una realización aún más preferida, una composición de BO-112 es una composición de acuerdo con lo anterior, en la que dicha polialquilenimina lineal es una polietilenimina lineal.
En otra realización preferida de lo anterior, una composición de BO-112 es una composición de acuerdo con lo anterior, en la que el ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] contiene entre 5 % y 60 % de polirribonucleótidos de doble cadena que tienen menos de 400 pares de bases, entre 15 % y 30 % de polirribonucleótidos de doble cadena que tienen entre 400 y 850 bases, entre 10 % y 70 % de polirribonucleótidos de doble cadena que tienen entre 850 y 5000 pares de bases, y entre 0 % y 10 % de polirribonucleótidos de doble cadena que tienen más de 5000 pares de bases.
En una realización aún más preferida, una composición de BO-112 es una composición de acuerdo con lo anterior, en la que dicha composición comprende además al menos un portador farmacéuticamente aceptable, un disolvente orgánico, un excipiente y/o un adyuvante.
En una realización aún más preferida, una composición de BO-112 es una composición de acuerdo con lo anterior, en la que dicha composición comprende además al menos un compuesto seleccionado entre un compuesto orgánico, un compuesto inorgánico, un ácido nucleico, un aptámero, un péptido o una proteína.
En una realización aún más preferida, una composición de BO-112 es una composición de acuerdo con lo anterior, en la que dicha composición comprende además glucosa o manitol en una concentración de entre 1 y 10 % (peso/volumen).
En una realización aún más preferida, una composición de BO-112 es una composición de acuerdo con lo anterior, en la que dicha composición es una composición acuosa que tiene una osmolalidad de entre 200 y 600 mOsm/kg. En una realización adicional mucho más preferida, una composición de BO-112 es una composición de acuerdo con lo anterior, en la que:
(i) cada una de dichas partículas está formada por un complejo de al menos un polirribonucleótido de doble cadena, o una sal o un solvato del mismo, y al menos una polialquilenimina lineal, o una sal y/o un solvato del mismo, en el que dicho polirribonucleótido de doble cadena es ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] y el peso molecular medio de dicha polialquilenimina lineal está entre 17 y 23 kDa;
(ii) al menos 90 % de dichas partículas tiene una distribución de diámetro monomodal inferior a 300 nm;
(iii) dichas partículas tienen un diámetro promedio z inferior o igual a 200 nm, medido de acuerdo con la norma ISO 22412:2017;
(iv) dicha composición contiene ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] en una concentración de al menos 0,5 mg/ml;
(v) dicha composición tiene: un pH entre 2 y 4; y
(vi) dicha composición tiene un potencial zeta igual o superior a 30 mV, de acuerdo con la norma ISO 13099; en la que dichas partículas se forman con una relación entre el número de moles de nitrógeno de dicha polialquilenimina y el número de moles de fósforo de dicho polirribonucleótido de doble cadena en dicha composición que es igual o superior a 2,5.
En una realización preferida de la realización aún más preferida, una composición de BO-112 es una composición de acuerdo con lo anterior, en la que dicho ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] se forma por fusión:
(i) una preparación de ácido polinosínico [poli(I)] que contenga entre 80 % y 99 % de moléculas con menos de 400 bases, entre 0 % y 20 % de moléculas con entre 400 y 850 bases, entre 0 % y 5 % de moléculas con entre 850 y 5000 bases, y entre 0 % y 5 % de moléculas con más de 5000 bases; y
(ii) una preparación de ácido policidílico [poli(C)] que contiene entre el 20 % y el 85 % de moléculas que tienen menos de 400 bases, entre 10 % y 40 % de moléculas que tienen entre 400 y 850 bases, entre 0 % y 50 % de moléculas que tienen entre 850 y 5000 bases, y entre 0 % y 5 % de moléculas que tienen más de 5000 bases. En una realización más preferida de la realización aún más preferida y preferida de la misma, una composición de BO-112 es una composición de acuerdo con lo anterior, en la que dicha composición se forma añadiendo adicionalmente glucosa o manitol en una concentración de entre 1 y 10 % (peso/volumen total de dicha composición).
En una realización más preferida de lo anterior, dicho ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] se forma por fusión:
(i) una preparación de ácido policidílico [poli(C)] que contenga entre 20 y 82 % de moléculas que tienen menos de 400 bases, entre 15 y 40 % que tienen 400-850 bases, entre 3 y 50 % que tienen 850-5000 bases y menos del 1 % de moléculas que tienen más de 5000 bases; y
(ii) una preparación de ácido polinosínico [poli(I)] que contiene entre 80 y 99 % de moléculas que tienen menos de 400 bases, entre 1 y 20 % de moléculas que tienen 400-850 bases, entre 0 y 5 % de moléculas que tienen 850-5000 bases y menos del 1 % de moléculas que tienen más de 5000 bases.
Más preferentemente, el ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] se forma por fusión:
(i) una preparación de ácido policidílico [poli(C)] que contiene entre 33 % y 73 % de moléculas que tienen menos de 400 bases, entre 20 y 37 % de moléculas que tienen 400-850 bases, entre 5 y 48 % de moléculas que tienen 850-5000 bases y menos del 1 % de moléculas que tienen más de 5000 bases; y
(ii) una preparación de ácido polinosínico [poli(I)] que contiene entre 81 y 98 % de moléculas que tienen menos de 400 bases, entre 6 y 17 % de moléculas que tienen 400-850 bases, entre 0 y 3 % de moléculas que tienen 850-5000 bases y menos del 1 % de moléculas que tienen más de 5000 bases.
En una realización aún más preferida de lo anterior, las composiciones BO-11X y BO-112 comprenden moléculas de poli(I:C) que tienen una distribución de tamaño por la que dicho poli(I:C) contiene entre 7 y 57 % de moléculas que tienen menos de 400 bases, entre 20 y 45 % de moléculas que tienen 400-850 bases, entre 20 y el 70 % de moléculas que tienen 850-5000 bases, y entre 0 y 9 % de moléculas que tienen más de 5000 bases. Más preferentemente, las composiciones BO-11X y BO-112 comprenden moléculas de poli(I:C) que tienen una distribución de tamaños en la que dicho poli(I:C) contiene entre 10 y 30 % de moléculas que tienen menos de 400 bases, entre 20 y 30 % de moléculas que tienen 400-850 bases, entre 40 y el 60 % de moléculas que tienen 850-5000 bases, y entre 0 y 5 % de moléculas que tienen más de 5000 bases. Aún más preferentemente, las composiciones BO-11X y BO-112 comprenden moléculas de poli(I:C) que tienen una distribución de tamaños en la que dicho poli(I:C) contiene entre 11 y 28 % de moléculas que tienen menos de 400 bases, entre 23 y 27 % de moléculas que tienen 400-850 bases, entre 42 y 55 % de moléculas que tienen 850-5000 bases, y entre 0 y 3 % de moléculas que tienen más de 5000 bases.
Una composición de BO-112 es también una composición obtenible por liofilización de la composición acuosa según cualquiera de las realizaciones anteriores. Estas composiciones liofilizadas de BO-112 pueden ser reconstituidas usando soluciones apropiadas para proporcionar formulaciones que presenten una o más de las características definidas anteriormente, en particular las composiciones que comprenden partículas en las que:
(i) cada una de dichas partículas comprende un complejo de al menos un polirribonucleótido de doble cadena, o una sal o un solvato del mismo, y al menos una polialquilenimina, o una sal y/o un solvato del mismo;
(ii) al menos 95 %, o al menos 90 %, de dichas partículas tiene un diámetro inferior o igual a 900 nm, preferentemente, inferior o igual a 500 nm (por ejemplo, entre 140 y 400 nm o entre 140 y 250 nm); y
(iii) dichas partículas tienen un diámetro medio z inferior o igual a 300 nm, preferentemente inferior o igual a 200 nm, más preferentemente inferior o igual a 150 nm, en particular, medido según la norma ISO 22412:2017.
Además, la presente divulgación también se refiere a una formulación obtenible tratando una célula o tejido de un sujeto ex vivo con una composición de BO-11x, preferentemente una composición de BO-112, como se define en el presente documento. Preferentemente, dicha formulación comprende una célula o tejido de un sujeto que ha sido tratado ex vivo con una composición como la que se divulga en el presente documento. Más preferentemente, dicha célula o tejido es una célula o tejido de una muestra de un sujeto, como una muestra de sangre, una muestra linfática o una biopsia de tejido. También se proporcionan medios para generar una solución acuosa de moléculas de poli(I:C) (que ya contienen o no un excipiente como la glucosa o el manitol) y tienen características adecuadas para ser mezcladas con una solución acuosa de una polialquilenimina (como la polietilenimina) para producir las formulaciones de BO-11X. La formulación que contiene poli(I:C) resultante de la mezcla de estas dos soluciones acuosas se mantiene entonces como una preparación por lotes (preferentemente todavía como solución acuosa o en forma liofilizada) o puede prepararse directamente en alícuotas, cada una de ellas contenida en viales de un solo uso, jeringas u otro recipiente apropiado para su almacenamiento, uso único de dichas alícuotas y/o liofilización. Las formulaciones de BO-11X (en forma líquida o liofilizada) pueden almacenarse a temperatura ambiente, a una temperatura comprendida entre 8 °C y 2 °C, o a una temperatura inferior a 0 °C o inferior a -20 °C.
Otros compuestos (como uno o más anticuerpos, hormonas, péptidos, excipientes, portadores, inhibidores de una actividad enzimática, agentes quimioterapéuticos, antibióticos, agentes estabilizadores, agentes de etiquetado, disolventes orgánicos, conservantes, portadores, u otro fármaco) puede añadirse en cada una de las dos soluciones acuosas (si no altera la correcta formación de las partículas o cualquier otra de las características enumeradas anteriormente para las formulaciones de BO-11X) antes de su mezcla o después de que se haya producido la formulación de BO-11X mezclando las dos soluciones acuosas (de polirribonucleótido de doble cadena y de polialquilenimina). Dichos componentes adicionales que se administran al mismo tiempo con los componentes del BO-11X pueden proporcionar una composición con mejoras en la biodisponibilidad, la eficacia, los perfiles farmacocinéticos/farmacodinámicos, la estabilidad, la metabolización u otras propiedades de interés farmacéutico que no se observan cuando cada una de las formulaciones iniciales del BO-11X o el componente adicional (otro compuesto de interés farmacéutico, por ejemplo) se administran solos, o cada una de las formulaciones iniciales del BO-11X o el componente adicional se administran por separado.
La formulación de BO-11X divulgada es para uso como medicamento, tal como una composición farmacéutica que se
formula (por ejemplo como una composición acuosa inyectable, que comprende opcionalmente un portador, excipiente y/o adyuvante farmacéuticamente aceptable) y administrada para la entrega de polirribonucleótidos de doble cadena a un órgano o un tejido en un estado sano, que presenta una enfermedad relacionada con un agente patógeno exógeno (como una bacteria o un virus) o que presente una alteración debida a un trastorno del crecimiento celular caracterizado por un crecimiento anormal de las células humanas o animales, por ejemplo, debido a un cáncer (es decir, que implique una transformación tumorogénica, una metástasis, un compuesto tóxico), o un trastorno ginecológico caracterizado por un crecimiento anormal de las células de los órganos reproductores de los mamíferos femeninos. Así, la presente divulgación se refiere a una composición como la definida anteriormente para su uso como medicamento en el tratamiento del cáncer que comprende la administración de la composición de la presente divulgación a un ser humano o animal.
Preferentemente, la formulación de BO-11X se utiliza para inducir (directa o indirectamente) la muerte de la célula tumoral o suprimir el crecimiento de la célula tumoral, en el ámbito del tratamiento, la reducción, la mejora o la prevención del crecimiento del cáncer, la supervivencia, la metástasis, la transición epitelial-mesenquimal, el escape inmunológico o la recurrencia. Más preferentemente, las formulaciones de BO-11X se utilizan para tratar tumores sólidos, como carcinomas, gliomas, melanomas o sarcomas. En particular, la formulación de BO-11X se administra dentro o en un lugar cercano al tumor, como en el margen de la masa tumoral, en las células epiteliales circundantes, en los vasos linfáticos o sanguíneos (es decir, por inyección intratumoral). La presente divulgación se refiere a una composición de BO-112 como se define en lo anterior, para su uso como medicamento para el tratamiento del cáncer. Otra realización preferida de la presente divulgación se refiere a una composición de BO-112 para su uso, como se define en lo anterior, en la que dicho medicamento es una composición acuosa inyectable, que opcionalmente comprende un portador, excipiente y/o adyuvante farmacéuticamente aceptable.
Una forma de realización más preferida de la mencionada forma de realización se refiere a la composición de BO-112 para su uso según lo anterior, en la que la composición es para su uso en inyección intratumoral. Alternativamente, una forma de realización más preferida de la forma de realización mencionada y preferida de la misma se refiere a la composición de BO-112 para su uso según lo anterior, en la que la composición es para su uso para la inyección a nivel de la piel o de un órgano o tejido interno.
Otra divulgación se refiere a una composición de BO-11X, preferentemente una composición de BO-112, para su uso como vacuna, como se define en lo anterior. Preferentemente dicha composición de BO-11X o BO-112 es para su uso como vacuna en el tratamiento de un trastorno del crecimiento celular caracterizado por el crecimiento anormal de células humanas o animales, más preferentemente en el tratamiento del cáncer. Alternativamente, y no según la invención, dicha composición de BO-11X o BO-112 es para su uso como vacuna relacionada con la infección.
En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se produce de acuerdo con los procedimientos de fabricación, y luego se define estructural y funcionalmente, como se describe en los Ejemplos como formulaciones de BO-112. La formulación de BO-11X puede presentar además las actividades biológicas que se caracterizaron para BO-110 como se describe en WO2011003883, a saber, la activación de una familia de helicasas MDA-5 o el nivel de expresión de NOXA, en combinación con la inducción de la autofagia en células cancerosas o en una línea celular derivada de células cancerosas, preferentemente de origen humano, aunque en un grado mejorado. Independientemente del procedimiento de caracterización de las propiedades y el mecanismo de acción de BO-110 que se describe en WO2011003883los ejemplos de líneas celulares para validar las formulaciones de BO-11X son las células humanas SK-Mel-19, SK-Mel-28, SK-Mel-103 y SK-Mel-147, y las células murinas B16, dichas líneas celulares de melanoma presentan un aumento de la expresión de moléculas como el interferón beta cuando se exponen a una formulación de BO-11X. Además, la formulación de BO-11X no presenta toxicidad a las dosis que promueven la muerte de las células tumorales en las líneas de células cancerosas frente a las células normales que se utilizan como control, como los melanocitos u otras células de la piel, así como las células del sistema inmunitario, que suelen representar lugares de toxicidad secundaria en el tratamiento del cáncer. La formulación de BO-11X puede también, tras la autofagia y la apoptosis de las células cancerosas (o cualquier otro efecto de interés terapéutico que esta formulación pueda inducir en dichas células), inducir la liberación de antígenos de las células cancerosas que pueden actuar como inductores de una respuesta inmunológica específica del tumor, en particular cuando la formulación de BO-11X se administra localmente a las células o tumores cancerosos (por ejemplo, mediante inyección peritumoral o intratumoral, administrando BO-11X en el margen de la masa tumoral, en las células epiteliales circundantes, en los vasos linfáticos o sanguíneos, o directamente dentro de la masa tumoral), con o sin la administración simultánea o secuencial de otro fármaco u otro tratamiento para la misma indicación.
La formulación de BO-11X puede, tras la administración en un lugar distante o independiente de la masa tumoral (por ejemplo, por inyección intramuscular o subcutánea, o por administración ex vivo a células obtenidas del paciente y luego reinyectadas) proporcionar un efecto de interés terapéutico al dirigirse también a células distintas de las cancerosas (incluidas las células inmunitarias u otras células en la circulación sanguínea o situadas cerca del cáncer). Dicho efecto puede deberse a la inducción de la liberación de un efector específico del tumor, o a la migración de las células hacia las células cancerosas o dentro de los tumores, incluso cuando la inyección peritumoral o intratumoral no es posible (tal como en los tumores no sólidos, tal como la leucemia u otro cáncer hematológico).
Se divulga también un procedimiento para fabricar la composición, como se divulga en el presente documento, que comprende:
(i) preparar una solución acuosa de al menos un polirribonudeótido bicatenario, o una sal o un solvato del mismo, y una solución acuosa de al menos una polialquilenimina, o una sal o un solvato del mismo, en el que una o ambas soluciones comprenden opcionalmente un portador, un disolvente orgánico, un excipiente y/o un adyuvante farmacéuticamente aceptables;
(ii) filtrar independientemente cada solución a través de un filtro con un diámetro de poro inferior o igual a 500 nm para formar soluciones esterilizadas;
(iii) mezclar las soluciones esterilizadas resultantes en una cámara de mezcla para formar una composición acuosa mediante la adición de una de dichas soluciones a la otra solución en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a una velocidad mayor o igual a 1 ml/min, o mediante la adición simultánea de cada una de dichas soluciones en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a una velocidad mayor o igual a 1ml/min; y opcionalmente
(iv) filtrar la composición acuosa resultante a través de un filtro con un diámetro de poro inferior o igual a 600 nm para formar un filtrado, o centrifugar la composición acuosa resultante a una velocidad superior o igual a 22480 m/s2 para formar un sobrenadante; y, opcionalmente
(v) liofilizar la composición acuosa, el filtrado o el sobrenadante resultantes.
Así, un procedimiento para fabricar la composición, como se divulga en el presente documento, puede comprender:
(i) preparar una solución acuosa de al menos un polirribonucleótido bicatenario, o una sal o un solvato del mismo, y una solución acuosa de al menos una polialquilenimina, o una sal o un solvato del mismo, en el que una o ambas soluciones comprenden opcionalmente un portador, un disolvente orgánico, un excipiente y/o un adyuvante farmacéuticamente aceptables;
(ii) filtrar independientemente cada solución a través de un filtro con un diámetro de poro inferior o igual a 500 nm para formar soluciones esterilizadas; y
(iii) mezclar las soluciones esterilizadas resultantes en una cámara de mezcla para formar una composición acuosa mediante la adición de una de dichas soluciones a la otra solución en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a una velocidad mayor o igual a 1 ml/min, o mediante la adición simultánea de cada una de dichas soluciones en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a una velocidad mayor o igual a 1ml/min; y
(iv) opcionalmente, liofilizar la composición acuosa resultante.
Además, un procedimiento para fabricar la composición, como se divulga en el presente documento, puede comprender:
(i) preparar una solución acuosa de al menos un polirribonucleótido bicatenario, o una sal o un solvato del mismo, y una solución acuosa de al menos una polialquilenimina, o una sal o un solvato del mismo, en el que una o ambas soluciones comprenden opcionalmente un portador, un disolvente orgánico, un excipiente y/o un adyuvante farmacéuticamente aceptables;
(ii) filtrar independientemente cada solución a través de un filtro con un diámetro de poro inferior o igual a 500 nm para formar soluciones esterilizadas;
(iii) mezclar las soluciones esterilizadas resultantes en una cámara de mezcla para formar una composición acuosa mediante la adición de una de dichas soluciones a la otra solución en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a una velocidad mayor o igual a 1 ml/min, o mediante la adición simultánea de cada una de dichas soluciones en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a una velocidad mayor o igual a 1ml/min; y
(iv) filtrar la composición acuosa resultante a través de un filtro con un diámetro de poro inferior o igual a 600 nm para formar un filtrado, o centrifugar la composición acuosa resultante a una velocidad superior o igual a 22480 m/s2 para formar un sobrenadante; y
(v) opcionalmente, liofilizar el filtrado o sobrenadante resultante.
Más preferentemente, el procedimiento no comprende una etapa final de liofilización. En el procedimiento, dicho polirribonucleótido de doble cadena, dicha polialquilenimina y dicho portador farmacéuticamente aceptable, disolvente orgánico, excipiente y/o adyuvante son como se divulga en el presente documento. La esterilización de cada solución para formar soluciones esterilizadas tiene lugar filtrando independientemente dichas soluciones a través de un filtro que tiene un diámetro de poro menor o igual a 500 nm, preferentemente filtrando independientemente dichas soluciones a través de un filtro que tiene un diámetro de poro menor o igual a 300 nm, más preferentemente filtrando dichas soluciones a través de un filtro que tiene un diámetro de poro menor o igual a 200 nm.
Preferentemente, la mezcla de los filtrados resultantes tiene lugar mediante el transporte convectivo a gran escala de remolinos y, posteriormente, mediante la eliminación de las diferencias de concentración a través del transporte puramente difusivo. La cámara de mezclado puede ser cualquier cámara o recipiente en el que se inicie el mezclado de dichas soluciones, como un matraz, reactor o mezclador, y que tenga cualquier forma adecuada (como cilindrica, esférica u otra que permita el correcto mezclado dentro de la cámara) en la que el mezclado se realice de forma
controlada dentro de un espacio confinado. Más preferentemente, dicha cámara de mezcla tiene un volumen fijo de entre 0,1 y 20 ml (o incluso volúmenes más grandes como 25, 50, 100 ml o más, lo que permite el rendimiento continuo y mayor del producto, especialmente en condiciones GMP), además preferentemente entre 0,2 y 10 ml, mucho más preferentemente entre 0,5 y 8 ml. Más preferentemente, la mezcla tiene lugar por adición, opcionalmente por inyección, a una velocidad de entre 1 ml/min y 2000 ml/min, aún más preferentemente a entre 10 y 1000 ml/min, además preferentemente a entre 20 y 500 ml/min. El filtrado opcional de la composición acuosa resultante para formar o recoger un filtrado puede realizarse posteriormente a través de un filtro que tenga un diámetro de poro inferior o igual a 600 nm, preferentemente que no supere el diámetro de 500 nm, más preferentemente que no supere el diámetro de 400 nm, y aún más preferentemente que no supere el diámetro de 300 nm. Alternativamente, la centrifugación opcional de la composición acuosa resultante para formar o recoger un sobrenadante puede realizarse posteriormente a más de 22480 m/s2 (5000 rpm en un rotor con un radio de 0.082 m), preferentemente a más de 27202 m/s2 (5500 rpm en un rotor con un radio de 0,082 m), más preferentemente a más de 32372 m/s2 (6000 rpm en un rotor con un radio de 0,082 m), y aún más preferentemente 44062 m/s2 (7000 rpm en un rotor con un radio de 0,082 m). El paso (iv) puede ser obligatorio cuando la composición de la presente divulgación no se consigue mediante los pasos (i) a (iii) del procedimiento, es decir, cuando la adición se realiza a un ritmo tal que menos del 95 % de las partículas comprendidas en dicha composición acuosa tiene un diámetro inferior o igual a 600 nm; y/o dichas partículas tienen un diámetro medio z superior a 200 nm, más preferentemente cuando dichas partículas no tienen una distribución de diámetro monomodal. Este puede ser el caso cuando la adición se realiza a una velocidad de entre 1 ml/min y 20 ml/min, particularmente en una cámara de mezcla (reacción) de entre 0,5 y 20 ml. Por último, la composición acuosa, el filtrado o el sobrenadante resultantes pueden someterse a una liofilización para obtener la composición en forma de partículas sólidas.
Así, en una divulgación especialmente preferida del procedimiento, dicho procedimiento comprende
(i) preparar una solución acuosa de al menos un polirribonucleótido bicatenario, o una sal o un solvato del mismo, y una solución acuosa de al menos una polialquilenimina, o una sal o un solvato del mismo, en el que una o ambas soluciones comprenden opcionalmente un portador, un disolvente orgánico, un excipiente y/o un adyuvante farmacéuticamente aceptables;
(ii) filtrar independientemente cada solución a través de un filtro con un diámetro de poro inferior o igual a 200 nm para formar soluciones esterilizadas;
(iii) mezclar las soluciones esterilizadas resultantes en una cámara de mezcla para formar una composición acuosa mediante la adición de una de dichas soluciones a la otra solución en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a una tasa de entre 20 ml/min y 100 ml/min, o mediante la adición simultánea de cada una de dichas soluciones en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a un ritmo de entre 20 ml/min y 100 ml/min, en el que dicha cámara de mezcla tiene un volumen de entre 0,2 y 10 ml;
(iv) filtrar la composición acuosa resultante a través de un filtro que tiene un diámetro de poro inferior o igual a 500 nm para formar un filtrado, o centrifugar la composición acuosa resultante a una tasa superior o igual a 32372 m/s2 (6000 rpm en un rotor con un radio de 0,082 m) para formar un sobrenadante; y
(v) opcionalmente, liofilizar el filtrado o sobrenadante resultante.
En otra divulgación aún mucho más especialmente preferida del procedimiento, dicho procedimiento comprende
(i) preparar una solución acuosa de al menos un polirribonucleótido bicatenario, o una sal o un solvato del mismo, y una solución acuosa de al menos una polialquilenimina, o una sal o un solvato del mismo, en el que una o ambas soluciones comprenden opcionalmente un portador, un disolvente orgánico, un excipiente y/o un adyuvante farmacéuticamente aceptables;
(ii) filtrar independientemente cada solución a través de un filtro con un diámetro de poro inferior o igual a 200 nm para formar soluciones esterilizadas;
(iii) mezclar las soluciones esterilizadas resultantes en una cámara de mezcla para formar una composición acuosa mediante la adición de una de dichas soluciones a la otra solución en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a una tasa de entre 30 ml/min y 100 ml/min, o mediante la adición simultánea de cada una de dichas soluciones en dicha cámara de mezcla, opcionalmente por inyección, a una tasa de entre 30 ml/min y 100 ml/min, en la que dicha cámara de mezcla tiene un volumen de entre 0,5 y 8 ml; y
(iv) opcionalmente, liofilizar la composición acuosa resultante.
En otra realización, la formulación de BO-11X se produce de acuerdo con un procedimiento de fabricación que implica la mezcla de dos soluciones acuosas, una primera que comprende los polirribonucleótidos de doble cadena (o una sal o un solvato de los mismos) y una segunda que comprende la polialquilenimina (o una sal o un solvato de los mismos), de modo que las partículas resultantes presentan las características definidas anteriormente, en particular con respecto al diámetro y la distribución monomodal del diámetro, así como el aspecto de una solución coloidal esencialmente clara.
En otro paso opcional, se puede añadir un compuesto adicional (que sea un adyuvante o un compuesto terapéutico relacionado con el sistema inmunitario, tal como CD40L, IL12, antígenos virales o tumorales, o un fármaco anticanceroso) durante el paso (i), o después de cualquiera de los pasos (i)-(v) o de los pasos (i)-(iv) en el procedimiento para fabricar la composición definida anteriormente. Las composiciones resultantes (que pueden ser
denominadas como BO-11Xm y más específicamente como BO-112m, cuando presentan la combinación de características descritas anteriormente) pueden ser utilizadas de acuerdo con cualquiera de las realizaciones divulgadas en el presente documento para utilizar las composiciones BO-11X, y específicamente las composiciones BO-112.
Como se describe con más detalle en los Ejemplos, las formulaciones de BO-11X pueden proporcionarse filtrando y/o centrifugando la composición farmacéutica que comprende partículas formadas por polirribonucleótidos de doble cadena y un homo o heteropolímero policationico soluble en agua, proporcionando las formulaciones de BO-11X como composiciones líquidas a granel o de un solo uso sin agregados visibles. Dicho procedimiento para fabricar la composición comprende:
(i) preparar una solución acuosa de al menos un polirribonucleótido de doble cadena, o una sal o un solvato del mismo, y una solución acuosa de al menos una polialquilenimina, o una sal o un solvato del mismo, opcionalmente junto con un portador farmacéuticamente aceptable, un disolvente orgánico, un excipiente y/o un adyuvante presente en cualquiera de las soluciones;
(ii) mezclar dichas soluciones; y
(iii) filtrar la mezcla resultante a través de un filtro que tiene un diámetro de poro inferior o igual a 600 nm, o centrifugado a más de 22480 m/s2
Este procedimiento puede adaptarse aún más a los componentes reales de la composición (polirribonucleótidos de doble cadena, la polialquilenimina y otros componentes opcionales), así como a los procedimientos deseados de uso, almacenamiento, envío, empaquetado y/o administración de la composición, en particular si la composición requiere ser fabricada inmediatamente antes del uso o, como es más común para las composiciones farmacéuticas, fabricada para el almacenamiento a largo plazo y/o en forma de múltiples recipientes, cada uno para un solo uso (por ejemplo, en viales o jeringas estériles) y que contengan partículas que tengan el tamaño más uniforme, la estabilidad, la solubilidad y, finalmente, los efectos biológicos cuando se administran por ejemplo, en viales o jeringas estériles), y que contienen partículas que tienen el tamaño, el contenido de poli(I:C), la estabilidad, la solubilidad y, finalmente, los efectos biológicos más uniformes cuando se administran.
Los pasos de mezclado y filtrado (ii) y (iii) anteriores pueden adaptarse a nivel del orden de filtrado y/o mezclado, el procedimiento de mezclado, la velocidad de mezclado y/o la cantidad de soluciones que se mezclan. En otra divulgación preferida, el procedimiento para fabricar formulaciones de BO-11X comprende:
(i) preparar una solución acuosa de al menos un polirribonucleótido de doble cadena, o una sal o un solvato del mismo, y una solución acuosa de al menos una polialquilenimina, o una sal o un solvato del mismo, opcionalmente junto con un portador farmacéuticamente aceptable, un disolvente orgánico, un excipiente y/o un adyuvante presente en cualquiera de las soluciones;
(ii) esterilizar cada una de las soluciones filtrándolas de forma independiente;
(iii) mezclar dichas soluciones en el recipiente para almacenar, liofilizar y/o utilizar la composición añadiendo primero una de las soluciones y luego la otra a una velocidad de inyección superior a 50 rpm a una velocidad de flujo entre 1 ml/min y 50 ml/min; y
(iv) sellar el recipiente.
En otro paso opcional, puede añadirse otro compuesto (que sea un compuesto terapéutico o adyuvante relacionado con el sistema inmunitario, tal como CD40L, IL12, antígenos virales o tumorales, o que sea un compuesto terapéutico o adyuvante, tal como un fármaco anticanceroso) durante el paso (i), o después de cualquiera de los pasos (i)-(v) o de los pasos (i)-(iv) en el procedimiento para fabricar la composición definida anteriormente. Las composiciones resultantes (que pueden denominarse BO-11Xm y, más concretamente, BO-112m, cuando presentan la combinación de características (i)-(vi) descrita anteriormente) pueden utilizarse de acuerdo con cualquiera de las realizaciones divulgadas en el presente documento para el uso de las composiciones BO-11X, y específicamente de las composiciones BO-112.
Dependiendo de cómo se vaya a administrar la composición acuosa de la presente divulgación (por ejemplo, mediante inyección subcutánea o intratumoral), la composición de BO-11X o B O -ll2 , tal como se define en lo anterior, puede proporcionarse en recipientes y/o en la cantidad que sea más apropiada para un solo uso o para una dosis múltiple.
Combinaciones
Una composición de acuerdo con la presente divulgación puede utilizarse en combinaciones que incluyan otros compuestos o tratamientos con los que se sabe que es compatible, si no proporciona un efecto aditivo o incluso sinérgico. Además, las composiciones que se denominan BO-11Xm (y específicamente como BO-112m) pueden producirse como se ha descrito anteriormente proporcionando nuevos productos en los que la combinación de una composición de BO-11X, tal como una composición de BO-112, con otro compuesto proporciona efectos terapéuticos mejorados u otros efectos farmacéuticamente relevantes (incluyendo la estabilidad o la eficacia a dosis más bajas, en general o con respecto a indicaciones o vías de administración específicas) en comparación con las combinaciones en las que la composición de BO-11X y el otro compuesto simplemente se mezclan antes de su uso.
Por ejemplo, las moléculas de poli(I:C) pueden utilizarse en combinación con diferentes fármacos anticancerosos, anticuerpos, radioterapia o quimioterapia (Le U et al., 2008; Le U et al., 2009; Taura M et al., 2010; Matijevic T et al., 2011; Levitzki A, 2012; Yoshino H y Kashiwakura I, 2013; Hafner A et al., 2013) o con moléculas de poli(I:C) de diferente longitud (Zhou Y et al., 2013). Las moléculas de poli(I:C) también se han utilizado como adyuvante o agente de acción sinérgica cuando se combinan con otros agentes, como en la vacunación con antígenos de cáncer o lisados celulares (Ammi R et al., 2015), agentes que bloquean la vía PD-1/PD-L1 (Nagato T y Celis E, 2014), otros agonistas de TLR, tal como el agonista de TLR9 CpG ODN (Zhang Y et al., 2014), dicloroacetato (Ohashi T et al., 2013), IL27 (Chiba Y et al., 2013), inhibidores de quinasas tales como sorafenib (Ho V et al.,2015), proteínas proapoptóticas tales como NS1 (Gupta S et al. 2016), el ácido zoledrónico (Chen L et al., 2013) o el ácido transretinoico (Szabo A et al., 2012). Otros usos de las formulaciones de BO-11X pueden hacerse evidentes a la vista de las actividades de las moléculas de poli(I:C) hacia tipos celulares específicos demostradas recientemente, al menos mediante ensayos in vitro, tal como en preadipocitos, inhibiendo la diferenciación y la diferenciación en adipocitos (Yu L et al., 2016), células madre mesenquimales, potenciando los efectos inmunosupresores (Cho K. et al., 2016; Vega-Letter A et al., 2016), o la activación de células NK (Perrot I et al., 2010).
En algunos aspectos, la presente divulgación se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de una formulación de BO-11X y una cantidad eficaz de uno o más agentes inmunomoduladores, en particular agentes que se dirigen a moléculas de punto de control inmunitario (tales como PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, CD134, CD134L, CD137, CD137L, CD80, CD86, B7-H3, B7-H4, B7RP1, LAG3, ICOS, TIM3, GAL9, CD28, AP2M1, SHP-2, PPP2R5A u OX-40), dichos compuestos comúnmente denominados inhibidores de puntos de control (IPC). Alternativamente, el agente inmunomodulador bloquea el efecto inmunosupresor de las células reguladoras T, tal como un inhibidor de objetivos farmacológicos tales como IDO, TGF-p, STAT3 o CSFR1.
En consecuencia, la presente divulgación proporciona composiciones que son útiles en terapias combinadas y regímenes que comprenden la administración de formulaciones de BO-11X (o formulaciones de BO-11Xm) y otro agente o tratamiento terapéutico (incluyendo radioterapia, quimioterapia, crioterapia, ablación de tumores o terapia fotodinámica). En particular, la presente divulgación se refiere a una formulación de BO-11X y uno o más fármacos anticancerígenos para su uso en un procedimiento para tratar, mejorar o prevenir el crecimiento del cáncer, la metástasis, la ulceración, el escape inmunológico o la recurrencia en un sujeto, que comprende la administración de dicha formulación de BO-11X y dicho uno o más fármacos anticancerígenos, preferentemente un agente inmunomodulador, en la que la administración es simultánea (como formulaciones separadas o en el contexto de una coformulación) o secuencial (en cualquier orden o en ciclos de administración consecutivos). En algunos aspectos, la presente divulgación se refiere a una composición para su uso como medicamento para el tratamiento del cáncer, que comprende la administración de una cantidad eficaz del agente de formulación de BO-11X y una cantidad eficaz de uno o más agentes inmunomoduladores a un sujeto que necesita el mismo, en particular cuando el sujeto está sometido a una terapia contra el cáncer con uno o más agentes inmunomoduladores.
En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador es preferentemente un anticuerpo, incluyendo un anticuerpo monoclonal y otros formatos de anticuerpos, o cualquier otro agente disponible farmacéuticamente que se une a una proteína de la superficie celular que controla la respuesta inmunitaria, actuando, así como un IPC, que puede bloquear, reducir y/o inhibir PD-1 y PD-L1 o PD-L2 y/o la unión de PD-1 con PD-L1 o PD-L2. Alternativamente, este IPC puede bloquear, reducir y/o inhibir reduce y/o inhibe la actividad de otras moléculas de punto de control inmunitario tales como CTLA-4, AP2M1, CD80, CD86, SHP-2, y/o PPP2R5A. Como alternativa adicional, el IPC aumenta y/o estimula CD137 (4-1BB) y/o la unión de CD137 (4-1BB) con uno o más de los ligandos 4-1BB y TRAF2.
En algunas realizaciones, las composiciones para su uso, como se ha definido anteriormente, que incluyen terapias combinadas y regímenes para el tratamiento del cáncer que comprenden la administración de formulaciones de BO-11X (o formulaciones de BO-11Xm) pueden definirse además con respecto a una vía de administración específica, en la que la formulación de BO-11X se administra por una vía diferente a la del otro compuesto terapéutico, tal como un agente inmunomodulador, y preferentemente un IPC. Esto puede implicar la administración de la formulación de BO-11X por inyección intratumoral o peritumoral (dentro del tumor, en el margen de la masa tumoral, en las células epiteliales circundantes, vasos linfáticos o sanguíneos) u otros medios que permitan administrar la formulación de BO-11X directamente dentro o en la proximidad de las células cancerosas o del órgano que comprende las células cancerosas (y no indirectamente, por ejemplo a través del torrente sanguíneo) y la administración sistémica de IPC u otro agente inmunoestimulante). La formulación de BO-11X por inyección intratumoral o peritumoral puede realizarse a nivel de la piel, es decir, en la piel (por ejemplo, para tratar el melanoma o en relación con la combinación con una vacuna) o de un órgano o tejido interno, es decir, en dicho órgano o tejido interno (por ejemplo, por inyección intrahepática para tratar el cáncer de hígado o por administración intravesicular para el cáncer de vejiga). Dicha administración local de la formulación de BO-11X sigue preferentemente o (preferentemente) es seguida por la administración del agente inmunoestimulador.
La formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm) también puede administrarse en combinación con terapias celulares, en las que el BO-11X se coadministra con la terapia celular directamente al paciente, o se utiliza para tratar las células que se obtienen de un paciente (de la sangre o de una biopsia, incluyendo las células dentro de la masa tumoral, en el margen de la masa tumoral, en las células epiteliales circundantes, en los vasos linfáticos o sanguíneos). Estas células, con o sin selección positiva o negativa para tipos celulares específicos, pueden ser expuestas a la
formulación de BO-11X en un entorno de laboratorio adecuado para generar células que, tras este tratamiento, presenten marcadores, secreten proteínas y/o expongan antígenos útiles para el tratamiento posterior del cáncer. Dichas células autólogas, de nuevo con o sin selección negativa o positiva adicional, pueden ser administradas al paciente. Durante las fases posteriores del tratamiento, la formulación de BO-11X puede seguir administrándose al paciente por cualquier medio apropiado (por inyección intratumoral o, preferentemente, intramuscular o subcutánea). El tratamiento ex vivo de células de pacientes puede realizarse durante un período de tiempo superior a 1 hora, preferentemente superior a 3 horas, más preferentemente superior a 8 horas, incluso más preferentemente superior a 24 horas, o más, a una concentración inferior a la de la inyección intramuscular o subcutánea (preferentemente al 50 %, más preferentemente al 25 %, incluso más preferentemente al 10 %, además preferentemente al 5 % o mucho más preferentemente al 1 % de dicha dosis).
Efectos y usos adicionales
Se proporciona además en esta divulgación la formulación de BO-11X para usos farmacéuticos que implican la administración de dicha formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm) para aumentar la respuesta inmunitaria contra un agente patógeno o biológico indeseable y, en particular, para mejorar una respuesta inmunitaria antitumoral, actuando potencialmente como un agente inmunomodulador. Dicho efecto puede ser monitorizado midiendo la respuesta inmune relacionada con el tumor en el sitio del tumor y en el microambiente del tumor (o en el torrente sanguíneo, otros fluidos biológicos y tejidos) a nivel de tipos o subpoblaciones celulares relevantes (por ejemplo, células dendríticas, células reguladoras T, células T y/o células NK) y/o de biomarcadores inmunológicos (por ejemplo, quimiocinas, factores de crecimiento, citoquinas y sus receptores).
En particular, cuando la formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm) se administra clínicamente por inyección intratumoral, se observa apoptosis y/o necrosis en el tumor, promoviendo así potencialmente la presentación de antígenos tumorales a las células dendríticas residentes. Una cascada de señalización puede conducir también al reclutamiento de células inmunitarias, en particular de células T CD4+ y CD8+ en la masa tumoral promoviendo un efecto inmunitario contra el tumor, contribuyendo al efecto citotóxico del BO-11X. Otra divulgación se refiere a una composición que se utiliza para inducir la producción de interferón en una célula o tejido in vitro, que comprende el paso de poner en contacto una célula o tejido con una composición, en la que dicha célula o tejido presenta un trastorno del crecimiento celular caracterizado por un crecimiento anormal de las células humanas o animales, en la que dicha composición es BO-11X, más preferentemente BO-112. Así, la divulgación se refiere a una composición para su uso en la inducción de la producción de interferón en las células de un sujeto in vitro, que comprende:
(i) obtener las células del sujeto;
(ii) poner en contacto dichas células con una composición de BO11X, preferentemente BO-112.
Composiciones farmacéuticas
También se proporcionan procedimientos para hacer una composición farmacéutica de BO-112 (y/o otras formulaciones de BO-11X, tal como una formulación de BO-11Xm o BO-112m) mezclando una formulación de BO-11X y uno o más adyuvantes, diluyentes, portadores o excipientes farmacéuticamente aceptables. Dichos componentes pueden adaptarse a la indicación médica específica (por ejemplo, un cáncer sólido o un cáncer hematológico) y/o a los medios de administración, por ejemplo, por inyección (peritumoral, intratumoral, intrahepática, intrapancreática, intramuscular o subcutánea), por inhalación, por vía tópica u oral.
Los tratamientos combinados basados en la formulación de BO-11X pueden implicar la misma o diferentes vías de administración para la formulación de BO-11X y el otro compuesto. En particular, la formulación de BO-11X puede administrarse, como en el caso de otros agentes de ARN inmunoestimulantes, mediante inyecciones intratumorales o peritumorales que pueden activar el sistema inmunitario antes de la administración sistémica de un anticuerpo terapéutico que actúe como IPC, tal como los inhibidores de la vía PD-1/PD-L1 (Bald T et al., 2014) o las células T activadas (Amos SM et al., 2011). Alternativamente, la formulación del BO-11X junto con otros compuestos terapéuticos que sean agonistas o ligandos del TLR, tales como las moléculas CpG o el Resiquimod, para potenciar el efecto de la vacunación contra el cáncer (Sajadian A et al., 2014) o las células dendríticas (Fujimura T et al., 2006).
Agentes inmunomoduladores
La formulación de BO-11X (incluyendo una formulación de BO-11Xm) puede combinarse con uno o más agentes inmunomoduladores. En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador es una molécula coestimuladora o coinhibidora (por ejemplo, de una o más células inmunitarias, tal como, a título no limitativo, las células T y las células NK). En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador es un agente que modula una célula T CD4 y/o CD8, por ejemplo, actuando como agonista o antagonista con respecto a CD3, CD4, Cd 8, PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, CD137, CD96, CD73, CD90, CD47, CD69, CD26, TIM3 y La G3. En otras realizaciones, el agente inmunomodulador es un agente que modula las células NK, por ejemplo, actuando como agonista o antagonista con respecto a CD3, NKp46, CD16, NKG2D, NKp44 y NKp30. En otras realizaciones, el agente inmunomodulador es un agente que modula los biomarcadores del estroma tumoral y del endotelio, por ejemplo, actuando como agonista o antagonista con respecto a CD45, PD-L1, PD-L2, PTEN y CD31, o combinaciones de los mismos. La combinación de agentes
inmunomoduladores puede utilizarse para dirigirse a diferentes poblaciones inmunitarias, por lo que los agentes combinados se dirigen a células que expresan diferentes poblaciones de células inmunitarias.
El agente inmunomodulador se proporciona como un compuesto adicional en forma de un compuesto químico orgánico o inorgánico, un ácido nucleico, un aptámero, un péptido, una proteína, y más particularmente un anticuerpo que se une al objetivo relevante en los fluidos biológicos o en la superficie celular. El anticuerpo puede ser policlonal o monoclonal; intacto o truncado (por ejemplo, F(ab')2 , Fab, Fv); biespecífico o multiespecífico; xenogénico, alogénico, singénico, o formas modificadas del mismo (por ejemplo, un anticuerpo quimérico o un anticuerpo humanizado). Cuando el agente inmunomodulador es un anticuerpo monoclonal, puede ser un anticuerpo monoclonal no derivado de mamíferos humanos, un anticuerpo monoclonal quimérico recombinante, un anticuerpo monoclonal humanizado recombinante o un anticuerpo monoclonal humano.
El anticuerpo que actúa como agente inmunomodulador puede comprender además los elementos estructurales normalmente necesarios para ejercer la actividad biológica requerida, como cuatro cadenas polipeptídicas, dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas ligeras (L) interconectadas por enlaces disulfuro que son capaces de unir uno o más antígenos (por ejemplo, anticuerpos biespecíficos o multiespecíficos) y presentar una región Fc de una inmunoglobulina (por ejemplo, IgA, IgG, IgE, IgD o IgM) que puede interactuar con los receptores Fc y activar una respuesta inmunitaria que provoque el agotamiento y/o la muerte celular de las células inmunitarias u otras células. Cada cadena pesada se compone de una región variable de la cadena pesada (Vh) y una región constante de la cadena pesada. La región constante de la cadena pesada está compuesta por tres dominios, CH1, CH2 y CH3. Cada cadena ligera está compuesta por una región variable de la cadena ligera (Vl) y una región constante de la cadena ligera. La región constante de la cadena ligera está compuesta por un dominio, CL. Las regiones Vh y Vl pueden subdividirse en regiones de hipervariabilidad, denominadas regiones determinantes de la complementariedad (CDR), intercaladas con regiones más conservadas, denominadas regiones marco (FR). Cada región variable (Vh o Vl) contiene 3 CDR, designadas CDR1, CDR2 y CDR3. Cada región variable contiene también 4 subregiones marco, designadas FR1, FR2, FR3 y FR4. El término anticuerpo incluye todos los tipos de anticuerpos, incluyendo, por ejemplo, IgA, IgG, IgD, IgE e IgM, y sus respectivas subclases (isotipos), por ejemplo, IgG-1, IgG-2, IgG-3 e IgG-4; IgA-1 e IgA-2. Un anticuerpo, en algunas realizaciones, también se refiere a fragmentos de anticuerpos y fragmentos de unión a antígenos. Los anticuerpos adecuados para practicar los procedimientos descritos en el presente documento pueden ser de diversos formatos de anticuerpos, por ejemplo, monoclonales, policlonales, biespecíficos, multiespecíficos, y pueden incluir, pero no se limitan a, anticuerpos humanos, humanizados o quiméricos, que comprenden anticuerpos de cadena simple, fragmentos Fab, fragmentos F(ab'), fragmentos producidos por una biblioteca de expresión Fab, y/o fragmentos de unión de cualquiera de los anteriores. Los anticuerpos también se refieren a las moléculas de inmunoglobulina y a las porciones inmunológicamente activas de las moléculas de inmunoglobulina, es decir, moléculas que contienen al menos dos antígenos o sitios de unión a objetivos contra al menos dos objetivos descritos en el presente documento. Las moléculas de inmunoglobulina descritas en el presente documento pueden ser de cualquier tipo (por ejemplo, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA e IgY), clase (por ejemplo, IgGI, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 e IgA2) o subclase de molécula de inmunoglobulina. Además, los anticuerpos (por ejemplo, mono, biespecíficos y/o multiespecíficos) adecuados para practicar la divulgación descrita en el presente documento pueden proporcionarse en cualquiera de los formatos alternativos que se divulgan en la literatura, por ejemplo, Diabodies; Flexibodies; Camelid Antibodies, Immunobodies; Triomabs, Pepbodies, Vaccibodies, minibodies, Fcabs, UniBodies o DuoBodies (Storz U, 2011).
PD-1 (también conocido como CD279 o proteína de muerte celular programada 1) es un miembro de la familia de receptores B7. En algunas realizaciones, PD-1 se refiere a la secuencia PD-1 humana (véase, por ejemplo, NCBI Reference Sequence: NP_005009) y cualquier variante alélica, de empalme y formas procesadas que se produzcan de forma natural (Keir M et al., 2008; UniProt: Q15116). PD-1 se une a PD-L1 (también conocido como c D274 o B7-H1) y PD-L2 (también conocido como CD273 o B7-DC), que también son miembros de la familia B7. En algunas realizaciones, PD-L1 se refiere a PD-L1 humano (véase, por ejemplo, GenBank: AF233516), PD-L2 se refiere a PD-L2 humana (por ejemplo, NCBI Reference Sequence: NM_025239), junto con y cualquier variante alélica, de empalme y formas procesadas que se produzcan de forma natural.
En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador se dirige a uno o más de PD-1, PD-L1 y PD-L2. En particular, el agente inmunomodulador es un inhibidor de PD-1. En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador es un anticuerpo específico para uno o más de PD-1, PD-L1 y PD-L2. Dicho agente inmunomodulador es un anticuerpo tal como, a título no limitativo, nivolumab, (ONO-4538/BMS-936558, MDX1106, OPDIVO), pembrolizumab (KEYTr UdA), pidilizumab (CT-011), MK-3475, BMS 936559, MPDL328OA, y otros recientemente revisados (Tan S et al. 2016).
En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm) se combina con uno o más de BMS-936559 y MEDI4736 para el tratamiento de, por ejemplo, tumores sólidos avanzados. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con uno o más MPDL3280A (opcionalmente con vemurafenib) y MEDI4736 (opcionalmente con uno o más de dabrafenib y trametinib) para el tratamiento del melanoma. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con uno o más MPDL3280A (opcionalmente con erlotinib) y MEDI4736 (opcionalmente con tremelimumab) para el tratamiento del NSCLC. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con MPDL3280A (opcionalmente con uno o más de bevacizumab y sunitinib) para el tratamiento del RCC. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con MPDL3280A para el tratamiento de tumores
malignos sólidos o hematológicos. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con uno o más MPDL3280A (opcionalmente con uno o más de bevacizumab, quimioterapia y cobimetinib); MEDI4736 (opcionalmente con tremelimumab) y MSB0010718C para el tratamiento de tumores sólidos. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con AMP-224 para el tratamiento del cáncer avanzado. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con nivolumab (opcionalmente con iliolumbar (anti-KIR)) para el tratamiento de tumores sólidos avanzados. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con nivolumab para el tratamiento del cáncer de próstata resistente a la castración, el melanoma, el NSCLC y el RCC. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con pembrolizumab para el tratamiento del cáncer de colon. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con pembrolizumab para el tratamiento del cáncer gástrico, el cáncer de cabeza y cuello, el TNBC y el cáncer urotelial. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con nivolumab (opcionalmente con ipilimumab) para el tratamiento del cáncer gástrico, el cáncer de páncreas, el cáncer de pulmón de células pequeñas y el TNBC. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con nivolumab (opcionalmente con ipilimumab) para el tratamiento del glioblastoma. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con nivolumab para el tratamiento del cáncer hepatocelular. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con pembrolizumab para el tratamiento del linfoma de Hodgkin, el mieloma, el síndrome mielodisplásico y el linfoma no Hodgkin. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con pidilizumab para el tratamiento de gliomas malignos. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con uno o más de nivolumab (opcionalmente con uno o más de ipilimumab, y múltiples péptidos de clase 1 y montanida ISA 51 VG; y opcionalmente secuencialmente con ipilimumab) y pembrolizumab para el tratamiento del melanoma. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con pembrolizumab para el tratamiento del melanoma y el NSCLC. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con uno o más de nivolumab (opcionalmente con uno o más de gemcitabina/cisplatino, pemetrexed/cisplatino, carboplatino/paclitaxel, bevacizumab, erlotinib e ipilimumab) y pembrolizumab para el tratamiento del NSCLC. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con pidilizumab (opcionalmente con gemcitabina) para el tratamiento del cáncer de páncreas. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con pidilizumab (opcionalmente con uno o más de sipuleucel-T y ciclofosfamida) para el tratamiento del cáncer de próstata. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con uno o más de nivolumab (opcionalmente con uno o más de sunitinib, pazopanib e ipilimumab), pembrolizumab (opcionalmente con pazopanib) y pidilizumab (opcionalmente con la vacuna de células dendríticas/células de fusión de RCC) para el tratamiento del RCC. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con uno o más de los anti-LAG3 (BMS-986016, opcionalmente con nivolumab), nivolumab (opcionalmente con interleucina-21) y AMP-554 para el tratamiento de tumores sólidos. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con pembrolizumab para el tratamiento de tumores sólidos.
En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador se dirige a uno o más de los CD137 o CD137L. En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador es un anticuerpo específico para uno o más de los CD137 o CD137L. Por ejemplo, en algunas realizaciones, el agente inmunomodulador es un anticuerpo como, a título no limitativo, urelumab (también conocido como BMS-663513 y anticuerpo anti-4-1BB). En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con urelumab (opcionalmente con uno o más de nivolumab, lirilumab y urelumab) para el tratamiento de tumores sólidos y/o linfoma no Hodgkin de células B y/o cáncer de cabeza y cuello y/o mieloma múltiple. En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador es un anticuerpo tal como, a título no limitativo, ipilimumab (MDX-010, MDX-101, Yervoy, BMS) y/o tremelimumab (Pfizer). En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con ipilimumab (opcionalmente con bavituximab) para el tratamiento de uno o más de los melanomas, cáncer de próstata y cáncer de pulmón.
En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador se dirige a CD20. En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador es un anticuerpo específico de CD20. Por ejemplo, en algunas realizaciones, el agente inmunomodulador es un anticuerpo como, a título no limitativo, Ofatumumab, obinutuzumab (GAZYVA), AME-133v, Ocrelizumab, TRU-015 y veltuzumab.
Validación de las formulaciones de BO-11X
La validación preclínica de la eficacia terapéutica de una formulación de BO-11X (de acuerdo con la presente divulgación, incluyendo una formulación de BO-11Xm, y como se ejemplifica con BO-112 en los Ejemplos) puede realizarse en ensayos con base en células y, lo que es más interesante, en modelos animales en los que pueden probarse y compararse diferentes criterios experimentales para establecer las condiciones más apropiadas para lograr efectos terapéuticos de forma eficaz, utilizando la formulación de BO-11X sola o en combinación con un fármaco candidato o aprobado contra el cáncer.
Estos criterios incluyen las dosis, la vía de administración, el orden y/o la frecuencia de administración de cualquiera de los compuestos al alcance para identificar cuáles son las mejores condiciones para el uso terapéutico de una formulación de BO-11X (sola, como formulación de BO-11Xm, o sinérgicamente con un fármaco candidato o aprobado contra el cáncer) en términos de eficacia, seguridad y/o uso clínico. Cuando se utilizan modelos animales y/o ex vivo, las formulaciones de BO-11X pueden validarse utilizando uno o más de los siguientes criterios: citotoxicidad de las células cancerosas, activación de PARP, muerte celular inmunogénica, eficacia terapéutica (en particular a través de la apoptosis y/o necrosis de las células cancerosas, ya sea directa o indirectamente por efecto abscópico), aumento
de la expresión de marcadores en las poblaciones de células inmunitarias, aumento de las poblaciones de células inmunitarias, y los demás ensayos mostrados en los Ejemplos.
Los efectos de diferentes dosis de una formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm), número y/o sitio de administración (en particular, inyectándolo en uno o más sitios), cada compuesto, vía de administración, frecuencia, y/o punto de tiempo para la administración pueden asociarse a puntos finales relevantes y parámetros fisiológicos que se miden en muestras biológicas obtenidas de células o (preferentemente) animales que se exponen a los compuestos probados, solos o en combinación con otros fármacos. Una lista no limitativa de dichos parámetros incluye la regresión del tamaño del tumor, el bloqueo del crecimiento del tumor y/o la proliferación de células tumorales, la apoptosis, la reducción de la vascularización o metástasis del tumor, la superación de la resistencia a un fármaco común contra el cáncer (o la mejora de la respuesta a tal fármaco en la población tratada), reducción de los efectos adversos relacionados con el tratamiento en tejidos y funciones normales, modulación de la respuesta inmunitaria y/o de células inmunitarias con actividades y características específicas, identificación de biomarcadores o poblaciones celulares específicas en materiales biológicos (por ejemplo en preparaciones de células cancerosas, biopsias tumorales o fluidos biológicos) cuyo aumento (o disminución) es conocido en la literatura como asociado al efecto anticancerígeno en general, y en particular a la supervivencia de modelos animales y posiblemente de pacientes con cáncer. Siempre que sea posible, dichos puntos finales se miden en puntos de tiempo intermedios y finales tras la administración de cada compuesto de prueba, o de una combinación de compuestos de prueba a una dosis y/o régimen determinados, utilizando una vía de administración y/o formulaciones farmacéuticas específicas.
La eficacia terapéutica anticancerosa de la formulación de BO-11X (o de las formulaciones de BO-11Xm) puede probarse sola o en combinación con los tratamientos convencionales habituales (tal como la radioterapia, la quimioterapia, los inhibidores de las quinasas celulares, los fármacos con efectos epigenéticos, etc.) o los tratamientos que implican nuevos mecanismos y/o nuevos fármacos anticancerígenos candidatos. De hecho, una categoría de nuevos compuestos anticancerígenos que pueden probarse en combinación con una formulación de BO-11X son aquellos que mejoran las respuestas inmunitarias antitumorales dentro del microambiente del tumor, proporcionando una inmunidad antitumoral sistémica que se dirige a las células tumorales diseminadas que son eliminadas. Este enfoque ha demostrado ser exitoso en modelos animales y en pacientes y puede mejorar el resultado de las terapias convencionales tal como la radioterapia o la quimioterapia (véase, por ejemplo, Galluzzi L et al., 2014; Vacchelli E et al., 2013; Van der Jeught K et al., 2015).
Este creciente panel de nuevos fármacos contra el cáncer se dirige a los mecanismos por los que las células cancerosas escapan a la detección y destrucción inmunitaria por parte del cuerpo humano. Las inmunoterapias específicas para el cáncer pueden ofrecer una serie de ventajas en comparación con otras terapias contra el cáncer (por ejemplo, la especificidad de las células tumorales). De hecho, la identificación de una serie de objeticos moleculares para las inmunoterapias contra el cáncer está permitiendo importantes avances en la definición de los mecanismos y compuestos que pueden proporcionar un efecto coestimulador (o coinhibidor) adecuado en las respuestas inmunitarias contra los tumores en relación con su plasticidad, heterogeneidad, resistencia o microambiente.
Una lista no limitativa de inmunoterapias pasivas o activas contra el cáncer, cada una de las cuales actúa sobre diferentes objetivos y/o mecanismos moleculares, incluye anticuerpos monoclonales dirigidos al tumor u otros inmunomoduladores, virus oncolíticos, citoquinas inmunoestimuladoras, transferencia celular adoptiva y otras terapias basadas en células, vacunas con base en ADN o péptidos, inhibidores del metabolismo inmunosupresor o agonistas de los receptores de reconocimiento de patrones. Entre estos mecanismos, los objetivos moleculares contra los que los anticuerpos u otros compuestos tienen actividad agonista o antagonista (dependiendo de su papel en la respuesta inmunitaria o en el escape del cáncer de la respuesta inmunitaria) incluyen una serie de proteínas de la membrana celular tal como PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, CD137, CD38, OX-40, c D26, TIM3 y LAG3 que son puntos de control para el desarrollo de tumores y contra los que existen diferentes anticuerpos agonistas o antagonistas disponibles comercialmente o en repositorios científicos para caracterizar su especificidad y/o nivel de efecto anticancerígeno contra el antígeno humano o (cuando se trata de modelos animales) el correspondiente antígeno de roedor.
A pesar de las impresionantes respuestas de los pacientes a los agentes dirigidos a estas moléculas coestimuladoras o coinhibidoras (por ejemplo, las terapias que se basan en un anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1), la respuesta clínica a los inhibidores de los puntos de control inmunitarios sigue logrando de forma incompleta o ineficaz el efecto terapéutico deseado en demasiados pacientes con cáncer. Una formulación de BO-11X en una combinación adecuada con un compuesto tal como un anticuerpo anti-PD-1, anti-CTLA4 o anti-CD137 puede potenciar la reducción del crecimiento tumoral y la metástasis (o aumentar el número de sujetos que presentan dicha reducción), en comparación con el efecto de la administración de uno de esos dos agentes anticancerígenos por sí solos, posiblemente más allá de los efectos aditivos que cabría esperar.
Los efectos terapéuticos de las formulaciones de BO-11X (o las formulaciones de BO-11Xm) pueden evaluarse en uno de los varios modelos con base en células que se basan en cultivos celulares aislados o mixtos, incluyendo células cancerosas primarias o líneas celulares cancerosas establecidas, preferentemente de origen humano. Los ejemplos de líneas celulares de cáncer para validar las formulaciones de BO-11X pueden definirse de acuerdo con el tipo de cáncer, tal como el melanoma (células humanas SK-Mel-19, SK-Mel-103 y UACC62; células murinas B16), el
carcinoma (células de ratón Hepa 1-6; células FAO de rata), cáncer de mama (células humanas BT483, HCC1143, HCC1937, MDA-MB-231, MDA-MB-415, MDA-MB-468 y BT549), cáncer de páncreas (células humanas MiaPaCa2, IMIM-PC2, Panc1, Panc0203, Panc 327, o BxPc3), u otras líneas celulares relevantes que estén disponibles a través de ATCC, otros repositorios oficiales o académicos, o proveedores comerciales. Los efectos anticancerígenos de las formulaciones de BO-11X pueden evaluarse utilizando una pluralidad de métricas, incluyendo el período de tiempo, la frecuencia y/o la dosis que se requiere para tener un bloqueo de la proliferación, la muerte, la expresión de biomarcadores y/o la liberación de moléculas de señalización (tales como quimiocinas o Interferón Beta) que indican un efecto potencialmente relevante de la formulación de BO-11X que se va a confirmar bajo una variedad de condiciones fisiológicas.
En consecuencia, los efectos de las formulaciones de BO-11X (o formulaciones de BO-11Xm) pueden evaluarse en modelos animales de tumores en los que la respuesta antitumoral debida a la administración de una formulación ejemplar tal como BO-112 se evalúa en diferentes protocolos tanto de monoterapia como de tratamiento combinado (por ejemplo, junto con un IPC tal como un anticuerpo anti-PD-1) a lo largo de un período de tiempo más corto o más largo después de la administración. El estudio puede proseguirse administrando BO-112 y/o el anticuerpo anti-PD-1 en los animales en un momento determinado del desarrollo del tumor debido a la proliferación de las células inyectadas, es decir, después de un número determinado de días tras la inyección de las células cancerosas o (preferentemente) que presenten el tamaño deseado del tumor (por ejemplo, un tamaño promedio de 80-100 mm3), o incluso tras su desaparición (para evaluar cualquier efecto de cada fármaco o combinación de fármacos en la recaída del tumor). El estudio también incluiría compuestos de control que son controles negativos (por ejemplo, el vehículo solo) o positivos, tal como los fármacos quimioterapéuticos u otros fármacos anticancerígenos que se indican en la literatura como estándar de eficacia de los fármacos para un tumor específico y/o en un modelo animal determinado. Estas actividades de validación en modelos animales y en células animales también pueden conducir al desarrollo de la formulación de BO-11X para uso veterinario.
El modelo animal es típicamente un modelo de ratón en el que el cáncer aparece tras la transferencia y el injerto de células cancerosas humanas (derivadas de una línea celular inmortalizada o una biopsia de cáncer que se obtiene de un paciente) o la inducción (o transferencia) de células tumorales de ratón en los animales. Las células pueden provenir de diferentes tipos de tumores (por ejemplo, carcinoma de pulmón, melanoma o linfoma) y pueden inyectarse por vía subcutánea en el flanco de cada ratón respectivo para la detección de un tumor y para analizar el tamaño y/o la composición del tumor a lo largo del estudio. A continuación, se trata a los ratones distribuyéndolos aleatoriamente en grupos de un tamaño que permita el análisis estadístico de los resultados (por ejemplo, 3, 5, 10, 12, 15, 20 o más animales para cada grupo de control o de tratamiento).
Se proporcionan posibles mejoras debido a que una formulación de BO-11X tal como BO-112 y un inhibidor del punto de control tal como un anticuerpo anti-PD-1 pueden inducir mejoras en los modelos animales de cáncer (en particular cuando se combinan adecuadamente en términos de cantidad, orden u otros criterios de administración), una mayor supervivencia de los animales después del tratamiento y/o la desaparición del tumor, una reducción de la recaída del tumor, efectos de toxicidad y/o resistencia limitados o retrasados, y una mejora en la respuesta a la reexposición de la inoculación del tumor después de la terminación del tratamiento con BO-112 y/o anticuerpo anti-PD-1.
La formulación ejemplar de BO-11X que se identifica estructural y funcionalmente más arriba como la formulación de BO-112 y un anticuerpo anti-PD-1 pueden administrarse (solos o en combinación, en dosis únicas o múltiples) en diferentes localizaciones con respecto a las células tumorales y/o en diferente cantidad. Típicamente, BO-112 y el anticuerpo monoclonal específico para PD-1 de ratón(por ejemplo, el clon RMP1-14 de BioLegend u otros similares disponibles en otros proveedores) se inyectan por vía subcutánea, intravesicular, intraperitoneal, peritumoral o intratumoral (dependiendo del modelo y de las características moleculares y patológicas del tumor) a una concentración que se determina con respecto al peso del animal (por ejemplo, entre 0,01 y 2,5 mg/kg), la concentración en el volumen inyectado (por ejemplo entre 0,01 y 0,5 ml, y/o el contenido en cada dosis (por ejemplo entre 0,01 y 250 |jg por dosis). En particular, la dosis-respuesta de BO-112 a diferentes concentraciones, combinada con una dosis fija de anticuerpo anti-PD-1 (o viceversa), puede permitir determinar cualquier efecto ventajoso tras la reducción significativa de la cantidad de cualquiera de los dos compuestos que se administra debido a la combinación con el otro compuesto (por ejemplo, perfil de eficacia y/o seguridad no afectado o incluso mejorado; efectos abscópicos en tumores que se encuentran en localizaciones diferentes y no tratadas).
La composición de BO-112 (o una composición de BO-112m) puede inyectarse en uno o varios ciclos (por ejemplo, 2, 3, 4 o más) que están separados por un número fijo y deseado de días (1,2, 3, 5, 7 o más). Alternativamente, cuando BO-112 se coadministra con el anticuerpo anti-PD1, BO-112 puede inyectarse inmediatamente antes (o después) del anticuerpo (o en una única preparación inyectable), de nuevo en uno o múltiples ciclos (que están separados por un número determinado de días). De forma alternativa, los dos agentes pueden formularse o administrarse en cualquier orden secuencial, pero separados por un periodo de tiempo variable (por ejemplo, 1 hora, 3 horas, 6 horas, 12 horas, 18 horas, 24 horas, 36 horas, 2 días o más). En particular, cuando el BO-112 se administra después del anticuerpo anti-PD-1, su administración posterior (sola o en combinación con el anticuerpo anti-PD-1) puede proporcionar un efecto de rescate antitumoral en animales en los que el anticuerpo anti-PD-1 fue ineficaz contra las células tumorales, superando cualquier resistencia tumoral específica o mecanismo de escape. Al final del periodo de tratamiento, todos los animales supervivientes pueden dejarse sin tratar durante 1, 2, 3 o más semanas consecutivas para controlar si
reaparecen los tumores y cómo, con o sin volver a inyectar a los animales que tuvieron una regresión completa del tumor con otra inyección subcutánea de células cancerosas.
Los efectos de las composiciones de BO-112 (o las composiciones de BO-112m), solas o en combinación con el anticuerpo anti-PD1 como se ha descrito anteriormente, pueden evaluarse como resultados provisionales que se comunican durante el estudio sin sacrificar a los animales (por ejemplo midiendo el tamaño del tumor, el porcentaje de ratones aún vivos, el peso corporal o los criterios de comportamiento) o después de sacrificar al animal (o en ratones ya muertos) para determinar las características moleculares de las células tumorales y/o normales (incluyendo el número total y/o las subpoblaciones específicas de células NK, linfocitos infiltrados en el tumor, esplenocitos, incorporación de precursores radiomarcados y otras células que puedan estar implicadas en las respuestas inmunitarias locales o sistémicas antitumorales, tales como, células supresoras derivadas de los mieloides (MDSCs), células T reguladoras (Tregs); neutrófilos asociados al tumor (TANs), macrófagos M2 y macrófagos asociados al tumor (TAMs)). Paralelamente, la presencia/ausencia de biomarcadores relevantes puede determinarse mediante la amplificación por PCR de los ARN relevantes, o a nivel de proteínas en la superficie de las células dentro de los tejidos o circulantes en la sangre, tales como las citocinas o quimiocinas mediante el uso de ensayos y kits inmunológicos estándar.
Este análisis de fenotipo global puede realizarse utilizando células aisladas de tumores, sangre, bazo, ganglios linfáticos u otros tejidos y localizaciones relevantes, para detectar cualquier cambio estadística y/o terapéuticamente relevante en el número de células que expresan marcadores de superficie celular que se detectan por citometría de flujo y se describen en la literatura como CD3, CD4, CD25, FoxP3, CD8, PD-1, PD-L1, PD-L2, PTEN, CTLA-4, CD137, CD96, CD73, CD90, CD47, CD69, CD26, TIM3, LAG3, Gr1, CD11b, Ly6C, Ly6G, NKp46, CD16, NKG2D, NKp44, NKp30, CD45, y CD31. Dichas células también pueden evaluarse a nivel de la respuesta inmunitaria específica al antígeno del tumor, la expresión de factores de transcripción, citocinas o quimiocinas relevantes (por ejemplo, IFN-gamma, IFN-beta, TNFalfa, HIF1a, HIF2a, p53), o utilizando otros ensayos con base en células.
Además, el examen macroscópico de los órganos y de la piel y el análisis microscópico y patológico en modelos animales totalmente inmunodeficientes pueden indicar más sobre la eficacia de los compuestos del estudio (solos o en la combinación) o de su toxicidad, tal como la inflamación de los órganos y la necropsia. Los datos cuantitativos que se generan en estudios similares pueden compararse entre los diferentes grupos experimentales mediante el uso de las pruebas estadísticas apropiadas, con y sin correcciones para pruebas múltiples, en el alcance para evaluar qué efectos terapéuticos (en particular antitumorales) proporciona la administración de una formulación de BO-11X, sola o en combinación con otro agente anticancerígeno.
Composiciones para su uso en procedimientos de tratamiento y selección de pacientes
En algunas realizaciones, la presente divulgación se refiere a una composición para su uso en el tratamiento, la reducción, la mejora o la prevención del crecimiento, la supervivencia, la metástasis, la transición epitelialmesenquimal, el escape inmunológico o la recurrencia del cáncer, que comprende la administración de una formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm) y uno o más agentes inmunomoduladores. El cáncer puede ser una enfermedad oncológica. El cáncer puede ser un tumor latente, que puede resultar de la metástasis de un cáncer. El tumor latente también puede ser el resultado de la extirpación quirúrgica de un tumor. La reaparición del cáncer puede ser, por ejemplo, un rebrote del tumor, una metástasis pulmonar o una metástasis hepática.
En algunas realizaciones, el cáncer es uno o más de los siguientes: carcinoma de células basales, cáncer del tracto biliar; cáncer de vejiga; cáncer de hueso; cáncer de cerebro y del sistema nervioso central; cáncer de mama; cáncer del peritoneo; coriocarcinoma; cáncer del tejido conectivo; cáncer del sistema digestivo (incluyendo cáncer de esófago, estómago, colon, recto u otro cáncer gastrointestinal); cáncer de ojo; cáncer de cabeza y cuello; glioblastoma; carcinoma hepático; hepatoma; neoplasia intraepitelial; cáncer de riñón, suprarrenal o renal; leucemia; cáncer de hígado; cáncer de pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de pulmón de células no pequeñas, adenocarcinoma de pulmón y carcinoma escamoso de pulmón); melanoma; mieloma; neuroblastoma; cáncer de la cavidad oral (labio, laringe, lengua, boca y faringe); cáncer de páncreas; cáncer de próstata; retinoblastoma; rabdomiosarcoma; cáncer del sistema respiratorio; carcinoma de las glándulas salivales; cáncer de piel; cáncer de células escamosas; cáncer de testículo; cáncer de tiroides; cáncer de útero, endometrio, cuello uterino, vulva, ovario u otro cáncer ginecológico; cáncer del sistema urinario; linfoma, incluyendo el linfoma de células B, el linfoma de Hodgkin y el linfoma no Hodgkin (LNH; incluyendo tipos específicos tales como el LNH de grado bajo/folicular, linfocítico pequeño, de grado intermedio/folicular, difuso de grado intermedio, inmunoblástico de grado alto, linfoblástico de grado alto, de células pequeñas no hendidas o de enfermedad voluminosa), de células del manto y relacionado con el SIDA; leucemia linfocítica crónica leucemia linfoblástica aguda; leucemia de células pilosas; leucemia mieloblástica crónica; así como otros carcinomas y sarcomas; trastorno linfoproliferativo postrasplante (PTLD), así como proliferación vascular anormal asociada a facomatosis o edema (tales como los que se asocian a los tumores cerebrales). En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer del tracto biliar. En algunas realizaciones, el cáncer del tracto biliar se selecciona entre el cáncer de páncreas, el cáncer de vesícula biliar, el cáncer de conductos biliares y el cáncer de la ampolla de Vater. En algunas realizaciones, el cáncer es de hígado. En algunas realizaciones, el cáncer es de colon. En algunas realizaciones, el cáncer del tracto biliar es un colangiocarcinoma y/o un adenocarcinoma. Alternativamente, el cáncer puede figurar en la lista de enfermedades raras, definidas de acuerdo
con los criterios de incidencia definidos en Europa o en los Estados Unidos, e indicadas en las listas actualizadas periódicamente disponibles en el sitio web de organizaciones tal como la International Rare Cancers Initiative (http://www.irci.info) o RaraCare (http://www.rarecare.eu).
En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm) y/o el agente inmunomodulador se utilizan para tratar cánceres en diversas etapas (por ejemplo, en la Etapa I, o II, o III, o IV). A modo de ejemplo no limitativo, utilizando la agrupación global de estadios, los cánceres de Etapa I están localizados en una parte del cuerpo; los cánceres de Etapa II son localmente avanzados, al igual que los cánceres de Etapa III. La designación de un cáncer como Etapa II o Etapa III puede depender del tipo específico de cáncer. En un ejemplo no limitativo, la enfermedad de Hodgkin, la Etapa II indica los ganglios linfáticos afectados en un solo lado del diafragma, mientras que la Etapa III indica los ganglios linfáticos afectados por encima y por debajo del diafragma. Por lo tanto, los criterios específicos de las Etapas II y III difieren de acuerdo con el diagnóstico. Los cánceres de las Etapas IV suelen haber hecho metástasis, es decir, se han extendido a otros órganos o a todo el cuerpo.
En algunas realizaciones, las formulaciones de BO-11X (o las formulaciones de BO-11Xm) y/o el agente inmunomodulador reducen los efectos secundarios de las terapias que puede experimentar un paciente. Por ejemplo, la terapia combinada de una formulación de BO-11X y uno o más agentes inmunomoduladores puede permitir una dosis menor de la formulación de BO-11X y/o de uno o más agentes inmunomoduladores (por ejemplo, en comparación con la monoterapia) y, por lo tanto, aumentar la ventana terapéutica de cualquiera de los agentes. En algunas realizaciones, la dosis reducida mitiga uno o más efectos secundarios sin (o con una mínima) pérdida de eficacia. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X y/o el agente inmunomodulador se utilizan para tratar a un sujeto que tiene un cáncer refractario al tratamiento. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se utiliza para tratar a un sujeto que es refractario a uno o más agentes inmunomoduladores, en particular el que se combina realmente con la formulación de BO-11X.
En algunas realizaciones (véase también el Ejemplo 3), el sujeto es refractario a un agente PD-1 y/o PD-L1 y/o PD-L2, incluyendo, por ejemplo, nivolumab (ONO-4538/BMS-936558, MDX1106 u OPDIVO), pembrolizumab (KEYTRUDA), pidilizumab (CT-011), MK-3475, BMS-936559, Ibrutinib y/o pacientes refractarios a MPDL328OA. Por ejemplo, en algunas realizaciones, el sujeto es refractario a un agente anti-CTLA-4, por ejemplo, pacientes refractarios a ipilimumab (Yervoy) (por ejemplo, pacientes con melanoma). En algunas realizaciones, el sujeto es refractario a una formulación de BO-11X. En consecuencia, en algunas realizaciones la presente divulgación proporciona composiciones para su uso en el tratamiento del cáncer que rescatan a los pacientes que no responden a diversas terapias, incluyendo la monoterapia de una formulación de BO-11X o uno o más agentes inmunomoduladores.
En particular, ciertos tipos de cáncer pueden ser seleccionados para el tratamiento con una formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm) de acuerdo con su sensibilidad a la inmunoterapia, tal como por ejemplo con un anticuerpo anti-PD1, anti-PD-L1 o anti-CTLA4. Estos cánceres incluyen el melanoma, el cáncer de pulmón de células no pequeñas, el cáncer de cabeza y cuello, el cáncer de células renales, el cáncer de vejiga, el carcinoma hepatocelular y el linfoma de Hodgkin. Alternativamente, una formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm) puede administrarse para tratar tipos de cáncer que no han demostrado previamente ninguna sensibilidad a la inmunoterapia, tales como el cáncer de próstata, el cáncer de mama, el cáncer colorrectal o subtipos de estos cánceres que, por ejemplo, tienen una alta carga mutacional (o inestabilidad de microsatélites), tal como los que presentan JAK, Po l E u otras mutaciones detectadas por la secuencia de genes y/o perfiles de expresión que afectan a la respuesta al interferón, en particular al interferón gamma, como se informa en la literatura (Ayers M et al. 2017; Budczies J et al., 2016; Gong J et al. 2017; Shin DS et al., 2017; Zaretsky JM et al. 2016). En general, la formulación de BO-11X también puede combinarse con los ARNmi, (u otras moléculas de ARN no codificantes que actúan como inhibidores o moduladores de la expresión de genes específicos, tales como ARNi ARNhc, o ARNpi; Ling H, 2016; Larsson M et al., 2017), ARNm (es decir, ARN que codifica proteínas cuando se introduce en las células), o cualquier otro fármaco con base en ARN, en el que una formulación de BO-11X, tal como la formulación de BO-112, puede mejorar la entrega, la actividad y/o la estabilidad del ARN (por ejemplo, ARNm para silenciar la IDO, el TGFbeta o el ligando NKG2D) mediante este procedimiento combinado o de coadministración. Las combinaciones sinérgicas de la formulación de BO-112 con mecanismos de acción complementarios incluirían fármacos diseñados para reducir la inmunosupresión y el agotamiento de las células T, para potenciar la activación de las células T o para aumentar el número de células T específicas del tumor. Estos fármacos pueden dirigirse a las células tumorales, a las células T o a otras células del microentorno tumoral e incluyen moléculas tal como mAbs inmunomoduladores (CTLA4, PD1 o PDL1, LAG3, TIM3, CD137, OX40, GITR, CD40, CD25), citoquinas activadoras (IL2, IL12), otros mAbs neutralizantes (TGFbeta, IDO1, IL10, ligando NKG2d), células T CAR o vacunas contra el antígeno del cáncer. Los datos actuales también apoyan la combinación con agentes dirigidos a las Tregs y fármacos implicados (y dirigidos) a la reparación y/o replicación del ADN.
En algunas realizaciones, los términos "paciente" y "sujeto" se utilizan indistintamente. En algunas realizaciones, el sujeto y/o el animal es un mamífero, por ejemplo, un humano, un ratón, una rata, una cobaya, un perro, un gato, un caballo, una vaca, un cerdo, un conejo, una oveja, o un primate no humano, tal como un mono (por ejemplo, un babuino) o un chimpancé.
En algunas realizaciones, las composiciones de la divulgación son útiles en el tratamiento de un sujeto humano. En
algunas realizaciones, el humano es un humano pediátrico. En otras realizaciones, el humano es un humano adulto. En otras realizaciones, el humano es un humano geriátrico. En otras realizaciones, el ser humano puede denominarse paciente o sujeto. En algunas realizaciones, el humano es una mujer. En algunas realizaciones, el humano es un hombre.
Regímenes de administración y terapias combinadas
En una realización, la presente divulgación se refiere a una composición de BO-11X (o una composición de BO-11Xm), preferentemente una composición de BO-112 (o una composición de BO-112m), como se define en el presente documento, para su uso en el tratamiento del cáncer, que comprende los siguientes pasos:
(i) administrar a dicho sujeto (paciente) al menos un tratamiento con dicha composición o dicha formulación; seguido de
(ii) un seguimiento (análisis) de las condiciones médicas de dicho sujeto (paciente) y/o un seguimiento de la expresión genética dentro de las células tumorales, cancerosas y/o inmunitarias del mismo; junto con o seguido de
(iii) evaluación de (a) infiltrados celulares dentro de las biopsias tumorales (por ejemplo, células T CD8 y/o positivas para CD4), (b) necrosis y/o apoptosis de las células cancerosas en las biopsias tumorales, o (c) aumento/disminución de las células inmunitarias circulantes en sangre.
Este enfoque es útil para evaluar la administración de una formulación de BO-11X como BO-112, y puede desarrollarse aún más de acuerdo con las tecnologías disponibles, por ejemplo, en relación con la obtención de imágenes para evaluar la carga y/o la respuesta del tumor (véase también el Ejemplo 3).
En otras realizaciones, tal como las resumidas en las Figuras 14 y 15, la presente divulgación se refiere a:
(i) una composición de BO-11X (o una composición de BO-11Xm), preferentemente una composición de BO-112 (o una composición de BO-112m), según se define en el presente documento, o
(ii) una formulación obtenible tratando una célula o tejido de un sujeto (paciente) ex vivo con una composición de BO-11x (o una composición de BO-11Xm), preferentemente una composición de BO-112 (o una composición de BO-11Xm), como se define en el presente documento,
para su uso en el tratamiento del cáncer, en el que dicha composición se administra a dicho sujeto (paciente) de acuerdo con un procedimiento que comprende los siguientes pasos:
(i) al menos un tratamiento con dicha composición o formulación; seguido de
(ii) un seguimiento (análisis) de las condiciones médicas de dicho sujeto (paciente) y/o un seguimiento de la expresión génica dentro del tumor, el cáncer y/o las células inmunitarias del mismo y/o la evaluación de (ii,a) los infiltrados celulares dentro de las biopsias tumorales (por ejemplo, células T CD8 y/o positivas para CD4), (ii,b) la necrosis y/o apoptosis de las células cancerosas en las biopsias tumorales, o (ii,c) el aumento/disminución de las células inmunitarias circulantes en sangre; junto con o seguido de
(iii) al menos un tratamiento con dicha composición, y/o dicha formulación y/o un protocolo de atención estándar y/o un fármaco o tratamiento anticanceroso (ya aprobado o dentro de un protocolo de estudio clínico) contra el que el sujeto (paciente) era resistente, no respondía o respondía mal, en el que el tratamiento con dicha composición, y/o dicha formulación en el paso (i) y en el paso (iii) puede realizarse utilizando la misma o diferente dosis, medios de administración (intratumoral o subcutánea/intramuscular), o régimen. Más preferentemente, el tratamiento estándar, el fármaco en desarrollo clínico u otro tratamiento contra el que el sujeto (paciente) era resistente, no respondía o respondía mal es la radioterapia, la quimioterapia, la terapia anti-PD-1/PD-L1 (u otro inhibidor del punto de control inmunitario), la vacunación con base en antígenos del cáncer o la terapia basada en células (incluyendo la terapia T CAR). Preferentemente, la expresión génica implica la expresión de ARNm y/o proteínas de conjuntos específicos de proteínas.
Así, la presente invención se refiere a una composición de BO-11X (o una composición de BO-11Xm), preferentemente una composición de BO-112, como se reivindica, para su uso en el tratamiento del cáncer, en la que dicha composición se administra a un sujeto (paciente) de acuerdo con un régimen de administración que comprende
(I) al menos una primera inyección intratumoral de dicha composición; y
(II) al menos una segunda inyección subcutánea o intramuscular de dicha composición,
en la que dicha al menos una inyección intratumoral se administra antes de dicha al menos una inyección subcutánea o intramuscular.
Alternativamente, y no de acuerdo con la invención, el régimen de administración para una composición de BO-11X (o una composición de BO-11Xm) puede comprender:
(i) al menos una primera inyección intratumoral en una primera lesión; y
(ii) al menos una segunda inyección intratumoral en la misma lesión o, si ya no está presente, en una o más lesiones adicionales.
Preferentemente, en la composición de uso, dicha inyección intratumoral posterior se realiza al menos 24 horas después de dicha al menos una inyección intratumoral, aún más preferentemente al menos 48 horas después de haber realizado de dos a cuatro inyecciones intratumorales, aún más preferentemente al menos una semana después de haber realizado cuatro inyecciones intratumorales. Aún más preferentemente, en la composición de uso, la administración de dicha al menos una inyección intratumoral se repite a intervalos de tiempo iguales o diferentes.
Estos regímenes de administración también pueden incluir la administración de una composición de BO-11X (o una composición de BO-11Xm):
(a) antes o después de administrar un segundo agente terapéutico, siendo dicho segundo agente terapéutico administrado por inyección intratumoral o peritumoral en la misma y/o otras lesiones, por inyección subcutánea, o por inyección intramuscular;
(b) después de determinar si el sujeto es resistente, insensible o responde mal (o no responde) a dicho segundo agente terapéutico;
(c) y luego se administra dicho segundo agente terapéutico a un sujeto después de determinar si, tras la administración de la composición de BO-11X (o una composición de BO-11Xm), hay un aumento estadísticamente significativo del número de células inmunitarias circulantes y/o un cambio en la expresión de cualquiera de los genes de la Tabla I (véase el Ejemplo 4).
Con respecto a las realizaciones (b) y (c) anteriores, el segundo agente terapéutico se selecciona preferentemente entre anti-CTLA4, anti-PD1, anti-PDL1, las células T CAR, las vacunas contra el antígeno del cáncer o los agentes dirigidos a las células T reguladoras, las enzimas metabólicas, la reparación y/o replicación del ADN o una proteína expresada por cualquiera de los genes de la Tabla I.
La invención se relaciona además con la composición de BO-11X (o la composición de BO-11Xm), como se reivindica, para su uso en un régimen de administración como se reivindica que implica el tratamiento ex vivo de células con dicha composición. En este caso, la composición de BO-11X (o una composición de BO-11Xm) es para su uso como medicamento en el tratamiento al cáncer administrándolo a un sujeto de acuerdo con un régimen de administración que comprende:
(i) obtención de células del sujeto;
(ii) poner en contacto dichas células con dicha composición ex vivo; y
(iii) La administración de dichas células al sujeto.
Más preferentemente, en la composición de uso divulgada, dicha al menos una (o cualquier segunda u otra adicional) inyección intratumoral, peritumoral, subcutánea o intramuscular se realiza al menos 24 horas después de dicha al menos una (o primera) inyección intratumoral, aún más preferentemente al menos 48 horas después de haber realizado de dos a cuatro inyecciones intratumorales, aún más preferentemente al menos una semana después de haber realizado cuatro inyecciones intratumorales. Aún más preferentemente, en la composición de uso divulgada, la administración de dicha al menos una inyección intratumoral se repite a intervalos de tiempo iguales o diferentes. Preferentemente, la administración de la al menos una inyección subcutánea se repite a intervalos de tiempo iguales o diferentes y/o la inyección intramuscular se repite a intervalos de tiempo iguales o diferentes. Mucho más preferentemente, en la composición de uso, la composición administrada en la al menos una inyección subcutánea o intramuscular comprende la misma o menor cantidad de ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] que en la al menos una inyección intratumoral.
En algunas realizaciones, la presente divulgación proporciona regímenes específicos de tratamiento del cáncer con formulaciones de BO-11X (o una composición de BO-11Xm), y un segundo agente inmunomodulador (y opcionalmente uno o más agentes terapéuticos adicionales). Por ejemplo, en algunas realizaciones, la formulación de BO-11X, por ejemplo, BO-112, puede administrarse a un paciente primero para normalizar la vascularización del tumor, opcionalmente reduciendo o ablando la hipoxia. Alternativamente, dicha primera administración de la formulación de BO-11X, por ejemplo, BO-112, puede estimular y/o aumentar los linfocitos T (por ejemplo, células T CD4+ y CD8+) y/o células NK tumorales y/o inhibir y/o disminuir el reclutamiento de células inmunosupresorasf por ejemplo, células supresoras derivadas de los mieloides (MDSC), células T reguladoras (Treg); neutrófilos asociados al tumor (TAN), macrófagos M2 y macrófagos asociados al tumor (TAM) al tumor. En algunas realizaciones, las presentes terapias pueden alterar la relación de macrófagos M1 frente a M2 en el lugar del tumor para favorecer los macrófagos M1. Las formulaciones de BO-11X, en algunas realizaciones, pueden inducir una normalización vascular duradera (es decir, mayor que la transitoria). Por ejemplo, la normalización vascular de la formulación de BO-11X puede durar más de 1, o 2, o 3, o 4, o 5, o 6, o 7, o 14 días, o 21 días. En consecuencia, en algunas realizaciones, esta normalización vascular duradera de la formulación de BO-11X (o, en general, los cambios en las células inmunitarias que se infiltran en el tumor o que circulan en el torrente sanguíneo) puede permitir un microambiente tumoral permisivo sostenible que es más probable que responda a uno o más agentes inmunomoduladores. Es decir, en algunas realizaciones, la formulación de BO-11X puede potenciar, rescatar o sensibilizar hacia una terapia inmunomoduladora.
Alternativamente, las formulaciones de BO-11X (o las composiciones de BO-11Xm, por ejemplo, BO-112 o BO-112m) se administran a un paciente antes o después de iniciar el tratamiento con uno o más agentes inmunomoduladores. Por ejemplo, en algunas realizaciones, el agente inmunomodulador se dirige a una o más moléculas coinhibidoras y reduce o elimina la inmunosupresión. En este contexto favorable, es decir, tras la eliminación de la supresión, las formulaciones de BO-11X (o las composiciones BO-11Xm, por ejemplo, BO-112 o BO-112m) se administran para estimular el sistema inmunitario. Alternativamente, el agente inmunomodulador se dirige a una o más moléculas coestimuladoras en primer lugar y la formulación de BO-11X (o una composición de BO-11Xm, por ejemplo, BO-112 o BO-112m) se administra en segundo lugar para reforzar este efecto, por ejemplo, de forma sinérgica.
Además, como se describe en el presente documento, la formulación de BO-11X y/o el agente inmunomodulador pueden combinarse con un agente terapéutico adicional en el contexto de, por ejemplo, la coadministración, un régimen de tratamiento o una coformulación.
En algunas realizaciones, las formulaciones de BO-11X (o las composiciones BO-11Xm) y/o el agente inmunomodulador, opcionalmente con un agente terapéutico adicional, pueden administrarse secuencialmente. El término "secuencialmente", tal como se utiliza en el presente documento, significa que el agente terapéutico adicional y la formulación de BO-11X y/o el agente inmunomodulador se administran con una separación de tiempo de más de aproximadamente 60 minutos. Por ejemplo, el tiempo entre la administración secuencial del agente terapéutico adicional y la formulación de BO-11X y/o el agente inmunomodulador puede ser de más de aproximadamente 60 minutos, más de aproximadamente 2 horas, más de aproximadamente 5 horas, más de aproximadamente 10 horas, más de aproximadamente 1 día, más de aproximadamente 2 días, más de aproximadamente 3 días o más de aproximadamente 1 semana de diferencia. Los tiempos óptimos de administración pueden depender de las tasas de metabolismo, excreción y/o de la actividad farmacodinámica del agente terapéutico adicional y de la formulación de BO-11X y/o del agente inmunomodulador que se administre. Se puede administrar primero el agente terapéutico adicional o los agentes presentes.
En algunas realizaciones, las formulaciones de BO-11X (o las composiciones BO-11Xm) y/o el agente inmunomodulador, opcionalmente con un agente terapéutico adicional, pueden administrarse simultáneamente. El término "simultáneamente", tal y como se utiliza en el presente documento, significa que el agente terapéutico adicional y la formulación de BO-11X y/o el agente inmunomodulador se administran con una separación temporal de no más de aproximadamente 60 minutos, como por ejemplo no más de aproximadamente 30 minutos, no más de aproximadamente 20 minutos, no más de aproximadamente 10 minutos, no más de aproximadamente 5 minutos o no más de aproximadamente 1 minuto. La administración del agente terapéutico adicional y de la formulación de BO-11X y/o del agente inmunomodulador puede realizarse mediante la administración simultánea de una única formulación ( por ejemplo, una formulación que comprenda el agente terapéutico adicional y la formulación de BO-11X y/o el agente inmunomodulador) o de formulaciones separadas (por ejemplo, una primera formulación que incluya el agente terapéutico adicional y una segunda formulación que incluya la formulación de BO-11X y/o el agente inmunomodulador).
La coadministración tampoco requiere que los agentes terapéuticos adicionales se administren al sujeto por la misma vía de administración. Más bien, cada agente terapéutico puede ser administrado por cualquier vía apropiada, por ejemplo, por vía parenteral o no parenteral.
Tal combinación puede conducir a un sinergismo y/o efectos aditivos y/o potentes a una dosis más baja de la formulación de BO-11X (o una composición de BO-11Xm) y/o del agente inmunomodulador. Por ejemplo, cuando la formulación de BO-11X se combina con uno o más agentes inmunomoduladores, la cantidad efectiva de la formulación de BO-11X puede ser inferior a la que sería en una monoterapia. En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X se combina con un agente inmunomodulador y la cantidad efectiva de la formulación de BO-11X es una dosis subterapéutica, por ejemplo, cuando el agente inmunomodulador se combina con una formulación de BO-11X, la cantidad efectiva del agente inmunomodulador puede ser menor de lo que sería en una monoterapia. En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador se combina con una formulación de BO-11X y la cantidad efectiva del agente inmunomodulador es una dosis subterránea. En algunas realizaciones, el agente inmunomodulador se combina con una formulación de BO-11X y un agente terapéutico adicional y la cantidad efectiva del agente terapéutico adicional es una dosis subterránea. El término "dosis o cantidad subterapéutica" significa que una dosis o cantidad de una sustancia farmacológicamente activa es inferior a la dosis o cantidad de esa sustancia que se administra, como única sustancia, para lograr un efecto terapéutico. La dosis subterapéutica de dicha sustancia puede variar dependiendo del sujeto y de la enfermedad que se trate, del peso y la edad del sujeto, de la gravedad de la enfermedad, de la forma de administración y de otros factores similares, que pueden ser fácilmente determinados por un experto en la técnica. En una realización, la dosis o cantidad subterapéutica del agente quimioterapéutico es inferior al 90 % de la dosis completa aprobada del agente quimioterapéutico, tal como la proporcionada en la información de la etiqueta aprobada por la U.S. Food & Drug Administration para el agente quimioterapéutico. En otras realizaciones, la dosis o cantidad subterapéutica del agente quimioterapéutico es inferior al 80 %, 70 %, 60 %, 50 %, 40 %, 30 %, 20 % o incluso 10 % de la dosis completa aprobada, tal como por ejemplo de 20 % a 90 %, 30 % a 80 %, 40 % a 70 % u otro intervalo dentro de los valores previstos en el presente documento.
En algunas realizaciones, la cantidad efectiva del agente inmunomodulador es menor que una cantidad efectiva utilizada en monoterapia para el mismo cáncer y/o una terapia de combinación con un agente además de una formulación de BO-11X para el mismo cáncer. En algunas realizaciones, la cantidad efectiva de la formulación de BO-11X es menor que una cantidad efectiva utilizada en monoterapia para el mismo cáncer o estado clínico, y/o una terapia de combinación con un agente (tal como un agente inmunomodulador) para el mismo cáncer o estado clínico.
En algunas realizaciones, la formulación de BO-11X (o una composición de BO-11Xm) se combina con uno o más agentes inmunomoduladores(por ejemplo, 1, o 2, o 3, o 4, o 5 agentes inmunomoduladores) y, opcionalmente, uno o más agentes terapéuticos adicionales (por ejemplo, 1, o 2, o 3, o 4, o 5 agentes terapéuticos adicionales). Dichas combinaciones pueden dar lugar a efectos sinérgicos y/o aditivos y/o potentes a una dosis menor de la formulación de BO-11X y/o del agente inmunomodulador y/o el uno o más agentes terapéuticos adicionales. La coadministración puede ser simultánea o secuencial. Además, las composiciones farmacéuticas que incluyen la formulación de BO-11X y/o el agente inmunomodulador pueden comprender el agente terapéutico adicional(por ejemplo, mediante la coformulación). Es decir, en algunas realizaciones, se pueden coformular dos o más de cualquiera de los agentes divulgados en el presente documento. Además, en algunas realizaciones, la formulación de BO-11X y/o el agente inmunomodulador pueden administrarse a un paciente que esté en tratamiento con uno o más agentes terapéuticos adicionales. Además, en algunas realizaciones, la formulación de BO-11X y/o el agente inmunomodulador pueden sustituir el tratamiento actual de un paciente con uno o más agentes terapéuticos adicionales. La terapia adyuvante, también llamada atención adyuvante, es un tratamiento que se administra además del tratamiento primario, principal o inicial. A modo de ejemplo no limitativo, la terapia adyuvante puede ser un tratamiento adicional que se suele administrar después de la cirugía cuando se ha eliminado toda la enfermedad detectable, pero cuando sigue habiendo un riesgo estadístico de recaída debido a la enfermedad oculta. En algunas realizaciones, los agentes descritos en el presente documento se utilizan como terapia adyuvante en el tratamiento de un cáncer. En algunas realizaciones, los agentes terapéuticos descritos en el presente documentos se administran como terapia neoadyuvante antes de la resección. En ciertas realizaciones, la terapia neoadyuvante se refiere a la terapia para reducir el tamaño del tumor y/o degradarlo antes de cualquier cirugía. En algunas realizaciones, la terapia neoadyuvante significa que un agente terapéutico descrito en el presente documento se administra a pacientes con cáncer antes de la cirugía u otra técnica que permita la ablación del tumor.
En algunas realizaciones, los agentes terapéuticos descritos en el presente documento son útiles como terapia de mantenimiento después de un tratamiento inicial con una terapia de primera línea, incluyendo sin limitación cualquiera de los agentes terapéuticos adicionales de la presente divulgación.
En algunas realizaciones, la presente divulgación proporciona una formulación de BO-11X y/o un agente inmunomodulador y uno o más de los agentes terapéuticos adicionales descritos en el presente documento para su uso en un régimen de tratamiento para tratar el cáncer o los tumores en un sujeto que incluye la administración simultánea o secuencial de una cantidad terapéuticamente eficaz de dicha formulación de BO-11X y/o un agente inmunomodulador y uno o más de los agentes terapéuticos adicionales descritos en el presente documento. En algunas realizaciones, la presente divulgación proporciona una formulación de BO-11X y/o un agente inmunomodulador y uno o más de los agentes anticancerígenos descritos en el presente documento para su uso en un régimen de tratamiento para tratar el cáncer o los tumores en un sujeto que incluye la administración simultánea o secuencial de una cantidad terapéuticamente eficaz de dicha formulación de BO-11X y/o un agente inmunomodulador y uno o más de los agentes anticancerígenos descritos en el presente documento, incluyendo pero sin limitarse a agentes quimioterapéuticos. Los agentes quimioterapéuticos adecuados para su uso en los procedimientos divulgados pueden incluir los descritos en el presente documento. En ciertas realizaciones, el agente quimioterapéutico es uno o más de 5-fluorouracilo (5-FU), doxorrubicina, gemcitabina, paclitaxel y cisplatino. A modo de ejemplo, en algunas realizaciones, la presente divulgación proporciona la combinación de una formulación de BO-11X y/o un agente inmunomodulador con uno o más regímenes comunes de tratamiento del cáncer (a modo de ilustración no limitante, FOLFOX, FOLFIRI, IFL, FL (Mayo), QUASAR, esquema de Machover, CAF, CMF, ECF y FEC).
En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional es un agente antihiperproliferativo. Los agentes antihiperproliferativos incluyen, pero no se limitan a, doxorrubicina, daunorrubicina, mitomicina, actinomicina D, bleomicina, cisplatino, VP16, enedyina, taxol, vincristina, vinblastina, carmustina, melfalán, ciclofosfamida, clorambucil, busulfán, lomustina, 5-fluorouracilo, gemcitabina, BCNU o camptotecina.
Además, el agente terapéutico adicional puede incluir el uso de radiación. Además, la terapia fotodinámica puede utilizarse también en los procedimientos de tratamiento divulgados.
Sales, composiciones farmacéuticas y dosis
En algunas realizaciones, la presente divulgación proporciona la formulación, las composiciones (donde formulación y composición se utilizan indistintamente en la presente divulgación), y los agentes descritos en el presente documento y los ésteres, profármacos, sales, solvatos, enantiómeros, estereoisómeros, metabolitos activos y cocristales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
En un aspecto, la presente divulgación proporciona agentes descritos en el presente documento y un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica puede presentarse en cualquier forma adecuada para el uso y la vía de administración deseados. Los excipientes farmacéuticos pueden ser líquidos, tales como el agua y los aceites, incluyendo los de origen petrolero, animal, vegetal o sintético, tales como el aceite de cacahuete, el aceite de soja, el aceite mineral, el aceite de sésamo y similares. Los excipientes farmacéuticos pueden ser, por ejemplo, solución salina, goma acacia, gelatina, pasta de almidón, talco, queratina, sílice coloidal, urea y similares. En una realización, los excipientes farmacéuticamente aceptables son estériles cuando se administran a un sujeto. El agua es un excipiente útil cuando cualquier agente descrito en el presente documento se administra por vía intravenosa. Las soluciones salinas y las soluciones acuosas de dextrosa y glicerol también pueden emplearse como excipientes líquidos, específicamente para soluciones inyectables. Entre los excipientes farmacéuticos adecuados se encuentran también el almidón, la glucosa, la lactosa, la sacarosa, la gelatina, la malta, el arroz, la harina, la tiza, el gel de sílice, el estearato de sodio, el monoestearato de glicerol, el talco, el cloruro de sodio, la leche desnatada en polvo, el glicerol, el propileno, el glicol, el agua, el etanol y similares. Otros ejemplos de excipientes farmacéuticos adecuados se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences (editado por Allen, Loyd V., Jr; 22a edición, 2012).
Además, las composiciones o formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden contener adyuvantes tales como conservantes, agentes humectantes, agentes emulsionantes, agentes de tampón del pH y agentes dispersantes. Además, pueden incluirse agentes auxiliares, estabilizadores, espesantes, lubricantes y colorantes. La prevención de la acción de los microorganismos puede garantizarse mediante la inclusión de diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabeno, clorobutanol, ácido fenólico y similares. Las composiciones farmacéuticas también pueden incluir agentes isotónicos tal como azúcares, cloruro de sodio y similares. Cuando sea necesario, las composiciones farmacéuticas pueden incluir también un agente solubilizante. Además, los agentes pueden ser entregados con un vehículo adecuado o un dispositivo de entrega como se conoce en la técnica. Las composiciones para la administración pueden incluir opcionalmente un anestésico local tal como, por ejemplo, lidocaína para disminuir el dolor en el lugar de la inyección.
Las composiciones o formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden adoptar la forma de soluciones, suspensiones, emulsiones, gotas, comprimidos, píldoras, gránulos, cápsulas, cápsulas que contienen líquidos, polvos, formulaciones de liberación sostenida, supositorios, emulsiones, aerosoles, aerosoles, suspensiones o cualquier otra forma adecuada para su uso. Así, la composición descrita en el presente documento puede estar comprendida en una cápsula, tableta, píldora, cápsula, frasco, ampolla, sobre, jeringa, cartucho, nebulizador u otro recipiente. La composición farmacéutica puede presentarse en forma de cápsula. La composición farmacéutica puede tener la forma de un comprimido.
La administración de cualquiera de los agentes y composiciones descritos puede ser cualquiera de las vías oral, intravenosa y parenteral. Las vías de administración incluyen, por ejemplo: oral, intradérmica, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, subcutánea, intranasal, epidural, sublingual, intranasal, intracerebral, intrahepática, intrapancreática, intravesicular, intravaginal, transdérmica, rectal, por inhalación o tópica, por ejemplo, en los oídos, la nariz, los ojos o la piel. La administración puede realizarse por vía oral o por inyección parenteral. El modo de administración puede dejarse a la discreción del profesional, y depende en parte del lugar de la enfermedad y/o de los tratamientos concurrentes (siendo, por ejemplo, quimioterapia, radioterapia, o en combinación con anticuerpos, vacunas y otros fármacos dirigidos al cáncer). En algunas realizaciones, la administración da lugar a la liberación de cualquier agente descrito en el presente documento en el torrente sanguíneo.
Cualquier agente, composición farmacéutica y/o formulación descrita en el presente documento puede administrarse por vía oral. Dichos agentes y/o composiciones farmacéuticas también pueden administrarse por cualquier otra vía conveniente, por ejemplo, por infusión intravenosa o inyección en bolo, por absorción a través de revestimientos epiteliales o mucocutáneos (por ejemplo, mucosa oral, rectal e intestinal, etc.) y pueden administrarse junto con un agente terapéutico adicional. La administración puede ser sistémica o local. Se conocen diversos sistemas de administración, por ejemplo, la encapsulación en liposomas, micropartículas, microcápsulas, cápsulas, etc.., y pueden utilizarse. En determinadas realizaciones, puede ser deseable administrar localmente en la zona que necesita tratamiento.
Un agente descrito en el presente documento y/o la composición farmacéutica y/o las formulaciones descritas en el presente documento pueden formularse de acuerdo con los procedimientos habituales tal como una composición adaptada para la administración oral a los seres humanos. Las formas farmacéuticas sólidas para la administración oral incluyen, por ejemplo, cápsulas, tabletas, píldoras, polvos y gránulos. En estas formas de dosificación, el agente activo se mezcla con al menos un excipiente o portador inerte, farmacéuticamente aceptable, tal como citrato de sodio, fosfato dicálcico, etc., y/o a) cargas o extensores tales como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol, ácido silícico, celulosa microcristalina y azúcar especial para panaderos, etc., b) aglutinantes tales como, por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, etc., c) humectantes tales como glicerol, etc, d) agentes desintegradores tales como el agar-agar, el carbonato de calcio, el almidón de patata o de tapioca, el ácido algínico, ciertos silicatos, el carbonato de sodio, los polímeros entrecruzados tales como la crospovidona (polivinilpirrolidona entrecruzada), la croscarmelosa sódica (carboximetilcelulosa sódica reticulada), el almidón glicolato de sodio, etc., e) agentes retardadores de la solución como la parafina, etc., f) aceleradores de la absorción, tales como los agentes de amonio cuaternario, etc., g) agentes humectantes, tales como, por ejemplo, el alcohol cetílico y el monoestearato de
glicerol, etc., h) absorbentes, tales como el caolín y la arcilla bentonita, etc., e i) lubricantes, tales como el talco, el estearato de calcio, el estearato de magnesio, los polietilenglicoles sólidos, el laurilsulfato de sodio, el behenato de glicerilo, etc., y las mezclas de dichos excipientes. Un experto en la técnica reconocerá que determinados excipientes pueden tener dos o más funciones en la forma farmacéutica oral. En el caso de una forma de dosificación oral, por ejemplo, una cápsula o un comprimido, la forma de dosificación también puede comprender agentes amortiguadores.
Las formas de dosificación líquida para la administración oral incluyen emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmacéuticamente aceptables. Además de los agentes activos, las formas farmacéuticas líquidas pueden contener diluyentes inertes comúnmente utilizados en la técnica, tales como, por ejemplo, agua u otros disolventes, agentes solubilizantes y emulsionantes tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilenglicol, dimetilformamida, aceites (en particular, aceites de semilla de algodón, de cacahuete, de maíz, de germen, de oliva, de ricino y de sésamo), glicerol, alcohol tetrahidrofurfurílico, polietilenglicoles y ésteres de ácidos grasos de sorbitán, y mezclas de los mismos. Las formas de dosificación adecuadas para la administración parenteral (porejemplo, inyección e infusión intravenosa, intramuscular, intrahepática, intrapancreática, intraperitoneal, subcutánea e intraarticular) incluyen, por ejemplo, soluciones, suspensiones, dispersiones, emulsiones y similares. También pueden fabricarse en forma de composiciones sólidas estériles(por ejemplo, composición liofilizada), que pueden disolverse o suspenderse en un medio inyectable estéril inmediatamente antes de su uso. Pueden contener, por ejemplo, agentes de suspensión o dispersión conocidos en la técnica. Las composiciones farmacéuticas de la presente divulgación para inyección parenteral comprenden soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones estériles acuosas o no acuosas farmacéuticamente aceptables, así como polvos estériles para su reconstitución en soluciones o dispersiones inyectables estériles justo antes de su uso. Entre los ejemplos de portadores, diluyentes, disolventes o vehículos acuosos y no acuosos adecuados se encuentran el agua, el etanol, los polioles (tales como el glicerol, el propilenglicol, el polietilenglicol y similares) y las mezclas adecuadas de los mismos, los aceites vegetales (tales como el aceite de oliva) y los ésteres orgánicos inyectables, tales como el oleato de etilo. La fluidez adecuada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de materiales de recubrimiento tales como la lecitina, el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de las dispersiones y el uso de tensioactivos. En la presente invención, la composición se administra como se reivindica.
Cualquier agente descrito en el presente documento y/o composición farmacéutica descrita en el presente documento puede ser administrado por medios de liberación controlada o sostenida o por dispositivos de entrega que son conocidos por aquellos de habilidad ordinaria en la técnica. Tales formas de dosificación pueden ser útiles para proporcionar una liberación controlada o sostenida de uno o más ingredientes activos utilizando, por ejemplo, hidropropilcelulosa, hidropropilmetilcelulosa, polivinilpirrolidona, Eudragit, otras matrices poliméricas, geles, membranas permeables, sistemas osmóticos, recubrimientos multicapa, micropartículas, liposomas, microesferas o una combinación de los mismos para proporcionar el perfil de liberación deseado en proporciones variables. Pueden seleccionarse fácilmente formulaciones adecuadas de liberación controlada o sostenida para su uso con los ingredientes activos de los agentes descritos en el presente documento. La divulgación proporciona, por tanto, formas de dosificación unitarias adecuadas para la administración oral tales como, por ejemplo, comprimidos, cápsulas, cápsulas de gel y cápsulas adaptadas para la liberación controlada o sostenida.
Las formulaciones que comprenden los agentes descritos en el presente documento y/o las composiciones farmacéuticas pueden presentarse convenientemente en formas de dosificación unitarias y pueden prepararse por cualquiera de los procedimientos conocidos en la técnica de los fármacos Tales procedimientos incluyen generalmente el paso de poner los agentes terapéuticos en asociación con un portador, que constituye uno o más ingredientes accesorios. Típicamente, las formulaciones se preparan asociando de manera uniforme e íntima el agente terapéutico con un portador líquido, un portador sólido finamente dividido, o ambos, y luego, si es necesario, dando forma al producto en formas de dosificación de la formulación deseada(por ejemplo, granulación húmeda o seca, mezclas de polvos, etc., seguidas por el tableteado utilizando procedimientos convencionales conocidos en la técnica).
Se apreciará que la dosis real de los agentes descritos en el presente documento y/o las composiciones farmacéuticas de la presente divulgación que se administrarán de acuerdo con la presente divulgación pueden variar de acuerdo con el agente particular, la forma de dosificación particular y el modo de administración. Los expertos en la técnica pueden tener en cuenta muchos factores que pueden modificar la acción de las formulaciones de BO-11X (por ejemplo, el peso corporal, el sexo, la dieta, el tiempo de administración, la vía de administración, la tasa de excreción, el estado del sujeto, las combinaciones de fármacos, la disposición genética y las sensibilidades a las reacciones). La administración puede realizarse de forma continua o en una o más dosis discretas dentro de la dosis máxima tolerada. Los expertos en la técnica pueden determinar las tasas de administración óptimas para una serie de condiciones dadas utilizando pruebas convencionales de administración de dosificación.
Las dosis individuales de los agentes descritos en el presente documento y/o las composiciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden administrarse en formas de dosificación unitarias (por ejemplo, comprimidos o cápsulas) que contengan, por ejemplo, desde aproximadamente 0,01 mg hasta aproximadamente 1.000 mg de moléculas de poli(I:C) dentro de la formulación de BO-11X o la formulación de BO-11Xm, por ejemplo en la que dicha formulación individual de BO-11X está formada por un complejo de aproximadamente 0,01 mg a aproximadamente 10 mg de poli(I:C)] preferentemente de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 2,5 mg de poli(I:C), más preferentemente de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 2 mg de poli(I:C), incluyendo todos los valores e intervalos entre ellos.
En algunas realizaciones, los agentes descritos en el presente documento y/o las composiciones farmacéuticas de la presente divulgación se administran en una cantidad de aproximadamente 0,01 mg a aproximadamente 1.000 mg de moléculas de poli(I:C) dentro de la formulación de BO-11X diaria, o de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 10 mg diarios [por ejemplo, en la que dicha formulación de BO-11X diaria individual se forma haciendo un complejo de aproximadamente 0,01 mg a aproximadamente 1.000 mg, preferentemente de aproximadamente 0,01 mg a 10 mg de poli(I:C)], incluidos todos los valores e intervalos entre ellos.
En algunas realizaciones, una dosificación adecuada de los agentes y/o composiciones farmacéuticas de la presente divulgación se encuentra en un intervalo de aproximadamente 0,001 a aproximadamente 10 mg de moléculas de poli(I:C) dentro de la formulación de BO-11X/kg de peso corporal del sujeto, preferentemente 0.003 a aproximadamente 10 mg de moléculas de poli(I:C) dentro de la formulación de BO-11X o BO-11Xm (calculado con respecto a un sujeto o, si es necesario, calculado con respecto al peso corporal del sujeto), más preferentemente de 0,005 a aproximadamente 10 mg de moléculas de poli(I:C) dentro de la formulación de BO-11X/kg de peso corporal del sujeto y aún más preferentemente de 0.01 a aproximadamente 10 mg de moléculas de poli(I:C) dentro de la formulación de BO-11X por kg de peso corporal del sujeto [por ejemplo, cuando dicha formulación individual de BO-11X administrada está formada por un complejo de aproximadamente 0,005 mg a aproximadamente 10 mg de poli(I:C)] por kg de peso corporal del sujeto, preferentemente aproximadamente 0,003 mg a aproximadamente 10 mg de poli(I:C)] por kg de peso corporal del sujeto, más preferentemente de aproximadamente 0,001 mg a aproximadamente 10 mg de poli(I:C)] por kg de peso corporal del sujeto, incluidos todos los valores e intervalos entre ellos].
En otras realizaciones, una dosificación adecuada de la formulación de BO-11X y/o del agente inmunomodulador y/o del agente terapéutico adicional está en un intervalo de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal, o en un intervalo de aproximadamente 0,05 mg/kg a aproximadamente 1 mg/kg de peso corporal.
De acuerdo con ciertas realizaciones de la divulgación, los agentes y/o las composiciones farmacéuticas descritas en el presente documento pueden administrarse, por ejemplo, más de una vez al día, aproximadamente una vez al día, aproximadamente cada dos días, aproximadamente cada tres días, aproximadamente una vez a la semana, aproximadamente una vez cada dos semanas, aproximadamente una vez al mes, aproximadamente una vez cada dos meses, aproximadamente una vez cada tres meses, aproximadamente una vez cada seis meses o aproximadamente una vez al año. En una realización, una dosificación adecuada de los agentes y/o composiciones farmacéuticas de la presente divulgación está en un intervalo de 0,1 a 10 mg de moléculas de poli(I:C) dentro de la formulación de BO-11X por sujeto (paciente), preferentemente de 0,5 a 2 mg de moléculas de poli(I:C) dentro de la formulación de BO-11X por sujeto, más preferentemente de 0,6 a 1 mg por sujeto durante un ciclo de tratamientos. En particular, cuando una composición de la presente divulgación se administra por inyección intracutánea o intratumoral, la cantidad total de composición puede adaptarse en consecuencia.
Kits
La divulgación también proporciona kits que pueden simplificar la administración de los agentes y/o composiciones farmacéuticas descritas en el presente documento. El kit es un conjunto de materiales o componentes, que incluye al menos uno de los agentes descritos en el presente documento. La naturaleza exacta de los componentes configurados en el kit depende de su finalidad. En una realización, el kit está configurado para el tratamiento de sujetos humanos.
Las instrucciones de uso pueden estar incluidas en el kit. Las instrucciones de uso suelen incluir una expresión tangible que describe la técnica que debe emplearse para utilizar los componentes del kit con el fin de obtener un resultado deseado, tal como tratar o prevenir, por ejemplo, el cáncer, los trastornos ginecológicos o las infecciones. Opcionalmente, el kit también contiene otros componentes útiles, tales como diluyentes, tampones, portadores farmacéuticamente aceptables, jeringas, catéteres, aplicadores, filtros, (micro)agujas, herramientas de pipeteo o medición, materiales de vendaje u otra parafernalia útil que puede ser fácilmente reconocida por los expertos en la materia. En particular, el kit puede incluir un dispositivo para la administración de fármacos intratumorales o peritumorales más precisos (por ejemplo, guiados por imágenes), dispositivos implantables (o no) de elución de fármacos en formato de matrices (incluyendo estructuras y andamios porosos, biodegradables y/o poliméricos), sistema de encapsulación u otro envase apropiado para uso clínico.
Dado que las composiciones de BO-11X o BO-11Xm pueden utilizarse directamente, en combinación con otros compuestos (por ejemplo, vacunas, fármacos, adyuvantes, etc.), utilizando diferentes vías de administración, y/o implicando la recuperación y el análisis de células o muestras de los pacientes, el kit puede incluir materiales específicos tales como jeringas para inyecciones intratumorales, intramusculares y/o subcutáneas (precargadas o no), vehículo para la dilución, viales para almacenar materiales biológicos de los pacientes, y/o anticuerpos para detectar marcadores celulares específicos.
EJEMPLOS
Ejemplo 1: Caracterización estructural de preparados de poli(I:C) basados en jetPEI (formulaciones de BO-11X) y validación funcional inicial in vitro
Las composiciones y formas de administración que no corresponden a las reivindicadas no son conformes a la invención.
Materiales y procedimientos
Preparación de poli(I:C)
Las moléculas de ácido polinosínico monocatenario [poli(I)] y de ácido policidílico [poli(C)] utilizadas para generar moléculas de ácido polinosínico-policidílico de doble cadena [poli(I:C)] se obtuvieron de proveedores comerciales tales como Tide Group, Carbogen, Hangzhou Fst Pharmaceutical Co, o Invivogen. Dependiendo del proveedor y del lote, la distribución de tamaños para las moléculas de poli(C) se define como <400 bases, 20-82 % (con pruebas adicionales realizadas con preparaciones que presentan, por ejemplo, 33 %, 43 %, 50 %, 70 % o 73 %); 400-850 bases, 15~40 % (con pruebas adicionales realizadas con preparaciones que presentan, por ejemplo, 20 %, 27 %, 30 %, 34 % o 37 %); 850-5000 bases, 3~50 % (con pruebas adicionales realizadas con preparaciones que presentan, por ejemplo, 5 %, 6 %,13 %, 30 % 34 %, 42 % o 48 %); >5000 bases, 1 % o menos (generalmente ausente). Dependiendo del proveedor y del lote, la distribución de tamaños para las moléculas de poli(I) se define como <400 bases, 80-99 % (con pruebas posteriores realizadas con preparados que presentan, por ejemplo, 81 %, 86 %, 91 %, 95 % o 98 %); 400-850 bases, 1-20 % (con pruebas posteriores realizadas con preparados que presentan, por ejemplo, 6 %, 8 %, 12 % o 17 %); 850 5000 bases, 0~5 % (con pruebas posteriores realizadas con preparados que presentan, por ejemplo, 3 %, 1 % o menos); >5000 bases, 1 % o menos (generalmente ausente). Los criterios de aceptación para la fabricación de formulaciones de BO-11X que se aplican al polvo o a las soluciones de poli(I) y poli(C) también incluyen la absorción máxima (a una longitud de onda de 248 ± 1 nm y de 268 ± 1 nm para el poli(I) y el poli(C), respectivamente), el contenido de endotoxinas (< 10 EU/m-), el pH (6,0 - 8,0) y el coeficiente de sedimentación (> 4S).
Se obtuvieron preparaciones de poli(I) por lotes y preparaciones de poli(C), se fusionaron y se purificaron como se describe en el documento PCT/EP2016/078078. Brevemente, las preparaciones de poli(I) y de poli(C) se obtuvieron por separado de la misma manera y a la misma concentración.
Podrían implementarse pasos adicionales de filtración para mejorar aún más la calidad de las soluciones de partida utilizando membranas con un corte de 300 kDa o un corte de 500 kDa (casete Pellicon 2, Millipore). Los permeados de estos pasos de filtración se concentran y se liberan de impurezas de pequeño tamaño, tal como los monómeros, sobre una membrana de 30 kDa (casete Pellicon 2, Millipore). El retentado resultante de cada solución se mezcla con una solución tampón concentrada (tal como PBS 10X). Para ambas soluciones, se determinó la densidad óptica para calcular la concentración como base para una estequiometría 1:1 para el siguiente paso de fusión, ajustando en consecuencia el volumen total antes del paso de fusión.
La solución de poli(I) se mezcla y agita con las moléculas de la solución de poli(C) a 55 - 62 °C durante 30 minutos. La solución resultante se enfría lentamente a temperatura ambiente durante aproximadamente 3 horas para fusionar las moléculas monocatenarias y generar moléculas de poli(I:C), y finalmente se filtra sobre un filtro de poros de vidrio G3 (tamaño de poro de aproximadamente 15 - 40 pm).
Este procedimiento de fusión genera una solución que contiene un conjunto de diferentes moléculas de poli(I:C) de doble cadena que luego se aplica en una columna de GPC cromatográfica. La cromatografía se realiza con una columna de vidrio Omnifit de 5 cm de diámetro que se llenó con una suspensión de 700mlToyopearl HW-65F en tampón de fosfato sódico 40 mM. Se dejó sedimentar lentamente el lodo, seguido de un lavado con tampón fosfato sódico 40 mM (pH = 6,9) a un caudal creciente de 10 ml/min a 60 ml/min. La columna se instaló en un dispositivo de HPLC preparativa compuesto por dos bombas de alimentación, un detector de UV, válvulas de muestreo y un ordenador. La mezcla de reacción de la fusión se cargó en la columna y se eludió con tampón fosfato sódico 40 mM (flujo = 50 ml/min, pH = 6,9). Las fracciones objetivo se tomaron cuando la señal UV estaba entre 100 mV y 1250 mV, y se agruparon para su posterior elaboración mediante cuatro ciclos de desalación de dilución y concentración utilizando un dispositivo de flujo tangencial (TFF, Millipore Pellicon 2, celulosa regenerada, equipado con tres casetes de membrana de 0,1 m2 cada uno, corte de 300 kDa). La entrada y la salida se conectaron al primer frasco de vidrio con las fracciones cromatográficas agrupadas. El retentado final y la solución de lavado se filtraron sobre una membrana para dar una solución clara e incolora que se desaló con isopropanol, se liofilizó y se liofilizó a temperatura ambiente (a 0,1 Mpa durante aproximadamente 5 días). Se puede obtener una preparación de poli(I:C) mediante el siguiente procedimiento ejemplar: la solución de poli(C) se calentó a 61 a 66 °C durante 1,5 h antes de mezclarla con la solución de poli(I) y agitarla a 55 a 58 °C durante 70 minutos, tras lo cual la mezcla se enfrió y se filtró sobre una membrana de 0,2 pm.
Diferentes In vivo-JetPEI comerciales [que tienen un peso molecular medio comprendido entre 8,3 y 22,5 kDa, y un índice de polidispersidad < 1,5, determinado a partir del de PEOX (polietilenoóxido, precursor del PEl) se obtuvieron por cromatografía de permeación en gel (GPC: SOP GPC-0044) y filtrado estérilmente a través de un filtro de 0,2 pm] de PolyPlus (número de catálogo 201-50G). Algunas condiciones aplicables al paso de cromatografía y/o filtración, la ausencia o presencia de una etapa de congelación, junto con el tampón y el tiempo de fusión, se adaptaron para reducir aún más la viscosidad de la solución o la precipitación de los complejos. En la formulación final se utiliza Manitol o Glucosa como excipiente. La solución 1 que contiene JetPEI se obtiene utilizando JetPEI en una preparación líquida
concentrada o solubilizando preparaciones sólidas a granel de JetPEI (que tiene un peso molecular comprendido entre 17 y 23 kDa) en una cantidad de agua estéril para inyección que alcance 150 mM, y mezclando para obtener una solución homogénea. Se realiza un nuevo paso de dilución para alcanzar una concentración de 11,25-11,7 mM, antes de la dilución final a 5,62-5,85 mM en el vial final. La solución 2 contiene moléculas de poli(I:C) y glucosa monohidratada en una cantidad que, tras la mezcla con JetPEI, proporciona una solución que contiene 5 % de glucosa (peso/volumen total de dicha composición) y poli(I:C) a 0,5-0,7 mg/ml del volumen total de dicha composición, por lo que dicho poli(I:C) forma complejos con dicha JetPEI. Las soluciones 1 y 2 se esterilizan de forma independiente mediante una doble filtración a través de filtros de 0,2 pm (Sartopore® 21500,2 pm, totalmente validados como filtros de grado de esterilización (de acuerdo con las directrices de ASTM F-838-05) utilizando una bomba Watson Marlon (velocidad 30 rpm)).
La mezcla automatizada de las dos soluciones se realiza en cada vial mediante un procedimiento secuencial: (i) La solución 1 se añade al vial utilizando una bomba Watson-Marlow para dosificar 5,95 - 6,05 g (6 ml; densidad: 1 g/ml), (ii) se añade la solución 2 sobre la solución 1 utilizando un tubo de 1,8 mm de diámetro interno conectado a una aguja G20-0,9 pm mediante una bomba Flexicon a 550 rpm para dosificar 6,08-6,40 g (6ml). Los resultados pueden mejorarse utilizando un mezclador en T. En el caso de agregados de partículas (por ejemplo, con un tamaño en el intervalo de 1-100 pm o mayor) que pueden estar todavía presentes por inspección visual al final del procedimiento de fabricación (o durante su almacenamiento) debido a las interacciones electrostáticas, el producto puede ser filtrado sobre un filtro de 0,8 pm antes de su uso (por ejemplo, antes de su inyección), sin alterar ni las propiedades biológicas ni la distribución del diámetro monomodal de las partículas dentro de la composición. Por ejemplo, la formulación de BO-112 puede filtrarse a través de un filtro de jeringa Minisart (Sartorious) con un tamaño de exclusión de 0,8 pm. Los viales (que tienen volúmenes variables de formulaciones de BO-112, por ejemplo, 1 ml, 2ml, 5 ml, 10ml o más) se sellan con tapones de goma estériles libres de pirógenos y se engarzan con cápsulas de aluminio y se etiquetan individualmente. Estos viales pueden utilizarse directamente para inyecciones o su contenido puede diluirse en un vehículo apropiado antes de su uso.
El tamaño de las moléculas de poli(I:C) dentro de las preparaciones de BO-11X se determinó y comparó mediante cromatografía o utilizando geles de agarosa y preparaciones de poli(I) y poli(I:C) sin etiquetar o etiquetadas con [32P]. Brevemente, se carga 1 pg de poli(I) y poli(I:C) (PBS) en el gel de agarosa y se realiza la electroforesis durante 1 hora a 80 voltios en tampón TBE. En función de la distribución de tamaños de las moléculas iniciales de poli(C) y poli(I), se determinó también por cromatografía la distribución de tamaños de las moléculas de poli(I:C) presentes en las preparaciones de BO-11X: <400 bases, 7-57 % (con pruebas adicionales realizadas con preparaciones que presentan valores comprendidos entre 10 % y 30 %, por ejemplo, 11 %, 15 %, 17 %, 21 %, 26 % o 28 %); 400-850 bases, 20-45 % (con pruebas adicionales realizadas con preparados que presentan valores comprendidos entre 20 % y 30 %, por ejemplo, 23 %, 25 % o 27 %); 850-5000 bases, 20-70 % (con pruebas adicionales realizadas con preparaciones que presentan valores comprendidos entre 40 % y 60 %, por ejemplo, 42 %, 45 %, 52 %, 53 % o 55 %); >5000 bases, 0-9 % (con pruebas adicionales realizadas con preparaciones que presentan valores comprendidos entre 0 % y 5 %, por ejemplo, 3 %, 1 % o 0 %). Se evaluó el tamaño de diferentes preparaciones de poli(I) y de poli(C) por lotes y se comparó mediante cromatografía.
Las composiciones de BO-112 se producen y validan a una concentración y con una distribución del tamaño de las partículas como la descrita para las formulaciones de BO-11X en el documento PCT/EP2016/078078. Las composiciones de BO-112 se suministran en forma de viales que contienen poli(I:C) a una concentración de 0,5-0,8 mg/ml. La estabilidad de las composiciones de BO-112 en estos viales se confirmó tras 1 año de almacenamiento a 2-8 °C.
Formulaciones comerciales que contienen poli(I:C)
El poli-ICLC es una preparación de poli(I:C) estabilizado con polilisina y carboximetilcelulosa (Ewel C et al., 1992; WO2005102278). LyoVec-HMW (Cat. No. tlrl-piclv) y LyoVec-LMW (Cat. No. tlrl-picwlv), y las correspondientes preparaciones de poli(I:C) de alto peso molecular (HMW; Cat. Nombre tlrl-pic) y de bajo peso molecular (LMW; Cat. Nombre tlrl-picw) están disponibles en Invivogen.
Tecnologías analíticas
El valor del diámetro promedio zeta (promedio z) y el índice de polidispersidad de las partículas de JetPEI/poli(I:C) en distintas preparaciones de BO-11X (entre 0,5-0,8 mg/ml, que se diluirán para los ensayos celulares y de otro tipo a una concentración de poli(I:C) de 1,0 pg/ml) se determinaron utilizando el Zetasizer Nano ZS de acuerdo con las instrucciones del fabricante y de acuerdo con la norma ISO 22412, partiendo de la base de que dichas partículas son esféricas. En general, se aplica la dispersión de luz dinámica (tecnología Nanosizer) utilizando el software v7.11.
Caracterización in vitro de las preparaciones de BO-11X
Las diferentes preparaciones con base en poli(I:C) se probaron utilizando células de melanoma humano, células pancreáticas humanas o melanocitos humanos de acuerdo con la bibliografía que describe las propiedades de los complejos de BO-110 en la línea celular de melanoma humano SK-MEL-103 y en la línea celular de cáncer de
páncreas humano c (Pozuelo-Rubio M et al., 2014; Tormo D et al; documento WO2011003883). Brevemente, se realizaron ensayos de viabilidad celular en células adherentes al menos 12 horas antes del tratamiento. El porcentaje de muerte celular a los tiempos y concentraciones de tratamiento indicados se estimó mediante ensayos estándar de exclusión de azul tripán en células flotantes y adherentes que se agruparon, se tiñeron con una solución de azul tripán al 0,4 % (Gibco Laboratories, Grand Island, NY, EE. UU.) y se puntuaron con un microscopio de luz (se contó un mínimo de 100-500 células por tratamiento). Cada preparación se ensayó durante un período comprendido entre 12 horas y 48 horas y a concentraciones de moléculas de poli(I:C) en las diferentes preparaciones que estaban comprendidas en un intervalo entre 0,3 y 2,5 pg/ml.
La actividad inductora de la muerte de BO-112 se probó en melanocitos normales y líneas celulares de melanoma y glioblastoma y se comparó con componentes aislados, es decir, moléculas de poli(I:C) y PEI lineal (Jet PEI; Polyplus). Se aislaron melanocitos normales de prepucios de donantes asintomáticos. Las células de melanoma SK-Mel-28, SK-Mel-103 y UACC62 (con mutaciones en p53, NRAS y BRAF respectivamente) se obtuvieron de colecciones establecidas en el ATCC o en el Memorial Sloan Kettering Cancer Centre (EE. UU.) y se sometieron a un perfil de repeticiones cortas en tándem (STR) (sistema GenePrint® 10) para la autentificación de la línea celular. Se obtuvieron células primarias de pacientes con melanoma y se mantuvieron utilizando protocolos estándar. Las células se sembraron en placas de 96 pocillos (6000 células/pocillo). Por triplicado por experimento, con formulaciones de Poli(I:C) solamente, BO-110 o BO-112 a 0,5 o 1 pg/ml para un tratamiento de 24 o 40 horas.
Caracterización de la muerte de las células tumorales
La línea celular de cáncer de ratón B16-F10, melanoma de piel, (código ATCC CRL-6475) se obtuvo de colecciones establecidas en el ATCC; las células B16-OVA (derivadas de las células B16-F10) se obtuvieron del Centro de Investigación Médica Aplicada (Navarra, España). Las líneas celulares B16 insensibles a los IFN se obtuvieron de Invivogen (células B16-Blue™ IFN-y, Cat.no. bb-ifng; células B16-Blue™ IFNa/p, Cat.no.. bb-ifnt1) y se mantuvieron como indica el fabricante. Se investigó la caracterización de la muerte de las células tumorales (apoptosis, necrosis, muerte celular inmunogénica) inducida por la formulación de BO-112 y se comparó con el poli(I:C) aislado y con otro ligando TLR (LPS, específico para TLR4). Se cultivaron células B16-OVA (105 células/pocillo): solas, con LPS ultrapuro (0,25 y 1 pg/ml, InvivoGen, San Diego, CA), con la formulación de BO-112 (0,25, 0,5 y 1 pg/ml), o con poli I:C solamente (0,25, 0,5 y 1 pg/ml) durante 48 horas. La tasa de apoptosis y necrosis celular se analizó mediante citometría de flujo con tinción combinada de Annexin V y 7ADD (Células vivas: 7ADD negativo, Anexo V negativo- ; necrosis celular: 7ADD positivo, Anexo V negativo; apoptosis temprana 7ADD negativo, Anexo V positivo; apoptosis tardía: 7ADD positivo, Anexo V positivo). El efecto del BO-112 en la inducción de la muerte celular inmunogénica se analizó mediante citometría de flujo, detectando la expresión en la superficie celular de MHC-1, CD95 y Calreticulina. Para la citometría de flujo, las muestras se adquirieron en un citómetro Gallios (Beckman Coulter) y los datos se analizaron con el software de análisis de flujo Kaluza (Beckman Coulter).
Activación de la PARP
Además, se investigó el efecto de la formulación de BO-112 sobre la activación de la enzima Poli ADP ribosa polimerasa (PARP), que está involucrada en la reparación del ADN, la estabilidad genómica y la muerte celular programada. El adenocarcinoma de colon MC38 (código CVCL_B288 de Cellosaurus, cat. no. ENH204 de Kerafast), y las células de cáncer de mama 4T1 (código CRL-2539 de ATCC) se obtuvieron de colecciones celulares establecidas tal como la ATCC. Cada línea celular de cáncer (3*106) se estimuló con BO-112 (0,5 pg/ml) y se analizó la activación de PARP a las 0, 16h y 24h en los lisados celulares mediante Inmunotransferencia Western. Se utilizó el anticuerpo monoclonal PARP (clon C-2-10, ThermoFisher Scientific) para identificar una proteína de 116 kDa que corresponde a la PARP y el producto de escisión inducido por la apoptosis de 85 kDa.
Resultados
El documento PCT/EP2016/078078 divulga protocolos y datos experimentales sobre el desarrollo inicial y la caracterización de formulaciones de BO-11X, que conducen a una mayor citotoxicidad de las formulaciones de BO-11X contra las células cancerosas en comparación con los complejos de BO-110 descritos en la literatura y obtenidos a escala de laboratorio (Pozuelo-Rubio Met al., 2014; Tormo D et al., 2009; documento WO2011003883). Los datos sobre el procedimiento de fabricación del BO-11X y las preparaciones resultantes que contienen poli(I:C) en condiciones GMP con los procedimientos y preparaciones se compararon con los divulgados en la literatura.
La Figura 1A proporciona una visión general de dicho procedimiento para generar un primer tipo de preparaciones de BO-11X que se denominan formulaciones de BO-112 en las que la sustancia farmacológica (es decir, moléculas de poli(I:C) de doble cadena que se generan por fusión de moléculas de poli(I) y poli(C) de cadena simple) se mezcla primero con un excipiente como la glucosa en una solución que se esteriliza por filtración, por separado de la solución que contiene un polímero que tiene la función de portador (es decir, JetPEI). A continuación, estas dos preparaciones a granel se mezclan adecuadamente en cada vial para generar un gran número de formulaciones farmacéuticas estructural y funcionalmente comparables que se requieren para los estudios farmacotóxicos y las aplicaciones clínicas. Este procedimiento también puede proporcionar formulaciones de poli(I:C) en las que un compuesto adicional (tal como un adyuvante relacionado con el sistema inmunitario u otro compuesto terapéutico) está presente en las
partículas (y luego en la formulación final) que se forman en la Etapa 1, en particular añadiendo dicho compuesto terapéuticamente relevante junto con (o como alternativa a) un excipiente como la glucosa, proporcionando un ejemplo de formulación de BO-11Xm que puede denominarse BO-112m.
Al menos algunos de estos criterios de reproducibilidad y aceptación pueden compararse con los de otras formulaciones que contienen poli(I:C) cuya actividad anticancerígena se conoce. A nivel del tamaño de las moléculas de poli(I:C), las moléculas de poli(I:C) que se incluyen en los productos comerciales Lyovec-HMW y Lyovec-LMW cubren intervalos de tamaño que son claramente distintos de los proporcionados por el procedimiento de fabricación de BO-11X (con HMW casi totalmente por encima de 0,85 kb y LMW casi totalmente por debajo de 0,85 kb). Esta diferencia de tamaño en las moléculas de poli(I:C) puede depender del diferente procedimiento de fabricación y/o del portador que se asocia en los complejos con las moléculas de poli(I:C). Los valores promedio de Z de los complejos dentro del poli(I:C) dentro de los complejos con base en poli-ICLC (que comprenden polilisina y carboximetilcelulosa) y LyoVec-HMW/LyoVec-LMW (de acuerdo con el fabricante, que comprenden los reactivos de transfección con base en lípidos catiónicos cloruro de Di-tetradecilfosforilo-N,N,N-trimetilmetanaminio, o DTCPTA y el lípido neutro 1,2-Diftanoil-sn-Glicero-3-Fosfoetanolamina, o DiPPE) se compararon con los de las formulaciones de BO-112, mostrando que estas formulaciones comerciales contienen complejos mucho más grandes (en su gran mayoría mayores de 200nm) y, al menos para Lyovec-LMW, con una distribución bimodal (Fig. 1B). Si este análisis se realiza después de un ciclo de congelación/descongelación, estas preparaciones comerciales aparecen también como menos estables, con una variabilidad que no se observa para el BO-112. En efecto, si las formulaciones de BO-112 que tienen un diámetro promedio Z (d. nm) de 100 /- 50 nm (por ejemplo, 82,5 nm), y sin superar los 400 nm, las formulaciones con base en LyoVec y Poly-ICLC tienen un valor promedio Z muy superior a 300 nm, lo que confirma que los poli(I:C) disponibles en el mercado se suministran como preparaciones heterogéneas en cuanto a su composición o que incluyen partículas grandes mal caracterizadas funcionalmente y cuyo tamaño se modifica durante un ciclo de congelación/descongelación.
Este enfoque puede automatizarse para proporcionar formulaciones de BO-11X (tal como las preparaciones de BO-112) con características aún más uniformes. Este procedimiento de fabricación permite no sólo evitar tener moléculas libres de JetPEI, o de poli(I:C) en solución y no acomplejadas dentro de las preparaciones de BO-112, sino también obtener un diámetro promedio controlado y la distribución monomodal del diámetro de los complejos dentro de las preparaciones de BO-112, de manera que el promedio Z puede ser modulado entre 30 y 150nm. Además, este enfoque puede adaptarse para incluir moléculas de poli(I:C) de diferente distribución de tamaño, así como otros polirribonucleótidos (Poli (A), Poli(G),y/o Poli (U)) que tengan diferente tamaño, distribución de tamaño, y/o que presenten regiones de cadena simple y doble. El documento PCT/EP2016/078078 también divulga que los poli(I:C) disponibles en el mercado se suministran como preparaciones que son heterogéneas en su composición o incluyen partículas grandes mal caracterizadas funcionalmente y cuyo tamaño se modifica durante un ciclo de congelación/descongelación. De hecho, la hipercromía también puede utilizarse para evaluar las formulaciones de BO-112 y, en particular, la estabilidad de las moléculas de poli(I:C) de doble cadena dentro de las partículas como consecuencia de los cambios de temperatura (u otra condición) que determinan la separación entre las cadenas de poli(I) y las cadenas de poli(C). Las formulaciones de BO-112 mostraron un efecto hipercromático muy bajo, con diferencias de transmitancia a 260 nm inferiores a 0,2 o 0,1. También se ha evaluado y confirmado la estabilidad de los viales de BO-11X congelados a -20 °C durante diferentes tiempos, al menos hasta un mes. La filtración y la congelación de la formulación de BO-112 antes de su administración no promueven modificaciones sustanciales en las propiedades citotóxicas o en la estabilidad de las partículas dentro de la composición con respecto a la formulación de BO-112 original. Por ejemplo, las composiciones mantienen un D90 % inferior a 250 nm, un potencial zeta superior a 30 mV (por ejemplo, entre 40 mV y 50 mV), un diámetro hidrodinámico con una media Z entre 30 y 150 nm, compatibilidad con el uso de glucosa como excipiente, valores de polidispersidad comprendidos entre 0,1 y 0,6, y otros criterios aplicables de la European Pharmacopoeia).
Así, las preparaciones de BO-11X, tales como las preparaciones de BO-112, son formulaciones que presentan el alto nivel de estabilidad y reproducibilidad de las partículas formadas por complejos poli(I:C)-JetPEI que tienen un diámetro promedio Z (d.nm) inferiora 200 nm (cuando no inferior a 100 nm) que no se observa en las formulaciones comerciales de poli(I:C) que se basan en otros portadores y procedimientos de fabricación. Las preparaciones de BO-112 resultantes presentan complejos de BO-112 que tienen una distribución de diámetro monomodal, sin partículas visibles (es decir, sin un número de partículas superior al límite exigido por Eur. Pharm. 2.9,20), incluso si la solución final no se filtra a través de 5 pm después de mezclar las soluciones a granel 1 y 2. Las preparaciones de BO-112 pueden filtrarse sobre un filtro de 0,8 pm antes de su uso (por ejemplo, antes de su inyección), sin que se alteren las propiedades biológicas ni la distribución del diámetro monomodal de las partículas dentro de la composición. Por ejemplo, la formulación de BO-112 puede filtrarse a través de un filtro de jeringa Minisart (Sartorious) con un tamaño de exclusión de 0,8 pm. Las condiciones de mezclado pueden adaptarse, en particular modificando la velocidad de mezclado entre 50 rpm y 600 rpm y/o la velocidad de flujo para la solución de poli(I:C) o de JetPEI entre 1 ml/min y 50 ml/min. En general, las preparaciones de BO-11X (y en particular las preparaciones de BO-112) presentan las siguientes características principales: incoloro, sin partículas visibles, una osmolalidad comprendida entre 220 y 340mOsm/kg, un pH comprendido entre pH 2 y pH 4 (por ejemplo, entre 2,7 y 34), una rotación óptica comprendida entre 1500 y 3750, un potencial zeta igual o superior a 30mV, una distribución monomodal del diámetro de las partículas con un diámetro medio Z (nm) comprendido entre 30 y 250 nm (por ejemplo, entre 30 y 150 nm), pero preferentemente entre 60 nm y 130 nm, y que comprenda moléculas de poli(I:C), en las que al menos 40 %, 50 % o
60 % de dichos polirribonucleótidos de doble cadena tengan un tamaño superior a 085 Kb y al menos 70 % de dichos polirribonucleótidos de doble cadena tienen un tamaño comprendido entre 0,4 y 5 Kb. Características tales como la distribución del diámetro de las partículas pueden modificarse utilizando un mezclador de piezas en T en combinación con una velocidad de flujo diferente tanto para la Solución 1 como para la Solución 2. Cuando dicha velocidad es superior a 20 ml/min(por ejemplo, 30 ml/min), la turbidez del preparado de BO-112 resultante se reduce paralelamente a la reducción del diámetro promedio de las partículas Z y de la distribución de los diámetros en torno a este valor, manteniendo la monomodalidad, posiblemente debido al cambio en el régimen de flujo.
La preparación ejemplar de BO-112 se proporciona en forma de viales que comprenden partículas que tienen un diámetro promedio Z de entre 45 /- 5 nm y 81 /- 5 nm (por ejemplo, 73 /- 5 nm), con al menos 50 % de las partículas más pequeñas que 85 /- 20 nm, una polidispersidad de 0,25, un potencial zeta de 38 mV y un pH de 3,1. Estas propiedades estructurales que se mantienen tras un ciclo de congelación/descongelación a -20 °C o una amplia exposición a temperatura ambiente pueden modificarse en distintos lotes, manteniendo los criterios de aceptación dentro de unos intervalos de valores específicos. En particular, cuando se comparan los lotes GMP y no GMP para las propiedades fisicoquímicas y funcionales y los criterios más reproducibles y eficaces para evaluar la formulación de BO-112 (y las formulaciones de BO-11X en general), se definen más intervalos preferidos. Por ejemplo, las formulaciones terapéuticas y biológicamente eficaces de BO-112 pueden presentar partículas que tienen un diámetro promedio Z de 100 /- 50 nm o de 80 /- 20 nm( por ejemplo, 76 nm, 89 nm o 96 nm), con un potencial z comprendido entre aproximadamente 35 (o 40) y 50 mV (por ejemplo, 39 mV, 46 mV o 50 mV) o aproximadamente 40 y 45 mV (por ejemplo, 43 mV), al menos 90 % de la partícula tiene un diámetro inferior a 250 nm o de 200 /- 50 nm (por ejemplo, 170 nm, 172 nm, 174 nm, 216 nm, 218 nm, 220 nm), y polidispersidad entre 0,2 y 0,3 (por ejemplo, 0,21, 0,23 o 0,25). Pueden asociarse criterios adicionales a las características que se miden en la composición acuosa, tales como la presencia de ácido inosínico monomérico por debajo de la detección o irrelevante (por ejemplo, por debajo de 1, 0,5, 0,2 o 0,1 pg/ml), la osmolalidad comprendida entre 300 y 310mOsm/kg, la fuerza iónica por debajo de 5 mM o, preferentemente, por debajo de 1 mM (por ejemplo, 0,7, 0,76, 0,78 o 0,80).
Estos valores pueden modificarse tras la conservación a bajas temperaturas (por ejemplo, 5 °C /- 3 °C), pero deben permanecer dentro de estos intervalos.
La concentración de Poli(I:C) y de partículas en el vial puede adaptarse de acuerdo con el uso final. Sin embargo, para mantener la estabilidad de los complejos con base en Poli(I:C) y PEI en las composiciones, el vial debe comprender BO-11X con una concentración superior a 0,1mg/ml de moléculas de Poli(I:C), posiblemente superior a 0,5 mg/ml de Poli(I:C), para que el potencial zeta y las características de agregación fueran estables y permitan un uso uniforme y eficaz de la preparación de BO-11X. Los viales pueden prepararse para un solo uso (conteniendo un volumen de 4 ml, 2ml, 1 ml de composición de BO-11X o menos) como en preparaciones de lotes más grandes (conteniendo 5 ml, 10 ml, 15 ml o más de composición de BO-11X o más) que pueden fraccionarse en 2, 3, 5 o más alícuotas para un solo uso que se administran a lo largo del período de tratamiento (3 días, 5 días, 7 días, 10 días, 15 días, 30 días o más).
Si se compara la actividad citotóxica de la formulación de BO-112 con las formulaciones comerciales, estas últimas parecen ser mucho menos efectivas para matar células cancerosas en al menos dos modelos in vitro (Fig. 2A y B). La actividad citotóxica de las preparaciones de BO-11X puede medirse y validarse para usos posteriores en diferentes tipos de líneas celulares de cáncer, representativas de diferentes indicaciones de cáncer. Estos efectos también pueden estudiarse midiendo la expresión y/o secreción de proteínas que se sabe que modifican, y posiblemente mejoran, la respuesta celular contra las células cancerosas. Por ejemplo, una formulación de BO-112 induce, mucho más eficientemente que Poly-ICLC, la expresión de Interferón-beta en una línea celular de melanoma durante un periodo de al menos 24 horas (Fig. 2C). Estas pruebas in vitro pueden utilizarse para evaluar no sólo qué tipos de cáncer pueden tratarse con mayor eficacia mediante la administración de una formulación de BO-11X, sino también para evaluar qué otros tratamientos contra el cáncer (tales como vacunas con base en células o antígenos, adyuvantes, anticuerpos, fármacos quimioterapéuticos, radioterapia, terapias celulares, inmunoterapia, terapia epigenética o inhibidores de actividades enzimáticas tales como quinasas o enzimas metabólicas) pueden actuar de manera más eficaz cuando se administran en combinación con una formulación de BO-11X( por ejemplo, reduciendo la dosificación, la frecuencia y/o el período de tratamiento con este otro enfoque).
De hecho, la especificidad de tales efectos citotóxicos contra las líneas celulares de cáncer, y no contra las células primarias normales, por parte de las formulaciones de BO-11X (como se describió previamente para las formulaciones de BO-110 a escala de laboratorio; Tormo D et al., 2009) se confirmó in vitro comparando las actividades con compuestos apropiados y controles celulares (Fig. 3). Ni las moléculas lineales de PEIl ni las de poli(I:C) afectan por sí solas de forma significativa a la viabilidad de las células tumorales (melanoma o glioma). Sólo cuando las moléculas de PEI lineal y de poli(I:C) forman un complejo como el que se proporciona en las formulaciones de BO-112, se observa una eliminación significativa de las células tumorales, sin afectar a la viabilidad de los melanocitos normales. Los ensayos celulares de citotoxicidad in vitro pueden formar parte de la validación y la clasificación de los lotes de formulaciones de BO-112 antes de los usos (pre)clínicos posteriores. Dichos ensayos pueden basarse en el efecto sobre las líneas celulares de melanoma humano (tales como las células SK-Mel-19, SK-Mel-28, SK-Mel-103 y SK-Mel-147) tras una exposición de 24, 36 o 48 horas a un lote de formulaciones de BO-112 a 1,2 o más concentraciones estándar (por ejemplo, 0,35, 0,5, 0,85, 1,0 o 15 pg/ml, con o sin filtración previa usando un filtro de 0,8 pm) en medio
de cultivo, usando vehículo u otra solución libre de partículas que tenga criterios comparables (tales como osmolalidad, pH o fuerza iónica) como control negativo y SDS u otro agente citotóxico biológico o químico.
En conjunto, los criterios con base en el poli(I:C), con base en las partículas, con base en la composición y con base en la citotoxicidad que se aplican para producir y validar las formulaciones de BO-11X (y en particular las formulaciones de BO-112) hacen que esta formulación de poli(I:C) sea una formulación estructuralmente diferente y funcionalmente mejorada con respecto a las anteriores formulaciones con base en el poli(I:C) disponibles en el mercado (véanse las figuras) y/o descritas en la bibliografía (Schaffert D et al., 2011; documento WO2011003883; documento WO2015173824). Con respecto a estas últimas publicaciones, estas formulaciones no GMP, con base en poli(I:C), requieren la adición de grupos tales como PEG (con actividad de blindaje) y/o péptidos EGF (para la focalización celular) con el fin de lograr el nivel deseado de citotoxicidad utilizando soluciones que contienen partículas que tienen un tamaño sustancialmente mayor, a una relación N/P más alta, con una complejidad química adicional en la producción, y con una especificidad para las células cancerosas limitada a las que expresan un antígeno de superficie celular tal como EGFR.
Las observaciones descritas anteriormente fueron confirmadas en una línea celular de un paciente con melanoma que ha sido expuesto a una composición de BO-112 (en comparación con otras formulaciones con base en poli(I:C)) no sólo redujo específicamente y con más fuerza la viabilidad de las células cancerosas, sino que también indujo la producción de interferón alfa/beta por parte de dichas células (Fig. 4). Además, la composición del BO-112 promueve la muerte de las células tumorales (apoptosis y necrosis) y potencia la muerte celular inmunogénica (DCI) en mucha mayor medida que el LPS (un agonista del TLR4) o las correspondientes moléculas de poli(I:C) (generalmente definidas como agonistas del TLR3) a una concentración comparable (Fig. 5A y B). Esta mayor potencia proapoptótica de la formulación de BO-112, en comparación con estos agonistas específicos de los TLR, tiene importantes implicaciones para eliminar las células cancerosas, pero también para activar una respuesta inmunitaria antitumoral eficaz. De hecho, se observa un aumento significativo de los niveles de expresión de los marcadores IDC, tales como MHC-I, CD95 o Calreticulina, tras la estimulación con BO-112 (en comparación con las células no tratadas, las tratadas con LPS o las tratadas con poli I:C), lo que confirma la gran potencia de las formulaciones de BO-112 para inducir la inmunidad antitumoral. Se pueden realizar estudios in vitro similares utilizando modelos tumorales de ratón para estudios in vivo y para orientar el desarrollo clínico.
Se han utilizado enfoques similares con base en las células para validar las formulaciones de BO-11X, y de BO-112 en particular, que han sido expuestas a filtración y/o congelación, confirmando que los efectos citotóxicos no sólo se mantienen cualitativa y cuantitativamente en las preparaciones de BO-112 después de tales procedimientos, sino también para evaluar la expresión mejorada de marcadores de muerte celular y/o antígenos de cáncer u objetivos específicamente reconocidos por las células inmunitarias o los fármacos contra el cáncer. Por ejemplo, este enfoque puede utilizarse también para medir la reducción o disminución de la expresión (o degradación) de objetivos biológicos para los fármacos contra el cáncer, tales como los marcadores y receptores de la superficie celular, las quinasas y las enzimas.
Por ejemplo, aparte del punto de control inmunitario, la actividad de las enzimas que controlan la reparación del ADN, tales como las poli [ADP-ribosa] polimerasas, puede verse afectada por la exposición de las células a las composiciones de BO-11X, como se ha observado en el caso de PARP1 en líneas celulares y especímenes tumorales frescos, derivadas de carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello autólogo primario y metastásico, donde se ha evaluado el papel de la señalización TLR3 en la progresión metastásica, observándose una apoptosis significativa medida por el PARP escindido en muestras de tumores primarios y metastásicos, así como en líneas celulares relacionadas, tras la exposición a moléculas de poli(I:C) (Umemura N. et al, 2012). La Figura 6 muestra que
También se observa la escisión de PARP cuando se administra una formulación de BO-112 a las líneas celulares de cáncer de mama 4T1 y de colon MC38, que indica que la formulación de BO-112 puede utilizarse para mejorar el uso de los inhibidores de PARP, cuyo uso clínico está limitado por los mecanismos de resistencia en los pacientes (Lim J y Tan D, 2017), en terapias combinadas para ampliar la utilidad terapéutica de los inhibidores de PARP, como se muestra en las figuras anteriores para los anti-PD1 o antiPD-L1.
Se puede realizar un análisis más profundo de estos datos in vitro para guiar el desarrollo clínico utilizando diferentes modelos preclínicos que implican la producción y la comparación de diferentes formulaciones de BO-11X, diferentes regímenes de administración, y/o condiciones asociadas a una enfermedad tal como el cáncer. En particular, los estudios adicionales pueden implicar la determinación del efecto de las formulaciones de BO-11X sobre la actividad, la expresión y/o la concentración de ARNm y/o de las proteínas correspondientes en materiales biológicos (tales como sangre o biopsias) y células obtenidas de pacientes (ya sean células cancerosas, células inmunitarias u otro tipo de células). Las propiedades de las formulaciones de BO-11X pueden evaluarse en células humanas (ya sean células tumorales primarias, líneas celulares o células modificadas genéticamente) cuando se cultivan in vitro, se prueban ex vivo y/o se inyectan en ratones, donde pueden estudiarse mecanismos inmunológicos más complejos. La caracterización de dichas actividades, así como del cambio asociado en la expresión génica y los posibles mecanismos de acción, puede permitir definir rutas y regímenes de administración optimizados, combinaciones con otros fármacos, tratamientos de seguimiento y/o poblaciones de pacientes aplicables a las formulaciones de BO-11X, como se resume en el Ejemplo 3.
Ejemplo 2: Caracterización funcional de las preparaciones de BO-11X en modelos animales
Las composiciones y formas de administración que no corresponden a las reivindicadas no son conformes a la invención.
Materiales y procedimientos
Formulaciones de BO-11X y otros compuestos
Las formulaciones de BO-112 se han obtenido como se describe en el Ejemplo 1, y se han diluido con una solución de PBS al 5 % de glucosa (vehículo; ref: BE14-516F, Lonza, Francia) en tres concentraciones diferentes de acuerdo con una cantidad de dosificación por kilo de peso corporal del animal de 0,05 mg/Kg, 0,5 mg/Kg y 2,5 mg/Kg respectivamente.
Se eligió el anticuerpo murino anti-PD-L1 (InVivoPlus, clon 10F.9G2) como compuesto de inmunoterapia combinada. Se utilizó el anticuerpo rata-IgG2b (clon LTF-2, BioXCell) como control de isotipo. Cada día de inyección a los ratones, los anticuerpos anti-PD-L1 y Rat-IgG2b (RIgG) se diluyeron con vehículo a concentraciones finales de 1,5 mg/ml.
Se utilizaron anticuerpos murinos anti-CD4 (clon GK1.5) y anti-CD8a (clon 2.43), y rata-IgG2b (clon LTF-2) (todos de BioXCell) para el agotamiento de células T. Los ratones recibieron tres dosis iniciales de anticuerpos anti-CD4 o anti-CD8a (300 pg/ratón), o Rat-IgG2b (100 pg/dosis), seguidas de dosis de mantenimiento de 100 pg/ratón.
Líneas celulares de ratón
B16-F10, melanoma de piel, código ATCC CRL-6475, y B16-OVA derivado de ellos; MC38, adenocarcinoma de colon, código Cellosaurus CVCL_B288, Kerafast cat. no. ENH204; 4T1, cáncer de mama, código ATCC CRL-2539; se obtuvieron de colecciones establecidas en el ATCC o del Centro de Investigación Médica Aplicada (Navarra, España) y, cuando fue posible, se sometieron a un perfil de repeticiones cortas en tándem (STR) (sistema GenePrint® 10) para la autentificación de la línea celular. Las líneas celulares B16 insensibles a los IFN se obtuvieron de Invivogen (células B16-Blue™ IFN-y, Cat.no. bb-ifng; células B16-Blue™ IFNa/p, Cat.no. bb-ifnt1) y se mantuvieron como indica el fabricante.
Modelos animales de cánceres humanos
Las líneas celulares indicadas anteriormente se inyectaron por vía subcutánea (s.c.) en el flanco RIGHT (5 x105 -1 * 1065 células) de ratones C57BL/6 hembra de 8 a 10 semanas de edad. Para los estudios abscópicos, se realizó una segunda inyección s.c. (3 *105 células) en el flanco LEFT (directamente después de la inyección primaria de células tumorales en el flanco derecho, modelo de inyección concomitante). Para los estudios de reexpedición se realizó una segunda inyección s.c. (2,5 -5 *105 células) en el flanco izquierdo de los ratones que respondieron al tratamiento con BO-112 y que estaban libres de tumores. Los tumores se midieron con un calibrador semanalmente hasta su sacrificio y se calculó su volumen (longitud * anchura2/2). La supervivencia se evaluó mediante un análisis de Kaplan-Meier.
Administración de BO-112 y otros compuestos
El tratamiento con BO-112 se inició cuando el volumen del tumor era de 80-100 mm3. La administración de BO-112 y del vehículo se realizó por vía intratumoral mediante una única inyección directa en la masa tumoral del flanco RIGHT. Programa de dosis de BO-112 (2 dosis/semana, 3 semanas). La administración de anticuerpos Anti-PD-L1 y Rat-IgG2b se realizó por vía intraperitoneal, comenzando con la segunda dosis de BO-11X y continuando con el mismo esquema de BO-112. Se administraron mAbs anti-CD4, anti-CD8a y Rat-IgG2b por vía intraperitoneal; se inyectó una dosis inicial un día antes de comenzar la administración de BO-112, y se continuó a lo largo del experimento. El esquema exacto de administración (BO-112 y otros compuestos) de cada experimento se indica en las figuras.
Estudios de la respuesta inmunitaria
La implicación de diferentes subconjuntos de células T en el efecto antitumoral del BO-112 se investigó mediante experimentos de depleción de células T en el modelo tumoral de ratón MC38. Los anticuerpos anti-CD4 o anti-CD8a se administraron por vía sistémica en ratones portadores de tumores MC38 empezando antes del tratamiento con BO-112; la dosificación, la administración y l programación de BO-112, anticuerpos anti-CD4 o anti-CD8a se han descrito previamente. Los tumores se midieron con un calibrador semanalmente hasta su sacrificio y se calculó su volumen (longitud * anchura2/2). La activación de las células T y el cebado inducido por la terapia con BO-112 in vivo se evaluó 24 horas después de la segunda administración de BO-112. Se extirparon los tumores y los ganglios linfáticos de drenaje, se digirieron los tumores (medio de digestión de colagenasa/dispasa) y se filtraron, todas las muestras se procesaron para obtener una suspensión de células individuales. Se realizó un protocolo estándar para las tinciones superficiales e intracelulares por citometría de flujo, se utilizaron anticuerpos marcados con fluorocromo: anti -CD4, -c D8, -CD45, -PD-1, - IFNy, -CD137 (Biolegend). Se analizaron las células T CD8+ específicas contra OVA o Trp2
(iTAg Tetramer/PE - H-2 Kb, BML international Corporation). Las muestras se adquirieron con un citómetro Gallios (Beckman Coulter) y los datos se analizaron con el software de análisis de flujo Kaluza (Beckman Coulter).
La actividad inductora de muerte de BO-112 fue probada en células cancerosas de ratón que no responden a IFNs por un ensayo MTS (CellTiter 96® AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay, Promega). Las células B16, B16-IFN-a/p (no responden al IFN-y) y B16-IFN-y (no responden al IFN-a/p) (5000 células/pocillo; placas de 96 pocillos planos, 8 réplicas por condición) se cultivaron con Polo(I:C) solamente (0,5 jg/ml), la formulación de BO-112 (0,5 |jg/ml) o el agonista de picadura 2',3'-Cíclico GMP (7jg/ml; InvivoGen, San Diego, CA) durante 24, 48 y 72 horas, según el experimento, como se describe en las Figuras. La absorbencia (OD 492 nm) se midió en un lector de ELISA. El % de células muertas se refiere a las células no tratadas (0 %).
Resultados
La eficacia anticancerosa in vivo de las formulaciones de BO-112 se investigó en una cepa de ratón inmunocompetente, implantada con células de melanoma de ratón. Los ratones fueron tratados con una solución de PBS o con una formulación de BO-112 a tres concentraciones diferentes (0,05, 0,5 o 2,5 mg/kg, preferentemente administrados intratumoralmente), en combinación con un anticuerpo murino anti-PD-L1 (preferentemente administrado sistémicamente) y comparados con el vehículo solo a lo largo de 3 semanas (Fig. 7A). El anticuerpo anti-PD-L1 en combinación con el vehículo no aumentó significativamente la supervivencia en comparación con el vehículo solo. Las tres combinaciones de BO-112 probadas con anti-PD-L1 (y posiblemente de forma independiente de dicho anticuerpo) aumentaron significativamente la supervivencia de los ratones en comparación con el vehículo o el anti-PD-L1 solo. Además, la supervivencia aumentó significativamente en la combinación de la formulación de BO-112 de 2,5mg/kg anti-PD-L1 en comparación con las dosis más bajas de la formulación de BO-112 (Fig. 7B). De hecho, la formulación de BO-112 administrada sola reduce claramente el crecimiento del tumor en este modelo (Fig. 7C-D). El efecto de esta combinación también se probó en el modelo de efectos abscópicos de las inyecciones intratumorales en un modelo de ratón de melanoma similar, en el que la formulación de BO-112 no sólo redujo el tamaño de la masa tumoral inyectada sino también la masa tumoral no inyectada, confirmando así el efecto antitumoral tanto local como sistémico de la formulación de BO-112 (Fig. 8). El anticuerpo anti-PD-L1 es un importante y validado fármaco anticanceroso, y mediador de una respuesta inmunitaria eficaz contra las células cancerosas. El experimento demuestra que los complejos de BO-11X pueden utilizarse en combinación con otros agentes anticancerígenos, y que la combinación de los compuestos de BO-11X con otros agentes anticancerígenos, tales como el anti-PD1, tiene una potencia superior a la del agente anticancerígeno por sí solo, lo que conlleva un aumento significativo de la supervivencia y la eficacia antitumoral. Además, la mejora en la supervivencia (o en las células de memoria inmunitaria, y las respuestas terapéuticas sistémicas más generales) se correlaciona con un aumento de la dosis de la formulación de BO-11X a la combinación, lo que apoya que el beneficio añadido en la supervivencia está mediado por la formulación de BO-11X. Esta eficacia anticancerígena in vivo de la formulación de BO-112 se confirmó, también en ausencia de anti-PD-L1 o de cualquier otro tratamiento, tanto en modelos basados en 4T1 (Fig. 9) como basados en MC38 (Fig. 10) para cáncer de mama y cáncer colorrectal, respectivamente. El BO-112 no sólo redujo el crecimiento del tumor en el modelo de carcinoma de mama 4T1, sino que también mejoró la supervivencia de los ratones en el modelo de carcinoma de colon MC38, en este último caso también mediante dos enfoques diferentes (con o sin una nueva provocación con células cancerosas; Fig. 10 y 11).
Por lo tanto, las formulaciones de BO-11X pueden utilizarse (solas o en combinación con otros agentes anticancerígenos, tales como anticuerpos, inmunoterapia o quimioterapia, que pueden administrarse por la misma vía o por una vía diferente) en el tratamiento del melanoma y otras indicaciones de cáncer, en particular las que permiten la inyección peritumoral o intratumoral, tal como en el cáncer de páncreas, de endometrio, de ovario, de riñón, hepatocelular o colorrectal. Además, el BO112 induce la inmunidad sistémica al promover la memoria de las células inmunitarias, lo que permite su uso como agente terapéutico único.
En este ámbito, la identificación de las vías biológicas y los mecanismos de acción específicos puede guiar las dosificaciones, los regímenes, la combinación con otros fármacos o terapias y las indicaciones más adecuadas para las formulaciones de BO-11X, como se ha demostrado en el caso de los efectos combinados de los anticuerpos monoclonales inmunomoduladores dirigidos a PD-1, CTLA4, PD-L1 o CD137 y las preparaciones de poli(I:C) que potencian las actividades de las células dendríticas (Sánchez-Paulete AR et al., 2015). Para ello, Duewell Pet al., 2015 divulga un modelo animal alternativo de enfermedad que puede utilizarse para probar la composición de la presente divulgación para la inmunoterapia del carcinoma de páncreas.
El efecto terapéutico sobre el crecimiento del tumor (localmente y/o en localizaciones distales) y la respuesta inmunitaria antitumoral de las formulaciones de BO-11X puede medirse realizando estudios in vivo de administración intratumoral (i.t.) a través de un intervalo de concentración para las moléculas de poli(I:C) (tal como 0,5, 1, 2, 2,5 o 5 mg/kg) para evaluar cómo dicho tratamiento mejora la supervivencia de los ratones en un modelo relevante (tal como los modelos de melanoma, cáncer de mama, cáncer de ovario, leiomiosarcoma, cáncer de endometrio o cáncer de páncreas en ratones), con o sin la coadministración de otro fármaco o vacuna. Al mismo tiempo, los estudios de dosisrespuesta sobre actividades biológicas específicas inducidas por el tratamiento con BO-11X pueden evaluarse en paralelo ex vivo, utilizando muestras humanas o animales a nivel de la inducción de la apoptosis (por el resplandor relacionado con la caspasa), la inducción de la muerte celular inmunogénica (por ejemplo, la expresión de MHC-I
calreticulina, CD95 o expresión de HMGB1), la secreción de quimiocinas/citocinas en el fluido biológico (por ejemplo, la secreción de IL-6 e IP-10), la activación y/o proliferación celular in vitro (por ejemplo, asociada al aumento de CD40, CD86, CD69 en los tipos celulares pertinentes). Estos estudios pueden realizarse utilizando células directamente implicadas en la enfermedad (por ejemplo, células tumorales, células epiteliales, endoteliales o epiteliales) o células indirectamente implicadas desde que realizan algunas actividades inmunitarias o inmunorreguladoras (por ejemplo, células mononucleares de sangre periférica humana, células NK, células B, células T CD4+ / CD8+, células dendríticas), ya sea dentro de los tumores, en los órganos linfoides o en la sangre. Estos estudios también pueden incluir el efecto del tratamiento con BO-11X utilizando diferentes vías de administración, tales como la administración subcutánea o intramuscular, con el fin de establecer diferentes calendarios para los usos clínicos del BO-11X, así como la idoneidad del BO-11X como adyuvante en las vacunas relacionadas con el cáncer y/o las infecciones.
Estos estudios pueden asociarse además a la identificación de moléculas que pueden utilizarse como biomarcadores para predecir la respuesta al BO-11X (o la falta de ella) con el fin de estratificar las etapas de la enfermedad y/o las poblaciones de pacientes para el tratamiento con BO-11X. En particular, el análisis de las actividades del BO-11X puede realizarse comparando la característica cualitativa y/o cuantitativa de las células inmunitarias (tales como las células NK, las células B, las células T CD4+ / CD8+) y la cinética de crecimiento del tumor en modelos animales en los que los cambios en los marcadores celulares específicos y las (sub)poblaciones pueden medirse también cuando se agotan o activan tipos celulares específicos en combinación con la administración del BO-11X (por ejemplo, mediante la coadministración de anticuerpos depletores o activadores de células T, antígenos víricos, bacterianos o cancerígenos, tratamientos basados en células, tales como las terapias de células T adoptivas, o compuestos con propiedades adyuvantes).
La participación de células inmunitarias específicas puede explorarse en modelos animales de cáncer similares a los descritos anteriormente, donde el tratamiento con la formulación de BO-112 se evalúa con respecto a la depleción de células inmunitarias o la presencia de poblaciones de células inmunitarias específicas dentro de los tumores tras la administración de la formulación de BO-112. El agotamiento de las células T positivas para CD4 mejora el efecto de la formulación de BO-112, lo que sugiere el potencial clínico de las terapias combinadas de BO-112 con fármacos dirigidos a las Tregs CD4 (Fig. 12 A y B). La depleción de las células T positivas para CD8 parece disminuir el efecto antitumoral de la formulación de BO-112 en modelos tumorales de ratón, confirmando la implicación de la respuesta inmune adaptativa en el efecto antitumoral mediado por BO-112.
Además, la representación de poblaciones celulares específicas entre los linfocitos infiltrantes del tumor es modificada por la inyección intratumoral de la formulación de BO-112, con el aumento significativo no sólo de las células T CD45/positivas para CD8, sino también de la positividad para los tetrámeros CD137, OVA y Trp2, PD-1, y la expresión del interferón gamma en las células positivas para c D8, estos efectos se confirman parcialmente en las células positivas para CD4; en el mismo modelo, las células T CD8+ específicas contra el antígeno tumoral endógeno Trp2 también aumentan en el ganglio linfático que drena el tumor (Fig. 12 C y D).
Estos datos confirman que la formulación de BO-112 promueve la respuesta inmune adaptativa contra el tumor y es capaz de inducir inmunidad sistémica. El potente efecto de BO-112 para inducir la muerte de las células tumorales y promover la infiltración y la activación de las células T proporciona pruebas para la combinación clínica con fármacos que se dirigen a mecanismos complementarios de la progresión del tumor, tal como la inmunosupresión (Chen DS y Mellman I, 2013). La activación de las células T CD4+ y CD8+ en el tumor tras la terapia con BO-112 demuestra la activación de la vía de señalización del IFN. El IFNy desempeña un papel fundamental en la inmunidad sistémica y local antitumoral, pero también induce la expresión de PD-L1 en las células cancerosas, un mecanismo que se ha descrito como un impedimento para la inmunidad local del tumor y una inmunosupresión (Abiko K et al., 2015). La administración intratumoral de BO-112 en diferentes modelos tumorales de ratón induce la expresión de PD-L1 en las células tumorales, lo que soporta la racionalidad de la terapia combinada de BO-112 con fármacos dirigidos a PD-1/PD-L1. Las combinaciones prometedoras incluyen fármacos que se dirigen a otros inhibidores de puntos de control inmunitarios, con el fin de desbloquear la supresión inmunitaria inducida por las células tumorales y/o el microambiente tumoral, tal como CTLA4, Tim-3, LAG3 o IDO.
El efecto citotóxico potente y directo de la formulación de BO-112 sobre las células tumorales también se detecta en las células que no responden a los IFNs (teniendo implicaciones clínicas relevantes para la selección de pacientes y el tratamiento con BO-112. La formulación de BO-112 parece desencadenar la muerte de las células tumorales también de forma independiente a la capacidad de las células cancerosas de responder a los interferones (Fig. 13). Las mutaciones de pérdida de función en la señalización del receptor IFN-gamma o en la maquinaria de presentación de antígenos median algunos casos de resistencia primaria y resistencia adquirida al tratamiento de bloqueo de PD-1 (Zaretsky J et al., 2016). La activación de la vía RIG1/MDA5 por BO-112 en las células tumorales representa una estrategia para superar la resistencia al IFN-y y podría resensibilizar los tumores a las terapias con células T CD8+ autólogas. Las aberraciones cromosómicas tempranas podrían predisponer a la resistencia adquirida al IFNy y a la resistencia de las células T en ciertos tipos de tumores, por lo que el cribado de las metástasis de los pacientes en busca de aberraciones cromosómicas y mutaciones genéticas antes de la inmunoterapia para definir el riesgo de desarrollo de resistencia puede ser útil para la selección de los pacientes que se beneficiarán del tratamiento con BO-112.
La literatura proporciona varias evidencias de muestras de tejido humano en células dentro de tumores (incluyendo melanoma, carcinoma invasivo de mama, adenocarcinoma de próstata, adenocarcinoma de pulmón y adenocarcinoma colorrectal) albergan alteraciones en JAK1 y JAK2, incluyendo alteraciones de pérdida de función en JAK1 o JAK2 que putativamente disminuirían la señalización de JAK1 o JAK2 (homodeleciones, mutaciones de truncamiento o regulación a la baja del gen o la proteína). Estas evidencias pueden ser útiles para la selección de pacientes que, en vista de su carga mutacional con el tumor, se beneficiarían especialmente de la terapia con BO-112.
Ejemplo 3: Estudios clínicos con formulaciones de BO-112 (las composiciones y formas de administración que no corresponden a las reivindicadas no son acordes con la invención)
Los estudios preclínicos que implican la administración de BO-112 en modelos animales pueden utilizarse como base para establecer estudios clínicos en los que se administra BO-112 (por ejemplo, a través de la administración intratumoral) buscando una potenciación más segura y focalizada de los efectos antitumorales locales y sistémicos. El potencial de la administración intratumoral de BO-112 como tratamiento inmunomodulador, así como su perfil de toxicidad/seguridad, se está analizando en este primer ensayo clínico en humanos, de prueba de concepto (NCT02828098). Los pacientes con lesiones cancerosas accesibles para la inyección intratumoral, tales como los tumores sólidos malignos y las metástasis cutáneas/subcutáneas o de los ganglios linfáticos palpables (>1 cm) y de los que se pueden obtener biopsias, se tratan con BO-112 mediante inyecciones intratumorales a diferentes niveles de dosis (0,6 mg - 1mg de contenido de poli(I:C) en cada dosis, 1-3 dosis con una dosis/semana) a partir de preparados de BO-112 que contienen moléculas de poli(I:C) a una concentración de al menos > 0,5-mg/ml. Las lesiones inyectadas se someten a una biopsia antes de iniciar el tratamiento y entre 7-14 días después de la última dosis, o bien a las 6 semanas, por ejemplo. Los pacientes son evaluados en paralelo con respecto a los signos de relevancia clínica y la respuesta del sistema inmune innato o adaptativo y las vías de señalización. También se evalúa la farmacocinética del BO-112 y las citocinas circulantes, tales como interferón tipo I, TNF-alfa y IL-6, en el plasma. Los resultados preliminares muestran que los pacientes no experimentaron toxicidad relevante con la excepción de dos episodios de trombocitopenia, que se recuperaron sin tratamiento. El BO-112 no fue detectable en el torrente sanguíneo tras la administración intratumoral. El BO-112 ha determinado cambios estadística y terapéuticamente relevantes en todos los pacientes para al menos uno de los siguientes criterios relevantes para el tumor tamaño del tumor inyectado, aparición o no de metástasis, apoptosis y necrosis de las células cancerosas (lo que demuestra la muerte celular inmunógena desencadenada en los tumores por las formulaciones de BO-112), aumento de las células T infiltradas en el tumor positivas para CD4, aumento de las células T infiltradas en el tumor positivas para CD8, aumento de las células inmunitarias circulantes (incluidas las células NK, las células dendríticas, los monocitos y/o las células reguladoras T, totales o subpoblaciones específicas que presentan marcadores específicos tales como CD16 o PD-1).
Cuando la formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm) se administra clínicamente por inyección intratumoral, se observa apoptosis y/o necrosis en el tumor, posiblemente como resultado de los efectos antitumorales directos combinados con la activación de respuestas antitumorales por parte de otras células residentes en el tumor (por ejemplo, promoviendo la presentación de antígenos tumorales a las células dendríticas). Una cascada de señalización también puede conducir al reclutamiento y/o activación de células inmunitarias, en particular células T CD4+ y CD8+ en la masa tumoral, promoviendo un efecto inmunitario contra el tumor, contribuyendo al efecto citotóxico del BO-11X. También se desencadenan cambios sistémicos en las poblaciones de células inmunitarias, tales como CD8, CD4, CD4 Treg, NK, monocitos CD16+ o DC, que podrían ser capaces de montar respuestas antitumorales tanto primarias como de memoria.
Las formulaciones de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm) también pueden administrarse como agente único o en combinación con otras terapias anticancerosas tales como los inhibidores de puntos de control u otros agentes inmunooncológicos (además o no de la quimioterapia y la radioterapia) administrados a través de otras vías de administración y con diferente frecuencia en regímenes que implican no sólo inyecciones intratumorales posteriores, sino también incluyendo vías de administración alternativas tales como la administración subcutánea o intramuscular, dentro de uno o más ciclos de tratamientos (Fig. 14A y 14B, incluyendo también terapias concurrentes anti-CTLA4, anti-PD-1 o anti-PD-L1). Un ciclo de tratamiento con BO-11X puede establecerse como un número predefinido de inyecciones intratumorales en la misma o en diferentes lesiones tumorales (desde una hasta cuatro o más consecutivas durante una, dos, tres, cuatro o más semanas).
En una segunda parte del primer ensayo clínico en humanos mencionado anteriormente, los pacientes que no responden al tratamiento con un anticuerpo anti-PD1 reciben múltiples dosis de BO-112 además del tratamiento continuado con el anticuerpo anti-PD1 (véase la Figura 14B). La respuesta clínica al tratamiento, medida por la carga tumoral global basada en técnicas de imagen, así como la actividad biológica evaluada en el tejido tumoral y en las células inmunitarias circulantes, se evalúan en el ensayo (véase la Figura 15) que puede ser seguido por un número de inyecciones intramusculares o subcutáneas (desde una hasta siete o más consecutivas a lo largo de una, cuatro, siete, quince o más semanas), repitiendo dicho ciclo con el mismo régimen (o ampliando el intervalo entre inyecciones) en función de las respuestas de los pacientes. Las formulaciones de BO-11X en estas inyecciones intramusculares o subcutáneas se diluirán posiblemente antes de la administración para proporcionar dosis más bajas de moléculas de poli(I:C), en comparación con las inyecciones intratumorales (por ejemplo, 50 %, 25 %, 10 %, 5 %, 1 % de la dosis que se inyecta intratumoralmente), pero pueden seguir permitiendo mantener el efecto terapéutico y/o
inmunomodulador inicial de las inyecciones intratumorales. Además de los parámetros mencionados anteriormente, la respuesta clínica también puede evaluarse mediante un examen físico, una tomografía computarizada, una resonancia magnética u otras técnicas de imagen para evaluar la carga tumoral.
Alternativamente, las formulaciones de BO-11X (o las formulaciones de BO-11Xm) pueden ser administradas ex vivo, usando células que son aisladas de un paciente, en particular para mejorar la maduración, la eficacia, y/o la activación de células inmunes específicas, tales como las Células Dendríticas (Fig. 14C). Este enfoque puede aplicarse para la maduración in vitro de células dendríticas, como se describe en la literatura para usos relacionados con neoantígenos, células T adoptivas, lisados celulares, cáncer, enfermedades ginecológicas y/o infecciones (Vanderlocht J et al., 2010; Gallois A y Bhardwaj N, 2013; Da Silva DM et al., 2015; Fritsch EF et al., 2014; González FE et al., 2014; Tai LH et al.
2013; Hammerich L et al., 2015; Hervas-Stubbs S et al., 2012; Ochoa MC et al., 2017; Osada T et al., 2015; Perica K et al, 2015). También en este caso, las formulaciones de BO-11X en estos procedimientos in vitro / ex vivo se diluirán posiblemente antes de la administración para proporcionar dosis más bajas de moléculas de poli(I:C), en comparación con las inyecciones intratumorales (por ejemplo, 50 %, 25 %, 10 %, 5 %, 1 % de la dosis que se inyecta intratumoralmente, pero posiblemente dentro del intervalo de dosis y concentración que se utilizan para validar la formulación de BO-11X en modelos basados en células, como se divulga en el Ejemplo 1). Estas dosificaciones pueden seguir permitiendo proporcionar el efecto terapéutico y/o inmunomodulador adecuado para tales enfoques terapéuticos, con o sin aplicar posteriormente un ciclo de tratamientos con BO-11X en el mismo paciente.
Utilizando cualquiera de las vías de administración y el régimen enumerado anteriormente, las formulaciones de BO-11X (o las formulaciones de BO-11Xm, tales como las formulaciones de BO-112) pueden ser validadas teniendo en cuenta uno o más criterios combinados que se miden en los pacientes utilizando biopsias, muestras de sangre y/u otros criterios clínicos (véase arriba y la Fig. 15A). Así, aparte de la evaluación directa del tamaño del tumor y la metástasis, la eficacia terapéutica de las formulaciones de BO-11X puede determinarse en procedimientos en los que se evalúa al menos uno de los tres criterios generales siguientes: citotoxicidad directa sobre las células cancerosas (apoptosis y necrosis de las células cancerosas), aumento de las células inmunitarias infiltradas en el tumor (tales como células T infiltradas en el tumor positivas para CD4 y/o positivas para CD8), aumento de las células inmunitarias que circulan en la sangre (poblaciones totales o subpoblaciones específicas de linfocitos, células NK, monocitos, células dendríticas, macrófagos, células B, etc.), y/o que presenten alguna expresión diferencial antes y después del tratamiento sólo en los pacientes que responden o que no responden (de acuerdo con lo determinado por la secuenciación del ARN u otro enfoque de secuenciación masiva).
Este procedimiento de validación también puede implicar el seguimiento a nivel molecular, por ejemplo, mediante el cribado de la expresión de ARNm y/o proteínas de conjuntos específicos de proteínas, de manera que no sólo se pueda confirmar la eficacia del tratamiento, sino también si se puede aplicar otro tratamiento (que anteriormente se consideró ineficaz), ya que la administración de BO-11X (o BO-11Xm) ha mejorado la capacidad de respuesta del paciente. En la literatura hay ejemplos de tales firmas y regímenes alternativos que pueden identificarse en pacientes tratados con BO-11X o BO-11Xm, por ejemplo, con respecto a la expresión de interferón y/u otros marcadores que deben identificarse y la resistencia adquirida a las terapias con base en PD-1 para el potencial rescate de pacientes (Zaretsky J et al., 2016; Masucci G et al., 2016). Por lo tanto, los datos de seguridad, eficacia e inmuno-biológicos proporcionarán la justificación para elegir la dosis de BO-11X (o BO-11Xm) para futuros ensayos clínicos, utilizando formulaciones de BO-11X tal como BO-112 solo y/o en combinación con otros fármacos, protocolos de atención estándar o inmunoterapias que puedan proporcionar más beneficios terapéuticos (Fig. 15B).
La eficacia terapéutica de la formulación de BO-112 está bajo evaluación clínica, con dos ejemplos iniciales que ilustran aún más el efecto clínico relevante (Fig. 16 y 17). Estos resultados preliminares confirman la eficacia de BO-112 en la reducción de las lesiones cancerosas, demostrando la seguridad y el efecto biológico previsto, con o sin la administración concurrente de anticuerpos anti-CTLA4, anti-PD1, y/o anti-PD-L1, con el efecto potencial de dirigirse a pacientes con cáncer refractarios a la terapia de puntos de control e induciendo la muerte celular inmunogénica y la inmunidad antitumoral. Además, estos resultados preliminares muestran que los pacientes no experimentaron una toxicidad clínicamente relevante, con la excepción de dos casos de trombocitopenia, que se recuperaron (uno con transfusión de plaquetas y otro sin tratamiento). El BO-112 no fue detectable en el torrente sanguíneo tras la administración intratumoral. BO-112 ha demostrado cambios terapéuticamente relevantes en todos los pacientes para al menos uno de los siguientes criterios relevantes para el tumor: tamaño del tumor inyectado, apoptosis y necrosis de las células cancerosas, aumento de las células T infiltradas en el tumor positivas para CD4, aumento de las células T infiltradas en el tumor positivas para CD8-, aumento de las células inmunitarias circulantes (incluyendo las células NK, las células dendríticas, los monocitos y/o las células reguladoras T, totales o subpoblaciones específicas que presentan marcadores específicos tales como CD16 o PD-1).
Ejemplo 4 Evaluación de los efectos biológicos debidos a la administración de formulaciones de BO-112 en pacientes (las composiciones y formas de administración que no corresponden a las reivindicadas no son acordes con la invención)
Materiales y procedimientos
Se obtienen las biopsias previas y posteriores al tratamiento de la lesión metastásica inyectada, para analizar las firmas de expresión de ARN de genes de apoptosis, necrosis, infiltrado inmunitario e inflamación (por ejemplo, utilizando la plataforma Nanostring y paneles específicos de genes humanos tales como los enumerados por el fabricante como PanCancer Pathways, PanCancer Immune Profiling o PanCancer Progression Panels). La farmacocinética, las citocinas séricas y las células inmunitarias circulantes se estudian secuencialmente en muestras de sangre antes y después del tratamiento.
Utilizando el software de análisis nSolver (NanoString, Inc.), los recuentos se normalizaron primero a la media geométrica del control negativo introducido en el ensayo para corregir la variabilidad experimental. A continuación, se utilizó la media geométrica para calcular el factor de normalización del control positivo y, por último, se normalizó con respecto a los genes de mantenimiento de la casa incorporados en el panel de Inmunología Humana. Las directrices detalladas del análisis de normalización se pueden encontrar en el sitio web de NanoString Technologies [http://www.NanoString.com1. Los datos normalizados se midieron como recuentos. Los datos normalizados del procedimiento nSolver se transformaron en logaritmos (con base 2) para los 750 genes endógenos. Los datos de nCounter chips para los 12 pacientes se obtuvieron antes y después del tratamiento. Las expresiones diferenciales se evaluaron mediante una prueba t emparejada para cada gen. La matriz de diseño utilizada fue
Donde p0 es la expresión diferencial entre el pre y el postratamiento. Los genes modificados a mayor expresión tras el tratamiento mostraron valores positivos de cambio de pliegues. Se construyó un modelo lineal para los datos de nCounter utilizando el paquete limma. Los valores p se corrigieron para las comparaciones múltiples mediante el procedimiento de Benjamini y Hochberg. Los genes con un valor de significancia de p<0,05 se agruparon. Todos los análisis de expresión génica se realizaron en R.
Resultados
Inicialmente, los estudios de expresión génica que usaron células obtenidas de pacientes tratados con BO-112 han permitido identificar la regulación hacia abajo o hacia arriba de un número limitado de genes, como se resume en la Tabla I.
TABLA I
(continuación)
Los genes seleccionados presentan (log 2) cambio de pliegue, valor p y valor p ajustado. A partir de este análisis, se encontraron 23 genes expresados de forma diferencial entre el pre y el postratamiento (valor p< 0,05) dentro de los tumores (incluyendo así potencialmente tanto las células cancerosas como las células inmunes infiltradas). Los genes enumerados en la Tabla I anterior pueden estar asociados a una o más de las clases de GO (Gene Ontology) que se asocian a la modulación (pero preferentemente a la activación o el aumento) de la frecuencia, la tasa o la extensión de una respuesta o defensa inmunitaria (contra una amenaza interna y/o invasiva presente o potencial), procedimientos inmunológicos y/o inflamatorios generales, u otra respuesta a un agente orgánico, inorgánico o biológico. Estas clases de GO incluyen las que tienen los nombres sistemáticos: M14329, M11976, M10574, M13496, M12904, M13657, M12866, M10700, M16728 y M16306. En particular, tres genes (CCL7, MARCO, MSR1) están relacionados específicamente con los macrófagos, uno (OAS3) con los DC activados y otro (LAIR2) con las células T Th2. Otros dos genes (CD163, CD36) corresponden a receptores implicados en la fagocitosis.
Alternativamente, estos genes pueden ser analizados con base en su localización proteica y/o actividad enzimática. En un primer grupo de genes regulados al alza, la proteína correspondiente es una enzima cuya acción puede ser inhibida por pequeñas moléculas, teniendo estas químicas en muchos casos propiedades terapéuticas al alterar una respuesta inmune y/o contra el cáncer, asociada o no a TLR3. Por ejemplo, IRAK2 es un mediador de la señalización de TLR3 (Jain A et al., 2014), OAS3 es una enzima activada por el ARNds inducido por el interferón que desempeña un papel crítico en la respuesta innata celular, mientras que la catepsina L1 y la bTk son objetivos de compuestos anticancerosos y/o inmunomoduladores (Feng M et al., 2015; Molina-Cerrillo J et al., 2017; Ping L et al., 2017; Li YY et al., 2017; Sudhan D and Siemann D, 2015). En un segundo grupo de genes regulados al alza (MSR1, MARCO, LAIR2, TLR2, CD163, CD36, SLC11A1, LRr N3), la proteína correspondiente es un receptor de la superficie celular cuya acción puede ser activada (o inhibida) por diversos agentes (anticuerpos o pequeñas moléculas), teniendo estos compuestos, en muchos casos, propiedades terapéuticas. En un tercer grupo de genes regulados al alza (IL10, IL8, CCL3, CCL7, CXCL1, LY96), la proteína correspondiente es una proteína secretada cuya acción o interacción con un receptor de la superficie celular puede ser inhibida, por diversos agentes (anticuerpos o pequeñas moléculas), teniendo también estos compuestos, en muchos casos, propiedades terapéuticas.
Usando estos esquemas de categorización y luego probando anticuerpos apropiados, inhibidores u otros productos comercialmente disponibles en líneas celulares, muestras de tejido u otros materiales biológicos, es posible definir cómo la administración de BO-11X puede afectar por la respuesta inmune y/o la respuesta contra el cáncer afectando los conjuntos de genes, asociados o no con las actividades relacionadas con TLR3, las células inmunes, y/o la respuesta contra el cáncer. El enfoque descrito anteriormente puede conducir a una serie de aspectos adicionales en los que una formulación de BO-11X (incluyendo una formulación de BO-11Xm) se utiliza para tratar a un paciente que
sufre una enfermedad (tal como el cáncer) y/o para prevenir una enfermedad (tal como el cáncer o una infección) después de determinar la presencia combinada (y/o la ausencia) de expresión a nivel de ARN y/o de proteínas para uno o más genes en células o tejidos del paciente (tal como un tumor, una muestra de sangre o una fracción de sangre), después o antes del tratamiento con dicha formulación. Esto puede permitir, por lo tanto, definir una firma de expresión génica que se asocie a:
(i) la cantidad terapéuticamente eficaz de una formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm);
(ii) los biomarcadores terapéuticamente relevantes que predicen que un sujeto puede tener una respuesta antitumoral o antiinfecciosa después del tratamiento con una formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm):
(iii) la cantidad terapéuticamente eficaz de una formulación de BO-11X (o formulación de BO-11Xm) que puede permitir que un sujeto responda al tratamiento con un compuesto después del tratamiento con la formulación de BO-11X (o formulación de BO-11Xm); y/o
(iv) Los biomarcadores terapéuticamente relevantes que predicen que un sujeto puede responder al tratamiento con un compuesto después del tratamiento con una formulación de BO-11X (o una formulación de BO-11Xm).
Así, cualquiera de los genes de la Tabla I puede ser utilizado para los usos resumidos en (i)-(iv) arriba, utilizando los medios para detectar/medir la expresión de ARN y/o proteínas de cualquiera de estos genes que están disponibles comercialmente y son aplicables en tecnologías comunes tales como RT-PCR o procedimientos con base en anticuerpos). En particular, la regulación coordinada hacia arriba y hacia abajo de los (conjuntos de) genes seleccionados de la Tabla I puede utilizarse para definir la respuesta biológica al BO-11X (y en particular al BO-112) cuando se administra terapéuticamente, y se asocia a la modulación de las actividades mediadas por el TLR3, la inducción de interferón, y/o la respuesta inmunitaria, en pacientes que presentan una enfermedad específica, y en particular indicaciones específicas relacionadas con el cáncer, etapas clínicas, y/o combinación con otros fármacos. Además de los productos aplicables a las tecnologías enumeradas anteriormente (tales como las sondas de ácido nucleico o los anticuerpos), la actividad biológica de dichos genes suele estar bien definida, con una variedad de agentes comercial y técnicamente disponibles para probar adecuadamente la posible interacción con la administración de una formulación de BO-11X, tal como BO-112.
Además, hay otros agentes terapéuticos disponibles para dirigir las proteínas cuya expresión se ve afectada por el tratamiento con una formulación de BO-11X (o formulación de BO-11Xm). Los fármacos dirigidos a cualquiera de los genes mencionados pueden utilizarse ventajosamente en combinación con las formulaciones de BO-11X, administrándolos dentro de la misma composición o en composiciones distintas.
REFERENCIAS
Abiko K et al., 2015. Br J Cancer;112:1501-9.
Ammi R et al., 2015. Pharmacol. Ther.;146:1 20-31.
Amos SM et al.,2011. Cancer Immunol. Immunother.; 60: 671-83.
Ayers M et al. 2017. J Clin Invest.;127(8):2930-2940.
Bald T et al., 2014. Cancer Discov.; 4: 674-87.
Bhoopathi P et al., 2014. Cancer Res.; 74: 6224-35.
Bilensoy E, 2010. Expert Opin. Drug Deliv.; 7: 795-809.
Budczies J et al., 2017. Genes Chromosomes Cancer;56(8):651-659.
Chen DS and Mellman I, 2013. Immunity; 25;39:1-10
Chen L et al., 2013. Int. J. Nanomed.; 8:137-145.
Chiba Y et al., 2013. PLoSOne.; 8: e76159.
Cho K. et al., 2016, Immunobiology. 222(2):394-398 ( Epub 2016 Aug 31).
Cobaleda-Siles M et al., 2014. Small.; 10: 5054-67.
Da Silva DM et al., 2015. Papillomavirus Res. 1;1:12-21
Duewell P et al., 2015., Oncolmmunol.; 4(10): e1029698.
Ewel C et al., 1992. Cancer Res.; 52: 3005-10.
Feng M et al., 2015. Proc Natl Acad Sci U S A.; 112(7):2145-50
Fritsch EF et al., 2014. Oncoimmunology. 25;3:e29311
Fujimura T et al., 2006. Eur. J. Immunol.; 36: 3371-80.
Gallois A and Bhardwaj N, 2013. Front Immunol. 10;4:436.
Galluzzi L et al., 2014. Oncotarget; 5: 12472-508.
Garcia-Pascual C and Gomez R, 2013. J. Endometr.; 5(suppl.1):S13 (SP-04).
Germershaus O and Nultsch K, 2015. Asi J Pharm Sci. 10: 159-175.
Gong J et al. 2017. J Natl Compr Canc Netw.;15(2):142-147.
González FE et al., 2014. Hum Vaccin Immunother. 10(11):3261-9.
Gupta S et al. 2016. Tumor Biol. 37: 12089 - 12102.
Hafner A et al., 2013. Advanced Drug Delivery Rev.; 65 (10): 1386-1399.
Hammerich L et al., 2015. Mol Oncol. 9(10):1966-81.
Hervas-Stubbs S et al., 2012. J Immunol. 189(7):3299-310
Ho V et al.,2015. Oncotarget. 6: 27252 - 27266).
Islam M et al., 2014. Journal of Controlled Release; 193: 74-89.
Jain A et al., 2014. Front Immunol.; 17;5:553.
Kabilova T et al., 2014. BMC Cancer.; 14: 338.
Keir M et al., 2008. Annu. Rev. Immunol.; 26: 677-704.
Kübler K et al., 2011. Eur. J. Immunol.; 41: 3028-39.
Kurosaki T et al., 2009. Biomaterials,30: 2846-2853.
Le U et al., 2008. Canc. Biol. Ther.; 7: 440-447.
Le U et al., 2009. Radiother. Oncol.; 90: 273-279.
Levitzki A, 2012. Front. Oncol.; 2: 4.
Li YY et al., 2017. Expert Opin Ther Pat.; 27: 643-656.
Lim J and Tan D, 2017. Cancers (Basel;9(8). pii:E109.
Ling H, 2016. Adv Exp Med Biol.; 937:229-37.
Masucci G et al., 2016. J Immunother Cancer. 4: 76.
MatijevicT et al., 2011. Chemotherapy; 57: 460-7.
McBain S et al., 2007. J. Mater. Chem.; 17: 2561-2565.
Molina-Cerrillo J et al., 2017. Cancer Treat Rev.; 58:41-50.
Nagato T and Celis E, 2014. Oncoimmunology; 3: e28440.
Ochoa MC et al., 2017. Immunol Cell Biol. 95(4):347-355.
Ohashi T et al., 2013. Int. J. Cancer; 133: 1107-18.
Osada T et al., 2015. J Immunother. 38(4):155-64
Palchetti S et al., 2013. RSC Adv.; 3: 24597-24604.
Perica K et al, 2015. Rambam Maimonides Med J. 6(1): e0004.
Perrot I et al., 2010. J. Immunol. 185:2080-2088.
Ping L et al., 2017. Oncotarget; 8(24):39218-39229.
Pozuelo-Rubio M et al., 2014. Nano-Oncologicals in Adv. Del. Sci. Tech., Springer, pp. 453-470. Saheki A et al., 2011. Int. J. Pharm.; 406: 117-21.
Sajadian A et al., 2014. Arch. Virol.; 159: 1951-1960.
Sanchez-Paulete AR et al., 2015. Cancer Discov.; pii: CD-15-0510.
Schaffert D et al., 2011. Pharm. Res., 28: 731-741.
Shabani M et al., 2010. Avicenna J. Med. Biotech.; 2: 123-130.
Shin DS et al., 2017. Cancer Discov.;7(2):188-201.
Storz U, 2011. MAbs. 3: 310-7.
Sudhan D and Siemann D, 2015. Pharmacol Ther.;155:105-16.
Szabo A et al., 2012. Melanoma Res.; 22: 351-361.
Tai LH et al. 2013, Clin Cancer Res. 19:5104-15.
Tan S et al. 2016. Protein Cell;7(12):866-877.
Taura M et al., 2010. Cancer Sci.; 101: 1610-7.
Tormo D et al., 2009.Cancer Cell; 16: 103-114.
Tutin-Moeavin I et al., 2015.Org & Biomol Chem. 13: 9005-9011.
Umemura N. et al., 2012. Cancer Res. 72: 45-55.
Vacchelli E et al., 2013. Oncoimmunology; 2: e25396, e23510, e25595.
Van der Jeught K et al., 2015. Oncotarget; 6: 1359-81.
Vanderlocht J et al., 2010. Int J Immunopathol Pharmacol.;23(1):35-50.
Vega-Letter A et al., 2016. Stem Cell Res. & Ther. 7:150
Yoshino H and Kashiwakura I, 2013.Blood; 122: 4721.
Yu L et al., 2016. Immunol Cell Biol. 94:875-885.
Zaretsky J et al., 2016. N Engl J Med. 375:819-829
Zhang Y et al., 2014.Cancer Lett. 355: 76-84.
Zhou Y et al., 2013. Innate Immun.; 19: 184-192.
Claims (16)
1. Una composición para su uso como medicamento para el tratamiento del cáncer, en la que dicha composición se administra a un sujeto de acuerdo con un régimen de administración que comprende:
(i) al menos una primera inyección intratumoral; y
(ii) al menos una segunda inyección subcutánea o intramuscular,
en la que dicha al menos una inyección intratumoral se administra antes de dicha al menos una inyección subcutánea o intramuscular, y en la que dicha composición es una composición acuosa que comprende partículas en las que:
(i) cada una de dichas partículas comprende un complejo de
(a) ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)], o una sal o un solvato del mismo, en el que al menos 40 % de las moléculas de poli(I:C) comprendidas en dichas partículas tienen al menos 850 pares de bases, y al menos 50 % de las moléculas de poli(I:C) comprendidas en dichas partículas tienen entre 400 y 5000 pares de bases; y
(b) la homo-polialquilenimina o la hetero-polialquilenimina lineales, solubles en agua, o una sal y/o un solvato de las mismas, en las que el peso molecular promedio de dicha polialquilenimina lineal está comprendido entre 17 y 23 kDa;
(ii) al menos 90 % de dichas partículas tiene una distribución de diámetro monomodal inferior a 300 nm; (iii) dichas partículas tienen un diámetro promedio z inferior o igual a 200 nm, medido de acuerdo con la norma ISO 22412:2017, con un índice de polidispersidad de dicho diámetro de partícula inferior a 1,5; (iv) dicha composición contiene ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] en una concentración de al menos 0,5 mg/ml;
(v) dicha composición tiene: un pH entre 2 y 4 y una osmolalidad entre 200 y 600 mOsm/kg; y
(vi) dicha composición tiene un potencial zeta entre 35 mV y 50 mV, de acuerdo con la norma ISO 13099-2:2012.
2. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con la reivindicación 1, en la que entre 5 % y 60 % de las moléculas de poli(I:C) tienen menos de 400 pares de bases, entre 15 % y 30 % de las moléculas de poli(I:C) tienen entre 400 y 850 pares de bases, entre 10 % y 70 % de las moléculas de poli(I:C) tienen entre 850 y 5000 pares de bases y entre 0 % y 10 % de las moléculas de poli(I:C) tienen más de 5000 pares de bases.
3. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con las reivindicaciones 1-2, en la que dicha homopolialquilenimina o hetero-polialquilenimina lineal soluble en agua es una polietilenimina lineal.
4. La composición para uso como medicamento de acuerdo con las reivindicaciones 1-3, en la que dicha composición se administra antes o después de administrar un segundo agente terapéutico, siendo dicho segundo agente terapéutico administrado por inyección intratumoral o peritumoral en la misma y/o en otras lesiones, por inyección subcutánea, o por inyección intramuscular.
5. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con la reivindicación 4, en la que dicho segundo agente terapéutico se administra a un sujeto después de determinar si el sujeto es resistente, insensible o responde mal (o no) a dicho segundo agente terapéutico.
6. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con la reivindicación 4, en la que dicho segundo agente terapéutico se administra a un sujeto después de determinar si, tras la administración de dicha composición de acuerdo con la reivindicación 1, hay un aumento estadísticamente significativo del número de células inmunitarias circulantes.
7. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con la reivindicación 5 o 6, en la que el segundo agente terapéutico se selecciona entre el anticuerpo anti-CTLA4, el anticuerpo anti-PD1, el anticuerpo anti-PDL1, las células T CAR, las vacunas contra el antígeno del cáncer o los agentes dirigidos a las células T reguladoras, las enzimas metabólicas, la reparación y/o la replicación del ADN.
8. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con la reivindicación 7, en la que el segundo agente terapéutico se selecciona entre nivolumab, pembrolizumab, pidilizumab, MK-3475, BMS 936559, MPDL328OA.
9. La composición para uso como medicamento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en la que dicho uso es en el tratamiento de un cáncer seleccionado entre melanoma, cáncer de pulmón no pequeño, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de células renales, cáncer de vejiga, carcinoma hepatocelular y linfoma de Hodgkin.
10. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en la que dicho uso es en el tratamiento de un cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer colorrectal o subtipos de estos
cánceres.
11. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-7 y 9, en la que dicha segunda u otra inyección adicional intratumoral, peritumoral, subcutánea o intramuscular se realiza al menos 24 horas después de dicha al menos primera inyección intratumoral.
12. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con la reivindicación 6, en la que las células inmunitarias circulantes se seleccionan entre las células NK, las células dendríticas, los monocitos y las células reguladoras T, en su totalidad o en subpoblaciones específicas de las mismas.
13. Una composición para su uso como medicamento para el tratamiento del cáncer, en la que dicha composición se administra a un sujeto de acuerdo con un régimen de administración que comprende:
(i) obtención de células del sujeto;
(ii) poner en contacto dichas células con dicha composición ex vivo; y
(iii) administrar dichas células al sujeto;
en el que dicha composición es una composición acuosa que comprende partículas en las que:
(i) cada una de dichas partículas comprende un complejo de
(a) ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)], o una sal o un solvato del mismo, en el que al menos 40 % de las moléculas de poli(I:C) comprendidas en dichas partículas tienen al menos 850 pares de bases, y al menos 50 % de las moléculas de poli(I:C) comprendidas en dichas partículas tienen entre 400 y 5000 pares de bases; y
(b) la homo-polialquilenimina o la hetero-polialquilenimina lineales, solubles en agua, o una sal y/o un solvato de las mismas, en las que el peso molecular promedio de dicha polialquilenimina lineal está comprendido entre 17 y 23 kDa;
(ii) al menos 90 % de dichas partículas tiene una distribución de diámetro monomodal inferior a 300 nm; (iii) dichas partículas tienen un diámetro promedio z inferior o igual a 200 nm, medido de acuerdo con la norma ISO 22412:2017, con un índice de polidispersidad de dicho diámetro de partícula inferior a 1,5; (iv) dicha composición contiene ácido polinosínico-policidílico [poli(I:C)] en una concentración de al menos 0,5 mg/ml;
(v) dicha composición tiene: un pH entre 2 y 4 y una osmolalidad entre 200 y 600 mOsm/kg; y
(vi) dicha composición tiene un potencial zeta entre 35 mV y 50 mV, de acuerdo con la norma ISO 13099-2:2012,
en el que dichas células se aíslan de la sangre, de un tejido o de un tumor.
14. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con la reivindicación 13, en la que entre 5 % y 60 % de las moléculas de poli(I:C) tienen menos de 400 pares de bases, entre 15 % y 30 % de las moléculas de poli(I:C) tienen entre 400 y 850 pares de bases, entre 10 % y 70 % de las moléculas de poli(I:C) tienen entre 850 y 5000 pares de bases y entre 0 % y 10 % de las moléculas de poli(I:C) tienen más de 5000 pares de bases.
15. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con las reivindicaciones 13-14, en la que dicha homopolialquilenimina o hetero-polialquilenimina lineal soluble en agua es una polietilenimina lineal.
16. La composición para su uso como medicamento de acuerdo con las reivindicaciones 13-15, en la que dichas células se seleccionan para la expresión de uno o más marcadores antes y/o después de ser expuestas a dicha composición.
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Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA3063805C (en) * | 2017-05-17 | 2024-01-09 | Bioncotech Therapeutics Sl | Novel pharmaceutical composition comprising particles comprising a complex of a double-stranded polyribonucleotide and a polyalkyleneimine |
JP2022507840A (ja) * | 2018-11-21 | 2022-01-18 | ハイライト セラピューティクス エセ.エレ. | ナノプレックス化ポリ(i:c)製剤及びその使用 |
AR126610A1 (es) * | 2021-07-30 | 2023-10-25 | Andres Salazar | Actividad biológica multidimensional optimizada de poli-iclc con tamaño y formulación de componentes controlados |
CN114525253B (zh) * | 2022-03-09 | 2024-03-15 | 南开大学 | 一种脂多糖诱导的外泌体及其应用 |
US20240091348A1 (en) | 2022-09-20 | 2024-03-21 | Highlight Therapeutics, S.L. | Novel compositions based on polyinosinic-polycytidylic acid |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2378150T3 (es) | 2002-07-03 | 2012-04-09 | Oncovir, Inc. | Método para la preparación de poly-ICLC y sus usos |
EP1581653A4 (en) | 2002-11-18 | 2006-09-06 | Yissum Res Dev Co | TARGETED BY DOUBLE-STRAND RNA-MEDIATED KILLING OF CELLS |
JP4861036B2 (ja) | 2006-03-31 | 2012-01-25 | リンテック株式会社 | 剥離シートおよびその製造方法 |
WO2008057696A2 (en) | 2006-10-10 | 2008-05-15 | Juvaris Biotherapeutics, Inc. | Compositions of pattern recognition receptor-ligand: lipid complexes and methods of use thereof |
KR100958293B1 (ko) | 2008-03-27 | 2010-05-19 | 단국대학교 산학협력단 | 테오필린에 의해 표적 특이적 rna 치환 활성이 조절되는알로스테릭 트랜스―스플라이싱 그룹 i 리보자임 |
LT3098239T (lt) * | 2008-12-22 | 2020-02-10 | Targimmune Therapeutics Ag | Į egfr nukreipiamas dvigrandis rnr vektorius, skirtas sisteminiam vėžio gydymui |
ES2368963B1 (es) * | 2009-07-04 | 2012-10-10 | Fundación Centro Nacional De Investigaciones Oncológicas Carlos Iii | Procedimiento de identificación de agentes terapéuticos contra el melanoma y uso de agente identificado. |
CN102988303A (zh) | 2011-09-15 | 2013-03-27 | 天津泽世德生物医药有限公司 | 一种多聚肌苷酸多聚胞苷酸冻干粉针的制备方法 |
WO2013040552A2 (en) | 2011-09-16 | 2013-03-21 | Georgia Health Sciences University | Methods of promoting immune tolerance |
WO2013063019A1 (en) | 2011-10-28 | 2013-05-02 | The Wistar Institute Of Anatomy And Biology | Methods and compositions for enhancing the therapeutic effect of anti-tumor t cells |
WO2013087083A1 (en) | 2011-12-15 | 2013-06-20 | Biontech Ag | Particles comprising single stranded rna and double stranded rna for immunomodulation |
NZ630040A (en) | 2012-05-03 | 2016-10-28 | Janssen Sciences Ireland Uc | Polyinosinic-polycytidylic acid (poly (i:c)) formulations for the treatment of upper respiratory tract infections |
ITRM20120480A1 (it) | 2012-10-09 | 2014-04-10 | Uni Degli Studi Camerino | Nanoparticelle lipidiche multicomponenti e procedimenti per la loro preparazione. |
WO2014165296A1 (en) | 2013-03-12 | 2014-10-09 | Multicell Immunotherapeutics, Inc. | Methods and formulations to achieve tumor targeted double stranded rna mediated cell death |
EP3065714B1 (en) | 2013-11-06 | 2020-02-12 | Janssen Sciences Ireland Unlimited Company | Polyinosinic-polycytidylic acid (poly (i:c)) formulations for the treatment of upper respiratory tract infections |
CN103599071B (zh) | 2013-11-08 | 2016-01-27 | 杭州美亚药业股份有限公司 | 一种双链聚肌胞干粉的制备方法 |
KR102472590B1 (ko) | 2014-05-14 | 2022-11-30 | 타르그이뮨 테라퓨틱스 아게 | 개선된 폴리에틸렌이민 폴리에틸렌글리콜 벡터 |
EP4353257A2 (en) | 2015-04-13 | 2024-04-17 | CureVac Manufacturing GmbH | Method for producing rna compositions |
KR20180015145A (ko) * | 2015-05-05 | 2018-02-12 | 이섬 리서치 디벨러프먼트 컴파니 오브 더 히브루 유니버시티 오브 예루살렘 엘티디. | 핵산-양이온성 중합체 조성물 및 그의 제조 및 사용 방법 |
ES2755418T3 (es) * | 2015-11-17 | 2020-04-22 | Bioncotech Therapeutics S L | Novedosa composición farmacéutica que comprende partículas que comprenden un complejo de un polirribonucleótido de doble cadena y una polialquilenimina |
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